JPS62275689A - L−カルニチンの製造法 - Google Patents
L−カルニチンの製造法Info
- Publication number
- JPS62275689A JPS62275689A JP27518185A JP27518185A JPS62275689A JP S62275689 A JPS62275689 A JP S62275689A JP 27518185 A JP27518185 A JP 27518185A JP 27518185 A JP27518185 A JP 27518185A JP S62275689 A JPS62275689 A JP S62275689A
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- Japan
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- genus
- carnitine
- crotonobetaine
- converting
- aspergillus
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Links
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Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
3発明の詳細な説明
産業上の利用分野
本発明はクロトノベタインに微生物を作用させて一一カ
ルニテンを製造する方法に関するものである。本発明に
よυ製造さnるL−カルニテ/は、長鎖脂肪酸がミトコ
ンドリア映を通洒して代謝系に入るために必要な物質で
、心臓疾患等に医薬として使われる。また幼児、病人等
の栄養強化でも重要な役割をもち用途がある。
ルニテンを製造する方法に関するものである。本発明に
よυ製造さnるL−カルニテ/は、長鎖脂肪酸がミトコ
ンドリア映を通洒して代謝系に入るために必要な物質で
、心臓疾患等に医薬として使われる。また幼児、病人等
の栄養強化でも重要な役割をもち用途がある。
(R,A、 FrenkelおよびJ、 O,M、 C
arry編: 0arni−tine biosynt
hesis 、 metabolism ana f
uncl −ons、 Acaaemic
Press 、 1 9 8 0 年
〕 。
arry編: 0arni−tine biosynt
hesis 、 metabolism ana f
uncl −ons、 Acaaemic
Press 、 1 9 8 0 年
〕 。
従来の技術
従来り一カルエテンの製法としては種々の方法が知らn
ておυ、近年生化学的方法も報告烙nでいる。しかし、
これらは工業的に安価なL−カルニチンを供給するには
なお不満足なものである。生化学的方法の中で特に本発
明方法と関連のある方法について述べると、クロトノベ
タインをL−カルニチンに変換せしめる微生物としてエ
ンテロバクタ−(Kntsl obactar )属細
菌(公開特公昭59−183694)、糧々の細菌、酵
母、放線菌(公開特公昭59−192095、公開特公
昭60−137295)を用いる方法が知られている。
ておυ、近年生化学的方法も報告烙nでいる。しかし、
これらは工業的に安価なL−カルニチンを供給するには
なお不満足なものである。生化学的方法の中で特に本発
明方法と関連のある方法について述べると、クロトノベ
タインをL−カルニチンに変換せしめる微生物としてエ
ンテロバクタ−(Kntsl obactar )属細
菌(公開特公昭59−183694)、糧々の細菌、酵
母、放線菌(公開特公昭59−192095、公開特公
昭60−137295)を用いる方法が知られている。
こnらの方法に反応収率が低かつ九シ、収率が高くても
基質濃度が低くて生産性からみてなお満足なものとほい
\難い。
基質濃度が低くて生産性からみてなお満足なものとほい
\難い。
発明が解決しようとする問題点と解決するための手段
上記したように従来OL−カルニチン製造法が工業的に
はなお難点がある次め、本発明者らはよシ効率的なL−
カルニチンの製造法を確立すべく研究を重ねた。その結
果、これまでクロトノベタインからL−カルニチンへの
f換能力の知られていない6徨のカビ、放線菌、酵母、
細菌にその能力を見い友し、この発見に基いて本発明を
完成するにいたった。
はなお難点がある次め、本発明者らはよシ効率的なL−
カルニチンの製造法を確立すべく研究を重ねた。その結
果、これまでクロトノベタインからL−カルニチンへの
f換能力の知られていない6徨のカビ、放線菌、酵母、
細菌にその能力を見い友し、この発見に基いて本発明を
完成するにいたった。
発明の効果、作用
本発明によれば容易に製造しうるクロトノベタインから
L−カルニチンを効率よく製造することが可能である。
L−カルニチンを効率よく製造することが可能である。
本発明に使用する微生物に、アスベルギルスイoスポラ
(lJeurosporaJ 属、ペニシリウム(Pe
nicilliumJ属、リゾープス(Rhizopu
a]属、トリコブル? (Trichoderma)属
、アy’s’s−ビア(Ashbya) 属、ブレタ
ノミセス(nrettanomyces )属、ブレラ
(Bullsra)属、シゾサツ力ロミセスイトファガ
(Cytophaga )属、ミクロシクルスO何1か
の属に属する微生物でめり、6属に楓する微生物の具体
的例は実施例に示す如くである。これらの属の微生物で
クロトノベタインをL−カルニチンに変換する能力を有
する微生物を培地に培養してえた菌体もしくにその処理
物をクロトノベタインに接触反応せしめるとL−カルニ
チンがえられる。本発明に使用する微生物菌体をえるた
めの培養法は、通常の培養法によればよく、特に説明を
要しないが、基質として用いるクロトノベタインを含有
せしめ次培地に微生物を生育せしめると転換活性の高い
菌体をえることができる。このようにしてえた菌体を基
質に作用せしめてもよく、まt菌体からえ九酵素系含有
物を基質に作用せしめてもよい。
(lJeurosporaJ 属、ペニシリウム(Pe
nicilliumJ属、リゾープス(Rhizopu
a]属、トリコブル? (Trichoderma)属
、アy’s’s−ビア(Ashbya) 属、ブレタ
ノミセス(nrettanomyces )属、ブレラ
(Bullsra)属、シゾサツ力ロミセスイトファガ
(Cytophaga )属、ミクロシクルスO何1か
の属に属する微生物でめり、6属に楓する微生物の具体
的例は実施例に示す如くである。これらの属の微生物で
クロトノベタインをL−カルニチンに変換する能力を有
する微生物を培地に培養してえた菌体もしくにその処理
物をクロトノベタインに接触反応せしめるとL−カルニ
チンがえられる。本発明に使用する微生物菌体をえるた
めの培養法は、通常の培養法によればよく、特に説明を
要しないが、基質として用いるクロトノベタインを含有
せしめ次培地に微生物を生育せしめると転換活性の高い
菌体をえることができる。このようにしてえた菌体を基
質に作用せしめてもよく、まt菌体からえ九酵素系含有
物を基質に作用せしめてもよい。
また微生物菌体を培養液から分けることなく、生育培養
の培養液に基質を刃口えて反応せしめてもよい。また菌
の生育培地に基質を加えて生育と同時に反応場せる方式
も可能である。
の培養液に基質を刃口えて反応せしめてもよい。また菌
の生育培地に基質を加えて生育と同時に反応場せる方式
も可能である。
基質濃度にパッチ式、連続式、反応時間などによって異
ってくるが、通常α1〜30%で行なう。反応温度も通
常10〜60℃で行われるが、酵素系の失活を伴なわな
い温度でろnば割限にない。反応−pHについても同様
で、失活を伴わないpHが望ましく、通常pH4〜10
で行われる。反応時間は静置、攪拌、流下などの手段、
おるいは菌のもつ活性の強弱などによって異るが、一般
に30分〜72時間程度である。
ってくるが、通常α1〜30%で行なう。反応温度も通
常10〜60℃で行われるが、酵素系の失活を伴なわな
い温度でろnば割限にない。反応−pHについても同様
で、失活を伴わないpHが望ましく、通常pH4〜10
で行われる。反応時間は静置、攪拌、流下などの手段、
おるいは菌のもつ活性の強弱などによって異るが、一般
に30分〜72時間程度である。
反応は生成するL−カルニチンをベアンンらの酵素法(
Method of Enz7matic Analy
sis、第2版第4巻1758頁、1974.年〕で分
析することによシ、あるいは高速液体クロマトグラフィ
ー、薄層クロマトグラフィーなどの分析手段を応用して
追跡できる。
Method of Enz7matic Analy
sis、第2版第4巻1758頁、1974.年〕で分
析することによシ、あるいは高速液体クロマトグラフィ
ー、薄層クロマトグラフィーなどの分析手段を応用して
追跡できる。
反応終了後、反応液をイオン交換樹脂カラムにかけ、溶
出濃縮するなど公知の方法によシー−カルニチンに回収
さnる。
出濃縮するなど公知の方法によシー−カルニチンに回収
さnる。
次に本発明の実施例を示す。
実施例1
第1表に示した培地5dをふくむ大型試験管に第2表に
示し次カビ、酵母を植菌して26℃で、カビrX7日、
酵母は48振とり培養し次。
示し次カビ、酵母を植菌して26℃で、カビrX7日、
酵母は48振とり培養し次。
培養液5−から遠心分離ま友に濾過によシえ九菌体を2
回水洗後クロトノベタインを10岬/−の@度にふくむ
pH7,0の燐酸緩衝液α5−を加え、30℃で18時
間振とり培養で反応させ次結果、第2表に示した転換率
(モル収率)でL−カルニチンが生成した。
回水洗後クロトノベタインを10岬/−の@度にふくむ
pH7,0の燐酸緩衝液α5−を加え、30℃で18時
間振とり培養で反応させ次結果、第2表に示した転換率
(モル収率)でL−カルニチンが生成した。
第 1 嵌
培地成分 培地ム 培地B 培地OK
、HPO47,5t/l 7.5’l/l 7.5
?/LKH,Po、 2.5
2.5 2.5Mg804・7馬0
α1 α1 α1Fe804・7H10C
LOl α01 α01NH4C21,O
to tO NaCt5.0 5.0 5.0グルコー
ス IQ、Q −−フマール
酸ナトリウム −2(LO−グリセロール
− −2α0肉エキス
却 5.0 5.0ポリペプト
ン an s、o s、
口酵母エキス 五〇 五〇
五ロクロトノペタイン 1αOIQ
、Q 1αOpH&Op)L 6.0 pH
6,0第 2 表 アスペルギルス・ニゲルfmフル − −12,
5%テイベス (Aapergllua n1cer var。
、HPO47,5t/l 7.5’l/l 7.5
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却 5.0 5.0ポリペプト
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口酵母エキス 五〇 五〇
五ロクロトノペタイン 1αOIQ
、Q 1αOpH&Op)L 6.0 pH
6,0第 2 表 アスペルギルス・ニゲルfmフル − −12,
5%テイベス (Aapergllua n1cer var。
altipes) エIPO4067
アスベルギルスーニゲル変糧フエ − −12,
9ルメンタリウス (Aspergillus niger var。
9ルメンタリウス (Aspergillus niger var。
fermentariusJ IIFO4068アス
ペルギルス・フエニクス − 1
2.6(Aapergillus phoenicus
)ATOo 11363 フfUウム・オキシスボルム − −15
,1(Fusarium oxysporum f、
sp。
ペルギルス・フエニクス − 1
2.6(Aapergillus phoenicus
)ATOo 11363 フfUウム・オキシスボルム − −15
,1(Fusarium oxysporum f、
sp。
1ini )工F05880
ジベレラーラテリテウム 5.5
(Gibbarella 1ateritiumJ工F
0 71813 モナスクス・アンカ − −12
,8(Monaecus ankaJ 工FO447B リゾムコール・ミーヘイ − &2(
Rhizomucor m1eheiJATOO220
64 ノイロスポラ・シトフィラ −−9,8(と
当とり1臼」幻j」恵玉聾) IFO4596 ペニシリウム・カマンベルf −−15,0
(Penicillium camenberti)
IFo 5855 犬 ペニシリウム・シトリスム − −19
4(Penicillium citrinumJAT
OO14994 リゾープス・ギネンシス変極りキファシ −−2.5c
互しり旦辺些 chinensis var+l紐己!
9正互)工IFO4737 トリコデルマ・リーセイ − −al
ATCC13631 トリコデルマ・ビリデ − 7.2
−工F0 4847 アッシュビア・ゴクビー 9.2 4.
9 5.3工FOQ560 ブレタノミセス・フラケセレンシス 6.5 −
−工FO0677 ブレラ・アルバ 7.7 4
.8 −工FO1192 シゾサツカロミセス・ボンベ 1.9 −
−pombs)ATCC2a76 シユワニオミセス・オク7テン &0 −
−スボロボロミセスーサルモニカラー Mu
−1,7rs1co1or) 工F0 1038ス
テリグマトミセス−ハロフィルス −
1.2(13terigmatomyces halo
−philus)工F0 1488 トリゴノグシス・パリアビリス −−α6ATC
C10679 ウィッカーハミア・フルオレスンス −114工FO
1116 m:実施せず、 ′第1表の培地 実施例2 第3表に示した培地と第4表に示した微生物を用い、菌
体収得の為の培養時間4io日とするほかに実施例」1
と同様に実施し之場合OL−カルニチンの生成1α弔4
表に示した如くであった。
(Gibbarella 1ateritiumJ工F
0 71813 モナスクス・アンカ − −12
,8(Monaecus ankaJ 工FO447B リゾムコール・ミーヘイ − &2(
Rhizomucor m1eheiJATOO220
64 ノイロスポラ・シトフィラ −−9,8(と
当とり1臼」幻j」恵玉聾) IFO4596 ペニシリウム・カマンベルf −−15,0
(Penicillium camenberti)
IFo 5855 犬 ペニシリウム・シトリスム − −19
4(Penicillium citrinumJAT
OO14994 リゾープス・ギネンシス変極りキファシ −−2.5c
互しり旦辺些 chinensis var+l紐己!
9正互)工IFO4737 トリコデルマ・リーセイ − −al
ATCC13631 トリコデルマ・ビリデ − 7.2
−工F0 4847 アッシュビア・ゴクビー 9.2 4.
9 5.3工FOQ560 ブレタノミセス・フラケセレンシス 6.5 −
−工FO0677 ブレラ・アルバ 7.7 4
.8 −工FO1192 シゾサツカロミセス・ボンベ 1.9 −
−pombs)ATCC2a76 シユワニオミセス・オク7テン &0 −
−スボロボロミセスーサルモニカラー Mu
−1,7rs1co1or) 工F0 1038ス
テリグマトミセス−ハロフィルス −
1.2(13terigmatomyces halo
−philus)工F0 1488 トリゴノグシス・パリアビリス −−α6ATC
C10679 ウィッカーハミア・フルオレスンス −114工FO
1116 m:実施せず、 ′第1表の培地 実施例2 第3表に示した培地と第4表に示した微生物を用い、菌
体収得の為の培養時間4io日とするほかに実施例」1
と同様に実施し之場合OL−カルニチンの生成1α弔4
表に示した如くであった。
第 3 表
培地成分 培地D 培地E
K!HP 04 7.5 ?/17.5
?/1KH2PO42,512,5// Mg5o、・7HtOQ、1 tt α1 〃F
e804−7H2OO,01tt O,01pNE
4CL 1.Ott 1.OpN
ail 5.Ott 5onグ
ルコース 1αOp −グリ
セロール − IQ //肉
エキス 5,0 1 5
.Onポリペプトン 5.0 //
5.Op酵母エキス α3
tr (13trジクロノベタイン
iaO〃 1αo 〃pH7,2pH7,2 第 4 表 り一カルニチン式率 アクテノマジュラ・ツーシラ α5
−ムTCC27296 アクチノプラネス・ミズーリエンシス α7
−工F0 1343 ミクロモノスポラープルプレオクロモ 1.1−
ゲネス chromogensa)工1P013524ストレグ
トスポランギウム・ピリド 五5 −グリゼ
ウム griseum)ムTCC25242 ノカルジオイデス・アルプス 1.9
−ATCC27980 ミクロテトラスポラ・フスカ −
1.6(Microtetraspora fu
sca))TCo 23058 − 二実施せず、 ” 第3表の培地実施例5 実施例1のB培地でpHを12に調整し次培地を用い、
菌体収得の為の培養時間t−2日とするほかに実施例1
と同様に実施した場合、第5表に示し7ta菌で第5衆
に示しt率OL−力ルニチンか生成し九。
?/1KH2PO42,512,5// Mg5o、・7HtOQ、1 tt α1 〃F
e804−7H2OO,01tt O,01pNE
4CL 1.Ott 1.OpN
ail 5.Ott 5onグ
ルコース 1αOp −グリ
セロール − IQ //肉
エキス 5,0 1 5
.Onポリペプトン 5.0 //
5.Op酵母エキス α3
tr (13trジクロノベタイン
iaO〃 1αo 〃pH7,2pH7,2 第 4 表 り一カルニチン式率 アクテノマジュラ・ツーシラ α5
−ムTCC27296 アクチノプラネス・ミズーリエンシス α7
−工F0 1343 ミクロモノスポラープルプレオクロモ 1.1−
ゲネス chromogensa)工1P013524ストレグ
トスポランギウム・ピリド 五5 −グリゼ
ウム griseum)ムTCC25242 ノカルジオイデス・アルプス 1.9
−ATCC27980 ミクロテトラスポラ・フスカ −
1.6(Microtetraspora fu
sca))TCo 23058 − 二実施せず、 ” 第3表の培地実施例5 実施例1のB培地でpHを12に調整し次培地を用い、
菌体収得の為の培養時間t−2日とするほかに実施例1
と同様に実施した場合、第5表に示し7ta菌で第5衆
に示しt率OL−力ルニチンか生成し九。
第5表
クロモバクテリウム・ヨージヌム 1
.7(Chromo’bacterium iodin
um)工F05558 サイト7アガ菌&
Q、3(Cytophaga sp、)ATO(!
2947aミクロシクルス拳エパーネウス
13(Microcyclus 5b
urneusツムToe 21373 パラコツカス・デニトリフィカンス
zl(Paracoccua denitrific
ans)ATCO1956ア 実施例4 ペニシリウム・シトリヌムムTO(:! 14974
i用い、実施例1と同じ東件で実施した反応液から面
体を除いてえた」:コ液400−をイオン交換樹脂(ダ
ウエックス5o)crカラムに通し、稀塩酸で溶出し、
a縮径エチルアルコールtfiMIによ、91−カルニ
チン・クロライドの#i結晶560岬をえ九。
.7(Chromo’bacterium iodin
um)工F05558 サイト7アガ菌&
Q、3(Cytophaga sp、)ATO(!
2947aミクロシクルス拳エパーネウス
13(Microcyclus 5b
urneusツムToe 21373 パラコツカス・デニトリフィカンス
zl(Paracoccua denitrific
ans)ATCO1956ア 実施例4 ペニシリウム・シトリヌムムTO(:! 14974
i用い、実施例1と同じ東件で実施した反応液から面
体を除いてえた」:コ液400−をイオン交換樹脂(ダ
ウエックス5o)crカラムに通し、稀塩酸で溶出し、
a縮径エチルアルコールtfiMIによ、91−カルニ
チン・クロライドの#i結晶560岬をえ九。
特許出願人 パイオール株式会社
代表者 申出 清
中央化成品株式会社
代表者 水島喜三部
Claims (1)
- 1、アスペルギルス(¥Aspergillus¥)属
、フザリウム(¥Fusarium¥)属、ジベレラ(
¥Gibbe−rella¥)属、モナスクス(¥Mo
nasus¥)属、リゾムコール(¥Rhizomuc
or¥)属、ノイロスポラ(¥Neurospora¥
)属、ペニシリウム(¥Penicillium¥)属
、リゾープス(¥Rhizopus¥)属、トリコデル
マ(¥Trichoderma¥)属、アッシュビア(
¥Ashbya¥)属、ブレタノミセス(¥Brett
anomyces¥)属、ブレラ(¥Bullera¥
)属、シゾサッカロミセス(¥Schizosacch
aro−myces¥)属、シユワニオミセス(¥Sc
hwanni−omyces¥)属、スポロボロミセス
(¥Sporobo−lomyces¥)属、ステリグ
マトミセス(¥Steri−gmatomyces¥)
属、トリゴノプシス(¥Trigo−nopsis¥)
属、ウィッカーハミア(¥Wicker−hama¥)
属、アクチノマジュラ(¥Actinoma−dura
¥)属、アクテノプラネス(¥Actinopla−n
es¥)属、ミクロモノスポラ(¥Micromono
s−pora¥)属、ミクロテトラスポラ(¥Micr
otet−raspora¥)属、ノカルジオイデス(
¥Nocardi−oides¥)属、ストレプトスポ
ランギウム(¥Streptosporangium¥
)属、サイトファガ(¥Cytophaga¥)属、ミ
クロシクルス(¥Micro−cyclus¥)属、パ
ラコッカス(¥Paracoccus¥)属、クロモバ
クテリウム(¥Chromobacterium¥)属
の何れかの属に属し、クロトノベタインをL−カルニチ
ン変換する能力を有する微生物をクロトノベタインに作
用せしめて、クロトノベタインをL−カルニチンに変換
せしめることを特徴とするL−カルニチンの製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP27518185A JPS62275689A (ja) | 1985-12-09 | 1985-12-09 | L−カルニチンの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP27518185A JPS62275689A (ja) | 1985-12-09 | 1985-12-09 | L−カルニチンの製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62275689A true JPS62275689A (ja) | 1987-11-30 |
Family
ID=17551800
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP27518185A Pending JPS62275689A (ja) | 1985-12-09 | 1985-12-09 | L−カルニチンの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS62275689A (ja) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60224488A (ja) * | 1984-03-29 | 1985-11-08 | ロンザ リミテツド | 微生物学的手段によるl−カルニチンの製造 |
| JPS61234788A (ja) * | 1985-04-11 | 1986-10-20 | Seitetsu Kagaku Co Ltd | L−カルニチンの製造方法 |
| JPS61271996A (ja) * | 1985-05-25 | 1986-12-02 | Seitetsu Kagaku Co Ltd | L−カルニチンを製造する方法 |
| JPS61271995A (ja) * | 1985-05-25 | 1986-12-02 | Seitetsu Kagaku Co Ltd | L−カルニチンの製造法 |
-
1985
- 1985-12-09 JP JP27518185A patent/JPS62275689A/ja active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60224488A (ja) * | 1984-03-29 | 1985-11-08 | ロンザ リミテツド | 微生物学的手段によるl−カルニチンの製造 |
| JPS61234788A (ja) * | 1985-04-11 | 1986-10-20 | Seitetsu Kagaku Co Ltd | L−カルニチンの製造方法 |
| JPS61271996A (ja) * | 1985-05-25 | 1986-12-02 | Seitetsu Kagaku Co Ltd | L−カルニチンを製造する方法 |
| JPS61271995A (ja) * | 1985-05-25 | 1986-12-02 | Seitetsu Kagaku Co Ltd | L−カルニチンの製造法 |
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