JPS625996A - Ｓ−フアルネシルペプチド - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はＳ−ファルネシルペプチドに関する。

異担子菌類酵母に属する　Ｒｈｏｄｏｓｐｏｒｉｄｉｕ
ｍｔｏｒｕｌｏｉｄｅｓ　　やＴｒｅｍｅｌｌａ　ｍｅ
ｓｅｎｔｅｒｉｃａが、その生活史で一倍体酵母から二
倍体にうつる過程でホルモン様物質が分泌され、その物
質の誘導によって接合管をのばして細胞融合をおこすこ
とはよく知られている酵母の生理的現象である。

この物質がペプチドであることは、その活性物質の探索
から明らかとなって来たが、単純ペプチド、例えばＨ−
Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｕ　−Ｉ　Ｉｅ−９ｅｒ−Ｔｒｐ
−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−ＯＨやＨ
−Ｇｌｕ−Ｈ４ｓ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−９ｅｔ−Ａｌａ−
Ｐｒｏ−Ｇ　ｌｙ　−Ａｓｎ　−Ｇ　ｌｙ　−Ｔｙｒ　
−Ｃｙｓ　−ＯＨのようなその構造がホルモン様物質と
関連があると考えられるペプチド類には全く生理作用が
認められない。

この事実は単純ペプチドでは異担子類酵母に作用を示さ
ないことを示してい・る。若し、これら酵母に作用を示
す物質が得られるならば、酵母の育種。

種の改良等に有効に利用できるばかりでなく、また生化
学１分子生化学研究の重要な試薬ともなりうるものであ
る。

本発明者らは、これら活性物質に脂溶性残基か結合して
いるとの推定のもとに、各種の脂溶性残基をシスティン
の−ＳＨ基に導入する方法を検討し、その新規導入方法
を開発すると共に、この方法によって製造されたＳ−フ
ァルネシルペプチド類が天然品に劣らない強い接合管形
成促進作用を示すことを知見し、本発明を完成したもの
である。

すなわち本発明は、 Ｈ−Ｇ　ｌｕ　−Ｈｉｓ　−Ａｓｐ−Ｐ　ｒｏ　−Ｓ　
ｅｒ−Δ１ａ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｔｙ
ｒ−Ｃｙｓ　（Ｓ　−ｆａｒｎｅｓｙｌ　）　−Ｎ　Ｉ
（２（１）または上式のＣ−末端がカルボン酸であるＳ
−ファルネシルペプチドに関するものである。

本明細書においてアミノ酸もしくはその残基。

ペプチド、保護基、使用試薬等は　ＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ
の命名委員会で採用された略号または当該分野において
慣用されている略号が用いられることがあり、かかる略
号としてはたとえば下記の略号があげられる。

Ａｌａ　　：　　アラニン Ａｒｇ：　　アルギニン Ａｓｎ　　：　　アスパラギン Ａｓｐ　　　アスパラギン酸 Ｃｙｓ　　　システィン Ｇｌｕ　　：　　グルタミン酸 Ｇｌｙ　　：　　クリシン Ｈｉｓ　　：　　ヒスチジン ｒｌｅ　　・　イソロイシン Ｐｒｏ：　　プロリン Ｓｅｔ：　　セリン Ｔｈｒ　　　スレオニン Ｔｒｐ　　：　　トリプトファン Ｔｙｒ　　：　　チロシン Ｂｏｃ　　：　　ｔ−ブトキンカルホニルＡｏｃ　　　
アミルオキシカルボニル Ｂｕｔ　　：　　ｔ−ブチル Ｚ　　：　ベンジルオキシカルボニル Ｂｚｌ　　：　　ヘンシル Ｂｚｌ（ＣＬ）・ｐ−クロルベンジル Ｔｏｓ　　：　　トシル ＤＣＣ：　　Ｎ、Ｎ’−ジノクロへキシルカルボジイミ
ドＤＣＩＩΔ　・　シンクロベキジルアミンｔ（ＯＮＢ
　　：　　Ｎ−ヒドロキン−５−ノルボルネン−２゜３
−ンカルポキノイミド ＯＮＢ：Ｎ−ヒドロキン−５−ノルボルネン−２，３〜
ジカルポキンイミドエステル ＴＦΔ　　　トリフルオロ酢酸 ＤＭＦ　　：　　ジメチルホルムアミドなお、上記各ア
ミノ酸の略号は対応するアミノ酸残基の表示にらそのま
ま用いられ、アミノ酸またはその残基を上記略号で表示
する場合、特に明記しない限りＬ一体を意味するものと
する。

本発明のＳ−ファルネシルペプチドは、式（１’Ｊ）Ｈ
−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−３ｅｔ−Ａｌａ−
Ｐｒ。

−Ｇ　ｌｙ　−Ａｓｎ−Ｇ　ｌｙ　−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ　
−ＯＨのペプチドを含水ジメチルホルムアミド中マグネ
シウムオキザイドの存在下でファルネシルブロマイドと
反応させることによって得られろ。式（ＩＩ）のペプチ
ドは該当する保護ペプチドから保護基を除去することに
よって製造されろ。それら公知の方法については、“Ｔ
ｈｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ”第１巻（１９８６年）。

Ｓ　ｃｈｒＯｏｄｅｒとＬｕｂｋｅ著、Ａｃａｄｅｍｉ
ｃ　　Ｐｒｅｓｓ；Ｎｅｗ　　Ｙｏｒｋ、Ｕ、　Ｓ、　
Ａ、“ペプチド合成“東屋ら著、丸善株式会社（１９７
５年）、または日本生化学全編、生化学実験講座１．“
タンパク質の化学■、化学修飾とペプチド合成”東京化
学同人（１９７７年）などの文献に詳細に説明されてい
る。

−４〜 以下簡単に原料ペプチドの製造方法について述べると、
まず目的とするポリペプチド全構成しうる部分アミノ酸
ま′にはそのペプチドとその残部を構成しうる化合物全
公知のペプチド合皮手段によって縮合させる。合波手段
としては、たとえば７ジド法、クロフィト法、酸無水物
法、混酸燕７ＫｖＩＪ法、ＤＣＣ法、活性エステル法、
ウッドワード試薬にを用いる方法、カルボジイミダゾー
ル法、酸化還元法、　　Ｄｅｃ−７デイテイプ決（ＨＯ
ＮＢ、１゜−ハイドロオキシベンゾトリアゾー／Ｉ’、
Ｎ−ハイドロオキシスクシンイミド等ぞアブイブイブと
して使用する〕などが挙げられる。零瑠合反応金行なう
前に、それ自体公知の手段とよう原料の反応に関与しな
いカルボキシμ基、アミノ基？保護した）、水９基、チ
オール基全保護して置くことが好ましいが、保護手段と
してはカルボキシＩｖ基はニーアルキルアミン塵（例え
ば、トグエｆｆｉ／アミン、Ｎ−メチルモルホリン等）
や金属塩（例えば、ナトリウム、カリウム、＋Ｊチウム
塩等）として保護してもよく、またエステｆｉ／（例、
メチｐ、ニチル、ベンジル、ｐ−クロルベンジル、Ｔ、
−ブチル、ｔ−７ミル等のエステル）として保護しても
よい。アミノ基の保護基としてはベンジルオキシカの保
護基としては、たとえばベンジル、トシル。

２．４−ジニトロフェニル、ｔ−ブチルオキシカルボニ
ル、カルボベンゾキシ等があげられる。フルギニンのグ
アニジノ基の保護基としては、たと工ば、ニトロ基、ト
シＡ／基、カルボベンゾキシ。

イソボルニルオキシカルボニル、アダマンチルオキシ力
ルポニｆｉ／等が例示される。またチロシン。

セリンの７に酸基の保護手段としてはベンジ／Ｉ／、　
−３−ブチル、ｔ−アミｙ等全保護基とするエーテル等
が、チオ−ｙの保護手段としてはベンジｌＩ／、　　ｐ
−メトキシベンジ／Ｌ／、　ｐ−メチルベンジル−ｐｔ
〜ブチ／Ｌ／等全保Ｗ基とするチオエーテ／ｌ／等が例
示される。

ペプチド鰯合父２は通常用いられる溶媒中で適宜行うこ
とができ、かかる溶媒としては、たとえば無７Ｋまたは
含水のジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキサイド
、ピリジン、クロロホルム。

ジオキサン、ジクロルメタン、テトフハイドロフラン、
酢酸エチルあるいはこれらの適宜の混合物が使用される
。、反応は一般に一２ａ℃〜＋６ｏｔｒ程度の範囲の温
度で行われる。また本発明における原料化合物は固相合
成法【よっても容易に製造することができる。

このようにして得られた保護されたシスティン含有ペプ
チドは、保護基を脱離してチオール・ペプチドとして反
応に供する。保護基の脱離には、硫黄の存在のため接触
還元は好ましくなく、７＋七えは弗化水素、メタンスル
ホン酸、トリプルオロメタンヌｙホン酸などによる酸分
解反応による脱離が好ましへこれらの反応は一般にアニ
ソ−ｙの存在下−ｚｏｔＴから＋４０℃程度の温度で行
われる。この様にして製造された原料ペプチドは、反応
終了後、自体公知のペプチドの分離手段、たとえば分配
、抽出、再沈段、カラムグロマトグラフイーなどＫよっ
て精製することができる。

さて、本発明において式（ＩＩ）のペプチドの一５Ｉ］
基にファルネンル基を導入する方法は、上記の原料ペプ
チドを含水ツメチルホルムアミドに溶解し、マグネンウ
ムオキザイドを塩基成分としてファルネンルブロマイド
を反応せしめろことによって行われろ。

含水ジメチルポルムアミド溶液は一般に含水量１０”７
０容量％、好ましくは３ｆ）−６０容量％であり、マグ
ネシウムオキザイド量はペプチドに対しモル比で１−１
０当量、好ましくは２−４当量を使用する。またファル
ネンルフロマイドはペプチドに対ずろモル比で１−１０
当量、一般には２−４当量が好ましい。反応は一般に−
１０°Ｃ〜６０°Ｃ５好ましは０°Ｃ〜３０℃て行イつ
れ、ま７二反応時間は通常３時間〜１２時間程塵が好ま
しし）。

カくシて生成するＳ−ファルネンルペブヂト（Ｉ）は、
自体公知の分離精製手段（例、分配、抽出、再沈段、カ
ラムクロマトグラフィー）によって反応液から単離する
ことがてきろ。

本反応を例えは有機塩基（例、トリエチルアミン、ピリ
ジン等）や他の金属塩基（例、炭酸水素ナトリウム、水
酸化ナトリウム、酢酸水銀、硝酸銀等）を使用して行う
と、反応は殆んど進行しないか、目的物を得ろことが出
来ない。また、溶媒としてメタノール、無水ジメチルホ
ルムアミド、含水もしくは無水のテトラヒドロフラン等
を使用して行っても収率よく目的物を得ることが出来な
い。

従って、上記の方法は式（１）のＳ−ファルネノルペプ
チドの製造法として特に優れたものであり、酵母ホルモ
ンのｕ学的合成に有効な手段を提供するものである。

本発明の方法によって製造されるＳ−ファルネンルペプ
ヂド（Ｉ）およびそのＣ−末端がカルボン酸である化合
物は、Ｔ　ｒ’ｅｍｅｌｌａ　　ｍｅｓｅｎｔｅｒｉｃ
ａに対し、１〜２ｎｇ／、ｄの低濃度でそれぞれ接合管
形成促進作用を示し、強力な酵母性ホルモン作用を有す
るものである。従って、式（Ｉ）のＳ−ファルネンルペ
プチドは酵母の育種１種の改良等に有用であり、また生
化学１分子生化学研究の試薬としても用いることができ
ろ。一般に本化合物の使用に当たっては、本化合物を少
なくとも上記記載の活性濃度となるように酵母培養液に
添加すればよく、生化学的試薬としては本化合物を放射
性ヨードや蛍光試薬で標識化して使用することもてきる
。

次に実施例を示すが、実施例中、薄層クロマトグラフィ
ーの溶媒系は下記の略号を使用する。

Ｒｆ、−クロロホルム・メタノール：酢酸（９：１：０
．５）Ｒｆ２−酢酸エチル：ピリジン：酢酸：水（６０
：２０・６１０）Ｒｆ３−酢酸エチル：ｎ−ブタノール
：酢酸：水（１：ｌ：１・１） Ｒｆ、−ローブタノール：ピリジン、酢酸：水（３０・
２０゜６　：　２４） 別に記載のない場合Ｒｆは、メルクシリカゲルプレート
６０　Ｆ’　２．による。

実施例Ｉ Ｈ−Ｇ　ｌｕ　−Ｈｉｓ　−Ａｓｐ　−Ｐ　ｒｏ　−Ｓ
　ｅｔ　−Ａ　ｌａ　−Ｐ　ｒｏ−Ｇ　ｌｙ　−Ａｓｎ
−Ｇ　１ｙ−Ｔｙｒ　−Ｃｙｓ（Ｓ　−ｒａｒｎｅｓｙ
ｌ）　　ＮＨ２およびそのＣ−末端がカルボン酸である
Ｓ−ファルネシルペプチドの製造・１）原料の合成 門灯 ａ）　　Ｂｏｃ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−０１１−ＤＣＨＡＯ
製造：■−Ｐｒｏ−ＯＨｔｓ、　　９ｇｆｆ１）リエチ
μアミン８１Ｉｌ！ととモ ら合成したＢｏｃ−Ａｓｐ−ＯＮＢのジオキサン溶液全
１えて１２時間かきまぜる。反応液全減圧留去し、残留
物と飽和炭酸水素す）！１ウム水を１えて溶解しエーテ
ルで洗ったのち０℃に冷却して、Ｎ−塩酸をｍえｐ！１
２〜３とし酢酸エチμ２００１０１で２回抽出する。酢
酸エチ／Ｌ’層全水洗し無Ｘ硫酸ナトリウムで乾燥する
、溶媒金留去し残留物をエーテｐ３ｏｏｍｌＫ溶解しか
きまぜながらＤＣＩＩＡ７，９６１１１ｔ−ｍえる。析
出する結晶全ろ取してエーテ〃で洗う。

収量２１ｇ（８７，５％）、融点１１Ｂ−１２１℃、〔
α）”、’−３０−３°　（ｃ　　Ｏ−５９５゜メタノ
−）ｖ　）。

元素分析　Ｃｓ　ｘｉｓ　ｇｏ？Ｎｉ　：計Ｘ５ＨＣ６
５゜８６ｉ　１１８．５４ｉ　Ｎ　６．９６０分析値　
０６５−８９ｍｌにけんだ＜Ｌｏ、２ＦＩ−硫酸と水で
洗浄して、無水硫酸す１１ウムで乾燥する。酢酸エチ／
Ｉ／ｌ−減圧留去し、残留油状物をＴ　Ｆ　Ａ　１５１
１１に溶解する、１５分後浴媒を留去しエーテルをｍえ
てゲル状物としてろ取する。これＴＣＤＭＦ５０ｆｆＬ
ＩＩＩｊ溶解し冷溶液音用えて室温で１６時間かきまぜ
る、反応終了後溶媒全留去し、残留物金飽′Ｓ戻酸水素
ナトリウム水に溶解し二−テ／Ｉ／−＋１＠洗ってのち
氷冷してＮ−塩酸フＨ２〜３とする。析出する油状物を
酢酸エチ／Ｉ／１００Ｉｎ１で２回抽出し、酢酸エチμ
属音合し水洗ののち無水硫酸ナトリウムで乾燥する、酢
酸エチルを減圧留去し残留物全エーテルで粉末としてろ
取する。収量２．３ｇ、このものは、ＥｏｃＴ￥：　、
　胃；Ｐｒｏ−ＯＨとＢｏｃ−、ＪｃＩｌ（：：３．、
：　Ｐｒ。

−ＯＨの混合物のため、これをさらに精製すると−Ｐｒ
ｏ−ＯＥＩ　　の混合物１，８ｇ１ｌ−ハイドロキシベ
ンフトワアゾー）ｖ６８４■とと本にデトフハイドロ７
フンｘｏｍｔ＜溶解し、３０分間かきまぜたのち戸トフ
ハイドロフヲン金留去し、残留物をＴ　Ｆ　Ａ　７　ｒ
ｎｌ、Ｖｃ溶解する。２０分後浴ＦＡを留去し、エーテ
ル金部えて粉末としてろ取する、これ１ＤＯＦｉＥ　　
のジオキサン溶液音用えて１６時間かきまぜる、溶媒を
留去し、飽和炭酸水素ナトリウム水に抽出してエーテル
と酢酸エチルで洗い、水冷下ｆＣＨ−塩酸ｆｆ１２１Ｑ
えて２１１２〜３とする。＃酸エチ〃１００　ＩＩＩで
２＠Ｊ抽出し、抽出液を合して水洗し、無Ｘ硫酸ナトリ
ウムで乾燥する、溶Ｋｋ留去し、残留物をエーテルで粉
末としてろ取し、酢酸エチルとエーテルから再沈殿する
。

収量１．４２ｇ（６９，１％）、融点１１８−ｘ２ｘ’
Ｄ（分解Ｌ　Ｃα〕’ニー３６．８°　（ＣＯ６５６５
，メタノ−／Ｌ／）、　Ｒｆ、　　０．４２Ｒｆ、　　
Ｏ＋　７０゜ ｃｌ）　　Ｅｏｃ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−ＯＨの製造：Ｅｏ
ｃ−Ａｌａ−ＯＲ９，２６ｇとＨＯＭＥ９．０ｇ全アセ
トニトリ／１１５０［［１１に溶解し、氷冷下Ｄｃｃｘ
１ｇｋＨ１えて４時間かき混ぜる。生ずる尿素体をろ去
し、ろ液を減圧乾固する。残留物をＤＭＦ２０１１１１
に溶かす。

一方、Ｈ−Ｐｒｏ−ＯＨ６，９ｇｉＤＭＦ２Ｑｍｌと水
１０　ｍＪに加熱溶解し、トリエチルアミン７ｕｌｌ′
ｔ″加えて氷冷する。この溶液に上記の活性エステμ含
育ＤＭＦ溶液全Ｊえ６時間かき混ぜる。減圧下ＤＭ？’
ｉ留夫し酢留去チ／Ｉ／２００　［１１ｔ−７１Ｑえて
溶解し、飽和クエン酸水溶液と仄で洗浄後、＃酸エチ）
Ｖ層を硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下部酸エチルを留
去する。残留物全酢酸エチルと石油ニーチルで結晶化し
、ろ取すると針状晶ｘｚｇが得られる。融点１５０．５
−１５１＋　５ｔ：元素分析　Ｃよ、Ｎ２．Ｏδｉｐ　
として計算値：　Ｃ５４，５３；　Ｈ７，７５；　　Ｈ
９，７８分析値：　Ｃ５４，７５ｉ　Ｈｆ、９３ｉ　１
１ｒ　９．６３ｅ）　　Ｅｏｃ−ム１ａ−Ｐｒｏ−Ｇｌ
ｙ−ＯＢｓｌ（Ｃ１）の製造：Ｅｏｃ−Ａｌａ−Ｐｒｏ
−ＯＨ５，フ３ｇｔ−アセトニドＩＪＡ／４ＱｌｌＩＫ
溶かし、ｏｔ？に冷却してＨＯＭＥ　４　ｇとＤＣＣ４
，６ｇ金財え、６時間かき混ぜる。生ずる尿素体をろ別
しろ液にＩＥ−Ｇｌｙ−ＯＥｚｌ（Ｃ１）−ＴＦＡ　７
　ｇとトリエチルアミン３１１Ｉｉをｍえ６時間かき混
ぜる。溶媒を減圧留去し、酢酸エチ）ｖ２００Ｉ［ｌＩ
に溶解して、４％炭酸水素ナトリウムと飽和クエン酸水
溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧で浴に全
留去する。残留物を酢酸エチμと石油エーテｐで結晶化
すると９．１ｇの針状晶金錫る。融点１０１３−１１０
　′ｃ、　Ｔｌｆｘ＝Ｏ、〒７　。

元素分析　Ｃ２ｚＨ３ｏ０６Ｍ３ｃｌとして計算＠　：
　Ｃ５６，４６ｉ　１ＥＩ　５＋４６ｉ　　Ｎ　８．９
８；０１７．５８ 分析値：　０５６．５７ｉ　Ｈ６，６３ｉ　Ｍ　Ｂ、９
５；Ｃ１７，３６ ｆ）　Ｅｏｃ−８ｅｒ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−ＯＥ
ｚｌ（ｃｌ）の製造：　　Ｂｏａ　−Ａｈａ−Ｐｒｏ−
Ｇｌｙ−ＯＥｚｌ（Ｃ１）７゜ＯｚｇｉＴＦＡ３０！ｆ
ｆ１ｌｃとかし、これＩＣ６Ｎ−塩酸−ジオキサン３ｍ
ｌを添ゴし２０分間１０℃でかきまぜる。エーテｌＬ／
ｌ　ＯＯｍ１ｉｌえて生ずる沈殿をろ取し、エーテルで
洗って乾燥する。

乾燥粉末１ＤＩＪ？２０１１に溶解し冷却してトリエチ
ルアミン２，４１１１１をｍえる。

一方、Ｂｏａ−８ｅｒ−０１１１３，０８ｇ　ｆアセト
ニトリＡ／３０１１に溶解し、水冷下ｌｌ０ＷＢ　３　
ｇとＤＯＣ３，３ｇ’１）７１１えて４時間かき混ぜ、
生ずる原票体音ろ別する、ろ液を上記ＤＭＦ溶液に川え
て室温で１０時間かき混ぜる。溶媒全減圧で留去し、残
留物を酢酸エチｆｉ／１ｏｏＩＩｌＩＶＣ溶解し、４％
炭酸水素ナトリウム水と飽和クエン酸水で洗浄する。

減圧乾固してＲｆ、の溶に系と酢酸エチルの１＝８の混
合液１０瓜ＪｉＣ溶解する。これ全シリカゲルのカラム
（６Ｘ　ｌ　５ＣＯ１，Ｈｆ友の溶媒系と酢酸エチ〃の
１：８混合液で充填したもの）Ｋ展開し、４６８［［Ｉ
Ｊよｊｊ）９５４ｆｆｌｌの溶出区分を集めて７に浣し
、減圧乾固する。残留物をエーテμと石油エーテルの１
＝１の混合液で洗ってろ取する。６．８ｇ融点：明確な
融点を示さず、分解する。Ｈｆ、＝０．５６　。

元素分析　ＣｚｓＨｓｓＯａＨ４Ｃ１として計算［：　
Ｃ５４，１０；　Ｈ６，３６；　Ｎ　９．５１；Ｃ１６
＋４０ 分析値＋　０５４．２９；　Ｈ６，５２ｉ　　Ｎ　９．
８１；Ｃ１６，ユ６ ｇ）　　ＢｏＣ−３ｅｒ−ム１ａ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｏ
Ｈの製造；ＥＯＣ−３ｅｒ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−
ＯＥｚ　（Ｃ１）　　１．４ｇ’ｋｔ−ゲタノー／Ｌ１
５０ｍｌＫ溶解し、バヲジウム黒５００ｍｇを触媒とし
て４時間水素添ゴし、触媒ｔろ別して減圧乾固する。

Ｎ１１．　　Ｊ　５ｇ１ＴＦＡ５ＱＩＩＩＩに溶かし１
５分後浴圧留留去て残留物にエーテルと石油エーテ〃を
ｍえ結晶としてろ取する。この結晶全ＤＭＦ５゜ｍｌに
溶解し、トリエチルアミン４８７ｍｌで中和したのちＢ
ｏａ−Ｔｙｒ−○ＭＢ　１５．　７ｇｔ＝ｆｆｉえ、室
温で１６時間かきまぜる、溶媒全減圧留去し、残留物を
酢酸エチ／Ｌ’２５０ｍ１Ｋ溶解して、０．２Ｎ−塩酸
、４％−次酸Ｘ索ナトリウム水および水で洗い無水硫酸
ナトリウムで乾燥する。溶媒を留去し、残留物を＃酸エ
チμとエーテｐとからゲル状結晶としてろ取する。さら
に酢酸エチルにけんだぐし沸点にまで加熱して、冷却後
ろ取する。

収量８．２ｇ（６５，１％）、融点ユ４４−１４７ｔ７
．（α〕２゜＞　−２４，３°（ａｏ、ｅｘ。

メタノ−／Ｉ／）、Ｒｆ、Ｏ−５４゜ 元素分析　Ｃ，、Ｉｌ、、０４ＨｊＳ　：計算ｆｉｃ５
９゜６２ｉ　Ｈ６，５１；　　Ｎ　Ｅｊ　３４ｉ　　Ｓ
　６．３’７４分析値−虹 一’Ｉ’ｙｒ−Ｏｙ　８−ＭＨｌ　　７　、　５５　ｇ
、　ｔ−アニソ−／Ｌ１５ｍｌを含むＴＰＡ４５１１１
ｊに溶解し、室温に１５分間放置したのち減圧留去し、
残留物をエーテｙで粉末としてろ取する。これｉＤＭＦ
５０［ｎｌに溶解し、トリエチルアミン２．４１１１１
ｉ７Ｊｌえて中和ののち、Ｅｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＮＥ　５
．ｌＫｔ［Ｉえ１２時間かきまぜる。溶媒を留去し、残
留物全酢酸エチμ２００［ｎｌ［Ｃ抽出し、０．２Ｎ　
−塩ａＬ　　４’５’ｉｒ−炭ｅ水嵩ｔトリウム水、お
よび水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥する、酢酸エ
チ／１／全減圧留去し、残留物全酢酸エチルとエーテμ
とから結晶としてろ取し、さらに同じ溶媒系で再結晶す
る。

収量６．４ｇ（７６，１％）、融点ｌユ９−１ｚｏｔ？
、（α）％９−：５ｚ、４°（ｃｏ、５．ｚａ、メタノ
−／！／）、Ｈｆ、０．５６゜元素分析　Ｃｓ　＜Ｈ４
１０ａＨｓＦ３　：計算値　Ｃ６２゜６５；　Ｈ６，３
４；　　ｆｆ　６．４５ｉ　　Ｓ　４．９Ｊ分析値５叫
全含むＴＦＡ３０１＋１１ｉＣ溶解し、１０分後浴圧留
留去て残留物に６，４Ｈ−塩酸／ジオキサン２ｍ１ｌｉ
加えてよくまぜたのち、エーテルｆｃ７！ｌえ粉末とし
てろ取する。これ全ＤＭＦ３０ｍｌに溶解し、トリエチ
ルアミンｘ、５ｍ１ｉ加えて中和し、析出する）　＋７
エチ〃アミン壜酸塘ｔろ去する、ろ液にＢｏｃ　＝Ａ９
ｎ−ＯＨ２＋６１　ｇとＨＯＮＥ２．　ｌＫ’ｌ：ｍえ
一５℃に冷却する。冷却下にＤＣＧ２．４３ｇ全１え１
６時間かきまぜる。不溶物音ろ去し、浴Ｋを留去して残
留物を酢酸エチ／ｌ／２００［［１１に溶解する、これ
を０．２Ｎ−塩酸、４％−次酸水素ナトリウム水、およ
び水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥する。溶媒を留
去し析出するゲル状物をろ取し、酢酸エチＩＬ／にけん
だくして扉熱し冷却したのちる取し、次にアセトニ）！
Ｊ／Ｌ／で同様に処理したのちる取する。

収量Ｊ　ｅｌｌｇ（５０，Ｅ１％〕、融点１３９−１４
１℃〔分解〕、〔α）％１−４９　、３’　　（ｃ　　
０．４５．メタノ−／Ｌ’）、Ｒｆｌ　０．３３゜元素
分析　Ｃ５ｘＨ４ｚＯ１■６Ｓ　’：計３Ｅ値０５５゜
１８ｉ　Ｈ６，２７ｉ　Ｎ　１２．４５ｉ　　Ｓ　４．
７５０分析値Ｇ　５４，８９；　　Ｈ６，４８；　　Ｎ
　１２．３３；　　Ｓ　４．６３゜ｋ）　”’Ｅｏｃ−
８ｅｒ−Ａｍ−ａｍＰｒｏ’−ｆＧｌｙ−Ａｓｎ−Ｇｌ
ｙ−ＭＥｌｚＩＭＥｌｚＩ Ｃ’Ｊ９−ｂＴＨ２の製造：　Ｂｏｃ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ
−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−ＮＨ４Ｉ、６９　ｇをアニソ−／Ｌ
１０．８叫を含むＴＦ’Ａ’ｉ’、５１１１１に溶解し
、１０分間放置する。減圧留去してＴＦＡｉ除去し、残
留物をエーテルで粉末としてろ取する、これｆＤＭ１２
ｍｌＫ溶かし、トリエチルアミン０．７ｍｌ全２１０え
て中和し、この溶液にニー７′ル古ｍえ、生、じた沈殿
全エーテルでよく洗ったのちＤ　Ｍ　ＩＦ　１０　［１
１１に溶かす、この溶液に：ＥＯＧ−８ａｒ−Ａｌａ−
Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−ＯＨ１，０８ｇとＨＯＮＥ　５６０１
１１ｇ全７Ｊえて溶解したのち氷冷する、水冷下にＤＣ
Ｃ６２０Ｔｌ１ｇを唄えて室温で１６時間かきまぜる、
不溶物をろ云し、溶媒を留去し、残留物に酢酸エチ、”
ＩＸＩえて粉末としてろ取し、さらにアセトニドｇ〜で
洗い、粉末２．．３５ｇ’ｒ得る、これ全酢酸エチ／ｌ
／：ビリジン：酢酸：Ｘ（４２：１１）：３：５）の混
合温媒でシワカゲル力ラム（５Ｘ１．５■）に付し同じ
溶媒系で溶出し、３５０〜ｅｓｔｚｍｌの溶出部分金集
め溶媒で減圧留去ののち残留物をエーテルで粉末として
ろ取する。

収量１．１５ｇ（４６，６％）、融点８７−９ｏｔ４分
解）　、Ｃα〕”Ｂ１６０　、２°　（ｃｏ。

４′Ｍ−塩酸／ジオキサン０．１１１１１ｉ７１［］え
る、１５分後エ後浴ｌＬ／金川えて生じた沈澱？ろ取す
る、これ全ＤＭＦ３ｍｌに溶かし、トリエチルアミン。

。 １６ｍ１で中和して析出するトリエチルアミン塩酸塩を
ろ夫する、ろ液にＥＯｃ−〒−Ｅ［ｉｓ　２Ｂ、７Ｐｒ
ｏ−ＯＨ４８ａｑとＨＯＭＢ１８　ｏｚＢとをｍえて溶
解し、冷却する、さらにＤ　ＣＣ２０６ｆｆｉｇ全１え
１６時間かきまぜる。不溶物子ろ去し、溶媒全減圧留去
して、残留物に酢酸エチル金ｍえ粉末としてろ取する、
（８３０ｍｇ）　　これ全酢酸２チμ：ビリジン：酢酸
ご水（６ｏ：ｚａｒｅ＝ｌａ）Ｏ混合溶媒でシリカゲル
カラム（３Ｘ２９Ω〕クロマトグラフイーで展開し３５
０−５４３ｍｌの溶出部分を集め、溶媒金留去し、エー
テ、”ｆｆ１ｍえて粉床としてろ取する。

収量４００ＩＩＩｇ（４１３，６％）、融点１６０１−
１６４℃（分解）、〔α〕￥−５６，８°　（ｏ　　０
．５０．メタノ−／！／）、　Ｈｆ２０．　２３アミノ
酸分析１分析値（理論値）　：　Ｅｎａｌ−、ａｍ）、
Ａｓｐ２．０ｏ（２１，Ｓｅｒ　０．９３Ｕ、’　Ｇｌ
ｕｌ、　０ｄｌ）、’　　Ｐｒｏ　ｌ、　９１３１’２
）、　Ｇｌｙ　ｌ、　９１１３２＋、Ａｌａ、１．ＩＣ
（ユ入　　Ｃｙｓ　　０．　４Ｍユ）、　　　Ｔｙｒ　
　０．４ゴユ）、　　平均子 ＢｏＣ−ａｙｓ−ＯＥＺＩ　　を出発原料としてｈ）　
〜ｌ）と同様の操作で＜勺かえし、目的化合物金錫る。

収量５００．（５２，０％）、Ｒｒ、ｏ、３３゜ｎ）　
　Ｅｒ−Ｇｌｕ−Ｈｌｓ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−８ｅｒ−Ａ
ｌａ−Ｐｒ。

千 Ｇ１７−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｏｙｓ−ＨＨ２３４
５ｍｇ１アニソ−／Ｌ／１ｍｌとともに弗化７に素１３
叫４Ｃ溶かし、０℃で６０分間かきまぜる。弗化水素を
減圧で留去し、残留物に＊　１５　ｔｎｌ　＝ｍえて溶
解し、エーテ／Ｌ１５１１１１で２回洗う、水届全アン
バーライトエＲＡ−４１０（酢酸型）のカラム（ｌＸ５
ｃｍ）Ｋ通し、さらに樹脂金水でよく洗い、通過液全台
して凍結乾燥する（２５０１ＩＩｇ）。これ全０−１４
−ｍ酸にとかしセファデックスＬＨ−２０のカラム（２
゜４ＸｌｌＯＣ１１）に展開し、ｏ、１Ｍ−Ｈ酸で溶出
する、１９６〜２２ユ［ｆｉｌの区分金集めて凍結乾燥
する。

収３１２６＋ａｇ（４８，２％）　、〔α〕Ｄ９０．６
°　（ｃ　　０，２，０．１ｉ−ｉｉ［）、Ｈｆ４（セ
／Ｌ／四−ヌ）０．４８＋ アミノ酸分析１分析値（理論５１）：Ｈｌｓｏ、　９９
（１）、　Ａｓｐ　１，９１２）、　Ｓｅｒ　０．９ｅ
（１）、Ｇｌｕｏ、９ｃＪｘ）、　ｐｒ０２．５１ｆ２
）、　Ｇ１７２．０（２）、　　Ａｌａｌ　０９１：ｌ
）、　Ｃｙａ　０．２Ｃｉｌ）、　Ｔｙｒ　０１９４１
．平均回収率６１．０％。

１）　　Ｈ−Ｇｌｕ−ＨｌＳ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−３ｏｒ
−Ａｌａ−Ｐｒ。

−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｇｙｓ　（５−ｆ
ａｒｎｅ　ｓｙｌ　）−１１Ｈ２の製造：　Ｈ−Ｇｌｕ
−Ｈ：１ｓ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−３ｅｒ−Ａｌａ−Ｐｒｏ
−Ｇｌｙ−Ａａｎ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−ＨＨ。

５ｏｍｇｉマグネシウムオキサイドＪ２ｍｇとともに５
０％含ＸＤＭＦＯ＋ｔｓｔｎＩに溶かし、ブアルネシル
・ブロマイド（トランヌ体）のイソプロピルｘ　−＋　
ＩＶｇ液（１０％）０．２ｍｌ全滴下し１６時間かきま
ぜる。溶媒全減圧濃縮し７０％メタノ−／Ｉ／７０．０
１瓦−酢酸アンモニウム水０．５［＋１１に溶カシ、セ
ファデックスＬＨ−２０のカラム（１，４×９３ｃｌ＋
！Ｉ）に展開する。４１−５２１１１１の溶出部分を集
め凍結乾燥し、３３１１１ｇを得る、これを水に溶かし
アンバーライトＸＡＤ−２のカラム（ＩＸ　３　ａｍ　
）に付し水と８０％エタノ−μのグフジエント溶出し、
エタノール濃度が４４〜６０％の区分を集めて凍結乾燥
し２０岨を得る、さらにこれを６０％メタノール：酢ｉ
！！（９ＢＸ２）の溶媒０．５叫に溶かし、セプアデツ
クスＩ、Ｈ−２０のカラム（ユ、！Ｘ４５値）に流入し
、同じ溶媒系で溶出すると１８〜２６ｍ１の溶出区分に
目的物が溶出される。この区分を集めて凍結乾燥すると
１８ｍｇ（３０，９％）のＳ−ファルネシルペプチドを
得る。

Ｃα〕Ｄ−７３，５°（Ｃ０，４３，０，ＩＮ−酢酸）
、Ｒｆ４（セルロース）０．７１−アミノ酸分析９分析
値（理論値）　＋　Ｈｊ−ｓｌ、０５（１）、　Ａｓｐ
　ｌ、　７％ｚ）、　　Ｓｅｒ　０．９：ｌ）、　Ｇｌ
ｕｌ、　ｏ２ｘ）、　Ｐｒｏ　２．０Ｍ２）、Ｇｌｙ　
ｌ、　９９（２１，ＡｌａＬ　Ｏ（ｍｌ、　　Ｃｙｓ　
０．６ｇ１）、　Ｔｙｒ　Ｏ，ｓｓＨ，平均回収率７１
．３％。

１）　　Ｅ［−Ｇｌｕ−１１ｓ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−８ｅ
ｒ−Ａｌａ−Ｐｒ。

−０Ｂｚｌを用いＩ）−ｎ）およびＩ）と同様に操作す
ると、目的物金得る。Ｒｆａ（セルロース〕０゜６Ｂ、
（ａ）％１−７４．２ａ（Ｑ　　Ｊ　　２，０．１■−
酢酸〕 アミノ酸分析１分析ｇＸ（理論［）：Ｈｌｓｌ、ｏ２ｘ
）、　Ａｓｐ　１．８９（２）、　Ｓｅｒ　Ｏ−８９（
１３，Ｇｌｕ１＋００（１）、　Ｐｒｏ　２．０３２）
、　Ｇ１７１．９Ｅ（２）、　Ａｌａｌ　００（１）、
　Ｃｙｓ　０．６２１．ｌ）、Ｔｙｒ　０．９７（１）
、平均回収律７６．１％

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 式 Ｈ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ａｌａ
   −Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ（
   Ｓ−ｆａｒｎｅｓｙｌ）−ＮＨ＿２ または上式のＣ−末端がカルボン酸であるＳ−フアルネ
   シルペプチド。