JPS60500869A - 抗腫瘍作用を有する５−フルオロウラシルニトロキシル誘導体 - Google Patents

Abstract

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Description

【発明の詳細な説明】 抗腫瘍作用を有する５−フルオ ロウラシルニトロキシル誘導体 技術分野 本発明は新規な生物学的に活性な化合物、即ち抗腫瘍作用を有するウラシル誘導 体に関する。

背景技術 ５−フルオロウラシルが、今日胃腸筋、肺癌及び卵巣癌の手術不能な形態に対し 腫瘍学において用いられていることは公知である（　Ｊ、　Ａｍｅｒ、　Ｃｈｅ ｍ、５ｏｃ−７９巻１６号、１９５７年発行；Ｒ，ドクシニスキイ、Ｅ、Ｉレデ ン、Ｃ，ハイデルベルク「ザシインセシイスオブ５−フルオロピリミジン類」） 。

しかるにこの化合物は非常に毒性が強く、骨髄及び胃腸管の機能に著しく影響を 及ぼす。

本発明に係る化合物の他の同族体は、１−（α−７ラニジル）−５−フルオロウ ラシル（フトラ７−ル）である（英国特許１，１６８，３９１参照、Ｃ１，Ｃ０ ７ｄ５１／３０．１９６９）。これは固体の実験腫瘍：肉腫１８０、ハルディン グ−ｉＲセイ黒色癌、ウォーカー癌肉腫、肝の胞状筋に関して相当に高活性を有 する低毒性（マウスに対するＬＤ５Ｑは７５０Ｈ１９／に９である）の化合物で ある。診療所においては、フトラフール製剤が哺乳動物の腫瘍、直腸腫瘍、大腸 及び胃癌の治２ 療に対し用いられている。しかるにこの製剤は、造血を抑制し更に胃腸管側に合 併症を引き起こす。更に、フルオロウランル同様フトラフールは、常磁性の性質 を欠く。

発明の開示 本発明は抗腫瘍作用、低、身性及び常磁性を有する新規な化合物を提供する、こ とをその目的とする。

この目的は抗腫瘍作用を有する次の一般式；（式中、Ｒ１とＲ２は共にＸである か、又はＲ１がＸで、Ｒ２が水素−ｃあるか、又はＲ１が水素で、Ｒ２がＸであ るか又はＲ１がナトリウムであり、Ｒ２がＸである。

こ＼でＸは で表される５−フルオロウラシルニトロキシル誘４体によシ達成される。

これ等の化合物はフト１ラフールの抗腫瘍作用よりも２〜４倍優れた高抗腫瘍作 用を有することに特徴がちり更に５−フルオロウラシルの抗腫瘍作用に匹敵する 。

本発明に係る化合物はその低毒性が顕著であり、従って好ましくない副作用を最 小限にし、生体内で悪性の新生物の抑制効果を高め更にそれ等の作用の治療範囲 を相当に拡大することが出来る。

本発明に係る化合物における常磁性の有効性は、治療プロセスの簡易制御を可能 ならしめる。腫瘍組織における常磁性並びに細胞レベルまで組織の局在点を決定 する可能性は、腫瘍化の研究並びに抗腫瘍化合物の作用機構の発見においてこれ 等の化合物を不可欠のものとする。、 発明を実施する為の最良の形態 先の一般式（式中Ｒ１及びＲ２はＸであるか、又はＲ１はＸであシ、Ｒ２は水素 でちる）に相当する本発明に係る５−フルオロウラシルのニトロキシル誘導体ハ 、ヒス−（トリメチルシリル）−５−フルオロウラシル（Ａ）と２．２，５．５ −テトラメチル−１−オキシル−Δ３−ピロリンー３−カルボン酸塩化物（Ｂ） と金、ベンゼンの如き不活性溶剤の媒体中又は溶剤なしで室温又は穏やかに加熱 して縮合させることによシ得られる。化合物（Ｂ）に対する化合物（Ａ）のモル 比がそれぞれ１：２〜３に等しい場合、１，３−ビス−（２，２，５，５−テト ラメチル−１−オキシル−Δ３−ピロリンー３−オイル）−５−フルオロウラシ ル（Ｒ１＝　Ｒ２＝　Ｘ　）が得られる。（Ｂ）に対する（Ａ）のモル比がそれ ぞれ２〜３：１に等しい場合、１−　（２，２，５，５＝テトラメチル−１−オ キシル−Δ３−ピロリンー３−オイル）−５−フルオロウラシル（Ｒ１＝Ｘ、Ｒ ２＝Ｈ）が得られる。

先の一般式（式中Ｒ１は水素であり、Ｒ２はＸである）の本発明に係る化合物、 即ち３−　（２，２，５，５−テトラメチル−１−オキシル−Δ−ピロリンー３ −オイル）　−５’フルオロウラシルのナトリウム塩（は、１．３−ビス−（２ ，２，５＋５−テトラメチル−１−オキシル−Δ３−ビロリンー３−オイル）− ５−フルオロウラシルのアルコール性溶液を、当量のナトリウムアルコラードと 加熱することによシ得られる。

先の一般式（式中Ｒ１は水素でアシ、Ｒ２はＸである）の本発明に係る化合物、 即ち３−　（２，２，５，５−テトラメチル−１−オキシル−Δ３−ピロリンー ３＝オイル）−５−フルオロウラシルは、３−　（２，２，５，５−テトラフチ ルー１−オキシル−Δ３−ピロリン−３−オイル）−５−フルオロワラシルのナ トリウム塩を、当量の希酸、例えば塩酸又は硫酸と処理することにより得られる 。

本発明に係る化合物の次の標示は、以下明細書全体に亘って使用される： （Ｉ）　−Ｒ，及びＲ２が共にＸである化合物；（Ｉｔ）　−Ｒ，がＸであ５、 Ｒ２が水素で多る化合物；（ＩＩ［）　−Ｒ１が水素であシ、Ｒ２がＸである化 合物；（ＩＶ）　−Ｒ１がナトリウムであ広Ｒ２がＸである化合物。

本発明に係る５−フルオロウラシルのニトロキシ６ ル誘導体の構造は、元素分析並びにｇＰＲ，ＩＲ１電子及び質量分析法の方法に より確認される。

本発明に係る化合物（１，ｎ、■）のＩＲスペクトルにおいて、一群の特性吸収 帯がウラシル及びピロリノイル置換基のカルボニル基の振動に起因して１６７０ 〜１７６０＞　の領域内に観察される。カルボニル基の数に応じで、不発明に係 る化合物（■、■、■）は、化合物（Ｉ）に比較してよシ少ない数のカルビニル 吸収帯を有する。化合物（ＩＶ）においてウラシルのカルボニル吸収帯（１５６ １及び１６７３α−１）は、アニオンの陰電荷がウラシルのカルボニル基に非局 在化する結果低振動数側に対し強くシフトする。

本発明に係る全ての化合物（Ｉ、■、■、■）のＩＲ，２，ベクトルにおいて、 又１６２０〜１６２５ｃｒｎ　の波数にウラシル及びピロリンの炭素炭素二重結 合に基づく伸縮振動の吸収帯、ピロリンのメチル基（２８００〜３０００　ｃｍ −１）及びピロリン及びウラシルのＨ−Ｃ−Ｃ基（３０３０〜３１００α−１） のプロトンの伸縮振動に基づく吸収帯が存在する。本発明の化合物（■、■）に おいて、３２００　ｃｍ−’の波数にＮＨ基の吸収帯も存在する。

本発明に係る５−フルオロウラシルのニトロ−”／ル誘導体の常磁性は、ＥＰＲ 法によって証明された。

化合物（■、■、■）の希釈溶液のＥＰＲス啄クトりは、ニトロキシルモノラジ カルに対し特徴的な三本線から成っている。化合物（１）のＥＰＲスペクトルは 九本線から成り更にニトロキシルビラジカルに対し特徴的であり、電子の交換相 互作用のエネルギーは１．８ａＮ１４に等しい。本発明に係る化合物（■、■、 ■、■）の超微細相互作用定数ａＮ１４及びｇ因子は、ピロリン系のニトロキシ ル基に対し特徴的である。

本発明に係る５−フルオロウラシルのニトロキシル誘導体のアセトニトリル溶液 の電子スペクトルは、１２５００〜５００００ｃｍ−１の領域内に四個の重なり 合った吸収帯を有し、これはニトロキシル、ピロリン及びウラシル発色団の吸収 による。化合物（１）におけるこれ等の吸収帯の強度は、化合物（■及び■）の それよシも１．５〜２倍強い。化合物（■、■、■）の水溶液の電子スペクトル は、ＰＨに依存する。ｐＨ３又はそれ以下のＰＨでは、それ等は化合物（■又は ■）の吸収によシ主に引き起こされ、一方ｐＨ１１以上では対応するアニオンの 吸収に起因する。

化合物（ＩＩＩ）及びその対応するアニオンの電子スペクトルは、ウラシル発色 団の吸収に伴う特性吸収帯の波数及び強度の双方において著しく異なっていも。

上記の化合物において、この吸収帯は４１４７０ｃｍ−１であシ、アニオンにお いては３３７１０ｃ！ｎ　である。

波数のこの様な違いは、全ての３−置換ウラシルに対し特徴的であり、従って化 合物（■及び■）の構造を与える。化合物（Ｉ［）及びその対応するアニオンの スペクトルは、互いに類似しており、又１−置換ウラシルに対し典型的である。

化合物（■、Ｉ［、Ｉｎ）の質量分析法において、分子イオン虻が存在し、更に フラグメントイオンはピロリノイル基Ｘの５−フル万ロウラシル（以下Ｆｕト称 する）に対する結合の数及び点を確認する。従って化合物ＣＤＩ）の質量分析法 において、フラグメントイオンｍ／ｅ１６７　ＣＸ〕’及びｍ／ｅ　１３０　［ Ｆｕ］’、並びにカルボニル基の間に位置するウラシルの窒素原子に対する２、 ２，５．５−テトラメチル−１−オキシル−Δ−ピロリノイル基の結合を実証す るフラグメントイオンｒｒＶ／ｅ２２６〔ＸＮＣＯＮＨ２〕　及びｒｒｌ／ｅ２ ２５〔ＸＮＨＣＯＮＨ〕　が存在する。化合物（Ｉ）の質量分析法において、フ ラグメントイオンｒｒ４／ｅ　２９６［ＸＦｕ：ｌ＋が存在しこれは分子イオン Ｍ　から二個のＸ基の一個が分裂したことに起因する。

５−フルオロウラシルと同様に、化合物（１，Ｉｔ、ｍ）は有機溶剤：アルコー ル、アセトン、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド に易溶でちる。化合物（ＩＶ）は水に非常に良く溶解する。その水溶液はアルカ リ性反応を有する。化合物（■、ｎ、ｍ）は、驚くほど良く水に溶解する。

しかし乍ら、化合物（■、■）はアルカリ水溶液又はｐＨ１０以上の緩衝溶液に 良く溶解する。

化合物（■、■）は加水分解に対し充分安定である。３〜１１の範囲内でのＰＨ での室温のもとにおいて、該化合物は約５時間に亘る顕著な加水分解を受けない 。

アルカリ水溶液に２ける化合物（ｎ）は、容易に加水分解されフルオロウラシル と２．２＋５＋５−テトラメチル−１−オキシル−Δ−ピロリンー３−カルボン 酸となる。加水分解速度は、反応媒体の−の増加につれて増加する。

以下に５−フルオロウラシルのニトロキシル誘導体の製法を説明する実施例、並 びに得られた化合物の物理的及びス啄りトル特性を掲げる。

例　１ １．３−ビス−（２，２，５，５−テトラメチル−１−オキシル−Δ３−ピロリ ンー３−オイル）−５−フルオロウラシル（化合物Ｉ）の調製 ４０ｍ１の乾燥ベンゼンに溶解した８１１ｇの２，２゜５．５−テトラメチル− １−オキシル−Δ３−ビロリンー３−カルボン酸塩化物の溶液に、乾燥窒素雰囲 気中５．４９ｇのビス−（トリメチルシリル）−５−フルオロウラシルを添加す る。沈澱した有機結晶化合物（１）　’ｅ濾別し、少量のベンゼン及びヘキサン で洗浄し次いで乾燥し目的化合物７．１９　’ｚ得た（用いたビス−（トリメチ ルシリル）−５−フルオロウラシルに対し計算して７７％）。

この様にして得られた化合物をトルエンから再結晶し、融点１９５〜１９８℃を 有するオレンジプリズム様結晶を得る。

実験値１％：Ｃ５７，４±Ｑ、３　；　Ｈ５，９±０．１　；　Ｎ　１２．１± ０．１　；　Ｆ　３．７±０．３　；　ｒｒｖ／ｅ　４６２ＣＭ’：ｌ　、　Ｃ ２２Ｈ，ＦＮ４０６゜理論値１％：　Ｃ５７，１４；　Ｈ５，９８；　Ｎ　１２ ．１１　；　Ｆ４１１゜分子量４６２．４７４５　。

ＩＲスペクトル（ｃｃｔ４中）、ν、ｃｍ−’　（ε、　１／ｍｏｌ　、ｃｒｎ ）　：１．６２１（２３０）Ｃ＝Ｃ；　１，６７６（６２０）；　１，７０５（ １，１００）；　１，７２９（８００）；　１，７６２（５２］）；　Ｃ＝０； 　２，８７０（１００）；　２，９３５（２２０）；　２，９８４（３１０）Ｃ Ｉ（６；　３，０３０（８０）　、　３，０６５（７０）　、３，０９５（９０ ）ＣＨ。

２５度で且つ得られた化合物の濃度５　Ｘ　１０−’モル／リットルを有するト ルエン中におけるＥＰＲスペクトルは、強度比０．１６：１００：２９：３３： ９５：３２：２４：８６：０．１５を有する９本線から成シ更に中央線に対する 側線の距離は０．４１；０．５８；１；２．２３　；に等しく、ｇ因子は２．０ ０５６±１×１０−５で６　’）　：　ａＮ”は１４’、１８±０．０４Ｇｓで ある。

アセトニトリル中の電子スペクトル、ν　、ｍ−１ａｘ （ε’、　１／ｍｏｌ　、　ｃｍ）　：　２６，５０　’Ｏ±１００（８１±２ ）。

３７．４００±１００（８，２００±１００）、４４，５６０±６０（２０，９ ００±２００）、４７，０００±１００（２２，４００±２００）。

質量ス被りトルｍ／ｅｃｉｏｎｌ　（１／Ｉ　１％　）　：ａＸ ４６３ＣＭ＋Ｄ＋（１，４）　；　４６２　Ｍ＋（４，４）　；　４４７　Ｍ（ ＣＨ２Ｆ”（０，２２）　；　４３２　（Ｍ−Ｎｏ）＋（２，２）　；　２９６ 　ＣｘＦｕ〕＋（５７）　；２８１（Ｘ　Ｆｕ−ＣＨ５’：ｌ＋（０，１６）　 ；　２６６ＣＸ　Ｆｕ−Ｎｏ：ｌ’　（４，７）　；１６７［Ｘ：ｌ＋（１６） 　；　１５２（Ｘ−ＣＨ３）”（１６）：１３９（Ｘ−ＣＯＩ＋：　１３７ＣＸ −Ｎｏ：ＩＩ＋（５２）　；　１０９ＣＸ−ＮＯＣＯＩ”（１００）、こ＼でＸ 及びＦｕは先に説明した通９である。

例　２ １−　（２，２，５，５−テトラメチル−１−オキシル−Δ−ピロリンー３−オ イル）−５−フルオロウラシル（化合物■）の調製 １００ｍＪの乾燥ベンゼンに溶解した２、０２ｇの２．２，５．５−テトラメチ ル−１−オキシル−Δ−♂ロリンー３−カルビン酸塩化物の溶液に、乾燥窒素雰 囲気中５．４９９のビス−（トリメチルシリル）−５−フルオロウラシルを添加 する。万レンジ赤色結晶化合物（ＩＩ）　ｋ濾別し、ベンゼンで洗浄し次いでヘ キサンで洗浄し更に乾燥し、１．５ｇの生成物（２，２，５，５−テトラメチル −１−オキシルーΔ３−ピロリンー３−カルボン酸塩化物に対し計算して５０％ ）を得る。

得られた化合物をニトロメタンから再゛結晶し、融点１９８〜２０１℃を有する オレンジ赤色針状様結晶を得る。

実験値１％：Ｃ５２，４±０．３　；　Ｈ５，１０±０．０５；Ｎ１３．８±０ ２；ＩＶ／ｅ２９６〔Ｍ〕＋Ｃ１３Ｈ１，ＦＮ３ｏ４゜理論値１％二Ｃ５２，７ ０；　Ｈ５，１０；　Ｎ　１４．１８．分子量２９６．２７６０゜ アセトニトリル中のＩＲスペクトル、ν、ｃｒｎ−’　（ε。

１／ｍｏ１．　ｃｒｎ）：　１，６２７（１１０）Ｃ＝Ｃ；　１，６８５（３３ ０）。

１．７３０（１，７００）Ｃ＝Ｃ；　２，８３５（４０）、２，８７２（５２） 。

２．９４６（１５５）、２，９８３（２１０）ＣＨ３；　３，１０５（１４０） ＣＨ；　３，２２５（１３０）ＮＨ。

２５度で且つ得られた化合物の濃度５　Ｘ　１０−’モル／リットルを有するト ルエン中のＥＰＲス被クトりは、強度比：　１００：９９：９０’ｉ有する３本 の線から成シ；ｇは２．００５６２±３　Ｘ　１０−”であｐ　；　ａＮｌ　４ は１４．２５±０．０３Ｇｓである。

アセトニトリル中の電子スペクトル、ν　、α−１ａＸ （ｔ　、　１／ｍｏ１．ｃｒｎ）　：　２６，１２０±５０（５０±１）　、３ ７，１２０±５０（７，７００±１００）、４０，７００±４０（１０，０００ ±１００）、４７，０３０±４０（１３，４００±２００）。

０．００１Ｍの塩酸水溶液における電子スペクトル、νｍａｘ、σ−１（ε、　 １／ｍｏ１．ｍ）　：　４１，８４０±８０（９，７００）。

４７．３２０±８０（＜４４，４００）。

例　３ ３−　（２，２，５，５−テトラメチル−１−オキシル−Δ３−ビロリンー３− オイル）−５−フルオロウラシルのナトリウム塩（化合物■）の調製 ４．６２９の１．３−ビス−（２，２，５，５−テトラメチル−１−オキシル− Δ３−ピロリンー３−、４−（ル）−５−フルオロウラシル（化合物１）に、無 水エタノールのナトリウムエチラート１モル溶液１０ｍ１ｆ添加する。

反応混合物を攪拌し、次いで４　、ｏ　ｒｎｌのジエチルエーテルを添加する。

得られた塩の黄色沈澱物を濾別し、ジエチルエーテルで洗浄し次いで乾燥する。

収率は３．０５ｇ（９６％）である。塩は明確な融点を示さず、該塩は２５０〜 ３３０℃の範囲内の温度で徐々に分解する。

実験値１％：Ｎ１３．０±０．２−　Ｃ１，Ｈ１４ＦＮ３０４Ｎａ。

理論値２％：Ｎ１３．２０゜ ワセリン油中のＩＲス啄ツクトルν、ｃｍ−’　：　１，６２０Ｃ＝Ｃ；　１， ５６１　；　Ｃ６７３；　１，７３８Ｃ＝Ｏ；　３，０７０　ＣＨ。

０、ＯＯＩＭの塩酸水溶液中の電子ス被りトル、νｍａｘ　’ｃｍ−１（ε、　 １／ｍｏｌ　、ｃＩｎ）　：　３７，４００±５０（７，２００±１００）。

４１．７００±４０（１３，０００±１００）、４６，７００±１００（１２， １０σ±１００）。

０、ＯＯＩＭの水酸化ナトリウム水溶液中の電子スペ１４ クトル、ｖｍａｘ、ｃｍ−１（ε、　１／ｍｏｌ　−ｃｍ）　：　３３，７００ ±３０（８，１００±１００）、４４．．２７０±５０（１５，７００±３００ ）。

２５度で且つ得られた塩の濃度５　Ｘ　１０”−４モル／リンドルを有する、水 中でのＥＰＲス波クトりは強度比１００：１０１：８０全有する三本線がら成シ ；ｇ因子は２．００５１４±１×１０−５であわ、ａＮ”　４Ｐｉ　１５．８８ ±〇、０５Ｇｓである。

例　４ ３−　（２，２，５，５−テトラメチル−１−オキシル−Δ−ピロリンー３−オ イル）−５−フルオロウラシル（化合物■）の調製 １５９ｇの３−　（２，２，５，５−テトラメチル−１−オキ−シル−Δ３−ピ ロリンー３−オイル）−５−フルオロウラシルのナトリウム塩（化合物■）に、 ２５ｍ１の０．２Ｎ塩酸水溶液を添加する。混合物ｅｌＯ分間攪拌し次いでクロ ロホルムで数回抽出する。クロロホルム相を硫酸で乾燥し、溶剤を真空除去し次 いで残留物をトルエンから再結晶する。得られた化合物は融点１６９〜１７１℃ を肩する微細黄色針状形である。収率は１．１１ｇ（７５％）である。

実験値、飴：Ｃ５２，６±０．２　；　Ｈ５，０９±００５；Ｎ１４．３±０． １　；　Ｆ　６．４４±０．０５　；　ｍ／ｅ２９６　ＣｆＶＤ”　。

Ｃ１５Ｈ１５ＦＮ３０４゜ 理論値１％：　Ｃ５２，７０；　Ｈ５，１０；　Ｎ　１４．１８；　Ｆ６．４１ ゜分子量２９６，２７６゜ ＩＲスにクトル（アセトニトリル中）、ν＋　（’ｍ−’（ε、１／ｍｏ１．ｚ ）：Ｃ６２２（１８０）Ｃ＝Ｃ；　Ｃ６８０（１，３３０）、１，７２３（７６ ０）、１．７５４（９６０）Ｃ＝Ｏ；２．８７７（４７）；　２，９４０（１３ ０）：　２，９８９（１９０）ＣＨ３；　：３．０８７　（９０）　ＣＨ；　３ ，２７０　（１４０）　ＮＨ−２５度で且つ得られた化合物の濃度５Ｘ１０’モ ル／す、トルを有するトルエン中でのＥＰＲスペ／）ルは、強度比１００：９９ ：９０を有する３本線から成り；ｇは２．００５６１±１×１０−５であり；Ｃ Ｈ１４は１４．１５±０．０ＩＧｓである。

電子スペクトル（アセトニトリル中）、ｖｍａｘ　’ｃｍ−”　（ε、　１／ｍ ｏ１．ｃｒｎ）　：　２５，１４０±２０（５２，６±０５）。

３８．１９０±２０（８，５００±２００）、４２，４６０±２０（１４，００ ０±５００）、４７，４３０±６０　（１３，２００±６００）。

電子スペクトル（０，ＯＱＩＭの塩酸水溶液中）、ｖｍａＸ＋ｃｒｎ−”　（６ ＋　１／ｍｏ１１ｍ）　：　３７，４１０±６０（７，２００±１００）；４１ ，７１０±３０（１３，９００±１００　）　；　４６，７００±７０（１２， ０００±１００）。

電子スイクトル（０，００１Ｍの水酸化す）　ＩＪウム水溶液中）、ν＋ｆｆｉ ”　（εｌ　１／ｍｏ１．ｃｒｎ）　：　３３，７１０±ａＸ ３０（８，１６０±１５０．ｉ）　、、　、４４，２７０±９０（１５，７００ ±３００）。

質量スペクトル１．　ｒＪｅ　Ｃ１ｏｎ〕（Ｉ／■ｍａｘ　、　％　）　：２９ ７〔Ｍ＋１〕＋（７，１）；２９６〔Ｍ〕＋（２３）；　２８２６ 〔朋−ＣＨ３〕＋（２６）；２８１〔Ｍ−ＣＨ３〕＋（１，２）；２６６　ＣＭ −ＮＯ〕＋（１２）　；　２２６　ＣＸＮＨＣｏ　ＮＨ２）＋（０，４４）　； ２２５〔ＸＮＨＣＯＮＨ〕＋（１，４）；１６７〔Ｘ〕＋（４２）；１５２ＣＸ −ＣＨ３〕＋（６７）；　１３９ＣＸ−ＣＯＩ＋（１６）；１３７ＣＸ−Ｎｏ’ ：ｌ＋（８２）；　１３６［Ｘ−ＨＮ０’：ｌ’　（１００）；１３０（Ｆｕｎ ’　（９１）　；　１０９［Ｘ−Ｎ０ＣＯ）’　（９６）　、こＸでＸ及びＦｕ は先に説明゛した通）である。

本発明に係る５−フルオロウラシルのニトロキシル誘導体を、比較の為５−フル オロウラシル及びフトラフールを用いた比較試験に委ねた。これ等の試験結果を 以下の表に示す。

本発明に係る化合物の毒性を、これ等の化合物をキングシルホワイトマウスに腹 腔内投与することによシ決定し更にバルンス法（動物の死亡数対用量の集積曲線 を用いる）によシ評価した。

毒性の特性値として、実験に対し用いた動物の５０％を死亡ならしめる用量を用 いた（ＬＤｓｏ）。

１．３−ビス−（２，２，５，５−テトラメチル−１−オヤシルーΔ３−ピロリ ンー３−オイル）−５−フルオロウラシル（化合物Ｉ）、１−　（２，２，５， ５−テトラメチル−１−オキシル−Δ３−ヒロリンー３−オイル）−５−フルオ ロウラシル（化合物Ｉｔ）及ヒ３−（２゜２．５．５−テトラメチル−１−オキ フルーΔ−ピロリンー３−オイル）−５−フルオロウラシル（化合物■）の毒性 の決定に対してこれ等の化合物をポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート （ソウイージー８０、フェラーク、ベルリン、西ドイツ）のｌＯ係懸濁液の形で 腹腔内投与した０ ３−　（２，２，５，５−テトラメチル−１−オキシルーΔ３−ビロリンー３− オイル）−５−フルオロウラシルのナトリウム塩（化合物■）、フトラフール及 び５−フルオロウラシルの毒性の決定に対し、これ等の化合物全又水溶液の形態 で腹腔内投与した。

試験結果は化合物（１）が５−フルオロウラシルよシも３，５倍毒性が少ないこ とを示している。化合物■の毒性は５−フルオロウラシルのそれと実質的に類似 している。化合物（［Ｉ［、ＩＶ）は５−フルオロウラシルよりも５倍毒性が少 なく更にフトラフールの毒性に近い。

抗腫瘍作用の決定に対し、これ等の化合物（１，ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ）、５−フ ルオロウラシル及びフトラフールを、毒性の決定において用いたと同じ溶剤中で 使用した。

抗腫瘍作用の決定は、マウスの移植腫瘍゛白血病Ｌ−１２１０、白血病Ｐ−３８ ８、白血病Ｌａｓ黒色腫Ｂ−１６、腺癌７５５（Ｃａ−７５５）、並びにラット の移植腫瘍：ンーヴエルツ赤白血症、ウォーカー癌肉腫（ＷＣ８）、グレン（Ｇ ｅｒｅｒ３）癌について行った。

１８ 白血病Ｌ−１２ｘＯｋ、腹水０．２　ｍ１９１０５個の細胞だけ腹腔内に移植し た。又化合物（ＩＶ）　ｋ、腫瘍移植後１日目から始めて１日基準量を腹腔内投 与した。

処置計画は後記の表に示す。

白血病Ｐ−３８８を、腹水０．２　ａｔ中１０６個細胞だけ腹腔内に移植した。

又化合物（ＩＶ）　ｆ　、癌の移植後１日目から始めて日月量を腹腔内投与した 。処置計画を又後記の表に示す。

白血病Ｌａ　ｆ、生理溶液に懸濁させた白血病細胞懸濁液を用いて腹腔内投与し た。接種物は１０８個の白血病細胞全含有した。化合物（Ｌｎ、■、ＩＶ）、５ −フルオロウラシル及びフトラフールを又腹腔内投与し、最初の投与は腫瘍移植 後３時間目に行い次いで毎日行った。処置計画を後記の表に示す。

固体腫瘍（黒色腫Ｂ−１６、腺癌７５５、ン＝ヴエルソ赤白血症、ウォーカー癌 肉腫、ケ゛レン内腫）を、生理溶液の腫瘍細胞懸濁液（１：１重量比に希釈）を 用いて移植し次いで各試験動物に０．３　ｍｌの用量で皮下投与した。試験化合 物を、黒色腫Ｂ−１６腺癌７５５、ウォーカー癌肉腫の場合には腫瘍移植後１日 から始め、或いは又シーヴエルツ亦白血症及びグレン腫瘍の移植の場合には７日 後に腹腔内投与した。処置計画を下記の表に示す。抗腫瘍作用の決定において、 試験化合物を等毒性用量で導入した。

１９　７）、７鴫日３（：１）−５００８（ｉ９（６）フトラフールを又３ｏｏ ｍ９／＆に等しい最適用量で用いた。

白血病Ｐ−３８８、Ｌ−１２１０及びＬａに対する抗腫瘍作用の判定基準は、対 照動物に比較し試験動物の平均寿命の長さくＥＬＳ）であわ、これはパーセント で表され且つ次式に従って計算される。

式中、Ｌｔは試験群にお−ける動物の寿命であり；Ｌｃは対照群即ち試験化合物 を投与しない場合における動物の寿命である。

固体腫瘍に関し抗腫瘍作用の判定基準として、対照と比較して腫瘍容積増加の抑 制（１）であり、これはパーセントで表され且つ次式によって計算される：上記 式中、ＶＣは対照における腫瘍の平均容積であり、■ｔは実験における腫瘍の平 均容積である。

白血病Ｌａ及び腺７５５の場合において、抗腫瘍作用について一以上の判定基草 、特に動力学的判定基準Ｘ＝１−ψｔ／ψＣ（式中ψを及びψ。はそれぞれ試験 及び対照における腫瘍増殖割合である）を示す。

治療作用の範囲の比較評価を、治療指数Ｉ４０、Ｉ６０及びｌ１００を用いて行 う：　Ｉ４０　＝　Ｌｌ）＋ｏ／Ｅｌ）４ｏ、Ｉ６ｏ　＝　ＬＤ＋ｏ　／　ＥＤ ６０．１１００　＝　ＬＤｌｏ　／　ＥＤｌｏｏ　、こ５においてＬＤｌｏは動 物の１０係の死亡をもたらす用量でｈ　＋）　；　ＥＤ４０　、ＥＤ６０及びＥ Ｄｉｏｏはそれぞれ動物の寿命を４０．６０及び１００７ぐ一セントだけ延長さ せる有効用量である。

表 動　物　毒性値　移　植　対照。

Ｃ５７ＢＬ２０　３５０　Ｌａ　ｉ／ｐ　６．５■　マウス ＣＢＡＦ　２０　−　Ｂ−１６ｈ／ｄ　−■　マウス Ｃ５７ＢＡ　２０１５０　Ｌａ　ｉ／ｐ　６．５■　マウス Ｃ５７ＢＬ　２０　５５０　Ｌａ　ｉ／ｐ　６．５■　マウス ＢＤＦ　２０　５１ＯＬ−１２１０ｉ’／ｐ　７．５■　マウス ＢＤＦ　２０　−　Ｌ−１２１０ｉ／ｐ　７．５■　マウス ＢＤＦ　２０　−　Ｐ−３８８ｉ／ｐ　１０■　マウス ＢＤＦ　２０　−　Ｐ−３８８ｉ／ｐ　１０■　マウス Ｃ５７ＢＬ２０　−　Ｌａ　ｉ／ｐ　６．５■　マウス Ｃ５７Ｂｔ２０　−　Ｌａ　ｉ／ｐ　６．５■　マウス ＣＢＡＦ　２０　−　Ｂ−１６ｈ／ｄ　−■　マウス Ｃ５７ＢＬ２０　−　Ｃａ−７５５ｈ／ｄ　−五乙暁月 動　物　毒性値　移　植　対照。

ｍｏｎ、２０　−　ＷＣ８ｈ／ｄ　− ｍｏｎ、　２０　−　ケゝレン癌　ｈ／ｄ　−５−フルオマウス ロウラシル　Ｃ５７ＢＡ　２０　１００　Ｌａ　ｉ／ｐ　６．５同上　マウス Ｃ５７Ｂｔ２０　−　Ｌａ　ｉ／ｐ　６．５同上　マウス ＣＢＡＦ　２０　−　Ｂ−１６ｈ／ｄ　−同　上　ラット　シュグエルソ ｍｏｎ、　２０　−　赤白血症　ｈ／ｄ　−フトラフ−７し　マウス Ｃ５７Ｂｔ　２０　６４０　Ｌａ　ｉ／ｐ　−同上　マウス Ｃ５７ＢＡ２０　−　Ｌａ　ｉ／ｐ　−同上　マウス ＣＢＡＦ　２０　−　Ｂ−１６ｉ／ｐ　−同　上　ラ　、ト　シュヴエルツ ｍｏｎ、　２０　−　赤白血症　ｈ／ｄ　−表（繞（） 試験化合物　腫瘍移植　％　飴 １　７５　１−７　０．１　−　３０　Ｉ４゜−４，ＯＩ　７５　１−１０　− 　１５　−　−Ｉ［７５１−７０，５−４５Ｉ４０＝２．ＯＩ［［６５１−７０ ，２−４０Ｉ　４ａ　＝７．８ＩＶ　６５１−９　−　−１００　− ＩＶ　７５　１−７　−　−　６０Ｉ６ｏ＝５，６ＩＶ　７５　１−７　．０． ７　−　８０　−ＩＶ　７５１−１０　−　３０−　− ＩＶ　６５　１−１０　０．３　７０　−　−ＩＶ　６０１−１０　−　７５− 　− ＩＶ　７５７−１４　−　４５−　− ＩＶ　６０　７−１６　−　２０　−　−同上　３５１．３，５．７０．６７− 　５７　−同上　２５１−１０　−　０　−　− 同上　２５７−１４　−　１５−　− フトラフール　４５　１−６　’０．１７−　１５　−同上　３００１，５．９ −　−　６０　Ｉ、。＝２．０同上　３００１．５．９−　１０−　−同上　９ ０７−１４　−　１５−　− 上記表から明らかなように、本発明に係る全ての化合物は明らかに明白な抗白血 病作用を有する。

即ち白血病Ｌａの場合において化合物（１）は、Ｆ、ＬＳ指数に関しフトラフー ルに対する処理の同様の計画で該フトラフールよシも２倍与→よシ有効であシ； 両化合物の運動学的判定基準Ｘは近似した値を有する。化合物（１）は、白血病 Ｌａに関しその治療効果において５−フルオロウラシルに近似している。

白血病Ｌａの場合において、化合物（ｎ）はＥＬＳ及び運動学的判定基準の特徴 に関しフトラフールよシも３倍り妙よ）有効であシ、更にこれ等の特性において ５−フルオロウラシルに類似してイル。

白血病Ｌａの場合において、化合物（Ｉｌｌ）はＥＬＳの特徴に関しフトラフー ルよシも２倍奔→より有効であシ、−万両化合物の運動学的判定基準Ｘは接近し た値を有する。白血病Ｌａに関するその治療効果に関し化合物（ＩＩＩ）は５− フルオロウラシルに近似している。

最も活性なものは化合物（ＩＶ）でアわ、これは等毒性用量及び比較し得る処置 計画において固化合物を比較した場合その作用の有効性の点においてフトンより フールよシも５倍％優れている。化合物（ＩＶ）の有効性は５−フルオロウラシ ルのそれに匹敵する。

化合物（ＩＶ）も又、白血病Ｌ−１２１０及び白血病Ｐ−３８８の場合において 高い抗腫瘍作用を示す。

固体腫瘍に関するそれ等の作用について、本発明に係る化合物のうち最も活性な ものは化合物（ＩＶ）である。比較用量及び処置計画において、化合物（ＩＶ） はシュヴエルツ赤白血症の場合においてフトラフール及び５−フルオロウラシル よりも２〜３倍←→よシ有効であり、黒色腫Ｂ−１６の場合においてフトラフー ルよりも３倍殻妙より有効である（５−フルオロウラシルは黒色腫Ｂ−１６に関 し有効な作用を示さない）。化合物（ＩＶ）は、癌肉腫７５５及びワオーカー癌 肉腫に関し相当な抗腫瘍作用を示す点に特徴を有する。

本発明に係る全ての化合物は高い治療指数の値を有する点に特徴を有する。かく して、白血病Ｌａの場合において、化合物（ＩＶ）の治療指数Ｉ６０はフトラフ ールのＩ６ｏに比較し２倍←妙より高く更に５−フルオロウラシルのそれに比較 し１２倍高イ。

白血病Ｌａの場合において化合物（ＩＶ）、フトラフール及び５−フルオロウラ シルの治療的有効性に関し抗腫瘍作用及び運動学的特性を明らかにする為、マウ スＣ５７Ｂｔに関し一連の実験を行った。白血病Ｌａ’ｉｚ生理溶液中の白血病 細胞懸濁液を用い腹腔内に移植した。接種物は、白血病細胞１０個を含有した。

化合物（ＩＶ）　、フトラフール及び５−フルオロウラシルを又腫瘍の移植後３ 時間目に第一回の投与を行い次いで七日間に亘って一日の基準量を腹腔内投与し た。

マウスの牌の重量（！りの変動（Ｍ）を１４日（τ）に亘って測定した。得られ た結果を第１図に示されろ座標軸Ｍ−τで示すグラフをプラットする為用いた。

第１図は、対照実験（試験化合物を投与しない場合）及び試験化合物の等モル量 の一回用量（０２ミリモル／ｋｇ）の作用に関し白血病ＬａＬｖ場合におけるマ ウスの牌の重量変化を示す動力学的曲線でアシ：曲線１は対照実験に対し、 曲線２はフトラフールの作用に対し、 曲線３は５−フルオロウラシルの作用に対し、曲線４は化合物（ＩＶ）の作用に 対する。

マウスの牌の増加の動力学的曲線の傾きは、白血病Ｌａの抑制において最も有効 である。その作用は５−フルオロウラシルの作用の数倍も優れておシ更にフトラ フールの作用よシも何倍も優れている。

腺癌７５５の場合において、化合物（ＩＶ）及びフトラフールの治療的有効性に 関する抗腫瘍作用及び動力学的特徴全町らかにする為、マウスＣ５７ＢＡに対し 一連の実験全行った。腺癌７５５を、生理溶液（１：１重量比に希釈）中腫瘍細 胞懸濁液を用いて移植し、次いで各マウスに０．３　ｍｌの用量で皮下組織に投 与した。試験化合物を、腫瘍移植後１日目から始め、１０日間に亘って毎日腹腔 的投与した。

腺癌７５５の腫瘍容積増加（Ｖ）ｋα３で２８日（τ）量測定した。得られた結 果を用い、第２図に示される座標軸Ｖ−τにグラフにプロ、トシた。

第２図は腺癌７５５の場合において対照実験（試験化合物を投与しない場合）及 び試験化合物の等モル量の一回用量（０，２ミｌＪモル／ｋｇ）の作用に関し腫 瘍容積増加の動力学的曲線を示す゛ 曲線５は対照実験及びフトラフールの作用に関し更に 曲線６は化合物（ＩＶ）の作用に関する。

動力学曲線５において、対照実験に対応する実験の点は、通常の丸で示され、フ トラフールの使用に対応する実験点は通常の三角で示される。

第２図から明らかな様に化合物（ＩＶ）は腫瘍の増殖を相当に阻止し、−万フド ラフールは抗腫瘍作用を示さない。

上記試験結果から明らかな様に、それ自身５−フルオロウラシルの最も良好な特 性−その高い抗白血病作用を、フトラフールの最も良好な特性−その低毒性及び 固体腫瘍に関し高い抗腫瘍作用を組み合わせたものと言うことが出来る。

産業上の利用可能性 本発明に係る抗腫瘍作用を有する５−フルオロウ図面の簡単な説明 本発明は更に添付した図面を参照しつ＼それ等の特定の態様によシ説明される： 第１図は、対照におけるＬａ−白血病の場合におけるマウスの牌の重量変化並び にフトラフール、５−フルオロウラシル及び５−フルオロウラシルのニトロキシ ル誘導体（Ｒ１＝ナトリウム、Ｒ２＝Ｘ）の当モル用量を投与した場合の該変化 を座標Ｍ−τ（ここにおいてＭはマウスの牌の重量（９）であシ、τは時間（日 ）である）で７０口、トシた曲線であシ：第２図は、対照において並びにフトラ フール及び５−フルオロ−ウラシルのニトロキシル誘導体（Ｒ，ハナトリウムで あシ、Ｒ２はＸである）を投与した場合マウスにおける腺癌７５５において得ら れた腫瘍容積の曲線を示し、これは座標Ｖ−τ（こ＼において■は腺癌７５５腫 瘍の容積（ｃｒｎ３）であシ、τは時開（日）である）でプロットされている。

国際調査報告

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １．抗腫瘍作用を有する一般式： （式中、Ｒ１およびＲ２はともにＸであるか、又はＲ１はＸでｉ、Ｒ２は水素で あるか、又はＲ１は水素であシ、Ｒ２はＸであるか、又はＲ１はナトリウムであ 、９、Ｒ２はＸであ）、ここにおいてＸは導体Ｏ