JPH01257486A - 発酵法によるｌ−アルギニンの製造法 - Google Patents
発酵法によるｌ−アルギニンの製造法Info
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- JPH01257486A JPH01257486A JP63086097A JP8609788A JPH01257486A JP H01257486 A JPH01257486 A JP H01257486A JP 63086097 A JP63086097 A JP 63086097A JP 8609788 A JP8609788 A JP 8609788A JP H01257486 A JPH01257486 A JP H01257486A
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- C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
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- C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業−１−の利用分野
本発明は発酵法によるＬ−アルギニンの製造法に関する
。Ｌ−アルギニンは医薬品、食品等として有用なアミノ
酸である。
。Ｌ−アルギニンは医薬品、食品等として有用なアミノ
酸である。
従来の技術
従来、Ｌ−アルギニンは発酵法または蛋白質からの抽出
法により製造されている。発酵法で生産する方法とし°
Ｃは、アルギーンアナログに耐性の菌株を使用する方法
〔′ｒグリ力ルチュラル・アンド・バイオ嘗１シカＪし
・ケミストリイ （八にｒｉｃｕｌＬｕｒａｌ＆旧ｏ１
ｏ１＜１ｃａｌ （二ｈｅｓｉｓＬｒｙ） ３（ｉ 、
１Ｇ７５（１９７２） 、ジャーナル・オブ・ジェネ
ラル・アンドパｒブライドΦミク０バイオτ１シイ（Ｊ
ｎｕｒｎａｌ ｏｆ Ｇｅｎｅｒａｌ ＆＾ｐｐｌｉｅ
＋ｉ ＭｉｃｒｏｂｉｌｏＨＹ） １９ 、 ：１３９
（１９７コ）および特公昭４Ｂ−３３９１号公報〕、：
１リネパクテリウ１１屈に属し、ピリミジン゛ｒすｒ１
グ耐性を有する微生物を用いる方法（特発ＩＩｔｔ５７
−！’１０４７９号公報）、■、−アルギニン生合成系
に関与する遺伝子とベクターＯＮ＾との組み換え体１）
Ｎ八を保有させた菌株を用いる方法（特開昭（ｉｏ−６
（ｉ９ｇ９号公報）などが知られている。
法により製造されている。発酵法で生産する方法とし°
Ｃは、アルギーンアナログに耐性の菌株を使用する方法
〔′ｒグリ力ルチュラル・アンド・バイオ嘗１シカＪし
・ケミストリイ （八にｒｉｃｕｌＬｕｒａｌ＆旧ｏ１
ｏ１＜１ｃａｌ （二ｈｅｓｉｓＬｒｙ） ３（ｉ 、
１Ｇ７５（１９７２） 、ジャーナル・オブ・ジェネ
ラル・アンドパｒブライドΦミク０バイオτ１シイ（Ｊ
ｎｕｒｎａｌ ｏｆ Ｇｅｎｅｒａｌ ＆＾ｐｐｌｉｅ
＋ｉ ＭｉｃｒｏｂｉｌｏＨＹ） １９ 、 ：１３９
（１９７コ）および特公昭４Ｂ−３３９１号公報〕、：
１リネパクテリウ１１屈に属し、ピリミジン゛ｒすｒ１
グ耐性を有する微生物を用いる方法（特発ＩＩｔｔ５７
−！’１０４７９号公報）、■、−アルギニン生合成系
に関与する遺伝子とベクターＯＮ＾との組み換え体１）
Ｎ八を保有させた菌株を用いる方法（特開昭（ｉｏ−６
（ｉ９ｇ９号公報）などが知られている。
又、ブレビバクテリウム屈の５−２−アミノエチルシス
テイン耐性株による！、−リジンの製法が知られている
〔ジャーナル・オブ・ジェネラル・アンド・アプライド
・ミクロバイオロジイ（Ｊｏｕｒｎａｌｏｒ Ｇｅｎｅ
ｒａｌ ＆＾ｐｐｌｉｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｌｏｇｙ）
１６ 、３７３（１９７Ｇ）］。
テイン耐性株による！、−リジンの製法が知られている
〔ジャーナル・オブ・ジェネラル・アンド・アプライド
・ミクロバイオロジイ（Ｊｏｕｒｎａｌｏｒ Ｇｅｎｅ
ｒａｌ ＆＾ｐｐｌｉｅｄ Ｍｉｃｒｏｂｉｌｏｇｙ）
１６ 、３７３（１９７Ｇ）］。
発明が解決しようとする課題
１．−・アルギニンを、より収率よく安価に製造する方
法が求められている。
法が求められている。
本発明は＝１リネ型グルタミン酸生産菌であって、シス
テインまたはシステインアナログに耐性を有し、かつＬ
−アルギニン生産能を有する微生物を培地にＪｌｌｉ養
し、培養物中に１４−アルギニンを生成ＮＩＲＩさせ、
該ｊ８養物より７．−’ｆルギー、ンを採取°４゜るこ
とを特徴とする発酵法による【、−アルギニンの製造法
に関する。
テインまたはシステインアナログに耐性を有し、かつＬ
−アルギニン生産能を有する微生物を培地にＪｌｌｉ養
し、培養物中に１４−アルギニンを生成ＮＩＲＩさせ、
該ｊ８養物より７．−’ｆルギー、ンを採取°４゜るこ
とを特徴とする発酵法による【、−アルギニンの製造法
に関する。
本発明に使用°４”る微生物としては、コリネ型グルタ
ミン酸生産菌であって、システインまたはシスティンア
ナログに耐性を有し、かつＬ−アルギニン生産能を有す
るものであればいずれも用いられる。
ミン酸生産菌であって、システインまたはシスティンア
ナログに耐性を有し、かつＬ−アルギニン生産能を有す
るものであればいずれも用いられる。
コリネ型グルタミン酸生産菌としては、コリネバクテリ
ウム屑（種として、コリネバクテリウム・グルタミクム
、コリネバクテリウム・アセトアシドフィラム、コリネ
バクテリウム・リリウム等）、プレピバクデリウ！、証
１（種として、プレビパクデリウ！・°・フラバ！・、
ブレビバクゾリウム・ラクトフアーメンタノ・、ブレビ
バクテリウム・デイバリカラム等）等に属する菌株があ
げられる。具体的には、コリネバクテリウム・グルタミ
クム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｓ ｇｌｕｔａ
ｓｉｃｕｍ ） ｔｌ −７０９０（Ｆ［！）ＩＭ Ｄ
Ｉ’−１８２３） （以下、１１−７０９６と称す）、
コリネバクテリウム・アセトアシドフィラム（Ｃｏｒｙ
ｎｅｂａｃＬａｒｉｕｓ ａｃｅＬｏａｃｉｄｏｐｂ
ｉｌｕ＋５）ＩＩ −？ ０９２ （ＦＢＲｌｉ ０Ｐ
−１８２０） （以下、１１−７０９２と称す）、Ｈ−
７０９３（同ＲＭ’［ＩＰ−１８２１） （以下、１１
−７１１９３と称す） 、Ｈ−？ ｌ ｌ ７ （Ｐ［
！Ｒ１ｌ ０１１−１８２２） （以下、ｌｌ−７１１
７と称す）等があげられる。これらの菌株は昭和６３年
３月２８０付で工業技術院微生物工業技術研究所（微工
研）にそれぞれ国際寄託されている。
ウム屑（種として、コリネバクテリウム・グルタミクム
、コリネバクテリウム・アセトアシドフィラム、コリネ
バクテリウム・リリウム等）、プレピバクデリウ！、証
１（種として、プレビパクデリウ！・°・フラバ！・、
ブレビバクゾリウム・ラクトフアーメンタノ・、ブレビ
バクテリウム・デイバリカラム等）等に属する菌株があ
げられる。具体的には、コリネバクテリウム・グルタミ
クム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｓ ｇｌｕｔａ
ｓｉｃｕｍ ） ｔｌ −７０９０（Ｆ［！）ＩＭ Ｄ
Ｉ’−１８２３） （以下、１１−７０９６と称す）、
コリネバクテリウム・アセトアシドフィラム（Ｃｏｒｙ
ｎｅｂａｃＬａｒｉｕｓ ａｃｅＬｏａｃｉｄｏｐｂ
ｉｌｕ＋５）ＩＩ −？ ０９２ （ＦＢＲｌｉ ０Ｐ
−１８２０） （以下、１１−７０９２と称す）、Ｈ−
７０９３（同ＲＭ’［ＩＰ−１８２１） （以下、１１
−７１１９３と称す） 、Ｈ−？ ｌ ｌ ７ （Ｐ［
！Ｒ１ｌ ０１１−１８２２） （以下、ｌｌ−７１１
７と称す）等があげられる。これらの菌株は昭和６３年
３月２８０付で工業技術院微生物工業技術研究所（微工
研）にそれぞれ国際寄託されている。
本発明でいうシスティンアナログとは最小培地寒天平板
上に該アナログを添加し、コリネ型グルタミン酸生産菌
を培養した時に、該生産菌の生育を阻害するが、この阻
害がシスティンが存在することにより解除されるような
ものをいう。例えば、Ｓ−エチルシスティン、Ｓ−メチ
ルシスティン、５−２−アミノエチルシステイン、ホモ
システイン、システイン酸、ホモシステイン酸、γリル
グリシン等が挙げられる。
上に該アナログを添加し、コリネ型グルタミン酸生産菌
を培養した時に、該生産菌の生育を阻害するが、この阻
害がシスティンが存在することにより解除されるような
ものをいう。例えば、Ｓ−エチルシスティン、Ｓ−メチ
ルシスティン、５−２−アミノエチルシステイン、ホモ
システイン、システイン酸、ホモシステイン酸、γリル
グリシン等が挙げられる。
以下に前記具体的な菌株の採取方法を説明する。
（１）ＩＩ−７０９６の取得方法
コリネバクテリウム・・グルタミクムにマー１０６７１
（Ｆｌ！ＭＭ ｌ”−３６１（ｉ） （以下、にマ１１
１ｒｉ７１と称ず）（１）−３ｅｒζ１）４Ｐｇ” 、
Ａｒｇｌｌｘ” 、（ｉＡＵ ”）をＮ−／ チＪレ
−Ｎ’−二）ｔ＋−Ｎ−二）ｎ７グ°ｒ−′、ジ：／
２５１１ａｇ／ｄで３０℃、３０分処理した後、該処理
株を親株が生育阻害を示す濃度（１０ｍｇ／ａｄ）のＳ
−エチルシスティンを含む最小ＪΔ地寒天平板上（グル
コースｌｏｇ／ｊ、塩化°ｒンｓｔ：ニウＬｋｇ／ｌ、
尿嵩２ ｇ／ｌ、 に１ｌＩＰ０４ １ ｇ ／ １、
に、１１Ｐ口＊３ｇ／ｌ 、１１ｇｃｊ＊’２１１ａ
０ ０．４ｇ／ｌ、ｌ’ｅｓＯ＊”７１１ｉ０ １
０ｍｇ／ １、賛ｎｓＯ＊”４１１ｓＯｔｏ ｗｇ／
ｄｉ、 ＺｎＳＯ４”７１１ｓＯ１ｍｇ／ １ 。
（Ｆｌ！ＭＭ ｌ”−３６１（ｉ） （以下、にマ１１
１ｒｉ７１と称ず）（１）−３ｅｒζ１）４Ｐｇ” 、
Ａｒｇｌｌｘ” 、（ｉＡＵ ”）をＮ−／ チＪレ
−Ｎ’−二）ｔ＋−Ｎ−二）ｎ７グ°ｒ−′、ジ：／
２５１１ａｇ／ｄで３０℃、３０分処理した後、該処理
株を親株が生育阻害を示す濃度（１０ｍｇ／ａｄ）のＳ
−エチルシスティンを含む最小ＪΔ地寒天平板上（グル
コースｌｏｇ／ｊ、塩化°ｒンｓｔ：ニウＬｋｇ／ｌ、
尿嵩２ ｇ／ｌ、 に１ｌＩＰ０４ １ ｇ ／ １、
に、１１Ｐ口＊３ｇ／ｌ 、１１ｇｃｊ＊’２１１ａ
０ ０．４ｇ／ｌ、ｌ’ｅｓＯ＊”７１１ｉ０ １
０ｍｇ／ １、賛ｎｓＯ＊”４１１ｓＯｔｏ ｗｇ／
ｄｉ、 ＺｎＳＯ４”７１１ｓＯ１ｍｇ／ １ 。
ＣｕＳＯｓ”５Ｈ＊Ｏｔｓｇ／ｊ、（Ｎ１１Ｊａｉｌｏ
ｔＯｓ、’４１１＊０１１１ｇ／ １、ビオチン５０尾
／１、寒天２０■／１、ｐＨ？、２ ）に塗布し、３０
℃で７〜１０日間培養して生育する変異株を取得した。
ｔＯｓ、’４１１＊０１１１ｇ／ １、ビオチン５０尾
／１、寒天２０■／１、ｐＨ？、２ ）に塗布し、３０
℃で７〜１０日間培養して生育する変異株を取得した。
このようにして取（）シた変異株の内、Ｌ−’ｒアルギ
ニン生産能殴れた株としてＩＩ −７０９ｆｉ （１）
−３ｅｒ’、 ｌ）−八１８″、＾ｒｇｌｌｘ”、６＾
ｕ１、Ｓ［ＩＣ”）を取得した。
ニン生産能殴れた株としてＩＩ −７０９ｆｉ （１）
−３ｅｒ’、 ｌ）−八１８″、＾ｒｇｌｌｘ”、６＾
ｕ１、Ｓ［ＩＣ”）を取得した。
Ｄ−３ｅｒ’ ： Ｄ−セリン感受性、ト＾ｒＨ” ：
ｆ）−アルギニン耐Ｌ Ａｒｇｌｌｘ” ： ’］
’ルギニンハイドロキサメート耐性、６＾ｕ”：６−ア
ずウラシル耐性、ｓｔ＋ｃ” ： ｓ−エチルシスティ
ン耐性（２）ＩＩ−７０り ２．Ｉｌ−？ ０９ ；ｌ
及びｌｌ−７１１７の取得方法 前記（−）項の取得方法において、親株としてＰＩ！Ｒ
１１Ｐ−３６１６の代わりにコリネバクテリウム、・ア
セトアシドフィラム夏（−４３１３（Ａｒｇｌｌｘ”。
ｆ）−アルギニン耐Ｌ Ａｒｇｌｌｘ” ： ’］
’ルギニンハイドロキサメート耐性、６＾ｕ”：６−ア
ずウラシル耐性、ｓｔ＋ｃ” ： ｓ−エチルシスティ
ン耐性（２）ＩＩ−７０り ２．Ｉｌ−？ ０９ ；ｌ
及びｌｌ−７１１７の取得方法 前記（−）項の取得方法において、親株としてＰＩ！Ｒ
１１Ｐ−３６１６の代わりにコリネバクテリウム、・ア
セトアシドフィラム夏（−４３１３（Ａｒｇｌｌｘ”。
２ＴＡ”、６ＡＵ−（ＭＰＡ＋Ｃ［ｌＺ Ａｒｇ）”］
（以下、ｌｌ−４３１３と称す）を用い、かつＳ−
エチルシステインの代わりにＳ−メチルシスティン、５
−２−丁ミノエチルシステインまたはシスティンを用い
る以外は（１）項と同様に行い、 ｌｌ−７０９２（（＾ｒｇｌｂ＠、２ＴＡ＠、６＾Ｕ−
（ＭＦ＾＋ＣｎＺ Ａｒｇ）”、５ｌｌＣ，＠〕、１１
−７０９３［（＾ｒｇｌｌｘ”、 ２ＴＡ″、 ６＾Ｕ
″、 （Ｍ１５八ｉｔ’：１１７＾「に）１、ＡｌＩＣ
町または１１−７ １ １ ７ ［（＾ｒｇｌｌｘ″
、 ２ＴＡ”、 ＧへＩ＋”、 （Ｍｌｉ＾ｊｃｌＩ
Ｚ＾「８）１、ＣＹＳ町を１１だ。
（以下、ｌｌ−４３１３と称す）を用い、かつＳ−
エチルシステインの代わりにＳ−メチルシスティン、５
−２−丁ミノエチルシステインまたはシスティンを用い
る以外は（１）項と同様に行い、 ｌｌ−７０９２（（＾ｒｇｌｂ＠、２ＴＡ＠、６＾Ｕ−
（ＭＦ＾＋ＣｎＺ Ａｒｇ）”、５ｌｌＣ，＠〕、１１
−７０９３［（＾ｒｇｌｌｘ”、 ２ＴＡ″、 ６＾Ｕ
″、 （Ｍ１５八ｉｔ’：１１７＾「に）１、ＡｌＩＣ
町または１１−７ １ １ ７ ［（＾ｒｇｌｌｘ″
、 ２ＴＡ”、 ＧへＩ＋”、 （Ｍｌｉ＾ｊｃｌＩ
Ｚ＾「８）１、ＣＹＳ町を１１だ。
２ＴＡ” ： ２−−チアゾールアラ！−ン耐性、（Ｉ
ＪＦＡ）ＣＩＩＺ＾「ル）１：モノフル」１１酢酸存在
下でのＮ−カルボベンゾキシｒルギニン耐性、ＳＭＩ：
” ： Ｓ−メチルシステイン耐性、＾ｌｉｅ”：Ｓ−
２−γミノエチルシスティン耐性、１：Ｙｓ”：システ
イン耐性 づぎに前記親株及び皮異様をシステイン又はシステイン
“ｆデｔ１グを含む最小培地寒天甲板」−で３０℃、２
４時間培養したときの生育度を第１表に示す。
ＪＦＡ）ＣＩＩＺ＾「ル）１：モノフル」１１酢酸存在
下でのＮ−カルボベンゾキシｒルギニン耐性、ＳＭＩ：
” ： Ｓ−メチルシステイン耐性、＾ｌｉｅ”：Ｓ−
２−γミノエチルシスティン耐性、１：Ｙｓ”：システ
イン耐性 づぎに前記親株及び皮異様をシステイン又はシステイン
“ｆデｔ１グを含む最小培地寒天甲板」−で３０℃、２
４時間培養したときの生育度を第１表に示す。
本発明の方法において用いられる菌の培養に際しては、
一般にアミノ酸の発酵生産に用いられる７５地が使用さ
れる。
一般にアミノ酸の発酵生産に用いられる７５地が使用さ
れる。
ずなわら菌が資化しうる炭素源、窒素源、無機塩類等を
含有する合成培地または天然培地が適宜用いられる。
含有する合成培地または天然培地が適宜用いられる。
炭素源としては、グルコース、フラクトース、シュク【
１−ス、糖蜜、澱粉、澱粉加水分解物等の糖類、酢酸、
フマール酸、クエン酸等の有機酸、エタノール、メタノ
ール、グリセ１１−ル等のアルコール類等が用いられる
。
１−ス、糖蜜、澱粉、澱粉加水分解物等の糖類、酢酸、
フマール酸、クエン酸等の有機酸、エタノール、メタノ
ール、グリセ１１−ル等のアルコール類等が用いられる
。
窒素源としては、アンモニア、塩化アンモニウム、硫酸
アンモニウム、酢酸アンモニウム、燐酸°ｒアンモニウ
ムの無機塩類、フマール酸アンモニウノ・等の有機酸の
アンモニウム・塩、エチルアミン等のアミン類、原書等
の含窒素化合物、ペプトン、肉エキス、酵母エキス、コ
ーンｅスディープ・リカー、カゼイン加水分解物、大豆
粕又はその加水分解物、アミノ酸発酵、核酸発酵等の発
酵菌体およびその消化物等が用いられる。
アンモニウム、酢酸アンモニウム、燐酸°ｒアンモニウ
ムの無機塩類、フマール酸アンモニウノ・等の有機酸の
アンモニウム・塩、エチルアミン等のアミン類、原書等
の含窒素化合物、ペプトン、肉エキス、酵母エキス、コ
ーンｅスディープ・リカー、カゼイン加水分解物、大豆
粕又はその加水分解物、アミノ酸発酵、核酸発酵等の発
酵菌体およびその消化物等が用いられる。
無機塩類としては、燐／ｉ１２第一カリウト、燐酸第二
カリウノ・、燐酸マグネシウム、硫酸マグネシラ！・、
塩化す） ＩＪウド、硫酸第一鉄、硫酸マンガン、酸ｌ
１ｉ１２′ＩＡ１炭酸カルシウム等が用いられる。
カリウノ・、燐酸マグネシウム、硫酸マグネシラ！・、
塩化す） ＩＪウド、硫酸第一鉄、硫酸マンガン、酸ｌ
１ｉ１２′ＩＡ１炭酸カルシウム等が用いられる。
その他必要により培地にビオチン、チアミン、ニコチン
酸、β−γラニン等のビタミン類、グ・ルタミン酸等の
アミノＰＩＩ類を添加することがある。
酸、β−γラニン等のビタミン類、グ・ルタミン酸等の
アミノＰＩＩ類を添加することがある。
培養は振盪培養または深部通気攪拌培養などの好気的条
件下２０〜４０℃、好ましくは２５〜３８℃の温度で行
われる。培地のｐｌ＋は５〜９好ましくは中性付近に保
持する。培地の１１１１調整は炭酸力ルシウ！・、無機
または有機の酸、アルカリ溶液、アンモニア、ｐ１１緩
衝液等によって行う。
件下２０〜４０℃、好ましくは２５〜３８℃の温度で行
われる。培地のｐｌ＋は５〜９好ましくは中性付近に保
持する。培地の１１１１調整は炭酸力ルシウ！・、無機
または有機の酸、アルカリ溶液、アンモニア、ｐ１１緩
衝液等によって行う。
培養期間は通常１〜７日間で、培養物中にＬ−アルギニ
ンが生成蓄積する。
ンが生成蓄積する。
培養終了後、培養液から菌体などの沈澱物を除去し、イ
オン交換処理法、濃縮法、塩析法、等電点沈澱法等を併
用することにより、培養液から１、−アルギニンを回収
°４゛ることかできる。
オン交換処理法、濃縮法、塩析法、等電点沈澱法等を併
用することにより、培養液から１、−アルギニンを回収
°４゛ることかできる。
以下に本発明の実施例を示す。
実施例！
ｌｌ−７０９６及びＫＹ−１０（ｉｌｌをそれぞれグル
コース２０ｇ／Ｊ！、ペプトンｌＯｇ／ｌ、酵母エキＸ
１１１ｇ／Ｊ！及びＮａＣ１５ｇ／ｌの組成よりなる種
陪地（ｐＨ７，２） ｌｉ ｍｆｆ−（’：１１）℃、
２４時間培養シタ。１町）られた種ｊΔ養液２ｍｌを後
記生産培地２０−を含む３０〇−容三角フラスコ１に植
菌した後、３０℃で７２時間振ｒＲＪΔ養した。
コース２０ｇ／Ｊ！、ペプトンｌＯｇ／ｌ、酵母エキＸ
１１１ｇ／Ｊ！及びＮａＣ１５ｇ／ｌの組成よりなる種
陪地（ｐＨ７，２） ｌｉ ｍｆｆ−（’：１１）℃、
２４時間培養シタ。１町）られた種ｊΔ養液２ｍｌを後
記生産培地２０−を含む３０〇−容三角フラスコ１に植
菌した後、３０℃で７２時間振ｒＲＪΔ養した。
その結果、１１−７０ り （ｉ及びＫＹ−１（１（ｉ
７１の培養液中のし一アルギニン生成量はそれぞれ２４
．５ｍｇ／−及び２２．０ｍｇ／ ｍｅ テ／） −）
だ。
７１の培養液中のし一アルギニン生成量はそれぞれ２４
．５ｍｇ／−及び２２．０ｍｇ／ ｍｅ テ／） −）
だ。
生産培地の組成
廃糖蜜１５０ｇ／ｊ！ （グルコース換算）、硫安３０
ｇ／ｌ、尿ｍ３ｇ／ｌ、に１Ｉａｌ’Ｏｎ ０．５ｇ
／ １ 、に！＋１１１０゜０．５ ｇ／ｌ、 Ｍ
ｇ５Ｏｎ ・２Ｈ＊ロ ０．２５ｇ ／ １ 、
ＣａＣＯａ３０ｇ／ｌ （ρ１１７．２） Ｈ−７０９６の培養終了液から遠心分離によりえた」；
清液１１を強酸性陽イオン交換樹脂〔ダウエックス５０
ｘ ８ （Ｎ ａ 型） 、ダウケミカル社製〕のカ
ラ！・に通し、アンモニア水で１６−アルギニンを溶出
分離した後、精製、濃縮及び品出°４°ることにより、
１９、（ｉｇの！、−’ｒアルギニン結晶を１−）た。
ｇ／ｌ、尿ｍ３ｇ／ｌ、に１Ｉａｌ’Ｏｎ ０．５ｇ
／ １ 、に！＋１１１０゜０．５ ｇ／ｌ、 Ｍ
ｇ５Ｏｎ ・２Ｈ＊ロ ０．２５ｇ ／ １ 、
ＣａＣＯａ３０ｇ／ｌ （ρ１１７．２） Ｈ−７０９６の培養終了液から遠心分離によりえた」；
清液１１を強酸性陽イオン交換樹脂〔ダウエックス５０
ｘ ８ （Ｎ ａ 型） 、ダウケミカル社製〕のカ
ラ！・に通し、アンモニア水で１６−アルギニンを溶出
分離した後、精製、濃縮及び品出°４°ることにより、
１９、（ｉｇの！、−’ｒアルギニン結晶を１−）た。
実施例２
１１−４３１：ｌ 、 厘１−７（１り２ 、
ｌｌ−７（１９３及びｌｌ−７１１７をソレソレグ７
１／：Ｊ−ｘ５０ｇ／ｌ、ペプトンｌｕｇ／ｌ、酵母エ
キスＩＯｇ／Ｊ、硫安５− ｇ／ｌ、 Ｋ１１ｌ＋’０
４ ５ｇ ／ １ 、 Ｍｇ５Ｏ１・ ２１１ａＯ（１
’、５ｇ ７１ 、 。
ｌｌ−７（１９３及びｌｌ−７１１７をソレソレグ７
１／：Ｊ−ｘ５０ｇ／ｌ、ペプトンｌｕｇ／ｌ、酵母エ
キスＩＯｇ／Ｊ、硫安５− ｇ／ｌ、 Ｋ１１ｌ＋’０
４ ５ｇ ／ １ 、 Ｍｇ５Ｏ１・ ２１１ａＯ（１
’、５ｇ ７１ 、 。
ビオチン５ｈｇ／ｍｌ及びＮａＣｊ ５ｇ ／ １ （
７）、Ｉｌ成Ｊ、 リなる種培地（ｐＨ？、２） ６
ａｄで３０℃、２４時間培養した。
７）、Ｉｌ成Ｊ、 リなる種培地（ｐＨ？、２） ６
ａｄで３０℃、２４時間培養した。
１！）られた各種培養液２１を後記生産培地２０ｍ１を
含む３００１容三角フラスコに植菌した後、：ＩＩＩｔ
で７２時間振盪培養した。
含む３００１容三角フラスコに植菌した後、：ＩＩＩｔ
で７２時間振盪培養した。
生産１Δ地の組成
廃糖蜜８０ｇ／ｊ（グルコース換算）、に１１２ｅ口。
０．５ｇ／ｌ、に１１１１”０４０．５ｇ ／ １、硫
安４５ｇ／ｌ、尿素２ｇ ／１ 、 ＣａＣ０ａ ３０
ｇ ／ １ （ｐＨ７、２）培養液中のし一アルギニン
生成量を第２表に示す。
安４５ｇ／ｌ、尿素２ｇ ／１ 、 ＣａＣ０ａ ３０
ｇ ／ １ （ｐＨ７、２）培養液中のし一アルギニン
生成量を第２表に示す。
第 ２ 表
１１−７０９２ ２４．１）
ｔｌ−７０！３３ ２３．５
ＩＩ−７１１？ ２３．２
■菖 −４：１１：ｌ
２１．０本発明方法により【、−アルギニンを収
率よ＜１！シることができる。
２１．０本発明方法により【、−アルギニンを収
率よ＜１！シることができる。
Claims (1)
- コリネ型グルタミン酸生産菌であって、システインまた
はシステインアナログに耐性を有し、かつＬ−アルギニ
ン生産能を有する微生物を培地に培養し、培養物中にＬ
−アルギニンを生成蓄積させ、該培養物よりＬ−アルギ
ニンを採取することを特徴とする発酵法によるＬ−アル
ギニンの製造法。
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63086097A JP2578468B2 (ja) | 1988-04-07 | 1988-04-07 | 発酵法によるｌ−アルギニンの製造法 |
| EP89105956A EP0336387B1 (en) | 1988-04-07 | 1989-04-05 | Process for producing l-arginine |
| DE89105956T DE68907972T2 (de) | 1988-04-07 | 1989-04-05 | Verfahren zur Herstellung von L-Arginin. |
| KR1019890004558A KR910008636B1 (ko) | 1988-04-07 | 1989-04-06 | L-아르기닌의 제조방법 |
| US07/334,328 US5034319A (en) | 1988-04-07 | 1989-04-07 | Process for producing L-arginine |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP63086097A JP2578468B2 (ja) | 1988-04-07 | 1988-04-07 | 発酵法によるｌ−アルギニンの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH01257486A true JPH01257486A (ja) | 1989-10-13 |
| JP2578468B2 JP2578468B2 (ja) | 1997-02-05 |
Family
ID=13877203
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP63086097A Expired - Lifetime JP2578468B2 (ja) | 1988-04-07 | 1988-04-07 | 発酵法によるｌ−アルギニンの製造法 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5034319A (ja) |
| EP (1) | EP0336387B1 (ja) |
| JP (1) | JP2578468B2 (ja) |
| KR (1) | KR910008636B1 (ja) |
| DE (1) | DE68907972T2 (ja) |
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| LT5581B (lt) | 2007-11-10 | 2009-07-27 | Vytautas FEDARAVIČIUS | Baltyminio pieno produkto su l-argininu gamybos būdas |
| RU2496867C2 (ru) | 2011-04-25 | 2013-10-27 | Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО "АГРИ") | Способ получения l-аминокислоты семейства глутамата с использованием коринеформной бактерии |
Family Cites Families (5)
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| US4346169A (en) * | 1980-09-15 | 1982-08-24 | Ajinomoto Company, Incorporated | Method for production of L-arginine by fermentation |
| US4411991A (en) * | 1980-10-07 | 1983-10-25 | Kanegafuchi Chemical Industry Company, Limited | Process for fermentative production of amino acids |
| JPS6066989A (ja) * | 1983-09-24 | 1985-04-17 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | Ｌ−アルギニンの製造法 |
-
1988
- 1988-04-07 JP JP63086097A patent/JP2578468B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1989
- 1989-04-05 DE DE89105956T patent/DE68907972T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1989-04-05 EP EP89105956A patent/EP0336387B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-04-06 KR KR1019890004558A patent/KR910008636B1/ko not_active Expired
- 1989-04-07 US US07/334,328 patent/US5034319A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
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| EP0336387B1 (en) | 1993-08-04 |
| US5034319A (en) | 1991-07-23 |
| DE68907972D1 (de) | 1993-09-09 |
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| KR910008636B1 (ko) | 1991-10-19 |
| EP0336387A3 (en) | 1990-09-12 |
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