MC1265A1 - Preparation d'un medicament a base de prostaglandines - Google Patents

Description

V

La présente invention concerne des compositions pharmaceutiques contenant de la prostacycline (PGH^/ PGX), de la 15-méthylprostacycline, de la 16,16-diméthylprostacycline ou leurs sels acceptables pour des usages pharmaceutiques.

5 La prostacycline et ses sels sont des subs tances importantes en médecine humaine et vétérinaire,qui ont une puissante action antiagglutinante sur les plaquettes sanguines et qui accélèrent aussi la guérison de blessures, et qui préviennent les ulcères de l'estomac ou ont un effet thérapeutique 10 sur ces ulcères.

L'action antiagglutinante sur les plaquettes sanguines est utile par exemple pour prévenir ou atténuer la formation de caillots ou embolus pendant une circulation extracorporelle du sang, par exemple dans des dialyses rénales 15 ou des dérivations cardio-pulmonaires.

Toutefois, une difficulté rencontrée avec la prostacycline ou ses sels est que ces substances sont instables, en particulier en solution aqueuse, et rapidement transformées en 6-oxo-PGFla ou en ses sels, qui n'ont à peu près pas d'action 20 pharmacologique et très peu ou aucune des activités intéressantes de la prostacycline et de ses sels.

La prostacycline et ses sels sont connus pour être plus stables en milieu alcalin que dans des milieux acides ou neutres, mais si leur stabilité a été quelque peu améliorée 25 avec le tampon Tris en solution alcaline, la prostacycline se décompose encore rapidement et par conséquent elle doit être préparée très peu de temps avant son emploi, par exemple en perfusion intraveineuse, car l'action pharmacologique de la solution se modifie considérablement si l'on attend pour l'utili-30 ser, ce qui rend difficile de régler les perfusions avec le soin souhaitable.

Or, la présente Demanderesse a trouvé que l'on pouvait améliorer notablement la stabilité en associant la prostacycline, la 15-méthylprostacycline, la 16,16-dimëthyl-35 prostacycline ou leurs sels, de préférence les sels sodiques (substances qui seront appelées ci-après corps ou composés actifs) , avec un agent de tamponnage acceptable pour des usages pharmaceutiques, à base d'un amino-acide

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comme acide de tamponnage principal. Le corps actif et le tampon peuvent être associés à l'état solide ou en solution dans un solvant, en général dans de l'eau, et si le corps actif et le tampon sont en solution, le pH mesuré est celui de la solution 5 les contenant, et cette composition ou le tampon auront de préférence un pH au moins égal à 9.

Si le composé actif et le tampon sont associés à l'état solide, le pH du tampon ou de la composition est celui mesuré de l'une quelconque des manières suivantes. Si la 10 combinaison solide est une solution congelée, le pH mesuré est le pH de la solution détenue par décongélation, tandis que pour d'autres états solides, le pH mesuré est celui de la solution formée par dissolution, dans de l'eau pour injections à pH 7, de l'association du corps actif et du tampon. Pour le cas 15 particulier d'une association lyophilisée à partir d'une telle solution le pH mesuré est celui de la solution formée par dissolution, d'un échantillon du lyophilisât dans le volume d'eau pour injections,à pH 7,minimal pour avoir une solution limpide.

A l'état solide, la lyophilisation d'une telle 20 solution améliore la stabilité du composé actif, lyophilisation qui peut se faire de la manière habituelle, par exemple dans une. ampoule ou dans une fiole. Mais la solution peut aussi être congelée et conservée par exemple à -20°C pour être utilisée telle quelle en injections ou pour être diluée après décongéla-25 tion.

Naturellement, une telle solution, de même que toutes les solutions dont il sera question ci-après, sont des solutions stériles pour les usages médicinaux.

La prostacycline et les substances analo-30 gues, en particulier la 15-méthylprostacycline et la 16,16-diméthyl-prostacycline, ainsi que leurs sels, peuvent être préparés par les méthodes qui sont décrites dans la demande de brevet britannique au nom de la Demanderesse N° 19384/76 pour la préparation de composés ayant une structure chimique analogue. Ces méthodes 35 comprennent l'élimination d'une mole d'hydracide halogéné d'un composé de formule I ci-dessous :

H

H

dans laquelle X représente le brome ou l'iode ; Y un groupe OH,

4

NHR ou R, R étant un alkyle en C.-C, ou un cation pharmaceuti-

4

quement acceptable tel que le sodium, et R un alkyle en C-C. ; 12 3

et R , R et, R sont, indépendamment les uns des autres,

10 l'hydrogène ou des alkyles en C. à C,, en particulier des

1 2 3

groupes méthyle (par exemple, si R est l'hydrogène, R et R

sont des groupes méthyle et vice et versa), élimination qui se fait avec une base ; et le cas échéant on transforme en composé

actif cherché le composé ainsi obtenu dans lequel Y est un

4 4

15 groupe NHR ou OR, R et R étant des alkyles en a .

L1amino-acide qui est employé dans le tampon est de préférence un amino-acide non-sulfuré, 1'amino-acide préféré étant le glycocolle, en particulier parce qu'il est facilement disponible et que, s'il est préparé synthétiquement, 20 il ne nécessite pas une séparation en isomères optiques, mais on peut aussi choisir d'autres amino-acides tels que la valine, l'alanine et l'arginine.

La teneur totale du tampon en amino-acide (y compris les sels de celui-ci) sera de préférence la teneur 25 la plus faible permettant d'obtenir un tampon stable, par exemple de 0,02M à 0,03M, de préférence d'environ 0,025M, car une trop forte teneur a tendance à diminuer la stabilité du corps actif en augmentantla force ionique d'une solution de celui-ci associé avec le tampon. Mais 1'.amino-acide doit être

suffisamment soluble pour donner le pouvoir de tamponnahe nécessaire .

Si une solution du tampon contient du chlorure de sodium, comme cela est préférable, la quantité ajoutée ne 5 devra pas naturellement rendre la solution impropre aux usages pharmaceutiques. La concentration molaire du chlorure de sodium sera de préférence à peu près la même que celle de 1'amino-acide car une trop forte concentration élèverait trop la force ionique d'une solution de l'association du corps actif et du tampon et 10 serait préjudiciable à la stabilité du corps actif. D'autres sels, par exemple du chlorure de potassium, peuvent aussi être présents si ces sels, ou leurs proportions, sont acceptables pour les usages pharmaceutiques.

Le pH du tampon est de préférable de 10,2 15 à 11,6, en particulier de l'ordre de 10,5, mesuré par la méthode appropriée qui a été décrite plus haut.

Comme exemple de préparation d'une solution tampon conforme à cette invention, contenant de la prostacycline, on prépare une solution aqueuse de glycocolle contenant aussi 20 un peu de chlorure de sodium, on lui ajoute de l'hydroxyde de sodium comme base pour élever le pH à la valeur voulue, puis on ajoute la prostacycline.

Le choix ci-dessus d1hydroxyde de sodium comme base n'empêche pas que l'on puisse employer également 25 toute autre base suffisamment forte pour porter à la valeur voulue le pH de la solution. Naturellement, la base doit donner une solution acceptable pour des usages pharmaceutiques, c'est-à-dire qui ne soit pas nocive pour le receveur du médicament. Les proportions de 1'amino-acide, par exemple du 30 glycocolle, et de la base, par exemple de l'hydroxyde de sodium, doivent être les proportions les plus faibles permettant de stabiliser le composé actif pendant le temps nécessaire,

car un excès de l'un ou de l'autre entraînerait une rétention d'eau dans un produit lyophilisé, ce qui provoquerait une dé-35 gradation du composé actif. Toutefois, le pH de la solution est un facteur important pour déterminer l'acceptabilité pharmaceutique. Si par exemple la solution tamponnée doit être

6

introduite dans une machine, par exemple pour une dialyse rénale, son pH peut s'élever jusqu'à 12 ou même plus, mais si l'on doit injecter un grand volume de solution dans une veine, par exemple dans une dérivation cardio-pulmonaire, à l'entrée 5 dans la veine,le pH doit de préférence être compris entre 8,4 et 9, et pour cela il peut être abaissé peu avant l'emploi de la solution tamponnée.

de tamponnage, mais naturellement dans des proportions qui ne 10 diminuent pas sensiblement la stabilité du composé actif en solution. Il peut y avoir par exemple un peu de carbonate provenant de la prostacycline, la prostacycline sodique pouvant contenir par exemple jusqu'à 5 % en poids de carbonate de sodium.

15 Comme le composé actif a une très puissante action pharmacologique, sa proportion peut être très faible, par exemple de quelques milligrammes seulement pour une heure de perfusion chez une personne moyenne de 70 kg. La quantité de composé actif dans une solution tamponnée donnée avant 20 lyophilisation dépend de l'emploi envisagé pour le produit lyophilisé après reconstitution, et comme celle-ci peut se faire avec une solution tampon sans composé actif, le rapport de celui-ci aux constituants de tamponnage peut être beaucoup plus élevé que dans la solution à administrer. 25 Si on lyophilise une solution ne contenant que des agents de tamponnage, le corps actif et du chlorure de sodium, la résistance physique et l'aspect du produit lyophilisé obtenu ne sont pas particulièrement satisfaisants et il est donc préférable, avant de lyophiliser cette solu-30 tion, de lui inclure un excipient, l'excipient préféré étant le mannitol, et de préférence la concentration de l'excipient sera de 2 5 à 50 mg/ml de solution. Pour le mannitol, si l'on en ajoute moins de 25 mg/ml, cela est insuffisant pour améliorer la résistance et l'aspect du produit lyophilisé, tandis 35 qu'une proportion supérieure à 50 mg/ml apporte peu ou pas d'améliorations supplémentaires, et de plus elle peut compromettre la stabilité du composé actif. L'excipient apporte une matrice

La solution peut contenir d'autres agents

r de support dans le produit lyophilisé et améliore la résistance physique et l'aspect de celui-ci. Mais on ne peut pas utiliser tous les excipients, par exemple, ceux qui donnent lieu à un moussage excessif du produit reconstitué dans le récipient de lyophili-5 sation, comme la polyvinyl-pyrrolidone, doivent être évités, de même que d'autres qui modifient le pH du tampon, par exemple du glycocolle lui-même.

si l'on veut d'autres produits thérapeutiques en plus du composé 10 actif défini, et ces autres produits peuvent également se trouver dans un produit lyophilisé, ou encore ils peuvent être ajoutés à la solution tamponnée reconstituée. En outre, de tels autres produits thérapeutiques peuvent remplacer en partie ou en totalité l'excipient.

15 Le.solvant utilisé pour préparer la solution tamponnée est de préférence de l'eau pour injections (Pharmacopée Européenne) ou une autre eau convenant pour des perfusions ou des injections, et pour reconstituer le produit lyophilisé en vue de l'emploi, on peut le redissoudre dans de l'eau pour 20 injections ayant en général un pH de 5,5 à 7, de préférence de 7, ou bien dans une solution tamponnée avec 11amino-acide à pH 9 au moins, de préférence d'environ 10,5, ou encore on peut éventuellement ajouter une petite quantité de la solution tamponnée à une solution dans de l'eau pour injections. La 25 reconstitution du produit lyophilisé peut aussi se faire par dissolution de celui-ci dans une base pour perfusions, par exemple un soluté physiologique normal pour perfusions, mais on peut également à cette fin employer du glucose.

30 peut se faire par toute méthode habituelle, la teneur en eau

étant abaissée le plus qu'il est possible pour améliorer encore la stabilité du composé actif.

l'effet thérapeutique recherché varie avec la voie d'administra-35 tion, mais en général une dose appropriée pour un mammifère sera de 0,01 à 200 mg par kg de poids corporel, avantageusement de 0,01 à 10 mg/kg, de préférence de 0,1 à 1 mg/kg et en particulier de 0,2 à 0,5 mg/kg.

La solution tamponnée peut aussi contenir

La lyophilisation de la solution tamponnée

La quantité du composé actif pour donner

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La quantité de composé actif dans une ampoule pour perfusion sera de 0,1 à 1,5 mg/kg, de préférence de 0,5 à 1 mg/kg. Chez l'homme, le composé actif peut se montrer plusieurs fois plus puissant que chez d'autres mammifères, et il peut être 5 alors bon de choisir les doses les plus basses des gammes que l'on vient d'indiquer.

vétérinaire, il peut être souhaitable de disposer d'une collection d'au moins deux récipients, par exemple sous la forme 10 d'un emballage à plusieurs composants, dont 1'un est une fiole ou une ampoule contenant le produit lyophilisé du composé actif tamponné tel qu'il a été décrit ci-dessus, l'autre récipient étant une fiole ou me ampoule contenant une quantité supplémentaire du tampon en solution aqueuse ou lyophilisé, mais sans le 15 corps actif. Le produit lyophilisé peut alors être reconstitué avec le tampon aqueux, ou bien, si le contenu du second récipient est lyophilisé, avec un diluant aqueux approprié d'un troisième récipient. Le produit reconstitué peut ensuite être encore dilué si cela est nécessaire pour avoir la dose voulue 20 aussitôt avant l'administration. Ainsi, une préparation lyophilisée, par exemple de 0,5 mg du corps actif à pH 11,5, peut être diluée avec 50 ou 500 ml de dextrose aqueux ou d'un soluté physiologique normal à un pH tel que la solution obtenue ait un pH compris entre 10 et 10,5.

25 Ainsi, la présente invention concerne notamment :

a) Une solution tamponnée propre à des usages pharmaceutiques, comprenant de la prostacycline, de la 15-méthylprostacycline, de la 16,16-diméthylprostacycline ou un sel de l'une quelconque

30 de ces substances, avec un amino-acide comme acide de tamponnage principal, cette solution ayant un pH au moins égal à 9 ;

b) Une méthode de préparation d'une solution tamponnée selon a) ci-dessus, consistant à mettre les divers ingrédients en solution dans un solvant approprié ;

35 c) Un produit lyophilisé obtenu à partir d'une solution tamponnée telle que définie sous a) ;

Aussi bien en médecine humaine qu'en médecine

9

d) Un produit congelé obtenu à partir d'une solution tamponnée telle que définie sous a) ;

e) Une solution pour injections ou perfusions, obtenue par dissolution d'un produit lyophilisé selon c) dans un sol-

5 vant approprié, ou bien par décongélation d'un produit congelé suivant d) ;

f) Une forme d'administration de prostacycline, de 15-méthyl-prostacycline, de 16,16-diméthylprostacycline ou d'un sel de l'une quelconque de ces substances, qui est une

10 solution telle que définie ci-dessus en a) , d) ou e) ;

g) Une formulation pharmaceutique comprenant un composé actif choisi parmi la prostacycline, la 15-méthylprostacycline, la 16,16-diméthyl-prostacycline et des sels de ces substances, associé avec un tampon pour usages pharmaceutiques dont le

15 pH est au moins égal à 9 et à base d'un amino-acide comme acide de tamponnage principal ; et h) Une formulation pharmaceutique comprenant un composé actif choisi parmi la prostacycline, la 15-méthylprostacycline, la 16,16-diméthylprostacycline et des sels de ces substances,

20 associé avec un tampon pour usages pharmaceutiques à base d'un amino-acide comme agent de tamponnage principal.

La présente invention sera maintenant illustrée par les exemples non limitatifs suivants :

EXEMPLE 1 :

25 On prépare des solutions stériles contenant

0,2 et 0,4 mg/ml de prostacycline et 50 mg/ml de mannitol dans les tampons suivants : glycocolle, arginine, valine, alanine, carbonate et Tris, les concentrations des composants de tamponnage étant :

30 Amino-acide : 0,025M d'amino-acide, 0,025M de chlorure de sodium et hydroxyde de sodium : q.s. pour pH 10,5.

A 0

Carbonate : 448 mg/litre de bicarbonate de sodium et 1614 mg/litre de carbonate de sodium.

Tampon Tris : 6054 mg/litre de base Tris et 2,5 ml par litre d'hydroxyde de sodium décinormal.

5 On lyophilise des portions de 5 ml de chacune de ces solutions dans des fioles en les congelant à -40°C sous vide et en effectuant le premier stade du séchage à 0°C, le second stade à 20°C, et en scellant les fioles sous azote. Les produits lyophilisés sont ensuite soumis à un essai de 10 stockage accéléré aux températures qui sont indiquées au tableau I ci-après, et les produits obtenus après les temps également indiqués au tableau I sont analysés par chromatogra-phie liquide â haute efficacité (HPLC) pour déterminer leur teneur en prostacycline, cette chromatographie étant conduite 15 sur des préparations lyophilisées reconstituées dans 10 ml d'une solution à 0,025 % d'hydroxyde de tétraméthylammonium.

On opère sur une colonne en acier spécial de 25 cm et 4 mm de diamètre intérieur, garnie du produit Partisil ODS préparé au laboratoire de la manière décrite ci-20 après, la colonne étant garnie par la méthode de Webber et

McKerrel, J. Chromatog., 122, 243, (1976), avec du tétrachlorure de carbone comme milieu de mise en suspension.

Le produit de garnissage de la colonne est préparé de la manière suivante. Dans un ballon à fond rond de 25 250 ml on sèche à 80°C sous vide pendant deux heures et demie 10 g de Partisil de 10-ym, on ajoute ensuite 10 ml d'octadécyl-trichlorosilane et 100 ml de toluène anhydre et on chauffe la solution au reflux pendant 3 heures tout en agitant avec un agitateur à pales, sous un condenseur de reflux muni d'un tube 30 de garde à chlorure de calcium. On laisse ensuite refroidir le mélange puis on le filtre sur un filtre millipores de 0,5 ym, on lave la silice sur le filtre avec 250 ml de méthanol, tout en mettant continuellement la matière solide en suspension,

puis avec 250 ml d'acétone chaude, et on sèche à 80°C sous 35 vide pendant environ 2 heures. En traitant le produit ainsi obtenu (11 g) avec 10 ml de triméthylchlorosilane comme ci-dessus,

14>

puis en chauffant au reflux pendant 45 minutes, on obtient le produit final.

La phase mobile utilisée est constituée par 1200 ml d'eau dans lesquels on a dissous 5 g d'acide borique et 7,6 g de tétraborate disodique,puis ajouté 800 ml de métha-nol. La température de la colonne est la température ambiante, c'est-à-dire environ 25 à 30°C, le débit de la phase mobile est de 3,6 ml/minute et la pression de 20 MPa. La détection des produits se fait avec un appareil Pye Unichem LC3 à la longueur d'onde de 205 nanomètres, 0,16 aufs (échelle totale d'unités d1absorbance) pour des solutions de O à 100 yg/ml.

La quantité de prostacycline est déterminée par la mesure de la hauteur du pic que l'on compare avec un échantillon de référence de concentration connue.

Les résultats obtenus sont groupés dans le tableau I (solutions stériles initiales à 0,2 mg/ml de prostacycline) . TABLEAU I

Dosage chromatographique (HPLC) (% de prostacycline restante)

Tampon

66 heures

6 jours (144 heures)

70°C

60°C

50°C

37°C

ro o>

0

n

Glycocolle

0

0

3

90

96

Arginine

45

91

Valine

86

93

Alaline

83

97

Carbonate

0

2

3,5

45

62

Tris

0

0

trace trace

35

r-

Ces résultats montrent clairement qu'aux températures de stockage normales, c'est-à-dire aux environs de 37°C ou moins, les amino-acides se montrent supérieurs aux deux autres tampons essayés, et bien que le carbonate soit 5 inférieur aux amino-acides, on voit qu'une petite quantité de carbonate peut cependant être tolérée dans le tampon d'amino-acide.

EXEMPLE 2 :

Préparation lyophilisée de prostacycline (1 mg) 10 pour injection.

Prostacycline 1,000 mg

Mannitol 50,000 mg

NaCl (0,025 M) 2,932 mg

Glycocolle (0,025 M) 3,760 mg

NaOH q.s. pour pH 10,5

Par le procédé général qui a été donné à l'exemple 1 ci-dessus on lyophilise une préparation injectable à 1 mg de prostacycline comprenant les ingrédients ci-dessus, ce qui donne un produit pouvant contenir jusqu'à 5 % en poids 20 d'eau.

EXEMPLE 3 :

A une solution agitée de 50 mg de l'ester méthylique de la PGF2a dans 1 ml d'éther on ajoute 115 mg de bicarbonate de sodium (10 équivalents moléculaires) et 1 ml 25 d'eau puis, goutte à goutte et en 2 heures, 0,261 ml d'une solution aqueuse 0,7 molaire de triiodure de potassium. Après avoir agité le mélange pendant une nuit on le secoue avec de 1'éther et une solution aqueuse de thiosulfate de sodium puis on sépare la phase d'éther, on la lave à l'eau, on sèche 30 sur du sulfate de magnésium et on évapore, ce qui laisse sous la forme d'une matière gommeuse jaune l'ester méthylique de la 5Ç-iodo-9-désoxy-6Ç, 9a-époxy-prostaglandine F^a-

n

On abandonne ensuite pendant 5 heures sous de l'azote sec une solution de 100 mg de cet ester méthylique dans une solution méthanolique de méthylate de sodium préparée avec 46 mg de sodium et 0,70 ml de méthanol anhydre , puis on éli-5 mine le solvant dans un vide élevé, on lave avec du benzène la matière solide amorphe restante et on l'abandonne à l'air pendant une nuit puis en la mettant en agitation avec 0,5 ml d'hydroxyde de sodium aqueux normal on obtient une suspension de fines aiguilles incolores. On recueille ces cristaux, on 10 les lave avec quelques gouttes d'hydroxyde de sodium aqueux N et on les sèche à l'air, ce qui donne le sel sodique de la

5

9-desoxy-6,9a-époxy-A -prostaglandine L'inhibition de l'agrégation de thrombocytes humains induite par l'acide arachi-donique, à une concentration de 0,2 ng/ml par ce sel, et son 15 instabilité dans l'eau en milieu acide, ainsi que d'autres indications,sont en accord avec l'attribution de la configuration (5Z)-5,6-didéhydro-9-désoxy-6,9-a-époxyprostaglandine F, .

13

Le spectre de RMN C à haute résolution d'une solution de ces cristaux dans du diméthylsulfoxyde-dg 20 montre les 20 résonances attendues dont les déplacements chimiques sont en plein accord avec la structure chimique établie pour la prostacycline, et on n'observe aucun pic d'impureté .

EXEMPLE 4 :

25 On agite sous azote à la température ordi naire, pendant une nuit, 500 ml d'ester méthylique de la 5Ç-iodo-9-désoxy-6Ç,9£-époxyprostaglandine F^ avec une so-luyion méthanolique de méthylate de sodium préparée avec 0,23 g de sodium (10 équivalents) et 3,5 ml de MeOH, puis on 30 ajoute à la solution jaune 2,5 ml de NaOH aqueux normal pour hydrolyser l'ester et au bout de 2 heures on évapore le méthanol sous vide à la température ordinaire. La solution aqueuse restante forme spontanément une masse de fines aiguilles incolores du sel sodique cherché, que l'on refroidit à 0° puis 35 qu'on lave modérément avec une solution aqueuse normale de

NaOH, on sèche à l'air et on conserve le produit dans un tube bouché. Ce sel (383 mg) présente un nombre d'onde v max (disque

Hr de KBR) de 1692 cm ^ (0—) et on n'observe que 20 résonances

13 C à 182,7 (C-l), 158,2 (C-6), 140,0 et 134,3 (C-13,14), 100,7 (C-5), 87,5 (C-15), 80,6 et 75,5 (C-9,11), 58,0 (C-12), 49,0, 45,8, 42,4, 41,9, 37,5, 35,8 (C-18), 31,6, 29,9, 29,3, 5 26,7 (C-19) et 18,4 (C-20) ppm avec le triméthylsilane (TMS)

dans du DMSO-dg. Ce produit est le sel sodique de la (5Z)-5,6 didéhydro-9-désoxy-6,9a-époxy-prostaglandine F^ (encore appelé prostacycline sodique).

EXEMPLE 5 :

10 On traite à la température ordinaire pendant quelques heures, sans solvant, l'ester méthylique de la

5Ç-iodo-9-désoxy-6Ç,9a-époxyprostaglandine F^a avec du 1,5-

diazabicyclo-5-nonêne (DBN).

Le DBN et 11iodure d'hydrogène sont ensuite

15 convenablement éliminés par adsorption sur une colonne de Si02

préparée avec une suspension de Si02 dans un mélange 50:1

EtOAc/Et^N, puis l'éther vinylique est élué avec le même système de solvants. Spectroscopie IR : pellicule mince, v max 1738

(CÛ2Me) et 1696 cm (-0-C=è) ; RMN "*"H dans un mélange 19:1

20 CgDg-Et^N : ô 4,22, triplet de triplets"^, J = 6,9 et 1,0 Hz

(proton vinylique C-5), et RMN "^C dans un mélange 19:1

C,D,-Et_N : les résonances suivantes sont des caractères distinc-6 6 3

tifs : à 159,8 (C-l), 155,8 (C-l), 155,8 (C-6), 137,2 et 130,6 (C-13,14), 95,3 (C-5), 84,1 (C-15), 77,3 et 72,2 (C-9,11) 25 et 51,1 (ester méthylique) ppm d'après le TMS.

L'hydrolyse avec une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium de l'éther vinylique, ester méthylique de la (5Z)-5,6-didéhydro-9-désoxy-6,9a-époxyprostaglandine, donne la prostacycline sodique synthétique.

30 EXEMPLE 6 :

On reprend dans du méthylate de sodium méthanolique / préparé avec 6,23 g de Na et 94 ml de MeOH_7, en opérant à la température ordinaire et sous azote, 13,375 g d'ester méthylique de la (5R, 6R)-5-iodo-PGI^ contenant environ 2 % 35 d'isomère 5S, 6S, et on abandonne pendant une nuit à la température . ordinaire. On traite ensuite la solution jaune avec

70 ml de NaOH aqueux normal, on filtre pour séparer le sédiment et on abandonne à la température ordinaire pendant 2 heures puis on élimine le méthanol sous vide à la température ordinaire sur un évaporateur Buchi. Au sirop restant, on ajoute alors 5 25 ml d'eau et encore 80 ml de NaOH aqueux normal, la cristallisation se produisant spontanément en donnant une masse de cristaux feutrés. Après refroidissement à 0° on recueille la substance solide, on la lave avec environ 40 ml de NaOH aqueux normal glacé jusqu'à ce que le liquide de lavage soit incolore, et en 10 séchant à l'air pendant 2 jours jusqu'à poids constant on obtient 10,15 g du sel sodique de prostacycline incolore,

point de fusion 164-166° après séchage à 100°.

EXEMPLE 7 :

Diluant stérile pour injection de prostacycline

15 Glycocolle (0,025M) 94,0 mg

NaCl (0,025M) 73,3 mg

NaOH q.s. pour pH 10,5

Eau pour injections pour 50 ml.

En suivant le procédé général qui a été indiqué 20 à l'exemple 1, on utilise ces ingrédients en solution comme diluant.

nP

16

Claims (10)

REVENDICATIONS

1.- Méthode de stabilisation d'un composé pharmacologiquement actif choisi parmi la prostacycline,

la 15-méthylprostacycline, la 16,16-diméthylprostacycline et 5 leurs sels, à l'égard de l'hydrolyse du groupe éther énolique, consistant à associer le composé actif avec un tampon acceptable pour des usages pharmaceutiques, à base d'un amino-acide comme principal acide de tamponnage.

2.- Méthode selon la revendication 1, carac-

10 térisée en ce que le composé actif est en solution dans un solvant.

3.- Méthode selon la revendication 2, caractérisée en ce que le solvant est de l'eau.

4.- Méthode selon l'une quelconque des re-

15 vendications 1 à 3, caractérisée en ce que le pH de la composition est au moins égal à 9.

5.- Méthode selon l'une quelconque des revendications 2 à 4, caractérisée en ce que la solution du composé actif et du tampon est lyophilisée ou congelée.

20 6.- Méthode selon l'une quelconque des reven dications précédentes, caractérisée en ce que 1'amino-acide est un amino-acide non-sulfuré.

7.- Méthode selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que 1'amino-acide

25 est choisi parmi le glycocolle, l'alanine, l'arginine et la valine.

8.^- Méthode selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la concentration totale de 1'amino-acide (y compris ses sels) est de 0,02 à

30 0,03M.

9.- Méthode selon la revendication 8, caractérisé en ce que la concentration totale de 1'amino-acide

(y compris ses sels) est d'environ 0,025M.

10.- Méthode selon l'une quelconque des reven-

35 dications précédentes, caractérisée en ce que l'on ajoute une quantité de chlorure de sodium acceptable pour des usages pharmaceutiques .

U

Vf

11.- Méthode selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que le pH de la formulation est compris entre 10,2 et 11,6.

12.- Méthode selon l'une quelconque des reven-5 dications précédentes, caractérisée en ce que l'on ajoute un excipient.

13.- Méthode selon la revendication 12, caractérisée en ce que l'excipient est le mannitol.

14.- Méthode selon l'une quelconque des reven-10 dications précédentes, caractérisée en ce que le composé actif est la prostacycline ou un sel de cette substance.

15.- Méthode selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que le sel est un sel de sodium.

15 16.- Méthode selon la revendication 15, carac térisée en ce que le composé actif est le sel sodique de la prostacycline.

17.- Méthode de préparation d'une formulation pharmaceutique consistant à stabiliser un composé actif choisi

20 parmi la prostacycline, la 15-méthylprostacycline, la 16,16-di-méthylprostacycline et leurs sels par une méthode selon l'une quelconque des revendications précédentes, et à ajouter un véhicule pharmaceutique.

18.- Formulation pharmaceutique préparée par 25 la méthode selon la revendication 17.

19.- Méthode selon l'une quelconque des revendications 1 à 16, caractérisée en ce que le tampon comprend un amino-acide et une base forte.

20.- Méthode selon la revendication 19, carac-30 térisée en ce que la base forte est de l'hydroxyde de sodium.

21.- Méthode selon l'une quelconque des revendications 1, 5 à 16 et 19 et 20, caractérisée en ce que le produit stabilisé est placé à l'état lyophilisé dans un premier ré-

35

cipient faisant partie d'une collection d'au moins deux récipients, un second récipient est rempli du tampon tel que défini dans l'une quelconque des revendications précédentes et lesdits premier et second récipients sont scellés. ' (7

M

1%

22.- Méthode selon la revendication 21, caractérisée en ce que le second récipient est rempli d'une solution aqueuse du tampon tel que défini aux revendications précédentes.

23.- Méthode selon la revendication 21, carac-5 térisée en ce que le second récipient est garni du tampon à

l'état lyophilisé.

24.- Procédé de préparation d'une formulation pharmaceutique comprenant comme corps actif un composé choisi parmi la prostacycline, la 15-méthylprostacycline, la 16,16-di-

10 méthylprostacycline et leurs sels, procédé caractérisé en ce que :

A) On prépare la prostacycline, la 15-méthyl-

prostacycline,la 16,16-diméthylprostacycline ou leurs sels par déshydrohalogënation avec une base d'un composé de formule I

15

R-1 OH

20

25

le brome ou 11 iode, Y un groupe '1 " J4

dans laquelle X représente

4

OH, NHR ou OR, R étant un alkyle en C a C. ou un cation ac-

4

ceptable pour des usages pharmaceutiques, et R un alkyle en 12 3

à ; et R , R et R représentent, indépendamment les uns des autres, l'hydrogène ou des groupes méthyle ;

et le cas échéant on transforme en composé actif cherché un

4

composé ainsi obtenu dans lequel Y est un groupe NHR ou OR,

4

R et R étant des alkyles en C à ; et

B) on associe le composé actif ainsi obtenu avec un tampon acceptable pour des usages pharmaceutiques, à base d'un amino-acide comme principal acide de tamponnage, et le cas échéant avec aussi un véhicule pharmaceutique.

Original sur 19 pages , sans renvoi ni mot nul ni surcharge. Monte-Carlo, 16 mai 1979.