JPS62220195A - Ｌ−含硫アミノ酸の製造法 - Google Patents
Ｌ−含硫アミノ酸の製造法Info
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- JPS62220195A JPS62220195A JP5956986A JP5956986A JPS62220195A JP S62220195 A JPS62220195 A JP S62220195A JP 5956986 A JP5956986 A JP 5956986A JP 5956986 A JP5956986 A JP 5956986A JP S62220195 A JPS62220195 A JP S62220195A
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- Japan
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- cystine
- tryptophan synthase
- cysteine
- reaction
- hydrogen sulfide
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は、トリプトファンシンターゼの存在下にβ−置
換−Ｌ−アラニンを硫化水素と水性媒体中で反応させ、
Ｌ−システィンおよび／またはＬ−シスチンを製造する
方法に間する。
換−Ｌ−アラニンを硫化水素と水性媒体中で反応させ、
Ｌ−システィンおよび／またはＬ−シスチンを製造する
方法に間する。
Ｌ−システィンおよびＬ−シスチンは、輸液の成分など
の医薬用途のほか、化粧品用、食品添加剤などとして広
く使用されている。
の医薬用途のほか、化粧品用、食品添加剤などとして広
く使用されている。
（従来の技術）
従来、Ｌ−システィンおよびＬ−シスチンの代表的製法
としては、（１）毛髪などの 天然物から抽出する方法
、（２）化学合成法（たとえば、持間昭５７−２００３
５６）、（３）ＤＬ−２−アミノチアゾリン−４−カル
ボン酸から酵素的に合成する方法（特公昭５４−２２７
２）、（４）β−置換アラニンをシステインデスルフヒ
ドラーゼの存在下、金属硫化物または金属水硫化物と反
応させる方法（特公昭５７−２１３１１）などが知られ
ているが、工業的な製法としては必ずしも有利な方法と
は思われない。
としては、（１）毛髪などの 天然物から抽出する方法
、（２）化学合成法（たとえば、持間昭５７−２００３
５６）、（３）ＤＬ−２−アミノチアゾリン−４−カル
ボン酸から酵素的に合成する方法（特公昭５４−２２７
２）、（４）β−置換アラニンをシステインデスルフヒ
ドラーゼの存在下、金属硫化物または金属水硫化物と反
応させる方法（特公昭５７−２１３１１）などが知られ
ているが、工業的な製法としては必ずしも有利な方法と
は思われない。
（発明が解決しようとする問題点）
このような状況のもとて、本発明者らは、安価なＬ−シ
ステインおよび／またはＬ−シスチンの新しい製造法に
間して研究を重ねた結果、トリプトファンシンターゼの
存在下にβ−置換−Ｌ−アラニンを、硫化水素と水性媒
体中で反応させることにより、Ｌ−システィンおよび／
またはＬ−シスチンが、生成することを見出し、この知
見に基ずいて本発明を完成した。
ステインおよび／またはＬ−シスチンの新しい製造法に
間して研究を重ねた結果、トリプトファンシンターゼの
存在下にβ−置換−Ｌ−アラニンを、硫化水素と水性媒
体中で反応させることにより、Ｌ−システィンおよび／
またはＬ−シスチンが、生成することを見出し、この知
見に基ずいて本発明を完成した。
（問題を解決するための手段）
トリプトファンシンターゼは、微生物、高等植物などに
広く存在していることが知られており（例えば、 Ｂａ
ｃｔｅｒｉｏｉｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ、 Ｖｏ
ｌ、３９＋Ｎｏ、２．ｐ、８７−１２０ （１９７５）
） 、本発明においても酵素源は特に限定されないが、
通常は微生物起源のものが用いられる。トリプトファン
シンターゼを生産する菌株としては、たとえば、エシェ
リヒア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）
ＭＴ−１０２３２（ＦＥＲＭ ＢＰ−１９）、エシェリ
ヒア・コリｌ’１Ｔ−１０２４２（ＦＥＲＭ ＢＰ−２
０）、ノイロスポラ０クラツサ（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ
ｃｒａｓｓａ）ＡＴＣＣ−１４６９２、サツカロミセ
ス・セレビシェ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒ
ｅｖｉｓｉａｅ） ＡＴＣＣ−２６７８７などがある。
広く存在していることが知られており（例えば、 Ｂａ
ｃｔｅｒｉｏｉｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ、 Ｖｏ
ｌ、３９＋Ｎｏ、２．ｐ、８７−１２０ （１９７５）
） 、本発明においても酵素源は特に限定されないが、
通常は微生物起源のものが用いられる。トリプトファン
シンターゼを生産する菌株としては、たとえば、エシェ
リヒア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）
ＭＴ−１０２３２（ＦＥＲＭ ＢＰ−１９）、エシェリ
ヒア・コリｌ’１Ｔ−１０２４２（ＦＥＲＭ ＢＰ−２
０）、ノイロスポラ０クラツサ（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ
ｃｒａｓｓａ）ＡＴＣＣ−１４６９２、サツカロミセ
ス・セレビシェ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒ
ｅｖｉｓｉａｅ） ＡＴＣＣ−２６７８７などがある。
エシェリヒア・コリの培養面体からのトリプトファ
ンシンターゼの抽出法については、Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎ
ａｌ ｏｆ Ｂｉｏｉｏ３ｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒ
ｙ、Ｖｏｌ、２４９゜ＮＯ，２４，ｐ、７７５６−７７
６３ （１９７４年）、ノイロスポラ・クラッサの培養
菌体からの抽出法については、同Ｖｏ１．２５０．Ｎｏ
、８．ｐ、２９４１−２９４６ （１９７５年）、サツ
カロミセス・セレビシェの培！！菌体からの抽出法につ
いては、εｕｒｏｐｅａｎ 、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｖｏｌ。
ンシンターゼの抽出法については、Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎ
ａｌ ｏｆ Ｂｉｏｉｏ３ｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒ
ｙ、Ｖｏｌ、２４９゜ＮＯ，２４，ｐ、７７５６−７７
６３ （１９７４年）、ノイロスポラ・クラッサの培養
菌体からの抽出法については、同Ｖｏ１．２５０．Ｎｏ
、８．ｐ、２９４１−２９４６ （１９７５年）、サツ
カロミセス・セレビシェの培！！菌体からの抽出法につ
いては、εｕｒｏｐｅａｎ 、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｖｏｌ。
１０２、ρ、１５９−１６５ （１９７９年）に記載さ
れ知られている。
れ知られている。
しかし、本発明に使用されるトリプトファンシンターゼ
は、必ずしも抽出された純粋な物である必要はない、す
なわち、トリプトファンシンターゼ生産菌の培養物、培
養物から遠心分離などの方法によって採取した主面体、
その乾燥菌体あるいは面体を磨砕、自己消化、超音波処
理などをすることによって得られる国体処理物、更には
、これらの国体よりの抽出物並びに該抽出物より得られ
る酵素の粗製物であっても利用できる。もちろん、これ
らの固定化物でもよい。
は、必ずしも抽出された純粋な物である必要はない、す
なわち、トリプトファンシンターゼ生産菌の培養物、培
養物から遠心分離などの方法によって採取した主面体、
その乾燥菌体あるいは面体を磨砕、自己消化、超音波処
理などをすることによって得られる国体処理物、更には
、これらの国体よりの抽出物並びに該抽出物より得られ
る酵素の粗製物であっても利用できる。もちろん、これ
らの固定化物でもよい。
トリプトファンシンターゼ生産菌を培養するための培地
としては、炭素源、窒素源、無機物および必要に応じて
少量の微量栄養素を含むものであれば、合成培地または
天然培地の何れも使用可能である。培地へ微量のトリプ
トファンまたはインドールを添加することが有効なこと
もある。また、培地へｙ＆量のインドールアクリル酸を
添加することによりトリプトファンシンターゼ生産量が
高まることもある。
としては、炭素源、窒素源、無機物および必要に応じて
少量の微量栄養素を含むものであれば、合成培地または
天然培地の何れも使用可能である。培地へ微量のトリプ
トファンまたはインドールを添加することが有効なこと
もある。また、培地へｙ＆量のインドールアクリル酸を
添加することによりトリプトファンシンターゼ生産量が
高まることもある。
培養は、振盪培養あるいは通気撹拌培養などの好気的条
件下で行う。培養温度は２０−４０℃、通常は２３−３
７℃の範囲である。培養液のｐＨは５−８である。
件下で行う。培養温度は２０−４０℃、通常は２３−３
７℃の範囲である。培養液のｐＨは５−８である。
トリプトファンシンターゼは、インドール−３−グリセ
ロ燐酸とＬ−セリンからＬ−）リブトフ７ンを合成する
反応の池に種々の反応を触媒する多機能酵素であること
は良く知られている。（例えば、 Ａｄｖａｎｃｅ
ｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｒｅ１ａｔ
ｅｄＡｒｅａｓ ｏｆ Ｍｏ１ｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏ１
ｏ３ｙ、Ｖｏｌ、４９．ｐ、１２７−１８５（１９７９
）） シかしながら、トリプトファンシンターゼによ
る本発明の反応は、本発明者らが初めて見出したもので
ある。
ロ燐酸とＬ−セリンからＬ−）リブトフ７ンを合成する
反応の池に種々の反応を触媒する多機能酵素であること
は良く知られている。（例えば、 Ａｄｖａｎｃｅ
ｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｒｅ１ａｔ
ｅｄＡｒｅａｓ ｏｆ Ｍｏ１ｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏ１
ｏ３ｙ、Ｖｏｌ、４９．ｐ、１２７−１８５（１９７９
）） シかしながら、トリプトファンシンターゼによ
る本発明の反応は、本発明者らが初めて見出したもので
ある。
反応基質であるβ−置換−Ｌ−アラニンとしては、例え
ばβ−クロロ−し−アラニン、β−ブロモ−Ｌ−アラニ
ンなどのβ−ハロゲノ−Ｌ−アラニン、 ０−メチル−
Ｌ−セリン、０−エチル−°Ｌ−セリンなとのＯ−アル
キル−し−セリン、Ｓ−メチル−Ｌ−システィン、Ｓ−
エチル−Ｌ−システィンなどのＳ−アルキル−Ｌ−シス
ティン、０−７セチルーし一セリン、０−ベンジル−し
−七リン、Ｓ−ベンジル−し−システィンし一セリン
０−サルフェート、Ｌ−セリンなどを用いることができ
る。
ばβ−クロロ−し−アラニン、β−ブロモ−Ｌ−アラニ
ンなどのβ−ハロゲノ−Ｌ−アラニン、 ０−メチル−
Ｌ−セリン、０−エチル−°Ｌ−セリンなとのＯ−アル
キル−し−セリン、Ｓ−メチル−Ｌ−システィン、Ｓ−
エチル−Ｌ−システィンなどのＳ−アルキル−Ｌ−シス
ティン、０−７セチルーし一セリン、０−ベンジル−し
−七リン、Ｓ−ベンジル−し−システィンし一セリン
０−サルフェート、Ｌ−セリンなどを用いることができ
る。
本発明においては、トリプトファンシンターゼの存在下
、通常ｐＨ５−ｔｏの水性媒質中で、β−置換−Ｌ−ア
ラニンと硫化水素とを反応させる。反応温度は２０−６
０℃が適当である。 反応時間は、酵素力価、基質濃度
、その池の条件により異なるが、回分反応では通常 １
−１００時間である。反応は、静置またはゆるやかな撹
拌下に行われる。基質であるβ−置換−Ｌ−アラニンと
硫化水素の濃度は特に制限はない。基質は反応開始時に
全量を反応液に添加しても良いし、反応の進行にともな
い分割添加することも可能である。反応に際しては、基
質の他に補酵素であるピリドキサール該を微量添加する
ことが望ましい。
、通常ｐＨ５−ｔｏの水性媒質中で、β−置換−Ｌ−ア
ラニンと硫化水素とを反応させる。反応温度は２０−６
０℃が適当である。 反応時間は、酵素力価、基質濃度
、その池の条件により異なるが、回分反応では通常 １
−１００時間である。反応は、静置またはゆるやかな撹
拌下に行われる。基質であるβ−置換−Ｌ−アラニンと
硫化水素の濃度は特に制限はない。基質は反応開始時に
全量を反応液に添加しても良いし、反応の進行にともな
い分割添加することも可能である。反応に際しては、基
質の他に補酵素であるピリドキサール該を微量添加する
ことが望ましい。
このようにして反応を行うと、反応液中にはＬ−システ
インが生成するが、Ｌ−システィンは酸化されてＬ−シ
スチンに変化しやすいので、反応の進行とともに反応液
中には通常、Ｌ−システィンとＬ−シスチンが共存し、
徐々にＬ−シスチンの員が増大する。しかしながら、反
応条件を制御することによりＬ−システィンとＬ−シス
チンの濃度比を変えることも可能である。
インが生成するが、Ｌ−システィンは酸化されてＬ−シ
スチンに変化しやすいので、反応の進行とともに反応液
中には通常、Ｌ−システィンとＬ−シスチンが共存し、
徐々にＬ−シスチンの員が増大する。しかしながら、反
応条件を制御することによりＬ−システィンとＬ−シス
チンの濃度比を変えることも可能である。
反応液からＬ−システインまたはＬ−シスチンを採取す
るには通常の方法を用いることができる。
るには通常の方法を用いることができる。
例えば、反応終了後反応液に通気して大部分のＬ−シス
テインをＬ−シスチンに酸化すれば、Ｌ−シスチンは水
に難溶なので容易に単離できる。またこのようにして得
られたＬ−シスチンを電解還元すればＬ−システィンを
得ることができる。
テインをＬ−シスチンに酸化すれば、Ｌ−シスチンは水
に難溶なので容易に単離できる。またこのようにして得
られたＬ−シスチンを電解還元すればＬ−システィンを
得ることができる。
Ｌ−システィンとＬ−シスチンの定量は、液体クロマト
グラフィーで行った。生成したシスティンとシスチンが
Ｌ一体であることは、光学異性体公社用カラムを用いた
液体クロマトグラフィーにより確認した。
グラフィーで行った。生成したシスティンとシスチンが
Ｌ一体であることは、光学異性体公社用カラムを用いた
液体クロマトグラフィーにより確認した。
、（実施例）
以下、実施例により本発明を具体的に説明する。
実施例１
肉エキス１％、ペプトン０．５％、酵母エキス０．１％
、ＫＨ２ＰＯ４０，２％、ｐＨ７，０の液体培地にエシ
ェリヒア・コリＭＴ−１０２４２（ＦＥＲＭ ８Ｐ−２
０）を接種し、３０℃にて２０時間振盪培養した。培！
！終了後、遠心分離して面体を集め、０．Ａｄａｃｈｉ
らの方法（Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏ
ｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ。
、ＫＨ２ＰＯ４０，２％、ｐＨ７，０の液体培地にエシ
ェリヒア・コリＭＴ−１０２４２（ＦＥＲＭ ８Ｐ−２
０）を接種し、３０℃にて２０時間振盪培養した。培！
！終了後、遠心分離して面体を集め、０．Ａｄａｃｈｉ
らの方法（Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏ
ｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ。
Ｖｏｌ、 ２４９．ＮＯ，２４，ｐ、７７５６−７７６
３ （１９７４年））に従って精製操作を行い、比活性
が９．２単位／ｍｇの力価のトリプトファンシンターゼ
を取得し、この酵素を月いて以下の反応を行った。
トリプトファンシンターゼの活性は、Ｃ，Ｙａｎｏｆｓ
ｋｙらの方法 （Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏ
１ｏ３ｙ、Ｖｏｌ、５．ｐ、８０１−８０７（１９６２
））により測定し、ｐ）Ｉ ７．８．３７℃において１
μｍｏｌ ／ｍｉｎのトリプトファンをＬ−セリンとイ
ンドールから合成する酵素量を１単位とした。
３ （１９７４年））に従って精製操作を行い、比活性
が９．２単位／ｍｇの力価のトリプトファンシンターゼ
を取得し、この酵素を月いて以下の反応を行った。
トリプトファンシンターゼの活性は、Ｃ，Ｙａｎｏｆｓ
ｋｙらの方法 （Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏ
１ｏ３ｙ、Ｖｏｌ、５．ｐ、８０１−８０７（１９６２
））により測定し、ｐ）Ｉ ７．８．３７℃において１
μｍｏｌ ／ｍｉｎのトリプトファンをＬ−セリンとイ
ンドールから合成する酵素量を１単位とした。
Ｌ−セリン５０ｍＭ、硫化水素１００ｍＭ、ピリドキサ
ール燐ＩＩ ０．１ｍＭを含むＩＭ ）リスアミノメタ
ン−Ｉ（ＣＩ緩衝液（ｐＨ９，０） １０ｍ１にトリ
プトファンシンターゼを０．５ｍｇ添加し、３５℃で２
時間ゆるやかに振盪した。 反応液中には、３．１１ｎ
ＭのＬ−システインと０．４ｍＭのし一シスチンが生成
した。
ール燐ＩＩ ０．１ｍＭを含むＩＭ ）リスアミノメタ
ン−Ｉ（ＣＩ緩衝液（ｐＨ９，０） １０ｍ１にトリ
プトファンシンターゼを０．５ｍｇ添加し、３５℃で２
時間ゆるやかに振盪した。 反応液中には、３．１１ｎ
ＭのＬ−システインと０．４ｍＭのし一シスチンが生成
した。
実施例２
ノイロスポラ・クラッサ ＡＴＣＣ−１４６９２を用い
、Ｗ、Ｈ，Ｍａｔｃｈｅｔｔらの方法 （Ｔｈｅ Ｊｏ
ｕｒｎａｌ ｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓ
ｔｒｙ、 Ｖｏｌ、２５０． Ｎｏ、８． ｐ、２９４
１−２９４６ （１９７５年））に従い、培養および酵
素精製を行い、比活性が１．３単位／ｍＨの力価のトリ
プトファンシンターゼを取得し、この酵素液を用いて以
下の反応を行った。
、Ｗ、Ｈ，Ｍａｔｃｈｅｔｔらの方法 （Ｔｈｅ Ｊｏ
ｕｒｎａｌ ｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓ
ｔｒｙ、 Ｖｏｌ、２５０． Ｎｏ、８． ｐ、２９４
１−２９４６ （１９７５年））に従い、培養および酵
素精製を行い、比活性が１．３単位／ｍＨの力価のトリ
プトファンシンターゼを取得し、この酵素液を用いて以
下の反応を行った。
Ｌ−セリン５０ｍＭ、硫化水素１００ｍＭ、ピリドキサ
ール燐酸０．１ｍＭ、およびトリプトファンシンターゼ
１．３単位を含む団トリスアミノメタン−）ｌｃｌｌｉ
衝液（ｐＨ９，０） １０ｍ１を３５℃で２時間ゆる
やかに振盪した０反応液中には、１．２ｍＭのＬ−シス
テインと０．３ｏ＋ＭのＬ−シスチンが生成した。
ール燐酸０．１ｍＭ、およびトリプトファンシンターゼ
１．３単位を含む団トリスアミノメタン−）ｌｃｌｌｉ
衝液（ｐＨ９，０） １０ｍ１を３５℃で２時間ゆる
やかに振盪した０反応液中には、１．２ｍＭのＬ−シス
テインと０．３ｏ＋ＭのＬ−シスチンが生成した。
実施例３
ペプトン１％、酵母エキス０．５％、グルコース２％、
インドールアクリルＷｉｏ、ｏｔ％、ｐＨ６，０の液体
培地にサツカロミセス・セレビシェ ＡＴＣＣ−２６７
８７を接種し、３０℃にて２０時間振盪培養した。
インドールアクリルＷｉｏ、ｏｔ％、ｐＨ６，０の液体
培地にサツカロミセス・セレビシェ ＡＴＣＣ−２６７
８７を接種し、３０℃にて２０時間振盪培養した。
培養終了後、遠心分離し・て菌体を曳め、Ｍ、Ｄｅｔｔ
ｖｉ ｌｅｒらの方法（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎ
ａｌ ｏｆＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｖｏｌ、１０２
．ｐ、１５９−１６５ （１９７９年））に従い酵素精
製を行い、比活性が１．２単位／ｍｇの力価のトリプト
ファンシンターゼを取得し、この酵素液を用いて以下の
反応を行った。
ｖｉ ｌｅｒらの方法（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎ
ａｌ ｏｆＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｖｏｌ、１０２
．ｐ、１５９−１６５ （１９７９年））に従い酵素精
製を行い、比活性が１．２単位／ｍｇの力価のトリプト
ファンシンターゼを取得し、この酵素液を用いて以下の
反応を行った。
Ｌ−セリン５０ｍＭ、硫化水素１００ｍＭ、ピリドキサ
ール燐酸０．１ｍＭ、およびトリプトファンシンターゼ
１．２単位を含む団トリスアミノメタン−）ＩＣ＋緩衝
液（ｐ）Ｉ ９．０） １０ｍ１を３５℃で２時間ゆ
るやかに振盪した０反応液中には、１− ＯｍＭのＬ−
システインと０．２ｍＭのし一シスチンが生成した。
ール燐酸０．１ｍＭ、およびトリプトファンシンターゼ
１．２単位を含む団トリスアミノメタン−）ＩＣ＋緩衝
液（ｐ）Ｉ ９．０） １０ｍ１を３５℃で２時間ゆ
るやかに振盪した０反応液中には、１− ＯｍＭのＬ−
システインと０．２ｍＭのし一シスチンが生成した。
実施例４
肉エキス １％、ペプトン０．５％、酵母エキス０．１
％、ＫＨ２ＰＯ４０，２％、ｐＨ７，０の液体培地にエ
シェリヒア・コリＭＴ−１０２４２（ＦＥＲＭ ＢＰ−
２０）を接種し、３０℃にて２０時間振盪培養した。培
養終了後、遠心分離して菌体を集め、これをトリプトフ
ァンシンターゼの酵素源として用いた。この湿菌体１８
当たりのトリプトファンシンターセ活性は、１２０単位
であった。
％、ＫＨ２ＰＯ４０，２％、ｐＨ７，０の液体培地にエ
シェリヒア・コリＭＴ−１０２４２（ＦＥＲＭ ＢＰ−
２０）を接種し、３０℃にて２０時間振盪培養した。培
養終了後、遠心分離して菌体を集め、これをトリプトフ
ァンシンターゼの酵素源として用いた。この湿菌体１８
当たりのトリプトファンシンターセ活性は、１２０単位
であった。
Ｌ−セリン１００ｍＭ、硫化水素４００ｍＭ、ピリドキ
サールリンＨ０，１ｍＭ、湿ｙ体５ｇを含むＩＭ ）リ
スアミノメタン −）ＩＣ＋緩衝液（ｐ）Ｉ ９．０）
１００ｍ１を、３５℃で５時間Ｓ盪した。反応終了
後、ジチオスレイトールにより反応液中のし一シスチン
をＬ−システィンに還元してから、Ｌ−システィンの生
成量を測定したところ、１５ｍＭであフた。
サールリンＨ０，１ｍＭ、湿ｙ体５ｇを含むＩＭ ）リ
スアミノメタン −）ＩＣ＋緩衝液（ｐ）Ｉ ９．０）
１００ｍ１を、３５℃で５時間Ｓ盪した。反応終了
後、ジチオスレイトールにより反応液中のし一シスチン
をＬ−システィンに還元してから、Ｌ−システィンの生
成量を測定したところ、１５ｍＭであフた。
実施例５
実施例１で取得したトリプトファンシンターゼを用いて
以下の反応を行った。
以下の反応を行った。
第１表に示したβ−置換−Ｌ−アラニンｌＯ抛屯硫化水
素３００ｍＭ、ピリドキサール燐酸 １ｍＭを含む９８
０ｍＭ ）リスアミノメタン−）ＩＣＩ！ｉｉＥ衡液（
ｐ）１８．５）１００ｍｌにトリプトファンシンターゼ
を ５００単位添加し、３５℃で１時間ゆるやかに振盪
した。反応終了後、ジチオスレイトールにより反応液中
のＬ−シスチンをＬ−システィンに還元してから、Ｌ−
システインの生成量を測定した。結果を第１表に示した
。
素３００ｍＭ、ピリドキサール燐酸 １ｍＭを含む９８
０ｍＭ ）リスアミノメタン−）ＩＣＩ！ｉｉＥ衡液（
ｐ）１８．５）１００ｍｌにトリプトファンシンターゼ
を ５００単位添加し、３５℃で１時間ゆるやかに振盪
した。反応終了後、ジチオスレイトールにより反応液中
のＬ−シスチンをＬ−システィンに還元してから、Ｌ−
システインの生成量を測定した。結果を第１表に示した
。
第１表
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 トリプトファンシンターゼの存在下に一般式［ I ］で
表されるβ−置換−Ｌ−アラニンを、硫化水素と水性媒
体中で反応させることを特徴とするＬ−システインおよ
び／またはＬ−シスチンの製造法。 ▲数式、化学式、表等があります▼ 一般式［ I ］ （但し、Ｘはハロゲン原子、−ＯＲ基または−ＳＲ基を
示す。（Ｒは水素原子、アルキル基、アセチル基、ベン
ジル基またはスルホン酸基を示す。））
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5956986A JPH0614868B2 (ja) | 1986-03-19 | 1986-03-19 | Ｌ−含硫アミノ酸の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5956986A JPH0614868B2 (ja) | 1986-03-19 | 1986-03-19 | Ｌ−含硫アミノ酸の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62220195A true JPS62220195A (ja) | 1987-09-28 |
| JPH0614868B2 JPH0614868B2 (ja) | 1994-03-02 |
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Family Applications (1)
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| Country | Link |
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1986
- 1986-03-19 JP JP5956986A patent/JPH0614868B2/ja not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Publication date |
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| JPH0614868B2 (ja) | 1994-03-02 |
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