JPS6361000B2 - - Google Patents
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- JPS6361000B2 JPS6361000B2 JP54006603A JP660379A JPS6361000B2 JP S6361000 B2 JPS6361000 B2 JP S6361000B2 JP 54006603 A JP54006603 A JP 54006603A JP 660379 A JP660379 A JP 660379A JP S6361000 B2 JPS6361000 B2 JP S6361000B2
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- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
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- C07J7/001—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms not substituted in position 21 substituted in position 20 by a keto group
- C07J7/004—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms not substituted in position 21 substituted in position 20 by a keto group substituted in position 17 alfa
- C07J7/0045—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms not substituted in position 21 substituted in position 20 by a keto group substituted in position 17 alfa not substituted in position 16
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- C07J7/008—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms substituted in position 21
- C07J7/0085—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms substituted in position 21 by an halogen atom
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Description
本発明は、一般式：
〔式中〓は単結合又は二重結合を表わし、Ｘは水
素原子、フツ素原子、塩素原子又はメチル基を表
わし、 Ｗはメチレン基、エチリデン基又はビニリデン
基を表わし、 R1は炭素原子数１〜６を有するアルキル基を
表わす〕 で示される11β−ヒドロキシステロイドを製造す
るに当り、一般式XI： 〔式中Ｘ、Ｗ及びR1は前記のものを表わし、R4
はヒドロキシ基又は炭素原子数１〜６のアルカノ
イルオキシ基を表わす〕で示される11−デスオキ
システロイドを、クルブラリア属の培養菌で発酵
させ、得られた〓が単結合を表わす式の化合物
を、場合によつては１，２−位で脱水素化するこ
とを特徴とする前記11β−ヒドロキシステロイド
の製造方法に関する。 一般式で示される11β−ヒドロキシステロイ
ドは、一般式XII： 〔式中〓、Ｘ、Ｗ及びR4は一般式に関して記
載したものを表わす〕で示されるステロイドを製
造するための中間生成物として使用される。 周知のように、抗炎症作用を有する11β−ヒド
ロキシステロイド（例えばコルチコイド：ヒドロ
コーチゾン、プレドニソロン、デキサメタソン、
ベータメタソン、プレドニリデン、トリアムシノ
ロン、フルオシノロン又はフルアンドレノロン）
は、極めてコスト高な多段階部分合成で天然産ス
テロイド（例えばジオスゲニン）から製造される
が、天然産ステロイドを多量に供給するのが次第
に困難になつている。上記ステロイドの多段階合
成の内で、ステロイドの骨格に11β−ヒドロキシ
基を微生物的に導入する段階は、一般に極めて高
価で損失の多い合成段階である。 1966年、プレグナン系11−デスオキシ−17α−
ヒドロキシステロイドを11β−ヒドロキシ化する
場合、17α−ヒドロキシ基をエステル化し、次に
クルブラリア属のカビでヒドロキシル化し、得ら
れる11β−ヒドロキシ−17α−アシルオキシステ
ロイドを加水分解することによつて収量を著しく
高めうる方法が開発された（西独特許第1618599
号）。 しかし17−ヒドロキシ基のアシル化は極めてコ
スト高であり、この際得られる収量は不満足であ
ることが多い。 また11β−ヒドロキシ−17α−アシルオキシス
テロイドの加水分解も困難である、それというの
も大抵副生成物が形成され、ひいては、得られた
生成物が医薬用作用物質に必要な純度基準に相応
するためには該生成物のコスト高で損失の多い精
製が必要であるからである。 これに対して本発明による方法の場合には、相
応する17−ヒドロキシステロイドより好収率で製
造されうる出発ステロイドが使用され、得られた
生成物は迅速かつ定量的に相応する11β，17α−
ジヒドロキシステロイドに加水分解されうる。 本発明により使用されるステロイドは常法で置
換されておりかつ／又は二重結合を有していても
よい。 例えば21−位におけるヒドロキシ基又はアシル
オキシ基の存在、例えば６−位及び／又は16−位
におけるハロゲン原子、好ましくはフツ素原子、
メチル基又はメチレン基の存在は本発明による方
法の実施に影響を及ぼさない。本発明による方法
のためには出発化合物として、有利に３−位にオ
キソ基を有し、４，５−位に二重結合を有するよ
うなステロイドが使用される。 本発明による方法は、他の出発化合物を使用す
ることは別にして、普通クルブラリア属のカビに
よるステロイドの11β−ヒドロキシル化のために
用いられる条件下に実施される。 ヒドロキシル化のために適当なクルブラリア属
のカビは例えばクルブラリア・フアルクータ
（falcuta）QH−102H、クルブラリア・ゲンテイ
クラータ（genticulata）IFO（6284）、クラブラ
リア・ルナータ（lunata）NRRL2380
（ATCC12017）、NRRL2434（ATCC13633）又は
IFO（6286）又はクルブラリア・マクランス
（maculans）IFO（6292）である。 クルブラリア属のカビとして他の11β−ヒドロ
キシル化をもたらす微生物も方法実施のために適
当であると述べられている。しかしこれは一般に
は本発明による方法に対して利点をもたらさな
い。 前記微生物に関して通常使用される培養条件下
に適当な通気培養基、深部培養で増殖を行なう。
次に培養物に基質を（適当な溶剤に溶かすは又は
好ましくは乳化された形で）加えかつ最大の基質
変化が達成されるまで発酵させる。 適当な基質溶剤は、例えばメタノール、エタノ
ール、グリコールモノメチルエーテル、ジメチル
ホルムアミド又はジメチルスルホキシドである。
基質の乳化は、例えば、基質を微粒子に細砕され
た形で又は水と混合可能の溶剤（例えばメタノー
ル、エタノール、アセトン、グリコールモノエチ
ルエーテル、ジメチルホルムアミド又はジメチル
スルホキシド）に溶かして、常用の乳化助剤を含
有する（好ましくは脱灰された）水中に激しい乱
流下に噴出することによつて行なうことができ
る。適当な乳化助剤は、例えば酸化エチレン付加
物又はポリグリコールの脂肪酸エステルのような
非イオン性乳化剤である。適当な乳化剤として例
えば市販の湿潤剤テギン（Tegin商標、以下同
じ）タガート（Tagat）、ツウイン（Tween）及
びスパン（Span）が挙げられる。 基質の乳化によつて基質処理量を高め、ひいて
は基質濃度を増大させうることが多い。しかしも
ちろん本発明による方法の場合発酵業者に周知の
他の方法を用いて基質処理量を高めてもよい。 最適な基質濃度、基質添加時間及び発酵期間
は、使用される基質の構造及び使用される微生物
の種類に依存する。微生物学的ステロイド変換の
際に一般に必要とされる前記の濃度、添加時間及
び発酵期間の大きさは、個々の場合について、当
業者に周知の予備試験によつて確かめられなけれ
ばならない。 場合によつて引続き行なわれる１−位で飽和さ
れた一般式の△4−ステロイドの脱水素化は、
微生学的方法ならびに純化学的方法によつて実施
することができる。すなわち△4−ステロイドは
例えば、慣用条件下にバチルス（Bacillus）属
〔例えばバチルス・レンツス（Bacillus lentus）
又はバチルス・スフエリクス（Bacillus
sphaericus）〕又はアルトロバクテル（Arthro−
bacter）属〔例えばアルトロバクタテル・シンプ
レクス（Arthrobacter sumplex）〕の培養細菌
で１−位で脱水素化することができる。しかしま
た、△4−ステロイドを、このような反応の場合
に常用される酸化剤、例えば二酸化セレン又は
２，３−ジクロル−５，６−ジシアノベンゾキノ
ンと一緒に不活性溶剤中で加熱することによつて
△1−脱水素化を実施することもできる。 得られた方法生成物は容易に相応する11β，
17α，21−トリヒドロキシステロイドに分解する
ことができる。 この分解は、アセタールの加水分解又はアルコ
リシスのために慣用される条件下に実施される。
すなわち該化合物を例えば、メタノール又はエタ
ノールのような低級アルコール中又は水を含む有
機溶剤例えばグリコールモノメチルエーテル、テ
トラヒドロフラン、ジオキサン、ジメチルホルム
アミド、ジメチルスルホキシド、ヘキサメチルホ
スホン酸トリアミド、アセトン中で、塩酸、硫
酸、リン酸、過塩素酸のような鉱酸、ｐ−トルオ
ールスルホン酸のようなスルホン酸、ギ酸、酢
酸、トリフルオル酢酸、酸性イオン交換体のよう
な強酸性カルボン酸又は三フツ化ホウ素、塩化亜
鉛、臭化亜鉛又は四塩化チタンのようなルイス酸
と反応させることによつて分解を行なうことがで
きる。 一般式の新規コルチコイドは局所的適用時に
極めて良好な抗炎症性作用によつて優れておりか
つ所望の局所的作用と望ましくない全身的副作用
との間の極めて有利な分離作用を有する： 局所的作用は血管収縮試験によつて測定するこ
とができる。 血管収縮試験は、最後の二週間の間コルチコス
テロイド局所療法を受けていない両性の健康な被
験者８人について実施する。被験者の背中の角質
層から透明層までを除去した（20〜40回テサフイ
ルム（Tesafilm）で剥離）後各0.1ｇの調剤を、
４cm2の面積の領域に被蓋繃帯なしに塗布する。同
調剤がその都度皮膚の同一部分に適用されないよ
うに順次回転しながら塗布する。 血管収縮は４時間後及び８時間後に実験者によ
つて視覚的に次の作用度により判定する： １＝完全蒼白化、２＝僅かに残余紅斑あり、３
＝中程度の紅斑（剥離された皮膚、未処理の皮膚
及び損傷のない皮膚の中央部における赤化強さ）、
４＝明るい部分の少ない紅斑、５＝蒼白化せず、
又は紅斑強化。 個々の判定を行なう。 実験の順番ごとに対照物質としてジフルオルト
ロン−21−バレリアネート（＝6α，9α−ジフル
オル−11β−ヒドロキシ−16α−メチル−21−バ
レリルオキシ−１，４−プレグナジエン−３，20
−ジオン＝DEV）を使用する。 個々の試験順番で得られたDEV平均作用度と
被験物質の平均作用度との差△をその都度決定す
る。プラスの偏差△はDFVと比べて被験物質が
有利であると判定されることを示し、マイナスの
偏差は同様に不利であると判定されることを示
す。 以下の表には、被験者の治療の際に作用物質
0.1ppmを含有する調剤を用いて得られる試験成
績を記載してある。 該化合物の全身的作用は補助薬による浮腫試験
によつて確定することができる： 体重130〜150ｇのSPFラツトに炎症性病巣をつ
くるために0.5％ミコバクテリウム・ブチリクム
（Mycobacterium butyricum）懸濁液（米国
Difko社製）0.1mlを体重130〜150ｇのSPFラツト
の右後脚に注射する。注射前にラツトの脚容積を
測定する。注射24時間後に再び脚容積を測定して
浮腫の程度を決定する。次に種々の量の被験物質
（安息香酸ベンジル29％とヒマシ油71％とより成
る混合物中に溶かす）をラツトに経口的又は皮下
的に適用する。更に24時間後に脚容積を再び測定
する。 対照動物も同様に処置するが、被験物質を含ま
ない安息香酸ベンジル−ヒマシ油混合物を注射す
る点が相違する。 普通、得られた脚容積から、実験的につくられ
る脚浮腫の容積を50％減少させるために必要な被
験物質の量を決定する。以下の表には得られた試
験成積が記載してあるが、本発明による物質は市
販製剤として存在する構造的に極めて類似の公知
コルチコイドと比較してある。
素原子、フツ素原子、塩素原子又はメチル基を表
わし、 Ｗはメチレン基、エチリデン基又はビニリデン
基を表わし、 R1は炭素原子数１〜６を有するアルキル基を
表わす〕 で示される11β−ヒドロキシステロイドを製造す
るに当り、一般式XI： 〔式中Ｘ、Ｗ及びR1は前記のものを表わし、R4
はヒドロキシ基又は炭素原子数１〜６のアルカノ
イルオキシ基を表わす〕で示される11−デスオキ
システロイドを、クルブラリア属の培養菌で発酵
させ、得られた〓が単結合を表わす式の化合物
を、場合によつては１，２−位で脱水素化するこ
とを特徴とする前記11β−ヒドロキシステロイド
の製造方法に関する。 一般式で示される11β−ヒドロキシステロイ
ドは、一般式XII： 〔式中〓、Ｘ、Ｗ及びR4は一般式に関して記
載したものを表わす〕で示されるステロイドを製
造するための中間生成物として使用される。 周知のように、抗炎症作用を有する11β−ヒド
ロキシステロイド（例えばコルチコイド：ヒドロ
コーチゾン、プレドニソロン、デキサメタソン、
ベータメタソン、プレドニリデン、トリアムシノ
ロン、フルオシノロン又はフルアンドレノロン）
は、極めてコスト高な多段階部分合成で天然産ス
テロイド（例えばジオスゲニン）から製造される
が、天然産ステロイドを多量に供給するのが次第
に困難になつている。上記ステロイドの多段階合
成の内で、ステロイドの骨格に11β−ヒドロキシ
基を微生物的に導入する段階は、一般に極めて高
価で損失の多い合成段階である。 1966年、プレグナン系11−デスオキシ−17α−
ヒドロキシステロイドを11β−ヒドロキシ化する
場合、17α−ヒドロキシ基をエステル化し、次に
クルブラリア属のカビでヒドロキシル化し、得ら
れる11β−ヒドロキシ−17α−アシルオキシステ
ロイドを加水分解することによつて収量を著しく
高めうる方法が開発された（西独特許第1618599
号）。 しかし17−ヒドロキシ基のアシル化は極めてコ
スト高であり、この際得られる収量は不満足であ
ることが多い。 また11β−ヒドロキシ−17α−アシルオキシス
テロイドの加水分解も困難である、それというの
も大抵副生成物が形成され、ひいては、得られた
生成物が医薬用作用物質に必要な純度基準に相応
するためには該生成物のコスト高で損失の多い精
製が必要であるからである。 これに対して本発明による方法の場合には、相
応する17−ヒドロキシステロイドより好収率で製
造されうる出発ステロイドが使用され、得られた
生成物は迅速かつ定量的に相応する11β，17α−
ジヒドロキシステロイドに加水分解されうる。 本発明により使用されるステロイドは常法で置
換されておりかつ／又は二重結合を有していても
よい。 例えば21−位におけるヒドロキシ基又はアシル
オキシ基の存在、例えば６−位及び／又は16−位
におけるハロゲン原子、好ましくはフツ素原子、
メチル基又はメチレン基の存在は本発明による方
法の実施に影響を及ぼさない。本発明による方法
のためには出発化合物として、有利に３−位にオ
キソ基を有し、４，５−位に二重結合を有するよ
うなステロイドが使用される。 本発明による方法は、他の出発化合物を使用す
ることは別にして、普通クルブラリア属のカビに
よるステロイドの11β−ヒドロキシル化のために
用いられる条件下に実施される。 ヒドロキシル化のために適当なクルブラリア属
のカビは例えばクルブラリア・フアルクータ
（falcuta）QH−102H、クルブラリア・ゲンテイ
クラータ（genticulata）IFO（6284）、クラブラ
リア・ルナータ（lunata）NRRL2380
（ATCC12017）、NRRL2434（ATCC13633）又は
IFO（6286）又はクルブラリア・マクランス
（maculans）IFO（6292）である。 クルブラリア属のカビとして他の11β−ヒドロ
キシル化をもたらす微生物も方法実施のために適
当であると述べられている。しかしこれは一般に
は本発明による方法に対して利点をもたらさな
い。 前記微生物に関して通常使用される培養条件下
に適当な通気培養基、深部培養で増殖を行なう。
次に培養物に基質を（適当な溶剤に溶かすは又は
好ましくは乳化された形で）加えかつ最大の基質
変化が達成されるまで発酵させる。 適当な基質溶剤は、例えばメタノール、エタノ
ール、グリコールモノメチルエーテル、ジメチル
ホルムアミド又はジメチルスルホキシドである。
基質の乳化は、例えば、基質を微粒子に細砕され
た形で又は水と混合可能の溶剤（例えばメタノー
ル、エタノール、アセトン、グリコールモノエチ
ルエーテル、ジメチルホルムアミド又はジメチル
スルホキシド）に溶かして、常用の乳化助剤を含
有する（好ましくは脱灰された）水中に激しい乱
流下に噴出することによつて行なうことができ
る。適当な乳化助剤は、例えば酸化エチレン付加
物又はポリグリコールの脂肪酸エステルのような
非イオン性乳化剤である。適当な乳化剤として例
えば市販の湿潤剤テギン（Tegin商標、以下同
じ）タガート（Tagat）、ツウイン（Tween）及
びスパン（Span）が挙げられる。 基質の乳化によつて基質処理量を高め、ひいて
は基質濃度を増大させうることが多い。しかしも
ちろん本発明による方法の場合発酵業者に周知の
他の方法を用いて基質処理量を高めてもよい。 最適な基質濃度、基質添加時間及び発酵期間
は、使用される基質の構造及び使用される微生物
の種類に依存する。微生物学的ステロイド変換の
際に一般に必要とされる前記の濃度、添加時間及
び発酵期間の大きさは、個々の場合について、当
業者に周知の予備試験によつて確かめられなけれ
ばならない。 場合によつて引続き行なわれる１−位で飽和さ
れた一般式の△4−ステロイドの脱水素化は、
微生学的方法ならびに純化学的方法によつて実施
することができる。すなわち△4−ステロイドは
例えば、慣用条件下にバチルス（Bacillus）属
〔例えばバチルス・レンツス（Bacillus lentus）
又はバチルス・スフエリクス（Bacillus
sphaericus）〕又はアルトロバクテル（Arthro−
bacter）属〔例えばアルトロバクタテル・シンプ
レクス（Arthrobacter sumplex）〕の培養細菌
で１−位で脱水素化することができる。しかしま
た、△4−ステロイドを、このような反応の場合
に常用される酸化剤、例えば二酸化セレン又は
２，３−ジクロル−５，６−ジシアノベンゾキノ
ンと一緒に不活性溶剤中で加熱することによつて
△1−脱水素化を実施することもできる。 得られた方法生成物は容易に相応する11β，
17α，21−トリヒドロキシステロイドに分解する
ことができる。 この分解は、アセタールの加水分解又はアルコ
リシスのために慣用される条件下に実施される。
すなわち該化合物を例えば、メタノール又はエタ
ノールのような低級アルコール中又は水を含む有
機溶剤例えばグリコールモノメチルエーテル、テ
トラヒドロフラン、ジオキサン、ジメチルホルム
アミド、ジメチルスルホキシド、ヘキサメチルホ
スホン酸トリアミド、アセトン中で、塩酸、硫
酸、リン酸、過塩素酸のような鉱酸、ｐ−トルオ
ールスルホン酸のようなスルホン酸、ギ酸、酢
酸、トリフルオル酢酸、酸性イオン交換体のよう
な強酸性カルボン酸又は三フツ化ホウ素、塩化亜
鉛、臭化亜鉛又は四塩化チタンのようなルイス酸
と反応させることによつて分解を行なうことがで
きる。 一般式の新規コルチコイドは局所的適用時に
極めて良好な抗炎症性作用によつて優れておりか
つ所望の局所的作用と望ましくない全身的副作用
との間の極めて有利な分離作用を有する： 局所的作用は血管収縮試験によつて測定するこ
とができる。 血管収縮試験は、最後の二週間の間コルチコス
テロイド局所療法を受けていない両性の健康な被
験者８人について実施する。被験者の背中の角質
層から透明層までを除去した（20〜40回テサフイ
ルム（Tesafilm）で剥離）後各0.1ｇの調剤を、
４cm2の面積の領域に被蓋繃帯なしに塗布する。同
調剤がその都度皮膚の同一部分に適用されないよ
うに順次回転しながら塗布する。 血管収縮は４時間後及び８時間後に実験者によ
つて視覚的に次の作用度により判定する： １＝完全蒼白化、２＝僅かに残余紅斑あり、３
＝中程度の紅斑（剥離された皮膚、未処理の皮膚
及び損傷のない皮膚の中央部における赤化強さ）、
４＝明るい部分の少ない紅斑、５＝蒼白化せず、
又は紅斑強化。 個々の判定を行なう。 実験の順番ごとに対照物質としてジフルオルト
ロン−21−バレリアネート（＝6α，9α−ジフル
オル−11β−ヒドロキシ−16α−メチル−21−バ
レリルオキシ−１，４−プレグナジエン−３，20
−ジオン＝DEV）を使用する。 個々の試験順番で得られたDEV平均作用度と
被験物質の平均作用度との差△をその都度決定す
る。プラスの偏差△はDFVと比べて被験物質が
有利であると判定されることを示し、マイナスの
偏差は同様に不利であると判定されることを示
す。 以下の表には、被験者の治療の際に作用物質
0.1ppmを含有する調剤を用いて得られる試験成
績を記載してある。 該化合物の全身的作用は補助薬による浮腫試験
によつて確定することができる： 体重130〜150ｇのSPFラツトに炎症性病巣をつ
くるために0.5％ミコバクテリウム・ブチリクム
（Mycobacterium butyricum）懸濁液（米国
Difko社製）0.1mlを体重130〜150ｇのSPFラツト
の右後脚に注射する。注射前にラツトの脚容積を
測定する。注射24時間後に再び脚容積を測定して
浮腫の程度を決定する。次に種々の量の被験物質
（安息香酸ベンジル29％とヒマシ油71％とより成
る混合物中に溶かす）をラツトに経口的又は皮下
的に適用する。更に24時間後に脚容積を再び測定
する。 対照動物も同様に処置するが、被験物質を含ま
ない安息香酸ベンジル−ヒマシ油混合物を注射す
る点が相違する。 普通、得られた脚容積から、実験的につくられ
る脚浮腫の容積を50％減少させるために必要な被
験物質の量を決定する。以下の表には得られた試
験成積が記載してあるが、本発明による物質は市
販製剤として存在する構造的に極めて類似の公知
コルチコイドと比較してある。
【表】
新規化合物は、ガーレン式薬学において常用さ
れる担持剤と組合わせることにより、接触性皮膚
炎、種々の湿疹、神経皮膚症、紅皮症、火傷、外
陰及び肛門、痒症、酒、皮膚紅斑性痕瘡、乾癬、
扁平紅色及び疣状苔癬及び類似の皮膚疾患の局所
的治療のために適する。 特殊性医薬の調製は、常法で作用物質を適当な
添加剤と一緒に所望の適用形、例えば溶液、ロー
シヨン、軟膏、クリーム又は硬膏に代えることに
よつて行なわれる。このようにして調製された医
薬の場合作用物質の温度は適用形に依存する。ロ
ーシヨン及び軟膏の場合には好ましくは0.001％
〜１％の作用物質濃度が用いられる。 更に新規化合物は場合により常用の担持剤及び
助剤と組合わせることにより、アレルギー性気道
疾患、例えば気管枝喘息又は鼻カタルの治療に用
いられうる吸入剤の製造にも好適である。 更に新規コルチコイドは、好ましくは10〜200
mgの作用物質を含有しかつ経口的に適用されるカ
プセル、錠剤又は糖衣丸の形で又は用量位当り好
ましくは100〜500mgを含有し、直腸的に適用され
る懸濁液の形で、潰瘍性結腸炎及び肉芽腫性結腸
炎のようなアレルギー性腸管疾患の治療にも適し
ている。 次に実施例により本発明を詳述する。 例 １ (a) 3β，21−ジアセトキシ−17α−ヒドロキシ−
５−プレグネン−20−オン21.63ｇを、水を含
まない塩化メチン150mlと水を含まないホルム
アルデヒドジメチルアセタール100mlとの中に
溶かす。次にこの溶液を水で冷却しかつ五酸化
リン21.6ｇとケイ藻土43ｇとの混合物を入れて
１時間室温で撹拌する。次いで反応混合物を濾
過し、残留物を塩化メチレンで洗浄し、濾液に
PH値９の得られるまでトリエチルアミンを加え
かつ真空で蒸発濃縮する。残留物をメタノール
−塩化メチレンより再結晶させて融点182〜184
℃の3β，21−ジアセトキシ−17α−メトキシメ
トキシ−５−プレグネン−20−オン22.68ｇを
得る。 (b) 酵母エキス0.3％、コーンスチープ
（CornSteep）液0.3％及びデンプン糖0.2％を含
有する無菌培養液（PH＝7.0に調節）１を含
む２のエルレンマイヤーフラスコに、フラボ
バクテリウム・デヒドロデゲナンス
（Flavobacterium dehydrogenans）
ATCC13930の乾燥培養菌を接種し、30℃で２
日間毎分175回転で振盪する。 同一培養液85mlを含む500mlのエルレンマイ
ヤーフラスコに、フラボバクテリウム・デヒド
ロゲナンス増殖培養菌10mlを接種し、30℃で７
時間毎分175回転で振盪する。次にこの培養物
にジメチルホルムアミド中の3β，21−ジアセ
トキシ−17α−メトキシメトキシ−５−プレグ
ネン−20−オン0.5ｇの無菌溶液５mlを加えて、
更に65時間30℃で毎分175回転で振盪する。発
酵後培養物より塩化エチレン100mlで２回抽出
を行ない、抽出物を真空で蒸発濃縮し、残留物
を酸化アルミニウムを媒体とするクロマトグラ
フイーによつて精製して、融点152〜153℃の21
−ヒドロキシ−17α−メトキシメトキシ−４−
プレグネン３，20−ジオン402mgを得る。 (c) グルコース２％及びコーンスチープ液２％を
含有する無菌培養液（PH＝6.5に調節）１を
含む２のエルレンマイヤーフラスコに、クル
ブラリア・ルナータ（Curvularia lunata）
NRRL2380の乾燥培養菌の浮遊液を接種して、
30℃で60時間毎分175回転で振盪する。 コーンスチープ液1.0％及び大豆粉1.25％を
含有する無菌培養液（PH＝6.2に調節）90mlを
含む500mlのエルレンマイヤーフラスコにクル
ブラリア・ルナータ増殖培養菌10mlを接種し、
30℃で７時間毎分175回転で振り混ぜる。次に
この培養物にジメチルホルムアミド中の21−ヒ
ドロキシ−17α−メトキシメトキシ−４−プレ
グネン−３，20−ジオン30mgを無菌溶液0.6ml
を加えて、更に65時間前記条件下に発酵を行な
う。 発酵培養物を例1bで記載したようにして後
処理して、融点180〜182℃の11β，21−ジヒド
ロキシ−17α−メトキシメトキシ−４−プレグ
ネン−３，20−ジオン27mgを得る。 (d) 11β，21−ジヒドロキシ−17a−メトキシメ
トキシ−４−プレグネン−３，20−ジオン2.5
ｇを、水を含まない塩化メチレン40ml中に溶か
し、０℃に冷却しかつ15分以内にアルゴン下に
塩化メチレン10ml中の四塩化チタン2.25mlの溶
液を加える。反応混合物を90分間室温で撹拌
し、次に塩化メチレン150ml及び炭酸水素ナト
リウムの飽和水溶液100mlを加え、15分間撹拌
し、有機相を分離し、洗浄して中性にし、硫酸
ナトリウムを介して脱水しかつ真空で蒸発濃縮
する。残留物をクロロホルムより再結晶させて
分解温度215℃の11β，17α，21−トリヒドロキ
シ−４−プレグネン−３，20−ジオン2.19ｇを
得る。 例 ２ 酵母エキス0.1％、コーンスチープ液0.5％、デ
ンプン糖0.1％を含有する無菌培養液（PH7.0に調
節）500mlを含む２のエルレンマイヤーフラス
コに、アルトロバクテル・シンプレクス
ATCC6946の乾燥培養菌の浮遊液を接種し、30℃
で48時間毎分190回転で振盪する。 前記の培養液90mlを含む500mlのエルレンマイ
ヤーフラスコに、アルトロバクテル・シンプレク
ス増殖培養菌10mlを接種し、30℃で６時間毎分
165回転で振盪する。次にこの培養物にジメチル
ホルムアミド中の11β，21−ジヒドロキシ−17α
−メトキシエトキシ−４−プレグネン−３，20−
ジオン50mgの無菌溶液を加えて、更に42時間発酵
させる。 発酵培養物を例1bで記載したようにして後処
理して、融点229／230〜231℃の11β，21−ジヒ
ドロキシ−17α−メトキシエトキシ−１，４−プ
レグナジエン−３，20−ジオン44.5mgを得る。 例 ３ (a) 21−アセトキシ−17α−ヒドロキシ−４−プ
レグナン−３，20−ジオン50ｇを、ホルムアル
デヒドジエチルアセタール600ml及び塩化メチ
レン600mlで懸濁し、−30〜40℃に冷却する。五
酸化リン75ｇとケイ藻土150ｇとの混合物を撹
拌下に導入して、−30℃で30時間撹拌する。こ
の溶液を濾過して、トリエチルアミンで中性に
する。溶剤を留去した後もう一度メタノールと
一緒に蒸留を行ない、残留物をメタノールより
再結晶させる。21−アセトキシ−17α−エトキ
シメトキシ−４−プレグネン−３，20−ジオン
35.9ｇが得られ、もう一度再結晶させると137
〜139℃で融解する。 (b) コーンスチープ液１％、大豆粉1.25％を含有
する無菌培養液（PH6.2に調節）１を含む２
のエルレンマイヤーフラスコに、クルブラリ
ア・ルナータNRRL2380の乾燥培養菌の浮遊
液を接種し、30℃で72時間毎分175回転で振盪
する。 前記のような無菌培養液29を含む50の発酵
槽に、前記クルブラリア・ルナータ培養菌１を
接種し、30℃で24時間２m3／ｈで通気しながら培
養する。 前記のような無菌培養液36を含む50の発酵
槽に、クルブラリア・ルナータの予備発酵槽培養
菌４を接種し、30℃で10時間、２m3／ｈで通気
しかつ220回転／minで撹拌しつつ増殖させる。
次にこの培養物に、エチレングリコールモノメチ
ルエーテル200ml中の21−アセトキシ−17α−エ
トキシメトキシ−４−プレグネン−３，20−ジオ
ン10ｇを加える。10時間からPH値を65〜7.0に保
つ。更に４時間後にもう一回エチレングリコール
モノエチルエーテル200ml中の21−アセトキシ−
17α−エトキシメトキシ−４−プレグネン３，20
−ジオン10ｇを加え、更に23時間前記条件下に発
酵を行なう。 発酵培養物から３回塩化エチレン10で抽出を
行ない、次いで例1bに記載したようにして後処
理する。融点153〜154℃の11β，21−ジヒドロキ
シ−17α−エトキシメトキシ−４−プレグネン−
３，20−ジオン13.8ｇを得る。 例 ４ (a) 21−アセトキシ−17α−ヒドロキシ−４−プ
レグネン−３，20−ジオン25ｇを、ホルムアル
デヒドジプロピルアセタール200ml及び塩化メ
チレン320mlで懸濁し、−20℃に冷却する。五酸
化リン49.3ｇ及びケイ藻土97ｇより成る混合物
を撹拌下に導入して22時間−20℃で撹拌する。
溶液を濾過し、トリエチルアミンで中性にす
る。メチレンクロリドを真空で留去し、ホルム
アルデヒドジプロピルアセタール相を、油状析
出物よりデカンテーシヨンする。他の溶剤を真
空で留去した後融点145〜147℃の21−アセトキ
シ−17α−プロポキシメトキシ−４−プレグネ
ン−３，20−ジオン19ｇが結晶化する。 (b) 21−アセトキシ−17α−プロポキシメトキシ
−４−プレグネン−３，20−ジオン10ｇを、ツ
ウイン80 １ｇ及び３倍量の水と一緒にジノ
（Dyno）ミキサーKDL型〔バツハオーフエン
（Bachofen）社、バーゼル在〕で粉砕する。こ
の粉砕物を、１％H2O2で少なくとも４時間滅
菌する。 クルブラリア・ルナータNRRL2380を、例
3bに記載したように、振盪フラスコ及び予備
発酵槽で培養し、メイン発酵槽で接種する。こ
の発酵槽を例3bで記載したようにセツトし、
同様に例3bで記載した条件により10時間培養
する。次のこの培養物に21−アセトキシ−17α
−プロポキシメトキシ−４−プレグネン−３，
20−ジオンの粉砕物を加え、更に44時間発酵さ
せ、この際PH値を6.4〜6.7に保つ。発酵培養物
を例3bで記載したように後処理して、融点
134／135〜136℃の11β，21−ジヒドロキシ−
17α−プロポキシメトキシ−４−プレグネン−
３，20−ジオン6.5ｇを得る。 例 ５ (a) 21−アセトキシ−17α−ヒドロキシ−４−プ
レグネン−３，20−ジオン50ｇを、ホルムアル
デヒドブチルアセタール500ml及び塩化メチレ
ン500mlで懸濁し、−35℃に冷却する。五酸化リ
ン74ｇ及びケイ藻土150ｇより成る混合物を撹
拌下に導入し、30時間−35℃で撹拌する。溶液
を濾過し、トリエチルアミンで中性にする。塩
化メチレンを真空で留去し、ホルムアルデヒド
ジブチルアセタール相を油状析出物よりデカン
テーシヨンする。他の溶剤の真空での留去後に
融点123.5〜124.5℃の21−アセトキシ−17α−
ブトキシメトキシ−４−プレグネン−３，20−
ジオン38.7ｇが結晶化する。 (b) 21−アセトキシ−17α−ブトキシメトキシ−
４−プレグネン−３，20−ジオン８ｇをツウイ
ン80 0.8ｇと一緒に例4bで記載したように粉砕
する。 クルブラリア・ルナータNRRL2380を、振
盪フラスコ、予備発酵及びメイン発酵槽で例
3bで記載したように培養し、発酵させる。メ
イン発酵槽の10時間の時点で基質を加え、更に
50時間発酵させる。 発酵培養物を例3bで記載したように後処理
して、融点79〜81℃の11β，21−ジヒドロキシ
−17α−ブトキシメトキシ−４−プレグネン−
３，20−ジオン3.7ｇを得る。 例 ６ (a) 21−アセトキシ−6α−フルオル−17α−ヒド
ロキシ−４−プレグネン−３，20−ジオン
10.60ｇを、塩化メチレン265ml及びホルムアル
デヒドジメチルアセタール47.7mlに溶かす。五
酸化リン7.95ｇとケイ藻土15.9ｇとより成る混
合物を少しずつ加え、生じる混合物を90分間室
温で窒素下に撹拌する。この溶液を濾過し、ト
リエチルアミン2.1mlを加える。溶剤を留去し、
残留物をメタノールより再結晶させる。融点
161〜167℃の21−アセトキシ−6α−フルオル
−17α−メトキシメトキシ−４−プレグネン−
３，20−ジオン7.6ｇを得る。 (b) クルブラリア・ルナータNRRL2380を、例
3bで記載したようにして、振盪フラスコ、予
備発酵槽及びメイン発酵槽で培養する。メイン
発酵槽における10時間の時点でエチレングリコ
ールモノメチルエーテル100ml中の21−アセト
キシ−6α−フルオル−17α−メトキシメトキシ
−４−プレグネン−３，20−ジオン５ｇを加え
る。PH値をこの時点で6.5〜7.0に保つ。14時間
でもう一度エチレングリコールモノエチルエー
テル100ml中の21−アセトキシ−6α−フルオル
−17α−メトキシメトキシ−４−プレグネン−
３，20−ジオン５ｇを加え、更に26時間発酵を
行なう。 発酵培養物を、例3bで記載したようにして
後処理し、融点190〜192℃の11β，21−ジヒド
ロキシ−6α−フルオル−メトキシ−４−プレ
グネン−３，20−ジオン4.2ｇを得る。 例 ７ (a) 3β，21−ジアセトキシ−17α−ヒドロキシ−
16β−メチル−５−プレグネン−20−オン43ｇ
を、ホルムアルデヒドジメチルアセタール800
ml中に溶かし、−15℃に冷却する。五酸化リン
43ｇとケイ藻土86ｇとより成る混合物を少しず
つ加え、生じる混合物を15時間約−15℃で冷却
する。溶液を濾過し、トリエチルアミンで中性
にし、溶剤を真空で留去する。残留物をメタノ
ールより再結晶させて、融点117〜118℃の3β，
21−ジアセトキシ−17α−メトキシメトキシ−
16β−メチル−５−プレグネン−20−オン31.5
ｇを得る。 (b) フラボバクテリウム・デヒドロゲナンス
ATCC13930を例1bで記載したように培養し、
発酵させる。７時間の時点でこの培養物にジメ
チルホルムアミド中の3β，21−ジアセトキシ
−17α−メトキシメトキシ−16β−メチル−５
−プレグネン−20−オン0.2ｇの無菌溶液４ml
を加え、更に65時間振盪する。 発酵実施後に培養物を例1bで記載したよう
に後処理して、融点126／128〜129℃の21−ヒ
ドロキシ−17α−メトキシメトキシ−16β−メ
チル−４−プレグネン−３，20−ジオン163mg
を得る。 (c) クルブラリア・ルナータNRRL2380を、例
1cで記載したようにして培養し、発酵させる。
７時間の時点でこの培養物にジメチルホルムア
ミド中の21−ヒドロキシ−17α−メトキシメト
キシ−16β−メチル−４−プレグネン−３，20
−ジオン50mgの無菌溶液１mlを加えて、更に65
時間発酵を行なう。 発酵培養物を、例1bに記載したようにして
後処理して、融点204／205〜206℃の11β，21
−ジヒドロキシ−17α−メトキシメトキシ−
16β−メチル−４−プレグネン−３，20−ジオ
ン34.5mgを得る。 例 ８ (a) 21−アセトキシ−17α−ヒドロキシ−４−プ
レグネン−３，20−ジオン38.85ｇを、ホルム
アルデヒドジイソプロピルアセタール235mlと
塩化メチレン500mlと一緒に撹拌し、−20℃に冷
却する。五塩化リン75ｇとケイ藻土150ｇとよ
り成る混合物を撹拌下に入れて−20℃で20時間
撹拌する。この混合物を濾過し、塩化メチレン
で洗浄し、トリエチルアミンでPH９にもたら
す。溶剤を真空で留去し、残留物を塩化メチレ
ンにとる。溶液を塩化ナトリウム半飽和溶液で
洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、活性炭で処
理し、ケイ藻土により吸引しかつ真空で濃縮す
る。残留物にシリカゲルを媒体としてトルオー
ル−酢酸エステル混合物でクロマトグラフイー
を施す。21−アセトキシ−17α−イソプロポキ
シメトキシ−４−プレグネン−３，20−ジオン
35.8ｇが得られる。このものはペンタンで結晶
化すると融点111〜117℃を示す。 (b) クルブラリア・ルナータNRRL2380を、例
3bに記載したように、振盪フラスコ、予備発
酵槽及びメイン発酵槽で培養する。メイン発酵
槽での10時間の時点でエチレングリコールモノ
エチルエーテル240ml中の21−アセトキシ−
17α−イソプロポキシメトキシ−４−プレグネ
ン−３，20−ジオン12ｇを加える。この時点よ
りPH値を6.5〜7.5に保ち、更に15時間発酵を行
なう。 発酵培養物を、例3bに記載したように、後
処理して、11β，21−ジヒドロキシ−17α−イ
ソプロポキシメトキシ−４−プレグネン−３，
20−ジオン（融点71゜／73〜78℃）8.4ｇを得
る。 (c) アルトロバクテル・シンプレクスATCC6946
を、例２で記載したように、増殖フラスコ及び
発酵フラスコで培養する。６時間の時点で発酵
フラスコにエチレングリコールモノメチルエー
テル中の11β，21−ジヒドロキシ−17α−イソ
プロポキシメトキシ−４−プレグネン−３，20
−ジオン50mgの無菌溶液１mlを加え、更に42時
間発酵を行なう。 発酵培養物を、例1bに記載したように後処
理すると、11β，21−ジヒドロキシ−17α−イ
ソプロポキシメトキシ−１，４−プレグナジエ
ン−３，20−ジオン（融点58゜／63〜65℃）32
mgが得られる。
れる担持剤と組合わせることにより、接触性皮膚
炎、種々の湿疹、神経皮膚症、紅皮症、火傷、外
陰及び肛門、痒症、酒、皮膚紅斑性痕瘡、乾癬、
扁平紅色及び疣状苔癬及び類似の皮膚疾患の局所
的治療のために適する。 特殊性医薬の調製は、常法で作用物質を適当な
添加剤と一緒に所望の適用形、例えば溶液、ロー
シヨン、軟膏、クリーム又は硬膏に代えることに
よつて行なわれる。このようにして調製された医
薬の場合作用物質の温度は適用形に依存する。ロ
ーシヨン及び軟膏の場合には好ましくは0.001％
〜１％の作用物質濃度が用いられる。 更に新規化合物は場合により常用の担持剤及び
助剤と組合わせることにより、アレルギー性気道
疾患、例えば気管枝喘息又は鼻カタルの治療に用
いられうる吸入剤の製造にも好適である。 更に新規コルチコイドは、好ましくは10〜200
mgの作用物質を含有しかつ経口的に適用されるカ
プセル、錠剤又は糖衣丸の形で又は用量位当り好
ましくは100〜500mgを含有し、直腸的に適用され
る懸濁液の形で、潰瘍性結腸炎及び肉芽腫性結腸
炎のようなアレルギー性腸管疾患の治療にも適し
ている。 次に実施例により本発明を詳述する。 例 １ (a) 3β，21−ジアセトキシ−17α−ヒドロキシ−
５−プレグネン−20−オン21.63ｇを、水を含
まない塩化メチン150mlと水を含まないホルム
アルデヒドジメチルアセタール100mlとの中に
溶かす。次にこの溶液を水で冷却しかつ五酸化
リン21.6ｇとケイ藻土43ｇとの混合物を入れて
１時間室温で撹拌する。次いで反応混合物を濾
過し、残留物を塩化メチレンで洗浄し、濾液に
PH値９の得られるまでトリエチルアミンを加え
かつ真空で蒸発濃縮する。残留物をメタノール
−塩化メチレンより再結晶させて融点182〜184
℃の3β，21−ジアセトキシ−17α−メトキシメ
トキシ−５−プレグネン−20−オン22.68ｇを
得る。 (b) 酵母エキス0.3％、コーンスチープ
（CornSteep）液0.3％及びデンプン糖0.2％を含
有する無菌培養液（PH＝7.0に調節）１を含
む２のエルレンマイヤーフラスコに、フラボ
バクテリウム・デヒドロデゲナンス
（Flavobacterium dehydrogenans）
ATCC13930の乾燥培養菌を接種し、30℃で２
日間毎分175回転で振盪する。 同一培養液85mlを含む500mlのエルレンマイ
ヤーフラスコに、フラボバクテリウム・デヒド
ロゲナンス増殖培養菌10mlを接種し、30℃で７
時間毎分175回転で振盪する。次にこの培養物
にジメチルホルムアミド中の3β，21−ジアセ
トキシ−17α−メトキシメトキシ−５−プレグ
ネン−20−オン0.5ｇの無菌溶液５mlを加えて、
更に65時間30℃で毎分175回転で振盪する。発
酵後培養物より塩化エチレン100mlで２回抽出
を行ない、抽出物を真空で蒸発濃縮し、残留物
を酸化アルミニウムを媒体とするクロマトグラ
フイーによつて精製して、融点152〜153℃の21
−ヒドロキシ−17α−メトキシメトキシ−４−
プレグネン３，20−ジオン402mgを得る。 (c) グルコース２％及びコーンスチープ液２％を
含有する無菌培養液（PH＝6.5に調節）１を
含む２のエルレンマイヤーフラスコに、クル
ブラリア・ルナータ（Curvularia lunata）
NRRL2380の乾燥培養菌の浮遊液を接種して、
30℃で60時間毎分175回転で振盪する。 コーンスチープ液1.0％及び大豆粉1.25％を
含有する無菌培養液（PH＝6.2に調節）90mlを
含む500mlのエルレンマイヤーフラスコにクル
ブラリア・ルナータ増殖培養菌10mlを接種し、
30℃で７時間毎分175回転で振り混ぜる。次に
この培養物にジメチルホルムアミド中の21−ヒ
ドロキシ−17α−メトキシメトキシ−４−プレ
グネン−３，20−ジオン30mgを無菌溶液0.6ml
を加えて、更に65時間前記条件下に発酵を行な
う。 発酵培養物を例1bで記載したようにして後
処理して、融点180〜182℃の11β，21−ジヒド
ロキシ−17α−メトキシメトキシ−４−プレグ
ネン−３，20−ジオン27mgを得る。 (d) 11β，21−ジヒドロキシ−17a−メトキシメ
トキシ−４−プレグネン−３，20−ジオン2.5
ｇを、水を含まない塩化メチレン40ml中に溶か
し、０℃に冷却しかつ15分以内にアルゴン下に
塩化メチレン10ml中の四塩化チタン2.25mlの溶
液を加える。反応混合物を90分間室温で撹拌
し、次に塩化メチレン150ml及び炭酸水素ナト
リウムの飽和水溶液100mlを加え、15分間撹拌
し、有機相を分離し、洗浄して中性にし、硫酸
ナトリウムを介して脱水しかつ真空で蒸発濃縮
する。残留物をクロロホルムより再結晶させて
分解温度215℃の11β，17α，21−トリヒドロキ
シ−４−プレグネン−３，20−ジオン2.19ｇを
得る。 例 ２ 酵母エキス0.1％、コーンスチープ液0.5％、デ
ンプン糖0.1％を含有する無菌培養液（PH7.0に調
節）500mlを含む２のエルレンマイヤーフラス
コに、アルトロバクテル・シンプレクス
ATCC6946の乾燥培養菌の浮遊液を接種し、30℃
で48時間毎分190回転で振盪する。 前記の培養液90mlを含む500mlのエルレンマイ
ヤーフラスコに、アルトロバクテル・シンプレク
ス増殖培養菌10mlを接種し、30℃で６時間毎分
165回転で振盪する。次にこの培養物にジメチル
ホルムアミド中の11β，21−ジヒドロキシ−17α
−メトキシエトキシ−４−プレグネン−３，20−
ジオン50mgの無菌溶液を加えて、更に42時間発酵
させる。 発酵培養物を例1bで記載したようにして後処
理して、融点229／230〜231℃の11β，21−ジヒ
ドロキシ−17α−メトキシエトキシ−１，４−プ
レグナジエン−３，20−ジオン44.5mgを得る。 例 ３ (a) 21−アセトキシ−17α−ヒドロキシ−４−プ
レグナン−３，20−ジオン50ｇを、ホルムアル
デヒドジエチルアセタール600ml及び塩化メチ
レン600mlで懸濁し、−30〜40℃に冷却する。五
酸化リン75ｇとケイ藻土150ｇとの混合物を撹
拌下に導入して、−30℃で30時間撹拌する。こ
の溶液を濾過して、トリエチルアミンで中性に
する。溶剤を留去した後もう一度メタノールと
一緒に蒸留を行ない、残留物をメタノールより
再結晶させる。21−アセトキシ−17α−エトキ
シメトキシ−４−プレグネン−３，20−ジオン
35.9ｇが得られ、もう一度再結晶させると137
〜139℃で融解する。 (b) コーンスチープ液１％、大豆粉1.25％を含有
する無菌培養液（PH6.2に調節）１を含む２
のエルレンマイヤーフラスコに、クルブラリ
ア・ルナータNRRL2380の乾燥培養菌の浮遊
液を接種し、30℃で72時間毎分175回転で振盪
する。 前記のような無菌培養液29を含む50の発酵
槽に、前記クルブラリア・ルナータ培養菌１を
接種し、30℃で24時間２m3／ｈで通気しながら培
養する。 前記のような無菌培養液36を含む50の発酵
槽に、クルブラリア・ルナータの予備発酵槽培養
菌４を接種し、30℃で10時間、２m3／ｈで通気
しかつ220回転／minで撹拌しつつ増殖させる。
次にこの培養物に、エチレングリコールモノメチ
ルエーテル200ml中の21−アセトキシ−17α−エ
トキシメトキシ−４−プレグネン−３，20−ジオ
ン10ｇを加える。10時間からPH値を65〜7.0に保
つ。更に４時間後にもう一回エチレングリコール
モノエチルエーテル200ml中の21−アセトキシ−
17α−エトキシメトキシ−４−プレグネン３，20
−ジオン10ｇを加え、更に23時間前記条件下に発
酵を行なう。 発酵培養物から３回塩化エチレン10で抽出を
行ない、次いで例1bに記載したようにして後処
理する。融点153〜154℃の11β，21−ジヒドロキ
シ−17α−エトキシメトキシ−４−プレグネン−
３，20−ジオン13.8ｇを得る。 例 ４ (a) 21−アセトキシ−17α−ヒドロキシ−４−プ
レグネン−３，20−ジオン25ｇを、ホルムアル
デヒドジプロピルアセタール200ml及び塩化メ
チレン320mlで懸濁し、−20℃に冷却する。五酸
化リン49.3ｇ及びケイ藻土97ｇより成る混合物
を撹拌下に導入して22時間−20℃で撹拌する。
溶液を濾過し、トリエチルアミンで中性にす
る。メチレンクロリドを真空で留去し、ホルム
アルデヒドジプロピルアセタール相を、油状析
出物よりデカンテーシヨンする。他の溶剤を真
空で留去した後融点145〜147℃の21−アセトキ
シ−17α−プロポキシメトキシ−４−プレグネ
ン−３，20−ジオン19ｇが結晶化する。 (b) 21−アセトキシ−17α−プロポキシメトキシ
−４−プレグネン−３，20−ジオン10ｇを、ツ
ウイン80 １ｇ及び３倍量の水と一緒にジノ
（Dyno）ミキサーKDL型〔バツハオーフエン
（Bachofen）社、バーゼル在〕で粉砕する。こ
の粉砕物を、１％H2O2で少なくとも４時間滅
菌する。 クルブラリア・ルナータNRRL2380を、例
3bに記載したように、振盪フラスコ及び予備
発酵槽で培養し、メイン発酵槽で接種する。こ
の発酵槽を例3bで記載したようにセツトし、
同様に例3bで記載した条件により10時間培養
する。次のこの培養物に21−アセトキシ−17α
−プロポキシメトキシ−４−プレグネン−３，
20−ジオンの粉砕物を加え、更に44時間発酵さ
せ、この際PH値を6.4〜6.7に保つ。発酵培養物
を例3bで記載したように後処理して、融点
134／135〜136℃の11β，21−ジヒドロキシ−
17α−プロポキシメトキシ−４−プレグネン−
３，20−ジオン6.5ｇを得る。 例 ５ (a) 21−アセトキシ−17α−ヒドロキシ−４−プ
レグネン−３，20−ジオン50ｇを、ホルムアル
デヒドブチルアセタール500ml及び塩化メチレ
ン500mlで懸濁し、−35℃に冷却する。五酸化リ
ン74ｇ及びケイ藻土150ｇより成る混合物を撹
拌下に導入し、30時間−35℃で撹拌する。溶液
を濾過し、トリエチルアミンで中性にする。塩
化メチレンを真空で留去し、ホルムアルデヒド
ジブチルアセタール相を油状析出物よりデカン
テーシヨンする。他の溶剤の真空での留去後に
融点123.5〜124.5℃の21−アセトキシ−17α−
ブトキシメトキシ−４−プレグネン−３，20−
ジオン38.7ｇが結晶化する。 (b) 21−アセトキシ−17α−ブトキシメトキシ−
４−プレグネン−３，20−ジオン８ｇをツウイ
ン80 0.8ｇと一緒に例4bで記載したように粉砕
する。 クルブラリア・ルナータNRRL2380を、振
盪フラスコ、予備発酵及びメイン発酵槽で例
3bで記載したように培養し、発酵させる。メ
イン発酵槽の10時間の時点で基質を加え、更に
50時間発酵させる。 発酵培養物を例3bで記載したように後処理
して、融点79〜81℃の11β，21−ジヒドロキシ
−17α−ブトキシメトキシ−４−プレグネン−
３，20−ジオン3.7ｇを得る。 例 ６ (a) 21−アセトキシ−6α−フルオル−17α−ヒド
ロキシ−４−プレグネン−３，20−ジオン
10.60ｇを、塩化メチレン265ml及びホルムアル
デヒドジメチルアセタール47.7mlに溶かす。五
酸化リン7.95ｇとケイ藻土15.9ｇとより成る混
合物を少しずつ加え、生じる混合物を90分間室
温で窒素下に撹拌する。この溶液を濾過し、ト
リエチルアミン2.1mlを加える。溶剤を留去し、
残留物をメタノールより再結晶させる。融点
161〜167℃の21−アセトキシ−6α−フルオル
−17α−メトキシメトキシ−４−プレグネン−
３，20−ジオン7.6ｇを得る。 (b) クルブラリア・ルナータNRRL2380を、例
3bで記載したようにして、振盪フラスコ、予
備発酵槽及びメイン発酵槽で培養する。メイン
発酵槽における10時間の時点でエチレングリコ
ールモノメチルエーテル100ml中の21−アセト
キシ−6α−フルオル−17α−メトキシメトキシ
−４−プレグネン−３，20−ジオン５ｇを加え
る。PH値をこの時点で6.5〜7.0に保つ。14時間
でもう一度エチレングリコールモノエチルエー
テル100ml中の21−アセトキシ−6α−フルオル
−17α−メトキシメトキシ−４−プレグネン−
３，20−ジオン５ｇを加え、更に26時間発酵を
行なう。 発酵培養物を、例3bで記載したようにして
後処理し、融点190〜192℃の11β，21−ジヒド
ロキシ−6α−フルオル−メトキシ−４−プレ
グネン−３，20−ジオン4.2ｇを得る。 例 ７ (a) 3β，21−ジアセトキシ−17α−ヒドロキシ−
16β−メチル−５−プレグネン−20−オン43ｇ
を、ホルムアルデヒドジメチルアセタール800
ml中に溶かし、−15℃に冷却する。五酸化リン
43ｇとケイ藻土86ｇとより成る混合物を少しず
つ加え、生じる混合物を15時間約−15℃で冷却
する。溶液を濾過し、トリエチルアミンで中性
にし、溶剤を真空で留去する。残留物をメタノ
ールより再結晶させて、融点117〜118℃の3β，
21−ジアセトキシ−17α−メトキシメトキシ−
16β−メチル−５−プレグネン−20−オン31.5
ｇを得る。 (b) フラボバクテリウム・デヒドロゲナンス
ATCC13930を例1bで記載したように培養し、
発酵させる。７時間の時点でこの培養物にジメ
チルホルムアミド中の3β，21−ジアセトキシ
−17α−メトキシメトキシ−16β−メチル−５
−プレグネン−20−オン0.2ｇの無菌溶液４ml
を加え、更に65時間振盪する。 発酵実施後に培養物を例1bで記載したよう
に後処理して、融点126／128〜129℃の21−ヒ
ドロキシ−17α−メトキシメトキシ−16β−メ
チル−４−プレグネン−３，20−ジオン163mg
を得る。 (c) クルブラリア・ルナータNRRL2380を、例
1cで記載したようにして培養し、発酵させる。
７時間の時点でこの培養物にジメチルホルムア
ミド中の21−ヒドロキシ−17α−メトキシメト
キシ−16β−メチル−４−プレグネン−３，20
−ジオン50mgの無菌溶液１mlを加えて、更に65
時間発酵を行なう。 発酵培養物を、例1bに記載したようにして
後処理して、融点204／205〜206℃の11β，21
−ジヒドロキシ−17α−メトキシメトキシ−
16β−メチル−４−プレグネン−３，20−ジオ
ン34.5mgを得る。 例 ８ (a) 21−アセトキシ−17α−ヒドロキシ−４−プ
レグネン−３，20−ジオン38.85ｇを、ホルム
アルデヒドジイソプロピルアセタール235mlと
塩化メチレン500mlと一緒に撹拌し、−20℃に冷
却する。五塩化リン75ｇとケイ藻土150ｇとよ
り成る混合物を撹拌下に入れて−20℃で20時間
撹拌する。この混合物を濾過し、塩化メチレン
で洗浄し、トリエチルアミンでPH９にもたら
す。溶剤を真空で留去し、残留物を塩化メチレ
ンにとる。溶液を塩化ナトリウム半飽和溶液で
洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、活性炭で処
理し、ケイ藻土により吸引しかつ真空で濃縮す
る。残留物にシリカゲルを媒体としてトルオー
ル−酢酸エステル混合物でクロマトグラフイー
を施す。21−アセトキシ−17α−イソプロポキ
シメトキシ−４−プレグネン−３，20−ジオン
35.8ｇが得られる。このものはペンタンで結晶
化すると融点111〜117℃を示す。 (b) クルブラリア・ルナータNRRL2380を、例
3bに記載したように、振盪フラスコ、予備発
酵槽及びメイン発酵槽で培養する。メイン発酵
槽での10時間の時点でエチレングリコールモノ
エチルエーテル240ml中の21−アセトキシ−
17α−イソプロポキシメトキシ−４−プレグネ
ン−３，20−ジオン12ｇを加える。この時点よ
りPH値を6.5〜7.5に保ち、更に15時間発酵を行
なう。 発酵培養物を、例3bに記載したように、後
処理して、11β，21−ジヒドロキシ−17α−イ
ソプロポキシメトキシ−４−プレグネン−３，
20−ジオン（融点71゜／73〜78℃）8.4ｇを得
る。 (c) アルトロバクテル・シンプレクスATCC6946
を、例２で記載したように、増殖フラスコ及び
発酵フラスコで培養する。６時間の時点で発酵
フラスコにエチレングリコールモノメチルエー
テル中の11β，21−ジヒドロキシ−17α−イソ
プロポキシメトキシ−４−プレグネン−３，20
−ジオン50mgの無菌溶液１mlを加え、更に42時
間発酵を行なう。 発酵培養物を、例1bに記載したように後処
理すると、11β，21−ジヒドロキシ−17α−イ
ソプロポキシメトキシ−１，４−プレグナジエ
ン−３，20−ジオン（融点58゜／63〜65℃）32
mgが得られる。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 一般式： 〔式中〓は単結合又は二重結合を表わし、Ｘは水
素原子、フツ素原子、塩素原子又はメチル基を表
わし、 Ｗはメチレン基、エチリデン基又はビニリデン
基を表わし、 R1は炭素原子数１〜６を有するアルキル基を
表わす〕 で示される11β−ヒドロキシステロイドを製造す
るに当り、一般式XI： 〔式中Ｘ、Ｗ及びR1は前記のものを表わし、R4
はヒドロキシ基又は炭素原子数１〜６のアルカノ
イルオキシ基を表わす〕で示される11−デスオキ
システロイドを、クルブラリア属の培養菌で発酵
させ、得られた〓が単結合を表わす式の化合物
を、場合によつては１，２−位で脱水素化するこ
とを特徴とする前記11β−ヒドロキシステロイド
の製造方法。
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19782803661 DE2803661A1 (de) | 1978-01-25 | 1978-01-25 | Neue in 17-position substituierte 11beta-hydroxysteroide der pregnanreihe, ihre herstellung und verwendung |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS54163564A JPS54163564A (en) | 1979-12-26 |
| JPS6361000B2 true JPS6361000B2 (ja) | 1988-11-28 |
Family
ID=6030586
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP660379A Granted JPS54163564A (en) | 1978-01-25 | 1979-01-25 | Novel pregnane 11 betaahydroxysteroid substituted in 177position*its manufacture and manufacture of antiiinflammatory medicine containing it and other sterids |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS54163564A (ja) |
| DE (1) | DE2803661A1 (ja) |
| HU (1) | HU185778B (ja) |
| PL (1) | PL121296B1 (ja) |
| ZA (1) | ZA79318B (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3227312A1 (de) * | 1982-07-19 | 1984-01-19 | Schering AG, 1000 Berlin und 4709 Bergkamen | Neue 6,16-dimethylkortikoide, ihre herstellung und verwendung |
| US4588683A (en) * | 1984-02-06 | 1986-05-13 | Eastman Kodak Company | Method of preparing 11β, 17α, 20, 21-tetrahydroxy steroids and corresponding 11β, 17α, 21-trihydroxy-20-oxo steroids |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ZA751599B (en) * | 1974-03-27 | 1976-02-25 | Plurichemie Anstalt | 16-methyl-9alpha-halo steroid esters, ethers and preparation thereof |
-
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- 1978-01-25 DE DE19782803661 patent/DE2803661A1/de not_active Withdrawn
-
1979
- 1979-01-23 PL PL1979222270A patent/PL121296B1/pl unknown
- 1979-01-24 HU HU79SCHE672A patent/HU185778B/hu not_active IP Right Cessation
- 1979-01-25 ZA ZA79318A patent/ZA79318B/xx unknown
- 1979-01-25 JP JP660379A patent/JPS54163564A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS54163564A (en) | 1979-12-26 |
| ZA79318B (en) | 1980-01-30 |
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