JPS61103841A - 放射性テクネチウム標識に供する安定な塩化第一スズ組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は肝臓シンチグラフィー用放射性テクネチウム標
識つきスズコロイドの調製、および赤血球の高収率な放
射性テクネチウム標識を目的とした用途に宵用な、新し
い、安定かつ低毒性の非放射性標識用組成物に関するも
のである。すなわち。

本発明は比較的高濃度の塩化第一スズ溶液を微量分注し
これを凍結乾燥して形成させる非放射性標識用組成物に
関するものである。

テクネチウム−９９ｍは約１４０ＫｅＶのＴ−線のみを
放出（β−線をともなわない）シ、短い半減期（約６時
間）で減衰する核種であり１体内投与用診断用放射性核
種として極めて通した特性を有するために、近年、核医
学領域においてその利用が急速に増加しつつある。

種々のテクネチウム−９９ｍ標識放射性医薬品が開発さ
れてきた途上で、ある種のコロイド粒子が肝臓のＫｕｐ
ｆｆｅｒ細胞に取り込まれることを利用して肝臓の形態
をシンチグラフィー的に可視化するためのテクネチウム
−９９ｎ１標識放射性医薬品もいくつか登場した。この
なかで、　１９７２年に発表されたテクネチウム−９９
ｍスズコロイド（Ｗｉｎｃｈｅｌ１等Ｊｏｕｒｎａｌ　
ｏｆ　Ｎｕｃｌｅａｒ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　１３：　５
８−６５＋１９７２）は優れた肝臓イメージング剤とし
てテクネチウム−９９ｍ硫黄コロイド、テクネチウム−
９９ｍカルシウム−フィチン酸コロイドと並んで現在広
く臨床使用されている。

テクネチウム−９９ｍスズコロイドの調製にあたっては
第一スズ〔２価のスズ、５ｎ（ＩＩ））を含む非放射性
標識用組成物と過テクネチウム酸ナトリウムの生理食塩
水（０，９重量　％ＮａＣ１）溶液を混合して目的物を
得る方法がとられるが、このためには安定かつ低毒性で
ありさらに静脈内投与によって優れた肝臓シンチグラム
を与え得る粒子径と粒子濃度を持つテクネチウム−９９
ｍスズコロイドが形成されるように第一スズ〔２価のス
ズ、　Ｓｎ（■）〕を含む非放射性標識用組成物を製造
しなくてはならない。この第一スズ〔２価のスズ、　Ｓ
ｎ（■）〕を含む非放射性標識用組成物としては。

先に述べたＷｉｎｃｈｅｌｌ等の報告にある塩化第一ス
ズの希薄水溶液（０，５−２，０ミリモル／リットル）
を用いるのが最も一般的であるが、希薄水溶液中の塩化
第一スズは加水分解や空気酸化を極めて受けやすいため
その安定性や保存方法に大きな問題を残している。通常
、溶液状態において不安定な組成物を安定化させるため
にこれを凍結乾燥することがよ（行われるが、塩化第一
スズの希薄水溶液では凍結乾燥中に加水分解あるいは酸
化を受けるため、テクネチウム−９９ｍスズコロイドｔ
Ｊ！ｉｌ製用の凍結乾燥塩化第一スズ組成物はこれまで
に報告　　　　′されていない。

上に述べた問題点をいくらか解決する試みとして第一ス
ズ〔２価のスズ、５ｎ（ＩＩ））を含む非放射性標識用
組成物の調製に際し、塩化第一スズにかえて弗化第一ス
ズおよび弗化ナトリウムを用いる方法をレイドラ−等が
報告している（特公昭５７−１５０８９　）が、一般に
弗化物化学種は対応する塩化物に比較して著しくその毒
性が高いため、これもテクネチウム−９９ｎ＋スズコロ
イド調製用の理想的な非放射性標識用組成物とは言い難
い。

本発明者等はテクネチウム−９９ｍスズコロイドはその
調製と投与が適切に行われたときには優れた肝臓シンチ
グラムを与えると確信するものであり、安定かつ低毒性
なテクネチウム−９９ｍスズコロイド開裂用非放射性標
識用組成物・ε得るための研究を続けてきた。その結果
、高濃度の塩化第一スズ溶液を微量分注しこれを凍結乾
燥することにより安定、低毒性でかつ極めて優れた肝臓
シンチグラムを与えるテクネチウム−９９ｍスズコロイ
ド開裂用非放射性標識用組成物を製造し得ることを見い
出した。

一方血管内に投与された際に、いかなる臓器にも摂取さ
れずに血液循環系内に留まる放射性医薬品の開発は、心
臓血液プールの体外観察、脳血管。

末梢血管の体外観察、また総崩液循環系容量の決定など
の医学的に有用な知見を得ることを目的として核医学領
域において多くの研究がなされており、テクネチウム−
９９ｍ標識人血清アルブミン（″”Ｔｃ−ＵＳＡ）や体
外標識法によるテクネチウム−９９ｍ標識赤血球（′１
”Ｔｃ−赤血球）などが報告された。しかしながら、１
５”Ｔｃ−１１ｓＡは標識率と体内での安定性に大きな
問題があり、また１体外標識法による”″Ｔｃ−赤血球
では、採血　−血球の分離−第一スズの添加　−過テク
ネチウム酸塩Ｃ′”ＴｅＯ２−）の添加　−標識反応　
−分離精製　−投与、という一連の操作の複雑さ、また
操作中の細菌汚染の可能性などのために１両者とも広く
用いられるまでには至っていない。

これに対して１体内において赤血球をテクネチウム−９
９ｍで標識しようとする試みがなされた。

すなわち、第一スズをリン酸化合物キレートの形で含む
注射液を血管内に投与した後に過テクネチウム酸塩（”
Ｔｃ０４−）を投与して赤血球を特異的にテクネチウム
−９９ｍで標識しようとするもので１手技の簡便さ、標
識率の高さ、標識後の安定性の高さなどの面から注目を
集め、広く利用されつつある。この方法では第一スズの
リン酸化合物キレートとしてスズ−ピロリンｆｌｉ　（
Ｓｎ−ＰＰ＋）　＋スズーエタンー１−ヒドロキシー１
．１−ジホスホン酸（Ｓｎ−ＥＨＤＰ　）　、スズ−メ
チレンジホスホン酸（Ｓｎ−ＭＤＰ）等が報告されてい
るが、５ｎ−ＰＰｉを使用した報告が最も多い。既に我
々が報告したとおり。

この標識法において第一スズと共に用いられるリン酸化
合物は赤血球標識の実現に不可欠なものではなく他のキ
レート剤（例えばピリドキシリデンアミネート類）を第
一スズと共に用いても良好な体内赤血球標識を行うこと
ができる（Ｋａｔｏ：　Ｊｏｕ−ｒｎａｌ　ｏｆ　Ｎｕ
ｃｌｅａｒ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　　２０：　１０７１−
１０７４＋　１９７９）。

すなわち、ここで第一スズと共に用いられるキレート剤
の役割は非放射性標識用組成物中において第一スズを加
水分解や空気酸化から保護して安定化することにあり、
したがって塩化第一スズのみから成る十分に安定な非放
射性標識用組成物が調製できるのであればこの種のキレ
ート剤の添加は必須の条件ではなく、さらに必要最小限
の成分分量を人体に投与すべきであるとする医学薬学上
の精神から見てもこの種のキレート剤の添加は可能な限
り避けられるべきである。

上に述べたような観点から１本発明者等はテクネチウム
−９９ｍによる体内赤血球標識に用いるための塩化第一
スズのみから成る非放射性標識用組成物の調製方法の研
究を進めてきた。その結果。

本発明にかかる塩化第一スズのみから成る非放射性標識
用組成物を用いることにより極めて優れた体内赤血球標
識が可能であることを見い出した。

本発明の実施について具体的に説明すると次のようにな
る。

！ まず、塩化第一スズ溶液の調製に用いる塩化第一スズは
無水塩化第一スズ（ＳｎＣ１２）または塩化第一スズ水
和物（一般に二水和物、　５ｎＣ１２・２Ｈ２０’）の
いずれであっても本発明を実施し得る。

次に、塩化第一スズ溶液の開裂に用いる溶媒は所定濃度
の塩化第一スズ溶液を与え、かつこの溶液の凍結乾燥を
妨げないものであれば良＜、シたがって最も好ましい溶
媒は水である。また、溶液の凍結乾燥を妨げない範囲で
混合された溶媒（例えば、水とエチルアルコール、水と
メチルアルコール、水とジメチルスルホキシド等）を塩
化第一スズ溶液のｇＦｆＪＭに用いることは本発明の実
施を妨げるものではない。

塩化第一スズ溶液の調製に際しては、後に実施例におい
て述べるよ・うに、第一スズの加水分解や酸化を避ける
ために窒素またはアルゴンのような不活性気体の雰囲気
下でこれを行うべきである。

同様に、調製に使用する溶媒は上述のような不活性気体
を用いてその溶存酸素を除去してお（べきである。

溶液の分注とは、得られた溶液の一定量ずつを取りこれ
をバイアルまたはアンプルのごとき小容器に充虜する操
作であり、上に述べたのと同様の理由によりこの操作も
不活性気体の雰囲気下で行われることが望ましい。

溶液の凍結乾燥とは溶液を適当な方法を用いて冷却して
凍結せしめた後、系を減圧して昇華作用により凍結体か
ら溶媒を除去する操作である。

本発明における凍結乾燥では、凍結過程における塩化第
一スズまたは塩化第一スズ溶媒和物の析出や凍結体中に
おける塩化第一スズ濃度の不均一化を避けるために、溶
液をなるべく急速に冷却して凍結せしめることが望まし
い。

凍結乾燥の終了後は、得られた非放射性標識用組成物の
酸化を避けるために減圧真空下で非放射性標識用組成物
を収容している容器を密栓して製品とするか、もしくは
窒素またはアルゴンのごとき不活性気体を用いて系を大
気圧に復圧せしめ。

さらにこの不活性気体雰囲気下で非放射性標識用組成物
を収容している容器を密栓して製品とすべきである。

次に、塩化第一スズ溶液の濃度とその分注量について説
明する。

塩化第一スズ溶液の濃度は０．０５モル／リットル以上
であり、使用する溶媒に対する室温における塩化第一ス
ズの溶解度以下でかつ凍結乾燥の凍結過程において溶液
の凍結完了までに塩化第一スズまたは塩化第一スズ溶媒
和物の析出を起こさないような濃度であれば本発明を実
施し得るが、好ましい濃度範囲は０．５モル／リットル
から２．０モル／リットルである。ここで、溶液の凍結
過程において温度の低下に従ってその溶媒に対する塩化
第一スズの溶解度が溶液調製時における塩化第一スズ濃
度を下回る場合でも、溶液が過飽和状態を維持すること
により溶液の凍結完了までに塩化第一スズまたは塩化第
一スズ溶媒和物の析出を起こさなければ１本発明を実施
することができる。

バイアルまたはアンプルのような小容器への塩化第一ス
ズ溶液の分注量は、実際の臨床現場において３本発明に
かかる非放射性標識用組成物を含有する一容器あたり、
何名の被検者の検査を実施するかを勘案して決められる
べきである。使用時における空気酸化や細菌汚染の危険
性を考慮すれば９本発明にかかる非放射性標識用組成物
を含有する一容器あたりの好ましい被検者数は１名から
５名の範囲であり、現在一般に使用されている他の放射
性医薬品と同様に１０名を越えるような一容器あたりの
被検者数は避けられるべきである。

本発明においてこの要請を勘案すると塩化第一スズ溶液
の分注量は、テクネチウム−９９ｍスズコロイド凋製調
製非放射性標識用組成物としては。

−容器あたり０．５マイクロモルから５．０マイクロモ
ルの塩化第一スズを含有するように本発明を実施するこ
とか好ましい。したがって塩化第一スズ溶液の濃度を１
．０モル／リットルとした場合の一容器あたりの分注量
は０．５マイクロリツ＋ルから５．０マイクロリツトル
となる。なお、この非放射性標識用組成物を用いてテク
ネチウム−９９ｍスズコロイドを調製する方法について
は後述の実施例において具体的に説明する。　　　　　
　　　　　　　　　Ｊ一方、赤血球の体内テクネチウム
−９９ｍ標識用の非放射性標識用組成物としては、−容
器あたり１０．０マイクロモルから１００．０マイクロ
モルの塩化第一スズを含有するように本発明を実施する
ことが好ましい。したがって、塩化第一スズ溶液の濃度
を１．０モル／す７）ルとした場合の一容器あたりの分
注量は１０．０マイクロリツトルから１００．０マイク
ロリツトルとなる。

後述の実施例において示すように１この非放射性標識用
組成物を用いてテクネチウム−９９ｍによる体内赤血球
標識を行う際に被検者に投与されるべき第一スズ（Ｓｎ
２＋　）の最適量は体重Ｉ　Ｋｇあたり１０マイクログ
ラムから２０マイクログラム（０，０８４２マイクロモ
ルから０．１６８マイクロモル、塩化第一スズ（ＳｎＣ
１２）として１５．９７マイクログラムから３１．９５
マイクログラム〕であり、この結果はスズ−ピロリン酸
やスズ−ピリドキシリデンアミネート類を用いた体内赤
血球標識についてすでに報告されている第一スズの最適
投与量（Ｈａｍｉｌｔｏｎ等：Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　
Ｎｕｃｌｅａｒ　Ｍｅｃｌｉｃｉｎｅ　１８：　１０１
０−１０１３＋１９７７、　Ｋａｔｏ：　Ｊｏｕｒｎａ
ｌ　ｏｆ　Ｎｕｃｌｅａｒ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　２０：
１０７１−１０７４．１９７９）と一致していた。

次に１本発明に関る非放射性標識用組成物を実際に臨床
使用するにあたっての操作法について説明する。

本発明に関るテクネチウム−９９ｍスズコロイド８Ｒｉ
ｌ裂用の非放射性標識用組成物の使用にあたっては、ま
ずその容器中に存在する塩化第一スズの１マイクロモル
につき１ｍｌに相当する量の、無菌で発熱性物質を含ま
ず、かつ溶存酸素を除去した水を加えて溶解した後、加
えた水と同容量の、テクネチウム−９９ｍを過テクネチ
ウム酸ナトリウムの形で含む生理食塩水を加えて室温に
約１５分間放置することによりテクネチウム−９９ｍス
ズコロイドが得られる。ここで調製に用いるテクネチウ
ム−９９ｍの放射能量は、このテクネチウム−９９ｍス
ズコロイドを含有する一容器あたり、何名の被検者の検
査を実施するかを勘案して決められるべきである。ちな
みに１現在一般に行われているテクネチウム−９９ｍス
ズコロイドによる静的肝臓シンチグラフィーにおけるテ
クネチウム−９９ｎ＋の投与量は、被検者−人あたりＩ
　ｎ＋ｃｉから５　ｍｃｉであるが。

これも使用するガンマカメラの性能等を勘案して調節さ
れるべきである。このようにして調製されたテクネチウ
ム−９９ｍスズコロイドを被検者に静脈内投与し、ガン
マカメラまたはシンチレーションスキャナーによって撮
像することにより肝臓シンチグラムを得ることができる
。

一方１本発明に関る体内赤血球標識用の非放射性標識用
組成物の使用にあたっては、まずその容器中に存在する
塩化第一スズの５マイクロモル（９４８マイクログラム
）につき約１ｎ＋Ｉｔに相当する量の、無菌で発熱性物
質を含まず、かつ溶存酸素を除去した水を加えて熔解す
る。この液を、被検者の体１１Ｋｇあたりの第一スズ（
Ｓｎ（ＩＩ））量が２０マイクログラム〔塩化第一スズ
（５ｎＣ１□）としては３２マイクログラム〕になるよ
うに液量を調節して被検者に静脈内投与し、　３０分経
過後にテクネチウム−９９＋ｎを過テクネチウム酸ナト
リウムの形で含む生理食塩水を静脈内投与することによ
りテクネチウム−９９ｍによる体内赤血球標識が達成さ
れる。ここで使用されるテクネチウム−９９ｍの放射能
量は、検査の目的、ガンマカメラの性能等を勘案して決
められるべきであるが、現在一般に心臓核医学の領域に
おいて体内赤血球標識に際して用いられているテクネチ
ウム−９９ｍの放射能量は被検者−人につき５ｍＣ１か
ら３０ｍＣ１である。

本発明の重要な要素は、比較的高濃度の塩化第一スズ溶
液を用いることにある。現在市販されているテクネチウ
ム−９９ｍ標識用の非放射性標識用組成物（テクネチウ
ム−９９ｍ標識用キット型放射性医薬品）の大部分はテ
クネチウム−９９ｍの還元剤として第一スズを含む凍結
乾燥製剤であり、しかも塩化第一スズの量は一容器あた
り数マイクロモルである。このように微量の塩化第一ス
ズを含む組成物を第一スズの加水分解や酸化を回避しつ
つ凍結乾燥できるのは、共存する被標識化合物、　　　
　　！安定化剤、賦形剤等が第一スズを加水分解や酸化
から保護しているためであり、したがって塩化第一スズ
単独の溶液を加水分解や酸化を回避しつつ凍結乾燥する
ことは非常に困難であるとされ、先にも述べたように塩
化第一スズのみから成る非放射性標識用組成物はこれま
でに実用に供されていなかった。

しかしながら８本発明において我々は比較的高濃度の塩
化第一スズ溶液を先に説明したような手法を用いて凍結
乾燥す、ること番＋より、第一スズの加水分解や酸化を
回避しつつ塩化第一スズのみから成る非放射性標識用組
成物を製造し得ることを見い出したのである。

以下に実施例をあげながら本発明をさらに具体的に説明
する。

実施例１．　テクネチウム−９９ｍスズコロイド調製用
の非放射性標識用組成物（以下この非放射性標識用組成
物をＦＤＳｎ　−ＣＯＬと略記する）の製造゛　　無菌
で発熱性物質を含まない水に、除菌した窒素ガスを吹き
こんで溶存酸素を除去した。以下の操作はすべて窒素気
流下、無菌的に行った。この水１００　ｍｌｌをとり、
無水塩化第一スズ（ＳｎＣ１２）１８．９６１ｇ　（０
，１モル）を熔解させた。次にこの第一スズ溶液（濃度
１．０モル／リットル）を１窒素気流下、孔ｔ１０　、
２２μｍのフィルターを通して３．０μβずつ、内部を
窒素置換したバイアルに分注し。

凍結乾燥機を用いて凍結乾燥した。凍結乾燥終了後、窒
素を用いて大気圧に戻し、窒素気流下でゴム栓を用いて
密栓し、目的の非放射性標識用組成物、すなわちＦＤＳ
ｎ−ＣＯＬを得た。

実施例２．　　ＦＤＳｎ−ＣＯＬを用いたテクネチウム
−９９ｍスズコロイド〔以下、この方法によって調製さ
れたテクネチウム−９９ｍスズコロイドをＴｃ−（ＦＤ
Ｓｎ−ＣＯＬ）と略記する〕の製造実施例１の方法によ
って製造したＦＤＳｎ　−ＣＯＬを含むバイアルに無菌
で発熱性物質を含まず、かつ溶存酸素を除去した永３．
Ｏｎ＋ｊ２を加えて内容物を溶解した。次いでこの液に
、テクネチウム−９９ｍ５ｍＣｉを過テクネチウム酸ナ
トリウムの形で含む生理食塩水３．Ｏｎ！！を加えて混
合した後、室温に３０分間放置することにより目的のテ
クネチウム−９９ｍスズコロイド、すなわちＴｃ　−（
ＦＤＳｎ−ＣＯＬ）を得た。

実施例３　、　　Ｔｃ　　（ＦＤＳｎ−ＣＯＬ）の性質
Ｔｃ　−（ＦＤＳｎ−ＣＯＬ）の標識率を調べるためニ
、シリカゲルＮＮ板を用いて、メチルエチルケトンを展
開溶媒として薄層クロマトグラフィーを行い。

ラジオクロマトグラムスキャナーで走査して薄層板上の
放射能分布を検索した。放射能は原点（ＲｆＯ，００）
に単一ピークとして検出され、他に放射能ピークを認め
なかった。

上記の薄層クロマトグラフィー系では、過テクネチウム
酸塩の形のテクネチウム−９９ｍはＲｆＯ，９５からＲ
ｆ　１．００に展開され、テクネチウム−９９ｍスズコ
ロイドは原点に留まるのでＴｃ　−（ＦＤＳｎ−ＣＯＬ
）が原点に単一放射能ピークを示したことは、その標識
率が１００％であることに対応する。

次いで、　Ｔｃ　−（ＦＤＳｎ−ＣＯＬ）の０．２ｎｌ
ずつを複数のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ系雌ラット
に静脈内投与し、１５分後および３０分後に解剖して臓
器を摘出し各臓器中の放射能を測定して１表１に示す結
果を得た。

また１表１中には、比較のために低濃度の塩化第一スズ
溶液を用いて製造した非放射性標識用組成物に関る結果
も同時に示した。すなわち、実施例１と同様の製法にお
いて塩化第一スズ溶液の濃度を２ミリモル／リットル、
１バイアルあたりの分注量を１．５ｍ１ｌとするばか実
施例１と同様に操作して非放射性標識用組成物を得、こ
れについて実施例２と同様に操作して比較のためのテク
ネチウム−９９＋ａ　＋￥ｉ識体〔以下、このテクネチ
ウム−９９ｍ標識体をＴｃ　−（ＦＤＳｎ−ＲＥＦ）と
略記する〕を得た。

これをＴｃ　−（ＦＤＳｎ−ＣＯＬ）と同様に動物に投
与して表１に示す比較結果を得た。

表１の結果はＴｃ　−（ＦＤＳｎ−ＣＯＬ）が肝臓シン
チグラフィー用放射性医薬品として極めて優れた性質を
有していることを示している。すなわち、Ｔｃ−’（Ｆ
ＤＳｎ−ＣＯＬ）はいずれの時間点においても肝臓に９
５％以上の高度な集積を示しているのに対してＴｃ−（
ＦＤＳｎ−ＲＥＦ）は肝臓への集積が少なく、肺や残全
身等の非目的臓器への集積が相対的に顕著になっている
。本発明者等は、これまでに報告されている同目的の放
射性医薬品についてもラット体内分布を検討し１本発明
に関るＴｃ　−（ＦＤＳｎ−ＣＯＬ）が肝臓シンチグラ
フィー用放射性医薬品として優れていることを確認して
いるが、当業者は１表１の結果からこの優れた性質を容
易に理解することができるはずである。

表り、　　Ｔｃ　−（ＦＤＳｎ−ＣＯＬ）およびＴｃ　
−（ＦＤＳｎ−ＲＥＦ）のラットにおける体内分布（投
与総放射能に対する％値、５匹のラットにおける平均値
）Ａ＊　　　　−−−−Ｔｃ−（ＦＤＳｎ−ＣＯＬ）Ｂ
　＊　＊　　　−−−−−−Ｔｃ−（ＦＤＳｎ−ＲＥＦ
）実施例４．　　ＦＤＳｎ−ＣＯＬの安定性実施例１に
よって製造されたＦＤＳｎ　−ＣＯＬを遮光下、３〜６
℃にて、１００および２００日間保存し。

これを用いて実施例２の方法によりＴｃ−（ＦＤＳｎ−
ＣＯＬ　）を製造し、実施例３の方法により標識率とラ
ットにおける体内分布を調べた。その結果標識率はいず
れの時点、いずれの試料においても　１００％であった
。

さらに、ラット体内分布試験の結果を表２に示す。

表２に示したとおり、　ＦＤＳｎ−ＣＯＬは３〜６℃に
おいて２００日以上安定であった。

表２．　　Ｔｃ　−（ＦＤＳｎ−ＣＯＬ）のラットにお
ける体内分布（投与総放射能に対する％値１５匹のラッ
トにおける平均値）＊ 実施例５．　　Ｔｃ　−（ＦＤＳｎ−ＣＯＬ）の安定性
実施例２の方法により製造したＴｃ　−（ＰＤＳｎ−Ｃ
ＯＬ）を遮光下、室温で３および６時間保存し、実施例
３に記載した方法によりラット体内分布を調べた結果を
表３に示す。

表３　、　　Ｔｃ　　（ＦＤＳｎ−ＣＯＬ）のラットに
おける体内分布（投与量放射能に対する％値、５匹のラ
ットにおける平均値）＊ 表３のどと＜　、　Ｔｃ　−（ＦＤＳｎ−ＣＯＬ）は製
造後６時間以上安定であった。

実施例６．　テクネチウム−９９ｍによる体内赤血球標
識用の非放射性標識用組成物（以下、この非放射性標識
用組成物をＦＱＳｎ　−ＲＢＣと略記する）の製造 実施例１に示したＦＤＳｎ　−ＣＯＬの製造方法におい
てバイアルへの分注量を２０．０μｌとするほか実施例
１と同様に操作することにより体内赤血球標識　　　　
！用の非放射性標識用組成物、すなわちＦＤＳｎ　−Ｒ
ＢＣを製造した。

実施例７．　　ＦＤＳｎ−ＲＢＧを用いたテクネチウム
−９９ｎ＋による体内赤血球標識 実施例６の方法によって製造したＦＤＳｎ−ＲＢＣを含
むバイアルに無菌で発熱性物質を含まず、かつ溶存酸素
を除去した水１０．０ｍｌを加えて内容物を溶解した。

この溶液を＋　Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ系雌ラッ
ト（体重１４５−１８０ｇ　）の尾静脈内に５体重ＩＫ
ｇあたりの第一スズ（Ｓｎ（ＩＩ））の投与量が２０μ
ｇになるように投与液量を調節して投与した。３０分経
過後に反対側の尾静脈からテクネチウム−９９ｍ０．５
ｍＣ１を過テクネチウム酸ナトリウムの形で含む生理食
塩水０．２５ｍＪを投与した。過テクネチウム酸ナトリ
ウムＣ″″Ｔｃ）の投与から一定時間後に開腹し、ヘパ
リン処理した注射筒を用いて大動脈から５−７ｎｌの血
液を採取した。採取した血液のうち１、Ｏｍｌをピペッ
トを用いて放射能測定用バイアルに取りガンマ線測定器
を用いて計測した。計数値を別途調製した標準試料の計
数値と比較することにより、血液１ｒｒＩＩｌ中に、投
与量”Ｔｃ放射能の何％（減衰補正済）が存在するかを
算出した。この値を％ＩＤ／　ｍ　ｌ　　Ｂｌｏｏｄと
表す。ここで１０はＩｎｊｅ−ｃｔｅｄ　Ｄｏｓｅの略
号である・ ついで体重の異なる動物間でデータを比較し得るように
するために、この値を次式を用いて一定体重１６０ｇに
規格化（ｎｏｒｍａｌｉｚｅ　）　Ｌ／た。

％１０／ｍｎ　　Ｂｌｏｏｄ　（ｎｏｒｍ）　＝　（％
／　ｍ　１２　　Ｂｌｏｏｄ）ここでＷはラットの体重
（ｇ）である。

次に残りの３−５ｍｊ！の血液を遠心分離器にかけて（
８００ｇｒ、　２０分）血しょうと血球部分に分離した
。遠心分離後、ヘマトクリット値（血液中の血球成分の
体積百分率５％／Ｈｃｔ）を求め１さらに血しょう１．
０ｎｌをピペットを用いて放射能測定用バイアルに取っ
た。この血しょう１．０ｍｊ２の入ったバイアルと先述
の血液１．０ｍ＃の入ったバイアルをガンマ線測定装置
の同一幾何学的位置（同一計数効率位置）にて計数し、
ハックグラウンドを差し引いてそれぞれの１分間あたり
の正味の計数値Ｃ（ｐｌａｓｍａ）　、　Ｃ（ｂｌｏｏ
ｄ　）を求めた。これらの値より次式を用いて血液中放
射能の赤血球中および血しょう中の分布百分率（それぞ
れ％／ＲＩＩＣ，％／Ｐｌａｓｍａ）を算出した。　　
（ｐｌａｓｍａ−血しよう、　ｂ−１ｏｏｄ−血液、　
ＲＢＣ−Ｒｅｄ　Ｂｌｏｏｄ　Ｃｅ１ｌｓ−赤血球）。

×１００ ％／ＲＢＣ＝　　１００−　Ｃ％／　Ｐｌａｓｍａ３さ
らに赤血球の１ｍｊｌｉ中に投与縁放射能の何％が存在
するか〔％１０／　ｍ　ｌ　　ＲＢＣ（ｎｏｒｍ）　）
を次式によって算出した。

％ｒＤ／ｍ　（！　　ＲＢＣ（ｎｏｒｍ）　＝また全赤
血球中に投与縁放射能の何％が存在するか〔％１０　ｉ
ｎ　ｗｈｏｌｅ　ＲＢＣ）を全血量（ｍｊりが体重（ｇ
）の６．５％であると仮定して次式により算出した。

＝〔％ＩＤ／ｍＩｔＢｌｏｏｄ　（ｎｏｒｍ）　）　Ｘ
　　１６０以上の方法によって得られた結果を表４に示
す。

表４．ＦＤＳｎ−ＲＢＣを用いたテクネチウム−９９ｍ
による体内赤血球標識 ＊　過テクネチウム酸ナトリウムＣ１″″Ｔｃ）投与後
採血までの経過時間 ＊＊　ラット５匹についての平均値 Ａ　　−−−−−％１０／　ｍｌ　　Ｂｌｏｏｄ　（ｎ
ｏｒｍ）Ｂ　　−−−−−−％／　ＲＢＣ Ｃ−−−一＝−％／Ｐｌａｓｍａ Ｄ　　−−−−％ＩＤ／　ｍｌ　　ＲＢＣ（ｎｏｒｍ）
Ｅ　　・−一　％１０　ｉｎ　ｗｈｏｌｅ　ＲＢＧ後述
（実施例８）するように２０μｇ／体重ＫｇＯ量の第一
スズ量に相当するＦＤＳｎ　−ＲＢＣの投与において赤
血球標識率は一定最高値に達している。表４からも明ら
かなごと＜ＦＤＳｎ−ＲＢＣを用いたテクネチウム−９
９ｍによる体内赤血球標識においては。

過テクネチウム酸ナトリウムの投与後１時間および２時
間のいずれの時点においても％ＩＤ　ｉｎ　ｗｈｏ−１
ｅ　ＲＩＩＣ値において９５％以上の優れた標識率を示
した。本発明者等は、これまでに報告されている同目的
の放射性医薬品についても同様な動物実験を行い１本発
明に関るＦＤＳｎ　−ＲＢＣがテクネチウム−９９ｍに
よる体内赤血球標識に供する非放射性標識用組成物とし
て優れていることを−ｉ認しているが、当業者は２表４
の結果からこの優れた性質を容易に理解することができ
るはずである。

実施例８．　　ＦＤＳｎ−ＲＢＣの投与量と赤血球体内
標識率の関係 実施例７の方法においてＦＤＳｎ　−ＲＢＣのラットへ
の投与量を増減することにより１体重Ｉ　Ｋｇあたりの
第一スズ投与量を１．５．１０．２０および４０μｇと
して赤血球体内標識率を検討した結果を表５に示す。

表５．　　ＦＤＳｎ−ＲＢＣを用いたテクネチウム−９
９ｍによる体内赤血球標識 ＊　μｇ／体重Ｋｇ ＊＊　ラット５匹についての平均値、過テクネチウム酸
ナトリウムＣｌ−７ｃ）の投与後１時間で採血 Ａ　　−−−−−％ＩＤ／　ｍ１２　　Ｂｌｏｏｄ　（
ｎｏｒｍ）Ｂ　　−−−−−％／　ＲＢＣ ｃ　　−−−−−％／Ｐｌａｓｍａ Ｄ　　−−−−％ＩＤ／　ｍｌ　　ＲＢＣ（ｎｏｒｍ）
Ｅ　　−−−−−％ＩＤ　ｉｎ　ｗｈｏｌｅ　ＲＢにの
表から明らかなごとく体重ＩＫｇあたり１０〜２０μｇ
の第一スズ（Ｓｎ（ＩＩ））に相当する量のＦＤＳｎ　
−ＲＢＣの投与により裔収率な体内赤血球標識が達成さ
れた。

これらの実施例によって本発明の体内赤血球標識用の非
放射性標識用組成物を用いることにより体内において極
めて簡便かつ高収率なテクネチウム−９釦による赤血球
標識が可能であることを示した。

実施例９．　ＦＤＳｎ−ＲＢＣの安定性実施例６の方法
により製造したＦＤＳｎ　−ＲＢＣを遮光下、３〜６℃
にて１００および２００日間保存し。

これを用いて実施例７の方法により体内赤血球標識を行
った結果を表６に示す。

表６．　　ＦＤＳｎ−ＲＢＧを用いたテクネチウム−９
９ｍによる体内赤血球標識 ＊　ラット５匹についての平均値、過テクネチウム酸ナ
トリウム（”Ｔｃ）の投与後１１時間で採血 Ａ　　−−−−−−％１０／　　ｍｌ　　Ｂｌｏｏｄ　
（ｎｏｒｍ）Ｂ　　−・・−・−％／ＲＢＣ Ｃ−−−一　　％／Ｐｌａｓｍａ Ｄ　　　・−−−−％■０／　　ｍｌｌ　　ＲＢＣ（ｎ
ｏｒｍ）Ｅ　　　−−−−−−％１０　　ｉｎ　　ｗｈ
ｏｌｅ　　ＲＢにの表の結果のごと＜ＦＤＳｎ−ＲＢＣ
は製造時から２００日経過後でも良好な体内赤血球標識
を与え。

極めて安定であることが確認された。

実施例１０．　　本発明に関る非放射性標識用組成物の
毒性 本発明に関る非放射性標識用組成物はテクネチウム−９
９ｍスズコロイド調製用１体内赤血球標識用のいずれも
塩化第一スズのみから成る凍結乾燥体であるので、その
毒性の評価結果は塩化第一スズの毒性を表すものとなる
。ここでは、ラットおよびマウスに本発明に関る非放射
性標識用組成物を静脈内投与した際の急性毒性について
検討した。

すなわち、　ＦＤＳｎ−ＲＢＣを含むバイアルに無菌で
発熱性物質を含まず、かつ溶存酸素を除去した水１、Ｏ
ｎｊ！を加えて内容物を溶解して塩化第一スズ水ン容液
（ＳｎＣ１２２０マイクロモル／　ｍｌ　、　３．７９
２１１ｇ／ｍ１）としこれを雌雄のＩＣＲ系マウスおよ
びＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｉｖｌｅｙ系ラットに静脈内投
与し、投与後１４日間の累積死亡率からＬｉｔｃｈｆｉ
ｅｌｄ　−Ｗｉｌｃｏｘｏｎ法によって半数致死濃度（
ＬＤＳ。）を求めた。その結果８塩化第一スズ（ＳｎＣ
Ｉ２　）のＬＤ、。は、雌雄マウスに対してそれぞれ２
８±３　ｍｇ／　Ｋｇ、　３３±３　ｍｇ／Ｋｇ、雌雄
ラットに対してそれぞれ１７±２　ｍｇ／　Ｋｇ。

１８±３　ｍｇ／　Ｋｇであった。

本発明に関る非放射性標識用組成物の人への投与量は塩
化第一スズ（ＳｎＣ１２）として、テクネチウム−９９
ｍスズコロイド標識用の場合には最大でも９．４８μｇ
　／　Ｋｇ　（ＦＤ’；ｎ７　ＣＯＬ　’１　バイアル
の全量を体重６０Ｋｇの被検者に投与すると仮定）であ
り、また１体内赤血球標識の場合には先に述べたように
３１．９５　／ｌ　ｇ　／　Ｋｇ　［Ｓｎ　（ＩＩ　）
として２０ｐ　ｇ　／　Ｋｇ）である。これらの人体投
与量を、今回検討した動物物の中で最も感受性が高いと
考えられる雌ラットのＬＤ、。と比較すると、テクネチ
ウム−９９ｍスズコロイド調製用の非放射性標識用組成
物についてはＬＤ、、の約１／１７９０．体内赤血球標
識用の非放射性標識用組成物については約１１５３０と
なる。

これらの結果ならびに考察により１本発明に関る非放射
性標識用組成物は人体への静脈内投与に際し毒性面にお
いて十分な安全係数を確保し°ζいることが理解できる
。

さらに、塩化第一スズは、現在一般に臨床的に繁用され
ている多くの放射性医薬品において単独または他のキレ
ート剤等の成分と共に人体に投与されており、その安全
性が広く一般に認められていることも本発明に関る非放
射性標識用組成物の安全性を支持するものである。

以上、実施例を示し本発明を説明してきたが。

当業者は、これらの実施例が本発明を例示し、説明する
ために意図されたものであり、その範囲を何ら制限する
ものではないことを理解すべきである。

特許出願人　日本メジフィジンクス株式会社手続補正書
（方式） ％式％ １、事件の表示 昭和５９年特許願第２２６３９５号 ３、補正をする者 ４、補正命令の日付 ５、補正の対象 発明の詳細な説明の欄 ６、補正の内容 明ＩＯ書の発明の詳細な説明の欄を次のとおり訂正する
。

（１）３頁１１行〜１２行 「（Ｗｉｎｃｈｅｌｌ等：　・・・−・・・・・５Ｂ−
６５，１９７２）　Ｊとあるを、以下のとおり訂正する
： 「〔ウィンチエル（Ｗｉｎｃｈｅｌｌ）等：ジャーナル
　オブ　ニュークリア　メジシン（Ｊ−ｏｕｒｎａｌ　
ｏｆ　Ｎｕｃｌｅａｒ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）　１３巻＝
５８〜６５頁、　　１９７２年〕　」 （２）７頁１６行〜１８行 ｒ（Ｋａｔｏ：　−１０７１−１０７４，１９７９）　
、　Ｊとあるを、以下のとおり訂正する： 「〔加勝（Ｋａ　ｔｏ）　　：ジャーナル　オブ　ニュ
ークリア　メジシン（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｎｕｃｌ
−ｅａｒ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）　　２０巻：　１０７１
〜１０７４頁、　　１９７９年〕。」 （３）　　１３頁１８行〜１４頁１行 ｒ　（Ｉｌａｍｉｌｔｏｎ等：　・・・・・・１０７１
−１０７４．１９７９）　Ｊとあるを、以下のとおり訂
正する： 「〔ハミルトン（Ｈａｍｉｌｔｏｎ）等：ジャーナル　
オブ　ニュークリア　メジシン（Ｊｏｕ−ｒｎａｌ　ｏ
ｆ　Ｎｕｃｌｅａｒ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）　１８巻＝１
０１０〜１０１３頁、　１９７７年及び加藤（Ｋａ　ｔ
ｏ）　　：ジャーナル　オブ　ニュークリア　メジシン
（Ｊ−ｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｎｕｃｌｅａｒ　Ｍｅｄｉ
ｃｉｒ＋ｅ）　２０＠　：　１０７１〜１０７４頁、　
　１９７９年〕　」 以上

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. （１）高濃度の塩化第一スズ溶液を微量分注し、これを
   凍結乾燥することを特徴として形成されるテクネチウム
   −９９ｍ標識放射性診断剤調製用の非放射性標識用組成
   物。
2. （２）高濃度の塩化第一スズ溶液を微量分注し、これを
   凍結乾燥することを特徴としてテクネチウム−９９ｍ標
   識放射性診断剤調製用の非放射性標識用組成物を製造す
   る方法。
3. （３）溶液中の塩化第一スズ濃度がｘモル／リットル（
   ｘＭ／ｌ）、分注量がｖマイクロリットル（ｖμｌ）で
   あり、ｘが０．１以上（ｘ≧０．１）かつｖが５００以
   下（ｖ≦５００）であることを特徴とする特許請求の範
   囲第一項記載の非放射性標識用組成物。
4. （４）溶液中の塩化第一スズ濃度がｘモル／リットル（
   ｘＭ／ｌ）、分注量がｖマイクロリットル（ｖμｌ）で
   あり、ｘが０．１以上（ｘ≧０．１）かつｖが５００以
   下（ｖ≦５００）であることを特徴とする特許請求の範
   囲第二項記載の製造方法。