JPS63264484A

JPS63264484A - 新規ミルベマイシン類およびその製造法

Info

Publication number: JPS63264484A
Application number: JP30401187A
Authority: JP
Inventors: Keiko Nakagawa; 恵子中川; Akio Torigata; 鳥潟　顕雄; Kazuo Sato; 一雄佐藤; Hisayoshi Kajino; 久喜梶野
Original assignee: Sankyo Co Ltd
Current assignee: Sankyo Co Ltd
Priority date: 1986-12-03
Filing date: 1987-12-01
Publication date: 1988-11-01
Anticipated expiration: 2012-01-29
Also published as: JP2577019B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】この発明は、新規マクロライド化合物およびその製造法
に関するものであり、さらに詳しくはミルベマイシン類
およびその類縁体ならびにそれらの製造法に関するもの
である。　ミルベマイシ、　　ンは、一連のマクロライ
ド化合物であって、特開昭５０−２９７４２号公報、同
５６−３２４８１号公報等により公知の、下記式（ＩＩ
工）の化合物である。

■ 式中、■およびＷは水素原子を示し、又はメチル、エチ
ルまたはイソプロピル基を示し、それぞれミルベマイシ
ンＡ３．ミルベマイシンＡ４およびミルベマイシンＤと
称されている。　■およびＷが水素原子を示し、Ｘが５
ｅｃ−ブチルである化合物は、特開昭５４−１４５５９
９号公報等に記載されたミルベマイシン頚縁体である。

　■が水素原子であり、Ｗが４′−（α−Ｌ−オレアン
ドロシル）−α−Ｌ−オレアンドロシロキシ基であり、
モしてＸがイソプロピル基または５ｅｃ−ブチルである
化合物は、特開昭５４−６１１９８号公報に記載された
化合物であり、それぞれ２２，２３−ジヒドロアベルメ
クチンＢｌａおよびＢｌｂと称されている。また、Ｗが
水素原子であり、■が水酸基であり、モしてＸが１−メ
チル−１−プロペニル基、１−メチル−１−ブテニル基
または１．３−ジメチル−１−ブテニル基である化合物
は、特開昭６１−１０５８９号公報に記載された化合物
であり、ＬＬ、−Ｆ−２８２４９として知られている。

■がオキソ基であり、モしてＸが１−メチル−１−プロ
ペニル基、１−メチル−１−ブテニル基または１．３−
ジメチル−１−ブテニル基である化合物は、特開昭６１
−２８０４９６号公報に記載された化合物である。　こ
れらの化合物は、いずれも殺虫、殺ダニおよび駆虫活性
を有することが知られている。

本発明者等は、これらミルベマイシン類の新規類縁体の
探索について鋭意努力した結果、上記ミルベマイシン類
を、微生物またはそれが産生ずる酵素を用いて変換する
ことにより、新規ミルベマイシン類が生産されることを
見出して本発明を完成した。

特開昭６１−２３３６８６号公報には２２．２３−ジヒ
ドロアベルメクチンアグリコン、または１３−デオキシ
−２２，２３−ジヒドロアベルメクチンアグリコンの微
生物変換が開示されているが、後述の通り、氷原発明と
は、使用する微生物も水酸化される位置も異なる。

本発明によれば、下記の一般式（ＩＩ）で表わされる化
合物を基質とし、このものを下記の一般式（Ｉ）で表わ
される化合物に変換しうる、アミコラータ属、アミコラ
トプシス属、ストレプトミセス属、アブシディア属、シ
ルシネラ属、ムコール属、シンセファラストラム属、モ
ルテイエレラ属、リゾープス属またはバチルス属に属す
る微生物を、一般式（ＩＩ）で表わされる化合物を基質
として含有する培地中で培養するか、または、これらの
微生物の培養菌体もしくは酵素抽出液を一般式（ＩＩ）
で表わされる化合物と接触させることにより、一般式（
１）で表わされる化合物を製造することができる。

■ （式中、■は水素原子、水酸基またはオキソ基を示し、
Ｗは水素原子、水酸基、ハロゲン原子または４′−（α
−Ｌ−オレアンドロシル）−α−Ｌ−オレアンドロシロ
キシ基を示し、Ｘは、■が水素原子のときは、メチル基
、エチル基、イソプロピル基、５ｅｃ−ブチル基、１−
メチル−１−プロペニル基、１−メチル−１−ブテニル
基または１．３−ジメチル−１−ブテニル基を示し、モ
して■が水酸基またはオキソ基のときは、１−メチル−
１−プロペニル基、１−メチル−１−ブテニル基または
１．３−ジメチル−１−ブテニル基を示し、Ｙは水酸基
またはヒドロキシイミノ基を示す。）（式中、Ｕはヒド
ロキシメチル基またはカルボキシ基を示し、Ｖ、Ｗ、Ｘ
およびＹは前記と同意義を示し、２は水素原子または水
酸基を示す。）。

本発明の方法は、一般式（ＩＩ）の化合物の微生物によ
る水酸化および／またはカルボキシ化に関するものであ
る。　本発明の方法において、２４位に結合した３０位
のメチル基は常に水酸化またはカルボキシ化される。　
これに対して、５位に結合した２６位のメチル基は常に
、水酸化されるわけではなく、場合によっては、水酸化
されないこともある。　そして、１２位、１４位に結合
したメチル基および２５位に結合したＸ基は水酸化を受
けない。

本発明の方法の出発物質である一般式（ＩＩ）の化合物
のうち、■が水素原子であり、ＷとＹとが共に水酸基で
ある化合物は特開昭６１−８５３９０号公報により、モ
してＷが水素原子であり、Ｙがヒドロキシイミノ基であ
る化合物は特開昭５９−１０８７８５号公報により、そ
れぞれ公知である。　また、■が水素原子であり、Ｗが
水酸基であり、Ｙがヒドロキシイミノ基である化合物は
、Ｗが水素原子であり、Ｙがヒドロキシイミノ基である
前記の化合物を、特開昭６１−１０３８８４号公報に記
載された方法によって、Ｗを水酸化することによって得
ることができる。さらにまた、■が水素原子であり、Ｗ
がハロゲン原子であり、Ｙが水酸基である化合物は特開
昭６１−８５３９０号公報により公知である。

本発明の方法において用いられる微生物は、アミコラー
タ属（ｇｅｎｕｓ　Ａｍｙｃｏｌａｔａ）、アミコラト
プシス属（ｇｅｎｕｓ　Ａｍｙｃｏｌａｔｏｐｓｉｓ）
、ストレプトミセス属（ｇｅｎｕｓ　Ｓｔｒｅｐｔｏｍ
ｙｃｅｓ）、アブシディア属（ｇａｎｕｓ　Ａｂｓｉｄ
ｉａ）、シルシネラ属（ｇｅｎｕｓ　Ｃ１ｒｃｉ−ｎｅ
ｌｌａ）、ムコール属（ｇａｎｕｓ　Ｍｕｃｏｒ）、シ
ンセファう゛ストラム属（ｇａｎｕｓ　Ｓｙｎｃｅｐｈ
ａｌａｓｔｒｕｍ）、モルテイエレラ属（ｇｅｎｕｓ　
Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ）、リゾープス属（ｇｅｎｕｓ
　Ｒｈ１ｚｏｐｕｓ）またはバチルス属（ｇｅｎｕｓ　
Ｂａｃｉ−１１ｕｓ）に属する微生物であって、一般式
（ＩＩ）の化合物を一般式（１）の化合物へ変換し得る
微生物である。　アミコラータ属およびアミコラトプシ
ス属は、以前はノカルディア属に分類されていたが。

菌体成分の相違により、現在はノカルディア属から独立
して、それぞれ新しい属を形成している（Ｉｎｔｅｒｎ
ａｔｉＯｎａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｓｙｓｔｅｍ
ａｔｉｃＢａｃｔ＝ｒｉｏｌｏｇｙ、　Ｖｏｌ、３６．
　Ｎｏ、１．　ｐ、２９．１９８６）。

本発明の方法において用いられ、アミコラータ属に属す
る菌としては、たとえば、アミコラータ、オートトロフ
ィカ（Ａ、　ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃａ）をあげること
ができる。　その代表的なものは、通商産業省工業技術
院微生物工業技術研究所に寄託されており、微工研菌寄
第６１８１号、第６１８２号および第６１８３号の寄託
番号が付与されている。　これらの寄託菌は、寄託当時
はＮｏｃａｒｄｉａ　ｓｐ、　５ＡＮＫ　６２７８１、
Ｎｏｃａｒｄｉａ　ｓｐ、　５ＡＮＫ　６２８８１およ
びＮｏｃａｒｄｉａ　ｓｐ、　５ＡＮＫ　６２９８１と
それぞれ称されており、それらの菌学的性質は特開昭５
８−８９１９１号公報に記載されている。

また、本発明の方法において用いられ、アミコラトプシ
ス属に属する菌としては、たとえば、゛アミコラトプシ
ス、オリエンタリス（Ａ、　ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ）お
よびアミコラトプシス、メデイテラネイ（Ａ。

ｍｅｃｉｉｔｅｒｒａｎｅｉ）をあげることができる。

　それらの代表的なものは、財団法人発酵研究所の保存
菌株であるＩＦＯ１２８０６およびＩＦＯ１３４１５ｔ
’あり、これらの菌株はいずれもＩＳＰ指定の菌株、す
なわちＩＳＰ　５０４０およびＩＳＰ　５５０１である
。

さらにまた、本発明の方法において用いられ、ストレプ
トミセス属に属する菌としては、たとえば、ストレプト
ミセス、フラヴオヴイレンス（Ｓ、　ｆｌａｖｏｖｉｒ
ｅｎｓ）、ストレプトミセス、グリゼオラス（Ｓ、　ｇ
ｒｉｓｅｏｌｕｓ）およびストレプトミセス、ロゼウス
（Ｓ、　ｒｏｓｅｕｓ）をあげることができる。　それ
らの代表的なものは、公的菌株分譲機関の保存菌株であ
るＡＴＣＣ３３２０（工ＳＰ　５０６２）、ＫＣＣ５８
１（ＩＳＰ５０６７）およびＩＦＯ１２８１８（ＩＳＰ
　５０７６）である。

本発明の方法において、好適な微生物は、アミコラータ
属およびアミコラトプシス属に属する菌であり、ことに
アミコラータ、オートトロフィカ　ＦＥＲＭ　Ｐ−６１
８３およびアミコラトプシス、メデイテラネイＩＦＯ１
３４１５は最も好ましい。

本発明の方法は、種種の態様で実施することが出来る。

　たとえば、（１）微生物を培養した培地中で基質であ
る式（ＩＩ）の化合物を接触させる方法、（２）微生物
を培養した培地から菌体を集め、これに式（ＩＩ）の化
合物を接触させる方法、（３）菌体から調製された無細
胞抽出物を式（工Ｉ）の化合物と接触させる方法等をあ
げることができる。

変換菌の培養は、通常微生物が利用出来る栄養物を含有
する培地中で培養することにより行なわれる。　栄養源
としては、一般の放線菌の培養に使用される公知のもの
を使用することが出来るまたとえば、炭素源としては、
グルコース、シュークロース、マルトース、乳糖、澱粉
、グリセリン、水飴、糖蜜、大豆油等が使用される。

また、窒素源としては、大豆粉、小麦はい芽、肉粉、魚
粉、肉エキス、ペプトン、コーンステイープリカー、乾
燥酵母、硝酸アンモニウムなどのアンモニウム塩等が使
用される。　その他、必要に応じて、食塩、塩化カリウ
ム、炭酸カルシウム、燐酸塩等の無機塩のほか、菌の発
育を助け、前記の水酸化能を有する酵素の生産を促進す
る添加物等を適宜組み合わせて使用することが出来る。

培養は好気的条件下で行なわれ、培養温度は２０−４０
℃９、好適には２６−３５℃である。

（１）法は、式（ＩＩ）の化合物を添加して培養するこ
とにより行なわ九る。　添加の時期は、使用する変換菌
の至適培養条件、特に培養装置、培地組成、培養温度等
により異なるが、変換菌の水酸化能が高まり始める時期
がよく、通常は変換菌の培養開始後１−５日経過した時
点が好ましい。　原料化合物、すなわち基質の添加量は
、培地に対しテｏ、ｏ１−５．０％、好ましくは０．０
２５−２．０％である。

原料化合物添加後の培養は、好気的条件下、上記の培養
温度で行なわれる。　培養期間は、原料化合物の添加後
１−８日程度である。

（２）法は、上記（１）の方法により変換菌を少量の基
質の存在下で培養し、変換菌の水酸化能が最大となるま
で培養することにより行なわれる。

すなわち、水酸化能は培地の種類、温度等によって異な
るが、通常は培養開始後２−３日で最大となるので、こ
の時点で培養を終了する。　集菌は培養物を遠心分離、
濾過等の方法に付すことによって行なわれる。集菌され
た変換菌菌体は、通常、生理食塩水、緩衝液等で洗浄し
て使用するのが好ましい。　このようにして得られた変
換菌菌体を原料化合物と接触させるには、通常は水性媒
体中、例えばｐＨ５−９の燐酸緩衝液中で行なわれる。

接触による反応は、通常２０−４５℃、好適にはＺ５−
３５℃で行なわれる。　基質の濃度は、通常培地に対し
て０．０１−５．０％である。　反応時間は、基質濃度
、反応温度等によるが、通常は１−５日位である。

（３）法での無細胞抽出液は、上記の方法で得られた変
換菌菌体に物理的又は化学的手法を適用し、たとえば、
磨砕、超音波処理等によって菌体破砕物として、または
有機溶媒、界面活性剤、酵素処理等によって菌体溶解液
として得られる。

このようにして得られた無細胞抽出液を原料化合物と接
触させるには、上記の変換菌菌体と接触させる方法と同
様にして行なわれる。

変換反応終了後、巨的化合物は生成物から既知の方法で
採取、分離、精製することができる。

たとえば、得られた生成物を濾過し、得られた濾液を酢
酸二チルのような、水と混和しにくい有機溶媒で抽出し
、抽出液から溶媒を留去したのち、得られた粗目的化合
物をシリカゲル、アルミナ等を用いたカラムクロマトグ
ラフィーに付し、適切な溶離剤で溶出する。二とによっ
て分離、精製することができる。

式（ＩＩ）の化合物の出発原料である天然のミルベマイ
シン類は、発酵生産物であって、多数の類縁体が種種の
割合で生産され、そして、各類縁体は単離された後にま
たは混合物のままで反応に付される。　それゆえ、式（
ＩＩ）の化合物は単一化合物もしくはそれらの混合物の
何れでもありうる。

従って、式（Ｉ）の化合物も単一化合物もしくはそれら
の混合物として生産されうる。　一般式（１）で表わさ
れる化合物のうち、下記の式（Ｉａ）で表わされる化合
物はそれ自体新規であり、本発明の一部を構成する：Ｙ（゛式中、Ｕはヒドロキシメチル基またはカルボキシ基
を示し、Ｗは水素原子、水酸基またはハロゲン原子を示
し、Ｘａは、Ｕがヒドロキシメチル基のときは、メチル
基またはエチル基を示し、そして、Ｕがカルボキシ基の
ときは、メチル基、エチル基、イソプロピル基または５
ｅＣ−ブチル基を示し、Ｙは水酸基またはヒドロキシイ
ミノ基を示し、２は水式（Ｉ）の化合物は、それ自体殺
虫、殺ダニおよび駆虫活性を有し、または殺虫、殺ダニ
および駆虫活性を有する他の化合物の合成中間体として
有用である。

式（Ｉ）の化合物は、果樹、野菜及び花きに寄生するナ
ミハダニ（Ｔｅｔｒａｎｙｃｈｕｓ）　、リンゴハダニ
（Ｐａｎｏｎｙｃｈｕｓ）およびサビダニ等の成虫、幼
虫及び卵、動物に寄生するマダニ科（Ｉｘｏｄｉｄａｅ
）、ワクモ科（Ｄｅｒｍａｎｙｓｓｉｄａｅ）およびヒ
ゼンダニ科（Ｓａｒｃｏｐｔｉｄａｓ）等に対して優れ
た殺ダニ活性を有している。

さらに、ヒツジバエ（Ｏｅｓｔｒｕｓ）、キンバエ（Ｌ
ｕｃｉｌｉａ）、ウシバエ　（Ｈｙｐｏｄａｒｍａ）、
ウマバエ（Ｇａｕｔｒｏｐｈｉｌｕｓ）等、およびノミ
、シラミ等の動物や鳥類の外部寄生虫；ゴキブリ、イエ
バエ等の衛生害虫；その他、アブラムシ類、鱗し目幼虫
等の各種農園芸害虫に対して活性を有している。　さら
にまた、土壌中のネコブセンチュウ（Ｍｅｌｏｉｄｏｇ
ｙｎｅ）、マツノザイセンチュウ（Ｂｕｒｓａｐｈａｌ
ｅｎｃｈｕｓ）、ネダニ（Ｐｈｉｚｏｇｌｙｐｈｕｓ）
等に対しても活性を有している。

また、式（Ｉ）の化合物は、植物に害を与える昆虫、特
に植物を摂取することによって害を与える昆虫に対して
も活性を有している。

さらにまた、式（Ｉ）の化合物は、動物及び人間の駆虫
剤として、優れた殺寄生虫活性を有している。　とくに
、豚、羊、山羊、牛、馬、犬、猫および鶏のような家畜
、家禽類およびペットに感染する線虫に対しても有効で
ある。

式（Ｉ）の化合物を農園芸用に使用するときは、粉剤、
水利剤、乳剤等のこの分野で周知の製剤に調製して使用
される。必要に応じて、水で希釈されて使用されるとき
は、有効成分の濃度は、およそ１１−１Ｏｐｐ程度であ
る。

式（１）の化合物を動物用駆虫剤に使用するときは、粉
剤、錠剤、カプセル、注射剤等のこの分野で周知の製剤
に調製して使用される。　経口的に投与されるときは、
投与量は、およそ体重１ｋｇあたり０．０１−１００ｍ
ｇ、好適には０．５−５０ｍｇ程度である。

次に、本発明を実施例によって更に具体的に説明する。

夾施忽↓ 下記の組成の培地１００ｍ１を含有する５００ｍ１容三
角フラスコ６本に、アミコラータ、オートトロフィカ（
Ａ、　ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃａ　：微工研菌寄第６１
８３号）を植菌し、２８℃、Ｚ２０ｒｐｍで振どう培養
した。　　４日後に、ミルベマイシンＡ４　（式ＩＩ：
Ｖ＝Ｗ＝水素原子、Ｘ＝エチル基、Ｙ＝水酸基）をその
５′３ｔジオキサン溶液を用いて、最終濃度で０．０５
％になるように添加し、更に１日間２８℃、２２０ｒｐ
ｍで培養した。

境主緻或グルコース　　　　　　　　１．０％酵母エキス　　　　　　　０．３％叉牙−ゴス　　　　　　　０．３％ペプトン　　　　　　　Ｏ，’５％水道水　　　　　　　　　残（ｐＨ未修正）培養終了後
、反応液を酢酸エチル６００ｍ１で２回抽出し、抽出液
を無水硫酸ナトリウムで乾燥したのち濃縮した。　残さ
をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、３０
−ヒドロキシミルベマイシンＡ４　（式１：Ｕ＝ヒドロ
キシメチル基、Ｖ＝Ｗ＝　Ｚ　＝水素原子、Ｘ＝エチル
基、Ｙ＝水酸基）を１１４．６ｍｇ　（収率３７．逐）
　、２６，３０−ジヒドロキシミルベマイシンＡ４　（
式Ｉ：Ｕ＝ヒドロキシメチル基。

Ｖ＝Ｗ＝水素原子、Ｘ＝エチル基、ｙ＝ｚ＝水酸基）を
４７．７ｍｇ　（収率１５．０％）　、ミルベマイシン
−３０−オイック　アシッドＡ４′（式Ｉ：Ｕ＝カルボ
キシ基、Ｖ＝Ｗ＝Ｚ＝水素原子、Ｘ＝エチル基、Ｙ＝水
酸基）を３０．１ｏ＋ｇ　（収率９．５％）得た。　さ
らに、ミルベマイシンＡ４を５４．８ｍｇ　（回収率２
１．６％）回収した。

廷ｍ１２トジ先２惨質量スペクトル（ｍ／ｚ）　　二　５５８　（Ｍ＋）　
、　５４０゜４３０．４１２．３７２．３１４．２８０
．２１１．１８３核磁気共鳴スペクトルδ（ＣＤＣ１３
）ｐｐｍ　：　１．００（ｄ、３Ｈ，Ｃ２８Ｈ３，Ｊ＝
７，０Ｈｚ）、　１．０１（ｔ、３Ｈ，Ｃ３２Ｈ３，Ｊ
＝７．０Ｈｚ）、　１．５２（ｓ、３Ｈ，Ｃ２９Ｈ３）
、　１．８７（ｂｒ、ｓ、３Ｈ。

Ｃ２６Ｈ３）、　３．２６（ｍ、ＬＨ，Ｃ２Ｈ）、　３
．３３（ｄｔ、ＬＨ，Ｃ２５Ｈ。

Ｊ＝２．８，８．５Ｈｚ）、　３．４５−３．６５（ｍ
、ＩＨ，Ｃ１７Ｈ）、　３．４９（ｄｄ、ＩＨ，Ｃ３０
Ｈ，Ｊ＝６．０，１０．６Ｈｚ）、　３．６３（ｄｄ、
ＩＨ。

Ｃ３０Ｈ，Ｊ＝４．４，１０．６Ｈｚ）、　３．９５（
ｄ、ＩＨ，Ｃ６Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ）、　４．０５（ｂ
ｒ、ｓ、ＩＨ，Ｃ７０Ｈ）、　４．２８（ｂｒ、ｓ、Ｉ
Ｈ。

Ｃ５［（）２６．３０−ジヒドロキシ質量スペクトル（ｍ／ｚ）　　：　　５７４（Ｍ＋）、
５５６゜５３８．２８０，２１１，１８３核磁気共鳴スペクトルδ（ＣＤＣ１３）ｐｐｍ　：　１
．００（ｄ、３Ｈ，Ｃ２８Ｈ３，Ｊ＝６．５Ｈｚ）、　
１．０２（ｔ、３Ｈ，Ｃ３２Ｈ３゜Ｊ＝５．５Ｈｚ）、
　１．５３（ｓ、３Ｈ，Ｃ２９Ｈ３）、　３．４９（ｄ
ｄ、ＩＨ。

Ｃ３０Ｈ，Ｊ＝６．２，１１．０Ｈｚ）、　３．６３（
ｄｄ、ＩＨ，Ｃ３０Ｈ，Ｊ＝４．２，１１．０Ｈｚ）、
　３．９８（ｄ、ＬＨ，Ｃ６Ｈ，Ｊ＝６：２Ｈｚ）。

４．１３（ｂｒ、ｓ、ＬＨ，Ｃ７０Ｈ）、　４．２４（
ｄ、ＬＨ，Ｃ２６Ｈ。

、１＝１２．８Ｈｚ）、　４．３２（ｄ、ＬＨ，Ｃ２，
６Ｈ，Ｊ＝１２．８Ｈｚ）。

４．５８（ｂｒ、ｓ、］、Ｈ，Ｃ３Ｈ）３０−オイック
　アシッド質量スペクトル（ｍ／ｚ）　　：　　５７２（Ｍ＋）、
４４４，４２６゜２９４．２２５，１９７，１５１核磁気共鳴スペクトルδ（ＣＤＣ１３）ｐｐｍ：　　１
．００（ｄ、３Ｈ，Ｃ２８Ｈ３，Ｊ＝６．５Ｈｚ）、　
１．０２（ｔ、３’）Ｉ、Ｃ３２Ｈ３゜Ｊ＝７．２Ｈｚ
）、　１．５３（ｓ、３Ｈ，Ｃ２９Ｈ３）、　１．８７
（ｓ、３Ｈ。

Ｃ２６Ｈ３）、　３．２８（ｍ、ＩＨ，Ｃ２Ｈ）、　３
．５−３．７（ｍ、２Ｈ。

Ｃ１７Ｈ，Ｃ２５Ｈ）、　３．９６（ｄ、ＬＨ，Ｃ６Ｈ
，Ｊ＝６．４Ｈｚ）。

４．０１（ｂｒ、ｓ、ＩＨ，Ｃ７０Ｈ）笑施佐λ 実施例１の方法に従って、ミルベマイシンＡ４を基質と
し、下記のｉ種の微生物を用いて３０−ヒドロキシミル
ベマイシンＡ４を得た。

倣二焦　　　　　　　　３０−ヒドロキシ　ハ、率Ａｍ
ｙｃｏｌａｔｃｐｓｉｓ　ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ　ＩＦ
Ｏ１２８０６＋　３Ａｍｙｃｏｌａｔｏｐｓｉｓ　ｍｅ
ｄｉｔｅｒｒａｎｅｉ　ＩＦＯ１３４１５＋４Ａｍｙｃ
ｏｌａｔａ　ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃａ　ＦＥＲＭ　Ｐ
−６４８１＋　１Ａｍｙｃｏｌａｔａ　ａｕｔｏｔｒｏ
ｐｈｉｃａ　ＦＥＲＭ　Ｐ−６１８２＋ＩＳｔｒｅｐｔ
ｏｍｙＣｅｓ　ｆｌａｖｏｖｉｒｅｎｓ　ＩＦＯ１２７
７１＋　ＩＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｇｒｉｓｅｏｌ
ｕｓ　ＩＦＯ１２７７７÷ＩＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ
　ｒｏｓｅｕｓ　ＩＦｏ　１２８１８　　　　　　　÷
２Ａｂｓｉｄｉａ　ｒｅｆｌｅｘａ　ＩＦＯ５８７４＋
　３Ｃｉｒｃｉｎｅｌｌａ　ｕｍｂｅｌｌａｔａ　工Ｆ
Ｏ８０９３＋３Ｍｕｃｏｒ　ｒｅｃｙｒｖｕｓ　工ＦＯ
８０９３＋　３Ｒｈｉｚｏｐｕｓ　ｎｉｇｒｉｃａｎｓ
　ＮＲＲＬ　４５　　　　　　　　　＋　２Ｓｙｎｃｅ
ｐｈａｌａｓｔｒｕｍ　ｒａｃｅｍｏｓｕｍ　ＩＦＯ４
８２７＋　ＩＭｏｒｔｉｅｒａｌｌａ　１ｓａｂｅｌｌ
ｉｎａ　ＮＲＲＬ　１７５７　　　　　　＋４Ｂａｃｉ
ｌｌｕｓ　ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ　ＩＦＯ１２１０８＋
２なお、変換率はつぎの基準による：＋１　　：　　０．５−５．０７＋２　　：　　５．０−１０．Ｏ％＋　３　　：　　１０．０−３０．は＋　４　　：　　３０．０−５０．０％尖施忽主実施例１と同一の組成の培地１００ｍ１を含有する５０
０ｍ１容三角フラスコ６本に、アミコラータ。

オートトロフィカ（Ａ、　ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃａ　
：微工研菌寄第６１８３号）を植菌し、２８℃、２２０
ｒｐｍで振どう培養した。　　５日後に、５−ケトミル
ベマイシンＡ４５−オキシム（式１Ｊ：Ｖ＝Ｗ：水素原
子、Ｘ＝エチル基、Ｙ＝ヒドロキシイミノ基）をその５
％ジオキサン溶液を用いて、最終濃度でｏ、ｏ５％にな
るように添加し、更に７日間２８℃、２２Ｏｒｐｍで培
養した。

培養終了後、反応液を酢酸エチル５００ｍ１で３回抽出
し、抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥したのち濃縮し
た。　残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精
製し、３０−ヒドロキシ−５−ケトミルベマイシンＡ４
５−オキシム（式Ｉ：Ｕ＝ヒドロキシメチル基、Ｖ＝Ｗ
＝Ｚ＝水素原子、Ｘ＝エチル基、Ｙ＝ヒドロキシイミノ
基）を３０．４ｍｇ　（収率９．８％）得た。

質量スペクトル（ｍＨｚ）　　：　　５７１（Ｍ＋）、
５５３゜５３７．２１１，１８３核磁気共鳴スペクトル　δ（ＣＤＣ１３）　ｐｐｍ　：
Ｌ、０Ｏ（ｄ、３Ｈ，Ｃ２８Ｈ３，Ｊ＝−７，０Ｈｚ）
、　１．０３（ｔ、３Ｈ。

Ｃ３２Ｈ３，ｊ＝７．０Ｈｚ）、　１．５３（ｓ、３Ｈ
，Ｃ２９Ｈ３）、　３．３８（：ｎ。

ＩＨ，Ｃ２Ｈ）、　３．４０（ｄｔ、ＩＨ，Ｃ２５Ｈ，
Ｊ＝２．３，９．５Ｈｚ）。

３．４５−３．６５（ｍ、ＬＨ，Ｃ１７Ｈ）、　３．’
、９（ｄｄ、ＬＨ，Ｃ３０Ｈ。

Ｊ＝６．２，１０．８Ｈｚ）、　３．６３（ｄｄ、ＩＨ
，Ｃ３０Ｈ，Ｊ＝４．０゜１０．８Ｈｚ）、　３．９５
（ｂｒ、ｓ、ＩＨ，Ｃ７０Ｈ）、　４．６７（ｓ、ＩＨ
。

Ｃ６Ｈ）実弥１シ１実施例１と同一の組成の培地１７ｍ１を含有する１　０
０ｍ１容三角フラスコ２本に、アミコラータ、オートト
ロフィカ（Ａ、　ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃａ　：微工研
菌寄第６１８３号）を植菌し、２８℃、２２０ｒｐｍで
振どう培養し、た。　　３日後に、１３−ヒドロキシミ
ルベマイシンＡ４　（式ＩＩ：Ｖ＝水素原子、ｗ＝ｙ＝
水酸基、Ｘ＝エチル基）をその５％ジオキサン溶液を用
いて最終濃度で０．０５％になるように添加し、更に１
日間２８℃、　２２０ｒｐｍで培養した。　培養終了後
、反応液を酢酸エチル５０ｍ１で３回抽出し、抽出液を
無水硫酸ナトリウムで乾燥したのち濃縮した。　残さを
シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し。

１３．３０−ジヒドロキシミルベマイシンＡ４　　（式
１：Ｕ＝ヒドロキシメチル基、Ｖ＝Ｚ＝水素原子、Ｗ＝
Ｙ＝水酸基、Ｘ＝エチル基）を８．７ｍｇ　（収率４９
゜７石）得た。

質量スペクトル（ｍＨｚ）　　：　　５７４（Ｍ＋）、
５５６゜５４０．２９５，２７７．２１１，１８３，１
５１核磁気共鳴スペクトル　δ（ＣＤＣ１３）　ｐｐｍ
：１．０１（ｔ、３Ｈ，Ｃ３２Ｈ３，Ｊ＝７．３Ｈｚ）
、　１．１３（ｄ、３Ｈ，Ｃ２８Ｈ３、Ｊ＝６．４Ｈｚ
）、　１．５８（ｓ、３Ｈ，Ｃ２９Ｈ３）、　１．８８
（ｓ、３Ｈ。

Ｃ２６Ｈ３）、　３．２８（ｍ、ＬＨ，Ｃ２Ｈ）、　３
．３５（ｄｔ、ＬＨ，Ｃ２５Ｈ。

Ｊ＝３．２，１０．２Ｈｚ）、　３．５１（ｄｄ、ＬＨ
，Ｃ３０Ｈ，Ｊ＝６．２゜１１．０Ｈｚ）、　３．５−
３．６５（ｍ、ＩＨ，Ｃ１７Ｈ）、　３．６８（、：ｆ
ｄ。

ＩＨ，Ｃ３０Ｈ，Ｊ＝４．２，１１．０Ｈｚ）、　３．
７１（ｄ、ＬＨ，Ｃ１３Ｈ。

、■＝１０．ＩＨｚ）、　　３．９６（ｄ、ＬＨ，Ｃ６
Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ）。

３．９９（ｓ、ＬＨ，Ｃ７０Ｈ）、　４．２９（ｂｒ、
ｓ、ＬＨ，Ｃ３Ｈ）夾施伝旦実施例１と同一の組成の培地１００ｍ１を含有する５０
０ｍ１容三角フラスコ５本に、アミコラータ。

オートトロフィカ（Ａ、　ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃａ　
：微工研菌寄第６１８３号）を植菌し、２８℃、２２０
ｒｐｍで振どう培養した。　　３日後に、ミルベマイシ
ンＡ３　（式ＩＩ：Ｖ＝Ｗ＝水素原子、Ｘ＝メチル基、
Ｙ＝水酸基）をその５％ジオキサン溶液を用いて、最終
濃度で０．０５％になるように添加し、更に４日間２８
℃、２２０ｒｐｍで培養した。　培養終了後１反応液を
酢酸工・チル５００ｍ１で２回抽出し、抽出液を無水硫
酸ナトリウムで乾燥したのち濃縮し・た。　残さをシリ
カゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、３０−ヒド
ロキシミルベマイシンＡ３　（式Ｉ：Ｕ＝ヒドロキシメ
チル基、Ｖ＝Ｗ＝Ｚ＝水素原子、Ｘ；メチル基、Ｙ＝水
酸基）を５７．５ｍｇ　（収率２２．３％）を得、また
ミルベマイシンＡ３を４０ｍｇ　（回収率１６．０％）
回収した。

質量スペクトル（ｍＨｚ）　　：　　５４４（Ｍ＋）、
５２６゜４１６．２６６．１９７，１６９，１５１核磁
気共鳴スペクトル　δ　（ＣＤＣ１３）　ｐｐｍ　：１
．００（ｄ、、３Ｈ，Ｃ２８Ｈ３，Ｊ＝６．４Ｈｚ）、
　１．２１（ｄ、３Ｈ。

Ｃ３１Ｈ３，ＬＪ＝６．４Ｈｚ）、　１．５３（ｓ、３
）ｆ、Ｃ２９Ｈ３）、　１．８７（ｓ、３Ｈ，Ｃ２６Ｈ
３）、　３．２７（ｍＪＨ，Ｃ２Ｈ）、　３．５０（ｄ
ｄ。

ＬＨ，Ｃ３０Ｈ，Ｊ＝６．５ｄ１．０Ｈｚ）、　３．６
５（ｄｄ、ＬＨ，Ｃ３０Ｈ。

Ｊ＝４．２，１１．０Ｈｚ）、　３．４５−３．６（ｍ
、２Ｈ，Ｃ１’７Ｈ，Ｃ２５Ｈ）。

３．９６（ｄ、ＬＨ，Ｃ６Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ）、　４
．０７（ｂｒ、’ｓ、ＬＨ。

Ｃ７０Ｈ）実施例６実施例１と同一の組成の培地１００ｍ１を含有する５０
０ｍ１容三角フラスコ５本に、アミコラータ。

オートトロフィカ（Ａ、　ａｕｔｏｔｒｃｐｈｉｃａ　
：微工研菌寄第６１８３号）を植菌し、２８℃、２２０
ｒｐｍで振どう培養した。　　２日後に、ミルベマイシ
ンＤ（式１工：Ｖ＝Ｗ＝水素原子、Ｘ＝イソプロピル基
、Ｙ＝水酸基）をその５％ジオキサン溶液を用いて、最
終濃度で０．０５％になるように添加し、更に７日間２
８°ＣＣ１２２０ｒｐで培養した。　培養終了後、反応
液を酢酸エチル５００ｍ１で３回抽出し、抽出液を無水
硫酸ナトリウムで乾燥したのち濃縮した。　残さをシリ
カゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、３０−ヒド
ロキシミルベマイシンＤ（式Ｉ：Ｕ＝ヒドロキシメチル
基、Ｖ＝Ｗ＝Ｚ＝水素原子、Ｘ＝イソプロピル基、Ｙ＝
水酸基）を２２．７ｍｇ　（収率８゜８％）　、２６，
３０−ジヒドロキシミルベマイシンＤ（式１：Ｕ＝ヒド
ロキシメチル基、Ｖ＝Ｗ＝水素原子。

Ｘ＝イソプロピル基、Ｙ＝Ｚ＝水酸基）を４．０ｍｇ　
（収率１．５％）、ミルベマイシン−３０−オイック　
アシッドＤ（式Ｉ：Ｕ＝カルボキシ基、Ｖ＝Ｗ＝Ｚ＝水
素原子、Ｘ＝イソプロピル基、Ｙ＝水酸基）を２６．４
ｍｇ　（収率１０．０％）得た。　さらに、ミルベマイ
シンＤを９４．３ｍｇ　（回収率３７．７％）回収した
。

四二ζ五ｐ」づ召本質量スペクトル（ｍ／ｚ）　　：　　５７２（Ｍ＋）、
４４４゜４２６．３１４，２９４，２４８，２２５，１
９７，１７９，１５１核磁気共鳴スペクトル　δ　（Ｃ
ＤＣ１３）　ｐｐｍ：０．９１（ｄ、３Ｈ，Ｃ３２Ｈ３
，Ｊ＝６．８Ｈｚ）、　１．００（ｄ、３Ｈ。

Ｃ２８Ｈ３，Ｊ＝６．４Ｈｚ）、　１．０６（ｄ、３Ｈ
，Ｃ３３Ｈ３，Ｊ＝６．８Ｈｚ）。

１．５３（ｓ、３Ｈ，Ｃ２９Ｈ３）、　１．８７（ｓ、
３Ｈ，Ｃ２６Ｈ３）、　３．２７（ｍ、ＬＨ，Ｃ２Ｈ）
、　３．３４（ｄｄ、ＬＨ，Ｃ２５Ｈ，Ｊ＝２．０，９
．７Ｈｚ）。

３．４６（ｄｄ、ＩＨ，Ｃ３０Ｈ，Ｊ＝６．０，１０．
９Ｈｚ）、　３．６０（ｍ。

１）ｉ、Ｃ１７Ｈ）、　３．６２（ｄｄ、ＬＨ，Ｃ３０
Ｈ，Ｊ＝４．０，１０．９Ｈｚ）。

３．９６（ｄ、ＬＨ，Ｃ６Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ）、　４
．０５（ｂｒ、ｓ、ＬＨ。

Ｃ７０Ｈ）箆、３０−ジヒドロキシ体質量スペクトル（ｍ／ｚ）　　：　　５８８（Ｍ＋）、
５７２゜４４４．４２６，２９４，２２５，１９７，１
７９’、１５１核磁気共鳴スペクトル　δ　（ＣＤＣ１
３）　ｐｐｍ：０．９１（ｄ、３Ｈ，Ｃ３２Ｈ３，Ｊ＝
６．８Ｈｚ）、　１．００（ｄ、３Ｈ。

Ｃ２８Ｈ３，Ｊ＝６．４Ｈｚ）、　１．０６（ｄ、３Ｈ
，Ｃ３３Ｈ３，Ｊ＝６．８Ｈｚ）’。

１．５３（ｓ、３Ｈ，Ｃ２９Ｈ３）、　３．３−３．４
（ｍ、２Ｈ，Ｃ２Ｈ，Ｃ２５Ｈ）。

３．４７（ｄｄ、ＬＨ，Ｃ３０Ｈ，Ｊ＝６．０，１０．
９Ｈｚ）、　３．５６（ｍ、ＬＨ，Ｃ１７Ｈ）、　３．
６２（ｄｄ、ＩＨ，Ｃ３０Ｈ，Ｊ＝４．０，１０．９Ｈ
ｚ）、　３．９８（ｄ、ＬＨ，Ｃ６Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ
）、　４．１２（ｂｒ、ｓ。

ＩＨ，Ｃ７０Ｈ）、　４．２４（ｄ、ＬＨ，Ｃ２６Ｈ，
Ｊ＝１３．７Ｈｚ）、　４．３３（ｄ、ＩＨ，Ｃ２６Ｈ
，Ｊ＝１３．７Ｈｚ）３０−オイ・・り　アシ・・ド質量スペクトル（ｍ／ｚ）　　：　　５８６（Ｍ＋）、
５５８゜４５８．３０８，２４８，２３９，２１１，１
５１核磁気共鳴スペクトル　δ　（ＣＤＣ１３）　ｐｐ
ｍ　：０．９５（ｄ、３Ｈ，Ｃ３２Ｈ３，Ｊ＝６．８Ｈ
ｚ）、　１．００（ｄ、３Ｈ。

Ｃ２８Ｈ３，Ｊ＝６．８Ｈｚ）、　１．０６（ｄ、３Ｈ
，Ｃ３３Ｈ３，Ｊ＝６．８Ｈｚ）。

１．５３（ｓ、３Ｈ，Ｃ２９Ｈ３）、　１．８７（ｓ、
３Ｈ，Ｃ２６Ｈ３）、　３．２６（ｍ、ＬＨ，Ｃ２Ｈ）
、　３．５５（ｍ、ＩＨ，Ｃ１７Ｈ）、　３．６６（ｄ
ｄ、ＬＨ。

Ｃ２５Ｈ，Ｊ＝２．０，１０．０Ｈｚ）、　３．９６（
ｄ、ＬＨ，Ｃ６Ｈ）実施孤７実施例１と同一の組成の培地２０ｍ１を含有する１００
ｍ１容三角フラスコ８本に、アミコラータ、オートトロ
フィカ（Ａ、　ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃａ　：微工研菌
寄第６１８３号）を植菌し、２８℃、２２０ｒｐｍで振
どう培養した。　　２日後に、１３−フルオロミルベマ
イシン４（式ＩＩ：Ｖ＝水素原子、Ｗ＝フッ素原子、Ｘ
＝エチル基、Ｙ＝水酸基）をその５％ジオキサン溶液を
用いて、最終濃度で０．０５％になるように添加し、更
に２日間２８°Ｃ、２２０ｒｐｍで培養した。　培養終
了後、反応液を酢酸エチル１６０ｍｉで３回抽出し、抽
出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥したのち濃縮した。　
残さを分取薄層シリカゲルグロマトグラフィー（メルク
社製、Ａｒｔ　５７１７，　２０　ｘ　２０　ｃｍ、厚
さ２ｍｒｕ、酢酸エチルで展開）で精製し、１３−フル
オ０−３０−ヒドロキシミルベマイシンＡ４（式Ｉ：Ｕ
＝ヒドロキシメチル基、Ｖ＝Ｚ＝水素原子、Ｗ＝フッ素
原子、Ｘ＝エチル基、Ｙ＝水酸基）を１５．７ｍｇ（収
率１９．１％）と１３−フルオロ−２６，３０−ジヒド
ロキシミルベマイシンＡ４　（式Ｉ：Ｕ＝ヒドロキシメ
チル基、Ｖ＝水素原子、Ｗ＝フッ素原子、Ｘ＝エチル基
、ｙ　＝　ｚ　＝水酸基）を９．５ｍｇ　（収率１１．
２％）得質量スペクトル（ｍ／ｚ）　　：　　５７６（
Ｍ＋）、５５８゜４４８．３３２，２６６．２１１，１
８３，１５１核磁気共鳴スペクトル　δ（ＣＤＣ１３）
　ｐｐｍ　：１．０１（ｔ、３Ｈ，Ｃ３２Ｈ３，Ｊ＝７
．３Ｈｚ）、　１．１５（ｄ、３Ｈ。

Ｃ２８Ｈ３，Ｊ＝６．０Ｈｚ）、　１．６１（ｓ、３Ｈ
，Ｃ２９Ｈ３）、　１．８８（ｓ、３Ｈ，Ｃ２６Ｈ３）
、　３．４９（ｄｄ、ＬＨ，Ｃ３０Ｈ，Ｊ＝４．８，１
１．１Ｈｚ）、　３．６０（ｍ、ＬＨ，Ｃ１７Ｈ）、　
３．６４（ｄｄ、ＬＨ，Ｃ３０Ｈ。

Ｊ＝４．８，１１．１Ｈｚ）、　３．９７（ｄ、ＬＨ，
Ｃ６Ｈ，Ｊ＝５．９Ｈｚ）。

４．０４（ｓ、ＬＨ，Ｃ７０Ｈ）、　４．２９（ｂｒ、
ｓ、ＬＨ，Ｃ３Ｈ）。

４．４０（ｄｄ、　ＬＨ，Ｃｌ５Ｈ，Ｊ＝９．９，４７
．９Ｈｚ）１３−フルオロ−２６，３０−ジヒドロキシ
質量スペクトル（ｍ／ｚ）　　：　　５９２（Ｍ＋）、
５７４゜５５６．４４８，３３２．２６６、２１１　、
１８３，１５１核磁気共鳴スペクトル　δ　（ＣＤＣ１
３）　ｐｐｍ：１．０２（ｔ、３Ｈ，Ｃ３２Ｈ３，Ｊ＝
７．３Ｈｚ）、　１．１６（ｄ、３Ｈ。

Ｃ２８Ｈ３，Ｊ＝６．２Ｈｚ）、　１．６２（ｓ、３Ｈ
，Ｃ２９Ｈ３）、　３．５１（ｄｄ、ＩＨ，Ｃ３０Ｈ，
Ｊ＝６．６，１１．３Ｈｚ）、　３．６０（ｍ、ＬＨ。

Ｃ１７Ｈ）、　３．６５（ｄｄ、ＬＨ，Ｃ３０Ｈ，Ｊ＝
４．６，１１．３Ｈｚ）。

３．９９（ｄ、ＩＨ，Ｃ６Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ）、　４
．１１（ｓＪＨ，Ｃ，７０Ｈ）。

４．２４（ｄ、ＬＨ，Ｃ２６Ｈ，Ｊ＝１３．０Ｈｚ）、
　４．３２（ｄ、ＬＨ。

Ｃ２６Ｈ，Ｊ＝１３．０Ｈｚ）、　４．４２（ｄｄ、Ｌ
Ｈ，Ｃ１３Ｈ，Ｊ＝９．９゜４７．９Ｈｚ）尖施但旦実施例１と同一の組成の培地２Ｑｍｌを含有する１００
ｍ１容三角フラスコ２２本に、アミコラトプシス、メデ
イテラネイ（Ａ、　ｍｅｄｉｔｅｒｒａｎｅｉ　：　Ｉ
ＦＯ１３４１５）　を植菌し、２８℃、２２０ｒｐｍで
振どう培養した。

２日後に、２２．２３−ジヒドロアベルメクチンＢｌａ
（式ＩＩ：Ｖ＝水素原子、Ｗ＝４’　−（ａ−Ｌ−オレ
アンドロシル）−α−Ｌ−オレアンドロシロキシ基、Ｘ
　＝　５ｅｃ−ブチル基、Ｙ＝水酸基）をその５％ジオ
キサン溶液を用いて、最終濃度で０．０２５％になるよ
うに添加し、更に７日間２８℃、２２０ｒｐｍで培養し
た。　　培養終了後、反応液を遠心分離し、菌体と上清
とに分けた。　上清を酢酸エチル４００ｍ１で３回抽出
し、抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥したのち濃縮し
た。菌体は、８０％メタノール水溶液１００ｍ１で２回
抽出し、メタノールを蒸発したのち上清と同様に酢酸エ
チルで抽出し、濃縮した。

菌体と上清とからの抽出物をシリカゲルカラムクロマト
グラフィーで精製し、３０−ヒドロキシ−２２，２３−
ジヒドロアベルメクチンＢｌａを２９．７ｍｇ　（収率
２６゜５％）得た。　さらに、２２，２３−ジヒドロア
ベルメクチンＢｌａを１７．６ｍｇ　（’−収率１６．
４％）回収した。

質量スペクトル（ｍ／ｚ）　　：　　７２８（Ｍ＋−１
６２）。

６０２．５８４，５６８，３２３，３０５．２１１．１
４５核磁気共鳴スペクトル　δ　（ＣＤＣ１３）　ｐｐ
ｍ：０．８９（ｄ、３Ｈ，Ｃ３２Ｈ３，Ｊ＝６．５Ｈｚ
）、　０．９３（ｔ、３Ｈ。

Ｃ３４Ｈ３，Ｊ＝７．３Ｈｚ）、　１．１５（ｄ、３Ｈ
，Ｃ２８Ｈ３，Ｊ＝６．８Ｈｚ）。

１．２４（ｄ、３Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ）　、　１．２６
（：ｄ、３Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ）　。

１．４９（ｓ、３Ｈ，Ｃ２９Ｈ３）　、　１．８７（ｓ
、３Ｈ，Ｃ２６Ｈ３）　、　３．４１（ｓｙ３Ｈ）、　
３．４２Ｃ５，３Ｈ）、　３．３５−３．５５（ｍ、２
Ｈ，Ｃ３０Ｈ２）、　３．５５−３．９（ｍ、５Ｈ）、
　３．９４（ｂｒ、ｓ、ＩＨ，Ｃ１３Ｈ）。

３．９５（ｄ、ＬＨ，Ｃ６Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ）、　４
．ｌｏ（ｂｒ、ｓ、ＬＨ。

Ｃ７０Ｈ）夾施但１実施例１と同一の組成の培地２０ｍ１を含有する１００
ｍ１容三角フラスコ１４本に、アミ：ラータ。

オートトロフィカ（Ａ、　ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃａ　
：微工研菌寄第６１８３号）を植菌し、２８℃、２２０
ｒｐｍで振どう培養した。　３日後に、ＬＬ−Ｆ２８２
４９α（式エエ：Ｖ＝Ｙ＝水酸基、Ｗ＝水素原子、Ｘ＝
゛ｌ、３−ジメチル−１−ブテニル基）をその５％ジオ
キサン溶液を用いて、最終濃度で０．０３％になるよう
に添加し、更に４日間２８℃、２２０ｒｐｍで培養した
。　培養終了後、反応液を酢酸エチル２００ｍ１で３回
抽出し。

抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥したのち濃縮した。

　残さを分取薄層シリカゲルクロマトグラフィー（メル
ク社製、Ａｒｔ　５７１７．２０　ｘ　２０　ｃｍ、厚
さ２ｍｍ、酢酸エチルで展開）で精製し、３０−ヒドロ
キシ−ＬＬ−Ｆ２８２４９　　（式Ｉ：Ｕ＝ヒドロキシ
メチル基、Ｖ＝Ｙ＝水蹴基、Ｗ＝Ｚ＝水素原子、Ｘ＝１
．３−ジメチル−１−ブテニル基）を４　、０ｍｇ（収
率４．６％）得た。さらにＬＬ−Ｆ２８２４９　ａを１
５ｍｇ（回収率１７．９≦）回収した。

四ｍｌｌシ≧先Ｚ生質量スペクトル（ｍ／ｚ）　　：　　６２８（Ｍ＋）、
６１０゜５９２．４８２，４６４核磁気共鳴スペクトル　δ　（ＣＤＣ１３）　ｐｐｍ：
３．２１（ｍ、ＬＨ，Ｃ２Ｈ）、　３．３−３．４５（
ｍ、３Ｈ，Ｃ２５Ｈ，Ｃ３０Ｈ２）、　３．５１（ｄ、
ＬＨ，Ｃ２３０Ｈ，Ｊ＝５．６Ｈｚ）、　３．５−３．
７（ｍ、ＬＨ，Ｃ１７Ｈ）、　３．７５−３．７８（ｍ
、２Ｈ，Ｃ２３Ｈ，Ｃ３００Ｈ）。

３．７９（ｓ、ＬＨ，Ｃ７０Ｈ）、　３．９５（ｄ、Ｌ
Ｈ，Ｃ６’Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ）。

４．２９（ｔ、　ＬＨ，Ｃ７０Ｈ）、　４．６８（ｂｒ
、ｓ、２Ｈ，Ｃ２７Ｈ２）。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）下記の一般式（II）で表わされる化合物を基質と
し、このものを下記の一般式（ I ）で表わされる化合
物に変換しうる、アミコラータ属、アミコラトプシス属
、ストレプトミセス属、アブシディア属、シルシネラ属
、ムコール属、シンセファラストラム属、モルティエレ
ラ属、リゾープス属またはバチルス属に属する微生物を
、一般式（II）で表わされる化合物を基質として含有す
る培地中で培養するか、又は、これ等の微生物の培養菌
体もしくは酵素抽出液を一般式（II）で表わされる化合
物と接触させて一般式（ I ）で表わされる化合物に変
換し、ついで一般式（ I ）で表わされる化合物を採取
することを特徴とする一般式（ I ）で表わされる化合
物の製造法： ▲数式、化学式、表等があります▼（II）（式中、Ｖは水素原子、水酸基またはオキソ基を示し、
Ｗは水素原子、水酸基、ハロゲン原子または４′−（α
−Ｌ−オレアンドロシル）−α−Ｌ−オレアンドロシロ
キシ基を示し、Ｘは、Ｖが水素原子のときは、メチル基
、エチル基、イソプロピル基、ｓｅｃ−ブチル基、１−
メチル−１−プロペニル基、１−メチル−１−ブテニル
基または１，３−ジメチル−１−ブテニル基を示し、そ
してＶが水酸基またはオキソ基のときは、１−メチル−
１−プロペニル基、１−メチル−１−ブテニル基または
１，３−ジメチル−１−ブテニル基を示し、Ｙは水酸基
またはヒドロキシイミノ基を示す。）： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ）（式中、Ｕはヒドロキシメチル基またはカルボキシ基を
示し、Ｖ、Ｗ、ＸおよびＹは前記と同意義を示し、Ｚは
水素原子または水酸基を示す。）。
（２）下記の一般式（ I ａ）で表わされる化合物：▲
数式、化学式、表等があります▼（ I ａ）（式中、Ｕはヒドロキシメチル基またはカルボキシ基を
示し、Ｗは水素原子、水酸基またはハロゲン原子を示し
、Ｘａは、Ｕがヒドロキシメチル基のときは、メチル基
またはエチル基を示し、そして、Ｕがカルボキシ基のと
きは、メチル基、エチル基、イソプロピル基またはｓｅ
ｃ−ブチル基を示し、Ｙは水酸基またはヒドロキシイミ
ノ基を示し、Ｚは水素原子または水酸基を示す）。