JPS6412277B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は新規な抗生物質に関し、更に詳しくは
放線菌によつて産生されるデアネマイシンから誘
導される抗生物質に関する。 デアネマイシンは放線菌ストレプトミセス・ハ
イグロスコピカスにより産生され、コクシジウム
などの原虫およびグラム陽性菌に対して良好な活
性を有するポリエーテル系抗生物質である。その
製造法および生理活性については、ジヤーナル・
オブ・アンチビオテイツクス（Journal of
Antibiotics）第22巻第161〜164ページ（1969
年）、同第33巻第137〜143ページ（1980年）およ
び米国特許第3577531号明細書などに記載されて
いる。 デアネマイシンは有用な抗生物質であるが、そ
の毒性が満足できる程には低くくなるためにその
適用範囲が不当に狭められている。 本発明者らはデアネマイシンの毒性を低下させ
るべく種々研究の結果、デアネマイシンおよびそ
の塩の有機溶媒溶液にその有機溶媒に可溶な有機
酸を加えて反応させることによつて得られる化合
物は活性作用を低下させることなくその毒性が低
下することを見出し、本発明を完成した。 以下、本発明を詳しく説明する。 本発明の目的物質は、 構造式 で表わされる抗生物質（以下、化合物と称す
る。）およびその塩である。 本発明において、塩とはアルカリ金属塩、アル
カリ土類金属塩、アンモニウム塩などの医薬とし
て常用の塩を指し、就中ナトリウム塩、カリウム
塩がその取扱上望ましい。 本発明の目的物質である化合物およびその塩
は、例えば次の方法により製造することができ
る。 すなわち、デアネマイシンまたはその塩をアセ
トン、アセトニトリル、クロロホルムなどの有機
溶媒に溶解し、この溶液にパラトルエンスルホン
酸を加えてPHを約３に調整した後、室温で静置し
て反応させる。 反応終了後、得られた化合物を常法によりナ
トリウム塩とし、ベンゼン、酢酸エチル、クロロ
ホルムなどの有機溶媒で抽出する。この抽出液を
濃縮乾涸後、再度適当な有機溶媒（例えば、クロ
ロホルム、メタノールまたはこれらの混合溶媒な
ど）に転溶し、シリカゲルカラムクロマトグラフ
イー、ゲル過などを適宜組合せて精製し、これ
を更にメタノール−水混合溶媒から結晶化を行
い、化合物のナトリウム塩をプリズム結晶とし
て得ることができる。 このナトリウム塩から常法により化合物を得
ることができる。また、必要があれば常法により
化合物の種々の塩に変えることができる。 本発明の目的物質である化合物およびその塩
は出発物質であるデアネマイシンおよびその塩に
比してその毒性が著しく低く、しかもトキソプラ
ズマなどの原虫およびグラム陽性菌に対して活性
を有するから、医薬または動物薬として有用であ
る。 次に本発明の目的物質である化合物のナトリ
ウム塩の生理作用を示す「試験例」およびその製
造例を示す「実施例」を挙げて本発明を具体的に
説明する。 試験例 １ 正常ICRマウス腹腔内に滅菌した0.2％グリコ
ーゲン添加生理食塩水液１mlを注射し、５日後ヘ
バリン添加ハンクス液５mlを腹腔内に注入してマ
クロフアージを含む腹腔液をガラス管で採取し
た。このマクロフアージを含む腹腔液を遠心分離
（1200rpm、5min）し、マクロフアージ細胞を集
めた。 このマクロフアージ細胞をヘバリン添加ハンク
ス液を用い前出の条件で２回遠心分離洗浄後、マ
クロフアージ細胞を含む沈殿区分を仔牛血清20％
を含むTC−119培地に浮遊させた。トーマの血球
計を用い顕微鏡下でマクロフアージ細胞数を測定
後、仔牛血清20％を含むTC−119培地でマクロフ
アージ細胞数が10⁶cell／mlになるように希釈し、
マクロフアージ細胞浮遊液を調製した。 このマクロフアージ細胞浮遊液１mlを径1.5cm
の円形カバーグラスを含んだ培養シヤーレ内に分
注し、５％炭酸ガス培養器内で培養し、混入する
赤血球やリンパ球系細胞を除去するために、２時
間毎に３回ヘパリン添加ハンクス液で洗浄後、37
℃で24時間培養してマクロフアージ・モノレーヤ
とした。 トキソプラズマ・ゴンデイRH株虫体3000個／
mlの生理食塩水１mlをマウス（Belb／ｃ、20〜
30ｇ）の腹腔内に投与し増殖させた。２日後に腹
腔内よりトキソプラズマ・ゴンデイRH株虫体を
含む腹腔液をガラス管で採取した。この腹腔液を
ハンクス液を用い３回遠心分離、洗浄した後、仔
牛血清20％を含むTC−119培地にサスペンドし、
トーマ血球計を用い顕微鏡下で虫体数を測定後、
虫体数が５×10⁵個になるよう前記培養マクロフ
アージ・モノレーヤに添加し、37℃で約１時間接
触感染させた後、同じ培地で非感染虫体を洗い流
すことにより除き、同培地にて更に培養を続行し
た。 薬剤添加群は、培地中にその最終濃度が
0.1ppmになるように化合物のナトリウム塩を
添加した。 薬効判定は、37℃で48時間培養を行なつた後、
メイグリエーンワルド・ギムザ重染色を行ない、
マクロフアージ中に１〜５個および６個以上のト
キソプラズマRH株虫体を含む細胞の百分率を求
め、感染対照群と薬剤添加群との比較をした。 その結果を第１表に示す。

【表】 のナトリウム塩を添加したことによる
細胞毒性は認められなかつた。
試験例 ２ 本発明の目的物質である化合物のナトリウム
塩を加えたハートインフユージヨン寒天培地を用
い、化学療法学会法に準じ、MIC（最小発育阻止
濃度、mcg／ml）を測定し、抗菌作用を調べた。 その結果を第２表に示す。

【表】 試験例 ３ 本発明の目的物質である化合物のナトリウム
塩および対照薬剤であるデアネマイシンのナトリ
ウム塩をそれぞれ別個に、５％アラビアゴム添加
生理食塩水に懸濁した液を調製した。 ddY系雄性マウス（４週齢）７匹を一群とし、
前記各薬剤懸濁液をそれぞれ別個に各群のマウス
腹腔内に投与した。投与後７日間の死亡率に基づ
いてLD₅₀値（mg／Kg）を求め、その急性毒性を
調べた。 その結果を第３表に示す。

【表】 実施例 １ デアネマイシン１ｇをアセトニトリル70mlに溶
解し、更にこの溶液にパラトルエンスルホン酸
250mgを加えて撹拌溶解後、室温で静置し、一昼
夜反応させた。 この反応液に重曹水を加え、PH８に調整して30
分間放置した後、ベンゼン50mlで２回抽出した。
この抽出液を合せて水洗し、無水硫酸ナトリウム
で脱水後、濃縮乾涸して化合物のナトリウム塩
の粗粉末0.86ｇを得た。 実施例 ２ デアネマイシンのナトリウム塩１ｇをアセトニ
トリル70mlに溶解し、この溶液に更にパラトルエ
ンスルホン酸300mgを加えて撹拌溶解後、室温で
静置し、一昼夜反応させた。この反応液に重曹水
を加え、PH８に調整して30分間放置した後、ベン
ゼン50mlで２回抽出した。この抽出液を合せて水
洗し、無水硫酸ナトリウムで脱水後、濃縮乾涸し
て化合物のナトリウム塩の粗粉末0.83ｇを得
た。 実施例 ３ 実施例１、２で得た化合物のナトリウム塩の
粗粉末を合せ、クロロホルム−メタノール（49：
１）混合溶媒５mlに溶解し、前記混合溶媒で充填
した100mlのシリカゲル・カラム〔ワコーゲルＣ
−200（商品名、和光純薬製）〕に吸着させた後、
同じ混合溶媒で溶出した。 2.5〜４ベツト量の区分〔薄層クロマトグラフ
イー（クロロホルム：メタノール＝９：１）で確
認〕を集め、濃縮乾涸後、得られた残渣を少量の
メタノールに溶解し、セフアデツクスLH−20
（商品名、フアルマシア社製）を用いてメタノー
ルでゲル過を行なつた。 活性区分を集めて濃縮乾涸し、メタノール−水
（２：１）混合溶媒から結晶化を行ない、無色の
プリズム結晶として化合物のナトリウム塩0.55
ｇを得た。 m.p.203〜205℃ 比旋光度〔α〕²⁶ _D＝＋42゜（ｃ＝0.5、メタノール） 紫外線吸収スペクトル（メタノール） Ｅ１％ 1cm（232nｍ）＝163.8 元素分析値（C₄₀H₆₅O₁₂Naとして） 理論値（％）： Ｃ 63.16 Ｈ 8.55 Na 3.03 実測値（％）： Ｃ 63.10 Ｈ 8.66 Na 2.99

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 構造式 で表わされる抗生物質およびその塩。