JPS6260075B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 （発明の分野） 本発明は組織培養装置に関し、特に使用中培養
基の蒸発を減少させる特徴を有する増殖培地にお
ける細胞の生体内培養のための多房型組織培養装
置組立体に関する。

（従来技術の説明） しばしば組織培養平板と呼ばれる組織培養装置
組立体が特に実験目的のための細胞の生体内の培
養のため一般に使用されている。多房型組織培養
平板はこのような目的のために使用されており、
６個、12個、24個、48個および96個の培養房を含
んでいる。このような多房型組織培養平板は、あ
らゆる培養において関連する試験および分析の実
施のため培養試料を密接状態（全てを１つの蓋を
有する１枚の平板に収めた状態）に維持しながら
個々の細胞の培養試料の分離のための試験を行な
うためには研究者にとつて便利である。

多房型組織培養平板を覆うための今日周知であ
りかつ入手可能な蓋体は、少なくとも３つの目的
に供するように設計されている。即ち、(1)培養房
内の内容物の無菌状態の維持、(2)蓋体上の蒸気の
凝縮による培養房間の相互汚染の排除、および(3)
培養房の内外環境間の充分な通気または換気の維
持である。上記目的の最初の２つは通常の多房型
組織培養平板により充分に満たされるが、最後の
特性については充分に満たされていない。特に、
今日入手可能な多房型組織培養平板用の蓋体は、
外部環境から培養房内への空気の流入はあまりに
も多量に過ぎる。比較的大きな多房型組織培養平
板の場合は、このような換気は、一般に内部の培
養房における培地および細胞培養試料に対しては
問題を生じない。しかし、組織培養平板の周部即
ち隅部における培養房は外部環境からの多量に過
ぎる空気流によつて擾乱される。多量の空気は細
胞の培地の蒸発を惹起し、その結果培地の成分の
濃縮をもたらす。その結果として、周部および隅
部の培養房内では、培地の浸透性は細胞の原形質
との均衡状態を失う。従つて、培地の蒸発がこの
ような過度の換気のために生じる如き培養房内で
は細胞の生長は妨げられる。培地は蒸発量を補償
するため更にしばしば補充しなければならない
か、あるいはこの周部または隅部の培養房は細胞
の培養操作のために使用しないかのいずれかとな
る。

多房型組織培養装置組立体については、米国特
許第4349632号、同第4038149号、同第4012288
号、同第4010078号、同第3597326号および同第
3107204号に例示されている。別の培養容器につ
いては、米国特許第4358908号において例示され
ている。上記の米国特許に記載された本発明はい
ずれも、培養房と外部環境との間の過度の換気に
よる培地の蒸発の問題を克服するものではない。

従つて、培養房内の培地と多房型組織培養装置
組立体に対して外部の周囲条件との間の均衡状態
を可能にする充分な空気の流れを維持しながら、
培養房内の培地の蒸発の減少をもたらすために培
養房に対する空気の流れを低減することができる
多房型組織培養装置組立体に対する需要が依然と
して存在する。本発明は、上記の諸問題を解決す
るこのような多房型組織培養装置組立体に関する
ものである。

（発明の要約） 本発明の多房型組織培養装置は、平板部と蓋体
とからなつている。平板部は、その内部に液体を
収受するための複数の培養房を有する。直立する
側壁面がこの平板部の外部境界線を形成する。一
本の突条が前記側壁面の内側に隔てられ、側壁面
と培養房間の平板部の周囲に延在している。前記
蓋体は、平板部上に取外し自在に配置され、培養
房上に延在する実質的な平坦なカバーを含む。こ
のカバーと関連する手段、側壁面、突条および培
養房が培養房と外部環境との間の換気を許容して
その間の均衡状態を維持するが、培養房に対する
空気の侵入を部分的に阻止して培養房内の液体の
蒸発を最小限度に抑える。

本発明の望ましい実施態様においては、前記蓋
体は前記カバーを囲繞して前記平板部の側壁面に
対して離間した位置関係で下方に延在するするス
カートを含んでいる。前記スカートからはリブが
内側に隔てられ、前記カバーから凹状に形成され
た凹条にに向つて下方に延在している。しかし、
このリブは凹状を呈する前記凹条に対して接触状
態にはなく、距離を隔てた関係にある。隅部にお
ける前記リブの比較的長い延長部としてフランジ
がカバーの各隅部から下方に延在している。この
ようなフランジは、前記カバーが開口上を培養房
に向つて隔てられる関係で高くなるように前記平
板部の凹条と接触している。このような多房型組
織培養装置組立体の使用においては、上記の諸要
素により形成される間隙が、培養房と外部環境と
の間の換気を許容する迷路状の通路を形成するこ
とになる。前記フランジと関連して、この迷路状
の通路は培養房に対する換気の部分的な閉鎖を生
じ、これにより培養房内の培地の蒸発を最小限度
に抑えるのである。

本発明の原理によれば、今日周知であり入手可
能な装置組立体に勝る重要な改善が提供される。
更に重要なことは、本発明は、現在の構造の多房
型組織培養の平板および蓋体において生じる過度
の培地の蒸発の問題を排除するかあるいは実質的
に減殺するものである。本発明はこのような新た
な特徴を供し得るが、前記蓋体の他の主な目的は
妥協することはない。特に、本発明は更に、多房
型培養平板における内容物の無菌状態を維持し
て、培養房と外部環境との間に充分な換気が行な
われることを許容するものである。特に隅部また
は周部の培養房内における培地の損失が、今日の
多房型組織培養平板の形態において示される損失
の50％まで低減させることができる。従つて、本
発明は細胞の培養操作のための諸条件を最適化す
るものである。

本発明は多くの異なる形態における実施態様に
より満たされるものであるが、図面に示され以下
本文において詳細に記述されるものは、本文の開
示はその原理の例示と見做されるべきものであり
かつ例示された実施態様に本発明が限定されるべ
きものでないことの理解に基づき、本発明の望ま
しい実施態様である。本発明の範囲は、頭書の特
許請求の範囲およびその相等内容によつて計られ
よう。

図面において、特に第１図においては本発明の
多房型組織培養装置組立体１０の典型的な実施態
様が示される。組立体１０は、２つの主な構成要
素、即ち平板部１２と蓋体１４を含む。

最初に平板部１２については、以下に述べる実
施態様において、これがその内部に液体１３を収
受するための複数の培養房１５を有する多房型培
養平板であることが判るであろう。このような液
体は、細胞の培養操作のための増殖環境として作
用する液体状の細胞培地でよい。６個、12個、24
個、48個および98個の培養房を有する平板部が一
般に知られ入手可能であるが、平板部１２にはど
んな数の培養房１５があつてもよい。第１図にお
いては、単に例示の目的のため48個の培養房の平
板部が示されている。ほとんどの標準的な多房型
培養平板は、使用される個々の培養房を明瞭に識
別することができるように、直交する行および列
状に配置された培養房を有する。無論、本発明に
よつてどのような培養房の構成も対象となるた
め、平板部１２における培養房の配置は本発明の
実質的な限定とはならない。

培養房を囲繞しかつ平板部１２の外側の境界線
を形成しているのは側壁面１６である。本実施例
においては、この平板部は４つの側壁面１６があ
るように矩形の形状を呈する。ほとんどの事例に
おいては、本発明の目的のためには平板部はどの
ような実際の形態に作ることもできるが、公知の
組織培養平板は四辺形状を呈する。側壁面１６
は、上部分１８と下部分１９とを有する。側壁面
の下部分１９はこれら上部と下部間で環状の肩部
２０を形成するため側壁面の上部分１８から段状
を呈することが判るであろう。下部分１９は、本
多房型組織培養装置組立体が使用される時平板部
１２に対する環状の基部として役立つ。

側壁面の上部の内側で平板部１２の上面の周囲
に隔てられているのは、第１図および第２図に関
して第４図および第５図において更に詳細に示さ
れるように、凹状を呈する条部２２である。これ
により条部２２は、平板部１２の内部の培養房の
周囲の境界線を形成する。図面に示されるよう
に、凹条２２は培養房１５への開口部２４の高さ
よりも低い凹みとなつている。典型的には、培養
房への開口は全て、多房型培養平板の上面に沿つ
て延在する同じ略々水平面内にある。凹条２２は
２つの直立したリム２５および２７により画成さ
れるが、リム２５は内側に配置され、リム２７は
凹条の上方の位置まで延在する側壁面の上部分１
８の頂部を表わす。凹条２２は平坦でかつ略々水
平面内にある如くに示されるが、この凹条はＶ字
形の如き切欠きでも、あるいは平滑な湾曲形状で
もよく、あるいは他の望ましい形態でもよい。

蓋体１４は、多房型培養平板の全ての壁面を覆
う別個の取外し自在な部材である。蓋体１４は全
ての図面において示されるが、蓋体１４の詳細は
第３図、第４図および第５図において最もよく示
されている。蓋体１４は、多房型培養平板の全て
の培養房上に延在するに充分な大きさの略々平坦
なカバー３を含む。カバー３１の形状は、平板部
１２の形状と合致する。カバー３１の周囲に延在
しているのは蓋体１４の周囲の境界をなす下方に
下垂するスカート３２である。スカート３２は、
その各々が多房型培養平板の隣接する側壁面に対
して略々下方に平行に延在する４つの側面を有す
る。蓋体１４が平板部１２上に置かれる時、スカ
ート３２は多房型培養平板の肩部２０に隣接する
がこれと接触しない位置で終り、これによりその
間に空間３４を残す。更に、スカート３２はまた
それ自体と多房型培養平板の壁面の上部分１８と
の間に空間３５を残す。

小さな突起部の形態の複数のリング３６がカバ
ー３１の下側に形成されている。各リング３６
は、培養房の内容物の相互の汚染を防止するため
各培養房の隔離に貢献するよう培養房の各開口部
２４に重合するようになつている。蓋体が多房型
培養平板上に定置される時、リング３６は培養房
の頂部の開口の丁度真上に離間されるが、培養房
と外部環境との間の換気を阻害してはならない。

蓋体１４を多房型培養平板１２の所定位置に支
持するために、蓋体のパツド３８が蓋体の各隅部
に設けられる。これらのパツドは平板部のリム２
７の頂部に静置し、多房型組織培養装置組立体の
使用中蓋体を適正な位置に支持する。

スカート３２から内側に離間されかつカバー３
１の底面部から下方に延在しているのはリブ４０
である。スカート３２の４つの側面の各々と略々
平行に位置するリブは、凹条２２により形成され
る凹部に対して下方に下垂するもこの凹条とは接
触しないよう維持されるように前記カバー上に定
置される。従つて、空間４１は、前記蓋体が第４
図に更に詳細に示されるように多房型培養平板上
に適正に配置される時リブ４０と凹条２２間に維
持される。

しかし、蓋体１４の４つの隅部の各々にはフラ
ンジ４２の形態でリブ４０が下方に延長してい
る。各隅部におけるフランジは実質的に各隅部に
おいてある角度をなす形状の２つの脚部を有す
る。フランジ４２の比較的長い下方の延長部によ
り、各フランジは多房型培養平板の隅部において
凹条２２と接触する。このため、フランジ４２お
よびパツド３８の両者は多房型培養平板１２にお
ける適正位置における蓋体１４の支持に寄与す
る。この位置においては、空間４４がその間にで
きるように培養房の開口部２４上方にカバー３１
が配置される。フランジ４２が凹条２２と接触す
る隅部を除いて、空間３４，３５，４１および４
４は全て通気路を提供するように相互に連通して
いる。この通路は、培養房１５と外部環境との間
の換気を許容する。しかし、図面において判るよ
うに、この通路は迷路形状を呈することにより、
培養房と外部環境間の空気の流通を最小限度に抑
える。更に、多房型培養平板の凹条により形成さ
れる凹部に対して下方に下垂するリブは空気の流
れを制御してこれを多房型培養平板の外周部から
離すように指向する。

平板部の隅部においては、空気の流れは平板部
の凹条２２とフランジ４２による接触のため完全
に遮断される。このため、本蓋体および平板部の
このような全ての特徴および構成要素が培養房、
特に平板部の隅部と周部における培養房における
液状の培地の蒸発を最小限度に抑えるのである。
内部の培養房は、上記の蒸発問題によつて常に影
響を受けることはない。更に、培地の蒸発問題の
みが管理されるのではなく、本発明はまた多房型
組織培養装置の他の主要な機能を行なうものであ
る。特に、培養房の内容物の無菌状態が維持さ
れ、充分な量の換気が培養房と外部環境間の均衡
状態を維持するためその間に行なわれる。これ
は、本発明の蓋体および平板部の共働する要素に
よつて提供される培養房に対する換気の部分的な
閉鎖および独特な迷路状の通路によるものであ
る。

多房型組織培養装置組立体の蓋体および平板部
は多くの異なる選択の材料から作ることができる
が、プラスチツクが望ましい。ポリスチレン等の
如き透明で堅固なプラスチツクが蓋体および平板
部の構成要素のための好適な材料である。蓋体お
よび平板部はそれぞれ一体に形成された単一部材
として成形されることが望ましい。

上記の如く、本発明は現在の組織培養装置組立
体に勝る重要な改善である多房型組織培養装置組
立体を提供するものである。本発明の諸特徴によ
れば、空気の流れは斬新な迷路状の空気通路を介
して培養培養房に対して制限される。空気流の制
限は、主として蒸発による培地の損失を低減する
ことにより細胞の培養操作のための最適な条件を
維持するものである。

【図面の簡単な説明】

第１図は平板部から蓋体を取外して示す本発明
の多房型組織培養装置組立体の一実施例を示す斜
視図、第２図は隅部の一部を断面で示した組立て
状態の多房型組織培養装置の側面図、第３図は第
２図の線３−３に関する多房型組織培養装置の蓋
体を示す断面図、第４図は平板部に対して蓋体が
組付けられた状態の第１図の線４−４に関する蓋
体と平板部の構成の部分拡大断面図、および第５
図は平板部に対して蓋体を組付けた状態の第１図
の線５−５に関する蓋体と平板部の構成の部分拡
大断面図である。 １０…多房型組織培養装置組立体、１２…平板
部、１３…液体、１４…蓋体、１５…培養房、１
６…側壁面、１８…上部分、１９…下部分、２０
…環状の肩部、２２…凹条、２４…開口部、２５
…リム、２７…リム、３１…カバー、３２…スカ
ート、３４…空間、３５…空間、３６…リング、
３８…パツド、４０…リブ、４１…空間、４２…
フランジ、４４…空間。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 平板部およびこの平板部上に取り外し自在に
   置かれる蓋体から成る多房型組織培養装置組立体
   であつて、 前記平板部は、組織培地を収容するための複数
   の培養房と、該平板部の四辺形の外郭を画定する
   直立した側壁と、これら側壁から内方に隔置され
   ていて該側壁と前記培養房との間で前記平板部の
   周囲に延在する凹条と、を有するとともに、前記
   側壁の上方部分が前記凹条よりも上方へ延在して
   該凹条を包囲するリムを形成するようになされて
   おり、前記蓋体は、前記培養房の上方に延在する
   ほぼ平坦なカバーと、このカバーを包囲して該カ
   バーに複数の隅部を画成するとともに前記平板部
   の側壁に関して間隔を空けた状態で下方に伸長す
   るスカートと、該スカートから内方に隔置されか
   つ前記カバーの各隅部から下方に伸長して前記平
   板部の凹条に接触しこれによつて前記カバーが前
   記培養房の開口とは間隔を空けて上方に位置する
   ようになすフランジであつて前記リムがこのフラ
   ンジと前記スカートとの間に設けられるようにな
   す複数のフランジと、を有しており、 これによつて、前記蓋体と前記平板部との間の
   空間により前記培養房と外部環境との間に換気を
   許容すると同時に、前記フランジが培養房に対す
   る換気を部分的に阻害して前記培養房中の組織培
   地の蒸発を最小にするように構成されたことを特
   徴とする多房型組織培養装置組立体。 ２ 前記平板部の凹条が前記培養房の開口よりも
   下方に設けられることを特徴とする特許請求の範
   囲第１項記載の多房型組織培養装置組立体。 ３ 前記蓋体が、更に、前記凹条により形成され
   た凹部内に向かつて前記カバーから下方に延在す
   るが該凹条とは接触せず、前記複数のフランジの
   間に設けられるリブを有することを特徴とする特
   許請求の範囲第２項記載の多房型組織培養装置組
   立体。 ４ 前記平板部が、更に、前記側壁の下方部分を
   形成する環状の基部を含み、該基部はこれと前記
   側壁の上方部分との間に環状の肩部を形成するた
   め前記側壁から段形状をなしていることを特徴と
   する特許請求の範囲第１項記載の多房型組織培養
   装置組立体。 ５ 前記スカートが前記平板部の肩部に隣接する
   がこれと接触しない位置まで延在することを特徴
   とする特許請求の範囲第４項記載の多房型組織培
   養装置組立体。 ６ 前記培養房が、ほぼ直交する行および列をな
   して配列されることを特徴とする特許請求の範囲
   第１項記載の多房型組織培養装置組立体。 ７ 前記平板部および前記蓋体が透明なプラスチ
   ツクから作られることを特徴とする特許請求の範
   囲第１項記載の多房型組織培養装置組立体。