JPS6261037B2 - - Google Patents
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- JPS6261037B2 JPS6261037B2 JP55126087A JP12608780A JPS6261037B2 JP S6261037 B2 JPS6261037 B2 JP S6261037B2 JP 55126087 A JP55126087 A JP 55126087A JP 12608780 A JP12608780 A JP 12608780A JP S6261037 B2 JPS6261037 B2 JP S6261037B2
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- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
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- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
- C12P1/06—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using actinomycetales
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/465—Streptomyces
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Description
本発明はストレプトミセス属に属する微生物を
培養して、その培養物からえられるアンスラサイ
クリン系の新抗生物質MF266物質に関し、ま
た、MF266物質の製造法に関するものである。 本発明者らは、東京都品川区西品川の土壌試料
より分離された放線菌で、MF266−g4の番号が
付された菌株を培養してMF266物質を蓄積せし
め、その培養物からMF266物質を採取すること
ができることを発見した。 本発明のMF266物質はグラム陽性菌の発育を
強く阻止し、マウス白血病Ｌ−1210細胞およびあ
る種の癌細胞の発育を強く抑制し、制癌剤として
用いられる新抗生物質である。 本発明に係る新抗生物質MF266物質の性状は
次に示すとおりである。 MF266物質は両性物質で、その塩酸塩は赤色
無定形粉末として得られ、分解点178−180℃、比
旋光度〔α〕２５ Ｄ＝＋370゜（c0.1、メタノール）で
ある。元素分析値はC49.00％，H6.56％，N3.39
％，O28.58％，Cl7.17％を示し、分子式および分
子量は未だ確定することはできないが、MF266
物質のメチルエステルのマススペクトルの結果か
ら、分子量は1200〜1300であると推定される。臭
化カリ錠で測定した赤外吸収曲線は第１図に示す
ごとくである。紫外部吸収曲線は第２図に示すご
とくで、メタノール溶液中で220，235，254，
290，380，475，496，535および575nmに、それ
ぞれＥ１％１cm208，276，232，64，28，96，100，64
および14の吸収極大を有し、0.1N塩酸−90％メ
タノール溶液中で220（肩）、235，254，290，
380，480，497，535および570nmに、それぞれＥ
１％１cm188，264，241，64，28，92，100，60および
14の吸収極大を有し、0.1N水酸化ナトリウム−
90％メタノール溶液中で213，253，292，360，
560および597nmに、それぞれＥ１％１cm688，247，
48，36，100および100の吸収極大を有する。 MF266物質塩酸塩は水、メタノール、ジメチ
ルスルホキシド、ピリジンなどにとけるが、クロ
ロホルム、アセトン、ベンゼン、酢酸エチルなど
の有機溶媒にとけ難く、シリカゲルの薄層クロマ
トグラフイーでクロロホルム−メタノール−10％
酢酸アンモニウム（20：15：１）の溶媒系で展開
するとRf0.27、クロロホルム−メタノール（１：
１）の溶媒系で展開するとRf0.06、クロロホルム
−メタノール−酢酸（20：５：１）の溶媒系で展
開するとRf0.10を示す。 以上の諸性状から、既知の抗生物質とは明らか
に区別されるアンスラサイクリン系の新抗生物質
であることを確認した。 本発明によるMF266物質は、分子式
C60H82N4O26をもち、かつ次式 で表わされる構造式をもつと推定される。 MF266物質塩酸塩の寒天平板上での各種細菌
に対する最低発育阻止濃度は第１表に示すとおり
である。MF266物質塩酸塩のマウス白血病Ｌ−
1210に対する治療効果は第２表に示すごとくで、
Ｌ−1210細胞接種直後より連続10日間腹腔内投与
して著明な延命効果が示された。
培養して、その培養物からえられるアンスラサイ
クリン系の新抗生物質MF266物質に関し、ま
た、MF266物質の製造法に関するものである。 本発明者らは、東京都品川区西品川の土壌試料
より分離された放線菌で、MF266−g4の番号が
付された菌株を培養してMF266物質を蓄積せし
め、その培養物からMF266物質を採取すること
ができることを発見した。 本発明のMF266物質はグラム陽性菌の発育を
強く阻止し、マウス白血病Ｌ−1210細胞およびあ
る種の癌細胞の発育を強く抑制し、制癌剤として
用いられる新抗生物質である。 本発明に係る新抗生物質MF266物質の性状は
次に示すとおりである。 MF266物質は両性物質で、その塩酸塩は赤色
無定形粉末として得られ、分解点178−180℃、比
旋光度〔α〕２５ Ｄ＝＋370゜（c0.1、メタノール）で
ある。元素分析値はC49.00％，H6.56％，N3.39
％，O28.58％，Cl7.17％を示し、分子式および分
子量は未だ確定することはできないが、MF266
物質のメチルエステルのマススペクトルの結果か
ら、分子量は1200〜1300であると推定される。臭
化カリ錠で測定した赤外吸収曲線は第１図に示す
ごとくである。紫外部吸収曲線は第２図に示すご
とくで、メタノール溶液中で220，235，254，
290，380，475，496，535および575nmに、それ
ぞれＥ１％１cm208，276，232，64，28，96，100，64
および14の吸収極大を有し、0.1N塩酸−90％メ
タノール溶液中で220（肩）、235，254，290，
380，480，497，535および570nmに、それぞれＥ
１％１cm188，264，241，64，28，92，100，60および
14の吸収極大を有し、0.1N水酸化ナトリウム−
90％メタノール溶液中で213，253，292，360，
560および597nmに、それぞれＥ１％１cm688，247，
48，36，100および100の吸収極大を有する。 MF266物質塩酸塩は水、メタノール、ジメチ
ルスルホキシド、ピリジンなどにとけるが、クロ
ロホルム、アセトン、ベンゼン、酢酸エチルなど
の有機溶媒にとけ難く、シリカゲルの薄層クロマ
トグラフイーでクロロホルム−メタノール−10％
酢酸アンモニウム（20：15：１）の溶媒系で展開
するとRf0.27、クロロホルム−メタノール（１：
１）の溶媒系で展開するとRf0.06、クロロホルム
−メタノール−酢酸（20：５：１）の溶媒系で展
開するとRf0.10を示す。 以上の諸性状から、既知の抗生物質とは明らか
に区別されるアンスラサイクリン系の新抗生物質
であることを確認した。 本発明によるMF266物質は、分子式
C60H82N4O26をもち、かつ次式 で表わされる構造式をもつと推定される。 MF266物質塩酸塩の寒天平板上での各種細菌
に対する最低発育阻止濃度は第１表に示すとおり
である。MF266物質塩酸塩のマウス白血病Ｌ−
1210に対する治療効果は第２表に示すごとくで、
Ｌ−1210細胞接種直後より連続10日間腹腔内投与
して著明な延命効果が示された。
【表】
【表】
未治療マウスの生存日数
MF266物質塩酸塩の急性毒性は、マウス静脈
内投与でLD5050−100mg／Kgであつた。また、他
のアンスラサイクリン系抗生物質にくらべて心毒
性が弱いことが確認されている。 本発明の第二の要旨とするところは、放線菌に
属するMF266物質生産菌を培養してMF266物質
を蓄積せしめ、その培養液からMF266物質を採
取するMF266物質の製造法にある。本発明の方
法によれば、MF266物質は純粋な状態で、或は
粗製の状態で、また溶液の状態で、或は固体の状
態で採取される。MF266物質は遊離の状態でも
得られるが、その安定性から通常の方法により薬
学的に許容できる酸を加えて任意の無毒性の酸付
加塩として採取することが好ましい。付加すべき
酸としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸、燐酸、硝
酸などの無機酸、酢酸、リンゴ酸、クエン酸、ア
スコルビン酸、メタンスルホン酸などの有機酸が
用いられる。 本発明におけるMF266物質の生産菌の一例と
して、昭和51年１月、微生物化学研究所において
東京都品川区西品川の土壤より分離された放線菌
で、MF266−g4の菌株番号が付された菌株があ
げられる。この菌株の菌学的性状は次に示すとお
りである。 MF266−g4株の菌学的性状 １ 形態 MF266−g4株は顕微鏡下で分枝した基中菌糸
より螺旋状、又培地によつては、鉤状あるいは真
直ぐな気菌糸を形成し、輪生枝はみとめられな
い。成熟した胞子鎖は10個以上の胞子の連鎖をみ
とめ、胞子の大きさは、0.6〜0.8×0.8〜1.2ミク
ロン位で胞子の表面は平滑である。 ２ 各種培地における生育状態 色の記載につて〔 〕内に示す標準は、コンテ
イナー・コーポレーシヨン・オブ・アメリカのカ
ラー・ハーモニイ・マニユアル（Container
Corporation of AmericaのColor harmony
manual）を用いた。 (1) シユクロース・硝酸塩寒天培地（27℃培養） 無色の発育上に、ピンク白〜明るい茶灰
〔5cb〕の気菌糸を着生し、溶解性色素はみと
められない。 (2) グルコース・アスパラギン寒天培地（27℃培
養） 発育はうす黄〜うす黄茶、気菌糸は着生せ
ず、溶解性色素もみとめられない。 (3) グリセリン・アスパラギン寒天培地（ISP−
培地５，27℃培養） うす黄茶〔２ｇｃ，Bamboo〕〜明るい赤味
だいだい〔5ia，Brite Peach〜5lc，Copper〕
〜にぶだいだい〔5le，Rust Tan〕の発育上に
白〜うすピンクの気菌糸をうつすらと着生し、
溶解性色素はかすかに黄色味をおびる程度であ
る。 (4) スターチ・無機塩寒天培地（ISP−培地４，
27℃培養） うす黄〔２ｇｃ，Bamboo〕〜うす黄茶
〔2ie，Lt Mustard Tan〕の発育上に、ピンク
灰〔５ｇｅ，Rosewood〕〜明るい茶灰
（5dc，Pussywillow Gray〕の気菌糸を着生
し、溶解性色素はかすかに茶色味をおびる程度
である。 (5) チロシン寒天培地（ISP−培地７，27℃培
養） うす黄茶〔２ｇｃ Bamboo〜2ie，Lt
Mustard Tan〕〜ピンク〔４ｇｃ，Nude Tan
〜５ｇｃ，Peach Tan〕の発育上に、ピンク白
〔5ba，Shell Pink〕〜ピンク灰〔５ｇｅ，
Rosewood〕の気菌糸を着生し、溶解性色素は
かすかに黄色味をおびる程度である。 (6) 栄養寒天培地（27℃培養） 発育は灰味黄茶〔4p，Dk Spice
Brown〕、気菌糸は着生せず茶の溶解性色素を
産生する。 (7) イースト・麦芽寒天培地（ISP−培地２，27
℃培養） うす黄茶〔2le，Mustard〜2ie，Lt Mustard
Tan〕〜うす赤味だいだい〔5ie，Copper
Tan〕の発育上に白〜ピンク灰〔５ｇｅ，
Rosewood〕の気菌糸を着生し、溶解性色素は
かすかに黄茶味をおびる程度である。 (8) オートミール寒天培地（ISP−培地３，27℃
培養〕 うす黄〜うす黄茶〔２ｇｃ，Bamboo〜３
ｅ，Cinnamon〕の発育上に、ピンク白〜明る
い茶灰〔5ec，Dusty Peach〜５ｇｅ，
Rosewood〕の気菌糸を着生し、溶解性色素
は、かすかに黄色味をおびる程度である。 (9) グリセリン・硝酸塩寒天培地（27℃培養） うす黄茶〔２ｇｃ，Bamboo〕〜うす赤茶
〔５ｇｃ，Peach Tan〕の発育上に、うすピン
ク〔5cb〜5ba，Shell Pink〕の気菌糸を着生
し、溶解性色素はかすかに黄色味をおびる程度
である。 (10) スターチ寒天培地（27℃培養） ピンク〔5ic，Lt Persimmon〕〜うす赤味だ
いだい〔５ｅ，Rust、Tan〕の発育上に、う
すピンク〔5ec，Dusty Peach〕〜明るい灰
〔3fe，Silver Gray〕の気菌糸を着生し、溶解
性色素はうす赤色を呈する。 (11) リンゴ酸石灰寒天培地（27℃培養） 無色〜うす黄の発育上に、ピンク灰〜明るい
茶灰〔５ｇｅ，Rosewood〜5ec，Dusty
Peach〕の気菌糸を着生し、溶解性色素は、か
すかにピンク色をおびる程度である。 (12) セルロース（27℃培養） 発育は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色素
もみとめられない。 (13) ゼラチン穿刺培養（15％単純ゼラチン、20
℃培養；グルコース・ペプトン・ゼラチン27℃
培養） 単純ゼラチン培地では、うす黄茶の発育上に
白色〜うすピンク〜明るい灰の気菌糸を着生
し、茶の溶解性色素を産生する。 グルコース・ペプトン・ゼラチン培地では、
黄茶の発育上に白色〜明るい茶灰の気菌糸を着
生し、暗い茶の溶解性色素を産生する。 (14) 脱脂牛乳（37℃培養） 発育は、うす黄〜うすピンク〜うす黄茶、気
菌糸は着生せず、うす茶の溶解性色素を産生す
る。 ３ 生理的性質 (1) 生育温度範囲 スターチ・イースト寒天（可溶性澱粉1.0
％、イースト・エキス0.2％、紐寒天3.4％、PH
7.0〜7.2）を用い20℃，24℃，27℃，30℃，37
℃，50℃の各温度で試験の結果、50℃を除い
て、何れの温度でも生育するが、最適温度は30
℃〜37℃付近と思われる。 (2) ゼラチンの液化（15％単純ゼラチン、20℃培
養；グルコース・ペプトン・ゼラチン，27℃培
養） 単純ゼラチン培地の場合は、液化はみとめら
れなかつたが、グルコース・ペプトン・ゼラチ
ン培地では、培養後17日目頃から液化が始まり
その作用は、弱い方である。 (3) スターチの加水分解（スターチ・無機塩寒天
培地及びスターチ寒天培地、何れも27℃培養） 培養後５日目頃から水解性がみとめられ、そ
の作用は中等度〜強い方である。 (4) 脱脂牛乳の凝固・ペプトン化（脱脂牛乳、37
℃培養） 21日間の培養では凝固もペプトン化もみとめ
られなかつた。 (5) メラニン様色素の生成（トリプトン・イース
ト・ブロス、ISP−培地１；ペプトン・イース
ト・鉄寒天、ISP−培地６；チロシン寒天、
ISP−培地７、何れも27℃培養） トリプトン・イースト・ブロス及びペプト
ン・イースト・鉄寒天培地ではメラニン様色素
の生成がみとめられるがチロシン寒天培地では
みとめられない。 (6) 炭素源の利用性（プリドハム・ゴトリーブ寒
天培地、ISP−培地９、27℃培養） グルコースを利用して発育し、Ｌ−アラビノ
ース、Ｄ−キシロース、シユクロース、イノシ
トール、ラフイノース、Ｄ−マンニトールは、
利用しない。又、Ｄ−フラクトース、Ｌ−ラム
ノースはおそらく利用しないと判定される。 (7) リンゴ酸石灰の溶解（リンゴ酸石灰寒天、27
℃培養） 培養後７日目頃から、発育周辺のリンゴ酸石
灰を溶解し、その作用は中等度〜強い方であ
る。 (8) 硝酸塩の還元反応（1.0％硝酸カリ含有ペプ
トン水、ISP−培地８、27℃培養） 陽性である。 以上の性状を要約すると、MF266−ｇ４株は
ストレプトミセス（Streptomyces）属に属し気
菌糸は螺旋形成をみとめ、輪生枝はみられず、胞
子の表面は平滑である。種々の培地でうす黄〜う
す黄茶あるいはピンクの発育上に白〜ピンク灰〜
明るい茶灰の気菌糸を着生し、溶解性色素は黄〜
黄茶〜うす赤をおびる。 メラニン様色素は、トリプトン・イースト・ブ
ロス及びペプトン・イースト・鉄寒天培地では陽
性、チロシン寒天培地では陰性である。蛋白分解
力は弱い方であり、スターチの水解性は中等度〜
強い方である。 これらの性状より既知菌種を検索すると、スト
レプトミセス・バージニエ（Streptomyces
virginiae、文献１）Journal of Systematic
Bacteriology，18巻、178頁、1968；文献２）
WaksmanのThe actinomycetes，２巻、285頁）
及びストレプトミセス・ラベンドレー
（Streptomyces lavendulae、文献１）Journal of
Systematic Bacteriology，18巻、138頁、1968；
文献２）WaksmanのThe actinomycetes，２
巻、233頁）がもつとも近縁の種としてあげられ
る。 次に実際にこれら２種の菌株を入手し、
MF266−ｇ４株と比較検討した成績の大要を示
すと第３表の如くである。
MF266物質塩酸塩の急性毒性は、マウス静脈
内投与でLD5050−100mg／Kgであつた。また、他
のアンスラサイクリン系抗生物質にくらべて心毒
性が弱いことが確認されている。 本発明の第二の要旨とするところは、放線菌に
属するMF266物質生産菌を培養してMF266物質
を蓄積せしめ、その培養液からMF266物質を採
取するMF266物質の製造法にある。本発明の方
法によれば、MF266物質は純粋な状態で、或は
粗製の状態で、また溶液の状態で、或は固体の状
態で採取される。MF266物質は遊離の状態でも
得られるが、その安定性から通常の方法により薬
学的に許容できる酸を加えて任意の無毒性の酸付
加塩として採取することが好ましい。付加すべき
酸としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸、燐酸、硝
酸などの無機酸、酢酸、リンゴ酸、クエン酸、ア
スコルビン酸、メタンスルホン酸などの有機酸が
用いられる。 本発明におけるMF266物質の生産菌の一例と
して、昭和51年１月、微生物化学研究所において
東京都品川区西品川の土壤より分離された放線菌
で、MF266−g4の菌株番号が付された菌株があ
げられる。この菌株の菌学的性状は次に示すとお
りである。 MF266−g4株の菌学的性状 １ 形態 MF266−g4株は顕微鏡下で分枝した基中菌糸
より螺旋状、又培地によつては、鉤状あるいは真
直ぐな気菌糸を形成し、輪生枝はみとめられな
い。成熟した胞子鎖は10個以上の胞子の連鎖をみ
とめ、胞子の大きさは、0.6〜0.8×0.8〜1.2ミク
ロン位で胞子の表面は平滑である。 ２ 各種培地における生育状態 色の記載につて〔 〕内に示す標準は、コンテ
イナー・コーポレーシヨン・オブ・アメリカのカ
ラー・ハーモニイ・マニユアル（Container
Corporation of AmericaのColor harmony
manual）を用いた。 (1) シユクロース・硝酸塩寒天培地（27℃培養） 無色の発育上に、ピンク白〜明るい茶灰
〔5cb〕の気菌糸を着生し、溶解性色素はみと
められない。 (2) グルコース・アスパラギン寒天培地（27℃培
養） 発育はうす黄〜うす黄茶、気菌糸は着生せ
ず、溶解性色素もみとめられない。 (3) グリセリン・アスパラギン寒天培地（ISP−
培地５，27℃培養） うす黄茶〔２ｇｃ，Bamboo〕〜明るい赤味
だいだい〔5ia，Brite Peach〜5lc，Copper〕
〜にぶだいだい〔5le，Rust Tan〕の発育上に
白〜うすピンクの気菌糸をうつすらと着生し、
溶解性色素はかすかに黄色味をおびる程度であ
る。 (4) スターチ・無機塩寒天培地（ISP−培地４，
27℃培養） うす黄〔２ｇｃ，Bamboo〕〜うす黄茶
〔2ie，Lt Mustard Tan〕の発育上に、ピンク
灰〔５ｇｅ，Rosewood〕〜明るい茶灰
（5dc，Pussywillow Gray〕の気菌糸を着生
し、溶解性色素はかすかに茶色味をおびる程度
である。 (5) チロシン寒天培地（ISP−培地７，27℃培
養） うす黄茶〔２ｇｃ Bamboo〜2ie，Lt
Mustard Tan〕〜ピンク〔４ｇｃ，Nude Tan
〜５ｇｃ，Peach Tan〕の発育上に、ピンク白
〔5ba，Shell Pink〕〜ピンク灰〔５ｇｅ，
Rosewood〕の気菌糸を着生し、溶解性色素は
かすかに黄色味をおびる程度である。 (6) 栄養寒天培地（27℃培養） 発育は灰味黄茶〔4p，Dk Spice
Brown〕、気菌糸は着生せず茶の溶解性色素を
産生する。 (7) イースト・麦芽寒天培地（ISP−培地２，27
℃培養） うす黄茶〔2le，Mustard〜2ie，Lt Mustard
Tan〕〜うす赤味だいだい〔5ie，Copper
Tan〕の発育上に白〜ピンク灰〔５ｇｅ，
Rosewood〕の気菌糸を着生し、溶解性色素は
かすかに黄茶味をおびる程度である。 (8) オートミール寒天培地（ISP−培地３，27℃
培養〕 うす黄〜うす黄茶〔２ｇｃ，Bamboo〜３
ｅ，Cinnamon〕の発育上に、ピンク白〜明る
い茶灰〔5ec，Dusty Peach〜５ｇｅ，
Rosewood〕の気菌糸を着生し、溶解性色素
は、かすかに黄色味をおびる程度である。 (9) グリセリン・硝酸塩寒天培地（27℃培養） うす黄茶〔２ｇｃ，Bamboo〕〜うす赤茶
〔５ｇｃ，Peach Tan〕の発育上に、うすピン
ク〔5cb〜5ba，Shell Pink〕の気菌糸を着生
し、溶解性色素はかすかに黄色味をおびる程度
である。 (10) スターチ寒天培地（27℃培養） ピンク〔5ic，Lt Persimmon〕〜うす赤味だ
いだい〔５ｅ，Rust、Tan〕の発育上に、う
すピンク〔5ec，Dusty Peach〕〜明るい灰
〔3fe，Silver Gray〕の気菌糸を着生し、溶解
性色素はうす赤色を呈する。 (11) リンゴ酸石灰寒天培地（27℃培養） 無色〜うす黄の発育上に、ピンク灰〜明るい
茶灰〔５ｇｅ，Rosewood〜5ec，Dusty
Peach〕の気菌糸を着生し、溶解性色素は、か
すかにピンク色をおびる程度である。 (12) セルロース（27℃培養） 発育は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色素
もみとめられない。 (13) ゼラチン穿刺培養（15％単純ゼラチン、20
℃培養；グルコース・ペプトン・ゼラチン27℃
培養） 単純ゼラチン培地では、うす黄茶の発育上に
白色〜うすピンク〜明るい灰の気菌糸を着生
し、茶の溶解性色素を産生する。 グルコース・ペプトン・ゼラチン培地では、
黄茶の発育上に白色〜明るい茶灰の気菌糸を着
生し、暗い茶の溶解性色素を産生する。 (14) 脱脂牛乳（37℃培養） 発育は、うす黄〜うすピンク〜うす黄茶、気
菌糸は着生せず、うす茶の溶解性色素を産生す
る。 ３ 生理的性質 (1) 生育温度範囲 スターチ・イースト寒天（可溶性澱粉1.0
％、イースト・エキス0.2％、紐寒天3.4％、PH
7.0〜7.2）を用い20℃，24℃，27℃，30℃，37
℃，50℃の各温度で試験の結果、50℃を除い
て、何れの温度でも生育するが、最適温度は30
℃〜37℃付近と思われる。 (2) ゼラチンの液化（15％単純ゼラチン、20℃培
養；グルコース・ペプトン・ゼラチン，27℃培
養） 単純ゼラチン培地の場合は、液化はみとめら
れなかつたが、グルコース・ペプトン・ゼラチ
ン培地では、培養後17日目頃から液化が始まり
その作用は、弱い方である。 (3) スターチの加水分解（スターチ・無機塩寒天
培地及びスターチ寒天培地、何れも27℃培養） 培養後５日目頃から水解性がみとめられ、そ
の作用は中等度〜強い方である。 (4) 脱脂牛乳の凝固・ペプトン化（脱脂牛乳、37
℃培養） 21日間の培養では凝固もペプトン化もみとめ
られなかつた。 (5) メラニン様色素の生成（トリプトン・イース
ト・ブロス、ISP−培地１；ペプトン・イース
ト・鉄寒天、ISP−培地６；チロシン寒天、
ISP−培地７、何れも27℃培養） トリプトン・イースト・ブロス及びペプト
ン・イースト・鉄寒天培地ではメラニン様色素
の生成がみとめられるがチロシン寒天培地では
みとめられない。 (6) 炭素源の利用性（プリドハム・ゴトリーブ寒
天培地、ISP−培地９、27℃培養） グルコースを利用して発育し、Ｌ−アラビノ
ース、Ｄ−キシロース、シユクロース、イノシ
トール、ラフイノース、Ｄ−マンニトールは、
利用しない。又、Ｄ−フラクトース、Ｌ−ラム
ノースはおそらく利用しないと判定される。 (7) リンゴ酸石灰の溶解（リンゴ酸石灰寒天、27
℃培養） 培養後７日目頃から、発育周辺のリンゴ酸石
灰を溶解し、その作用は中等度〜強い方であ
る。 (8) 硝酸塩の還元反応（1.0％硝酸カリ含有ペプ
トン水、ISP−培地８、27℃培養） 陽性である。 以上の性状を要約すると、MF266−ｇ４株は
ストレプトミセス（Streptomyces）属に属し気
菌糸は螺旋形成をみとめ、輪生枝はみられず、胞
子の表面は平滑である。種々の培地でうす黄〜う
す黄茶あるいはピンクの発育上に白〜ピンク灰〜
明るい茶灰の気菌糸を着生し、溶解性色素は黄〜
黄茶〜うす赤をおびる。 メラニン様色素は、トリプトン・イースト・ブ
ロス及びペプトン・イースト・鉄寒天培地では陽
性、チロシン寒天培地では陰性である。蛋白分解
力は弱い方であり、スターチの水解性は中等度〜
強い方である。 これらの性状より既知菌種を検索すると、スト
レプトミセス・バージニエ（Streptomyces
virginiae、文献１）Journal of Systematic
Bacteriology，18巻、178頁、1968；文献２）
WaksmanのThe actinomycetes，２巻、285頁）
及びストレプトミセス・ラベンドレー
（Streptomyces lavendulae、文献１）Journal of
Systematic Bacteriology，18巻、138頁、1968；
文献２）WaksmanのThe actinomycetes，２
巻、233頁）がもつとも近縁の種としてあげられ
る。 次に実際にこれら２種の菌株を入手し、
MF266−ｇ４株と比較検討した成績の大要を示
すと第３表の如くである。
【表】
【表】
第３表にみられるように、MF266−g4株とス
トレプトミセス・バージニエISP5094株とは硝酸
塩の還元反応及びＤ−フラクトースとＬ−ラムノ
ースの利用性において極くわずかな相異点を示す
のみで、極めてよく一致している。他方、ストレ
プトミセス・ラベンドレーISP5069株とはISP−
培地７におけるメラニン様色素の生成、牛乳のペ
プトン化、硝酸塩の還元反応等に相異点をみとめ
る。これらの結果より、MF266−g4株はストレ
プトミセス・バージニエISP5094株及びストレプ
トミセス・ラベンドレーISP5069株に近縁の菌種
であり中でも前者とは極めて近縁の菌種であるこ
とが判明した。よつて、MF266−g4株をストレ
プトミセス・バージニエMF266−g4と同定す
る。 このストレプトミセスMF266−g4株を工業技
術院微生物工業技術研究所に、昭和55年２月６日
保管委託申請し、微生物受託番号は微工研菌寄第
5401号である。放線菌は人工的に、また自然界で
変異をおこしやすいが、本発明にいうストレプト
ミセスMF266−g4株はそれらの変異菌のすべて
を包含する。本発明にいうこれらの菌種は、
MF266物質を生産して本菌種およびその変異菌
と明確に区別されない菌株をすべて含むものであ
る。 本発明の方法を実施するに当つては、MF266
物質の生産菌株の胞子または菌糸を栄養源含有培
地に接種して、好気的に発育させることによつて
MF266物質を含む培養液が得られる。栄養源と
しては放線菌の栄養源として用いられる公知のも
のを使用できる。例えば、市販されている大豆
粉、落花生粉、棉実粉、酵母エキス、ペプトン、
肉エキス、カゼイン、コーン・スチープ・リカ
ー、NZアミン、硝酸アンモニウム、硫酸アンモ
ニウム、塩化アンモニウムなどの窒素源および市
販されているブドウ糖、澱粉、グリセリン、マル
トース、デキストリン、蔗糖、乳糖などの炭水化
物、あるいは脂肪などの炭素源を使用できる。ま
た塩化ナトリウム、炭酸カルシウム、硫酸マグネ
シウム、塩化マンガン、燐酸ナトリウムなどの無
機塩および各種のアミノ酸などを使用できる。そ
の他必要に応じて、微量の金属塩を添加すること
ができる。これらのものはMF266物質生産菌が
利用し、MF266物質の生産に役立つものであれ
ば良く、公知の放線菌の培養材料はすべて使用で
きる。その大量生産には液体培養が好ましく、培
養温度は生産菌が発育し、MF266物質を生産す
る範囲で適用しうるが、殊に好ましいのは25〜35
℃である。培養は普通MF266物質が充分蓄積す
るまで継続される。例えば、澱粉2.0％、大豆粉
2.0％、ブドウ糖1.0％、コーン・スチープ・リカ
ー1.0％、塩化アンモニウム0.25％、塩化ナトリ
ウム0.3％、炭酸カルシウム0.6％を含む液体培地
（PH6.2−6.4）で、ストレプトミセスMF266−g4
株をジヤー培養器中27℃で好気的に撹拌培養を行
なつたところ、２−５日間の培養で目的の抗生物
質の蓄積がみられた。 MF266物質の定量は試験菌として枯草菌
PCI219株を使用して、抗生物質の定量に用いら
れる通常の円筒平板法によつて行ない、本発明で
得られた純粋のMF266物質塩酸塩を標準
（1000u／mg）とした。しかし、ストレプトミセ
スMF266−g4株の培養において、本発明に係る
MF266物質以外に数種の活性物質が同時に生産
されているので、本発明における培養、抽出およ
び精製過程中のMF266物質の定量を枯草菌を用
いる円筒平板法のみによつて行なうのは困難であ
る。そこで高速液体クロマトグラフイーによる定
量法が次に示す実験条件によつて確立された。 カラム：μ−ボンダパツクＣ−18（米国ウオター
ズ社製）内径6.3mm、長さ30.5cm 溶媒系：メタノール−10％酢酸アンモニウム
（３：１） 検出：紫外部吸収（254nm） 流速：毎分1.0ml 上記条件でMF266物質は8.2分にピークが得ら
れ、そのピークの高さを測定することによつて
MF266物質を定量した。MF266物質はその性状
に従つて生産菌の培養液から溶媒抽出法、吸着法
および沈澱法など種々の方法で抽出され、さらに
精製される。 MF266物質は遊離の状態でクロロホルム、ブ
タノールなどの有機溶媒にわずかにとけるが、水
にとけ難い、またMF266物質は酸塩の状態で
水、メタノールにとけるが、他の有機溶媒にきわ
めてとけ難い。このMF266物質の性状にもとず
いて培養液などのMF266物質の水溶液からPH４
以上で、クロロホルム、ブタノールなどの有機溶
媒に転溶することができる。さらに、有機溶媒中
のMF266物質はPH３以下で水層に転溶すること
ができる。このようなMF266物質の性状にもと
ずいて、向流分配法によるMF266物質の精製法
が有効である。例えば、クロロホルム−メタノー
ル−酢酸ナトリウム緩衝液（２：２：１）の混液
を使用して、PH3.5の緩衝液のときの分配係数は
0.41−0.55、PH4.0の緩衝液のときの分配係数は
0.23であつた。これらの有機溶媒によるMF266物
質の抽出および精製法は不純物を分離するのに有
効な方法であるが、MF266物質の有機溶媒に対
する溶解度が一般に低いため、大量の物質を扱か
うには適さない。 MF266物質生産菌の培養液ではMF266物質は
一般に液体部分に限らず、菌体中にも存在する。
従つて培養液の滓よりMF266物質を有効に抽
出する必要がある。そのためにはメタノール、メ
タノール水またはそれらの微酸性溶液によつて
MF266物質を抽出することができる。また、培
養液を過する際、あらかじめ培養液にメタノー
ルを添加してから行なうことが好ましい一例であ
る。MF266物質は、吸着剤として活性炭のほか
に、弱酸性カチオン交換樹脂、例えばアンバーラ
イトIRC−50およびCG−50（米国ローム・アン
ド・ハース社製、Ｈ型）、また多孔性樹脂アンバ
ーライトXAD−２およびXAD−４などが用いら
れ、これらの樹脂に吸着されたMF266物質は酸
性アセトン水や酸性メタノール水で効率良く溶出
される。そのほか、CM−セフアデツクスC25
（フアルマシア社製）などのイオン交換体による
カラム・クロマトグラフイーも有用な精製手段で
ある。 また、MF266物質はその水溶液または混合溶
液中から通常の沈澱法によつて採取することがで
きる。すなわち、MF266物質の酸塩の水溶液を
中性または微アルカリ性にすることにより、ま
た、MF266物質の酸塩の水溶液に難溶性の有機
溶媒を加えることによりMF266物質を沈澱とし
て採取することができる。 MF266物質は、上述の抽出法、精製法を適宜
組合せあるいは繰返すことによつて純粋に採取す
ることができる。MF266物質は、前述のごとく
塩基性で不安定のため、酸塩として採取すること
が好ましい。 以下に実施例を示すが、本発明によつて明らか
にされたMF266物質の性状にもとずき、MF266
物質の製造方法を種々考案することができる。従
つて、本発明は実施例に限定されるものではな
く、実施例の修飾手段は勿論、MF266物質の性
状にもとずいて公知の手段を施してMF266物質
を生産、濃縮、抽出、精製する方法をすべて包含
する。 実施例 １ 寒天斜面培地に培養した放線菌MF266−g4株
（微工研菌寄第5401号）を、グリセリン2.0％、デ
キストリン2.0％、大豆ペプトン1.0％、酵母エキ
ス0.3％、硫酸アンモニウム0.2％、炭酸カルシウ
ム0.2％を含む液体培地（PH7.4に調整、500ml容
三角フラスコ２個に110mlずつ分注）に接種し、
27℃で48時間回転振盪培養（毎分180回転）して
種培養を得た。この種培養220mlを、澱粉2.0％、
大豆粉2.0％、ブドウ糖1.0％、コーン・スチー
プ・リカー1.0％、塩化アンモニウム0.25％、塩
化ナトリウム0.3％、炭酸カルシウム0.6％を含む
液体培地（PH6.2−6.4に調整）15を含むジヤー
培養器（30容）に接種し、27℃、毎分300回
転、通気量毎分15の条件で90時間培養した。 このジヤー培養器２基分の培養液を合し（24
）、メタノール12を加え、１時間撹拌したの
ち、過助剤としてハイフロ・スーパーセル（米
国ジヨンス・マンビル社製）を加えて過し、34
の液（430u／ml）を得た。滓にさらに５
のメタノールを加えて１時間撹拌して過し、
その液に水10を加えて再び過し、15の
液（120u／ml）を得た。両液を合し、アンバ
ーライトXAD−２樹脂（米国ローム・アンド・
ハース社製）３を含む塔（９×50cm）に通過吸
着せしめ、６の水で洗浄後、アセトン−
0.001N−HCl（１：１）で溶出し、初めの2.5
を捨て、次の5.0（2790u／ml）の活性画分を集
めた。 この溶液を水酸化ナトリウム溶液でPH6.0に調
整したのち、アンバーライトCG−50樹脂（Ｈ
型、タイプＩ、米国ローム・アンド・ハース社
製）400mlを含む塔（４×40cm）に通過吸着せし
め、メタノール−水（３：１）1.0で洗浄後、
メタノール−0.1N塩酸（４：１）で溶出して850
mlの活性溶出液を得た。これをアンバーライト
IR−45樹脂（OH型）でPH5.0に調整したのち濃縮
乾固して、赤色粗粉末（塩酸塩）6300mg
（2020u／mg）を得た。 実施例 ２ 実施例１で得られた赤色粗粉末6300mgに水500
mlを加えて溶解し、水酸化ナトリウム溶液でPH
6.5に調整したのち、クロロホルム−メタノール
（９：１）混液1000mlで３回抽出した。溶媒層2.7
を減圧濃縮乾固して赤色粉末1386mg（2920u／
mg）を得た。 この赤色粉末1380mgを、クロロホルム−メタノ
ール−0.1M酢酸ナトリウム緩衝液（PH4.0）
（２：２：１）の溶媒系で、上下層各10mlの向流
分配を行ない、79回転溶した。第９−26管の上下
層を集めて、110mlまで減圧濃縮し、水酸化ナト
リウム溶液でPH7.4としたのち、クロロホルム−
メタノール（９：１）混液500mlを加えて抽出
し、溶媒層を減圧濃縮乾固して588mgの赤色粉末
（2140u／mg）を得た。 この赤色粉末580mgを、クロロホルム−メタノ
ール−0.1M酢酸ナトリウム緩衝液（PH3.5）
（２：２：１）の溶媒系で、上記と同様の向流分
配を行ない、79回転溶した。第20−34管の上下層
を集め、溶媒を溜去し、PH7.4としてクロロホル
ム−メタノール（９：１）混液500mlで抽出し、
溶媒層を減圧濃縮乾固して195mgの赤色粉末
（1837u／mg）を得た。 さらに、この赤色粉末190mgを、上記と同様の
溶媒系で向流分配を行ない、99回転溶した。第31
−40管から、同様に処理してMF266物質の赤色
粉末85.5mg（1337u／mg）を得た。この赤色粉末
は高速液体クロマトグラフイーで定量して約65％
の純度を示した。 実施例 ３ 実施例２で得られた赤色粉末を次の条件で高速
液体クロマトグラフイーにかけ、22〜29分に現わ
れるピークの画分を分散した。 カラム：μ−ボンダパツクＣ−18（米国ウオータ
ーズ社製）内径9.5mm、長さ30.5cm 溶媒系：メタノール−10％酢酸アンモニウム
（３：１） 検出：紫外部吸収（280nm）および屈折率 試料：10mg／ml溶液を毎回0.5ml使用 分取画分220mlに水500mlを加え、クロロホルム
900mlを加え、PH7.4で抽出した。クロロホルム層
を500mlの水で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウム
で脱水後、減圧濃縮乾固して31mgの赤色粉末を得
た。この赤色粉末を０，001N塩酸50mlにとか
し、凍結乾燥してMF266物質塩酸塩の赤色粉末
（1000u／mg）31mgを得た。
トレプトミセス・バージニエISP5094株とは硝酸
塩の還元反応及びＤ−フラクトースとＬ−ラムノ
ースの利用性において極くわずかな相異点を示す
のみで、極めてよく一致している。他方、ストレ
プトミセス・ラベンドレーISP5069株とはISP−
培地７におけるメラニン様色素の生成、牛乳のペ
プトン化、硝酸塩の還元反応等に相異点をみとめ
る。これらの結果より、MF266−g4株はストレ
プトミセス・バージニエISP5094株及びストレプ
トミセス・ラベンドレーISP5069株に近縁の菌種
であり中でも前者とは極めて近縁の菌種であるこ
とが判明した。よつて、MF266−g4株をストレ
プトミセス・バージニエMF266−g4と同定す
る。 このストレプトミセスMF266−g4株を工業技
術院微生物工業技術研究所に、昭和55年２月６日
保管委託申請し、微生物受託番号は微工研菌寄第
5401号である。放線菌は人工的に、また自然界で
変異をおこしやすいが、本発明にいうストレプト
ミセスMF266−g4株はそれらの変異菌のすべて
を包含する。本発明にいうこれらの菌種は、
MF266物質を生産して本菌種およびその変異菌
と明確に区別されない菌株をすべて含むものであ
る。 本発明の方法を実施するに当つては、MF266
物質の生産菌株の胞子または菌糸を栄養源含有培
地に接種して、好気的に発育させることによつて
MF266物質を含む培養液が得られる。栄養源と
しては放線菌の栄養源として用いられる公知のも
のを使用できる。例えば、市販されている大豆
粉、落花生粉、棉実粉、酵母エキス、ペプトン、
肉エキス、カゼイン、コーン・スチープ・リカ
ー、NZアミン、硝酸アンモニウム、硫酸アンモ
ニウム、塩化アンモニウムなどの窒素源および市
販されているブドウ糖、澱粉、グリセリン、マル
トース、デキストリン、蔗糖、乳糖などの炭水化
物、あるいは脂肪などの炭素源を使用できる。ま
た塩化ナトリウム、炭酸カルシウム、硫酸マグネ
シウム、塩化マンガン、燐酸ナトリウムなどの無
機塩および各種のアミノ酸などを使用できる。そ
の他必要に応じて、微量の金属塩を添加すること
ができる。これらのものはMF266物質生産菌が
利用し、MF266物質の生産に役立つものであれ
ば良く、公知の放線菌の培養材料はすべて使用で
きる。その大量生産には液体培養が好ましく、培
養温度は生産菌が発育し、MF266物質を生産す
る範囲で適用しうるが、殊に好ましいのは25〜35
℃である。培養は普通MF266物質が充分蓄積す
るまで継続される。例えば、澱粉2.0％、大豆粉
2.0％、ブドウ糖1.0％、コーン・スチープ・リカ
ー1.0％、塩化アンモニウム0.25％、塩化ナトリ
ウム0.3％、炭酸カルシウム0.6％を含む液体培地
（PH6.2−6.4）で、ストレプトミセスMF266−g4
株をジヤー培養器中27℃で好気的に撹拌培養を行
なつたところ、２−５日間の培養で目的の抗生物
質の蓄積がみられた。 MF266物質の定量は試験菌として枯草菌
PCI219株を使用して、抗生物質の定量に用いら
れる通常の円筒平板法によつて行ない、本発明で
得られた純粋のMF266物質塩酸塩を標準
（1000u／mg）とした。しかし、ストレプトミセ
スMF266−g4株の培養において、本発明に係る
MF266物質以外に数種の活性物質が同時に生産
されているので、本発明における培養、抽出およ
び精製過程中のMF266物質の定量を枯草菌を用
いる円筒平板法のみによつて行なうのは困難であ
る。そこで高速液体クロマトグラフイーによる定
量法が次に示す実験条件によつて確立された。 カラム：μ−ボンダパツクＣ−18（米国ウオター
ズ社製）内径6.3mm、長さ30.5cm 溶媒系：メタノール−10％酢酸アンモニウム
（３：１） 検出：紫外部吸収（254nm） 流速：毎分1.0ml 上記条件でMF266物質は8.2分にピークが得ら
れ、そのピークの高さを測定することによつて
MF266物質を定量した。MF266物質はその性状
に従つて生産菌の培養液から溶媒抽出法、吸着法
および沈澱法など種々の方法で抽出され、さらに
精製される。 MF266物質は遊離の状態でクロロホルム、ブ
タノールなどの有機溶媒にわずかにとけるが、水
にとけ難い、またMF266物質は酸塩の状態で
水、メタノールにとけるが、他の有機溶媒にきわ
めてとけ難い。このMF266物質の性状にもとず
いて培養液などのMF266物質の水溶液からPH４
以上で、クロロホルム、ブタノールなどの有機溶
媒に転溶することができる。さらに、有機溶媒中
のMF266物質はPH３以下で水層に転溶すること
ができる。このようなMF266物質の性状にもと
ずいて、向流分配法によるMF266物質の精製法
が有効である。例えば、クロロホルム−メタノー
ル−酢酸ナトリウム緩衝液（２：２：１）の混液
を使用して、PH3.5の緩衝液のときの分配係数は
0.41−0.55、PH4.0の緩衝液のときの分配係数は
0.23であつた。これらの有機溶媒によるMF266物
質の抽出および精製法は不純物を分離するのに有
効な方法であるが、MF266物質の有機溶媒に対
する溶解度が一般に低いため、大量の物質を扱か
うには適さない。 MF266物質生産菌の培養液ではMF266物質は
一般に液体部分に限らず、菌体中にも存在する。
従つて培養液の滓よりMF266物質を有効に抽
出する必要がある。そのためにはメタノール、メ
タノール水またはそれらの微酸性溶液によつて
MF266物質を抽出することができる。また、培
養液を過する際、あらかじめ培養液にメタノー
ルを添加してから行なうことが好ましい一例であ
る。MF266物質は、吸着剤として活性炭のほか
に、弱酸性カチオン交換樹脂、例えばアンバーラ
イトIRC−50およびCG−50（米国ローム・アン
ド・ハース社製、Ｈ型）、また多孔性樹脂アンバ
ーライトXAD−２およびXAD−４などが用いら
れ、これらの樹脂に吸着されたMF266物質は酸
性アセトン水や酸性メタノール水で効率良く溶出
される。そのほか、CM−セフアデツクスC25
（フアルマシア社製）などのイオン交換体による
カラム・クロマトグラフイーも有用な精製手段で
ある。 また、MF266物質はその水溶液または混合溶
液中から通常の沈澱法によつて採取することがで
きる。すなわち、MF266物質の酸塩の水溶液を
中性または微アルカリ性にすることにより、ま
た、MF266物質の酸塩の水溶液に難溶性の有機
溶媒を加えることによりMF266物質を沈澱とし
て採取することができる。 MF266物質は、上述の抽出法、精製法を適宜
組合せあるいは繰返すことによつて純粋に採取す
ることができる。MF266物質は、前述のごとく
塩基性で不安定のため、酸塩として採取すること
が好ましい。 以下に実施例を示すが、本発明によつて明らか
にされたMF266物質の性状にもとずき、MF266
物質の製造方法を種々考案することができる。従
つて、本発明は実施例に限定されるものではな
く、実施例の修飾手段は勿論、MF266物質の性
状にもとずいて公知の手段を施してMF266物質
を生産、濃縮、抽出、精製する方法をすべて包含
する。 実施例 １ 寒天斜面培地に培養した放線菌MF266−g4株
（微工研菌寄第5401号）を、グリセリン2.0％、デ
キストリン2.0％、大豆ペプトン1.0％、酵母エキ
ス0.3％、硫酸アンモニウム0.2％、炭酸カルシウ
ム0.2％を含む液体培地（PH7.4に調整、500ml容
三角フラスコ２個に110mlずつ分注）に接種し、
27℃で48時間回転振盪培養（毎分180回転）して
種培養を得た。この種培養220mlを、澱粉2.0％、
大豆粉2.0％、ブドウ糖1.0％、コーン・スチー
プ・リカー1.0％、塩化アンモニウム0.25％、塩
化ナトリウム0.3％、炭酸カルシウム0.6％を含む
液体培地（PH6.2−6.4に調整）15を含むジヤー
培養器（30容）に接種し、27℃、毎分300回
転、通気量毎分15の条件で90時間培養した。 このジヤー培養器２基分の培養液を合し（24
）、メタノール12を加え、１時間撹拌したの
ち、過助剤としてハイフロ・スーパーセル（米
国ジヨンス・マンビル社製）を加えて過し、34
の液（430u／ml）を得た。滓にさらに５
のメタノールを加えて１時間撹拌して過し、
その液に水10を加えて再び過し、15の
液（120u／ml）を得た。両液を合し、アンバ
ーライトXAD−２樹脂（米国ローム・アンド・
ハース社製）３を含む塔（９×50cm）に通過吸
着せしめ、６の水で洗浄後、アセトン−
0.001N−HCl（１：１）で溶出し、初めの2.5
を捨て、次の5.0（2790u／ml）の活性画分を集
めた。 この溶液を水酸化ナトリウム溶液でPH6.0に調
整したのち、アンバーライトCG−50樹脂（Ｈ
型、タイプＩ、米国ローム・アンド・ハース社
製）400mlを含む塔（４×40cm）に通過吸着せし
め、メタノール−水（３：１）1.0で洗浄後、
メタノール−0.1N塩酸（４：１）で溶出して850
mlの活性溶出液を得た。これをアンバーライト
IR−45樹脂（OH型）でPH5.0に調整したのち濃縮
乾固して、赤色粗粉末（塩酸塩）6300mg
（2020u／mg）を得た。 実施例 ２ 実施例１で得られた赤色粗粉末6300mgに水500
mlを加えて溶解し、水酸化ナトリウム溶液でPH
6.5に調整したのち、クロロホルム−メタノール
（９：１）混液1000mlで３回抽出した。溶媒層2.7
を減圧濃縮乾固して赤色粉末1386mg（2920u／
mg）を得た。 この赤色粉末1380mgを、クロロホルム−メタノ
ール−0.1M酢酸ナトリウム緩衝液（PH4.0）
（２：２：１）の溶媒系で、上下層各10mlの向流
分配を行ない、79回転溶した。第９−26管の上下
層を集めて、110mlまで減圧濃縮し、水酸化ナト
リウム溶液でPH7.4としたのち、クロロホルム−
メタノール（９：１）混液500mlを加えて抽出
し、溶媒層を減圧濃縮乾固して588mgの赤色粉末
（2140u／mg）を得た。 この赤色粉末580mgを、クロロホルム−メタノ
ール−0.1M酢酸ナトリウム緩衝液（PH3.5）
（２：２：１）の溶媒系で、上記と同様の向流分
配を行ない、79回転溶した。第20−34管の上下層
を集め、溶媒を溜去し、PH7.4としてクロロホル
ム−メタノール（９：１）混液500mlで抽出し、
溶媒層を減圧濃縮乾固して195mgの赤色粉末
（1837u／mg）を得た。 さらに、この赤色粉末190mgを、上記と同様の
溶媒系で向流分配を行ない、99回転溶した。第31
−40管から、同様に処理してMF266物質の赤色
粉末85.5mg（1337u／mg）を得た。この赤色粉末
は高速液体クロマトグラフイーで定量して約65％
の純度を示した。 実施例 ３ 実施例２で得られた赤色粉末を次の条件で高速
液体クロマトグラフイーにかけ、22〜29分に現わ
れるピークの画分を分散した。 カラム：μ−ボンダパツクＣ−18（米国ウオータ
ーズ社製）内径9.5mm、長さ30.5cm 溶媒系：メタノール−10％酢酸アンモニウム
（３：１） 検出：紫外部吸収（280nm）および屈折率 試料：10mg／ml溶液を毎回0.5ml使用 分取画分220mlに水500mlを加え、クロロホルム
900mlを加え、PH7.4で抽出した。クロロホルム層
を500mlの水で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウム
で脱水後、減圧濃縮乾固して31mgの赤色粉末を得
た。この赤色粉末を０，001N塩酸50mlにとか
し、凍結乾燥してMF266物質塩酸塩の赤色粉末
（1000u／mg）31mgを得た。
第１図はMF266物質塩酸塩の臭化カリ錠で測
定した赤外部吸収曲線を示す。第２図はMF266
物質塩酸塩のメタノール溶液中、0.1N塩酸−90
％メタノール溶液中および0.1N水酸化ナトリウ
ム−90％メタノール溶液中で測定した紫外部吸収
曲線を示す。
定した赤外部吸収曲線を示す。第２図はMF266
物質塩酸塩のメタノール溶液中、0.1N塩酸−90
％メタノール溶液中および0.1N水酸化ナトリウ
ム−90％メタノール溶液中で測定した紫外部吸収
曲線を示す。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 赤色両性物質で、その塩酸塩は分解点178−
180℃、比旋光度〔α〕２５ Ｄ＝＋370゜（c0.1、メタ
ノール）を示し、臭化カリ錠で測定した赤外部吸
収曲線は添附図面の第１図に示す主なる吸収極大
を有し、メタノール溶液中で測定した紫外部吸収
曲線は220，235，254，290，380，475，496，535
および575nmにそれぞれＥ１％１cm208，276，232，
64，28，96，100，64および14の吸収極大を有
し、0.1N塩酸−90％メタノール溶液中で220
（肩）、235，254，290，380，480，497，535およ
び570nmにそれぞれＥ１％１cm188，264，241，64，
28，92，100，60および14の吸収極大を有し、
0.1N水酸化ナトリウム−90％メタノール溶液中
で213，253，292，360，560および597nmにそれ
ぞれＥ１％１cm688，247，48，36，100および100の吸
収極大を有し、水、メタノール、ジメチルスルホ
キシド、ピリジンにとけるが、クロロホルム、ア
セトン、ベンゼン、酢酸エチルの有機溶媒にとけ
難く、シリカゲルの薄層クロマトグラフイーでク
ロロホルム−メタノール−10％酢酸アンモニウム
（20：15：１）の溶媒系で展開するとRf0.27、ク
ロロホルム−メタノール（１：１）の溶媒系で展
開するとRf0.06、クロロホルム−メタノール−酢
酸（20：５：１）の溶媒系で展開するとRf0.10を
示すことを特徴とするアンスラサイクリン系抗生
物質MF266物質。 ２ ストレプトミセス属に属するMF266物質生
産菌を、栄養源を含有する培地中で好気的に培養
してその培養物中にMF266物質を生産せしめ、
培養物からMF266物質を採取することを特徴と
するMF266物質の製造法。 ３ ストレプトミセスMF266−g4株（微工研菌
寄第5401号）を栄養培地中で25−35℃の温度範囲
で好気的に培養してその培養物中にMF266物質
を生産せしめる特許請求の範囲第２項記載の方
法。
Priority Applications (10)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP55126087A JPS5750994A (en) | 1980-09-12 | 1980-09-12 | Novel antibiotic mf266 substance and its preparation |
| ZA815330A ZA815330B (en) | 1980-09-12 | 1981-08-03 | New antibiotic,mf 266 substance and production thereof |
| KR1019810002853A KR840001258B1 (ko) | 1980-09-12 | 1981-08-06 | 신항생물질 mf 266 물질의 제조방법 |
| US06/296,923 US4420473A (en) | 1980-09-12 | 1981-08-27 | Antibiotic, MF266 substance and production thereof |
| ES505429A ES505429A0 (es) | 1980-09-12 | 1981-09-11 | Procedimiento para la produccion de un nuevo antibiotico desiguado como sustancia mf 266. |
| DE8181401416T DE3161185D1 (en) | 1980-09-12 | 1981-09-11 | New antibiotic substance, its process of production and pharmaceutical composition containing the same |
| DE198181401416T DE48660T1 (de) | 1980-09-12 | 1981-09-11 | Antibiotika, verfahren zu deren herstellung und diese enthaltende pharmazeutische zusammensetzungen. |
| CA000385747A CA1173384A (en) | 1980-09-12 | 1981-09-11 | Antibiotic, mf266 substance and production thereof |
| EP81401416A EP0048660B1 (en) | 1980-09-12 | 1981-09-11 | New antibiotic substance, its process of production and pharmaceutical composition containing the same |
| AT81401416T ATE4988T1 (de) | 1980-09-12 | 1981-09-11 | Antibiotika, verfahren zu deren herstellung und diese enthaltende pharmazeutische zusammensetzungen. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP55126087A JPS5750994A (en) | 1980-09-12 | 1980-09-12 | Novel antibiotic mf266 substance and its preparation |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5750994A JPS5750994A (en) | 1982-03-25 |
| JPS6261037B2 true JPS6261037B2 (ja) | 1987-12-18 |
Family
ID=14926274
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP55126087A Granted JPS5750994A (en) | 1980-09-12 | 1980-09-12 | Novel antibiotic mf266 substance and its preparation |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4420473A (ja) |
| EP (1) | EP0048660B1 (ja) |
| JP (1) | JPS5750994A (ja) |
| KR (1) | KR840001258B1 (ja) |
| AT (1) | ATE4988T1 (ja) |
| CA (1) | CA1173384A (ja) |
| DE (2) | DE48660T1 (ja) |
| ES (1) | ES505429A0 (ja) |
| ZA (1) | ZA815330B (ja) |
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| IT1155446B (it) * | 1982-12-23 | 1987-01-28 | Erba Farmitalia | Procedimento per la purificazione di glucosidi antraciclinonici mediante adsobimento selettivo su resine |
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| EP0157203A3 (en) * | 1984-04-04 | 1986-10-01 | American Cyanamid Company | Antitumor agents ll-d49194 alpha 1, ll-d49194 beta, ll-d49194 beta 2, ll-d49194 upsilon, ll-d49194 delta, ll-d49194 epsilon, ll-d49194 zeta, and ll-d49194 eta |
| CH667904A5 (de) * | 1985-06-17 | 1988-11-15 | Immanuel Straub | Rohrkupplung. |
| CH666949A5 (de) * | 1985-08-09 | 1988-08-31 | Immanuel Straub | Rohrkupplung. |
| US5304373A (en) * | 1991-10-22 | 1994-04-19 | Bristol-Myers Squibb Co. | Antitumor antibiotic |
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|---|---|---|---|---|
| FR1533151A (fr) * | 1962-05-18 | 1968-07-19 | Rhone Poulenc Sa | Nouvel antibiotique et sa préparation |
| US3183157A (en) * | 1963-02-01 | 1965-05-11 | Upjohn Co | Antibiotic nogalamycin and method of producing |
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| US4071411A (en) * | 1974-07-27 | 1978-01-31 | Zaidan Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyu Kai | Antitumor antibiotics aclacinomycins A and B [RD-9187A] |
| US4127446A (en) * | 1975-09-07 | 1978-11-28 | Tadashi Arai | Process for producing antibiotics mimosamycin and chlorocarcins A, B and C |
-
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-
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- 1981-09-11 AT AT81401416T patent/ATE4988T1/de not_active IP Right Cessation
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- 1981-09-11 EP EP81401416A patent/EP0048660B1/en not_active Expired
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| DE3161185D1 (en) | 1983-11-17 |
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| ZA815330B (en) | 1982-09-29 |
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