MC200110A1 - Utilisation topique de dérivés thiazolidines contre les conséquences du stress oxydatif de la peau - Google Patents

Description

200t10 002539

2 1 SEP. 200?

14-40

BREVET D'INVENTION

TITRE DE L'INVENTION :

UTILISATION TOPIQUE DE DÉRIVÉS THIAZOLIDINES CONTRE LES CONSÉQUENCES DU STRESS OXYDATIF DE LA PEAU

DÉPOSANT :

EXSYMOL S.A.M.

INVENTEUR :

M. C. SEGUIN

L'invention concerne l'utilisation cosmétique de dérivés thiazolidine, précisément dans le domaine de la protection de la peau et plus particulièrement dans la lutte contre le stress oxydatif et ses conséquences cutanées.

2

Par son rôle d'enveloppe externe du corps vi*s-à-vis de l'atmosphère, la peau est un organe particulièrement sensible à l'environnement auquel elle est soumise. Celui-ci peut être de nature pro-oxydante, dû à des expositions prolongées aux 5 rayonnements ultraviolets du soleil, à des atmosphères enfumées ou contenant des vapeurs de polluants chimiques atmosphériques. Ces "agressions" de nature exogène génèrent en effet un excès d'espèces très réactives, radicalaires ou non, au fort potentiel oxydant. Ce sont notamment des espèces dérivées de l'oxygène 10 moléculaire, souvent appelées espèces oxygénées réactives ou "EOR" ou "ROS" en anglais, telles l'anion superoxyde 02°~, le peroxyde d'hydrogène H202, l'oxygène singulet 102, le radical hydroxyle OH°. ;Cette surproduction d'espèces réactives EOR est alors 15 responsable de l'altération des constituants biologiques de la peau, en particulier de ceux rencontrés dans les cellules cutanées (ADN, protéines, lipides, glucides). La formation de sous-produits issus de la dégradation de ces molécules biologiques, et en particulier ceux issus des phospholipides 20 membranaires peroxydés par les EOR, est elle aussi néfaste à la peau. Enfin, l'exposition d'une peau à une surproduction d'EOR initie également des réactions biochimiques complexes à l'origine de la production de cytokines pro-inflammatoires, de métabolites mutagènes, et à la mort des cellules cutanées 25 (Briganti S. et al., J. Eur. Acad. Dermatol. Venereol. (2003), vol. 17, pp. 663-669). ;D'une manière générale, tous ces phénomènes sont préjudiciables à la peau, plus particulièrement lorsqu'ils atteignent les 30 couches profondes, notamment dans le derme. Il est en outre bien établi aujourd'hui qu'une perte de contrôle par la ,peau de la présence excessive d'EOR, conduisant à un état communément désigné par « stress oxydatif », est clairement impliquée dans le déclenchement de nombreux désordres ou anomalies cutanés : 35 vieillissement induit, immunosuppression, inflammation/érythème, carcinogenèse, irritation, etc (Bickers D.R. et al., J. Invest. Dermatol. (2006), vol. 126, pp. 2565-2575 et références citées). ;3 ;Physiologiquement, et malgré l'existence de systèmes antioxydants naturels de régulation et de protection, enzymatiques (superoxyde dismutases, catalases, peroxydases, etc) ou non (vitamines A, C, D ou E, caroténoïdes, glutathion, 5 oligo-éléments, etc), la peau présente, face à un flux important de radicaux libres ou d'espèces EOR, une défense rapidement épuisée et débordée. ;Aussi, depuis de nombreuses années, la conception de systèmes 10 capables de limiter les effets délétères de cette surproduction d'espèces réactives, ou même de capturer ou piéger celles-ci, est devenu un sujet de recherche majeur. Ainsi, pour pallier aux insuffisances physiologiques de la peau, de nombreuses molécules, d'origine naturelle (extraits de plantes ou d'animaux 15 terrestres) ou synthétique, ont été développées et proposées à titre de supplément antioxydant ou antiradicalaire, administrées par voie générale (orale) ou par application topique (Darvin M. et al., Skin Pharmacol. Physiol. (2006), vol. 19, pp. 238-247). Toutefois, il est en général affiché, pour nombre de molécules 20 antioxydantes ou antiradicalaires appartenant à l'état de la technique, une protection efficace à 1'encontre des EOR dits de première génération selon l'invention. Par "EOR de première génération", il faut comprendre les espèces dérivées de la réduction de l'oxygène moléculaire (02°~, H202, 102, OH°, ONOO", 25 etc). Il est par contre plus rarement justifié d'une action vis-à-vis des sous-produits d'oxydation ou produits dits de seconde génération (aldéhydes toxiques, produits finaux issus de la péroxydation lipidique, etc), eux aussi toxiques et résultant de réactions en chaîne des espèces primaires avec les composants 30 biochimiques de la cellule. ;De façon générale, il reste que la sélection d'une substance antioxydante dite "efficace", notamment pour une administration à l'Homme, est difficile. Il est aussi à noter qu'il est souvent 35 avancé un bénéfice in vitro, mais rarement confirmé clairement in vivo (Bickers D.R. et al., J. Invest. Dermatol. (2006), vol. 126, pp. 2565-2575). ;4 ;En effet, outre la complexité structurale multi-couches de la peau humaine, en conséquence un stress oxydatif s'y exprimant différemment, la substance antioxydante précédemment évoquée doit combiner : ;5 - une efficacité vis-à-vis du plus large panel possible d'espèces oxygénées réactives EOR, en conséquence posséder un large spectre de propriétés "anti-stress", une efficacité vis-à-vis des sous-produits toxiques du stress oxydatif, ;10 - une réactivité au contact des EOR telle qu'elle ne conduise pas à la formation de produits de réarrangement toxiques, une pénétration cutanée (et donc une biodisponibilité) favorable afin de pouvoir atteindre différents sites tissulaires cutanés, - » ;15 - enfin, une résistance aux systèmes hydrolytiques de la peau (et donc une résistance à sa métabolisation) qui soit garante de son activité in situ. ;La présente invention a été développée dans ce contexte de 20 satisfaire à cette demande de produits ou préparations permettant de s'opposer le plus efficacement possible aux effets destructeurs du stress oxydatif et de ses sous-produits toxiques, notamment dans les couches profondes de la peau. ;25 Le choix de la demanderesse s'est ainsi porté sur des dérivés de 1'hétérocycle thiazolidine, en particulier sur le 2-oxo-l,3-thiazolidine. Les raisons de cette sélection sont multiples : ;En premier lieu, la structure et les propriétés démontrées par 30 le composé 2-oxo-l,3-thiazolidine ont constitué une réponse avantageuse aux différents critères énoncés précédemment, illustrée par : ;une pénétration cutanée tout à fait favorable, révélée par l'obtention d'une valeur logarithmique de son coefficient 35 de partage ("Log P") comparable à celle obtenue pour des composés reconnus perméants trans-stratum corneum (Arct J. et al., SOFW-J. (2003), vol. 129, pp. 2-9) [test 1 ci-après ], ;TfV ;5 ;10 ;une activité antioxydante remarquable au regard de sa capacité à réagir sur un large panel de molécules EOR (constituées par 0°~, H202, et OH° produits à l'aide du couple oxydant xanthine oxydase/hypoxanthine) [test 2 ci-après ], ;une capacité insoupçonnée à neutraliser l'espèce électrophile hautement toxique issu de la péroxydation lipidique, l'aldéhyde 4-hydroxynonénal ou "4-HNE" [tests 3 et 4 ci-après]. ;En second lieu, et c'est un autre aspect important de l'invention, lors d'un suivi de 1'hétérocycle 2-oxo-l,3-thiazolidine en milieu aqueux oxydant contenant des EOR, et en particulier le péroxyde d'hydrogène (soit un des EOR les plus 15 toxiques pour les tissus vivants), la demanderesse a découvert, à son étonnement au regard d'une évolution quasi-quantitative et de l'absence de formes oxydées intermédiaires, que cet hétérocycle générait aisément, dès son "placement" sous des conditions oxydatives, le produit d'oxydation ultime, stable, à 20 savoir la taurine [cf test 5 ci-après]. Un tel comportement est fort utile car il garantit une absence totale de, toxicité des sous-produits de réaction du 2-oxo-l,3-thiazolidine avec H202, puisque la taurine est en effet un aminoacide naturellement présent dans le peau. Par ailleurs, l'intérêt cutané de former 25 de la taurine se trouve même être aujourd'hui renforcé, puisqu'elle est considérée depuis peu comme osmolyte essentiel dans 1'homéostasie de kératinocytes soumis à un stress "UV-induit" (Jancke G. et al., J. Invest. Dermatol. (2003), vol. 121, pp. 354-361). ;30 ;Le composé 2-oxo-l,3-thiazolidine, en tant que tel, n'est pas un produit nouveau. Dans l'état de la technique, il est à relever sa synthèse à partir d'aminoéthanethiol et de diphényl carbonate, selon un procédé et des conditions particulières qui 35 accordent, d'une manière générale, une réactivité chimique de type phosgène à divers polycarbonates cycliques issus du recyclage de matière plastique (Hata S. et al., J. Appl. Polym. Sci. (2003), vol. 90, pp. 2959-2968). Par contre, et au vu de l'art antérieur porté à la connaissance de la demanderesse, ;Jf \l ;10 ;15 ;20 ;25 ;30 ;35 ;lf\l ;6 ;nulle application cosmétique ou dermatologique n'est connue pour spécifiquement cet hétérocycle soufré "2-oxo", ni même une ou plusieurs propriétés vis-à-vis du stress oxydatif pour son analogue "thiono" en position 2 pour lequel, par ailleurs, la demanderesse a aussi observé la formation de taurine en conditions oxydatives [cf test 5 ci-après]. ;Il est à signaler toutefois l'existence de l'acide 2-oxothiazolidine-4-carboxylique. Ce composé a fait par contre l'objet, lui, mais aussi certains dérivés esters ou amides, d'intérêts divers et nombreux en cosmétique ou dermatologie : photoprotection (brevets FR 2 877 004 et FR 2 854 160), lutte contre la chute de cheveux (brevet EP 0656 20,1), agents dépigmentant (brevets US 6,063,389 et US 6,007,827) ou desquamant (brevet FR 2 816 838), etc. A la lecture de sa littérature concernant la protection de la peau d'une manière générale, il n'y est relevé un bénéfice cutané qu'en raison d'une action de stimulation des défenses naturelles des cellules, et tout particulièrement d'une action stimulante sur la synthèse intracellulaire du glutathion. Ce composé n'est pas, de plus, un précurseur de la taurine. Enfin, ce composé est structuralement différent du 2-oxo-l,3-thiazolidine, de sorte que cet enseignement ne présage pas des effets du 2-oxo-l,3-thiazolidine. ;Ainsi, selon un premier aspect, et de par cette dimension plurifonctionnelle "anti-stress" représentée par le comportement du composé 2-oxo-l,3-thiazolidine dans un environnement prooxydant, tel celui d'une peau soumise à un stress oxydatif, l'invention a pour objet l'utilisation, à titre d'ingrédient actif, dans une composition cosmétique, d'un dérivé de formule générale (I) : ;/~A ;Si N3 -H ;Il ® ;X ;dans laquelle X représente un atome d'oxygène ou de soufre, ledit dérivé ou ladite composition étant destinés à protéger la ;7 ;peau de tout stress générant des radicaux libres ou des espèces réactives de l'oxygène. ;Le composé préféré de formule (I) ci-dessus est tel que X 5 représente un atome d'oxygène. ;Il est retenu préférentiellement l'utilisation susmentionnée contre un stress dont l'origine est choisie parmi les radiations ultraviolettes, la pollution atmosphérique, le contact avec des 10 xénobiotiques chimiques ou des atmosphères enfumées, et tout particulièrement les radiations ultraviolettes. La présente invention vise à prévenir et à lutter contre les signes cutanés résultant de ces stress, notamment contre les différentes manifestations liées au vieillissement de la peau. Elle 15 s'applique particulièrement au domaine de la photoprotection, au regard de : ;l'implication aujourd'hui démontrée du 4-hydroxynonénal ou "4-HNE" dans l'apoptose de cellules soumises à des rayonnements UV-A (Yang Y. et al. (2003), vol.278, 20 pp.41380-41388), combinée à l'efficacité notable, évoquée ci-avant, du composé 2-oxo-l,3-thiazolidine à piéger cet aldéhyde toxique l'existence rapportée d'un stress "UV-A induit" dans le derme de la peau et dommageable aux constituants 25 protéiniques de la matrice extra-cellulaire (Wondrak G.T. ;et al., J. Invest. Dermatol. (2003), vol. 121, pp. 578-586), combinée à la biodisponibilité topique du même composé 2-oxo-l,3-thiazolidine justement dans ces couches dermiques, et en sus de ses caractéristiques intrinsèques : 30 absence de fonctions chimiques ionisables au pH ;physiologique de la peau, non sensibilité aux hydrolases de la peau, faible poids moléculaire. ;Ensuite, selon un deuxième aspect, la présente invention s'étend 35 également à une composition cosmétique comprenant, en association avec tout excipient physiologiquement compatible avec la peau, et à titre d'ingrédient actif principal, le dérivé de formule (I) tel que défini ci-avant, ladite composition étant ;TFV ;destinée à protéger la peau de tout stress générant des radicaux libres ou des espèces réactives de l'oxygène. ;Tout particulièrement, ladite composition est destinée à protéger la peau d'un stress "UV-induit", et le dérivé de formule générale (I) est tel que X représente un atome d'oxygène. ;Avantageusement, la quantité dudit dérivé de formule (I) dans la composition ci-dessus est comprise entre 0,01 et 10 % en poids par rapport au poids total de la composition, de préférence entre 0,05 et 5 % en poids, encore mieux entre 0,5 % et 5 % en poids. ;On peut citer, à titre d'exemple d'excipient physiologiquement compatible avec la peau, un tensioactif, un conservateur, un corps gras, un colorant, un émulsionnant, un gélifiant, un émolliant, un humectant, un pigment, ou tout autre adjuvant habituellement utilisé en cosmétique. ;Selon un mode particulier de l'invention, afin de renforcer l'activité antioxydante ou antiradicalaire, ladite composition est susceptible de comprendre, en outre, un autre élément actif choisi parmi des agents antioxydants, antiradicalaires et/ou anti-pollution couramment sur le marché, de manière telle que l'effet attaché intrinsèquement aux compositions selon l'invention ne soit pas altéré par l'addition envisagée. Ces agents antioxydants, antiradicalaires ou anti-pollution couramment sur le marché peuvent être : ;des vitamines, telles les vitamines C, E, et D, ;des enzymes, telles les superoxyde dismutases, catalases, et peroxydases, d'origine synthétique, végétale, animale, bactérienne ou recombinante par exemple, ;des composés phénoliques, tels des polyphénols (épigallocatéchine-3-gallate) et notamment les flavonoïdes acide férulique, silymarine, génistéine, apigénine, resvératrol. ;9 ;Toujours de manière facultative, ladite composition susmentionnée peut également associer un filtre solaire UV-A ou B, ou leur mélange, de nature organique (dérivés de la benzophénone) ou inorganique (oxydes métalliques), ou encore un 5 actif cosmétique à effet secondaire, tel un agent hydratant, un agent apaisant, un agent pigmentant, un agent stimulant la synthèse de macromolécules épidermiques et dermiques, et ce, toujours en veillant que ledit actif cosmétique et sa quantité sont présents de manière telle que les propriétés de la 10 composition selon l'invention ne soient pas altérées par l'adjonction envisagée. ;Les compositions selon l'invention sont adaptées à une administration par voie topique cutanée, présentées sous toutes 15 les formes normalement utilisées pour une telle administration. De manière avantageuse, elles sont formulées sous forme, par exemple, d'émulsions, crème, lait, gel, lotion, etc. ;A titre d'illustration, il est mentionné ci-après quelques 20 exemples de formulation de composition cosmétique selon l'invention, contenant les hétérocycles 2-oxo-l,3-thiazolidine ou 2-thiono-1,3-thiazolidine précités : ;25 ;Formule A (crème) ;2-oxo-l,3-thiazolidine 1 % ;Polyisobutène hydrogéné 7 % ;Myristate d'isobutyle 3 % ;Palmitate de cétyle 7 % ;30 Monostéarate d'éthylène glycol 5 % ;Laurate sorbitan 2 % ;Polysorbate 20 2 % ;Carbomer (copolymère d'acrylate/acrylamide & huile minérale) 0,3 % ;Phénoxyéthanol 0,5 % ;35 Eau qsp 100 % ;Formule B (gel) ;40 2-thiono-l,3-thiazolidine ' 0,5 % ;Carbomer (copolymère d'acrylate/acrylamide & huile minérale) 1,5 % ;Benzoate de sodium 0,2 % ;Acide sorbigue 1 % ;1,3-butanediol 10 % ;45 Glycérine 5 % ;Soude 0,13 % ;Phénoxyéthanol 0,9 % ;Eau qsp 100 % ;TfV ;10 ;Enfin, selon un dernier aspect, la présente invention concerne un procédé de traitement cosmétique visant à lutter contre le stress oxydatif de la peau et ses conséquences, procédé mis en œuvre en appliquant les compositions telles que définies 5 précédemment, préférentiellement avec une composition comprenant le dérivé 2-oxo-l,3-thiazolidine. ;De manière préférée, et afin de renforcer ledit procédé, celui-ci peut également être mis en œuvre en concomitance avec la 10 supplémentation orale d'une substance antioxydante couramment mis sur le marché, par exemple tel qu'énoncée ci-avant. A cette fin, ledit procédé peut comprendre en outre l'administration par voie orale d'une substance antioxydante chez l'individu sujet du traitement cosmétique. L'administration sur la peau d'une 15 composition selon l'invention et l'administration par voie orale d'une substance antioxydante ont lieu de préférence sur une période de temps commune. ;L'invention est illustrée ci-après, à titre purement indicatif 20 par les tests suivants évoqués plus haut dans la description de l'invention (tests 1 à 5). Il est aussi à signaler que les premiers résultats d'études in vivo menées sur l'Homme sont également en mesure d'illustrer l'utilisation des dérivés thiazolidines aux fins de la présente invention. ;25 ;Test 1 : coefficient de partage du composé 2-oxo-l,3-thiazolidine ;30 Les valeurs de coefficient de partage n-octanol/eau (Log P) ont été obtenus expérimentalement conformément au protocole décrit dans la ligne directrice n° 107 de l'OCDE (adoptée le 27/7/1995) pour les essais de produits chimiques. ;Le log P du composé 2-oxo-l,3-thiazolidine selon l'invention est 35 comparé à celui obtenu pour la caféine et l'éthanol (tableau 1 ci-après). ;■jf\j ;11 ;Tableau 1 ;Composé ;Log P ;éthanol ;- 0,31 ;caféine ;1 ;O ;o ;2-oxo-l,3-thiazolidine ;- 0,27 ;Le résultat obtenu pour le 2-oxo-l,3-thiazolidine est comparable 5 à celui obtenu pour les composés reconnus perméants trans-stratum corneum. ;Test 2 : mise en évidence de l'effet antioxydant du composé 2-oxo-1,3-thiazolidine ;10 ;a) mesure de l'activité piégeur du radical hydroxyle (OH°) La méthode, décrite par Rehman A. et coll. (British J. Pharmacol. (1997), vol. 122, pp. 1702-1706), est utilisée pour la détermination de la constante de vitesse de piégeage du 15 radical hydroxyle [Ks(OH°)], le composé 2-oxo-l,3-thiazolidine selon l'invention étant comparé à une molécule de référence, la taurine. ;Expérimentalement, la substance testée est dissoute dans un milieu tamponné à pH 7,4 auquel est ajouté un milieu générateur 20 de OH°. Après une heure d'incubation à 37°C, la réaction est arrêtée à l'aide d'acide trichloroacétique. Après addition du révélateur colorimétrique, l'acide thiobarbiturique, il est mesuré l'absorbance à 532 nm pour différentes concentrations, puis calculé le Ks(OH°) relatif à chacune des substances. Les 25 résultats sont reportés dans le tableau 2a ci-après. ;Tableau 2a ;Composé ;KS(OH ) (ÎO9.*!"1^-1)

taurine

5 ,32

2-oxo-l,3-thiazolidine

13,52

30 Les résultats, rassemblant les valeurs moyennes obtenues à partir de cinq expérimentations indépendantes, soulignent une capacité à piéger le radical hydroxyle (OH°), pour le composé 2-

t n/

12

oxo-1,3-thiazolidine, très largement supérieure à celle de la taurine, supérieure même à l'acide ascorbique (vitamine C) pour lequel la littérature annonce un Ks(OH°) de 10,1 Giga.M~l.s~l (Cabelli D.E., J. Phys. Chem. (1983), vol. 87, pp. 1809-1812).

5

b) mesure du pouvoir antioxydant "global"

Le système de production d'EOR, décrit par Nowak D. et coll. (Biomed. Biochem. Acta (1991), vol. 50, pp. 265-272)'et mettant en jeu le couple xanthine oxydase/hypoxanthine, est utilisé pour 10 la détermination du pouvoir antioxydant "global". Celui-ci est caractérisé par la somme des effets à 1'encontre de l'anion superoxyde 02°~, du peroxyde d'hydrogène H202, et du radical hydroxyle OH°, et est exprimé en suivant le pourcentage de protection d'une molécule "détectrice", le désoxyribose. 15 Le composé 2-oxo-l,3-thiazolidine selon l'invention est également comparé à la taurine. Expérimentalement, la substance testée est dissoute dans un milieu tamponné à pH 7,5, additionné de NaCl, MgCl2 et CaCl2. Après leur incubation à 37°C en présence du couple xanthine oxydase/hypoxanthine, d'EDTA, et 20 de désoxyribose, la réaction est arrêtée à l'aide d'acide trichloroacétique. Après addition d'acide thiobarbiturique, il est réalisé une mesure de densité optique à 532 nm, exprimée par la suite en pourcentage de protection du désoxyribose (après comparaison avec un contrôle). Les résultats sont reportés dans 25 le tableau 2b ci-après :

Tableau 2b

Composé

% de protection taurine (20 mM)

19

2-oxo-l,3-thiazolidine (10 mM)

19

2-oxo-l,3-thiazolidine (20 mM)

25

30 Pour le composé 2-oxo-l,3-thiazolidine, il est ainsi observé une protection du désoxyribose supérieure à celle obtenue avec la taurine (protection identique pour une concentration deux fois moindre).

35 ,

7ï\j

13

Test 3 : mise en évidence de la capacité du composé 2-oxo-l,3-thiazolidine à neutraliser la cytotoxicité du 4-hydroxynonénal

L'étude expérimentale a été réalisée sur une lignée 5 fibroblastique adhérente de hamster appelée "V79", maintenue en atmosphère humide à 37 °C et 5 % de C02, puis ensemencée dans des plaques 96 puits à raison de 0,5.104 cellules par puit. Les cellules sont alors soumises à un état de stress, toxique, avec le remplacement du milieu de culture par un milieu contenant du 10 4-hydroxynonénal (ou 4-HNE) à la concentration de 6 ppm, milieu auquel est ajouté simultanément le composé 2-oxo-l,3-thiazolidine selon l'invention.

La viabilité cellulaire des fibroblastes est mesurée par la méthode d'incorporation au bromure de 3-(4,5-diméthylthiazol-2-15 yl)-2,5-diphenyltétrazolium (ou "MTT"). Les résultats, rassemblant les valeurs moyennes obtenues à partir de trois expérimentations indépendantes, sont présentés dans le tableau 3 ci-après, en comparaison avec ceux obtenus pour la N-acétyl-cystéine à 2 mM choisie comme molécule de référence positive 20 (restauration totale d'une viabilité cellulaire par rapport à un contrôle et des cellules non objets d'un stress 4-HNE).

Tableau 3

% viabilité cellulaire contrôle

100

HNE 6 ppm

34

N-acétyl-cystéine 2 mM

126

2-oxo-l,3-thiazolidine 0,1 mM

40

2-oxo-l,3-thiazolidine 1 mM

58

2-oxo-l,3-thiazolidine 2,5 mM

100

25

Les résultats du tableau 3 soulignent, pour le composé 2-oxo-1,3-thiazolidine selon l'invention, une viabilité cellulaire dose-dépendante, ainsi qu'une capacité identique à celle de la référence à protéger les cellules soumises à un stress 4-HNE.

30

TV

14

Test 4 : mise en évidence de l'effet anti-clastogène du composé 2-oxo-l,3-thiazolidine en présence d'une concentration génotoxique de 4-hydroxynonénal

5 L'étude a été réalisée selon des conditions expérimentales (ensemencement) identiques à celles présentées dans le test 3 ci-avant, avec une exposition des cellules à un état de "stress 4-HNE" à la concentration génotoxique de 1 ppm, décrite (Eckel P.M., Molecular Aspects of Medecine (2003), vol. 24, pp. 161-10 165) comme entraînant des cassures de 1'ADN cellulaire et la formation de micronoyaux (effet clastogène).

Le nombre de cellules à micronoyaux est compté après lecture des lames au microscope à épifluorescence, sur 2000 cellules et après marquage à l'acridine orange (colorant de 1'ADN). 15 Les résultats, rassemblant les valeurs moyennes obtenues à partir de deux expérimentations indépendantes, sont présentés dans le tableau 4 ci-après, en comparaison avec ceux obtenus pour la N-acétyl-cystéine à 2 mM choisie comme molécule de référence positive (nombre de cellules à micronoyaux voisin de 20 celui du "contrôle" ou témoin non exposé).

Tableau 4

Nbre de cellules à micronoyaux/2000 cellules contrôle

19

stress-HNE 1 ppm

58

N-acétyl-cystéine 2 mM

27

2-oxo-l,3-thiazolidine 5 mM

21

25 II est ainsi observé, pour le composé 2-oxo-l,3-thiazolidine selon l'invention, une capacité à prévenir l'apparition de cellules à micronoyaux induite par un stress génotoxique 4-HNE.

30

Test 5 : mise en évidence "in tubo" de la formation' de taurine au contact d'une solution d'H202

Jf\f

15

A une solution aqueuse à 10 % en dérivés 2-oxo-l,3-thiazolidine ou 2-thiono-1,3-thiazolidine selon l'invention, tamponnée à pH 7,4 et à 37 °C, sont ajoutés 4 équivalents d'une solution de peroxyde d'hydrogène (H202) , soit un faible excès d'espèces 5 oxydantes par rapport aux 3 équivalents théoriques nécessaires à une conversion complète (100 %) en taurine. L'évolution du mélange réactionnel est alors suivie par chromatographie en phase liquide (HPLC muni d'un détecteur UV à 254 nm), conduisant aux résultats exposés dans le tableau 5 ci-après et à la mise en 10 évidence d'une formation quasi-exclusive et quantitative de taurine après réaction des dérivés 2-oxo-l,3-thiazolidine ou 2-thiono-1,3-thiazolidine au contact de H202.

Tableau 5

15

taurine (% formation à partir du 2-oxo-l,2 thiazolidine)

taurine (% formation à partir du 2-thiono-l,3-thiazolidine)

3h

38

30

7h

56

50

24h

82

77

48h

93

89

16

Claims (13)

REVENDICATIONS

1. Composition cosmétique destinée à protéger la peau de tout 5 stress générant des radicaux libres ou des espècesJréactives de l'oxygène, comprenant, en association avec tout excipient physiologiquement compatible avec la peau, et à titre d'ingrédient actif principal, un dérivé de formule (I) :

10

A~V

Si N3

V

X

•H

(I)

dans laquelle X représente un atome d'oxygène ou de soufre.

2. Composition cosmétique selon la revendication 1, caractérisée 15 en ce que le dérivé de formule (I) est tel que X représente un atome d'oxygène.

3. Composition cosmétique selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisée en ce que le dérivé de formule (I) est présent dans

20 une quantité comprise entre 0,01 et 10 % en poids par rapport au poids total de la composition.

4. Composition cosmétique selon la revendication 3, caractérisée en ce que la quantité dudit composé de formule (I) est comprise

25 entre 0,05 et 5 % en poids par rapport au poids total de la composition.

5. Composition cosmétique selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce qu'elle comprend, en

30 outre, un autre élément actif antioxydant, antiradicalaire ou anti-pollution.

6. Composition cosmétique selon la revendication 5, caractérisée en ce que ledit autre élément actif est choisi parmi des

35 vitamines, des enzymes, des composés phénoliques.

10

15

20

25

30

35

17

7. Composition cosmétique selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce qu'elle peut associer un filtre solaire UV-A ou B, organique ou inorganique, ou leur mélange, ou encore un actif cosmétique a effet secondaire, tel un agent hydratant, un agent apaisant, un agent pigmentant, un agent stimulant la synthèse de macromolécules épidermiques et dermiques.

8. Composition cosmétique selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisée en ce qu'elle est formulée sous forme d'émulsions, crème, lait, gel, lotion.

9. Utilisation, à titre d'ingrédient actif, dans une composition cosmétique telle que définie selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, d'un dérivé de formule générale (I) :

/~A

Si N3 -H

l| ®

X

dans laquelle X représente un atome d'oxygène ou de soufre, ledit dérivé ou ladite composition étant destinés à protéger la peau de tout stress générant des radicaux libres ou des espèces réactives de l'oxygène.

10. Utilisation selon la revendication 9, dans laquelle ledit stress est choisi parmi les radiations ultraviolettes, la pollution atmosphérique, le contact avec des xénobiotiques chimiques ou des atmosphères enfumées.

11. Utilisation selon la revendication 10, dans laquelle ledit stress est les radiations ultraviolettes.

12. Procédé de traitement cosmétique afin de lutter contre le stress oxydatif de la peau et ses conséquences, consistant à appliquer sur la peau une composition telle que définie dans l'une quelconque des revendications 1 à 8.

13. Procédé de traitement cosmétique selon la revendication 12, caractérisé en ce qu'il est comprend en outre l'administration par voie orale d'une substance antioxydante.