JPS6322179A - 耐酸性ビフイズス菌乾燥菌体製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、ビフィズス乾燥菌体製造法に関し、生菌数を
長時間の保存においても安定に維持し、しかも酸に対す
る耐性が高い乾燥菌体の効率的な製造法に関するもので
ある。

（従来の技術） ビフィズス菌は有用な腸内細菌とされている。

しかしながら偏性嫌気性菌のため酸素の存在下で死滅し
やすく、又、ｐＨの低い状態においても著しく生菌数が
低下する。

このため、ビフィズス菌の乾燥菌体調製においては可及
的に空気に触れないように常に保持し、保持中も脱気、
遮光、低温などの製造条件をきびしく制御しているにも
かかわらず死滅し易く、乾燥後の菌体粉末も一定な生菌
数を長時間にわたって維持することは困難である。

一般にビフィズス菌の凍結乾燥には保護剤として脱脂粉
乳や各腫糖類、アミノ酸類などが使用さｈており、これ
らは保護剤としてすぐれた効果を示す。

しかし、この場合混合液をがなり低温に保持しても、な
お活発なビフィズス菌の代謝によって産出される酸によ
’）ｐｌ＋の低下が見られるのが普通である。

このｐＨ低下の程度は生残ビフィズス菌数や温度、時間
により異なるが、大量生産規俣においては作業時間が良
くなるため過度のｐｔ＋低下に達することがある。この
ようなビフィズス菌液を凍結乾燥した場合には凍結１０
客や乾燥障害が者しく凍結収率が低下する。

また乾燥菌体の保存中における生残性や耐酸性も明らか
に劣るものである。

（発明が解決しようとする問題点） 本発明はビフィズス菌液と保護剤を混合した場合にとフ
イズス菌により産出される酸により保護剤から炭酸〃ス
を発生させて嫌気状態を良好に維持するとともにｐｌ＋
低下を軽減することにより凍結及び乾燥障害を少なくし
、乾燥菌体の生残性改善を見出だす事を最大の問題点と
するものである。

（問題点を解決するための手段） 本発明は面頂に述べた問題、αを解決することを目的と
するものである。

本発明者らはこの目的実現のため鋭意研究を重ねていた
ところ、炭酸塩が極く有用なことを発見した。

即ち、一般にこのような効果を有する物質としてはナト
リウム、カルシウムアルミニウムなどの金属の酸化物、
水酸化物が考えられる。

本発明者等はビフィズス菌濃厚液を凍結乾燥するに際し
、保護剤として脱脂粉乳、糖類、アミノ酸などを含む混
液中に、各種の塩類を０．１〜１０％添加し、３７℃、
１時間放置後、これらを凍結乾燥した菌体粉末のビフィ
ズス生菌数などを調ヘタ。

使用した塩類は次の通りである。

酢酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、
リン酸−ナトリウム、リン酸二ナトリウム、硫酸ナトリ
ウム、水酸化カルシウム、リン酸水素カルシウム、炭酸
カルシウム、硫酸マグネシウム、炭酸マグネシウム、酸
化マグネジツム、硫酸アルミニウム、塩化アルミニウム
、ケイ酸アルミニウム、人工カルルス塩（ｆ５９版　日
本薬局方解説書Ｄ）。

その結果、実施例に示すように、胃液の塩酸を中和する
薬剤として一般に広く使用されている炭酸塩のうちで重
炭酸ナトリウム（ｍ曹）と炭酸マグネシウムが特に有効
であることを確認した。

この重炭酸ナトリウムと炭酸マグネシウムが有効である
メカニズムは次のようであると推察される。即ち、これ
らの炭酸塩は冷水に比較的溶は難いが、しかしこのわず
かに溶けた部分は解離の結果として弱アルカリ性を呈す
ると共に炭酸ガスを発生する。このためビフィズス菌の
代謝により産出された酸が中和され、又、炭酸がスによ
り保護されるため、ビフィズス菌の生存に対して有効に
働き、ビフィズス菌乾燥菌体の保存安定性及び耐酸性に
するすぐれたものが得られるように思われる。

なお、制酸剤としては炭酸カルシウムや炭酸ナトリウム
も広く使用されるものであるが、炭酸カルシウムは第１
表に示すように重炭酸ナトリウム及び炭酸マグネシウム
に比べて溶解度が過小であり、従ってｐＨ低下の阻止が
不充分なために効果が少なく、他方炭酸ナトリウムはこ
れとは逆に、溶解度が過大であり、がっρ１］低下の阻
止限界が高すぎる（ｐｉｔ　１１．６）ために効果がほ
とんどないものと推察される。

本発明の好適な実施例を次項に説明する。

（実施例） 実施例−１ 脱脂粉乳７％、酵母エキスＯ０５％、ツイーン８００．
０５％、Ｌ−システィンの０．０５９６などを含む培養
液を加熱滅菌冷却。これにビフイドバクテリワム・ロン
ガムＡ　Ｔ　ＣＣ１５７０７を接種。培養中１０％Ｎａ
。

ＣＯ３を添加してｐｉｔ６．０以上に維持しＣ○２ガス
、Ｎ２ガスを通じながら３７℃、８時間の嫌気培養を行
い、培養終了後、遠心分離により濃厚菌液をＩＴＩ製し
た。

これに脱脂粉乳２５％、デンプン分解物１０％、グルタ
ミン酸ナトリウム１％含む保護剤溶液をｐＨ７，０に１
４整後、重炭酸ナトリウム、若しくは炭酸マグネシウム
又はその両者を混合して加えよく分１牧させた。

重炭酸ナトリウム、炭酸マグネシウムの保護剤溶液への
添加量は０．５％以下では効果がなく１０％以上ではｐ
ｉｔの上昇が大きい。このため、経済性と呈味性を：ｉ
ｆａ！　して添加量１％〜７．５％を選んだ。

このようにして調整した保護剤溶液に前記濃ｊ７菌液を
加え混合した。

ついでこれらをそれぞれ半量に分け、一方を直ちに凍結
乾燥、他方を３７℃１時間放置後、凍結乾燥を行った。

なお、重炭酸ナトリウム、炭酸マグネシウムを加えない
ものを対照として制酸作用、凍結乾燥収率、乾燥菌体の
保存安定性、耐酸性について比較した。

その結果、第２表、第３表に示すように明らかに重炭酸
ナトリワム、炭酸マグネシウムの効果が認められた。

第３表；耐酸性（実施例−１）車 京耐酸性試験法 人工胃液（＃母エキス１．２５ｇ、ペプトン２．５ｇ、
乳糖０．５ｇ、ツイーン８０　Ｑ、５ｇ、Ｌシ入ティン
０．０５．、塩化ナトリウム１．０８を蒸留水５００ｍ
１で溶解後滅菌）に乾燥菌体ヲ入７ｔ、Ｉ　Ｎ　ＨＯ２
”ｌ’ｐＨ３，０１：ＷＩ４９１Ｊｚ。

これを３７℃１時間、３ＩＬ！間放置し、直ちにｐＨ６
，０に？Ｉ４整し、生菌数を測定した。

実施例−２ 実施例−１において使用したと同じ組成の液体培地で濃
厚菌液をＩＩ！！ｓ！した。

これに脱脂粉乳１２％、砂糖５％、ゼラチン１．２％、
グルタミン酸ナトリウム１．０％を含む保護剤溶液のｐ
Ｈを７．０に調整後、重炭酸ナトリウム、炭酸マグネシ
ウムをそれぞれ加えた後よく分散させた。

これに前記濃厚菌液を加え、よく混合、実施例−１と同
様な方法で重炭酸ナトリウム、炭酸マグネシウムの効果
を調べた。

その結果、＃Ｓ４表、第５表に示すように明らかに重炭
酸ナトリウム、炭酸マグネシウムの効果が認められた。

ｔｐＪＳｌ＆；耐酸性（実施例−２）本本耐酸性試験法 人工胃液（酵母エキス１．２５ｇ、ペプトン２．５ｇ、
乳糖０．５ｇ、ツイーン８００，５ｇ。

Ｌシスティン０．０５ｇ、塩化ナトリウム１．Ｏｇを蒸
留水５００−で溶解ａ滅菌）に乾燥菌体を入れ、ＩＮＨ
（Ｊ’でｐｌ＋　３．０に、ｉ！ｌ整した。

これを３７℃１時間、３時間放置し、直ちにｐ＋＋　６
．０に調整し、生菌数を測定した。

（本発明の作用及び効果） 本発明は前記した説明により明らかにしたように、一般
にビフィズス菌の凍結乾燥に供用される保護剤の、ビフ
ィズス菌から産出される酸によ’）ｐｌ＋の低下が見ら
れ、嫌気状態を不良にして凍結障害や乾燥障害を米たし
、かつ乾燥菌体の保存中における生残性　耐酸性を劣ら
せるのを、炭酸塩の保護剤への添加により、生残性と耐
酸性にすぐれたビフィズス菌乾燥体を製造できるもので
、極く有用な発明をなすものである。

出願人　新日本化学工業　株式会社 手続補正書 １．事件の表示　特願昭６１−１６４５２２２、発明の
名称　生残性及びａｔ酸性ビフィズス菌乾燥菌体製造法 ３、補正をする者 事件との関係　出願人 名　称　　新日本化学工業株式会社 ４、代理人 ６、補正により増加する発明の数 ７、補正の対象　明細書 補　　正　　の　　内　　穿 １、明細書第４頁第１３行に「カルシウムアルミニウム
」とあるを 「カルシウム、アルミニウム」 と訂正する。

２、明細書ｅｊＳ６頁第１０〜１１行に「耐酸性１こす
るすぐれたもの」とあるを ［耐酸性にすぐれたちの」 と訂正する。

３、明細書第８頁第７〜８行に「グルタミン酸ナトリウ
ム１％含む保護剤溶液」とあるを「グルタミン酸ナトリ
ウム１９６を含む保護剤溶液」と訂正する。

以　　　上

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. ビフィズス菌培養濃厚菌液に通常使用されている公知の
   保護剤中に重炭酸ナトリウム、炭酸マグネシウム等の炭
   酸塩を加え、凍結乾燥することを特徴とする生残性と耐
   酸性のすぐれたビフィズス乾燥菌体製造法。