JPS6158588A - 固定化微生物 - Google Patents
固定化微生物Info
- Publication number
- JPS6158588A JPS6158588A JP18008684A JP18008684A JPS6158588A JP S6158588 A JPS6158588 A JP S6158588A JP 18008684 A JP18008684 A JP 18008684A JP 18008684 A JP18008684 A JP 18008684A JP S6158588 A JPS6158588 A JP S6158588A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- microorganism
- cellulose acetate
- particle
- microorganisms
- immobilized
- Prior art date
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- Granted
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- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は固定化微生物に関する。更に詳しくは酢酸セル
ロース多孔質粒子を固定化の相体として用いることを特
徴とする固定化微生物に関するものである。
ロース多孔質粒子を固定化の相体として用いることを特
徴とする固定化微生物に関するものである。
（従来の技術）
近年固定化微生物の研究はますます盛んとなシ、工業的
に重要な技術として着目されはじめている。固定化微生
物の製造法としては従来から種々の方法が知られておシ
、その代表的な方法としてポリアクリルアミド、アルギ
ン酸、カラギーナン、ポリビニールアルコールなどのゲ
ル内に微生物を包括して同定化する方法が知られている
（「固定化酵素」千畑一部編、講談社１９７５ ）。中
でもアルギン酸、カラギーナンを用いる方法は簡単な固
定化微生物の製造法であｐｌしかも種々の微生物の固定
化に利用できるため広く用いられている。
に重要な技術として着目されはじめている。固定化微生
物の製造法としては従来から種々の方法が知られておシ
、その代表的な方法としてポリアクリルアミド、アルギ
ン酸、カラギーナン、ポリビニールアルコールなどのゲ
ル内に微生物を包括して同定化する方法が知られている
（「固定化酵素」千畑一部編、講談社１９７５ ）。中
でもアルギン酸、カラギーナンを用いる方法は簡単な固
定化微生物の製造法であｐｌしかも種々の微生物の固定
化に利用できるため広く用いられている。
（発明が解決しようとする間肋点）
併しながらこれらのゲルを用いる方法でね１、通常実施
される加熱殺菌の条件を適用すると、得られるゲルの強
度が低下すること、あるいりゲル内における微生物の増
殖に基因するゲルの膨潤化及び強度低下が昭められるこ
と、更にカルシウムイオン、アルンニクムイオン尋のゲ
ル化剤共存下で微生物反応をおこさせる必要があｐ、リ
ン酸イオンのごとき脱ゲル化剤が共存する場合にはゲル
の溶解がおこること、更にねまた微生物反応により有機
酸製造を実施する場合においては必然的にそのカルシウ
ム塩あるい祉アルｉ＝ウム塩の状態となるため、例えば
壱′機酸のナトリウム塩を得る場合衣とにおいてはこれ
らのゲルを用いる方法は不可能であること、尋の工業的
に重大な間讐が存在していた。
される加熱殺菌の条件を適用すると、得られるゲルの強
度が低下すること、あるいりゲル内における微生物の増
殖に基因するゲルの膨潤化及び強度低下が昭められるこ
と、更にカルシウムイオン、アルンニクムイオン尋のゲ
ル化剤共存下で微生物反応をおこさせる必要があｐ、リ
ン酸イオンのごとき脱ゲル化剤が共存する場合にはゲル
の溶解がおこること、更にねまた微生物反応により有機
酸製造を実施する場合においては必然的にそのカルシウ
ム塩あるい祉アルｉ＝ウム塩の状態となるため、例えば
壱′機酸のナトリウム塩を得る場合衣とにおいてはこれ
らのゲルを用いる方法は不可能であること、尋の工業的
に重大な間讐が存在していた。
（問題点を解決するための手段）
本発明者らは従来固定化担体として使用され ５ている
アルギン酸、カラギーナンなどの基本的な欠点を克服す
べく種々検討をくわえた結果、固定化担体として酢酸セ
ルロース多孔質粒子を用いる事により、微生物の固定化
が容易であシ、又加熱殺菌が可能であり、担体強度本高
く、しかも脱ゲル化剤共存下でも使用出来るなど、上記
欠点を克服出来ることを見い出し本発明を完成した。
アルギン酸、カラギーナンなどの基本的な欠点を克服す
べく種々検討をくわえた結果、固定化担体として酢酸セ
ルロース多孔質粒子を用いる事により、微生物の固定化
が容易であシ、又加熱殺菌が可能であり、担体強度本高
く、しかも脱ゲル化剤共存下でも使用出来るなど、上記
欠点を克服出来ることを見い出し本発明を完成した。
即ち、本発明ね酢酸セルロース多孔質粒子に微生物を固
定化せしめてなる同定化微生物を提供するものである。
定化せしめてなる同定化微生物を提供するものである。
本発明で使用される酢酸セルロースとしては水酸基と酢
酸エステル基を有する酢化度４８〜６２％の酢酸セルロ
ースが適当であり、ｌ特願昭５９−１０５５５で示すよ
うニ、酢酸セルロースのアセトンや酢酸溶液などを適当
な凝固溶剤、例えばアセトン水溶液や酢酸水溶液中に押
出して凝固させ、水で洗滌することにより多孔質粒子と
することが出来る。粒子形状としては粒状、球状、円柱
状、卵形など種々の形状を取りうるが、球状が、流動性
や、強度、表面積などの点から有利であシ、粒子径とし
ては０．５〜１０■が好ましい。この方法で製造した酢
酸セルロース多孔質粒子は細孔容積が大きい割に圧壊強
度が大きい。本発明に使用するものは細孔容積としては
、０．？５５ｃｃ／９以上、圧壊、強度１０ｋｊ￥以上
の多孔質粒子で、細孔分布幅としては７５ｘ〜１０μ位
のものであシ、細孔の大きさは凝固溶剤、例えば酢酸水
溶液の濃度を変えることにより調節出来る。これらの細
孔は一部独立気泡も含まれるが、大部分１」、連続気泡
を形成している。使用される酢酸セルロースは酢化度と
して４８〜６２％、より好゛すしくは４０〜５８％の酢
酸セルロースであり、このものは親水基と親油基゛が適
当にバランスして固定化を強固にする作用があると考え
られる。
酸エステル基を有する酢化度４８〜６２％の酢酸セルロ
ースが適当であり、ｌ特願昭５９−１０５５５で示すよ
うニ、酢酸セルロースのアセトンや酢酸溶液などを適当
な凝固溶剤、例えばアセトン水溶液や酢酸水溶液中に押
出して凝固させ、水で洗滌することにより多孔質粒子と
することが出来る。粒子形状としては粒状、球状、円柱
状、卵形など種々の形状を取りうるが、球状が、流動性
や、強度、表面積などの点から有利であシ、粒子径とし
ては０．５〜１０■が好ましい。この方法で製造した酢
酸セルロース多孔質粒子は細孔容積が大きい割に圧壊強
度が大きい。本発明に使用するものは細孔容積としては
、０．？５５ｃｃ／９以上、圧壊、強度１０ｋｊ￥以上
の多孔質粒子で、細孔分布幅としては７５ｘ〜１０μ位
のものであシ、細孔の大きさは凝固溶剤、例えば酢酸水
溶液の濃度を変えることにより調節出来る。これらの細
孔は一部独立気泡も含まれるが、大部分１」、連続気泡
を形成している。使用される酢酸セルロースは酢化度と
して４８〜６２％、より好゛すしくは４０〜５８％の酢
酸セルロースであり、このものは親水基と親油基゛が適
当にバランスして固定化を強固にする作用があると考え
られる。
又連続した細孔が微細孔と数μの細孔が適当に分布して
形成され、上記の親水基と親油基のバランスと相まって
固定化微生物の生育を良くする作用を奏すると考えられ
る。細孔容積が０．６５ｃａ ／ Ｉ ’未満であれば
微生物の担持量が少なくて実用的でない。又圧壊強度１
０゛ｋ）未満のものでは使用中に粒子がくずれるなどし
て実用的でない。又粒子径０．’５’ｌＥ１以下や１０
ｓＩＩ以・上では製造時に洗滌などに問題があるが、必
要に応じて酢酸セル日−ス多孔質粒子を粉砕することに
よシスキン層を破壊したものや粒子径を０．５Ｗ以下に
したものを使用することが出来る。
形成され、上記の親水基と親油基のバランスと相まって
固定化微生物の生育を良くする作用を奏すると考えられ
る。細孔容積が０．６５ｃａ ／ Ｉ ’未満であれば
微生物の担持量が少なくて実用的でない。又圧壊強度１
０゛ｋ）未満のものでは使用中に粒子がくずれるなどし
て実用的でない。又粒子径０．’５’ｌＥ１以下や１０
ｓＩＩ以・上では製造時に洗滌などに問題があるが、必
要に応じて酢酸セル日−ス多孔質粒子を粉砕することに
よシスキン層を破壊したものや粒子径を０．５Ｗ以下に
したものを使用することが出来る。
本発明で使用される微生物はカビ・、酵母、”細゛菌、
放線菌などに分類される微生物であ゛る。
放線菌などに分類される微生物であ゛る。
これらの微生物は栄養培地で生育せしめられたのち、生
きた状態で使用される。゛ 本発′明について更に詳細に説明すると、例えば通常の
方法で！Ｉｌｉ製される培地に対し酢酸セルロース多孔
質粒子を加え尼゛後に・加熱滅菌な夾施“する。゛酢酸
セルロース多孔質粒子は２５０Ｃにおいて吃゛安定であ
る゛ため、′一般の滅菌温度である１２０Ｃで“何６問
題はない。′その後に固定化じたい微生物を接種し、常
法過少培養するだけで酢酸セルロース多孔質粒子内でも
微生物が増殖するため目的とする固定化微生物を得るこ
とができる。より好着しくは微生物を接種した後培養液
を減圧に保つことによｐ酢酸セル−−ス多孔質粒子内へ
の微生物の移行を促進させることができる。更には通常
の培養・によシ゛得られる培養液を遠心分Ｓ等によシ濃
厚な微生物懸濁液となしそれに殺菌した酢酸セルロース
多孔質粒子を加え、減圧に保つことによシ固定化の時間
はよル短縮される。このよりにして得られる固定化微生
物は一般の攪拌混合槽、充填塔形式の反応器を用いて目
的とする反応を行なわせることができる。
きた状態で使用される。゛ 本発′明について更に詳細に説明すると、例えば通常の
方法で！Ｉｌｉ製される培地に対し酢酸セルロース多孔
質粒子を加え尼゛後に・加熱滅菌な夾施“する。゛酢酸
セルロース多孔質粒子は２５０Ｃにおいて吃゛安定であ
る゛ため、′一般の滅菌温度である１２０Ｃで“何６問
題はない。′その後に固定化じたい微生物を接種し、常
法過少培養するだけで酢酸セルロース多孔質粒子内でも
微生物が増殖するため目的とする固定化微生物を得るこ
とができる。より好着しくは微生物を接種した後培養液
を減圧に保つことによｐ酢酸セル−−ス多孔質粒子内へ
の微生物の移行を促進させることができる。更には通常
の培養・によシ゛得られる培養液を遠心分Ｓ等によシ濃
厚な微生物懸濁液となしそれに殺菌した酢酸セルロース
多孔質粒子を加え、減圧に保つことによシ固定化の時間
はよル短縮される。このよりにして得られる固定化微生
物は一般の攪拌混合槽、充填塔形式の反応器を用いて目
的とする反応を行なわせることができる。
以下実施例について本発明を更に説明するが、本発明は
これらの＊施例に限定されるものではない。
これらの＊施例に限定されるものではない。
実施例」１゛
スボロラクトバチラスイヌリナスＴｕｉ ｓ’ ＜ Ｓ
Ｌを表−１に示す液体培地で３７Ｃ，２４時間培養し
た。この培養液２０ｍ１／に対し１２０Ｃ。
Ｌを表−１に示す液体培地で３７Ｃ，２４時間培養し
た。この培養液２０ｍ１／に対し１２０Ｃ。
１５分間殺菌した（表２に示した酢酸セルｏ −ス多孔
質粒子） ０．２５ Ｉｉを無菌的に加え、減圧下（４
０ｗａＨｇ ）で２時間保持した。次で培養液から酢酸
セルロース多孔質粒子を取シ出し、水洗ｉ１４０ｗＬｔ
の表１に示すグルコース培地に移し、攪拌しガから５７
Ｃで乳酸を生産させた。
質粒子） ０．２５ Ｉｉを無菌的に加え、減圧下（４
０ｗａＨｇ ）で２時間保持した。次で培養液から酢酸
セルロース多孔質粒子を取シ出し、水洗ｉ１４０ｗＬｔ
の表１に示すグルコース培地に移し、攪拌しガから５７
Ｃで乳酸を生産させた。
以下一定時間毎に酢酸セルロース多孔質粒子を取シ出し
、水洗し、同様の方法で反応をくり返した。
、水洗し、同様の方法で反応をくり返した。
表−２に示した結果から明らかなように酢酸セルロース
多孔質粒子は微生物の有効な固定化担体である事が明ら
かである。
多孔質粒子は微生物の有効な固定化担体である事が明ら
かである。
表−１培地組成
液体培地 グルコース培地
グルコース ２０ ！／−ｅ ５０
１１／−ｅ酵母エキス １０ Ｉｉ形 １
０ Ｉ／形ポリペプトン １０１１／１３
−Ｍ ｇ Ｓ Ｏ４・７Ｈ２００，２１１／１３
０，２１／ＩＩ３Ｍｎ５０ ・４−６ｕ２ｏ １０
１Ｒ９７’−１３１０＃／”４３Ｆｅ１２・７ＨＯｌ
０ＩＲ９／−６１０■／Ｊ）Ｊａｉｌ １
０ ｑ／＄ １０ Ｗ／−ｅＯＩＬｏｏｓ
１０ １７４３ ５５ １ｉ／４表−２酢
酸セルロース多孔質粒子の性状酢化度 ５４．
８％ 細孔容積 ０．９ａｃ／１ 細孔分布幅 ７５Ａ〜８μ 圧壊強度 １！Ｓｋ） 粒径 ５，０ｍ＋１１ 一／ − 表−３実験結果
１１／−ｅ酵母エキス １０ Ｉｉ形 １
０ Ｉ／形ポリペプトン １０１１／１３
−Ｍ ｇ Ｓ Ｏ４・７Ｈ２００，２１１／１３
０，２１／ＩＩ３Ｍｎ５０ ・４−６ｕ２ｏ １０
１Ｒ９７’−１３１０＃／”４３Ｆｅ１２・７ＨＯｌ
０ＩＲ９／−６１０■／Ｊ）Ｊａｉｌ １
０ ｑ／＄ １０ Ｗ／−ｅＯＩＬｏｏｓ
１０ １７４３ ５５ １ｉ／４表−２酢
酸セルロース多孔質粒子の性状酢化度 ５４．
８％ 細孔容積 ０．９ａｃ／１ 細孔分布幅 ７５Ａ〜８μ 圧壊強度 １！Ｓｋ） 粒径 ５，０ｍ＋１１ 一／ − 表−３実験結果
Claims (1)
- 酢酸セルロース多孔質粒子に微生物を固定化せしめてな
る固定化微生物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18008684A JPS6158588A (ja) | 1984-08-29 | 1984-08-29 | 固定化微生物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18008684A JPS6158588A (ja) | 1984-08-29 | 1984-08-29 | 固定化微生物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6158588A true JPS6158588A (ja) | 1986-03-25 |
| JPH0468912B2 JPH0468912B2 (ja) | 1992-11-04 |
Family
ID=16077201
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP18008684A Granted JPS6158588A (ja) | 1984-08-29 | 1984-08-29 | 固定化微生物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6158588A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH08256773A (ja) * | 1995-03-27 | 1996-10-08 | Bio Material:Kk | 微生物固定化用担体及びその微生物固定化用担体を用いた液体中の窒素化合物の変換方法 |
| KR100348740B1 (ko) * | 2000-04-24 | 2002-08-14 | (주)이앤텍 | 초산셀루로즈를 이용하여 미생물을 고정한 오, 폐수처리용 미생물 고정 담체 및 그의 제조 방법 |
| US6908556B2 (en) * | 1999-12-02 | 2005-06-21 | The University Of Tulsa | Methods for forming microcultures within porous media |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS52105281A (en) * | 1976-02-26 | 1977-09-03 | Teijin Ltd | Immobilization of enzyme |
| JPS541795A (en) * | 1977-06-06 | 1979-01-08 | Hitachi Ltd | Fuel rod for reactores |
| JPS5819273A (ja) * | 1981-07-24 | 1983-02-04 | 日産自動車株式会社 | シ−トベルト |
| JPS58148796A (ja) * | 1982-03-02 | 1983-09-03 | Mitsubishi Heavy Ind Ltd | 印刷機排紙部のパウダ−塗着装置 |
-
1984
- 1984-08-29 JP JP18008684A patent/JPS6158588A/ja active Granted
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS52105281A (en) * | 1976-02-26 | 1977-09-03 | Teijin Ltd | Immobilization of enzyme |
| JPS541795A (en) * | 1977-06-06 | 1979-01-08 | Hitachi Ltd | Fuel rod for reactores |
| JPS5819273A (ja) * | 1981-07-24 | 1983-02-04 | 日産自動車株式会社 | シ−トベルト |
| JPS58148796A (ja) * | 1982-03-02 | 1983-09-03 | Mitsubishi Heavy Ind Ltd | 印刷機排紙部のパウダ−塗着装置 |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH08256773A (ja) * | 1995-03-27 | 1996-10-08 | Bio Material:Kk | 微生物固定化用担体及びその微生物固定化用担体を用いた液体中の窒素化合物の変換方法 |
| US6908556B2 (en) * | 1999-12-02 | 2005-06-21 | The University Of Tulsa | Methods for forming microcultures within porous media |
| KR100348740B1 (ko) * | 2000-04-24 | 2002-08-14 | (주)이앤텍 | 초산셀루로즈를 이용하여 미생물을 고정한 오, 폐수처리용 미생물 고정 담체 및 그의 제조 방법 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0468912B2 (ja) | 1992-11-04 |
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