JPS6240295A - ビタミンｂ↓１↓２の製造法 - Google Patents
ビタミンｂ↓１↓２の製造法Info
- Publication number
- JPS6240295A JPS6240295A JP60177838A JP17783885A JPS6240295A JP S6240295 A JPS6240295 A JP S6240295A JP 60177838 A JP60177838 A JP 60177838A JP 17783885 A JP17783885 A JP 17783885A JP S6240295 A JPS6240295 A JP S6240295A
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- Japan
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- vitamin
- culture
- methanol
- microorganism
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明はビタミン８１２の製造法に関し、さらに詳細に
は個性嫌気性細菌であるニーバクテリウム属に属する微
生物をメタノールを主炭素源として培養することを特徴
とするビタミンＢ１２の製造方法に関するものである。
は個性嫌気性細菌であるニーバクテリウム属に属する微
生物をメタノールを主炭素源として培養することを特徴
とするビタミンＢ１２の製造方法に関するものである。
ビタミンＢ１２は生体内で種々の生合成反応に必須な因
子として関与してお抄、飼料添加剤としての用途の他に
悪性貧血、慢性の神経疾患などに優れた薬効のあること
が見いだされており近年需要が増大している。
子として関与してお抄、飼料添加剤としての用途の他に
悪性貧血、慢性の神経疾患などに優れた薬効のあること
が見いだされており近年需要が増大している。
〔従来技術、発明が解決しようとする問題点〕ビタミン
Ｂ１２は、その構造の複雑さのために。
Ｂ１２は、その構造の複雑さのために。
化学合成では多段にわたる複雑な合成工程が必要である
ことから実用的ではない。
ことから実用的ではない。
また牛の肝臓などの動物臓器から抽出するという方法も
あるが、この方法では動物臓器のビタミンＢ１２の含有
率が低く、しかも動物臓器の供給量が少なく、かつ供給
量も不安定であるので工業的な製造法として好ましい方
法とはいえない。
あるが、この方法では動物臓器のビタミンＢ１２の含有
率が低く、しかも動物臓器の供給量が少なく、かつ供給
量も不安定であるので工業的な製造法として好ましい方
法とはいえない。
これに対してシュードモナス属、ノカルディア属、スト
レプトマイセス属および７−スロバクター属などのそれ
ぞれに属する微生物を使用する方法もある。しかしなが
ら、これらの微生物はいずれも好気的微生物であるため
、培養における通気および攪拌のため多大の動力が必要
であり、かつ雑菌に汚染される危険性が大きく、また揮
発性培地成分の揮散が多い。また、これらの微生物の多
くは一般ＫＲ素源としてグルコース、フラクトースおよ
びシェークロースなどの糖類またはこれらの糖類を含有
する廃糖蜜などを使用して培養されているが、これらの
糖および糖含有物は比較的高価であり、かつ、その供給
も不安定であるので、これらの微生物を使用する方法も
工業的な方法としては好ましい方法とはいい難い。
レプトマイセス属および７−スロバクター属などのそれ
ぞれに属する微生物を使用する方法もある。しかしなが
ら、これらの微生物はいずれも好気的微生物であるため
、培養における通気および攪拌のため多大の動力が必要
であり、かつ雑菌に汚染される危険性が大きく、また揮
発性培地成分の揮散が多い。また、これらの微生物の多
くは一般ＫＲ素源としてグルコース、フラクトースおよ
びシェークロースなどの糖類またはこれらの糖類を含有
する廃糖蜜などを使用して培養されているが、これらの
糖および糖含有物は比較的高価であり、かつ、その供給
も不安定であるので、これらの微生物を使用する方法も
工業的な方法としては好ましい方法とはいい難い。
従って、メタノール資化性を有し、かつ、ビタミン８１
２を効率良く生産しうる嫌気性微生物が存在すれば、安
価でかつ安定的に工業原料として大量に供給されるメタ
ノールを炭素源とし、通気および攪拌などが本質的に不
要でありかつ雑菌によって汚染される危険性が比較的に
小さく、かつ揮発性培地成分の揮散量が著しく減少され
、ビタミンＢ１２を工業的に有利に製造することが可能
となる。
２を効率良く生産しうる嫌気性微生物が存在すれば、安
価でかつ安定的に工業原料として大量に供給されるメタ
ノールを炭素源とし、通気および攪拌などが本質的に不
要でありかつ雑菌によって汚染される危険性が比較的に
小さく、かつ揮発性培地成分の揮散量が著しく減少され
、ビタミンＢ１２を工業的に有利に製造することが可能
となる。
本発明者らは微生物を用いメタノールを炭素源として培
養するビタミンＢ１２の生産方法について種々検討を行
なってきた。その・結果、個性嫌気性細面のニーバクテ
リウム属Ｋｉするｆｉｌ物ヲグルコースおよびフラクト
ースなどの糖類を炭素源として培養したときには菌体中
のビタミンＢ１２含有率はそう高くはならないが、一方
、炭素源としてメタノールを使用したときには菌体中の
ビタミンＢ 含有率が著しく高くなるとの新知見を得、
この新知見に基づいて本発明に到達した。
養するビタミンＢ１２の生産方法について種々検討を行
なってきた。その・結果、個性嫌気性細面のニーバクテ
リウム属Ｋｉするｆｉｌ物ヲグルコースおよびフラクト
ースなどの糖類を炭素源として培養したときには菌体中
のビタミンＢ１２含有率はそう高くはならないが、一方
、炭素源としてメタノールを使用したときには菌体中の
ビタミンＢ 含有率が著しく高くなるとの新知見を得、
この新知見に基づいて本発明に到達した。
すなわち、本発明はニーバクテリウム（Ｅｕ−ｂａｃｔ
ｅｒｉｕｍ ）属に属し、メタノール資化性を有し、か
つ、ビタミン８１２を生産しうる微生物を、メタノール
を炭素源として排気条件下で培養してビタミンＢ を該
微生物の菌体内に生成、蓄積させることを特徴とするビ
タミンＢ１２の製造法である。
ｅｒｉｕｍ ）属に属し、メタノール資化性を有し、か
つ、ビタミン８１２を生産しうる微生物を、メタノール
を炭素源として排気条件下で培養してビタミンＢ を該
微生物の菌体内に生成、蓄積させることを特徴とするビ
タミンＢ１２の製造法である。
本発明で使用される微生物（以下単に微生物と記すこと
もある）は、ニーバクテリウム属に属し、メタノール資
化性を有し、かつ、ビタミンＢ１２を生産しうる微生物
であれば特に制限はないが、代表例としてニーバクテリ
ウム リモＸＡ （Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｉｍ
ｏｓｕｍ） Ｋ属する微生物がある。また１本発明で使
用されるニーバクテリウム属に属する微生物は、一般に
炭素源としてメタノールとともＫＷ＆などのメタノール
以外の炭素化合物を資化しうる微生物である。
もある）は、ニーバクテリウム属に属し、メタノール資
化性を有し、かつ、ビタミンＢ１２を生産しうる微生物
であれば特に制限はないが、代表例としてニーバクテリ
ウム リモＸＡ （Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｉｍ
ｏｓｕｍ） Ｋ属する微生物がある。また１本発明で使
用されるニーバクテリウム属に属する微生物は、一般に
炭素源としてメタノールとともＫＷ＆などのメタノール
以外の炭素化合物を資化しうる微生物である。
二一バタテリウム リそスムは、ダラム陽性びエタノー
ル等を資化しない。ニーバクテリウム リモスムの醒学
的性質は、たとえば％Ｂｅｒ−ｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａ
１ 第８版に記載さレテイル。
ル等を資化しない。ニーバクテリウム リモスムの醒学
的性質は、たとえば％Ｂｅｒ−ｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａ
１ 第８版に記載さレテイル。
本発明に用いるニーバクテリウム リモスムに属する代
表的菌株としては、ＡＴＣＣａａ８６株％ＡＴＣＣ１０
８２５株、ＤＳＭ ２５９３株およびＤＳＭ ２５
９４株等があげられるが、これらの中でメタノール含有
培地中での増殖速度が早いＡＴＣＣ８４８６株が好まし
い。
表的菌株としては、ＡＴＣＣａａ８６株％ＡＴＣＣ１０
８２５株、ＤＳＭ ２５９３株およびＤＳＭ ２５
９４株等があげられるが、これらの中でメタノール含有
培地中での増殖速度が早いＡＴＣＣ８４８６株が好まし
い。
本発明の微生物の培養において、炭素源としてメタノー
ルを用いるものであるが、この培養液中にはＣｏｔおよ
び／ｌたはＣＯｓ が存在していることが好ましい
。このＣｏ２および／また力ＸＩ′ はＣＯ５−一としてメタノール台分解されて生成しえ。
ルを用いるものであるが、この培養液中にはＣｏｔおよ
び／ｌたはＣＯｓ が存在していることが好ましい
。このＣｏ２および／また力ＸＩ′ はＣＯ５−一としてメタノール台分解されて生成しえ。
。２゜、！□。。２およｕ／ｌ、、、ゆ、８□。。３カ
−□□ どの炭酸化合物をさらに添加してもよい。また、炭素源
としてグルコースおよびフラクトースな
１どの糖類ならびに糖類含有物などのこの微生物が資
化しうるメタノール以外の炭素源の併用を妨げない。
−□□ どの炭酸化合物をさらに添加してもよい。また、炭素源
としてグルコースおよびフラクトースな
１どの糖類ならびに糖類含有物などのこの微生物が資
化しうるメタノール以外の炭素源の併用を妨げない。
培養液中のメタノール濃度は、微生物が好適に増殖しう
る濃度であれば特に制限はない。培養液中のメタノール
濃度は微生物の種類、他の通常の培地の如く、炭素源の
他、窒素源やミネラル類およびビタミン類等を含有せし
める事も可能である。
る濃度であれば特に制限はない。培養液中のメタノール
濃度は微生物の種類、他の通常の培地の如く、炭素源の
他、窒素源やミネラル類およびビタミン類等を含有せし
める事も可能である。
ヘフトン、酵母エキス、肉エキス、コーンステイープリ
カーおよびカザミノ酸などを挙げることができる。ミネ
ラル類としては、たとえば、リン酸塩類、マグネシウム
塩類、カリウム塩類、カルシウム塩類、マンガン塩類、
コバルト塩類。
カーおよびカザミノ酸などを挙げることができる。ミネ
ラル類としては、たとえば、リン酸塩類、マグネシウム
塩類、カリウム塩類、カルシウム塩類、マンガン塩類、
コバルト塩類。
鉄塩類および亜鉛塩類などを使用することができる。さ
らに、たとえば５，６−シメチルペンズイミダゾール、
コリンおよびベタインなどの添加はビタミンＢ の生産
麓を向上させるので好ましく、これらの化合物はビタミ
ンＢ１２の前駆体として作用するものと推察される。ま
た。
らに、たとえば５，６−シメチルペンズイミダゾール、
コリンおよびベタインなどの添加はビタミンＢ の生産
麓を向上させるので好ましく、これらの化合物はビタミ
ンＢ１２の前駆体として作用するものと推察される。ま
た。
培養液中に培養液の還元状態を知るための検知剤−たと
えばレサズリンーなどを存在させることが好ましい。
えばレサズリンーなどを存在させることが好ましい。
この微生物は、個性嫌気性細菌であることから、培養は
嫌気的条件下で行なうことが必要である。好気的培養は
、攪拌動力や酸素供給動力等のエネルギーが必要である
のに対して、嫌気的な培養ではこれらのエネルギーが本
質的に不要である。実際の培１１１に際しては、静置培
養が採用されるが、窒素ガスや炭酸ガスによる通気攪拌
培養や動力攪拌培養のいずれも可能である。
嫌気的条件下で行なうことが必要である。好気的培養は
、攪拌動力や酸素供給動力等のエネルギーが必要である
のに対して、嫌気的な培養ではこれらのエネルギーが本
質的に不要である。実際の培１１１に際しては、静置培
養が採用されるが、窒素ガスや炭酸ガスによる通気攪拌
培養や動力攪拌培養のいずれも可能である。
ただし、このときの動力は好気的培養に比して極めて小
さくて済む。
さくて済む。
また、培養方式形式としては回分培養、連続ン
培 ずれも可能である。
培養温度は微生物によって異なり、−概に特定しえない
が、実用上、通常は２０〜４５℃。
が、実用上、通常は２０〜４５℃。
好ましくは３０〜４０℃とされる。培養ｐＨは微生物に
よって異なり、−概に特定しえないが、実用上、通常は
約ｐＨ５〜８、好ましくは約ｐＨ６〜７が例示できる。
よって異なり、−概に特定しえないが、実用上、通常は
約ｐＨ５〜８、好ましくは約ｐＨ６〜７が例示できる。
実際の培養においては、培養液のｐＨを一定に保つのが
好ましく、ｐＨの調整には苛性ソーダ、炭酸ソーダ、７
ンモニ７水などのアルカリが用いられる。
好ましく、ｐＨの調整には苛性ソーダ、炭酸ソーダ、７
ンモニ７水などのアルカリが用いられる。
培養液からのビタミン８１２の回収は、それ自体公知の
方法によって行なうことができる。すなわち、ビタミン
Ｂ は本質的に菌体内に生成蓄積されるので、培養液か
ら遠心分離などの固液分離手段によ抄回収された菌体か
ら分離される。ビタミン８１２をシアノ型ビタミンＢ１
２として分離回収する場合には、菌体を水に懸濁させた
液（Ｍ体懸濁液）を硫酸などの酸によりｐＨを酸性、好
ましくはｐＨ４〜５に調整し、シアン化カリなどのシア
ン化物を約５０〜２００ｐｐｍ添加した後、８５〜１２
０℃に加熱することＫよ抄抽出分離が可能である。また
、ビタミン８１２をメチル型または補酵素型として得る
場合には、常法により菌体から暗所でメタノール、エタ
ノール、７セトン等の溶媒を用いて抽出する。自体から
抽出分離されたビタミンＢ は必要に応じてさらに精製
される。この精製はフェノール抽出、イオン交換樹脂ま
たセルロース等を用いたカラムクロマトグラフィーによ
る方法など、またさらにこれらの方法を併用して行なわ
れる。
方法によって行なうことができる。すなわち、ビタミン
Ｂ は本質的に菌体内に生成蓄積されるので、培養液か
ら遠心分離などの固液分離手段によ抄回収された菌体か
ら分離される。ビタミン８１２をシアノ型ビタミンＢ１
２として分離回収する場合には、菌体を水に懸濁させた
液（Ｍ体懸濁液）を硫酸などの酸によりｐＨを酸性、好
ましくはｐＨ４〜５に調整し、シアン化カリなどのシア
ン化物を約５０〜２００ｐｐｍ添加した後、８５〜１２
０℃に加熱することＫよ抄抽出分離が可能である。また
、ビタミン８１２をメチル型または補酵素型として得る
場合には、常法により菌体から暗所でメタノール、エタ
ノール、７セトン等の溶媒を用いて抽出する。自体から
抽出分離されたビタミンＢ は必要に応じてさらに精製
される。この精製はフェノール抽出、イオン交換樹脂ま
たセルロース等を用いたカラムクロマトグラフィーによ
る方法など、またさらにこれらの方法を併用して行なわ
れる。
実施例により本発明を更に具体的に説明する。
比較例および実施例において、ビタミンＢ１２の定量は
ビタミンＢ 要求変異株のラクトバチルス・ライヒマニ
ＣＩＦＯ−３５７６）ｆｔ用いる微生物法で行なった。
ビタミンＢ 要求変異株のラクトバチルス・ライヒマニ
ＣＩＦＯ−３５７６）ｆｔ用いる微生物法で行なった。
また培養液には検知剤であるレサズリンを添加し、レサ
ズリンが無色を保つように培養液を還元状態に保った。
ズリンが無色を保つように培養液を還元状態に保った。
比較例 Ｉ
Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍｌｉｍｏｓｕｍ（ＡＴＣＣ８４
８６）の培養には第１表に示した組成の培地を用いた。
８６）の培養には第１表に示した組成の培地を用いた。
第１表
ＫＨ＊ＰＯａ ５ ．１ｉｌＮａｚＨＰ
Ｏ４２９。
Ｏ４２９。
Ｍｇ５Ｏｉ・７Ｈ２００，４ｇ
３、。４）２５０４ ０．５１７ ：。
ＮａｘＣＯｓ Ｌ ｏｇＣＨｓＣＯＯＮ
ａ ・５ＨｚＯｌ、 ０９シズテイン・塩酸塩
０．５ｇＣａＣ１＊・２ＨｚＯＯ，ＩＪ 酵母エキス １０ ｇレサズ
リン（２９６溶（資） ０１ｔｄ
−クエン酸鉄・ｘＨ２Ｏ６０ダ ＺｎＳＯ４・７Ｈ２０１０Ｒ９ ＭｎＣ１ｚ ・４ＨｚＯ１０１ｉｔ ＣｕＳＯ４・５Ｈ２００，５１９ Ｋｌ ＋ ■（
ＮＨ４） ６Ｍｏ ７ｏ２４−ａＨρ １〜ＣｏＣ
ｌ２−６ＨｚＯ１０＃ Ｈ３ＢＯ３１ｔｒｙ ＮｉＳＱ＜・（ＳＨ２０１ダ ピオチン ５０ ４１葉
酸 １０ μｇチアミン・
塩酸塩 １０ １ｎ９リボフラビン
１００ μ９ナイフシフ
１００ μ９パントテン酸カル
シウム ５ ダｐ−７ミノ安息香酸
１００ μＩチオクト酸
１００ μＩ水
１１第１表に示した組成の培地にさらに３０
ｇ／ｇのグルコースを添加した培地 ７５０−を１！容
培養槽に張に込み％ １２０℃で２０分間高圧滅菌した
後、窒素気流下で冷却した。この培地にこれと同様な培
地を用い１００ｄ容三角フラスクで静置培養して予め調
製したＥｕｂａｃｔｅ−ｒｉｕｍ Ｉｉｍｏｓｕｍ（Ａ
ＴＣＣ８４８６ンの種母培養液約５ａｒｎｌを植菌し、
培養温度３５℃で１５０ ｒ ｐｍでゆっくり攪拌し、
培養ｐＨを７７モニーシ水で７，３にコントロールしな
がら窒素気流下で嫌気培養を行なった。培養開始後１５
時間経経過上び２５時間経過時点でグルコースをそれぞ
れ２５ｇずつ培養槽に添加した。培養開始後、３０時間
でビタミンＢ の生産量は約６１１９／ｌであり、乾燥
菌体１，９あたりの含有量は約０．３０１９であった。
ａ ・５ＨｚＯｌ、 ０９シズテイン・塩酸塩
０．５ｇＣａＣ１＊・２ＨｚＯＯ，ＩＪ 酵母エキス １０ ｇレサズ
リン（２９６溶（資） ０１ｔｄ
−クエン酸鉄・ｘＨ２Ｏ６０ダ ＺｎＳＯ４・７Ｈ２０１０Ｒ９ ＭｎＣ１ｚ ・４ＨｚＯ１０１ｉｔ ＣｕＳＯ４・５Ｈ２００，５１９ Ｋｌ ＋ ■（
ＮＨ４） ６Ｍｏ ７ｏ２４−ａＨρ １〜ＣｏＣ
ｌ２−６ＨｚＯ１０＃ Ｈ３ＢＯ３１ｔｒｙ ＮｉＳＱ＜・（ＳＨ２０１ダ ピオチン ５０ ４１葉
酸 １０ μｇチアミン・
塩酸塩 １０ １ｎ９リボフラビン
１００ μ９ナイフシフ
１００ μ９パントテン酸カル
シウム ５ ダｐ−７ミノ安息香酸
１００ μＩチオクト酸
１００ μＩ水
１１第１表に示した組成の培地にさらに３０
ｇ／ｇのグルコースを添加した培地 ７５０−を１！容
培養槽に張に込み％ １２０℃で２０分間高圧滅菌した
後、窒素気流下で冷却した。この培地にこれと同様な培
地を用い１００ｄ容三角フラスクで静置培養して予め調
製したＥｕｂａｃｔｅ−ｒｉｕｍ Ｉｉｍｏｓｕｍ（Ａ
ＴＣＣ８４８６ンの種母培養液約５ａｒｎｌを植菌し、
培養温度３５℃で１５０ ｒ ｐｍでゆっくり攪拌し、
培養ｐＨを７７モニーシ水で７，３にコントロールしな
がら窒素気流下で嫌気培養を行なった。培養開始後１５
時間経経過上び２５時間経過時点でグルコースをそれぞ
れ２５ｇずつ培養槽に添加した。培養開始後、３０時間
でビタミンＢ の生産量は約６１１９／ｌであり、乾燥
菌体１，９あたりの含有量は約０．３０１９であった。
さらに培養を継続しても菌の増殖は認められず、ビタミ
ン８１２の生産量も増加しなかった。
ン８１２の生産量も増加しなかった。
比較例 ２
炭素源としてグルコースのかわりにフラクト□
一スを添加した培地を使用し、種母培養液にお
１□ ケル炭素もフラクトースとしたほかは比較例１１と同様
にして行なった。
１□ ケル炭素もフラクトースとしたほかは比較例１１と同様
にして行なった。
培養開始後、約２０時間経過および約３５時間経過時点
で７ラクトースをそれぞれ２５ＩＩずつ培養槽に添加し
た。培養開始後、４５時間でビタミンＢ１２生産量は約
８１１１９／ｌであり、乾燥菌体１ｇあたりの８１２含
有量は０．２６８９でちゃ、これ以上培養を継続しても
ビタミンＢ１２の生産値は増加しなかった。
で７ラクトースをそれぞれ２５ＩＩずつ培養槽に添加し
た。培養開始後、４５時間でビタミンＢ１２生産量は約
８１１１９／ｌであり、乾燥菌体１ｇあたりの８１２含
有量は０．２６８９でちゃ、これ以上培養を継続しても
ビタミンＢ１２の生産値は増加しなかった。
実施例 １
炭素源としてグルコースのかわやにメタノールを１０ｍ
１／９添加した培地７５０ｍｊを１１容培養槽に入れ、
１２０℃で２０分間滅菌した。
１／９添加した培地７５０ｍｊを１１容培養槽に入れ、
１２０℃で２０分間滅菌した。
別にろ過滅菌したＮａＨＣＯｉ を２ ｆ／／１１に
なるように添加した後、炭酸ガスによりｐＨ７，３に調
整し、種母培養でグルコースのかわりにメタノールを使
用したほかは比較例１と同様に行た。培養開始後、約４
０時間の時点でビタミンＢ１２生産量を測定したところ
約２７９／ｌ、乾燥菌体１ｇあたｂのビタミンＢ 含有
量は約４岬であり、比較例１および比較例２゛のそれぞ
れにおけるよ秒、ビタミンＢ 生産量は顕著に増１２
ｊ加した。
［実施
例 ２
（□培地組成でグ／に：ｌ−Ｘのかわりに・’ Ｊ
／−ｔ。
なるように添加した後、炭酸ガスによりｐＨ７，３に調
整し、種母培養でグルコースのかわりにメタノールを使
用したほかは比較例１と同様に行た。培養開始後、約４
０時間の時点でビタミンＢ１２生産量を測定したところ
約２７９／ｌ、乾燥菌体１ｇあたｂのビタミンＢ 含有
量は約４岬であり、比較例１および比較例２゛のそれぞ
れにおけるよ秒、ビタミンＢ 生産量は顕著に増１２
ｊ加した。
［実施
例 ２
（□培地組成でグ／に：ｌ−Ｘのかわりに・’ Ｊ
／−ｔ。
“１゛°″／ ｌ ＞ ！ ＃ｊＪ［化°”７２ ｆｌ
／ｌ添加 （した培地７５０！ＩＬｌを
１１容培養槽に入れ、１２ （１・ ０℃で２０分間滅菌した。別にろ過滅菌した
１８°ＨＣＯｓ Ｉｒ ２ 、！ｉ’／ ｌ
Ｋ″ｈ！’）ｍｈｎＬ、ｆＦ−’４に、 。
／ｌ添加 （した培地７５０！ＩＬｌを
１１容培養槽に入れ、１２ （１・ ０℃で２０分間滅菌した。別にろ過滅菌した
１８°ＨＣＯｓ Ｉｒ ２ 、！ｉ’／ ｌ
Ｋ″ｈ！’）ｍｈｎＬ、ｆＦ−’４に、 。
炭酸ガスによ抄ｐＨ７，３に調整し、種母培養でグルコ
ースのかわりにメタノールを使用したに適時添加しなが
ら行ない、培養開始後２０時間経過した時点で５．６−
シメチルペンズイミダゾールを２０Ｗ／ＩＫなるように
添加した。
ースのかわりにメタノールを使用したに適時添加しなが
ら行ない、培養開始後２０時間経過した時点で５．６−
シメチルペンズイミダゾールを２０Ｗ／ＩＫなるように
添加した。
培養開始後約４０時間経過の時点で乾燥菌体１９あたり
のビタミンＢ 含有量は４．８■であ抄ビタミンＢ 生
産量は３３ダ／ｌであった。
のビタミンＢ 含有量は４．８■であ抄ビタミンＢ 生
産量は３３ダ／ｌであった。
嫌気性微生物であるニーバクテリウム属に属する微生物
を、安価！かつ安定的に供給されるメタノールを炭素源
として培養することにより医薬品および飼料添加剤など
として価値の高いピタミ、ンＢ を少ない工水ルギーで
、雑菌に汚染される危険性が小さく、揮発性培地成分の
揮散量が減少し、工業的に極めて有利に製造することが
可能となった。
を、安価！かつ安定的に供給されるメタノールを炭素源
として培養することにより医薬品および飼料添加剤など
として価値の高いピタミ、ンＢ を少ない工水ルギーで
、雑菌に汚染される危険性が小さく、揮発性培地成分の
揮散量が減少し、工業的に極めて有利に製造することが
可能となった。
特許出願人 三菱瓦斯化学株式会社
代表者長野和吉
Claims (1)
- ユウバクテリウム（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属に属し
、メタノール資化性を有し、かつ、ビタミンＢ＿１＿２
を生産しうる微生物を、メタノールを炭素源として嫌気
条件下で培養して、ビタミンＢ＿１＿２を該微生物の菌
体内に生成蓄積させることを特徴とするビタミンＢ＿１
＿２の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60177838A JPS6240295A (ja) | 1985-08-13 | 1985-08-13 | ビタミンｂ↓１↓２の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60177838A JPS6240295A (ja) | 1985-08-13 | 1985-08-13 | ビタミンｂ↓１↓２の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6240295A true JPS6240295A (ja) | 1987-02-21 |
| JPH054073B2 JPH054073B2 (ja) | 1993-01-19 |
Family
ID=16037998
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60177838A Granted JPS6240295A (ja) | 1985-08-13 | 1985-08-13 | ビタミンｂ↓１↓２の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6240295A (ja) |
-
1985
- 1985-08-13 JP JP60177838A patent/JPS6240295A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH054073B2 (ja) | 1993-01-19 |
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