JPS6385357A - アポリポプロテインｂの測定方法と試薬 - Google Patents
アポリポプロテインｂの測定方法と試薬Info
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- JPS6385357A JPS6385357A JP23017286A JP23017286A JPS6385357A JP S6385357 A JPS6385357 A JP S6385357A JP 23017286 A JP23017286 A JP 23017286A JP 23017286 A JP23017286 A JP 23017286A JP S6385357 A JPS6385357 A JP S6385357A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（１）産業上の利用分野
本発明は血中アポリボプロティンＢの測定方法および試
薬に関する。従って本発明は血中アポリボプロティンＢ
の測定に生化学的あるいは医学的意義が存する分野９例
えば臨床診断の分野において利用される。
薬に関する。従って本発明は血中アポリボプロティンＢ
の測定に生化学的あるいは医学的意義が存する分野９例
えば臨床診断の分野において利用される。
（２）従来技術および問題点
高コレステロール血症は動脈硬化性疾患の重要な成因の
一つであり、そのメカニズムは詳細に判明してきた。Ｑ
ｏｌｄＳｔｅｉｎとＢｒｏｗｎが家族性高コレステロー
ル血症］Ｊａをもって研究したところによれば。
一つであり、そのメカニズムは詳細に判明してきた。Ｑ
ｏｌｄＳｔｅｉｎとＢｒｏｗｎが家族性高コレステロー
ル血症］Ｊａをもって研究したところによれば。
本庁はアポリポプロティンＢに対するリセプターの異常
が原因となつて発生することが明らかにされ、従って患
者の血中アポリボプロティンＢ値は高くなることが知ら
れている。すなわち血中アポリボプロティンＢの測定に
よって高コレステロール血症の診断が可能となる。下記
文献（ａｌは上記の従来知見をさらに詳細に説明する資
料として参照される。
が原因となつて発生することが明らかにされ、従って患
者の血中アポリボプロティンＢ値は高くなることが知ら
れている。すなわち血中アポリボプロティンＢの測定に
よって高コレステロール血症の診断が可能となる。下記
文献（ａｌは上記の従来知見をさらに詳細に説明する資
料として参照される。
（ａｌ ゴールドスタイン、ジュー。エル１．アンド
ブラウン、エム、ニス０．ザＬＤＬリセプターデフエク
ト イン ファミリアル ハイパーコレステローレミア
、メゾ、クリニ、ノース。
ブラウン、エム、ニス０．ザＬＤＬリセプターデフエク
ト イン ファミリアル ハイパーコレステローレミア
、メゾ、クリニ、ノース。
エム、 ６６ ： ２７３ 、１９８２ （Ｇｏｌｄｓ
ｔｅｉｎ、 Ｊ、 Ｌ、、 ａｎｄＢｒｏｗｎ、 Ｍ、
Ｓ、、 Ｔｈｅ ＬＤＬ ｒｅｃｅｐｔｅｒ ｄｅｆ
ｅｃｔ ｉｎ ｆａｍｉｌｉａｌｈｙｐｅｒ＋ｃｈｏｌ
ｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ、Ｍｅｄ、０Ｌｉｎ、Ｎｏｒｔ
ｈ、Ａｍ、６６ ：２７３、１９８２） 血中アポリボプロティンＢの測定には各種の方法がある
が、感度のよい方法としては免疫学的測定方法が推奨さ
れる。例えば抗アポリポプロティンＢ抗体を利用してＲ
ＬＩＳＡ法を行う方法をあげることができる。
ｔｅｉｎ、 Ｊ、 Ｌ、、 ａｎｄＢｒｏｗｎ、 Ｍ、
Ｓ、、 Ｔｈｅ ＬＤＬ ｒｅｃｅｐｔｅｒ ｄｅｆ
ｅｃｔ ｉｎ ｆａｍｉｌｉａｌｈｙｐｅｒ＋ｃｈｏｌ
ｅｓｔｅｒｏｌｅｍｉａ、Ｍｅｄ、０Ｌｉｎ、Ｎｏｒｔ
ｈ、Ａｍ、６６ ：２７３、１９８２） 血中アポリボプロティンＢの測定には各種の方法がある
が、感度のよい方法としては免疫学的測定方法が推奨さ
れる。例えば抗アポリポプロティンＢ抗体を利用してＲ
ＬＩＳＡ法を行う方法をあげることができる。
ところで、高コレステロール血症は新生児の早い段階か
らすでに発症しており、それ以後の長い年月にわたる進
行の結果として動脈硬化症に至ることが知られている。
らすでに発症しており、それ以後の長い年月にわたる進
行の結果として動脈硬化症に至ることが知られている。
すなわち新生児のできるだけ早期に高コレステロール血
症の危険因子を発見し、これを除去してコレステロール
値をコントロールすることができれば、成人になってか
らの動脈硬化症をかなり減少させることができる。この
意味で新生児における血中アポリボプロティンＢの測定
は非常に重要であることが理解される。
症の危険因子を発見し、これを除去してコレステロール
値をコントロールすることができれば、成人になってか
らの動脈硬化症をかなり減少させることができる。この
意味で新生児における血中アポリボプロティンＢの測定
は非常に重要であることが理解される。
しかしながら新生児の採血量には限度があるために新生
児における血中アポリボプロティンＢの測定にはこれを
容易に行うことができない難点がある。特に採血してか
ら数日経過後に測定する必要のある場合には測定値の再
現性が悪くなるという問題がある。
児における血中アポリボプロティンＢの測定にはこれを
容易に行うことができない難点がある。特に採血してか
ら数日経過後に測定する必要のある場合には測定値の再
現性が悪くなるという問題がある。
このような問題点にかんがみ本発明者はきわめて微量の
採血サンプルであってもその血中アポリボプロティンＢ
を感度よ（測定することのできる方法の提供を課題とし
て検討した。
採血サンプルであってもその血中アポリボプロティンＢ
を感度よ（測定することのできる方法の提供を課題とし
て検討した。
（３）解決手段
種々の検討の結果、乾燥が紙を使用して新生児より極微
量の採血を行い、界面活性剤を含む溶液中に溶出し、こ
れを測定試料として適当な免疫学的測定法によりアポリ
ポプロティンＢを測定すればよいことを見出し２本発明
を完成するに至った。
量の採血を行い、界面活性剤を含む溶液中に溶出し、こ
れを測定試料として適当な免疫学的測定法によりアポリ
ポプロティンＢを測定すればよいことを見出し２本発明
を完成するに至った。
以下に本発明の詳細な説明する。
アポリポプロティンにはＡ−Ｉ、 Ａ−ＩＦ、 Ｂ。
Ｃ−ｌｌ、 Ｃ−Ｉ［、Ｅ等があるが１本発明はこれら
のうちアポリポプロティンＢのみを対象とする。アポリ
ポプロティンＢの説明については前記文献ｆａｌの記述
が本発明のために参照される。
のうちアポリポプロティンＢのみを対象とする。アポリ
ポプロティンＢの説明については前記文献ｆａｌの記述
が本発明のために参照される。
本発明において乾燥が紙はＤＢＳ （Ｄｒｉｅｄ Ｂｌ
ｏｏｄＳｐｏｔ ）用として一般に市販されているもの
を入手して使用すればよく１例えば３ｍｍ径の円形ｐ紙
を用いて新生児より極微量を採血すればよい。
ｏｏｄＳｐｏｔ ）用として一般に市販されているもの
を入手して使用すればよく１例えば３ｍｍ径の円形ｐ紙
を用いて新生児より極微量を採血すればよい。
採取された乾燥濾紙血は溶液中に溶出されるが。
本発明においては該溶液に界面活性剤が含まれることが
特徴である。後記実験例によって示され？界面活性剤が
含まれることにより溶出率がきわめて安定し、再現性の
よい感度の高い測定が可能となる。ここで界面活性剤と
しては例えばＴｒｉｔｏｎｘ−ｉｏｏが好適なものとし
て推奨されるが１本発明はこれに限定されない。
特徴である。後記実験例によって示され？界面活性剤が
含まれることにより溶出率がきわめて安定し、再現性の
よい感度の高い測定が可能となる。ここで界面活性剤と
しては例えばＴｒｉｔｏｎｘ−ｉｏｏが好適なものとし
て推奨されるが１本発明はこれに限定されない。
次に本発明に係る免疫学的測定法はアポリポプロティン
Ｂと抗アポリボプロティンＢ抗体との特異反応を利用す
るいかなる方法であってもよい。
Ｂと抗アポリボプロティンＢ抗体との特異反応を利用す
るいかなる方法であってもよい。
すなわち酵素免疫測定法、放射免疫測定法、受身赤血球
凝集法等の中から任意に選択して適用すればよ（９例え
ば二抗体サンドイッチ型のＥＬＩＳＡ法は好ましい応用
例である。この方法を応用する場合について概略を述べ
れば次のどと（になる。
凝集法等の中から任意に選択して適用すればよ（９例え
ば二抗体サンドイッチ型のＥＬＩＳＡ法は好ましい応用
例である。この方法を応用する場合について概略を述べ
れば次のどと（になる。
まず、あらかじめ用意した抗アポリボプロティンＢ抗体
（ＩｇＧ）をマイクロタイタープレートのウェルに吸着
させる。ここに乾燥濾紙血を溶出して得た測定試料を加
えてインキュベートシ９次に酵素標識した抗アポリポプ
ロティンＢ抗体（Ｆａｂ）を加えてインキュベートし、
最後に基質液を加え。
（ＩｇＧ）をマイクロタイタープレートのウェルに吸着
させる。ここに乾燥濾紙血を溶出して得た測定試料を加
えてインキュベートシ９次に酵素標識した抗アポリポプ
ロティンＢ抗体（Ｆａｂ）を加えてインキュベートし、
最後に基質液を加え。
一定時間後に反応を停止し、基質の分解量を吸光値によ
って測定すればよい。
って測定すればよい。
なお抗アポリボプロティンＢ抗体は従来公知の方法の組
合せによって調製すればよい。その概略は以下のとと（
である。アポリポプロティンＢはりＣｏｎ Ａ−８ｅｐ
ｈａｒｏｓｅカラムを用いてアポリポプロティンＢを精
製する。得られたアポリポプロティシセウサギを免疫し
、抗血清をとる。次に抗血清からアフィニティクロマト
グラフィーを用いて抗アポリポプロティンＢ抗体（ウサ
ギＩｇＧ）を精製分取する。ここでアフィニティーカラ
ムとしてはＣＮＢｒで活性化した５ｅｐｈａｒｏｓｅ
４ Ｂを用い、膨潤ゲ用すればよい。また溶出には０．
２Ｍグリシン塩酸ｐＨ２，２を使用すればよい。精製分
取した抗アポリポプロティンＢ抗体（ウサギＩｇＧ）は
さらにペプシン処理し、そのＦ （ａｂ）”にさらにメ
ルカプトエチルアミンを反応させ抗アポリポプロティン
Ｂ抗体すればよい。
合せによって調製すればよい。その概略は以下のとと（
である。アポリポプロティンＢはりＣｏｎ Ａ−８ｅｐ
ｈａｒｏｓｅカラムを用いてアポリポプロティンＢを精
製する。得られたアポリポプロティシセウサギを免疫し
、抗血清をとる。次に抗血清からアフィニティクロマト
グラフィーを用いて抗アポリポプロティンＢ抗体（ウサ
ギＩｇＧ）を精製分取する。ここでアフィニティーカラ
ムとしてはＣＮＢｒで活性化した５ｅｐｈａｒｏｓｅ
４ Ｂを用い、膨潤ゲ用すればよい。また溶出には０．
２Ｍグリシン塩酸ｐＨ２，２を使用すればよい。精製分
取した抗アポリポプロティンＢ抗体（ウサギＩｇＧ）は
さらにペプシン処理し、そのＦ （ａｂ）”にさらにメ
ルカプトエチルアミンを反応させ抗アポリポプロティン
Ｂ抗体すればよい。
以下の文献（ｂｌ〜ｔｅｌは上記の方法の説明のための
資料として参照することができる。
資料として参照することができる。
（ｂｌ バーベル アール、ジュー。工、タール、。
ジエー、クリニ、インベスト、 （１９５５） ３４
： １３４５−１３５３ （Ｈａｖｅｌ Ｒ，Ｊ、
ｅｔ、 ａｌ、、 Ｊ、 Ｃｌ１ｎ、 Ｉｎｖｅｓｔ、
（１９５５）３４ ： １３４５−１３５３） （Ｃ１マコナシー タプル、ジュー。工、 ター／Ｌ／
、。
： １３４５−１３５３ （Ｈａｖｅｌ Ｒ，Ｊ、
ｅｔ、 ａｌ、、 Ｊ、 Ｃｌ１ｎ、 Ｉｎｖｅｓｔ、
（１９５５）３４ ： １３４５−１３５３） （Ｃ１マコナシー タプル、ジュー。工、 ター／Ｌ／
、。
エフイービーニス、レタ、 （１９７４） ４１ ：
１７４−１７９（ＮａＣ４−１７９（Ｗ、 Ｊ、 ｅｔ
、 ａｌ、、 ＦＥＢＳ １ｅｔｔ、 （１９７４）
４１ ：（ｄｉ クアトレカサス ピー１．ジェー、
バイオロ。
１７４−１７９（ＮａＣ４−１７９（Ｗ、 Ｊ、 ｅｔ
、 ａｌ、、 ＦＥＢＳ １ｅｔｔ、 （１９７４）
４１ ：（ｄｉ クアトレカサス ピー１．ジェー、
バイオロ。
ケミ、 ２４５ （１９７０） ３０５９−３０６５
（Ｃｕａｔｒｅｃａｓａｓ Ｐ、、 Ｊ。
（Ｃｕａｔｒｅｃａｓａｓ Ｐ、、 Ｊ。
Ｂｉｏｌ、 Ｃｈｅｍ、 ２４５ （１９７０） ３０
５９−３０６５）ｔｅｌ ヨシタケ ニス１．工、タ
ール、ｌジエー。
５９−３０６５）ｔｅｌ ヨシタケ ニス１．工、タ
ール、ｌジエー。
バイオケミ、 ９２ （１９８２） １４１３ （Ｙｏ
ｓｈｉｔａｋｅ Ｓ、 ｅｔ、 ａｌ、。
ｓｈｉｔａｋｅ Ｓ、 ｅｔ、 ａｌ、。
Ｊ、 Ｂｉｏｃｈｅｍ、 ９２ （１９８２） １４１
３）次に本発明測定試薬は本発明測定方法の実施に使用
する試薬であり、測定方法におけると同一の目的を達成
するものである。すなわち本発明測定試薬は血中アポリ
ポプロティンＢを免疫学的測定方法で測定するためのセ
ットにおいて、測定試料の調製のための乾燥濾紙および
界面活性剤が必須の構成要素として添付されていること
を特徴とするものである。ここで界面活性剤は界面活性
剤を含む溶液として提供されていてもよく２例えば燐酸
塩、 Ｎａ１ｌ、 Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００をそれぞ
れ０．ＯＩＭ。
３）次に本発明測定試薬は本発明測定方法の実施に使用
する試薬であり、測定方法におけると同一の目的を達成
するものである。すなわち本発明測定試薬は血中アポリ
ポプロティンＢを免疫学的測定方法で測定するためのセ
ットにおいて、測定試料の調製のための乾燥濾紙および
界面活性剤が必須の構成要素として添付されていること
を特徴とするものである。ここで界面活性剤は界面活性
剤を含む溶液として提供されていてもよく２例えば燐酸
塩、 Ｎａ１ｌ、 Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００をそれぞ
れ０．ＯＩＭ。
０．１５Ｍ、 ０．１％の濃度に溶解しており、 ｐＨ
が７．３に調整された溶液として提供されることをあげ
ることができる。
が７．３に調整された溶液として提供されることをあげ
ることができる。
本発明の作用は乾燥が紙で採血し、界面活性剤を含む溶
液に溶出することによって、極微の採血量の中からアポ
リポプロティンＢを免疫学的測定方法により感度よ（測
定することを可能にする。
液に溶出することによって、極微の採血量の中からアポ
リポプロティンＢを免疫学的測定方法により感度よ（測
定することを可能にする。
（４）実施例
実施例１
０．１Ｍ炭酸塩緩衝液（ｐＨ８，５）に抗アポリポプロ
ティンＢ抗体（ウサギＩｇＧ ）を１０Ｍｇ／１ｔｔＬ
になるように溶解し、これを９６ウエルのマイクロタイ
タープレートに１ウェル当り１００μｔずつ入れ、４℃
で一夜放置する。各ウェルを吸引除液し、 ０−１５Ｍ
ＮａＣ１（ｐＨ７，５）の洗浄液で３回洗浄し、１％牛
血清アルブミン溶液（０，０１Ｍリン酸緩衝液、 ０．
１５Ｍ ＮａＣ１゜ｐＨ７，５） ２５０μＬを入れ、
３７°Ｃで３時間インキュベートする。吸引除液し、前
記洗浄液で３回洗浄し。
ティンＢ抗体（ウサギＩｇＧ ）を１０Ｍｇ／１ｔｔＬ
になるように溶解し、これを９６ウエルのマイクロタイ
タープレートに１ウェル当り１００μｔずつ入れ、４℃
で一夜放置する。各ウェルを吸引除液し、 ０−１５Ｍ
ＮａＣ１（ｐＨ７，５）の洗浄液で３回洗浄し、１％牛
血清アルブミン溶液（０，０１Ｍリン酸緩衝液、 ０．
１５Ｍ ＮａＣ１゜ｐＨ７，５） ２５０μＬを入れ、
３７°Ｃで３時間インキュベートする。吸引除液し、前
記洗浄液で３回洗浄し。
測定用ウェルとする。
別にペルオキシダーゼ標識した抗アポリポプロティンＢ
抗体（ウサギＦａｂ）を用意して前記測定用ウェルと組
合わせ、さらに３■径のＤＢＳおよびＴｒｉｔｏｎ Ｘ
−１００を添付して本発明測定試薬とする。
抗体（ウサギＦａｂ）を用意して前記測定用ウェルと組
合わせ、さらに３■径のＤＢＳおよびＴｒｉｔｏｎ Ｘ
−１００を添付して本発明測定試薬とする。
実施例２
実施例１記載の測定試薬を使用して以下のごとく測定を
行う。
行う。
３麿径のＤＢＳを用いて新生児より採血する。燐酸塩Ｎ
ａＣ１，Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００をそれぞれ０．ＯＩ
Ｍ、 ０．１５Ｍ、 ０．１９６濃度に溶解しｐＨを７
．３に調整した溶出液２００μ乙に前記の採血ＤＢＳを
浸漬し、４℃で一夜放置する。得られる溶液を燐酸塩、
ＮａＣ１をそれぞれ０．ＯＩＭ、 ０．１５Ｍの濃度
に溶解し、 ｐＨを７．３に調整した溶液で１００倍に
希釈して測定試料とする。
ａＣ１，Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００をそれぞれ０．ＯＩ
Ｍ、 ０．１５Ｍ、 ０．１９６濃度に溶解しｐＨを７
．３に調整した溶出液２００μ乙に前記の採血ＤＢＳを
浸漬し、４℃で一夜放置する。得られる溶液を燐酸塩、
ＮａＣ１をそれぞれ０．ＯＩＭ、 ０．１５Ｍの濃度
に溶解し、 ｐＨを７．３に調整した溶液で１００倍に
希釈して測定試料とする。
測定用ウェルに１ウエルあたり測定試料を１００μｌず
つ入れ、４℃で一夜静かにかくはんする。各ウェルを吸
引除液し、 ０．１５ Ｍ ＮａＣ１（ｐＨ７，５）の
洗浄液で４回洗浄する。
つ入れ、４℃で一夜静かにかくはんする。各ウェルを吸
引除液し、 ０．１５ Ｍ ＮａＣ１（ｐＨ７，５）の
洗浄液で４回洗浄する。
ペルオキシダーゼ標識した抗アポリポプロティンＢ抗体
（ウサギＦａｂ）、燐酸塩、 ＮａＣ１，正常ウサギ血
清をそれぞれ１ ａｇｅｎｔ、 ０．ＯＩＭ、 ０−１
５Ｍ、２０％の濃度に溶解しｐＨを７．４に調整した溶
液１００μＬを各ウェルに入れ、３７６Ｃで３時間イン
キュベーションする。各ウェルを吸引除液し、 ０．１
５ ＮａＣ１（ｐＨ７，５）で４回洗浄する。２，２′
−アジノービス（３−エチル−ベンゾチアゾリン−６−
スルホン酸）および過酸化水素を含有する基質溶液１０
０μＬを各ウェルに入れ、室温３０分後、 ２ ｍＭ
ＮａＮ５溶液を加え反応を停止させる。この後、４０５
ｎｍの吸光値を測定する。
（ウサギＦａｂ）、燐酸塩、 ＮａＣ１，正常ウサギ血
清をそれぞれ１ ａｇｅｎｔ、 ０．ＯＩＭ、 ０−１
５Ｍ、２０％の濃度に溶解しｐＨを７．４に調整した溶
液１００μＬを各ウェルに入れ、３７６Ｃで３時間イン
キュベーションする。各ウェルを吸引除液し、 ０．１
５ ＮａＣ１（ｐＨ７，５）で４回洗浄する。２，２′
−アジノービス（３−エチル−ベンゾチアゾリン−６−
スルホン酸）および過酸化水素を含有する基質溶液１０
０μＬを各ウェルに入れ、室温３０分後、 ２ ｍＭ
ＮａＮ５溶液を加え反応を停止させる。この後、４０５
ｎｍの吸光値を測定する。
（５）発明の効果
実験例１
新生児よりＤＢＳで採血して多数のサンプルを用意し、
所定の経日後に（イ）実施例２記載の方法および（ロ）
実施例２においてＴｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を使用しな
い点を除いて実施例２記載と同様の方法によってそれぞ
れ血中アポリポプロティンＢを測定した。
所定の経日後に（イ）実施例２記載の方法および（ロ）
実施例２においてＴｒｉｔｏｎ Ｘ−１００を使用しな
い点を除いて実施例２記載と同様の方法によってそれぞ
れ血中アポリポプロティンＢを測定した。
結果を図１に示す。図の横軸は採血後の経日日数、タテ
軸は採血直後のサンプルについての測定値を１００９６
としたときの回収率（９６）を表わす。図中・印実線は
（イ）の方法、０印点線は（ロ）の方法による結果を示
す。図１より本発明方法による測定値は安定することが
知られる。
軸は採血直後のサンプルについての測定値を１００９６
としたときの回収率（９６）を表わす。図中・印実線は
（イ）の方法、０印点線は（ロ）の方法による結果を示
す。図１より本発明方法による測定値は安定することが
知られる。
実験例２
５５人についてそれぞれ濾紙皿および血清を採取し、濾
紙皿については実施例２記載の要領で血中アポリポプロ
ティンＢを測定し、血清については燐酸塩、 Ｎａ１ｌ
をそれぞれ０．ＯＩＭ、 ０．１５Ｍの濃度に溶解しｐ
Ｈを７．３に調整した溶液で８０．０００倍に希釈して
測定試料とし、以下実施例２記載と同じ要領で血中アポ
リポプロティンＢを測定した。
紙皿については実施例２記載の要領で血中アポリポプロ
ティンＢを測定し、血清については燐酸塩、 Ｎａ１ｌ
をそれぞれ０．ＯＩＭ、 ０．１５Ｍの濃度に溶解しｐ
Ｈを７．３に調整した溶液で８０．０００倍に希釈して
測定試料とし、以下実施例２記載と同じ要領で血中アポ
リポプロティンＢを測定した。
結果を図２に示す。図の横軸は血清からの測定値（ｍｇ
／ｄＬ）、タテ軸は濾紙皿からの測定値（ｕ／ｄＤを表
わし、各点は各人における二つの測定値の対応を示す。
／ｄＬ）、タテ軸は濾紙皿からの測定値（ｕ／ｄＤを表
わし、各点は各人における二つの測定値の対応を示す。
なお、スタンダードとして（Ｃ２５ｎｇ／１００ μＬ
〜４．Ｏｎｇ／１００μｔにおける各種の濃度のアポ
リポプロティンＢ溶液を使用し、Ｐ紙皿の場合には測定
値の１００倍をｕ／ｄＬとして表わした。図２より本発
明方法は採血量が極微量であるにもかかわらず、その測
定値は大量採取した血清からの測定値と良好に相関する
ことが知られる。
〜４．Ｏｎｇ／１００μｔにおける各種の濃度のアポ
リポプロティンＢ溶液を使用し、Ｐ紙皿の場合には測定
値の１００倍をｕ／ｄＬとして表わした。図２より本発
明方法は採血量が極微量であるにもかかわらず、その測
定値は大量採取した血清からの測定値と良好に相関する
ことが知られる。
図１は採血後の経日日数と回収率（％）との関係を示す
グラフである。 図２は血清からの測定値と濾紙皿からの測定値との相関
を示すグラフである。
グラフである。 図２は血清からの測定値と濾紙皿からの測定値との相関
を示すグラフである。
Claims (8)
- （１）免疫学的測定方法による血中アポリポプロテイン
Ｂの測定方法において、測定試料の調製にあたり当該血
中アポリポプロテインＢを乾燥濾紙血として採取し、界
面活性剤を含む溶液で溶出することを特徴とする血中ア
ポリポプロテインＢの測定方法 - （２）界面活性剤がＴｒｉｔｏｎＸ−１００である特許
請求の範囲第１項記載の血中アポリポプロテインＢの測
定方法 - （３）免疫学的測定方法がＥＬＩＳＡ法である特許請求
の範囲第１項または第２項記載の血中アポリポプロテイ
ンＢの測定方法 - （４）血中アポリポプロテインＢの測定方法が高コレス
テロール血症の診断方法である特許請求の範囲第１項な
いし第３項記載の血中アポリポプロテインＢの測定方法 - （５）免疫学的測定方法による血中アポリポプロテイン
Ｂの測定試薬において、測定試料の調製のための乾燥濾
紙および界面活性剤が添付されることを特徴とする血中
アポリポプロテインＢの測定試薬 - （６）界面活性剤がＴｒｉｔｏｎＸ−１００である特許
請求の範囲第５項記載の血中アポリポプロテインＢの測
定試薬 - （７）免疫学的測定方法がＥＬＩＳＡ法である特許請求
の範囲第４項ないし第６項記載の血中アポリポプロテイ
ンＢの測定試薬 - （８）血中アポリポプロテインＢの測定試薬が高コレス
テロール血症の診断試薬である特許請求の範囲第５項な
いし第７項記載の血中アポリポプロテインＢの測定試薬
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP23017286A JPH0814578B2 (ja) | 1986-09-30 | 1986-09-30 | アポリポプロテインｂの測定方法と試薬 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP23017286A JPH0814578B2 (ja) | 1986-09-30 | 1986-09-30 | アポリポプロテインｂの測定方法と試薬 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6385357A true JPS6385357A (ja) | 1988-04-15 |
| JPH0814578B2 JPH0814578B2 (ja) | 1996-02-14 |
Family
ID=16903733
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP23017286A Expired - Lifetime JPH0814578B2 (ja) | 1986-09-30 | 1986-09-30 | アポリポプロテインｂの測定方法と試薬 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0814578B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110234974A (zh) * | 2016-12-19 | 2019-09-13 | 生物梅里埃公司 | 将血液样品沉积在吸液纸上和随后机械提取血液培养的方法 |
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1986
- 1986-09-30 JP JP23017286A patent/JPH0814578B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110234974A (zh) * | 2016-12-19 | 2019-09-13 | 生物梅里埃公司 | 将血液样品沉积在吸液纸上和随后机械提取血液培养的方法 |
| CN110234974B (zh) * | 2016-12-19 | 2021-08-17 | 生物梅里埃公司 | 将血液样品沉积在吸液纸上和随后机械提取血液培养的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0814578B2 (ja) | 1996-02-14 |
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