JPS62289595A - α、β−核置換フエニルグルコシドおよびα、β−核置換フエニルマルトオリゴシドの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ３、発明の詳細な説明 〔産業上の利用分野〕 本発明はα、β−核置換フェニルグルコシドおよびα、
β−核置換フェニルマルトオリゴシドの新規な製造法に
関するものである。

〔従来の技術〕

α、β−核置換フェニルグルコシドはα−またはβ−グ
ルコシダーゼ測定用基質として用いられる。又該グルコ
シドは、α−アミラーゼ活性測定用基質として有用なα
−核置換フェニルマルトオリ−ｆ’シト、例えばｐ−ニ
トロフェニルα−Ｄ−マルトヘプタオシド等の転位酵素
を用いる酵素法による合成の際の原料としても有用なも
のである。

さらにα、β−核置換フェニルマルトオリコシドは血液
、尿等の体液中のα−アミラーゼ活性測定のための基質
として有用なものである。具体的には、例えばｐ−ニト
ロフェニルマルトペンタオシド、ｐ−ニトロフェニール
マルトへキサオシド、ｐ−ニトロフェニールマルトへブ
タオシド、２．４−ジクロロフェニルマルトペンタオシ
ド、２−１０口、４−ニトロフェニルマルトペンタオシ
ド等を挙げることができる。

これらのグルコシドの内、酵素の転位反応を利用して合
成されるｐ−ニトロフェニルα−Ｄ−マルトヘプタオシ
ド以外は主に化学合成法によって調製されている。しか
し、該化学合成法は工程が繁雑で収率も低いものであっ
た。

すなわち、従来法はグルコースまたはマルトペンタオー
ス等のマルトオリゴ糖をアセチル化し、ハロゲン化し、
次いで脱アセチル化するものであった。

より詳しくはグルコースまたはマルトオリゴ塘に酢酸無
水物を作用させて水酸基をアセチル化し、アセチル化グ
ルコースまたはアセチル化マルトオリゴ糖、例えばペン
タアセチルグルコース、ヘプタデカアセチルマルトペン
タオース等を得る。次いでアセチル化グルコースまたは
アセチル化マルトオリゴ糖の末端基をハロゲン化する。

ハロゲン化はクロロホルム、ジクロロメタン等の非極性
溶媒中で無水塩化亜鉛、塩化第二錫、無水匹ハロゲン化
チタン、無水ハロゲン化水素等を作用させて行われる。

このようにして得られるハロゲン化アセチルグルコース
またはハロゲン化アセチルマルトオリゴ糖にα、β−核
装フエノールをピリジン等の溶媒の存在下に作用させる
とα、β−核置換フェニルグルコシドまたはマルトオリ
ゴシトのアセチル化物が得られる。（尋られたアセチル
化物をナトリウムメトキサイド等を用いて脱水メタノー
ル溶媒中で脱アセチル化して目的とするα、β−核核置
換ユニニルグルコシドたはα、β−核置換フェニルマル
トオリゴシドを得るものであった。

Ｓ発明が解決しようする問題点〕 以上の如〈従来法はアセチル化グルコースまたはアセチ
ル化マルトオリゴ糖のハロゲン化工程が必要であるため
工程が複雑となり、また収率も低く問題があった。本発
明者等はα、β−核亙換フェニルグルコシドまたばば、
β−核２７０フェニルマルトオリゴシトの効率的な合成
法について検討した。その結果アセチル化グルコースま
たはアセチル化マルトオリゴ糖と核置換フェノールとを
三フッ化ホウ素、三フッ化メタンスルホン酸メチルシラ
ン等のルイス酸の存在下に直接反応させることにより、
ハロゲン化工程を経由することなく、α、β−核置換フ
ェニルグルコシド及びα、β−核置換フェニルマルトオ
リゴシドを効率よく合成することができることを見出し
、本発明を完成した。

〔問題点を解決するための手段〕

即ち本発明は、アセチルグルコースおよび／またはアセ
チルグ化マルトオリゴ糖と核置換フェノールとをルイス
酸の存在下に反応させることを特徴とする、 一般式 （式中Ｒ１及びＲ２はそれぞれ別々に水素原子、ヒドロ
キシ基、低級アルキル基、アミノ基、ニトロ基、または
ハロゲン原子を表し、ｎは０から７の整数を意味する）
で示されるα、β−核置換フェニルグルコシドおよびα
、β−核置換フェニルマルトオリゴシドの新規な製造方
法を提供するものである。

即ち本発明はα、β−グルコシダーゼ活性測定用の基質
として有用なα、β−核置換フェニルグルコシダーゼ、
またはα−アミラーゼ活性測定用基質として有用なα、
β−核置換フェニルマルトオリゴシドの新規な製造法に
関するものである。

以下に上記化合物を製造する方法について更に詳細に説
明する。

先ず本発明において使用するグルコースまたはマルトオ
リゴ糖としては、無水α−グルコース、無水β−グルコ
ース、マルトテトラオース、マルトペンタオース、マル
トヘキサオース、マルトヘプタオース、マルトオクタオ
ース等が挙げられる。

より好ましくは、これらを出来るだけ乾燥した後アセチ
ル化を行う。アセチル化は、公知の方法で行えばよい。

−例えば、上記のグルコースまたはマルトオリゴ糖を無
水酢酸に溶解し、無水酢酸ナトリウムを加え１，００〜
１１０℃で４〜５時間還流冷却管付きの容器に入れ撹拌
する。反応終了後常法により精製し、濃縮乾燥してアセ
チル化物を得る。

アセチルグルコースまたはアセチル化オリゴ糖を脱水し
たトルエン−ジクロロエタン混液等の低極性溶媒に溶解
し、核置換フェノールを加え、更に触媒としてルイス酸
を加える。ルイス酸としては、例えば三フッ化ホウ素、
三フッ化メタンスルホン酸メチルシラン、塩化第二スズ
、三臭化アルミニウム等を挙げることができる。

触媒として用いる三フッ化ホウ真または三フッ化ホウ素
コンプレックスとしては通常三フッ化ホｔＳエチルエー
テルコンプレックスが用いられるが、その他、三フプ化
ホウ素フェノールコンプレックス、三フッ化ホウ素酢酸
コンプレックス、三フッ化ホウ毒モノエチルコンプレッ
クス、三フッ化ホウ素ヒベリジンコンプレックス、三フ
フ化ホウ素ｎ−ブチルエーテルコンプレックス、三フッ
化ホウ素トリエタノールアミンコンプレックス等を用い
ることが出来る。

アセチル化グルコースまたはアセチル化マルトオリゴ糖
とα、β−核置換フェノールとの反応温度は１０〜１０
０℃、好ましくは３０〜６０℃である。反応時間は１〜
５０時間、好ましくは５〜４０時間である。

反応に用いる溶媒としては低極性溶媒であれば何れを用
いてもよいが、トルエンまたは／およびジクロロエタン
を用いるのが好ましい。

ハロゲン化工程を径由す−る従来法においてはβ一体が
多く生成し、α一体を多（生成することは一般に困難で
あった。またα一体、β一体の生成比工を自由に調節す
ることも困難であった。しかし本発明においては、熱力
学的に安定なα体と反応速度的に有利なβ体との生成比
を反応温度、反応時間、触媒量等の条件を選択すること
によりある程度まで調節できる。

反応終了後、反応液を無水状態のま＼冷却し、氷を加え
て冷却した炭酸ナトリウム溶液１こ反応液を加え撹拌す
る。

これを分液ロートに移し、クロロホルムを加えてフェノ
ール類を抽出した後、硫酸ナトリウムで脱水、濃縮乾固
するとα、β−核置換フェニールグルコシドアセチル化
物またはα、β−核置換フェニルマルトオリゴシドアセ
チル化物が得られる。

これをクロロホルムを展開溶媒とするシリカゲルカラム
でＩ′ｉ′製し、各面分を乾固した後脱水メタノールに
溶解し、ナトリウムメトキサイドを加えて常法により脱
アセチル化し、メタノールを溜去すると目的とするα、
β−核置換フェニルグルコシドまたはα、β−核置換フ
ェニルマルトオシドが得られる。

〔実施例〕

以下に実施例を挙げて更に具体的に説明するが、本発明
は以下の実施例に限定されるものではない。

実施例１ ｐ−＝）ロフニニル−α−Ｄ　−クルコシトノ合成 ペンタアセチル−β−Ｄ−グルコシド９．３ｇ。

ｐ−ニトロフェノール５．Ｏｇをトルエン３６ｍ！、ジ
クロロエタン６ｍｌの混合溶媒に加え触媒として三フッ
化ホウ素エチルエーテルコンプレックス１２ｇを加えて
５０℃で３０時間換押した。反応終了後、反応液を冷却
し氷冷した炭酸す）　ＩＪウム溶液に加えて撹拌した後
クロロホルムで抽出し、抽畠液を飽和重炭酸ナトリウム
水溶液及び水で洗浄し、クロロホルム層を無水硫酸ナト
リウムで脱水した後、クロロホルムを減圧で溜去すると
９．８ｇのα−β−（ｐ−二トロフェニル）−テトラア
セチルグルコシドの粗生成物が得られた。次いでこの粗
生成物５ｇをクロロホルムを展開溶媒とするシリカゲル
のカラムクロマトグラフィーにより精製し、クロロホル
ムを溜去すると粗ｐ−ニトロフェニルーα−Ｄ−テトラ
アセチルグルコシド２．５ｇが得られた。この生成物を
７０ｍ１の脱水メタノールに溶解し、撹拌しつつ０．５
Ｎナトリウムメトキシド１０ｍ１を添加して５時間反応
し、脱アセチル化ヲ行すった。ｐ−ニトロフニニルーα
−Ｄグルコシド１．２ｇが得られた。本物質がα配位で
あることは、α−グルコシダーゼおよびβ−グルコシダ
ーゼを反応させる事により確認した。

（ｐ−＝）ロフェニルーα−グルコシド）融点　　２１
２〜２１４℃ 旋光度　［α］。”＋２０３．３　　。

（メタノーノベＣ；０．３３） 赤外吸収スペクトルｃｍ−’ ：　３４８０．３３２０（ＯＨ）、　１５９０．　ｒ５
００１３５０（ＰｈＮＯ２）、　７５０．７１０．　６
９０（Ｐｈ）２７０　！Ｊ　Ｈｚ核磁気共鳴スペクトル
（重メタノール）δ３．４８〜３．９３　（ｍ、　６Ｈ
，Ｈ−２〜６）５．６５　（ｄ、　ＩＨ，ＪＩ２３．６
６ｉｆ、　Ｈ−１）？、　２８．８．２２　　（ｍ、　
４Ｈ，Ｐｈ）実施例２ ｐ−ニトロ７ニニルα−Ｄ−マルトペンタオシド マルトペンタオース１４．３　ｇを用いて常法によりア
セチル化を行いヘプタデカアセチルマルトペンタオース
２２．　Ｏｇを得た。これにｐ−ニトロフェノール９．
８ｇ、）ルエン１００ｍｆジクロロエタン２０ｍｆ！０
）混合溶媒を加え触媒として三フッ化ホウ素エチルエー
テルコンプレックス４ｍｌを加えて４５℃で２４時間撹
拌反応した。反応終了後実施例１と同様にクロロホルム
を抽出し、クロロホルムヲ溜去スると粗ｐニトロフェニ
ルα−ヘキサデカアセチルマルトペンタオシド２６．０
　ｇが得られた。次いで上記生成物をクロロホルムを溶
媒としてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、
クロロホルムを溜去後、脱水メタノールに溶解し、ナト
リウムメトキシドを用いて、常法により脱アセチル化す
ると、ｐ−ニトロフェニル−α−Ｄ−マルトペンタオシ
ド３ｇが得られた。

（ｐ−ニトロフェニル−α−マルトペンタオシド）融点
　　２０２〜２０６℃ 旋光度　［α］。”、−２０３，１゜ （メタノール、ｃ；　０．３９） 赤外吸収スペクトルイ：ｍ−１ ：　３４８０．３３２０（Ｏｆｔ）、　　１５９０．１
５００゜１３５Ｑ（ＰｈＮＯ２）、　７５ＣＬ　７１０
．６９０（Ｐｈ）６３．４３〜４．ｉ６　　（ｍ、　　
３０）１．　　Ａ　−ＢＨ−２〜６）５．１２〜５．１
４　　（ｍ、　　４Ｈ，Ｃ−ＤＨ−１）５．２０（ｄ、
　　ＬＨ，ＪＢｌ、Ｂ２゜３、　ｂ７Ｈｚ、　　８ｆｌ
　　ｌ） ）、６７　　　　（ｄ、　　ＬＨ，ｊｈｌ。

３、６６　Ｈｚ　、Ａ　Ｈｉ　） ７．３２．　８．２２　　（ｍ、　　４Ｈ，Ｐｈ）実施
例３ ２−クロロ−４−ニトロフェニル−β−Ｄ−マルトヘプ
タオシドの合成 マルトヘプタオース１９．７　ｇを常法によりアセチル
化し、アセチル化物３５．５ｇ　％得た。得られたマル
トヘプクオースアセチル化１勿３５ｙ５　ｇ、２−クロ
ロ−４ニトロフェノール９．４　ｇ　）ルエン１５０ｍ
１を混合し触媒として三フブ化ホウ累エチルエーテルコ
ンプレックス９ｒｒ＋ｊ７を加えて４０℃で２０時間撹
拌した。反応終了後、実施例１と同様にクロロホルムで
抽出し、クロロホルムを溜去すると粗−２−クロロ−４
−ニトロフェニル−β−Ｄ−マルトヘプタオシドのアセ
チル化物３６．０ｇが得られた。次いで上記生成物をク
ロロホルムを展開溶媒とするシリカゲルカラムクロマト
グラフィーにより精製し、クロロホルムを溜去後、脱水
メタノールに溶解し、ナトリウムメトキシサイドを用い
て常法により脱アセチル化し、脱塩すると２−クロロ−
４−ニトロフェニル−β−Ｄ−マルトヘプタオシド１．
９ｇが得られた。本島がβ体であることはα−アミラー
ゼ（Ａｍｙｌａｓｅ）をｆ［させた後α−およびβ−グ
ルコシダーゼを作用させる事により確認した。

融点　　２１５〜２２０℃ 旋光度　［αコＤ”　＋　１０７．４゜（メタノール、
ｃ；　０．４３） 赤外吸収スペクトルＣｍ７’ ：　３３８０（叶）、　１５９０．１５１０．１３５０
゜８５０　（ＰｈＮＯ□Ｃ）　７５０．　７１０．　６
９０（Ｐｈ）６３．４１〜３．９５　　（ｍ、　　４９
Ｈ，Ａ−ＧＨ−２〜６）４、６５〜５．２５　　（ｍ、
　　７Ｈ，Ａ−Ｇ）Ｉ　　ｌ）？、４５，８．２１，８
，３０　　（ｍ、　　３Ｈ，Ｐｈ）融点　　２１４〜２
１９℃ 融点　　１４３〜１４５℃

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）アセチルグルコースおよび／またはアセチル化マ
   ルトオリゴ糖と核置換フェノールとをルイス酸の存在下
   に反応させることを特徴とする、一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中Ｒ＿１及びＲ＿２はそれぞれ別々に水素原子、ヒ
   ドロキシ基、低級アルキル基、アミノ基、ニトロ基、ま
   たはハロゲン原子を表し、ｎは０から７の整数を意味す
   る）で示されるα，β−核置換フェニルグルコシドおよ
   びα，β−核置換フェニルマルトオリゴシドの製造方法
   。
2. （２）反応を低極性溶媒中で実施することを特徴とする
   特許請求の範囲第１項記載の製造方法。
3. （３）反応を１０〜１００℃の温度で実施することを特
   徴とする特許請求の範囲第１項記載の製造方法。