JPS6226253A - 新規アントラキノン誘導体、蛋白質吸着剤および蛋白質沈殿剤 - Google Patents
新規アントラキノン誘導体、蛋白質吸着剤および蛋白質沈殿剤Info
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- JPS6226253A JPS6226253A JP61164870A JP16487086A JPS6226253A JP S6226253 A JPS6226253 A JP S6226253A JP 61164870 A JP61164870 A JP 61164870A JP 16487086 A JP16487086 A JP 16487086A JP S6226253 A JPS6226253 A JP S6226253A
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
- C12N9/0006—Oxidoreductases (1.) acting on CH-OH groups as donors (1.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
- C09B62/00—Reactive dyes, i.e. dyes which form covalent bonds with the substrates or which polymerise with themselves
- C09B62/002—Reactive dyes, i.e. dyes which form covalent bonds with the substrates or which polymerise with themselves with the linkage of the reactive group being alternatively specified
- C09B62/004—Anthracene dyes
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明は、アントラキノン（ＡＱ）誘導体に関し、さら
に詳細には反応性・＼ロデン原子を含む基を有する同誘
導体、および同誘導体から製造され、蛋白質の分離およ
び精製に有効な蛋白實吸漕剤および沈殿剤に関する。
に詳細には反応性・＼ロデン原子を含む基を有する同誘
導体、および同誘導体から製造され、蛋白質の分離およ
び精製に有効な蛋白實吸漕剤および沈殿剤に関する。
従来の技術
セルロース反応性染料は、木綿、ビスコースおよび他の
セルロース繊維の着色用に繊維工業で広範に使用される
十分に確立した生成物である。このような反応性染料の
分子は、それぞれが異なる作用を有する連結された２つ
の単位から構成されていると考えることができる。１つ
の単位は、繊維にＦ９Ｔ望の色および他の酒色性を与え
る作用を有する発色団である。他の単位は繊維反応基で
あり、四基は十分に確立された通用条件下でセルロース
と化学的に反応して染料分子を繊維に共有納会させて高
い耐洗濯性を有する染色拐科を生じる。
セルロース繊維の着色用に繊維工業で広範に使用される
十分に確立した生成物である。このような反応性染料の
分子は、それぞれが異なる作用を有する連結された２つ
の単位から構成されていると考えることができる。１つ
の単位は、繊維にＦ９Ｔ望の色および他の酒色性を与え
る作用を有する発色団である。他の単位は繊維反応基で
あり、四基は十分に確立された通用条件下でセルロース
と化学的に反応して染料分子を繊維に共有納会させて高
い耐洗濯性を有する染色拐科を生じる。
セルロース反応性染料は、初期にはセルロース繊維材料
の染色および捺染において遭遇した若干の問題を解決す
るために開発されたけれども、数年後に繊維の染色分野
以外で同染料を有用にする諸性質を有することが判明し
た。
の染色および捺染において遭遇した若干の問題を解決す
るために開発されたけれども、数年後に繊維の染色分野
以外で同染料を有用にする諸性質を有することが判明し
た。
例えば米国特許第４．Ｌｌ １６．１４９号および国際
公開第７９００５基１号から、セルロース反応性染料が
同様な技術によって炭水化物基質、例えばアガロース、
デキストロース、デキストラン等に結合されかつそれら
の変性架制形を生じることが知られている。このような
炭水化物基質の付加物および開業的に得られる若干の反
応性染料は、若干の蛋白質物質をクロマトグラフィーに
より分離するための吸着剤として使用されている。この
ようＶＣ蛋白貿の分離のために使用されている間業的祖
維染料の中には、若干の基１純なブルーＡＣ，ｌ染料、
例えは次式：を有するＣ’ＩＸアチプ・ブルー（Ｒｅａ
ｃｔｉｖ８Ｂｌｕｓ） ２が存在する。
公開第７９００５基１号から、セルロース反応性染料が
同様な技術によって炭水化物基質、例えばアガロース、
デキストロース、デキストラン等に結合されかつそれら
の変性架制形を生じることが知られている。このような
炭水化物基質の付加物および開業的に得られる若干の反
応性染料は、若干の蛋白質物質をクロマトグラフィーに
より分離するための吸着剤として使用されている。この
ようＶＣ蛋白貿の分離のために使用されている間業的祖
維染料の中には、若干の基１純なブルーＡＣ，ｌ染料、
例えは次式：を有するＣ’ＩＸアチプ・ブルー（Ｒｅａ
ｃｔｉｖ８Ｂｌｕｓ） ２が存在する。
この種類の畏敬の染料は、棟々の染料製造から得られる
反応性染料の範囲で見出される。この種類のセルロース
反応性染料の分子的特徴は、員が１−アミノ−４−アリ
ールアミノ−ＡＱ−２−スルホン酸（アリール単位は一
般に１さらにスルホン酸基およびイミノ基によってベン
ゼン環に結合されたハロデノーヘテロ環式壕維反応基に
よってｔＩｔ換された率−ベンセ゛ン壌である９の塩、
延常ナトリウム塩であることである。弐Ａの染料中に存
在するモノクロロトリアジン反応基は、異なる繊維反応
性ハロゲノへテロ項式基、例えばジクロロピリミジニル
、ゾフルオロビリミジニル、トリクロロピリミジニル、
５−クロロジフルオロピリミジニル、５−シアノジクロ
ロピリミジニルまたはジクロロトリアゾニルによって置
侠されていてもよい、しかし有利な反応基はモノクロロ
トリアジニルである。
反応性染料の範囲で見出される。この種類のセルロース
反応性染料の分子的特徴は、員が１−アミノ−４−アリ
ールアミノ−ＡＱ−２−スルホン酸（アリール単位は一
般に１さらにスルホン酸基およびイミノ基によってベン
ゼン環に結合されたハロデノーヘテロ環式壕維反応基に
よってｔＩｔ換された率−ベンセ゛ン壌である９の塩、
延常ナトリウム塩であることである。弐Ａの染料中に存
在するモノクロロトリアジン反応基は、異なる繊維反応
性ハロゲノへテロ項式基、例えばジクロロピリミジニル
、ゾフルオロビリミジニル、トリクロロピリミジニル、
５−クロロジフルオロピリミジニル、５−シアノジクロ
ロピリミジニルまたはジクロロトリアゾニルによって置
侠されていてもよい、しかし有利な反応基はモノクロロ
トリアジニルである。
ところで、このような吸着剤の選択性が、前記商業的染
料に代わる若干の新規ＡＱ＝傅体を使用することによっ
て著しく改善されうろことが判明した。
料に代わる若干の新規ＡＱ＝傅体を使用することによっ
て著しく改善されうろことが判明した。
発８Ａを達成するための手段
本発明の第一番目の態様によれば式：
で示される化合物が提供される。
式Ｉの新規化合物は、式Ａの采科と比べて大抵の塩基性
の生物種に対する増大された選択性を有する。環Ａのカ
ルボキシレート基はアミノ架倒基に関してオルト、メタ
またパラ位に存在してもよい。しかしカルボキシレート
基がメタ位にある場合が選択性は特に増大されることが
判明し、カルボキシレート基がメタ位に存在する場合の
式Ｉの化合物が本発明のこの態様の有利な種類である。
の生物種に対する増大された選択性を有する。環Ａのカ
ルボキシレート基はアミノ架倒基に関してオルト、メタ
またパラ位に存在してもよい。しかしカルボキシレート
基がメタ位にある場合が選択性は特に増大されることが
判明し、カルボキシレート基がメタ位に存在する場合の
式Ｉの化合物が本発明のこの態様の有利な種類である。
式１の化合物は、アニリンスルホネートの代りにアニリ
ンカルボキシレート金使用するほかは成因の化合物を製
造するための任意の公知方法によって製造することがで
きる。
ンカルボキシレート金使用するほかは成因の化合物を製
造するための任意の公知方法によって製造することがで
きる。
本発明の第二査目の態様によれば、式：〔式中Ｘは墳Ｂ
と基Ｒとの間の少なくとも３個の共有単結合を提供する
非発色性架橋基であり；Ｒは反応性ハロダン原子を有す
る基であり；各Ａは独立的にＨまたは酸性基であり；こ
の際条件として該分子が水溶化されるために十分な酸性
基を有しかつＸが壌ＢとＲとの間の共有結合を唯３個の
み与える場合には、Ｒはクロロジフルオロピリミジル基
ではない〕で示される新規化合物が提供される。
と基Ｒとの間の少なくとも３個の共有単結合を提供する
非発色性架橋基であり；Ｒは反応性ハロダン原子を有す
る基であり；各Ａは独立的にＨまたは酸性基であり；こ
の際条件として該分子が水溶化されるために十分な酸性
基を有しかつＸが壌ＢとＲとの間の共有結合を唯３個の
み与える場合には、Ｒはクロロジフルオロピリミジル基
ではない〕で示される新規化合物が提供される。
Ｘによって表わされる架橋基は好ましくは囲碁を基Ｒに
結合する木端アミン基１個、さらに好ましくは架橋基を
基ＲおよびｉＢに結合する末端アミノ基２個を有する。
結合する木端アミン基１個、さらに好ましくは架橋基を
基ＲおよびｉＢに結合する末端アミノ基２個を有する。
すなわ゛らＸの好ましい形は、
−Ｙ−ＮＨ−および −ＮＨ−Ｙ−ＮＨ−〔式中Ｙは場
合により置決された炭化水素基である〕のように表わす
ことができる。基Ｙは脂肪族または芳香族でありかつ染
料中に代表的に存在する基、゛すなわ’５Ｃ工〜４−ア
ルキル、Ｃ工〜４−アルコキシ、ハロ、特にクロロ、ニ
トロ、シアノおよび酸性基、例えばスルホおよびカルボ
キシルによってｔｊｔ換されていてよい。基Ｙは好まし
くは次のものから消択される： （＋） ｃ２〜８−アルキレン、特に式：％式％） ｃ式中ｎは２〜８〕で示されるポリメチレン、すなわち
エチレン、プロピレンまたはへキサメチレン； （１１） アリーレン、すなわちフェニレン又は２−
スルホフエニ−１，４−イレン： （ｌｌｉ） アラルキレン、すなわち４−メチレンツ
ニー１−イルまたは４−（エチー２−イレン）−フエニ
ー１−イル；および １Ｉｖ）アラルキレン、すなわジ４−（エテニー２−イ
レン）−５−スルホーフエニーｉ−イル。
合により置決された炭化水素基である〕のように表わす
ことができる。基Ｙは脂肪族または芳香族でありかつ染
料中に代表的に存在する基、゛すなわ’５Ｃ工〜４−ア
ルキル、Ｃ工〜４−アルコキシ、ハロ、特にクロロ、ニ
トロ、シアノおよび酸性基、例えばスルホおよびカルボ
キシルによってｔｊｔ換されていてよい。基Ｙは好まし
くは次のものから消択される： （＋） ｃ２〜８−アルキレン、特に式：％式％） ｃ式中ｎは２〜８〕で示されるポリメチレン、すなわち
エチレン、プロピレンまたはへキサメチレン； （１１） アリーレン、すなわちフェニレン又は２−
スルホフエニ−１，４−イレン： （ｌｌｉ） アラルキレン、すなわち４−メチレンツ
ニー１−イルまたは４−（エチー２−イレン）−フエニ
ー１−イル；および １Ｉｖ）アラルキレン、すなわジ４−（エテニー２−イ
レン）−５−スルホーフエニーｉ−イル。
基Ｙが共有二重結合を含まないのが有利である。
このような架橋基は、ＡＱ核が、市販のセルロース反応
性染料の場合のように墳Ｂが単純アミノ基−ＮＨ−によ
って基Ｒに結合されている場合よりも基Ｒに対してより
自由に動くことを許す。
性染料の場合のように墳Ｂが単純アミノ基−ＮＨ−によ
って基Ｒに結合されている場合よりも基Ｒに対してより
自由に動くことを許す。
特に有利には、架橋基Ｘが一般式：
％式％
〔式中Ωは２〜８である〕で示されるアルキレンシアミ
ノ基、特にエチレン−１，２−ジアミノである。
ノ基、特にエチレン−１，２−ジアミノである。
有利には、架橋基Ｘは壇Ｂと基Ｒとの間の共有単結合最
高１０個、より好ましくは４〜１０個、％に好ましくは
４〜３個与える。
高１０個、より好ましくは４〜１０個、％に好ましくは
４〜３個与える。
活性ハロゲンを有する基Ｒは、有オＤＣはセルロース反
応染料をセルロース繊維材料に定着するために使用され
る種類のセルロース反応基である。このような基の例は
ジクロロピリミジニル、シフ曳オロビリミジニル、トリ
ク四ロビリ・ミシニル、５−クロロジフルオロピリミジ
ニル、５−シアノジクロロピリミジニルおよびジクロロ
トリアジニルであり、竹に有利な反応基は式：〔式中２
は場合によって置換されたアミノ基である〕で示される
モノクロキトリアジン基である。２によって表わされる
場合によりｔ換されたアミン基は好ましくはアリールア
ミノ基であり、四基中アリール基打°場合により置換さ
れた単文は双環式、好ましくはフェニルまたはナフチル
のよ５な炭素環状基でありかつ少な（とも１個、好まし
くは１〜３個の水溶化酸性基、すなわちスルホネートま
たはカルボキシレート、有利には後者である。また、酸
性基がアミン結合Ｋ［してメタ位にあるのも有＋Ｕであ
る。アリールアミノ基の他の置換分は、好業しくはへロ
デン、０１〜４−アルキル、０１〜４−フルコキシ、Ｏ
ＨおよびＮＯ２から選択される。％ＩｃＺが６−カルボ
キシフェニルアミノであるのが有利である。
応染料をセルロース繊維材料に定着するために使用され
る種類のセルロース反応基である。このような基の例は
ジクロロピリミジニル、シフ曳オロビリミジニル、トリ
ク四ロビリ・ミシニル、５−クロロジフルオロピリミジ
ニル、５−シアノジクロロピリミジニルおよびジクロロ
トリアジニルであり、竹に有利な反応基は式：〔式中２
は場合によって置換されたアミノ基である〕で示される
モノクロキトリアジン基である。２によって表わされる
場合によりｔ換されたアミン基は好ましくはアリールア
ミノ基であり、四基中アリール基打°場合により置換さ
れた単文は双環式、好ましくはフェニルまたはナフチル
のよ５な炭素環状基でありかつ少な（とも１個、好まし
くは１〜３個の水溶化酸性基、すなわちスルホネートま
たはカルボキシレート、有利には後者である。また、酸
性基がアミン結合Ｋ［してメタ位にあるのも有＋Ｕであ
る。アリールアミノ基の他の置換分は、好業しくはへロ
デン、０１〜４−アルキル、０１〜４−フルコキシ、Ｏ
ＨおよびＮＯ２から選択される。％ＩｃＺが６−カルボ
キシフェニルアミノであるのが有利である。
Ａによって表わされる酸性基は水浴性を与えることかＪ
／ｉ釆されていて、好ましくはスルホネート基またはカ
ルボキシレート基でア１７、ＡＱ核が２位にこのような
基１個を有するのが有利である。したがって全分子を水
浴性にするためには、３ＪＢ上又はＲ中の任意の酸性基
を包含して十分な酸性基が存在しなければならない。式
…の化合物は好ましくは酸性基１〜４個、さらに好まし
くは２又は３個を有する。
／ｉ釆されていて、好ましくはスルホネート基またはカ
ルボキシレート基でア１７、ＡＱ核が２位にこのような
基１個を有するのが有利である。したがって全分子を水
浴性にするためには、３ＪＢ上又はＲ中の任意の酸性基
を包含して十分な酸性基が存在しなければならない。式
…の化合物は好ましくは酸性基１〜４個、さらに好まし
くは２又は３個を有する。
弐…による特に好ましい化合物は次のもので ゛ある：
Ｘが−ＮＨ−Ｙ−ＮＨ−ま／＋は−Ｙ−ＮＨ−である場
合の弐Ｂの化合物は、１−アミノ−４−プロモーＡＱＮ
例えば１−アミノ−２−スルホ−４−プロモーＡＱを、
式： 〔式中Ｙは前記のものを表わし、ｎは０又は１である〕
で示される化合物、例えば５−アミノ−２−（アセチル
アミノメチル）ベンゼンスルホン酸または５−アミノ−
２−（２−７セチルアミノーエチルアミン）ベンゼンス
ルホン酸ト銅触媒の存在で縮合させ、生じる付加物から
加水分解によって一〇〇〇Ｈ３を除去し、塩化シアヌル
を逐次同付加物およびアンモニアまたはアミン、特にア
リールアミン、例えば６−アミノ安息香酸と縮合させる
ことＫよって製造することができる。
合の弐Ｂの化合物は、１−アミノ−４−プロモーＡＱＮ
例えば１−アミノ−２−スルホ−４−プロモーＡＱを、
式： 〔式中Ｙは前記のものを表わし、ｎは０又は１である〕
で示される化合物、例えば５−アミノ−２−（アセチル
アミノメチル）ベンゼンスルホン酸または５−アミノ−
２−（２−７セチルアミノーエチルアミン）ベンゼンス
ルホン酸ト銅触媒の存在で縮合させ、生じる付加物から
加水分解によって一〇〇〇Ｈ３を除去し、塩化シアヌル
を逐次同付加物およびアンモニアまたはアミン、特にア
リールアミン、例えば６−アミノ安息香酸と縮合させる
ことＫよって製造することができる。
式１． ＵおよびＶで示される化合物は、特に良好な
蛋白性親和性を有しており、従って前記のような蛋白質
吸着剤および沈殿剤の製造に適合している。
蛋白性親和性を有しており、従って前記のような蛋白質
吸着剤および沈殿剤の製造に適合している。
本発明の第三査目の態様によれば、式１または弐■で示
される化合物の付加物および前記化合物中の反応性塩素
原子と反応ｏＴ能な基を有する基質から成る吸着剤が提
供される。基質は大体において水に不溶の固体支持体ま
たは水浴性ポリマーであってよい。固体支持体の例とし
ては、アクリル酸ポリマーおよびコポリマー、シリカ、
二酸化チタン、アルミナ、ヒドロキシアルキルメタクリ
レート、多孔質ガラスが挙げら”れるが、有利な水不溶
性固体キャリヤーは、式Ｉまたは式Ｈの化合物がセルロ
ース反応基によってそれに結合されうる多数のヒドロキ
シル基を有する高分子基質である。特に適当な基質は炭
水化物および改質炭水化物である。特に通油な炭水化物
基質の例は、アガロース、架橋アガロース、デキストロ
ース、デキストランスおよびそれらの改質変形であり、
例えば°セファロース（５ｅｐｈａｘｒｏｓ８）’ ”
セファデクス（Ｓｓｐｈａ−ｄｓｘ）” （’セファロ
ース１およびセファデクスほファルマシア・ファイン・
ケミカルス（Ｐｈａｒｍａｃｉａ ＦｉｎｅＣｈｅｍｉ
ｃａｌｓ ）社のＦ８傑である〕として侍られかつ英国
ｔｆｆ許第１，５４０．１６５号〔カッター（ｃｕｔｔ
８ｒ）］に記載されているよ５なものである。他の扁分
子基質はポリアミドおよびポリアクリルアミドである。
される化合物の付加物および前記化合物中の反応性塩素
原子と反応ｏＴ能な基を有する基質から成る吸着剤が提
供される。基質は大体において水に不溶の固体支持体ま
たは水浴性ポリマーであってよい。固体支持体の例とし
ては、アクリル酸ポリマーおよびコポリマー、シリカ、
二酸化チタン、アルミナ、ヒドロキシアルキルメタクリ
レート、多孔質ガラスが挙げら”れるが、有利な水不溶
性固体キャリヤーは、式Ｉまたは式Ｈの化合物がセルロ
ース反応基によってそれに結合されうる多数のヒドロキ
シル基を有する高分子基質である。特に適当な基質は炭
水化物および改質炭水化物である。特に通油な炭水化物
基質の例は、アガロース、架橋アガロース、デキストロ
ース、デキストランスおよびそれらの改質変形であり、
例えば°セファロース（５ｅｐｈａｘｒｏｓ８）’ ”
セファデクス（Ｓｓｐｈａ−ｄｓｘ）” （’セファロ
ース１およびセファデクスほファルマシア・ファイン・
ケミカルス（Ｐｈａｒｍａｃｉａ ＦｉｎｅＣｈｅｍｉ
ｃａｌｓ ）社のＦ８傑である〕として侍られかつ英国
ｔｆｆ許第１，５４０．１６５号〔カッター（ｃｕｔｔ
８ｒ）］に記載されているよ５なものである。他の扁分
子基質はポリアミドおよびポリアクリルアミドである。
特に有利な基ＪＨ７ガロースおよび架橋アガロースであ
る。
る。
固体支持体に結合された染料から成る吸着剤は、クロマ
トグラフィー分離用カラムまた膜分離フォーマット（ｆ
ｏｒｍａ ｔ）で行われる分離を許す膜の形であってよ
い。
トグラフィー分離用カラムまた膜分離フォーマット（ｆ
ｏｒｍａ ｔ）で行われる分離を許す膜の形であってよ
い。
式Ｉまたは式Ｈの染料と反応することのできる水溶性ポ
リマーの例としては、デキストランまたはポリエチレン
グリコールが挙げられ、かつ反応生成物は水性二相分配
法で蛋白責ｖＤ實を分離するために使用される。
リマーの例としては、デキストランまたはポリエチレン
グリコールが挙げられ、かつ反応生成物は水性二相分配
法で蛋白責ｖＤ實を分離するために使用される。
本発明の第三番目の態様により開示された吸着剤は、標
準的方法、例えば弐■またはＨの化合物を、酸結合剤、
すなわ５アルカリ金属水酸化物または炭酸塩、例えばＮ
ａＯＨまたはＮａ２ＣＯ３の存在で炭水化物基質と反応
させることによって製造してもよい。このような吸着剤
および同吸看剤を含有するクロマトグラフィー用カラム
の製造方法は、十分に記録されている。飼えば国際％ｎ
公開第７９００５基１号および米国特許第４，０１６，
１４９号を参照されたい。
準的方法、例えば弐■またはＨの化合物を、酸結合剤、
すなわ５アルカリ金属水酸化物または炭酸塩、例えばＮ
ａＯＨまたはＮａ２ＣＯ３の存在で炭水化物基質と反応
させることによって製造してもよい。このような吸着剤
および同吸看剤を含有するクロマトグラフィー用カラム
の製造方法は、十分に記録されている。飼えば国際％ｎ
公開第７９００５基１号および米国特許第４，０１６，
１４９号を参照されたい。
本発明の第四番目の態様によれば、式１蒼たは式■のＡ
Ｑ化合物の２種以上の分子の付加物と、ＡＱ化合物中に
存在する反応性へロケ９ンと反応することのできる２個
以上の基を有する多官能価結合化合物とから成る蛋白質
沈殿剤が提供される。このような付加物は蛋白質を凝集
によって沈殿させるのに使用することができ、同付加物
は蛋白質分子の間の橘として作用する。
Ｑ化合物の２種以上の分子の付加物と、ＡＱ化合物中に
存在する反応性へロケ９ンと反応することのできる２個
以上の基を有する多官能価結合化合物とから成る蛋白質
沈殿剤が提供される。このような付加物は蛋白質を凝集
によって沈殿させるのに使用することができ、同付加物
は蛋白質分子の間の橘として作用する。
同付加物は２種以上の染料分子を多官能価結合化合物と
反応させることによって形成することができる。二官能
価結合化合物の例は、アルキレンジアミンすなわ）エチ
レンシアミン、プロピレンジアミン、テトラメチレンジ
アミンおよびヘキサメチレンジアミンであって、これら
は式ＩよたはＨの化合物と縮合され、同時に塩化水素の
要素が除去される。高官能価を有する結合化合物の例は
、式ＩまたｌＩ：ｌ：１１の５８４以上の分子を一緒に
結合することのできるポリアミノアルカン、すなわちジ
エチレントリアミン、トリエチレンテトラミンおよびテ
トラエチレンペンタミンである。
反応させることによって形成することができる。二官能
価結合化合物の例は、アルキレンジアミンすなわ）エチ
レンシアミン、プロピレンジアミン、テトラメチレンジ
アミンおよびヘキサメチレンジアミンであって、これら
は式ＩよたはＨの化合物と縮合され、同時に塩化水素の
要素が除去される。高官能価を有する結合化合物の例は
、式ＩまたｌＩ：ｌ：１１の５８４以上の分子を一緒に
結合することのできるポリアミノアルカン、すなわちジ
エチレントリアミン、トリエチレンテトラミンおよびテ
トラエチレンペンタミンである。
弐■のＡＱ紡導体から得られる前記のような吸着剤およ
び沈殿剤は、弐Ａの化合物と比べると、成る種の生物学
的分子、すなわち蛋白質および酵素、特に次のような酵
素：ニコチンアミドヌクレオチに依存オキシドレダクタ
ーゼ；ホスホキナーゼ；補酵素Ａ依存酵素；ヒドラーゼ
；アセチル−、ホスホリボシル−およびアミノ−トラン
スフェラーゼ； ＲＮＡおよびＤＮＡヌクレアーゼおよ
びホリメラーゼ；制限エンドヌクレアーセ゛；シンテタ
ーゼ；ヒ１０キシラーゼ、血清アルブミンのような多数
の蛋白質、凝固および補足因子、フィトクロム、リボ蛋
白質およびインターフェロンに対する強めて強化された
結合効率を有し、したがって特に、蛋白質の混合物から
前記種類のものを分離するために極めて通合している。
び沈殿剤は、弐Ａの化合物と比べると、成る種の生物学
的分子、すなわち蛋白質および酵素、特に次のような酵
素：ニコチンアミドヌクレオチに依存オキシドレダクタ
ーゼ；ホスホキナーゼ；補酵素Ａ依存酵素；ヒドラーゼ
；アセチル−、ホスホリボシル−およびアミノ−トラン
スフェラーゼ； ＲＮＡおよびＤＮＡヌクレアーゼおよ
びホリメラーゼ；制限エンドヌクレアーセ゛；シンテタ
ーゼ；ヒ１０キシラーゼ、血清アルブミンのような多数
の蛋白質、凝固および補足因子、フィトクロム、リボ蛋
白質およびインターフェロンに対する強めて強化された
結合効率を有し、したがって特に、蛋白質の混合物から
前記種類のものを分離するために極めて通合している。
本発明による吸着剤および沈殿剤が特に結合するのに通
分している酵素および蛋白質の例くアルコールデヒドロ
デナーゼくウマの肝臓）、ラクトースデヒドロデナーゼ
（ウサギの筋肉）、血清アルブミン（ヒトの血液）およ
びキモトリプシン（ウシの膵臓）である。
分している酵素および蛋白質の例くアルコールデヒドロ
デナーゼくウマの肝臓）、ラクトースデヒドロデナーゼ
（ウサギの筋肉）、血清アルブミン（ヒトの血液）およ
びキモトリプシン（ウシの膵臓）である。
次に本発明を実施例によって詳述する力へ例中すべての
「部」および「％」は、他に指示がなければＦ重景部Ｊ
および「Ｎ惜％」である。
「部」および「％」は、他に指示がなければＦ重景部Ｊ
および「Ｎ惜％」である。
実施例
例 １
水２００ｙ中の１−アミノ−４−（４−アミノアニリノ
）−アントラキノン−２＋ ６’−”：／”スルホン酸
のＡナトリウム塩１３．５＆の痔液を５００未満に冷却
し、水１００ｇ中の塩化シアヌル４．６５ ｇの水冷却
懸濁液中に加えた。この添加０問およびその後の１時間
の間、必要なだけ２ Ｎ Ｎａ２ＣＯ３を加えることに
よってｐＨｋ ６〜７に保ちかつ温度を５８Ｃ未満にし
た。次にこの靜液に６−アミノ安５す、香酸６．８ｇを
加え温度を４０℃に高めかつ４０℃で２時間保）、その
間２ＮＮ ａ ２ ＣＯ３を必要なだけ加えて６．５〜
７の−を保った。次にこのＭ液にＮａＣｌ 、５０ ｇ
を加えかつｇ分物を５℃未満に冷却した。
）−アントラキノン−２＋ ６’−”：／”スルホン酸
のＡナトリウム塩１３．５＆の痔液を５００未満に冷却
し、水１００ｇ中の塩化シアヌル４．６５ ｇの水冷却
懸濁液中に加えた。この添加０問およびその後の１時間
の間、必要なだけ２ Ｎ Ｎａ２ＣＯ３を加えることに
よってｐＨｋ ６〜７に保ちかつ温度を５８Ｃ未満にし
た。次にこの靜液に６−アミノ安５す、香酸６．８ｇを
加え温度を４０℃に高めかつ４０℃で２時間保）、その
間２ＮＮ ａ ２ ＣＯ３を必要なだけ加えて６．５〜
７の−を保った。次にこのＭ液にＮａＣｌ 、５０ ｇ
を加えかつｇ分物を５℃未満に冷却した。
１−アミノ−２−スルホ−４−（６−スルホ−４−〔２
−クロロ−４−（３−カルボキシアニリノンー７．３．
５１リアジン−６−イル−アミノコアニリノ）−ＡＱを
濾取しかつ真空で乾燥した。
−クロロ−４−（３−カルボキシアニリノンー７．３．
５１リアジン−６−イル−アミノコアニリノ）−ＡＱを
濾取しかつ真空で乾燥した。
例 ２
水１００ｇ中の無水Ｎａ２ＣＯ３５０ｇの溶液に、１−
アミノ−４−プロモーアントラキノン−２−スルホン酸
および４−（２−アセチルアミノエチルアミノ）アニリ
ン−３−スルホン酸７．７ｇを加えた。この混合物を攪
拌し、ＣｕＳＯ４・５Ｈ２０６，８ｙを加え、次いで亜
鉛ダスト１．６を加えた。
アミノ−４−プロモーアントラキノン−２−スルホン酸
および４−（２−アセチルアミノエチルアミノ）アニリ
ン−３−スルホン酸７．７ｇを加えた。この混合物を攪
拌し、ＣｕＳＯ４・５Ｈ２０６，８ｙを加え、次いで亜
鉛ダスト１．６を加えた。
混合物を４５〜５０°Ｃで２６時間攪拌し、次いで水で
希釈して４００Ｍの容積は（６５チＨ（Ｊで−７に調部
した。次に混合物を９５°Ｃに加熱し、熱時に濾過し、
溶液から實塩１２０．！ｉｉ’を加えて１−アミノ−４
−（４−（２−アセチルアミノエチルアミノ〕−６−ス
ルホアニリノ）−アントラキノン−２−スルホン酸のへ
ナトリウム塩を沈殿させた。
希釈して４００Ｍの容積は（６５チＨ（Ｊで−７に調部
した。次に混合物を９５°Ｃに加熱し、熱時に濾過し、
溶液から實塩１２０．！ｉｉ’を加えて１−アミノ−４
−（４−（２−アセチルアミノエチルアミノ〕−６−ス
ルホアニリノ）−アントラキノン−２−スルホン酸のへ
ナトリウム塩を沈殿させた。
前記沈殿物を水５００ｇに溶かし、６５％ＨＣ１ｔｌ−
加えてｐｆ−１を０．５に下げた。この浴液を９５℃で
２時間攪拌し、１−アミノ−４−（４−〔２−アミノ−
エチルアミノコ−６−スルホアニリノ）−アントラキノ
ン−２−スルホン酸のモノナトリウム塩の沈殿を濾取し
、アセトンｉ ｏｏｏ、ｐで洗浄しかつ５０℃で乾燥し
た。
加えてｐｆ−１を０．５に下げた。この浴液を９５℃で
２時間攪拌し、１−アミノ−４−（４−〔２−アミノ−
エチルアミノコ−６−スルホアニリノ）−アントラキノ
ン−２−スルホン酸のモノナトリウム塩の沈殿を濾取し
、アセトンｉ ｏｏｏ、ｐで洗浄しかつ５０℃で乾燥し
た。
アセトン２０ｇ中の塩化シアヌル２．４Ｉの溶液を、５
°Ｃ未満に冷却した水１００ｇに加え、水１００９甲の
６−アミノ女息査＊ １．６８ 、！７の中和溶液を１
０分間愁濁液中に加え、この添加中ずつとｐ）Ｉｔ−６
〜７に保ち、次に６０分間同一を保った。１−アミノ−
４−（４−（２−アミノエチルアミノコ−６−スルホア
ニリノ）−アントラキノン−２−スルホン酸のニナトリ
ウム塩７ｇの中性離液を加え、混合物を６時間４０℃で
加熱し、この時間中必要なだけＩ Ｍ ＮａＯＨを加え
て−を８〜９に保った。この溶液にＮａｃｉ ４０ ｇ
を加え、沈殿物をｇ取し、アセトン１０００ｇで洗浄し
かつ真全て乾燥した。水中の青色溶液ヲ与える暗色粉末
として、１−アミノ−４（４−１：２−（２−クロル−
４−［３−カルボキシアニリノ］−８−）リアジン−６
−イルアミノ）−エチルアミンツー６−スルホアニリノ
）−アントラキノン−２−スルホン酸の三ナトリウム塩
が得られた。
°Ｃ未満に冷却した水１００ｇに加え、水１００９甲の
６−アミノ女息査＊ １．６８ 、！７の中和溶液を１
０分間愁濁液中に加え、この添加中ずつとｐ）Ｉｔ−６
〜７に保ち、次に６０分間同一を保った。１−アミノ−
４−（４−（２−アミノエチルアミノコ−６−スルホア
ニリノ）−アントラキノン−２−スルホン酸のニナトリ
ウム塩７ｇの中性離液を加え、混合物を６時間４０℃で
加熱し、この時間中必要なだけＩ Ｍ ＮａＯＨを加え
て−を８〜９に保った。この溶液にＮａｃｉ ４０ ｇ
を加え、沈殿物をｇ取し、アセトン１０００ｇで洗浄し
かつ真全て乾燥した。水中の青色溶液ヲ与える暗色粉末
として、１−アミノ−４（４−１：２−（２−クロル−
４−［３−カルボキシアニリノ］−８−）リアジン−６
−イルアミノ）−エチルアミンツー６−スルホアニリノ
）−アントラキノン−２−スルホン酸の三ナトリウム塩
が得られた。
例 ６
同様にして、例２で使用した４−（２−アセチルアミン
エチルアミン）アニリン−６−スルホン酸を消量の４−
（２−アセチルアミノヘキシルアミノ）アニリン−６−
スルホン酸と代えて１−アミノ−４−＜４−Ｃ２−（２
−クロロ−４−（３−カルボキシアニリノ］−８−）リ
アジン−６−イルアミノ）−へキシルアミノコ−６−ス
ルホアニリノ）−アントラキノン−２−スルホン酸の三
ナトリウム塩を製造した。
エチルアミン）アニリン−６−スルホン酸を消量の４−
（２−アセチルアミノヘキシルアミノ）アニリン−６−
スルホン酸と代えて１−アミノ−４−＜４−Ｃ２−（２
−クロロ−４−（３−カルボキシアニリノ］−８−）リ
アジン−６−イルアミノ）−へキシルアミノコ−６−ス
ルホアニリノ）−アントラキノン−２−スルホン酸の三
ナトリウム塩を製造した。
例 ４
例２で使用した４−（２−アセチルアミンエチルアミノ
）アニリン−６−スルホン版を描童の４−アミノ−６′
−アセチルアミノ−５′−力ルビキシジフェニルアミン
−２−スルホ２版ニ代えて、同様な染料として、１−ア
ミノ−４−（４−（ｉ−（２−クロロ−４−〔６−カル
ボキシアニリノ）−３−）リアジン−６−イルアミノ）
−５−カルボキシフェニルアミノコ−５−スルホフェニ
ルアミノ）−アントラキノン−２−スルホン酸の三ナト
リウム塩を製造した。
）アニリン−６−スルホン版を描童の４−アミノ−６′
−アセチルアミノ−５′−力ルビキシジフェニルアミン
−２−スルホ２版ニ代えて、同様な染料として、１−ア
ミノ−４−（４−（ｉ−（２−クロロ−４−〔６−カル
ボキシアニリノ）−３−）リアジン−６−イルアミノ）
−５−カルボキシフェニルアミノコ−５−スルホフェニ
ルアミノ）−アントラキノン−２−スルホン酸の三ナト
リウム塩を製造した。
例 ５
水５００ｇ中の無水Ｎａ２ＣＯ３１００ｇの溶液に、１
−アミノ−４−プロモーアントラキノン−２−スルホン
酸のナトリウム塩４０ｇおよび４ 、基１− ジアミノ
ジフェニル−２、２’−ジスルホン酸２７２ｇを加えた
。この混合物を攪拌しかつＣｕＳＯ４・５Ｈ２０６−８
ｇを加え、次いで亜鉛ダス）１．６ｇを加えた。この混
合物を６時間６５℃で攪拌し、次に水１０［］Ｏｇを加
えて希釈し、９５°Ｃに加熱し、熱時に濾過し、濾液に
ＮａＣノ５ｏｏｙを加えた。５°Ｃ未満に冷却した後、
混合物を丹びａ！過して、沈殿した４、４′−ジアミノ
ジフェニル−２，２′−ジスルホン酸を除去し、謹液に
纒塩酸１００ｇを加えた。沈殿した１−アミノ−４−＜
４−Ｃ４−アミノ−２−スルホフェニルゴー５−スルホ
アニリノ）−アントラキノン−２−スルホン酸のニナト
リウム塩を濾取し、水２５０ｇＫ再溶解し、ＮａＣｌ３
［］ｇを加えて書沈殿させ、再び濾取しかつ５０’Ｃで
乾燥する。
−アミノ−４−プロモーアントラキノン−２−スルホン
酸のナトリウム塩４０ｇおよび４ 、基１− ジアミノ
ジフェニル−２、２’−ジスルホン酸２７２ｇを加えた
。この混合物を攪拌しかつＣｕＳＯ４・５Ｈ２０６−８
ｇを加え、次いで亜鉛ダス）１．６ｇを加えた。この混
合物を６時間６５℃で攪拌し、次に水１０［］Ｏｇを加
えて希釈し、９５°Ｃに加熱し、熱時に濾過し、濾液に
ＮａＣノ５ｏｏｙを加えた。５°Ｃ未満に冷却した後、
混合物を丹びａ！過して、沈殿した４、４′−ジアミノ
ジフェニル−２，２′−ジスルホン酸を除去し、謹液に
纒塩酸１００ｇを加えた。沈殿した１−アミノ−４−＜
４−Ｃ４−アミノ−２−スルホフェニルゴー５−スルホ
アニリノ）−アントラキノン−２−スルホン酸のニナト
リウム塩を濾取し、水２５０ｇＫ再溶解し、ＮａＣｌ３
［］ｇを加えて書沈殿させ、再び濾取しかつ５０’Ｃで
乾燥する。
１−アミノ−４−（４−［４−アミノ−２−スルホフェ
ニル］−５−スルホアニリノ）−アントラキノン−２−
スルホン酸のニナトリウム塩２２．７ 、Ｆを水４００
ｇ中に溶かして溶液を製造し、同浴液のｐｉ−１を７に
調節した。この溶液を５°Ｃに冷却しかつ塩化シアヌル
６．７ｇを加えた。
ニル］−５−スルホアニリノ）−アントラキノン−２−
スルホン酸のニナトリウム塩２２．７ 、Ｆを水４００
ｇ中に溶かして溶液を製造し、同浴液のｐｉ−１を７に
調節した。この溶液を５°Ｃに冷却しかつ塩化シアヌル
６．７ｇを加えた。
この混合物を５′Ｃ未桶で攪拌し、１ＭＮａＯＨ５５ｇ
を加えて鎧を４時間の間６〜７に保った。
を加えて鎧を４時間の間６〜７に保った。
この混合物に６−７ミノ安息査酸４．６ｇを加えた。次
に混合物のｍ度を４０℃に高め、４時間４０’Ｃに保）
、他方Ｉ Ｍ ＮａＯＨ７０ｇを加えてｐ）ｌを６〜７
に保った。この時間の終りに溶液にＮａｃｚ ７０ ｇ
を加えて生成物を沈殿させた。１−アミノ−４−（４−
（４−（２−クロロ−４−〔６−カルボキシアニリノ］
−８−）リアジン−６−イルアミノ）−２−スルホフェ
ニル〕−６−スルホアニリノ）−アントラキノン−２−
スルホン酸の四ナトリウム塩の沈殿を濾取しかつ５０℃
で乾燥した。
に混合物のｍ度を４０℃に高め、４時間４０’Ｃに保）
、他方Ｉ Ｍ ＮａＯＨ７０ｇを加えてｐ）ｌを６〜７
に保った。この時間の終りに溶液にＮａｃｚ ７０ ｇ
を加えて生成物を沈殿させた。１−アミノ−４−（４−
（４−（２−クロロ−４−〔６−カルボキシアニリノ］
−８−）リアジン−６−イルアミノ）−２−スルホフェ
ニル〕−６−スルホアニリノ）−アントラキノン−２−
スルホン酸の四ナトリウム塩の沈殿を濾取しかつ５０℃
で乾燥した。
さらに例４で使用した４、４′−ジアミノジフェニル−
２，２′−ジスルホン酸２７２ｙを、表１記献のシアミ
ンの当量と代えて、本発明の他の染料を同様にして製造
した。
２，２′−ジスルホン酸２７２ｙを、表１記献のシアミ
ンの当量と代えて、本発明の他の染料を同様にして製造
した。
表 １
例 ジアミン
７ ４．４’−ジアミノジフェニルメタン例 ９
４−アニリノ−１−アミノアントラキノン−２−スルホ
ン酸のナトリウム塩を９８％Ｈ２Ｓｏ。
ン酸のナトリウム塩を９８％Ｈ２Ｓｏ。
４５０ｇ中に溶かして溶液を製造し、この溶液にＮ−メ
チロールフタルイミド１７．７ｇを加えた。この溶液を
一晩中攪拌して氷１５００ｇ上に注ぎ、沈殿物を濾取し
た。この沈殿物を水２００ｇ中で再懸濁し、Ｐｌ″Ｉを
８に１！４節した後、ＮａＣＪ ４００ ｇを加え、沈
殿物を濾取した。
チロールフタルイミド１７．７ｇを加えた。この溶液を
一晩中攪拌して氷１５００ｇ上に注ぎ、沈殿物を濾取し
た。この沈殿物を水２００ｇ中で再懸濁し、Ｐｌ″Ｉを
８に１！４節した後、ＮａＣＪ ４００ ｇを加え、沈
殿物を濾取した。
同沈殿物を水１０００ｇとエタノール１０００ｇとの混
合物と一緒に攪拌し、ヒドラジン水和物１０ｇを加えた
。１時間の還流後にこの溶液を濾過し、濾液から蒸発に
よってエタノールを除去した。残留水Ｍ液にＮａ（ＪＩ
ＱＯｇを加え、１−アミノ−４−（４−アミノエチルア
ニリノ）−アントラキノン−２−スルホン酸のナトリウ
ム塩の沈Ｍ全濾取し、５０°Ｃで乾燥した。
合物と一緒に攪拌し、ヒドラジン水和物１０ｇを加えた
。１時間の還流後にこの溶液を濾過し、濾液から蒸発に
よってエタノールを除去した。残留水Ｍ液にＮａ（ＪＩ
ＱＯｇを加え、１−アミノ−４−（４−アミノエチルア
ニリノ）−アントラキノン−２−スルホン酸のナトリウ
ム塩の沈Ｍ全濾取し、５０°Ｃで乾燥した。
水２００ｙ中のメタニル版ナトリウム６．９ｇの水冷却
解液に１塩化シアヌル４．１−加えた。
解液に１塩化シアヌル４．１−加えた。
この混合物を６０分攪拌し、他方温度を５℃未満に保Ｔ
）、Ｉ Ｍ ＮａＯＨを加えて６〜７の−を保った。同
混合物に１−アミノ−４−（４−アミノメチルアニリノ
クーアントラキノン−２−スルホン酸のナトリウム塩８
．９ｇを加え、さらに水６００ｇを加えてこの懸濁液を
希釈した。次に同懸濁液ｆｊＩ：４０℃に加熱し、ｉ
Ｍ ＮａＯＨｆ必要なだけ加えて８〜９の−を保ちなが
ら前記温度で６時間以上保った。反応完了後Ｋ ＮａＣ
Ｊ！ ５０ｇを加え、１−アミノ−４−（４−［２−ク
ロロ−４−（５’−スルホアニリノ）−３−）リアシン
−６−イル−アミノメチルシーアニリノ）−アントラキ
ノン−２−スルホン酸のニナトリウム塩の沈ｌ！ｉを想
取し、乾燥した。
）、Ｉ Ｍ ＮａＯＨを加えて６〜７の−を保った。同
混合物に１−アミノ−４−（４−アミノメチルアニリノ
クーアントラキノン−２−スルホン酸のナトリウム塩８
．９ｇを加え、さらに水６００ｇを加えてこの懸濁液を
希釈した。次に同懸濁液ｆｊＩ：４０℃に加熱し、ｉ
Ｍ ＮａＯＨｆ必要なだけ加えて８〜９の−を保ちなが
ら前記温度で６時間以上保った。反応完了後Ｋ ＮａＣ
Ｊ！ ５０ｇを加え、１−アミノ−４−（４−［２−ク
ロロ−４−（５’−スルホアニリノ）−３−）リアシン
−６−イル−アミノメチルシーアニリノ）−アントラキ
ノン−２−スルホン酸のニナトリウム塩の沈ｌ！ｉを想
取し、乾燥した。
例１０
式ｌの壌Ａ上のＣ○ＯＨがそれぞれオルト（０）位、メ
タ（ｍ）位およびパラ（ｐ）位に存在する６偵の染料（
表２の（１）、（１１）および（耐）およびＣ０ＯＨ基
がＳｏ、Ｈ基によって！換されている６檀の同様な染料
（表２の（１ψ、（Ｖ）および（ｖｉ） ）を、ウマ肝
臓のアルコールデヒドロゲナーゼに対する結合親和性に
ついて評価した。評価方法は、染料（１）〜Ｑｖ）の中
から自該酵素に関してＣニレアクチブ・ブルー（Ｒｅａ
ｃｔｉｖｅ Ｂｌｕｅ ） ４ （ウマ肝臓アルコール
デヒドロゲナーゼを急速に失活する高反応性ジクロトリ
アジン染料）と競争させる場合、ＣＩニレアクチブブル
ー４による酵素失活率の減少を測定することから成る。
タ（ｍ）位およびパラ（ｐ）位に存在する６偵の染料（
表２の（１）、（１１）および（耐）およびＣ０ＯＨ基
がＳｏ、Ｈ基によって！換されている６檀の同様な染料
（表２の（１ψ、（Ｖ）および（ｖｉ） ）を、ウマ肝
臓のアルコールデヒドロゲナーゼに対する結合親和性に
ついて評価した。評価方法は、染料（１）〜Ｑｖ）の中
から自該酵素に関してＣニレアクチブ・ブルー（Ｒｅａ
ｃｔｉｖｅ Ｂｌｕｅ ） ４ （ウマ肝臓アルコール
デヒドロゲナーゼを急速に失活する高反応性ジクロトリ
アジン染料）と競争させる場合、ＣＩニレアクチブブル
ー４による酵素失活率の減少を測定することから成る。
観察された失活率の減少から〔酵素−染料〕結合体の解
離定数ＫＤヲ計算し、これらの値を表２に記載しである
。結果の比較から、各カルボキシレート類似染料（１）
、（１１）および（ｉｉｌ）に関して観察した比較的小
さい胚値は、これらの染料のそれぞれの結合親和性が顯
著であり、意外にも相当のスルホネート類似染料（１ｖ
）、Ｍおよび（ｖＯの結合親和性よりも高いことを示す
。
離定数ＫＤヲ計算し、これらの値を表２に記載しである
。結果の比較から、各カルボキシレート類似染料（１）
、（１１）および（ｉｉｌ）に関して観察した比較的小
さい胚値は、これらの染料のそれぞれの結合親和性が顯
著であり、意外にも相当のスルホネート類似染料（１ｖ
）、Ｍおよび（ｖＯの結合親和性よりも高いことを示す
。
表 ２
式ＩＫＤ
（１） υ−ＣＯＯＨ１１
（ＩＩ） ｍ−Ｃ０ＯＨ４
ｆｌｉｉｌ ｐ −Ｃ○０Ｈ６０（Ｉｖ）
ｏ−８Ｏ３Ｈ１４ （Ｖ） ｍ−５Ｏ３Ｈ１７ （ｖｌ） ｐ −Ｓ Ｏ３Ｈ９６表２に関して
は、化合物Ｏｖ）および化合物（Ｖ）および（ＶＤの混
合物が商業的に入手できかつ通常蛋白質分離用クロマト
グラフィーカラムの製造のために使用される。解離定数
の前記値は、このような目的に対してはＷＡ上のカルボ
キシレート賛換基を有する弐Ｉの化合物がはるかに逼し
ていることを示す。
ｏ−８Ｏ３Ｈ１４ （Ｖ） ｍ−５Ｏ３Ｈ１７ （ｖｌ） ｐ −Ｓ Ｏ３Ｈ９６表２に関して
は、化合物Ｏｖ）および化合物（Ｖ）および（ＶＤの混
合物が商業的に入手できかつ通常蛋白質分離用クロマト
グラフィーカラムの製造のために使用される。解離定数
の前記値は、このような目的に対してはＷＡ上のカルボ
キシレート賛換基を有する弐Ｉの化合物がはるかに逼し
ていることを示す。
例１１
ガラスミニカラム（Ｑ、５ Ｃｍ Ｘ １０ ’ＩＩ
） Ｋｓ式の壌Ａ上にｍ−Ｃ０ＯＨ基を有する化合物的
２μｍｏｌアガロース が常法によって結合された寓天の商標銘柄（セファロー
ス４Ｂ）１ｇ（湿＠宣ｔ）ｔ−詰めかつカラムベッドｔ
−−値７．５ヲ有するＨＨＰＥＢ ／ＮａＯＨ稜僑欣で
平衡させた。このカラムに、粗製つマ肝臓アルコールデ
ヒドロデナーゼのｍ液（酵素約６率位を含何する） ０
．２ ｇｔ−適用し、１０分後にカラムを平衡緩衝？ｌ
ｌ６ｇを用いて流加６ｏｇ・ｈ−１−■−２で洗浄した
。次Ｋｇｌｃ着されたウマ肝臓アルコールデヒドロゲナ
ーゼを、２５°Ｃで、０〜０．２ ｍＭの範囲の一次Ｎ
ＡＤＩ（勾配全Ｍする溶離剤２０ｇで溶離した。検定で
５倍のボＢ度を示す精製酵素が収率６４％で回収された
。
） Ｋｓ式の壌Ａ上にｍ−Ｃ０ＯＨ基を有する化合物的
２μｍｏｌアガロース が常法によって結合された寓天の商標銘柄（セファロー
ス４Ｂ）１ｇ（湿＠宣ｔ）ｔ−詰めかつカラムベッドｔ
−−値７．５ヲ有するＨＨＰＥＢ ／ＮａＯＨ稜僑欣で
平衡させた。このカラムに、粗製つマ肝臓アルコールデ
ヒドロデナーゼのｍ液（酵素約６率位を含何する） ０
．２ ｇｔ−適用し、１０分後にカラムを平衡緩衝？ｌ
ｌ６ｇを用いて流加６ｏｇ・ｈ−１−■−２で洗浄した
。次Ｋｇｌｃ着されたウマ肝臓アルコールデヒドロゲナ
ーゼを、２５°Ｃで、０〜０．２ ｍＭの範囲の一次Ｎ
ＡＤＩ（勾配全Ｍする溶離剤２０ｇで溶離した。検定で
５倍のボＢ度を示す精製酵素が収率６４％で回収された
。
例１２
式Ｖの化合物′ｆｒ：過剰の１．６−ジアミツヘキサン
と反応させて、トリアジン壇上の塩素原子が６−アミン
へキシルアミノ基によって置換された類似化合物を形成
させた。この類似化合物性で粘性化しである縄入の商標
銘柄（セファロース４Ｂ）に結合した。生じるデル（２
μＭ／ｙの染料礎度を有する）１ｇ（磯＠友りをガ２ス
ミニカ？ ム（０−５０−５ｃ ｉ ＤｃＩＩＩ） Ｋ
ｕメｆｃ。カラムベッドを剛直７．５を儒するＨＥＰＥ
Ｓ／ＮａＯＨ緩胃液を用いて平衡させた。このカラムに
藺東的に側枠なウマ肝臓アルコールデヒドロゲナーゼの
溶成（酵素約３単位を含有する）０．２．Ｖを適用し、
１０分後にカラムを平衡緩宵液６ｙを用いて流ｊｔ ３
Ｌｌ ｉ−ｈ−１−ｍ−にで洗浄した。次に吸着され
たウマ肝臓アルコールデヒドロゲナーゼを、２５℃で、
０〜０．２ ｍＭ （Ｄ Ｗｌ、 囲）−次ＮＡＤＨ勾
配を有する溶離剤２０ｇを用いて溶離した。
と反応させて、トリアジン壇上の塩素原子が６−アミン
へキシルアミノ基によって置換された類似化合物を形成
させた。この類似化合物性で粘性化しである縄入の商標
銘柄（セファロース４Ｂ）に結合した。生じるデル（２
μＭ／ｙの染料礎度を有する）１ｇ（磯＠友りをガ２ス
ミニカ？ ム（０−５０−５ｃ ｉ ＤｃＩＩＩ） Ｋ
ｕメｆｃ。カラムベッドを剛直７．５を儒するＨＥＰＥ
Ｓ／ＮａＯＨ緩胃液を用いて平衡させた。このカラムに
藺東的に側枠なウマ肝臓アルコールデヒドロゲナーゼの
溶成（酵素約３単位を含有する）０．２．Ｖを適用し、
１０分後にカラムを平衡緩宵液６ｙを用いて流ｊｔ ３
Ｌｌ ｉ−ｈ−１−ｍ−にで洗浄した。次に吸着され
たウマ肝臓アルコールデヒドロゲナーゼを、２５℃で、
０〜０．２ ｍＭ （Ｄ Ｗｌ、 囲）−次ＮＡＤＨ勾
配を有する溶離剤２０ｇを用いて溶離した。
この方法によって酵素は２つの明瞭なフラクションに分
割され、これらのフラクションは均質物質として再びク
ロマトグラフにかけた。両フラクション＃ ＥＥおよび
ＥＥ’イソｌ！１１索の混合物から成ることが判ったが
、それにもかかわらず著しく異なる＃素活性を有し、第
２フラクシヨンは第１フラクシヨンの＃素話性の約４倍
の活性と有していた。
割され、これらのフラクションは均質物質として再びク
ロマトグラフにかけた。両フラクション＃ ＥＥおよび
ＥＥ’イソｌ！１１索の混合物から成ることが判ったが
、それにもかかわらず著しく異なる＃素活性を有し、第
２フラクシヨンは第１フラクシヨンの＃素話性の約４倍
の活性と有していた。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中Ｘは、環ＢとＲとの間の少なくとも ３個の共有単結合を与える非発色性架橋基であり； Ｒは反応性ハロゲン原子を有する基であり；各Ａは独立
的にＨまたは酸性基であり；但しこの際該分子が水溶化
されるのに十分な酸性基を有しかつＸが環Ｂと基Ｒとの
間の共有結合を３個しか与えない場合には、Ｒはクロロ
ジフルオロピリミジル基ではない〕で示される化合物。 ２、Ｘが−Ｙ−ＮＨ−または−ＮＨ−Ｙ−ＮＨ−（式中
Ｙは場合により置換された炭化水素基である）である特
許請求の範囲第１項記載の化合物。 ３、ＹがＣ＿２＿〜＿８−アルキレン、モノ−またはビ
ーホモ環状アリーレン、モノ環状アリーレン−Ｃ＿１＿
〜＿４−アルキレンおよびモノ環状アリーレン−Ｃ＿１
＿〜＿４−アルケニレンから選択される特許請求の範囲
第２項記載の化合物。 ４、Ｘがエチレン−１，２−ジアミノである特許請求の
範囲第１項記載の化合物。 ５、Ｒがジクロロピリミジニル、ジフルオロピリミジニ
ル、トリクロロピリミジニル、５−クロロジフルオロピ
リミジニル、５−シアノジクロロピリミジニル、ジクロ
ロトリアジニルおよび式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中Ｚは場合により置換されたアミノ基である〕で示
されるモノクロロトリアジニルから選択される特許請求
の範囲第１項記載の化合物。 ６、Ｚがカルボキシレート基またはスルホネート基１〜
３個を有するフェニル基またはナフチル基である特許請
求の範囲第５項記載の化合物。 ７、Ｚが３−カルボキシフェニルアミノである特許請求
の範囲第６項記載の化合物。 ８、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ で示される特許請求の範囲第１項記載の化合物。 ９、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ で示される特許請求の範囲第１項記載の化合物。 １０、環Ａ上のカルボキシレート基がアミノ架橋基に関
してメタ位に存在する特許請求の範囲第９項記載の化合
物。 １１、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中Ｘは、環Ｂと基Ｒとの間の少なくとも３個の共有
単結合を与える非発色性架橋基であり；Ｒは反応性ハロ
ゲン原子を有する基であり；各Ａは独立的にＨまたは酸
性基であり；但しこの際該分子が水溶化されるのに十分
な酸性基を有しかつＸが環Ｂと基Ｒとの間の共有結合を
３個しか与えない場合には、Ｒはクロロジフルオロピリ
ミジル基ではない〕で示される化合物と、同化合物中に
存在する反応性ハロゲンと反応可能な基を有する基質と
の付加物から成る蛋白質吸着剤。 １２、基質が水不溶性固体支持体または水浴性ポリマー
である特許請求の範囲第１１項記載の吸着剤。 １３、支持体が炭水化物である特許請求の範囲第１２項
記載の吸着剤。 １４、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中環Ａ上のカルボキシレート基はアミノ架橋基に関
してメタ位に存在する〕で示される化合物と、アガロー
スのポリマーまたはコポリマーとの付加物から成る特許
請求の範囲第１１項記載の吸着剤。 １５、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中Ｘは、環Ｂと基Ｒとの間の少なくとも３個の共有
単結合を与える非発色性架橋基であり；Ｒは反応性ハロ
ゲン原子を有する基であり；各Ａは独立的にＨまたは酸
性基であり；但しこの際該分子が水溶化されるのに十分
な酸性基を有しかつＸが環Ｂと基Ｒとの間の共有結合を
３個しか与えない場合には、Ｒはクロロジフルオロピリ
ミジル基ではない〕で示される化合物の２種以上の分子
と、前記化合物中に存在する反応性ハロゲンと反応する
少なくとも２個の基を有する多官能価結合化合物との付
加物から成る蛋白質沈殿剤。 １６、多官能価結合化合物がエチレンジアミン、プロピ
レンジアミン、テトラメチレンジアミン、ジエチレント
リアミン、トリエチレンテトラミンおよびテトラエチレ
ンペンタミンから選択される特許請求の範囲第１４項記
載の蛋白質沈殿剤。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB8517779 | 1985-07-15 | ||
| GB858517779A GB8517779D0 (en) | 1985-07-15 | 1985-07-15 | Anthraquinone derivatives |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6226253A true JPS6226253A (ja) | 1987-02-04 |
Family
ID=10582290
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61164870A Pending JPS6226253A (ja) | 1985-07-15 | 1986-07-15 | 新規アントラキノン誘導体、蛋白質吸着剤および蛋白質沈殿剤 |
Country Status (6)
| Country | Link |
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| US (1) | US4864018A (ja) |
| EP (1) | EP0209284A3 (ja) |
| JP (1) | JPS6226253A (ja) |
| DK (1) | DK336786A (ja) |
| GB (1) | GB8517779D0 (ja) |
| IL (1) | IL79295A0 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0383477U (ja) * | 1989-12-11 | 1991-08-26 | ||
| JP2008539280A (ja) * | 2005-04-08 | 2008-11-13 | チバ ホールディング インコーポレーテッド | 生物学的材料を分離するためのアントラキノン染料リガンドを含む吸着剤 |
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| CN112852185B (zh) * | 2020-12-31 | 2022-08-05 | 湖北丽源科技股份有限公司 | 高固色率兰色含氟活性染料及其制备方法 |
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| DE1100587B (de) * | 1957-10-12 | 1961-03-02 | Basf Ag | Verfahren zum Faerben und Bedrucken von Gebilden aus nativer und regenerierter Cellulose |
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| FR1334122A (fr) * | 1962-09-19 | 1963-08-02 | Bayer Ag | Colorants de la série de l'anthraquinone, leur procédé de préparation et leur application |
| DE1644617A1 (de) * | 1967-06-02 | 1970-12-17 | Bayer Ag | Anthrachinon-Reaktivfarbstoffe |
| DE2114158A1 (de) * | 1971-03-24 | 1972-09-28 | Bayer Ag | Reaktivfarbstoffe |
| US4016149A (en) * | 1973-09-10 | 1977-04-05 | Research Corporation | Selective removal of albumin from blood fluid and compositions therefore |
| US4043997A (en) * | 1976-05-28 | 1977-08-23 | Cutter Laboratories, Inc. | Method for isolating albumin using insoluble supports coupled to a dye |
| DE2657146A1 (de) * | 1976-12-16 | 1978-06-22 | Bayer Ag | Anthrachinon-reaktivfarbstoffe |
| DE2725316A1 (de) * | 1977-06-04 | 1978-12-14 | Bayer Ag | Reaktivfarbstoffe |
| JPS635133B2 (ja) * | 1978-01-24 | 1988-02-02 | Paburitsuku Herusu Raboratarii Saauisu Boodo | |
| DE2852672A1 (de) * | 1978-12-06 | 1980-06-19 | Bayer Ag | Reaktiv-farbstoffe |
| US4631341A (en) * | 1983-05-23 | 1986-12-23 | Sumitomo Chemical Company, Limited | Anthraquinone compound having both monohalogenotriazinyl and vinylsulfone type fiber reactive groups |
-
1985
- 1985-07-15 GB GB858517779A patent/GB8517779D0/en active Pending
-
1986
- 1986-06-27 EP EP86305046A patent/EP0209284A3/en not_active Withdrawn
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- 1986-07-14 US US06/885,146 patent/US4864018A/en not_active Expired - Fee Related
- 1986-07-15 DK DK336786A patent/DK336786A/da not_active Application Discontinuation
- 1986-07-15 JP JP61164870A patent/JPS6226253A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0383477U (ja) * | 1989-12-11 | 1991-08-26 | ||
| JP2008539280A (ja) * | 2005-04-08 | 2008-11-13 | チバ ホールディング インコーポレーテッド | 生物学的材料を分離するためのアントラキノン染料リガンドを含む吸着剤 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| GB8517779D0 (en) | 1985-08-21 |
| IL79295A0 (en) | 1986-10-31 |
| EP0209284A3 (en) | 1990-07-11 |
| EP0209284A2 (en) | 1987-01-21 |
| US4864018A (en) | 1989-09-05 |
| DK336786D0 (da) | 1986-07-15 |
| DK336786A (da) | 1987-01-16 |
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