JPS6253665A - 抗血液凝固剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は抗血液凝固剤に関する。

近年、臨床医学の発達によシ予防医学又は治療の状況判
断として血液検査のけたす役割は極めて大きいものとな
っている。このような状況にともなって血液検査用に採
血した血液の凝固を防止する抗血液凝固剤の開発が盛ん
に進められている。

又、体外循環回路、人工臓器等治療時等に血液に接触す
る材料表面での血液凝固防止等にも抗血液凝固剤の開発
が進められている。

本発明は、特にこれらの目的に適した抗血液凝固剤に関
する。

〔従来の技術〕

抗血液凝固剤としてはヘパリンナトリウム系のものが最
も知られており、人工透析、人工肺の治療等の時の血液
の添加、血液に接触する表面の処理が行なわれている。

又、ある種の血液形態検査にはエチレンジアミン四酢酸
の金属塩系のものが抗血液凝固剤として使用されている
。

〔発明が解決すべき問題点〕

しかし、ヘパリンは動物の臓器からの抽出によってのみ
得られるので合成品に較べると量的に充分でなく、製造
コストも格段に大きくなる。

また抽出原料臓器が異なると同一構造、同一性能ノヘパ
リンを得ることが困難であり、かつ、輸入に依存してい
るため安定な価格で供給され難いという欠点を有してい
る。

また、エチレンジアミン四酢酸の金属塩系のものは血液
形態検査用の抗血液凝固剤としては使用できるものの、
生化学検査の一種である無機イオンの定量ができないと
か、酵素検査に対して妨害作用を示す等の欠点があり、
このため血液検査にあたっては各々の検査項目に応じて
種々の抗血液凝固剤を選んで用いたシ、わざわざ血液か
ら血清を分離してから測定するという血清分離法を採用
しなければならないといった繁雑な方法を余儀なくされ
ていた。

そこで安価で抗血液凝固性を有し、しかも多種にわたる
血液検査に対して悪影響を与えない抗血液凝固剤の開発
が要望されているが、このような要望を満足する抗血液
凝固剤は未だ開発されていない。

かかる現状に鑑み鋭意検討を行なった結果、種々の血液
検査に使用し得る抗血液凝固剤に関する本発明に到達し
たものである。

〔問題点を解決するための手段〕

即ち本発明の要旨は、ポリアリルアミン中の第１級アミ
ノ基のうち、ｉ　ｍｏｌ　％以上、好ましくは５　ｍｏ
１％以上がスルホン化されてなるスルホン化ポリアリル
アミンを主成分とする抗血液凝固剤にある。

とのスルホン化ポリアリルアミンはアルカリ金属又はア
ルカリ土類金属の水酸化物によシ部分的に又は完全に中
和されていてもよい。

ポリアリルアミンはアリルアミンの重合ニより得られる
ものであり、通常アリルアミン無機酸塩を水溶液中でラ
ジカμ重合することによりポリアリルアミン無機酸塩を
得たのち、無機酸を除去することによって得られる無機
酸としては通常塩酸が使われている。無機酸を除去する
方法としては、塩基性イオン交換樹脂を用いる方法、透
析法あるいはカセイソーダなどの強塩基による中和反応
によシ生成した塩化ナトリウムなどの生成塩をポリアリ
ルアミンの良溶媒であるメタノール中に沈殿させてＰ別
する方法などがある。

又、ポリアリルアミンの第１級アミノ基の１！ｎ０１−
以上、好ましくは５ｍ０１−以上がスルホン化されてい
る必要があシ、スルホン化度が１ｍｏｌ　４未満ではス
ルホン化された官能基が少なすぎて抗血液凝固性が充分
には発揮され難い。

このスルホン化されたポリアリルアミンバーｔのまま即
ちスルホン酸形のままで用いることもできるが、スルホ
ン酸基の一部又は全部をアルカリ金属あるいはアルカリ
土類金属の水酸化物又は水酸化アンモニウムで中和しで
あることが好ましい。

ポリアリルアミンの分子量（重量平均）は１０００〜１
０万程度であることが好ましい。

以下に本発明の抗血液凝固剤を得るためのポリアリルア
ミンのヌルホン化方法について述べる。

ポリアリルアミンのヌルホン化方法としては、クロルス
ルホン酸を反応させスルホン化する方法及び熱１１３硫
酸によりスルホン化する方法がある。

クロμスルホン酸によるヌルホン化方法は、ポリアリル
アミンをメタノ−μなどの溶媒に溶解させておき、クロ
ルスルホン酸を適当量添加し反応させる事により出来る
。溶媒としてはメタノール、イソプロパノ−μなどのア
μコー〃類、アセトン、メチμエチμケトンなどのケト
ン類およびクロロホルム、四塩化次素、ジクロルエタン
などのハロゲン化炭化水累が使用出来る。又ポリアリル
アミンの溶媒に対する濃度は０．５重量％以上５０重量
係以下とすべきである。

α５重重量未満では溶媒使用量が多くなり過ぎてクロル
スルホン化後のポリマーの回収が困難となる。又、５０
重量％を越える濃度ではクロμスルホン化反応時の反応
熱の制御が困難となる。又、クロルスルホン酸の使用量
は、ポリアリμアミ７１００重量部に対し、１（１，０
重量部以上とするのが好ましい、１０．０重量部未満の
場合はスルホン化反応が充分には進行しな（なる。

但しポリアリルアミンのアミノ基のウチ、第１級アミノ
窒素の２つの水素を両方ともスルホン化する事は難しく
、通常、片方のみのスルホン化にとどまる。

次に、熱濃硫酸によるスルホン化方法は、９６乃至１０
０重量％の純度を有する濃硫酸をポリアリルアミンに直
接添加し、加熱する事によりスルホン化出来る。ここで
、ポリアリルアミンに対して反応させる硫酸の量及び加
熱温度によジスルホン化程度が決まる。すなわち、使用
される硫酸の量は、ポリアリルアミン１００ｆｉｉ部に
対し、５０重量部以上とすべきである。

５０重世部未満では硫酸によるスルホン化が有効に進行
しない。濃硫酸はポリアリルアミンに徐々に加えられ、
局所的に大量に添加しポリアリルアミンからの脱水反応
を引き起こすべきでない。次に濃硫酸添加後の反応温度
は、１００℃以上２００℃未満の温度を３０分から１２
０分間加えるべきである。高温の場合は比較的短時間で
スルホン化が終了し、低温の場合は１２０分程度の時間
でスルホン化が終了する。このスルホン化程度は、フー
リエ変換赤外吸収スペクトμによる分析によシ確認する
事が出来る。

以上のようにして反応されたポリアリルアミンのスルホ
ン化化合物は未反応のクロルスμホン酸、硫酸などを含
む為、これを精製によυ除去する。例えばポリアリルア
ミンのスルホン化化合物を水に溶解させメタノ−μ、イ
ソゾロパノール等のアルコール又はアセトン、メチμエ
チルケトンなどのケトン中に滴下し再沈澱させ分離後乾
燥する事によシネ納物を除去する事が出来る。この精製
時に溶解させる水の量は出来るだけ少ないことが好まし
い。従って再沈澱する場合のアルコール又はケトン中に
滴下するポリアリルアミンのスルホン化化合物水溶液の
濃度は１０重量％以上８０重ｉチ以下、好ましくは３０
重量−以上６０重量％以下とするのが好まし′い。１０
重ｉ％とするとアルコ−ｐ又はケトン中に滴加した時に
析出するポリアリルアミンのスルホン化化合物の量が少
量となり回収率が低下する。又８０重量−以上とすると
スルホン化化合物の水溶液の調整が困難となる。

ポリアリルアミンのスルホン化化合物の中和は、スルホ
ン化化合物の水溶液を作成し所定ののアルカリ金属ある
いはアルカリ土類金属の水酸化物又は水酸化アンモニウ
ムの水溶液を添加し中和する事によ）出来る。ここで用
いられる中和剤としては水酸化ナトリウム、水酸化カリ
ウム、水酸化マグネシウム、水酸化バリウム、水酸化ア
ンモニウムなどが挙げられる。スルホン化化合物を中和
剤で中和した反応物も、アルコ−μ等を利用した再沈澱
法により精製する事が出来る。

本発明の抗血液凝固剤は、ポリアリルアミンのスルホン
化化合物又はその部分あるいは完全中和物を各々単独で
又は混合して用いる事が出来る。この際血液検査結果に
影響を与えない程度の微量のヘパリン塩、蓚酸塩、蓚酸
複合塩、クエン酸塩等を含んでいてもよい。

〔実施例〕

以下実施例により本発明をさらに詳しく説明する。

なお、実施例においてスμホン化ポリアリμアミンのス
ルホン化度はフーリエ変換赤外吸収スペクトル分析によ
シ行った。

実施例１ 分子量ＩＱ、Ｇｏｏのポリアリルアミン（日東紡績社製
ＰＡＡ−ＨＣＬ−Ｌ　）　５　Ｉ！をメタノ−／Ｌ１５
０−に溶解させた。ここへクロクスμホン酸２〇−を徐
々に添加した。添加を終了したのち、攪拌を行いつつ６
０℃に昇温し、３０分間反反応度を維持して反応を終了
した。この際にポリアリルアミンのスルホン化反応生成
物は、溶媒に不溶な物質として析出してくる為、これを
ガラスフィルターを用い九口過により分離した。この生
成物に水５ｃｃを添加しこの水溶液を攪拌したメタノ−
／Ｉ／２００−中へ徐々に滴下する事によシ再結晶化さ
せた。生成した反応生成物を分離し減圧乾燥することに
よシ結晶状粉末五８ｙを得た。この粉末のスルホン化程
度を測定したところポリアリルアミンの−ＮＨ，基のう
ち３８チがスルホン化していた。この粉末の一部を採取
し水で溶解して１０ｗｔ％水溶液を調整した。

この１０　ｗｔチ水溶液５μＬ、２μｔ、１μＬ　を採
取しそれぞれ試験管に入れ鮮血を約１−ずつ添加した。

添加後３時間での凝血の有無を目視により測定したとこ
ろ、いずれのサンプ／Ｌ／についても凝血しなかった。

これらのサンプルについて光学顕微鏡によシ血液の形頷
観察を行ったところ、赤血球・白血球・血小板等に変化
はみとめられなかった。

実施例２ 次に、クロμスμホン酸添加量を種々の量について検討
した。この際原料のポリアリルアミン量は５．０ｇとし
反応温度・反応時間・精製方法などは実施例１と同様と
した。結果を第１表に示す。

表１からみて、クロルスルホン酸の添加量を減少し、ス
ルホン化程度が１チ未満の場合（比較例）は抗血液凝固
剤として作用しない事が判った。

第１表 壷抗凝血性の判定は以下のようにした。

（１）　　ポリエチレンイミンのスルホン化物の１ｖｔ
％水溶液１００μｔを試験管に入れ、これに鮮血をｔＯ
ｇＩｔ加え数回混和したのち静置し、 （２）　　３０分間隔で５時間凝血の有無を目視する。

凝血しなかった場合はＯｌ一部凝集が認められる場合は
Ｘとした。

（３）凝血しなかった場合の血液については光学顕微鏡
により血小板、血球の形態の変形の有無を調べた。

実施例３ 実施例１で作成したポリアリルアミンのスルホン化物１
ｇを採取し、水９ｃｃを添加して溶解させ反応生成物の
１０　ｖｔチ水溶液を作成しｆｃ、。

ここへ４Ｎ−苛性ソーダ水溶液２．２ｔｄを添加し中和
した。この水溶液を４００ｄメタノ−μ中へ徐々に滴下
し再結晶化させた。生成した反応生成物を分離し減圧乾
燥させ結晶状粉末ＣＬ６５Ｊを得た。

この結晶状粉末について、実施例２で行なったと同様の
抗凝血性試験を行なった。結晶状粉末の１．　Ｏｗｔ％
水溶液５０μＬを試験管に採取し血液約１．０−を添加
して血液凝固性を測定したが５時間後でも凝血は認めら
れなかった。

又、このサンプμについて顕微鏡観察を行なったところ
、赤血球・白血球・血小板の凝集は認められなかった。

実施例４ 分子量１へＯＯＯのポリアリ！アミン５Ｆを採取し、こ
こへ純度９８ｗｔ−の濃硫酸５ｇを徐々に滴下し混合し
た。次にこの硫酸溶液を１２０℃に加熱し９０分間この
温度を維持した。この際硫酸溶液の攪拌は維持して、局
所的に加熱されないようにした。この反応液に水１０ｃ
ｃ　を添加し溶解させたのち、メタノ−Ａ１５００−中
へ滴下することによシ反応物を再結晶化し残余の硫酸を
メタノ−μにより除去した。分離した反応物は減圧乾燥
して結晶状粉末２．７ｇを得た。

この反応生成物のスμホン化度を測定したところ２２チ
であった。この結晶状粉末のｔ　Ｏｖｔ％水溶液を作成
し、１００μｔ１５０μｔを試験管に採取し血液を各々
約１．ロー添加して血液凝固性を測定した。血液添加後
５時間経過しても凝血は認められず、これらのサンプ〜
について顕微鏡観察を行なったところ、赤血球・白血球
・血小板の異常は認められなかった。

〔発明の効果〕

本発明の抗血液凝固剤は化学工業製品であるポリアリル
アミンを用いて簡単に合成するととができ、従来の抗血
液凝固剤に較べ安価であ夛、かつ充分な抗血液凝固性を
示し、血球形態変形をおこさないという特徴を有する。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、ポリアリルアミン中の−ＮＨ＿２基の１ｍｏｌ％以
   上がスルホン化されてなるスルホン化ポリアリルアミン
   を主成分とする抗血液凝固剤。 ２、スルホン化されたポリアリルアミンがアルカリ金属
   あるいはアルカリ土類金属の水酸化物又はアンモニウム
   塩で少なくとも部分的に中和されていることを特徴とす
   る特許請求の範囲第１項記載の抗血液凝固剤。