JPS625995A - Ｓ−フアルネシルペプチド - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はＳ−ファルネシルペプチドに関する。

異担子菌類酵母に属する　Ｒｈｏｄｏｓｐｏｒｉｄｉｕ
ｍｔｏｒｕｌｏｉｄｅｓ　　やＴｒｅｍｅｌｌａ　ｍｅ
ｓｅｎｔｅｒｉｃａか、その生活史で一倍体酵母から二
倍体にうつろ過程でホルモン様物質が分注・され、その
物質の誘導によって接合管をのばして細胞融合をおこす
ことはよく知られている酵母の生理的現象である。

この物質がペプチドであることは、その活性物質の探索
から明らかとなって来たが、単純ペプチド、例えばＨ−
Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ　−Ｔ　１ｅ−８ｅｒ−Ｔｒｌ
）−Ｔｈｒ　−Ａｒｇ　−Ａｓｎ　−Ｇ　ｌｙ　−Ｃｙ
ｓ　−ＯＨやＨ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−８
ｅｔ−Ａｌａ−Ｐｒｏ　−Ｇ　ｌｙ　−Ａｓｎ　−Ｇ　
ｌｙ　−Ｔｙｒ　−Ｃｙｓ　−０１−１のようなその構
造かホルモン様物質と関連があると考えられるペプチド
類には全く生理作用か認められない。

この事実は単純ペプチドでは異担子類酵母に作用を示さ
ないことを示している。若し、これら酵母に作用を示す
物質が得られろならば、酵母の育種。

種の改良等に有効に利用できるばかりてなく、また生化
学１分子生化学研究の重要な試薬ともなりうるちのであ
る。

本発明者らは、これら活性物質に脂溶性残基が結合して
いるとの推定のらとに、各種の脂溶性残基をシスティン
の−５Ｈ基に導入する方法を検討し、その新規導入方法
を開発オろと共に、この方法によって製造されたＳ−フ
ァルネシルペプチド類が天然品に劣らない強い接合管形
成促進作用を示すことを知見し、本発明を完成したもの
である。

すなわち本発明は、 式 Ｈ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−１１ｅ−３ｅｒ−Ｔｒｐ
−Ｔｈｒ−Ａ　ｒｇ　−Ａｓｎ　−Ｇ　ｌｙ　−Ｃｙｓ
　（Ｓ　−ｆａｒｎｅｓｙｌ）−Ｎ　Ｈ２（１） または上式のＣ−末端かカルボン酸てあろＳ−ファルネ
シルペプチドに関するものである。

本明細書においてアミノ酸ｂ　Ｌ　＜　＋、：ｌその残
基。

ペプチド、保護基、使用試薬等ｉ」：ｒ［１ＰＡ（＞Ｉ
ＵＢの命名委員会で採用された略号または当接分野にお
いて慣用されている略号が用いられろことがあり、かか
る略号と１．ではたとえば下記の略号があげられろ。

Ａｌａ　　　アラニン Ａｒｇ　　　アルギニン Ａｓｎ　　・　アスパラギン Ａｓｐ　　・　アスパラキン酸 Ｃｙｓ　　　ンステイン Ｇｌｕ：　　グルタミン酸 ｃｒｙ　　：　　グリノン Ｈｉｓ：　　ヒスチジン Ｔｌｅ：　　イソロイシン Ｐｒｏ：　　プロリン Ｓｅｒ　　　セリン Ｔｈｒ　　・　スレオニン Ｔｒｐ　　＋　　）リブトファン Ｔｙｒ　　　チロノン Ｂｏｃ　　：　　ｔ−ブトキノカルボニルＡｏｃ　　　
アミルオキン力ルポニル Ｂｕｔ　　：　　ｔ−ブチル Ｚ　　：　ベンジルオキノカルボニル Ｂｚｌ　　：　　ヘンノル Ｂｚｌ（ＣＬ）　：　ｐ−クロルベンジルＴＯ８トノル ＤＣＣ：　　Ｎ、Ｎ’−ノンクロへキノルカルホノイミ
ド ＤＣＩＩＡ　　：　　ンンクロヘキンルアミンＨＯＮＢ
　　：　　Ｎ−ヒトロギシー５−ノルホルネン−２゜３
−ノカルポキノイミド ０１１８　　：　　Ｌヒドロキシ−５−ノルボルネン−
２，３−ジカルボキシイミドエステル ＴＦＡ　　：　　）リフルオロ酢酸 ＤＭＦ　　：　　ジメチルホルムアミドなお、上記各ア
ミノ酸の略号は対応するアミノ酸残基の表示にらそのま
ま用いられ、アミノ酸またはその残基を上記略号で表示
する場合、特に明記しない限り■７一体を意味するもの
とする。

本発明のＳ−ファルネシルペプチドは、式（ＩＩ）Ｈ−
Ｔｙｒ　−Ｐｒｏ　−Ｇ　ｌｕ　−ｒ　ｌｅ　−Ｓｅｒ
−Ｔｒｉ）−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ａｓｎ　−Ｇ　ｌｙ　−
Ｃｙｓ−ＯＨのペプチドを含水ジメチルホルムアミド中
マグネシウムオキサイドの存在下でファルネシルブロマ
イドと反応させろことによって得られろ。式（ｎ）のペ
プチドは該当する保護ペプチドから保護基を除去するこ
とによって製造されろ。それら公知の方法については、
“Ｔｈｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ　”第１巻（１９６６年）
。

Ｓ　ｃｈｒ６’ｄｅｒとＬ　ｕｂｋｅ著、　　Ａｃａｄ
ｅｍｉｃ　　Ｐｒｅｓｓ。

Ｎｅｗ　　Ｙｏｒｋ、Ｕ、　Ｓ、　Ａ、“ペプチド合成
”東屋ら著、丸善株式会社（１９７５年）、または日本
生化学金輪、生化学実験講座１．“タンパク質の化学■
、化学修飾とペプチド合成”東京化学同人（１９７７年
）などの文献に詳細に説明されている。

以下簡単に原料ペプチドの製造方法について述べると、
まず目的とするボＩ＋ペプチド金購成しうる部分アミノ
酸ま＆はそのペプチドとその残部全構成しうる化合物子
公知のペプチド合成手段によって縮合させる。合成手段
としては、たとえばアジド法、クロフィト法、酸無水物
法、混酸煕広物法、ＤＣＣ法、活性エステル法、ウッド
ワード試薬ｒｔｌ−用いる方法、カルポジイミダゾ−μ
法、ｅ化還尤法、ＤＯＯ−アディティブ法（ＨＯＮＢ、
１−ハイドロオキシベンゾトリアシー／Ｌ／、Ｎ−ハイ
ドロオキシスクシンイミド等全アディティブとして使用
する）などが挙げられる。本心合反応？行なう前に、そ
れ自体公知の手段により原料の反応に関与しないカルボ
キシ、”基、アミノ基全保護したり、水酸基、チオール
基を保護して置くことが好ましいが、保護手段としては
カルボキシル基は℃−アｐキルアミン堪（例えば、トリ
エチルアミン、Ｎ−メチジモルホリン等）や金属塩（例
えば、ナトリウム、カリウム、リチウム塩等）として保
護してもよく、ま走エステル（例、メチル、エチル、ベ
ンジル、ｐ−クロルベンジル、１−ブチル、℃−アミル
等のエステル）として保護してもよい。アミノ基の保護
基としてはベンジルオキシカの保護基としては、たとえ
ばベンジル、トシル。

２、４−ｓ）ニトロフェニル、ｔ−プチルオキシカルボ
ニμ、カルボベンゾキシ等があげられる。アルギニンの
グアニジノ基の保護基としては、たとえば、ニドｐ基、
トシｐ基、カルボベンゾキシ。

イソポルニルオキシカルボニＡ／、アダマンチルオキシ
カμポニ／ｌ／等が例示される。またチロシン。

セリンの水酸基の保護手段としてはベンジル、ｔ−７’
ｆｌＶ、　　ｔ−アミＡ４を保護基とするエーテル等が
、チオ−μの保護手段としてはベンジＡ／、　　ｐ−メ
トキシベンＳ）Ｎ、ｐ−メチルベンジルやｔ−ジメチル
を保護基とするチオエーテル等が例示される。

ペプチドＭ合反応は通常用いられる溶媒甲で適宜行うこ
とができ、かかる溶媒としては、たとえばｆｆＸま＆は
含水のジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキサイド
、ピリジン、クロロホルム。

ジオキサン、ジクロルメタン、テトフハイドロフフン、
酢酸エチ／１／あるいはこれらの適宜の混合物が使用さ
れる。反応は一般に一り０℃〜＋６０ｂ程度の範囲の温
度で行われる。また本発明における原料化合物は固和合
成法圧よっても容易に製造することができる。

このようにして得られた保護されたシスティン含有ペプ
チドは、保護基金脱原してチオ−ｙ・ペプチドとして反
応に供する。保護基の脱離には、硫黄の存在のため接触
還元は好ましくなく、たと工ば弗化水素、メタンスルホ
ン酸、トリプルオロメタンスルホン酸などによる酸分解
反応による脱離が好ましい、これらの反応は一般にアニ
ソールの存在下−２０Ｃから＋４０′ｃ程度の温度で行
われる。この様にして製造されたＮ料ベグチドは、反応
終了後、自体公知のペプチドの分離手段、たとえば分配
、抽出、再沈殿、カフムクｐマトグフフイーなどＫよっ
て精製することができる。

さて、本発明？こおＬ）て式（１７）のペプチドの一９
Ｈ基にファルネシル基を導入する方法は、上記の原料ペ
プチドを含水ジメチルホルムアミドに溶解し、マグネノ
ウムオキサイドを塩基成分と１．てファルネシルブロマ
イドを反応せしめろことによって行われろ。

含水ジメチルポルムアミド溶液は一般に含水量１０−７
０容量％、好ま（２くは３０−６０容量％であり、マグ
ネシウムオキザイド量はペプチドに対しモル比で１−Ｉ
Ｏ当楢、好ましくは２−４当量を使用する。またファル
ネシルブロマイドはペプチドに対するモル比で１−ＩＯ
当量、一般には２−４当量が好ましい。反応は一般に−
＋ｏ０ｃ〜６０℃、好ましは００６〜３０°Ｃで１〒ｔ
）れ、また反応時間は通常３時間〜１２時間程度か好ま
しい。

カ＜シて生成オろＳ−ファルネシルペプチド（，１）は
、自体公知の分離精製手段（例、分配、抽出、再沈殿、
カラムクロマトクラフィー）によって反応液から単離す
ることができる。

本反応を例えばＨ機塩基（例、トリエチルアミン、ピリ
ジン等）や曲の金属塩居（例、炭酸水素ナトリウム、水
酸化ナトリウム、酢酸水銀、硝酸銀等）を使用して行う
と、反応は殆んど進行しないか、目的物を得ろことが出
来ない。また、溶媒としてメタノール、無水ンメチルポ
ルムアミト、含水らしくは無水のテトラヒドロフラン等
を使用して行っても収率よく目的物を得ろことが出来な
い。

従って、上記の方法は式（１）のＳ−ファルネシルペプ
チドの製造法として特に優れたらのであり、酵母ホルモ
ンの科学的合成に有効な手段を提供するものである。

本発明の方法によって製造されろＳ−ファルネシルペプ
チド（１）およびそのＣ−末端かカルボン酸である化合
物は、Ｒｈｏｄｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ　ｔｏｒｕｌｏｉ
ｄｅｓに対し、５〜ｌｏｎｇ／ｒｎｌの低ｍｌで接合管
形成促進作用を示し、強力な酵母性ホルモン作用を有ず
ろちのである。従って、式（１）のＳ−ファルネシルペ
プチドは酵母の育種２種の改良等に有用であり、また生
化学１分子生化学研究の試薬としても用いることかでき
る。一般に本化合物の使用に当たっては、本化合物を少
なくとも上記記載の活性ａ変となるように酵母培養液に
添加すれぼよく、生化学的試薬としては本化合物を放射
性ヨードや蛍光試薬で標識化して使用することもてきる
。

次に実施例を示すか、実施例中、薄層クロマトグラフィ
ーの溶媒系１よ下記の略号を使用する。

Ｒｆ、＝クロロホルム・メタノール・酢酸（９１・０５
）Ｒ「２＝酢酸エチルピリジン酢酸水（６０：２０：６
：１０）Ｒｆ３＝酢酸エチル：ｎ−ブタノール；酢酸−
水（１１Ｒｆ４＝　ｎ−ブタノールピリジン酢酸水（３
０：２０・別に記載のない場合Ｒｆは、メルクンリカゲ
ルプレート６０Ｆ２５４による。

英施例／ Ｈ−Ｔ７ｒ−ＰｒＯ−ＧＬｕ−工１ｓ−３ｅｒ−でｒ′
ｐ−でｈｒ−Ａｒｚ−−４ｓｎ−Ｇｌｙ−０７３（３−
ｆａｒ？１ｅ９７１）−ｆｆＨ，＞よびそのＣ−末端が
万ルボン酸であるＳ−ブアμネシルペプチドの製造 ２０．５ｇとトフェチｙアミン９Ｉ！Ｉｉ上ＤＭ７２０
０１１と溶かして水冷する、これてベンジｙプフマイド
７−　２ｄ全ＤＭＦ３５ｍｉＣ溶屏した溶液全滴下し、
徐々知室温にもどしながらかきまぜる。１６時間後、析
出した不溶珈亡ろ去し、ろ液の溶媒を減圧１云する、残
留物全作酸二チ、シ↓ＯＯ叫に溶かし、４％−炭酸ナト
リクム水と水で洗い、無Ｘ硫酸ナトリウムで吃燥する、
酢酸二千ｙ全留云し、残留物にエーテル金１えると緒晶
となる、ろ取シテエーテルと石油エーテμから再結晶す
る。

収量１４．Ｉｇ（６１−９形）、融点づｌ−６４１１？
、　（α）”−４５，８’　（ｃ　　Ｊ　５３．　）タ
ノーμ） 元素分析　Ｃ，、Ｈ２ｇＯ，ＭＳ＝計算ｇＩＣ６４，Ｑ
ｌ菖Ｅｒ６．’Ｆラフ；　ｆｆ　３．２５ｉ　　３７．
４３．　　分析値−０ＢＺＩ　　７ｇ′ｔ１７ＴＦＡ３
５１Ｔ１１［４解して室温で５分間ふりまぜる、減圧下
ＫＴＦＡ全留去し残留物に少量のエーテルと石油エーテ
）Ｖｋ川え油状の析出物とし、溶媒金のぞいて＃＝酸エ
チＡ１５００１１［溶解シ、トリエチルアミン２．３ｍ
ｌて中和する、この溶液にＥＯＯ−Ｇｌｙ−ＯＮＢ　６
　ｇｆｌえ１２時間かきまぜる。反応液金０．２Ｎ−塩
酸、ζ％−炭酸水素ナトリウム水と水で洗い熊７に硫酸
す）１７ウムで乾燥したのち／８’Ｌｉｆ減圧留去する
と油状の残留物が残る。

Ｉｌｌに溶解して室温で１０分曲ふりまぜる。６．４Ｎ
−塩酸／ジオキサン溶液２．５ｍｌｍｌ金工溶媒を減圧
留去し０！留物を少量のエーテ／Ｌ／全含む石油エーテ
ルで洗いＤＭＦ５０１１１１［溶解する、水冷してトリ
エチルアミン２．７５１１１１７１１え、析出するトリ
エチルアミノ塩酸塩全ろ去する。ろ液にＢｏａ−Ａｓｎ
−ＯＨ３，１８ｇと？ＴＯＮＥ３．７ｇｋ扉え−５１１
；ＶＣ冷却したのちＤＧＣ３，ｌ］４’ｅ７］１えて攪
拌する、約１６時曲かきまぜ、不溶析出物をろ夫し、ろ
液を減圧乾固する、残留物を＃酸エチル３０ＱＩＱＩＫ
溶解し０．２Ｎ−ｍ酸、４％−炭酸γ素ナトリウム水、
および水で洗って無７に硫酸ナトリウムで乾燥する、溶
媒ｔ−ｄ圧留去し、析出する固体金エーテルでろ取する
。

収量５．１ｇ（６９，ａ号）、句点１２１−１２３Ｄ、
　Ｃ−ａ〕”ニー３９．８＠（ｃ　　０．５４゜メタノ
−Ａ／）。

元素分析　０．、Ｈ，，０，ｆｆ、３：　　計算ｆｉ　
Ｃ５７゜フ９ｉ　　Ｈ６，３６ｉ　　Ｎ　　９，３０；
　　３　５．３２．　　分析値Ｆ　Ａ　３０　ｄｌｌに
溶かし室温で２０分曲ふりまぜ、減圧でＴＦＡを留去し
残留物に６．４Ｍ−塩酸／ジオキサン１．　５ｍｆｔ−
加えてかきまぜたのちエーテルをＪえて生ずる沈殿全ろ
取する、これｔ＝ＤＭ１’５ｏ＋ｕ［溶かしトリエチル
アミン０．９４１１１金冷却下に加えて中和し析出する
トリエチルアミン塩Ｔ（？８ 酸ミノろ去する、ろ液！／ＣＡｏｃ　−Ａｒｇ−ＯＥ［
２−９６ｇとＨＯＮＢ　　２．４１ｇ’１ｉ７ｉ１え一
５Ｔ２に冷却しＤＣＣｌ、６６ｇ’ｌ：Ｅ；Ｉえる、室
温で１６時間かきまぜて析出物をろ去し、溶媒を留去す
る、残留物を酢酸エチル３００ｍ１に抽出し、０．２Ｎ
−ｊＪ！酸、４％−炭酸水素ナトリウム水および水で洗
い無水硫酸す）９つふで乾燥する、溶媒金留去し、残留
物全エーテルで粉末としてろ取する、これをアセトニト
リルとエーテルで再沈殿する。

収ｆｉ５．ｓｚｇ（ａｓ−９％）、融点７０で（分ＦＩ
Ｉ）ｓ　Ｃａ〕”：　−ｓ　０．３°　（Ｃｏ、５３５
Ｔ　？　ｓ　　　　　　　ＭＢＺＩ の製造：　Ａｏｃ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｙａ−
ＯＥＺＩ　　５．１ｇ１ＴＦＡ３５１１１１に浴かし室
温テ１５分間ふりまぜたのち減圧乾固し６．４Ｍ−塩酸
／ジオキサン１．　６１１１１ｅ７Ｊｌえてさらにエー
テ／Ｌ”ｔ２１［１えて沈殿としてろ取する、これｉＤ
ＭＩＦ４０１１１１ｃ７ｇかしトリエチルアミン０．’
ｙ８ｔｉｕＴｈｆｆｉえて中和し、析出するトリエチル
アミン塩酸ｊｆｉｋろ去する。ろ液にＥｏｃ−Ｔｈｒ−
ＯＨ１，２７ｇとｌｌｌ０ＮＢ　　１．２５ｇで合成し
たＢｏｃ−Ｔｈｒ−ＯＮＥのジオキサン溶液をＪえて１
６時間かきまぜる、反応終了後溶媒を留去し、残留物を
酢酸エチＡ１５００１１に溶かし、０．２Ｈ−塩酸、４
％−炭酸Ｘ素ナトリウムＸ＞よび仄で洗い、燕７Ｘ置酸
ナトリウムで乾燥して溶媒を留去するａ残留物に少量の
酢酸エチ、４／をｍえてＩフス俸でこするとゲル状結晶
となる、これをエーテル’ｒ７Ｊ］えてろ取する。

収量５．４２ｇ（９）、１％）、融点８０〜８３″Ｃ（
分解）、〔α）”、、’−３３，０°　（ａＱ−室温に
１５分間放置してのち、減圧でＴＦＡを留去し残留物に
エーテルｋｉｌｎえてろ取する、これを７セトニトリ／
’３０］ＩＫ：／！かし、トリエチルアミン０．８［［
１１宿加えて中和し、エーテルを茄えて沈殿とする。上
澄のエーテルを除いて沈殿をジメチルホルムアミドに溶
解し氷冷する、これにＢｏｃ−Ｔｒｐ−ＯＨ１，２８ｇ
とＨＯ！ＪＢ　　９０７！ｌ１ｇから合成したＢＯ（３
−Ｔｒｐ−ＯＮＥのジオキサン浴液全ｍえて室温で１６
時間かきまぜる、反応終了後浴ＩｊＸ’を減圧留去し残
留物を酢酸エチ／Ｌ’５００１１１１に抽出し、０．２
１ｉ−塩酸、４％−炭酸水素ナトリウム水および水で洗
い無水硫酸ナトリウふで乾燥する。溶ｔ！Ｘを留去し、
残留物に少量の酢酸エチル全侃えるとゲル状物となる、
これ全酢酸工ｆ／Ｌ／とエーテルの混合溶媒でろ取する
、ろ取した沈殿を＃酸エチＩＬ／にけんだくし、沸点ま
で２１１温し冷却後ろ取する。

収量５．５５ＥＣ７３，９％）、ｆＩｉｉ点１２点上２
０℃）、〔α）Ｄ−２５，８°（ｃｏ、５ｓ５、メタノ
−／Ｌ’）、　Ｒｆ、　　０．　１８ｇ）　　Ｂｏａ−
Ｂａｒ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−ムｒｇ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−門
ｚＩ Ａｓｎ−Ｇｌｙ−ｃｙｎ−ＯＢｚｌ　　３，３ｇ１２Ｑ
％−１，２−エタンジチオール？含有するジオキサン６
．５ｍ１に溶かし、６．４ＨｊＪｚ酸／ジオキサン１３
ｍ１ｔ−７１１１えて室温に３５分間放置する、溶ｂＪ
″ｊｒ：留去し、残留物にエーテＩＬ”Ｋｍえて粉末と
してろ取する。これｉＤＭｌｌｏｌ［１１［溶かし、ト
リエチルアミン０．　４１１１１ｆｆｉ７１１えて中和
し析出するトリエチルアミン塩酸ミノろ去する、ろ液に
Ｂｏａ−８ｅｒ−ＯＨ６２１■とＨＯＭＢ　　９９０＋
ｎｇと音用え水冷下ＫＤＣＣ７４９１ｎｇを加えてかき
まぜる。室温で１６時間かきまぜたのち、不溶物上ろ失
する、溶媒を減圧で留去し、残留物にエーテｆｉ／１＝
ｚｎえて粉末としろ取する、これ全酢酸エチ／Ｉ／；ピ
リジン；酢酸；水（１２０ｒｌｏ：３：５）の溶媒で充
填したシリカゲルカラム（５−５Ｘ１２，５ｃｍ）Ｋ流
入し、同じ溶媒で溶出する、１４９０−２フ８５頗の溶
出部分を集めてａ脂し、エーテ／Ｉ／ｋｍえ、生ずる粉
末をろ取する。

収量１．９ｇ（５３，）う）、融点１５０−１５３′ｃ
（分解）、　Ｃａ〕２８．２°（ｃ　　ａ、３４．メタ
ノ−／Ｉ／　）　。

元素分析　ＣｇｏＨｙａＯｘｇＮｚｚＳｅ’　　計竜直
Ｃ５５，９７；Ｔ１６．　ｌｌｉ　Ｍ　１３．０６ｉ　
Ｓ　４．９Ｂ、分析値　Ｃ５５，５’７ｉ　Ｈ６，２７
ｉ　Ｎ　１．２．６７ｉ　　Ｓ４、７フ。

ｈ）　　Ｂｏｃ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−ＯＨの製造：　Ｈ−
Ｐｒｏ　−０ｆｆ４、　４ｇｔｒ含水ジオキサ：／　８
０　ｍ１Ｋｇ屏しトリエチルアミン４．〒５ｆｌ１１”
１１え水冷する。この溶液にＥｏｃ−Ｔｙｒ−０，ＥＪ
Ｂ　１１．　　Ｉｇ？、ｉえてはげしくかきまぜる、溶
媒を留去して、４％戻酸水素ナトリウム水８０ｍ１Ｋ溶
解しエーテル５０１１で洗い、氷冷して０．２Ｆｉ−塩
酸で−１２とし析出する油状物全酢酸エチ／Ｌ／ｌｏＯ
［１１１に抽出ナツト酸エチル層を水洗し、無水硫酸ナ
トリウムで乾燥して溶媒全留去する、結晶が析出するの
でエーテル會１えてろ取する。

収４に４．：５ｇＣ４５，４％）ｌ融点１２３−１２６
Ｃ（分解）、　　（α）２２１５５−２３．’６°（Ｃ
Ｏ８５２５，メタノ−／ｌ／）。

元素分析　Ｃｘ９Ｈ２６０ａＨｚ　：計算値　Ｃ６０゜
３０±　Ｈ６，９３；Ｎフ、４０．分析値　Ｃ６０，１
５；　　Ｅｌ　　６−８Ｑｉ　　ｆｆ　　’／、３（Ｊ
ｌ）　　Ｚ−ｍ＋”ｘ−１１ｅ−ＯＢｚｌの弾ａ：Ｅｒ
−工１ｅ−ＯＢＺＩ−パフトルエンスルホン酸塩１４．
２ｇ全酢酸エチル４　Ｑ　Ｏｆｉｌｌにけんだくし、飽
和戻酸ナト１１ウムＣＨＡ　　１５−６ｇ’Ｔｈ酢酸エ
チｆｉ７３００１ｎｌｌｃけんだ（シａ、２Ｎ−＠ｆ、
酸でＤＯＨＡ’ｉ抽出除去する、さらに水洗後、無水硫
酸ナトリウムで乾燥したのち溶媒全減圧で留去する。両
者をテトフハイドロフランと酢酸エチｌｖ（１：　ｌ　
）の混合溶媒１４０ｍ１Ｋ溶解し、ＨＯＮＢ　　１３．
１ｇを］え氷冷してＤＣＣフ、４４ｇＴｈ加えかきまぜ
る。１２時間室温でかきまぜ、析出物をろ去し、溶媒を
留去ののぢ残留物′ｆｒ酢Ｈｚチ、Ａ／３００１１１１
４溶解する。これ’ｔ−ｌＮ−塩酸、４の一炭酸水素ナ
トリクム水、および水で洗い無水硫酸ナトリウムで乾燥
する、溶媒を留去して室温に放置すると結晶化するので
これに石油ベンジンを」えてろ取する。

収量１３Ｅ（１３０％）ｌ融点６５−６８１ｒ。

〔α〕Ｔ−２４，５°（ｃｏ、ｓｏ、メタノ−とともに
メタノールに溶解し、パラジウム黒１ｇをｍえ７Ｘ素を
通じて還元する、パラジウム、川音ろ別し、メタノ−〃
を減圧留去し、残留物をＤＭＦｌｏ　Ｑ　ｌ［ｌＩに溶
解し、水冷下にトリエチルアミン２．８ｍｌ’ｔ７Ｊｌ
える。別にＢｏｃ−Ｔｙｒ−Ｐ’ｒｏ−ＯＨ３゜７８ｇ
とＴｉ０ＮＥ　２．　１６　ｇを酢酸エチルとジオキサ
ン（１：１）の混合溶媒１００［１１１に：溶解しＤＣ
Ｃ！２，２７ｇｔ−２１１えて室温で６時間かきまぜ□
る、析出物をろ云し、このろ液を先のＤＭＦ溶液に１え
、１６時間かきまぜる、反応終了後、溶媒金減圧留去し
、次酸７に累すＩ−ｊＦウム２，５ｇｆ含む水２００−
に抽出してエーテルで洗う、７に属音氷冷し、Ｍ−塩酸
３５１＋１１で酸性とし析出する：！！状物全酢酸エチ
ル２０００１１で２回抽出する。酢はエチル肩を合し水
洗ののち、無７に硫酸ナトリウムで乾燥する、酢酸エチ
／＆／全減圧留去し、残留物全エーテルで粉末としてろ
取する、これ？クロロホルム：メタノー／ｌ／：水（１
０７：４：２）の混合溶媒でシリカゲルカラム（５，５
Ｘ１２．ａｃｉ）に付し同じ溶媒系で溶出し６８０−９
８０ｍｌの溶出部分を集めて溶媒全留去し、残留物をエ
ーテルで粉末としてろ取する。

収ｆｉ３．ｔ５ｇ（ｓｌ、ｏ％）、融点１１５−１１９
℃（分解）、〔α〕曾−４０，２°　（ＣＯ１４６５，
メタノ−１ｖ）。

元素分析　Ｃ３ａＨｓａＯｘ。Ｈ４：計算値　Ｃ６０゜
３４；■γ、　’Ｆ４ｉ　　Ｎ　８．２８．分析値　Ｃ
６０，２２−ＯＢｚｌ　６４４ｆｆ１ｇ’ｊＤ　Ｍ　？
　０．５’１ｌ１１とジオキサン２［［＋１に溶解し、
１．２−エタンジチオ−μ０．３ｍｌと６．４Ｈ−塩酸
／ジオキサン６頗全Ｊえ室温で３０分間ふりまぜる。溶
媒を減圧で留去し、残留物にエーテル金′ＩＩＩえ粉末
としてろ取する１、これ全ＤＭＦ５叫に溶解しトリエチ
ルアミンＱ、３ｍｌ■１θ−０Ｈｂ ０〜−５℃に冷却する、ｒ）　ＣＣ２０６ｍｍ政見て１
６時間かきまぜる、析出する不溶物そる失し溶媒を留去
し、残留物をア七トニ）ＩＩ／Ｌ／と酢酸エチルとで粉
末としてろ取する。

収ｉａ５０ｒｎｇ、（ｔｏ、４％）、Ｆａ１点１００−
１０５℃（分解ハ〔α）Ｄ−２６，６°（ＣＯ０３６５
、メタノ−）ｖ　）　。

元素分析　Ｃａ、Ｈ１２ｏ０２ｓＮｒｅＳｚ’２）１２
０　：計算値　Ｃ５６，７９；　　Ｈ６，６４ｉ　　Ｎ
　１１．９１ｉ　　Ｓ　３゜４１、　　分析値　Ｃ５６
，２３；　Ｈ６−６７薯Ｈユ１＋６７ｉ　　Ｓ　３．９
０゜ アミノ酸分析１分析値（理論値）　：　Ａｒｇｏ、９Ｘ
１）、　Ａｓｐ　ｌ＋０９１）、　　Ｔｈｒ　０．９Ｂ
（１）、　５ｅｒＯ，９ｇ１ｌ、　Ｇｌｕ　０．８’ｆ
ｌ）、Ｐｒｏ　Ｌ　０９（１）、　Ｇｌｙｌ、σ１１．
Ｃｙｓ　　Ｏ，３７（１１，工］−ｅ０．８！ｎｌｌ、
　　ＴｙｒＯＨＩＱ＋　２４ｇとＨＯＮＢ６．５ｇ全全
テトラハイドラフフン２００１に溶解し、水冷下にＤＣ
Ｏ６，８ｇ全１える。４時間後、不溶物音ろ去し、ろ液
全かきまぜながら濃アンモニア水３１１１１６滴下し、
析出する不溶物音ろ別するる液を減圧留去し、残留物全
酢酸エチ／Ｌ／３０ＱＩｌｌＩｉＣ抽出し、水洗ののち
無水硫酸ナトリウムで乾燥する、溶媒を留去し、残留す
る結晶をエーテルでろ取し、さらにメタノールより再結
晶する。

収’！ｔ９．ｘｇ（ａ９，２％）、融点１５０−１５ｘ
ｌｒ、［α］Ｄ−１４，１’（ｃ　　ｏ、５５５゜メタ
ノ−／Ｌ’）、　Ｈｆｘ　　Ｏ１’ＦＢ１’７８　Ｃｚ
ａＨｚａＯａＮｚ３　：計算値　Ｃ５６゜４５；Ｂフ−
１１ｉ　Ｎ　８．２３；　　Ｓ　９．４２．分析値０　
５６．４＋３ｉ　　　Ｈフ、　　１９；　　　Ｈ８，１
５；　　　Ｓ　　９．４４゜Ａｒｇ　Ａｓｎ−Ｇｌｙ　
ＣＪｆＳ　　ＮＨ２Ｚ＞’得られる。

融点１６Ｂ−１７２℃（分解）、〔α〕２令５−５０＋
　０°（Ｑ　　０．０２．ＤＭＦ）アミノ酸分析９分析
ｉ（理論値）　：　Ａｒｇ、１．Ｃ９１１，Ａｓｐ　１
．　Ｏ＆ｌｌ、　Ｔｈｒ　ｏ、９’４１）、　　５ｅｒ
ｏ、　９１１）、　Ｇｌｕ　１．ｎ（１）、　　Ｐｒｏ
　Ｌ　０８（１）、　Ｇｌｙｌ、　０（１）、　　ａｙ
ｓ　ｏ、　７１ｒ、　工１ｅ　Ｑ、８９（１）、　’Ｉ
’ｙｒＯ１８シ１）、乎均１川収率７８．０％。

１）　　Ｈ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−１１ｅ−３ｅｒ
−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−４ｓｎ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（
Ｓ−ｆａｒｎｅｓｙｌ）−ＯＨＴ’ｓ　　　　　　　Ｍ
Ｅｊｚｌ −Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｙｓ−ＯＢｚｌ　　５５
４ｍｙ、ｆアニソールｘ、ａｍ＋共存下に弗化水素２Ｑ
［１１に溶解し、ＯＣで６０分間かきまぜる、弗化）に
素を減圧留去し残留物全水１０１ｎｌＫ抽出しエーテ／
Ｌ１５ａｌｌで洗う、７Ｘ層をアンバーフィト丁ＲＡ−
４１０（酢酸型）の樹脂カラふ（ｌＸ５ｃＺＩｌ）Ｋ通
し、水で洗い、全通過液を合して凍結乾燥し４０５１１
１ｇを得る。これ全セファデック７ＬＨ−２０（２，４
Ｘ１０７ｃｚ）のカラムに付し、ｏ、１ｔＪ−ｍ＝ｔｔ
で溶出し２３７−２８１ｍ１の溶出液を集め凍結乾燥し
て１０６ｍｇ金得る。この乾燥粉末の５３ｍｇ１水０．
３［１１１とＤＭＦｏ、　　４ｒｒｄに浴解し、マグネ
シウムオキサイド９ｍｇＴｈ７１０え次にファルネシル
・ブロマイド（トランス体）１０％を含むイソプロピル
エーテル溶液Ｊ２１［１１１全滴下し、１６時間かきま
ぜる。反応液全メタノ−／Ｉ／：０．ＯＩＭ−酢酸アン
モニウムＸ溶液（３：２）の混合溶媒系に溶かしセプア
デツクスＩ、Ｈ−２０（１−４Ｘ８７Ｃ１＋１）のカラ
ムに付し、同じ溶媒系で溶出して５９５９−７ｚの溶出
部分を集め、溶に！：留留去のち凍結乾燥すると目的の
８−ブアルネシルベブチドが得られる。

収量１６呵、　　Ｒｆ３０．６０ アミノ酸分析１分析値（理論値）　：　Ａｒｇ上０．１
！７１）、Ａｓｐ上０３１）、　Ｔｈｒ　ｏ、　９７α
ｌ、　５ｅｒＯ，９２（１１，Ｇｌｕ　ｘ、ｏｎυ、　
Ｐｒｏ　１．Ｏゴ１）、　Ｇｌｙ１、ｏ（ｘ）、　　ａ
ｙｓ　　ｏ、　６ｎ１）、　　工１ｅ　　０．９’４１
）、　　Ｔ７ｒＯ，９ｇ刀、平均回収臨７５．０％ コ）　　Ｈ−”７ｒ−”ｒｓ−Ｇｉｎ−エエｅ−３ｅｒ
−Ｔｒ；−Ｔ”ｘｘ−ムｒｇ−ＡＳｎ−Ｇｌｙ−Ｃ７ａ
（Ｓ−ｒａｒｉｅｓｙｌ、）−ＮＥ［ａＩＩ！、から目
的のＳ−ファｙネジμペプチドが得られる。

ＲｆＪ　０．６０ アミノ酸分析１分析菫（理論ｆ）：ムｒｇ。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 式 Ｈ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ
   −Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（Ｓ−ｆａ
   ｒｎｅｓｙｌ）−ＮＨ＿２または上式のＣ−末端がカル
   ボン酸であるＳ−フアルネシルペプチド。