MC309A1 - La transformation de la cyanocobalamine (b12) en hydroxocobalamine - Google Patents

Description

1 - DESCRIPTIF ET DESSINS

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BREVET D'INVENTION

TRNSFORMATION DE LA OYANOCOBALAMINE ( B12 ) EN HYDROXO OOBALAMINE

DEMANDEUR t COTE Robert

(1) On sait que par réduction, il est possible d'éliminer le

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groupement ON de la molécule de la cyanocobalamine (B ), le cobalt passant de la valence 3 à la valence 2»

Si on oxyde ensuite la solution aqueuse, on redonne la (5) troisième valence au cobalt? en fixant OH on obtient l'hydroxo cobalamine.

Une autre technique est basée sur le fait qu'en milieu acide il est possible d'éliminer le ON de la molécule de la

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cyanocobalamine (B ) et de le remplacer par un autre cathion (10) Cl par exemple.

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Le nouvel ester obtenu est beaucoup plus ionisé que

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la cyanocobalaraine (B ) et on peut passer de cet ester à l'hydroxo cobalamine.

lia technique décrite ci-après s'appuie sur les pro-(15) priétés des réducteurs et en outre» pour faciliter le départ du CN» un pH bas est utilisé•

TECHNIQUE DE L'OPERATION

On emploie comme réducteur, le chlorure ferreux en milieu chlorhydrique.

1 P

(20) Une solution de cyanocobalamine (B ) est préparée par exemple à 5»000 gama par cc. Cette concentration n'est pas obligatoire et peut varier dans de très larges mesures. A cette solution on ajoute un volume égal d'une solution de chlorure ferreux dans l'eau chlorhydrique» de façon à (25) obtenir sensiblement pH 1,8. Pour la solution de chlorure ferreux, on peut par exemple» prévoir une solution de : 1 gramme d© chlorure ferreux dans 100 cc d'eau chlorhydri-que.

Là aussi cette concentration peut varier dans de (30) grandes proportions, et notamment suivant la concentration de la solution de cyanooobalamine (B ).

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Le mélangej obtenu est concentré sous-vide à environ au quart du volume initial. Cette concentration durant de 45 minutes à 1 heure.

(35) lie liquide obtenu est dilué de moitié et neutralisé par de la soude pour ramener le pH sensiblement à 7«

On a un précipité important d*oxyde ferreux» On filtre et on vérifie sur la solution obtenue qu'il ne reste plus de. fer à précipiter, par addition de quelques gouttes de soude» ;(40) Le nouveau liquide obtenu est aéré et réoxydé pour retransformer le cobalt qui pourrait être devenu divalant en cobalt tri valent ». ;Cette oxydation se fait par barbotage soit d'air, soit d'oxygène pendant 1/4 d'heure environ» ;(45) La solution est diluée par l'acétone de façon à avoir un degré acétonique de 80$* On filtre s'il est nécessaire et le pH est ajusté à 7 par de la soude»

Cette solution est chromatographiée sur alumine préparée par passage de tampon, neutralisation à pH 7 et passage préa-

(50) lable d'acétone à 80#»

La solution contenant l'hydroxo et de la cyanocobalamine 12

(B ) non transformée est passée lentement sur la colonne

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d'alumine. La ïï ainsi que l'hydroxo sont fixés. On lave à l'acétone à 80$ et élue avec l'acétone à 55$. lies premières

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(55) fractions rouges contiennent la majeure partie de

B 12 non transformée, B 12 qui pourrait être réutilisée: pour une nouvelle opération»

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L'hydroxo est éluée après le départ de la B . On la fait cristalliser, en augmentant le degré acétoni» (60) que.

Le produit obtenu, chromatographié sur papier se place comme l'hydroxo» Le coefficient de partage entra l'alcool benzilique et l'eau est celui de l'hydroxo et les courbes de titrage acidimétrique ainsi que le (65) spectre démontrent bien que c'est de l'hydroxo pratiquement pur®

Claims (1)

1. ( 5 )

   RESUME

   La cyanocobalaœine est transformée en hydroxocobalamine en utilisant à la fois les propriétés réductrices et acides (70) du ohlorure ferreux en milieu chlorhydrique« Le produit obtenu est cristallisé en solution acétonique#

   (9<c(ji>i ux£

   La présente description se compose de 5 feuillets numérotés de 1 à 5.

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   Monsieur COTE Hobert Louis Florentin -

   Eden Parle - Boulevard de Belgique à MONACO (3?té)