JPS615095A - コノトキシンｍｉ（ｂ）類縁体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、コアトキシンＭｌ（Ｂ）類縁体及びこれを有
効成分とする筋肉弛緩剤に関する。

従来の技術 本発明者らは、先に特願昭５９−８３４６３号において
、コアトキシンＧＴＩと類似、骨格を４するコアトキシ
ンＭＩのうち、特にＢタイプの類縁体（３と８．４と１
４４位置Ｃｙｓがそれぞれジスルフィド結合をしている
もの）、例えば次に示すようなりｅｓ−ＮＨ７”、Ｄｅ
ｓ［Ｇ’、Ｒ２］等が局部あるいは全身の筋肉弛緩剤と
して作用する穏やかな生理活性を有することを提案した
。

＾ｓｎ”Ｔｙｒ１２Ｓｅｒ”Ｃｙｓ１４−ＮＨ２Ｄｅｓ
　　ＮＨ２”： Ｇｌｙ’Ａｒｇ”Ｃｙｓ３Ｃｙｓ’）ｌ＋ｓ’Ｐｒｏ１
′八Ｉａ’Ｃｙｓ”［；ｌｙ”Ｌｙｓ’　”八ｓｎ”Ｔ
ｙｒ１２Ｓｅｒ”Ｃｙｓ１４−ＯＨＡｓｎ”Ｔｙｒ”Ｓ
ｅｒ”Ｃｙｓ目−ＮＨ。

λ叫Δ断暖 本発明者らは、上記コノトキシンＭＩ（Ｂ）およびその
類縁体の生理活性とこれらの構造およびアミノ酸との関
連を追及した。その結果、二つのジスルフィド結合の有
無、お上び６位置と９位置のアミノ酸（Ｐｒｏ’、　Ｇ
ｌｙ’）の特異配座が、生理活性と密接な関係を有する
と共に、コノトキシンＭｌ（Ｂ）から前記Ｇｌｙｌを除
去したもの、あるいは特定位置のアミノ酸（ＧＩｙ’ｙ
ＡｒＨ２，１Ｉｉｓ５＋Ｌｙｓ”等）を他のアミノ酸で
置換することにより、コノトキシンＭｌ（Ｂ）類縁体の
有する生理活性を更に穏やかなものとすることができる
ことを見出し、本発明に至った。

即ち、本発明は、下記の式ａ−にで表されるフットキシ
ンＭＩ（Ｂ）Ｍ縁体及び該類縁体を有効成分として含有
する筋肉弛緩剤に関する。。

ａ、＾ｒｇ−Ｃｙｓ３−Ｃｙｓ”−Ｈｌｓ　　Ｐｒｏ−
八Ｉａ　　Ｃｙｓ８−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−八５ｎ−Ｔｙｒ
−Ｓｅｒ　　　Ｃｙｓ”−ＮＩＩ２ｂ、Ｇｌｙ−＾ｒｇ
−Ｃｙｓ３−Ｃｙｓ’　　　Ｈｉｓ　　Ｐｒｏ−八１ａ
−Ｃｙｓ８−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−＾５ｎ−Ｔｙｒ−＾Ｉａ
　　Ｃｙｓ”　　Ｎ１１２ｃ、Ｇｌｙ−八ｒｇ−Ｃｙｓ
３−Ｃｙｓ’　　Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−八１ａ−Ｃｙｓ８Ｇ
ｌｙ　　Ｌｙｓ−＾５ｎ−Ｐｈｅ　　５ｅｒ−Ｃｙｓ”
−Ｎｌ１２ｄ、Ｇｌｙ−＾ｒｇ−Ｃｙｓ３−Ｃｙｓ’　
　Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−＾１ａ−Ｃｙｓ８−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ
−ΔＩａ　　Ｔｙｒ　　５ｅｒ−Ｃｙｓ”−ＮＨ２ｅ、
Ｇｌｙ−＾ｒｇ−Ｃｙｓ３−Ｃｙｓ’　　Ｈｉｓ−Ｐｒ
ｏ−八１ａ−Ｃｙｓ８−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ　　Ｇｌｎ−Ｔ
ｙｒ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ１４−ＮＨ２Ｆ、ｃｒｙ−Δｒｇ
−Ｃｙｓ１−Ｃｙｓ’　　Ｈｉｓ　　Ｉ’ｒｏ−Δ１ａ
−Ｃｙｓ’−Ｇｌｙ　　　０ｒｎ−八ｓｎ　　　Ｔｙｒ
　　　５ｅｒ−Ｃｙｓ”−Ｎ１２ｇ、　ｃｒｙ−八ｒｇ
−Ｃｙｓ”　　　Ｃｙｓ’−Ｈｌｓ−Ｐｒｏ−八１ａ−
Ｃｙｓ’−Ｇｌｙ−Ｎｌｅ−＾ｓｎ　　Ｔｙｒ　　５ｅ
ｒ−ＣｙｓＩ４−ＮＨ２ｈ、　　Ｇｌｙ−八ｒＢ　　　
Ｃｙｓ３−Ｃｙｓ’　　　１ｌｉｓ−Ｐｒｏ−八１ａ−
Ｃｙｓ８−＾１ａ−Ｌｙｓ−八ｓｎ　　　Ｔｙｒ　　　
５ｅｒ−Ｃｙｓ”−ＮＨ２ｉ、　　ｃｌｙ−八ｒｇ−Ｃ
ｙｓ３−Ｃｙｓ’−Ｐｂｅ−Ｐｒｏ−＾１ａ−Ｃｙｓ８
−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−八５ｎ−Ｔｙｒ−Ｓｅｔ−Ｃｙｓ”
−ＮＨ２ｊ、ｃｌｙ−Ｎｌｅ−Ｃｙｓ”−Ｃｙｓ’−Ｈ
ｌｓ−Ｐｒｏ−八Ｉｎ−ＣｙｓＢ−Ｃ１ｙ−Ｌｙｓ−八
５ｎ−Ｔ’ｙｒ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ”−ＮＨ２に、Δｒｇ
−＾ｒＦｌ−Ｃｙｓ’−Ｃｙｓ’−Ｈｌｓ　　Ｐｒｏ−
＾１ａ−Ｃｙｓ”−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−八５ｎ−Ｔｙｒ−
Ｓｅｒ−Ｃｙｓ”　−ＮＨ２（但し、式ａ−に中、Ｃｙ
ｓ’とＣｙｓ８およびＣｙｓ’とＣｙ　ｓ　Ｉ　４はい
ずれもジスルフィド結合をしてν）る。）本発明に係る
コノトキシンＭＩ（Ｂ）類縁体を構成するα−アミノ酸
は、Ｌ−グリシン（ＧＬｙ）、アルギニン（八ｒｇ）、
システィン（Ｃｙｓ）　、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、プロ
リン（Ｐｒｏ）　、グリシン（Ｇｌｙ）、リジン（Ｌｙ
ｓ）、アスパラギン（八ｓｎ）、チロシン（Ｔｙｒ）お
よびセリン（Ｓｅｒ）の１０種を基本とし、この他にＬ
−オルニチン（Ｏｒｎ）およびアミノ酸類似物質である
ノルロイシン（Ｎｌｅ）が挙げられる。

上記アミノ酸から本発明に係るコノトキシンＭＩ（Ｂ）
類縁体を合成するには、一般に使用されるアミ７基、カ
ルボキシル基や側鎖官能基の保護、脱離と共に従来ペプ
チド合成に慣用される段階的伸長法、７ラグメント縮合
法およびこれらを適宜組合せることによ；て容易に行う
ことができる。

本発明において使用されるアミ７基および側鎖官能基の
保護基としては、アセチル（＾ｃ−）、アセトアミドメ
チル（八〇ｒｏ−）、ｔ−７ミルオＡ・ジカルボニル（
＾０ｃ−）、ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ　　）、
を−アミルオキシカルボニル（Δ０Ｃ−）、トリチル（
Ｔｒｉ−）、ベンゾイル（Ｂｚ−）、ベンジル（Ｂｚｌ
−）、２゜６−ジクロロベンジル（ＣＩ。Ｂｚｌ−）、
カルボキシメチル（Ｃ＋ａ、）、２．４−ジニトロフェ
ニル　（Ｄｎｐ　　）、ホルミル（Ｆｏｒ−）、ｐ−メ
トキシベンノル（Ｍｌｌｚｌ　　）、７タロイル（Ｐｈ
ｔ−）、トリフルオロアセチル（Ｔｆａ−）、トシル（
Ｔｏｓ−）、トリチル（Ｔｒｔ、　　）、ペンノルオキ
シカルボニル（Ｚ−）、ｏ−クロロベンノルオキシカル
ボニル（Ｚ（ＣＩ）−）、ｐ−ニトロベンジル４キシカ
ルボニル（Ｚ（ＮＯ２）−）その他一般に使用される保
護基が挙げられるが、アミノ基への保護基の導入および
脱離の容易さからＢｏｃ−１２−等の使用が好適である
。また、側鎖官能基の保護基としては、Ｃｙｓの場合そ
のジスルフィドの結合位置を規制するため、八Ｃ１ｒｌ
−および４−メチルベンジル（４−ＭｅＢｚｌ）を選択
使用し、Ｓｅｒ、’　Ｔｙｒ、　ＡｒｇおよびＬｙｓの
側鎖官能基の保護基としてはそれぞれＢｚｌ−１ＣＩ２
ＢＺｌ−１Ｔｏｓ−１Ｚ（Ｃ１）−基の使用が好ましい
。

また、本発明において使用されるカルボキシル基の保護
方法としては、ｔ−ブチルエステル（−ＯＢｕ　）、ベ
ンジルエステル（−０Ｂｚｌ）、エチルエステル（−０
Ｅｔ）、ｐ−ニトロベンジンジルエステル（−ＯＮＢｚ
ｌ）、ｐ−ニトロフェニルエステル（０Ｎｐ）、７エナ
シルエステル（０Ｐａｃ）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイ
ミドエステル（−０Ｓｕ）等のエステルの形成やその他
一般に使用される保護基が挙げられるが、前記アミ７基
の保護基の脱離との関連で、−０Ｂｚ　ｌおよび一０Ｐ
ａｃ基によるエステル形成が好適である。

これらの保護基による保護方法あるいは保護基の脱離方
法は、従来ペプチドの合成の際に慣用されている手段を
利用して行うことができる。

かくして、例えばＤｃｓ　−［Ｇｌｙ’　］−：ｌ　／
　）　Ｎ　Ｅ／　ンＭｌ（Ｂ）を合成するには、Ｂｏｃ
＝Ｃｙｓ（４Ｍｅ［１ｚｌ）−Ｎ１１２を出発原料とし
て、順次ａ−アミノ基及び必要に応じて側鎖官能基を保
護したＢｏｃ、−５ｅｒ（Ｂｚｌ）、Ｔｙｒ　（Ｃｌ２
ＢＺｌ）、八〇〇及びしｙｓ（ＣＩＺ）をこれらの活性
エステル又は１ＯＢｔ存在下に縮合剤１例えばジシクロ
へキシルカルボジイミド、１−エチル−３−（３−Ｉメ
チルアミノプロピル）カルボジイミド（ｕ＋ｓｃ　ｉ　
）を反応させて７ラグメン）（Ａ）Ｒ１ 嘴 Ｂｏａ−Ｌｙｓ（ＣＩＺ）＾５ｎＴｙｒ（ＣＩＪｚｌ）
Ｓｅｒ（Ｉｌｚｌ）Ｃｙ！ＨＮｌ１２を得る。

一方、Ｇｌｙを出発原料として、これをＢｏｃ　−Ｃｙ
ｓ（八〇ｍ）−ＯＮｐと反応させてＢｏａ−Ｃ１４；（
八ｃｍ）Ｇｌｙとし、ＰａｃＢｒとの反応でＢｏｃ−Ｃ
ｙＳ（Ａｃｍ　）Ｇ　ｌ　ｙ　−０Ｐａｃとした後、順
次Ｂｏｃ−＾１ａ−ＯＮＳｕＳＢｏｃ−Ｐｒｏ、　ｌ１
ｉｓ（Ｔｏｓ）、Ｃｙｓ（４ＭｅＢｚｌ）、Ｃｙｓ（Ａ
Ｃｌｌｌ）およびＡｒｇ（Ｔｏｓ）を前記と同様に反応
させて７ラグメン）（Ｂ）を得る。

かくして得られた保護ペプチド、即ち７ラグメント（Ａ
）および（Ｂ）を次式に示す如くそれぞれＺｎ／八Ｃへ
Ｈ，トリフルオロ酢酸（ＴＦ八）／ＨＣＩで処理して末
端の保護基を除去し、縮合剤（ｗ−ｓｃｉ）の存在で７
ラグメントを結合させ、コノトキシンＭＩの基本構造を
有する保護ペプチド＜Ｃ＞を合成する。

Ｒ４ 一へ５ｎＴｙｒ（Ｃｌ２ＢＺｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚ’１）Ｃ
ｙｓ−Ｎｌ２　　　　　　　（Ｃ）尚、この保護ペプチ
ド（Ｃ）は、Ｃｙｓの一３Ｈを保護する保護基Ｒ１〜Ｒ
４を表１の如く変えることにより、ジスルフィド結合位
置の異なる三種（Ａ、Ｂ。

Ｃタイプ）のコントキシンＭｌを得ることができる。

また、特定位置のアミノ酸、例えばＧｌｙ’→Ａｒｇ。

八ｒ　ｇ　２→Ｎｌｅ、５ｅｒ１１→＾１ａの如く置換
するには上記７ラグメン）（Ａ）、（Ｂ）の逐次合成の
段階で対応する保護アミノ酸と反応せしめればよい。

表１ タイ７’Ａ　　Ａｃ＋ｎ　　　　　Ａｃｍ　　４−Ｍｅ
Ｂｚｌ　４−ＭｅＢｚｌタイプＢ　　　　Ａｃｍ　　　
　　４−ＭｃＢｚｌ　　　　八ｃｔｎ　　　　　４−Ｍ
ｃｌｌｚｌタイプＣ４ＭｅＢｚｌ　　　八ｃｍ　　　　
Ａｃ＋ｎ　　　４　　ＭｃＢｚｌ次いで、八ｃｍ−，４
ＭｅＢｚｌ−基の結合位置によって三種に分けられる保
護ペプチド（Ｃ）は、最初に７フ化水素酸（肝）−アニ
ソールによりＡＣｌｌｌ−基を除く保護基を除去した後
、４−ＭｃＢｚｌ−基の除去位置にあるＣｙｓ　　ＳＨ
基をに３［Ｆｅ（ＣＮ）ｉ］により酸化して一個のノス
ルフイド結合を有する保護ペプチド［ＳＳ、２八ｃｍｌ
とし、次いでこれを更に脱保護（八ｃｍ−）した後、ヨ
ウ素メタ７−ル溶液（１２／Ｍｅ０１１）で酸化して二
個のノスルフイド結合を有する［２ＳＳ］体が得られる
。

上記反応に際し、活性エステルを用いる場合にはｐ−ニ
トロフェニルエステルやＮ−ヒドロキシスクシンイミド
エステル等を好ましい例としてあげることができる。ま
た、溶媒としては、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、
ブタノール（ＢｕＯＨ）、メタノール（Ｍｅｏｌｌ）等
ペプチド合成に一般に使用されるものを好適に使用する
ことができる。反応は室温で進行するが、所望に応じて
加熱し、反応を促進させることもできる。

反応混合物より本発明に係るコノトキシンＭＩ（Ｂ）Ｍ
縁体を単離するには、例えば反応混合物を濃縮乾固し、
残溜物をカラムクロマトグラフィーにより精製し次いで
凍結乾燥する。

なお、上記コアトキシンＭＩ（Ｂ）類縁体は、酸付加塩
の形でもよく、その場合の酸は塩酸、硫酸等の鉱酸、酢
酸、トルエンスルホン酸等の有機酸が採用できる。その
遊離形を得るには、上記酸付加塩をアルカリで中和すれ
ばよい。

本発明に係るコアトキシンＭＩ（Ｂ）類縁体を有効成分
とする筋肉弛緩剤は、穏やかな生理活性を有し、局部あ
るいは全身の筋肉弛緩剤として、また麻ひ（酔）剤や胃
カメラなどの内視鏡挿入時における苦痛の緩和や肩こり
の解消などの鎮痛剤としても有効である。

、に痰例− 次に、本発明を実施例により詳細に説明する。

実施例１ にΣｄ工炒」二Ｐフ」反溝バーβＷ−槙ａ）　　Ｂｏｃ
−５ｅｒ（Ｂｚｌ）Ｃｙｓ（４−ＭｅＢｚｌ）　−ＮＨ
２Ｈｏｅ−Ｃｙｓ（４−ＭｅＢｚｌ）−Ｎｌｌ２　６．
５ｇを　ΔｃｏｌＩ２０＋ｎｌに溶かし、ＴｏｓＯＨ−
）１２０７　、１　Ｆ加えた。１．５時間後反応を終了
させ、エーテルを加えて結晶化し、ろ取した。これを更
にエーテルで洗浄してＮａＯＨ上で乾燥した。このもの
をＢｏＣ−３ｅｒ（Ｂｚｌ）　５．９０ｇ、　ｔｌＯＢ
ｔ　２，７０ｇと共にＤＭＦ　２０＋ｎｌに溶かし、冷
却攪　下に切ｓｃｉ　３．８５＋ｎｌを滴下した６ｐＨ
＝４で終夜攪拌した。翌日フルオレスアミン試験は陰性
であった。反応液をＡ　ｃ　ＯＥ　ｔ、水に注ぎ分配し
た。

次いで、ＡｃｏＥｔ層を５％ＮａＨＣＯ３水、水、ｌＮ
−ＨＣｌ及び水で洗浄し、無水Ｍ、ＳＯ，で乾燥した。

八ｃＯＥｔを留去し、固体残さをΔｃＯＥｔ／ｎ−ヘキ
サンより再沈澱した。収量９．４Ｂ（９４％）。

１〕）　　Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）Ｓｅｒ（１
３ｚｌ）Ｃｙｓ（４−ＭｅＢｚｌ）　−Ｎｌｌ□ Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）Ｃｙｓ（４−ＭｅＢｚｌ）　
　Ｎｌ２　８．０３　ｇをＣＦ　３ｃＯ２１１３５＋ｏ
ｌで１０分間冷却した後、室温で５０分処理した。３．
５Ｎ−１（ＣＩ／ノオキサン　５．５ｍｌを冷却下に加
え、過剰の酸を留去し、エーテル、１１−ヘキサンを加
えて結晶化した。次いで、結晶をろ取してｎ−ヘキサン
で洗浄し、ＮａＯＨ上で乾燥した。これをＢｏｃ−Ｔｙ
ｒ　（Ｃ１２ＢＺｌ）０　、３９　ｇ、　）ＩＯＢｔ　
２　。

２７と共にＤＭＦ　４０　ｍｌに溶かし、冷却攪拌下に
田ｓｃ；３．１ｍｌ　を添加した。これを終夜攪拌した
。沈澱物が析出し固っている。水を加えてろ取し、水、
エーテルで洗浄した。ＣｕＣｌ２−ＭｅＯＨ／Ｅｔｈｅ
ｒから再沈澱した。更に、八Ｃ０Ｅｔに懸濁し、加温し
た後ろ取し、１２．０．を得た。

ｃ）　　　ｆｌｏｅ−八５ｎＴｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）Ｓ
ｃｒ（Ｉｈｌ）Ｃｙ：＋（４−Ｍｅｌ！）りＮＨ２ Ｂｏｃ−Ｔｙｒ（ＣＩ２Ｂｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）Ｃｙ
ｓ（４−ＭｅＢｚｌ　）　−Ｎｌ＋２８．２３ｇをＴＦ
八へ５＋ｎｌで１０分間冷却し、室温で５０分処理した
。３．８Ｎ−ＨＣＩ／ノオキサン　３．２ｍｌを冷却下
に加え、過剰の酸を留去した。エーテルを加えて粉末状
としてろ取した。これをＮａＯＨ−Ｊ二で乾燥し、ｆｌ
ｏｃ−八３ｎ２，４４ｇ、１Ｉ０１ｉＬ　１　、４２　
ｇと八にＤＭＦ２０＋ｎｌに溶がし、冷却攪拌下にｕ＋
５ｃｉｌｌ。

９２＋ｏ１２ｉ下した。ｐＨχ４゜翌日、フルオレスア
ミン試験は陰性であった。反応液に水を加え、析出した
固体をろ取し、水、エーテルで洗浄した。

ＣｔｌＣｌ　３−　Ｍｅ０１１／　エーテルより再沈澱
し、［１ｏｃ−八３１１Ｔｙｒ　（Ｃ１２ＢＺｌ）　Ｓ
ｅｒ（Ｉｔｚｌ）Ｃｙｓ（４−Ｍｃｌｌｚｌ）−Ｎｌｌ
、　８．７１ｇを得た。

ｄ）　　　Ｂｏｃ　　　Ｌｙｓ　　（ＣＩＺ）　　八ｓ
ｎＴｙｒ（Ｃ１２Ｂｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）Ｃｙｓ（４
−Ｍｅｌｌｚｌ）　　Ｎ１ｈ Ｂｏｃ−八ｓｎＴｙｒ（ＣＩ２Ｂｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ
）Ｃｙｓ（４−ＭｅＢｚｌ）−Ｎｌ１２６．５７ｇ（７
，０ｍｍｏｌ）をＣＦ３ＣＯ２１１２５１１１１で、１
０分間冷却し、室温で５０処理した。　３．８Ｎ−ＨＣ
Ｉ／ジオキサン　２．３ｍｌを冷却下に添加し、過剰の
酸を留出した。エーテルを加えて粉末状としてろ取した
。これをＮａ０１１上で乾燥し、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（ＣＩ
２）−刊Ａ３．７６Ｆ３（１，、ｌｅｑ、、予め脱塩）
、ＨＯＢＩ；　１゜Ｏｇ（１，０５ｅｑ）と共にＤＭＦ
　２０＋ｎｌに溶かし、冷却攪拌下に田５ｃｉ１．３５
ｍ１滴下した。ｐＨ＝４〜５゜翌日、フルオレスアミン
試験は陰性であった。反応液に水を注ぎ、析出した固体
をろ取し、水、エーテルで洗浄した。ＣＨＣｌ３　　Ｍ
ｅＯＨ／エーテルより再沈澱し、Ｂｏｃ　　Ｌｙｓ（Ｃ
ＩＺ）＾５ｎＴｙｒ（Ｃｌ２Ｂｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）
Ｃｙｓ（４ＭｅＢｚｌ）−ＮＨ２８，７１ｇを得た。

Ｅ、Ａ、。

計算値　Ｃ６，＋＋、、Ｎ８０．２ＳＣ１３−０，５１
１２０Ｃ；　５７．９４、ＩＩ；　５，８４、Ｎ；　９
．０１％実測値　Ｃ；　５７．９７、ＩＩ；　５，７７
、Ｎ；　８．９６％Ａ、Ａ、Ａ、、　　（６Ｎ−１１Ｃ
Ｉ　、　１１０℃、　２２ｈｒｓ　Ｓ　ｌ”ｈｅｎｏ　
ｌ　）Ｌｙｓ　　１．１９、　Ｎｉ１２０，９６ｘ２、
　八ｓｌ）　１，００．　　Ｓｅｒ　　Ｏ，８７、Ｃｙ
ｓ　−１Ｔｙｒ　Ｑ、９６゜ ｅ）　　　Ｂｏａ　　　Ｃｙｓ（八ｃ＋ｎ）ＧｌｙＧｌ
ｙ　　１．８８　ｇ（２５＋ｎｍｏｌ）をＤＭＦ／水（
３：］−）　４０　ｍｌおよびＥＬ３Ｎ３　、４８　ｏ
ｗｌ（１、１ｅｑ）（こン容かし、Ｉ（ｏｃ−Ｃｙｓ（
八ｃｏｏ）−ＤＮＰ　１０　、３　ｇ（２５ｖｎｏｌ）
を加え終夜攪拌した。翌日、活性エステルを１［！追加
し、更に終夜攪拌した。この間Ｅｔ３Ｎを加えｌｕｌ＋
−７に調整した。溶媒を留去し、］、Ｎ−１１ｃＩを加
え１．ｌ　Ｈ−２に調整した。ＡｃｏＥｔを加えたとこ
ろで結晶が析出した。

エーテルを加えろ取した。ＭｅＯＨ／エーテルにより再
結晶を２回繰り返し、Ｂｏｃ　　Ｃｙｓ（八ｃ＋ｎ）Ｇ
ｌｙを５．０ｇ（５７％）を得た。

ｆ）　　　Ｂｏｃ　　Ｃｙｓ（八ｃ＋ｎ）Ｇｌｙ　　　
０ＰａｃＢｏｃ−Ｃｙｓ（八ｃｍ）Ｇｌｙ　　４．８Ｂ
（１３，７ｍｍｏｌ）を　ＤＭＦ１５ｍ１に溶かし、冷
却攪拌下に、Ｐａｃ−Ｂｒ２．７ｇ（１，０ｅｑ）、Ｅ
ｔ３Ｎ　１　、９１．　ｍｌ　（１，０（！Ｑ）を添加
した。

これにＥ　ｔ、　３　Ｎを追加してｐｏγ５に調整した
。翌日反応液をＡｃ０Ｅｔに注ぎ、水洗した。、１．Ｎ
−１１ｃＩ、水、５％ＮａＨＣＯ３水、水で順次洗浄し
、ＭｇＳＯ４で乾燥した。Ａｃ０Ｅｔ、を留去腰油状残
さをＭｅｒｉｔ／エーテルより結晶化し、Ｂｏｃ−Ｃｙ
ｓ（八ｃ１１１）Ｃ；ｌ１ｌ−Ｏｌ’ａｃ　４　。

１８ｇ（６５％）を得た。

ｇ）　　　）’ｔＯｃ−八１ａｃへｓ（Δｃｍ　）Ｇ　
Ｉ　ｙ　−０ＰａｃＢｏｃ　　Ｃｙｓ（Δａｍ）［；１
ｙ−ＯＰａｃ　　４　、　ＯＵ（８、５６ｍｍｏｌ）を
ＴＦ八へ０ｍ１で１０分間冷却し、室温で５０分処理し
た。３．８Ｎ−１１ｃＩ／ノオキサン２．７ｍｌを冷却
下に加え、過剰の酸を留去した。エーテル、Ｉ】−ヘキ
サンを加え、油状物を洗浄し、Ｎａ０１１−ヒで乾燥し
た。これをＤＭＦｌｏｍｌに溶かし、冷却攪拌下にＥｔ
、、Ｎ　ｉ　、１９　＋ｏｌ、Ｂｏｃ−八Ｉｎ−０ＮＳ
ｕ　２　、６　ｇを加えて２日間攪拌した。この間、Ｅ
ｔ３Ｎを加え、ｐＨ−７に調整した。反応液をＡｃｏＥ
ｔ、水に分、配し、水層にＮａＣｌ　を飽和し、更に八
ｃＱＥｔで抽出した。ＡｃｏＥｔ層を５％ＮａＨＣＯ１
水、水、ｌＮ−ＨＣｌ、水で順次洗浄し、Ｍｇ５Ｏ，で
乾燥した。ＡｃｏＥｔを留去し、結晶残さをＭｅＯＨ／
エーテルより再結晶した。再び、へｃＯＥｌ／ｎ−ヘキ
サンーエーテルより再結晶し、Ｂｏｃ−八１ａＣｙｓ（
Δｃｍ）Ｇｌｙ−ＯＰａｃ　３　、９　ｇ（８５％）得
た。

１＋）　　　Ｂｏｃ　−ＰｒｏΔ１ａｃｙｓ（八Ｃｍ）
Ｇｌｙ−ＯＰｕｃＢｏｃ−Δ１ａｃｙｓ（Δｃｍ）Ｇｌ
ｙ　　０Ｐａｃ３．２４ｇ（６、Ｏｍｌｎｏｌ）をＣＦ
、Ｃ０２Ｈ１８＋ｎｌで１０分間冷却し、室温で５０分
処理した。３．８Ｎ−ＨＣＩ／ジオキサン１．９ｍｌ　
を冷却下に添加し過剰の酸を留去した。エーテル、１１
−ヘキサンを加えて結晶化し、ろ取した後、ＮａＯＨ上
で乾燥した。これをＢｏｃ−Ｐｒｏｌ　、　３６ｇ（１
、Ｑ５ｅｑ）、１ｌＯＢｔ　Ｏ，８５ｇ（１，０５ｃｑ
）と共にＤＭＦ　１２ｍ１に溶かし、冷却攪捏下にｕ＋
ｓｃｉ　　１．１５ｍ１（１゜０５ｅｑ）を添加した。

Ｅ　ｌ；　３　Ｎを加えて１．、ＩＩ　＝　４−５に調
整し、終夜攪拌した。翌日、フルオレスアミン試験は１
仝性であった。反応柩に水を加えＡｃｏＥｔ水で抽出し
た。完全に抽出されないので、水層を更にＣＩＩＣＬで
抽出した。、　ＣｌｌＣｌ、　）ＶＪを水、５％ＮａＨ
ＣＯ。

水、水、１Ｎ−）１ｃＩ、水で順次洗浄し、Ｍｇ５Ｏ，
で乾燥した。ＣＨＣｌ、を留去し、ＭｅＯｔｌ／エーテ
ルより結晶化し、ＭｅＯＨ／エーテルより再結晶し、Ｂ
ｏｃ−ＰｒｏΔｌ　ａＣｙｓ（八ｅｔａ）Ｇｌｙ−Ｏｐ
ａｃ　３　、１５　Ｂを得た。

Ｅ、Ａ、。

計算値　Ｃ２，Ｈ１ＩＮ５０９Ｓ・ｉ、５ＬＯＣ；　５
２，５５、Ｉｔ；　６，６！１１、Ｎ；　１０，５６％
実測値　Ｃ；　５２，７６、Ｈ；　６，５５、Ｎ；　１
０，４５％ｉ）　　　Ｂｏｃ−旧５Ｐｒｏ八１ａｃｙｓ
（八ａｍ）Ｇ　１ｙ−ＯＩ’ａｃＢｏｃ−ＰｒｏＡＩａ
Ｃｙｓ（八ｃｍ）ＧＬｙ−ＯＰａｃ　５．７　０　ｇ（
８，９７ｎ＋ｍｏｌ）をＣＦ１Ｃ０２１１３５「ｏｌで
１０分間冷却し、室混で５０分処理したａ３．８Ｎ−１
１ＣＩ／ジオキサン１．６ｍｌを冷却下に添加し、過剰
の酸を留去した。エーテル、ｎ−ヘキサンを加え固化し
た。ろ取した後、ＮａＯＨ上で乾燥した。これをＢｏｃ
−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）　４　、０４ｇ（１，１ｅｑ）、１
（ＯＢｔ　１，３３ｇ　（１，１，ｅｑ）と共にＤＭＦ
　１２　ｍｌに溶かし、冷却攪拌下にｕ＋５ｃｉ１．８
３ｍ１（１，１ｅｑ）を滴下した。Ｅｔ３Ｎを加えてｐ
ｌ＋＝４〜５に調整し、終夜攪拌した。５％ＮａＨＣＯ
，／飽和食塩水を注ぎ、析出した油状物質をＣｌＩＣｌ
３で抽出した。

ＣｌＩＣｌ３屑を水洗し、Ｍｇ５Ｏ，で乾燥した。Ｃｌ
１Ｃｈを留去し、Ｔ肝に溶解し、ｌｌ０Ｂｔで処理した
。次いで、Ｔ旺を留去し、ＣＩＣｌ３に溶解し、５％Ｎ
ａＨＣＯ３水、飽和食塩水で洗浄し、Ｍ８ＳＯ，で乾燥
した。Ｃ１１ｃｋ、を留去し、エーテルを加えて粉状と
した。

ＣＩＣｌ３−トＯ１１／エーテルより再沈澱し、６．７
３３を得た。

ｊ）　　Ｂｏｅ−Ｃｙｓ（４−ＭｅＢｚｌ）ＨｉｓＰｒ
ｏ八１ａｃｙへ（八ｃｍ）Ｇｌｙ−ＯＰａｃ Ｂｏｃ−ＨｉｓＰｒｏ八１ａｃｙへ　　（八ｃａｎ）　
　Ｇｌｙ　　　０Ｐａｃ　　６．７　０ｇ（８、６７ｍ
ｍｏｌ）をＣＦ３ＣＯ２Ｈ４０ｍｌ（６０ｅｑ）で１０
分間冷却し、室温で５０分処理した。：Ｌ　８Ｎ　−１
１ｃ　ｌ　／ジオキサン　５．７＋ｎｌを冷却下に加え
、過剰の酸を留去した。エーテルを加えて粉状とし、ろ
取してＮａ０１１上で乾燥した。これをＢｏｃ−Ｃｙｓ
（４Ｍｅｔ）ｚｌ）２．４　’３ｇ　（１，０５ｅｑ）
、ＨＯＢｔ　１　、　＋１４＋＋　（１，０５ｅｑ）と
共にＤＭＦ１４ｍｌに溶がし、冷却攪拌下にｕ＋ｓｃ　
ｉｌ、４０ｍ１　（１，０５ｅｑ）を滴下した。ＥＩ：
Ｊを加えｐＨ＝４〜５に調整した。翌日、フルオレスア
ミン試験は陰性であった。反応液に、ΔｃＯＥＩを加え
、５％ＮａｆｌＣＯ＋水、水、飽和食塩水で洗浄した。

Ｍｇ５Ｏ。

で乾燥後、八ｃＯＥｔを留去し、油状残さをイｑた。メ
９／−ル／エーテルより結晶化し、メタノール／エーテ
ルより再結晶し、Ｂｏｃ−Ｃｙｓ（４−Ｍｅｌｌｚｌ）
ｌｌｉｓｒ’ｒ。

＾１ａｃｙｓ（八ｃｍ）　Ｇｌｙ−ＯＰａｃ　５　、５
７　ｇをイ辱た。

ｋ）　　　Ｂｏｃ−Ｃｙｓ（八ｃｍ）Ｃｙｓ（４−Ｍｃ
ｌ）ｚｌ）Ｈｉ！＋Ｉ’ｒｏＡｌａＣｙｓ（八ｃｍ）Ｇ
ｌｙ　　０Ｐａｃ １１ｏｃ　　　Ｃｙｓ（４ＭｃＢｚｌ）ｌｌｉｓＰｒｏ
Ａｌａｃｙｓ（八ｃｍ）にＩｙ−ＯＰａｃ５．５２ｇ（
５，６３ｕｕｎｏｌ）をＣＦ：＋ＣＣｈ！＋　３０＋ｎ
１（７０ｃｑ）で１０分間冷却し、５０分開攪桿処理し
た。３．８Ｎ−ＨＣＩ／ジオキサン　３．Ｏｍｌを冷却
下に加え、過剰の酸を留去した。エーテルを加えて粉状
とし、ろ取してＮａ０）ｌ上で乾燥した。これをＢｏｃ
−Ｃｙｓ（八ｃｍ）１．８１ｇ　（１，１ｅｑ）、ＨＯ
Ｂｔ　Ｏ，８４ｇ（１，１ｅｑ）と共にＤＭＦｌｏｍｌ
に溶がし、冷却攪拌下にｗｓｃｉ　　１　、１４＋ｎｌ
（１、１ｅｑ）を滴下した。Ｅｔ３Ｎを加えｐＨ＝４．
〜５に調整した。翌日、フルオレスアミン試験は陰性で
あった。ＤＭＦを留去し、油状残さをＣＨＣｈに溶がし
、５％ＮａＨＣＯ３、飽和食塩水で洗浄した。これをＭ
ｇ５Ｏ，で乾燥した後、Ｃ）ｌｃＩ３を留去し、ＣＨＣ
ｌ、−ＭｅＯＨ／エーテルより結晶化した。

ＣｌＩＣｌ３　　ＭｅＯＨ／　ｘ−チルより再結晶を２
回繰り返し、Ｂｏｃ−Ｃｙｓ（八ｃｂ＋）Ｃｙｓ（４−
ＭｅＢｚｌ　　）ＨｉｓＰｒｏΔｌ　ａＣｙｓ（八ａｍ
）ＣｌＩｙ−０１’ａｃ　６　、２８　ｇ（９７％）を
１什だ。

１）　　Ｂｏｃ−＾ｒｇ（Ｔｏｓ）Ｃｙｓ（八ｃｍ）Ｃ
ｙｓ（４−ＭｅＢｚｌ）ＨｉｓＰｒ。

八１ａｃｙｓ（八ｃｍ）Ｇｌｙ−ＯＰａｃＢｏｃ　　Ｃ
ｙｓ（Δｃｍ）Ｃｙｓ（４−ＭｅＢｚｌ）ＨｉｓＰｒｏ
＾１ａｃｙｓ（Δｃｍ）Ｇｌｙ−ＯＰａｃ　５．０　＆
（４，３１１１ｍｏｌ　）をＴＦ＾２６　ｍｌ（８０ｅ
ｑ）で１０分間冷却し、室温で５０分処理した。これに
３．８Ｎ−１１ＣＩ／ジオキサン３ｍｌを冷却下に添加
し、過剰の酸を留去し、エーテルを加えて粉末とした。

これをろ取してＮａ０ＩＩ上で乾燥した。１これをｎｏ
ｃ　−八ｒｇ（Ｔｏｓ）２．１　３ｇ（１，１５ｅｑ）
、　ＨＯＩ）ｔｏ、６　８Ｈ（１。

１５ｅｑ）と共にＤＭＦ：１．Ｏｍｌに溶がし、冷却攪
才半下にｗｓｃｉｏ、９１ｍ１（１，１５ｅｑ）をン商
下した。ｌ］ｌ＋＝　４−５ｏｙｅ、フルオレスアミン
試験は陰性であった。

ＤＭＦを留去し得られた油状の残さをＣＨＣｌ３に溶が
し、５％ＮａＨＣＯ３水、飽和食塩水で洗浄した。これ
をＭｇ５０４Ｔ乾燥Ｌ　タ後、ＣＨＣｌ、ヲ’Ｊ去し、
ＣＨＣｌ、−ＭｅＯＨ／エーテルにより粉末状とし、ｌ
１ｏｃ−ΔｒＨ（Ｔｏｓ　）Ｃｙｓ（八ｃｍ）Ｃｙｓ（
４−ＭｅＢｚｌ　　）ＨｉｓＰｒｏΔ１ａｃｙｓ（八ｃ
ｍ）Ｇｌｙ−ＯＰａｃ　６　、３　ｇを得た。

＋ｎ）　　　Ｂｏｃ−八ｒｇ（Ｔｏｓ）Ｃｙｓ（八ｃｍ
）Ｃｙｓ（４−Ｍｃ１３ｚｌ）ＨｉｓＰｒ。

八ＩａＣｙｓ（Δｃｍ）Ｇｌｙ−ＯｌｌＢｏａ−八ｒｇ
（Ｔｏｓ）Ｃｙｓ（八ｃｍ）Ｃｙｓ（４−ＭｅＴｏ、ｌ
　　）ｔｌｉｓＰｒ。

ΔＩａＣｙｓ（八ｃｍ）Ｇｌｙ−ＯＰａｃ　１　．４　
４ｇ　　（０，９８＋ｏｍｏｌ）をΔｃＯＨ１０ｍｌに
溶がし、Ｚｎ粉末１．４ｇ上約４５°Ｃ以下に加温しな
がら攪拌した。２時間後、Ｚｎ−粉末をろ去し、ΔｃＯ
Ｈを留去した。水を加えてフラッシュした。水を加えて
ｆＬ離した油状物をデカンテーションで洗浄した。水を
捨て油状物をＣＩＩＣＣｌＩＣｌｌ　／エーテルより粉
末状とした。かくしてｌｌｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）Ｃｙ
ｓ（Δｃ＋ｏ）Ｃｙｓ（４−ＭｅＢｚｌ）　　　Ｈｉｓ
Ｐｒｏ八１ａＣｙへ（Δｃａｎ）Ｇｌｙ−０１１を１．
：１．４ｇ（８６％）を得た。

ｎ）　　Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）Ｃｙｓ（Δｓｍ）Ｃ
ｙｓ（４−ＭｅＢｚｌ）ＨｉｓＰｒ。

Δ１ａｃｙｓ（八ｃｍ）Ｇｌｙｌ、ｙｓ（ＣＩＺ）八５
ｎＴｙｒ（ＣＩＪｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）Ｃｙｓ（４−
ＭｅＢｚｌ）　−ＮＨ２Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（ＣＩＺ）八５
ｎＴｙｒ（Ｃ１２Ｂｚ］　）Ｓｅｒ（Ｂｚ　Ｉ　）Ｃｙ
ｓ（４−ＭｅＢｚｌ）−ＮＨ７０，４６ｇ　（０，３７
ｍｍｏｌ）をＣＦ３ＣＯ２Ｈ２＋ｎ１（６０ｅｑ）で１
０分間冷却し、室温で５０分間処理した。次いで、６．
９Ｎ−）１ｃＩ／ノオキサン　０．１ｍ１（１、５ｃｑ
）を冷却下に加え、過剰の酸を留去した。エーテルを加
えて粉末とし、ろ取扱ＮａＯＨ上で乾燥した。これをＢ
ｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）Ｃｙｓ（八ｃ＋ｎ）Ｃｙｓ（４
ＭｅＢｚｌ）ＨｉｓＰｒｏ　　八１ａＣｙｓ（八ｃｍ）
Ｇｌｙ−ＯＨ０，５２ｇ（１。

０５ｅｑ）、ＨＯＢｔ　５３　ｍｇ（１、０５ｅｑ）と
共にＤＭＦ／Ｎ−メチルピロリドン（２：１）に溶がし
、冷却攪拌下にｕ＋５ｃｉ７２μｌ（１，０５ｅｑ）を
添加した。ｐｌ＝　６−７゜翌日、Ｃ−成分２０ＩＩ＋
ｇ（０，０４ｅｑ）、ｗｓｃｉ５μｌを追加した。２時
間後、フルオレスアミン試験は陰性であった。この反応
液に５％ＮａＨＣＯ３水を注ぎ、析出した沈澱をろ取し
、水、エーテルにより洗浄した。ＤＭＦ／エーテルより
再沈澱上目的物０．８９゜（９６％）を得た。

Ａ、Ａ、Ａ、、（６Ｎ−ＨＣＩ、１１０°Ｃ，２２１＋
ｒｓ、　千円＋ｅｎｏｌ）Ｌｙｓ　］、、２５、１ｌｉ
ｓ　　Ｏ，９２、Ｎｌｌ＊　　１．６５Ｘ２、　八ｒＦ
ｉ　Ｏ，８９、八ｓｐ　　１，０２、　Ｓｅｒ　　Ｏ，
８４、Ｐｒｏ　　Ｏ，９５、にｌ、　　１，００、八ｌ
ａ　　１．００、１／２（Ｃｙｓｈ　　０．２８Ｘ４、
Ｔｙｒ　　０．９７０）　八ｒｇｃｙｓ（Δｃ＋ｎ）Ｃ
ｙｓＨ＋５Ｐｒｏ＾１ａｃｙｓ（Δｃｍ）ＧｌｙＬｙｓ
Ａｓｎ一一−−１ １’ｙｒＳｅｒＣｙｓ−Ｎｌｌ。

Ｂｏｃ−八ｒｇ（Ｔｏｓ）Ｃｙｓ（八ｓ＋ｏ）Ｃｙｓ（
４−ＭｅＢｚｌ）ＩＩｉｓｌ’ｒｏ八１ａＣｙｓ（へｃ
ｍ）ＧｌｙＬｙｓ（ＣＩＺ）八５ｎＴｒｙ（Ｃ１２１１
ｚｌ　）Ｓｃｒ（Ｂｚｌ　）Ｃｙｓ（４ＭｅＢｚｌ）　
　ＮＨ２Ｏ，２６ｇ（０，１０６ｍｍｏｌ）をアニソー
ル１．５ｍｌの存在下、ＩＩＦ約８約８矛ｌ°Ｃ１１時
間処哩した。旺を留去し、残さをＩＮ　　ＡｃＯＨに溶
かし、エーテルで洗浄した。水層をＤｏｕｌｅ×１×２
（Δｃｏｅｆｏｒｍ、　５０１１１＋）に供給し、ＩＮ
−八ｃＯＨで溶出した。Ｐａｕｌｙ（十）の両分を集め
、凍結乾燥した。

上記粉末を１Ｎ−八ｃＯＨ１０＋ｎｌに溶かＬＫ−Ｆｅ
（ＣＮ）６４９＋ｎｇ（１、４ｅｑ）を含んだＩＭ−八
ｃＯＮＩ１４（ｐＨ７，４）７８Ｍ−尿素溶液９０ｍ１
に１０分間で滴下した。この開、１０％アンモニア水を
加えｐｔ＋７．４に保った。更に１０分間抜はん後、Ａ
ｃＯＨを加え１）Ｈ４〜５に調整した。

ＩＲＡ−４５（ＣＩ”Ｔｏｒ＋ｎ、　２０ｍ１　）を加
え、１０分間ゆっくり攪はんした。その後、ＩＲＡ−４
５（Ｃ１ｅｆｏｒ＋ｎ、５０＋ｏｌ）カラムに供給した
。ＩＮ−八ｃＯＨで洗浄し、Ｐａｕｌｙ（＋）の画分を
集めた。洗液ともで約３００ｍ１となった。

この溶液をＩＩＰ−２０（ｆ　ｉｎｅ、φ２，２Ｘ２６
ｃｍ）カラムに吸着させ、 １）　　１　％ＡｃＯＨ１６０ｍ１ ２）０−１５　％　Ｃｌ１３ＣＮ／１　　％ＡｃＯＨ（
各４　０　０ｍ１）のリニヤ−・グラジェント のシステムで溶出、精製して目的物（Ｄｅｓ　［Ｇ　ｌ
　ｙ　’　］（２ＮＨ２ Ｄｅｓ［Ｇｌｙ’］（２へａｍ−３Ｓ）　６　（１ｍｇ
（３，４７Ｘ１０−５＋ｏｏｌ）をＭｅ０１１／水（４
：１）　７　＋ｎｌ、　６Ｎ−ＨＣＩ　６０　ｕ　１（
１０ｅｑ）＋：溶がし、この溶液を０．ＩＮ−Ｉ／Ｍｅ
ＯＨ１０，４ｍｌ　（１５ｅｑ）に激しく攪はんしなが
ら一度に添加した。、２０分後、６．５×１０２Ｍヒタ
ミンＣ／クエン酸緩衝液（ｐｔ１５．０）８、（ｉｍｌ
　（１６ｅｑ）を加え、反応を停止１４シた１、溶媒を
留去し、残さを１％八へＯ）Ｉに溶がし、ｌｌｒ’−２
０（φ１．９×３６０菌）カラムに供給した。

０→１０％Ｃ１１３ＣＮ／１％ΔｃＯＨ（各４．　ｆ’
、）　Ｏｍ　ｌ　）のりニヤー・グラジェントで溶出、
精製し　目的物２５＋ｎｇ（４５％）を得た。

Ａ、Ａ、Ａ６．　（６Ｎ−ＨＣＩ、１１０°Ｃ，２２１
＋ｒｓ、　＋　７　ｘ　／−ル） Ｌｙｓ　Ｏ，９３、Ｈｉｓ　Ｏ，９７、ＮＨ３］、１４
Ｘ２、Ａｒｃ　０８９９、八８１３　０．９８、　Ｓｅ
ｒ　　Ｏ，９１、Ｐｒｏ　　Ｏ，９４、Ｇｌｙ　　］、
００、八ｌａ　　１．００、１／２（Ｃｙｓ）２０．１
４Ｘ４、　Ｔｙｒ　　Ｏ，９７上星五法成１ １）使用薬剤 本試験には、上記Ｄｅｓ−［Ｇｌｙ’ｌ−コアトキシン
ＭＩ（Ｂ）を生理食塩水で溶解して使用した。その他に
「塩化ツボクラソン」（吉富製薬（株）製）を陽性対照
薬として使用した。各薬物の濃度は、モル濃度（Ｍ）で
表示した。

２）使用動物 ウィスター系雄性ラット（体重２０５〜２４５ｇ）を使
用した。動物は室温２１〜２５°Ｃ１湿度４５〜７０％
、照明時間（７：００八Ｍ〜９：（’）ＯＰＭ）、換気
回数１０〜１５回／時間の条件下で飼育し、エサは固型
飼料ｒＭＦＪ（オリエンタル酵母（株）製）を自由摂取
させ、水は町営水道水を自由に与えた。

３）試験方法 ラットを１群３〜４匹として使用した。Ｂｕｌｂｒｉｏ
ｇの方法に準じて横隔膜神経筋標本を作成した。すなわ
ちラットを屠殺脱血致死し開胸して横隔膜神経を剥離し
、横陥膜筋と共に摘出した。扇状の横隔膜を９５％０２
＋５％ＣＯ２の混合ガスを通じたＫｒｅｂｓ−ｂｉｃａ
ｒｂｏｎａｔｅ液（液量５０ｍ１．液温３７’Ｃ）中に
懸垂した。筋収縮はＦＤピックアップ（ＴＢ−６１１丁
目本光電）を介して、ひずみ圧力用アンプ（ΔＰ−２６
０Ｇ日本光電）よりインク書オシログラフ（ＲＭ−８１
００日本光電）上に記録した。また神経刺激には簡易型
電気刺激装置（Ｓ−７２７２Ｂ日本光電）を用いてスラ
イド式双極電極（Ｔ−１５３０ＭＴ技研）より矩形波１
ｍ５ｅｃ、０．２Ｈｚ、５−６Ｖの条件下で行った。

筋収縮が一定した後、低濃度より０．５ｍｌの容量を栄
養液槽に添加し、添加後１０分間測定腰前部加と比較し
た。着明な作用がみられない場合は累積的に添加した。

４）試験結果 試験結果を表２に示した。表２から明らかなように、本
発明のＤｃｓ　　［Ｇｌｙ’］は軽度の抑制作用を示す
ことがわかる。

表２ Ｄｅｓ−［Ｇｌｙ’ｌ　　　１０−６４　　２６．１±
３１．５塩化ツボクラソン １ｏ−６３−−−伏わ太旦Ｊ （＊　　ｐ　＜　０．０５） 実施例２〜１１ 実施例１と同様に段階的伸長法および７ラグメント縮合
法を組合せでコアトキシンＭｌ（Ｂ）；Ｇｌｙｌ八ｒＨ
へｃｙｓ’ｃｙｓ→旧５５Ｐｒｏ６八ｌａ’ｃｙｓ８ｃ
ｌｙ９１、ｙＳ１０八Ｓｏｌ”Ｔｙｒ”Ｓｅｒ”Ｃｙｓ
”−ＮＩＩ２を構成するアミノ酸を変えて（例えば、静
）（’、Ｎ１ｅ２は、上記Ｍｌ（Ｂ）のＧｌｙｌ、八ｒ
Ｆｉ２をそれぞれ八Ｔ・ｅ、ＮＩｅに置換したことを意
味する。）種々の類縁体を合成し、これらの生理活性を
ＭＩ（Ｂ）と比較し、その結果を表３に示した。

表３ ２　　　　　　　　八Ｔ・ｇ’　　　　　　　　　＞　
　７　０３　　　　Ｎ１ｅ２３０ ４　　　　　　　ＰＩ＋ｅ”　　　　　　　　　１０５
　　　　　　　八１ａ９　　　　　　　　　３６　　　
　Ｎ１ｅ１０３０ ７　　　０ｒｎ”　　　　＞７０ ８　　　　　　Ｇｌｎ目＞７０ ９　　　Δ１αＮ　　　〉７０ １．０　　　　Ｐｈｅ１２３０ １１　　　Δ１ａ１３＞　７０ 参考例 Ｉ　　　　　Ｇｌｙ６０ １）−ＴＩ２ ２　　　　　　　　ｒ、　　　　０ 表３から明らかなように、コノトキシンＭＩ（Ｂ）の構
成アミノ酸の一部を他のアミノ酸で置換することにより
、その生理活性を一層穏やかなものとすることができる
。ただし、Ｍｌ（Ｂ）のＣ’＝　、　９　（☆置のＧｌ
ｙと八ｌｕは他のアミノ酸と置換すると生理活性が殆ど
無くなり、また１２位置の１．−ＴｙｒをＤ一体に変え
た場合も同様である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 下記の式ａ〜ｋで表されるコノトキシンＭＩ（Ｂ）類縁
   体。 記 ａ、Ａｒｇ−Ｃｙｓ＾３−Ｃｙｓ＾４−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ
   −Ａｌａ−Ｃｙｓ＾８−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｔｙ
   ｒ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ＾１＾４−ＮＨ＿２ｂ、Ｇｌｙ−Ａ
   ｒｇ−Ｃｙｓ＾３−Ｃｙｓ＾４−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ａｌ
   ａ−Ｃｙｓ＾８−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ａ
   ｌａ−Ｃｙｓ＾１＾４−ＮＨ＿２ｃ、Ｇｌｙ−Ａｒｇ−
   Ｃｙｓ＾３−Ｃｙｓ＾４−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｃ
   ｙｓ＾８−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−
   Ｃｙｓ＾１＾４−ＮＨ＿２ｄ、Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ
   ＾３−Ｃｙｓ＾４−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｃｙｓ＾
   ８−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ
   ＾１＾４−ＮＨ＿２ｅ、Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ＾３−
   Ｃｙｓ＾４−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｃｙｓ＾８−Ｇ
   ｌｙ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ＾１＾
   ４−ＮＨ＿２ｆ、Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ＾３−Ｃｙｓ
   ＾４−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｃｙｓ＾８−Ｇｌｙ−
   Ｏｒｎ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ＾１＾４−Ｎ
   Ｈ＿２ｇ、Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ＾３−Ｃｙｓ＾４−
   Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｃｙｓ＾８−Ｇｌｙ−Ｎｌｅ
   −Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ＾１＾４−ＮＨ＿２
   ｈ、Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ＾３−Ｃｙｓ＾４−Ｈｉｓ
   −Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｃｙｓ＾８−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ａｓ
   ｎ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−ＣｙＳ＾１＾４−ＮＨ＿２ｉ、Ｇ
   ｌｙ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ＾３−Ｃｙｓ＾４−Ｐｈｅ−Ｐｒ
   ｏ−Ａｌａ−Ｃｙｓ＾８−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｔ
   ｙｒ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ＾１＾４−ＮＨ＿２ｊ、Ｇｌｙ−
   Ｎｌｅ−Ｃｙｓ＾３−Ｃｙｓ＾４−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ａ
   ｌａ−Ｃｙｓ＾８−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−
   Ｓｅｒ−Ｃｙｓ＾１＾４−ＮＨ＿２ｋ、Ａｒｇ−Ａｒｇ
   −Ｃｙｓ＾３−Ｃｙｓ＾４−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−
   Ｃｙｓ＾８−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ
   −ＣｙＳ＾１＾４−ＮＨ＿２（但し、式ａ〜ｋ中、Ｃｙ
   ｓ＾３とＣｙｓ＾８およびＣｙｓ＾４とＣｙｓ＾１＾４
   はいずれもジスルフィド結合をしている。）