JPS61280296A - 光学活性２−（４−フエノキシフエノキシ）プロパン−１−オ−ルの生化学的製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は下記式（１）で示される（±）−２−（４−フ
ェノキシフェノキシ）−プロパン−１−オールの生化学
的光学分割法に関する。更に詳しくは微生物が生産する
エステラーゼを（±）−２−（４−フェノキシフェノキ
シ）プロパン−１−オールの有機カルボン酸（炭素数１
〜１８個の飽和または不飽和のカルボン酸）エステルに
作用させて不斉加水分解して、光学純度の高い光学活性
２−　（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−１−オ
ールとその対掌体のエステルを得ることによる工業的に
有利な２−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−１
−オールの生化学的光学分割法に関する。

従来技術及び問題点 上記式（１）で示される２−（４−フェノキシフェノキ
シ）プロパン−１−オールは、例えば優れた有害生物防
除活性を有する式（Ｉ）Ｃル で示される新規なエーテル化合物の重要な中間体である
。

上記式（１）で示されるエーテル化合物は、これを家畜
または家禽用の飼料または飲料水に混入させ、家畜また
は家禽に摂食させるか、経口的に投与することにより有
効成分をそれらの排泄物中に混在させ、これによって排
泄物または　　　　゛排泄物による堆肥に発生するハエ
類を駆除することができ、よって特に公衆衛生上極めて
有用な化合物である。

上記式（１）で示されるエーテル化合物は、不斉炭素を
１ケ有することから、２種の光学異性体が存在する。そ
の中、（Ｓ）−配置を有するエーテル化合物は、（Ｒ）
−配置のものに比し、約４倍の活性（家バエでの羽化阻
害活性）を有することから、その合成中間体としての光
学活性な一般式（１）で示される２−（４−フエノキシ
フェノキシ）プロパン−１−オールの有利な取得法の開
発が望まれている。

一般的な光学活性２−（４−フェノキシフェノキシ）プ
ロパン−１−オールを得る方法としては、光学活性な乳
酸をエチルエステルとし、これにｐ−トルエンスルホン
酸クロリドを作用させてトシルエステルとした後、アル
カリ条件下でフェノキシフェノールと反応させて光学活
性な２−（４−フェノキシフェノキシ）プロピオン酸の
エチルエステルを得、更にこれをリチウムアルミニウム
ハイドライドで還元する方法などが考えられる。

しかし、この様な方法は工程数が長く、原料に高価な光
学活性原料を使用せねばならない為工業的に実施するに
は不利である。

発明の構成 このような状況の下に、本発明者らは工業的に有利な（
±）−２−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−１
−オールの光学分割法を確立すべく研究を重ねた結果、
下記微生物由来のエステラーゼを（±）−２−（４−フ
ェノキシフェノキシ）プロパン−１−オールの有機カル
ボン酸（炭素数１〜１８個の飽和または不飽和の有機カ
ルボン酸）エステルに作用させることにより極めて光学
純度の高い光学活性２−（４−フェノキシフェノキシ）
−プロパン−１−オールとその対掌体のエステルが得ら
れることを見い出し、これに種々の検討を加え本発明を
完成するに至った。

次に本発明の詳細な説明する。

本発明方法において原料として使用される（ｉ：）−２
−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−１−オール
の有機カルボン酸（炭素数１〜１８個の飽和の有機カル
ボン酸）エステルの製造は、エステル製造の漕法、例え
ば（±）−２−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン
−１−オールに有機カルボン酸の無水物を反応させる方
法、あるいは有機カルボン酸クロライドを有機塩基の存
在下で反応させることなどにより容易に製造することが
できる。

本発明で使用されるエステラーゼを生産する微生物とし
ては、（±）−２−（４−フェノキシフェノキシ）プロ
パン−１−オールの有機カルボン酸エステルを不斉加水
分解する能力を有するエステラーゼ（ここで、エステラ
ーゼとはリパーゼを含む広義のエステラーゼを意味する
。）を生産する微生物であり、具体例としては、シュー
ドモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　）　Ｘ、クロモバ
クテリウム（Ｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、ア
ルスロバクタ−（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ　）属、ア
ルカリゲネス（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ　）属、キャン
ディダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属、アクロモバクタ−（Ａｃ
ｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒ）属、ノカルディア（Ｎｏｃａ
ｒｄｉａ　）属、フラボバクテリウム（Ｆ　１ａｖｏｔ
＋ａｃｔｅｒｉｕｍ）属、トルロプシス（Ｔｏｌｕｌｏ
ｐｓｉｓ　）　ｆ４、ブレビバクテリウム（Ｂｒｅｖ−
ｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）　５％、バｆ　Ｊｌ／　ス（Ｂ
ａｃｉｌｌｕｓ）属、ニスケリシフ　（Ｅｓｃｈｅｒｉ
ｃｈｉａ　）　ｆ４　、ミクロコツカス（Ｍｉｃｒｏｃ
ｏｃｃｕｓ　）属、ハンセヌラ（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ）
属、ムコール（Ｍｕｃｏｒ　）属、コリネバクテリウム
（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、Ｚコバクテリ
ウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、サツカロマイ
−ｔｙス（Ｓａｃ−ｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　）属、サー
モマイセス（Ｔｈｅｒｍｏｍｙ−ｃｅｓ）　（フミコラ
（Ｈｕｍｉｃｏｌａ））属、リゾプス（Ｒｈ１ｚｏｐｕ
ｓ　）属、アスペルギラス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）
属、ストレプトマイセｘ　（Ｓ　ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅ
ｓ）属、ジオトリカム（Ｇｅｏｔｒｉｃｕｍ）属、トリ
コデルマ（Ｔ−ｒｉｃｏｄｅｒｍａ）属、アシネトバク
タ−（Ａｃ１ｎｅｔｏｂ−ａｃｔｅｒ）属、アエロモナ
：ｘ、　（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ）属、ベアラベリｙ　（
Ｂｅａｕｖｅｒｉａ）属、ロドトルラ（Ｒｈｏｄ−ｏｔ
ｏｒｕｌａ）属、エンテロバクタ−（Ｅｎｔｅｒｏｂａ
ｃｔｅｒ）属、ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｌｌｉｕｍ）
属、セラチア（Ｓｅｒｒａｔｉａ）属、ｘルビ＝　７　
（Ｅｒｗｉｎｉａ　）属、スタフィロコッカｘ　（Ｓ　
ｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　）属、ヒコマイセス（Ｐ
ｈｙｃｏｍｙｃｅｓ　）属、プロピオニバクテリウム（
Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、メタリジウ
ム（Ｍｅｔａｒｒｈｉｚｉｕｍ）属、パエシロマイセス
（Ｐａｅｃ−ｉｌｏｍｙｃｅｓ　）属、サッヵロミコブ
シｘ　（Ｓａｃｃａｒｏ−ｍｙｃｏｐｓｉｓ）属、ベニ
ルティシリウム（Ｖｅｒｔｉｃｉｌ−１ｉｕｍ　）属、
キサントモナス（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ　）属に属す
る微生物が挙げられる。

これらの各属に属する代表的な菌株名を下記に例示する
が、本発明の微生物はこれらの例示に限定されるもので
はない。

（１）　　ノカルディア・エリスロポリス（Ｎｏｃａｒ
ｄｉａｅｒｙｔｈｒｏｐｏｒｉｓ）　　　　　　　　Ｉ
　Ｆ　０−１２６８２及びＩＦＯ−１２８２０ （２）　　アルスロバクタ−・シンプレックス（Ａｒｔ
−ｈｒｏｂａｃｔｅｒ　ｓｉｍｐｌｅｘ）　　　　　Ｉ
　ＦＯ−１２０６９（８）　　フラボバクテリウム・ア
ルボレッセンス（Ｆｌａｖ−ｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ａ
ｒｂｏｒｅｓｃｅｎｓ）　　Ｉ　Ｆ　Ｏ−８７５０（４
）トルロプシス・キャンディダ（ＴＯｒｕｌｏｐｓｉｓ
ｃａｎｄｉｄａ）　　　　　　　　　　Ｉ　ＦＯ−０８
８０（ω　ブレビバクテリウム・アンモニアゲネス（Ｂ
ｒｅ−ｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ａｍｍｏｎｉａｇｅｎ
ｅｓ）　Ｉ　Ｆ　Ｏ−１２０７２（６）　　バチルス・
リケニホルミＸ　（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｌｉ−ｃｈｅｎ
ｉｆｏｒｍｉｓ）　　　　　　　　Ｉ　Ｆ　Ｏ−１２１
９７（７）　　バチルＸ　’　Ｘ　７　ｚリカＸ　（Ｂ
ａｃｉｌｌｕｓ　５ｐｈａ−ｅｌｉｃｕｓ）　　　　　
　　　　　　Ｉ　ＦＯ−８５２８（８）　　ニスケリシ
ア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　）ＩＦ
Ｏ−８８０１ （９）　　ハンセヌラ・サチｓ　ＪＬ／　ヌス（Ｈａｎ
ｓｅｎｕｌａｓａｔｕｒｎｕｓ　）　　　　　　　　　
Ｉ　ＦＯ−０１１７００）　ミクロコツカス・パリアン
ス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓｖａｒｉａｎｓ）　　　　
　　　　　　Ｉ　ＦＯ−８７６５（１１）　　クロモバ
クテリウム・ビスコサム（Ｃｈｒｏｍｏｂａ−ｃｔｅｒ
ｉｕｍ　ｖｉｓｃｏｓｕｍ）　　　　　　ＡＴＣＣ−６
９１８（１２）　　シュードモナス・フルオレッセンス
（Ｐｓｅｕｄｏｍ−ｏｎａｓ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ
）　　　　　　ＩＦＯ−８０８１（１ｉ３）　　アルス
ロバクタ−・ウレアファシェンス（Ａｒｔ−ｈｒｏｂａ
ｃｔｅｒ　ｕｒｅａｆａｃｉｅｎｓ）　　　ＡＴＣＣ−
７５６２（１４）アルカリゲネＸ−フェーカリｘ　（Ａ
ｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｆａｅｃａｌｉｓ）　　　　　　
　　　　　Ｉ　ＦＯ−１２６６９（１５）キャンディダ
・ユテリス（Ｃａｎｄｉｄａ　ｕｔｉｌｉｓ）ＩＦＯ−
０９８８ （１６）アクロモバクタ−・スペシーズ（Ａｃｈｒｏｍ
ｏｂａｃ−ｔｅｒ、　ｓ属、　）　　　　　　　　　　
　ＡＴＣＣ−２１９１０（１７）ムコール・ブシラｘ　
（Ｍｕｃｏｒ　ｐｕｓｉｌｌｕｓ）ＩＦＯ−９８５６ （１８）コリネバクテリウム・グルタミカム（Ｃｏｒｙ
−ｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ）　
ＡＴＣＣ−１８２８７（１９）Ｆ、−１バクテリウム・
フライ（Ｍｙｃｏｂａｃ　ｔｅｒｉｕｍｐｈｌｅｉ）　
　　　　　　　　　　　ＩＦＯ−３１５３（２ｏ）サツ
カロマイセス・セルビシェ（Ｓ　ａｃｃｈａｒｏ−ｍｙ
ｃｅｓ　ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）　　　　　ＡＴＣＣ−
７７５３（２１）　　サツカロマイセス・カルスペルゲ
ンシス（Ｓａｃｃ−ｈａｒｏｍｙｃｅｓ　ｃａｒｌｓｂ
ｅｒｇｅｎｓｉｓ）　ＡＴＣＣ−９０８０（２２）　　
？−％？イセス・ラヌギノサス（Ｔｈｅｒｍｏｍｙｃｅ
ｓｌａｎｕｇｉｎｏｓｕｓ）　　　　　　　　　Ｉ　Ｆ
Ｏ−９７８８（フミコラ　ラヌギノサ、　Ｈｕｍｉｃｏ
ｌａ　ｌａｎｕｇｉ−ｎｏｓａ） （２８）リゾプＸ−ジャポニカｘ　（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ
　ｊａｐｏｎ−ｉｃｕｓ）　　　　　　　　　　　　Ｉ
ＦＯ−４７５８（２４）７スペルギラスーオリーゼ（Ａ
ｓｐｅｒｇｉ　１ｌｕｓ　−ｏｒｙｚａｅ）　　　　　
　　　　　ＡＴＣＣ−１４６０５（２５）アスベルギラ
ス・フラバス（Ａｓｐｅｒｇｉ　１ｌｕｓｆｌａｖｕｓ
）　　　　　　　　　　ＡＴＣＣ−１１４９２（２６）
　　ストレプトマイセス・グリセウス・サブスビーシー
ズパグリセウス（Ｓ　ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｇｒｉ
ｃｅｕｓ　５ｕ−ｂｓ属、　ｇｒｉｓｅｕｓ）　　　　
　　　　　Ｉ　Ｆ　Ｏ−２３４８０（２７）　　ストレ
プトマイセス・カスガエンシス（Ｓ　ｔｒｅｐ−ｔｏｍ
ｙｃｅｓ　ｋａａｕｇａｅｎｓｉｓ）　　　　Ｉ　Ｆ　
Ｏ−１８８５１（２８）ジオトリカム・キャンディダム
（Ｇｅｏｔｒｉｃｕｍｃａｎｄｉｄｕｍ）　　　　　　
　　　　　Ｉ　ＦＯ−４５９７（２９）　　）リコデル
マ・ビリデ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ　ｖｉｒｉ−ｄｅ
）　　　　　　　　　　　　　　ＩＦＯ−５７２０（３
０）アシネトバクタ−・カルコアセチカス（Ａｃｉｎｅ
ｔ−ｏｂａｃｔｅｒ　ｃａｌｃｏａｃｅｔｉｃｕｓ）　
　Ｉ　ＦＯ−１２５５２およびＩＦＯ−１８００６ （８１）　　アエロモナス・ハイドロフィラ・サブスピ
ーシーズ−ハイドロフィラ（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ　ｈｙ
ｄｒｏｐｈｉ　１ａｓｕｂｓ属、　１ｘｙｄｒｏｐｈｉ
ｌａ）　　　　　　Ｉ　ＦＯ−１２９７８（３２）ベア
ウベリ７−バシアナ（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ　ｂａｓｓ−
ｉａｎａ）　　　　　　　　　　　　　ＡＴＣＣ−２６
０８７（８３）　　ロドトルラ・史ヌタ・パル・テキセ
ンシス（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ　ｍ１ｎｕｔａ　ｖａ
ｒ、　ｔｅｘｅｎｓｉｓ）ＩＦＯ−０８７９ （８４）　　エンテロバクタ−・アエロモナス（Ｅｎｔ
ｅｒ−ｏｂａｃｔｅｒ　ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）　　　　
　ｉ　ＦＯ−１８５８４（８５）ペニシリウム・カネセ
ン：ｘ、　（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｃａｎｅｓｃｅｎ
ｓ）　　　　　　　　　　　　　ＩＦＯ−７１０８（８
６）　　セラチｙ　−ｖ　ルセセンス（Ｓｅｒｒａｔｉ
ａ　ｍａｒｃ−ｅｓｃｅｎｓ）　　　　　　　　　　　
Ｉ　ＦＯ−１２６４８（８７）　　エアビニア・キャロ
トボラ　サブスピーシーズキャロトボラ（Ｅｒｗｉｎｉ
ａ　ｃａｒｏｔｏｖｏｒａ　５ｕｂｓｐ。

ｃａｒｏｔｏｖｏｒａ）　　　　　　　　　　Ｉ　ＦＯ
−１４０８２（８８）スタフィロコッカス・アウレウス
（Ｓｔａｐｈｙｌｏ−ｃｏｃｃｕｓ　　ａｕｒｅｕｓ）
　　　　　　　　Ｉ　ＦＯ−８０６０（８９）フィコマ
イセス・ニテ：／　Ｘ　（Ｐｈｙｃｏｍｙｃｅｓｎｉｔ
ｅｎｓ）　　　　　　　　　　ＩＦＯ−９４２２（４０
）プロピオニバクテリウム・アクネス（Ｐｒｏ−ｐｉｏ
ｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ａｃｎｅｓ）　　　ＡＴＣＣ
−１１８２７（４１）　　メタリジウム−７二’／ブリ
エ（Ｍｅｔａｒｒｈｉｚｉｕｍａｎｉｓｏｐｌｉａｅ）
　　　　　　　　　　ＡＴＣＣ−１６０８５（４２）キ
サントモナス−オリーゼ（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓｏｒ
ｙｚａｅ）　　　　　　　　　　Ｉ　ＦＯ−８８１２（
４８）サツカロミコプシス・リポリティカ（Ｓａｃ−ｃ
ｈａｒｏｍｙｃｏｐｓｉｓ　１ｉｐｏｌｙｔｉｃａ）　
ＡＴＣＣ−８４０８８（４４）ヘルティシリウム・フン
ギコーラ（Ｖｅｒｔｉ−ｃｉｌｌｉｕｍ　ｆｕｎｇｉｃ
ｏｌａ）　　　　　ｉ　ＦＯ−８０６１６（４５）パエ
シロマイセス・リラシヌス（Ｐａｅｃｉｌｏｍ−ｙｃｅ
ｓ　１ｉｌａｃｉｎｕｓ）　　　　　　ＡＴＣＣ−１８
８０７これらの菌株はいずれもＡｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙ
ｐｅ　Ｃｕ１−ｕｒｅ　Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣ
Ｃ）あるいは大阪布の財団法人醸酵研究所（ＩＦＯ）に
保存され、これらの保存機関より入手することができる
。

また、これらの微生物起源のエステラーゼのなかには市
販されているものがあり、容易に入手することができる
。市販エステラーゼの具体例としてはシュードモナス属
のリパーゼ（天野製薬製＞　、ムコール属のリパーゼ（
リパーゼＭ−ＡＰ（天野製薬製））、キャンタイプ・シ
リンドラッセのリパーゼ（リパーゼＭＹ（名糖産業製）
）、アルカリ土類金属のリパーゼ（リパーゼＰＬ（名糖
産業製））、アクロモバクタ−属のリパーゼ（リパーゼ
ＡＬ（名糖産業製））、アルスロバクタ−属のリパーゼ
（リパーゼ合同ＢＳＬ（合同酒精製））、同じくアルス
ロバクタ−属のリパーゼ（新日本化学工業製）、クロモ
バクテリウム属のリパーゼ（東洋醸造製）リゾプス属の
リパーゼ（リパーゼサイケン１００（大阪細菌研究新製
））などがあげられる。

上記のような微生物起源由来のエステラーゼにおいて、
工業規模での実施時には、入手のし易さ、光学純度の点
でシュードモナス（Ｐｓｅｕ−ｄｏｍｏｎａｓ　）属、
ムコール（Ｍｕｃｏｒ）属、クロモバクテリウム（Ｃｈ
ｒｏｍｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、エスケリシｙ　（Ｅ
ｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　）属、アルスロバクタ−（Ａｒ
ｔ−ｈｒｏｂａｃｔｅｒ）属、アルカリ土類Ｘ　（Ａｌ
ｃａｌｉｇｅｎｅｓ）属、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ
）属、ノカルディア（Ｎｏｃａｒｄｉａ）属、キャンタ
イプ（Ｃａｎｄｉｄａ）属、アクロモバクタ−（Ａｃｈ
ｒｏｍｏｂａｃｔｅｒ）属、フラボバクテリウム（Ｆｌ
ａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ブレビバクテリウム（Ｂ
ｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、疋クロコツカス（Ｍ
ｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ）　ＦＪ、トルロブシｘ　（Ｔｏ
ｌｕｌｏｐｓ−ｉｓ）属、ハンセヌラ（Ｈａｎｓｅｎｕ
ｌａ　）属、アシネトバクター（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃ
ｔｅｒ）　Ｊｊｉ　、アエロモナス（Ａｅｒｏｍｏｎａ
ｓ）属、ロドトルラ（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ）属、ト
リコデルマ　（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）属、ジオトリ
カム（Ｇｅｏｔｒｉｃｕｍ）属、ヘアウヘリ７　（Ｂｅ
ａｕｖｅｒｉａ）属、ストレプトマイ−１！　Ｘ　（Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属、ミコバクテリウム（Ｍｙ
ｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、サツカロマイセス（Ｓ　
ａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　）属、アスペルギラス（Ａ
ｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）　属に属する微生物の生産する
エステラーゼがより好ましい。更により高い光学純度を
与える点で、クロモバクテリウム（Ｃｈｒ−ｏｍｏｂａ
ｃｔｅｒｉｕｍ）属、７’　）Ｌｌ　ス０バクター（Ａ
ｒｔｈ−ｒｏｂａｃｔｅｒ）属に属する微生物の生産す
るエステラーゼがより好ましい。

本発明方法において、使用されるエステラーゼを生産す
る微生物の培養は、通常、常法に従って液体培養を行な
うことにより培養液を得る。

たとえば滅菌した液体培地〔かび類、酵母頻用には麦芽
エキス・酵母エキス培地（水１１にバフトン５．Ｏｆ、
可溶性デンプン１ｏ、ｏｙ、麦芽エキス８．０ｇおよび
酵母エキス８．０ｇを溶解し、ｐ　Ｈ６，２とする）、
放線菌用には滅菌した液体培地（水１１１に可溶性デン
プン１０．０）、ＮＺアミン（タイプＡ）２．Ｑノ、肉
エキス１．ｏｆ！および酵母エキス１．Ｏｆを溶解し、
ｐＨ７，２とする）、細菌用には滅菌した液体培地（水
１１に可溶性デンプン１０．Ｏｆ、ペプトン５．Ｏｙお
よび酵母エキス５、Ｏｆを溶解しｐＨ６，８とする）〕
に微生物を接穏し、通常２０〜４０°Ｃで１〜８日間往
復または回転振盪培養を行なう。また必要に応じて固体
培養や嫌気培養を行なってもよい。さらに、このような
培養に際し、誘導物質としてオリーブ油、大豆油などの
天然油脂、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエー
トなどの非イオン系界面活性剤を培地に添加することに
より酵素の生産量を向上させることもできる。

本発明方法における（±）−２−（４−フェノキシフェ
ノキシ）プロパン−１−オールの有機カルボン酸（炭素
数１〜１８個の飽和または不飽和のカルボン酸）エステ
ルの不斉加水分解は、上記微生物を培養した培養液、培
養液から分離した菌体、エステラーゼを含有する培養Ｐ
液、あるいは各種酵素分離法によって菌体または培養Ｆ
液から分離した粗製エステラーゼ、精製エステラーゼお
よびエステラーゼ含有抽出液またハ濃縮液ト、（±）−
２−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−１−オー
ルの有機カルポジ酸エステルとを混合し、撹拌または振
盪することにより行なわれる。また、固定化菌体あるい
は固定化エステラーゼを使用すること延できる。

不斉加水分解を行なう条件としては、反応温度は１０〜
７０°Ｃが適当であり、好熱菌の培養液または好熱菌の
培養により得られた耐熱性エステラーゼでは６０〜６５
°Ｃ１中温菌の培養液または特に耐熱性を有しないエス
テラーゼでは２０〜５０℃が好ましい。

反応時間は通常８〜７０時間であるが、反応温度を高め
たり酵素量を増加させるなどにより反応時間の短縮も可
能である。

反応中のｐＨは好アルカリ性菌の培養液やアルカリ性エ
ステラーゼではｐＨ８〜１１．好アルカリ性でない微生
物の培養液や耐アルカリ性を有しないエステラーゼでは
ｐＨ５〜８が好ましい。

また、加水分解によって゛生成する有機カルボン酸を中
和し、反応中のｐＨを一定に保つために緩衝液の使用や
、反応進行に伴ないアルカリ水溶液を滴下することが好
ましい。

緩衝液としては、リン酸ナトリウム、リン酸カリウムな
どの無機酵塩の緩Ｗ液、酢酸すトリウム、クエン酸ナト
リウムなどの有機酵塩の緩衝液をあげることができる。

基質である（±）−２−（４−フェノキシフェノキシ）
プロパン−１−オールの有機カルボン酸エステルの使用
濃度は反応液に対し０．５〜８０重量％であり、工業的
実施時には１０〜６０重量％が好適である。

また、原料となる（−１ｚ）　−２−（４−フェノキシ
フェノキシ）プロパン−１−オールの有機カルボン酸エ
ステルにおいて、有機カルボン酸としては、取扱いの容
易さや反応性の点から炭素数２〜１２のカルボン酸が好
ましく、さらに、経済性や入手の容易さを考慮すると酢
酸が好ましい。

次に、このようにして不斉加水分解反応を行った後、遊
離した光学活性２−（４−フェノキシフェノキシ）プロ
パン−１−オールと未反応の対掌体エステルを分離回収
する。この分離回収に際しては、溶媒抽出、分別蒸留、
カラムクロマトグラフィー、再結晶などの操作を適宜採
用することができる。たとえば反応液をエーテル、酢酸
エチル、ベンゼンなどの有機溶媒で抽出し、この抽出物
を分別蒸留し光学活性２−（４−フェノキシフェノキシ
）プロパン−１−オールとその対掌体のエステルを分離
取得するか、または抽出物をシリカゲルのカラムクロマ
トグラファーにかけ、たとえばヘキサン−酢酸エチル（
５：１）溶液で溶出することにより、先ず光学活性２−
（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−１−オールの
有機カルボン酸エステルが分１！１１され、ついでヘキ
サン−酢酸エチル（２：１）溶液で溶出を行なうことに
よりその対掌体の遊離の１−（４−フェノキシフェノキ
シ）プロパン−２−オールが分離される。

また、以上のようにして分離された光学活性２−（４−
フェノキシフェノキシ）プロパンー１−オールのエステ
ルは、さらに加水分解することにより容易に光学活性２
−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−１−オール
に導くことができる。加水分解の方法としては、たとえ
ば光学活性２−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン
−１−オールの有機カルボン酸エステルを苛性ソーダま
たは苛性カリの水、メタノールまたはエタノールの溶液
に加え、室！（２０℃〜８０°Ｃ）で撹拌することによ
り、容易に光学活性２−（４−フェノキシフェノキシ）
プロパン−１−オールを取ることができる。

又、光学活Ｆｌ−（４−フェノキシフェノキシ）プロパ
ン−１−オールのエステルから上記の方法によって得ら
れる光学活１’ｔ２−（４−フェノキシフェノキシ）プ
ロパン−１−オールの光学純度が不充分な場合には、不
斉加水分解の反応時間を長くシ、高い氷解率（少なくと
も氷解率６０％以上）にすることにより高い光学純度の
２−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−１−オー
ルを得ることができる。

発明の効果 本発明方法によれば光学活性２−（４−フェノキシフェ
ノキシ）プロパン−１−オールが高い収率および光学純
度で取得することができ工業的にもきわめて有利である
。

次に本発明を実施例によってさらに詳細に説明するが本
発明はこれによって限定されるものではない。

実施例１ （±）−２−（４−フェノキシフェノキシ）−プロピル
アセテート５゜ＯＯｆ　（１７，５ミリモル）クロモバ
クテリウム属のリパーゼ（東洋醸造製）１５０１１＆を
０．２　Ｍ濃度のリン酸塩緩衝液（ｐＨ（ｉ、８　）　
１５　ｍｌに加え、４０°Ｃで撹拌しつつ反応させた。

この時反応の進行に伴ないＩＮ苛性ソーダ液を加え、ｐ
Ｈを６，８に保持した。５時間反応を行った後、反応物
をトルエンで抽出した。抽出液をガスクロマトグラフィ
ー（カラＡ　：　５ｉｌｉｃｏｎ　ＤＣ−ＱＦ−１２゜
５ｍ、ガラムカラム。カラム温度＝２８０°Ｃ）で分析
した結果、２−（４−フェノキシフェノキシ）−１−プ
ロピルアセテート：７０．６％、２−（４−フェノキシ
フェノキシ）プロパン−１−オール：２９．４％であす
、他の成分は全く認められなかった。

次いで該抽出液を０縮した後、シリカゲルを充填したカ
ラムクロマトグラフィーに付、し、２−（４−フェノキ
シフェノキシ”）−１−プロピルアセテート８．５８ｇ
及び２−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−１−
オール１．２５１比旋光度：〔α）、＝ｆ３２．７０（
クロロホルム、ｃ＝ｉ、ｏｏ））を得た。

ここで得られた２−（４−フェノキシフェノキシ）プロ
パン−１−オールを光学活性カラムを用いた液体クロマ
トグラフィー（カラＡ　：　Ｓｕｍｉｐａｘ　ＯＡ　−
２３００、住化分析センター鏝製）で光学異性体分析を
行った結果、Ｓ−（＋）一体／Ｒ−（−）一体＝９５．
０１５．００であった。

実施例２ 実施例１において（＋）　−２−（４−フェノキシフェ
ノキシ）−１−プロピルアセテートおよびリパーゼの使
用量を各々２倍にし反応時間を４時間とした以外は実施
例１と同様にして反応させた。反応後、反応液を実施例
１と同様にして処理してガスクロマトグラフィーにて１
分析した結果、２−（４−フェノキシフェノキシ）−１
−プロビルアセテート二７５．０％、２−（４−フェノ
キシフェノキシ）プロパン−１−オール：２５．０％で
あった。

次いで、該反応液を実施例１と同様にして処理し、シリ
カゲルクロマトグラフィーに付し、２−（４−フェノキ
シフェノキシ）プロパン−１−オール２．１８１　（Ｓ
　−（＋）一体／Ｒ−Ｃ−’）一体＝　９７．５　／　
２．５　　比施光度＝Ｃａ〕Ａ’　＝ａ　４．４０　（
りｏｏ＊ルム、　（、＝　１．Ｏｏ　）２’／ｊｉ’　
；！。

実施例８ アルスロバクタ−・ウレアファシェンス（Ａｒｔｈｒｏ
ｂａｃｔｅｒ　ｕｒｅａｆａｃｉｅｎｓ）（ＡＴＣＣ−
７５６２）から高い酵素生産性を示すコロニーを選択し
ながら酵素高生産株を得た。かくして得られたアルスロ
バクタ−・ウレアフアシェンスの酵素高生産株を５１容
量のミニジャファメンターを用い、通常の細菌培養用の
培地に大豆粕抽出液とオリーブ油２％を加え、８０°Ｃ
で８１時間通気培養を行った（培養液３１）。

遠心分離により菌体を除去した後、培養液をアセトンに
よる溶媒沈殿操作（アセト２５５鳴〜アセトン８０％の
間の分画）を行い、沈殿した酵素蛋白質を遠心分離によ
って分離し、更に凍結乾燥を行いｔ　Ｏ，６ｙの乾燥酵
素を得た。

かくして得られた乾燥酵素１゜Ｏｆと（±）−２−（４
−フェノキシフェノキシ）−１−プロピルカブリレート
４０Ｆを０゜ＩＭ濃度のリン酸塩緩衝液（ｐＨ６，８）
　１８０ｇｇ／に加え、４８°Ｃで撹拌しつつ反応させ
た。この時反応の進行に伴ない２Ｎ苛性ソーダ液を加え
反応中ｐＨを６．８に保持した。

８時間反応を行った後、反応物をトルエンで抽出した。

抽出液を実施例１と同じ条件でガスクロマトグラフィー
で分析した結果、２−（４−フェノキシフェノキシ）プ
ロパン−１−オール：８５．０％、２−（４−フェノキ
シフェノキシ）−１−プロビルヵプリレート二６５゜０
％であった。

次いで該抽出物を実施例１と同様にしてクロマトグラフ
ィーにより分離し、２−（４−フェノキシフェノキシ）
プロパン−１−オール９．２１９　（Ｓ　−（＋）一体
／　Ｒ−Ｃ−’）一体＝９０．５／９．５）を得た。

実施例４ 実施例８において、（±）−２−（４−フェノキシフェ
ノキシ）−１−プロピルカブリレートに代えて（±）−
２−（４−フェノキシフェノキシ）−１−プロピルプロ
ピオネートを用い、またその反応スケールを１７５にし
た以外は実施例３と同様の条件で反応させた。反応液を
実施例１と同様にして処理した後ガスクロマトグラフィ
ーで分析した結果、２−（４−フェノキシフェノキシ）
プロパン−１−オール：４０．２％、２−（４−フェノ
キシフェノキシ）−１−プロピルプロピオネート＝６９
．８％であった。

反応液を実施例１と同様にしてクロマトグラフィーに付
し、２−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−１−
オール２．６１ｆＩ（５−（＋）一体／Ｒ−（−）一体
＝８８．５／１１．５）を得た。

実施例５〜１４ （±）−２−（４−フェノキシフェノキシ）−１−フ０
　ヒル７セテー　）　０．５　ｆ　（１，７５ｔリモル
）および表１に示す各酵素（使用量を表１に示す）を０
．２Ｍ濃度のリン酸塩緩衝液（ｐＩ（ｅ、ｓ　）　２０
　ｍｌニ加え、４０″Ｃで撹拌しつツ加水分解反応を行
なった（反応時間を表１に示す）。反応液を実施例１と
同様に処理し、加水分解率および該加水分解反応により
得られた光学活性２−（４−フェノキシフェノキシ）プ
ロパン−１−オールのＳ　−（＋）一体とＲ−（−）一
体との比を測定した。

結果を表１に示す。

表　　ｌ 実施例１２〜２９ ６００耐三角フラスコＩζ液体培地〔細菌類用には、水
１１に可溶性デンプン１０．Ｏｆ。

ペプトン５６０ｆおよびタラエキス５．Ｏｌを溶解し、
ｐＨ６，８としたもの。酵母頻用には、水１１に可溶性
デンプン１０．Ｏｆ、ペプトン５、Ｏｆ、９芽エキス８
゜Ｏｆおよび酵母エキス８、Ｏｆを溶解し、　ｐＨ６，
２としたもの。放線菌類用には、水１１に可溶性デンプ
ン１０．Ｏｆ。

ＮＺアミン−タイプＡ”　２゜Ｏｆ、肉エキス１、Ｏｆ
および酵母エキス１゜Ｏｇを溶解しｐＨ７，２としたも
の）１００ｇｌを入れて滅菌した後、表２に記載した各
微生物を斜面培養からｌ白金耳接種し、ｓｏ’ｃで４６
６０時間回転振盪培養した。次いでこれに（±’）−２
−（４−フェノキシフェノキシ）−１−プロピルアセテ
ート２．０ｆ（６，９９ミリモル）を添加し、８０℃で
撹拌しつつ表２１ζ示す時間加水分解反応を行なった。

以後、実施例１と同様にして、抽出、分離、分析を行な
い、加水分解率および該加水分解反応で得られた光学活
性２−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−１−オ
ールのＳ−（ト）一体とＲ−（へ）一体との比を測定し
た。結果を表２に示す。

！１！２ 実施例８０ （±）−２−（４−フェノキシフェノキシ）−１−プロ
ピルアセテート８．００ｆ（２８，０ミリモル）および
クロモバクテリウム属のリパーゼ（東洋醸造）０．２５
Ｆを０．２Ｍ濃度のリン酸塩緩衝液（ｐＨ６，８）　２
０譚ｔに加え、４０℃で撹拌しつつ反応させた。この時
反応の進行に伴ないＩＮ苛性ソーダ液を加え、ｐＨを６
．８に保持した。４０時間反応を行なった後、反応物を
トルエンで抽出した。抽出液を実施例１と同様にガスク
ロマトグラフィーで分析し？：ＭＪＬ　２−（４−フェ
ノキシフェノキシ）−１−プロピルアセテート：４０゜
９％、２−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−１
−オール：　５９．１％であり、他の成分は全く認めら
れなかった。

ついで該抽出液を濃縮した後、シリカゲルを充填したカ
ラムクロマトグラフィーに付し、２−（４−フェノキシ
フェノキシ）−１−プロピルアセテート８．２７ｆを得
た。

このうち、１．０ｙを苛性カリのメタノール溶液（濃度
１０％）５．８６Ｎに溶解し、２０°Ｃで１時間撹拌し
た。反応液を水１００　ｍｌで希釈した後トルエンで抽
出し、得られたトルエン層を濃縮することにより、２−
（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−１−オール０
．８５Ｆを得た。

該２（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−１−オー
ルを前述と同様にして光学異性体分析を行なった結果、 Ｓ−（ト）一体／Ｒ−（→一体＝０．８／９９．２（比
施光度〔０元”’　　８５．７°　（クロロホルム、　
Ｃ＝１、ＱＯ）であった。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、
   クロモバクテリウム（Ｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ
   ）属、アルスロバクター（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ）
   属、アルカリゲネス（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）属、キ
   ャンディダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属、アクロモバクター（
   Ａｃｈｒｏ−ｍｏｂａｃｔｅｒ）属、ノカルディア（Ｎ
   ｏｃａｒｄｉａ）属、フラボバクテリウム（Ｆｌａｖｏ
   ｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、トルロプシス（Ｔｏｌｕｌｏ
   ｐｓｉｓ）属、ブレビバクテリウム（Ｂｒｅｖｉｂａｃ
   ｔｅｒｉｕｍ）属、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、
   ニスケリシア（Ｅｓｃｈｅｒｉｃ−ｈｉａ）属、ミクロ
   コッカス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ）属、ハンセヌラ（
   Ｈａｎｓｅｎｕｌａ）属、ムコール（Ｍｕｃ−ｏｒ）属
   、コリネバクテリウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔ−ｅｒｉ
   ｕｍ）属、ミコバクテリウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅ−ｒ
   ｉｕｍ）属、サッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙ
   −ｃｅｓ）属、サーモマイセス（Ｔｈｅｒｍｏｍｙｃｅ
   ｓ）（フミコラ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ））属、リゾプス（
   Ｒｈ−ｉｚｏｐｕｓ）属、アスペルギラス（Ａｓｐｅｒ
   ｇｉｌｌｕｓ）属、ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔ
   ｏｍｙｃｅｓ）属、ジオトリカム（Ｇｅｏｔｒｉｃｕｍ
   ）属、トリコデルマ（Ｔｒｉｃｏｄｅｒｍａ）属、アシ
   ネトバクター（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）属、アエ
   ロモナス（Ａｅｒｏｍ−ｏｎａｓ）属、ベアウベリア（
   Ｂｅａｕｖｅｒｉａ）属、ロドトルラ（Ｒｈｏｄｏｔｏ
   ｒｕｌａ）属、エンテロバクター（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃ
   ｔｅｒ）属、ペニシリウム（Ｐｅｎ−ｉｃｌｌｉｕｍ）
   属、セラチア（Ｓｅｒｒａｔｉａ）属、エルビニア（Ｅ
   ｒｗｉｎｉａ）属、スタフィロコッカス（Ｓｔａｐｈｙ
   ｌｏｃｏｃｃｕｓ）属、ヒコマイセス（Ｐｈ−ｙｃｏｍ
   ｙｃｅｓ）属、プロピオニバクテリウム（Ｐｒｏｐｉｏ
   ｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、メタリジウム（Ｍｅｔａ
   ｒｒｈｉｚｉｕｍ）属、パエシロマイセス（Ｐａｅｃｉ
   ｌｏｍｙｃｅｓ）属、サッカロミコプシス（Ｓａｃｃａ
   ｒｏｍｙｃｏｐｓｉｓ）属、ベエルティシリウム（Ｖｅ
   ｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ）属、キサントモナス（Ｘａｎ−
   ｔｈｏｍｏｎａｓ）属に属する微生物が生産するエステ
   ラーゼを（±）−２−（４−フェノキシフェノキシ）プ
   ロパン−１−オールの有機カルボン酸（炭素数１〜１８
   個の飽和または不飽和のカルボン酸）エステルに作用さ
   せて、これを不斉加水分解して、光学活性な２− （４−フェノキシフェノキシ）プロパン−１ーオールと
   その対掌体のエステルに分割することを特徴とする（±
   ）−２−（４−フェノキシフェノキシ）プロパン−１−
   オールの生化学的光学分割方法。 （２）シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、
   ムコール（Ｍｕｃｏｒ）属、クロモバクテリウム（Ｃｈ
   ｒ−ｏｍｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、エスケリシア（Ｅ
   ｓｃｈｅｒ−ｉｃｈｉａ）属、アルスロバクター（Ａｒ
   ｔｈｒｏｂａｃ−ｔｅｒ）属、アルカリゲネス（Ａｌｃ
   ａｌｉｇｅｎｅｓ）属、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）
   属、ノカルディア（Ｎｏｃａｒｄｉａ）属、キャンディ
   ダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属、アクロモバクター（Ａｃｈｒ
   ｏｍｏｂａｃｔｅｒ）属、フラボバクテリウム（Ｆｌａ
   ｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ブレビバクテリウム（Ｂｒ
   ｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、ミクロコッカス（Ｍｉ
   ｃｒｏｃｏｃｃｕｓ）属、トルロプシス（Ｔｏｌｕｌｏ
   ｐｓｉｓ）属、ハンセヌラ（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ）属、
   アシネトバクター（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）属、
   アエロモナス（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ）属、ロドトルラ（
   Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ）属、トリコデルマ（Ｔｒｉｃ
   ｈｏｄｅ−ｒｍａ）属、ジオトリカム（Ｇｅｏｔｒｉｃ
   ｕｍ）属、ベアウベリア（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ）属、ス
   トレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属、ミ
   コバクテリウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｒｉｕｍ）属、サッ
   カロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属、アス
   ペルギラス（Ａｓ−ｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属に属する微
   生物より得られるエステラーゼを用いる特許請求の範囲
   第一項記載の方法。 （８）クロモバクテリウム（Ｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒ
   ｉｕｍ）属、アルスロバクター（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔ
   ｅｒ）属に属する微生物より得られるエステラーゼを用
   いる特許請求の範囲第一項記載の方法。