JPS61104797A - 光学活性１−（４−フエノキシフエノキシ）プロパン−２−オ−ルの生化学的製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、下記式（Ｉ）で示されるｅ！３−１−（４−
フェノキシフェノキシ）−プロパン−２−オールの生化
学的光学分割法に関する。さらに詳し゛くは、特定の微
生物が生産するエステラーゼあるいは小麦胚芽由来のエ
ステラーゼを８３−１−（４−フェノキシフェノキシ）
プロパン−２−オールの有機カルボン酸（−炭素数１〜
１８個の飽和または不飽和のカルボン酸）エステルに作
用させて不斉加水分解して、光学活性１−（４−フェノ
キシフェノキシ）プロパン−２−オールとその対掌体の
エステルを得ることによる工業的に有利な１−（４−フ
ェノキシフェノキシ）プロパン−２−オールの生化学的
光学分割法に関する。

上記式（Ｉ＞で示される１−（４−フェノキシフェノキ
シ）プロパン−２−オールは、たとえば優れた有害生物
防除活性を有する式ｌ で示される新規なエーテル化合物の重要な中間体である
。

上記式ｌで示されるエーテル化合物は、これを家畜また
は家禽用の飼料または飲料水に混入させ、家畜または家
禽に摂食させるか、経口的に投与することにより有効成
分をそれらの排泄物中に混在させ、これによって排泄物
または排泄物による堆肥に発生するハエ類を駆除するこ
とができ、よって特に公衆衛生上きわめて有用な化合物
である。

上記式（Ｉ）で示されるエーテル化合物は、不斉炭素を
１個有することから、２種の光学異性体が存在する。そ
の中、（Ｓ）−配置を有するエーテル化合物は、（Ｒ）
−配置のものに比し、約４倍の活性（家バエでの羽化阻
害活性）を有することから、その合成中間体としての光
学活性な一般式（１）で示される１−（４−フェノキシ
フェノキシ）プロパン−２−オールの有利な取得法の開
発が望まれている。

このような状況の下に、本発明者らは工業的に有利な８
１３−１−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−２
−オールの光学分割法を確立すべく研究を重ねた結果、
微生物エステラーゼあるいは小麦胚芽由来のエステラー
ゼをω−１−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−
２−オールの有機カルボン酸（炭素数１〜１８個の飽和
または不飽和の有機カルボン酸）エステルに作用させる
ことにより、きわめて光学純度の高い光学活性１−（４
−フェノキシフェノキシ）−プロパン−２−オールとそ
の対掌体のエステルが得られることを見出し、これに穏
々の検討を加え本発明を完成するに至った。

なお本発明においては、エステラーゼなる語はリパーゼ
を含む広義のリパーゼを意味し、有機カルボン酸のエス
テルを加水分解する酵素の意味で用いられている。

次に本発明の詳細な説明する。

本発明方法において原料として使用される出−１−（４
−フェノキシフェノキシ）プロパンエステル製造の常法
、たとえば＄−１−（４−フェノキシフェノキシ）プロ
パン−２−オールに有機カルボン酸の無水物を反応させ
る方法あるいは有機カルボン酸クロライドを有機塩基の
存在下で反応させることなどにより容易に製造すること
ができる。

本発明で使用されるエステラーゼを生産する微生物とし
ては、コリネバクテリウム（Ｃｏｒｙ−ｎｅｂａｃｔｅ
ｒｉｕｍ）属、ミコバクテリウム（Ｍｙ、ｃｏ−ｂａｃ
ｔｅｒｉｕｍ）属、サッカｏｖイセｘ　（Ｓａｃｃｈａ
−ｒｏｍｙｃｅｓ）属、サーモマイセＸ　（Ｔｈｅｒｍ
ｏｍｙｃｅｓ）（フミコラ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ））属、
リゾプス（Ｒｈｉｚ−ｏｐｕｓ）属、アスペルギラｙ、
　（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属、ストレブトマイセｘ
　（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属、ジオトリカム（Ｇ
ｅｏｔｒｉｃｕｍ）属、トリコデルマ（Ｔｒ−ｉｃｏｄ
ｅｒｍａ）属、アシネトバクタ−（Ａｃｉｎｅｔｏ−ｂ
ａｃｔｅｒ）　ｉ！４ｓ　７　ｘ　ａ　モｆ　ｘ　（Ａ
ｅｒｏｍｏｎａｓ）　Ｒ。

ベアウベリア（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ）属、ロドトルラ（
Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ）属、エンテロバクタ−（Ｅｎ
ｔ−ｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属、ペニシリウＡ　（Ｐｅｎ
ｉｃｌｌｉｕｍ）属、セラチア　（Ｓｅｒｒａｔｉａ）
属、エルビニア（Ｅ−ｒｗｉｎｉａ）属、スタフ　イＯ
：Ｉ−）力ｘ　（Ｓｔａｐｈｙｌｏ−ｃｏｃｃｕｓ　）
属、ヒコマイセス（Ｐｈｙｃｏｍｙｃｅｓ）−属、プロ
ピオニハクテリウＡ　（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｅｔｅｒ
ｉ　−ｕｎ）属、メタリジウム（Ｍｅｔａｒｒｈｉｚｉ
ｕｍ）属、バエシロマイセス（Ｐａｅｃ　ｉ　１　ｏｍ
ｙｃｅｓ　）属、サツカロマイセスｘ　（Ｓａｃｃａｒ
ｏｍｙｃｏｐｓｉｓ）属、ベニルティシリウム（Ｖｅｒ
ｔｉｃｉｌｌｉｕｍ）属、キサ：／）−１ス（Ｘａｎｔ
ｈｏｍｏｎａｓ）属に属する微生物が挙げられる。

これらの各属に属する代表的な菌株名を下記に例示する
が、本発明の微生物はこれらの例示に限定されるもので
はない。

（１）コリネバクテリウム・グルタミｉカムＡＡＴＣＣ
−１８２８ ７Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕ　ｇｌｕｔａｍｉｃｕ
ｍ（２）ミコバクテリウム・フライ　　ＩＦＯ−８１５
８Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｐｈｌｅｉ（８）サツ
カロマイセス・セルビシエ　ＡＴＣＣ−７７’５８Ｓａ
ｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ（４）
サツカロマイセス・カルスペルゲンシスＡＴＣＣ−９０
ｓ　ｒ； Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　ｃａｒｌｓｂｅｒｇｅｎ
ｓｉｓ（５）サーモマイセス・ラヌギノサス　　Ｉ　Ｆ
Ｏ−９７８８（フミコラ　ラヌギノサ） Ｔｈｅｒｍｏｍｙｃｅｓ　ｌａｎｕｇｉｎｏｓｕｓ（Ｈ
ｕｉｎｉｃｏｌａ　ｌａｎｕｇｉｎｏｓａ）（６）リゾ
プス・ジャポニカス　　　　　Ｉ　ＦＯ−４７５８Ｒｈ
ｉｚｏｐｕｓ　　ｊａｐｏｎｉｃｕｓ（７）アスペルギ
ラス・オリーゼ　　ＡＴＣＣ−１４６０５Ａｓｐｅｒｇ
ｉ　１１ｕｓ　−ｏｒｙｚａｅ（８）アスペルギラス・
フラバス　　ＡＴＣＣ−１ＡＴＣＣ−１１４９２Ａｓｐ
ｅｒ　ｆｌａｖｕｓ（９）ストレプトマイセス・グリセ
ウス・サブスピーシーズ・グリセウス　　　　　　　　
ＩＦＯ−８４８０Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｇｒｉｃ
ｅｕｓ　５ｕｂｓｐ、ｇｒｉｓｅｕｓ（１０）ストレプ
トマイセス・カスガエンシスＩＦＯ−１８８５１ Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｋａｓｕｇａｅｎｓｉｓ（
Ｕ）ジオトリカム・キャンディダム　　ＩＦＯ−４５９
７Ｇｅｏｔｒｉｃｕｍ　ｃａｎｄｉｄｕｍ（（２）トリ
コデルマ・ビリデ　　　　　　ＩＦＯ−５７２０Ｔｒｉ
ｃｈｏｄｅｒｍａ　ｖｉｒｉｄｅ（功アシネトバクタ−
・カルコアセチカスＩＦＯ−１２５５２およびＩＦＯ−
１８００６Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ　ｃａｌｃｏａ
ｃｅｔｉｃｕｓ（１４）アエロモナス・ハイドロフィラ
　サブスピーシーズ゛　ハイＦｏフイラ　　　　　　　
　　ＩＦＯ−１２９７８Ａｅｒｏｍｏｎａｓ　ｈｙｄｒ
ｏｐｈｉｌａ　５ｕｂｓｐ、　ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ（
（５）ベアウベリア・バシアナ　　　ＡＴＣＣ−２６０
８７Ｂｅａｕｖｅｒｉａ　ｂａｓｓｉａｎａ（劫ロドト
ルラ・疋ヌタ・パル・テキセンシスＩＦＯ−０８７９ Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ　ｍ１ｎｕｔａ　ｖａｒ、　ｔ
ｅｘｅｎｓｉｓ（！７）エンテロバクタ−・アエロモナ
スＩＦＯ−１：１１５８４ Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ａｅｒｏｇｅｎｅｓ（Ｉ３
）ペニシリウム・カネセンス　　　　ＩＦＯ−７１０８
Ｐｅｎｉｃｉ　１１　ｉｕｍ　ｃａｎｅｓｃｅｎｓ（１
９）セラチア・マルセセンス　　　　ＩＦＯ−１２６４
８Ｓｅｒｒａｔｉａ　ｍａｒｃｅｓｃｅｎ８■）エアビ
ニア・キャロトボラ　サブスビーシーズキャロトボラ　
　　　　　　　　　ＩＦＯ−１４０８２Ｅｒｗｉｎｉａ
　　ｃａｒｏｔｏｖｏｒａ　　５ｕｂｓｐ、ｃａｒｏｔ
ｏｖｏｒａ＠）スタフィロコッカス・アウレウス ＩＦＯ−８０６０ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ（２）フ
ィコマイセス・ニテンス　　　　ＩＦＯ−９４２２Ｐｈ
ｙｃｏｍｙｃｅｓ　ｎ１ｔｅｎｓ ＠）プロピオニバクテリウム・アクネスＡＡＴＣＣ−１
１８２ ７Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕ　ａｃｎｅｓ（４
）メタリジウム・アニソブリエ　ＡＴＣＣ−１６０８５
ＭｅＡＴＣＣ−１６Ｏ８５ａｎｉｓｏｐｌｉａｅ＠）キ
サントモナス・オリーゼ　　　　ＩＦＯ−８８１２Ｘａ
ｎｔｈｏｍｏｎａｓ　ｏｒｙｚａｅ（４）サツカロミコ
プシス・リボリティカＡＴＣＣ−８４０８８ Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｏｐｓｉｓ　　ｌｉｐｏｌｙｔ
ｉｃａ（５）ベルティシリウム・フンギコーラＩＦＯ−
１０６１６ Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ　ｆｕｎｇｉｃｏｌａ（２８
）バエシロマイセス・リラシヌスＡＴＣＣ−１ＡＴＣＣ −１８１０７Ｐａｅｃｉ１　１ｉｌａｃｉｎｕｓこれら
の菌株はいずれもＡｍｅｒｉｃａｎ　ＴｙｐｅＣｕｌｔ
ｕｒｅ　Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）あるいは大
阪布の財団法人醗醪研究所（ＩＦＯ）に保存され、これ
らの保存機関より入手することができる。

また、これらの微生物起源のニステラー°ゼのなかには
市販されているものがあり、容易に入手することができ
る。市販エステラーゼの具体ム 例としては、リゾプス層のリパーゼ（リパーゼサイケン
１００（大阪細菌研究新製））などがあげられる。また
小麦胚芽由来のエステラーゼとしては、たとえば小麦胚
芽リパーゼ（Ｌ　ｉ　ｐ　ａ　ｓ　ｅｆｒｏｍ　Ｗｈｅ
ａｔ　Ｇｅｒｍ　（Ｓ　ＩＧＭＡ社製））があげられる
。

上記のような微生物起源または小麦胚芽出来のエステラ
ーゼにおいて、工業規模での実施時コリネバクテリウム
（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、ミコバクテリ
ウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、サッカ０フイ
セｘ　（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属、サーモマイ
セス（Ｔｈｅｒｍｏｍｙｃｅｓ）（）電コラ（Ｈｕｍｉ
ｃｏｌａ））属、リゾプス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）属、ア
スペルギラス（Ａｓｐｅｒｇｉ　ｆｌｕｓ）属、ストレ
ブトマイセｘ（Ｓｔ−ｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属、ジオ
トリカム（Ｇｅｏｔｒｉｃｕｍ）属、トリコデルマ　（
Ｔｒｉｃｏｄｅｒｍａ）属、アシネトバクタ−（Ａｃｉ
ｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）属、アエロモナス（Ａｅｒｏｍ
ｏｎａｓ）属、ヘアウベリ７　（ＢｅＢｕｖｅｒｉａ）
属、ロドトルラ（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ）属に属する
微生物の生産するエステラーゼが好ましい。

その中でも特にコリネバクテリウム（Ｃｏｒｒｙ−ｎｅ
ｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、ミコバクテリウム（Ｍｙｃｏ
ｂ−ａｃｔｅｒｉｕｍ）属、サツカロマイセス（Ｓａｃ
ｃｈａｒｏ−ｍｙｃｅｓ）ｇ、サーモマイセＸ　（Ｔｈ
ｅｒｍｏｍｙｃｅｓ）（）電コラ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）
）属、リゾプＸ　（Ｒｈｉｚ　−ｏｐｕｓ）ｇ、アスペ
ルギラｘ　（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属に属する微生
物の生産するエステラーゼがより好ましい。

本発明方法において、使用されるエステラーゼを生産す
る微生物の培養は、通常、常法に従って液体培養を行な
うことにより培養液を得る。

たとえば滅菌した液体培地〔かび類、酵母類用書ζは麦
芽エキス・酵母エキス培地（水１１ｉこペプトン５．Ｏ
ｆ、可溶性デンプン１０．Ｏｆ、麦芽エキス３．０ｇお
よび酵母エキス８．Ｏｆを溶解し、ｐＨ６，２とする）
、放線菌用には滅菌した液体培地（水１１に可溶性デン
プン１０．Ｏｆ、ＮＺアミン（タイプＡ）２．Ｏｆ、肉
エキス１．Ｏｆおよび酵母エキス１．０ｇを溶解し、ｐ
Ｈ７，２とする）、細菌用には滅菌した液体培地（水Ｉ
Ｅに可溶性デンプンｌｏ、ＯＦ１ペプトン５．Ｏｆおよ
び酵母エキス５．ｏｙを溶解しｐＨ６，８とする）〕に
微生物を接種し、通常２０〜４０°Ｃで１〜３日間往復
または回転振盪培養を行なう。また必要に応じて固体培
養や嫌気培養を行なってもよい。さらに、このような培
養に際し、誘導物質としてオリーブ油、大豆油などの天
然油脂、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート
などの非イオン系界面活性剤を培地に添加することによ
り酵素の生産量を向上させることもできる。

本発明方法を実施するに際し、＄−１−（４−フェノキ
シフェノキシ）プロパン−２−オールの有機カルボン酸
（炭素数１〜１８個の飽和または不飽和のカルボン酸）
エステルの不斉加水分解は、上記微生物を培養した培養
液、培養液から分離した菌体、エステラーゼを含有する
培養Ｐ液、あるいは各穏酵素分離法によって菌体または
培養Ｐ液から分離した粗製エステラーゼ、精製エステラ
ーゼおよびエステラーゼ含有抽出液または濃縮後、ある
いは小麦胚芽由来のエステラーゼを含有する水溶液と、
＄−１−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−２−
オールの有機カルボン酸エステルとを混合し、撹拌また
は振盪することにより行なわれる。また、固定化菌体あ
るいは固定化エステラーゼを使用することもできる。

不斉加水分解を行なう条件としては、反応温度は１０〜
７０℃が適当であり、好熱菌の培養液または好熱菌の培
養により得られた耐熱性エステラーゼでは５０〜６５℃
、中温菌の培葉液または特に耐熱性を有しないエステラ
ーゼでは２０〜５０°Ｃが好ましい。

友°応時間は通常８〜７０時間であるが、反応温度を高
めたり酵素量を増加させるなどにより反応時間の短縮も
可能である。

反応中のｐＨは好アルカリ性菌の培養液やアルカリ性エ
ステラーゼではｐＨ８〜１１、好アルカリ性でない微生
物の培養液や耐アルカリ性を有しないエステラーゼでは
ｐＨ６〜８が好ましい。また、加水分解によって生成す
る有機カルボン酸を中和し、反応中のｐＨを一定に保つ
ために緩衝液の使用や、反応進行に伴ないアルカリ水溶
液を滴下することが好ましい。

緩衝液としては、リン酸ナトリウム、リン酸カリウムな
どの無機酸塩の緩衝液、酢酸ナトリウム、クエン酸ナト
リウムなどの有機酸塩の緩衝液をあげることができる。

基質であるω−１−（４−フェノキシフェノキシ）プロ
パン−２−オールの有機カルボン酸エステルの使用濃度
は反応液に対し０．５〜８０重量％であり、工業的実施
時には１０〜５０重量％が好適である。

また、原料となる（±）−１−（４−フェノキシフェノ
キシ）プロパン−２−オールの有機カルボン酸エステル
において、有機カルボン酸としては、取扱いの容易さや
反応性の点から炭素数２〜１２のカルボン酸が好ましく
、さらに、経済性や入手の容易さを考慮すると酢酸が好
ましい。

次に、このようにして不斉加水分解反応を行った後、遊
離した光学活性１−（４−フェノキシフェノキシ）プロ
パン−２−オールド未反応の対掌体エステルを分離回収
する。この分離回収に際しては、溶媒抽出、分別蒸留、
カラムクロマトグラフィー、再結晶などの操作を適宜採
用することができる。たとえば反応液をエーテル、酢酸
エチル、ベンゼンなどの有機溶媒で抽出し、この抽出物
を分別蒸留し光学活性１−（４−フェノキシフェノキシ
）プロパン−２−オールとその対掌体のエステルを分離
取得するか、または抽出物をシリカゲルのカラムクロマ
トグラフィーにかけ、たとえばヘキサン−酢酸エチル（
６：１）溶液で溶出することにより、先ｆ光学活性ｔ　
−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−２−オール
の有機カルボン酸エステルが分離され、ついでヘキサン
−酢酸エチル（２：１）溶液で溶出を行なうことによ口
その対掌体の遊離の１−（４−フェノキシフェノキシ）
プロパン−２−オールが分離される。

また、以上のようにして分離された光学活性１−（４−
フェノキシフェノキシ）プロパン−２−オールのエステ
ルは、さらに加水分解することにより容易に光学活性１
−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−２−オール
に導くことができる。加水分解の方法としては、たとえ
ハ光学活性１−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン
−２−オールの有機カルボン酸エステルを苛性ソーダま
たは苛性カリの水、メタノールまたはエタノールの溶液
に加え、室温（２０°Ｃ〜８０℃）で撹拌することによ
り、容易に光学活性１−（４−フェノキシフェノキシ）
プロパン−２−オールを得ることができる。。

又、光学活性１−（４−フェノキシフェノキシ）プロパ
ン−２−オールのエステルかう上記の方法によって得ら
れる光学活性１−（４−フェノキシフェノキシ）プロパ
ン−２−オールの光学純度が不充分な場合には、不斉加
水分解の反応時間を長くし、高い氷解率（少なくとも氷
解率５０％以上）にすることにより高い光学純度の１−
（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−２−オールを
得ることができる。（後述の実施例１８参照）。

以上、詳述したごとく、本発明方法によれば光学活性１
−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−２−オール
が高い収率および光学純度で取得することができ工業的
にもきわめて有利である。

次に本発明を実施例によってさらに詳細に説明するが、
本発明はこれによって限定されるものではない。

実施例１ ５００　ｍｌ三角フラスコに液体培地〔水ｌｌに可溶性
デンプン１０．Ｏｆ、ペプトン５．０ｇおよび酵母エキ
ス５．Ｏｆを溶解し、ｐＨ・６．８としたもの。〕１０
０Ｈｌを入れて滅菌した後コリネパクテリウムグルタミ
ヵム（Ｃｏｒｒｙｎｅ−ｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｇｌｕｔ
ａｍｉｃｕｍ）　ＡＴＣＣ−１３２８７を斜面培養から
１白金耳接覆し、８０’Ｃで４６．０時間回転振盪培養
した。ついでこれに（至）−１−（４−フェノキシフェ
ノキシ）−２−プロピルアセテ−）２．０ｆ（６，９９
ミリモル）を添加し、８０″Ｃで撹拌しつつ８８時間加
水分解反応を行なった。反応液に３５％塩酸を加えて酸
性とした後、反応物をトルエンで抽出した。抽出液をガ
スクロマトグラフィー（カラム：　５ｉｌｉｃｏｎ　Ｄ
Ｃ−ＱＦ−１２，６ｍ、ガラスカラム。カラム温度：　
２８０　’Ｃ）で分析した結果、１−（４−フェノキシ
フェノキシ）−２−プロピルアセテート：４８．０％、
１−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−２−オー
ル：５２．０％であり、他の成分は全く認められなかっ
た。

ついで該抽出液を濃縮した後、シリカゲルを充填したカ
ラムクロマトグラフィーに付し、１−（４−フェノキシ
フェノキシ）−２−プロピルアセテート０．９６０ｆ（
比旋光度：（ａ）３’＝−ａｔ、ｙｏ（りｏａホルム、
Ｃ＝１．ＯＯ）　　）および１−（４−フェノキシフェ
ノキシ）プロパン−２−オール０．８８７ｊＬ（比旋光
度：Ｃα）５”＝−１６，８°（りｏｏ＊ルＡ、　（＝
　１．００　）　）を得た。

ここで得られた１−（４−フェノキシフェノキシ）プロ
パン−２−オールを８．５−ジニトロ−フェニルイソシ
アネートと反応させてカーバメート誘導体とした後、光
学活性カラムを用いた液体クロマトグラフィー（カラム
：　Ｓｕｍｉ　ｐａｘ　０Ａ−１０００−住化分析セン
ター■製）で光学異性体分析を行なった結果、Ｓ−（ト
）一体／Ｒ−（ハ）一体＝７．５／９２．５であった。

さらに上記で得られた１−（４−フェノキシフェノキシ
）−２−プロピルアセテートｏ、５ｏｏｙを苛性カリの
メタノール溶液（濃度１０％）２．９８Ｆに溶解し、２
０”Ｃで１時間撹拌した。反応液を水１００　ｍｌで希
釈した後トルエンで抽出し、得られたトルエン層を濃縮
することにより、 １−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−２−オー
ル０．４２６ｆＣ比旋光度〔α邦８＝　１７．６°（り
ｏｏホ／Ｌ／Ａ、　Ｃ’１．ＯＯ）　）を得た。

該１−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−２−オ
ールを前述と同様にして光学異性体分析を行なった結果
、 ｓ−ｍ一体／Ｒ−（−３一体＝９６．０／４．０であっ
た。

実施例２〜１５ ５００　ｍｌ三角フラスコｌビ液体培地〔細菌類用（実
施例２〜５）には、水１１に可溶性デンプン１Ｇ、（１
，ペプトンｓ、ｏｙおよび酵母エキス５．Ｏｆを溶解し
、ｐＨ６，８としたもの。

酵母類およびカビ類用（実施例６〜１８）には、水１１
に可溶性デンプン１０．Ｏｆ、ペプトン５．０１．麦芽
エキス８．Ｏｆおよび酵母エキス８．Ｏｆを溶解し、ｐ
Ｈ６，２としたもの。

放線菌類用（実施例１４〜１５）には、水ＩＥに可溶性
デンプン１０．Ｏｆ、ＮＺアミン“タイプＡ“２．０１
．肉エキス１．０ｇおよび酵母エキス１．Ｏｆを溶解し
ｐ　Ｈ７，２としたもの〕１００　ｙｔｔを入れて滅菌
した°後、別に滅菌した大豆油０．２　ｍｌを加え、さ
らに表１に記載した各微生物を斜面培養から１白金耳接
種し、８０″Ｃで４６．０時間回転振盪培養した。つい
で実施例２〜９にはθ−１−（４−フェノキシフェノキ
シ）−２−プロピルアセテート２、Ｏｆを、また、実施
例１０〜１５にはω−１−（４−フェノキシフェノキシ
）−２−プロピルブチレート２．Ｏｆを添加し、８０°
Ｃで撹拌しつつ表１に示す時間加水分解反応を行なった
。以後、実施例１と同様にして、抽出、分離、分析を行
ない、加水分解率および該加水分解反応で得られた光学
活性１−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−２−
オールのＳ−（ト）一体とＲ−（へ）一体との比を測定
した。

結果を表１に示す。

実施例１６ ５００　ｄ三角フラスコに液体培地〔水１１に可溶性デ
ンプンｔｏ、ｏｙ、ペプトンｓ、ｏｙ。

麦芽エキス８．Ｏｆおよび酵母エキス８．Ｏｆを溶解し
ｐ　Ｉ（６，２としたもの。）１００ｍ＋／を入れて滅
菌した後側に滅菌した大豆油０．２　ｍｌを加え、さら
にＴｈｅｒｍｏｍｙｃｅｓ　ｌａｍｕｇｉｎｏｓｕｓＩ
ＦＯ−９７８８を斜面培養から１白金耳接種し、５０°
Ｃで４６．０時間回転振盪培養した。ついでこれに（±
）−１−（４−フェノキシフェノキシ）−２−プロピル
カプレート２．Ｏｆを添加し、５０℃で撹拌しつつ４８
時間加水分解反応を行なった。以後実施例１と同様にし
て、抽出、分離、分析を行なったところ、加水分解率４
１．０％であった。また、該加水分解反応で得られた光
学活性１−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−２
−オールのＳ−（ト）一体とＲ−θ一体の比は１８．５
対８６．５であった。

実施例シフ θ−１−（４−フェノキシフェノキシ）−２−プロピル
アセテートｔｏｏｌ（ｔａ、ｏミリモル）およびリゾプ
ス属のリパーゼ（大阪細菌研兜所ｔＲ）２．０ｏｆを０
．２Ｍ１１度のリン酸塩緩衝液（１）Ｈ６，８）　２０
　ｄに加え、４０℃で撹拌しつつ反応させた。この時反
応の進行に伴ないＩＮ苛性ソーダ液を加え、ｐＨを１．
８に保持した。６０時間反応を行った後、反応物をトル
エンで抽出した。抽出液を実施例１と同様にガスクロマ
トグラフィーで分析した結果、 １−（４−フェノキシフェノキシ）−２−プロピルアセ
テ−）：４９．０％、 １−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−２−オー
ル：５１．０％であり、他の成分は全く認められなかっ
た。

ついで該抽出液を濃縮した後、シリカゲルを充填したカ
ラムクロマトグラフィーに付し、１−（４−フェノキシ
フェノキシ）−２−プロピルアセテート１．９６Ｆ（比
旋光度：〔α）Ｄ＝−８２，０°（クロロホルム、Ｃ＝
１．０Ｏ））および １−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−２−オー
ル１．７４ｆ（比旋光度：〔α〕ｔ＝−１７．１°（ク
ロロホルム、　ｃ＝ｔ、ｏ　ｏ　＞　＞を得た。

ここで得られた１−（４−フェノキシフェノキシ）プロ
パン−２−オールを実施例１と同様の方法で光学異性体
分析を行なつた結果、Ｓ−（ト）一体／Ｒ−θ一体＝５
．８／９４．７であった。

さらに上記で得られた１−（４−フェノキシフェノキシ
）−２−プロピルアセテート１．０ｊＦを苛性カリのメ
タノール溶液（濃度１０％）５．８６Ｎに溶解し、２０
℃で１時間撹拌した。反応液を水１００　ｘ！で希釈し
た後トルエンで抽出し、得られたトルエン層を濃縮する
ことによし、 １−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−２−オー
ル０．８５Ｍ（比旋光度〔α〕み３＝１７．８°（クロ
ロホルム、Ｃ＝１．０Ｏ））を得た。

該１−．（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−２−
オールを前述と同様にして光学異性体分析を行なった結
果、 Ｓ−（ト）一体／Ｒ−（へ）一体＝９６．５／８．５で
あった。

実施例１８ （±）−１−（４−フェノキシフェノキシ）−２−プロ
ピルアセテ−）８．０Ｏｆ（２８，０ミリモル）および
小麦胚芽リパーゼ（Ｓ　Ｉ　ＧＭＡ社製）２．４Ｆを０
．２Ｍ濃度のリン酸塩緩衝液（ｐＨ６，８）　２０　ｍ
ｌに加え、４０°Ｃで撹拌しつつ反応させた。この時反
応の進行に伴ないＩＮ苛性ソーダ液を加え、ｐＨを６．
８に保持した。

４０時間反応を行なった後、反応物をトルエンで抽出し
た。抽出液を実施例１と同様にガスクロマトグラフィー
で分析した結果、１−（４−フェノキシフェノキシ）−
２−プロピルアセテ−）二３５．ａ％、 １−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−２−オー
ル：　６４．’５％であり、他の成分は全く認められな
かった。

ついで該抽出液を濃縮した後、シリカゲルを充填したカ
ラムクロマトグラフィーに付し、１−（４−フェノキシ
フェノキシ）−２−プロピルアセテ−）２．８４ｆを得
た。

このうち、１．Ｏｆを実施例１７と同様に処理して１−
（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−２−オール０
．８４Ｆを得た。

該１−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−２−オ
ールを前述と同様にして光学異性体分析を行なった結果
、 Ｓ−（ホ）一体／Ｒ−（ハ）一体＝９４．６１５−４で
あった。

（Ｃ１２Ｐ　　４１１００ Ｃ１２Ｒ１：６４５） 手続補正書（自発） 昭和６０年１月声　日 ２、発明の名称 光学活性１−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−
２−オールの生化学的製造法３、補正をする音 ５、補正の対象 明細書の発明の詳細な説明の欄 方式■ 審査 ６、補正の内容 （１）　　明細書＃Ｉ２４頁表１中、実施例７のエステ
ラーゼ起源の欄に「Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ−ｒｉ
ｓｂｅｒｇｅｎｓｉｓ　Ｊとあるの％　「Ｓａｃｃｈａ
ｒｏｍｙｃｅｓ−ｒｌｓｂｅｒｇｅｎｓｉｓ　Ｊと訂正
する。

のをｆＴｅｏｔｒ４ｃｕｍ　ｃａｎｄｉｄｕｍＪと訂正
する。

（３）　　同第２６頁第７行目に「ｌａｍｕｇｉｎｏｓ
ｕｓ　Ｊ　とあるのを口ａｎｕｇｉｎｏｓｕｓ　Ｊと訂
正する。

以上

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. コリネバクテリウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ
   ）属、ミコバクテリウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ
   ）属、サッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ
   ）属、サーモマイセス（Ｔｈｅｒｍｏｍｙｃｅｓ）（フ
   ミコラ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ））属、リゾプス（Ｒｈｉｚ
   ｏｐｕｓ）属、アスペルギラス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ
   ｓ）属、ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
   ｓ）属、ジオトリカム（Ｇｅｏｔｒｉ−ｃｕｍ）属、ト
   リコデルマ（Ｔｒｉｃｏｄｅｒｍａ）属、アシネトバク
   ター（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）属、アエロモナス
   （Ａｅｒｏｍｏｎａｓ）属、ベアウベリア（Ｂｅａ−ｕ
   ｖｅｒｉａ）属、ロドトルラ（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ
   ）属、エンテロバクター（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）
   属、ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）属、セラ
   チア（Ｓｅｒｒａ−ｔｉａ）属、エルビニア（Ｅｒｗｉ
   ｎｉａ）属、スタフィロコッカス（Ｓｔａｐｈｙ　ｌｏ
   ｃｏｃｃｕｓ）属、ヒコマイセス（Ｐｈｙｃｏｍｙｃｅ
   ｓ）属、プロピオニバクテリウム（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂ
   ａｃｔｅｒｉｕｍ）属、メタリジウム（Ｍｅ−ｔａｒｒ
   ｈｉｚｉｕｍ）属、パエシロマイセス（Ｐａｅｃｉｌｏ
   ｍｙ−ｃｅｓ）属、サッカロミコプシス（Ｓａｃｃａｒ
   ｏｍｙｃｏｐｓ−ｉｓ）属、ベルティシリウム（Ｖｅｒ
   ｔｉｃｉｌｌｕｍ）属、キサントモナス（Ｘａｎｔｈｏ
   ｍｏｎａｓ）属に属する微生物が生産するエステラーゼ
   あるいは小麦胚芽由来のエステラーゼを（±）−１−（
   ４−フェノキシフェノキシ）プロパン−２−オールの有
   機カルボン酸（炭素数１〜１８個の飽和または不飽和の
   カルボン酸）エステルに作用させて、これを不斉加水分
   解して、光学活性な１−（４−フェノキシフェノキシ）
   プロパン−２−オールとその対掌体のエステルに分割す
   ることを特徴とする（±）−１−（４−フェノキシフェ
   ノキシ）プロパン−２−オールの生化学的光学分割法。