JPS63317091A - ω−ハイドロキシ−トランス−α，β−不飽和脂肪酸の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） この発明は栄養剤、育毛剤、化粧品（美白剤）の素材と
して期待されているω−ハイドロキシ−トランス−α、
β−不飽和脂肪酸の製造法に関する。

（従来の技術） 近年、不飽和高級脂肪酸類の生体内での代謝および生理
作用に関する研究が進展するにつれ、その重要性が認識
されてき九。従来、ω−ハイドロキシ−トランス−α、
β−不飽和脂肪酸たとえばローヤルゼリー中Ｋｔまれて
いる１０−ハイドロキシ−トランス−２−デセンｆｆ１
ｉ！ｌ：ローヤルゼリー酸）の製造は有機合成的手法に
より試みられている（文献：特開昭４８−８７２３号公
報、特開昭４８−１００２１号公報および特開昭５４−
８８２１６号公報）。

（発明が解決すべき問題点） しかしながら、これら有機合成的手法では製造工程が長
くて複雑であり、また、収率が低いという問題があった
。本発明は酵素反応を用いて非常に簡便に１高収率で、
かつ高純度でω−ハイドロキシ−トランス−α、β−不
飽和脂肪酸を製造する方法を提供することを目的とする
。

（問題点を解決するための手段） 本発明者らはω−ハイドロキシ−トランス−α、β−不
飽和脂肪酸の酵素的合成法の検討を行なった。従来、飽
和脂肪酸類のＣＯＡがアシル−ＣＯＡオキシダーゼの作
用を受けてエノイルＣＯＡに変化すること（式１の反応
）は良く知られている。

式Ｉ　　　ＣＨ３（ＣＨ２）Ｈ−ＣＣＩＣｏＡ（アシル
−ＣＯＡ　） ＣＨ３（ＣＨ２）Ｑ−２・ＣＨ−ＣＨ−Ｃｏ−ＣｏＡ（
エノイルＣＯＡ　） （ｎ−６〜１８） ところが、飽和脂肪酸類のＣｏＡにのみ活性を示すと考
えられていたアシル−ＣＯＡオキシダーゼが意外にもω
−ハイドロキシ−アシル−ＣＯＡに対しても活性を示し
、効率的にα、β位にトランス体の二重結合を導入でき
ること（式２の反応）金兄い出し、本発明を完成させる
に到った。

式２　　　ＨＯＣＨ２（ＣＨ２）Ｈ拳ＣＯ＠Ｃ０Ａ（ω
−ハイドロキシ・アシル−ＣＯＡ）ＨＯＣＨ２（ＣＨ２
）ｎ−２・ＣＨ−ＣＨＣＯ・Ｃ０Ａ（ω−ハイドロキシ
エノイル　ＣｏＡ）ＨＯＣＨ２（ＣＨ２）ｎ−、−ＣＭ
−ＣＨ−ＣＯＯＨ（ω−ハイドロキシ−トランス−α、
β−不飽和脂肪ｒ１り（ｎ−６〜１８） すなわち、本発明はω−ハイドロキシ−アシル−ＣＯＡ
にアシル−ＣＯＡオキシダーゼを作用させ、得られたω
−ハイドロキシ−エノイル−ＣｏＡｅ２７０水分解する
ことｔ−特徴とするω−ハイドロキシ−トランス−α、
β−不飽和脂肪酸の製造法である。

本発明方法において、ω−ハイドロキシ−アシル−ＣＯ
Ａは脂肪酸の炭素数が０８〜Ｃ２０の範囲が好ましく％
Ｃ１０〜Ｃ１６はとくに好ましい。炭素数がＣ８未満ま
たはＣｇＱを越えるとアシル−ＣＯＡオキシダーゼが作
用し難い。

アシル−ＣＯＡオキシダーゼは市販のものでもよく、ま
た、この酵素を産生ずることが知られている微生物、と
くに炭化水素資化性のカンデイダ属（Ｃａｎｄｉｄａ　
）　、アリスロバクター属（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ
）寺から単離・精製したものを用いてもよい。単離・精
製の方法はたとえばバイオケミカル・アンド、バイオフ
ィシカル・リサーチ・コミュニケーションズ（Ｂｉｏｃ
ｈｅｍｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ　Ｒ
ｅ５ｅａｒｃｈ用いてもよいが、担体に固定したものあ
るいはそれ金含む菌体を用いてもよい。

ω−ハイドロキシ−アシル−ＣＯＡにアシル−ＣｏＡオ
キシダーゼを作用させるときの温度は１０′Ｃ〜６５°
Ｃが好ましく、２０℃〜４０℃がとくに好ましい。この
ときの−は５〜１０が好ましく、７〜９がとくに好まし
い。ω−ハイドロキシ−アシル−ＣＯＡにアシル−ＣＯ
Ａオキシダーゼを作用させると過酸化水素が発生し、過
酸化水素がこの酵素反応を阻害したり酵素を不活化する
ことがある。

そのため、反応系にカメラーゼを共存させて過酸化水素
を分解させることが好ましい。また、カタラーゼによる
過酸化水素の分解の結果生じた酸素も過酸化水素と同様
に有害であるので、反応系に還元剤を共存させるか、ま
たは反応を減圧下で行なうことが好ましい。

つぎに、生成したω−ハイドロキシ−エノイル−ＣＯＡ
を含む反応液に加水分解剤ｔ−ｍえてω−）１イドロキ
シーエノイルー〇ＯＡ　’ｉ加水分解する。加水分解剤
は塩酸、水酸化カリウムなど強酸または強アルカリが好
ましい。

用水分解後、エーテル、酢酸エチルなどの溶媒でω−ハ
イドロキシ−トランス−α、β−不飽和脂肪ｆＩｌ′を
抽出する。抽出液を蒸発濃縮し、残渣全シリカｒルクロ
マトグラフイーまたは分取液体クロマトグラフィーで精
製すれば高純度のω−ハづドロキシ−トランス−α、β
−不飽和脂肪酸が得られる。以下に本発明を実施例で具
体的に説明するが、これらに限定されるものではない。

（実施例） ＦＪ（７，５の０．０５　Ｍ−リン酸緩衝液１０１１Ｌ
ｌにアシル−ＣＯＡオキシダーゼ（東洋紡績株式会社製
）３単位とカタラーゼ（和光純薬株式会社製）３単位を
浴解し、表に示すω−ハイドロキシ−アシル−ＣｏＡ　
ｆ　１ｍモル添加し友。アスピレータ−減圧下、攪拌し
ながら温度６０℃で２０時間保ちω−ノ１イドロキシー
エノイルーＣ０Ａｔ−生成させた。

反応液に１０％水酸化カリウム水溶液’ｔ２＋ＩＬｌ添
加し、温度７０℃で１５分間放置することによって、前
記ω−ハイドロキシ−エノイル−ＣＯＡ　ｋ　２Ｘ１水
分解した。反応液に塩酸を那えてＰＨ全５に調製してカ
ラ５　ｍ／のエチルエーテルによる抽出を４回行ない、
エチルエーテル層全無水硫酸す）　ＩＪウムで脱水した
のち、エチルエーテルを減圧で蒸発して除去した。

残渣を分取ガスクロマトグラフィーで処理し、ω−ハイ
ドロキシ−トランス−α、β−不飽和脂肪酸を単離した
。なお、分取ガスクロマトグラフィーは担体「Ｔｅｎａ
ｘ　ＧＣ−ＤＭＤ８　Ｊ　（粒度６０〜８０メツシユ）
に０Ｖ−１７ｔ−５％コーティングした充てん剤を用い
、ヘリウムをキャリアガスとして、カラム温度２４０℃
で行なった。

単離された物質は懇分析（溶媒：四塩化炭素）の結果、
表に示すとおり、ω−ハイドロキシ−トランス−α、β
−不飽和脂肪酸に特有の化学シフトが現われた。また、
前記残渣中のω−７１イドロキシートランスーα、β−
不飽和脂肪酸をガスクロマトグラフィーで定量し、収率
を求めた。収率は表に示すとおり高収率であった。

（発明の効果） 本発明の製造法によればω−ハイドロキシ−トランス−
α、β−不飽和脂肪酸を容易に、高収率でかつ高純度で
製造することができる。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. ω−ハイドロキシ−アシル−ＣＯＡにアシル−ＣＯＡオ
   キシダーゼを作用させ、得られたω−ハイドロキシ−エ
   ノイル−ＣＯＡを加水分解することを特徴とするω−ハ
   イドロキシ−トランス−α，β−不飽和脂肪酸の製造法
   。