JPS61191696A - 血清胸腺因子ペプチド類似体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、一般式Ｉ Ａ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−８ｓ　ｒ−Ａｓｎ−Ｂ−Ｃ−Ｎｕ
−Ｒ（Ｉ）（式中人はｐＧｌｕ　、　Ｇｉｎ　、　Ａｉ
ｍ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒ。

ｐＧｌｕ　−Ａｌａ−Ｌｙｓ−８ｅｒまたはＧｌｎ−Ａ
ｌａ　−Ｌｙｓ−８ｅｒであり、ＢおよびＣはＧｌｙ　
、　Ｐｈｅ　、　Ｌ＠ｕ　、　Ａｌａまたは直接結合で
あシ、そしてＲはＨ，１〜６炭素原子のアルキルまたは
２−フェニルエチル基である） の血清胸腺因子ペプチド類似体（ｓｅｒｕｍ　ｔｈｙｍ
ｉａｆａｃｔｏｒ　ｐ＠ｐｔｉｄｅ　ａｎｏｌｏｇｓ　
）に関する。本発明は、また、それらを製造する方法に
関する。

胸腺アゴニストは、胸腺から単離された自然ホルモンま
たはその合成類体のいずれであっても、最近免疫不全の
処置において患者の免疫応答を増加するために、例えば
、全身の病気、紅斑性狼癒（Ｉｕｐｕｓ　ｅｒｙｔｈｓ
ｍａｔｏｄｅｓ　）　、重症性筋無力症（ｍｙａｓｔｈ
ｅｎｉａ　ｇｒａｖｉｇ　）、新産児喘息（ｉｎｆａｎ
ｔｉ　ｌｅａｓｔｈｍａ　）、およびまたある種の新生
細胞の病気において応用されてきている。

従来、血清胸腺因子ペプチド類似体についての研究は、
アミノ酸配列（ｐＧｌｕ−Ａｌｔ−Ｌｙｅ−８ｅｒ　−
Ｇｌｎ−Ｇｌｙ２−８ｅｒ−Ａｓｎ）の内側またはその
Ｎ−末端（すなわち、左側末端）のいずれかにおいて、
自然血清胸腺因子の分子の修飾に集中されてきた。

これに反して、配列の反対のＣ−末端（右側末端）にお
ける修飾または延長の単一の試みは報告されていない。

自然配列の上の構造と比較して一般式■から明らかなよ
うに、本発明の化合物は、Ｎ−末端において任意に短縮
されているほかに、主としてアミド部分を有する追加の
１または２以上のアミノ酸残基によるＣ−末端の増加（
ａｕｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ　）からなる。それらは驚く
べきことには、それらの特定の分子構造に依存して、ア
ゴニスト（刺激）またはアンタゴニスト（適度あるいは
なお抑制）の意味において、顕著な免疫調節活性を有す
ることが明らかにされた。それらの生体外の効果は、標
準のＥ−ロゼツト試験〔クリニカル・アンド・イクスペ
リメンタル・イムノロノー（Ｃｌ１ｎ、　Ｅｘｐ。

Ｉｍｍｕｎｏｌ、）４７，１８３．１９８２））により
評価されるように、自然の胸腺ホルモン、例えば、°゛
血清胸腺因子および精製されたチモシン因子Ｖのそれに
匹敵し、そしていくつかの典型的な例において、それは
有意にすぐれる。それぞれの数値的評価のデータ（免疫
調節について陽性および免疫抑制について陰性）ｔ−下
表に要約する。

以下余白 血清胸腺因子のアミノ酸配列における従来実施された構
造の修飾は、位置ｌにおけるピログルタミル残基または
グルタミニル残基が意味をもたないこと、すなわち、そ
れらの存在が活性についてわずかの作用を有するのみで
あることを示した〔サイテイス（Ｃ１ｔａｃａ　）　Ｇ
、ツカモト（ＴＳ［ＡＭＯＴＯ）ら：ジャーナル・オプ
壷プロティン・ケミストリー　（Ｊ、　Ｐｒｏｔ＠ｉｎ
　Ｃｈｅｍ、）　１．３０５　（Ｉ９８２）　：］。こ
れに反して、アミド基または置換アミド基で終る追加の
Ｃ−末端アミノ酸残基からなる主題の血清胸腺因子ペプ
チド類似体類において、それらのＮ−末端位置の化学的
性質は活性の程度についておよび活性の意味についてさ
え決定的である。

本発明の血清胸腺図ペプチド類似体は、ペプチドの合成
において一般に用いられている普通の製造法により、例
えば、適当なペプチド断片を結合すること（断片の縮合
）によりあるいは所望のアミノ酸配列の連続的な段階的
構成により製造することができる。この方法は溶液中で
あるいは固体の支持体上で、必要に応じて酵素触媒の存
在下に実施することができ、そしてこの分野において知
られている保護基および縮合剤を主として使用できる。

一般式Ｉの主題のペプチド化合物は、一般式■Ｇｌｙ−
Ｇｌｙ−８ｅｒ−Ａｇｎ−Ｂ−Ｃ→ＪＴ（−Ｒ（Ｉｔ）
（式中Ｂ、ＣおよびＲは式■におけるのと同一の意味を
有する） のペプチド化合物を、一般式■ Ｘ−Ａ（イ）　　　　　　　　　　　　　　　（２）（
式中人は式！におけるのと同一の意味を有し、そしてＸ
およびＹはアルファまたはオメガアミノ基を保護する保
護基であり、ただしＡがｐＧｌｎであるときＸおよびＹ
はまたＨであることができる） の化合物と反応させて、一般式■ Ｘ−葡シＧｌｙ−Ｇｌｙ−８ｅｒ−Ａｓｎ−Ｂ−Ｃ−Ｎ
Ｈ−Ｒ（Ｖ）（式中Ａ、Ｂ、ＣおよびＲは式■における
のと同一の意味を有し、そしてＸおよびＹは式■におけ
るのと同一の意味を有する） のペプチド化合物を生成させ、必要に応じて、保護基を
それ自体既知の方法により連続的にあるいは同時【除去
することことＫよって有利に製造することができる。

Ａがピログルタミル残基であり、そしてＢ、　Ｃおよび
Ｒが前述の意味を有する一般式■の主題の化合物は、一
般式■の対応する化合物を保護されていないピログルタ
ミン酸と反応させることによって有利に得ることができ
る。

製造に必要な出発物質は、関連する文献に記載されてい
る既知の方法により入手できる既知の物質である。

製造手順は、次の実施例により詳述されている。

実験部分に関する説明。

融点はコフラー（Ｋｏｆｌｅｒ）装置で決定しそして補
正されていない。分析試料は７０　ｋＰａで減圧下に五
酸化リンの存在下に室温において（融点が１１５℃より
低い化合物について）あるいは１０５℃において（融点
が１１５℃以上の化合物について）乾燥した。旋光度は
２０℃およびＮａｐＤ線の波長においてノ４−キンーエ
ルマー１４１偏光計で測定し、そして水分はアクアテス
）　（Ａｑｕａ−ｔｅｇｔ　）　ＩＩフォト？ルタ（Ｐ
ｈｏｔｏｖｏｌｔａ　）器具で決定した。

クロマトグラフィーによる分離は、次の溶媒系において
シリカの薄層（ＫｉｅｓｅｌｇｅｌＧ、　Ｍａｒｅｋ　
）上で実施した： Ｓ、：１−ブタノール−酢酸−水４：１：ＩＳ２：１−
ブタノール−酢酸−ピリシン−水１５：３：１０：６ Ｓ３：２−プロ／Ｊ？）−ルー水２：１溶液は回転真空
蒸発器により減圧蒸発させた。

特記しないかぎり、水素化は大気圧および周囲温度にお
いて実施した。結晶化の大部分は二成分溶媒技術により
実施した：物質を第１溶媒中にその沸点において溶解し
、そして他方の溶媒を加えて冷却時に結晶化を誘発させ
た。分析試料は、特記しないかぎり、前の溶媒から類似
方法で結晶化した。

下に記載する新規な中間体を包含するすべての調製され
た化合物の組成は元素分析により確証し、そして推定し
た溶媒和物の組成物もそれぞれの溶媒の決定により確証
した。

実施例１ ａ）　　ペン・ゾルオキシカル？ニルアスｔ４ラギルー
フェニルアラニンメチルエステル 一２０℃に冷却したジクロロメタン（Ｉ０Ｑｍ／）中の
ベンジルオキシカルざニルアスノＪ？ラギン（Ｉ３，３
Ｉ；５０ミリモル）、Ｎ−エチルピペリジン（７，０ｍ
ｌ　）およびピリジン（５，Ｑｍ／）の溶液を一定に攪
拌しながら塩化ピパロイル（６，３ｍｚ）で処理した。

次いでこの混合物を攪拌し、そして８分間冷却（０℃）
した。その後、２〜３分以内に、Ｎ−エチルピペリジン
（７，Ｏコ）の添加によりその塩酸塩（Ｉ０，７，９：
５０ミリモル）から遊離した、フェニルアラニンメチル
エステルのジクロロメタン（Ｉ００１ｄ）の溶液を加え
た。この反応混合物を室温においてさらに２時間攪拌し
、沈殿した結晶質物質をフィルター上に集め、１モルの
塩酸、水、５チの炭酸水素ナトリウム水溶液および水と
とも順次にすり砕いた。メタノールから結晶化すると、
１４．５．！ｉ’（６８％）の表題生成物が得られた。

融点１９６〜１９７℃。分析試料をジメチルホルムアミ
ドおよび２−プロノＪ？ノールから結晶化させた。

融点は変化しないままであった。クロマトグラフィー：
　Ｒ，０，’１ＶＳ１．０．７５／Ｓ２゜旋光度〔α〕
。

−２，０°（ｃＯ，２Ｓツメチルホルムアミド）。元素
分析は要約式（ｓｕｍｍａｒｙ　ｆｏｒｍｕｌａ　）Ｃ
２２Ｈ２５Ｎ３０６に相当した。

ｂ）　　７スノ母ラギニルーフエニルアラニンメチルエ
ステル臭化水素酸塩 氷酢酸（７，Ｑｍ）中に溶けた前のメチルエステル（４
，３ｇ；ｘＯミリモル）を酢酸（ｌＱｄ）中の３８１の
臭化水素溶液で処理し、そしてこの混合物を室温におい
て１時間静置した。生成物をエーテルの添加によシ沈殿
させ、分離し、エーテルで洗浄し、そして水酸化す）　
ＩＪウムおよび五酸化リンの存在下にデシケータ−内で
乾燥すると、電気泳動的およびクロマトグラフィ的に均
質である３、６＃（９７０の表題物質が得られた。Ｒｆ
Ｏ，３７／Ｓ、　、　０．７０／Ｓ２゜ｃ）ベンジルオ
キシカルがニルセリルーアスノ母うギニルーフェニルア
ラニンメチルエステル−２０℃に冷却したジクロロメタ
ン（Ｉ００１１Ｌｌ）中のペンノルオキシカルゲニルセ
リン（８，４，９：３５ミリモル）、Ｎ−エチルピペリ
シン（４，９ｍ）およびピリシン（３，５１ｄ）を一定
にかきまぜながら塩化ピパロイル（４，４１１ｔｊ）で
処理した。この混合物を８分間かきまぜかつ冷却（０℃
）した。その後、２〜３分以内に、Ｎ−エチルピペリジ
ン（４，９ｄ）の添加によシその臭化水素酸塩（Ｉ３，
１ｇ；３５ミリモル）から遊離した、アスパラギニル−
フェニルアラニンメチルエステルのジクロロメタン（Ｉ
００ｒｎｌ）中の溶液を加えた。この反応混合物を２時
間室温においてかきまぜ、そして蒸発させた。非結晶質
残留物を１モルの塩酸、水、５−の炭酸水素す）　ＩＪ
ウムおよび水で順次に洗浄し、無水硫酸す）　ＩＪウム
で乾燥し、蒸発させ、そして残留物をメタノールから結
晶化させた。収量は９．１．９（５１チ）であった。融
点１８０〜１８３℃。同一溶媒から再結晶化させた試料
は融点１８４〜１８６℃を有した。Ｒ，０，７１／Ｓ　
、、０．８２／Ｓ２゜〔α発’−１３，８°（ｃＯ，２
：メタノール〕。組成：Ｃ２５Ｈ５ＯＮ４０ＥＩ　Ｏ ｄ）ペンゾルオキシカルゲニルセリルーアスパラギニル
ーフェニルアラニンアミト ９８ｑ６のメタノール（Ｉ３０ｔｊ）中の前のエステル
（５，２，９：ＩＯミリモル）の予備冷却溶液を液状ア
ンモニア（はぼ３３Ｉ）で処理し、そしてこの反応混合
物を室温において７０時間静置した。

沈殿した結晶質生成物を分離し、そしてメタノールで洗
浄すると、３．９．９（７８１の生成物が得られた。融
点２１８−２２１℃。ジメチルホルムアミド−メタノー
ル（Ｉ：　１）からエーテルの添加により結晶化した試
料は、融点２２２−２２４℃を有した。Ｒ，０，６４／
Ｓ、、０．７１／Ｓ２゜〔α〕８゜−１５，９°（ｃＯ
，２：ジメチルホルムアミド）組成：Ｃ２４Ｈ２９Ｎ５
０７０ ｅ）　　セリルーアスフ９ラギニルーフエニルアラニン
アミド ７０チのメタノール（４００ｍ）中の前のアミ）”（５
，Ｏｆ９：１０ミリモル）および酢酸（０，１１／）の
溶液をＰｄ黒（はぼ５０ｒｎ９）と混合し１そして３時
間水素化した。触媒を除去した後、この溶液を蒸発させ
、そして固体残留物を９５チメタノールーエーテルから
結晶化すると、ａ、ｅｙ（９ｓ％）の生成物が得られた
。融点１６９〜１７２℃。試料を再結晶化すると、融点
は変化しなかった。ＲｔＯ１２４／Ｓ、、０．５７／Ｓ
、（α）Ｄ−１９，３°（ｅ　Ｏ，２：メタノール）。

組成：　Ｃ，６Ｉ（２，Ｎ５０５．１／２　Ｒ２０゜ｆ
）　　ペンシルオキシカル？ニルグルタミニルーグリシ
ルーグリシンメチルエステル ノメチルホルムアミドージクロロメタン（Ｉ：２）混合
物（３０ｍ）中のグリシル−グリシンメチルエステル塩
酸塩（Ｉ，９，９：１０ミリモル）の懸濁液ｔ−Ｎ−エ
チルエチリゾン（Ｉ，４ｍ）と混合し、そして室温にお
いて２時間かきまぜた。その後、ペン・ゾルオキシカル
ブニルグルタミンインタクロロフェニルエステル（５，
３ｊ’：１０１モル）ｔ″加え、そしてこの反応混合物
を室温においてさらに４時間かきまぜた。８時間静置後
、沈殿した結晶質生成物を分離し、そしてメタノ−ルー
ツクロロメタンから結晶化させた。収量２．５ｇ（６１
％）、融点１２９−１３４℃、メタノールから再結晶化
後は１３２−１３４℃。Ｒ，０，５７／８．．０．７８
／８２゜〔α発０−８．５°（ｃＱ。２；５０ｔｓ酢酸
）・組成：Ｃｌ８Ｈ２４Ｎ４０７．１／２Ｈ２０゜ｇ）
ヘンシルオキシカルがニルグルタミニルーグリシル−グ
リクンヒドラジド メタノール（Ｉ００ｍ／）中に溶けた前のエステ／Ｌ’
（８，３，９：２０ミリモル）Ｋ、　１ｏＯ％ｏヒドラ
ゾン水和物（４，７ｍ）を加えた。室温において４８時
間静置後、結晶を分離し、メタノールで洗浄し、そして
８０４のエタノールから結晶化すると、６．ｌｌ１（７
４１）の生成物が得られた。融点１６９−１７１℃。Ｒ
ｆＯ，３０／Ｓ、、０．７０／Ｓ　２゜〔α発０−９．
１°（ｃ　Ｏ，２：メタノール）。組成：Ｃ１７Ｈ２４
Ｎ６０６０ ｈ）ヘンシルオキシカルがエルグルタミニルーグリシル
ーグリシルーセリルーアスハラだニル−フェニルアラニ
ンアミド 一２０℃に冷却したジメチルホルムアミド（５０Ｗ１１
）中の前のヒドラシト（４，１，９：１０ミリモル）お
よび濃塩酸（４゜９ｍ７）の溶液を、３．６モルの亜硝
酸ナトリウム溶液（２，８ｍ）と混合した。この反応混
合物を１０分間かきまぜかつ冷却（−２０℃）し、次い
でＮ−エチルピペリシンの添加により−６，９に調節し
、そしてジメチルホルムアミド（５０ｒｎｌ）中のセリ
ル−アスパラギニル−フェニルアラニンアミド（３、？
、９：１０ミリモル）の溶液を加えた。０℃において１
２時間静置後、固体残留物を１モルの塩酸、水、５チの
炭酸水素ナトリウム溶液および水とともに順次にすシ砕
き、そして１−ブタノール−酢酸エチルから結晶化した
。収量５．６．９（７４％）、融点２２５−２２７℃。

同様に再結晶化した試料は融点２２６−２２９℃を有し
た。Ｒ２０，３０／Ｓ１．０．５８／Ｓ２゜〔α発０−
１２．１゜（ｃ　Ｏ，２：ノメチルホルムアミド〕。ア
ミノ酸分析：Ｇｌｕ　１．００　、Ｇｌｙ　２．０２　
、　Ｓ＠ｒ　Ｏ，７６、Ａｓｐ　Ｏ，９４゜Ｐｈｅ　Ｏ
，９２゜組成：Ｃ５３Ｈ４３Ｎ９０１４．Ｒ２０゜以下
余白 １）グルタミニルーグリシル−グリシシル−フェニルア
ラニンアミド前フェニルアラニンアミド前のアミド（２
，２＃：３ミリモル）を、酢酸（０，１１ｎｌ）で酸性
化したジメチルホルムアミド−メタノール（Ｉ：２：１
００ゴ）中でＰｄ黒（はぼ２５即）の存在下に６時間水
素化した。触媒の分離後、ろ液を蒸発させ、そして固体
残留物を９５チのメタノールからエーテルの添加により
結晶化させた。収ｔ１．７．９（８６チ）、融点２０２
−２０４℃、再結晶化後２０９−２１２℃。Ｒ２０，０
５／Ｓ１．０．４２／Ｓ　２゜〔α）Ｄ−２１，９°（
ｃｏ、２：５０チメタノール）。組成：　Ｃ２５Ｈ，Ｎ
、Ｏ７，３Ｈ２０゜実施例２ ａ）７ラニルーＮω−ペンシルオキシカル？ニルリシル
ーセリンメチルエステル塩酸塩 氷酢酸（Ｉ２ｍ／）中のｔｅｒｔ−ブチルオキシカルダ
ニルア２ニル−Ｎω−ペンノルオキシカルビニルシリル
−セリ／メチルエステル（３，４Ｎ：６ミリモル）を、
同一溶媒（Ｉ２ｄ）中の１モルの塩化水素溶液で処理し
た。この反応混合物を室温において１時間処理し、生成
物をエーテルで沈殿させ、分離し、そしてデシケータ−
内で水酸化ナトリウムおよび五酸化リンの存在下に乾燥
すると、２．７１９３％）の表題化合物が得られた。Ｒ
２０，３５／Ｓ１．０．６２　／ｓ　２　。

ｂ）　　ピログルタミル−アラニル−Ｎω−ベンジルオ
キシカルがニルリシル−セリンメチルエステル ジメチルホルムアミド（５０ｍ／）中のピログルタミン
酸（０，９Ｉｉニアミリモル）、Ｎ−ヒドロキシベンズ
トリアゾール（０，９５Ｉｉ）およびＮ、Ｎ　−ジシク
ロへキシルカーデシイミド（Ｉ，６ＩＩ）の溶液を、１
０分間かきまぜかつ冷却（−１０℃）した。この反応混
合物を、Ｎ−エチルピ（リシン（Ｉ，Ｏｍ）の添加によ
り前の塩酸塩（３，４，ｉ９ニアミリモル）から遊離さ
せ九アラニルーＮω−ベンジルオキシカルがニルリシル
−セリンメチルエステルのジメチルホルムアミド（５Ｑ
ｓ＋４）中の予備冷却した（−１０℃）溶液で処理した
。この反応混合物を０℃で２時間かきまぜ、次いで室温
において８時間静置した。Ｎ、Ｎ−ジシクロヘキシル尿
素の沈殿を炉去し、ｐ液を蒸発させ、非結晶質残留物を
酢酸エチル中に溶解し、１俤の水性クエン酸、水、５チ
の炭酸水素ナトリウムおよび水で屓次に洗浄し、無水硫
酸ナトリウムで乾燥、蒸発させ、そして２−プロ・９ノ
ールから結晶化させた。収量２．４ｙ（ｓ９％）、融点
１２０−１２２℃。結晶化後の生成物の融点１３５−１
３７℃およびＲ。

０．５３／Ｓ、、０．８３／Ｓ２．　（α）、：’−２
４，４°（ｃｏ、２ニジメチルホルムアミド）。アミノ
酸分析Ｇ　１　ｕ　Ｏ，８５＊Ｌｙｓ　１．００　ｅ　
Ａｌｍ　１．０６　、　Ｓｅｒ　Ｏ，８２を組成：Ｃ２
６Ｈ５７Ｎ５０９”２０゜ Ｃ）　　ピログルタミル−アラニル−Ｎω−ペンシルオ
キシキルがニルリシル−セリン塩酸塩 前記のエステル（２，９，９：５ミリモル）をジメチル
ホルムアミド−メタノール（Ｉ：１：４０ＩＬｌ）中に
溶かし、そして１００％のヒト２ジン水和物（３，０ｍ
）を加え友。室温において８時間静置後、沈殿し九結晶
質生成物をフィルター上に集め、そしてメタノールで洗
浄した。収量２．３ＪＦ（７９９６）、融点２１２−２
１４℃、８０ｑｌＩのメタノール力ら再結晶化後、２１
７−２１８℃。Ｒ，０，５４／Ｓ１．０．７３／８２　
ｏ　　［α）ｏ’　　−４８，９°（ｃｏ、２；８０％
／／ノール）。組成”、　Ｃ２５ＨｓｙＮｙＯａ−Ｒ２
０。

ｄ）　　ヒログルタミルーアラニルーＮω−ベンジルオ
キシカル？ニルリシル−セリル−グルタミニルーグリシ
ル−グリシル−セリル−アスパラギニル−フェニルアラ
ニンアミド 一２０℃に予備冷却したジメチルホルムアミド（２０Ｗ
Ｌ／）中の前Ｏヒドラ）　Ｐ　（０，９５１：　１．６
３ミリモル）および濃塩酸（Ｑ、５ｍ／）の溶液を、３
．６モルの亜硝酸ナトリウム溶液（Ｑ、５１ｎｌ）と混
合した。この混合物をＮ−エチルピ（リシンの添加ニよ
ｌ）　Ｐ）１６．９に調節した後、ツメチルボルムアミ
ド（４０ｍ／）中のグルタミニルーグリシルーグリシル
ーセリルーアスノクラギニル−７エニルアラニンアミド
（０，９２＃：１．５１ミリモル）の溶液を加えた。０
℃において１２時間靜買置後この反応混合物を蒸発させ
、そして非結晶質残留物を飽和塩化ナトリウム（２，ｏ
ｍ／）と混合した。同じ温度でさらに１時間静置後、結
晶質生成物を分離臥洗浄し、水で飽和させたブタノール
から２０℃において酢酸エチルの添加により結晶化させ
、そして８０％の水性メタノール−酢酸エチルから再結
晶化させ九。収量０．５８１１Ｃ３３％）、融点２４８
−２５２℃、再結晶化後、２５９−２６１℃。Ｒ２０，
０８／Ｓ　、、０．４２／Ｓ２．（α北’−４８，２°
（ｃｏ、１：５０％の水性酢酸）。アミノ酸分析：Ｑｌ
ｕｌ、９０ｓＡ１ｍ　１．１８　、　Ｌｙｓ　１．０６
　＃　Ｓｅｒ　１．７９　、　Ｇｌｙ　１−９５　。

Ａｓｐ　１．０５　、　Ｐｈｅ　１．０　Ｏｎ組成：Ｃ
３ｏＨ７ｏＮ、４ｏ、７゜２　Ｒ２０６ ｅ）　　ピログルタミルーアラニルーリシルーセリルー
グルメミニルーグリシルーグリシルーセリルーアスノ母
うギニルー７ェニルアラニンアミド 前のアミド（３００１Ｒ９：０．２６ミリモル）を、Ｐ
ｄ黒（はぼ２０ダ）の存在下に１０％の水性酢酸（Ｉ０
０１７）中に大気圧および室温において３時間水素化し
た。触媒の分離後、溶液を蒸発させ、残留物を０．２モ
ルの酢酸（５，０ｍ）中に溶解し、そしてセファデック
ス（５ｅｐｈａｄｅｘ　）Ｇ　１５（カラムの大きさ１
．８　Ｘ　９０　ｃｍ　）のグル濾過により精製した。

均質な分画を濃縮し、凍結乾燥すると、２ｏ０ｒｎ９（
６４％）のりｏマドグラフィー的に純粋な生成物が得ら
れた。Ｒ，０，０２／８１．０．２５／Ｓ　２゜〔α〕
ぼ’−６７，９°（ｃ　Ｏ，１：　０．１モルの酢酸）
。アミノ酸分析：　Ｇｌｕｌ、９４．Ａ１ｍ１．１８．
Ｌｙｓｌ、１０゜Ｓｅｒ　１．７８　、　Ｇｌｙ　２．
０３　、　Ａｓｐ　１．０４　、　Ｐｎｅ　１．００゜
組成：　Ｃ４２Ｈ６４Ｎ、７０．３２　ＡｃＯＨ，４Ｈ
２Ｏ。

実施例２人 ピログルタミル−グリシル−グリシル−セリル−アスパ
ラギニル−フェニルアラニンアミド１０チの酢酸（Ｉ０
０ｍ７）中のペンノルオキシカルゲエルグルタミニルー
グリシルーグリシルーセリルーアスパラギニルー７ェニ
ルアラニンアミド（４，Ｃ１５，２６ミリモル）ｔ−１
Ｐｄ黒（はぼ２５ｄ）の存在下に４０℃および大気圧に
おいて３時間水素化した。触媒を一過した後、溶液を蒸
発させ、残留する粗生成物を０．２モルの酢酸（５ｒｎ
ｌ）中に溶解し、そしてセファテックスＧ１５のグル濾
過により精製した。均質な分画を合わせ、濃縮し、そし
て凍結乾燥させた。収量２．！Ｍ（７７チ）、軸点２１
８−２２１℃。〔α発’−３５，７゜（ｅＯ，１，１モ
ルの酢酸）。この物質はクロマトグラフィー的に均一で
あったにンヒドリン試験は隘性であった）。Ｒ，０，１
５／Ｓ　、、０．５６／Ｓ　２゜アミノ酸分析：Ｇｌｕ
ｌ、ＯＯ，Ｇｌｙ２．ＯＯ，５ｅｒＯ，８７ｅＡｓｐｌ
、０４　、　Ｐｈｅ　Ｏ，９７゜組成”　Ｃ２４Ｈ３３
Ｎ８０９゜実施例３ ａ）　　ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルがニルアラニル−
Ｎω−ベンジルオキシカルがニルリシル−キリンメタノ
ール（２０１１）中のｔｅｒｔ−ブチルオキシカル？ニ
ルアラニル−Ｎω−ベンジルオキシカル−ニルリシル−
セリンメチルエステル（２，ｏＩｉ：３．６ミリモル）
の溶液を１モルの水酸ナトリウム溶液（５，４ｍ）でア
ルカリ性とし、次いで室温において３０分間かきまぜ、
ｐＨ７，０に中和し、溶媒を蒸留し、水性残留物を１モ
ルの塩酸でＰＨ３に調節し、そして遊離した生成物を酢
酸エチル（３Ｘ１００＃！／）中に取った。合わせた有
機抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させ、そ
して酢酸エチル−石油エーテルから結晶化した。収量は
１．７Ｆ（８８チ）であった。融点１３２−１３４℃。

同−溶媒系から再結晶化後に融点は変化しなかった。Ｒ
，０，７５／Ｓ　１．０．７５／Ｓ　２゜〔α〕二〇−
２３．２”（ｅ　Ｏ，２、メタノール）・組成：Ｃ２５
Ｈ３８Ｎ４０９゜ ｂ）　　ｔａｒｔ−フチルオキシカル？ニルアラニル−
Ｎω−ペンノルオキシカルゲニルリシルーセリルーグル
タミニルーグリシルーグリシルーセリルーアスＡ’ラギ
ニルーフェニルアラニンアミド ジメチルホルムアミド（３０ｍ）中の前のセリン誘導体
（０，８，９：１．４９ミリモル）、Ｎ−ヒドロキシベ
ンゾトリアゾール（０，２＃）およびＮ、Ｎ’−ジシク
ロヘキシルカーブジイミド（０，３，９）の溶液を、１
０分間かきまぜかつ一１０℃に冷却した。同一溶媒（５
０ｍ）中のグルタミニルーグリシル−グリシル−セリル
−アスパラギニル−フェニルアラニンアミド（Ｉ，ＯＩ
Ｉ：　１．５１ミリモル）の予備冷却（−１０℃）溶液
を加え、この反応混合物を０℃に２時間かきまぜ、次い
で室温において８時間静置した。形成したＮ、Ｎ’−ジ
シクロヘキシル尿素を濾過した後、この溶液を蒸発させ
、そして非結晶質残留物を飽和プライン（塩化ナトリウ
ム溶液、３．９ｍ／）と混合した。０℃において１時間
静置後、結晶質生成物を分離し、洗浄し、そして水で飽
和させたブタノールから酢酸エチルの添加により２０℃
において結晶化させると、０．４１２３９６）の物質が
得られた。融点２２５−２２７℃。試料を同様に再結晶
化させ、そして融点は変化し々かった。Ｒ，０，２５／
Ｓ１．０．７６／Ｓ２゜〔αｌｏ’−３９，２０（ｃ　
Ｏ−１＊　５０％の酢酸〕。アミノ酸分析：Ａ１ｍ１．
０３．ＬｙｓＯ，９８，５ｅｒ１．７７、ＧｌｕＯ，９
４ａ　Ｇｌｙ　２．０３　、　Ａｓｐ　１．００　、　
Ｐｈｅ　１．０３　、組成：Ｃ５０Ｈ７！５Ｎ１３０１
７・Ｈ２Ｏ０Ｃ）　　アラニル−リシル−セリ′ルーグ
ルタミニルーグリシルーグリシルーセリルーアスノ母う
ギニルーフェニルアラニンアミド 前の−２ｆチド誘導体（０，４，９：　０．３５ミリモ
ル）を、Ｐｄ黒（はぼＺＯＷ）の存在下にｌＯチの酢酸
（Ｉ００ｍ／）中で大気圧および室温において２時間脱
保護し九。触媒を除去した後、溶液を蒸発させ、残留物
をデシケータ−内で水酸化ナトリウムおよび五酸化リン
の存在下に５時間乾燥し、そしてトリフルオロ酢酸（Ｉ
，８ＲＡ’）中に溶解した。この溶液を１時間室温にお
いてかきまぜ、生成物をエーテルで沈殿させ、分離し、
洗浄し、上のように２時間乾燥し、そして５０チのメタ
ノール中に溶解した。アセテートのサイクルにおけるゼ
ロライト（Ｚｅｒｏｌｉｔｅ　）ＦＦアニオン交換体を
用いる転化（まずパッチ方式、次いでカラム１．８Ｘ２
５ｃｙ＋ｓ）は、対応ずアセテートを生じた。合わせた
メタノール溶離液を蒸発させ、残留物を０．２モルの酢
酸中に溶かし、そして実施何重に記載するようにしてセ
ファデックスＧ１５のダル濾過により精製した。収量は
０．２１！（５７％）の均一な生成物であった。Ｒｒｏ
、０２／Ｓ１．０．４５／Ｓ２゜〔α）：’　−４０，
４’（ｅＯ，１，０，１モルの酢酸）。アミノ酸分析：
Ａｌａｌ、０９　、　Ｌｙｓ　１．０３　、　Ｓａｒ　
１．６５　、　Ｇｌｕ　１．００　、　Ｇｌｙｌ、９７
　、　Ａｓｐ　１．０２　、　Ｐｈａ　Ｏ，９８。組成
：　ｃ、ａ、ｓ、、ｏ、３゜２ＡｃＯＨ。

実施例４ −）　　アラニル−Ｎω−ベンジルオキシカルＭニルリ
シルーセリル−グルタミニルーグリシル−グリシル−セ
リル−アスパラギニル−フェニルアラニンアミドトリフ
ルオロアセテートトリフルオロ酢酸（２，７ＷＬｌ）中
の対応するｔｅｒｔ−ブチルオキシカル？二ルアラニル
イプチドアミド（Ｉ，０９：０．８７ミリモル）の溶液
を、３０分間室温においてかきまぜた。生成物をエーテ
ルの添加により沈殿させ、分離し、洗浄し、そして水酸
化ナトリウムおよび五酸化リンで乾燥すると、０．９Ｊ
Ｆ（８（Ｉ）Ｏ物質が得られた。Ｒ，０，２１／Ｓ　４
．０．６５／Ｓ　２゜ ｂ）（ンクルオキシカル？ニルグルタミニルーアラニル
−Ｎω−ベンジルオキシカル？ニルリシルーセリルーグ
ルタミニルーグリシルーグリシルーセリルーアスパラギ
ニルーフェニルアラニンアミド ジメチルホルムアミド（３０ｍ／）中に溶けたペンツル
オキシカルざニルグルタミン（２５０〜：０．８９ミリ
モル）、Ｎ−ヒドロキシ吋ンソトリアゾール（Ｉ２０ｒ
ｎ９）およびＮ、Ｎ’−ノシクロヘキシルカル？シイミ
ド（２００ｒｎ９）を、１０分間かきまぜかつ冷却（−
１０℃）した。０．１５ｍのＮ−エチルピ（リジンの添
加によりそのトリフルオロアセテ−）（９９５ダニ０．
８７ミリモル）から遊離させた前のアミドのジメチルホ
ルムアミド（３０プ）中の予備冷却溶液（−１０℃）を
加えた。この反応混合物を０℃で２時間かきまぜ、次い
で室温において８時間静置した。初めの体積のほぼ半分
に蒸発させ、引き続いて冷却（０℃で１時間）した後、
Ｎ、Ｎ’−ソシクロヘキシル尿素の沈殿’ｔ−濾過し、
そしてν液を蒸発乾固させた。固体残留物を水（３Ｍ）
と混合し、そして結晶質生成物を分離し、そして酢酸−
酢酸エチルから結晶化すると、２００ｒｎ９（Ｉ８チ）
の物質が得られた。融点２５１−２５４℃（再１結晶化
後未変化）。Ｒｙｏ、０２／Ｓ、、０．０３／Ｓ２．（
α］、−３８．８°（ｃｏ、１，２５％の酢酸）６アミ
ノ酸分析：　Ｇｌｕｌ、８４ｊＡ１ａ０．９５．Ｌｙｓ
ｌ、１１゜Ｓ＠ｒ１．７３．Ｇｌｙ２．０４．Ａａｐｌ
、００．Ｐｈｅｌ、０９゜組成”　Ｃ５８Ｈ７９Ｎ１５
ｏ、？’　２Ｈ２”ｃ）クルタミニルーアラニルーリシ
ルーセリルーグルタミニルーグリシルーグリシルーセリ
ルーアスハラだニル−フェニルアラニンアラニンアミド 前ノペンゾルオキシカル？ニルグルタミニルイプチドア
ミド（Ｉ００１１７＆：０．０８ミリモル）を、１モル
の塩酸（０，４ｉ／）で酸性化した１０％の酢酸（Ｉ０
０ｒｎｌ）中でＰｄ黒（はぼ３０ｍ９）の存在下に大気
圧および室温において３時間水素化した。

触媒を除去した後、残留物を水（５−）中に溶がし、再
び蒸発させた。これを２回反復した。固体残留物を０．
２モルの酢酸中に溶解し、そして実施例１に記載するよ
うにしてセファデックスＧ１５のダル濾過によシ精製し
た。収ｉ７０η（７５４）。

Ｒ，０，００／Ｓ　１．０．２５／Ｓ　２゜〔α：１ｊ
０−４７．８°（ｃＯ，１モルの酢酸）。アミノ酸分析
：　Ｇｌｕ　１．９２　、　Ａｌａｌ、００　、　Ｌｙ
ｓ　Ｏ，９９、Ｓｅｒ　１．７７　、　Ｇｌｙ　２．０
４　ｅ　Ａｓｐ１．０１　、　Ｐｈｅ　Ｏ，９７゜組成
：Ｃ４２Ｈ６７Ｎ、５０，５．２ＨＣｔ。

４　Ｈ２０ａ 実施例５ ａ）ヘンシルオキシカル？ニルアスパラキニルーフェニ
ルアラニン２−フェニルエチルアミド表題のアミドを実
施例１における対応するメチルエステルと同様にして混
合無水物法により製造した。収量７０チ、融点２３９−
２４３℃（酢酸−エーテル）。組成：　Ｃ２，Ｈ３２Ｎ
４０５．０．５ＡａＯＨｃｔこの生成物を普通の技術に
従い酢酸中の臭化水素溶液の使用によシ脱保護した。室
温において１時間静置した後、臭化水素酸塩をエーテル
の添加により沈殿させ、分離し、同一溶媒でよく洗浄し
、そして水酸化ナトリウムおよび五酸化リンの存在下に
１２時間乾燥すると、アスパラギニル−フェニルアラニ
ン２−フェニルエチルアミド臭化水素酸塩が得られた。

Ｒ，０，４８／Ｓ、、０．５３／Ｓ　２゜ｂ）　　４ン
ゾルオキシカル〆ニルグリシルーグリシルーセリンヒド
ラジドー ゾメチルホル、ムアミド（Ｉ８０＋１１７）中のペン・
′クルオキシカル？ニルグリシルーグリシン（Ｉ３，３
１１；５０ミリモル）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド
（５，７５，９）およびＮ、Ｎ’−ジシクロへキシルカ
ーゲノイミド（Ｉ１，３，９）の溶液を、１時間かきま
ぜかつ冷却（−１０℃）した。Ｎ−エチルビイリジン（
６，８５ｍ）でその塩酸塩（７，８，９：５０ミリモル
）から遊離させたセリンメチルエステルの同一溶媒（５
０１１Ｌｌ）中の予備冷却（−１０℃）溶液を加え、こ
の反応混合物を０℃において３時間かきまぜ、そして室
温において８時間静置した。

Ｎ、Ｎ’−ノンクロヘキシル尿素の沈殿をＦ去し、そし
てＦ液を１００チのヒドラノン水和物（Ｉ５ｍ／）と混
合した。室温において３日間後、生成したヒドラジドを
分離し、エタノールで洗浄し、そして水性エタノールか
ら結晶化させ念。収量１５．２．Ｓ＋（８３チ）。融点
１７２−１７５℃（再結晶化後、未変化）。組成：Ｃ１
５Ｈ２，Ｎ５０６゜Ｃ）　　ペンノルオキシカルボエル
グリシルーグリシルーセリルーアスノｅラギニルーフェ
ニルアラニン２−フェニルエチルアミド ツメチルホルムアミド（８０ｍｊ）中の前のヒドラジド
（３，７ｇ：１０ミリモル）および濃塩酸（４ｄ）の溶
液を一３０℃に予備冷却し、そして水（２，８ｍｊ）中
の亜硝酸ナトリウム（６９０ｒｎ９）の溶液で処理した
。−２５℃において１０分間かきまぜた後、この混合物
をＮ−エチルピペリノンでｐＨ６，９に調節し、そして
ほぼ１．６−〇Ｎ−エチルピペリシンで前の臭化水素酸
塩から遊離させたアスノ９ラギニルーフェニルアラニン
２−フェニルエチルアミドのツメチルホルムアミド（５
０ｍ）中の予備冷却（−３０℃）溶液に加えた。３℃で
静置後、この反応混合物を蒸発させ、生成物を水の添加
により沈殿させ、分離し、１モルの塩酸、水、５％の炭
酸水素ナトリウムおよび水とともに順次にすりつぶし、
そして酢酸−エチルから結晶化させた。収ｔ２．４５Ｉ
Ｉ（４３チ）、融点２２５−２２９℃。

ａ）　　グリシルーグリシルーセリルーアスノ母うギニ
ル−フェニルアラニン２−フェニルアミド表題のアミド
を前のペンジルオキシカルゲニル誘導体を臭化水素で酢
酸中におい脱保護して臭化水素酸塩を生成することによ
って得た。融点２２７−２３０℃、　Ｒ，０，５２／Ｓ
１．０．７１　／Ｓ　２゜組成：Ｃ２８Ｈ，、Ｎ、０７
．２　ＨＢｒ、　０．５ＡｃＯＨ，表題の塩基を臭化水
素酸塩からジメチルホルムアミド中で１０俤の水性アン
モニアによシ遊離させ、水で希釈することによシ単離し
、そしてツメチルホルムアミド−エーテルから組結晶化
した。収率５１チ、融点２２３−２２６℃。Ｒ，０，６
１／Ｓ１．０．７４　／Ｓ　２゜実施例６ ピログルタミル−グリシル−グリシル−セリル−アスパ
ラギニル−フェニルアラニン２−フェニルエチルアミド
を、ピログルタミン酸およびグリシルーグリシルーセリ
ルーアスノ臂うギニル−フェニルアラニン２−フェニル
エチルアミドから、前の実施例５に記載するのと同様に
してカーポジイミド法を用いて製造した。収率７２％、
融点２０９−２１１℃、　Ｒ，０，２５／Ｓ１．０．６
７／Ｓ２゜実施例７ ａ）ペンゾルオキシカルボニルセリルーアスノ母うヤニ
ルーグリシン４，４′−ノメトキシペンズヒドリルアミ
ンをペンノルオキシカルデニルセリルーアスノンライン
ヒドラジドおよびグリシン４．４′−ジメトキシベンズ
ヒドリルアミドから、実施例１に記載する手順により得
た。収率６４チ、融点１６〇−１６２℃（ジメチルホル
ムアミド−メタノール−エーテル）、Ｒｒ　Ｏ，６８／
ｓ１．０．８０／Ｓ２゜ｂ）　　Ｎ”−ヘンシルオキシ
カル？エルグルタミニルーグリシルーグリシルーセリル
ーアスノ４ラギニルーグリシン４．４′−ジメトキシベ
ンズヒドリルアミドを、同様にして、Ｎａ−ペンシルオ
キシカル？ニルグルタミニルーグリシルーグリシンヒド
ラゾドおよびセリルーアス・４ラギニルーグリシン４．
４”ジメトキシベンズヒドリルアミドから得た。収率５
４％、融点２００−２０２℃（ゾメチルホルアミドー酢
酸エチル）、Ｒ，０，３８／Ｓ１．０．８５　／Ｓ　２
、組成”　ＣＩＨ５１Ｎ９０１３”２” ｅ）　　ピログルタミルーグリシルーグリシルーセリル
ーアス／’Ｐラギニルーグリシンアミドを、前の化合物
を実施例１に記載するよう知して塩酸で酸性化した１０
％の酢酸中で接触水素化し、引き続いて４．４′−ジメ
トキシベンズヒドリルアミド塩基（ＲｆＯ，１０／Ｓ４
．Ｏ，Ｇ３／Ｓ２，０．３６／Ｓ３）をトリフルオロ酢
酸で沸とうするアニソール中で脱保護することによって
製造した。収率６６チ（ベンズヒドリに７ｉ　）’Ｏ切
離し段階）、Ｒ，０，０１／Ｓ、　　。

０．０３／Ｓ２、〔α〕ｎ　−２７，５’　（ｅ　０．
　Ｉ　ＳＯ，１モルの酢酸）。

類似の製造手順を用いて、本発明の次のペプチド化合物
をまた製造した： グルタミニルーグリシルーグリシルーセリルーアスパラ
ギニルーフェニルアラ二ン２−フェニルメチルアミド、
Ｒ，０，１８／Ｓ、　、　０．５１／８２゜グルタミニ
ルーグリシルーグリシルーセリルーアス）４　ラｆニル
−フェニルアラニル−フェニルアラニンアミド、Ｒ，０
，０８／Ｓ、　、　０．３１／Ｓ２゜ピログルタミルー
グリシルーグリシルーセリルーアスノ々ラキニル−フェ
ニルアラニル−フェニルアラニンアミド、融点２５０−
２５３℃（ノメルホルムアミＰ−エーテル）、Ｒ，０，
２２／Ｓ　、　、　０．５１δ２゜グルタミニルーグリ
シルーグリシルーセリルーアスノセラキニルーアラニン
アミド、ＴＬｒ　Ｏ−００／Ｓ、。

０．１１／Ｓ２゜ グルタミニルーグリシル−グリシル−セリル−アスパラ
ギニル−アラニル−アラニンアミド、融点１８１−１８
５℃（分解）　、　Ｒ，０，００δ、ｌ０ｆ）４パ、。

アラニルーリシルーセリルーグルタミニルーグリシルー
グリシルーセリルーアス／ＩＰラギニルーアラニンアミ
ド水素−トリフルオロアセテート、融点１７８−１８１
℃（分解）、Ｒ、０，００／Ｓ　、　、　０．０２Ａ　
２゜アラニルーリシルーセリルーグルタミニルーグリシ
ルーグリシルーセリルーアスノ母うギニルーグリシンア
ミド、Ｒ，０，０１／Ｓ、　、　０．１８／Ｓ２゜以下
余白

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、一般式 I Ａ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｂ−Ｃ−ＮＨ−
   Ｒ（ I ）（式中ＡはｐＧｌｕ、Ｇｌｎ、Ａｌａ−Ｌｙ
   ａ−Ｓｅｒ、ｐＧｌｕ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒまたは
   Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｓｅｒであり、ＢおよびＣは
   Ｇｌｙ、Ｐｈｅ、Ｌｅｕ、Ａｌａまたは直接結合であり
   、そしてＲはＨ、１〜６炭素原子のアルキルまたは２−
   フェニルエチル基である） の血清胸腺因子ペプチド類似体。 ２、アラニル−リシル−セリル−グルタミニル−グリシ
   ル−グリシル−セリル−アスパラギンである特許請求の
   範囲第１項記載のペプチド類似体。 ３、アラニル−リシル−セリル−グルタミニル−グリシ
   ル−グリシル−セリル−アスパラギニル−グリシンアミ
   ドである特許請求の範囲第１項記載のペプチド類似体。 ４、アラニル−リシル−セリル−グルタミニル−グリシ
   ル−グリシル−セリル−アスパラギニル−フェニルアラ
   ニンアミドである特許請求の範囲第１項記載のペプチド
   類似体。 ５、ピログルタミル−アラニル−リシル−セリル−グル
   タミニル−グリシル−グリシル−セリル−アスパラギニ
   ル−グリシンアミドである特許請求の範囲第１項記載の
   ペプチド類似体。 ６、ピログルタミル−アラニル−リシル−セリル−グル
   タミニル−グリシル−グリシル−セリル−アスパラギニ
   ル−フェニルアラニンアミドである特許請求の範囲第１
   項記載のペプチド類似体。 ７、ピログルタミル−グリシル−グリシル−セリル−ア
   スパラギニル−グリシンアミドである特許請求の範囲第
   １項記載のペプチド類似体。 ８、ピログルタミル−グリシル−グリシル−セリル−ア
   スパラギニル−フェニルアラニンアミドである特許請求
   の範囲第１項記載のペプチド類似体。 ９、アラニル−リシル−セリル−グルタミニル−グリシ
   ル−グリシル−セリル−アスパラギニル−フェニルアラ
   ニン２−フェニルエチルアミドである特許請求の範囲第
   １項記載のペプチド類似体。 １０、ピログルタミル−グリシル−グリシル−セリル−
   アスパラギニル−フェニルアラニン２−フェニルエチル
   アミドである特許請求の範囲第１項記載のペプチド類似
   体。 １１、グルタミニル−グリシル−グリシル−セリル−ア
   スパラギニル−フェニルアラニンアミドである特許請求
   の範囲第１項記載のペプチド類似体。