JPS6224072B2 - - Google Patents
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- Publication number
- JPS6224072B2 JPS6224072B2 JP54015341A JP1534179A JPS6224072B2 JP S6224072 B2 JPS6224072 B2 JP S6224072B2 JP 54015341 A JP54015341 A JP 54015341A JP 1534179 A JP1534179 A JP 1534179A JP S6224072 B2 JPS6224072 B2 JP S6224072B2
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- lysine
- ethanol
- culture
- acinetobacter
- medium
- Prior art date
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- Expired
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、醗酵法によるＬ―リジン製造法に関
するものである。Ｌ―リジンは、必須アミノ酸と
して有用であり、その安価なる工業的製法が期待
されている。
するものである。Ｌ―リジンは、必須アミノ酸と
して有用であり、その安価なる工業的製法が期待
されている。
醗酵法によるアミノ酸の製造は、糖質（炭水化
物）系物質を主原料として実施されているが、原
料が農産物系のため、価格及び供給の安定性に問
題があることや、含有する多量の不純物に由来
し、生成される著量の副産物の問題、また醗酵廃
液の着色等の種々の問題を有し、根本的改善が望
まれていた。これらへの対応策として、炭化水素
等を醗酵原料とする製造法が研究されているが、
炭化水素はガス状であつたり、水に不溶性であつ
たりして工業的に使用するに難点があり、その為
に生成物の収量にも限界がある。そこで、本発明
者らは、安価で安定した供給が可能と考えられ、
かつ上記の欠点のないエタノールに着目して鋭意
研究の結果、アシネトバクター属に属し、エタノ
ール資化性を有する、微生物の中よりエタノール
を主炭素源とする培地にて培養すると、著量のＬ
―リジンを生成蓄積する能力を有する微生物を発
見し、ここに発明を完成した。すなわちアシネト
バクター属に属し、エタノール資化性を有し、か
つＬ―リジンを生成する能力を有する微生物をエ
タノールを主炭素源とする培地に培養して、Ｌ―
リジンを生成蓄積せしめ、培養物からこれを採取
することにより効率的にＬ―リジンを製造でき
る。
物）系物質を主原料として実施されているが、原
料が農産物系のため、価格及び供給の安定性に問
題があることや、含有する多量の不純物に由来
し、生成される著量の副産物の問題、また醗酵廃
液の着色等の種々の問題を有し、根本的改善が望
まれていた。これらへの対応策として、炭化水素
等を醗酵原料とする製造法が研究されているが、
炭化水素はガス状であつたり、水に不溶性であつ
たりして工業的に使用するに難点があり、その為
に生成物の収量にも限界がある。そこで、本発明
者らは、安価で安定した供給が可能と考えられ、
かつ上記の欠点のないエタノールに着目して鋭意
研究の結果、アシネトバクター属に属し、エタノ
ール資化性を有する、微生物の中よりエタノール
を主炭素源とする培地にて培養すると、著量のＬ
―リジンを生成蓄積する能力を有する微生物を発
見し、ここに発明を完成した。すなわちアシネト
バクター属に属し、エタノール資化性を有し、か
つＬ―リジンを生成する能力を有する微生物をエ
タノールを主炭素源とする培地に培養して、Ｌ―
リジンを生成蓄積せしめ、培養物からこれを採取
することにより効率的にＬ―リジンを製造でき
る。
本発明に使用する微生物は、アシネトバクター
属に属し、エタノールを資化し、Ｌ―リジンを生
成蓄積する能力を有する微生物であれば、自然界
からの分離株もしくは、公知の菌株あるいは、こ
れからの人為的遺伝変異株であつてもよい。
属に属し、エタノールを資化し、Ｌ―リジンを生
成蓄積する能力を有する微生物であれば、自然界
からの分離株もしくは、公知の菌株あるいは、こ
れからの人為的遺伝変異株であつてもよい。
エタノールからのＬ―リジンを生成蓄積する微
生物の例としてアシネトバクター・カルコアセチ
カムYK―1011を示す。
生物の例としてアシネトバクター・カルコアセチ
カムYK―1011を示す。
アシネトバクター・カルコアセチカムYK―
1011は工業技術院微生物研究所に受理番号第4818
号（昭和54年２月９日、微工研菌寄第4818号）と
して受理されている。
1011は工業技術院微生物研究所に受理番号第4818
号（昭和54年２月９日、微工研菌寄第4818号）と
して受理されている。
この微生物は、アシネトバクター・カルコアセ
チカムATCC19606より５―メチル―DL―トリプ
トフアン耐性株として誘導分離されたものであ
り、５―メチル―DL―トリプトフアン耐性であ
る点を除いたその他の性質はアシネトバクター・
カルコアセチカムATCC19606と同一である。
チカムATCC19606より５―メチル―DL―トリプ
トフアン耐性株として誘導分離されたものであ
り、５―メチル―DL―トリプトフアン耐性であ
る点を除いたその他の性質はアシネトバクター・
カルコアセチカムATCC19606と同一である。
本発明の具体的実施方法は以下の通りである。
培地組成の炭素源としては、エタノールを使用
するが、初期濃度については、使用する菌株によ
り１〜５％v/v内外より適当な条件を選定する。
なおエタノールは、消費にともない菌株の生育も
しくは、Ｌ―リジン生成に阻害を与えない適当な
る濃度条件に注意しながら逐次添加を行なう。
するが、初期濃度については、使用する菌株によ
り１〜５％v/v内外より適当な条件を選定する。
なおエタノールは、消費にともない菌株の生育も
しくは、Ｌ―リジン生成に阻害を与えない適当な
る濃度条件に注意しながら逐次添加を行なう。
窒素源としては、硫安、硝安、リン安、尿素等
より菌株の利用能により選定する。この他必要量
に応じて、アミノ酸類、コーンステイープリカ
ー、味液、酵母エキス等の有機栄養源や、無機塩
類、ビタミン類などを添加し培地とする。
より菌株の利用能により選定する。この他必要量
に応じて、アミノ酸類、コーンステイープリカ
ー、味液、酵母エキス等の有機栄養源や、無機塩
類、ビタミン類などを添加し培地とする。
培養条件については、温度20〜37℃、PH4〜
10、好ましくは、25〜35℃、PH6〜８として培養
すればよいが、これらの条件についても、使用菌
株により最適のものを選択する。培養は大体２〜
７日間を必要とする。
10、好ましくは、25〜35℃、PH6〜８として培養
すればよいが、これらの条件についても、使用菌
株により最適のものを選択する。培養は大体２〜
７日間を必要とする。
培養終了後、液中よりイオン交換樹脂法、活性
炭法、濃縮晶析法等の公知の方法により生成した
Ｌ―リジンを回収することが出来る。以下に実施
例を示す。
炭法、濃縮晶析法等の公知の方法により生成した
Ｌ―リジンを回収することが出来る。以下に実施
例を示す。
なお、生成されたＬ―リジンの定量は、ロイコ
ノストツク メセンテロイデスATCC8042を用い
る微生物定量法により培地中に含有するＬ―リジ
ンを差引いた値を示した。
ノストツク メセンテロイデスATCC8042を用い
る微生物定量法により培地中に含有するＬ―リジ
ンを差引いた値を示した。
実施例 １
前培養培地（尿素20g、硫安7.0g、
KH2PO40.5g、K2HPO40.5g、MgSO4・
7H2O0.5g、酵母エキス0.5g、カザミノ酸0.5g、
FeSO4・7H2O2mg、MnSO4・４〜6H2O2mg、
ZnSO4・7H2O2mg、NaCl2mg、CaCl2・2H2O2
mg、ビオチン200μｇ、チアミン塩酸塩100μｇ、
水道水１）10mlを口径24mmの大型試験管に分注
し、120℃、10分間滅菌し、無菌条件下にてエタ
ノールを0.2ml添加しアシネトバクター・カルコ
アセチカムYK―1011を植菌し、30℃で２日間振
盪培養を行なう。次に前培養地と同一の培地10ml
を口径24mmの大型試験管に分注し、120℃、10分
間滅菌し、あらかじめ乾熱滅菌した炭酸カルシウ
ム0.2gを添加し、次にエタノール0.2mlを添加し
た後、前培養液0.2mlを植菌し、30℃にて、７日
間振盪培養を行なう。エタノールは消費にともな
い添加する。（この際エタノールは３v/v％を越
えないようにする。）培養７日目に６g/蓄積さ
れたＬ―リジンを採取した。
KH2PO40.5g、K2HPO40.5g、MgSO4・
7H2O0.5g、酵母エキス0.5g、カザミノ酸0.5g、
FeSO4・7H2O2mg、MnSO4・４〜6H2O2mg、
ZnSO4・7H2O2mg、NaCl2mg、CaCl2・2H2O2
mg、ビオチン200μｇ、チアミン塩酸塩100μｇ、
水道水１）10mlを口径24mmの大型試験管に分注
し、120℃、10分間滅菌し、無菌条件下にてエタ
ノールを0.2ml添加しアシネトバクター・カルコ
アセチカムYK―1011を植菌し、30℃で２日間振
盪培養を行なう。次に前培養地と同一の培地10ml
を口径24mmの大型試験管に分注し、120℃、10分
間滅菌し、あらかじめ乾熱滅菌した炭酸カルシウ
ム0.2gを添加し、次にエタノール0.2mlを添加し
た後、前培養液0.2mlを植菌し、30℃にて、７日
間振盪培養を行なう。エタノールは消費にともな
い添加する。（この際エタノールは３v/v％を越
えないようにする。）培養７日目に６g/蓄積さ
れたＬ―リジンを採取した。
実施例 ２
実施例１に用いたと同じ前培養培地10mlを口径
24mmの大型試験管に分注し、120℃、10分間滅菌
した。これに無菌条件下にてエタノールを0.2ml
添加し、更にアシネトバクター・カルコアセチカ
ムYK―1011（微工研菌寄第4818号）を植菌し
て、30℃で２日間振盪培養を行つた。
24mmの大型試験管に分注し、120℃、10分間滅菌
した。これに無菌条件下にてエタノールを0.2ml
添加し、更にアシネトバクター・カルコアセチカ
ムYK―1011（微工研菌寄第4818号）を植菌し
て、30℃で２日間振盪培養を行つた。
次に前培養培地と同一の培地100mlを500ml容三
角フラスコに分注し、120℃、10分間滅菌した。
これに予め乾燥滅菌した炭酸カルシウム2gを添
加し、次にエタノール２mlを添加した後、上記前
培養液２mlを植菌し、30℃にて、７日間振盪培養
を行つた。この際エタノールは消費に伴い３v/v
％を越えないように添加した。培養７日目Ｌ―リ
ジンが6.5g蓄積された培養液を得た。この培養液
100mlを遠心分離して得られた上清液を強酸性イ
オン交換樹脂〔ローム・アンド・ハース社製「ア
ンバーライトIR―120」、Ｈ型〕カラムに通しＬ
―リジンを吸着させた。次いで３％アンモニア水
で溶出し、溶出液を減圧下濃縮し、これに塩酸を
加え、冷却・晶析後乾燥して560mlのＬ―リジン
塩酸塩を得た。
角フラスコに分注し、120℃、10分間滅菌した。
これに予め乾燥滅菌した炭酸カルシウム2gを添
加し、次にエタノール２mlを添加した後、上記前
培養液２mlを植菌し、30℃にて、７日間振盪培養
を行つた。この際エタノールは消費に伴い３v/v
％を越えないように添加した。培養７日目Ｌ―リ
ジンが6.5g蓄積された培養液を得た。この培養液
100mlを遠心分離して得られた上清液を強酸性イ
オン交換樹脂〔ローム・アンド・ハース社製「ア
ンバーライトIR―120」、Ｈ型〕カラムに通しＬ
―リジンを吸着させた。次いで３％アンモニア水
で溶出し、溶出液を減圧下濃縮し、これに塩酸を
加え、冷却・晶析後乾燥して560mlのＬ―リジン
塩酸塩を得た。
Claims (1)
- １ アシネトバクター属に属し、エタノール資化
性を有し、かつＬ―リジンを生成する能力を有す
る微生物をエタノールを主炭素源とする培地に培
養してＬ―リジンを生成蓄積せしめ、培養物から
これを採取することを特徴とする醗酵法によるＬ
―リジンの製造法。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1534179A JPS55108291A (en) | 1979-02-13 | 1979-02-13 | Production of l-lysine through fermentation process |
| DE19803005409 DE3005409A1 (de) | 1979-02-13 | 1980-02-13 | Verfahren zur herstellung von l-valin oder l-lysin |
| US06/120,963 US4276380A (en) | 1979-02-13 | 1980-02-13 | Production of L-amino acids |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1534179A JPS55108291A (en) | 1979-02-13 | 1979-02-13 | Production of l-lysine through fermentation process |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS55108291A JPS55108291A (en) | 1980-08-20 |
| JPS6224072B2 true JPS6224072B2 (ja) | 1987-05-26 |
Family
ID=11886080
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1534179A Granted JPS55108291A (en) | 1979-02-13 | 1979-02-13 | Production of l-lysine through fermentation process |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS55108291A (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108796026A (zh) * | 2018-06-29 | 2018-11-13 | 齐齐哈尔龙江阜丰生物科技有限公司 | 赖氨酸的生产、提取以及纯化工艺 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5036691A (ja) * | 1973-08-07 | 1975-04-05 |
-
1979
- 1979-02-13 JP JP1534179A patent/JPS55108291A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS55108291A (en) | 1980-08-20 |
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