JPH0563453B2 - - Google Patents
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- JPH0563453B2 JPH0563453B2 JP60502468A JP50246885A JPH0563453B2 JP H0563453 B2 JPH0563453 B2 JP H0563453B2 JP 60502468 A JP60502468 A JP 60502468A JP 50246885 A JP50246885 A JP 50246885A JP H0563453 B2 JPH0563453 B2 JP H0563453B2
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- dtpa
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-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
- A61K49/08—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier
- A61K49/10—Organic compounds
- A61K49/12—Macromolecular compounds
- A61K49/126—Linear polymers, e.g. dextran, inulin, PEG
- A61K49/128—Linear polymers, e.g. dextran, inulin, PEG comprising multiple complex or complex-forming groups, being either part of the linear polymeric backbone or being pending groups covalently linked to the linear polymeric backbone
-
- A—HUMAN NECESSITIES
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- A61K49/08—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier
- A61K49/085—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier conjugated systems
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01R—MEASURING ELECTRIC VARIABLES; MEASURING MAGNETIC VARIABLES
- G01R33/00—Arrangements or instruments for measuring magnetic variables
- G01R33/20—Arrangements or instruments for measuring magnetic variables involving magnetic resonance
- G01R33/44—Arrangements or instruments for measuring magnetic variables involving magnetic resonance using nuclear magnetic resonance [NMR]
- G01R33/48—NMR imaging systems
- G01R33/54—Signal processing systems, e.g. using pulse sequences ; Generation or control of pulse sequences; Operator console
- G01R33/56—Image enhancement or correction, e.g. subtraction or averaging techniques, e.g. improvement of signal-to-noise ratio and resolution
- G01R33/5601—Image enhancement or correction, e.g. subtraction or averaging techniques, e.g. improvement of signal-to-noise ratio and resolution involving use of a contrast agent for contrast manipulation, e.g. a paramagnetic, super-paramagnetic, ferromagnetic or hyperpolarised contrast agent
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- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Radiology & Medical Imaging (AREA)
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- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
請求の範囲
１ 常磁性金属イオンを錯化させる有機錯化剤を
化学的に連結させたポリサツカライドから成る、
NMR診断における緩和時間調節剤。 ２ ポリサツカライドが水に不溶でありかつ調節
剤が投与されるべき動物によつて新陳代謝性でな
い、請求の範囲第１項に記載の調節剤。 ３ ポリサツカライドがセルロース、澱粉あるい
はセフアロースである、請求の範囲第２項に記載
の調節剤。 ４ ポリサツカライドがデキストランである、請
求の範囲第１項に記載の調節剤。 ５ 有機錯化剤がアミノポリ酢酸である、請求の
範囲第１項から第４項のいずれかに記載の調節
剤。 ６ 有機錯化剤がDTPAである、請求の範囲第
５項に記載の調節剤。 ７ 錯化剤が炭素原子数が10個までの鎖を含む連
結体分子によつてポリサツカライドへ連結され
る、請求の範囲第１項から第６項のいずれかに記
載の調節剤。 ８ 常磁性金属イオンが２価のMn、３価のGd、
または３価のFeである、請求の範囲第１項から
第７項のいずれかに記載の調節剤。 ９ ポリサツカライドの100砂糖単位あたり少く
とも１個の常磁性金属イオンが存在する、請求の
範囲第１項から第８項のいずれかに記載の調節
剤。 明細書 本発明はNMR（核磁気共鳴）造影剤、すなわ
ちNMR診断における緩和時間の調節剤、特にプ
ロトン緩和時間の調節剤に関するものである。本
発明の薬剤は体内NMR造影の前にヒトあるいは
その他の動物へ投与するのに最も適当である。 ドイツ特許願3129906は、開放鎖または環状の
錯体形成剤と常磁性金属イオンとの錯体から成
る、NMR診断における緩和時間調節用化合物を
記載している。ヒトのNMR診断については、そ
れらの錯体の水溶液は経口的、神径中枢的、ある
いは管内的に投与され、常磁性金属の単純な無機
塩より毒性が少ないといわれている。 しかし、このドイツ特許願はいくつかの問題が
未解決のままで残つている。それらの錯体の毒性
は錯体が新陳代謝性である場合には特に一層、問
題となりそうである。錯体の生体分布はその錯体
形成剤の性質に大いに依存するが、この特徴は論
じられていない。NMR造影剤はその移動と生体
分布が知られかつある正確で以て制御されないか
ぎり、有用なものとなりそうもない。本発明の目
的はこれらの問題を克服することである。 本発明は、常磁性金属イオンが錯化される有機
錯化剤を化学的に結合されたポリサツカライドか
ら成る、NMR診断における緩和時間調節剤を提
供する。 本発明の薬剤が常磁性金属イオンの単純錯体よ
りすぐれれ可能性のある利点はプロトン緩和時間
に対するそれらのより大きい影響であり、それは
金属イオンの等量についてより良好な造影をもた
らす。 各種の異なるポリサツカライドは、それらの化
学的誘導体を含めて、使用してよく、そして薬剤
の性質に重要な影響をもつ。ポリサツカライドは
デキストランまたはデキストリンのような水溶性
であるか、あるいはセルロースあるいはセフアロ
ースまたは澱粉のような水不溶性であつてよい。
セフアロースはアガロースを交差結合させること
によつてつくられるビード形状化ゲルである。 水溶性ポリサツカライドをベースとする薬剤は
経口的または非経口的に投与することができ、非
水溶性ポリサツカライドは主して経口的投与に適
している。 ポリサツカライドはそれを投与する動物にとつ
て新陳代謝性であつてもよくそうでなくてもよ
い。NMR走査にとつて必要とされる時間間隔内
で新陳代謝されない化合物はここでは、たとえそ
れらがずつと長い時間間隔にわたつて新陳代謝さ
れるとしても、非代謝性と見做す。セルロース、
セフアロースおよびデキストリンはヒトには非代
謝性であるが、一方、澱粉とデキストリンは代謝
性である。不溶性の非代謝性（人の）ポリサツカ
ライドへ結合した金属イオン錯体を使用すること
の利点は、経口投与薬剤が胃腸管内に閉ぢ込めら
れて迅速に排泄物中に排泄されることである。し
ばしばおこるケースであるが遊離の常磁性金属イ
オンが毒性であるときには特に、このことは重要
である。 適当である常磁性金属イオンはこの分野でよく
知られており、原子番号が58から70であるランタ
ニド元素のイオンおよび原子番号が21から29、42
および44の遷移金属のイオンを含む。好ましいの
はMn（）、Cu（）、Fe（）、Gd（）、Fe（）
、
Cr（）、Dy（）、およびＶ（）である。金属イ
オンの選択に影響する要因はその常磁性的性質、
金属イオン−錯化剤−ポリサツカライド成分の安
定性、それの毒性、および錯体中の金属イオンが
プロトン緩和時間を変えるよう水と相互反応する
程度、である。 有機質錯化剤は好ましくは常磁性金属イオンと
体内で安定である錯体を形成するべきであり、こ
のことは遊離金属イオンが毒性であるときに特に
重要である。錯化剤は選択された金属イオンとキ
レートを形成するものであることができる。好ま
しいのは次のようなアミノポリ酢酢酸である： ニトリロトリ酢酸 Ｎ，Ｎ，N′，N′−エチレンジアミンテトラ酢
酸（EDTA）Ｎ−ヒドロキシエチル−Ｎ，N′，
N′−エチレンジアミントリ酢酸 Ｎ，Ｎ，N′，N″，N″−ジエチレントリアミン
ペンタ酢酸（DTPA） Ｎ−ヒドロキシエチルイミノジ酢酸。 特に好ましいのはEDTAとDTPAである。 その他の錯化剤は例えばアミノエチルジ燐酸
塩、グルタミン酸およびδ−Ｎ−アシル−δ−Ｎ
−ヒドロキシオルニチンのような遊離のアミノ基
をもつものを含む。 錯化剤は、例えば臭化シアンの使用による既知
の化学的方法によつてポリサツカライドへ化学的
に結合されてよい。ポリサツカライドへ直接に結
合される錯化剤は常磁性金属イオンをキレート化
することから立体的に妨害されるという可能性が
生ずる。この危険性は錯化剤とポリサツカライド
の間の連結体分子の使用によつて回避され得る。
その化学は次のように表現してよい： Ｘ−OH＋BrCN→Ｘ−OCN＋HBr Ｘ−OCN＋H2N−（CH2）o−NH2＋H2O →Ｘ−OCO−NH−（CH2）o−NH2＋NH3 ここに、Ｘはポリサツカライド残基であり、ｎ
は10までであり、例えば４−８である。次いで、 XOCO・NH.（CH2）o−NH2＋HOOC −Ｙ→XOCO・NH・（CH2）o −NHCO−Ｙ＋H2O ここに、Ｙは錯化剤残基である。ｎの値は臨界
的ではない。事実、連結体の腕はある場合には全
く必要とされないかもしれない。連結体を使用し
ない場合には、錯化剤は既知の化学的技法によつ
てポリサツカライドへ直接に結合されてよい。 ポリサツカライドをアミン基含有物連結腕と反
応させるために（あるいは錯化剤と直接に反応さ
せるために）活性化する用途に、臭化シアンに代
る各種のものが知られている。それらは次のもの
を含む： (1) １−シアノ−４−ジメチルアミノピリジニウ
ムテトラフルオロボレートポリサツカライド樹
脂へ配位子を共役結合させるためのシアニレー
テイング剤。Febs.Letters，154巻，No.１，
（1983），p.209。 (2) ベンゾキノン。BBA386（1975）196−202。 (3) カルボキシメチルデキストリン。 J.Applied Biochem.2，25−35（1980）。 (4) ビスエポキシラン。 J.Chromatograhy209、（1981）363。 (5) ジビニルスルフオン。 Meth.Enzymolsgy34，（1974），27。 (6) エピクロロヒドリン。 J.Chromat.51（1970）479。 J.Immunol.Meth.58（1983）93−107。 (7) カルボニルジイミダゾール。 J.Chromatography，196，（1980）379。 (8) 過沃素酸塩。 Immnslogy20，（1974）1061。 (9) 塩化シアヌール酸。 Anal.Biochem.87（1978）77。米国特許
3956272。Affinity Chromatography（Elsevier
Scient.Publ.Co.）1978年p.33−44，p.154，
p.324−326。 (10) トシルクロライド。 B.B.Res.Comm.102（1981）449 Eur.J.Biochem.112（1980）397 (11) ｐ−ニトロベンジルクロライド。 (12) ２−アミノエチルハイドロゼンサルフエート
（デキストランアミン）。 E.Jellum.Biochem.Pharm.，22，1179
（1973）。 反応過程の最終段階として常磁性イオンとのキ
レートを形成させることが一般的に便利である。
これ単純に、常磁性金属イオンの水溶液をポリサ
ツカライド−錯化剤と混合し、そして、混合物を
放置し、好ましくは錯化剤のプロトン化金属結合
部位のいくつかあるい全部を事前に中和すること
によつて、なされる。 ポリサツカライドが不溶性であるときには、そ
の物理的状態はそれがどのようにして投与される
べきかに依存する。微細分割状物質が好ましくは
用いられ、例えば５ミクロンのフアイバー状セル
ロース質物質である。このことは比表面積を増
し、従つて錯化剤との反応の速度と程度を増し得
る。どれほどの常磁性金属イオンをポリサツカラ
イドの単位重量あたりへ結合できるかを決定する
のはこの反応である。有用なNMR造影剤はポリ
サツカライドの200糖単位あたりに少くとも１個
の常磁性金属イオン、好ましくは100糖単位あた
り少くとも１個、を含むべきである。 それらの薬剤は経口的に投与して、例えば胃腸
管を肉視させてもよく、あるいは非経口的に、例
えば血液プール剤（blood pool agent）として
作用させてもよい。 以下の実施例は本発明を解説するものである。
実施例１および３から６は本発明による各種の
NMR造影剤の製法を示している。実施例２と７
から10はこれらの薬剤のいくつかの体内および体
外におる性質を示している。 実施例 １ Gd（）セルロース−連結体−DTPA
（GdcDTPA） (i) 合成 (ii) Gd（）結合 (i) 合成 (a) DTPA→DTPA無水物 55℃（油浴）において24時間、ピリジン中
で、40ｇのDTPAと無水酢酸（38ml）。DTPA
無水物を次に過によつて精製し、無水酢酸
（100ml）と無水エーテル（200ml）で以て洗滌
した。50℃の浴中で一夜乾燥。 (b) セルロースの活性化 セルロース（20ｇ）とCNBr（DMSO中で10
ｇ）をPH10.7のNaOH溶液（100ml）中で混合。
PHは急速に低下。2M NaOHの添加で以てPH
10.7へ上げる。混合物を25分間攪拌（さらに長
く攪拌すると糖単位間交差結合がおこるかもし
れない）。 活性化セルロースのIRスペクトルを記録。 (c) 活性化セルロース＋連結体→セルロース−連
結体 活性化セルロース（20ｇ）＋連結体（25ｇ）
〔１，４−ジアミノブタン、１，６−ジアミノ
ヘキサン、１，８−ジアミノオクタン〕。300ml
のH2O中。室温で３時間攪拌。HCl添加によつ
てPH７に保持。不溶性生成物を回収し乾燥。 セルロース−連結体のIRスペクトルを記録。 (d) セルロース−連結体＋DTPA無水物→
cDTPA二つの方法： 第一の方法（cDTPAの高収率−後記参照） 20ｇのセルロース−連結体を再蒸溜DMF中
で懸濁、ビスアンハイドライドDTPA（10ｇ）
を添加。16時間40℃で攪拌。生成物を捕集およ
び洗滌（DMF300ml、H2O2000ml）。 第二の方法 20ｇのセルロース−連結体をH2O（200ml）
中に懸濁、ビスアンハイドライド（10ｇ）を添
加。室温で24時間攪拌。生成物を捕集および洗
滌（H2O2000ml）。 総 括 四つのcDTAポリマーが製造された： 略語の定義： c4DTPA セルロース−ブタン連結体−
DTPA：DMF最終段階 c8DTPA セルロース−オクタン連結体−
DTPA：DMF最終段階 c6DTPA セルロース−ヘキサン連結体−
DTPA：DMF最終段階 c6DTPA（水） セルロース−ヘキサン連結体
−DTPA：H2O最終段階 (ii) coDTPAへのGd（）の結合 （ｎ＝４，６または８の場合） (1) coDTPAへのGd（）結合 (2) T1およびT2の緩和時間 (1) coDTPAへのGd（）結合 0.5ｇのcoDTPA＋５×10-5モルGd（）イオ
ン（10mlの５×10-3M Gd（NO3）3・5H2O）。
試料を１時間振とうし、次いで遠心分離
（400r.p.m.で３分間）。水性層の線幅を60MHz
において記録（室温）。
化学的に連結させたポリサツカライドから成る、
NMR診断における緩和時間調節剤。 ２ ポリサツカライドが水に不溶でありかつ調節
剤が投与されるべき動物によつて新陳代謝性でな
い、請求の範囲第１項に記載の調節剤。 ３ ポリサツカライドがセルロース、澱粉あるい
はセフアロースである、請求の範囲第２項に記載
の調節剤。 ４ ポリサツカライドがデキストランである、請
求の範囲第１項に記載の調節剤。 ５ 有機錯化剤がアミノポリ酢酸である、請求の
範囲第１項から第４項のいずれかに記載の調節
剤。 ６ 有機錯化剤がDTPAである、請求の範囲第
５項に記載の調節剤。 ７ 錯化剤が炭素原子数が10個までの鎖を含む連
結体分子によつてポリサツカライドへ連結され
る、請求の範囲第１項から第６項のいずれかに記
載の調節剤。 ８ 常磁性金属イオンが２価のMn、３価のGd、
または３価のFeである、請求の範囲第１項から
第７項のいずれかに記載の調節剤。 ９ ポリサツカライドの100砂糖単位あたり少く
とも１個の常磁性金属イオンが存在する、請求の
範囲第１項から第８項のいずれかに記載の調節
剤。 明細書 本発明はNMR（核磁気共鳴）造影剤、すなわ
ちNMR診断における緩和時間の調節剤、特にプ
ロトン緩和時間の調節剤に関するものである。本
発明の薬剤は体内NMR造影の前にヒトあるいは
その他の動物へ投与するのに最も適当である。 ドイツ特許願3129906は、開放鎖または環状の
錯体形成剤と常磁性金属イオンとの錯体から成
る、NMR診断における緩和時間調節用化合物を
記載している。ヒトのNMR診断については、そ
れらの錯体の水溶液は経口的、神径中枢的、ある
いは管内的に投与され、常磁性金属の単純な無機
塩より毒性が少ないといわれている。 しかし、このドイツ特許願はいくつかの問題が
未解決のままで残つている。それらの錯体の毒性
は錯体が新陳代謝性である場合には特に一層、問
題となりそうである。錯体の生体分布はその錯体
形成剤の性質に大いに依存するが、この特徴は論
じられていない。NMR造影剤はその移動と生体
分布が知られかつある正確で以て制御されないか
ぎり、有用なものとなりそうもない。本発明の目
的はこれらの問題を克服することである。 本発明は、常磁性金属イオンが錯化される有機
錯化剤を化学的に結合されたポリサツカライドか
ら成る、NMR診断における緩和時間調節剤を提
供する。 本発明の薬剤が常磁性金属イオンの単純錯体よ
りすぐれれ可能性のある利点はプロトン緩和時間
に対するそれらのより大きい影響であり、それは
金属イオンの等量についてより良好な造影をもた
らす。 各種の異なるポリサツカライドは、それらの化
学的誘導体を含めて、使用してよく、そして薬剤
の性質に重要な影響をもつ。ポリサツカライドは
デキストランまたはデキストリンのような水溶性
であるか、あるいはセルロースあるいはセフアロ
ースまたは澱粉のような水不溶性であつてよい。
セフアロースはアガロースを交差結合させること
によつてつくられるビード形状化ゲルである。 水溶性ポリサツカライドをベースとする薬剤は
経口的または非経口的に投与することができ、非
水溶性ポリサツカライドは主して経口的投与に適
している。 ポリサツカライドはそれを投与する動物にとつ
て新陳代謝性であつてもよくそうでなくてもよ
い。NMR走査にとつて必要とされる時間間隔内
で新陳代謝されない化合物はここでは、たとえそ
れらがずつと長い時間間隔にわたつて新陳代謝さ
れるとしても、非代謝性と見做す。セルロース、
セフアロースおよびデキストリンはヒトには非代
謝性であるが、一方、澱粉とデキストリンは代謝
性である。不溶性の非代謝性（人の）ポリサツカ
ライドへ結合した金属イオン錯体を使用すること
の利点は、経口投与薬剤が胃腸管内に閉ぢ込めら
れて迅速に排泄物中に排泄されることである。し
ばしばおこるケースであるが遊離の常磁性金属イ
オンが毒性であるときには特に、このことは重要
である。 適当である常磁性金属イオンはこの分野でよく
知られており、原子番号が58から70であるランタ
ニド元素のイオンおよび原子番号が21から29、42
および44の遷移金属のイオンを含む。好ましいの
はMn（）、Cu（）、Fe（）、Gd（）、Fe（）
、
Cr（）、Dy（）、およびＶ（）である。金属イ
オンの選択に影響する要因はその常磁性的性質、
金属イオン−錯化剤−ポリサツカライド成分の安
定性、それの毒性、および錯体中の金属イオンが
プロトン緩和時間を変えるよう水と相互反応する
程度、である。 有機質錯化剤は好ましくは常磁性金属イオンと
体内で安定である錯体を形成するべきであり、こ
のことは遊離金属イオンが毒性であるときに特に
重要である。錯化剤は選択された金属イオンとキ
レートを形成するものであることができる。好ま
しいのは次のようなアミノポリ酢酢酸である： ニトリロトリ酢酸 Ｎ，Ｎ，N′，N′−エチレンジアミンテトラ酢
酸（EDTA）Ｎ−ヒドロキシエチル−Ｎ，N′，
N′−エチレンジアミントリ酢酸 Ｎ，Ｎ，N′，N″，N″−ジエチレントリアミン
ペンタ酢酸（DTPA） Ｎ−ヒドロキシエチルイミノジ酢酸。 特に好ましいのはEDTAとDTPAである。 その他の錯化剤は例えばアミノエチルジ燐酸
塩、グルタミン酸およびδ−Ｎ−アシル−δ−Ｎ
−ヒドロキシオルニチンのような遊離のアミノ基
をもつものを含む。 錯化剤は、例えば臭化シアンの使用による既知
の化学的方法によつてポリサツカライドへ化学的
に結合されてよい。ポリサツカライドへ直接に結
合される錯化剤は常磁性金属イオンをキレート化
することから立体的に妨害されるという可能性が
生ずる。この危険性は錯化剤とポリサツカライド
の間の連結体分子の使用によつて回避され得る。
その化学は次のように表現してよい： Ｘ−OH＋BrCN→Ｘ−OCN＋HBr Ｘ−OCN＋H2N−（CH2）o−NH2＋H2O →Ｘ−OCO−NH−（CH2）o−NH2＋NH3 ここに、Ｘはポリサツカライド残基であり、ｎ
は10までであり、例えば４−８である。次いで、 XOCO・NH.（CH2）o−NH2＋HOOC −Ｙ→XOCO・NH・（CH2）o −NHCO−Ｙ＋H2O ここに、Ｙは錯化剤残基である。ｎの値は臨界
的ではない。事実、連結体の腕はある場合には全
く必要とされないかもしれない。連結体を使用し
ない場合には、錯化剤は既知の化学的技法によつ
てポリサツカライドへ直接に結合されてよい。 ポリサツカライドをアミン基含有物連結腕と反
応させるために（あるいは錯化剤と直接に反応さ
せるために）活性化する用途に、臭化シアンに代
る各種のものが知られている。それらは次のもの
を含む： (1) １−シアノ−４−ジメチルアミノピリジニウ
ムテトラフルオロボレートポリサツカライド樹
脂へ配位子を共役結合させるためのシアニレー
テイング剤。Febs.Letters，154巻，No.１，
（1983），p.209。 (2) ベンゾキノン。BBA386（1975）196−202。 (3) カルボキシメチルデキストリン。 J.Applied Biochem.2，25−35（1980）。 (4) ビスエポキシラン。 J.Chromatograhy209、（1981）363。 (5) ジビニルスルフオン。 Meth.Enzymolsgy34，（1974），27。 (6) エピクロロヒドリン。 J.Chromat.51（1970）479。 J.Immunol.Meth.58（1983）93−107。 (7) カルボニルジイミダゾール。 J.Chromatography，196，（1980）379。 (8) 過沃素酸塩。 Immnslogy20，（1974）1061。 (9) 塩化シアヌール酸。 Anal.Biochem.87（1978）77。米国特許
3956272。Affinity Chromatography（Elsevier
Scient.Publ.Co.）1978年p.33−44，p.154，
p.324−326。 (10) トシルクロライド。 B.B.Res.Comm.102（1981）449 Eur.J.Biochem.112（1980）397 (11) ｐ−ニトロベンジルクロライド。 (12) ２−アミノエチルハイドロゼンサルフエート
（デキストランアミン）。 E.Jellum.Biochem.Pharm.，22，1179
（1973）。 反応過程の最終段階として常磁性イオンとのキ
レートを形成させることが一般的に便利である。
これ単純に、常磁性金属イオンの水溶液をポリサ
ツカライド−錯化剤と混合し、そして、混合物を
放置し、好ましくは錯化剤のプロトン化金属結合
部位のいくつかあるい全部を事前に中和すること
によつて、なされる。 ポリサツカライドが不溶性であるときには、そ
の物理的状態はそれがどのようにして投与される
べきかに依存する。微細分割状物質が好ましくは
用いられ、例えば５ミクロンのフアイバー状セル
ロース質物質である。このことは比表面積を増
し、従つて錯化剤との反応の速度と程度を増し得
る。どれほどの常磁性金属イオンをポリサツカラ
イドの単位重量あたりへ結合できるかを決定する
のはこの反応である。有用なNMR造影剤はポリ
サツカライドの200糖単位あたりに少くとも１個
の常磁性金属イオン、好ましくは100糖単位あた
り少くとも１個、を含むべきである。 それらの薬剤は経口的に投与して、例えば胃腸
管を肉視させてもよく、あるいは非経口的に、例
えば血液プール剤（blood pool agent）として
作用させてもよい。 以下の実施例は本発明を解説するものである。
実施例１および３から６は本発明による各種の
NMR造影剤の製法を示している。実施例２と７
から10はこれらの薬剤のいくつかの体内および体
外におる性質を示している。 実施例 １ Gd（）セルロース−連結体−DTPA
（GdcDTPA） (i) 合成 (ii) Gd（）結合 (i) 合成 (a) DTPA→DTPA無水物 55℃（油浴）において24時間、ピリジン中
で、40ｇのDTPAと無水酢酸（38ml）。DTPA
無水物を次に過によつて精製し、無水酢酸
（100ml）と無水エーテル（200ml）で以て洗滌
した。50℃の浴中で一夜乾燥。 (b) セルロースの活性化 セルロース（20ｇ）とCNBr（DMSO中で10
ｇ）をPH10.7のNaOH溶液（100ml）中で混合。
PHは急速に低下。2M NaOHの添加で以てPH
10.7へ上げる。混合物を25分間攪拌（さらに長
く攪拌すると糖単位間交差結合がおこるかもし
れない）。 活性化セルロースのIRスペクトルを記録。 (c) 活性化セルロース＋連結体→セルロース−連
結体 活性化セルロース（20ｇ）＋連結体（25ｇ）
〔１，４−ジアミノブタン、１，６−ジアミノ
ヘキサン、１，８−ジアミノオクタン〕。300ml
のH2O中。室温で３時間攪拌。HCl添加によつ
てPH７に保持。不溶性生成物を回収し乾燥。 セルロース−連結体のIRスペクトルを記録。 (d) セルロース−連結体＋DTPA無水物→
cDTPA二つの方法： 第一の方法（cDTPAの高収率−後記参照） 20ｇのセルロース−連結体を再蒸溜DMF中
で懸濁、ビスアンハイドライドDTPA（10ｇ）
を添加。16時間40℃で攪拌。生成物を捕集およ
び洗滌（DMF300ml、H2O2000ml）。 第二の方法 20ｇのセルロース−連結体をH2O（200ml）
中に懸濁、ビスアンハイドライド（10ｇ）を添
加。室温で24時間攪拌。生成物を捕集および洗
滌（H2O2000ml）。 総 括 四つのcDTAポリマーが製造された： 略語の定義： c4DTPA セルロース−ブタン連結体−
DTPA：DMF最終段階 c8DTPA セルロース−オクタン連結体−
DTPA：DMF最終段階 c6DTPA セルロース−ヘキサン連結体−
DTPA：DMF最終段階 c6DTPA（水） セルロース−ヘキサン連結体
−DTPA：H2O最終段階 (ii) coDTPAへのGd（）の結合 （ｎ＝４，６または８の場合） (1) coDTPAへのGd（）結合 (2) T1およびT2の緩和時間 (1) coDTPAへのGd（）結合 0.5ｇのcoDTPA＋５×10-5モルGd（）イオ
ン（10mlの５×10-3M Gd（NO3）3・5H2O）。
試料を１時間振とうし、次いで遠心分離
（400r.p.m.で３分間）。水性層の線幅を60MHz
において記録（室温）。
【表】
結果は、DMF媒体をcoDTPA合成の最終段
階において使用するときにGdのより多くの吸
収がおこり、連結体の長さが結合Gd（）イオ
ンの数に影響を及ぼさないことを意味する。 Gdの結合はESR、電子スピン共鳴および
EM、電子顕微鏡Ｘ線分析によつて確認され
た。 (2) c6DTPAおよびGdc6DTPAの水のT1および
T2緩和時間に及ぼす影響 10mmNMRチユーブ。２mlのH2O／D2O
（70：30）を添加。T1は200MHzで室温におい
てインバージヨン・リカバリー・パルス・シー
ケンス（inversionrecovery pulse sequence）
を使つて測定した。0.25ｇのcDTPAを添加。
チユーブを振とうし、T1を記録。２mlのGd
（）イオン（５×10-3M Gd（NO3）3・5H2O、
すなわち10-5モルのGd（）イオン）を添加。
１時間振とう放置し、試料を洗滌し、２mlの
H2O／D2Oを添加。T1を前と同条件下で測定。
階において使用するときにGdのより多くの吸
収がおこり、連結体の長さが結合Gd（）イオ
ンの数に影響を及ぼさないことを意味する。 Gdの結合はESR、電子スピン共鳴および
EM、電子顕微鏡Ｘ線分析によつて確認され
た。 (2) c6DTPAおよびGdc6DTPAの水のT1および
T2緩和時間に及ぼす影響 10mmNMRチユーブ。２mlのH2O／D2O
（70：30）を添加。T1は200MHzで室温におい
てインバージヨン・リカバリー・パルス・シー
ケンス（inversionrecovery pulse sequence）
を使つて測定した。0.25ｇのcDTPAを添加。
チユーブを振とうし、T1を記録。２mlのGd
（）イオン（５×10-3M Gd（NO3）3・5H2O、
すなわち10-5モルのGd（）イオン）を添加。
１時間振とう放置し、試料を洗滌し、２mlの
H2O／D2Oを添加。T1を前と同条件下で測定。
【表】
0.017ｇのGdc6DTPAは５mmNMRチユーブ
中で0.7mlのH2O／D2O（70：30）の中に一様に
懸濁された。非遠心分離試料について60MHzに
おいて線幅を記録。（遠心分離する場合には、
遠心力はGdc6DTPAに作用して錯体をより早
く沈降させる）。 34Hzの線幅はH2O／D2O単独の同試料につい
て７Hzと比較して観察されて、0.017ｇの
Gdc6DTPAが水のT2を約５倍だけ減らすこと
を示す。 総 括 0.5ｇのcoDTPAが約５×10-5モルのGd（）イ
オンを結合する。0.25ｇのGdc6DTPAはH2Oの
T1値を2.88倍減らし、T2値を約５倍減らす。
NMRの検討では、連結体の長さが結合するGd
（）モル数に影響しないことを示した。計算で
は、連結体分子はセルロースの65糖単位毎に結合
することを示した。 実施例 ２ 目 的 c6DTPAによる153Gd（）吸収を追跡し、ねず
みの胃腸管中の153Gdc6DTPAの通過を検討する。 手 続 0.5ｇのc6DTPAをトリス（Tris）緩衝液（PH
7.2）の中で一晩中浸漬した。３×10ml部分のか
ん水で以て遠心分離を経て洗滌した。５mlの酢酸
塩緩衝液（PH5.6）の中の1.5mlの153GdCl3／HCl
を計数し、活性を測定し、次いでc6DTPAへ添加
し、ローラー上で２時間放置した。溶液を遠心分
離にかけ、水性層中のカウント数を測定した（従
つて153Gd（）のc6DTPAによる吸収％を推定す
る）。 0.32×10-4モルのGd（NO3）3・5H2Oを混合物へ
添加し、ローラー上で１週間放置し、遠心分離に
かけ、水性媒体中のカウン数を測定した。0.5ｇ
のc6DTPAを1.5mlの153GdCl3と一組に接種した
のち２時間後にc6DTPA上へ153Gdの91.5％の吸
収があつた。 接種後１週間の後に、DTPA上へ153Gdの63.2
％の吸収があつた。 この減少は放射能のないGd（）イオン添加後
の135Gd（）の解離に帰することができる。 洗滌後、わずか0.92％の153Gdのロスがあり、
153GdcDTPAが安定であることを意味している。 この153Gdc6DTPAを次に５mlのH2O中に再懸
濁させた（0.06mCi／ml）。１mlを次に４匹のス
プラグ・ダウレイ（Sprague Dawley）雄ねずみ
（投与前３日間代謝かごの中ですでに馴らしてい
る）へ投与した。各のねずみは経口投与の前にエ
ーテルで以て軽く麻酔をかけた（200mlの長いポ
ルテツクス（portex）6GFカテーテルを経て、錯
体の１ml）。投与後、計数率（count rate）をツ
インNaI結晶カウンターの中で、投与標準物と一
緒に取つた。尿と排泄物を投与後５時間、24時
間、48時間で捕集し、２匹は24時間で解剖し、他
の２匹は48時間で解剖した。器官、尿および排泄
物をオートガンマーカウンター中で153Gdについ
て検定した。 結果と討論 (1) 投与後24時間までに、97％の153Gd（）が排
泄物中に排泄されたが、尿の中で排泄される可
溶性生成物への153Gdc6DTPAの劣化がないこ
とを意味する。 (2) 投与後48時間において約100％の153Gd（）
が排泄された（排泄物を経て）。0.3％と0.7％
との尿の数字は僅かな排泄物汚染である。 (3) 0.4％の血液の数字は基底値レートの２倍以
下を示している。 (4) 投与後24時間または48時間において胃腸管以
外の検定された器官の中で153Gd（）の蓄積は
おこらなかつた。
中で0.7mlのH2O／D2O（70：30）の中に一様に
懸濁された。非遠心分離試料について60MHzに
おいて線幅を記録。（遠心分離する場合には、
遠心力はGdc6DTPAに作用して錯体をより早
く沈降させる）。 34Hzの線幅はH2O／D2O単独の同試料につい
て７Hzと比較して観察されて、0.017ｇの
Gdc6DTPAが水のT2を約５倍だけ減らすこと
を示す。 総 括 0.5ｇのcoDTPAが約５×10-5モルのGd（）イ
オンを結合する。0.25ｇのGdc6DTPAはH2Oの
T1値を2.88倍減らし、T2値を約５倍減らす。
NMRの検討では、連結体の長さが結合するGd
（）モル数に影響しないことを示した。計算で
は、連結体分子はセルロースの65糖単位毎に結合
することを示した。 実施例 ２ 目 的 c6DTPAによる153Gd（）吸収を追跡し、ねず
みの胃腸管中の153Gdc6DTPAの通過を検討する。 手 続 0.5ｇのc6DTPAをトリス（Tris）緩衝液（PH
7.2）の中で一晩中浸漬した。３×10ml部分のか
ん水で以て遠心分離を経て洗滌した。５mlの酢酸
塩緩衝液（PH5.6）の中の1.5mlの153GdCl3／HCl
を計数し、活性を測定し、次いでc6DTPAへ添加
し、ローラー上で２時間放置した。溶液を遠心分
離にかけ、水性層中のカウント数を測定した（従
つて153Gd（）のc6DTPAによる吸収％を推定す
る）。 0.32×10-4モルのGd（NO3）3・5H2Oを混合物へ
添加し、ローラー上で１週間放置し、遠心分離に
かけ、水性媒体中のカウン数を測定した。0.5ｇ
のc6DTPAを1.5mlの153GdCl3と一組に接種した
のち２時間後にc6DTPA上へ153Gdの91.5％の吸
収があつた。 接種後１週間の後に、DTPA上へ153Gdの63.2
％の吸収があつた。 この減少は放射能のないGd（）イオン添加後
の135Gd（）の解離に帰することができる。 洗滌後、わずか0.92％の153Gdのロスがあり、
153GdcDTPAが安定であることを意味している。 この153Gdc6DTPAを次に５mlのH2O中に再懸
濁させた（0.06mCi／ml）。１mlを次に４匹のス
プラグ・ダウレイ（Sprague Dawley）雄ねずみ
（投与前３日間代謝かごの中ですでに馴らしてい
る）へ投与した。各のねずみは経口投与の前にエ
ーテルで以て軽く麻酔をかけた（200mlの長いポ
ルテツクス（portex）6GFカテーテルを経て、錯
体の１ml）。投与後、計数率（count rate）をツ
インNaI結晶カウンターの中で、投与標準物と一
緒に取つた。尿と排泄物を投与後５時間、24時
間、48時間で捕集し、２匹は24時間で解剖し、他
の２匹は48時間で解剖した。器官、尿および排泄
物をオートガンマーカウンター中で153Gdについ
て検定した。 結果と討論 (1) 投与後24時間までに、97％の153Gd（）が排
泄物中に排泄されたが、尿の中で排泄される可
溶性生成物への153Gdc6DTPAの劣化がないこ
とを意味する。 (2) 投与後48時間において約100％の153Gd（）
が排泄された（排泄物を経て）。0.3％と0.7％
との尿の数字は僅かな排泄物汚染である。 (3) 0.4％の血液の数字は基底値レートの２倍以
下を示している。 (4) 投与後24時間または48時間において胃腸管以
外の検定された器官の中で153Gd（）の蓄積は
おこらなかつた。
【表】
【表】
総 括
c6DTPAの153Gd（）標識化は約60％の効率で
あつた（しかし冷Gd（）が過剰に存在する）。 経口的にねずみへ投与する際、153Gdc6DTPAの
97％は排泄物中で体から排泄され、Gdc6DTPA
残留がなく胃腸管に対して錯体が安定であること
を意味する。 153Gdc6DTPAに対する放射能検討とGdco
DTPA緩和性質について集めたデーターはGdco
DTPAが有力な経口的造影剤であることを示し
ている。 実施例 ３ Gd（）澱粉連結剤DTPA（GdStDTPA） もう一つの非水溶性剤を、実施例１に記載され
る方法によるが、しかし出発ポリサツカライドと
してセルロースの代りに澱粉を使用してつくり、
GdStDTPAと命名した。 300mlのH2O中の澱粉６ｇ＋２mlの2M
NaOH；溶液のPHは10.5。５分間攪拌。2.2ｇの
CNBr（２mlのDMFの中）を滴状添加。PH10を20
分間、2M NaOH添加によつて維持。次にHClを
添加、PHを７へ下げる。3.2ｇの１，６−ジアミ
ノヘキサンを添加。PH７をHCl添加によつて３時
間保ち（室温で絶えず攪拌）、次に過し、500ml
の水で以て洗滌。生成物の澱粉−連結体を次に
250mlのDMF中に取上げる（55℃において）。２
ｇのDTPA無水物を添加。混合物を12時間55℃
において攪拌。次いで、生成物の澱粉−連結体−
DTPA（StDTPA）を洗滌（300mlのDMFと500
mlのH2O）。Gd（）イオンの結合は飽和
GdStDTPA試料の電子ピストン共鳴（ESR）に
よつて確認された。 Gd（）飽和GdStDTPA誘導体についての
H2O T1緩和時間は0.12ｇ／mlについて142.2ms
であることが示され、同条件下のGdcDTPAにつ
いてより短かい。 実施例 ４ Gd（）セフアロース−連結体−DTPA
（GdsDTPA） (i) 合成 (ii) Gd（）の結合 (i) 合成 CNBr活性化セフアロース（１ｇ）を焼結ガラ
ス漏斗上で15分間1mM HCl（10ml）で以て膨潤
させ、次いで1mM HCl（200ml／ｇ・セフアロー
ス）で以て洗滌し、このHClは高PHにおいては加
水分解する反応基の活性を保存する。このゲルを
次に５mlのカツプリング緩衝液（0.25M
NaHCO3＋0.5M NaCl；PH8.5−9.0）で以て洗滌
した。 このゲルを１，６−ジアミノヘキサン（0.8ｇ）
を含む緩衝溶液（30ml）へ移し、回転オイール
（30r.p.m.）上で２時間、室温において混合した。
この段階での磁気攪拌器の使用はアガロース単位
を破壊し、低分子量生成物を形成する。生成物を
次に焼結漏斗で緩衝液（20ml）、次いでDMF（20
ml）で洗滌した。DMFによる最後の洗滌は次の
段階が無水状態であらねばならないので臨界的で
ある。 洗滌ゲルを次にDMF（50ml）とDTPA無水物
（DMSOの微小容積中で0.5ｇ）とを含むフラスコ
へ移した。混合物を回転ホイール上で室温におい
て最低６時間攪拌した。ゲルを次に（焼結漏斗を
経て）DMF（50ml）で以て、次いでH2O（100ml）
で以て洗滌した。グルタミン酸溶液を、これは連
結体を結合させない他の基をすべて封鎖するの
で、次に添加してよい（20ml）。 (ii) sDTPAへのGd（）の結合 Gd（）の結合は、NMRにより、水共鳴ピー
クの線幅の変化を追跡することによつて示すこと
ができる。 １ｇのsDTPAを焼結ガラス漏斗上に置き、10
mlのGd（）イオンを添加（５×10-3M Gd
（NO3）3・5H2O−線幅既知）。混合物をゆるやか
に１時間攪拌。上澄液を洗い出して集め、その後
の線幅を記録した。線幅の減少はGd（）の結合
を示す（すなわち、水溶液中のGd（）濃度が減
少したのである）。H2O（５ml）をこのゲルへ添
加し、ゆるやかに１時間振とうした。上澄液を洗
い出し、線幅を記録した。0.5ｇGdsDTPA／0.7
mlH2Oの線幅を記録し、Gd（）結合がおこつた
ことを示した。 線幅はすべて60MHzで記録した。 結 果
あつた（しかし冷Gd（）が過剰に存在する）。 経口的にねずみへ投与する際、153Gdc6DTPAの
97％は排泄物中で体から排泄され、Gdc6DTPA
残留がなく胃腸管に対して錯体が安定であること
を意味する。 153Gdc6DTPAに対する放射能検討とGdco
DTPA緩和性質について集めたデーターはGdco
DTPAが有力な経口的造影剤であることを示し
ている。 実施例 ３ Gd（）澱粉連結剤DTPA（GdStDTPA） もう一つの非水溶性剤を、実施例１に記載され
る方法によるが、しかし出発ポリサツカライドと
してセルロースの代りに澱粉を使用してつくり、
GdStDTPAと命名した。 300mlのH2O中の澱粉６ｇ＋２mlの2M
NaOH；溶液のPHは10.5。５分間攪拌。2.2ｇの
CNBr（２mlのDMFの中）を滴状添加。PH10を20
分間、2M NaOH添加によつて維持。次にHClを
添加、PHを７へ下げる。3.2ｇの１，６−ジアミ
ノヘキサンを添加。PH７をHCl添加によつて３時
間保ち（室温で絶えず攪拌）、次に過し、500ml
の水で以て洗滌。生成物の澱粉−連結体を次に
250mlのDMF中に取上げる（55℃において）。２
ｇのDTPA無水物を添加。混合物を12時間55℃
において攪拌。次いで、生成物の澱粉−連結体−
DTPA（StDTPA）を洗滌（300mlのDMFと500
mlのH2O）。Gd（）イオンの結合は飽和
GdStDTPA試料の電子ピストン共鳴（ESR）に
よつて確認された。 Gd（）飽和GdStDTPA誘導体についての
H2O T1緩和時間は0.12ｇ／mlについて142.2ms
であることが示され、同条件下のGdcDTPAにつ
いてより短かい。 実施例 ４ Gd（）セフアロース−連結体−DTPA
（GdsDTPA） (i) 合成 (ii) Gd（）の結合 (i) 合成 CNBr活性化セフアロース（１ｇ）を焼結ガラ
ス漏斗上で15分間1mM HCl（10ml）で以て膨潤
させ、次いで1mM HCl（200ml／ｇ・セフアロー
ス）で以て洗滌し、このHClは高PHにおいては加
水分解する反応基の活性を保存する。このゲルを
次に５mlのカツプリング緩衝液（0.25M
NaHCO3＋0.5M NaCl；PH8.5−9.0）で以て洗滌
した。 このゲルを１，６−ジアミノヘキサン（0.8ｇ）
を含む緩衝溶液（30ml）へ移し、回転オイール
（30r.p.m.）上で２時間、室温において混合した。
この段階での磁気攪拌器の使用はアガロース単位
を破壊し、低分子量生成物を形成する。生成物を
次に焼結漏斗で緩衝液（20ml）、次いでDMF（20
ml）で洗滌した。DMFによる最後の洗滌は次の
段階が無水状態であらねばならないので臨界的で
ある。 洗滌ゲルを次にDMF（50ml）とDTPA無水物
（DMSOの微小容積中で0.5ｇ）とを含むフラスコ
へ移した。混合物を回転ホイール上で室温におい
て最低６時間攪拌した。ゲルを次に（焼結漏斗を
経て）DMF（50ml）で以て、次いでH2O（100ml）
で以て洗滌した。グルタミン酸溶液を、これは連
結体を結合させない他の基をすべて封鎖するの
で、次に添加してよい（20ml）。 (ii) sDTPAへのGd（）の結合 Gd（）の結合は、NMRにより、水共鳴ピー
クの線幅の変化を追跡することによつて示すこと
ができる。 １ｇのsDTPAを焼結ガラス漏斗上に置き、10
mlのGd（）イオンを添加（５×10-3M Gd
（NO3）3・5H2O−線幅既知）。混合物をゆるやか
に１時間攪拌。上澄液を洗い出して集め、その後
の線幅を記録した。線幅の減少はGd（）の結合
を示す（すなわち、水溶液中のGd（）濃度が減
少したのである）。H2O（５ml）をこのゲルへ添
加し、ゆるやかに１時間振とうした。上澄液を洗
い出し、線幅を記録した。0.5ｇGdsDTPA／0.7
mlH2Oの線幅を記録し、Gd（）結合がおこつた
ことを示した。 線幅はすべて60MHzで記録した。 結 果
【表】
0.5ｇGdsDTPA／0.7mlH2Oは14Hzの線幅を与
えた0.5ｇ・sDTPA／0.7mlH2Oと比べて140Hzの
線幅を与えた。そのT1は同じ濃度でのsDTPAに
ついての3000msに比べてGdsDTPAポリマー
（0.5ｇ／0.7mlH2O）について10ms以下へ減少し
た。 討 論 H2O洗液の線幅の減少は１ｇのsDTPAがほぼ
５×10-5モルのGd（）イオンを結合することを
意味している。 ゲルを２回洗滌して、洗滌の水線幅の増加は観
察されず、従つて錯体GdsDTPAは安定である。 セフアロース−連結体単位の酸加水分解の
NMR分析は１個の連結体単位がセフアロース中
で70糖単位毎に結合していることを暗示してい
る。 実施例 ５ Gd（）デキストラン−連結体−（GddDTPA） (i) 合成 (ii) 常磁性金属イオンの結合 (i) dDTPAの合成 丸底フラスコ中の２ｇのデキストラン（分子
量18000）＋150mlのH2O（少くとも150ml。さも
なければ交差結合がおこり、白色沈澱がCNBr
活性化時に形成する）。１ｇのCHBr（微小容積
のDMSO）を添加し、溶液を2M NaOH添加
によつてPH10.7に20分間維持。約20分後、また
は交差結合の徴候（白色沈澱形成）が観察され
たときに、次の段階を実施した。 １，６−ジアミノヘキサン（1.2ｇ）を溶液
混合物へ添加し、この混合物を次に3000mlへ稀
釈して３時間攪拌（室温で）し、PHを7.4に保
ち、次いで回転蒸発によつて除き、油状生成物
（きわめて粘稠のデキストラン溶液）が残留す
る。DMF（100ml）を添加し、DTPA無水物
（DMSO中で１ｇ）を添加。混合物を12時間室
温できわめてゆつくりと磁気攪拌器によつて攪
拌した。 DMFを次に回転蒸発によつて取出す。粘稠
溶液を次に予め浸漬した透析サツク
（presoaked dialysis sack）の中へ注入し24時
間にわたつて透析した（３の水を４回変え
る）。生成物を次に丸底フラスコの中に注ぎ、
一夜凍結乾燥した。 (ii) dDTPA（分子量18000）への常磁性金属イオ
ンの結合 (1) 四つの試料チユーブをつくり、各々は10ml
のH2Oと2.23mgのMnSO4・4H2O（10-3M）を
含む。dDTPAの量を増しながら各チユーブ
へ順次添加する。線幅を60MHzで記録した。
結果を次に表示する。それらはdDTPAへの
Mn（）の結合を示している。
えた0.5ｇ・sDTPA／0.7mlH2Oと比べて140Hzの
線幅を与えた。そのT1は同じ濃度でのsDTPAに
ついての3000msに比べてGdsDTPAポリマー
（0.5ｇ／0.7mlH2O）について10ms以下へ減少し
た。 討 論 H2O洗液の線幅の減少は１ｇのsDTPAがほぼ
５×10-5モルのGd（）イオンを結合することを
意味している。 ゲルを２回洗滌して、洗滌の水線幅の増加は観
察されず、従つて錯体GdsDTPAは安定である。 セフアロース−連結体単位の酸加水分解の
NMR分析は１個の連結体単位がセフアロース中
で70糖単位毎に結合していることを暗示してい
る。 実施例 ５ Gd（）デキストラン−連結体−（GddDTPA） (i) 合成 (ii) 常磁性金属イオンの結合 (i) dDTPAの合成 丸底フラスコ中の２ｇのデキストラン（分子
量18000）＋150mlのH2O（少くとも150ml。さも
なければ交差結合がおこり、白色沈澱がCNBr
活性化時に形成する）。１ｇのCHBr（微小容積
のDMSO）を添加し、溶液を2M NaOH添加
によつてPH10.7に20分間維持。約20分後、また
は交差結合の徴候（白色沈澱形成）が観察され
たときに、次の段階を実施した。 １，６−ジアミノヘキサン（1.2ｇ）を溶液
混合物へ添加し、この混合物を次に3000mlへ稀
釈して３時間攪拌（室温で）し、PHを7.4に保
ち、次いで回転蒸発によつて除き、油状生成物
（きわめて粘稠のデキストラン溶液）が残留す
る。DMF（100ml）を添加し、DTPA無水物
（DMSO中で１ｇ）を添加。混合物を12時間室
温できわめてゆつくりと磁気攪拌器によつて攪
拌した。 DMFを次に回転蒸発によつて取出す。粘稠
溶液を次に予め浸漬した透析サツク
（presoaked dialysis sack）の中へ注入し24時
間にわたつて透析した（３の水を４回変え
る）。生成物を次に丸底フラスコの中に注ぎ、
一夜凍結乾燥した。 (ii) dDTPA（分子量18000）への常磁性金属イオ
ンの結合 (1) 四つの試料チユーブをつくり、各々は10ml
のH2Oと2.23mgのMnSO4・4H2O（10-3M）を
含む。dDTPAの量を増しながら各チユーブ
へ順次添加する。線幅を60MHzで記録した。
結果を次に表示する。それらはdDTPAへの
Mn（）の結合を示している。
【表】
加水分解物のNMR分析は１個の連結体が
デキストランの43糖残基毎に結合しているこ
とを暗示する。 dDTPAポリマーへのガドリニウム結合は
ESRによつて示され；dDTPA（分子量
82000）Gd（NO3）3・5H2Oの混合物を半時間
保温し次いで得られる溶液を24時間透析し
て、その透析溶液のESRを記録し、Gd（）
がポリマーへ結合によつて保持されたことを
示した。GddDTPAのH2OのT1測定値を記
録しデキストラン水溶液単独と比較した。
デキストランの43糖残基毎に結合しているこ
とを暗示する。 dDTPAポリマーへのガドリニウム結合は
ESRによつて示され；dDTPA（分子量
82000）Gd（NO3）3・5H2Oの混合物を半時間
保温し次いで得られる溶液を24時間透析し
て、その透析溶液のESRを記録し、Gd（）
がポリマーへ結合によつて保持されたことを
示した。GddDTPAのH2OのT1測定値を記
録しデキストラン水溶液単独と比較した。
【表】
結果はGd（）がdDTPAへ結合し、
GddDTPAが有効な緩和剤であることを示し
ている。 各種の分子量（9000、18000、82000、
110000および150000）のデキストランを出発
物質として使用してこの実験を繰返した。こ
のポリマータイプはまたカルボキシメチルデ
キストラン（文献３）、トシルクロライド
（文献10）、およびデキストランアミン（文献
12）によつて合成されかつ特性づけられた。 実施例 ６ Gd（）デキストランアミノエチルジスホスホ
ネート（GddAEDP） デキストラン（分子量82000）をクロロ酢酸に
よつてカルボキシメチルデキストラン（文献３）
へ活性化した。活性化デキストラン（３ｇ）を20
mlのH2Oの中にとり上げる。アミノエチルジハ
イドロゼンホスフエート（0.5ｇ）の水溶液を添
加し、溶液をPH５−８へ調節した。10分間攪拌
機、0.6ｇに１−エチル−３−（３−ジメチルアミ
ノプロピルカルボジイミド）・HClを添加した
（PH５−８を維持）。溶液を１時間攪拌し、両添加
を２回繰返した。最後の添加の後に、混合物を12
時間攪拌し、溶液を次に透析した（24時間にわた
つて３のH2Oを４回変える）。Gd（）金属の
吸収はGd（NO3）3・5H2OとdAEDPの透析溶液混
合物についてのESR分析によつて示された。 実施例 ７ Gd153dDTPA（分子量18000）の試料を11−14
mg／Kg・体重の投与量でうさぎへ経口投与した。
放射能は72時間以内に全部排泄された。尿中の活
性は無視でき、錯体の破断または吸収がないこと
を示した。 実施例 ８ GddDTPA（分子量18000）の水溶液（４mg／生
理食塩水）を３匹のスプレーギユ・ダウレイねず
みと２匹のうさぎへそれぞれ10mg／Kgと2.5mg／
Kgの投与水準において投与した。悪い影響は認め
なかつた。 実施例 ９ 塩水溶液中のGdc6DTPAおよびGddDTPAの
造影力増強性は6.4MHzにおいて、並べたテスト
チユーブのプロトンNMR像を影像として観察す
ることによつて示された。 実施例 10 体内での造影力増強を示すために、合計100mg
のGddDTPA（分子量18000）で経口的に約50mlの
生理的食塩水溶液として麻酔下のうさぎへ投与し
た。次の二、三時間の間、胃と腸の領域を示す断
面の6.4MHzにおけるプロトンNMR像を、プログ
レツシブ飽和およびインバージヨン・リカバリ
ー・パルス列を使つて記録した。プロトン緩和時
間の短縮化に基づいて、選択された像領域におい
てコントラストが現われた。例えば、胃中の液体
は、もとは黒色でその上方の空間中のガスと区別
できなかつたのに、白色となつた（黒色は低プロ
トン密度またはプロトンの長緩和時間を示すもの
である）。同じく、小腸管もまた今や識別できた。
GddDTPAが有効な緩和剤であることを示し
ている。 各種の分子量（9000、18000、82000、
110000および150000）のデキストランを出発
物質として使用してこの実験を繰返した。こ
のポリマータイプはまたカルボキシメチルデ
キストラン（文献３）、トシルクロライド
（文献10）、およびデキストランアミン（文献
12）によつて合成されかつ特性づけられた。 実施例 ６ Gd（）デキストランアミノエチルジスホスホ
ネート（GddAEDP） デキストラン（分子量82000）をクロロ酢酸に
よつてカルボキシメチルデキストラン（文献３）
へ活性化した。活性化デキストラン（３ｇ）を20
mlのH2Oの中にとり上げる。アミノエチルジハ
イドロゼンホスフエート（0.5ｇ）の水溶液を添
加し、溶液をPH５−８へ調節した。10分間攪拌
機、0.6ｇに１−エチル−３−（３−ジメチルアミ
ノプロピルカルボジイミド）・HClを添加した
（PH５−８を維持）。溶液を１時間攪拌し、両添加
を２回繰返した。最後の添加の後に、混合物を12
時間攪拌し、溶液を次に透析した（24時間にわた
つて３のH2Oを４回変える）。Gd（）金属の
吸収はGd（NO3）3・5H2OとdAEDPの透析溶液混
合物についてのESR分析によつて示された。 実施例 ７ Gd153dDTPA（分子量18000）の試料を11−14
mg／Kg・体重の投与量でうさぎへ経口投与した。
放射能は72時間以内に全部排泄された。尿中の活
性は無視でき、錯体の破断または吸収がないこと
を示した。 実施例 ８ GddDTPA（分子量18000）の水溶液（４mg／生
理食塩水）を３匹のスプレーギユ・ダウレイねず
みと２匹のうさぎへそれぞれ10mg／Kgと2.5mg／
Kgの投与水準において投与した。悪い影響は認め
なかつた。 実施例 ９ 塩水溶液中のGdc6DTPAおよびGddDTPAの
造影力増強性は6.4MHzにおいて、並べたテスト
チユーブのプロトンNMR像を影像として観察す
ることによつて示された。 実施例 10 体内での造影力増強を示すために、合計100mg
のGddDTPA（分子量18000）で経口的に約50mlの
生理的食塩水溶液として麻酔下のうさぎへ投与し
た。次の二、三時間の間、胃と腸の領域を示す断
面の6.4MHzにおけるプロトンNMR像を、プログ
レツシブ飽和およびインバージヨン・リカバリ
ー・パルス列を使つて記録した。プロトン緩和時
間の短縮化に基づいて、選択された像領域におい
てコントラストが現われた。例えば、胃中の液体
は、もとは黒色でその上方の空間中のガスと区別
できなかつたのに、白色となつた（黒色は低プロ
トン密度またはプロトンの長緩和時間を示すもの
である）。同じく、小腸管もまた今や識別できた。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB848413849A GB8413849D0 (en) | 1984-05-31 | 1984-05-31 | Nmr contrast agents |
| GB8413849 | 1984-05-31 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61501571A JPS61501571A (ja) | 1986-07-31 |
| JPH0563453B2 true JPH0563453B2 (ja) | 1993-09-10 |
Family
ID=10561731
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60502468A Granted JPS61501571A (ja) | 1984-05-31 | 1985-05-31 | Ｎｍｒ造影剤 |
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|---|---|
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| JP (1) | JPS61501571A (ja) |
| DE (1) | DE3585668D1 (ja) |
| GB (1) | GB8413849D0 (ja) |
| WO (1) | WO1985005554A1 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP3037298U (ja) * | 1996-10-29 | 1997-05-16 | 亨 原 | 内部に洗浄粒を充填したたわし |
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| US4735796A (en) * | 1983-12-08 | 1988-04-05 | Gordon Robert T | Ferromagnetic, diamagnetic or paramagnetic particles useful in the diagnosis and treatment of disease |
| SE465907B (sv) * | 1984-11-01 | 1991-11-18 | Nyegaard & Co As | Diagnosticeringsmedel innehaallande en paramagnetisk metall |
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1984
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-
1985
- 1985-05-31 DE DE8585902602T patent/DE3585668D1/de not_active Expired - Fee Related
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- 1985-05-31 EP EP85902602A patent/EP0183760B1/en not_active Expired
- 1985-05-31 JP JP60502468A patent/JPS61501571A/ja active Granted
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