JPS61286374A - 抗微生物および抗腫瘍フエナジンカルボキサルデヒドおよび誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔発明の背景〕 本発明は、抗微生物および抗新生物活性を有する新規な
フェナジンカルボキサルデヒドおよび誘導体、それら新
規化合物の製造方法、本発明化合物の出発物質の製造に
有用なストレプトマイセス・ガラノサ（１３ｔｒｅｐｔ
ｏｍｙｃｅｓ　ｇａｌａｎＯｓａ）ＮＲＲＬ　１５７３
８の精製株、および抗微生物剤または抗新生物剤として
の本発明化合物の使用方法に関する。

本発明はまた、本発明の７工ナジンカルボキサルデヒド
誘導体の製造における中間体として有用な新規化合物に
も関する。

フェナジン−１−カルボキサミド（オキシクロラフイン
〕および、フェナジン−１−カルボン酸のメトキシ化誘
導体（例えばグリセオルチー１フー ン〕を含むフェナジン化合物は天然物として知られてい
る（Ｊ、Ｍ、■ｎｇｒａｍほか、［Ａａｖ、　Ａｐｐｌ
；Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、　Ｊ　１３　：　２６７　（１
９７０）参照〕。

フェナジン−１−カルボン酸は抗腫瘍剤として評価され
ている（Ｖ、Ｃｈｅｒｎｅｔｓｋｉｉほか、ｒｏｎｋｏ
ｌｏｇｙｉａＪ　（Ｋｉｅｖ）、　５　：　１１０　（
１９７４）およびＯ，Ａ、５ｉｃ１ｏｒｉｋほか、［Ｉ
Ｆｉｚｉ、ｏｌ、Ａｃｔ、ＶｅｅｈｃｈＪ　／）：９２
（１９７４）参照）。

置換フェナジン−１−カルボキサミド類も抗腫瘍活性が
評価されており、そしてザルコーマ１８０に対ｔ７活性
があることが見出されている（Ｋ、Ｋａｔａｇｉｒｉほ
か、ｌ”’Ｋｅｎｙｕ　ＮｅｍｐｏＪ　ｉ　７　：　１
２７（１９６７）参照〕。

テトラゾール側鎖を有するフェナジン−１−カルボキサ
ミド類は抗アレルギー剤として評価されている（米国特
許第４，３！１７，５７９号明細書参照）。

ジメチルアミンエチルを含む様々な側鎖を有する３、４
−ベンゾフェナジン−１−カルボキサミド類の抗微生物
活性が評価されている（　Ｈ。

Ｓｈｏ　ｊ　ｉほか、ｒＹａｋｕｇａｌｃｕ　Ｚａ、５
ｓｈｉ　Ｊ　ｉ　０３　：　２４５（１９８２）参照）
。

アルキルアミノ−およびジアルキルアミノプロピル側鎖
を有するフェナジン−１，４−ジヵルボキサミド類の抗
マラリア活性が評価されている（　Ｓ　、　Ｎ、　Ｓａ
ｗｈｎｅｙほか、ｒ、ｙ、ｐｈａｒｍ、ｓｃｌ、Ｊ　６
８　：５２４（１９７９）参照）。

天然のフェナジン誘導体であるロモ７ド：マイシン（ｌ
ｏｍｏｎｄｏｍｙｃ　ｉｎ　；文献にはロモフンジン（
ｌｏｍｏｆｕｎｇｉｎ）としても知られている〕は、微
生物のストレプトマイセスのロモンデンシス（Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｌｏｍｏ−ｎｄｅｎｓｉすＮＲＲＬ
　３２５２により発酵液（プロス）中に生産されること
が報告されており（米国特許第３，３５９．ｊ６５号明
細書参照）、また６−ポルミル−４，７，９−１−ジヒ
ドロキシ−１−フェナジンカルボン酸メチルエステルに
相当する構造が与えられている（Ｃ，Ｇ、ＴｉｐｔＯｎ
はが、［Ｊ、Ａｍｅｒ、Ｃｈｅｍ。

ｓｏｃ、−１９２（５，）：１４２５〜１４２６（１９
７［１）参照）。

〔発明の概要〕

その最も広い観点において、本発明は、構造式Ｉ ■ 〔式中Ｒ１は水素またはメチルであり；Ｒ２は酸素また
は−Ｎ−Ｙ−ＮＲ４Ｒ５（式中Ｙは場合によりヒドロキ
シルで置換される１〜６個の炭素原子を有する直鎖状ま
たは分枝状アルキレン基またはシクロヘキシルであり；
’Ｒ４およびＲ５は独立して、水素、場合によりヒドロ
キシルで置換される１〜４個の炭素原子を有するアルキ
ルである）であるか；あるいはＲ２は＝Ｎ（ＣＨ２）ｎ
−Ｗ　（式中ｎは０〜４に等しく、そしてＷはピロリジ
ニルまたはピはリジニル猿であり該猿は場合により１〜
４個の炭素原子を有するアルキルで置換されており該ア
ルキルは更にヒドロキシルにより置換されていてもよい
）であり；Ｒ３はヒドロキシ、１〜４個の炭素原子を有
するアルコキシ、または−Ｎ）Ｔ−Ｙ’−ＮＲ４’Ｒ５
’　（式中Ｙ′は場合によりヒドロキシルで置換される
１〜６個の炭素原子を有する直鎖状または分枝状アルキ
レン基またはシクロヘキシルであり；そしてＲ，Ｉおよ
びＲ５′は独立して水素、場合によりヒドロキシルによ
り置換される１〜４個の炭素原子を有するアルキルであ
る〕であるか；あるいはＲ３は−ＮＨ（ＣＨ２）ｎ／　
−Ｗ’（式中ｎ′は０〜４に等しく、そしてＷ′はビロ
リジニルまたはピペリジニル環であり該環は場合により
１〜４個の炭素原子を有するアルキルで置換されており
該アルキルは更にヒドロキシルにより置換されていても
よい）であり；ただし、（ａ）Ｒ２が子Ｎ−Ｙ−ＮＲ４
Ｒ５でありかつＲ３が一冊−ｙ　／　−Ｒ，Ｉ’Ｒ５／
である場合には、基ＹおよびＹ′は同じであるかまたは
相異なってもよく、Ｒ４およびＲ４／は同じであるかま
たは相異なってもよく、そしてＲ５および遣５′は同じ
であるかまたは相異なってもよいか、あるいはＲ２が＝
Ｎ　−（ＣＨ２）ｎ”　−”でありかっＲ５が−ＮＨ−
（ＣＨ２）ｎ／　−Ｗ’である場合には数値ｎおよびｎ
′は同じであるかまたは相異なってもよく、そして基Ｗ
およびＷ′は同じであるかまたは相異なってもよく、ま
た（ｂ）Ｒ１が水素でありかっＲ２が酸素である場合に
はＲ３はヒドロキシまたはアルコキシであってはならな
い〕 を有する化合物およびそれらの共学的に許容しうる塩を
提供する。

本発明のもう１つの観点においては、抗微生物的に有効
量の式Ｉの化合物を薬学的に許容しうる担体と組合わせ
て包含する、哺乳動物の微生物感染症の治療に有用な薬
学的組成物が提供される。

更にもう１つの観点において、本発明は、抗微生物的に
有効量の式Ｉの化合物を薬学的に許容しうる担体と組合
せて包含する薬学的組成物を微生物感染症の治療を要す
る哺乳動物に投与することよりなる哺乳動物の微生物感
染症の治療方法を提供する。

もう１つの観点において、本発明は、抗新生物的に有効
量の式Ｉの化合物を薬学的に許容しうる担体と組合わせ
て包含する薬学的組成物を、新生物増殖阻害治療を要す
る哺乳動物に投与することよりなる哺乳動物における新
生物増殖阻害方法を提供する。

更にもう１つの観点において、本発明は、好気性発酵条
件下に同化可能な炭素および窒素源を含有する発酵ブロ
スから６−ホルミル−４，７，９−トリヒドロキシ−８
−メチル−１−フェナジンカルボン酸メチルエステルを
単離しうる量で生産できる、ＮＲＲＬ１５７３Ｂと称さ
れるストレプトマイセス・ガラノサの純粋株を提供すＺ
ｏもう１つの観点において、本発明は、構造式〔式中１
（１は水素またはメチルであり；■３２は酸素または＝
Ｎ　−Ｙ　−ＮＲ４Ｒ５（式中Ｙは場合によりヒドロキ
シルで置換される１〜６個の炭素原子を有する直鎖状ま
たは分枝状アルキレン基またはシクロヘキシルでありｔ
　Ｒ４およびＢ５は独立して水素、場合によりヒドロキ
シで置換される１〜４個の炭素原子を有するアルキルで
ある）であるか；あるいはＲ２は−Ｎ（ＣＨ２，）Ｈ−
Ｗ　（式中ｎは０〜４に等しく、そしてＷはピロリジニ
ルまたはピはリジニル環であり該環は場合により１〜４
個の炭素原子を有するアルキルで置換され該アルキルは
更にヒドロキシルにより置換されていてもよい）であり
；Ｒ３はヒドロキシ、１〜４個の炭素原子を有するアル
コキシ、または−ＮＨ−Ｙ′−ＮＲ４１１（５’（式中
Ｙ′は場合によりヒドロキシルで置換される１〜６個の
炭素原子を有する直鎖状または分枝状アルキレン基また
はシクロヘキシルであり；そしてＲ４′およびＲｂ２は
独立して水素、場合によりヒドロキシルにより置換され
る１〜４個の炭素原子を有するアルキルである〕である
か；あるいはＲ３は−ＮＨ（ＣＨ２）ｎ’　−Ｗ’　（
式中ｎ′は０〜４に等しく、そしてＷ′はピロリジニル
またはビＯＩＪジニル環であり該猿は場合により１〜４
個の炭素原子を有するアルキルで置換されまた該アルキ
ルは更にヒドロキシルにより置換されていてもよい）で
あり；ただし、（ａ）　Ｒ２が＝−Ｎ−Ｙ−ＮＲ４Ｒ５
でありかつＲ３が−Ｎｆ（−’Ｙ’−Ｒ４’Ｒ５’であ
る場合には、基ＹおよびＹ′は同じであるかまたは相異
なってもより、Ｒ４およびＲ４／は同じであるかまたは
相異なってもよく、そしてＲ５およびＲｂ２は同じであ
るかまたは相異なってもよく、あるいはＲ２が＝　Ｎ（
ＣＨ２）ｎ−ＷでありがつＲ３が−ＮＨ（ＣＨ２）ｎ／
　−Ｗ’である場合には数値ｎおよびｎ′は同じである
かまたは相異なつでもよく、そして基ＷおよびＷ′は同
じであるかまたは相異なってもよく、またＣｂ）Ｒ１が
水素でありかつＲ２が酸素である場合にはＲ５はヒドロ
キシまたはアルコキシであってはならない〕 を有する化合物およびその薬学的に許容しうる塩を製造
するにあたり次の諸工程、すなわち、ａ）構造式　■ ■ （式中Ｒ１は水素またはメチルであり、そしでＲ３はヒ
ドロキシまたはアルコキシである）を有する化合物を１
当量の式Ｒ４Ｒ５Ｎ−Ｙ−ＮＨ２またはＷ−（ＣＨ２）
ｎ−Ｎ’Ｈ２（式中Ｒ４、Ｒ５、Ｙ、ｎおよびＷは前記
定義のとおりである）を有する化合物と反応させて構造
式Ｉ［＋ａまたは■ｂ（式中Ｒ５はヒドロキシまたはア
ルコキシであり、そしてＹ、　Ｒ４、Ｒ５，ｎおよびＷ
は前記定義のとおりである） を有するイミンエステルまたはイミンカルボン酸を形成
させるか、あるいは、 ｂ）常法によるエステル変換法により構造式■（式中Ｂ
３はメトキシである）の化合物をより高級のアルキルエ
ステル（式中現は２〜４個の炭素原子を有するアルコキ
シである）に変換し、そして次いで所望により、得られ
た高級アルキルエステルを工程ａ）の方法により式１１
１ａまたはｌ［１）のイミンエステルに変換し；Ｃ）あ
るいはまたその後に工程ａ）または工程ｂ）のイミンエ
ステル生成物を所望により水性塩基を用いてけん化し相
当するイミンカルボン酸化合物を形成させるか；あるい
はまたｄ）工程ａ）または工程ｂ）のイミンエステル生
成物を式Ｒ４’Ｒ５’Ｎ−Ｙ’−ＮＨ２（式中Ｙ′は場
合によりヒドロキシルにより置換されていてもよい１〜
６個の炭素原子を有する直鎖状または分枝状アルキレン
基またはシクロヘキシルであり；そしてＲ４／およびＲ
５′は、独立して水素、場合によりヒドロキシルで置換
されていてもよい１〜４個の炭素原子を有するアルキル
である）を有する化合物か、または式Ｗζ（ＣＨ２）ｎ
Ｉ−ＨＨ２（式中ｎ′は０〜４に等しく、そしてＷ′は
ピロリジニルまたはピペリジニル環であり該環は場合に
より１〜４個の炭素原子を有するアルキルで置換されて
いてもより、該アルキルは更にヒドロキシルにより置換
されていてもよい）を有する化合物と反応させて構造式
■を有するイミンアミド化合物を形成させ、θ）そして
次いで工程ｄ）のイミンアミド生成物を、所望により希
水性酸中で加水分解して構造式Ｖａまたはｖｂ （式中Ｒ，／、Ｒ５′、Ｙ′、ｎ′、およびＷ′は前記
定義のとおりである） を有するアミド化合物を形成させ；そしてｆ）工程ａ）
、ｂ）、Ｃ）、ｄ）またはｅ）の生成物を所望により薬
学的に許容しうる塩に変換することを包含する前記化合
物およびその薬学的に許容しうる塩の製造方法を提供す
る。

〔詳細な説明〕

一つのサブ一般的化学的化合物面によれば、（式中、■
（１はメチルであり、そしてＰ３は１〜４個の炭素原子
を有するアルコキシである）で示されるエステルを提供
する。

特に好ましいのは化合物６−ホルミル−４，７，９−ト
リヒドロキシ−８−メチル−１−フェナジンカルボン酸
メチルエステルである。

もう１つの観点において、本発明は、化合物６−ホルミ
ル−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチル−１−フ
ェナジンカルボン酸およヒソの薬学的に許容しうる塩を
包含する。

もう１つのサブ一般的化学的化合物面によれば、本発明
化合物は前記構造式１１１ａまたはｌｌｌｂＣ式中基Ｒ
３は１〜４個の炭素原子を有するアルコキシであり、そ
してイミン基は−Ｎ−Ｙ−ＮＲ４Ｒ５または＝Ｎ（ＯＨ
２）ｎ−Ｗとして定義される）で示されるイミンエステ
ルを包含する。基Ｒ４およびＲ５は独立して水素または
１〜４個の炭素原子を有するアルキルまたはヒドロキシ
アルキル基であるか、または二者択一的にＲ３が−Ｎ（
ＯＨ２）ｎ／−Ｗ’である場合には、ｎは０〜４に等し
くそしてＷは場合により１〜４個の炭素原子を有するア
ルキル（該アルキルは更にヒドロキシルで置換されてい
てもよい）で置換されるピロリジニルまたはピペリジニ
ル環である。

連結基Ｙは場合によりヒドロキシルにより置換された１
〜６個の炭素原子を有する直鎖状または分枝鎖状アルキ
ｌノンであるかまたはシクロヘキシルである。本明細曹
全体にわたって用いられる用語「アルキレン」とは、一
般式ＣＸＨ２ｘ（式中Ｘは１〜６の範囲の整数である）
を有する直鎖状または分枝鎖状炭化水素基を意味する。

Ｘが３〜乙の値をとるとき、連結基Ｙの１個以上の水嵩
原子は場合によりヒドロキシルにより置換されていても
よい。

本明ａ書全体にわたり用いられる用語である１〜４個の
炭素原子を有する「アルキル」および「ヒドロキシアル
キル」は直鎖状および分枝鎖状アルキルおよびヒドロキ
シアルキル基例工ばメチル、ヒドロキシメチル、エチル
、２−ヒドロキシエチル、フロビル、２−および３−ヒ
ドロキシプロピル、１−メチルエチル、１−（ヒドロキ
シメチル）エチル、ブチル、３−および４−ヒドロキシ
ブチルなどを包含するものとして意図されている。

Ｒ４およびＲ５として特に好ましい基は、水素、メチル
、ヒドロキシメチル、エチル、２−ヒドロキシエチル、
プロピル、２−および３−ヒドロキシプロピルである。

基Ｙの例としては、メチレン、エチレン、プロピレン、
ブチレン、ベンチレン、ヘキシレン、２−メチルブチレ
ン、２−ヒドロキシプロピレン、２−ヒドロキシ−およ
び２．３−ｕヒドロキシブチレン、シクロヘキシルなど
が挙げられる。

Ｙとして特に好ましい基はメチレン、エチレン、プロピ
レン、２−ヒドロキシプロピレンおよびシクロヘキシル
である〇 本発明のこの態様の範囲に入る化合物の例としては次の
ものが挙げられる。

４．７．９−トリヒドロキシ−６−（イミノメチル）−
１−フェナジンカルボン酸メチルエステル。

４．７．９−トリヒドロキシ−６−（イミノメチル）−
８−メチル−１−フェナジンカルボン酸メチルエステル
。

４．７．９−　）リヒドロキシ−６−〔（メチルイミノ
）メチル〕−１−フェナジンカルボン酸メチルエステル
。

４．７．９−　）ジヒドロキシ−８−メチル−６−〔（
メチルイミノ）メチルツー１−フェナジンカルボン酸メ
チルエステル。

６−　［（２−アミノエチル）イミノコメチル〕−４，
７，９−トリヒドロキシ−１−フェナジンカルボン酸メ
チルエステル。

６−　［［（２−アミノエチル）イミノコメチル〕−４
，７，９−）リヒドロキシー８−メチルー１−フエナジ
ンカルポン酸メチルエステル。

６−０１１：　２−　（ジメチルアミノ）エチル〕イε
ノ〕メチル〕−４，７，９−）ジヒドロキシ−１−フェ
ナジンカルボン酸メチルエステル。

６−　［：［［：　２−　（ジメチルアミノ）エチル］
イミノ〕メチル、］　−４，７，９−）ジヒドロキシ−
８−メチル−１−フェナジンカルボン酸メチルエステル
。

４．７．９−　）リヒドロキシ−６−［Ｃ２−（１−ピ
ロリジニル）エチル〕イミノ〕メチル〕−１−フェナジ
ンカルボン酸エチルエステル。

４．７．９−　）ジヒドロキシ−８−メチル−６−〇［
：　２−　（１−ピロリジニル）エチル〕イミノ〕メチ
ル）−１−フェナジンカルボン酸エチルエステル。

６−　［：［［：　４−　（ジメチルアミノ）シクロヘ
キシル］イミノ〕メチル］　−４，７，９−トリヒドロ
キシ−１−７エナジンカルボン酸メチルエステル。

６−　ＣＣ（：　４−　（’）メチルアミン）シクロヘ
キシル〕イミノ〕メチル）　−４，７，９−）ジヒドロ
キシ−８−メチル−１−フェナジンカルボン酸メチルエ
ステル。

６−　ＣＣＣＣ１−メチル−２−ピロリジニル）メチル
〕イミノ〕メチル］　−４，７，９−）　ジヒドロキシ
−１−フエナ’）ンカルボン酸メチルエステル。

６−　［［（１−エチル−２−ピロリジニル）メチル〕
イミノ〕メチル、）　−４，７，９−）　’）ヒドロキ
シ−８−メチル−１−７エナジンカルボン酸メチルエス
テル。

４．７．９−トリヒドロキシ−６−［Ｃ［：　２−　（
１−メチル−２−ピロリジニル）エチル〕イミノ〕メチ
ル〕−１−７エナジンカルボン酸メチルエステル。

４．７．９−トリヒドロキシ−８−メチル−６−［［２
−（１−メチル−２−ピロリジニル）エチル〕イミノ〕
メチル〕−１−７エナジンカルボン酸メチルエステル。

４．７．９−　）リヒドロキシ−６−［（１−メチル−
４−ピペリジニル）イミノ〕メチル〕−１−フェナジン
カルボン酸メチルエステル。

４．７．９−　）ジヒドロキシ−８−メチル−６−〔〔
（１−メチル−４−ビはリジニ・ル）イミノ〕メチル〕
−１−７エナジンカルボン酸メチルエステル。

６−［：［：［，５−（ジメチルアミノ）ペンチル〕イ
ミノ〕メチル）　−４，７，９−）ジヒドロキシ−１−
フェナジンカルボン酸メチルエステル。

６−　［：［［５−（ジメチルアミノ）ペンチル〕イミ
ノ〕メチル、：ｌ　−４，７，９−）ジヒドロキシ−８
−メチル−１−フェナジンカルボン酸メチルエステル。

４．７．９−トリヒドロキシ−６−［２（（２−メチル
ゾロピル）アミノ〕エチル〕イばノ〕メチル〕−１−７
エナジンカルボン酸メチルエステル。

４．７．９−　）ジヒドロキシ−８−メチル−６−［２
−Ｃ（２−メチルプロピル）アミン〕エチル〕イミノ〕
メチル〕−１−フェナジンカルボン酸メチルエステル。

６−　［［（：　２−　（ジエチルアミノ）エチル〕イ
ミノ〕メチル〕−４，７，９−トリヒドロキシ−１−フ
ェナジンカルボン酸メチルエステル。

６−　［［２−（ジエチルアミノ）エチル〕イミノ〕メ
チル］　−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチル−
１−フェナジンカルボン酸メチルエステル。

４．７．９−　）リヒドロキシ−６−１：ｃ［：　２−
　（メチルアミノ）エチルコイばノ〕メチル〕−１−フ
ェナジンカルボン酸メチルエステル。

４．７．９−　）ジヒドロキシ−８−メチル−６−［［
２−（メチルアミン）エチル〕イミノ〕メチル〕−１−
フェナジンカルボンｒ凌メチルエステル。

４、７．９−トリヒドロキシ−６−［［［２−Ｃ（２−
ヒドロキシエチル）アミン〕エチル〕イミノ〕メチル〕
−１−フェナジンカルボン酸メチルエステル。

４、７．９−トリヒドロキシ−６−［［：［２−［（２
−ヒドロキシエチル）アミノ〕エチル〕イミノ〕メチル
〕−８−メチル−１−７エナジンカルボン酸メチルエス
テル。

６−　［［２−（エチルメチルアミノ）エチル〕イミノ
〕メチル、１−４．７．９−トリヒドロキシ−１−フェ
ナジンカルボン酸メチルエステル。

６−　ＣＩ：Ｉ：　２−　（：ｒ−ｆルメｆル’７ミ／
）エチル〕イミノ〕メチル）　−４，７，９−トリヒド
ロキシ−８−メチル−１−フェナジンカルボン酸メチル
エステル。

６−　［Ｃ［２−Ｃビス（ヒドロキシエチル）アミン〕
エチル〕イミノ〕メチル）　−４，７，９−）リヒドロ
キシー１−フェナジンカルボン酸メチルエステル。

６−ＣＣＣ２−Ｃビス（ヒドロキシエチル）アミン〕エ
チル〕イミノ〕メチル）　−４，７，９−トリヒドロキ
シ−８−メチル−１−フェナジンカルボン酸メチルエス
テル。

６−　［：［３，−（ジメチルアミノ）−２−ヒドロキ
シプロピル〕イミノ〕メチル）　−４，７，９−トリヒ
ドロキシ−１−フェナジンカルボン酸メチルエステル。

６−　［Ｃ３−（ジメチルアミノ）−２−ヒトロキシプ
ロピル〕イミノ〕メチル、１−４．７．９−トリヒドロ
キシ−８−メチル−１−フェナジンカルボン酸メチルエ
ステル。

もう１つのサブ一般的化学的化合物面によれは、本発明
化合物は構造式 （式中Ｙ　、　Ｒ４、Ｒ５、ｎおよびｗＦｉｉｊＪ記定
義のとおりである） で示されるイミン酸を包含する。

この態様の範囲に入る化合物の例としては次のものが挙
げられる。

４．７．９−　）リヒドロキシ−６−（イミノメチル）
−１−フェナジンカルボン酸。

４．７．９−　）リヒドロキシ−６−（イミノメチル）
−８−メチル−１−フェナジンカルボン酸。

６−　ＣＣＣ２−（アミノエチル）〕イミノ〕メチル）
　−４，７，９−）ジヒドロキシ−１−フェナジンカル
ボン酸。

６−　［［［：　２−　（アミノエチル）〕イミノ〕メ
チル）　−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチル−
１−フェナジンカルボン酸。

６−　［［４−（ジメチルアミノ）シクロヘキシル〕イ
ミノ〕メチル）　−４，７，９−トリヒドロキシ−１−
フェナジンカルボン酸。

６−　［［：［：　４−　（ジメチルアミノ）シクロヘ
キシル〕イミノ〕メチル）　−４，７，９−トリヒドロ
キシ−８−メチル−１−７エナジンカルボン酸。

６−　［［：（１−エチル−２−ピロリジニル）メチル
〕イミノ〕メチル）　−４，７，９−）ジヒドロキシ−
１−フェナジンカルボン酸。

６−　［：Ｃ［（１−エチル−２−ピロリジニル）メチ
ル〕イミノ〕メチル）　−４，７，９−）　！Ｊヒドロ
キシー８−メチルー１−７エナジンカルボン醒。

４．７．９−　）リヒドロキシ−６−［［２−（１−メ
チル−２−ピロリジニル）エチル〕イハノ〕メチル〕−
１−フェナジンカルボン酸。

４．７．９−トリヒドロキシ−８−メチル−６−Ｃ［：
［２−（１−メチル−２−ピロリジニル）エチル〕イミ
ノ〕メチル〕−１−フェナジンカルボン酸。

４．７．９−トリヒドロキシ−６−［（１−メチル−４
−ピにリジニル）イミノ〕メチル〕−１−フェナジンカ
ルボン酸。

４．７．９−）ジヒドロキシ−８−メチル−６−〔〔（
１−メチル−４−ピペリジニル）イミノ〕メチル〕−１
−フェナジンカルボン酸。

６−　［［：［５−（ジメチルアミノ）ｋンチル〕イミ
ノ〕メチル）　−４，７，９−）ジヒドロキシ−１−フ
ェナジンカルポン教。

６−　［［５−（ジメチルアミノ）ペンチル〕イミノ〕
メチル）　−４，７ｔ９−）ジヒドロキシ−８−メチル
−１−フェナジンカルボン酸。

４．７．９−　）リヒドロキシ−６−［［２−［：（２
−メチルプロピル）アミノ〕エチル〕イミノ〕メチル〕
−１−７エナジンカルボン酸。

４．７．９−トリヒドロキシ−８−メチル−６−ＣＣＣ
２−ＣＣ２−メチルプロピル）アミン〕エチル〕イミノ
〕メチル〕−１−フェナジンカルボン酸。

４．７．９−　）リヒドロキシ−６−（：（［２−（メ
チルアミノ）エチル〕イミノ〕メチル〕−１−フェナジ
ンカルボン酸。

４．７．９−　）ジヒドロキシ−８−メチル−６−［［
２−（メチルアミノ）エチル〕イミノ〕メチル〕−１−
フェナジンカルボン酸。

４．７．９−トリヒドロキシ−６−（［［２−（（２−
ヒドロキシエチル）アミノ〕エチル〕イミノ〕メチル〕
−１−７エナジンカルボン酸。

４．７．９−　）リヒドロキシ−６−［：［２−［（２
−ヒドロキシエチル）アミン〕エチル〕イミノ〕メチル
〕−８−メチル−１−７エナジンカルボン酸。

６−　［：（（２−（エチルメチルアミノ）エチル〕イ
ミノ〕メチル）　−４，７，９−）ジヒドロキシ−１−
フェナジンカルボン酸。

６−　Ｃ［［２−（エチルメチルアミノ）エチル〕イミ
ノ〕メチル）　−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メ
チル−１−フェナジンカルボン酸。

４．７．９−　）リヒドロキシ−６−［［２−（１−ピ
ロリジニル）エチル〕イミノ〕メチル〕−１−７エナジ
ンカルボン酸。

４．７．９−トリヒドロキシ−８−メチル−６−［（［
２−（１−ピロリジニル）エチル〕イミノ〕メチル〕−
１−７エナジンカルボン酸。

４．７．９−　）リヒドロキシ−６−（（：［２−（１
−ピロリジニル）エチル〕イミノ〕メチル〕−１−フェ
ナジンカルボン酸。

４．７．９−　）リヒドロキシ−６−ＣＣ［２−（１−
ピロリジニル）エチル〕イミノ〕メチル〕−８−メチル
−１−フェナジンカルボン酸。

６−　［〔［３−（ジメチルアミノ）−２−ヒドロキシ
プロピル〕イミノ〕メチル）　−４，７，９−トリヒド
ロキシ−１−フェナジンカルボン酸。

６−　ＣＣＣ３−（ジメチルアミノ）−２−ヒドロキシ
プロピル〕イミノ〕メチル〕−４，７，９−トリヒドロ
キシ−８−メチル−１−フェナジンカルボン酸。

もう１つのサブ一般的化学的化合物面によれば、本発明
化合物は前記構造式■（式中ＹおよびＹ′は同じである
かまたは相異なってもよく、Ｒ４およびＲ４／は同じで
あるかまたは相異なってもよく、そしてＲ５およびＲ５
′は同じであるかまたは相異なってもよく、ｎおよびｎ
′は同じであるかまたは相異なってもよくそして前記定
義どおりである）で示されるイミンアばドを包含スる。

本発明のこの範囲に入る化合物の例としては次のものが
挙げられる。

４．７．９−　）リヒドロキシ−６−（イミノメチル）
−１−フェナジンカルボキサミド。

４．７．９−　）リヒドロキシ−６−（イミノメチル）
−８−メチル−１−フェナジンカルボキサミ　　ド。

４．７．９−　）ジヒドロキシ−Ｎ−メチル−６−〔（
メチルイミノ）メチルツー１−フェナジンカルボキサミ
ド。

４．７．９−）ジヒドロキシ−Ｎ１８−ジメチル−６−
〔（メチルイミノ）メチルツー１−フェナジンカルボキ
サミド。

Ｎ−（２−アミノエチル）　−，６−［：（：（２−ア
ミノエチル）イミノコメチル］　−４，７，９−トリヒ
ドロキシ−１−７エナジンカルボキサミド。

Ｎ−（２−アミノエチル）　−６−ＣＣＣ２−アミノエ
チル）イミノコメチル）　−４，７，９−）リヒドａキ
シー８−メチルー１−７エナジンカルポキサミド。

Ｎ−〔２−Ｃジメチルアミノ）エチル〕−６−Ｃ［：［
２−（ジメチルアミノ）エチル〕イミノ〕メチル）　−
４，７，９−）ジヒドロキシ−１−フエナジンカルポキ
サミド。

Ｎ−［：２−（ジメチルアミノ）エチル〕−６−［：［
（２−（ジメチルアミノ）エチル〕イミノ〕メチル）　
−４，７，９：）ジヒドロキシ−８−メチル−１−フェ
ナジンカルボキサミド。

Ｎ−［２−（ジメチルアミノ）エチル〕−６−［：［２
−（０エチルアミノ）エチル〕イミノ〕メチル）　−４
，７，９−トリヒドロキシ−１−フェナジンカルボキサ
ミド。

Ｎ−［２−（ジエチルアミノ）エチル〕−６−ＣＣＣ２
−（ジエチルアミノ）エチル〕イミノ〕メチル−４，７
，９−トリヒドロキシ−８−メチル−１−フェナジンカ
ルボキサミド。

Ｎ−１：３−（ジメチルアミノ）プロピル〕−６−ＣＣ
Ｃ３−（ジメチルアミン）プロピル〕イミノ〕メチル）
　−４，７，９−トリヒドロキシ−１−フェナジンカル
ボキサミド。

Ｎ−Ｃ３−Ｃジメチルアミノ）プロピル〕−６−Ｃ［：
Ｃ３−（ジメチルアば〕）プロピル〕イミノ〕メチル］
　−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチル−フェナ
ジンカルボキサばド。

Ｎ−（２−［：ビス（ヒドロキシエチル）アミノコエチ
ル）　−６−［：［２−Ｃビス（ヒドロキジエチル）ア
ミノ〕エチル〕イミノ〕メチル〕−４，７，９−）ジヒ
ドロキシ−１−フエナジンカルポキサミド。

Ｎ−［２−［ビス（ヒドロキシエチル）アミノコエチル
）　−６−（［２−Ｃビス（ヒドロキシエチ）Ｌ／）ア
ミン〕エチル〕イミノ〕メチル〕−４，７，９−）ジヒ
ドロキシ−８−メチル−１−フェナジンカルボキサミド
。

４．７．９−　トリヒドロキシ−Ｎ　−［２−（１−ピ
ロリジニル）エチル〕−６−ＣＣＣ２−（１−ピロリジ
ニル）エチル〕イミノ〕メチル〕−１−７エナジンカル
ポキサミド。

４．７．９−トリヒドロキシ−８−メチル−Ｎ−［２−
（１−ピロリジニル）エチル〕−６−［［２−（１−ピ
ロリジニル）エチル〕イミノ〕メチル〕−１−フェナジ
ンカルボキサミド。

Ｎ−Ｃ２−Ｃジメチルアミノ）エチル〕−６−［［３−
（ジメチルアミノ）−２−ヒドロキシプロピル〕イミノ
〕メチル〕−４，７，９−）　ＩＪヒドロキシ−１−フ
ェナジンカルボギザミド。

Ｎ−［４−（ジメチルアミノ）シクロヘキシル〕−６−
［：［４−（ジメチルアミン）シクロヘキシル〕イミノ
〕メチル）　−４，７，９−トリヒドロキシ−１−７エ
ナジンカルポキサミド。

Ｎ−Ｃ４−Ｃジメチルアミノ）シクロへキシル−（［［
：　４−　（ジメチルアミノ）シクロヘキシル〕イミノ
〕メチル〕−４，７，９−トリヒドロキシ−８−メチル
−１−フェナジンカルボキサミド。

Ｎ−１ｍ（１−メチル−２−ピロリジニル）メチル）　
−６−〔〔〔（１−エチル−２−ピロリジニル）メチル
〕イミノ〕メチル）　−４，７，９−）リヒドロキシー
１−７エナジンカルポキサミド。

Ｎ−［（１−エチル−２−ピロリジニル）メチル）　−
６−［〔（ｊ−エチル−２−ビロリジニノリメチル〕イ
ミノ〕メチル）　−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−
メチル−１−フエナジンカルポキサミド。

４、７．９−トリヒドロキシ−Ｎ−［：２−（１−メチ
ル−２−、ｙピロリジニル）エチル］、　−６−ＣＣＣ
２−（１−メチル−２−ピロリジニル）エチル〕イミノ
〕メチル〕−１−７エナジンカルポキサミド。

４．７．９−　）ジヒドロキシ−８−メチル−Ｎ−Ｃ２
−＜１−）ｆルー２−ピロリジニル）エチル〕−６−〔
〔１ｍ　２−（１−メチル−２−ピロリジニル）エチル
〕イミノ〕メチル〕−１−フェナジンカルボキサミド。

４．７．９−　）リヒドロキシ−ＩＪ　＝　（１−メチ
ル−４−ピペリジニル）　−６−［（（’　１−メチル
−４−ピペリジニル）イミノ〕メチル〕−１−フエナジ
ンカルポキサミド。

４．７．９−　）ジヒドロキシ−８−メチル−Ｎ−（１
−メチル−４−ピペリジニル）　−６−ＣＣＣ１−メチ
ル−４−ピペリジニル）イミノ〕メチル〕−１−フェナ
ジンカルボキサミド。

Ｎ−［５−（ジメチルアミノ）ペンチル〕−６−［：［
：［５−（ジメチルアミン）ハンチル〕イミノ〕メチル
）　−４，７，９−）ジヒドロキシ−１−フエナジンカ
ルボキザミド。

Ｎ−［：５−（ジメチルアミノ）はメチル〕−６−［〔
［：　５−　（ジメチルアミン）ペンチル〕イミノ〕メ
チル〕−４，７，９−）リヒドロキシー８−メチルー１
−フェナジンカルボキサミド。

４、７．９−トリヒドロキシ−Ｎ−［２−［（２−メチ
ルプロピル）アミノコエチル）　＝６−　［［２−〔（
２−メチルプロピル）アミン〕エチル〕イミノ〕メチル
〕−１−フェナジンカルボキサミド。

−５４＝ ４．７．９−　）ジヒドロキシ−８−メチル−Ｎ−［２
−［（２−メチルプロピル）アミン〕エチル〕−６−（
：［（：２−［（２−メチルプロピル）アミン〕エチル
〕イミノ〕メチル〕−１−フェナジンカルボキサミド。

Ｎ−Ｃ２−（ジエチルアミノ）エチル〕−６−［［２−
（ジエチルアミノ）エチル〕イミノ〕メチル］　−４，
７，９−）ジヒドロキシ−１−フェナジンカルボキサミ
ド。

Ｎ７［：２−（ジエチルアミノ）エチル〕−６−［［：
　２−　（ジエチルアミノ）エチル〕イミノ〕メチル）
　−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチル−１−フ
ェナジンカルボキサミド。

４．７．９−　）ジヒドロキシ−Ｎ−Ｃ２−Ｃメチルア
ミノ）エチル）　−６−［：［［２−（メチルアミン）
エチル〕イミノ〕メチル〕−１−フェナジンカルボキサ
ミド。

４．７．９−）ジヒドロキシ−８−メチル−Ｎ−〔２−
（メチルアミン）エチル］　−６−［：［：［２−（メ
チルアミン）エチル〕イミノ〕メチル〕−１−フェナジ
ンカルボキサミド。

４、７．９−トリヒドロキシ−Ｎ−Ｃ２−ＣＣ２−ヒド
ロキシエチル）アミン〕エチル］−６−［（Ｃ２−Ｃ（
２−ヒドロキシエチル）アミン〕エチル〕イミノ〕メチ
ル〕−１−フェナジンカルボキサミド。

４．７．９−　）リヒドロキシーＮ　−［２４（２−ヒ
ドロキシエチル）アミノコエチル］−６−［：［Ｉ：２
−［（２−ヒドロキシエチル）アミノ〕エチル〕イミノ
〕メチル〕−８−メチル−１−フェナジンカルボキサミ
ド。

Ｎ−１ｍ２−（エチルメチルアミノ）エチル〕−６−［
［：［２−（エチルメチルアミン）エチル〕イミノ〕メ
チル］　−４，７，９−）ジヒドロキシ−１−フェナジ
ンカルボキサミド。

ｎ−［２−（エチルメチルアミノ）エチル〕−６−ＣＣ
Ｃ２−（ｘｆルメチルアミン）エチル〕イミノ〕メチル
］　−４，７，９−）　！Ｊヒドロキシー８−メチルー
１−フェナジンカルボキサミド。

Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル〕−６−（：［［
３−（ジメチルアミノ）−２−ヒドロキシプロピル〕イ
ミノ〕メチル〕−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メ
チル−１−フエナジンカルポキサミド。

もう１つのサブ一般的化学的化合物面によれば、本発明
化合物は、式■（式中Ｙ′、Ｒ４′およびＲｂ２は前記
の意味を有する）で示されるアミドを包含する。

この態様に入る化合物の例としては次のものが享けられ
る。

６−ホルミル−４，７，９−）リヒドロキシ−１−フェ
ナジンカルボキサミド。

６−ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチ
ル−１−フェナジンカルボキサミド。

６−ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−Ｎ−メチ
ル−１−フエナジンカルポキザミド。

６−ホルミル−４，７，９−）リヒドロキシーＮ、８−
ジメチル−１−フェナジンカルボキサミド。

Ｎ−（２−アミノエチル）−６−ホルミル−４，７１９
−）　ＩＪヒドロキシ−１−フェナジンカルボキサミド
。

Ｎ−（２−アミノエチル）−６−ホルミル−４，７，９
−トリヒドロキシ−８−メチル−１−７エナジンカルポ
キサミド。

Ｎ−［２−（ジメチルアミノ）エチル〕−６−ホルミル
−４，７，９−トリヒドロキシ−１−７エナジンカルポ
キサミド。

ｎ−［２−（ジメチルアミノ）エチル〕−６−ホルミル
ー４．７．９−　）ジヒドロキシ−８−メチル−１−フ
ェナジンカルボキサミド。

Ｎ−［３−（ジメチルアミノ）プロピルツー６−ホルミ
ル−４，７，９−トリヒドロキシ−１−７エナジンカル
ポキサミド。

Ｎ−［：３−（ジメチルアミノ）プロピルツー６−ホル
ミル−４，７，９−トリヒドロキシ−８−メチル−１−
フェナジンカルボキサミド。

Ｎ−［２−［ビス（ヒドロキシエチル）アミノ〕エチル
〕−６−ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−１−
フェナジンカルボキサミド。

Ｎ−［２−（ビス（ヒドロキシエチル）アミン〕エチル
〕−６−ホルミル−４，７，９−トリヒドロキシ−８−
メチル−１−フェナジンカルボ゛　キサミド。

６−ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−Ｎ−Ｃ２
−Ｃ１−ピロリジニル）エチルツー１−カルボジン力ル
ポキサミド。

６−ホルミル−４，７，９−トリヒドロキシ−８−メチ
ル−Ｎ　−［２−（１−ピロリジニル）エチルクー１−
フェナジンカルボキサミド。

Ｎ−４４−（ジメチルアミノ）シクロヘキシルクー６−
ホルミル−４，７，９−トリヒドロ千シー１−フエナジ
ンカルポキザミド。

Ｎ−［４−（９メチルアミン）シクロヘキシルクー６−
ホルミル−４，７，９−トリヒドロキシ−８−メチル−
１−７エナジンカルポキサミド。

６−ホルミル−４，７，９−）リヒドロキシーＮ−［２
−（１−メチル−２−ピロリジニル）エチルシー１−フ
エナジンカルポキサミド。

６−ホルミル−４，７，９−トリヒドロキシ−８−メチ
ルーＮ−（２−（１−メチル−２−ピロリジニル）エチ
ルクー１−フエナジンカルホキサミド。

６−ホルミル−４，７，９−）リヒドロキシーＮ−（１
−メチル−４−ピはリジニル）−１−フェナジンカルボ
キサミド。

６−ホルミル−４，７，９−トリヒドロキシ−８−メチ
ル−Ｎ−（１−メチル−４−ピペリジニル）−１−７エ
ナジンカルポキサミド。

Ｎ−［５−（ジメチルアミノ）ペンチル〕−６−ホルミ
ル−４，７，９−）リヒドロキシー１−フエナジン力ル
ポキサミド。

Ｍ−（５−（’ｕメチルアミノ）ペンチル〕−６−ホル
ミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチル−１−
フエナジンカルポキザミド。

６−ホルミル−４，７，９−）リヒドロキシーＮ−［２
−Ｃ（２−メチルプロピル）アミノ〕エチル〕−１−７
エナジンカルポキサミド。

６−ホルミル−４，７，９−トリヒドロキシ−８−メチ
ル−Ｎ　−［２−１：（２−メチルプロピル）アミノ〕
エチル〕−１−７エナジンカルボキサミ　　ド。

Ｎ−Ｃ２−Ｃジエチルアミノ）エチルツー６−ホルミル
−４，７，９−）ジヒドロキシ−１−フェナジンカルボ
キサミド。

Ｎ−Ｃ２−Ｃジエチルアミノ）エチルツー６−ホルミル
−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチル−１−フェ
ナジンカルボキサミド。

６−ホルミル−４，７，９−）リヒドロキシーＮ−［２
−（メチルアミン）エチルクー１−フェナジンカルボキ
サミド。

６−ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチ
ル−Ｎ−［２−（メチルアミン）エチルクー１−フェナ
ジンカルボキサミド。

６−ホルミル−４，７，９−）リヒドロキシーＮ−（２
−ＣＣ２−ヒドロキシエチル）アミン〕エチル〕−１−
フェナジンカルボキサミド。

６−ホルミル−４，７，９−トリヒドロキシ−Ｎ−Ｃ２
−ＣＣ２−ヒドロキシエチル）アミノ〕エチル〕−８−
メチル−１−フェナジンカルボキサミド。

Ｎ−Ｃ２−Ｃエチルメチルアミノ）エチルクー６−ホル
ミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−１−フエナジンカ
ルポキサミド。

Ｎ−［２−（エチルメチルアミノコエチル〕−６−ホル
ミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチル−１−
フエナジンカルポキサミド。

本発明による化合物は、出発物質である６−ホルミル−
４１７１９−）　’）ヒドロキシ−１−フェナジンカル
ボン酸メチルエステルまたＦｉ６−ホルミル−４，７，
９−）ジヒドロキシ−８−メチル−１−フェナジンカル
ボン酸メチルエステルから製造される。前者の化合物で
ある６−ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−１−
フェナジンカルボン酸メチルエステルは化学文献にロモ
フンジンまたはロモンドマイシンとして周知であり、ま
たは米国特許第３．５５９．１６５号明細書に詳述され
ているよりに微生物ストレプトマイセス・ロモンデンシ
ス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｌｏｍｏｎｄｅｎｓｉ
ｓ）ＮＲＲＬ　３２５２を含む発酵ブロス混合物から単
離可能な量で生産される。

後者の化合物である６−ホルミル−４，７，９−トリヒ
ドロキシ−８−メチル−１−フェナジンカルボン酸メチ
ルエステルは後記実施例１により詳述されるようなＮＲ
ＲＬ１５７３８と称される微生物ストレプトマイセス・
ガラノサ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｇａｌａｎｏｓａ
）を含む発酵ブロス混合物から単離しうる量で生産され
る。

前記２種類の出発物質であるメチルエステルから誘導さ
れる高級アルキルエステルは、それらメチルエステルを
出発物質として用いた常法によるエステル交換反応を行
い、そして次に必要ならばエステル交換反応の際に６−
ホルミル官能部に形成される任意のアセタールまたはへ
ぐアセタールを常法により加水分解することにより得ら
れる。

両化合物の遊離酸型は、前記メチルエステル出発物質あ
るいはエステル交換反応によシ生成する高級アルキルエ
ステルを、例えば水性水酸化ナトリウム中で常法により
塩基加水分解し、次いで酸性化することによシ得ること
ができる。

前記式■のイミンアミド誘導体は、Ｒ１がメチルである
場合には、６−ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ
−８−メチル−１−フェナジンカルボン酸メチルエステ
ルを所望のアミンと約２５℃〜１００℃、好ましくは約
３０℃〜７０℃の温度で反応させることにより得られる
。これらの条件下では、そのアミンとフェナジン環系の
６位のホルミル基の間の反応の結果としてシッフ塩基イ
ミンがまず生じる。このようにして形成されたイミンの
カルボメトキシ官能部は更にそのアミン反応剤と反応し
てイミンアミドを生じる。

単離されるべき生成物は次に常法による化学的方法によ
９精製される。

Ｒ１が水素である場合には、前述の反応シーケンスは、
イミンアミドを有意な量で生成しないが、これはおそら
く、フェナジン環系の８位の水素原子と隣接フェノール
性基のうちの１つの関与するケト−エノール互変異性に
よるものであろう。前記構造■（式中Ｒ１は水素である
）のイミンアミドを製造するには、メチルニスｆ　／ｌ
／出発物質の加水分解により形成された６−ホルミル−
４，７，９−）リヒドロキシー１−７エナジンカルボン
酸を無水極性有機溶媒例えばジメチルホルムアミド中で
カップリング剤例えば１，１′−カルボニルジ・ｆミダ
ゾール捷たは１．３−ジシクロへキシルカルボジイミド
と反応させた後、所望のアミンを添加する。この反応は
約−１０℃〜２５℃の温度で行われる。これらの条件下
で、過剰のアミンを用いると、６−ホルミル官能部とカ
ルボン酸官能部の両方がアミンとの反応により誘導体化
されてイミンアミドを生成する。

前記式１１１ａまたはＩＩＴｂＣ式中Ｒ３１−１：アル
コキシである）のイミンエステル化合物は、適宜の６−
ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−１−フェナジ
ンカルボン酸エステルまたは６−ホルミル−４，７，９
−）ジヒドロキシ−８−メチル−１−フェナジンカルボ
ン酸エステルを穏和な条件下に所望のアミンと反応させ
ることによシ製造される。例えば、それらエステルを極
性有機溶媒例えばテトラヒドロフランまたはジメチルホ
ルムアミド中で適宜のアミンと室温で数分間反応させ、
次いで常法により生成物を単離および精製することがで
きる。

イミン酸は、６−ホルミル−４，７，９−トリヒドロキ
シ−１−フェナジンカルボン酸または６−ホルミル−４
，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチル−１−フェナジ
ンカルボン酸を穏和な条件下に所望のアミンと反応させ
ることにより、あるいはまた、相当するイミンエステル
のエステル官能部を例えば冷水性水酸化ナトリウムで塩
基性加水分解後に酸性化することにより製造される。

前記式Ｖａおよびｖｂのアミドは、前述の如く製造され
たイミンアミドのイミノ官能部を、例えば冷水性塩酸で
酸性加水分解後に常法によジアミド生成物を単離および
精製することにより製造される。

本発明化合物は、多くの薬学的に許容しりる無機塩基お
よび有機アミンと塩を形成する。適当な無機塩基として
は水酸化アンモニウム、およびナトリウム、カリウム、
カルシウム、マグネシウム、鉄および亜鉛の水酸化物、
炭酸塩または重炭酸塩が挙げられる。本発明化合物の特
に好ましい無機塩はナトリウムおよびカリウム塩である
。本発明の酸性化合物の塩基付加塩の製造に適した有機
アミンは、薬剤処方に従事している者に周知の一群のア
ミンを形成する。

塩は、化合物を当量の所望の塩基と常法によシ接触させ
ることＫよシ製造される。所望により、塩を塩酸など酸
の冷水性溶液で処理することにより化合物を塩から再生
することもできる。

本発明化合物は、Ｒ２および／またはＲ３が塩基性窒素
原子を含む場合には、多くの薬学的に許容しうる無機お
よび有機酸例えば塩酸、臭化水素酸、沃化水素酸、硫酸
、硝酸、燐酸、酢酸、安息香酸、クエン酸、マレイン酸
、リンゴ酸、酒石ｆｆ、コハク酸、グルコン酸、アスコ
ルビン酸、スルファミン酸、蓚酸、パモエ酸、メタンス
ルホン酸、ペンセンスルホン酸および関連の酸およびそ
れらの混合物などと塩を形成する。

酸付加塩は遊離塩基型の化合物を適当な溶媒例えば水ま
たは水性アルコール中で所望の酸と混合することによシ
製造できる。得られた溶成は蒸発または凍結乾燥するこ
とができ、その結果回収される塩を次いで常法によシ精
製することができる。

所望によシ、酸付加塩を適当な塩基例えは水酸化ナトリ
ウム、炭酸ナトリウムなどの水性溶液で処理することに
より、遊離塩基型の化合物を回収することかできる。

塩類は遊離塩基型の本発明化合物とは融点や極性溶媒へ
の溶解度といった物性の点で異なるが、その他の点では
本発明の目的にとって等価であると考えられる。

本発明の化合物およびそれらの薬学的に許容しうる塩は
溶媒和されていない形でも、水和された形を含め溶媒和
された形でも存在しうる。

一般に薬学的に許容しうる溶媒例えば水、エタノールカ
どで溶媒和された形のものは、本発明の目的にとって溶
媒和されていたい形のものと等価であると考えられる。

本発明の化合物およびそれらの薬学的に許容しうる塩は
抗微生物剤として有用である。グラＡ　陰性、Ｉｌｌ菌
５種（スビーシズ）、ダラム陽性菌７種、酵母４種およ
び菌類２種に対する本発明化合物の代表例の抗微生物活
性を微量力価希釈法を用いて測定した。この方法はＴ　
、Ｂ　、０ｏｎｒａｔｈ著［Ｈａｎｄ’ｂｏｏｋ　ｏｆ
　Ｍｉｃｒｏｔｉｔｅｒ　ＰｒｏｃｅｄｕｒｅｅＪ（１
９７２年）；およびＩｌｉ、Ｈ，’Ｌｅｎｎｅｔｔｅ編
の［Ｍａｎｕａｌ　ｏｆｃ１１ｎｉｃａ１Ｍｉｃｒｏ’
ｂｉｏｌｏｇｙＪ　（１９８０）中の［１ｃｒｏ−ｄｉ
ｌｕｔｉｏｎ　Ｔｅ５ｔ　ｐｒｏｃｅａｕｒｅｓＪ　Ｔ
、Ｌ、　［）ａｖａｎ　ほかに記載されている。

各側を非水性溶媒に数分間懸濁してその化合物を滅菌す
るかまたは、その化合物が完全に水溶性である場合には
、その水性溶液を０．２〜０，４５マイクロメータ膜フ
イルタに通すことによシ滅菌する。

滅菌済み９６−ウェル微量希釈トレーの各ウェルに無菌
条件下に０．１−のＭｕｅｌｌｅｒ−Ｈ１ｎｔｏｎブロ
ス（抗細菌作用試験用）または酵母エキス−ｏプトンー
デキストロースまたは緩衝され補給された酵母窒素は−
ス（酵母または菌類に対する試験用）を充填する。

トレー第１列の８個のウェルの各々に供試化金物溶液の
り、　５　ｔｎｌ試料を添加する。微量希釈装置を用い
てこれらウェルの内容物を同時に混合しそしてアリコー
トを各々の後続のセル列に移して一連の連続希釈溶液を
得る。最終ウェル列は未処理のままとし、対照として用
いる。

プロスおよび供試化合物のはいった各ウェルに約１０マ
イクロリツトルの供試微生物接種物を接種する。最終列
のウェルのうち１個のウェル（供試化合物は含まない）
には接種せず、それを滅菌対照として用いる。トレーを
密封し、そして６７℃で１６〜２４時間（細菌の場合）
、あるいは２８℃で３６〜４８時間（酵母または菌類の
場合）インキュベートする。インキュベーションの間、
接種された培地を１００＝１４　Ｏｒｐｍで振盪して微
生物細胞と供試化合物との接触を高める。

インキュベーション時間の経過後、微生物増殖を阻止す
るのに必要な供試化合物の最低濃度を測定することによ
り各プ１／−トを評価しそ１゜て最低阻止濃度（ＭＩＤ
）として記録する。五（ＩＣ値が〈０、［１０５Ｔｎｇ
／７−０．５５５ｔｎｙ／−の場合は抗微生物活性を示
し、０．６３３〜１．０　Ｗ／ｍｌの値は限界的な活性
を示すものとみなし、そしてＭＩＤ値が〉１．０η／−
の場合は特定の微生物に対する活性の欠如を示すものと
みなす。

これら試験の結果を第１表に示す。

本発明化合物はまた、新生物増殖に対する細胞傷害活性
によって哺乳動物における新生物増殖の抑制にも有用で
ある。

試験管内における本発明の代表的化合物のＬ１２１０マ
ウス白血病セルラインに対する抗新生物活性を、Ｒ０■
、　Ｉ）ｅｒａｎほか、「Ｐｒ０ｔＯＯＯ１［］　ｆｏ
ｒＳｃｒｅｅｎｉｎｇ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ａｇｅｎｔ
ｓ　ａｎｃｌ　ＮａｔｕｒａｌＰｒｏａｕｃｔｅＡｇａ
ｉｎｓｔ　　Ａｎｉｍａｌ　　Ｔｕｍｏｒｓ　　ａｎｄ
　０ｔｈｅｒ　　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａ’ｉ８ｙｓｔｅｍ
ｓＪ第３版、Ｃａｎｃｅｒ　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ
　Ｒｅｐｏｒｔｓ　。

パート３．３巻、１〜８７頁（１９７２年）（その記載
を本明細書の一部として引用する）に詳述された方法を
用いて測定した。

二重の試験によって、細胞傷害活性は第２表に与えられ
るものであることが示された。工０５１１値はセルライ
ンの増殖を５０チ阻害するのに必要な化合物濃度である
。

第２表 Ｌ１２１０マウス白血病に対する試験管内細胞傷害活性
−Ａす１吻２櫂０便哩計−ｌ０ｓｏ−（マイクログラ合
とに９−３　　　　　　　　　０．１７ ５　　　　　　　　　０．１７ ７　　　　　　　　　０．６３ ８０．２４ １１　　　　　　　　　五４７ １６　　　　　　　　　０．３３ １８　　　　　　　　　　　　　０．２４マウスに移植
されたＰ３８８白血病セルラインに対する本発明の代表
的化合物の生体内抗新生物活性を前掲のＧθｒａｎほか
に記載のプロトコールに従って測定した。

０口重にマウスに腹腔内感染させた後、１〜９日目に記
載の投与量の供試化合物を投与した。

そのデータを第３表に示す。

抗微生物または抗新生物剤として用いるために、本発明
化合物は、相容性があり薬学的に許容しうる担体と共に
、所望の投与経路に適した剤形に処方される。かかる剤
形としては例えば経口投与用の固体剤形例えば錠剤、火
剤、粉末剤および顆粒剤、局所または経口投与用の液体
剤形例えば溶液、乳濁液、エリキシル、およびシロップ
、および非経腸投与に適した剤形例えば滅菌溶液、懸濁
溶液または乳濁液などが挙げられる。

本発明に記載の化合物から薬学的組成物を調製するだめ
の不活性な薬学的に許容しうる担体は固体または液体の
いずれであってもよい。固体剤形製剤には、粉末剤、錠
剤、回分散性顆粒剤、カプセル剤、カシェ剤および坐剤
が含まれる。固体担体は、希釈剤、香味付与剤、可溶化
剤、潤滑剤、懸濁剤、結合剤、または錠剤崩壊剤などと
しても働きうる１つ以上の物質であシ得るし、またそれ
はカプセル化材料でもあり得る。粉末剤の場合、担体は
微粉砕固体であシこれを活性化合物の微粉砕固体と混合
する。錠剤の場合、活性化合物を所要の結合特性を有す
る担体と適当な割合で混合しそして所望の形状および寸
法に圧縮する。粉末剤および錠剤は、好ましくは５また
は１０〜約７０チの活性成分を含有する。適当な固体担
体は炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タ
ルク、砂糖、ラクトース、はクチン、デキストリン、デ
ンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、
ナトリウムカルボキシメチルセルロース、低融点ワック
ス、ココア乳脂などである。「製剤」なる用語は、活性
化合物を担体としてのカプセル化材料と処方し活性成分
が（他の担体と共にあるいは他の担体を伴わずに）担体
（従ってそれと関連する）により包囲されているカプセ
ルとしたものを包含することを意味する。同様にカシェ
剤が包含される１１錠剤、粉末剤、カシェ剤およびカプ
セルは、経口投与に適した固体投与剤形として用いるこ
とができる。

坐剤の調製には、低融点ワックス例えば脂肪酸グリセラ
イド混合物捷たはココア乳脂をまず溶融し、そして活性
成分をその中に例えば攪拌により均質に分散させる。次
にその溶融された均質混合物を都合のよい寸法の成形型
に注ぎ、放冷しそしてそれによって固化させる。

液体剤形の製剤は溶液、懸濁液および乳濁液を含む。−
例としては、非経腸注射のだめの水または水−プロピレ
ングリコール溶液を挙げることができる。液体製剤はま
た水性ポリエチレングリコール溶液中の溶液として処方
することもできる。経口的に用いるのに適した水性溶液
は、活性成分を水に溶解しそして所望の適当な着色剤、
フレーバ、安定化剤および粘稠度付与剤を添加すること
によシ調製することができる。

経口的に用いるのに適した水性懸濁液は、微粉砕活性成
分を水中で粘稠材料、すなわち天然または合成ゴム、樹
脂、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセ
ルロース、およびその他の周知の懸濁剤を用いて分散す
ることによシ作ることができる。

更に、使用直前に経口または非経腸投与用液体剤形製剤
に変換すべく意図されている固体剤形製剤が包含される
。かかる液体剤形は溶液、懸濁液および乳濁液を包む。

これらの特別な固体剤形製剤は、極めて好都合には、ユ
ニット投与量剤形として提供されそしてそのまま１回分
の液体投与量ユニットを提供するのに用いられる。ある
いはまた、液体剤形に変換した後に、例えばシリンジ、
茶さじまたはその他の計量容器を用いて所定量の液体剤
形製剤を計ることによシー回分の液体投与量を多数回会
得られるように、充分な量の固体を付与してもよい。多
数回分の液体投与量をそのように調製する場合には、あ
りうる分解を遅らせるために該液体投与量の未使用部分
を低温に（すなわち冷蔵状態に）保つのが好ましい。液
体剤形への変換が意図される固体剤形は、活性物質のは
かに、香味付与剤、着色剤、安定化剤、緩衝剤、人工お
よび天然甘味料、分散剤、増粘剤、可溶化剤などを含ん
でいてもよい。液体剤形製剤の調製に用いられる液体は
、水、等張水、エタノール、グリセリン、プロピレング
リコールなど、およびそれらあ混合物であってもよい。

当然のことながら用いられる液体は投与経路を顧慮して
選択されることにたろう。例えば、多量のエタノールを
含有する液体製剤は非経腸的に用いるのには適していな
い。

好ましくは、薬学的製剤は、ユニット投与量剤形とする
。かかる剤形の場合、製剤は適当量の活性成分を含有す
るユニット投与量に分割される。ユニット投与量剤形は
、包装製剤が可能であり、個別量の製剤を含んだ包装、
例えば、小包装錠剤、カプセル剤、およびバイアルまた
はアンプル中の粉末剤などが可能である。ユニット投与
剤形はまた単独にカプセル剤、カシェ剤または錠剤であ
ることができ、あるいはこれらの任意のものを適当数包
装した剤形のものであることもできる。

ユニット投与量の製剤中の活性化合物量は、個々の適応
状態および活性成分の効力に従って０．１岬〜５００■
、好ましくは５〜１００ｑの範囲で変える。つまり調整
することができる。所望によシ、それら組成物は他の相
容性のある治療剤を含むことができる。

治療に用いる場合、７０Ｋｇの患者に対する哺乳動物用
投与量範囲は、１〜１５００η／〜体重／田好ましくは
２〜７５０１１１ｆ／Ｋｇ体重／日である。しかしなが
ら、それら投与量は患者の諸要件、治療される症状の軽
重、および使用化合物に応じて変えてもよい。特定の状
況に適した投与量の決定は当業者であれば容易に行い得
る。一般に治療は、その化合物の至適投与量よシも少い
低投与量から開始される。次いで、状況下に最適の効果
が得られるまで投与量を少しずつ高めていく。

便宜のために、所望により一日の総用量を分割して１日
に何回かに分けて投与してもよい。

抗微生物剤として用いるために、組成物の投与は、活性
成分濃度が抑制されるべき特定の微生物の最低の阻止に
必要な濃度を超えるように行われる。

哺乳動物における新生物増殖の阻害に用いるために、組
成物は、抑制されるべき特定の新生物組織の細胞傷害に
必要な最低濃度を超える日用量で腹腔内投与される。

当業者に本発明の実施を可能ならしむるために、以下に
実施例を記載する。これら実施例は、前記特許請求の範
囲によシ定義される本発明の範囲を制限するものではな
く、単にその例示として読まれるべきである。

実施例　１ ６−ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチ
ル−１−フェナジンカルボン酸メチルエステルの発酵生
産−５０リットル規模 ６−ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチ
ル−１−フェナジンカルボン産メチルエステルを生産す
る本発明の放線菌生物は、パージン諸島（ｔｈｅ　Ｖｉ
ｒｇｉｎ　１：ｓｌ、ａｎｄｓ）で採集した土壌試料か
ら得られた。この生物を無機塩例えば塩化ナトリウム、
炭酸カルシウム、硫酸マグネシウムおよび硫酸第一鉄、
炭素基質例えばグリセロール、および窒素源例えばＬ−
アルギニンを含む適尚な寒天培地を用いた標準的平板法
によシ前記土壌試料から単離した。前記生物を寒天培地
にブレーティングしそして好ましい温度特に６６℃でイ
ンキュベートして諸生物を増殖させた。

この微生物はストレプトマイセス・ガラノサ（ＮＲＲＬ
　１５７３８）と称される。本発明微生物と米国特許第
５．５５９．１６５号明細書に開示されたストレットマ
イセス・ロモンデンシス（ＮＲＲＬ　３２５２）の形態
学的特徴および炭素利用の比較がそれぞれ第４および５
表に示されている。

第４表 細胞壁装飾　　　　粗面〜いは状　　　とげ状ゼラチン
液化　　　陽性−褐色　　　　陽性−褐色ミルク凝固　
　　　陰性　　　　　　　−陰性ミルクはプトン化　陰
性−褐色色素　　陰性−淡褐色色素硝酸塩の還元　　　
陽性　　　　　　　陰性気中菌糸体　　工ＳＰ２　−ア
クア、グレイ色　　工ＳＰ２　−アクア・グレイ色より
Ｐ５　−わずかに白色　　　工ＳＰ３　−わずかにアク
ア・グレイ色 ■ＳＰ４　−アクア・グレイ色　　工８Ｐ４　−アクア
・Ｍ包丁ＳＰ５　−アクア・グレイ色　　工ＳＰ５　−
アクア・グレイ色Ｃ工Ｍ２３−アクア・グレイ色　　Ｃ
工Ｍ２３−アクア・グレイ色ｌ５Ｐ３　−パタースコッ
チ色　　工ＥＩＰ３　−かえで色■８Ｐ４−コーヒ惰　
　工ＥＩＰ４−暗褐色■ＳＰ５−オレンジさび色　　工
ｓｐｓ　　−暗赤色（ワイ閃り０’１Ｍ２３−クローブ
喝色　　　Ｃ工Ｍ２３−クローブ褐色第５表 Ｄ−フラクトース　　　　　　　　士　　　　　　　　
　　　　　　士り−ガラクトース　　　　　　　＋　　
　　　　　　　　　　やＤ−グル１−ス　　　　　　　
　　＋　　　　　　　　　　　　　十１−イノシトール
　　　　　　　＋　　　　　　　　　　　　十イヌリン
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　＋
十 マルトース　　　　　　　　　　　＋　　　　　　　　
　　　　　＋Ｄ−マンニトール　　　　　　＋　　　　
　　　　　十メロビオース　　　　　＋　　　　　　　
十ラフィノース　　　　　＋　　　　　　　十ラムノー
ス　　　　　　士　　　　　　　士すリシン　　　　　
　　−　　　　　　　−シュクロース　　　　　＋　　
　　　　　十り−キシロース　　　　　＋　　　　　　
　　千木発明の微生物であるストレプトマイセス・ガラ
ノサＮＲＲＩ、　１５７３８の培養物は、微生物寄託の
ためのブダペスト条約の条件の下に、米国農務省のｔｈ
ｅ　Ｎｏｒｔｈｅｒｎ　Ｒｅｇｉｏｎａｌ　Ｒｅ５ｅａ
ｒｃｈＩａｂｏｒａｔｏｒｙ（Ｐｅｏｒｉａ、工１１１
ｎｏＬｓ　６１６０４）に寄託され、そこではその永久
培養物コレクションに保存されている。この寄託はＩＪ
ＲＲＬ　１５７３８と表示されている。

この微生物はまた、凍結乾燥管、低温バイアル、および
土壌試料管中の休眠培養物としてｔｈｅ　Ｗａｒｎｅｒ
−Ｌａｍｂｅｒｔ／Ｐａｒｋｅ−Ｄａｖｉｓ　Ｃｕ１ｔ
ｕｒｅＣｏ１１ｅｃｔｉｏｎ（２８００Ｐｌｙｍｏｕｔ
ｈ　Ｒｏａｄ、Ａｎｎ　Ａｒｂｏｒ。

Ｍｉｃｈｉｇａｎ　４８１０５）に保存されており、そ
こではこの寄託の表示はＷＰ−４６１１である。

抗菌および抗腫瘍の両活性を示す化合物である６−ホル
ミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチル−１−
フェナジンカルボン酸メチルエステルは調節された条件
下での好気性発酵中に単離ＮＲＲＩ、　１５７３８によ
り単離しうる量で生産される。発酵培地は炭素源、窒素
源、無機物、および発育因子よりなる。適切た炭素源の
例はグリセロールおよび各種単糖類例えばグルコース、
マンノース、フラクトース、キシロース、リボース、ｔ
たはその他の炭水化物含有物質例えばデキストリン、で
んぷん、とうもろこし粉、および乳漿などである。培地
中の炭素源物質の通常の貴は一般に、約０．１〜１０重
量％の範囲で変化する。

培地に適した窒素源には、無機または無機−有機混合の
窒素化合物が含まれる。かかる物質の例は、綿実粉、大
豆粉、とうもろこし胚芽粉、コーシスチープリカー、蒸
留廃液、ピーナツ粉、Ｒゾトン化ミルク、および各種ア
ンモニウム塩などである。

発酵プロスへの無機物および発育因子の添加も単離され
たＮＲＲＬ　１５７！１８による６−ホルミル−４，７
，９−）ジヒドロキシ−８−メチル−１−フェナジンカ
ルボン酸メチルエステルの発酵生産を助長する。培地に
適した無機物の例は、燐酸二水素カリウム、塩化す）　
ＩＪウム、硫酸第一鉄、炭酸カルシウム、塩化コバルト
および硫酸亜鉛などである。発育因子は各種酵母および
ミルク副産物などの供給源により提供される。

本発明による６−ホルミル−４，７，９−）リヒＶロキ
シー８−メチルー１−フェナジンカルボン酸メチルエス
テルの好ましい生産方法は、単離されたＮＲＲＬ　１５
７３８による普通プロスの深部培養発酵による方法であ
る。本発明のこの態様によれば、発酵培地成分は懸濁液
として調製され、そして得られる懸濁液を好ましくは約
−Ｉ４〜ｐ＋（８の田値に調節される。次いで培地をオ
ートクレーブ処理またはスチーム加熱によシ滅菌し、１
６〜４５℃の適温まで冷却し次いで微生物を接種する。

次に、通気および攪拌を行いながら、単離しうる量の６
−ホルミル−４，７，９−トリヒドロキシ−８−メチル
−１−７エナジンカルボン酸メチルエステルが生産され
るまで（これらの条件下では通常２〜１０日以内）発酵
を行う。

深部培養法の場合には、振盪フラスコまたは静止タンク
発酵装置で発酵が行われる。振盪フラスコの場合、フラ
スコを振盪することによシ通気を行って接種された培地
を空気と十分混合する。静止タンク発酵装置の場合、デ
ィスク・タービン、羽根付きディスク、オープン・ター
ビンまたは船舶用ヲロはうの形の羽根車によシ攪拌を与
える。通気は、攪拌中に発酵混合物中に空気または酸素
を吹き込むことによって与えられる。

休眠状態の単離されたＮＲＲＬ　１５７３８を、滅菌０
１Ｍ　２３培地を含む寒天斜面管に移し、そして２８℃
で７〜１４日間インキュベートした。

第６表 Ｃ工Ｍ　２３培地の組成 Ａｍ１ｄｅｘコーンスターチ　　　　　　　２０ＦＮ−
Ｚアミン、タイプＡ　　　　　　　　　　２ｆ肉エキス
（ＤｉｆＱＯ）　　　　　　　　　　　　１　ｆ酵母エ
キス（Ｄｉｆｃｏ）　　　　　　　　　　　１　ｆ塩化
第一コバルト六水和物　　　　　　２０ｗＩｔ寒　　天
　　　　　　　　　　　　　　　　２０Ｆ蒸留水　　　
　　　　　１０００ｍ 得られた微生物増殖の一部を用いて５−の５Ｄ−０５培
地を入れた１８×１５０ｗ１管に接種する。

シード管培養物を旋回振盪機を用いて１７０ｒｐｍ。

３６℃で３〜４日間振盪した。

第７表 ５Ｄ−０５培地の組成 酵母エキス（Ａｍｂｅｒｅ＋ｃ　１００３）　　　　　
　　５　Ｗ釉−スー水和物（セレロース）１ｆ 噴霧乾燥肉可溶物（Ｄａｙｌｉｎ　Ｌａｂｓ）　　　　
　　３　ｆ炭酸カルシウム　　　　　　　　　　　　　
２１蒸　　留　　水　　　　　　　　　　　　１０００
ｄシード管での微生物増殖の一部（１−）を２５−のＰ
Ｍ−１２選択培地を含む３８Ｘ２［１０箭振盪管に移し
た。ＰＭ−１２選択培地は、デキス）　ＩＪン１重量％
および大豆粉、粉砕黄色コーン、粉砕小麦、コーン・グ
ルテン粉、小麦中等品、（ｗｈθａｔｍｉｄｄｌｉｎｇ
ｓ　）、乾燥ミルク製品、ＢＴ（Ａで保存された動物性
脂肪、粉砕ビート・クルゾ、炭酸カルシウム、シュクロ
ース、脱水アルファルファ粉、燐酸二カルシウム、ビー
ル酵母、塩、ビタミンＢＴ２補給剤、リボフラビン補給
剤、）ぐントテン酸カルシウム、ナイアシン、コリンク
ロライド、マナジオンナトリウムパイケルファイト（ビ
タミンに活性源）、葉酸、塩酸ピリドキシン、チアミン
、アスコルビン酸、ビタミンＡ補給剤、ビタミンＤ活性
化動物ステロール（ビタミンＤ５源）、ビタミンＥ補給
剤、炭酸鉄、硫酸鉄、沃素酸カルシウム、酸化第一マン
ガン、酸化銅、炭酸コバルト、および酸化亜鉛を包含す
る飼料級混合物１重量％からなる。

接種された振盪管を旋回振盪機を用いて３３℃、１７０
ｒｐｍ（５ｃＩｎスロー（ｔｈｒｏｗ））で３日間イン
キュベートした。６−ホルミル−４，７，９−）ジヒド
ロキシ−８−メチル−１−フェナジンカルボン酸メチル
エステルの生産は発酵ブロスを大腸菌（ＦＤ−０８００
０）に対しスクリーニングすることによりモニターされ
た。

大腸菌（ＦＤ−０８０００）を寒天平板上に接種し、そ
して発酵ビールで含浸された６、　３５　＋ｎｍ　径深
−ノ”−・ディスクをその接種された培地に載置シフ、
そして３７℃で一夜インキユベートした。それらペーパ
ー・ディスクの周囲の阻止帯域直径は、発酵ブロス中の
６−ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチ
ル−１−フェナジンカルポン酸メチルエステルの相対的
濃度を示した。

単離されたＮＲＲＬ　１５７３８を用いて、６００ｍｅ
のＳＤ−［１５培地を含む２リツトル容、バッフル付き
エルレンマイヤーフラスコに接種り、り。フラスコ内容
物を３３℃で６５〜７５時間インキュベートした。得ら
れる微生物増殖を用いて６０リツトル容の攪拌ジャー・
ファーメンタ−に入れた１６リツトルのＳＤ−［１５培
地に接種した。攪拌ジャーの内容物を攪拌しながら、そ
して１容／容／分の速度で空気を吹込みながら３６℃で
２４時間インキュベートした。得られる微生物増殖を用
いて４個の生産規模攪拌ジャー・ファーメンタ−に接種
した。

各々約１６リツトルのＰＭ−１２培地を含む４個の３０
リツトル容の攪拌ジャー・ファーメンタ−を、１２１℃
で９０分間オートクレーブ処理することによって滅菌し
た。次にジャー内容物を３３℃に冷却し、次いで前述の
パッチからの接種物８００−を接種した。次いで４個の
ジャーを、攪拌しながらそして１容／容／分の速度で空
気を吹込みながら６６℃で６日間インキュベートした。

この発酵全体を通して、前述の如き大腸菌（ＩＰＤ−０
８０００）に対するアッセイによジローホルミル−４，
７，９−トリヒドロキシ−８−メチル−１−フェナジン
カルボン酸の生産をモニターした。これらアッセイの結
果を第８表に示す。

第８表 ６−ホルミル−４，７，９−トリヒドロキシ−８−メチ
ル−１−７エナジンカルボン酸メチルエステルの発ＦＩ
Ｅ産の微生物アッセイ ジャー１ ５０　　　６．４　　　　　４．７　　　　２３７１　
　　７．２　　　　　４．７　　　　２５ジヤー２ ７１　　　７．２　　　　　５．３２５ジヤー３ ７１　　　７．０　　　　　４．０　　　　２３ジヤー
４′ 実施例　２ ６−ホルミル−４，７，９−トリヒドロキシ−８−メチ
ル−１−７エナジンカルボン酸メチルエステルの発酵生
産−５００［］　！７ツトル規模約１ｍ７！のストレゾ
トマイセス・ガラノサＮＦＩＴ（、Ｌ１５７３８培養物
を含む低温保存（ｃｒｙｏｇｅｎｉｃａｌｌｙｐｒｅｓ
ｅｒｖｅｄ）　試料を用いて、２リツトル容のバッフル
付振盪フラスコに入れた６００−の５Ｄ−０５シード培
地に接種した。接種されたフラスコ内容物を、旋回振盪
機を用いてｊ　３　Ｄ　ｒｐｍで振盪しながら３３℃で
７２時間インキュベートした。

７２時間後、シードフラスコの内容物を無菌的に３０リ
ツトルのシード培地に移した。接種されたファーメンタ
−内容物を、３００ｒｐｍで攪拌しながら、かつ１容／
容／分の速度で空気を吹込みながら６３℃で２８時間イ
ンキュベートした。

前記ステンレス鋼製ファーメンタ−からの微生物増殖を
用いて２００ガロン（７５７リツトル）容のステンレス
鋼ファーメンタ−に入れた７５ガロン（２８４リツトル
）の８Ｄ−０５シード培地に接種した。その培地を１２
１℃で４０分間スチーム加熱することにより滅菌した後
、ファーメンタ−と内容物を３３℃に冷却しそして約１
５リツトルの前記微生物含有ブロスを接種した。得られ
た混合物を、１５５ｒＴ）ｍで攪拌しながらかつ約０．
７５容／容／分の速度で空気を吹込みながら３３℃で２
３時間インキュベートした。

２３時間後、前記２００ガロン容ファーメンタ−からの
微生物増殖を用いて２０００　ｆｉロン（７５７１リツ
トル〕容ステンレス鋼ファーメンタ−に入れた１３０［
Ｊガロン（４９２１リットル７）のＰＭ−１３普通培地
に接種した。

第９表 硫酸アンモニウム（Ａ１１１ｅｄ　Ｃｈｅｍ１ｃａ’ｌ
）　　　０．１％炭酸カルシウム（Ｐｆｉｚｅｒ　）　
　　　　　　　０．４　ｑｂファル−ｒメディア（Ｔｒ
ａｄｅｒｓ　Ｐｒｏｔｅｉｎ）　　　２．０％セレロー
ス（Ａｔｌａｓ　Ｓｕｇａｒ）　　　　　２．０％マル
トリン（Ｇｒａｉｎ　Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ）　　　２
．０％ｐＨ調整なし 接種に先立ち、この培地をスチームを用いて１２１℃で
４０分間加熱することにより滅菌した。

滅菌後、ファーメンタ−および内容物を３３′Ｃに冷却
し、接種し、そして１２５　ｒｐｍで攪拌しながらかつ
０．７５容／容／分の速度で空気を吹込みながら３３℃
で２７時間インキュベートした。

実施例１と同様にして％ｌ）Ｈ％沈降値、および大腸菌
（ｐＤ−０８０００）の増殖阻止を周期的に測定するこ
とにより、発酵過程を追跡した。更に、１：５０および
１：２５０の希釈１０合において発酵ブロスがＬ１２１
０マウス白血病細胞の試験管内増殖を阻止する能力を発
酵の過程のいくつかの時点で測定した。これらの結果を
第１０表に示す。

−１０４一 実施例　３ ６−ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチ
ル−１−フェナジンカルボン酸メチルエステルの単離 前記実施例２からの未沖過ビール（４７６３１Ｊツトル
）を５０％硫酸でｐＨ３，Ｑに調節した。セライト（Ｃ
θ１ｉｔｅ）５４５（６６０〜）を添加し、そしてその
混合物を３０３０１Ｊツトルの酢酸エチルと共に１時間
攪拌した。更に硫酸を添加してｐ）Ｔを５．０に維持し
た。次にその混合物を濾過し、そしてフィルターケーク
を酢酸エチル３８０リツトルずつで２回洗浄した。Ｐ液
と洗浄液を合一し、そして上方の酢酸エチル層を６３７
リツトルまで真空濃縮した。この濃縮液を一２０℃で６
５時間貯蔵した。生じた沈殿を涙取し、３リツトルの酢
酸エチル、４リツトルのメタノールおよび最後に２５５
リツトルのクロロポルムで洗浄して残留する固体を真空
乾燥した。この部分結晶性生成物（１５５Ｆ　）を１８
リツトルのクロロホルム：メタノール（９：１）から再
結晶して６３ｆの結晶性６−ホルミル−４，，７，，９
−トリヒドロキシ−８−メチル−１−フェナジンカルボ
ン酸メチルエステルを得た。母液を濃縮および冷却して
更に２３Ｆの結晶生成物を得た。

この生成物を、４．１（より）ｘ２５０　ｍＰＲＰ　−
１カラム（Ｈａｍｉｌｔｏｎ　’Ｃｏ、製）および零時
点における０、０２５ＭｐＨ９，５ボレート緩衝液ニア
セトニトリル：メタノール（９０：５：５）から、２．
０ＷＩ７！／分の流速で７分間にわたる［ＬＯ２５Ｍｐ
Ｈ９，５ボレート緩衝液ニアセトニトリル：メタノール
（７０：２５：５）までの直線濃度勾配よりなる移動相
を用いた高圧液体クロマトグラフィ（ＨＰＬり法により
分析した。この系における生成物の保持時間は五５分で
あ４゜ 実施例　４ ６−ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチ
ル−１−フェナジンカルボン酸メチルエステルカリウム
塩（フェルレート塩）の製造６−ホルミル−４，７，９
−）リヒドロキシー８１−メチルー１−フェナジンカル
ボン酸メチルエステルＣ６Ｂ、２岬、０．２０８ミリモ
ル）を５−の水に懸濁させ、そして水α５ｔｎｌ中の０
．４１６ミリモルの水酸化カリウムの溶液を添加した。

得られた赤色溶液を凍結乾燥して７４．４＋＋ｖの６−
ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチル−
１−フェナジンカルボン酸メチルエステルカリウム塩を
赤さび色の固形物として得た。

実施例　５ ６−ＣＣＣ２−Ｃジメチルアｔノ）エチル〕イミノ〕メ
チル）　−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチル−
１−フェナジンカルボン酸メチルエステルの製造 ６−ホルミル−４，７，９−トリヒドロキシ−８−メチ
ル−１−７エナジンカルボン酸メチルエステル（５ａＯ
岬、１．５２ミリモルノを５０−のテトラヒドロフラン
に懸濁し、そして２−（ジメチルアミノ）エチルアミン
（１６０■、１．８５ミリモル）を攪拌しながら滴加し
て深紫色溶液を得た。室温で約２０分間後、橙色の沈殿
が生成し、そして反応混合物は徐々に橙色を呈した。

橙色の粗生成物を戸別し、テトラヒドロフランで洗浄し
、そして真空乾燥して４８０１１ｖ（８０，３％）の６
−［Ｃ（２−（ジメチルアミノ）エチル〕イミノ〕メチ
ル−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチル−１−フ
ェナジンカルボン酸メチルエステルを得た。前記実施例
５に記載の）ＪＰＬＣ系および方法を用いた場合のこの
生成物の保持時間は５，２分であった。

実施例　６ ６−（Ｃ（２−（ジメチルアミノ）エチル〕イミノ〕メ
チル）　−４，７，９−トリヒドロキシ−８−１’ｆル
ー１−７エナジンカルボン酸メチルエステル、メタンス
ルホネート塩の製造 ６−〔（［２−（ジメチルアミノ）エチル〕イミノ〕メ
チル〕−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチル−１
−フェナジンカルボン酸メチルエステル（４６８■、１
．１７７ミリモル）を２０ゴの水中でメタンスルホン酸
（１２５！、１．３ミリモル）と共に溶解が完了するま
で室温で攪拌した。

その溶液を水で希釈し、そして凍結乾燥して得られた粗
製メタンスルホネート塩をイソプロピルアルコールで洗
浄し、濾過した。固形残留物を水に溶解しそして凍結乾
燥して４２５ｒｎｇの精製塩を得た。

実施例　７ Ｎ−（：２−（ジメチルアミノ）エチル〕−６−（Ｃ［
２−（ジメチルアミノ）エチル〕イミノ〕メチル３−４
．７．９−　）ジヒドロキシ−８−メチル−１−フェナ
ジンカルボキサミドの製造６−ホルミル−４，７，９−
）ジヒドロキシ−８−メチル−１−フェナジンカルボン
酸メチルエステル（１，Ｏｆ、３［１５ミリモル）を５
０−の無水Ｎ、Ｎ−ジメチルエチレンジアミン（Ａｌｄ
ｒｉｃｈＣｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ、製）に溶解し、そし
て窒素雰囲気下に５５℃で１４５分間攪拌した。反応過
程を実施例３に記載の高圧液体クロマトグラフィ（ＨＰ
ＬＣ）法により追跡した。

反応完了後、過剰のＮ、Ｎ−ジメチルエチレンシアぐン
を真空蒸発させ、そして残留物を１５０−の水に溶解し
た。この溶液のｐＨを酢酸で４．５に調節し、そして得
られた溶液を予め０．０７５Ｍ酢酸アンモニウム緩衝液
（ｐＨ４，５）で平衡させた３００ｔｄのＤｉａｉｏｎ
　ＨＰ−２０樹脂（三菱化成工業株式会社製〕でのクロ
マトグラフィにかけた。

カラムを６００−ずつの酢酸アンモニウムｌｆｌ　％Ｔ
Ｒ液で２回洗浄し、次いで緩衝液中の５％、１０係およ
び１５％アセトニトリル２００−ずつを用いて溶出した
。溶出液をＨＰＬＣによりアッセイし、そして生成物を
含むものを合一しそしてアセトニトリルを真空蒸発によ
り除去した。残った溶液を凍結乾燥した。凍結乾燥物を
クロロホルム１０［１ｍｔスつで２回磨砕した。そのク
ロロホルム溶液を濾過し、そして水１０Ｄｍｔずつで２
回抽出した。水性抽出液を合一し、過剰クロロホルムを
蒸発により除去し、そして水性溶液を凍結乾燥して９８
６ｒＩ１ｇ（２，５１ミリモル、７５．７％）のＮ−〔
２−（ジメチルアミノ）エチル３−６−ＣＣＣ２−〔ジ
メチルアミノ〕エチル〕イミノ〕メチル〕−４，７，９
−トリヒドロキシ−８−メチル−１−フェナジンカルボ
キサミドを暗赤色の吸湿性粉末として得た。前記実施例
３に記載のＨＰＬＣ系および方法を用いた場合、この生
成物の保持時間は５．６分であった。

実施例　８ Ｎ−１ｍ２−（ジメチルアミノ〕エチル〕−６−ホルミ
ル−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチル−１−フ
ェナジンカルボキサミドの製造Ｎ−（２−（ジメチルア
ミノ〕エチル〕−６−Ｃ［：［２−（：）メチルアミノ
）エチル〕イミノ〕メチル）　−４，７，９−トリヒド
ロキシ−８−メチル−１−７エナジンカルボキサミド（
２５２■、０．５９ミリモル）を５０ｄの０．３Ｍ水性
塩酸に溶解した。その混合物を５５℃で６時間攪拌し、
そして反応過程を前述のＨＰＬＣ法により追跡した。

反応完了後、その混合物を５０−の１０％塩化ナトリウ
ム溶液および５０　ｍｌの１．０　Ｍ　燐酸ナトリウム
緩衝液（ｐＨ７，０）で希釈し、そして１−ブタノール
Ｓ　Ｄ　ｔｎｅずつで２回抽出した。

ブタノール抽出液を合一し、そして２０７の水で洗浄し
た。その抽出液を次に真空濃縮して過剰の水を除きそし
て一２０℃まで１８時間冷却した。生じた生成物の深赤
色結晶を沢取して１６０η（０，４２ミリモル、７１％
）のＮ−［２−（ジメチルアミノ）エチルツー６−ホル
ミル−４，７，９−トリヒドロキシ−８−メチル−１−
フェナジンカルボキサミド、ｍ９２２５０℃、を得た。

前述の実施例３に記載のＨＰＬＣ系および方法を用いた
場合の保持時間は４．６分であった。

実施例　９ Ｎ−Ｃ２−Ｃジメチルアミノ〕エチル〕−６−ホルミル
−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチル−１−フェ
ナジンカルボキサミド、メタンスルホネート塩の製造 Ｎ−Ｃ２−Ｃジメチルアミノ）エチルツー６−ホルミル
−４，７，９−トリヒドロキシ−８−メチル−１−フェ
ナジンカルボキサミド（５，７５ｔ１（Ｌ０１５モル）
を１０３−の０．１５Ｍメタンスルホン酸（Ｔｈｉｏｋ
ｏｌ／Ｖｅｎｔｒｏｎ）に溶解して得られた透明赤色溶
液を凍結乾燥した。得られた橙赤色固形物を焼結ガラス
漏斗に移し、そして３容量（１００，７５および１００
ｔｄ）のイソプロピルアルコールで洗浄した。次に固形
残留物を１５０−の水に再溶解し、濾過し、そして凍結
乾燥して６．７３　ｆ（９４％）のメタンスルホネート
塩を橙色固形物として得た。

実施例　１Ｏ Ｎ−Ｃ２−（ジメチルアミノ）エチルツー６−ホルミル
−４，７，９−トリヒドロキシ−８−メチル−１−７エ
ナジンカルボキサミドメクンスルホネート塩の別の塩形
態への変換 前記実施例９で製造したメタンスルホネート塩を水に溶
解し、そして水に溶解し、ｐＨを水性ＮａＯＨで５．５
に調節する。５℃で一夜冷却後、溶液から結晶する遊離
塩基形態のものを炉果し、アセトニトリルで洗浄し、そ
して真空乾燥する。

このように形成された生成物を次に１当量の所望の酸例
えば塩酸、グルコン酸などを含む水性溶液で処理し、そ
して凍結乾燥して新しい塩形態を製造する。

実施例　１１ ６−ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチ
ル−１−フェナジンカルボン酸の製造６−ホルミル−４
，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチル−１−フェナジ
ンカルボン酸メチルエステル（５００■、１．５２ミリ
モ／Ｌ／）を２０−の１Ｍ水性水酸化す）　ＩＪウム溶
液に懸濁し、そして６０℃で１．２時間攪拌した。

反応混合物を濃塩酸の滴加により酸性化し、そして生成
した沈殿を沖果した。残留物を酢酸エチル：メタノール
に部分溶解しそして混合物を沖過した。室温で放置して
生じる６−ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−８
−メチル−１−フェナジンカルボン酸の結晶を炉果した
。

酢酸エチル：メタノールに溶解しなかった残留物を沸騰
クロロホルム：メタノールに溶解しそして溶液を濾過し
た。冷却時にそのクロロホルム：メタノール溶液から生
じる６−ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−
メチル−１−フェナジンカルボン酸をＦ果した。

結晶の２つの収穫物を合一して１５０りの酸を得た。前
記実施例３のＨＰＬＣ系および方法を用いた場合の保持
時間は、１．０分であった。

実施例　１２ ６−ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−１−フェ
ナジンカルボン酸の製造 米国特許第３，３５９．１６５号に記載の如くして製造
された６−ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−１
−フェナジンカルボン酸メチルエステル（４００■、１
．２７ミリモル）を４０−の１Ｍ水性水酸化ナトリウム
溶液に溶解し、２５℃で１４５分間攪拌し、そして前記
実施例３に記載したような高圧液体クロマトグラフィ法
により反応をモニターした。加水分解の完了後、１ＭＨ
ｃｔの添加により溶液をｐＨ２，５に調節したところ、
粗製６−ホルミル−４，７，９−トリヒドロキシ−１−
７エナジンカルボン酸の赤色沈殿が生じた。

１５分後、沈殿をＰ集し、水洗しそして乾燥させた。そ
の粗製の酸を２００ｍ１の１：１クロロホルム：メタノ
ールから再結晶せしめて２８２１Ｍｇ（０，９４ミリモ
ル、７４％）の６−ホルミル−４，７，９−）　ジヒド
ロキシ−１−フェナジンカルボン酸を得た。前記実施例
３に記載のＨＰＬＣ系および方法を用いた場合の保持時
間は、１．６分であった。

実施例　１６ Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル〕−６−［［Ｃ２
−（ジメチルアミノ〕エチル〕イミノ〕メチル〕−４，
７，９−）ジヒドロキシ−１−フェナジンカルボキサミ
ドの製造 ６−ホルミル−４，７，９−トリヒドロキシ−１−７エ
ナジンカルボン酸（５２０Ｗｒ、　１．７３ミリモル）
を１５−の乾燥ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ　）に懸
濁し、そしてＤＭＦ　４　ｔｄに溶解した１、１′−カ
ルボニルジイミダゾール（７００■、４．３２ミリモル
）を添加した。その反応混合物を透明溶液となるまで２
５℃で２０分間攪拌した。次にその溶液を水浴で冷却し
、そしてＮ、Ｎ−ジメチルエチレンジアミン（０−６＋
＋＋１を添加した。２５℃で１５分間授拌後、過剰の反
応剤を真空除去してＮ　−Ｃ２−（ジメチルアミノ）エ
チル〕−６−［：［（２−（ジメチルアミノ）エチル〕
イミノ〕メチル）　−４，７，９−トリヒドロキシ−１
−７エナジンカルボキサミドを得た。前記実施例乙に記
載のＨＰＬＣ系におけるこの生成物の保持時間は５．０
分であった。

実施例　１４ Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル〕−６−ホルミル
−４，７，９−トリヒドロキシ−１−７エナジンカルボ
キサミドの製造 前記実施例１３で製造されたイミンアミドを４２５−の
水に溶解し、そしてそのｐＨを塩酸で６．５に調節した
。４５℃に加熱後、４５艷の濃塩酸を徐々に添加し、そ
してその溶液を４５℃で８０分間攪拌し、冷却し、そし
て酢酸エチルで３回抽出した。下方の水性相を真空濃縮
して残留有機溶媒を除去し、次いでＩＤＯｍｇのＤｉａ
ｉｏｎ　ＨＰ−２０樹脂でのクロマトグラフィにかけた
。そのカラムを５００ｄのＱ、ＱｊＭＨＣ／！、で洗浄
し、次いでアセトニトリル：　０．０１　Ｍ　ＨＣｌ　
（１：　１　）で溶出した。溶出液（５０ｍｌ）を５０
−のアセトニトリル：水（１：１）で希釈し、そして１
Ｍ水性ＮａＯＨでｐＨを５．５に調節し、そして５℃に
冷却した。１８時間後に、生成した赤色沈殿を炉別し、
水およびアセトニトリルで洗浄し、そして真空乾燥して
５３０ｑのＮ−ｆ：２−（：）メチルアミン）エチルツ
ー６−ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−１−フ
ェナジンカルボキサミドを得た。これハ熱クロロホルム
−メタノール（１：１）から再結晶することにより更に
精製することができた。

前記実施例３に記載のＨＰＬＣ系におけるこの生成物の
保持時間は、２．９分であった。

実施例　１５ Ｎ−［２−（ジエチルアミノ〕エチル〕−６−（（（２
−（ジエチルアミノ〕エチル〕イミノ〕メチル〕−４，
７，９−トリヒドロキシ−８−メチル−１−７エナジン
カルポキサミドの製造６−ホルミル−４，７，９−）ジ
ヒドロキシ−８−メチル−１−フェナジンカルボン酸メ
チルエステル（１，０２ｆ、！１．０２ミリモル）を５
０−の２−（ジエチルアミノ）エチルアミンと共に６５
℃で２時間攪拌した。前述の系のＨＰＬＣ分析による測
定により反応が完了したら、過剰のアミンを真空下に除
去して、Ｎ−（２−（：）エチルアミノ）エチル］−６
−［（（２−（ジエチルアミン）エチル〕イミノ〕メチ
ル）−４，７，９−）リヒドロキシー１−７エナジンカ
ルボキサミドを得た。前記実施例６に記載の系を用いた
場合のこの生成物の保持時間は、６．０分であった。

実施例　１６ Ｎ−［：２−（ジエチルアミノ）エチル］−６−ホルミ
ル−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチル−１−フ
ェナジンカルボキサミドの製造実施例１５のイミンアミ
ド生成物を５０−の水に溶解しそして攪拌しながら５５
℃に加熱した。濃塩酸（６ゴ）を滴加し、そしてその混
合物の温度を徐々に７２℃に上げた。ＨＰＬＣ分析の示
すところによればイミン官能部の加水分解は２時間後に
本質的に完了した。その反応混合物を更に１時間加熱し
、次いで氷冷して黄色沈殿として得られる生成物をＦ集
した。

固形残留物を０．０１　ＮＨＣｌ（５ｍ）に溶解し、そ
して（予め０．０１　ＮＨＣｌ　テ平衡した）Ｈｐ−２
０テ（Ｄクロマトグラフィにかけた。そのカラムを０．
ｏｌＮ　ＨＣｔ（２Ｄ　０ｍ１）で洗浄し、そして水ニ
アセトニトリル（９：１．１０［］ｔ／）および水ニア
七トニトリル（１：１、ＩＤＯｍｇ）で溶出した。生成
物を含有する溶出液を合一し、真空濃縮後凍結乾燥して
９２５ｑのＮ−［２−（：）メチルアミン）エチルツー
６−ホルミル−４，７，９−トリヒドロキシ−１−フェ
ナジンカルボキサミドを得た。前記実施例３に記載のＨ
ＰＩＪＣ系におけるこの生成物の保持時間は４．５分で
ある。

実施例　１７ Ｎ−［３−（ジメチルアミノ）プロピル〕−６−（（［
：３−（：）メチルアミノ）プロピル〕イミノ〕メチル
）　−４，７，９−トリヒドロキシ−８−メチル−１−
７エナジンカルボキサミドの製造 ６−ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチ
ル−１−フェナジンカルボン酸メチルエステル（１，１
０７ｆ、３．２７ミリモル）を５０９の３−（ジメチル
アミノ）プロピルアミン（ＡｌｄｒｉｃｈＣｈｅｍｉｃ
ａｌ　Ｃｏｍｐａｎｙ製）と共に６０℃で１．５時間攪
拌した。次にその反応混合物を冷浴中で２０分間冷却す
ると、粗製のイミンアミド生成物が溶液から沈殿した。

その沈殿固形物をヂ果しそして５０ｍｇのアセトニトリ
ルで洗浄した。前記実施例３に記載のＨＰＬＣ系および
方法を用いた場合のこの生成物の保持時間は４．６分で
あった。

実施例　１８ Ｎ　−（３−（ジメチルアミノ）プロピルツー６−ホル
ミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチル−１−
フェナジンカルボキサミドの製造実施例１７のイミンア
ミドの水性溶液（５０−）を窒素雰囲気下に攪拌する一
方、２−の濃塩酸を滴加した。８時間の間に更に８−の
濃塩酸（全部で１０ｄ）を添加した。その反応混合物を
次に水浴中で冷却し、そしてその溶液を塩化ナトリウム
で飽□和させて沈殿を誘導した。沈殿したアミドをＰ集
し、アセトニトリルおよび水の順で洗浄した。残留橙色
固形物を水に溶解しそしてＨｐ　−２０樹脂（５０ｍ、
予め１０１Ｎ　’ＨＣＡで平衡しておく）でのクロマト
グラフィにかけた。

そのカラムを０．０１ＮＩ（Ｃｔで洗浄し、次いで０．
０１Ｎ　ＨＣｌ　ニアセトニトリル（１：１）で溶出し
た。

溶出液を水性ＮａＯＨでＴ）Ｈ５，５に調節し、真空濃
縮してアセトニトリルを除去し、次いで凍結乾燥して５
３０■のＮ−Ｃ３−（ジメチルアミノ〕プロピル〕−６
−ホルミル−４，７，９−）ジヒドロキシ−８−メチル
−１−フェナジンカルボキサミドを得た。前記実施例３
に記載のＨＰＬＣ系を用いた場合のこの生成物の保持時
間は、３．６分である。

特許出願人　　ワーナーーランバート・コンパニー−１
２５−外２名

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）構造式 I ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中Ｒ＿１は水素またはメチルであり；Ｒ＿２は酸素
   または＝Ｎ−Ｙ−ＮＲ＿４Ｒ＿５（式中Ｙは場合により
   ヒドロキシルで置換される１〜６個の炭素原子を有する
   直鎖状または分枝状アルキレン基またはシクロヘキシル
   であり；Ｒ＿４およびＲ＿５は独立して水素、場合によ
   りヒドロキシルで置換される１〜４個の炭素原子を有す
   るアルキルである）であるか；あるいはＲ＿２は＝Ｎ（
   ＣＨ＿２）＿ｎ−Ｗ（式中ｎは０〜４に等しく、そして
   Ｗはピロリジニルまたはピペリジニル環であり該環は場
   合により１〜４個の炭素原子を有するアルキルで置換さ
   れており該アルキルは更にヒドロキシルにより置換され
   ていてもよい）であり；Ｒ＿３はヒドロキシ、１〜４個
   の炭素原子を有するアルコキシ、または−ＮＨ−Ｙ′−
   ＮＲ＿４′Ｒ＿５′（式中Ｙ′は場合によりヒドロキシ
   ルで置換される１〜６個の炭素原子を有する直鎖状また
   は分枝状アルキレン基またはシクロヘキシルであり；そ
   してＲ＿４′およびＲ＿５′は独立して水素、場合によ
   りヒドロキシルにより置換される１〜４個の炭素原子を
   有するアルキルである）であるか；あるいはＲ＿３は−
   ＮＨ（ＣＨ＿２）＿ｎ＿′−Ｗ′（式中ｎ′は０〜４に
   等しく、そしてＷ′はピロリジニルまたはピペリジニル
   環であり該環は場合により１〜４個の炭素原子を有する
   アルキルで置換されており該アルキルは更にヒドロキシ
   ルにより置換されていてもよい）であり；ただし （ａ）Ｒ＿２が＝Ｎ−Ｙ−ＮＲ＿４Ｒ＿５でありかつＲ
   ＿３が−ＮＨ−Ｙ′−Ｒ＿４′Ｒ＿５′である場合には
   、基ＹおよびＹ′は同じであるかまたは相異なつてもよ
   く、Ｒ＿４およびＲ＿４′は同じであるかまたは相異な
   つてもよく、そしてＲ＿５およびＲ＿５′は同じである
   かまたは相異なつてもよいか、あるい はＲ＿２が＝Ｎ−（ＣＨ＿２）＿ｎ−ＷでありかつＲ＿
   ３が−ＮＨ−（ＣＨ＿２）＿ｎ＿′−Ｗ′である場合に
   は、ｎおよびｎ′は同じであるかまたは相異なつてもよ
   く、また （ｂ）Ｒ＿１が水素でありかつＲ＿２が酸素である場合
   にはＲ＿３はヒドロキシまたはアルコキシであつてはな
   らない〕 を有する化合物およびその薬学的に許容しうる塩。 ２）Ｒ＿１が水素である特許請求の範囲第１項記載の化
   合物。 ５）Ｒ＿１がメチルである特許請求の範囲第１項記載の
   化合物。 ４）Ｒ＿２が酸素である特許請求の範囲第２項記載の化
   合物。 ５）Ｒ＿２が＝Ｎ−Ｙ−ＮＲ＿４Ｒ＿５（式中Ｙはシク
   ロヘキシルまたは１〜６個の炭素原子を有する直鎖状ま
   たは分枝状アルキレン基であり、そしてＲ＿４およびＲ
   ＿５は独立して水素、場合によりヒドロキシルで置換さ
   れる１〜４個の炭素原子を有するアルキルであるか；あ
   るいはまたＲ＿２が＝Ｎ（ＣＨ＿２）＿ｎ−Ｗ（式中ｎ
   は０〜４に等しく、またＷはピロリジニルまたはピペリ
   ジニル環であり該環は場合により１〜４個の炭素原子を
   有するアルキルで置換され、該アルキルは更にヒドロキ
   シルにより置換されていてもよいである特許請求の範囲
   第２項記載の化合物。 ６）Ｒ＿２が酸素である特許請求の範囲第３項記載の化
   合物。 ７）Ｒ＿２が＝Ｎ−Ｙ−ＮＲ＿４Ｒ＿５（式中Ｙはシク
   ロヘキシルまたは１〜６個の炭素原子を有する直鎖状ま
   たは分枝鎖状アルキレン基であり、そしてＲ＿４および
   Ｒ＿５は独立して水素、場合によりヒドロキシルで置換
   される１〜４個の炭素原子を有するアルキルである）で
   あり；あるいはまたＲ＿２が＝Ｎ（ＣＨ＿２）＿ｎ−Ｗ
   （式中ｎは０〜４に等しく、そしてＷはピロリジニルま
   たはピペリジニル環であり該環は場合により１〜４個の
   炭素原子を有するアルキルで置換され、該アルキルは更
   にヒドロキシルにより置換されていてもよい）である特
   許請求の範囲第３項記載の化合物。 ８）６−ホルミル−４，７，９−トリヒドロキシ−８−
   メチル−１−フエナジンカルボン酸である特許請求の範
   囲第６項記載の化合物。 ９）６−ホルミル−４，７，９−トリヒドロキシ−８−
   メチル−１−フエナジンカルボン酸メチルエステルであ
   る特許請求の範囲第６項記載の化合物。 １０）Ｎ−〔２−（ジメチルアミノ）エチル〕−６−ホ
   ルミル−４，７，９−トリヒドロキシ−８−メチル−１
   −フエナジンカルボキサミドである特許請求の範囲第６
   項記載の化合物。 １１）Ｎ−〔２−（ジエチルアミノ）エチル〕−６−ホ
   ルミル−４，７，９−トリヒドロキシ−８−メチル−１
   −フエナジンカルボキサミドである特許請求の範囲第６
   項記載の化合物。 １２）Ｎ−〔３−（ジメチルアミノ）プロピル〕−６−
   ホルミル−４，７，９−トリヒドロキシ−８−メチル−
   １−フエナジンカルボキサミドである特許請求の範囲第
   ６項記載の化合物。 １３）６−〔〔〔２−（ジメチルアミノ）エチル〕イミ
   ノ〕メチル〕−４，７，９−トリヒドロキシ−８−メチ
   ル−１−フエナジンカルボン酸メチルエステルである特
   許請求の範囲第７項記載の化合物。 １４）Ｎ−〔２−（ジメチルアミノ）エチル〕−６−〔
   〔〔２−（ジメチルアミノ）エチル〕イミノ〕メチル〕
   −４，７，９−トリヒドロキシ−８−メチル−１−フエ
   ナジンカルボキサミドである特許請求の範囲第７項記載
   の化合物。 １５）Ｎ−〔２−（ジメチルアミノ）エチル〕−６−ホ
   ルミル−４，７，９−トリヒドロキシ−１−フエナジン
   カルボキサミドである特許請求の範囲第１項記載の化合
   物。 １６）Ｎ−〔２−（ジメチルアミノ）エチル〕−６−〔
   〔〔２−（ジメチルアミノ）エチル〕イミノ〕メチル〕
   −４，７，９−トリヒドロキシ−１−フエナジンカルボ
   キサミドである特許請求の範囲第１項記載の化合物。 １７）同化可能な炭素および窒素源を含有するブロスの
   好気性発酵条件下に６−ホルミル− ４，７，９−トリヒドロキシ−８−メチル−１−フエナ
   ジンカルボン酸メチルエステルを単離しうる量で生産で
   きるストレプトマイセス・ガラノサ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍ
   ｙｃｅｓ　ｇａｌａｎｏｓａ）ＮＲＲＬ１５７３８の精
   製培養物。 １８）抗微生物的に有効量の特許請求の範囲第１項記載
   の化合物を薬学的に許容しうる担体と組合わせて包含す
   る哺乳動物の微生物感染症の治療に有用な薬学的組成物
   。 １９）抗新生物的に有効量の特許請求の範囲第１項記載
   の化合物を薬学的に許容しうる担体と組合わせて包含す
   る哺乳動物における新生物増殖の阻害に有用な薬学的組
   成物。 ２０）抗微生物的に有効量の特許請求の範囲第１項記載
   の化合物を薬学的に許容しうる担体と組合わせて微生物
   感染症の治療を要する哺乳動物に投与することよりなる
   哺乳動物の微生物感染症の治療方法。 ２１）抗新生物的に有効量の特許請求の範囲第１項記載
   の化合物を薬学的に許容しうる担体と組合わせて新生物
   増殖阻害治療を要する哺乳動物に投与することよりなる
   哺乳動物における新生物増殖阻害方法。 ２２）構造式 I ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中Ｒ＿１は水素またはメチルであり；Ｒ＿２は酸素
   または＝Ｎ−Ｙ−ＮＲ＿４Ｒ＿５（式中Ｙは場合により
   ヒドロキシルで置換される１〜６個の炭素原子を有する
   直鎖状または分枝状アルキレン基またはシクロヘキシル
   であり；Ｒ＿４およびＲ＿５は独立して水素、場合によ
   りヒドロキシルで置換される１〜４個の炭素原子を有す
   るアルキルである）であるか；あるいはＲ＿２は＝Ｎ（
   ＣＨ＿２）＿ｎ−Ｗ（式中ｎは０〜４に等しく、そして
   Ｗはピロリジニルまたはピペリジニル環であり該環は場
   合により１〜４個の炭素原子を有するアルキルで置換さ
   れ、該アルキルは更にヒドロキシルにより置換されてい
   てもよい）であり；Ｒ＿３はヒドロキシ、１〜４個の炭
   素原子を有するアルコキシ、または−ＮＨ−Ｙ′−ＮＲ
   ＿４′Ｒ＿５′（式中Ｙ′は場合によりヒドロキシルで
   置換される１〜６個の炭素原子を有する直鎖状または分
   枝状アルキレン基またはシクロヘキシルであり；そして
   Ｒ＿４′およびＲ＿５′は独立して水素、場合によりヒ
   ドロキシルにより置換される１〜４個の炭素原子を有す
   るアルキルである）であるか；あるいはＲ＿３は−ＮＨ
   （ＣＨ＿２）＿ｎ＿′−Ｗ′（式中ｎ′は０〜４に等し
   く、そしてＷ′はピロリジニルまたはピペリジニル環で
   あり該環は場合により１〜４個の炭素原子を有するアル
   キルで置換され、該アルキルは更にヒドロキシルにより
   置換されていてもよい）であり；ただし （ａ）Ｒ＿３が＝Ｎ−Ｙ−ＮＲ＿４Ｒ＿５でありかつＲ
   ＿３が−ＮＨ−Ｙ′−Ｒ＿４′Ｒ＿５′である場合には
   、基ＹおよびＹ′は同じであるかまたは相異なつてもよ
   く、Ｒ＿４およびＲ＿４′は同じであるかまたは相異な
   つてもよく、 そしてＲ＿５およびＲ＿５′は同じであるかまたは相異
   なつてもよいか、あるいはＲ＿２が＝Ｎ−（ＣＨ＿２）
   ＿ｎ−ＷでありかつＲ＿３が−ＮＨ（ＣＨ＿２）＿ｎ＿
   ′−Ｗ′である場合には、ｎおよびｎ′は同じであるか
   または相異なつてもよく、そして基ＷおよびＷ′は同じ
   であるかまたは相異なつてもよく、 （ｂ）Ｒ＿１が水素であり、かつＲ＿２が酸素である場
   合にはＲ＿３はヒドロキシまたはアルコキシであつては
   ならない〕 を有する化合物およびその薬学的に許容しうる塩を製造
   するにあたり、次の諸工程、すなわち、 ａ）構造式II ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中Ｒ＿１は水素またはメチルであり、そしてＲ＿３
   はヒドロキシまたはアルコキシである）を有する化合物
   を式Ｒ＿４Ｒ＿５Ｎ−Ｙ−ＮＨ＿２または、Ｗ−（ＣＨ
   ＿２）＿ｎ−ＮＨ＿２（式中Ｒ＿４、Ｒ＿５、Ｙ、ｎお
   よびＷは前記定義のとおりである） を有する化合物と反応させて構造式IIIａまたはIIIｂ ▲数式、化学式、表等があります▼IIIａ ▲数式、化学式、表等があります▼IIIｂ （式中Ｒ＿３はアルコキシまたはヒドロキシであり、そ
   してＹ、Ｒ＿４、Ｒ＿５、ｎおよびＷは前記定義のとお
   りである） を有するイミンエステルまたはイミンカル ボン酸化合物を形成させるか、あるいは ｂ）常法によるエステル交換法により構造式II（式中Ｒ
   ＿３はメトキシである）の化合物をより高級のアルキル
   エステル（式中Ｒ＿３は２〜４個の炭素原子を有するア
   ルコキシであ る）に変換し、そして次に所望の場合は得 られた高級アルキルエステルを工程ａ）の方法により式
   IIIａまたはIIIｂのイミンエステルに変換し； ｃ）あるいはまた、その後に工程ａ）または工程ｂ）の
   イミンエステル生成物を所望の場合は水性塩基を用いて
   けん化し相当するイミ ンカルボン酸化合物を形成させるか；ある いはまた ｄ）工程ａ）または工程ｂ）のイミンエステル生成物を
   式Ｒ＿４′Ｒ＿５′Ｎ−Ｙ′−ＮＨ＿２（式中Ｙ′は場
   合によりヒドロキシルにより置換されていて もよい１〜６個の炭素原子を有する直鎖状 または分枝状アルキレン基またはシクロヘ キシルであり；そしてＲ＿４′およびＲ＿５′は、独立
   して水素、場合によりヒドロキシルで置 換されていてもよい１〜４個の炭素原子を 有するアルキルである）を有する化合物か、または式Ｗ
   ′−（ＣＨ＿２）＿ｎ＿′−ＮＨ＿２（式中ｎ′は０〜
   ４に等しく、そしてＷ′はピロリジニルまたはピペリジ
   ニル環であり該環は場合により１ 〜４個の炭素原子を有するアルキルで置換 されていてもよく、該アルキルは更にヒド ロキシルにより置換されていてもよい）を 有する化合物と反応させて構造式IV ▲数式、化学式、表等があります▼IV を有するイミンアミド化合物を形成させ、 ｅ）次いで工程ｄ）のイミンアミド生成物を、所望によ
   り希水性酸中で加水分解して構造 式ＶａまたはＶｂ ▲数式、化学式、表等があります▼Ｖａ ▲数式、化学式、表等があります▼Ｖｂ （式中Ｒ＿４′、Ｒ＿５′、Ｙ′、ｎ′およびＷ′は前
   記定義のとおりである） を有するアミド化合物を形成させ；そして ｆ）工程ａ）、ｂ）、ｃ）、ｄ）またはｅ）の生成物を
   所望により薬学的に許容しうる塩に変換 すること、 を包含する前記化合物およびその薬学的に許容しうる塩
   の製造方法。