JPS61501571A - Ｎｍｒ造影剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ＮＭＥ造影剤 本発明はＮＭＲ（核磁気共鳴）造影剤、すなわら■Ｒ診断における緩和時間の調 節剤、特にプロトン緩和時間の調節剤に関するものである。本発明の薬剤は体内 ＮＭＲ造影の前にヒトあるいはその他の動物へ投与するのに最も適当である。

ドイツ特許願３１２９９０６は、開放鎖または環状の錯体形成剤と常磁性金属イ オンとの錯体から取る、ＮＭＥ診断における緩和時間調節用化合物を記載してい る。ヒトのＮＭＥ診断については、それらの錯体の水溶液は径口的、神径中枢的 、あるいは管内的に投与され、常磁性金属の単純な無機塩より毒性が少ないとい われている。

しかし、このドイツ特許願はいくつかの問題が未解決のままで残っている。それ らの錯体の毒性は錯体が新陳代謝性である場合には特に一層、問題となりそうで ある。

錯体の生体分布はその鉛体形成剤の性質に大いに依存するが、この特徴は論じら れていない。ＮＭＲ造影剤はその移動と生体分布が知られかつある正確さで以て 制御されないかぎり、有用なものとなりそうもない。本発明の目的はこれらの問 題を克服することである。

本発明は、常磁性金属イオンが錯化される有機錯化剤を化学的に結合させたポリ サッカライドから成る、ＮＭＲ診断における緩和時間調節剤を提供する。

ナ厚ＲＢの版程１め（當二姓みｇ）＋ソぬ山加謎伏ヒハナｒれた可能性のある利 点はプロトン緩和時間に対するそれらのより大きい影響であり、それは金属イオ ンの等量についてより良好な造影をもたらす。

各種の異なるポリサンカライドは、それらの化学的誘導体を含めて、使用してよ く、そして薬剤の性質に重要な影響をもつ。ポリサッカライドはデキストランま たはデキストリンのような水溶性であるか、あるいはセルロースあるいはセファ ロースまたは澱粉のような水不溶性であってよい。セファロースはアガロースを 交差結合させることによってつくられるビード形状化ゲルである。

水浴性ポリサッカライドをベースとする薬剤は経口的または非経口的に投与する ことができ、非水浴性ポリサッカライドは主として経口的投与に適している。

ポリサッカライドはそｉｌ、を投与する動物にとって新陳代謝性であってもよく そうでなくてもよい。ＮＭＲ走査にとって必要とされる時間間隔内で新陳成縮さ れない化合物はここでは、たとえそれらがずっと長い時間間隔にわたって新陳代 謝されるとしても、非代謝性と見做す。

セルロース、セファロースおよヒテギストリンハヒＨＣは非代謝性であるが、一 方、澱粉とデキストリンは代謝性である。不溶性の非代謝性（人の）ポリサッカ ライドへ結合した金属イオン錯体を使用することの利点は、経口投与薬剤が胃腸 管内に閉ぢ込められて迅速に排泄物中に排泄されることである。しばしばおこる ケースであるが遊離の常磁性金属イオンが毒性であるときには特に、このことは 重要である。

適当である常磁性金属イオンはこの分野でよく知られており、原子番号が５８か ら７０であるランタニド元素のイオンおよび原子番号が２１から２９．４２およ び４４の遷移金属のイオンを含む。好ましいのはＭルｔｎｌ、Ｃ５（ＩＩ）、Ｆ ｇ（■）、Ｇｄ（ＴｆｆＪ、　Ｆｅ（ＩｌＤ、　Ｃｒ（ＩＩＤ、　Ｄ’／（ＦＩ Ｂ、およびＶ　（ＩＶ）である。金属イオンの選択に影響する要因；まその常磁 性的性質、金属イオン−錯化剤−ポリサッカライド成分の安定性、それの毒性、 および錯体中の金属イオンがプロトン緩和時間を変えるよう水と相互反応する程 度、である。

有機質錯化剤は好ましくは常磁性金属イオンと体内で安定である錯体を形成する べきであり、このことは遊離金属イオンが毒性であるとぎＫ特に重要である。錯 化剤は選択された金属イオンとキレートを形成するものであることができる。好 ましいのは次のようなアミノポリ酢酸である： ニトリロトリ酢酸 Ｎ、Ｎ、Ｎ’、Ｎ’−エチレンジアミンテトラ酢酸（ｆｆＤｒＡ）Ｎ−ヒドロキ シエチル−Ｎ、Ｎ’、Ｎ’−エチレンジアミントリ酢酸 Ｎ、Ｎ、Ｎ’、Ｎ“、Ｎｎ−ジエチレントリアミンインタ酢酸（ＤＴＰＡ） Ｎ−ヒドロキシエチルイミノジ酢酸。

特に好ましいのはＥＤＴＡとＤＴＰＡである。

その他の錯化剤は例えばアミノエチルジ燐酸塩、グルタミン散およびδ−Ｎ−ア シル−δ−Ｎ−ヒドロキシオルニチンのような遊離のアミノ基をもつものを含む 。

錯化剤は、例えば臭化シアンの使用による既知の化学的方法によってポリサッカ ライドへ化学的に結合されてよい。ポリサッカライドへ直接に結合される錯化剤 は常磁性金属イオンをキレート化することから豆体的に妨害されるという可能性 が生ずる。この危険性は錯化剤とポリサッカライドの間の連結体分子の使用によ って回避され得る。その化学は次のように表現してよい：Ｘ−ＯＨ＋ＢｒＣＮ− ＋Ｘ−０ＣＮ＋ＨＢｒＸ’−０ＣＮ＋ＨｔＮ　（ｆ：Ｈｔ）、　ＭＨｚ　＋　Ｈ ｔｏ−ｍ−仝Ｘ　ＯＣＯＮＨＣＣＨｔ）ｎ　ＮＨｔ　＋　ＮＨｓここに、Ｘはポ リサッカライド残基であり、路は１ｏまでであり、例えば４−８である。次いで 、Ｘ０ＣＯ−ＮＨ・（Ｃａｔ）、ＭＨｚ＋　ＨＯＣＯＹここに、Ｙは錯化剤残基 である。ルの値は臨界的ではない。事実、連結体の腕はある場合には全く必要と されないかもしれない。連結体を使用しない場合には、錯化剤は既知の化学的技 法によってポリサッカライドへ直接に結合されてよい。

ポリサンカライド金アミン基含有物連結腕と反応させるために（あるいは錯化剤 と直接に反応させるために）活性化する用途に、臭化シアンに伐る各種のものが 知られている。それらは次のものを含む： １）１−シアノ−４−ジメチルアミノピリジニウムテトラフルオロボレートポリ サッカライド樹脂へ配位子を共役結合させるためのシアニレ−ティング剤。Ｆｇ ｂｓ、Ｌｇｔｔｇｒｚ＋　１５４巻、鷹１゜（１９８３）、ｐ、２０９゜ ２）ベンゾキノン。ＢＢＡ３８６（１９７５）１９６−２０２゜ ３）カルボキシメチルデキストリン。

Ｊ、Ａｗｌｉｅｄ　Ｂｉｏｃｈｔｒｎｓ、ｚ、　２５−３５　（１９８０）。

４〕　ビスエポキシ２ン。

Ｊ、Ｃｈｒｏｍｔｓｔｏｇｒａｐんｙ　２０９．（１９８１）３６３゜５）ジビ ニルスルフォン。

Ｍｅｔｈ、Ｅｎｚ’ｔ７７Ｌｏｌｓｒｉ’／　３４　、　（１９７４）　、　２ ７゜６）エピクロロヒドリン。

、７．Ｃ’Ａデｏｍａｔ、６１（１９７０）４７９゜Ｊ、ＩｍｍｕｎｏＬ、Ｍｇ ｔｈ、　５８　（１９８３）９３−１０７゜７）カルボニルジイミダゾール。

Ｊ、ＣｈｒｏｍｎｔｏｇｒａｐんＬ　１９６．（１９８０）３７９゜ ８）過沃素酸塩。

ｌｍｍｎ５ｌｏａ”／　２０．（１９７４）１０６１゜９）塩化シアヌール酸。

Ａｎａｌ、Ｂｉｏｃｈｅｍ、　８７　（１９７８）　７７゜米国特許３＋９５６ ，２７２．　ＡｆｆｉｎｉｔｙＣｈｒｏｍａｔｏ−ｇｒａｐｈｌ（Ｅｌｓｅｖｉ ｅｒ　Ｓｃｉｇｎｔ、Ｐｖ、ｂｌ、Ｃｏ、）１９７８年ｐ、３３−４４　、　ｐ −１５４＋ｐ、３２４ｎ）ｐ−二トロベンジルクロライド。

（２）２−アミノエチルハイドロゼンサルフエート（デキ反応過程の最終段階と して常磁性イオンとのキレートを形成させることが一般的に梗利である。これは 単純に、常磁性金属イオンの水浴液をポリサッカライド−錯化剤と混合し、そし て、混合物を放置し、好ましくは錯化剤のプロトン化金属結合部位のいくつかあ るいは全部を事前に中和することによって、なされる。

ポリサッカライドが不溶性であるときには、その物理的状態はそれがどのように して投与されるべきかに依存する。微細分割状物質が好ましくは用いられ、例え ば５ミクロンのファイバー状セルロース質物質である。このことは比表面積を増 し、従って錯化剤との反応の速度と程度ヲ増し得る。どれほどの常磁性金属イオ ンをポリサンカライドの単位重量あたりへ結合できるかを決定するのはこの反応 である。有用なＮＭＥ造影剤はポリサッカライドの２００糖単位あたりに少くと も１個の常磁性金属イオン、好ましくは１００糖単位あたり少くとも１個、を含 むべきである。

それらの薬剤は経口的に投与して、例えば胃腸管を肉視させてもよく、あるいは 非経口的に、例えば血液プール剤（ｂｌｏｏｄ　ｐｏｏｌασｇｎｔ）として作 用させてもよい。

以下の実施例は本発明を解説するものである。実施例１および３から６は本発明 による各種のＮＭＲ造影剤の製法を示している。実施例２と７から１０はこれら の薬剤のいくつかの体内および体外における性質を示している。

１ｉ）　Ｇｄ（ｆｆＤ結合 ５５℃（油浴）において２４時間、ピリジン中で、４０ｇのＤＴＰＡと無水酢酸 （３８ゴ）。ＤＴＰＡ無水＊を次に濾過によって精製し、無水酢！！ｆｆ（１０ ０ｍ）と無水エーテル（２０Ｑａｊ）で以て＋５！滌した。５０Ｃの浴中で一夜 乾燥。

（ｂ）　セルロースの活性化 セルロース（２０ｇ）とＣＮＢτ（ＤＭＳＯ中で１０ｇ）をｐＨ１０，１のＮａ ＯＨ溶ｇ（１００＋ｊ）中で混合。ｐＨは急速に低下。２ＭＮαＯＨの添加で以 て３１１０．７へ上げる。混合物を２５分間撹拌（さらに長く撹拌すると糖単位 間で父差結合がおこるかもしれない）。

活性化セルロースのＩＥスイクトルを記録。

活性化セルロース（２０ｇ）十連結体（２５ｇ）［：１゜４−ジアミノブタン、 １．６−ジアミツヘキサン、１．８−ジアミノオクタン〕。３００ｄのＨ，Ｏ中 。室温で３時間撹拌。ＢＣＪ添加によってｐＨ７に保持。不溶性生成物を回収し 乾燥。

セルロース一連結体のＩｌｌスイクトルを記録。

第一の方法（ｃＤＴＰＡの高収率−後記参照）２０ｇのセルロース一連結体を再 蒸溜ＤＭＦ中で懸濁、ビスアンハイドライドｎｒｐＡＣ１Ｏｇ）ｔｌ−添加。１ ６時間４０℃で攪拌。生成物を捕集および洗滌（ＤＭＦ３００１、Ｈ，０２００ ０１ｔｌ）。

第二の方法 ２（ｌのセルロース一連結体をＨ２Ｏ（ｚＯＯｒ！Ｌｔ）中に懸濁、ビスアンハ イドライド（１０，！ｉ’）を添加。室温で２４時間撹拌。生成物を捕集および 洗Ｍ（ｚｒ、０２０００ｄ）。

総括 四つのｅＤＴＰＡポリマーが製造された：略語の定義： ｃ、ＤＴＰＡ　セルロース−ブタン連結体−ＤＴＰＡ　：ＤＭＦ最終段階 ｃ、ＤＴＰＡ　セルロース−オクタン連結体−ＤＴＰＡ：ＤＭＦｉｉＬ終段階 ｃ６ＤＴＰＡ　セルロース−ヘキサン連結体−ＤＴＰＡ：ＤＭＦ最終段階 ｃ　ａＤＴＦＡ　（水）　−ｋｅクロースへｄＦ”ｊ’７連結体−ＤＴＰＡ：Ｈ ｔＯ最終段階 （ｉｔ）　ｃｎＤ　Ｔ　Ｆ　Ａ　ヘのＧｄ（ＩｌＤの結合（ｎ＝４．６または８ の場合）　（υ　ｃｎＤＴＰＡへのＧｄ（２）結合 （２１７＋、およびＴ。

の緩和時間 （ＩＪ　４二５どゴゴｊ！≧１ ０．５ｇのｃ　ＤＴＰＡ　＋５　Ｘ　１０−’モルＧｄＷ）イオンル （１０ゴの５　Ｘ　ｌ　Ｏ−’Ｍ　Ｇｄ　（ＮＯ，）、・５馬Ｏ）。試料を１時 間振とうし、欠いで遠心分離（４００ｒ、ｐ、ｙｙｔ−で３分間）。水性層のｍ ｓを６０　ＭＨｚ　において記録（室温）。

結果は、ＤＭＦ媒体をＣユＤＴＰＡ　合成の最終段階において使用するときにＧ ｄのより多くの吸収がおこり、連結体の長さが結合Ｇｄ（至）イオンの数に影響 を及ぼざないことを意味する。

Ｇｄの結合はＥＳＲ１電子スピン共鳴およびＥＭ、電子顕微鏡Ｘ＠分析によって 確認でれた。

１．０ＨＮＭＥチューブ。２１ＬｔのＨｔＯ／Ｄ、Ｏ（７０：３０）を添加。Ｔ １は２００　ＭＨｚ　で室温においてイン。

バージョン・リカバリー・パルス−シーケンス（ｉｎ利デＳ（開−ｒｅｃｏｖｅ ｒｙ　ｐｕｌｓｅ　５ｅｑｕｅｎｃｅ　）を使って測定した。

０．２５ｇのｃＤＴＰＡ全添加。チューブを振とうし、Ｔ。

を記録。２１ＬｔのＧｄ（ＩＩＤ（オｙ　（５Ｘ　１０−”　Ｍ　Ｇｄ（＃０ｓ ）ｓ・５Ｈ，Ｏｌすなわち１０−ｓモルのＧｄ（皿イオン）を添加。１時間振と う放置し、試料を洗滌し、ｚｍのｆｆｔｏ　／　ＤｔＱ　ｆ添加。Ｔｌｔ−前と 同条件下で測定。

０．０１’ｌのＧｄｃ、ＤＴＰＡは５闘ＮＭＥチューブ中で０、７　ｄのＨ，Ｏ ／Ｄ＊ＯＣ’ＩＯ：３０）の中に一様に懸濁された。非遠心分離試料について（ ３０ＭＨｚ　において線幅を記録。（遠心分離する場合には、遠心力はＧｄｃ、 ＤＴＰＡに作用して錯体をより早く沈降させる）。

３４Ｊｌの線幅はＨ，０／Ｄ、Ｏ単独の同試料について７Ｈｚ　と比較して観察 されて、０．０１７ｇのＧｄｃ、ＤＴＰＡが水のＴｘｋ約５倍だｌ′ｊ減らすこ とを示す。

−序屋 ０．５ｇのｃ、ＤＴＰＡが約５　Ｘ　１０−’モルのＧｄ（Ｉｎ）イオンを結合 する。０．２５ｇのＧｄｃ、ＤＴＰＡはＨ，ＯのＴ、値を２．８８倍減らし、Ｔ ！値を約５倍減らす。ＮＭＥの検討では、連結体の長さが結合するＧｄ（ｆＪＪ Ｊモル数に影響しないことを示した。計算では、連結体分子はセルロースの６５ 塘単位毎に結合することを示した。

ｃ、ＤＴＰＡによるＩＩＩＧ　ｄ（ＩＩ９吸収を追跡し、ねずみの胃腸管中の” ”Ｇｄｃ、ＤＴＰＡ　の通過を検討する。

０．５ｇのｃ、ＤＴＰＡをトリス（Ｔｒｉｓ）ｄ衝液（ｐＨ７，２）の中で一晩 浸漬した。３ＸＩＱｍｊ部分、のかん水で以て遠心分離を経て洗滌した。５ゴの 酢酸塩緩衝ＩＦｔ　（ｐＨ５，６）の中の１．５　ｍの””ＧｄＣ１，／ＨＣＩ 　ｋ計数し、活性を測定し、次いでｃ、ＤＴＰＡへ添加し、ローラー上で２時間 放置した。溶液を遠心分離にかけ、水性層中のカウント数を測定した（従って！ ５１Ｇｄ（ＩＩＤのｃ６ＤＴＰＡによる吸収％を推定する）。

０、３２　Ｘ　１０−’モルのＧｔｉＣＮＯｓ）ｓ・５Ｈ，０を混合物へ添加し 、ローラー上で１週間放置し、遠心分離にかけ、水性媒体中のカラン数を測定し た。０．５ｇのｃ、ＤＴＰＡを１，５ｄの１８３に　、Ｉ　ＣＪ、と−緒に接檻 したのち２時間後にｃ、ＤＴＰＡ上へ１１１３Ｇｄ　の９Ｌ５％の吸収があった 。

接ｍ後ＩＭ間のｉ［、ＤＴＰＡ上へ１″”Ｇｄの６８．２％の吸収があった。

この減少は放射能のないＧｄ（Ｉ！Ｄイオン添加後の謁Ｇｄ（ｍｌの解離に帰す ることができる。

洗滌後、わずか０．９２％のｌシ”Ｇｄのロスがあり、　”ＧｄｃＤＴＰＡが安 定であることを意味している。

この””Ｇｄ　ｃ、ＤＴＰＡを次に５ゴのＨ，Ｏ中に再懸濁させり（０，０６ｒ ｎＣｉ／ｍｌ　）。１ゴを次に４匹のスプラグ・ダウレイ（Ｓｐｒａｇｕｇ　Ｄ ａｗｌｔｔｙ）雄ねずみ（投与前３日間代謝かどの中ですでに馴らしである）へ 投与した。谷のねずみは経口投与の前にエーテルで以て軽く麻酔をかけた（Ｚｏ ｏｍ、ｇの長いポルテックス（ｐｏｒｔｇｚ）　６Ｇ　Ｆカテーテルを紐て、錯 体の１ＷＬｔ）。投与後、計数率（ｃｏｕｎｔｒａｔｅ　）をツインＮαＩ結晶 カウンターの中で、投与標準物と一緒に取った。尿と排泄物を投与後５時間、２ ４時間、４８時間で捕集し、２匹は２４時間で解剖し、他の２匹は４８時間で解 剖した。器官、尿および排泄物をオートガンマ−カウンター中で１１３ｃｄ　に ついて検定した。

結果と討論 （１）投与後２４時間ｔＴＫ、９７　％ＬＤ””Ｇｄ（’１ＪｆＪ　カ排泄物中 に排泄されたが、尿の中で排泄される可溶性生成物への””Ｇｄｃ、ＤＴＰＡの 劣化がないことを意味する。

＋２）　投与後４８　Ｑ間ＩＣオイテ約１００　％Ｃ）　１５”Ｇｄ（ＷＪ　カ 排泄された（排泄物を経て）。０．３％と０．７％との尿の数字は僅かな排泄物 汚染である。

＋３）　０．４％の血液の数字は基底値レートの２倍以下を示している。

（→　投与後２４時間または４８時間において胃腸管以外の検定された器官の中 で””Ｇ　ｄ　（１１０の蓄積はおこらなかった。

総括 ｃａＤ　Ｔ　Ｐ　、ｔのＩ！５Ｇｄ（皿標黛化は約６０％の効率であった（しη ・し冷Ｇｄ（ＩＩＤが過剰に存在する）。

経口的にねずみへ投与する際、”Ｇ　ｄ　ｃ、Ｄ　Ｔ　Ｐ　Ａの９７％は排泄物 中で体から排泄され、Ｇｄｃ、ＤＴＰＡ残留がなく胃腸管に対して錯体が安定で あることを意味する。

ｌＩｌ”Ｇ　ｄ　ｃ、Ｄ　Ｔ　Ｐ　Ａに対する放射能検討とＧｄｃｎＤＴＰＡ緩 和性質について集めたデーターはＧｄｃ、ＤＴＰＡが有力なａ口約造影剤である ことを示している。

もう一つの非水溶性剤を、実施例１に記載される方法Ｖこよるが、しかし出発ポ リサンカライドとしてセルロースの代りに澱粉を使用してつくり、Ｇｄ５ｔＤＴ ＰＡと命名した。

３００ｉｊのＨ，０中の澱粉６１　＋　２　ｒｄ　ｔＤ　２　Ｍ　ＮａＯＨ；溶 液（ＤｐＨは１０．５゜５分間撹拌。２．　ｚ、ｉｉｌ　（Ｄ　ＣＮＥｒ　（２ ＮのＤＭＦ（Ｄ中）を滴状添加。ｐＨ１０ｆ２０分間、２Ｍ　ＮａＯＨ添加によ って維持。次１ｆＣＨＣ１を添加、ｐＨ全７へ下げる。３．２ｇの１，６−ジア ミノへ午サンを添加。

ｐＨ７をＭＣＩ添加によって３時間保ち（室温で絶えず撹拌）、次ＩＣ濾過し、 ５００ｄの水で以て洗滌。生成物の澱粉一連結体を次に２５０１１１のＤＭＦ中 に取上げる（５５℃において）。２ｇのＤＴＰＡ無水物を添加。混合物を１ｚ時 間５５℃において撹拌。次いで、生成物の澱粉一連結体−ＤＴＰＡ（ＳｔＤＴＰ Ａ）ｔ−洗滌（３００ｍｇのＤＭＦと５００ａのＨ，Ｏ）。Ｇｄ（ＩＩＤイオン ノ結合は飽和Ｇｄ５ｔＤＴＰＡ試料の電子スピン共鳴（ＥＳＲ）によって確認さ れた。

Ｇｄ（ｌ［ｌ飽和Ｇｄ５ｔＤＴＰＡ誘導体についてのＨ，ＯＴ。

緩和時間は０．１２，９／ｄについて１４２．２ｍａ　であることが示され、同 条件下のＧｄｃＤＴＰＡについてより短かい。

＋＋）　Ｇｄ（ＩＩＤの結合 １）合成 ＣＮＥｒ活性化セファロース（１ｇ）を焼結ガラス漏斗上で１５分間１　ｍＭ　 ＭＣＩ　（１０ｍ　）で以て膨潤させ、次いで１　ｍＭ　ＭＣＩ　（ＺＯＯｒｔ ｔｌ／　、ｌｉ’　・セファロース）で以て洗滌し、このＭＣＩ　は高ｐＨにお いては加水分解する反応基の活性を保存する。このゲルを次に５Ｍのカップリン グ緩衝液（０，２５Ａｆ　ＮａＨＣＯｓ　＋　０．５Ａｆ　ＮａＣ６；ｐＨ８， ５−９，０）で以て洗滌した。

このゲルを１，６−ジアミツヘキサン（０，８，１を含む緩衝浴液（３０＋＋ｚ ）へ移し、回転ホイール（３０デーｐ−ｍ、）上で２時間、室温において混合し た。この段階での磁気撹拌器の使用はアガロース単位を破壊し、低分子量生成物 を形成する。生成物を次に焼結漏斗上で緩衝液（２０ｒＩＬｔ）、次いでＤＭＦ （２０ｍｌ）で洗滌した。ＤＭＦによる最後の洗滌は次の段階が無水状態であら ねばならないので臨界的である。

洗滌ゲルｔ″次にＤＭＦ（５０Ｍ）とＤＴＰＡ無水物（ＤＭ：Ｓｏの微小容槓甲 で０．５ｐ）とを含むフラスコへ移した。混合物を回転ホイール上で室温におい て最低６時間撹拌した。ゲルを次に（愛結漏斗を経て）ＤＭＦ（５ＯＮ）で以て 、次イテｇ、ｏ　（１ｏ　ｏｍ）で以て洗滌した。グルタミン酸溶液を、これは 連結体を結合させない他の基をすべて封鎖するので、次に添加してよい（２０！ Ｒｔ）。

Ｉｆ）　５ＤＴＰＡへのＧｄ口の結合 ＧｄＩｘＪの結合は、ＮＭＲにより、水共鳴ピークの線幅の変化を追跡すること によって示すことができる。

１ｙのａＤＴＰＡを焼結ガラス漏斗上に置き、１０１のＧｄ（ｆｆＤイオンを添 加（５Ｘ　１０−Ｉ　Ｍ　Ｇｄ（Ｎｏ、）、・５Ｈ，０−線幅既知）。混合物を ゆるやかに１時間撹拌。上澄液を洗い出して集め、その後の線幅を記録した。線 幅の減少はＧｄ（［Ｄの結合を示す（すなわち、水浴液中のＧｄ（ＩＩＤ濃度が 減少したのである）。ｆｆ！□（５ｍ）をこのゲルへ添加し、ゆるやかに１時間 振とうした。上澄液全洗い出し、線幅を記録した。０．５ｊｊＧｄｓＤＴＰＡ／ 　０．７ゴＨ，０の線幅を記録し、Ｇｄ（Ｉｎ）結合がおこったことを示した。

線幅はすべて（５９ＭＨｚ　で記録した。

結果 ０．５１ＧｄｓＤＴＰＡ１０．７　ｒｒｒｌＨ！Ｏは１４Ｈｚの線幅を与えた０ 、５ｇ・５ＤＴＰＡ１０、’ＩＩＬｔＨｔＯと比べて１４０Ｈｚの線幅を与えた 。その１１は同じ濃度でのｇＤＴＰＡについての３０００　ｒｒＬｓに比べてＧ ｄ５ＤＴＰＡポリマー（０，５ｇ１０．７ゴＨ１Ｏ）について１０ｍ８以下へ減 少した。

討論 Ｈ□Ｏ洗液の線幅の減少は１ｇの５ＤＴＰＡ　がほぼ５×１０１モルのＧｄ（Ｊ ｆｆＪイオンを結合することを意味している。

ゲル’（ｉ−２回洗滌して、洗液の水耐幅の増加は観察されず、従って錯体Ｇｄ ａＤＴＰＡは安定である。

セファロース一連結体単位の酸加水分解のＮＭＲ分析は１個の連結体単位がセフ ァロース中で７０糖単位毎に結合していることを暗示している。

ｉｉ）　Ｎ磁性金属イオンの結合 １）ｄＤＴＰＡの合成 丸底フラスコ甲の２１１のデキストラン（分子ｆｌｌ１８．ｏ００）＋１５０＋ ｊのＨ２Ｏ（少くとも１５０ｉｕ、さもなければ交差結合がおこり、白色沈澱が ＣＮＢｒ活性化時に形成する）。

１ｇのＣＮＥｒ（微小容積のＤＭＳＯ）を添加し、溶液を２ＭＮαｏｚ添加によ ってｐＨ１Ｏ，７ＶＣ２０分間維持。

約２０分後、または交差結合の徴候（白色沈澱形成）が観察でれたとぎに、次の 段階を実施した。

１．６−ジアミツヘキサン（１，２ｇ）ｔ−溶液混合物へ添加し、この混合物を 欠に３．００　ｏｍへ稀釈して３時間撹拌（室温で）し、ｐＨ金７．４に保ち、 次いで回転蒸発によって除き、油状生成物（きわめて粘稠のデキストラン溶液） が残留する。ＤＭＦ（１００１Ｌｔ）′ｆ：添加し、ＤＴＰＡ無水物（ＤＭＳＯ 中で１ｇ）を添加。混合物を１２時間室温できわめてゆっくりと磁気撹拌器によ って撹拌した。

ＤＭＦ？次に回転蒸発によって取出す。粘稠浴液を次に予め浸漬した透析サック （ｐｒｅｓｏａｋｇｄ　ｄｉａｌｙｓｉｓｓａｃｋ　）の中へ注入し２４時間に わたって透析した（３ｊの水金４回変える）。生成物’を次に丸底フラスコの中 に注ぎ、−夜凍結乾燥した。

１）ｄＤＴＰＡ（分子量１８，０００）への常磁性金属イオ（ＩＪ　四つの試料 チューブをつくり、各々は１０ＷＬｔのＨ，０と２．２３　ｍ９のＭｎ、５Ｏ４ −４ｒＨ１Ｏ（１０−”Ｍ　）を含む。ｄ　ＤＴＰＡＯ量を増しながら各チュー ブへ顕次添加する。塚ｓを６０　ＭＨｚ　で記録した。結果を次に表示する。そ れらはｄＤＴＰＡへのＭＡＬ（Ｉｌｌの結合を示している。

加水分解物のＮＭＲ分析は１個の連結体がデキストラｙの４３６１残基毎に結合 していることを暗示する。

ｄＤＴＰＡ　ポリマーへのガドリニウム結合はＥｓＲにヨッテ示すれ：ｄＤＴＰ Ａ（分子量８２．０００　）ＧｄＣＮＯｘ）ｃ５Ｈ，Ｏの混合物を半時間保温し 次いで得られる浴液を２４時間透析して、その透析溶液の１４Ｅを記録し、Ｇｄ （ｆｆｆＪがポリマーへ結合によって保持されたことを示した。ＧｄｄＤＴＰＡ のＨｔＯのＴ、測定値を記録しデキストラン水浴液単独と比較した。

結果はＧｄ（ｆＪｆＪがｄＤＴＰＡ　へ結合し、ＧｄｄＤＴＰＡが有効な緩和剤 であることを示している。

各種の分子ｇｋ（９０００，１８０００，８２０００，１１００００および１５ ００００）のデキストランを出発物質として使用してこの実験を繰返した。この ポリマータイプはまたカルボキシメチルデキストラ／（文献３）、トシルクロラ イド（文献１０）、およびデキストランアミン（文献１２）によって合成されか つ特性づけられた。

デキストラン（分子量８２，０００）をクロロ酢酸によってカルボキシメチルデ キストラン（文献３）へ活性化した。活性化デキストラン（３ｇ）ｔ−２０１Ｌ ｔのＨ，０の中にとり上げる。アミノエチルジハイドロゼンホスフエート（０， ５Ｆ）の水溶液を添加し、浴液をｐＨ５−８へ調節した。１０分間撹拌模、０． ６ｇの１−エチル−３−（３−ジメデルアミノブロビルカルボジイミド）・ＭＣ Ｉを添加した（ｐＨ５−８を維持）。溶液を１時間撹拌し、両添加を２回繰返し た。最後の添加の後に、混合物を１ｊ時間撹拌し、溶液を次に透析した（２４時 間にわたって３ｊのＨ，０を４回変える）。Ｇｄ囮金金属吸収はＧｄ（＃Ｑｓ） ｓ・５Ｈ６０とｄＡＢＤＰの透析溶液混合物についてのＥＳＲ分析によって示さ れた。

実施例７゜ Ｇｄ””ｄＤＴＰＡ　（分子量１８，０００　）の試料を１１−１４ｍｑ／九ｇ ・体重の投与盪でうさぎへ経口投与した。放射能は７２時間以内に全部排泄され た。尿中の活性は無視でき、錯体の破断または吸収がないことを示した。

実施例８゜ ＧｄｄＤＴＰＡ（分子ｔｌ＆０００）の水溶液（４ｍ９／生理食塩水）を３匹の スプレーギュ・グラレイねずみと２匹のうさぎへそれぞれ１０ｍ９／ｊｃ９と２ ．５■／匈の投与水準において投与した。悪い影響は認めなかった。

実施例９゜ 塩水磐液甲のＧｄｃ、ＤＴＰＡおよびＧｄｄＤＴＰＡの造影力増強性は６．４　 ＭＨｚ　において、並べたテストチューブのプロトン緩和時間を影像として観察 することによって体内での造影力増強を示すために、合計１００ｍ９のＧｄｔｉ ＤＴＰＡ（分子量１８０００）を経口的に約５０屑ｌの生理的食塩水溶液として 麻酔下のうさぎへ投与した。

次の二、三時間の間、胃と腸の領域を示す断面の６．４ＭＨｚ　におけるプロト ン緩和時間を、プログレッシブ飽和およびインバージョン・リカバリー・パルス 列を使って記録した。プロトン緩和時間の短縮化に基づいて、選択された像領域 においてコントラストが現われた。例えば、胃中の液体は、もとは黒色でその上 方の空間中のガスと区別できなかったのに、白色となった（黒色は低プロトン密 度またはプロトンの長緩和時間金示すものである）。同じく、小腸管もまた今や 識別できた。

国際調査報告

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. １．常磁性金属イオンを錯化させる有機錯化剤を化学的に連結させたポリサツカ ライドから成る、緩和時間調節剤。
2. ２．ポリサツカライドが水に不溶でありかつ薬剤が投与されるべき動物によつて 新陳代謝性でない、請求の範囲第１項に記載の薬剤。
3. ３．ポリサツカライドがセルロース、澱粉あるいはセフアロースである、請求の 範囲第２項に記載の薬剤。
4. ４．ポリサツカライドがデキストランである、請求の範囲第１項に記載の薬剤。
5. ５．有機錯化剤がアミノポリ酢酸である、請求の範囲第１項から第４項のいずれ かに記載の薬剤。
6. ６．有機錯化剤がＤＴＰＡである、請求の範囲第５項に記載の薬剤。
7. ７．錯化剤が炭素原子数が１０個までの鎖を含む連結体分子によつてポリサツカ ライドへ連結される、請求の範囲第１項から第６項のいずれかに記載の薬剤。
8. ８．常磁性金属イオンが２価のＭｎ、３価のＧｄ、または３価のＦｅである、請 求の範囲第１項から第７項のいずれかに記載の薬剤。
9. ９．少くとも１個の常磁性金属イオンがポリサツカライドの１００砂糖単位あた りで存在する、請求の範囲第１項から第８項のいずれかに記載の薬剤。