JPS63240938A - リポソームの水性分散液 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は生物学的適合性表面（ｂｉｏｃｏｍｐａｔｉｂ
Ｌｇｓｕｒｆａｃｅｓ　）　、即ち生きている組織及び
体液との長い接触に適した表面に関１更に詳しくは新規
なリン脂質、その製造、それ刀）ら誘導された重合体、
及びＺ重合体の製造及びリン脂質の使用及び生物学的適
合性表面の製造における該りン脂質及びそれらの重合体
の使用及び生理学的に活性な化合物の長期の放出？与え
る組成物に関する。

少なくともたとえば人工器官の表面及び血液透析装置の
溝底部品ケ形戊するのに生物学的適合性の重合体ケ使用
するのぼ普通に実施されていることである。しかしなが
ら、これらの材料は完全なものではなく、生きている組
織との反応は問題を残している。たとえば表面に誘発さ
れる血栓症は、荷に大量の租液が人工肺及び人工腎７Ｊ
における如き異質の表面（ｆｏｒｅｉｇｎ　５ｕｒｆａ
ｃｅｓ）と接触する場合には依然として大きな困４であ
る。人工器官におけるクロットの形成は、もしクロット
が人工表面？破壊しく　ｂｒｅａｋ　　ｏｆｆ）そして
宿作用？及ぼす。最近、表面凝塊形成性（ｓｕｒｆａｃ
ｅｔｈｒｏｍｂｇｅｎｉｃｉｔｙ　Ｊｆｌ長Ｊ４Ａ保存
人工心１ａｋ使用せんとする試みケ挫折させた。人工石
、゛議により支持さｎた動物に起こる死の多くは人工６
説の機械的破損によって引起されるのでぼなくてクロッ
ト形成により引起こされる。透析膜、代用血液（ｂｌｏ
ｏｄ　　５ｕｂｓｔｉｔｕｔｅｓ　）及び人工肺はすべ
てこの＠題ゲ共Ｍする。

一般的な生物学的適合性に灯して医薬用途に］吏用され
る材料は望ましくぼ、 α）　純粋な物質として再生可能な製品であることがで
き、 ｂ）　劣化したり不利に変化することなく製造すること
ができ、 ｃ）　　特定の機能に灯して必要な機械的特性及び透過
性行性七有し、 ｄ）　機械的透過性又は表面特性が不利に変化すること
なく滅菌可能であり、 ｅ）　生物学的環境によって有害な方法で作用されず、 ｆ）　発局性でないことが望ましい。

血液との直接の１妾触七包含する用途において制約があ
る。脂質は１ノ問題となる程の血栓症を誘発するべきで
ぼなく、正常なりロツデイング機構？妨害するべきでは
なく、１１）細側要素又は血液の可溶性成分に問題とな
る程の損傷ｒ引起すべきではない。生物学的適合性の荷
に血液適合性の表面、即ち、血液凝固プロセスｒ活性化
せずそして血栓形成ケ促進しない表面盆製造する多くの
試みがなされ之。が刀する試みの例にアニオン件重合体
又は適当に配向したエレクトレット重合体の如き負にｎ
覗した表面、天然の抗凝固剤ヘパリン又は合成へｚＺ　
ＩＪン・印似体、固有に低い表面自由エネルギー？有す
る荷載した表面、アルブミン彼僅した表面、及び血液刀
）ら愛児的にアルブミンを吸収すると考えられるある（
■のポリメタンの如き表面？包含する。しかしながらす
べては限界ｒ有している。

表面の性質の一般的事項としてその問題ｒ考察すると、
生物学的ｒｅは体の丁べての区域において１に要である
という０とぼＥｔＥ大な意晟があるとの印象？うけた。

アベての生さている。咄砲は外側の膜ｒ有し、！ａ＠内
にぼ、種々のｒＩ＋ｉＩＩ胞器官、たとえば、ミトコン
ドリア、核及び内質１＠網（ｅ　ｎｄｏ　ｐ　ｌ　ａｓ
ｍｉ　ｃｒｅｔｉｃｕｌｕｍ）２区分するように作用す
る嗅がある。砿々なノ拙＠膜が極性脂質（たとえばリン
脂質Ｊのマトリックスから４成される。刀為＜シて赤血
球は、たとえば、リン脂質二重膜のマドｌ）ツクス上に
構成さｎた細胞壁〒有する。脂質は７朋胞壁の外側表面
上にリン脂質レシチン（ホスファチジルコリア）及びス
フィンゴミエリンとＲ？Ｋに、そして訓ｊ＠壁の内側面
上に６スフアチンルセリン及びホスファチンルエタノー
ルアミンと右称に配置されている。後者は正味の代の荷
区七有しそしてそれ自身の上に血液（凝固を引起丁こと
が却られている。前者１２メ性イオン構造を有し、細＠
壁の外側表面を形成するσ 本発明は、リン脂質が体全体にわたり生物学的膜の必須
の構成成分でありので、生きている組織と接触するべき
異質物の表面におけろリン脂質によりこれらの膜１；与
えられｆｃ衣表面模造物（イミテーション）がそれら７
生“物学的適合注ならしめることの契現に基づくもので
ある、 これが実際にそのようであり、そして本出顆人の提案の
必須事項は含リンオキシ酸（ｐｈｏ８ｐｈｏ−ｒｕｓ　
　ｏｘｙ−ａｃｉｄ　）／−ｉ素収注イオン基が分子構
造の外側面に存在している人工的生物学的適合性の表面
ｆ；Ｎ″Ｔる物品又は物体〒与えることであること七見
出した。

その最も広い観点において、本発明（低下記−役式の共
役ジーイ１ンｒ提供する。

ＣＩＩ　２−　ＯＢ　＋ 式中、Ｂ、及びＢ２の少なくとも一つば式−＜Ｃｏ）　
　−Ｘ、−Ｃ−＝Ｃ−Ｃ＝Ｃ−Ｙ式中ｐはＯ又は１であ
り、Ｘｌは直接の萌合又は二価の脂肪族又は項状脂肪族
基であり、Ｙ１汀Ｈ又は−価の脂肪族又は環状脂肪族基
であり、各Ｂ。

及び／父ｄＢ、におけるＸ、及びＹ、の炭素原子の総数
は８乃至２６であり、Ｂ、及びＢ２の他方に（α）式 ％式％ の四−又は相異なる基であるか或いは（６）少なくとも
８個の炭素原子ゲ含有する脂肪族又は環状脂肪族基であ
り、ｎば０又汀工であり、ｍぼ２．３又ぼ４であり、各
Ｒぽ独立に１〜４１固の炭素原子？含有するアルキル基
７表わす。

本発明の池の視照ぽ前記した如き共役ジーイアを架構す
ることにエリ涛られた電合体を提供する。

こ汎らの電合体はイ４造 式中、Ｚ、　、ｚ２、Ｚｓ及びＺ４の二つぽ前記した如
きＹ、七表わし、Ｚｌ　、Ｚ２　、Ｚ３及びＺ４の曲の
二つに各々−ｘ　Ｉ　　（ｃ　ＯＪ　ｐ　　Ｇ７表わし
、ここでＸ、及びｐは前記した通すであり、ＧはＨ２−
Ｑ− 孕表わし、式中、ｎ、ｍ及びＲは前記した通りであり、
架橋した鎖は同−又ぼ相異なるＧ残基に結合している、
の・子・シし単位′？！：Ａｌ習含、好する。

式１の共役ジーインは好ましくはべ性イオン性基が天然
のリン脂質レシチン及びスフィンゴミエリンのホスフェ
ート積台した基、即チ、コリンホスフェート基： Ｏ○ 又ぼ関連したホスフィン１倍合した基：であるところの
兵役ジーインである。

・２子ｆしい双性イオン性基ばｍが２であるがｍが３又
は４であることもできる天然に存在する生成物のり、Ｉ
ｌ似１・棹であり、そして各Ｒ基は天然に存在する生成
物においてはそうであるが、メチルであることが好まし
いが、シたしＲぼエテル、プロピル又はブチルであるこ
ともでき、そして成性イオン性基は四級窒素において非
対称に置換されていてもよい。

本発明の共役ジーインに寂いてぼ、１’ｔＱ　Ｂ　、及
びＢ２は各４式 ％式％ の基全表わ丁ことも１Ｅ−ｆＬい。

実際問題として、対称化合物ぼ合成するのが最も容易な
化合物、叩ちＢ１及びＢ２においてｐｌＸ、及びＹｌが
同一である化合物である。したしながら、刀）刀）る対
称性は本発明に促えば必須ではなく、そして各Ｘ１及び
Ｙ、が同−又は相異なる場合に８１及びＢ２の一つにお
いてｐがＯであり、Ｂ、及びＢ２の他方においてｐが１
である化合吻？使用することが可能である。じηムしな
がら、η１刀する物質を合成すること汀エリ困稚である
。

本発明の理論的基礎に関する限り、Ｂ１及びＢ２におけ
る共役ジー１ン系の位１４は重要ではない。

たとえば、Ｘｌは共役ジーインがカルボン酸ニスデル又
はエーテルにすぐＦＡ接しているように直接結合である
ことができ、そして刀）たる場合にＹ。

は少なくとも８個の炭素原子金含有する必要があるであ
ろう。共役ジ−イン系が、Ｙ、が水素であり、Ｘ、が少
なくとも８個の炭素原子？よ有する工うにカルボン酸ニ
スデル又はエーテル基から改い疎水性鎖のその端部にあ
ることも同じく可能である。し刀１しながら、以下に史
に詳γ、曲に議論する理由に工っで、共役ンーイン系が
Ｘｌ及びＹ、においてほぼ同じ数の炭素原子があるよう
に疎水性基の中心に内力）って泣ｄするように配［ヴさ
れているのが最も１更利であることが連層見出さｎる。

Ｘ、及びＹ、は各々好ましくぼ脂肪族又は環状脂肪族基
である。本発明者の初期の夷１倹は脂肪族又は偵状脂肪
族基が未分岐炭化水素痛である化合物に東中されている
けれども、脂肪族又は環状脂肪族基が分岐状炭化水素基
であるべきではない理由又は炭化水素鎖上に・ぴ喚基、
之とえばアルコキシ置換基又は・・ロゲンオ含有すべき
であるという理由は同もない。下記説明において明らか
となる理由で、兵役ジ−イン系が疎水性鎖におけるｉ准
−の炭素−炭素不砲祁？表わすが、もし１１カロの架搗
結合が所望さ扛るならば、更なる炭素−炭素不胞刈が基
ＸＩ及びＹｌに存在することができることが好ましい。

各１練水ｉ生鎖が総数１２〜３０個の炭素原子で含有す
るように各基Ｂ、及びＢ２におけるＸｌ及びＹ、におけ
る炭素原子の総数が８〜２６であることは重要である。

もし基Ｂ、及び／又はＢ２が１２個エリ少ない炭素原子
ｒ含有するならはイ尋られるＹｌ質は非虜に低いｒ＠度
の場合？除いて１合するのが困・碓であること？見出し
友。実際問題として、４Ｂ、及び／又ぼＢ２に１６乃至
２６個の炭素原子がある場合に、時に鎖が２２又は２４
１固の炭素原子金含有する場ｋＫ責も満足すべき結宋が
得られることで見出した。

Ｘ、及びＹｌにおける炭素原子の正確な購造配置は１本
発明にとって重要でになく、それらの主要な機能は該化
合物に正しい程度の疎水性７付与し、そして都合の良い
温度で重合金許容することであるが、炭素原子が直鎖又
は分岐溝造内にあるがＸｌ及びＹｌは貨状脂肪族１記置
中に３〜８個又ぼ更に多くの炭素原子ｒ含有する瞬状脂
Ｕｊ族残基才含むこともできることば必須でにない。

共役ジーインのＪＦ合に関しての下記の説明力）ら明ら
かになる理由によって、両Ｂ７文びＢ２汀共役ジーイン
系が分子内及び分子ｒｉａｌ　１１合に８７ＩＯするこ
とができる工うに共役ンーイン系？含むことば好ましい
。し７１１）シながら、単に分子間重合に工っで十分な
程度の架橋〒得ることができ、その場合に、基Ｂ１及び
Ｂ２の一つは共役ジー１ン系ｒ含有丁心ことのみが必須
である。Ｂ、及びＢ２の１しくは炭化水素残基であるこ
とができ、こｎ、ぽ飽和さｎていてもよく又は、孤立も
しくは共役ジ−１ン系と共インしていてもよいオレフィ
ン又は多分単一のアセチレン［１不・包和ｒ含有してい
てもよい。

刀≧刀）る基はやぼりエステル又ぼニーデル基？介して
グリセロール残基に結合しており、そして少なくとも１
２個の炭素原子音やはり含有丁めべさである。

本発明の共インジーインはそれ自体公刊の方法によって
悶造することができる。改に、ス１生イオン性基ｒｒ１
通当なホスホン酸又はホスフィン酸或いは工りグリセロ
ールのα−ヒドロキシ基に反応させて必要なリンエステ
ル基ｒ形成することにより導入することができる。基Ｂ
、及びＢ２ぼ、カルボ７ｙ４Ｂ、ＣｏＯＨもしくはアル
コールＢ、ＯＨ又は対応するＢ２Ｃ０ＯＨもしくはＢＯ
Ｈ物質或いは上ｄ己刀ルボン岡又にアルコールの一つの
グリセロール又はぞのエーテル形成性もしくにエステル
形成性誘導体とのエステルもしくはニーデル形成件誘導
体？使用するエステル化又はエーテル化に工り分子中に
導入することができる。これらの反応は一方ではグリセ
ロール又はその誘導体と、他方カルボン又はアルコール
及びリンエステルとの間で同時に又はいずれ刀１の順序
で引続いて行なうことができめ。本発明の好ましい化合
物である対称リン脂質の製造に対して、我々は、実際上
は選ばれた含リン酸又はリン酸との必要なグリセロール
モノエステルｒ形成し、次いでこのモノ−゛リンエステ
ル？選ばれた共役ジ−インカルボンｒｔｌの無水物（上
記Ｍｘジシクロへキシル−カルボジイミドと処理するこ
とによって得られた］と反応させ、次いでダリセロール
モノエステルｋＷ機浴媒中で且つ有機塩基の存在下に無
水物と反応させるのが便利であることがわ刀）つた。

エステル基の形成のための他の既知の方法も等しく使用
することができる。ｐがＯである化合物？製造すること
が望まれる場合には、対応する常用のエーテル形底件プ
ロセスと使用することができる。

本発明の共役ジーインは、そｎらｒ化学活性線放射しく
　ａｃｔｉｎｉｃ　　ｒａｄｉａｔｉｏｎ　）　、普通
は＜３０Ｑｎｍの範囲の波長の紫外線放射にさらすこと
により重合することができる。刀）たる照射は隣接鎖の
共役ジ−イン系間の架橋７生成する。これに下記構造の
４返し単位？含有する重合体ｒ生じる。

式中、Ｚｌ、Ｚ２、Ｚ３及びＺ４は前記した通りである
。架橋に関与する共役ンーイン系は非対称が、Ｃ１及び
Ｃ４は非対称置換の故に相互に同等ではないので架橋が
各類のＣ８及び０１間で又はＣ１及びＣ４間又ぼＣ４及
びＣ４１司で起こる刀）どう炉に依存して種々の架橋し
た生成物が生じ得るたとえば、もし架橋がＣ１及びＣ４
間に起こるならば、繰返し単位は である。

重合体に関する我々の構造研究に架橋した重合体が一つ
又は一つエリ多くの可能な架橋した生成物ケ含］してい
るがいない７１）會未だ確立していないが、それらがす
べての架橋した溝道に共通である共役系 →Ｃ−Ｃ三ｃ−ｃ、ｃ−ｃ＝　ｃ−ｃ４＝ｔｌ　　　　
　　ＩＩ　　　　　　１ ？含有すること７確立した。

Ｂ、及びＢ２は両万共共役ノーイン系？含有する４計に
は、本発明の重合体の大抵の用途に灯して望ましい分子
内及び分子間架橋の両方が存在するであろう。この理由
で、Ｂ１及びＢ２は画方共共役ジーイン系勿含有丁０こ
とが好ましく、そして分子内架橋ケ等最適にするために
、ＢＩ及びＢ２の共役ジ−イン系の相対位（ばかほぼ同
じであること、換言丁れば共役ジーイン系ングリセロー
ル残基に接続する炭素鎖は長さにおいて炭素原子が２′
１ＩＩＡより多く異なるべきでにないことが好ましい。

本発明の重合体の意図する生物医学的用途の点刀λら、
重合は化学活性線、普通ぼ可悦線の波長上り短い波長ケ
有アゐ化学活性線に曝り模することによって最も良く誘
発されるが、原理的に共役ンーイン系の重合ｒ誘発する
ことができることが知られた任意の方法ｒ本発明の重合
体の製造に対してて使用することができる。共役ジーイ
ンぼ種々の吠懐で、たとえば水上の＊層として、妹水件
基体之トエハ７″７０ン上の多層として、リポソーム（
ｔｉｐｏｓｏｍｅ　）として又ｒＨＫＢｒ円板内の固体
の状態で重合することができる。

本発明の重合体の主硬な用途の一つは、基体、符に＠欣
又ぼ他の体液又は内部体表面と後に〔σ接朕ＩＩＩ！Ｉ
！ぜしめらｎるこれらの嬶木上への辰面破榎〒与えるこ
とである。刀）かる衣面彼復は、夷除上、本発明の共役
ジーインで基体？、彼饅し、仄いて化学活性線に曝４丁
りことによってその場で共役ンーインン重合することに
よって普通は最も良く導入される。本発明の共役ジーイ
ンは無色の＠質であるが、重合が進むにつれて、共役ジ
ーインが中間体カルベンに先ず転化されると先ず赤色範
囲にわたって進行するきわだった色の変化があり、次い
でこの遷移状態カルベン中間体は赤色又は紫色の着色ケ
有する最終重合体分子に転化さｎる。結果として、基体
上の東金は目で睨て月うことができる。基本−１／：１
．たとえば重合体、金属、ガラス、セラミック及び多く
の他のものであることができ、重合体の例はセロファン
、ポリ塩化ビニル、ポリカーボネート、ポリメチルメタ
クリレート、ポリエチレン、ポリテトラフルオロエチン
ン及びシリコーンコ゛ムである。刀）刀する。反覆され
定基体（グヘエ器官移植、■＃ｉｃ（ｐｒｏｓｔｈｅｔ
ｉｃ　　ｉｍｐｌａｎｔｓ　）、目、移植１咀織（ｅｙ
ｅ　　ｉｍｐｔａｎｔｓ　Ｊ及びコンタクトレンズ、診
）折装置、人工肺（ｌｕｎｇ　ｍａｃｈｉｎｅ　１へ上
回１１＜、縫合糸、人工レンズ、随意に１更用できる組
織、培償答器及び池の外科器具、＋袋、力尤−デル、恒
久的入口ボート（ｅｎｔｒｙ　　ｐｏｒｔ　）医薬送給
システム、注射器、子宮内器具、７包含する避妊装置、
及び包帯に便用丁０ことができり。

本発明はＭ膜内皮ｆｊｊｆ３　（ｃｏｒｎｅａｌ　　ｅ
ｎｄｏｔｈｅ−１ｉａｌ　　ｄａｍａｇｅ　）−２減少
さぜりのに１（艮１’３Ｖ７ズ上に辰面被榎？与えるた
めに特に好適である。

眼内レンズの最明の４多植は白内障油出と関・屯した皮
肉細胞損失（ｅｎｄｏｔｈ、ｅｔｉａｔ　　ｃｅｌｌ　
　１ｏｓｓ　）及び損傷？問題となる程増７１１］させ
ることができる。

この損傷はもしレンズが角膜内皮に吸醍するならは内皮
表面へのレンズ材料、ポリメチルメタクリレート（Ｐ　
ＭＭＡ　）の瞬間的付着により引起こされるように見え
る。

電子頒做境ｒ便用して、カクフマン（Ｋａｕｆ−ｍａｎ
）及び’ｈ　ノア　（Ｋ　（Ｌ　ｔＺ　）　ｉｑ　Ｐ　
ｈｆ　Ｍ　Ａ　７Ｊｋ　ラツ〈られｔレンズと１膜内皮
、」１＠との間の瞬間的接触でアら・冊胞膜がＩＯＬ炎
面への付゛昔刀為らの引雌しで生じたこと？示し友。

ときどき起るレンズ−内皮接触における刀り≧る、細胞
損傷ケ減じたり防止したりするポリメチルメタクリレー
トの表面変性に関する研究は、この重合体が問題（Ｃな
る程の短期又は長期の劣化ｒ示すことなく眼内で十分に
耐性でありことが既に示されたので実際的方法であるよ
うに思われる。新規物質ン導入する変法は同様に広範な
安全及び有効性試験の繰返しケ必安とするであろう。

この分野における従来の研究はレンズと内皮との間の付
着が疎水性ポリメチルメタクリレートと現水住眼内、徂
熾との間の相互作用であるという考えに基ついていた。

ポリメチルメタクリレート表面？移植に先立ちポリビニ
ルピロリドン（Ｐ’ＶＰＪ父なメチルセルロース浴孜中
に浸漬することによって４ポリメチルメタクリレ一ト表
面〒現水注に′Ｔめと、内皮損傷の臨宋発生率（ｃｌｉ
ｎｉｃαｔｉｎｃｉｄｅｎｃｅ　）ｆ減少させることが
示された。（二これらの眼内し／ズ表面で一時的に変え
工うとする同様な試みにおいてＦＶＰ、シリコーン油及
び血清の浸漬溶液が使用された。し刀）しながら、これ
らのレンズ７手術の丁ぐ前に浴液に浸漬することに面倒
で且つ不便であり、滅菌性（５ｔｅｒｉｌｉｔｙ　）及
び再生可能性の２祈しい問題が起こる。

本発明の物質は、本発明の物質のそれらの極性基が訓廁
外７ｆ（（ｅｘｔｒａ　　ｃｅｌｌｕｌａｒ　　ｆｌｕ
、ｉｄｓ　）に而する工うに眼内レンズ？被擾するのに
期用される。これは生きている組織及びイ本玖との短い
又は長い接触に対してそれケ好適ならしめそして皮肉Ｍ
Ｂ胞膜の引裂き？減じるであろう。次いで共役ジーイン
に安定化さｎて表面が親水性であり同時に生きている組
織に生物学的に適合性の重合体被覆ｒ形成する。

眼内し／ズ又は他の支持体長面は、様々な方法、たとえ
ば浴液又はエマルジョン被覆又はラングミアーブロジエ
ノト（Ｌａｎｇｍｕｉｒ−Ｂｌｏｄｇｅｔｔ　）多層浸
漬方法によって被覆することができ配向した層？得そし
て不規則な表面？処理丁心ことｒ可能とする。

被覆の付、育（ａｔ　ｔ　ａｃｈｍｅｎｔ　）　ｇ、た
とえば被覆されるべき重合体又は他の物質又はたとえば
浴楳処理の後それにより吸収された′＠質と反応性であ
る基？脂肪酸の眼内又は鎖の木端に有する脂質ケ使用し
て該表面への共有結合にエリ改良ｆることができる。別
法として、たとえば■合体基体ｒ低分子＠溶媒によって
膨潤させて脂肪哨残基の脂肪鎖が重合体構造中にその後
に吸収？生じることに工って被覆の物理的付着が起こり
得る。

本発明の共役ジーインの他の重要な用途はリボソーム（
ｌｉｐｏｓｏｍｅ　）の−及ｌ青にある。刀）刀するリ
ポゾームは生理学的に活性な′Ｐ／Ｑ質ケ支持し、その
故にたとえば非代謝性医薬品又は酵素７体へ持、現放出
させる生物学的適合注処万？与えることができるからで
ある。

刀に７１”るリボソームは水性媒体中に共役ジーイノ紫
分散させ、分散液の温度？リボソームの生成が起こる１
品度である脂質又はチャツプマン転移１度（ｔｉｐｉｄ
　　ｏｒ　　ｃｈａｐｍａｎ　　ｔｒａｎｃｉｔｉｏ、
ｎｔｅｍｐｅｒａｔｗｒｅ　）Ｌり高い温度に分散欣の
温度？上昇させ、次いで分散液に同曲温度に冷却するこ
とにエリ製造することができる。もし生理学的に活性な
物質がリポソーム生成期間中水性媒体中に存在するなら
ば、リポソームぼ活性脂質ｒ含有し、そしてリポソーム
膜ｆＡ造の代謝の結果として長期にわ７ｔす活性物質【
ゆっくりと放出すめ。

かかる取合わせの実際上の利点の一つぼ、このようにし
て水溶性及び水不溶性活性′！舛質ｋｆｆｉ方し、又は
所望にエリ環水ｍ性及び水不浴注物質ケ同じ処方内に、
水不溶性物質ケ脂肪中に先ず配合することによって処方
することが可能であるということである。

本発明の共役ジ−インリン脂質又はリポソームの膜ケ形
成するぞｎらの重合体はリポソーム内に導入された多く
の生理学的に活性な物質の補助薬として作用することが
しばしば見出さｎる。

リポソーム形５ｙ、期間中水酸化アルミニウム又は他の
補助薬ｒ水性媒体中に導入アリことによってこれらの処
方に水１浚化アルミニウム又は他の浦助薬ケ配合して生
理学的に活性′；ｆ：、物質の活性７強化することも可
能であ０゜ リポソーム形灰ぼ多層ラメラ構造７生じるように既知の
方法によって行なうことができる。小さす直径の単一ラ
メラリポノームは多重ラメラリボノーム（ｍｒｂｔ　ｔ
ｉ　−ｌａｍｅ　１ｉａｒ　　１ｉｐｏｓｏｒｎｅｓ　
）？超音波振動に付することによって発生させることが
できる。より大きい単一ラメラリポソームは共役ジ−イ
ンチアルコール中に溶解し、次いでこの溶液ｋａ射器７
通して水性媒体中に注入丁ゐことにエリ発生させること
ができる。これらの単一ラメラ物質は成るときは微小小
ｒ＠　（ｍｉ　ｃｒｏｕｅ　−５ｉｃｌｅｓ　）として
知られている。

単一ラメラである７）ｈ又は多層ラメラであり、そして
普通に生理学的活性物質及び場計により補助薬に含む得
られるリポソームは前記した如きイ白学活性線に曝露す
ることによって兵役ジーイン系？架倫することにより安
定化することができる。かかる照射は分子間で起こり、
そして共役ジーインの構造、多分分子内架喝に依存して
、本発明の重合体ケ含んで成るリポソーム分散ｌ夜ケ与
える。不発明の共役ジーインの架橋の前文は後に本発明
のリポソーム分散液中に他のリン脂質のリポソームを含
ませることも可能である。

リポソーム形態にある本発明の賀合体ケ処方すめことは
普通最も便利であるが、共役ジ−イン２大量に屯合し、
次いで重合体？押出してリン脂質重合体カプセルｒ与え
ることも可能である。或いは、本発明のリン脂質重合体
は他のリン脂質勿ペースとするリポソーム系内に含ｆ、
＋！：めこともできる。

抗原物質、ホルモン、酵累及び抗炎症剤の如き医薬？含
む広範に種類の生理学的に活性な＃ｌ質ｒ本発明のリポ
ソーム分散欣内に処決することができる。リポソーム中
のインフルエンデビールス又ぼそのフラグメント、ジフ
テリアトキシン、破傷１虱トキシン及びリポソームにお
けるウィルス源又はバクテリア源から４刀１れた他の抗
原性物質の配合は、インシュリンの如きホルモン、仇炎
症注スデロイドたとえばコルチコステロイド、たとえば
コルチゾ／、コルチゾール及びそ扛らのΔ′−デヒドロ
ー及び９−フルオロ誘導体；抗炎症性非ステロイド、た
とえばペプチド、免疫抑制性化合物、たとえばメソトレ
キセート、サリチレート、フェニルブタシン、及び加水
分解性酵素１′−幻する抑制剤と同じく現在では文献に
十分に記載されている。

これらの及び他の生理学的活性な物質がい刀りでしてリ
ボンーム組灰物内に導入され得ゐかについては、たとえ
ば米国特許第４．１７７．１１３号及び４４、１９９．
５６５号及び西ドイツ公開公報第２２・１９５５２号、
第２５２８４１１号、第２６４３６４１号、第２７１２
０３０号及び第２７１２０３１号に参照することができ
る。こ扛らの物質は本発明のりボンームに編入すること
ができる生理学的に活性な物質の疼型的なものである。

下記実施１り１１により本発明ｒ説明する。

夷飛例　ｌ （α）　ジアセチレン喉の合成 ＨＣ−ＥＣ（ＣＨ２）８Ｃ０２Ｈ（Ａ）ＨＣ＝Ｃ（ＣＨ
２）ｒＬＣＨ３ ｎ＝９、１１ ３、　　＋Ｃｔｉ３ＣＨ２ＭｇＢｒ Ｂｒ　ＭｇＣ＝Ｃ（ＣＨ，）ｎＣＨ３ ４、＋　Ｉ　２　　　１　Ｃ＝Ｃ（ＣＨ２）　ｎ　ＣＨ
３（Ｂ　）ＣＨ５（ＣＨ２）　　Ｃ＝−Ｃ−Ｃ＝Ｃ−＜
ＣＨ２）、Ｃｏ２ＨｆＪ　　２　（Ｃ）　　Ｒ−Ｎ＝Ｃ
＝Ｎ−ＲＣＨ５（ＣＨ２八Ｃへ＝　Ｃ−Ｃ−＝　Ｃ−（
ＣＨ２ン。

ｔ５１　　　（Ｄ）４−　ＣＨ２０Ｈ ０−ＣｄＣｌ２ アルケン及びアルクン酸？１モル当暑の臭素ｒゆっくり
とｎ０えることによって石と由ニーデル中において臭素
化した。ジブロモ誘・４体牙エタノール中で過剰のＫＯ
Ｈと還流することによってジブロ誘導体〒ただちに脱臭
化水素化し友。アルコール’ｃ　’＋Ｍ去しそして給Ｈ
Ｃ１＝ｚｔ川えた後、アルキンｒエーテル抽出によす卓
誰しそして真空蒸留（１０−’止１−１　ｔ）　）に工
り樗昶した。

非幻亦１生コドキーヴイクッ　カップリング（Ｃｈｏｄ
ｏｋｉｅｗｉｃｚ　　ｃｏｕｐｌｉｎｇ）（Ｄｆｌａ！
’）、反応成分の一つにヨウ化しなければならない。故
に１−アルキンｈ乾燥ジエチルニーデル（ＣａＨ２−沈
埋した］中の通力１に）ＭＪＩの臭化エチルマグネシウ
ムに卯えた。生成し之アセチレン注グリニヤー試薬ｒ添
加したＩ２と直しに反応させて所望の・・口誘・４（４
ｒ得た。反応フラスコの内容吻〒過剰の希）咋ｒ投中に
注ぎそしてヨー化アセチレンｔンエチルエーテル中に抽
出した。禾反応のＩ２？チオ硫酸塩洗浄にエリ除去し、
そしてジエチルニーデル？！−蒸発さぞた後真窒蒸留に
より精製ケ達成した。

アセチレンカップリング反応の詳ａｉ広範に検討されて
いる。希ＫＯＨｍ准に溶解した改に痕跡量のヒドロキシ
ル塩酸塩及び水性エチルアミン中に金屑した０、２５モ
ル当量のＣｕ２Ｃｌ２２卯えた。

次いでヨク化アルキン（１モル当＝−）一時に少量ずつ
孕ｎｉ］えた。始め刀１ら黄色の溶液は緑色に変わった
。アルキンの次の４７１［１＠に数ン商の１０％ヒドロ
キシルアミン洛１ｇ、？卯えることによって回復した。

最後に、反応混合↑勿７酸性にし、そして生成物？ジエ
チルニーデル中に油出した。ンインｊ俊７４０１５０℃
の石油エーテル刀１ら再、浩晶した。

酸は容易に重合した。紫外線及び赤外分光法はそれぞれ
共役三重結合及びカルボン酸基の存在？示した。

ｂ）　　リン脂質の合成 １設ケ塩化メチレン中に溶解し、０．５５モルの当量ノ
シシクロへキシルカルボジイミド’に７１０えるこ、−
とによって無水物に転化した。無水物に赤外分光法にエ
リ四駕した。

リン脂質はグプタ冴（Ｇｕｐｔａ　　ｅｔ　　ａｌ　）
の方法？１更用して合成した。グリセロホスファチジル
コリン−ＣｄＣｌ２錯体（■、０モル当量）７乾燥クロ
ロホルム（Ｐ２０ｓ迅浬した）中で３０時間無水物（Ｚ
５モル当寸］及び４−Ｎ、Ｎ−ンメチルアミノビリンン
（２−Ｏ当２）と１桑拌した。溶媒の除去後、メタノー
ル／クロロホルム／水（５：４：１、Ｖ／ＶＩＫ可溶な
画分２ｖ＃シンｌ　−３００（Ｒｅｘｙｎ　　Ｉ　−３
００）樹脂ツカラム？下へ通過させた。今度にＣｄＣ１
，及びアミノ−ピリジン７含マナい生、載物ｒセファデ
ックスＬＨ−２０（Ｃｅｐｈａｄｅｘ　　ＬＨ−２０）
によるクロマトグラフィによって梢製した。Ｉｆ１元ア
ルケン７基準とする全収率に５％である。

生成物及びジパルミトイルホスファチジルコリン〔ピュ
リス　グレード（ｐｕｒｉｓｓ　　ｇｒａｄとλＦｌｕ
ｋα〕盆薄層クロマトグラフィー〔メルクシリカゲル　
ブレート；　＠　’４Ｋ　、タロロホルム／メタノール
／水（６５：３５　：４、Ｖ／ＶＩ〕及び赤外分光法に
エリ比・佼した。Ｒｆ直及びスペクトルは同一であった
。生成物にデイットマー試薬（Ｄ　ｉ　ｔ　ｔｍｅ’ｒ
　　ｒｅｃＬ　ｑｅ　ｎｔ　）　Ｔ”Ｇｔ　ｇ　ｔ、＊
４合Ｋ　正の試験（ｐｏｓｉｔｉｎｅ　　ｔｅｓｔ　］
　（＃色に変った）τ与えた。紫外線分元法による検肴
は共役した三重結合が存在していることン示した。生成
物はリン脂質１，２−ジトリコサノイル＜Ｃ２５）−及
び１．２−ペンタコサノイル（Ｃ２５）　−１０、１２
−ジイン−５ｎ−グリセロ−３−ホスホリルコリンであ
った。

これらのジアセチレンリン脂質（Ｃ２３及びＣ２５）に
討する転移温度及びエンタルピーに以下に示される： 実施例　２ 実、崩例１に使用さｎた方法を変性してＣ２３’）ン脂
質の兵役トリーイン急似体？生成した。アルキノイドカ
ルボン酸ＨＣ三Ｃ−（Ｃ１ｉ、鳥Ｃ０ＯＨケ英崩ｇＡＪ
　１に記載の如くして製造した。段階１０ビス−（クロ
ロメチルノーアセチレンｒデトラヒドロフラン及びヘキ
サメチルホスホルアミド中３モルのブチル−リチウムと
反応させてジアセチレンＩＩ　Ｃ＝　Ｃ−Ｃ＝−ＣＯＬ
　ｉ■のリチウム項ケ得、次いでこれ？臭化ｎ−オクチ
ルと反応させて約４０　Ｅ’ｏ収率でドデカジ−イン−
１，３盆形成した。

欠いでドデカジ−イン−１，３７ｚＮａＯＩと反応させ
て１−ヨード誘痒体Ｃ１ｌ、−（ＣＨ，）　７−Ｃ＝Ｃ
−Ｃ＝Ｃ−１２得、これ？次いで実施例１段［荷３に示
された条注下に前記したアルキン酸と反応させて共役ト
　リーインＣＨ３−（ＣＨ２）、−Ｃ＝Ｃ−Ｃ＝Ｃ−Ｃ
＝Ｃ（ＣＨ２）８ＣＯＯＩＩ？得た。

この共役トリアセチレン酸は実施例１の段階３で得られ
た共役ジアセチレン酸エリもＵＶスペクトルスペクトル
における高いピーク？示し、そのより高い程度の共役ケ
示す。兵役トリアセチレン酸ｒ実Ｉ＠例１の段階４に記
載の方法によってその無水物に転化し次いで無水物ケ実
施例１の段階５に記載のグリセロホスファチジルコリン
のＣｄＣｌ２錯体と反応させて兵役トリーアセチレンリ
ン脂質ｒ形成し、これは活性線にさらすと重合する。

共役トリーアセチレンリン脂質はトリーアセチレンカル
ボン酸でテトラヒドロフラン中のケトンケシメチルスル
ホキシド中でリン脂質のＣｄＣｌ２錯俸と反応させて共
役トリーアセチレンリン脂質を得ることによっても製造
された。

共役トリーアセチレン酸は、ｐＨｃ＝ｃ、（ＣＨ２）ａ
ＣｏＯＨにアセチレン結合のところでヨウ化し、ヨード
−デシン酸？ジーインＣＨ３゜＜Ｃｆ１２）、−Ｃ＝Ｃ
−Ｃ＝ＣＨと前記カップリング方法により反応させるこ
とエリ成る方法に工っても製造された。

実施例　３ 実施例１のジアセチレンリン酸脂質？ラングミアープロ
ジェット法ｒ使用してポリメチルメタクリレートからつ
くられた眼内レンズ勿被覆するのに使用した。この方法
において、脂質の表ＵｆＪ層は空気−水界面において形
成される。現水性極性表面勿有する最終脂質層が必安で
ある。

リン脂質単層ケＣｄＣ１２含有純水（Ｉｊｊ／ｌ。

ＣｄＣｌ２、水の抵抗１５ＡｆΩ／譚有機汚染物？検出
できない］上に広げる。Ｖンズ？〜６０℃の洗剤浴液（
ＲＢＳ　３５　）中で２時間ソーキングすることによっ
て清浄化し、次いで純粋中で完全に丁すいだ。単層は比
較的高い速度（自由に落下する父ば〜７３α／分）で下
向きに単層ケ通して４区し浸漬することによって移行せ
しめられる。上向きの移動期間中のみ堆積が起こる。被
覆された□物体が空気中へと抜き出されるとき、そ汎ぼ
最終層が外側親水性表面ケ有する工うに０．３□□□／
分又にそれ以下の速度で抜き出さ′ｎ、る。次いで被反
したレンズはその面から１．２００　ｕ　ｗ／ｂｒｄ　
１５．２ｍのエネルギー出力で２５４ｎｍにおいてビー
ク放射強度？有する紫外線ランプで室〆晶で１０秒間照
射した。或い汀、最終外側表面として所望の親水性極性
表面ｒ製造するために、被覆（所望の数の単層の２の間
脂質層の照射に工／）Ｍ合は水の下で行なうことができ
、レンズぽ氷表面が完全に洗浄されて後抜き出され祷る
。

脂質層の表面圧力はこれらの＋ｉの破壊圧に近い３５ダ
イン／αである工うに選ばれ、温度は２０〜２２℃（室
温］であった。不純物の影ｑＩｒ最小にする之めに、サ
ブフェーズ（５ｕｂｐｈａｓ　ｅ　）（ｌ夕／ｌ）にＣ
ｄＣ１，ケ卯えそしてｆｒたな噴霧単層のみを１吏用−
Ｔることが必要である。水はミリポア（Ｍｉｌｌ　　ｐ
ａｒｅ　）水稍裂シスデムにエリ積装し、製造後唯ちに
使用して再汚架？最小にする。

１−各表面の親水性は水滴の表面広がりの程度として定
義された“水接触角ｒ測定することにエリアッセイされ
る。水は標準（疎水性）ＰＭ’ＭＡの表面上にビーズｒ
形戊し、しかし、被覆された表面では、それは約１０秒
開広がりそして非常にゆっくりと押し流される（ｒｏｌ
ｌｓｏｆｆ　Ｉ。この挙動ハ被僅されたパースペックス
（ｐｅｒｓｐｅｘ　）　が数週間後空気上に保存され又
は数日水中に浸される場合変化しない。安定性な、数日
間７０３もＮａＯＨ溶液中の浸漬上官む滅菌方法が表面
特性？変えないという事実力１られ刀することができる
。

γ線照射ケ使用する眼内レンズ上への脂質重合体の恒久
的グラフト化はレンズ表面の紛る親水性変性？生じる。

変性さｎないＰＭＭＡに灯する水接触角は７２°であり
、グラフト化の後この角度は減少する（広がりが増加し
７？Ｃ）。

これらのレンズは臨床試験に付した。被覆されたレンズ
は皮肉損傷を起こしたり二ケ月の試験期間にわたり患者
に何ら有害な作用ケ生じることなく人間に導入された。

実施例　４ レンズＷ柔軟なデフロンシート０１屑厘厚さにより置換
えることにエリ実姉ｖＡＪ　３に記載の被覆方法？繰返
した。１皮覆されたシートで実す缶汐り３に記（戊の如
くして空気中で重合した。次いで柔軟なシートケ管に成
形し、血履〒管に・４人した。トロンビン活性を誘発す
る表面の能力の目安として試験管内フィブリノペプチド
Ａ発生試験？使用した。表面は血液クロッディングを開
始する傾向紮殆んど示さず、この点で未処理のデフロン
材料エリもすぐれていた。

実施例　５ レンズヶシリコーンコンタクトレンズ、ガラス’／　−
ト及Ｕｎｒｌｌセルロース透析膜［クプロファン（Ｃｕ
ｐｒｏｐｈａｎｅ）　〕に、ＣＦ）置僕えることにより
実砲例３の・被覆方法？燥区した。照射後の目による横
歪はこれらの三つの基体の各々に対する重合体フィルム
の形成ｒ示した。被覆された基体上の接触角測定は各場
合に親水性外側表面が形成されたことを示した。

実施例　６ 実施例１のジーＣ７，−ジー共役リン脂質？５０℃で水
中に導入しｔｏこれにそのリボゾーム形成温度、Ｃり高
い温度であり、欠いて分散液？、もし電子＠微鏡が多重
ラメラリボノームの存在？示す場合には室温に冷却した
。次いでこの分散液ヶ紫外線で照射した色の変化が見ら
れた時は共役ジイン系の架橋による重合を示す。やはり
同定されたスペクトル変化はこの有機物質の増加した兵
役路と合致していた。

この方法？検尺して酵素的に活性な固有タンパク質Ｃａ
　２２＋Ａ　Ｔ　Ｐ−アーゼ（１ｎｔｒｉｎｓｉｃｐｒ
ｏｔｅｉｎ　　Ｃａ”ＡＴＰ−ａｓｅ）２含有する水性
媒体中に共役リン脂質７導入した。得られるリボゾーム
のその後の検査ＨＩＪポンームがいくらかの酵素がリボ
ンーム内に導入されたことを示す酵素活性を示した。

実施例１のジーＣ２，共役リン脂質を使用して上記の方
法？繰返したが、それ７４人した水注体の温度はジーＣ
７，物質のリボゾーム形成温度より高くするために６０
℃に上げた。この場合もやはり、リポソームにおいて酵
素活性が検出されたことが見出さｎた。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、（Ａ）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、Ｂ＿１及びＢ＿２の少なくとも一つは式−（ＣＯ
   ）ｐ−Ｘ＿１−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡Ｃ−Ｙ＿１式中、ｐは０又
   は１であり、Ｘ＿１は直接の結合又は二価の脂肪族又は
   環状脂肪族基であり、Ｙ＿１はＨ又は一価の脂肪族又は
   環状脂肪族基であり、Ｂ＿１及び／又はＢ＿２の各々に
   おけるＸ＿１及びＹ＿１の炭素原子の総数は８乃至２６
   である、の基であり、Ｂ＿１及びＢ＿２の他方は（ａ）
   式 −（ＣＯ）ｐ−Ｘ＿１−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡Ｃ−Ｙ＿１式中、
   Ｘ＿１、Ｙ＿１又はｐは前記した通りである、の同一又
   は相異なる基であるか或は（ｂ）少なくとも８個の炭素
   原子を含有する脂肪族又は環状脂肪族基であり、ｎは０
   又は１であり、ｍは２、３又は４であり、各Ｒは独立に
   １〜４個の炭素原子を含有するアルキル基を表わす、の
   共役ジーイン、又は （Ｂ）上記共役ジーインを架橋することにより得られた
   重合体、 を含有することを特徴とするリポソームの水性分散液。 ２、上記重合体（Ｂ）が、 式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、Ｚ＿１、Ｚ＿２、Ｚ＿３及びＺ＿４の二つは特許
   請求の範囲第１項記載した通りのＹ＿１を表わし、Ｚ＿
   １、Ｚ＿２、Ｚ＿３及びＺ＿４の他の二つは各々 −Ｘ＿１−（ＣＯ）ｐ−Ｇを表わし、ここでＸ＿１及び
   ｐは特許請求の範囲第１項に記載した通りであり、Ｇは ▲数式、化学式、表等があります▼ を表わし、式中、ｎ、ｍ及びＲは特許請求の範囲第１項
   に記載した通りである、の繰返し単位を有し、架橋した
   鎖は同一又は相異なるＧ残基に結合している重合体であ
   る特許請求の範囲第１項に記載の水性分散液。