MD4820C1 - Compuşi dihidroizochinolinonici substituiţi - Google Patents

Abstract

Invenţia se referă la compuşii cu formula generală (I):(I),şi sărurile farmaceutic acceptabile ale acestora, unde R1, R2, R3, R4, L, X şi Z sunt definiţi în descriere, la compoziţiile farmaceutice ce conţin asemenea compuşi şi săruri, şi la metode de utilizare a acestor compuşi, săruri şi compoziţii pentru tratamentul creşterii anormale a celulelor, inclusiv a cancerului.

Description

Domeniul invenţiei

Prezenta invenţie se referă la compuşii cu formula I, I', II, II' şi III, şi sărurile lor farmaceutic acceptabile, la compoziţiile farmaceutice ce conţin asemenea compuşi şi săruri, şi utilizările acestora. Compuşii, sărurile şi compoziţiile prezentei invenţii pot fi utili pentru tratarea sau ameliorarea tulburărilor de proliferare celulară anormală, precum cancer.

Stadiul anterior

Modificările epigenetice joacă un rol important în reglarea proceselor celulare, inclusiv proliferarea celulelor, diferenţierea celulelor şi supravieţuirea celulelor. Inactivarea epigenetică a genelor supresoare tumorale şi activarea oncogenelor poate decurge prin modificarea paternelor de metilare a insulelor CpG, modificarea histonică, şi dereglarea proteinei de legătură a DNA. Genele policomb sunt un set de efectori epigenetici. EZH2 (potenţiator al homolog zeste 2) este componentul catalitic al Complexului Represor Policomb 2 (PRC2), un complex cu mai multe subunităţi conservate care reprimă transcripţia genelor prin metilarea lizinei 27 în Histona H3 (H3K27). EZH2 joacă un rol cheie în reglarea paternelor de expresie genică care reglează deciziile sorţii celulelor, precum diferenţierea şi auto-reînnoirea. EZH2 este supra-exprimată în anumite celule canceroase, unde ea a fost legată de proliferarea celulelor, invazia celulară, chemorezistenţa şi metastaza.

Expresia EZH2 ridicată a fost corelată cu un pronostic sărac, gradul înalt, şi stadiul înaintat în mai multe tipuri de cancer, ce includ cancerele mamar, colorectal, endometrial, gastric, hepatic, renal, pulmonar, de melanom, ovarian, pancreatic, de prostată, şi de vezică urinară. Vezi Crea şi al., Crit. Rev. Oncol. Hematol. 2012, 83:184-193, şi referinţele citate acolo; vezi de asemenea Kleer şi al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2003, 100:11606-11; Mimori şi al., Eur. J. Surg. Oncol. 2005, 31:376-80; Bachmann şi al., J. Clin. Oncol. 2006, 24:268-273; Matsukawa şi al., Cancer Sci. 2006, 97:484-491; Sasaki şi al. Lab. Invest. 2008, 88:873-882; Sudo şi al., Br. J. Cancer 2005, 92(9):1754-1758; Breuer şi al., Neoplasia 2004, 6:736-43; Lu şi al., Cancer Res. 2007, 67:1757-1768; Ougolkov şi al., Clin. Cancer Res. 2008, 14:6790-6796; Varambally şi al., Nature 2002, 419:624-629; Wagener şi al., Int. J. Cancer 2008, 123:1545-1550; şi Weikert şi al., Int. J. Mol. Med. 2005, 16:349-353.

Mutaţiile somatice recurente în EZH2 au fost identificate în limfom difuz cu celule B mari (DLBCL) şi limfome foliculare (FL). Mutaţiile ce modifică tirozina 641 a EZH2 (de ex., Y641C, Y641F, Y641N, Y641S, şi Y641H) au fost observate conform relatărilor până la 22% al centrului germinal al B-celulelor DLBCL şi 7% de FL. Morin şi al. Nat. Genetics 2010 Feb; 42(2):181-185. Mutaţiile alaninei 677 (A677) şi alanina 687 (A687) de asemenea au fost raportate. McCabe şi al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2012, 109:2989-2994; Majer şi al. FEBS Letters 2012, 586:3448-3451. EZH2 ce activează mutaţiile au fost sugerate pentru a modifica specificitatea substratului ce rezultă în nivelurile crescute ale H3K27 trimetilate (H3K27me3).

În sursa WO2012/142513 [1] sunt dezvăluiţi compuşi benzenici substituiţi, care sunt modulatori ai EZH2; compoziţii farmaceutice, ce conţin aceşti compuşi; şi procedee de tratare a cancerului prin introducerea acestor compuşi şi compoziţii farmaceutice persoanelor, care au nevoie de aceasta. În prezenta invenţie sunt propuşi modulatori EZH2 suplimentari, care sunt compuşi dihidroizochinolinonici substituiţi şi sunt utili la tratarea creşterii celulare anormale, inclusiv a cancerului.

În consecinţă, compuşii care inhibă activitatea tipului sălbatic şi/sau formei mutante a EZH2 pot fi de interes pentru tratamentul cancerului.

Sumar

Prezenta invenţie prezintă, în parte, compuşi şi săruri farmaceutic acceptabile noi. Astfel de compuşi pot modula activitatea EZH2, astfel efectuând funcţiile biologice, de exemplu prin inhibarea proliferării celulelor şi invazivitatea celulelor, inhibarea metastazelor, inducerea metastazelor sau inhibarea angiogenezei. De asemenea sunt descrise compoziţii farmaceutice şi medicamente, ce conţin compuşi sau săruri conform invenţiei, singure sau în combinaţie cu alţi agenţi terapeutici sau agenţi paliativi. Prezenta invenţie de asemenea prezintă, în parte, metode de preparare a compuşilor noi, sărurilor şi compoziţiilor acestora, şi metode de utilizare a celor de mai sus.

Într-un exemplu, invenţia prezintă un compus cu formula (I):

(I),

sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia,

unde:

R1 este selectat din grupul ce constă din H, F, C1-C4 alchil, C1-C4 alcoxi, C(O)R5, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri şi heteroaril cu 5-12 membri, unde fiecare C1-C4 alchil sau C1-C4 alcoxi menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6, şi fiecare C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7;

R2 este H, F sau C1-C4 alchil;

L este o legătură sau o C1-C4 alchilenă;

R3 este selectat din grupul ce constă din C1-C4 alchil, C1-C4 alcoxi, OH, CN, C(O)R8, COOR9, NR10R11, OR12, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri şi heteroaril cu 5-12 membri, unde fiecare C1-C4 alchil sau C1-C4 alcoxi menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6, şi fiecare C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7;

R4 este H, halo sau C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6;

R5 este C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14;

fiecare R6 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi;

fiecare R7 este independent C1-C4 alchil, OH, F, CN, C1-C4 alcoxi, =O sau C(O)R13;

R8 este C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14;

R9 este H sau C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14;

R10 şi R11 sunt independent H sau C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14;

R12 este selectat din grupul ce constă din C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri şi heteroaril cu 5-12 membri, unde fiecare C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7;

fiecare R13 este independent C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R15;

fiecare R14 şi R15 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi; şi

X şi Z sunt independent C1-C4 alchil, C1-C4 fluoroalchil, C1-C4 alcoxi sau C1-C4 fluoroalcoxi.

În unele exemple, compusul cu formula (I) are stereochimia absolută a atomului de carbon alăturat la substituenţii R1 şi R2 precum este arătat în Formula (I-A) sau (I-B):

sau

(I-A) (I-B)

sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia,

unde:

R1, R2, L, R3, R4, X şi Z sunt definiţi ca pentru Formula (I).

Într-un alt exemplu, invenţia prezintă un compus cu formula (II), (II-A) sau (II-B):

(II),

sau

(II-A) (II-B)

sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia,

unde:

R1, L, R3 şi X sunt definiţi ca pentru Formula (I); şi

R4 este H, Cl, Br, F sau CH3.

Într-un alt exemplu, invenţia prezintă un compus cu formula (III):

(III),

sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia,

unde:

R1 şi R3 luaţi împreună formează un heterociclil cu 3-12 membri substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7;

R2 este H, F sau C1-C4 alchil;

R4 este H, halo sau C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6;

fiecare R6 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi;

fiecare R7 este independent C1-C4 alchil, OH, F, CN, C1-C4 alcoxi, =O, CHO, C(O)R13, SO2R13 sau heterociclil cu 3-6 membri;

fiecare R13 este independent C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R15;

fiecare R15 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi; şi

X şi Z sunt independent C1-C4 alchil, C1-C4 fluoroalchil, C1-C4 alcoxi sau C1-C4 fluoroalcoxi.

Într-un alt exemplu, invenţia prezintă o compoziţie farmaceutică conţinând un compus conform unei formulări descrise aici, sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, şi un purtător sau excipient farmaceutic acceptabil. În unele exemple, compoziţia farmaceutică conţine doi sau mai mulţi purtători şi/sau excipienţi farmaceutic acceptabili.

Invenţia de asemenea prezintă metode şi utilizări terapeutice ce includ administrarea unui compus conform invenţiei, sau a unei sari farmaceutic acceptabile a acestuia.

Într-un exemplu, invenţia prezintă o metodă pentru tratamentul creşterii anormale a celulelor la un subiect ce include administrarea la subiect a unei cantităţi terapeutic acceptabile a unui compus conform invenţiei, sau a unei sari farmaceutic acceptabile a acestuia.

În exemplele frecvente de realizare a metodelor dezvăluite aici, creşterea anormală a celulelor este cancer. În unele exemple, metodele dezvăluite rezultă în una sau mai multe din efectele ce urmează: (1) inhibarea proliferării celulelor canceroase; (2) inhibarea invazivităţii celulelor canceroase; (3) inducerea metastazelor celulelor canceroase; (4) inhibarea metastazei celulelor canceroase; sau (5) inhibarea angiogenezei.

Într-un alt exemplu, invenţia prezintă o metodă pentru tratamentul unei tulburări mediate de EZH2 la un subiect ce include administrarea la un subiect a unui compus conform invenţiei, sau a unei sari farmaceutic acceptabile a acestuia, într-o cantitate care este eficientă în tratamentul tulburării menţionate. Compuşii şi sărurile prezentei invenţii pot inhiba tipul sălbatic şi anumite forme mutante ale histonei metiltransferaza EZH2 umană.

Într-un alt exemplu, invenţia prezintă un compus conform unei formulări descrise aici, sau sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, pentru utilizare în tratamentul creşterii anormale a celulelor la un subiect.

Într-un alt aspect, invenţia prezintă utilizarea unui compus conform unei formulări descrise aici, sau sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, pentru tratamentul creşterii anormale a celulelor la un subiect.

Într-un alt aspect, invenţia prezintă utilizarea unui compus conform unei formulări descrise aici, sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, pentru prepararea unui medicament pentru tratamentul creşterii anormale a celulelor.

În exemplele frecvente de realizare, creşterea anormală a celulelor este cancer şi subiectul este un om.

În unele exemple, metodele descrise aici cuprind în plus administrarea la subiect a unei cantităţi de agent terapeutic anticancer sau un agent paliativ, cantităţile căruia pot fi eficiente împreună în tratamentul creşterii celulare anormale menţionate. În unele exemple, unul sau mai mulţi agenţi terapeutici anticancer este selectat dintre agenţi antitumorali, agenţi antiangiodenici, inhibitori de transducţie a semnalului şi agenţi antiproliferativi, cantităţile căruia sunt eficiente împreună în tratamentul creşterii celulare anormale menţionate. În unele asemenea exemple concrete, agentul antitumoral este selectat din grupul ce constă din inhibitori mitotici, agenţi de alchilare, antimetaboliţi, antibiotice de intercalare, inhibitori ai factorului de creştere, radiaţie, inhibitori ai ciclului celular, enzime, inhibitori ai topoizomerazei, modificatori ai răspunsului biologic, anticorpi, citotoxice, antihormonale, şi antiandrogenice.

În alte exemple, utilizările descrise aici includ utilizarea unui compus conform unei formulări descrise aici sau sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, în combinaţie cu una sau mai multe substanţe selectate dintre agenţi antitumorali, agenţi antiangiodenici, inhibitori de transducţie a semnalului şi agenţi antiproliferativi.

În unele exemple, medicamentele descrise aici pot fi adaptate pentru utilizare în combinaţie cu una sau mai multe substanţe selectate dintre agenţi antitumorali, agenţi antiangiodenici, inhibitori de transducţie a semnalului şi agenţi antiproliferativi.

Fiecare din exemplele ale compuşilor prezentei invenţii descrişi mai jos pot fi combinaţi cu unul sau mai multe alte exemple ale compuşilor prezentei invenţii descrişi aici nu în contradicţie cu exemplul(le) cu care el este combinat. În plus, fiecare din exemplele de mai jos ce descriu invenţia prevăd înlucderea în domeniul său de aplicare a sărurilor farmaceutic acceptabile ale compuşilor conform invenţiei. În consecinţă, fraza “sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia” este implicit în descrierea tuturor compuşilor descrişi aici.

Descrierea Detaliată

Prezenta invenţie poate fi înţeleasă mai bine prin referire la următoarea descriere detaliată a exemplelor preferate conform invenţiei şi exemplelor descrise aici. Trebuie înţeles că terminologia descrisă aici este cu scopul de a descrie doar exemplele specifice şi nu este destnată să fie limitativă. În continuare trebuie să se înţeleagă că dacă nu este definit în mod specific aici, terminologia folosită aici este dată în sensul său adevărat precum este cunoscută în domeniul relevant.

Aşa cum este folosită aici, forma singulară "un/o", "o/un", şi "cele/cei/cel/cea" include referinţele plurale cu excepţia cazului când se indică astfel. De exemplu, ”un” substituent include unul sau mai mulţi substituenţi.

"Alchil" se referă la un radical hidrocarbonic alifatic monovalent, saturat ce include grupări cu catena lineară şi catena ramificată, având numărul specificat de atomi de carbon. Substituenţii alchil conţin în mod tipic de la 1 la 20 atomi de carbon (“C1-C20 alchil”), preferabil de la 1 la 12 atomi de carbon (“C1-C12 alchil”), mai preferabil de la 1 la 8 atomi de carbon (“C1-C8 alchil”), sau de la 1 la 6 atomi de carbon (“C1-C6 alchil”), sau de la 1 la 4 atomi de carbon (“C1-C4 alchil”). Exemplele de grupări alchil includ metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, izo-butil, terţ-butil, n-pentil, izopentil, neopentil, n-hexil, n-heptil, n-octil şi altele asemenea. Grupările alchil pot fi substituite sau nesubstituite. În particular, cu excepţia cazului când este specificat altfel, grupările alchil pot fi substituite cu una sau mai multe grupări halo, până la numărul total de atomi de hidrogen prezenţi în fragmentul alchil. Prin urmare, C1-C4 alchil include grupările alchil halogenate, şi în particular grupările alchil fluorurate, având de la 1 la 4 atomi de carbon, de ex., trifluorometil sau difluoroetil (adică, CF3 şi -CH2CHF2).

Grupările alchil descrise aici ca substituite opţional pot fi substituite cu una sau mai multe grupuri de substituenţi, care sunt selectate independent cu excepţia cazului când se indică altfel. Numărul total al grupelor de substituenţi poate fi egal cu numărul total de atomi de hidrogen în fragmentul alchil, în măsura în care substituţia are sens chimic. Grupările alchil substituite opţional conţin în mod tipic de la 1 la 6 substituenţi opţionali, uneori de la 1 la 5 substituenţi opţionali, preferabil de la 1 la 4 substituenţi opţionali, sau mai preferabil de la 1 la 3 substituenţi opţionali.

Grupele de substituenţi opţionali potriviţi pentru alchil includ, dar nu sunt limitate la C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri,C6-C12 aril şi heteroaril cu 5-12 membri, halo, =O (oxo), =S (tiono), =N-CN, =N-ORX, =NRX, -CN, -C(O)Rx, -CO2Rx, -C(O)NRxRy, -SRx, -SORx, -SO2Rx, -SO2NRxRy, -NO2, -NRxRy, -NRxC(O)Ry, -NRxC(O)NRxRy, -NRxC(O)ORx, -NRxSO2Ry, -NRxSO2NRxRy, -ORx, -OC(O)Rx şi -OC(O)NRxRy; unde fiecare Rx şi Ry este independent H, C1-C8 alchil, C1-C8 acil, C2-C8 alchenil, C2-C8 alchinil, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri, C6-C12 aril, sau heteroaril cu 5-12 membri, sau Rx şi Ry pot fi luaţi împreună cu atomul de N la care ei sunt ataşaţi pentru a forma un heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri, fiecare conţinând opţional 1, 2 sau 3 heteroatomi suplimentari selectaţi dintre O, N şi S; fiecare Rx şi Ry este substituit opţional cu de la 1 la 3 substituenţi selectaţi independent din grupul ce constă din halo, =O, =S, =N-CN, =N-OR', =NR', -CN, -C(O)R', -CO2R', -C(O)NR'2, -SR', -SOR', -SO2R', -SO2NR'2, -NO2, -NR'2, -NR'C(O)R', -NR'C(O)NR'2, -NR'C(O)OR', -NR'SO2R', -NR'SO2NR'2, -OR', -OC(O)R' şi -OC(O)NR'2, unde fiecare R' este independent H, C1-C8 alchil, C1-C8 acil, C2-C8 alchenil, C2-C8 alchinil, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri, C6-C12 aril, sau C5-C12 heteroaril; şi unde fiecare C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri, C6-C12 aril şi heteroaril cu 5-12 membri menţionat este substituit opţional aşa cum este definit în continuare aici.

Grupele de substituenţi tipici în alchil includ halo, -OH, C1-C4 alcoxi, -O-C6-C12 aril, -CN, =O, -COORx, -OC(O)Rx, -C(O)NRxRy, -NRxC(O)Ry, -NRxRy, C3-C8 cicloalchil, C6-C12 aril, heteroaril cu 5-12 membri şi heterociclil cu 3-12 membri; unde fiecare Rx şi Ry este independent H sau C1-C4 alchil, sau Rx şi Ry pot fi luaţi împreună cu N la care ei sunt ataşaţi pentru a forma un inel heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri, fiecare conţinând opţional 1, 2 sau 3 heteroatomi suplimentari selectaţi dintre O, N şi S; unde fiecare C3-C8 cicloalchil, C6-C12 aril, heteroaril cu 5-12 membri şi heterociclil cu 3-12 membri menţionat este substituit opţional prin 1 la 3 substituenţi selectaţi independent din grupul ce constă din halo, -OH, =O, C1-C4 alchil, C1-C4 alcoxi, C1-C6 haloalchil, C1-C6 hidroxialchil, C1-C4 alcoxi-C1-C6 alchil, -CN, -NH2, -NH(C1-C4 alchil), şi -N(C1-C4 alchil)2.

În unele exemple, alchil este substituit opţional cu unul sau mai mulţi substituenţi, şi preferabil prin 1 la 3 substituenţi, care sunt selectaţi independent din grupul ce constă din halo, -OH, C1-C4 alcoxi, -O-C6-C12 aril, -CN, =O, -COORx, -OC(O)Rx, -C(O)NRxRy, -NRxC(O)Ry, -NRxRy, C3-C8 cicloalchil, C6-C12 aril, heteroaril cu 5-12 membri şi heterociclil cu 3-12 membri; unde fiecare Rx şi Ry este independent H sau C1-C4 alchil, sau Rx şi Ry pot fi luaţi împreună cu N la care ei sunt ataşaţi pentru a forma un inel heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri, fiecare conţinând opţional 1, 2 sau 3 heteroatomi suplimentari selectaţi dintre O, N şi S; şi fiecare C3-C8 cicloalchil, C6-C12 aril, heteroaril cu 5-12 membri şi heterociclil cu 3-12 membri menţionat este substituit opţional prin 1 la 3 substituenţi selectaţi independent din grupul ce constă din halo, -OH, =O, C1-C4 alchil, C1-C4 alcoxi, C1-C6 haloalchil, C1-C6 hidroxialchil, C1-C4 alcoxi-C1-C6 alchil, -CN, -NH2, -NH(C1-C4 alchil) şi -N(C1-C4 alchil)2.

În alte exemple, alchil este substituit opţional cu unul sau mai mulţi substituent, şi preferabil prin 1 la 3 substituenţi, independent selectaţi din grupul ce constă din halo, -OH, C1-C4 alcoxi, -CN, -NRxRy, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri, C6-C12 aril şi heteroaril cu 5-12 membri; unde fiecare Rx şi Ry este independent H sau C1-C4 alchil, sau Rx şi Ry pot fi luaţi împreună cu N la care ei sunt ataşaţi pentru a forma un inel heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri, fiecare conţinând opţional 1, 2 sau 3 heteroatomi suplimentari selectaţi dintre O, N şi S; şi unde fiecare cicloalchil, heterociclil, aril sau heteroaril menţionat este substituit opţional prin 1 la 3 substituenţi selectaţi independent din grupul ce constă din halo, -OH, =O, C1-C4 alchil, C1-C4 alcoxi, C1-C6 haloalchil, C1-C6 hidroxialchil, C1-C4 alcoxi-C1-C6 alchil, -CN, -NH2, -NH(C1-C4 alchil) şi -N(C1-C4 alchil)2.

În anumite împrejurări, grupările alchil substituite pot fi numite specific cu referinţă la grupul substituent. De exemplu, “haloalchil” se referă la un grup alchil, având numărul specificat de atomi de carbon care este substituit cu unul sau mai mulţi substituenţi halo, şi conţin în mod tipic 1-6 atomi de carbon şi 1, 2 sau 3 atomi halo (adică, “C1-C6 haloalchil”) sau uneori 1-4 atomi de carbon şi 1, 2 sau 3 atomi halo (adică, “C1-C4 haloalchil”). Prin urmare, un C1-C4 grup haloalchil include trifluorometil (-CF3) şi difluorometil (-CF2H). Mai exact, grupările alchil fluorurate pot fi referite în mod specific la fluorogrupările alchil, de ex., C1-C6 sau C1-C4 fluorogrupările alchil.

Similar, “hidroxialchil” se referă la un grup alchil, având numărul specificat de atomi de carbon care este substituit cu unul sau mai mulţi hidroxi substituenţi, şi conţin în mod tipic 1-6 atomi de carbon şi 1, 2 sau 3 hidroxi (adică, “C1-C6 hidroxialchil”). Prin urmare, C1-C6 hidroxialchil include hidroximetil (-CH2OH) şi 2-hidroxietil (-CH2CH2OH).

“Alcoxialchil” se referă la un grup alchil, având numărul specificat de atomi de carbon care este substituit cu unul sau mai mulţi alcoxi substituenţi. Grupările alcoxialchil conţin în mod tipic 1-6 atomi de carbon în porţiunea alchil şi sunt substituite prin 1, 2 sau 3 C1-C4 substituenţi alchiloxi. Astfel de grupări sunt uneori descrise aici ca C1-C4 alchiloxi-C1-C6 alchil.

“Aminoalchil” se referă la grup alchil, având numărul specificat de atomi de carbon care este substituit cu una sau mai multe grupe amino substituite sau nesubstituite, precum astfel de grupări sunt în continuare definite aici. Grupările aminoalchil conţin în mod tipic 1-6 atomi de carbon în porţiunea alchil şi sunt substituite prin 1, 2 sau 3 amino substituenţi. Prin urmare, un grup aminoalchil C1-C6 include, de exemplu, aminometil (-CH2NH2), N,N-dimetilamino-etil (-CH2CH2N(CH3)2), 3-(N-ciclopropilamino)propil (-CH2CH2CH2NH-cPr) şi N-pirolidiniletil (-CH2CH2-N-pirolidinil).

"Alchenil" se referă la un grup alchil, precum este definit aici, ce constă din cel puţin doi atomi de carbon şi cel puţin o legătură dublă carbon-carbon. Tipic, grupele alchenil au de la 2 până la 20 atomi de carbon (“C2-C20 alchenil”), preferabil de la 2 la 12 atomi de carbon (“C2-C12 alchenil”), mai preferabil de la 2 la 8 atomi de carbon (“C2-C8 alchenil”), sau de la 2 la 6 atomi de carbon (“C2-C6 alchenil”), sau de la 2 la 4 atomi de carbon (“C2-C4 alchenil”). Exemplele reprezentative includ, dar nu sunt limitate la, etenil, 1-propenil, 2-propenil, 1-, 2-, sau 3-butenil, şi altele asemenea. Grupele alchenil pot fi nesubstituite sau substituite de aceleaşi grupe care sunt descrise aici ca potrivite pentru alchil.

"Alchinil" se referă la un grup alchil, precum este definit aici, ce constă din cel puţin doi atomi de carbon şi cel puţin o legătură triplă carbon-carbon. Grupele alchinil au de la 2 până la 20 atomi de carbon (“C2-C20 alchinil”), preferabil de la 2 la 12 atomi de carbon (“C2-C12 alchinil”), mai preferabil de la 2 la 8 atomi de carbon (“C2-C8 alchinil”), sau de la 2 la 6 atomi de carbon (“C2-C6 alchinil”), sau de la 2 la 4 atomi de carbon (“C2-C4 alchinil”). Exemplele reprezentative includ, dar nu sunt limitate la, etinil, 1-propinil, 2-propinil, 1-, 2-, sau 3-butinil, şi altele asemenea. Grupele alchinil pot fi nesubstituite sau substituite de aceleaşi grupe care sunt descrise aici ca potrivite pentru alchil.

"Alchilenă" aşa cum este folosită aici se referă la un radical de hidrocarbură divalent, având numărul specificat de atomi de carbon care poate lega alte două grupe împreună. Uneori el se referă la un grup -(CH2)n- unde n este 1-8, şi preferabil n este 1-4. În cazurile în care este specificat, o alchilenă poate de asemenea fi substituită prin alte grupe şi poate include unul sau mai multe grade de nesaturare (adică, o unitate alchenilenă sau alchinilenă) sau inele. Valenţele libere ale unei alchilene nu trebuie să fie la capetele opuse ale catenei. Prin urmare grupele alchilenă ramificate precum -CH(Me) - şi -C(Me)2- sunt de asemenea inlcuse în domeniul de aplicare al termenului `alchilene`, cum sunt grupele ciclice precum ciclopropan-1,1-diil şi grupele nesaturate precum etilen (-CH=CH-) sau propilen (-CH2-CH=CH-). Când un grup alchilenă este descris ca substituit opţional, substituenţii îi includ pe cei tipic prezenţi în grupările alchil precum este descris aici.

"Heteroalchilenă" se referă la un grup alchilenă precum este descris mai sus, unde unul sau mai mulţi atomi de carbon neînvecinaţi din catena alchilenică sunt înlocuiţi prin -N(R)-, -O- sau -S(O)q-, unde R este H sau C1-C4 alchil şi q este 0-2. De exemplu, grupul -O-(CH2)1-4- este un grup 'C2-C5'-heteroalchilenă, unde unul din atomii de carbon al alchenei corespunzătoare este înlocuit prin O.

“Alcoxi” se referă la un grup monovalent -O-alchil, unde porţiunea alchil are numărul specificat de atomi de carbon. Grupele alcoxi conţin în mod tipic de la 1 la 8 atomi de carbon (“C1-C8 alcoxi”), sau de la 1 la 6 atomi de carbon (“C1-C6 alcoxi”), sau de la 1 la 4 atomi de carbon (“C1-C4 alcoxi”). De exemplu, C1-C4 alcoxi include -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -OC(CH3)3, şi altele asemenea. Astfel de grupări pot de asemenea fi referite aici ca metoxi, etoxi, izopropoxi, terţ-butiloxi, etc. Grupele alcoxi pot fi nesubstituite sau substituite pe porţiunea alchil de aceleaşi grupe care sunt descrise aici ca potrivite pentru alchil. În particular, grupele alcoxi pot fi substituite cu una sau mai multe grupări halo, până la numărul total de atomi de hidrogen prezent pe porţiunea alchil. Prin urmare, C1-C4 alcoxi include grupe alcoxi halegenate, de ex., trifluorometoxi şi 2,2-difluoroetoxi (adică, -OCF3 şi -OCH2CHF2). În anumite împrejurări, astfel de grupări pot fi referite aici ca grupe “haloalcoxi” (sau, ca fluorinate, mai exact ca “fluoroalcoxi”), având numărul specificat de atomi de carbon şi substituite cu unul sau mai mulţi substituenţi halo, şi conţin în mod tipic 1-6 atomi de carbon şi 1, 2 sau 3 atomi halo (adică, “C1-C6 haloalcoxi”) sau uneori 1-4 atomi de carbon şi 1, 2 sau 3 atomi halo (adică, “C1-C4 haloalcoxi”). Prin urmare, un grup C1-C4 haloalcoxi include trifluorometoxi (-OCF3) şi difluorometoxi (-OCF2H). Mai exact, grupările alchil fluorurate pot fi referite în mod specific ca fluorogrupe alcoxi, de ex., fluorogrupe alcoxi C1-C6 sau C1-C4.

Similar, “tioalcoxi” se referă la un grup monovalent -S-alchil, unde porţiunea alchil are numărul specificat de atomi de carbon, şi pot fi substituiţi opţional pe porţiunea alchil de aceleaşi grupe care sunt descrise aici ca potrivite pentru alchil. De exemplu, un C1-C4 tioalcoxi include -SCH3 şi -SCH2CH3.

"Cicloalchil" se referă la un sistem carbociclic nearomatic, saturat sau parţial nesaturat ce conţine numărul specificat de atomi de carbon, care poate fi un sistem monociclic, biciclic sau policiclic izolat sau condensat care este conectat la molecula de bază printr-un atom de carbon al inelului cicloalchil. Tipic, grupările cicloalchil conform invenţiei conţin de la 3 la 12 atomi de carbon (“C3-C12 cicloalchil”), preferabil de la 3 la 8 atomi de carbon (“C3-C8 cicloalchil”). Exemplele reprezentative includ, de ex., ciclopropan, ciclobutan, ciclopentan, ciclopentena, ciclohexan, ciclohexena, ciclohexadiena, cicloheptan, cicloheptatriena, adamantan, şi altele asemenea. Grupările cicloalchil pot fi nesubstituite sau substituite de aceleaşi grupe care sunt descrise aici ca potrivite pentru alchil.

Exemplele ilustrative de exemple cicloalchil includ, dar nu sunt limitate la, următoarele:

"Cicloalchilalchil" poate fi utilizat pentru a descrie un inel cicloalchil, tipic un C3-C8 cicloalchil, care este conectat la molecula de bază printr-un element de legătură alchilenic, tipic o C1-C4 alchilenă. Grupările cicloalchil sunt descrise prin numărul total de atomi de carbon în inelul carbociclic şi element de legătură, şi conţin în mod tipic de la 4 la 12 atomi de carbon (“C4-C12 cicloalchilalchil”). Prin urmare un grup ciclopropilmetil este un grup C4-cicloalchilalchil şi un ciclohexiletil este un C8-cicloalchilalchil. Grupările cicloalchil pot fi nesubstituite sau substituite pe porţiunea cicloalchil şi/sau alchilenă de aceleaşi grupe care sunt descrise aici ca potrivite pentru grupările alchil.

Termenii "heterociclil", "heterociclic" sau “heteroaliciclic” pot fi folosiţi interschimbabil aici pentru a se referi la un sistem ciclic nearomatic, saturat sau parţial nesaturat ce conţine numărul specificat de atomi în inel, ce include cel puţin un heteroatom selectat dintre N, O şi S ca un membru al inelului, unde inelul heterociclic este conectat la molecula de bază printr-un atom din inel, care poate fi C sau N. Inelele heterociclice pot fi condensate la unul sau mai multe inele heterociclice sau carbociclice, inele condensate care pot fi saturate, parţial nesaturate sau aromatice. Preferabil, inelele heterociclice conţin de la 1 la 4 heteroatomi selectaţi dintre N, O, şi S ca membri ai inelului, şi mai preferabil de la 1 la 2 heteroatomi în inel, cu condiţia că astfel de inele nu conţin doi atomi de oxigen învecinaţi. Grupele heterociclil pot fi nesubstituite sau substituite de aceleaşi grupe care sunt descrise aici ca potrivite pentru alchil, aril sau heteroaril. În plus, atomii de N din inel pot fi substituiţi opţional prin grupe potrivite pentru o amină, de ex., substituenţi alchil, acil, carbamoil, sulfonil, etc., şi atomii de S din inel pot fi substituiţi opţional prin una sau două grupe oxo (adică, S(O)q, unde q este 0, 1 sau 2).

Heterociclii preferaţi includ grupe heterociclilii cu 3-12 membri în concordanţă cu definiţia de aici.

Exemplele ilustrative de grupe heterociclice nesaturate includ, dar nu sunt limitate la:

Exemplele ilustrative de grupe heterociclice izolate sau condensate includ, dar nu sunt limitate la:

Exemplele ilustrative de grupe heterociclice saturate includ, dar nu sunt limitate la:

În exemplele frecvente de realizare, grupele heterociclice conţin 3-12 membri în inel, inclusiv ambii atomii de carbon şi heteroatomii necarbonici, şi preferabil 4-6 membri în inel. În anumite exemple, grupele de substituenţi ce conţin heterocicli cu 3-12 membri sunt selectate din grupul ce constă din azetidinil, pirolidinil, piperidinil, piperazinil, morfolinil şi tiomorfolinil, fiecare dintre care poate fi substituit opţional în măsura în care asemenea substituţie are sens chimic. În alte exemple, grupele de substituenţi ce conţin heterocicli cu 3-12 membri sunt selectate din grupul ce constă din oxetanil, tetrahidrofuranil şi tetrahidropiranil, fiecare dintre care poate fi substituit opţional în măsura în care asemenea substituţie are sens chimic. În exemplele particulare, heterociclul cu 3-12 membri menţionat este oxetanil, substituit opţional în măsura în care asemenea substituţie are sens chimic.

Se înţelege că nu mai mult decât doi atomi N, O sau S sunt în mod obişnuit conectaţi secvenţial cu excepţia cazului când un grup oxo este ataşat la N sau S formând un grup nitro sau sulfonil, sau în cazul anumitor inele heteroaromatice, precum triazina, triazol, tetrazol, oxadiazol, tiadiazol, şi altele asemenea.

Termenul "heterociclilalchil" poate fi utilizat pentru a descrie un grup heterociclic cu mărimea specificată care este conectat la molecula de bază printr-un element de legătură alchilenic cu pulmonariimea specificată. Tipic, astfel de grupări conţin un heterociclu cu 3-12 membri substituit opţional ataşat la molecula de bază printr-un element de legătură C1-C4 alchilenic. În cazul când acest lucru este indicat, astfel de grupări pot fi substituite opţional pe porţiunea alchilenică de aceleaşi grupe care sunt descrise aici ca potrivite pentru grupările alchil şi pe porţiunea heterociclică prin grupe descrise ca potrivite pentru inelele heterociclice.

"Aril" sau “aromatic” se referă la un sistem monociclic, biaril sau biciclic sau policiclic condensat, având caracteristicile binecunoscute ale aromaticităţii, unde cel puţin un inel conţine un sistem complet conjugat de electroni-pi. Tipic, grupele aril conţin de la 6 la 20 atomi de carbon ("C6-C20 aril") ca membri ai inelului, preferabil de la 6 la 14 atomi de carbon ("C6-C14 aril") sau mai preferabil, de la 6 la 12 atomi de carbon ("C6-C12 aril"). Grupele aril condensate pot include un inel aril (de ex., un inel fenil) condensat la un alt inel aril, sau condensat la un inel carbociclic saturat sau nesaturat sau heterociclic. Puctul de ataşare la molecula de bază pe un asemenea sistem ciclic condensat poate fi un atom de C al porţiunii aromatice sau un atom de C sau N al porţiunii nearomatice a sistemului ciclic. Exemplele, fără limitare, de grupe aril includ fenil, bifenil, naftil, antracenil, fenantrenil, indanil, indenil, şi tetrahidronaftil. Grupul aril poate fi nesubstituit sau substituit precum este descris în continuare aici.

Similar, "heteroaril" sau “heteroaromatic” se referă la sistemele monociclice, heterobiaril sau biciclice sau policiclice condensate, având caracteristicile binecunoscute ale aromaticităţii care conţin numărul specificat de atomi în inel şi includ cel puţin un heteroatom selectat dintre N, O şi S ca un membru al inelului într-un inel aromatic. Incluziunea unui heteroatom permite aromaticitatea în inelele cu 5 membri precum şi inelele cu 6 membri. Tipic, heterogrupele aril conţin de la 5 la 20 atomi în inel (“heteroaril cu 5-20 membri”), preferabil de la 5 la 14 atomi în inel (“heteroaril cu 5-14 membri”), şi mai preferabil de la 5 la 12 atomi în inel (“heteroaril cu 5-12 membri”). Inelele heteroaril sunt ataşate la molecula de bază printr-un atom din inelul heteroaromatic, astfel încât aromaticitatea este menţinută. Prin urmare, inelele heteroaril cu 6 membri pot fi ataşate la molecula de bază printr-un atom de C din inel, în timp ce inelele heteroaril cu 5 membri pot fi ataşate la molecula de bază prin atomul de C sau N din inel. Exemplele de grupe heteroaril nesubstituite deseori includ, dar nu sunt limitate la, pirol, furan, tiofen, pirazol, imidazol, izoxazol, oxazol, izotiazol, tiazole, triazol, oxadiazol, tiadiazol, tetrazol, piridina, piridazina, pirimidina, pirazina, benzofuran, benzotiofen, indol, benzimidazol, indazol, chinolina, izochinolina, purina, triazina, naftiridina şi carbazol. În exemplele preferate frecvent, grupele heteroaril cu 5- sau 6-membri sunt selectate din grupul ce constă din inele pirolil, furanil, tiofenil, pirazolil, imidazolil, izoxazolil, oxazolil, izotiazolil, tiazolil, triazolil, piridinil, pirimidinil, pirazinil şi piridazinil. Grupul heteroaril poate fi nesubstituit sau substituit precum este descris în continuare aici.

Fragmentele aril, heteroaril şi heterociclil descrise aici ca substituite opţional pot fi substituite cu una sau mai multe grupuri de substituenţi, care sunt selectate independent cu excepţia cazului când se indică altfel. Numărul total al grupelor de substituenţi poate fi egal cu numărul total de atomi de hidrogen pe fragmentul aril, heteroaril sau heterociclil, în măsura în care asemenea substituţie are sens chimic şi aromaticitatea este menţinută în cazul inelelor aril şi heteroaril. Grupele aril, heteroaril sau heteroaril substituite opţional conţin în mod tipic de la 1 la 5 substituenţi opţionali, uneori de la 1 la 4 substituenţi opţionali, preferabil de la 1 la 3 substituenţi opţionali, sau mai preferabil 1-3 substituenţi opţionali.

Grupele de substituenţi opţionali potriviţi pentru inelele aril, heteroaril şi heterociclil includ, dar nu sunt limitate la: C1-C8 alchil, C2-C8 alchenil, C2-C8 alchinil, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri, C6-C12 aril şi heteroaril cu 5-12 membri; şi halo, =O, -CN, -C(O)Rx, -CO2Rx, -C(O)NRxRy, - SRx, -SORx, -SO2Rx, -SO2NRxRy, -NO2, -NRxRy, -NRxC(O)Ry, -NRxC(O)NRxRy, -NRxC(O)ORx, -NRxSO2Ry, -NRxSO2NRxRy, -ORx, -OC(O)Rx şi -OC(O)NRxRy; unde fiecare Rx şi Ry este independent H, C1-C8 alchil, C1-C8 acil, C2-C8 alchenil, C2-C8 alchinil, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri, C6-C12 aril, sau heteroaril cu 5-12 membri, sau Rx şi Ry pot fi luaţi împreună cu atomul de N la care ei sunt ataşaţi pentru a forma un heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri, fiecare conţinând opţional 1, 2 sau 3 heteroatomi suplimentari selectaţi dintre O, N şi S; fiecare Rx şi Ry este substituit opţional cu de la 1 la 3 substituenţi selectaţi independent din grupul ce constă din halo, =O, =S, =N-CN, =N-OR', =NR', -CN, -C(O)R', -CO2R', -C(O)NR'2, -SR', -SOR', -SO2R', -SO2NR'2, -NO2, -NR'2, -NR'C(O)R', -NR'C(O)NR'2, -NR'C(O)OR', -NR'SO2R', -NR'SO2NR'2, -OR', -OC(O)R' şi -OC(O)NR'2, unde fiecare R' este independent H, C1-C8 alchil, C1-C8 acil, C2-C8 alchenil, C2-C8 alchinil, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri, C6-C12 aril, sau heteroaril cu 5-12 membri; şi fiecare menţionat C1-C8 alchil, C2-C8 alchenil, C2-C8 alchinil, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri, C6-C12 aril şi heteroaril cu 5-12 membri este substituit opţional aşa cum este definit în continuare aici.

În exemplele tipice, substituţia opţională în inele aril, heteroaril şi heterociclil include unul sau mai mulţi substituenţi, şi preferabil de la 1 la 3 substituenţi, independent selectaţi din grupul ce constă din halo, C1-C8 alchil, -OH, C1-C8 alcoxi, CN, =O, -C(O)Rx, -COORx, -OC(O)Rx, -C(O)NRxRy, -NRxC(O)Ry, -SRx, -SORx, -SO2Rx, -SO2NRxRy, -NO2, -NRxRy, -NRxC(O)Ry, -NRxC(O)NRxRy, -NRxC(O)ORy -NRxSO2Ry, -NRxSO2NRxRy, -OC(O)Rx, -OC(O)NRxRy, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri, C6-C12 aril, heteroaril cu 5-12 membri, -O-(C3-C8 cicloalchil), -O-(heterociclil cu 3-12 membri), -O-(C6-C12 aril) şi -O-(heteroaril cu 5-12 membri); unde fiecare Rx şi Ry este independent H sau C1-C4 alchil, sau Rx şi Ry pot fi luaţi împreună cu N la care ei sunt ataşaţi pentru a forma un inel heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri, fiecare conţinând opţional 1, 2 sau 3 heteroatomi suplimentari selectaţi dintre O, N şi S; şi unde fiecare menţionat C1-C8 alchil, C1-C8 alcoxi, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri, C6-C12 aril, heteroaril cu 5-12 membri, -O-(C3-C8 cicloalchil), -O-(heterociclil cu 3-12 membri), -O-(C6-C12 aril) şi -O-(heteroaril cu 5-12 membri) care este descris ca un substituent opţional sau este parte al Rx sau Ry este substituit opţional prin 1 la 3 substituenţi selectaţi independent din grupul ce constă din halo, -OH, =O, C1-C4 alchil, C1-C4 alcoxi, C1-C6 haloalchil, C1-C6 hidroxialchil, C1-C4 alcoxi-C1-C6 alchil, -CN, -NH2, -NH(C1-C4 alchil), -N(C1-C4 alchil)2 şi N-pirolidinil.

Exemplele ilustrative de grupe heteroaril monociclice includ, dar nu sunt limitate la:

Exemplele ilustrative de grupe heteroaril cu inele condensate includ, dar nu sunt limitate la:

Un grup ”arilalchil” se referă la un grup aril precum este descris aici care este legat la molecula de bază printr-o alchilenă sau element de legătură similar. Grupările arilalchil sunt descrise prin numărul total de atomi de carbon în inelul şi elementul de legătură. Prin urmare un grup benzil este un grup C7-arilalchil şi un feniletil este un C8-arilalchil. Tipic, grupările arilalchil conţin 7-16 atomi de carbon (“C7-C16 arilalchil”), unde porţiunea aril conţine 6-12 atomi de carbon şi porţiunea alchilenică conţine 1-4 atomi de carbon. Astfel de grupări pot de asemenea fi reprezentate ca -C1-C4 alchilenă-C6-C12 aril.

"Heteroarilalchil" se referă la un grup heteroaril precum este descris mai sus care este ataşat la molecula de bază printr-un element de legătură alchilenic, şi diferă de "arilalchil" prin aceea că cel puţin un atom din inel din fragmentul aromatic este un heteroatom selectat dintre N, O şi S. Grupările heteroarilalchil sunt uneori descrise aici conform numărulului total de atomi nonhidrogenici (adică, C, N, S şi O atomi) în inelul şi elementul de legătură combinaţi, excluzând grupele de substituenţi. Prin urmare, de exemplu, piridinilmetil poate fi referit aici ca un “C7”-heteroarilalchil. Tipic, grupările heteroarilalchil nesubstituite conţin 6-20 atomi nonhidrogenici (ce includ atomi de C, N, S şi O), unde porţiunea heteroaril conţine în mod tipic 5-12 atomi şi porţiunea alchilenică conţine în mod tipic 1-4 atomi de carbon. Astfel de grupări pot de asemenea fi reprezentate ca -C1-C4 alchilenă-heteroaril cu 5-12 membri.

Similar, “arilalcoxi” şi “heteroarilalcoxi” se referă la grupe aril şi heteroaril, ataşate la molecula de bază printr-un element de legătură heteroalchilenic (adică, -O-alchilenă-), unde grupele sunt descrise conform numărul total de atomi nonhidrogenici (adică, C, N, S şi O atomi) în inelul şi elementul de legătură combinaţi. Prin urmare, grupele -O-CH2-fenil şi -O-CH2-piridinil vor fi referite la grupele C8-arilalcoxi şi C8-heteroarilalcoxi, respectiv.

Când un grup arilalchil, arilalcoxi, heteroarilalchil sau heteroarilalcoxi este descris ca substituit opţional, substituenţii pot fi pe oricare porţiune a elementului de legătură bivalent sau pe porţiunea aril sau heteroaril al grupului. Substituenţii optionali prezenţi pe porţiunea alchilenică sau heteroalchilenică sunt aceeiaşi ca cei descrişi mai sus pentru grupele alchil sau alcoxi în general, în timp ce substituenţii optionali prezenţi pe porţiunea aril sau heteroaril sunt aceeiaşi ca cei descrişi mai sus pentru grupele aril sau heteroaril în general.

"Hidroxi" se referă la un grup -OH.

“Aciloxi” se referă la un grup monovalent -OC(O)alchil, unde porţiunea alchil are numărul specificat de atomi de carbon (tipic C1-C8, preferabil C1-C6 sau C1-C4) şi pot fi substituiţi opţional prin grupe potrivite pentru alchil. Prin urmare, C1-C4 aciloxi includ un substituent -OC(O)C1-C4 alchil, de ex., -OC(O)CH3.

“Acilamino” se referă la un grup monovalent, -NHC(O)alchil sau -NRC(O)alchil, unde porţiunea alchil are numărul specificat de atomi de carbon (tipic C1-C8, preferabil C1-C6 sau C1-C4) şi pot fi substituiţi opţional prin grupe potrivite pentru alchil. Prin urmare, C1-C4 acilamino include un substituent -NHC(O)C1-C4 alchil, de ex., -NHC(O)CH3.

“Ariloxi” sau “heteroariloxi” se referă la -O-aril sau -O-heteroaril substituit opţional, în fiecare caz când aril şi heteroaril sunt aşa cum este definit în continuare aici.

“Arilamino” sau “heteroarilamino” se referă la -NH-aril, -NR-aril, -NH-heteroaril sau -NR-heteroaril substituit opţional, în fiecare caz când aril şi heteroaril sunt aşa cum este definit în continuare aici şi R reprezintă un substituent potrivit pentru o amină, de ex., un grup alchil, acil, carbamoil sau sulfonil, sau altele asemenea.

"Ciano" se referă la un grup -C≡N.

"Amino nesubstituită" se referă la un grup -NH2. Când amino este descrisă ca substituită sau substituită opţional, termenul include grupe de tipul -NRxRy, unde fiecare sau Rx şi Ry este independent H, alchil, alchenil, alchinil, cicloalchil, heterociclil, acil, tioacil, aril, heteroaril, cicloalchilalchil, arilalchil sau heteroarilalchil, în fiecare caz, având numărul specificat de atomi şi substituit opţional precum este descris aici. De exemplu, “alchilamino” se referă la un grup -NRxRy, unde unul din Rx şi Ry este un fragment alchil şi altul este H, şi “dialchilamino” se referă la -NRxRy unde ambii din Rx şi Ry sunt fragmente alchil, unde fragmentele alchil având numărul specificat de atomi de carbon (de ex., -NH-C1-C4 alchil sau -N(C1-C4 alchil)2). Tipic, substituenţii alchil în amina conţin de la 1 la 8 atomi de carbon, preferabil de la 1 la 6 atomi de carbon, sau mai preferabil de la 1 la 4 atomi de carbon. Termenul also include forme unde Rx şi Ry luaţi împreună cu atomul de N la care ei sunt ataşaţi pentru a forma un inel heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri, fiecare din acestea poate fi el singur substituit opţional precum este descris aici pentru inelele heterociclil sau heteroaril, şi care poate conţine de la 1 la 3 heteroatomi suplimentari selectaţi dintre N, O şi S ca membri ai inelului, cu condiţia că asemenea inele nu conţin doi atomi de oxigen învecinaţi.

“Halogen” sau “halo” se referă la fluoro, cloro, bromo şi iodo (F, Cl, Br, I). Preferabil, halo se referă la fluoro sau cloro (F sau Cl).

"Heteroform" este uneori folosit aici pentru a se referi la un derivat al unui grup precum, de ex., un alchil, aril, sau acil, unde cel puţin un atom de carbon al grupei carbociclice desemnate a fost înlocuit printr-un heteroatom selectat dintre N, O şi S. Prin urmare heteroformele pentru alchil, alchenil, alchinil, acil, aril, şi arilalchil sunt heteroalchil, heteroalchenil, heteroalchinil, heteroacil, heteroaril, şi heteroarilalchil, respectiv. Se înţelege că nu mai mult decât doi N, O sau S atomi sunt în mod obişnuit conectaţi secvenţial, cu excepţia cazului când un grup oxo este ataşat la N sau S formând un grup nitro sau sulfonil.

"Optional" sau "în mod opţional" înseamnă că circumstanţa sau evenimentul descris subsecvent poate, dar nu trebuie să decurgă, şi descrierea include exemple unde evenimentul sau circumstanţa se produce şi exemple în care nu.

Termenii “substituit opţional” şi “substituit sau nesubstituit” pot fi folosiţi interschimbabil pentru a indica că grupul particular descris poate să nu aibă substituenţi nonhidrogenici (adică, nesubstituiţi), sau grupul poate avea unul sau mai mulţi substituenţi nonhidrogenici (adică, substituiţi). În cazul în care nu se specifică altfel, numărul total de substituenţi care poate fi prezent este egal cu numărul de atomi de H prezent în forma nesubstituită al grupului descris, în măsura în care asemenea substituţie are sens chimic. Când un substituent opţional este ataşat printr-o legătură dublă, precum un substituent oxo (=O), grupul ocupă două valenţe disponibile, deci numărul total al altor substituenţi care pot fi incluşi este redus cu doi. În cazul când substituenţii opţionali sunt selectaţi independent dintr-o listă de alternative, grupa selectată poate fi aceeaşi sau diferită.

Într-un exemplu, invenţia prezintă un compus cu formula (I):

(I),

sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia,

unde:

R1 este selectat din grupul ce constă din H, F, C1-C4 alchil, C1-C4 alcoxi, C(O)R5, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri şi heteroaril cu 5-12 membri, unde fiecare C1-C4 alchil sau C1-C4 alcoxi menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6, şi fiecare C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7;

R2 este H, F sau C1-C4 alchil;

L este o legătură sau o C1-C4 alchilenă;

R3 este selectat din grupul ce constă din C1-C4 alchil, C1-C4 alcoxi, OH, CN, C(O)R8, COOR9, NR10R11, OR12, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri şi heteroaril cu 5-12 membri, unde fiecare C1-C4 alchil sau C1-C4 alcoxi menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6, şi fiecare C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7;

R4 este H, halo sau C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6;

R5 este C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14;

fiecare R6 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi;

fiecare R7 este independent C1-C4 alchil, OH, F, CN, C1-C4 alcoxi, =O sau C(O)R13;

R8 este C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14;

R9 este H sau C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14;

R10 şi R11 sunt independent H sau C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14;

R12 este selectat din grupul ce constă din C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri şi heteroaril cu 5-12 membri, unde fiecare C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7;

fiecare R13 este independent C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R15;

fiecare R14 şi R15 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi; şi

X şi Z sunt independent C1-C4 alchil, C1-C4 fluoroalchil, C1-C4 alcoxi sau C1-C4 fluoroalcoxi.

În unele exemple, compusul cu formula (I) are stereochimia absolută a atomului de carbon alăturat la substituenţii R1 şi R2 precum este arătat în Formula (I-A) sau (I-B):

sau

(I-A) (I-B)

sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia,

unde:

R1, R2, L, R3, R4, X şi Z sunt definiţi ca pentru Formula (I).

Fiecare din aspectele sau exemplele descrise aici cu privire la Formula (I) este de asemenea aplicabil la compuşii cu formula (I-A) sau (I-B).

În exemplele frecvente de realizare cu formula (I), R2 este H.

În exemplele frecvente de realizare cu formula (I), R4 este H, Cl, Br, F sau CH3. În unele asemenea exemple concrete, R4 este H sau Cl. În unele exemple, R4 este H. În alte exemple, R4 este Cl. În exemplele suplimentare, R4 este Cl sau Br.

În compuşii cu formula (I), X şi Z sunt independent C1-C4 alchil, C1-C4 fluoroalchil, C1-C4 alcoxi sau C1-C4 fluoroalcoxi. În unele exemple, Z este C1-C4 alchil, de exemplu CH3 sau C2H5 (adică, metil sau etil). În unele exemple, X este C1-C4 alchil, C1-C4 fluoroalchil, C1-C4 alcoxi. În exemplele specifice, X este CH3, OCH3 sau OCHF2 (adică, metil, metoxi sau difluorometoxi). În exemplele suplimentare, X este CH3, OCH3 sau OCHF2, şi Z este CH3.

În unele exemple cu formula (I), R1 este H sau F.

În alte exemple cu formula (I), R1 este C1-C4 alchil sau C1-C4 alcoxi, fiecare substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6. În unele asemenea exemple concrete, alchilul sau alcoxilul menţionat este substituit prin cel puţin un OH sau CN. În exemplele specifice, R1 este CH3, C2H5, CH2OH, CH2CH2OH, CH(OH)CH3 sau CH2CN (adică, metil, etil, hidroximetil, 2-hidroxietil, 1-hidroxietil sau cianometil). În alte exemple specifice, R1 este OCH3 (adică, metoxi).

În alte exemple cu formula (I), R1 este C(O)R5, unde R5 este C1-C4 alchil substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14. În unele asemenea exemple concrete, R5 este C1-C4 alchil substituit opţional prin OH. În exemplele specifice, R5 este CH3, CH2OH, CH2CH2OH sau CH(CH3)OH astfel încât R1 este C(O)CH3, C(O)CH2OH, C(O)CH2CH2OH sau C(O)CH(CH3)OH (adică, acetil, α-hidroxiacetil, 3-hidroxipropionil sau 2-hidroxipropionil).

În conformitate cu alte exemple suplimentare cu formula (I), R1 este C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri, unde fiecare C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7.

În unele asemenea exemple concrete, R1 este C3-C8 cicloalchil substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7. În unele asemenea exemple concrete, R1 este ciclopropil, ciclobutil, ciclopentil sau ciclohexil, fiecare substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7.

În alte exemple, R1 este heterociclil cu 3-12 membri substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7. În unele asemenea exemple concrete, heterociclil cu 3-12 membri menţionat este selectat din grupul ce constă din tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil, tetrahidrotiofenil, tetrahidrotiopiranil, pirolidinil, piperidinil şi morfolinil, fiecare substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7. În alte astfel de exemple, heterociclil cu 3-12 membri menţionat este selectat din grupul ce constă din oxetanil, tetrahidrofuranil şi tetrahidropiranil, fiecare substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7. În exemplele specifice, heterociclil cu 3-12 membri menţionat este oxetanil substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7. În unele asemenea exemple concrete, oxetanil menţionat este nesubstituit.

În conformitate cu alte astfel de exemple, R1 este heteroaril cu 5-12 membri, unde fiecare heteroaril cu 5-12 membri menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7. În unele asemenea exemple concrete, R1 este un heteroaril cu 5- sau 6 membri. În exemplele specifice, heteroaril cu 5- sau 6 membri menţionat este selectat din grupul ce constă din grupe pirazolil, imidazolil, izoxazolil, oxazolil, izotiazolil, tiazolil, şi triazolil, fiecare substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7.

În anumite exemple, când R1 este C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri, fiecare R7 este independent CH3, OH, F, CN, OCH3, =O sau C(O)R13, unde R13 este CH3 sau C2H5 fiecare substituit opţional prin OH (de ex., R13 este CH3, CH2OH, CH2CH2OH sau CH(CH3)OH.

În compuşii cu formula (I), L este o legătură sau o C1-C4 alchilenă. În unele exemple cu formula (I), L este o legătură. În alte exemple cu formula (I), L este o C1-C4 alchilenă. În exemplele specifice, L este un metilen sau etilen.

În compuşii cu formula (I), R3 este selectat din grupul ce constă din C1-C4 alchil, C1-C4 alcoxi, OH, CN, C(O)R8, COOR9, NR10R11, OR12, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri şi heteroaril cu 5-12 membri, unde fiecare C1-C4 alchil sau C1-C4 alcoxi menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6, şi fiecare C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7.

În unele exemple, R3 este C1-C4 alchil, C1-C4 alcoxi sau heterociclil cu 3-12 membri, fiecare substituit opţional precum este descris mai sus. În unele exemple, R3 este C1-C4 alchil sau C1-C4 alcoxi, În particular CH3 sau OCH3 (adică, metil sau metoxi).

În exemplele suplimentare, R3 este heterociclil cu 3-12 membri substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7. În unele asemenea exemple concrete, heterociclil cu 3-12 membri menţionat este selectat din grupul ce constă din tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil, tetrahidrotiofenil, tetrahidrotiopiranil, pirolidinil, piperidinil şi morfolinil, fiecare substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7. În alte astfel de exemple, heterociclil cu 3-12 membri menţionat este selectat din grupul ce constă din oxetanil, tetrahidrofuranil şi tetrahidropiranil, fiecare substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7. În exemplele specifice, heterociclil cu 3-12 membri menţionat este oxetanil, substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7. În unele asemenea exemple concrete, oxetanil menţionat este nesubstituiţi.

În exemplele suplimentare, L este o legătură şi R3 este C1-C4 alchil, C1-C4 alcoxi sau heterociclil cu 3-12 membri, fiecare substituit opţional precum este descris mai sus. În exemplele specifice, L este o legătură şi R3 este C1-C4 alchil sau C1-C4 alcoxi, În particular CH3 sau OCH3 (adică, metil sau metoxi).

În mai multe exemple suplimentare, L este o legătură şi R3 este heterociclil cu 3-12 membri substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7. În unele asemenea exemple concrete, L este o legătură şi heterociclil cu 3-12 membri menţionat este selectat din grupul ce constă din tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil, tetrahidrotiofenil, tetrahidrotiopiranil, pirolidinil, piperidinil şi morfolinil, fiecare substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7. În alte astfel de exemple, L este o legătură şi heterociclil cu 3-12 membri menţionat este selectat din grupul ce constă din oxetanil, tetrahidrofuranil şi tetrahidropiranil, fiecare substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7. În exemplele specifice, L este o legătură şi heterociclil cu 3-12 membri menţionat este oxetanil, substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7. În unele asemenea exemple concrete, oxetanil menţionat este nesubstituit.

În alte astfel de exemple, L este a C1-C4 alchilenă şi R3 este C1-C4 alchil, C1-C4 alcoxi sau heterociclil cu 3-12 membri, fiecare substituit opţional precum este descris mai sus.

În conformitate cu alte exemple suplimentare, R3 este OH, CN, C(O)R8 sau COOR9, unde R8 este C1-C4 alchil substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14, şi R9 este H sau C1-C4 alchil substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14.

În unele asemenea exemple concrete, L este o legătură şi R3 este OH, CN, C(O)R8 sau COOR9, unde R8 şi R9 sunt descrişi ca mai sus.

În alte exemple, L este o C1-C4 alchilenă şi R3 este OH, CN, C(O)R8 sau COOR9, unde R8 şi R9 sunt descrişi ca mai sus. În exemplele specifice, L este o C1-C4 alchilenă, de exemplu metilen sau etilen, şi R3 este OH sau CN.

În exemplele suplimentare, R3 este OR12, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri, unde fiecare C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7, şi unde R12 este C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri, fiecare substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7.

În unele asemenea exemple concrete, L este o legătură şi R3 este OR12, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri, precum este descris mai sus. În alte astfel de exemple, L este a C1-C4 alchilenă şi R3 este OR12, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri, precum este descris mai sus.

În compuşii cu formula (I), fiecare R6 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi. În exemplele frecvente de realizare, cel puţin un R6 este OH sau F.

În compuşii cu formula (I), fiecare R7 este independent C1-C4 alchil, OH, F, CN, C1-C4 alcoxi, =O sau C(O)R13. În unele exemple, cel puţin un R7 este C(O)R13, unde R13 este C1-C4 alchil şi C1-C4 alchil menţionat este în mod opţional substituit suplimentar cu unul sau mai mulţi R15. În alte exemple specifice, cel puţin un R7 este OH, F sau C1-C4 alchil, de ex., CH3.

În exemplele specifice, R1 şi/sau R3 este un heterociclil cu 3-12 membri substituit cu unul sau mai mulţi R7, unde cel puţin un R7 este C(O)R13, şi unde R13 este CH3, CH2OH sau CH2CN, astfel încât R7 este C(O)CH3, C(O)CH2OH sau C(O)CH2CN (adică, acetil, hidroxiacetil sau cianoacetil, respectiv).

În alte exemple specifice, R1 şi/sau R3 este un heterociclil cu 3-12 membri substituit cu unul sau mai mulţi R7, unde cel puţin un R7 este OH.

În compuşii cu formula (I), R8 este C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14.

În compuşii cu formula (I), R9 este H sau C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14. În unele asemenea exemple concrete, R9 este H. În alte astfel de exemple, R9 este C1-C4 alchil, substituit opţional precum este descris mai sus.

În compuşii cu formula (I), R10 şi R11 sunt independent H sau C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14.

Fiecare R14 şi R15 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi.

Într-un exemplu preferat, invenţia prezintă un compus cu formula (I), (I-A) sau (I-B), sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, unde:

R1 este heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri, unde fiecare heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7;

R2 este H;

L este C1-C4 alchilenă;

R3 este OH sau CN;

R4 este H sau Cl;

fiecare R7 este independent C1-C4 alchil, OH, F, CN, C1-C4 alcoxi, =O sau C(O)R13;

fiecare R13 este independent C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R15;

fiecare R15 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi; şi

X şi Z sunt independent C1-C4 alchil, C1-C4 fluoroalchil, C1-C4 alcoxi sau C1-C4 fluoroalcoxi.

Într-un alt exemplu preferat, invenţia prezintă un compus cu formula (I), (I-A) sau (I-B), sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, unde:

R1 este H sau C1-C4 alchil, unde C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6;

R2 este H;

L este o legătură sau C1-C4 alchilenă;

R3 este selectat din grupul ce constă din C1-C4 alchil, OH, CN, C(O)R8, COOR9, NR10R11, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri şi heteroaril cu 5-12 membri, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6, şi fiecare C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7;

R4 este H sau Cl;

fiecare R6 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi;

fiecare R7 este independent C1-C4 alchil, OH, F, CN, C1-C4 alcoxi, =O sau C(O)R13;

R8 este C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14;

R9 este H sau C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14;

R10 şi R11 sunt independent H sau C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14;

fiecare R13 este independent C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R15;

fiecare R14 şi R15 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi; şi

X şi Z sunt independent C1-C4 alchil, C1-C4 fluoroalchil, C1-C4 alcoxi sau C1-C4 fluoroalcoxi.

Într-un alt exemplu preferat, invenţia prezintă un compus cu formula (I), (I-A) sau (I-B), sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, unde:

R1 este C1-C4 alcoxi, unde C1-C4 alcoxi menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6;

R2 este H;

L este o legătură sau o C1-C4 alchilenă;

R3 este selectat din grupul ce constă din C1-C4 alchil, OH, C(O)R8 şi heterociclil cu 3-12 membri, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6, şi fiecare heterociclil cu 3-12 membri menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7;

R4 este H sau Cl;

fiecare R6 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi;

fiecare R7 este independent C1-C4 alchil, OH, F, CN, C1-C4 alcoxi, =O sau C(O)R13;

R8 este C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14;

fiecare R13 este independent C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R15;

fiecare R14 şi R15 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi; şi

X şi Z sunt independent C1-C4 alchil, C1-C4 fluoroalchil, C1-C4 alcoxi sau C1-C4 fluoroalcoxi.

Într-un alt exemplu preferat, invenţia prezintă un compus cu formula (I), (I-A) sau (I-B), sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, unde:

R1 este C1-C4 alchil, unde C1-C4 alchilul menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6;

R2 este H;

L este o legătură sau o C1-C4 alchilenă;

R3 este OR12;

R4 este H sau Cl;

fiecare R6 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi;

fiecare R7 este independent C1-C4 alchil, OH, F, CN, C1-C4 alcoxi, =O sau C(O)R13;

R12 este selectat din grupul ce constă din C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri şi heteroaril cu 5-12 membri, unde fiecare C3-C8 cicloalchil menţionat, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7;

fiecare R13 este independent C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R15;

fiecare R15 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi; şi

X şi Z sunt independent C1-C4 alchil, C1-C4 fluoroalchil, C1-C4 alcoxi sau C1-C4 fluoroalcoxi.

Într-un alt exemplu preferat, invenţia prezintă un compus cu formula (I), (I-A) sau (I-B), sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, unde:

R1 este C1-C4 alcoxi;

R2 este H;

L este o legătură;

R3 este heterociclil cu 3-12 membri, preferabil selectat din grupul ce constă din oxetanil, tetrahidrofuranil şi tetrahidropiranil, fiecare substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7;

R4 este H sau Cl;

fiecare R7 este independent C1-C4 alchil, OH, F, CN, C1-C4 alcoxi, =O sau C(O)R13;

fiecare R13 este independent C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R15;

fiecare R15 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi; şi

X şi Z sunt independent C1-C4 alchil, C1-C4 fluoroalchil, C1-C4 alcoxi sau C1-C4 fluoroalcoxi.

Într-un alt exemplu preferat, invenţia prezintă un compus cu formula (I), (I-A) sau (I-B), sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, unde:

R1 este heterociclil cu 3-12 membri, preferabil selectat din grupul ce constă din oxetanil, tetrahidrofuranil şi tetrahidropiranil, fiecare substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7;

R2 este H;

L este o legătură;

R3 este C1-C4 alcoxi, substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6,

R4 este H sau Cl;

fiecare R6 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi;

fiecare R7 este independent C1-C4 alchil, OH, F, CN, C1-C4 alcoxi, =O sau C(O)R13;

fiecare R13 este independent C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R15;

fiecare R15 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi; şi

X şi Z sunt independent C1-C4 alchil, C1-C4 fluoroalchil, C1-C4 alcoxi sau C1-C4 fluoroalcoxi.

Într-un alt exemplu, invenţia prezintă un compus cu formula (II), (II-A) sau (II-B):

(II),

sau

(II-A) (II-B)

sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia,

unde:

R1, L, R3 şi X sunt definiţi ca pentru Formula (I); şi

R4 este H, Cl, Br, F sau CH3.

Exemplele descrise aici cu Formula (I), (I-A) şi (I-B) sunt de asemenea aplicabile la compuşii cu formula (II), (II-A) şi (II-B) în măsura în care acestea nu sunt incompatibile.

Într-un alt aspect, invenţia prezintă un compus cu formula (III):

(III),

sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia,

unde:

R1 şi R3 luaţi împreună formează un heterociclil cu 3-12 membri substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7;

R2 este H, F sau C1-C4 alchil;

R4 este H, halo sau C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6;

fiecare R6 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi;

fiecare R7 este independent C1-C4 alchil, OH, F, CN, C1-C4 alcoxi, =O, CHO, C(O)R13, SO2R13 sau heterociclil cu 3-6 membri;

fiecare R13 este independent C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R15;

fiecare R15 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi; şi

X şi Z sunt independent C1-C4 alchil, C1-C4 fluoroalchil, C1-C4 alcoxi sau C1-C4 fluoroalcoxi.

În unele exemple cu formula (III), R2 este F sau CH3.

În compuşii cu formula (III), R1 şi R3 luaţi împreună formează un heterociclil cu 3-12 membri substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7. În unele asemenea exemple concrete, heterociclilul cu 3-12 membri menţionat este selectat din grupul ce constă din azetidinil, pirolidinil, piperidinil şi homopiperidinil, fiecare substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7. În alte astfel de exemple, heterociclilul cu 3-12 membri menţionat este selectat din grupul ce constă din oxetanil, tetrahidrofuranil şi tetrahidropiranil, fiecare substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7.

În compuşii cu formula (III), fiecare R7 este independent C1-C4 alchil, OH, F, CN, C1-C4 alcoxi, =O, CHO, C(O)R13, SO2R13 sau heterociclil cu 3-6 membri. În unele exemple, R7 este CHO, C(O)R13 sau SO2R13, unde fiecare R13 este independent C1-C4 alchil substituit opţional cu unul sau mai mulţi R15. În unele asemenea exemple concrete, R13 este C1-C4 alchil substituit opţional cu unul sau mai mulţi R15 şi fiecare R15 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi. În exemplele particulare, R13 este C1-C4 alchil substituit opţional prin OH. În exemplele specifice, R13 este CH3 sau CH2OH, astfel încât R7 este C(O)CH3, C(O)CH2OH, SO2CH3 sau SO2CH2OH (adică, acetil, α-hidroxiacetil, metilsulfonil sau α-hidroximetilsulfonil).

În unele exemple, R4 este H, CH3 sau Cl.

În unele exemple, Z este CH3.

În unele exemple, X este CH3 sau OCH3.

Într-un exemplu de preferat, invenţia prezintă un compus cu formula (III), sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, unde:

R2 este F sau CH3;

R1 şi R3 luaţi împreună formează un heterociclil cu 3-12 membri, fiecare substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7;

R4 este H, CH3 sau Cl;

Z este CH3; şi

X este CH3 sau OCH3.

Într-un alt exemplu preferat, invenţia prezintă un compus cu formula (III), sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, unde:

R2 este F sau CH3;

R1 şi R3 luaţi împreună formează un heterociclil cu 3-12 membri selectat din grupul ce constă din azetidinil, pirolidinil, piperidinil şi homopiperidinil, fiecare substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7;

R4 este H, CH3 sau Cl;

R7 este C(O)R13 sau SO2R13;

fiecare R13 este independent C1-C4 alchil substituit opţional cu unul sau mai mulţi R15;

fiecare R15 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi;

Z este CH3; şi

X este CH3 sau OCH3.

Într-un alt exemplu, invenţia prezintă un compus cu formula (I'):

(I'),

sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia,

unde:

R1 este selectat din grupul ce constă din H, F, C1-C4 alchil, C1-C4 alcoxi, C(O)R5, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri şi heteroaril cu 5-12 membri, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat sau C1-C4 alcoxi este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6, şi fiecare C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7;

R2 este H, F sau C1-C4 alchil;

L este o legătură sau o C1-C4 alchilenă;

R3 este selectat din grupul ce constă din C1-C4 alchil, C1-C4 alcoxi, OH, CN, C(O)R8, COOR9, NR10R11, OR12, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri şi heteroaril cu 5-12 membri, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat sau C1-C4 alcoxi este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6, şi fiecare C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7;

R4 este H, halo sau C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6;

R5 este C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14;

fiecare R6 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi;

fiecare R7 este independent C1-C4 alchil, OH, F, CN, C1-C4 alcoxi, =O sau C(O)R13;

R8 este C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14;

R9 este H sau C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14;

R10 şi R11 sunt independent H sau C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14;

R12 este selectat din grupul ce constă din C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri şi heteroaril cu 5-12 membri, unde fiecare C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7;

fiecare R13 este independent H sau C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R15;

fiecare R14 şi R15 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi; şi

X şi Z sunt independent C1-C4 alchil, C1-C4 fluoroalchil, C1-C4 alcoxi sau C1-C4 fluoroalcoxi.

În unele exemple, compusul cu formula (I') are stereochimia absolută a atomului de carbon alăturat la substituenţii R1 şi R2 substituenţi precum este arătat în Formula (I-A') sau (I-B'):

sau

(I-A') (I-B')

sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia,

unde:

R1, R2, L, R3, R4, X şi Z sunt definiţi ca pentru Formula (I).

Exemplele descrise aici cu Formula (I), (I-A) şi (I-B) sunt de asemenea aplicabile la compuşii cu formula (I'), (I-A') şi (I-B') în măsura în care acestea nu sunt incompatibile.

Într-un alt exemplu, invenţia prezintă un compus cu formula (II'), (II-A') sau (II-B'):

(II'),

sau

(II-A') (II-B')

sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia,

unde:

R1, L, R3 şi X sunt definiţi ca pentru Formula (I'); şi

R4 este H, Cl, Br, F sau CH3.

Exemplele descrise aici cu Formula (I), (I-A) şi (I-B) sunt de asemenea aplicabile la compuşii cu formula (II'), (II-A') şi (II-B') în măsura în care acestea nu sunt incompatibile.

O "compoziţie farmaceutică" se referă la un amestec de unul sau mai mulţi dintre compuşii descrişi aici, sau o sare, solvat, hidrat sau promedicament farmaceutic acceptabil al acestora ca ingredient activ, şi cel puţin un purtător sau excipient farmaceutic acceptabil.

Într-un alt exemplu invenţia prezintă o compoziţie farmaceutică conţinând un compus conform unei formulări descrise aici, sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, şi un purtător sau excipient farmaceutic acceptabil. În unele exemple, compoziţia farmaceutică conţine doi sau mai mulţi purtători şi/sau excipienţi farmaceutic acceptabili şi/sau excipienţi.

În unele exemple, compoziţia farmaceutică poate cuprinde suplimentar cel puţin un agent terapeutic anti-cancer sau un agent paliativ. În unele asemenea exemple concrete, agentul adiţional medicinal sau farmaceutic este un agent anti-cancer precum este descris mai jos. În unele asemenea exemple concrete, combinaţia prezintă un efect anti-cancer aditiv, mai mult decât aditiv, sau sinergic. În unele asemenea exemple concrete, unul sau mai mulţi agenţi terapeutici anti-cancer este sau sunt selectaţi din grupul ce constă din agenţi anti-tumoral, agenţi antiangiodenici, inhibitori de transducţie a semnalului şi agenţi antiproliferativi.

Într-un exemplu, invenţia prezintă o metodă pentru tratamentul creşterii anormale a celulelor la un subiect ce include administrarea la subiect a unei cantităţi terapeutic acceptabile a unui compus conform invenţiei, sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia.

În unele exemple, metodele descrise aici cuprind în plus administrarea la subiect a unei cantităţi de agent terapeutic anti-cancer sau un agent paliativ, cantităţile căruia sunt eficiente împreună în tratamentul creşterii celulare anormale menţionate. În unele exemple, unul sau mai mulţi agenţi terapeutici anti-cancer sunt selectaţi dintre agenţi anti-tumorali, agenţi antiangiodenici, inhibitori de transducţie a semnalului şi agenţi antiproliferativi, cantităţile cărora sunt eficiente împreună în tratamentul creşterii celulare anormale menţionate. În unele asemenea exemple concrete, agentul anti-tumoral este selectat din grupul ce constă din inhibitori mitotici, agenţi de alchilare, antimetaboliţi, antibiotice de intercalare, inhibitori ai factorului de creştere, radiaţie, inhibitori ai ciclului celular, enzime, inhibitori ai topoizomerazei, modificatori ai răspunsului biologic, anticorpi, citotoxice, antihormonale, şi antiandrogenice.

În exemplele frecvente de realizare a metodelor dezvăluite aici, creşterea anormală a celulelor este cancer. În unele exemple, metodele dezvăluite rezultă în unul sau mai multe din efectele ce urmează: (1) inhibarea proliferării celulelor canceroase; (2) inhibarea invazivităţii celulelor canceroase; (3) inducerea metastazelor celulelor canceroase; (4) inhibarea metastazei celulelor canceroase; sau (5) inhibarea angiogenezei.

Într-un alt exemplu, invenţia prezintă o metodă pentru tratamentul unei tulburări mediate de EZH2 la un subiect ce include administrarea la un subiect a unui compus conform invenţiei, sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, într-o cantitate care este eficientă în tratamentul tulburării menţionate.

Cu excepţia cazului când se indică astfel, toate referinţele de aici către compuşii conform invenţiei includ referinţe către săruri, solvaţi, hidraţi şi complecşi ai aiestora, şi către solvaţi, hidraţi şi complecşi de săruri ale acestora, ce includ polimorfi, stereoizomeri, şi versiuni marcate izotopic ale acestora.

Compuşii conform invenţiei pot exista în formă de săruri farmaceutic acceptabile precum, de ex., săruri de adiţie acidă şi săruri de adiţie bazică ale compuşilor cu una dintre formulele descrise aici. Aşa cum este folosit aici, termenul “sare farmaceutic acceptabilă” se referă la acele săruri care îşi păstrează eficienţă biologică şi proprietăţile compusului părinte. Fraza “sare farmaceutic acceptabilă”, aşa cum este folosită aici, cu excepţia cazului când se indică altfel, include săruri ale grupelor acide sau bazice care pot fi prezente în compuşii cu formulele descrise aici.

De exemplu, compuşii conform invenţiei care sunt bazici în natură pot fi capabili de formarea unei largi varietăţi de săruri cu diverşi acizi anorganici şi organici. Cu toate ca asemenea săruri trebuie să fie farmaceutic acceptabile pentru administrare la animale, este adesea necesar în practică de a izola iniţial compusul prezentei invenţii de amestecul de reacţie ca o sare farmaceutic inacceptabilă şi apoi simplu de a o converti pe ultima în compusul bază liberă prin tratament cu un reagent alcalin şi ulterior de a o converti pe ultima bază liberă într-o sare de adiţie acidă farmaceutic acceptabilă. Sărurile de adiţie acidă ale compuşilor bazici ai acestei invenţii pot fi preparaţi prin tratarea compusului bazic cu o cantitate substanţial echivalentă de acid mineral sau organic selectat într-un mediu de solvent apos sau într-un solvent organic potrivit, precum metanol sau etanol. La evaporare solventului, sare solidă necesară este obţinută. Sarea acidă necesară poate de asemenea fi precipitată dintr-o soluţie de bază liberă într-un solvent organic prin adăugarea unui acid mineral sau organic corespunzător la soluţie.

Acizii care pot fi folosiţi pentru a prepara săruri farmaceutic acceptabile de adiţie acidă a acelor compuşi bazici ai celor care formează săruri non-toxice de adiţie acidă, adică, săruri ce conţin anioni farmaceutic acceptabil, precum sărurile clorohidrat, bromohidrat, iodohidrat, nitrat, sulfat, bisulfat, fosfat, fosfat acid, izonicotinat, acetat, lactat, salicilat, citrat, citrat acid, tartrat, pantotenat, bitartrat, ascorbat, succinat, maleat, gentisinat, fumarat, gluconat, glucuronat, zaharat, formiat, benzoat, glutamat, metansulfonat, etansulfonat, benzensulfonat, p-toluensulfonat şi pamoat [adică, 1,1'-metilen-bis-(2-hidroxi-3-naftoate)].

Exemplele de săruri includ, dar nu sunt limitate la săruri acetat, acrilat, benzensulfonat, benzoat (precum clorobenzoat, metilbenzoat, dinitrobenzoat, hidroxibenzoat, şi metoxibenzoat), bicarbonat, bisulfat, bisulfit, bitartrat, borat, bromură, butin-1,4-dioat, edetat de calciu, camsilat, carbonat, clorură, caproat, caprilat, clavulanat, citrat, decanoat, diclorohidrat, dihidrogenfosfat, edetat, edisliat, estolat, esilat, etilsuccinat, formiat, fumarat, gluceptat, gluconat, glutamat, glicolat, glicolilarsanilat, heptanoat, hexin-1,6-dioat, hexilresorcinat, hidrabamina, bormohidrat, clorohidrat, γ-hidroxibutirat, iodură, izobutirat, izotionat, lactat, lactobionat, laurat, malat, maleat, malonat, mandelat, mezilat, metafosfat, metan-sulfonat, metilsulfat, monohidrogenfosfat, mucat, napsilat, naftalen-1-sulfonat, naftalen-2-sulfonat, nitrat, oleat, oxalat, pamoat (embonat), palmitat, pantotenat, fenilacetaţi, fenilbutirat, fenilpropionat, fthalat, fosfat/difosfat, poligalacturonat, propansulfonat, propionat, propiolat, pirofosfat, pirosulfat, salicilat, stearat, subacetat, suberat, succinat, sulfat, sulfonat, sulfit, tanat, tartrat, teoclat, tozilat, trietiodod, şi valerat.

Exemplele ilustrative de săruri potrivite includ săruri organice derivate din aminoacizi, precum glicina şi arginina, amoniac, amine primare, secundare, şi terţiare, şi amine ciclice, precum piperidina, morfolina şi piperazina, şi săruri anorganice derivate din sodiu, calciu, potasiu, magneziu, mangan, fier, cupru, zinc, aluminum şi litiu.

Compuşii conform invenţiei care includ un fragment bazic, precum un grup amino, pot forma săruri farmaceutic acceptabile cu diverşi aminoacizi, suplimentar acizilor menţionaţi mai sus.

Acei compuşii conform invenţiei care sunt acizi în natură pot fi capabili de formare de săruri bazice cu diverşi cationi farmaceutic acceptabili. Exemplele de asemenea săruri includ săruri ale metalelor alcaline sau alcalino-pământoase şi în special, sărurile de sodiu şi potasiu. Aceste săruri pot fi preparate prin tehnici convenţionale. Bazele chimice care pot fi folosite ca reagenţi pentru a prepara sărurile bazice farmaceutic acceptabile ale acestei invenţii le includ pe cele care formează săruri bazice non-toxice cu compuşii acizi menţionaţi aici. Aceste săruri pot fi preparate prin orice metodă potrivită, de exemplu, tratamentul acidului liber cu o bază anorganică sau organică, precum o amină (primară, secundară sau terţiară), un hidroxid de metal alcalin sau un hidroxid de metal alcalino-pământos, sau altele asemenea. Aceste săruri pot de asemenea fi preparate prin tratarea compuşilor acizi corespunzători cu o soluţie apoasă ce conţine cationii farmaceutic acceptabili necesar, şi apoi evaporând soluţia rezultată până la uscare, preferabil la presiune redusă. În mod alternativ, acestea pot de asemenea fi preparate prin amestecarea împreună a soluţiilor alcanolice inferioare ale compuşilor acizi şi alcoxidului de metal alcalin necesar, şi apoi evaporând soluţia rezultată la uscat în acelaşi mod ca înainte. În fiecare caz, cantităţi stoichiometrice de reagenţi pot fi implicate pentru a asigura completarea reacţiei şi randamentelor maxime de produs final necesar.

Bazele chimice care pot fi folosite ca reagenţi pentru a prepara săruri bazice farmaceutic acceptabile ale compuşilor conform invenţiei care sunt acizi în natură are cele care formează săruri bazice non-toxice cu astfel de compuşi. Asemenea săruri bazice non-toxice includ, dar nu sunt limitate la, cele derivate din asemenea cationi farmaceutic acceptabili precum cationi de metal alcalin (de ex., potasiu şi sodiu) şi cationi de metal alcalino-pământos (de ex., calciu şi magneziu), săruri de adiţie de amoniu sau amine solubile în apă precum N-metilglucamina-(meglumină), şi alcanolamoniu inferior şi alte săruri bazice ale aminelor organice farmaceutic acceptabil.

Hemisăruri ale acizilor şi bazelor pot de asemenea fi formate, de exemplu, săruri hemisulfat şi hemicalciu.

Pentru o recapitulare a sărurilor potivite, vezi Handbook of Farmaceutic Salts: Properties, Selection, and Use de Stahl şi Wermuth (Wiley-VCH, 2002). Metodele pentru prepararea sărurilor farmaceutic acceptabile sunt cunoscute de specialiştii din domeniu.

Sărurile prezentei invenţii pot fi preparate conform metodelor cunoscute de specialiştii din domeniu. O sare farmaceutic acceptabilă a compuşilor conform invenţiei poate fi uşor preparată prin amestecarea împreună a soluţiilor compusului şi a acidului sau bazei necesare, după cum este mai potrivit. Sarea poate precipita din soluţie şi fi colectată prin filtrare sau poate fi recuperată prin evaporarea solventului. Gradul de ionizare în sare poate varia de la complet ionizat ne-ionizat.

Se va înţelege de specialiştii din domeniu că compuşii conform invenţiei în formă de bază liberă având o funcţionalitate bazică pot fi convertiţi în sărurile de adiţie acidă prin tratarea cu un exces stoichiometric de acid corespunzător. Sărurile de adiţie acidă ale compuşilor conform invenţiei pot fi reconvertite în baza liberă corespunzătoare prin tratarea cu un exces stoichiometric de bază potrivită, precum carbonat de potasiu sau hidroxid de sodiu, tipic în prezenţa unui solvent apos, şi la o temperatură de între aproximativ 0° C şi 100° C. Forma de bază liberă poate fi izolată prin mijloace convenţionale, precum extracţia cu un solvent organic. În plus, săruri de adiţie acidă ale compuşilor conform invenţiei pot fi interschimbate prin profitarea de solubilităţile diferenţiale ale sărurilor, volatilităţile sau acidităţilor acizilor, sau prin tratarea curăşină schimbătoare de ioni încărcată corespunzător. De exemplu, cele interschimate pot fi afectate de reacţia sării compuşilor conform invenţiei cu un mic exces stoichiometric de un acid cu un pK mai mic decât componentul acid al sării iniţiale. Această conversiune este tipic realizată la o temperatură între aproximativ 0°C şi punctul de fierbere al solventului utilizat ca mediu pentru procedură. Schimburi similare sunt posibile cu săruri de adiţie bazică, tipic prin intermedierea formei de bază liberă.

Compuşii conform invenţiei pot exista în ambele forme solvatată şi nesolvatată. Când solventul sau apă este strâns legată, complexul va avea o stoicometrie bine definită independentă de umiditate. Când, totuşi, solventul sau apă este slab legată, ca în solvaţii canal şi compuşii higroscopici, conţinutul apă/solvent va fi dependent de umiditate şi condiţiile de uscare. În asemenea cazuri, non-stoicometria va fi o normă. Termenul 'solvat' este utilizat aici pentru a descrie un complex molecular conţinând compusul conform invenţiei şi una sau mai multe molecule de solvent farmaceutic acceptabil, de exemplu, etanol. Termenul 'hidrat' este implicat când solventul este apă. Solvaţii farmaceutic acceptabili în concordanţă cu invenţia includ hidraţi şi solvaţi unde solventul de cristalizare poate fi izotopic substituit, de ex. D2O, d6-acetona şi d6-DMSO.

De asemenea incluşi în domeniul de aplicare conform invenţiei sunt complecşi precum clatraţii, complecşi de includere medicament-gazdă unde, în contrast solvaţii menţionaţi mai sus, medicamentul şi gazda sunt prezenţi în cantităţi stoichiometrice sau non-stoichiometrice. De asemenea incluşi sunt complecşi ai medicamentului ce conţin două sau mai multe componente organice şi/sau anorganice care pot fi în cantităţi stoichiometrice sau non-stoichiometrice. Complecşii ce rezultă pot fi ionizaţi, ionizaţi parţial, sau ne-ionizaţi. Pentru o revizuire a asemenea complecşi, vezi J Pharm Sci, 64 (8), 1269-1288 de Haleblian (August 1975), descrierea care este incorporată aici prin referinţă în întregime.

Invenţia de asemenea se referă la promedicamente ale compuşilor cu formulele descrise aici. Prin urmare, anumiţi derivaţi ai compuşilor conform invenţiei care pot avea activitate farmacologică joasă sau acesta poate lipsi pot, la administrare la un subiect, fi convertiţi în compuşi conform invenţiei, de exemplu, prin clivaj hidrolitic. Asemenea derivaţi sunt numiţi aici ca 'promedicamente'. Informarea suplimentară asupra utilizării promedicamentelor poate fi găsită în 'Pro-drung as Novel Dehepaticy Systems, Vol. 14, ACS Symposium Series (T Higuchi şi W Stella) şi 'Bioreversible Carriers in Drug Design', Pergamon Press, 1987 (ed. E B Roche, American Farmaceutic Association), descrieri care sunt incorporate aici prin referinţă în întregme. Aşa cum este folosit aici, "subiect" se poate referi la un om sau subiect animal.

Promedicamentele în concordanţă cu invenţia pot, de exemplu, fi produse prin înlocuirea funcţionalităţilor corespunzătoare prezente în compuşii conform invenţiei cu anumite fragmente cunoscute specialiştilor în domeniu ca 'pro-fragmente' aşa cum este descris, de exemplu, în "Design of Prodrugs" de H Bundgaard (Elsevier, 1985), descrierea care este incorporată aici prin referinţă în întregime.

Unele exemple nelimitative de promedicamente potenţiale în concordanţă cu invenţia includ:

(i) unde compusul conţine o funcţionalitate de acid carboxilic (-COOH), un ester al acesteia, de exemplu, înlocuirea hidrogenului cu (C1-C8)alchil;

(ii) unde compusul conţine o funcţionalitate de alcool (-OH), un eter al acesteia, de exemplu, înlocuirea hidrogenului cu (C1-C6)alcanoiloximetil; şi

(iii) unde compusul conţine o funcţionalitate primară sau secundară amino (-NH2 sau -NHR unde R ≠ H), o amida acesteia, de exemplu, înlocuirea unuia sau a ambilor hidrogeni cu un grup labil metabolic potrivit, precum o amida, carbamat, uree, fosfonat, sulfonat, etc.

Exemplele suplimentare de înlocuire de grupe în concordanţă cu exemplele ce urmează şi exemplele de alte tipuri de promedicamente pot fi găsite în referinţele menţionat mai sus.

În final, anumiţi compuşi conform invenţiei pot în sine acţiona ca promedicamente potenţiale ale altor compuşi conform invenţiei.

De asemenea incluşi în domeniul de aplicare conform invenţiei sunt metaboliţi ai compuşilor cu formulele descrise aici, adică, compuşi formaţi in vivo la administrarea unui medicament.

Compuşii cu formulele descrise aici pot avea atomi asimetrici de carbon. Legăturile carbon-carbon ale compuşilor conform invenţiei pot fi reprezentate aici utilizând o linie continuă ( ), a pana solidă ( ), sau o pana întrerupă ( ). Utilizarea liniei continue pentru a reprezenta legăturile ca atomi asimetrici de carbon este intenţionată pentru a indica că toţi stereoizomeri posibili (de ex. enantiomeri specifici, amestecuri racemice, etc.) la atom de carbon sunt incluşi. Utilizarea a fie unei pene solide sau întrerupte pentru a reprezenta legăturile ca atomi asimetrici de carbon este intenţionată pentru a indica că doar stereoizomerul prezentat trebuie inclus. Este posibil ca compuşii conform invenţiei pot conţine mai mult decât un atom asimetric de carbon. În acei compuşi, utilizarea liniei continue pentru a reprezenta atomi asimetrici de carbon este intenţionată pentru a indica că toţi stereoizomeri posibili trebuie incluşi. De exemplu, dacă nu este indicat altfel, se intenţionează că compuşii conform invenţiei pot exista ca enantiomeri şi diastereomeri sau ca racemaţi şi amestecuri ale acestora. Utilizarea liniei continue pentru a reprezenta legătura la un sau mai mulţi atomi asimetrici de carbon într-un compus conform invenţiei şi utilizarea unei pene solide sau întrerupe pentru a reprezenta legătura altor atomi asimetrici de carbon în acelaşi compus este intenţionată pentru a indica că un amestec de diastereomeri este prezent.

Compuşii conform invenţiei care au centri chirali pot exista ca stereoizomeri, precum racemaţi, enantiomeri, sau diastereomeri.

Stereoizomerii compuşilor cu formulele de aici pot include izomeri cis şi trans, izomeri optici precum (R) şi (S) enantiomeri, diastereomeri, izomeri geometrici, izomeri rotaţionali, atropizomeri, izomeri conformaţionali, şi tautomeri ai compuşilor conform invenţiei, ce includ compuşi ce exprimă mai mult decât un tip de izomerie; şi amestecuri ale acestora (precum racemaţi şi perechi diastereomeric). De asemenea incluse sunt săruri de adiţie acidă sau bazică unde contraionul este optic activ, de exemplu, d-lactat sau l-lizină, sau racemic, de exemplu, dl-tartrat sau dl-arginină.

Când un racemat se cristalizează, cristale de două tipuri diferit pot fi posibile. Primul tip este compusul racemic (racemat adevărat) la care se face referinţă mai sus unde o formă omogenă de cristale este produsă ce conţine ambii enantiomeri în cantităţi echimolare. Al doilea tip este amestecul racemic sau conglomeratul unde două forme de cristale sunt produse în cantităţi echimolare fiecare conţinând un singur enantiomer.

Compuşii conform invenţiei pot exprima fenomene de tautomerism şi izomerie structurală. De exemplu, compuşii pot exista în câteva forme tautomerice, ce includ forma enolică şi imină, şi forma ceto şi enamină şi izomeri geometrici şi amestecuri ale acestora. Toate asemenea forme tautomerice sunt incluse în domeniul de aplicare al compuşilor conform invenţiei. Tautomerii există ca amestecuri ai unui set tautomeric în soluţie. În formă solidă, de obicei un tautomer predomină. Chiar cu toate că un tautomer poate fi descris, prezenta invenţie include toţi tautomeri compuşilor cu formulele oferite.

În plus, unii dintre compuşii conform invenţiei pot forma atropizomeri (de ex., biarili substituiţi). Atropizomerii stereoizomeri conformaţionali care apar când rotaţia în jurul unei singure legături în molecule este prevenită, sau încetinită puternic, ca rezultat al interacţiunilor sterice cu alte părţi ale moleculei şi substituenţii la ambele capete ale unei singure legături sunt asimetrice. Interconversia atropizomerilor este suficient de lentă pentru a permite separarea şi izolarea în condiţii predeterminate. Bariera de energie a racemizării termale poate fi determinată prin împiedicare sterică a rotaţiei libere a uneia sau a mai multor axe de formare a legăturilor.

Unde un compus conform invenţiei conţine un grup alchenil sau alchenilen, izomeri geometrici cis/trans (sau Z/E) pot fi posibili. Izomerii cis/trans pot fi separaţi prin tehnici convenţionale binecunoscute specialiştilor în domeniu, de exemplu, cromatografie sau cristalizare fracţionară.

Tehnicile convenţionale pentru prepararea/izolarea enantiomerilor individuali include sinteză chirală dintr-un precursor optic pur sau rezoluţia racematului (sau racematului unei sări sau derivat) utilizând, de exemplu, cromatografia lichidă de înaltă presiune chirală (HPLC).

În mod alternativ, racematul (sau un precursor racemic) poate fi supus reacţiei cu un compus optic activ, de exemplu, un alcool, sau, în cazul când compusul conţine un fragment acid sau basic, un acid sau o bază precum acid tartric sau 1-feniletilamina. Amestecul diastereomeric rezultat poate fi separat prin cromatografie şi/sau cristalizare fracţionară şi unul sau ambii dintre diastereoizomerii convertiţi în enantiomerul(enantiomerii) pur corespunzător prin metode binecunoscute unui specialist în domeniu.

Compuşii chirali conform invenţiei (şi precursorii chiral ai acestora) pot fi obţinuţi în formă enantiomeric îmbogăţită utilizând cromatografia, tipic HPLC, pe o răşină asimetrică cu o fază mobilă ce constă dintr-un hidrocarbură, tipic heptan sau hexan, ce conţine de la 0 la 50% izopropanol, tipic de la 2 la 20%, şi de la 0 la 5% dintr-o alchilamină, tipic 0.1% dietilamina. Concentrarea produsului de eluţie permite amestecul îmbogâţit.

Conglomeratele stereoizomerice pot fi separate prin tehnici convenţionale cunoscut specialiştilor în domeniu; vezi, de exemplu, “Stereochemistry of Organic Compounds” de E L Eliel (Wiley, New York, 1994), descrierea care este incorporată aici prin referinţă în întregime.

“Enantiomeric pur” aşa cum este folosit aici, descrie un compus care este prezent ca un singur enantiomer şi care este descris în termeni de exces enantiomeric (e.e.). Preferabil, unde compusul este prezent ca un enantiomer, enantiomerul este prezent într-un exces enantiomeric mai mare sau egal cu aproximativ 80%, mai preferabil, într-un exces enantiomeric mai mare sau egal cu aproximativ 90%, mai preferabil totuşi, într-un exces enantiomeric mai mare sau egal cu aproximativ 95%, mai preferabil totuşi, într-un exces enantiomeric mai mare sau egal cu aproximativ 98%, cel mai preferabil, într-un exces enantiomeric mai mare sau egal cu aproximativ 99%. Similar, “diastereomeric pur” aşa cum este folosit aici, descrie un compus care este prezent ca un diastereomer şi care este descris în termeni de exces diasteriomeric (d.e.). Preferabil, unde compusul este prezent ca un diastereomer, diastereomerul este prezent într-un exces diastereomeric mai mare sau egal cu aproximativ 80%, mai preferabil, într-un exces diastereomeric mai mare sau egal cu aproximativ 90%, mai preferabil totuşi, într-un exces diastereomeric mai mare sau egal cu aproximativ 95%, mai preferabil totuşi, într-un exces diastereomeric mai mare sau egal cu aproximativ 98%, cel mai preferabil, într-un exces diastereomeric mai mare sau egal cu aproximativ 99%.

Prezenta invenţie de asemenea include compuşi marcaţi izotopic, care sunt identici cu cei menţionaţi în una dintre formulele oferite, dar datorită faptului că unul sau mai mulţi atomi sunt înlocuiţi printr-un atom având o masă atomică sau număr de masă diferit de masa atomică sau numărul de masă întâlnit de obicei în natură.

Compuşii marcaţi izotopic conform invenţiei pot fi preparaţi în general prin tehnici convenţionale cunoscute specialiştilor în domeniu sau prin procese analoage celor descrise aici, utilizând un reagent marcat izotopic corespunzător în locul reagentului nemarcat implicat în caz contrar.

Exemplele de izotopi care pot fi incorporaţi în compuşii conform invenţiei includ izotopi de hidrogen, carbon, azot, oxigen, fosfor, fluorură şi clorură, precum, dar fără a se limita la, 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, 31P, 32P, 35S, 18F, şi 36Cl. Anumiţi compuşi marcaţi izotopic conform invenţiei, de exemplu cei în care sunt incorporaţi izotopi radioactivi precum 3H şi 14C, pot fi utili în testele medicamentului şi/sau distribuţiei ţesutului substrat. Izotopi tritiaţi, adică, 3H, şi carbon-14, adică, 14C, pot fi în special de preferat pentru uşurinţa de preparare şi detectare a acestora. Suplimentar, substituţia cu izotopi mai grei precum deuteriu, adică, 2H, pot oferi anumite avantaje terapeutice potenţiale anumit ce rezultă din stabilitatea metabolică potenţială mai mare, de exemplu timp de înjumătăţire in vivo potenţial mai mare sau cerinţe de dozare reduse potenţiale şi, prin urmare, pot fi de preferat în anumite circumstanţe. Compuşi marcaţi izotopic conform invenţiei pot în general fi preparaţi prin desfăşurarea procedurilor descrise în Schemele şi/sau în the Exemplele şi Preparările de mai jos, prin substituirea reagentului marcat izotopic cu un reagent nemarcat izotopic.

Compuşii conform invenţiei pot fi folosiţi ca produşi cristalini sau amorfi, sau amestecuri ale acestora. Aceştia pot fi obţinuţi, de exemplu, ca dopuri solide, pudre, sau pelicule prin metode precum precipitare, cristalizare, uscare prin îngheţare, uscare prin pulverizare, sau uscare prin evaporare. Uscarea cu microunde sau cu unde radio pot fi folosite cu acest scop.

Metode şi utilizări terapeutice

Invenţia în continuare prezintă metode şi utilizări terapeutice ce includ administrarea unui compus conform invenţiei, sau a sării farmaceutic acceptabilă a acestuia, singur sau în combinaţie cu unul sau mai mulţi alţi agenţi terapeutici sau agenţi paliativi.

Într-un exemplu, invenţia prezintă o metodă pentru tratamentul creşterii anormale a celulelor la un subiect ce include administrarea la subiect a unei cantităţi terapeutic acceptabile a unui compus conform invenţiei, sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia.

Într-un alt exemplu, invenţia prezintă o metodă pentru tratamentul creşterii anormale a celulelor la un subiect ce include administrarea la subiect a unei cantităţi a unui compus conform invenţiei, sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, în combinaţie cu o cantitate de un agent anti-tumoral, cantităţile căruia sunt eficiente împreună în tratamentul creşterii celulare anormale menţionate. În unele asemenea exemple concrete, agentul anti-tumoral este selectat din grupul ce constă din inhibitori mitotici, agenţi de alchilare, antimetaboliţi, antibiotice de intercalare, inhibitori ai factorului de creştere, radiaţie, inhibitori ai ciclului celular, enzime, inhibitori ai topoizomerazei, modificatori ai răspunsului biologic, anticorpi, citotoxice, antihormonale, şi antiandrogenice.

Compuşii conform invenţiei includ compuşi cu oricare dintre formulele descrişi aici, anume compuşi cu formulele I, I', II, II', I-A, I-A', I-B, I-B', II-A, II-A', II-B, II-B' şi III aşa cum este oferit şi definit aici, sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia.

Într-un alt exemplu, invenţia prezintă o metodă pentru tratamentul creşterii anormale a celulelor la un subiect ce include administrarea la subiect a unei cantităţi a unui compus conform invenţiei, sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, care este eficientă în tratamentul creşterii celulare anormale.

În încă un aspect, invenţia prezintă o metodă de inhibare a proliferării celulelor canceroase la un subiect, ce include administrarea la un subiect a unui compus conform invenţiei, sau a sării farmaceutic acceptabilă a acestuia, într-o cantitate eficientă pentru a inhiba proliferarea celulelor.

Într-un alt exemplu, invenţia prezintă o metodă de inhibarea a invazivităţii celulelor canceroase la un subiect, ce include administrarea la un subiect a unui compus conform invenţiei, sau sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, într-o cantitate eficientă pentru a inhiba invazivitatea celulelor.

Într-un alt exemplu, invenţia prezintă o metodă de inducere a metastazelor în celulele canceroase la un subiect, ce include administrarea la un subiect a unui compus conform invenţiei, sau sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, într-o cantitate eficientă pentru a induce apoptoza.

Într-un alt aspect, invenţia prezintă o metodă de inducere a metastazelor la un subiect, ce include administrarea la subiect a unei cantităţi terapeutic acceptabile a unui compus conform unei formulări descrise aici, sau a sării farmaceutic acceptabile a acestuia.

În exemplele frecvente de realizare a metodelor dezvăluite aici, creşterea anormală a celulelor este cancer, unde cancerul menţionat este selectat din grupul ce constă din cancer cu celule bazale, cancer meduloblastom, cancer hepatic, rabdomiosarcom, cancer pulmonar, cancer osos, cancer pancreatic, cancer de piele, cancer al capului sau gâtului, melanom cutanat sau intraocular, cancer uterin, cancer ovarian, cancer rectal, cancer al regiunii anale, cancer la stomac, cancer de colon, cancer mamar, cancer uterin, carcinom al trompelor uterine, carcinomul de endometru, carcinom de col uterin, carcinom al vaginului, carcinomul vulvar, boala Hodgkin, cancer al esofagului, cancer al intestinului subţire, cancer al sistemului endocrin, cancer al glandei tiroide, cancer al glandei paratiroide, cancer al glandei suprarenale, sarcom de ţesuturi moi, cancer de uretră, cancer al penisului, cancer de prostată, leucemie cronică sau acută, limfoame limfocitare, cancer de vezică urinară, cancer renal sau ureteral, carcinom cu celule renale, carcinom al pelvisului renal, neoplasme ale sistemului nervos central (SNC), limfom primar SNC, tumori ale măduvei spinării, creier gliom stem, adenom hipofizar, sau o combinaţie a unuia sau a mai multor tipuri de cancere menţionate mai sus.

În unele exemple, un compus conform invenţiei este selectiv pentru forma mutant a EZH2, astfel încât trimetilarea H3K27, care este asociat cu anumite cancere, este inhibată. Metodele şi utilizările descrise aici pot fi folosite pentru a trata cancere ce includ limfom folicular şi limfom difuz cu celule B mari (DLBCL).

Compuşii conform invenţiei pot fi utili pentru tratamentul tipurilor de cancer, precum tumori precum carcinomi şi sarcomi la creier, mamari, cervicali, colorectali, endometriali, esofagieni, gastrici/la stomac, la cap şi gât, hepatocelulari, laringieni, pulmonari, orali, ovarieni, de prostată, testiculari şi tiroidieni.

Termenul "cantitate terapeutic eficientă" aşa cum este folosit aici se referă la acea cantitate a unui compus administrat care va alina într-o anumită maură unul sau mai multe dintre simptomele ale tulburării care este tratată. Cu referinţă la tratamentul cancer ului, o cantitate terapeutic acceptabilă se referă la acea cantitate care are efectul de (1) reducerea dimensiunii tumorii, (2) inhibarea (care este, încetinirea într-o anumită măsură, preferabil oprirea) metastazei tumorii, (3) inhibarea într-o anumită măsură (care este, încetinirea într-o anumită măsură, preferabil oprirea) creşterea tumorii sau invazivităţii tumorii, şi/sau (4) remedierea într-o anumită măsură (sau, preferabil, eliminarea) a unuia sau mai multor semne sau simptome asociate cu cancerul.

Aşa cum este folosit aici, "subiect" se referă la un om sau subiect animal. În anumit exemplu de preferat, subiectul este un om.

Termenul "tratare", aşa cum este folosit aici, cu excepţia cazului când se indică altfel, înseamnă inversarea, ameliorarea, inhibarea procesului, sau prevenirea tulburării sau condiţiei la care se aplică asemenea termen, sau unul sau mai multe simptome ale unei asemenea tulburări sau condiţii. Termenul "tratament", aşa cum este folosit aici, cu excepţia cazului când se indică altfel, se referă la acţiunea de tratare aşa cum "tratare" este definit imediat mai sus. Termenul “tratare” de asemenea include tratamentul adjuvant şi neo-adjuvant al unui subiect.

Termenii “creştere celulară anormală” şi “ tulburare hiperproliferativă” sunt folosiţi interschimbabil în această cerere de brevet.

“Creştere celulară anormală”, aşa cum este folosită aici, cu excepţia cazului când se indică altfel, se referă la creştere celulară care este independentă ode mecanismele reglatorii normale (de ex., pierderea inhibiţiei de contact). Creşterea celulară anormală poate fi benignă (nu canceroasă), sau malignă (canceroasă). Aceasta include creşterea anormală a: (1) celulelor celulare (tumori) care prezintă expresie sporită de EZH2; (2) celule benigne şi maligne ale altor boli proliferative în care EZH2 este supra-exprimat; (3) tumori care proliferează activarea aberantă a EZH2; şi (4) celule benigne şi maligne ale altor boli proliferative în care activarea aberantă a EZH2 se produce.

Aşa cum este folosit aici “cancer” se referă la orice creştere malignă şi/sau invazivă sau tumoare cauzată de creşterea celulară anormală. Aşa cum este folosit aici “cancer” se referă la tumori solid numite în funcţie de celulele care le formează, cancer al sângelui, al măduvei osoase, sau al sistemului limfatic. Exemplele de tumori solide includ dar nu se limitează la sarcomi şi carcinomi. Exemplele de cancere al sângelui includ dar nu se limitează la leucemii, limfomi şi mielomi. Termenul “cancer” include dar este fără a se limita la un cancer primar care are originea într-o anumită parte a corpului , un cancer metastatic care s-a răspândit din locul din care a pornit către altă părţi ale corpului, o recurenţă de la cancerul primar original după atenuare, şi un cancer primar secundar care este un nou cancer primar la o persoană cu o istorie de cancere precedente de tip diferit de ultimul. Compuşii conform invenţiei pot inhiba EZH2, şi prin urmare pot fi utili ca agenţi antiproliferativi (de ex., cancer) sau agenţi anti-tumorali (de ex., efect împotriva tumorii solide) la mamifere, în special la oameni. În particular, compuşii conform invenţiei pot fi utili în prevenirea şi tratamentul unei varietăţi de tulburări hiperproliferative umane, precum creştere celulară anormală malignă sau benignă.

Compuşii, compoziţiile şi metodele descrise aici pot fi utile pentru tratamentul tipurilor de cancer ce includ dar nu se limitează la cancerele la:

Sistemul circulator, de exemplu, inima (sarcom [angiosarcom, fibrosarcom, rabdomiosarcom, liposarcom], mixom, rabdomiom, fibrom, lipom şi teratom), mediastinu şi pleură, şi alte organe intratoracice, tumori vasculare şi ţesutul vascular asociat tumorilor;

Tractul respirator, de exemplu, cavitatea nazală şi a urechii medii, sinusurile accesorii, laringe, trahee, bronhia şi pulmonar precum cancer pulmonar cu celule mici (CPCM), cancer pulmonar cu celule nu mici (CACNM), carcinomul bronhogenic (celule scuamoase, cu celule nediferenţiate mici, cu celule nediferenţiate mare, adenocarcinom), carcinom (bronchiolar) alveolar, adenom bronşic, sarcom, limfoma, hamartom chondromatous, mezoteliom;

Sistemul gastrointestinal, de exemplu, esofag (carcinom cu celule scuamoase, adenocarcinom, leiomiosarcom, limfom), stomac (carcinom, limfom, leiomiosarcom), gastric, pancreas (adenocarcinom ductal, insulinom, glucagonom, gastrinom, tumori carcinoide, vipom), intestinul subţire (adenocarcinom, limfom, tumori carcinoide, sarcom Karposi, leiomiom, hemangiom, lipom, neurofibrom, fibrom), intestinului gros (adenocarcinom, adenom tubular, adenomul vilos, hamartom, leiomiom);

tractul urogenital, de exemplu, renal (adenocarcinom, rumoare Wilm [nefroblastom], limfom, leucemie), de vezică urinară şi/sau uretră (carcinom cu celule scuamoase, carcinom cu celule de tranziţie, adenocarcinom), de prostată (adenocarcinom, sarcom), de testicul (seminom, teratom, carcinomul embrionar, teratocarcinom, choriocarcinom, sarcom, carcinom cu celule interstiţiale, fibrom, fibroadenom, tumorile adenomatoidă, lipom);

hepatom hepatic, de exemplu (carcinomul hepatocelular), colangiocarcinom, hepatoblastom, angiosarcom, adenom hepatocelular, hemangiom, tumorile endocrine pancreatice (precum feocromocitom, insulinom, tumora vasoactive peptida intestinală, tumora cu celule insulare şi glucagonom);

la oase, de exemplu, sarcom osteogenic (osteosarcom), fibrosarcom, histiocitom fibros malign, condrosarcom, sarcom Ewing, limfom malign (sarcom cu celule reticulate), mielom multiplu, maligne gigant chordoma celule tumorale, osteochronfromă (exostoze osteocartilaginoase), condrom benigne, condroblastom, condromixofibrom, osteoid osteom şi tumori cu celule gigant;

sistem nervos, de exemplu, neoplasme ale sistemului nervos central (SNC), limfom primar al SNC, cancer de craniu (osteom, hemangiom, granulom, xantom, boala Paget), meninge (meningiom, meningiosarcom, gliomatoză), cancer la creier (astrocitom, meduloblastom, gliom, ependimom, germinom [pinealom], glioblastom multiform, oligodendrogliom, neurinom, retinoblastom, tumori congenitale), neurofibromul măduvei spinării, meningiom, gliom, sarcom);

sistem reproductiv, de exemplu, ginecologic, uter (carcinom endometrial), col uterin (carcinomul de col uterin, displazie pre-tumorală de col uterin), ovarelor (carcinom ovarian [chistadenocarcinom seroasă, chistadenocarcinom mucinos, carcinom neclasificat], tumori cu celule granuloase-tecale, tumorile celulelor Sertoli-Leydig, disgerminom, teratom malign), vulva (carcinom cu celule scuamoase, carcinomul intraepitelială, adenocarcinom, fibrosarcom, melanom), vagin (carcinom cu celule clare, carcinom cu celule scuamoase, sarcom botrioid (rabdomiosarcom embrionar), trompe uterine (carcinom) şi alte zone asociate cu organele genitale feminine; placenta, penis, prostată, testicule, şi alte zone asociate cu organele genitale masculine;

sistem hepatic, de exemplu, sânge (leucemie mieloidă [acută şi cronică], leucemie limfoblastică acută, leucemie limfocitară cronică, boli mieloproliferative, multiple mielom, sindromul mielodisplazic), boala Hodgkin, limfom non-Hodgkin [limfom malignant];

cavitatea bucală, de exemplu, buza, limba, gumă, partea de jos a gurii, cerul gurii, şi alte părţi ale gurii, glanda parotida, şi alte părţi ale glandelor salivare, amigdală, orofaringe, nasofa, piriform sinusurilor, hipofaringe, şi alte părţi ale buzei, cavităţii bucale şi faringe;

piele, de exemplu, melanomul malign, melanomul cutanat, melanomul cutanat, carcinom cu celule scuamoase, sarcom Kaposi, moli nev displazic, lipom, angiom, dermatofibrom, şi cheloizi;

glandele suprarenale: neuroblastom; şi

alte ţesuturi ce includ ţesutului conjunctiv şi moale, retroperitoneu şi peritoneu, ochi, melanom intraocular, şi adnexa, regiunea mamară, a capului sau/şi gâtului, anală, glanda tiroida, paratiroid, glandei suprarenale şi alte glande endocrine şi structuri înrudite, neoplasm secundar nespecificată maligne ŞI ganglionilor limfatici, tumori maligne secundare respiratorii şi sisteme digestiv şi neoplasm malign secundar al altor zone.

Mai exact, exemplele de “cancer” când sunt utilizate aici în relaţie cu prezenta invenţie includ cancerul selectat dintre cancer pulmonar (NSCLC şi SCLC), cancer al gâtului capului Sau, cancer ovarian, cancer de colon, cancer rectal, cancer al regiunii anale, cancer la stomac, cancer mamar, cancer renal sau de ureter, carcinom cu celule renale, carcinom al pelvisului renal, neoplasme ale sistemului nervos central (SNC), limfom primar al SNC, limfom non-Hodgkin, tumori ale măduvei spinării, sau o combinaţie a unuia sa a mai multor cancere menţionate anterior .

Chiar mai exact, exemplele de “cancer” când sunt utilizate aici în relaţie cu prezenta invenţie includ cancerul selectat dintre cancer pulmonar (NSCLC şi SCLC), cancer mamar, cancer ovarian, cancer de colon, cancer rectal, cancer al regiunii anale, sau o combinaţie a unuia sa a mai multor cancere menţionate anterior.

Într-un exemplu al prezentei invenţii condiţii necanceroase includ asemenea condiţii hiperplastice precum hiperplazia benignă a pielii (de ex., psoriazis) şi hiperplazia benignă a prostatei (de ex., BPH).

Într-un alt exemplu, invenţia prezintă o metodă pentru inhibarea proliferării celulelor, conţinând celule de contact cu un compus conform invenţiei sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia într-o cantitate eficientă pentru a inhiba proliferation celulelor.

Într-un alt exemplu, invenţia prezintă metode centru inducerea apoptozei celulare, conţinând celule de contact cu un compus descrişi aici într-o cantitate eficientă pentru induce apoptoza celulelor.

"De contact" se referă la aducerea unui compus sau sări farmaceutic acceptabile conform invenţiei şi a unei celule ce exprimă EZH2 împreună într-un asemenea mod în care compusul poate afecta activitatea EZH2, fie direct sau indirect. Contactul pot fi realizat in vitro (adică, într-un mediu artificial precum, de ex., fără limitare, într-un tub de testare sau mediu de cultivare) sau in vivo (adică, într-un organism viu precum, fără limitare, un şoarece, şobolan sau şoarece.)

În unele exemple, celulele sunt într-o linie celulară, precum o linie celulară canceroasă. În alte exemple, celulele sunt într-un ţesut sau tumoare, şi ţesutul sau tumoarea poate fi la un subiect, inclusiv un om.

Forme şi Regimuri de Dozare

Administrare compuşilor conform invenţiei poate fi efectuată prin orice metoda care permite livrarea compuşilor către zona de acţiune. Acele metode includ căi orale, căi intraduodenale, injecţie parenterală (ce include intravenos, subcutanat, intramuscular, intravascular sau infuzie), administrare topică, şi administrare rectală.

Regimuri de dozare pot fi ajustate pentru a oferi răspunsul optim necesar necesar. De exemplu, un singur bol poate fi administrat, câteva doze divizate pot fi administrate în timp sau doza poate fi proporţional redusă sau crescută precum este indicat de exigenţele situaţiei terapeutice. Este în special avantajos de a formula compoziţii parenterale în forma de unităţi de dozare pentru uşurinţa administrării şi uniformitatea dozajului. Forma unitară de dozare, aşa cum este folosit aici, se referă la unităţi discrete din punct de vedere fizic potrivite ca dozaje unitare pentru subiecţi mamiferi care urmează a fi trataţi; fiecare unitate ce conţine o cantitate predeterminată de compus activ calculată pentru a produce efectul terapeutic necesar în asociere cu purtătorul farmaceutic necesar. Specificaţiile formei unitare de dozare conform invenţiei pot fi dictate de şi dependente direct de (a) caracteristicile unice ale agentului chemo-terapeutic şi efectul particular terapeutic sau profilactic care trebuie atins, şi (b) limitările inerente în domeniul compunerii unui asemenea compus activ pentru tratamentul sensibilităţii la indivizi.

Prin urmare, un specialist în domeniu va aprecia, în baza prezentei descrieri, că doza şi regimul de dozare este ajustat în concordanţă cu metode binecunoscute în domeniu terapeutic. Care este, doza maximum tolerabilă poate fi uşor stabilit, şi cantitate eficientă care poate oferi un beneficiu terapeutic detectabil la pacient poate de asemenea fi determinat, la fel cum pot fi determinate cerinţele temporale pentu administrarea fiecărui agent pentru a oferi un beneficiu terapeutic detectabil la pacient. În consecinţă, în timp ce o anumită doză şi regimuri de administrare sunt exemplificate aici, aceste exemple nu limitează în nici un mod doza şi regimul de administrare care poate fi oferit pacientul la urmărirea prezentei invenţii.

Trebuie menţionat faptul că valorile de dozaj pot varia în funcţie de tipul şi gravitate condiţiei condiţie care trebuie ameliorată, şi poate include o singură doză sau doze multiple. Trebuie înţeles suplimentar faptul că pentru orice subiect particular, regimuri de dozare specifice trebuie ajustate în timp conform nevoii individului şi hotărârea profesională a persoanei care administrează sau supraveghează administrarea compoziţiilor, şi intervalele de dozare stabilite aici în continuare sunt doar cu titlu de exemplu şi nu sunt intenţionate a limita domeniu sau practica compoziţiei revendicate. De exemplu, dozele pot fi ajustate în funcţie de parametrii farma-cocinetici sau farmacodinamici, care pot include efecte clinice precum efecte toxice şi/sau valori de laborator. Prin urmare, prezenta invenţie cuprinde încapsularea dozei intra-pacient precum va fi determinat de un specialist. Determinarea dozajelor potrivite şi regimurilor pentru administrare agentului chemo-terapeutic are binecunoscute în domeniu şi se va presupune că sunt cunoscute de un specialist căruia i s-au oferit învăţămintele descrise aici.

Cantitatea de compusul conform invenţiei administrată va depinde de subiectul tratat, gravitatea tulburării sau condiţiei, rata de administrare, disponibilitatea compusului şi discreţia medicului care prescrie tratamentul. Totuşi, un dozaj eficient este cuprins între aproximativ 0.001 şi aproximativ 100 mg per kg greutate corporală per zi, preferabil de la aproximativ 1 la aproximativ 35 mg/kg/zi, într-o singură doză sau doze divizate. Pentru un om de 70 kg, cantitate ar putea fi de la aproximativ 0.05 la aproximativ 7 g/zi, preferabil de la aproximativ 0.1 la aproximativ 2.5 g/zi. În anumite împrejurări, nivelele de dozare mai joase decât câmpul menţionat mai sus pot fi mai mult decât adecvate, în timp ce în alte cazuri doze mai mari pot fi utilizate fără a cauza orice efect advers, cu condiţia că asemenea doze mai mari sunt divizate mai întâi în doze mai mici pentru administrarea pe parcursul zilei.

Formulări şi Căi de Administrare

Aşa cum este folosit aici, un "purtător farmaceutic acceptabil" se referă la un purtător sau diluant care nu cauzează iritaţie semnificativă la organism şi şi nu abrogă activitatea biologică şi proprietăţile compusului activ.

Purtătorul farmaceutic acceptabil poate cuprinde orice purtător sau excipient farmaceutic convenţional. Alegerea purtătorului şi/sau excipientului va depinde mult de factori precum modul particular de administrare, efectul excipientului asupra solubilităţii şi stabilităţii, şi natură formei de dozaj.

Purtători farmaceutici potriviţi includ diluanţi inert sau agenţi de umplere, apă şi diverşi solvenţi organici (precum hidraţi şi solvaţi). Compoziţiile farmaceutice pot, dacă este necesar, pot conţine ingrediente suplimentare precum arome, agenţi de legare, excipienţi şi altele asemenea. Prin urmare pentru administrarea orală, tabletele ce conţine diverşi excipienţi, precum citric acid pot fi implicat împreună cu diverşi dezintegranţi precum amidon, acid alginic şi anumiţi silicaţi complex şi cu agenţi de legare precum zaharoză, gelatină şi acacia. Exemplele, fără limitare, de excipienţi includ carbonat de calciu, fosfat de calciu, diverse zaharuri şi tipuri de amidon, derivaţi din celuloză, gelatină, uleiuri vegetale şi polietilenglicoli. Suplimentar, agenţi de lubrifiere precum stearat de magneziu, lauril sulfat de sodiu şi talc sunt adesea utili cu scopul tabletării. Compoziţii solide de tip similar pot de asemenea fi implicate în capsule de gelatină cu conţinut sur sau moale. Exemplele nelimitative de materiale, astfel, includ laztoza sau praf de lapte şi polietilenglicoli cu greutate moleculară înaltă. Când sunt necesare suspensii apoase sau elixiruri pentru administrarea orală compusul activ din ele poate fi combinat cu diverşi agenţi de îndulcire sau aromatizare, materiale de colorare sau coloranţi şi, dacă este necesar, agenţi de emulsionare sau agenţi de suspendare, împreună cu diluanţi precum apă, etanol, propilenglicol, glicerină, sau combinaţii ale acestora.

Compoziţia farmaceutică poate, de exemplu, fi în formă potrivită pentru administrarea orală ca o tabletă, capsulă, pilulă, pudră, formulare cu eliberare susţinută, soluţie sau suspensie, for injecţie parenterală ca soluţie sterilă, suspensie sau emulsie, for administrare topică ca un unguent sau cremă, sau pentru administrare rectală ca supozitor.

Forme exemplare pentru administrare parenteral includ soluţii sau suspensii ale unui compus activ în a soluţie sterilă apoasă, de exemplu, propilenglicol apos sau soluţii de dextroză. Asemenea forme de dozaj pot fi tamponate potrivit, dacă este necesar.

Compoziţia farmaceutică poate fi în formă unitară de dozaj potrivită pentru o singură administrare de cantităţi precise.

Compoziţii farmaceutice pentru de-hepatizarea agenţilor activi şi metodele pentru prepararea acestora vor fi clare specialiştilor în domeniu. Asemenea compoziţii şi metode pentru prepararea acestora pot fi găsite, de exemplu, în 'Remington's Farmaceutic Sciences', 19th Edition (Mack Publishing Company, 1995), descrierea care este incorporată aici prin referinţă în întregime.

Compuşii conform invenţiei pot fi administraţi oral. Administrare orală poate implica înghiţirea, astfel încât compusul pătrunde în tractul gastrointestinal, sau administrarea bucală sau sublinguală pot fi implicate prin care compusul pătrunde în fluxul sangvin direct din gură.

Formulări potrivite pentru administrarea orală includ forme solide precum tablete, capsule ce conţin particule, lichizi, sau pudre, pastile (inclusiv umplute cu lichid), gume de mestecat, multi- şi nano-particule, geluri, soluţie solidă, lipozomi, pelicule (inclusiv muco-adezive), ovuli, spray-uri şi formulări lichide.

Formulările lichide includ suspensii, soluţii, siropuri şi elixiruri. Asemenea formulări pot fi folosite ca agenţi de umplere în capsule moi sau tari în capsule şi tipic includ un purtător, de exemplu, apă, etanol, polietilenglicol, propilenglicol, metilceluloză, sau un ulei potrivit, şi unul sau mai mulţi agenţi de emulsionare şi/sau agenţi de suspendare. Formulările lichide pot de asemenea fi preparate prin reconstituirea unui solid, de exemplu, dintr-un plic.

Compuşii conform invenţiei pot de asemenea fi utilizaţi în forme de dozaj cu dispersie rapidă, dezintegrare rapidă precum cele descrise în Expert Opinion in Terapeutic Patents, 11 (6), 981-986 by Liang şi Chen (2001), descrierea care este incorporată aici prin referinţă în întregime.

Pentru forme de dozaj ca tabletă, agentul activ poate cuprinde de la 1 TS% la 80 TS% din forma de dozaj, mult mai tipic de la 5 TS% la 60 TS% din forma de dozaj. În plus la agentul activ, tabletele în general conţin un dezintegrant. Exemplele de dezintegranţi includ sodiu amidon glicolat, carboximetil celuloză sodică, calciu carboximetil celuloză, crozcarmeloză sodică, crospovidona, polivinilpirolidona, metil celuloză, celuloză microcristalină, alchil inferior substituit hidroxipropilceluloză, amidon, amidon pregelatinizat şi alginat de sodiu. În general, dezintegrantul poate cuprinde de la 1 TS% la 25 TS%, preferabil de la 5 TS% la 20 TS% din forma de dozaj.

Agenţii de legare sunt în general utilizaţi pentru a avea impact asupra calităţilor coezive ale unei formulări ca tabletă. Agenţii de legare potriviţi includ celuloză microcristalină, gelatină, zaharuri, polietilenglicol, gume naturale şi sintetice, polivinilpirolidonă, amidon pregelatinizat, hidroxipropil celuloză şi hidroxipropil metilceluloză. Tabletele pot de asemenea conţin diluanţi, precum lactoză (monohidrat, spray-uscate monohidrat, anhidru şi altele asemenea), manitol, xilitol, dextroză, zaharoză, sorbitol, celuloză microcristalină, amidon şi fosfat de calciu dibazic dihidrat.

Tablete pot de asemenea în mod opţional include agenţi activi de suprafaţă, precum lauril sulfat de sodiu şi polisorbat 80, şi glidanţi precum dioxid de siliciu şi talc. Când sunt prezenţi, agenţii activi de suprafaţă are tipic în cantităţi de la 0.2 TS% la 5 TS% din tabletă, şi glidanţii tipic de la 0.2 TS% la 1 TS% din tabletă.

Tabletele de asemenea în general conţin lubrifianţi precum stearat de magneziu, stearat de calciu, stearat de zinc, stearil fumarat de sodiu, şi amestecuri de stearat de magneziu cu lauril sulfat de sodiu. Lubrifianţii în general sunt prezenţi în cantităţi de la 0.25 TS% la 10 TS%, preferabil de la 0.5 TS% la 3 TS% din tabletă.

Alte ingrediente convenţional includ anti-oxidanţi, coloranţi, agenţi de aromatizare, conservanţi şi agenţi de mascare a gustului.

Tablete considerate exemplare pot conţine până la 80 TS% agent activ, de la aproximativ 10 TS% la aproximativ 90 TS% agent de legare, de la aproximativ 0 TS% la aproximativ 85 TS% diluant, de la aproximativ 2 TS% la aproximativ 10 TS% dezintegrant, şi de la aproximativ 0.25 TS% la aproximativ 10 TS% lubrifiant.

Amestecurile de tablete pot fi comprimate direct sau cu rola pentru a forma tablete. Amestecurile de tablete sau porţiile de amestecuri pot în mod alternativ fi granulate la umezire, la uscare, sau prin topire, congelare după topire, sau extrudaţi înainte de tabletare. Formularea finală poate include unul sau mai multe straturi şi poate fi acoperită sau neacoperită; sau încapsulată.

Formularea tabletelor este descrisă în detail în “Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Vol. 1”, by H. Lieberman şi L. Lachman, Marcel Dekker, N.Y., N.Y., 1980 (ISBN 0-8247-6918-X), descrierea care este incorporată aici prin referinţă în întregime.

Formulările solide pentru administrarea orală pot fi formulate pentru a avea eliberare imediată şi/sau modificată. Formulările cu eliberare modificată include eliberarea întârziată, susţinută, pulsată, controlată, ţintită şi programată.

Formulările cu eliberare modificată sunt descrise în U.S. Patent No. 6,106,864. Detaliile altor tehnologii de eliberare precum dispersii cu energie ridicată şi particule osmotice şi acoperite pot fi găsite în Verma et al, Pharmaceutical Technology On-line, 25(2), 1-14 (2001). Utilizarea gumelor de mestecat pentru a atinge eliberarea conţinută este descrisă în WO 00/35298. Descrierile acestor referinţe sunt incorporate aici prin referinţă în întregime.

Administrare parenterală

Compuşii conform invenţiei pot de asemenea fi administraţi direct în fluxul de sânge, în muşchi, sau într-un organ intern. Căile potrivite pentru administrarea parenterală includ intravenos, intraarterial, intraperitoneal, intratecal, intraventricular, intrauretral, intrasternal, intracranial, intramuscular şi subcutanat. Dispozitive potrivite pentru administrarea parenterală includ injectoare cu ac (ce include micro-ac), injectoare fără ac şi tehnici de infuzie.

Formulările parenterale sunt tipic soluţii apoase care pot conţine excipienţi precum săruri, carbohidraţi şi agenţi de tamponare (preferabil la un pH de la 3 la 9), dar, pentru unele cereri de brevet, acestea pot fi mai mult formulate potrivit ca o soluţie sterilă non-apoasă sau ca formă uscată pentru a fi utilizată în conjuncţie cu un vehicul potrivit precum apă sterilă, fără pirogen.

Prepararea formulărilor parenterale sub condiţii sterile, de exemplu, prin liofilizare, poate fi uşor realizată prin tehnici farmaceutică standard binecunoscut specialiştilor în domeniu.

Solubilitatea compuşilor conform invenţiei utilizaţi în prepararea soluţiilor parenterale pot fi potenţial sporite prin utilizarea tehnicilor de formulare potrivite, precum încorporarea agenţilor de sporire a solubilităţii.

Formulările pentru administrarea parenterală pot fi formulate pentru a avea eliberare imediată şi/sau modificată. Formulările cu eliberare modificată include eliberarea întârziată, susţinută, pulsată, controlată, ţintită şi programată. Prin urmare compuşii conform invenţiei pot potenţial fi formulaţi ca un solid, semi-solid, sau lichid tixotropic pentru administrarea ca un depozit implantat oferind eliberarea modificată a compusului activ. Exemplele de asemenea formulări includ stenturi acoperite cu medicament şi micro-sfere PGLA.

Compuşii conform invenţiei pot de asemenea potenţial fi administraţi topic pe piele sau mucoasă, care este, dermal sau transdermal. De obicei formulările care urmează acest scop includ geluri, hidrogeluri, loţiuni, soluţii, creme, unguente, pudre, pansamente, spume, pelicule, plasturi de piele, vafele, implanturi, bureţi, fibre, bandaje şi micro-emulsii. Lipozomi pot de asemenea fi utilizaţi. De obicei purtătorii includ alcool, apă, ulei mineral, petrol lichid, petrol alb, glicerină, polietilenglicol şi propilenglicol. Potenţatori ai pătrunderii pot fi incorporaţi; vezi, de exemplu, J Pharm Sci, 88 (10), 955-958 de Finnin şi Morgan (October 1999). Alte metode de administrare topică includ livrarea prin electroporare, iontoforeză, fonoforeză, sonoforeză şi injecţii cu micro-ac sau fără ac (de ex. Pudrăject™, Bioject™, etc.). Descrierile acestor referinţe sunt încorporate aici prin referinţă în întregime.

Formulările pentru administrarea topică pot fi formulate pentru a avea eliberare imediată şi/sau modificată. Formulările cu eliberare modificată includ eliberarea întârziată, susţinută, pulsată, controlată, ţintită şi programată.

Compuşii conform invenţiei pot de asemenea potenţial fi administraţi intranazal sau prin inhalare, tipic în formă de pudră uscată (fie singuri, ca amestec, de exemplu, în amestec uscat cu lactoză, sau ca particule de component amestecate, de exemplu, amestecate cu fosfolipide, precum fosfatidilcolina) dintr-un inhalator de pudră sau ca un spary cu aerosol dintr-un container sub presiune, pompă, spray, atomizator (preferabil un pulverizator utilizând electrohidrodinamica pentru a produce un abur fin), sau nebulizator, cu sau fără utilizarea unui propulsor potrivit, precum 1,1,1,2-tetrafluoroetan sau 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropan. Pentru utilizarea intranazală, pudra poate include un agent bioadeziv, de exemplu, citosan sau ciclodextrină.

Containerul sub presiune, pompa, spray-ul, pulverizatorul, sau nebulizatorul poate conţine o soluţie sau suspensie de compusul conform invenţiei conţinând, de exemplu, etanol, etanol apos, sau un agent alternative potrivit for dispersarea, solubilizarea, sau extinderea eliberării compusului activ, propulsor ca solvent şi opţional un surfactant, precum trioleat de sorbitan, acid oleic, sau un acid oligolactic.

Înainte de utilizarea într-o formulare sub formă de pudră sau suspensie, compusul poate fi micronizat la dimensiunea potrivită pentru livrarea prin inhalare (tipic mai puţin de 5 microni). Acest lucru poate fi realizat pin orice metodă de mărunţire, precum măcinare cu jet în spirală, măcinarea cu jet în pat fluidizat, procesarea fluidului supercritic pentru a forma nano-particule, omogenizare la presiune înaltă, sau uscare prin pulverizare.

Capsulele (făcute, de exemplu, din gelatină sau HPMC), blistere şi cartuşe pentru utilizarea într-un inhalator sau insuflator pot fi formulate pentru a conţine un amestec pudră pentru compusul conform invenţiei, o bază pudră potrivită precum lactoză sau amidon şi un modificator performanţei precum l-leucină, manitol, sau stearat de magneziu. Lactoza poate fi anhidră sau în formă de monohidrat, preferabil ultima. Alţi excipienţi potriviţi includ dextran, glucoză, maltoză, sorbitol, xilitol, fructoză, zaharoză şi trehaloză.

O formulare ca soluţie potrivită pentru utilizarea într-un pulverizator utilizând electrohidrodinamica pentru a produce un vapor fin poate ocupa de la 1µg la 20mg din compusul conform invenţiei per acţionare şi volumul de acţionare poate varia de la 1µL la 100µL. O formulare tipică include un compus conform invenţiei, propilenglicol, sterile apă, etanol şi sodiu clorura. Solvenţii alternativi care pot fi folosiţi în lod ce propilenglicol include glicerol şi polietilenglicol.

Arome potrivite, precum mentol şi levomentol, sau îndulcitori, precum zaharină sau zaharină sodică, pot fi adăugate la acele formulări conform invenţiei intenţionate pentru administrarea prin inhalare/intranazală.

Formulările pentru administrarea prin inhalare/intranazală pot fi formulate pentru a avea eliberare imediată şi/sau modificată utilizând, de exemplu, poli(DL-lactic-coglicolic acid (PGLA). Formulările cu eliberare modificată include eliberarea întârziată, susţinută, pulsată, controlată, ţintită şi programată.

În cazul inhalatorilor şi aerosolilor cu pudră, unitatea de dozaj este determinată prin intermediul unei supape care livrează o cantitate măsurată. Unităţile în concordanţă cu invenţia are tipic aranjate pentru a administra o cantitate măsurată sau “puff” ce conţine o cantitate necesară compus conform invenţiei. Doza zilnică totală poate fi administrată într-o singură doză sau, mai de obicei, ca doze divizate pe parcursul zilei.

Compuşii conform invenţiei pot potenţial fi administraţi rectal sau vaginal, de exemplu, în formă de un supozitor, pesar, sau clismă. Untul de cacao este o bază supozitor tradiţională, dar diverse alternative pot fi folosite daca este necesar.

Formulările pentru administrarea rectală/vaginală pot fi formulate pentru a avea eliberare imediată şi/sau modificată utilizând. Formulările cu eliberare modificată include eliberarea întârziată, susţinută, pulsată, controlată, ţintită şi programată.

Compuşii conform invenţiei pot de asemenea fi administraţi direct în ochi sau ureche, tipic în formă de picături de suspensie sau soluţie micronizată în soluţie salină sterilă izotonică, pH-adjustată,. Alte formulări potrivite pentru administrarea oculară şi aurală pot include unguente, implanturi biodegradabile (de ex. bureţi de absobţie, colagen) şi non-biodegradabile (de ex. silicon), vafele, lentile şi sisteme de particule sau veziculare, precum niozomi sau lipozomi. Un polimer precum acid poliacrilic reticulat, polivinilalcool, acid hialuronic, polimer celulozic, de exemplu, hidroxipropilmetilceluloză, hidroxietilceluloză, sau metil celuloză, sau o polimer heteropolizaharidă, de exemplu, gumă gelan, poate fi incorporat împreună cu un conservant, precum clorură de benzalconiu. Asemenea formulări pot de asemenea fi livrate prin iontoforeza.

Formulările pentru administrarea oculară/aurală pot fi formulate pentru a avea eliberare imediată şi/sau modificată utilizând. Formulările cu eliberare modificată include eliberarea întârziată, susţinută, pulsată, controlată, ţintită şi programată.

Alte tehnici

Compuşii conform invenţiei pot fi combinaţi cu entităţi macromoleculare solubile, precum ciclodextrină şi derivaţi potriviţi ai acesteia sau polietilenglicol - ce conţine polimeri, pentru a spori solubilitatea acestora, rata de dizolvare, mascarea gustului, bio-disponibilitatea şi/sau stabilitatea pentru utilizare în oricare dintre modele de administrare menţionat mai sus.

Complecşii medicament-ciclodextrină, de exemplu, pot fi utili pentru diferite forme de dozaj şi căi de administrare. Ambii complecşi de includere şi ne - includere pot fi potenţial utilizaţi. Ca alternativă a complexării directe cu medicamentul, ciclodextrina poate fi folosiă ca aditiv auxiliar, adică ca un purtător, diluant, sau solubilizator. Cel mai des utilizaţi cu acest scop sunt ciclodextrine alfa, beta şi gama, exemplele de care pot fi găsite în PCT Publication Nos. WO 91/11172, WO 94/02518 şi WO 98/55148, descrieri care sunt incorporate aici prin referinţă în întregime.

Dozaj

Cantitatea de compusul activ administrat va fi dependentă de subiectul care este tratat, gravitatea tulburării sau condiţiei, rata de administrare, disponibilitatea compusului şi discreţia medicului care prescrie tratamentul. In orice caz, un dozaj eficient este tipic în intervalul de la aproximativ 0.001 la aproximativ 100 mg per kg greutate corporală per zi, preferabil aproximativ 0.01 la aproximativ 35 mg/kg/zi, în doză unitară sau doze divizate. Pentru un om de 70 kg, cantitate va fi de la aproximativ 0.07 la aproximativ 7000 mg/zi, preferabil aproximativ 0.7 la aproximativ 2500 mg/zi. În anumite împrejurări, nivelele de dozaj mai joase de limita inferioară a intervalului menţionat anterior pot fi mai mult decât adecvate, în timp ce în alte cazuri o doză mai mare poate fi folosită fără a cauza efecte secundare negative, asemenea doze mai mari pot fi tipic divizate în câteva doze mai mici pentru administrare pe parcursul zilei.

Părţile Trusei

Pe cât de mult poate fi necesar de a administra o combinaţie de compuşi activi, de exemplu, cu scopul tratării unei boli sau condiţii particulare, este în domeniul de aplicării prezentei invenţii că două sau mai multe compoziţii farmaceutice, cel puţin una dintre care conţine un compus în concordanţă cu invenţia, pot fi combinate în mod comod în formă de o trusă potrivită pentru co-administrarea compoziţiilor. Prin urmare trusa conform invenţiei include două sau mai multe compoziţii farmaceutice separate, cel puţin una dintre care conţine un compus conform invenţiei, şi metode de menţinere separată a compoziţiilor menţionate, precum un container, sticlă divizată, sau divizat pachet cu folie. Un exemplu de asemenea trusă este familiarul ambalaj blister utilizat pentru împachetarea tabletelor, capsulelor şi altele asemenea.

Trusa conform invenţiei poate fi în special potrivită pentru administrarea diferitelor forme de dozaj, de exemplu, oral şi parenteral, pentru administrarea compoziţiilor separate la intervale diferite de dozaj, sau pentru titrarea compoziţiilor separate una împotriva celeilalte. Pentru a ajuta respectarea, trusa tipic include ghidări pentru administrare şi poate fi prevăzută cu un ajutor de memorie.

Terapie Combinată

Aşa cum este folosită aici, termenul “terapie combinată” se referă la administrarea unui compus conform invenţiei împreună cu cel puţin un agent farmaceutic sau medicinal adiţional (de ex., un agent anti-cancer), fie secvenţial sau simultan.

Aşa cum este menţionat mai sus, compuşii conform invenţiei pot potenţial fi utilizaţi în combinaţie cu unul sau mai mulţi agenţi anti-cancer adiţional care sunt descrişi de mai jos. Când o terapie combinată este utilizată, unul sau mai mulţi agenţi anti-cancer adiţionali pot fi administraţi secvenţial sau simultan cu compusul conform invenţiei. Într-un exemplu, agentul anti-cancer adiţional este administrat la un mamifer (de ex., un om) înainte de administrarea compusului conform invenţiei. În alt exemplu, agentul anti-cancer adiţional este administrat la un mamifer după administrarea compusului conform invenţiei. În alt exemplu, agentul anti-cancer adiţional este administrat la un mamifer (de ex., un om) simultan cu administrare compusului conform invenţiei.

Invenţia de asemenea se referă la o compoziţie farmaceutică pentru tratamentul creşterii anormale a celulelor la un mamifer, ce include un om, care conţine o cantitate a unui compus conform invenţiei, precum este definit mai sus (ce include hidraţi, solvaţi şi polimorfi ai compusului sau sărurilor farmaceutice acceptabile menţionate ale acestuia), în combinaţie cu unul sau mai mulţi (preferabil de la unul al trei) agenţii anti-cancer selectat din grupul ce constă din agenţi anti-angiodenici şi inhibitori de transducţie a semnalului şi un purtător farmaceutic acceptabil, unde cantităţile de agentul activ şi combinaţia de agenţi anti-cancer când sunt luate împreună este terapeutic eficient în tratamentul creşterii celulare anormale menţionate.

Într-un exemplu al prezentei invenţii agentul anti-cancer utilizat în conjuncţie cu un compus conform invenţiei şi compoziţiile farmaceutice descrise aici este un agent de anti- angiogeneza (de ex., un agent care opreşte tumorile de a forma vase sangvine noi). Exemplele de agenţi antiangiodenici includ de exemplu inhibitori VEGF, inhibitori VEGFR, inhibitori TIE-2, inhibitori PDGFR, inhibitori de angiopoetin, inhibitori PKCβ, inhibitori COX-2 (ciclooxigenază II), integrine (alfa-v/beta-3), inhibitori MMP-2 (matrix-metalloprotienază 2), şi inhibitori MMP-9 (matrix-metalloprotienază 9).

Agenţi antiangiodenici preferaţi includ sunitinib (Sutent™), bevacizumab (Avastin™), axitinib (AG 13736), SU 14813 (Pfizer), şi AG 13958 (Pfizer).

Agenţi antiangiodenici adiţionali includ vatalanib (CGP 79787), Sorafenib (Nexavar™), pegaptanib octasodiu (Macugen™), vandetanib (Zactima™), PF-0337210 (Pfizer), SU 14843 (Pfizer), AZD 2171 (AstraZeneca), ranibizumab (Lucentis™), Neovastat™ (AE 941), tetratiomolibdat (Coprexa™), AMG 706 (Amgen), VEGF Trap (AVE 0005), CEP 7055 (Sanofi-Aventis), XL 880 (Exelixis), telatinib (BAY 57-9352), şi CP-868,596 (Pfizer).

Alţi agenţi antiangiodenici includ enzastaurin (LY 317615), midostaurin (CGP 41251), perifosină (KRX 0401), teprenonă (Selbex™) şi UCN 01 (Kyowa Hakko).

Alte exemple de agenţi antiangiodenici care pot fi folosiţi în conjuncţie cu un compus conform invenţiei şi compoziţiile farmaceutice descrişi aici include celecoxib (Celebrex™), parecoxib (Dynastat™), deracoxib (SC 59046), lumiracoxib (Preige™), valdecoxib (Bextra™), rofecoxib (Vioxx™), iguratimod (Careram™), IP 751 (Invedus), SC-58125 (Pharmacia) şi etoricoxib (Arcoxia™).

Alţi agenţi antiangiodenici includ exisulind (Aptosyn™), salsalat (Amigesic™), diflunisal (Dolobid™), ibuprofen (Motrin™), cetoprofen (Orudis™), nabumetona (Relafen™), piroxicam (Feldene™), naproxen (Aleve™, Naprosyn™), diclofenac (Voltaren™), indomethacin (Indocin™), sulindac (Clinoril™), tolmetin (Tolectin™), etodolac (Lodine™), cetorolac (Toradol™), şi oxaprozin (Zipro™).

Alţi agenţi antiangiodenici includ ABT 510 (Abbott), apratastat (TMI 005), AZD 8955 (AstraZeneca), incyclinide (Metastat™), şi PCK 3145 (Procyon).

Alţi agenţi antiangiodenici includ acitretin (Neotigazon™), plitidepsin (aplidină™), cilengtida (EMD 121974), combretastatin A4 (CA4P), fenretinida (4 HPR), halofuginona (Tempostatin™), Panzem™ (2-metoxiestradiol), PF-03446962 (Pfizer), rebimastat (BMS 275291), catumaxomab (Removab™), lenalidomidă (Revlimid™), scualamina (EVIZON™), talidomidă (Thalomid™), Ukrain™ (NSC 631570), Vitaxin™ (MEDI 522), şi acid zoledronic (Zometa™).

În alt exemplu agentul anti-cancer este aşa numitul inhibitor de transducţie a semnalului (de ex., inhibând metodele prin care moleculele regulatorii care reglementează procesele fundamentale de creştere celulară, diferenţierea, şi supravieţuirea comunicată în interiorul celulei). Inhibitorii de transducţie a semnalului includ molecule, anticorpi, şi moleculele antisens. Inhibitori de transducţie a semnalului includ de exemplu inhibitori ai kinazei (de ex., inhibitori ai tirozin kinazei sau inhibitori ai serin/treonin kinazei) şi inhibitori ai ciclului celular. Mai exact inhibitori de transducţie a semnalului includ, de exemplu, inhibitori ai farnesil transferazei proteice, inhibitori EGF, ErbB-1 (EGFR), ErbB-2, pan erb, inhibitori IGF1R, MEK, inhibitori c-Kit, inhibitori FLT-3, inhibitori K-Ras, inhibitori ai PI3 kinazei, inhibitori JAK, inhibitori STAT, inhibitori ai Raf kinazei, inhibitori Akt, inhibitor mTOR, inhibitori ai P70S6 kinazei, inhibitori ai căii WNT şi inhibitori ai aşa numitei kinaze ţintite multiplu.

Inhibitori de transducţie a semnalului preferaţi includ gefitinib (Iressa™), cetuximab (Erbitux™), erlotinib (Tarceva™), trastuzumab (Herceptin™), sunitinib (Sutent™), imatinib (Gleevec™), şi PD325901 (Pfizer).

Exemple adiţionale de inhibitori de transducţie a semnalului care pot fi folosiţi în conjuncţie cu un compus conform invenţiei şi compoziţii farmaceutice descrişi aici includ BMS 214662 (Bristol-Myers Squibb), lonafarnib (Sarasar™), pelitrexol (AG 2037), matuzumab (EMD 7200), nimotuzumab (TheraCIM h-R3™), panitumumab (Vectibix™), Vandetanib (Zactima™), pazopanib (SB 786034), ALT 110 (Alteris Terapeutics), BIBW 2992 (Boehringer Ingelheim),şi Cervene™ (TP 38).

Alte exemple de inhibitor de transducţie a semnalului includ PF-2341066 (Pfizer), PF-299804 (Pfizer), canertinib (CI 1033), pertuzumab (Omnitarg™), Lapatinib (Tycerb™), pelitinib (EKB 569), miltefosina (Miltefosin™), BMS 599626 (Bristol-Myers Squibb), Lapuleucel-T (Neuvenge™), NeuVax™ (E75 cancer vaccine), Osidem™ (IDM 1), mubritinib (TAK-165), CP-724,714 (Pfizer), panitumumab (Vectibix™), lapatinib (Tycerb™), PF-299804 (Pfizer), pelitinib (EKB 569), şi pertuzumab (Omnitarg™).

Alte exemplele de inhibitori de transducţie a semnalului includ ARRY 142886 (Array Biopharm), everolimus (Certican™), zotarolimus (Endeavor™), temsirolimus (Torisel™), AP 23573 (ARIAD), şi VX 680 (Vertex).

Suplimentar, alţi inhibitori de transducţie a semnalului includ XL 647 (Exelixis), sorafenib (Nexavar™), LE-AON (Georgetown University), şi GI-4000 (Globelmmune).

Alţi inhibitori de transducţie a semnalului includ ABT 751 (Abbott), alvocidib (flavopiridol), BMS 387032 (Bristol Myers), EM 1421 (Erimos), indisulam (E 7070), seliciclib (CYC 200), BIO 112 (Onc Bio), BMS 387032 (Bristol-Myers Squibb), PD 0332991 (Pfizer), şi AG 024322 (Pfizer).

Această invenţie suprinde utilizarea unui compus conform invenţiei împreună cu agenţi antineoplastici clasici. Agenţii antineoplastici clasici includ dar nu sunt limitaţi la modulatori hormonal precum agenţi terapeutici hormonali, anti-hormonali, androgen agonist, androgen antagonist şi anti-estrogen, inhibitori ai histon deacetilazei (HDAC), agenţi de atenuare a zgomotului genei sau agenţi de activare ai genei, ribonucleaze, proteomica, inhibitori ai topoizomerazei I, derivaţi camptotecină, inhibitori ai topoizomerazei II, agenţi de alchilare, antimetaboliţi, poli(ADP-riboză) inhibitor polimerazei-1 (PARP-1), inhibitori ai microtubulinei, antibiotice, inhibitori ai broşei derivate din plante, compuşi platină-coordonaţi, agenţi terapeutici de genă, oligonucleotide antisens, agenţi de ţintire vasculară (AiTV), şi statine

Exemplede agenţi antineoplastici clasici utilizaţi în terapia combinată cu un compus conform invenţiei, în mod opţional cu unul sau mai mulţi alţi agenţi includ, dar nu sunt limitaţi la, glucocorticoide, precum dexametazona, prednizona, prednizolona, metilprednizolona, hidrocortizona, şi progestina precum medroxiprogesterona, acetat de megestrol (Megace), mifepristona (RU-486), Receptori Modulatori Selective de Estrogen (RiMSE; precum tamoxifen, raloxifen, lasofoxifen, afimoxifen, arzoxifen, bazedoxifen, fispemifen, ormeloxifen, ospemifen, tesmilifen, toremifen, trilostan şi CHF 4227 (Cheisi), redulatori de diminuare a receprourlui de estrogen selectiv (SERD's; precum fulvestrant), exemestan (Aromasin), anastrozol (Arimidax), atamestan, fadrozol, letrozol (Femara), hormoni eliberatori de gonadotropină (GnRH; de asemenea fiind referiţi aici ca luteinizantul hormonului de eliberare a hormonului [LHRH]) agonişti precum buserelin (Suprefact), goserelin (Zoladex), leuprorelin (Lupron), şi triptorelin (Trelstar), abarelix (Plenaxis), bicalutamida (Casodex), ciproterona, flutamida (Eulexin), megestrol, nilutamida (Nilandron), şi osaterona, dutasterida, epristerida, finasterida, Serenoa repens, PHL 00801, abarelix, goserelin, leuprorelin, triptorelin, bicalutamida, tamoxifen, exemestan, anastrozol, fadrozol, formestan, letrozol, şi combinaţii ale acestora.

Alte exemplele de agenţi antineoplastici clasici utilizaţi în combinaţie cu un compus conform invenţiei includ dar nu sunt limitate la acid hidroxamic suberoilanilid (SAHA, Merck Inc./Aton Farmaceutics), depsipeptide (FR901228 sau FK228), G2M-777, MS-275, pivaloiloximetil butirat şi PXD-101; Onconază (ranpirnază),PS-341 (MLN-341), Velcada (bortezomib), 9-aminocamptotecina, belotecan, BN-80915 (Roche), camptotechina, diflomotecan, edotecarina, exatecan (Daiichi), gimatecan, 10-hidroxicamptotecina, irinotecan HCl (Camptosar), lurtotecan, Oratecin (rubitecan, Supergen), SN-38, topotecan, camptotecin, 10-hidroxicamptotecin, 9-aminocamptotecin, irinotecan, SN-38, edotecarin, topotecan, aclarubicina, adriamicina, amonafida, amrubicin, annamicina, daunorubicina, doxorubicina, elsamitrucina, epirubicina, etoposida, idarubicina, galarubicina, hidroxicarbamida, nemorubicina, novantrona (mitoxantrona), pirarubicina, pixantrona, procarbazina, rebeccamicina, sobuzoxana, tafluposida, valrubicina, Zinecard (dexrazoxan), azot muştar N-oxid, ciclofosfamida, AMD-473, altretamina, AP-5280, apazihiona, brostallicina, bendamustin, busulfan, carbocuona, carmustina, clorambucil, dacarbazina, estramustina, fotemustina, glufosfamida, ifosfamida, KW-2170, lomustina, mafosfamida, meclorethamina, melfalan, mitobronitol, mitolactol, mitomicin C, mitoxatrona, nimustina, ranimustina, temozolomide, tiotepa, şi compuşi de alchilare coordonaţi pe platină precum cisplatina, Paraplatina (carboplatina), eptaplatina, lobaplatina, nedaplatina, Eloxatina (oxaliplatin, Sanofi), streptozocina, satrplatina, şi combinaţii ale acestora.

Invenţia de asemenea cuprinde utilizarea unui compus conform invenţiei împreună cu inhibitori ai dihidrofolat reductazei (precum metotrexat şi NeuTrexin (trimetresat glucuronat)), antagonişti ai purinei (precum 6-mercaptopurina ribozidă, mercaptopurină, 6-tioguanină, cladribină, clofarabină (Clolar), fludarabina, nelarabină, şi raltitrexed), antagonişti ai pirimidinei (precum 5-fluorouracil (5-FU), Alimta (pemetrexed disodic, LY231514, MTA), capecitabina (Xeloda™), citozină arabinozidă, Gemzar™ (gemcitabine, Eli Lilly), Tegafur (UFT Orzel sau Uforal şi ce include combinaţie TS-1 de tegafur, gimestat şi otostat), doxifluridină, carmofur, citarabină (ce include ocfosfat, fosfat stearat, forme cu eliberare susţinută şi lipozomale), enocitabina, 5-azacitidina (Vidaza), decitabina, şi etinilcitidina) şi alţi antimetaboliţi precum eflornitina, hidroxiuree, leucovorina, nolatrexed (Thymitaq), triapina, trimetrexat, N-(5-[N-(3,4-dihidro-2-metil-4-oxoquinazolin-6-ilmetil)-N-metilamino]-2-tenoil)-L-glutamic acid, AG-014699 (Pfizer Inc.), ABT-472 (Abbott Laboratories), INO-1001 (Inotek Farmaceutics), KU-0687 (KuDOS Farmaceutics) şi GPI 18180 (Guilford Pharm Inc) şi combinaţii ale acestora.

Alte exemplele de agenţi antineoplastici clasici citotoxici utilizaţi în terapie combinată cu un compus conform invenţiei, în mod opţional cu unul sau mai mulţi alţi agenţi includ, dar nu sunt limitaţi la, Abraxan (Abraxis BioScience, Inc.), Batabulin (Amgen), EPO 906 (Novartis), Vinflunină (Bristol- Myers Squibb Company), actinomicină D, bleomicină, mitomicină C, neocarzinostatin (Zinostatin), vinblastină, vincristină, vindesină, vinorelbină (Navelbine), docetaxel (Taxotere), Ortataxel, paclitaxel (ce includ Taxoprexin un conjugat al DHA/paciltaxel), cisplatina, carboplatina, Nedaplatina, oxaliplatina (Eloxatin), Satraplatina, Camptosar, capecitabina (Xeloda), oxaliplatina (Eloxatin), Taxotere alitretinoin, Canfosfamida (Telcyta™), DMXAA (Antizoma), acid ibandronic, L-asparaginază, pegazpargază (Oncaspar™), Efaproxiral (Efaproxin™ - terapie cu radiaţie), bexarotenă (Targretin™), Tesmilifene (DPPE - îmbunătăţeşte eficacitatea citotoxice), Theratope™ (Biomira), Tretinoin (Vesanoid™), tirapazamina (Trizaona™), motexafin gadoliniu (Xcytrin™) Cotara™ (mAb), şi NBI-3001 (Protox Terapeutics), poliglutamat-paclitaxel (Xyotax™) şi combinaţii ale acestora.

Exemplele suplimentare de agenţi antineoplastici clasici utilizaţi în terapie combinată cu un compus conform invenţiei, în mod opţional cu unul sau mai mulţi alţi agenţi includ, dar nu sunt limitaţi la, cu ar fi Advexin (ING 201), TNFerade (GeneVec, Un compus care exprimă TNFalfa ca răspuns la radioterapie), RB94 (Bailor College of Medicine), Genasense (Oblimersen, Genta), Combretastatin A4P (CA4P), Oxi-4503, AVE-8062, ZD-6126, TZT-1027, Atorvastatin (Lipitor, Pfizer Inc.), Provastatin (Pravachol, Bristol-Myers Squibb), Lovastatin (Mevacor, Merck Inc.), Simvastatin (Zocor, Merck Inc.), Fluvastatin (Lescol, Novartis), Cerivastatin (Baycol, Bayer), Rosuvastatin (Crestor, AstraZeneca), Lovostatin, Niacin (Advicor, Kos Farmaceutics), Caduet, Lipitor, torcetrapib, şi combinaţii ale acestora.

Alt exemplu al prezentei invenţii de interes particular se referă la o metodă pentru tratamentul cancerului mamar la un om care are nevoie de asemenea tratament, ce includ administrarea la omul menţionat a unei cantităţi a unui compus conform invenţiei, în combinaţie cu unul sau mai mulţi (preferabil de la unul la trei) agenţi anti-cancer selectaţi din grupul ce constă din trastuzumab, tamoxifen, docetaxel, paclitaxel, capecitabina, gemcitabina, vinorelbina, exemestana, letrozol şi anastrozol.

Într-un exemplu invenţia prezintă o metodă de tratare a cancerului colorectal la un mamifer, precum un om, care are nevoie de asemenea tratament, prin administrarea unei cantităţi de un compus conform invenţiei, în combinaţie cu unul sau mai mulţi (preferabil de la unul la trei) agenţi anti-cancer. Exemple de particular agenţi anti-cancer îi include cei utilizaţi de obicei în chemoterapie adjuvant, precum FOLFOX, o combinaţie de 5-fluorouracil (5-FU) sau capecitabină (Xeloda), leucovorin şi oxaliplatin (Eloxatin). Exemplele suplimentare de agenţi anti-cancer particulari îi inclu pe cei utilizaţi de obicei în chemoterapie pentru boli metastatice, precum FOLFOX sau FOLFOX în combinaţie cu bevacizumab (Avastin); şi FOLFIRI, a combinaţie of 5-FU sau capecitabină, leucovorină şi irinotecan (Camptosar). Exemplele suplimentare includ 17-DMAG, ABX-EFR, AMG-706, AMT-2003, ANX-510 (CoFactor), aplidină (plitidepsin, Aplidin), Aroplatin, axitinib (AG-13736), AZD-0530, AZD-2171, bacillus Calmette-Guerin (BCG), bevacizumab (Avastin), BIO-117, BIO-145, BMS-184476, BMS-275183, BMS-528664, bortezomib (Velcade), C-1311 (Symadex), cantuzumab mertansine, capecitabine (Xeloda), cetuximab (Erbitux), clofarabine (Clofarex), CMD-193, combretastatin, Cotara, CT-2106, CV-247, decitabine (Dacogen), E-7070, E-7820, edotecarin, EMD-273066, enzastaurin (LY-317615)epothilona B (EPO-906), erlotinib (Tarceva), flavopyridol, GCAN-101, gefitinib (Iressa), huA33, huC242-DM4, imatinib (Gleevec), indisulam, ING-1, irinotecan (CPT-11, Camptosar) ISIS 2503, ixabepilona, lapatinib (Tykerb), mapatumumab (HGS-ETR1), MBT-0206, MEDI-522 (Abregrin), Mitomicină, MK-0457 (VX-680), MLN-8054, NB-1011, NGR-TNF, NV-1020, oblimersen (Genasense, G3139), OncoVex, ONYX 015 (CI-1042), oxaliplatin (Eloxatin), panitumumab (ABX-EGF, Vectibix), pelitinib (EKB-569), pemetrexed (Alimta), PD-325901, PF-0337210, PF-2341066, RAD-001 (Everolimus), RAV-12, Resveratrol, Rexin-G, S-1 (TS-1), seliciclib, SN-38 lipozomi, Sodiu stibogluconat (SSG), sorafenib (Nexavar), SU-14813, sunitinib (Sutent), temsirolimus (CCI 779), tetratiomolybdate, thalomide, TLK-286 (Telcyta), topotecan (Hycamtin), trabectedin (Yondelis), vatalanib (PTK-787), vorinostat (SAHA, Zolinza), WX-UK1, şi ZYC300, unde cantităţile de agentul activ împreună cu cantităţile de combinaţi de agenţi anti-cancer sunt eficiente în tratamentul cancerului colorectal.

Alt exemplu al prezentei invenţii de interes particular se referă la o metodă pentru tratamentul carcinomului cu celule renale la un om care are nevoie de asemenea tratament, ce include administrarea la omul menţionat a unei cantităţi a unui compus conform invenţiei, în combinaţie cu unul sau mai mulţi (preferabil de la unul la trei) agenţi anti-cancer selectaţi din grupul ce constă din axitinib (AG 13736), capecitabine (Xeloda), interferon alfa, interleukin-2, bevacizumab (Avastin), gemcitabine (Gemzar), thalidomide, cetuximab (Erbitux), vatalanib (PTK-787), sunitinib (Sutent™), AG-13736, SU-11248, Tarceva, Iressa, Lapatinib şi Gleevec, unde cantităţile de agentul activ împreună cu cantităţile de combinaţi de agenţi anti-cancer sunt eficiente în tratamentul carcinomului cu celule renale.

Alt exemplu al prezentei invenţii de interes particular se referă la o metodă pentru tratamentul unui melanom în un om care are nevoie de asemenea tratament, ce include administrarea la omul menţionat a unei cantităţi de un compus conform invenţiei, în combinaţie cu unul sau mai mulţi (preferabil de la unul la trei) agenţi anti-cancer selectaţi din grupul ce constă din interferon alfa, interleukin-2, temozolomidă (Temodar), docetaxel (Taxotere), paclitaxel, Dacarbazină (DTIC), carmustină (De asemenea cunoscut as BCNU), Cisplatin, vinblastină, tamoxifen, PD-325,901, axitinib (AG 13736), bevacizumab (Avastin), talidomidă, sorafanib, vatalanib (PTK-787), sunitinib (Sutent™), CpG-7909, AG-13736, Iressa, Lapatinib şi Gleevec, unde cantităţile de agentul activ împreună cu cantităţile de combinaţi de agenţi anti-cancer sunt eficiente în tratamentul melanomului.

Alt exemplu al prezentei invenţii de interes particular se referă la o metodă pentru tratamentul cancerului pulmonar în un om care are nevoie de asemenea tratament, ce include administrarea la omul menţionat a unei cantităţi de compus conform invenţiei, în combinaţie cu unul sau mai mulţi (preferabil unul până la trei) agenţi anti-cancer selectaţi din grupul ce constă din capecitabina (Xeloda), axitinib (AG 13736), bevacizumab (Avastin), gemcitabina (Gemzar), docetaxel (Taxotere), paclitaxel, pemetrexed disodic (Alimta), Tarceva, Iressa, Vinorelbina, Irinotecan, Etoposida, Vinblastina, sunitinib (Sutent™), şi Paraplatin (carboplatin), unde cantităţile de agentul activ împreună cu cantităţile de combinaţi de agenţi anti-cancer sunt eficiente în tratamentul cancerului pulmonar.

Metode de sinteză

Compuşii conform invenţiei pot fi preparaţi în conformitate cu procedurile exemplare descrise aici şi modificările acestora cunoscute de specialiştii din domeniu. În plus, căile de sinteză pentru formarea diferitor compuşi utili ca materii prime pentru prepararea compuşilor revendicaţi aici sunt descrise în Cererea Internatională No. PCT/IB2013/060682, conţinutul căreia este încorporat aici prin referinţă în întregime.

Acestea şi alte metode sunt exemplificate în prepararea exemplelor descrise aici. Se va înţelege de specialiştii din domeniu că selecţia materiilor prime şi ordinea particulară a etapelor, ce include, de ex., formarea inelului lactamic, instalarea sau manipularea diferitor grupe de substituenţi în lactamul condensat sau precursorii săi, şi instalarea fragmentului piridinonic, pot fi variate prin selecţia unei strategii de sinteză potrivite.

Exemplele de sinteză sunt furnizate pe tot parcursul Exemplelor şi în Tabelul 1 de mai jos. Valorile EZH2 IC50 (µM) pentru WT EZH2 şi Mutantul Y641N EZH2 sunt furnizate în Tabelul 2 pentru compuşii exemplari conform invenţiei.

Următoarele abrevieri sunt folosite pe tot parcursul Exemplelor: “Ac” înseamnă acetil, “AcO” sau “OAc” înseamnă acetoxi, “Ac2O” înseamnă anhidrida acetică, “ACN” sau “MeCN” înseamnă acetonitril, “AIBN” înseamnă azobisizobutironitril, “BOC”, “Boc” sau “boc” înseamnă N-terţ-butoxicarbonil, “Bn” înseamnă benzil, “BPO” înseamnă dibenzoil peroxid, “Bu” înseamnă butil, “iBu” înseamnă izobutil, “sBu” înseamnă sec-butil, “tBu” înseamnă terţ-butil, “tBuOK” sau “KOtBu” înseamnă terţ-butoxid de potasiu, “CDI” înseamnă carbonildiimidazol, “DCE” înseamnă 1,2-dicloroetan, “DCM” (CH2Cl2) înseamnă clorură de metilen, “DEAD” înseamnă dietil azodicarboxilat, “DIAD” înseamnă diizopropil azodicarboxilat, “DIPEA” sau “DIEA” înseamnă diizopropil etil amina, “DBU” înseamnă 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-ena, “DIBAL-H” înseamnă hidrura de diizobutilaluminiu, “DMA” înseamnă N,N-dimetilacetamida, “DMAP” înseamnă 4-dimetilaminopiridina, “DME” înseamnă dimetoxietan, "DMF" înseamnă N-N-dimetil formamida, “DMS" înseamnă dimetilsulfura, “DMSO" înseamnă dimetilsulfoxid, “dppf” înseamnă (difenilfosfino)ferocen, “DPPP” înseamnă 1,3-bis(difenilfosfino)propan, “Et” înseamnă etil, “EtOAc” înseamnă etil acetat, “EtOH” înseamnă etanol, “HATU” înseamnă 2-(7-Aza-1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluroniu hexafluorofosfat, “HOAc” sau “AcOH” înseamnă acid acetic, “i-Pr” sau “iPr” înseamnă izopropil, “IPA” înseamnă alcool izopropilic, “KHMDS” înseamnă hexametildisilazida de potasiu (bis(trimetilsilil)amidă de potasiu), “LiHMDS” înseamnă hexametildisilazida de litiu (bis(trimetilsilil)amida de litiu), “mCPBA” înseamnă acid meta-cloroperoxi-benzoic, “Me” înseamnă metil, “MeOH” înseamnă metanol, “Ms” înseamnă metansulfonat (în mod obişnuit numit 'mezilat'), "MTBE" înseamnă eter metil t-butilic, “NBS” înseamnă N-bromosuccinimida, “NCS” înseamnă N-clorosuccinimida, “NIS” înseamnă N-iodosuccinimida, “NMM” înseamnă N-metilmorfolina, “NMP” înseamnă 1-metil 2-pirolidinona, “Ph” înseamnă fenil, “RuPhos” înseamnă 2-Diciclohexilfosfino-2′,6′-diizopropoxibifenil, “Selectfluor” înseamnă Clorometil-4-fluoro-1,4-diazoniabiciclo[2.2.2]octan bis(tetrafluoroborat), “TEA” înseamnă trietilamina, “TFA” înseamnă acid trifluoroacetic, “Tf” înseamnă trifluorometansulfonat (în mod obişnuit numit 'triflat'), “THF” înseamnă tetrahidrofuran, “TMS” înseamnă trimetilsilil, “TMSA” înseamnă trimetilsililazida, “TsCl” înseamnă toluensulfonil clorură (în mod obişnuit numit 'tozilat'), “SFC” înseamnă cromatografie cu fluide supercritice, “TLC” înseamnă cromatografie în strat subţire, “Rf” înseamnă factor de retenţie, “~” înseamnă aproxiativ, “rt” înseamnă temperatura camerei, “h” înseamnă ore, “min” înseamnă minute, “eq.” înseamnă echivalenţi.

Pregătirea intermediarilor sintetici

Compus D: 2-(benziloxi)-3-(clorometil)-4,6-dimetilpiridina

La o soluţie de 2-hidroxi-4,6-dimetilpiridin-3-carbonitril (85.0 g, 0.574 mol) şi clorură de benzil (87.0 g, 0.688 mol) în toluen (800 mL) s-a adăugat Ag2O (146 g, 0.631 mol). Amestecul de reacţie s-a adăugat la 110 °C peste noapte. Amestecul de reacţie a fost filtrat prin CELITE® şi solidele spălate cu diclorometan. Filtratul a fost concentrat în vacuum şi purificat prin cromatografie pe coloană (eter de petrol/etil acetat) pentru a obţine 2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-carbonitril (Cpd A, 89 g, 65%) ca un solid alb.

44.5 g X 2 loturi: La o soluţie agitată de 2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-carbonitril (Cpd A, 44.5 g, 187 mmol) în diclorometan (500 mL) s-a adăugat cu picătura DIBAL-H (224 mL, 224 mmol, 1M în toluen) la 0 ~ 5 °C. Amestecul de reacţie s-a lăsat să se încălzească la temperatura camerei şi agitat suplimentar pentru 3 ore. Amestecul a fost diluat cu 1N HCl (200 mL) şi s-a adăugat viguros timp de 30 minute. Amestecul de reacţie a fost neutralizat cu 4N NaOH (20 mL) şi amestecul bifazic a fost filtrat şi spălate cu diclorometan (500 mL). Stratul apos a fost extras cu diclorometan (200 mL), straturile organice combinate au fost uscate pe sulfat de sodiu, şi concentrat în vacuum. Reziduul a fost purificat prin cromatografie pe coloană (eter de petrol/EtOAc) pentru a obţine 2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridina-3-carbaldehida (Cpd B, 70 g, 78%) ca un solid galben.

35 g X 2 loturi: La 0 °C la o soluţie de 2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-carbaldehidă (Cpd B, 35.0 g, 145 mmol) în metanol (1000 mL) s-a adăugat borohidrură de sodiu (6.60 g, 174 mmol) în porţii. Amestecul de reacţie s-a adăugat la temperatura camerei timp de 2 ore. Amestecul de reacţie s-a concentrat în vacuum şi reziduul a fost diluat cu NaHCO3 (sat., ap.). După ce barbotarea a încetat, soluţia apoasă a fost extrasă cu etil acetat (2 x 500 mL). Straturile organice combinate au fost uscate pe sulfat de sodiu, concentrat în vacuum, şi purificate prin cromatografie pe coloană (eter de petrol/etil acetat) pentru a obţine [2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il]metanol (Cpd C, 43 g, 61%) ca un lichid incolor.

21.5 g x 2 loturi: La o soluţie de [2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il]metanol (Cpd C, 21.5 g, 88.5 mmol) în diclorometan anhidru (400 mL) s-a adăugat clorură de tionil (16.0 g, 133 mmol) la -40 °C sub N2. Amestecul s-a adăugat la -40 oC timp de 30 minute. Amestecul de reacţie a fost turnat în apă cu gheaţă (300 mL) şi ajustat la pH 7~8 cu NaHCO3 (solid). Amestecul a fost separat şi stratul apos a fost extras cu diclorometan (300 mL). Straturile organice combinate au fost spălate cu soluţie de sare de bucătărie (300 mL), uscate pe sulfat de sodiu, şi concentrate în vacuum. Reziduul a fost purificat prin cromatografie pe coloană (eter de petrol/etil acetat, 100:1) pentru a obţine 2-(benziloxi)-3-(clorometil)-4,6-dimetilpiridina (Cpd D, 27.5 g, 60%) ca un solid alb. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.51-7.49 (d, 2H), 7.41-7.37 (t, 2H), 7.34-7.30 (t, 1H), 6.62 (s, 1H), 5.45 (s, 2H), 4.73 (s, 2H), 2.42 (s, 3H), 2.37 (s, 3H). MS: 261.9 [M+H]+.

Compus L: 2-(benziloxi)-3-(clorometil)-4-(difluorometoxi)-6-metilpiridina

La o suspensie răcită (-10 °C) de hidrură de sodiu (60 wt% dispersie în ulei mineral, 59.9 g, 1500 mmol) în tetrahidrofuran anhidru (1200 mL) s-a adăugat soluţie de malononitril (100 g, 1190 mmol) în tetrahidrofuran anhidru (30 mL) cu picătura, destul de încet pentru a menţine temperatura internă mai jos de 5 °C. După terminarea adiţiei, amestecul s-a adăugat la 0 °C timp de 1.5 ore, apoi dichetena (80.1 g, 1190 mmol) s-a adăugat cu picătura, destul de încet pentru a menţine temperatura internă mai jos de 0 °C. Amestecul s-a adăugat la -10 °C timp de 1.5 ore, apoi neutralizat cu 4N ap. HCl, şi concentrat pentru a înlătura volatilele. Suspensia rămasă în 4N ap. HCl (2000 mL) s-a adăugat la reflux timp de 5 ore, apoi agitată la temperatura camerei peste noapte. Precipitatul alb rezultat a fost colectat prin filtrare cu aspiraţie. Rămăşiţa de pe filtru a fost spălată consecutiv cu apă (500 mL), etanol (500 mL) şi MTBE (300 mL). Solidul a fost uscat obţinându-se 4-hidroxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-carbonitril (Cpd E, 108 g, 60.3%) ca o pulbere galbenă. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.40 (s.l., 1H), 11.72 (s.l., 1H), 5.82 (s, 1H), 2.17 (s, 3H).

O suspensie de 4-hidroxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-carbonitril (Cpd E, 91 g, 610 mmol), oxiclorură de fosfor (195 g, 1270 mmol) şi pentaclorura de fosfor (265 g, 1270 mmol) în cloroform (1200 mL) a fost încălzită la reflux timp de 5 ore, rezultând un amestec omogen de culoare roşie. Amestecul a fost turnat în apă (2000 mL) atent la agitare, apoi neutralizat cu hidroxid de amoniu (28% apos). Precipitatul solid rezultat a fost filtrat, spălat consecutiv cu diclorometan (400 mL) şi etanol (500 mL), şi uscat pentru a obţine 4-cloro-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridina-3-carbonitril (Cpd F, 78 g, 76%) ca un solid galben. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.43 (s.l., 1H), 6.53 (s, 1H), 2.28 (s, 3H).

O suspensie de 4-cloro-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridina-3-carbonitril (Cpd F, 90 g, 530 mmol), oxid de argint(I) (136 g, 587 mmol) şi clorură de benzil (81.1 g, 641 mmol) în toluen anhidru (1500 mL) a fost încălzită la reflux timp de 12 ore. Amestecul a fost filtrat printr-un filtru de CELITE® şi rămăşiţa de pe filtru spălată cu diclorometan (500 mL). Filtratul a fost concentrat pentru a obţine un reziduu (~100 g), care a fost purificat prin cromatografie pe coloană (silicagel, eter de petrol/EtOAc= 50:1~30:1), obţinându-se 2-(benziloxi)-4-cloro-6-metilnicotinonitril (Cpd G, 70 g, 51%) ca un solid galben deschis. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.49-7.47 (m, 2H), 7.40-7.33 (m, 3H), 6.91 (s, 1H), 5.05 (s, 2H), 2.50 (s, 3H).

La o soluţie agitată de 2-(benziloxi)-4-cloro-6-metilnicotinonitril (Cpd G, 70 g, 270.58 mmol) în N,N-dimetilformamidă (300 mL) s-a adăugat acetat de ceziu (156.0 g, 812 mmol) la temperatura camerei. Amestecul rezultat s-a adăugat la 80 °C timp de 40 ore. Amestecul a fost diluat cu etil acetat (500 mL) şi spălat cu soluţie de sare de bucătărie (3 x 400 mL). Faza organică a fost uscată pe sulfat de sodiu, filtrată, şi concentrată pentru a obţine un reziduu (~50 g), care a fost purificat prin cromatografie pe coloană (silicagel, eter de petrol/EtOAc=10:1~3:1) pentru a obţine 2-(benziloxi)-4-hidroxi-6-metilnicotinonitril (Cpd H, 31 g, 48%) ca un solid galben deschis. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.28 (s.l., 1H), 7.51-6.98 (m, 5H), 6.50 (s, 1H), 5.41 (s, 2H), 2.34 (s, 3H). MS 226.8 [M+Na]+.

La o suspensie de 2-(benziloxi)-4-hidroxi-6-metilnicotinonitril (Cpd H, 20.0 g, 83 mmol) şi clorodifluoroacetat de sodiu (25.4 g, 166 mmol) în N,N-dimetilformamidă (200 mL) s-a adăugat carbonat de potasiu (34.5 g, 250 mmol) la temperatura camerei. Amestecul rezultat a fost încălzit la 100 °C timp de 10 minute. Amestecul de reacţie a fost diluat cu etil acetat (300 mL) şi spălat cu NH4Cl sat. ap. (3 x 400 mL), şi soluţie de sare de bucătărie (3 x 400 mL). Stratul apos a fost extras dinnou cu etil acetat (400 mL). Straturile organice combinate au fost uscate pe sulfat de sodiu, filtrate, şi concentrate pentru a obţine un reziduu (18 g), care a fost purificat prin cromatografie pe coloană (silicagel, eter de petrol/EtOAc= 50:1~20:1) pentru a obţine 2-(benziloxi)-4-(difluorometoxi)-6-metilnicotinonitril (Cpd I, 16.3 g, 67%) ca un solid galben deschis. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.49-7.46 (m, 2H), 7.40-7.33 (m, 3H), 6.69 (t, J=71 Hz, 1H), 6.67 (s, 1H), 5.51 (s, 2H), 2.52 (s, 3H).

La o soluţie de 2-(benziloxi)-4-(difluorometoxi)-6-metilnicotinonitril (Cpd I, 11 g, 38 mmol) în diclorometan anhidru (250 mL) sub azot s-a adăugat hidrură de diizobutilaluminiu (1.0 M în toluen, 72 mL, 72 mmol) cu picătura la 0 °C. După terminarea adiţiei, amestecul s-a adăugat la temperatura camerei timp de 2.5 ore. Amestecul a fost acidulat la pH ~ 5 cu 1M HCl ap.. După agitare la temperatura camerei timp de 2 ore, amestecul a fost neutralizat cu 4.0 M NaOH ap.. Amestecul a fost filtrat printr-un filtru de CELITE® şi rămăşiţa de pe filtru a fost spălată cu diclorometan (300 mL). Filtratul a fost extras cu diclorometan (2 x 500 mL). Straturile organice combinate au fost spălate cu soluţie de sare de bucătărie (800 mL), uscate pe sulfat de sodiu, şi concentrat pentru a obţine un reziduu (13.4 g), care a fost purificat prin cromatografie pe coloană (silicagel, eter de petrol/ EtOAc= 30:1~10:1) pentru a obţine 2-(benziloxi)-4-(difluorometoxi)-6-metilnicotinaldehida (Cpd J, 6 g, 50%) ca un solid galben deschis. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 10.40 (s, 1H), 7.49-7.48 (m, 2H), 7.40-7.31 (m, 3H), 6.68 (t, J=72 Hz, 1H), 6.62 (s, 1H), 5.53 (s, 2H), 2.50 (s, 3H).

La o soluţie de 2-(benziloxi)-4-(difluorometoxi)-6-metilnicotinaldehida (Cpd J, 12 g, 41 mmol) în metanol (120 mL) s-a adăugat borohidrură de sodiu (1.86 g, 49.16 mmol) în porţii la 0 °C. După terminarea adiţiei, amestecul s-a adăugat la temperatura camerei timp de 2 ore. Reacţia a fost diluată cu NH4Cl sat. ap. (50 mL), apoi s-a diluată cu etil acetat (500 mL) şi apă (100 mL) şi extrasă cu etil acetat (2 x 100 mL). Straturile organice combinate au fost spălate cu soluţie de sare de bucătărie (300 mL), uscate pe sulfat de sodiu şi concentrată pentru a obţine un reziduu (~13.1 g), care a fost purificat prin cromatografie pe coloană (silicagel, eter de petrol: EtOAc =6:1) pentru a obţine (2-(benziloxi)-4-(difluorometoxi)-6-metilpiridin-3-il)metanol (Cpd K, 11.7 g, 97%) ca un solid alb. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.52-7.46 (m, 2H), 7.44-7.33 (m, 3H), 6.60 (t, J=73 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 5.46 (s, 2H), 2.46 (s, 3H).

La o soluţie de (2-(benziloxi)-4-(difluorometoxi)-6-metilpiridin-3-il)metanol (Cpd K, 7.6 g, 26 mmol) în diclorometan anhidru (120 mL) s-a adăugat clorură de tionil (3.67 g, 30.9 mmol) cu picătura la -20 °C. Amestecul s-a adăugat la -20 °C timp de 1 oră, apoi turnat în apă (50 mL), şi neutralizat cu NaHCO3 saturat ap.. Faza apoasă a fost extrasă cu diclorometan (2 x 90 mL). Fazele organice combinate au fost uscate pe sulfat de sodiu, filtrate şi concentrate pentru a obţine un reziduu (~6.1 g), care a fost purificat prin cromatografie pe silicagel (eter de petrol/EtOAc=6:1) pentru a obţine compusul din titlu, 2-(benziloxi)-3-(clorometil)-4-(difluorometoxi)-6-metilpiridina (Cpd L, 5.7 g, 71%) ca un solid alb. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.50 (d, J = 7.2, 2H), 7.41-7.33 (m, 3H), 6.64 (t, J=73 Hz, 1H),.6.56 (s, 1H), 5.48 (s, 2H), 4.69 (s, 2H), 2.47 (s, 3H). MS: 314 [M+H]+.

Compus S: 2-{[2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il]metil}-7-bromo-5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona.

Un amestec de acid 3-cloro-2-metilbenzoic (100 g, 0.58 mol), N-clorosuccinimidă (90 g, 0.67 mol) şi acetat de paladiu(II) (14.7 g, 65.7 mmol) în N,N-dimetilformamidă (1 L) s-a adăugat la 110 °C într-o atmosferă de azot peste noapte. După răcire la temperatura camerei, carbonat de cesiu (378 g, 1.16 mol) şi iodoetan (317 g, 2.03 mol) s-au adăugat şi agitarea a continuat la temperatura camerei timp de 1.5 ore. Amestecul de reacţie a fost turnat într-un amestec de apă (1 L) şi eter metil terţ-butilic (800 mL). Solidele au fost înlăturate prin filtrare, şi straturile de filtrat separate. Stratul apos a fost extras cu mai mult eter metil terţ-butilic (600 mL). Extractele organice combinate au fost spălate cu soluţie de clorură de sodiu apoasă saturată (1.2 L), uscate pe sulfat de sodiu, şi concentrate în vacuum. Reziduul a fost purificat prin cromatografie pe silicagel (eluţie cu 50:1 eter de petrol/etil acetat), obţinându-se etil 3,6-dicloro-2-metilbenzoat (Cpd N, 110 g, ~ 80% pur, 80% randament) ca un ulei galben.

O soluţie de etil 3,6-dicloro-2-metilbenzoat (Cpd N, 120 g, 0.52 mol) şi N-bromosuccinimidă (147 g, 0.82 mol) în cloroform (1 L) a fost tratată cu azobisizobutironitril (25.3 g, 0.15 mol) şi amestecul refluxat peste noapte. După răcire la temperatura camerei, amestecul a fost diluat cu diclorometan (800 mL) şi spălat cu apă (1.2 L). Stratul apos a fost extras cu diclorometan (800 mL). Extractele organice combinate au fost spălate cu soluţie de clorură de sodiu apoasă saturată (1.5 L), uscate pe sulfat de sodiu, şi concentrate în vacuum pentru a obţine etil 2-(bromometil)-3,6-diclorobenzoat (Cpd O, 160 g, 100% randament) care a fost folosit fără purificare suplimentară.

O soluţie de cianură de sodiu (75.12 g, 1.53 mol) în apă (300 mL) s-a adăugat cu picătura la o soluţie de etil 2-(bromometil)-3,6-diclorobenzoat (Cpd O, 320 g, 1.03 mol) în dimetisulfoxid (2.4 L) la temperatura camerei. Amestecul s-a adăugat la temperatura camerei timp de 1.5 ore. Amestecul de reacţie a fost turnat într-un amestec de apă (4 L) şi eter metil terţ-butilic (2 L), şi straturile separate. Stratul organic a fost spălat cu apă (2L) şi cu soluţie de clorură de sodiu apoasă saturată (2 L), uscat pe sulfat de sodiu, şi concentrat în vacuum. Reziduul a fost purificat prin cromatografie pe silicagel (eluţie cu 30:1 eter de petrol/etil acetat), obţinându-se etil 3,6-dicloro-2-(cianometil)benzoat (Cpd P, 150 g, ~75% pur, 47% randament) ca un ulei galben.

Clorura de cobalt(II) hexahidrat (166 g, 0.70 mol) s-a adăugat la temperatura camerei la soluţia de etil 3,6-dicloro-2-(cianometil)benzoat (Cpd P, 90 g, 0.35mol) în etanol (1.5 L), şi amestecul rezultat răcit la 0 °C. Borohidrură de sodiu (66.3 g, 1.74 mol) s-a adăugat în porţii. Amestecul s-a adăugat la temperatura camerei timp de 1 oră, şi apoi refluxat peste noapte. Suspensia rezultată a fost filtrată şi filtratul concentrat în vacuum. Solidele din rămăşiţa de pe filtru au fost agitate în etil acetat (600 mL), şi apoi filtrate dinnou. Această procedură s-a repetat a doua oară. Filtratele combinate s-au adăugat la reziduul filtrat original, şi această soluţie organică spălată cu apă (800 mL) şi soluţie de clorură de sodiu apoasă saturată (800 mL), uscat pe sulfat de sodiu, şi concentrată în vacuum pentru a obţine 5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd Q, 29.3 g, 39% randament) ca un solid albiu.

La o soluţie de 5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd Q, 40 g, 0.186 mol) în acid sulfuric concentrat (200 mL) la 60°C s-a adăugat N-bromosuccinimida (49.7 g, 0.279 mol) în porţii. Agitarea a fost continuată la 60 °C timp de 2 ore, apoi mai multă N-bromosuccinimidă (5 g. 28 mmol) s-a adăugat. După agitare la 60 °C timp de 1 oră suplimentară, amestecul a fost turnat în apă cu gheaţă (500 mL), apoi extras cu diclorometan (3 x 500 mL). Extractele organice combinate au fost spălate cu soluţie de clorură de sodiu apoasă saturată (800 mL), uscate pe sulfat de sodiu, şi concentrate în vacuum. Reziduul s-a adăugat în etil acetat (40 mL) şi eter de petrol (20 mL), şi solidele rezultate colectate prin filtrare şi uscate în vacuum pentru a obţine 7-bromo-5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd R, 41 g, 75% randament) ca un solid albiu.

Soluţie de terţ-butoxid de potasiu în tetrahidrofuran (1.0 M, 190 mL, 0.19 mol) s-a adăugat cu picătura la o soluţie răcită (0 °C) de 7-bromo-5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă (Cpd R, 47 g, 0.16 mol) în N,N-dimetilformamidă anhidră (500 mL) într-o atmosferă de azot. Agitarea a fost continuată la 0 °C timp de 5 minute, apoi 2-(benziloxi)-3-(clorometil)-4,6-dimetilpiridina (Cpd D, 40.2 g, 0.15 mol) s-a adăugat într-o porţie. După agitare timp de 10 minute la 0 °C, amestecul a fost tratată cu acid acetic concentrat (2 mL) şi turnat în eter metil terţ-butilic (600 mL). Soluţia organică a fost spălată cu apă (800 mL) şi soluţie de clorură de sodiu apoasă saturată (800 mL), uscată pe sulfat de sodiu, şi concentrată în vacuum. Reziduul a fost purificat prin cromatografie pe silicagel (eluţie cu 30:de la 1 la 20:1 eter de petrol/etil acetat), obţinându-se 2-{[2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il]metil}-7-bromo-5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd S, 50 g, 64% randament) ca un solid albiu. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.08 (s, 1H), 7.45-7.43 (m, 2H), 7.32-7.29 (m, 3H), 6.76 (s, 1H), 5.38 (s, 2H), 4.71 (s, 2H), 3.24 (t, J = 6 Hz, 2H), 2.72 (t, J = 6 Hz, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.31 (s, 3H). MS: 521 [M+H]+.

Compus T: Metil 2-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)acetat.

Un amestec de 2-{[2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il]metil}-7-bromo-5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă (Cpd S, 1.0 g, 1.9222 mmol), 1-(terţ-butildimetilsililoxi)-1-metoxietenă (1.09 g, 5.77 mmol), bis(tri-terţ-butilfosfin)paladiu(0) (98.2 mg, 0.192 mmol) şi fluorură de litiu (299 mg, 11.5 mmol) în N,N-dimetilformamidă anhidră (18 mL) a fost degazat cu azot timp de 10 minute. Apoi amestecul a fost încălzit într-un reactor cu microunde la 100 °C timp de 3 ore. Apă (20 mL) s-a adăugat la amestecul de reacţie, care a fost apoi extras cu etil acetat (2 x 40 mL). Straturile organice combinate au fost spălate cu soluţie de sare de bucătărie (4 x 50 mL), uscate pe sulfat de sodiu, şi concentrate în vacuum. Produsul crud a fost purificat prin cromatografie pe silicagel (eter de petrol/EtOAc = 3:1, Rf ~ 0.45) pentru a obţine metil 2-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)acetat (Cpd T, 600 mg, 60.8%) ca un solid galben deschis. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 7.37-7.30 (m, 4H), 6.62 (s, 1H), 5.42 (s, 2H), 4.87 (s, 2H), 3.80 (s, 2H), 3.72 (s, 3H), 3.28 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.73 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.42 (s, 3H), 2.32 (s, 3H). MS: 535.0 [M+Na]+.

Compus U: Metil 2-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)-2-diazoacetat

La o soluţie de metil 2-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)acetat (500 mg, 0.974 mmol) şi 4-acetil aminobenzensulfonil azidă (281 mg, 1.17 mmol) în acetonitril anhidru (8 mL) s-a adăugat 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-ena (0.22 mL, 1.47 mmol). Amestecul de reacţie rezultat s-a adăugat la temperatura camerei timp de 3 ore. După înlăturarea solventului, reziduul rezultat a fost purificat printr-o coloană cu silicagel cu un gradient de eluţie de 0◇40%EtOAc/heptan, obţinându-se metil 2-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)-2-diazoacetat ca o spumă asemenătoare cu un solid (Cpd U, 454 mg, 86% randament). LCMS: 511.10/512.10 (M - N2). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.64 (s, 1H), 7.44 (d, J=6.60 Hz, 2H), 7.29 - 7.39 (m, 3H), 6.63 (s, 1H), 5.47 (s, 2H), 4.89 (s, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.30 (t, J=5.99 Hz, 2H), 2.74 - 2.86 (m, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.36 (s, 3H).

Compus W: Metil 2-(2-((2-(benziloxi)-4-(difluorometoxi)-6-metilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)acetat

Soluţia de terţ-butoxid de potasiu în tetrahidrofuran (1.0 M, 3.2 mL, 3.2 mmol) s-a adăugat cu picătura la o soluţie răcită de 7-bromo-5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd R, 750 mg, 2.54 mmol) în N,N-dimetilformamidă anhidră (15 mL). Amestecul s-a adăugat la 0 °C timp de 15 minute, şi apoi o soluţie de 2-(benziloxi)-3-(clorometil)-4-(difluorometoxi)-6-metilpiridină (Cpd L, 798 mg, 2.54 mmol) în N,N-dimetilformamidă anhidră (5 mL) s-a adăugat cu picătura. După agitare la 0 °C timp de 30 minute, soluţia a fost diluată cu apă (30 mL) şi extrasă cu etil acetat (3 x 15 mL). Straturile organice combinate au fost spălate consecutiv cu apă (2 x 20 mL) şi soluţie de sare de bucătărie (20 mL), uscate pe sulfat de sodiu, filtrate, concentrate, şi au fost purificate prin cromatografie pe coloană (silicagel, eter de petrol/EtOAc=7:1) pentru a obţine 2-((2-(benziloxi)-4-(difluorometoxi)-6-metilpiridin-3-il)metil)-7-bromo-5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd V, 0.97 g, 67%) ca un solid galben deschis.

Un amestec de 2-((2-(benziloxi)-4-(difluorometoxi)-6-metilpiridin-3-il)metil)-7-bromo-5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă (Cpd V, 500 mg, 0.874 mmol), 1-(terţ-butildimetilsililoxi)-1-metoxietenă (494 mg, 2.62 mmol), bis(tri-terţ-butilfosfin)paladiu(0) (67 mg, 0.313 mmol) şi fluorură de litiu (136 mg, 5.24 mmol) în N,N-dimetilformamidă anhidră (15 mL) a fost degazat cu azot timp de 10 minute, apoi încălzit la 100 oC într-un reactor cu microunde timp de 3 ore. După răcire, amestecul a fost diluat cu apă (30 mL) şi extras cu etil acetat (4 x 20 mL). Straturile organice combinate au fost spălate cu apă (3 x 15 mL) şi soluţie de sare de bucătărie (15 mL), uscate şi concentrate. Reziduul a fost purificat prin TLC prep. (silicagel, eter de petrol/EtOAc=2:1, Rf~0.35) pentru a obţine metil 2-(2-((2-(benziloxi)-4-(difluorometoxi)-6-metilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)acetat (Cpd W, 175 mg, 35.4%) ca un solid alb. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.42-7.41 (m, 2H), 7.37 (s, 1H), 7.29-7.27 (m, 3H), 6.66 (t, J=72 Hz, 1H), 6.62 (s, 1H), 5.45 (s, 2H), 4.82 (s, 2H), 3.80 (s, 2H), 3.72 (s, 3H), 3.26 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.73 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.46 (s, 3H).

Compus Z: 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-7-bromo-8-cloro-3,4-dihidro-izochinolin-1(2H)-ona.

O soluţie de 7-amino-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (1.01 g, 6.23 mmol) şi N-clorosuccinimida (832 mg, 6.23 mmol) în N,N-dimetilformamidă (10 mL) a fost încălzită la 55 °C timp de 5 ore. Amestecul a fost turnat în apă şi extras cu etil acetat (3 x). Straturile combinate de acetat de etil au fost concentrare, şi DMF rezidual a fost înlăturat în vid înalt peste noapte. Uleiul întunecat rezultat a fost purificat pe silicagel (Biotage SNAP, 50g, gradient de 50-100% etil acetat în heptan) pentru a obţine 7-amino-8-cloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd X, 0.539g, 44%) ca un solid alb. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.87 (s.l., 1H), 6.96 (d, J=8.19 Hz, 1H), 6.87 (d, J=8.19 Hz, 1H), 5.32 (s, 2H), 3.20 (dt, J=3.79, 6.17 Hz, 2H), 2.69 (t, J=6.24 Hz, 2H); MS 197 [M+H]+.

O suspensie de bromură de cupru (1.04 g, 7.28 mmol) în acetonitril (20 mL) s-a adăugat la 60 °C timp de 10 minute. Nitrit de izoamil (0.348 mL, 2.91 mmol) s-a adăugat, urmat de 7-amino-8-cloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd X, 0.477 g, 2.43 mmol) într-o porţie. Amestecul de reacţie s-a adăugat la 60 °C timp de 1 oră. După răcire la temperatura camerei, NH4Cl saturat ap.şi EtOAc s-au adăugat la soluţia, şi amestecul bifazic s-a adăugat viguros timp de 20 minute. Straturile au fost separate, stratul organic concentrat, şi reziduul a fost purificat pe silicagel (Biotage SNAP, 10g, HP-Sil, gradient de 40-100% etil acetat în heptan) pentru a obţine 7-bromo-8-cloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd Y, 0.287 g, 45%) ca un solid galben. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.70 (d, J=8.07 Hz, 1H), 7.03 (d, J=8.07 Hz, 1H), 6.14 (s.l., 1H), 3.43-3.57 (m, 2H), 2.95 (t, J=6.36 Hz, 2H); MS 260, 262 [M+H]+.

t-Butoxid de potasiu (1.3 mL, 1.3 mmol, 1.0 M în THF) s-a adăugat la o soluţie răcită de 7-bromo-8-cloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd Y, 0.287 g, 1.10 mmol) în N,N-dimetilformamidă (10 mL). După 5 minute, 2-(benziloxi)-3-(clorometil)-4,6-dimetilpiridina (Cpd D 0.311 g, 1.19 mmol) s-a adăugat într-o porţie. Amestecul s-a adăugat timp de 30 minute, apoi s-a diluat cu acid acetic (3 picături), diluat cu MTBE, şi spălat cu apă (2 x). Stratul organic s-a concentrat, şi uleiul rezultat purificat pe silicagel (Biotage SNAP, 10 g, gradient de 0-25% etil acetat în heptan) în 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-7-bromo-8-cloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd Z, 0.387 g, 72%) ca o gumă transparentă. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.61 (d, J=8.07 Hz, 1H), 7.42-7.47 (m, 2H), 7.28-7.38 (m, 3H), 6.89 (d, J=8.07 Hz, 1H), 6.63 (s, 1H), 5.43 (s, 2H), 4.90 (s, 2H), 3.22-3.29 (m, 2H), 2.60-2.66 (m, 2H), 2.42 (s, 3H), 2.34 (s, 3H); MS 485, 487 [M+H]+.

Compus FF: 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5-bromo-8-cloro-7-iodo-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona.

Două loturi au fost experimentate în paralel în următoarele condiţii, apoi combinate pentru prelucrare şi purificare: la temperatura camerei (15-20 °C) la soluţia de acid 2-(2-bromo-5-clorofenil) acetic (25.0 g, 100.2 mmol) în TFH anhidru (300 mL) s-a adăugat clorură de oxalil (14.5 g, 9.97 mL, 114 mmol) şi DMF (150 mg, 2.05 mmol), iniţiind degajarea de gaz. Amestecul s-a adăugat la temperatura camerei timp de două ore, până când TLC a arătat că acidul iniţial s-a consumat complet. Amestecul a fost răcit la 0 °C, şi hidroxid de amoniu (28 wt% în apă, 154 mL) s-a adăugat într-o porţie, cauzând o creştere a temperaturii interne la 40°C. Baia de răcire a fost înlăturată, şi soluţia agitată viguros la temperatura camerei timp de o oră. Două loturi au fost combinate, diluate cu apă (500 mL), şi extrase cu etil acetat (2 x 1000 mL). Extractele organice combinate au fost spălate cu apă (2 x 500 mL), 1N apos HCl (500 mL), şi soluţie de sare de bucătărie (500 mL), apoi uscate pe sulfat de sodiu anhidru şi concentrate pentru a obţine produsul crud (~50 g) ca un solid galben. Produsul crud a fost cristalizat din eter de petrol/etil acetat 5/1 (200 mL x2) şi uscat pentru a obţine 2-(2-bromo-5-clorofenil)acetamida (Cpd AA, 44.0 g, 88% randament combinat pentru ambele loturi) ca un solid alb. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.52 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.37 (d, J=2.8 Hz, 1H), 7.16 (dd, J= 2.8, 8.8 Hz, 1H), 5.67 (s.l., 1H), 5.50 (s.l., 1H), 3.70 (s, 2H).

Două loturi au fost supuse reacţiei în paralel în următoarele condiţii, apoi combinate pentru purificare: complex boran-THF (1.0 M în THF, 400 mL, 400 mmol) s-a adăugat cu picătura la o suspensie răcită (0 °C) de 2-(2-bromo-5-clorofenil)acetamida (Cpd AA, 22.0 g, 88.5 mmol) în TFH anhidru (300 mL). Soluţia transparentă rezultată a fost încălzită la 80 °C timp de două ore, apoi răcită dinnou la 0 °C. Amestecul a fost diluat prin adiţie consecutivă de apă (45 mL) şi HCl conc. (120 mL), cauzând o degajare semnificativă de gaz. Agitarea a fost continuată la 10-15 °C timp de 16 ore, după care amestecul s-a concentrat pentru a înlătura THF. Rămăşiţa apoasă a fost răcită la 0°C, apoi hidroxid de sodiu 12 N apos s-a adăugat pentru a aduce pH-ul la 11. Soluţia bazificată a fost extrasă cu etil acetat (3 x 500 mL). Extractele organice combinate au fost spălate cu soluţie de sare de bucătărie (500 mL), uscate pe sulfat de sodiu anhidru, filtrate, şi concentrate pentru a obţine produsul crud (~25 g) ca un ulei galben. Două loturi ~25 g de acest produs crud au fost combinate, tratate cu HCl/MeOH 4N (500 mL), şi agitate la 10-15 °C timp de 16 ore. Amestecul s-a concentrat, şi reziduul a fost agitat în etil acetat (500 mL) timp de 30 minute. Solidul alb rezultat a fost colectat prin filtrare, şi rămăşiţa de pe filtru spălată cu etil acetat (3 x 100 mL). Solidele au fost dizolvate în apă (500 mL), filtrate pentru a înlătura insolubilele, şi filtratul extras cu etil acetat (2 x 500 mL). Stratul apos a fost bazificat cu NaOH solid la pH 10, apoi extras cu etil acetat (2 x 500 mL). Extractele organice combinate au fost spălate cu soluţie de sare de bucătărie (500 mL), uscate pe sulfat de sodiu anhidru, filtrate, şi concentrate pentru a obţine 2-(2-bromo-5-clorofenil)etan-1-amina (Cpd BB, 30.0 g, 72% randament combinat pentru ambele loturi) ca un lichid incolor. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.47 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.23 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.07 (dd, J= 2.4, 8.4 Hz, 1H), 2.98 (t, J=6.8 Hz, 2H), 2.86 (t, J=6.8 Hz, 2H), 1.28 (m, 2H).

La o suspensie răcită (0 °C) de 2-(2-bromo-5-clorofenil)etan-1-amina (Cpd BB, 28.0 g, 119 mmol) şi carbonat de sodiu (32.3 g, 304 mmol) 1,2-dicloroetan anhidru (600 mL) s-a adăugat 4-nitrofenil cloroformiat (25.5 g, 127 mmol). Amestecul s-a adăugat la 0 °C timp de 30 minute, apoi la 10-15 °C timp de 16 ore. Soluţia a fost diluată cu apă (1000 mL) şi extrasă cu diclorometan (3 x 1000 mL). Extractele organice combinate au fost spălate cu apă (1000 mL) şi soluţie de sare de bucătărie (1000 mL), uscate pe sulfat de sodiu anhidru, şi concentrate. Produsul crud (~55 g, solid galben) a fost cristalizat din eter de petrol/EtOAc 5/1 (100 mL x2) pentru a obţine 4-nitrofenil (2-bromo-5-clorofenetil)carbamat (Cpd CC, 40.0 g, 84% randament) ca un solid alb. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8.25 (d, J=9.2 Hz, 2H), 7.51 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.31 (m, 3H), 7.13 (dd, J= 2.0, 8.4 Hz, 1H), 5.22 (s.l., 1H), 3.57 (t, J=6.8 Hz, 2H), 3.05 (t, J=6.8 Hz, 2H).

Acid trifluorometansulfonic (150 g, 1000 mmol) s-a adăugat cu picătura la o suspensie răcită (0 °C) de 4-nitrofenil (2-bromo-5-clorofenetil)carbamat (Cpd CC, 40.0 g, 100 mmol) 1,2-dicloroetan anhidru (300 mL). Solidele se dizolvă gradual pe parcursul adiţiei, ce rezultă într-o soluţie galbenă transparentă. Amestecul s-a adăugat la 0 °C timp de 10 minute, apoi încălzită la 60-70 °C timp de 3 ore. Soluţia brună rezultată a fost turnată în apă cu gheaţă (1000 mL) şi agitată până când toată gheaţa s-a topit. Straturile au fost separate, şi stratul apos extras cu diclorometan (2 x 1000 mL). Straturile organice combinate au fost spălate cu hidroxid de sodiu 2N apos (3 x 500 mL), apă (500 mL), şi soluţie de sare de bucătărie (500 mL), apoi uscate pe sulfat de sodiu anhidru şi concentrat. Produsul crud (~30 g brown solid) a fost cristalizat din eter de petrol/etil acetat 2/1 (150 mL x2), pentru a obţine 5-bromo-8-cloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd DD, 20.7 g, 80% randament) ca un solid brun. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.25 (s.l., 1H), 7.72 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.35 (d, J=8.4 Hz, 1H), 3.12 (t, J=4.4 Hz, 2H), 2.95 (t, J=6.2 Hz, 2H).

N-iodosuccinimida (53.7 g, 239 mmol) s-a adăugat la o soluţie răcită de 5-bromo-8-cloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd DD, 20.7 g, 79.6 mmol) în acid sulfuric conc. (98% w/w, 300 mL). Suspensia brună rezultată s-a adăugat la 10-15 °C timp de 16 ore., apoi turnată în apă cu gheaţă (1000 mL) şi agitată până când toată gheaţa s-a topit. Suspensia apoasă rezultată a fost extrasă cu etil acetat (3 x 1000 mL). Extractele organice combinate au fost spălate cu NaHSO3 saturat apos (2 x 500 mL), hidroxid de sodiu 2N apos (2 x 500 mL), şi soluţie de sare de bucătărie (500 mL), apoi uscate pe sulfat de sodiu anhidru şi concentrate. Produsul crud (~30 g solid galben) a fost cristalizat din eter de petrol/etil acetat 1/1 (100 mL x2) pentru a obţine 5-bromo-8-cloro-7-iodo-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd EE, 23.0 g, 75% randament) ca un solid albiu. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.35 (s.l., 1H), 8.33 (s, 1H), 3.30-3.25 (2H, m), 2.89 (t, J = 6.0 Hz, 2H). MS: 386 [M+H]+.

Terţ-butoxid de potasiu (1.0M soluţie în THF, 7.30 mL, 7.30 mmol) s-a adăugat cu picătura la o suspensie răcită (0 °C) de 5-bromo-8-cloro-7-iodo-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd EE, 2.35 g, 6.08 mmol) în DMF anhidră (30 mL). Amestecul s-a adăugat la 0 °C timp de 30 minute, apoi o soluţie de 2-(benziloxi)-3-(clorometil)-4,6-dimetilpiridina (Cpd D, 1.75 g, 6.69 mmol) în DMF anhidră (10 mL) s-a adăugat, şi agitarea a continuat la 0 °C timp de 30 minute. Amestecul de reacţie a fost porţionat între etil acetat (100 mL) şi apă (100 mL). Faza organică a fost spălat cu apă (1 x 100mL) şi soluţie de sare de bucătărie (1x100mL), uscată pe sulfat de sodiu, concentrată la uscat, şi purificată prin cromatografie pe silicagel, eluţie cu a gradient de 0-40% etil acetat în heptan, obţinându-se 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5-bromo-8-cloro-7-iodo-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd FF, 2.95 g, 79% randament) ca o gumă. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.11 (s, 1H), 7.40 - 7.47 (m, 2H), 7.27 - 7.37 (m, 3H), 6.62 (s, 1H), 5.42 (s, 2H), 4.85 (s, 2H), 3.25 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.68 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.41 (s, 3H), 2.32 (s, 3H). MS: 611, 613 [M+H]+.

Compus KK: 2-(benziloxi)-3-(clorometil)-4-metoxi-6-metilpiridina

Bromură de benzil (19.1 g, 112 mmol) s-a adăugat la temperatura camerei la soluţia de etil 2,4-dihidroxi-6-metilnicotinat (20.0 g, 101.4 mmol) şi carbonat de argint (15.4 g, 55.8 mmol) în THF (100 mL), apoi amestecul a fost încălzită la 60 °C timp de 18 ore. După răcire la temperatura camerei, suspensia a fost filtrată printr-un filtru de CELITE®, filtratul concentrat şi purificat prin cromatografie pe silicagel (eluţie cu 5% etil acetat în heptan) pentru a obţine etil 2-(benziloxi)-4-hidroxi-6-metilnicotinat (Cpd GG, 18 g, 62% randament) ca un solid alb. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.14 (s, 1H), 7.40-7.44 (m, 2H), 7.36 (t, J=7.34 Hz, 2H), 7.27-7.33 (m, 1H), 6.44 (s, 1H), 5.35 (s, 2H), 4.23 (q, J=7.13 Hz, 2H), 2.30 (s, 3H), 1.22 (t, J=7.09 Hz, 3H). MS: 288 [M+H]+.

O soluţie de etil 2-(benziloxi)-4-hidroxi-6-metilnicotinat (Cpd GG, 18.0 g, 62.6 mmol) şi carbonat de potasiu (9.52 g, 68.9 mmol) în DMF (50 mL) s-a adăugat la temperatura camerei timp de 10 minute, apoi iodometan (9.98 g, 68.9 mmol) s-a adăugat şi agitarea a continuat la temperatura camerei timp de 18 ore. Amestecul a fost porţionat între apă şi etil acetat. Extractele organice au fost spălate cu NaCl sat. ap., uscate pe sulfat de sodiu, şi concentrate. Reziduul a fost purificat prin cromatografie pe silicagel (eluţie cu 0-35% etil acetat în heptan), obţinându-se etil 2-(benziloxi)-4-metoxi-6-metilnicotinat (Cpd HH, 16.7 g, 89 % randament) ca un lichid incolor. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.33-7.42 (m, 4H), 7.26-7.33 (m, 1H), 6.75 (s, 1H), 5.36 (s, 2H), 4.22 (q, J=7.13 Hz, 2H), 3.83 (s, 3H), 2.39 (s, 3H), 1.20 (t, J=7.09 Hz, 3H). ). MS: 302 [M+H]+.

Soluţie de hidrură de litiu-aluminiu (2.0M în THF) s-a adăugat cu picătura la o soluţie răcită de etil 2-(benziloxi)-4-metoxi-6-metilnicotinat (Cpd HH, 16.7 g, 55.4 mmol) în THF (100 mL). După terminarea adiţiei, soluţia s-a lăsată să se încălzească gradual la temperatura camerei cu agitare timp de 18 ore. Amestecul a fost diluat cu THF (200 mL), răcit la 0 °C, şi diluat prin adiţie secvenţială de apă cu picătura (3.4 mL), 15% ap. hidroxid de sodiu, şi apă (10.2 mL). Suspensia rezultată s-a adăugat la temperatura camerei timp de 2 ore, apoi filtrată printr-un filtru de CELITE®. Concentrarea filtratului a oferit (2-(benziloxi)-4-metoxi-6-metilpiridin-3-il)metanol (Cpd JJ, 14 g, 97 % randament) ca un ulei incolor. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.46 (d, J=7.09 Hz, 2H), 7.36 (t, J=7.40 Hz, 2H), 7.25-7.33 (m, 1H), 6.63 (s, 1H), 5.35 (s, 2H), 4.37-4.46 (m, 3H), 3.82 (s, 3H), 2.35 (s, 3H). MS: 260 [M+H]+.

Clorură de tionil (6.57 g, 54.7 mmol) s-a adăugat cu picătura la o soluţie răcită de (2-(benziloxi)-4-metoxi-6-metilpiridin-3-il)metanol (Cpd JJ, 13.5 g, 52.1 mmol) în etil acetat (300 mL), cauzând formarea unui precipitat solid. Suspensia s-a adăugat în baia de răcire timp de 30 minute, apoi apă s-a adăugat pentru a dizolva solidele. După separarea fazelor, stratul organic a fost spălat cu NaCl sat. ap., uscat pe sulfat de sodiu, şi concentrată până la uscat. Reziduul a fost dizolvat în heptan şi concentrat dinnou la uscat, obţinându-se 2-(benziloxi)-3-(clorometil)-4-metoxi-6-metilpiridina (Cpd KK, 13.9 g, 95 % randament) ca un solid alb. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.47 (d, J=7.34 Hz, 2H), 7.38 (t, J=7.40 Hz, 2H), 7.27-7.34 (m, 1H), 6.71 (s, 1H), 5.40 (s, 2H), 4.66 (s, 2H), 3.89 (s, 3H), 2.38 (s, 3H). MS: 260 [M+H]+.

Compus RR: 8-cloro-7-iodo-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona.

La o soluţie răcită de acid 5-cloro-2-metilbenzoic (20.0 g, 117 mmol) în anhidru 2-metiltetrahidrofuran (200 mL), complex boran-dimetilsulfură (28.0 g, 35.0 mL, 369 mmol) s-a adăugat cu picătura într-o oră, destul de încet pentru a menţine temperatura internă mai jos de 10 °C. Degajare de gaz s-a observat, şi ceva precipitat s-a format. După terminarea adiţiei, baia de răcire a fost înlăturată şi agitarea a continuat la temperatura camerei peste noapte. Metanol (50 mL) s-a adăugat atent la amestecul diluat. Soluţia s-a concentrat la uscat, şi reziduul porţionat între eter (200 mL) şi bicarbonat de sodiu saturat apos. Stratul organic a fost spălat cu soluţie de sare de bucătărie (200 mL), uscat pe sulfat de sodiu, filtrat, şi concentrat pentru a obţine etil 2-(benziloxi)-4-hidroxi-6-metilnicotinat (Cpd LL, 18.4 g, 100% randament) ca un ulei. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.36 (d, J=2.08 Hz, 1H), 7.13 - 7.19 (m, 1H), 7.04 - 7.11 (m, 1H), 4.63 (s, 2H), 2.27 (s, 3H), 2.12 (s, 1H).

O soluţie de 2-(benziloxi)-4-hidroxi-6-metilnicotinat (Cpd LL, 18.0 g, 115 mmol) în toluen anhidru (300 mL) a fost răcită la o temperatură internă de mai joasă de 10 °C. Clorură de tionil (21.3 g, 179 mmol) s-a adăugat cu picătura, destul de încet pentru a menţine temperatura internă mai jos de 10 °C. Amestecul s-a adăugat la această temperatură timp de 30 minute, apoi baia de răcire a fost înlăturată şi agitarea a continuat la temperatura camerei timp de 5 ore. Soluţia s-a concentrat pentru a înlătura volatilele, şi reziduul porţionat între etil acetat (200 mL) şi bicarbonat de sodiu (200 mL). Faza organică a fost spălat cu soluţie de sare de bucătărie (200 mL), uscată pe sulfat de sodiu, şi concentrată pentru a obţine 4-cloro-2-(clorometil)-1-metilbenzen (Cpd MM, 17.5 g, 87% randament) ca un ulei. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.33 (d, J=2.20 Hz, 1H), 7.20 - 7.25 (m, 1H), 7.14 (d, J=8.07 Hz, 1H), 4.55 (s, 2H), 2.39 (s, 3H).

La o soluţie de 4-cloro-2-(clorometil)-1-metilbenzen ((Cpd MM, 17.5 g, 100 mmol) în DMSO (200.0 mL) şi apă (50.0 mL) s-a adăugat cianură de sodiu solidă (5.88 g, 120 mmol) într-o porţie. Reacţia a fost uşor exotermică, şi temperatura internă a amestecului de reacţie a crescut la 43 °C. Agitarea a fost continuată timp de o oră. Amestecul de reacţie a fost porţionat între etil acetat (300 mL) şi apă (300 mL). Faza organică a fost spălată cu bicarbonat de sodiu (300mL) şi soluţie de sare de bucătărie (300mL), uscată pe sulfat de sodiu, şi concentrată pentru a obţine 2-(5-cloro-2-metilfenil)acetonitril (Cpd NN, 16.1 g, 97% randament) ca un ulei. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.37 (d, J=1.96 Hz, 1H), 7.21 - 7.26 (m, 1H), 7.13 - 7.17 (m, 1H), 3.64 (s, 2H), 2.32 (s, 3H).

Complex boran dimetilsulfură (22.3 g, 293 mmol, 26.0 mL) s-a adăugat cu picătura la o soluţie de 2-(5-cloro-2-metilfenil)acetonitril (Cpd NN, 16.0 g, 96.6 mmol) în 2-metil tetrahidrofuran (150 mL), cauzând degajare de gaz. După terminarea adiţiei, amestecul a fost încălzit la reflux timp de 5 ore. După răcire la temperatura camerei, metanol s-a adăugat la amestecul diluat până când nu s-au mai format bule. Soluţia s-a concentrat până la uscat. Reziduul a fost dizolvat în metanol şi tratat cu soluţie HCl/dioxan 4M (100 mL) pentru a descompune complexul borului. Soluţia s-a concentrat până la uscat. Reziduul solid alb a fost dizolvat în cantitatea minimă de metanol (~20 mL), etil acetat (~200 mL) s-a adăugat, şi amestecul agitat viguros până când s-a format o pastă subţire. Solidele au fost colectate prin filtrare, spălate cu etil acetat, şi uscate pentru a obţine 2-(5-cloro-2-metilfenil)etan-1-amina clorohidrat (Cpd OO, 9.5 g, 48% randament) ca un solid alb. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.24 (s.l., 3H), 7.26 (s, 1H), 7.20 (d, J=1.34 Hz, 2H), 2.84 - 3.02 (m, 4H), 2.27 (s, 3H). MS: 170 [M+H]+.

O soluţie răcită (0 °C) de 2-(5-cloro-2-metilfenil)etanamina clorohidrat (Cpd OO, 8.41 g, 40.8 mmol) în DMF (200 mL) s-a adăugat cu trietilamina (10.3 g, 102 mmol) timp de 10 minute, apoi 4-nitrofenil cloroformiat solid (8.14 g, 38.8 mmol) s-a adăugat într-o porţie. S-a format o pastă subţire, şi amestecul de reacţie a devenit gălbiu. Agitarea a fost continuată la 0 °C timp de 1 oră. Amestecul de reacţie a fost porţionat între etil acetat (300 mL) şi apă (300 mL). Faza organică a fost spălată cu apă (200mL), 10% carbonat de sodiu (200mL), şi soluţie de sare de bucătărie (200mL), apoi uscată pe sulfat de sodiu, şi concentrată pentru a obţine 4-nitrofenil(5-cloro-2-metilfenetil)carbamat (Cpd PP, 9.94 g, 73% randament) ca un solid. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8.18 - 8.29 (m, 2H), 7.24 - 7.32 (m, 2H), 7.11 - 7.17 (m, 3H), 5.28 (s.l., 1H), 3.45 - 3.53 (m, 2H), 2.85 - 2.92 (m, 2H), 2.32 (s, 3H).

O suspensie răcită (0 °C) de 4-nitrofenil(5-cloro-2-metilfenetil)carbamat (Cpd PP, 9.94 g, 29.7 mmol) în 1,2-dicloroetan anhidru (120 mL) a fost tratată cu acid trifluorometilsulfonic proaspăt deschis (45.8 g, 305 mmol, 27.0 mL), şi agitarea a continuat la 0 °C timp de 30 minute. Amestecul de reacţie a fost apoi încălzit la 70 °C timp de 3 ore. După răcire la temperatura camerei, amestecul de reacţie a fost apoi turnat atent apă cu gheaţă (200 mL), şi agitat până când toată gheaţa s-a topit. Amestecul bifazic a fost extras cu diclorometan (2 x 200 mL). Extractele organice combinate au fost spălate cu carbonat de sodiu 2M (200 mL). Faza apoasă a fost extrasă dinnou cu diclorometan (200 mL). Extractele diclorometanice au fost combinate, uscate pe sulfat de sodiu, şi concentrate pentru a obţine 8-cloro-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd QQ, 4.17 g, 72% randament) ca un solid. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ: 7.15 - 7.22 (m, 1H), 7.08 (d, J=13.69 Hz, 1H), 6.46 (s.l., 1H), 3.43 - 3.51 (m, 2H), 2.88 (t, J=6.17 Hz, 2H), 2.28 (s, 3H). MS: 196 [M+H]+.

Un balon ce conţine 8-cloro-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd QQ, 6.0 g, 30.7 mmol) a fost răcit într-o baie cu gheaţă. Acid sulfuric concentrat (125.0 mL) s-a adăugat, şi amestecul s-a adăugat la 0 °C timp de 30 min. N-iodosuccinimida (20.7 g, 92.0 mmol) s-a adăugat ca un solid într-o porţie, şi amestecul s-a adăugat la 0 °C timp de 3 ore. Soluţia a fost apoi turnată atent apă cu gheaţă (300 mL), cauzând formarea unui precipitat. Suspensia a fost extras cu etil acetat (300 mL). Ambele faze organică şi apoasă conţineau precipitat. Faza organică a fost spălată cu 10% Na2S2O3 (300 mL) pentru a înlătura excesul de iod, şi stratul apos a fost extras cu etil acetat (200 mL). Fazele organice combinate au fost uscate pe sulfat de sodiu şi concentrate până la uscat. Reziduul solid s-a adăugat în metanol (100 mL). Insolubilele au fost colectate prin filtrare, şi precipitatul (~14 g solid alb) a fost suspendat în disulfură de carbon (100 mL). Solidele au fost colectate prin filtrare, spălate cu disulfură de carbon, şi uscate în vacuum, formând 8-cloro-7-iodo-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd RR, 8.57 g, 87% randament) ca un solid. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.15 (s.l., 1H), 7.94 (s, 1H), 3.26 (td, J=6.17, 4.03 Hz, 2H), 2.75 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.22 (s, 3H). MS; 321 [M=H]+.

Compus SS: 2-((2-(benziloxi)-4-metoxi-6-metilpiridin-3-il)metil)-7-bromo-5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona.

La temperatura camerei o soluţie de 7-bromo-5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd R, 14.9 g, 50.4 mmol) în etil acetat (300 mL) a fost tratată cu terţ-butoxid de potasiu (1.0 M soluţie în THF, 65.5 mL, 65.5 mmol), cauzând solidele să se dizolve. După câteva minute, un precipitat a început sa se formeze. La acesta s-a adăugat 2-(benziloxi)-3-(clorometil)-4-metoxi-6-metilpiridina (Cpd KK, 14.0 g, 50.4 mmol), şi suspensia rezultată încălzită la 75 °C timp de 4 ore. După răcire la temperatura camerei, amestecul a fost spălat cu apă (2x) şi NaCl sat. ap., concentrat, şi reziduul cristalizat din etil acetat, obţinându-se 2-((2-(benziloxi)-4-metoxi-6-metilpiridin-3-il)metil)-7-bromo-5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd SS, 21.96 g, 81% randament) ca un solid alb. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.05 (s, 1H), 7.34-7.40 (m, 2H), 7.18-7.25 (m, 3H), 6.70 (s, 1H), 5.36 (s, 2H), 4.68 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.16 (t, J=6.17 Hz, 2H), 2.71 (t, J=6.17 Hz, 2H), 2.38 (s, 3H). MS: 535, 537 [M+H]+.

Compus TT: 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-8-cloro-7-iodo-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona.

La o soluţie răcită de 8-cloro-7-iodo-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd RR, 1.52 g, 4.73 mmol) în DMF anhidră (20 mL) s-a adăugat solid terţ-butoxid de potasiu (796 mg, 7.09 mmol) în porţii. Agitarea a fost continuată la 0 °C timp de 30 minute, apoi o soluţie de 2-(benziloxi)-3-(clorometil)-4,6-dimetilpiridina (Cpd D, 1.18 g, 4.49 mmol) în DMF anhidră (5 mL) s-a adăugat cu picătura. După agitare pentru 20 de minute suplimentare la 0 °C, amestecul a fost turnat în apă cu gheaţă (50 mL) şi extras cu etil acetat (4 x 50 mL). Straturile organice combinate au fost spălate cu soluţie de sare de bucătărie (4 x 50 mL), uscate pe sulfat de sodiu, filtrate, şi concentrate. Produsul crud (~2.4 g solid galben) a fost purificat prin cromatografie pe silicagel, eluţie cu 5/1 eter de petrol/etil acetat, obţinându-se 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-8-cloro-7-iodo-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd TT, 1.7 g, 66% randament) ca un solid albiu. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.76 (s, 1H), 7.45 (d, J=7.2 Hz, 2H), 7.36-7.30 (m, 3H), 6.62 (s, 1H), 5.42 (s, 2H), 4.88 (s, 2H), 3.24 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.50 (t, J = 6 Hz, 2H), 2.42 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 2.13 (s, 3H). MS: 547 [M+H]+.

Compus UU: 2-((2-(benziloxi)-4-metoxi-6-metilpiridin-3-il)metil)-8-cloro-7-iodo-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona.

La o soluţie răcită de 8-cloro-7-iodo-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd RR, 3.2 g, 9.95 mmol) în DMF anhidră (50 mL) s-a adăugat solid terţ-butoxid de potasiu (1.68 g, 14.9 mmol) în porţii. Agitarea a fost continuată la 0 °C timp de 30 minute, apoi o soluţie de 2-(benziloxi)-3-(clorometil)-4-metoxi-6-metilpiridina (Cpd KK, 2.63 g, 14.9 mmol) în DMF anhidră (50 mL) s-a adăugat cu picătura. După agitare pentru 30 de minute suplimentare la 0 °C, amestecul a fost turnat în apă cu gheaţă (100 mL) şi extras cu etil acetat (3 x 100 mL). Straturile organice combinate au fost spălate cu soluţie de sare de bucătărie (4 x 100 mL), uscate pe sulfat de sodiu, filtrate, şi concentrate. Produsul crud (~5 g solid galben) a fost purificat prin cromatografie pe silicagel, eluţie cu 20-50% etil acetat în eter de petrol. Produsul rezultat a fost dizolvat în diclorometan (10 mL), adăugat la eter de petrol (30 mL) şi agitat la temperatura camerei până când un precipitat s-a format (30 minute). Precipitatul a fost colectat prin filtrare şi uscate până la un solid alb. TLC al precipitatului încă a mai arătat impurităţi, deci el a fost repurificat prin cromatografie pe silicagel, eluţie cu 0-10% metanol în diclorometan, oferind 2-((2-(benziloxi)-4-metoxi-6-metilpiridin-3-il)metil)-8-cloro-7-iodo-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd UU, 2.8 g, 50% randament) ca un solid alb. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.75 (s, 1H), 7.42-7.40 (m, 2H), 7.29-7.27 (m, 1H), 7.25-7.22 (m, 2H), 6.38 (s, 1H), 5.42 (s, 2H), 4.87 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.14 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.50 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.44 (s, 3H), 2.13 (s, 3H). MS: 563 [M+H]+.

Exemplele

Metode Generale şi Exemplel Reprezentative

Metoda A

Exemplul 1: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1R)-2-hidroxi-1-[(3R)-tetrahidrofuran-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona

Exemplul 2: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1R*)-2-hidroxi-1-[(3S*)-tetrahidrofuran-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona

Exemplul 3: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1S*)-2-hidroxi-1-[(3R*)-tetrahidrofuran-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona

Exemplul 4: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1S)-2-hidroxi-1-[(3S)-tetrahidrofuran-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona

O soluţie răcită (0 °C) de metil 2-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)acetat (Cpd T, 800 mg, 0.487 mmol) în N,N-dimetilformamidă anhidră (70 mL) a fost tratată cu hidrură de sodiu (60 wt% dispersie în ulei mineral, 125 mg, 3.12 mmol), apoi agitată la 10 °C timp de 15 minute. Amestecul a fost răcit dinnou la 0°C şi 3-iodotetrahidrofuran (463 mg, 2.34 mmol) s-a adăugat. După agitare la temperatura camerei timp de 12 ore, acid acetic glacial (2 picături) şi apă (10 mL) s-au adăugat, şi amestecul extras cu etil acetat (3 x 20 mL). Extractele organice combinate au fost spălate cu soluţie de sare de bucătărie (10 mL), uscate pe sulfat de sodiu, concentrate, şi purificate prin cromatografie pe coloană (silicagel, Eter de petrol/EtOAc = 5:1~1:1) obţinându-se acid 2-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)-2-(tetrahidrofuran-3-il) acetic (1a, 500 mg, 56.3%) ca un solid alb; şi metil 2-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)-2-(tetrahidrofuran-3-il)acetat (1b, 150 mg, 16.5%) ca un solid galben.

O soluţie acid de 2-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)-2-(tetrahidrofuran-3-il) acetic (1a, 650 mg, 1.14 mmol), carbonat de potasiu (315 mg, 2.28 mmol), şi iodometan (324 mg, 2.28 mmol) în N,N-dimetilformamidă (8 mL) s-a adăugate la temperatura camerei timp de 12 ore. Amestecul a fost diluat cu apă (20 mL) şi etil acetat (50 mL). Stratul organic a fost separat şi stratul apos a fost extras cu etil acetat (2 x 15 mL). Straturile organice au fost combinate, spălate cu soluţie de sare de bucătărie (3 x 10 mL), uscate pe sulfat de sodiu, filtrate şi concentrate în vacuum pentru a obţine produsul crud, care a fost purificat prin cromatografie pe coloană (silicagel, Eter de petrol/EtOAc = 1:1) obţinându-se metil 2-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)-2-(tetrahidrofuran-3-il)acetat (1b 600 mg, 90.1%) ca un solid alb.

Borohidrura de litiu (28 mg, 1.29 mmol) s-a adăugat într-o porţie la temperatura camerei la soluţia de metil 2-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)-2-(tetrahidrofuran-3-il)acetat (1b, 250 mg, 0.428 mmol) în tetrahidrofuran anhidru (25 mL). Amestecul rezultat a fost încălzit la 60 °C timp de 2 ore. Amestecul a fost diluat cu apă (5 mL) şi apoi extras cu etil acetat (3 x 15 mL). Straturile organice au fost combinate, spălate cu soluţie de sare de bucătărie (5 mL), uscate pe sulfat de sodiu, filtrate şi concentrate în vacuum pentru a obţine produsul crud, care a fost purificat prin TLC prep. (Eter de petrol/EtOAc = 1:1) obţinându-se 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(2-hidroxi-1-(tetrahidrofuran-3-il)etil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (amestec de 4 stereoizomeri, 160 mg, 67.2%) ca un solid alb. Loturi combinate (500 mg total) de acest amestec de stereoizomer a fost rezolvat cu SFC preparativă chirală (Chiralpak AD, 250x30mm I.D., 5 µm, fază mobilă 35% EtOH NH3 H2O, debit 50mL/min) obţinându-se izomeri separată 1c (pic unu, 80 mg, 15.9%), 2c (pic doi, 90 mg, 17.9%), 3c (pic trei, 110 mg, 21.9%) şi 4c (pic patru,100 mg, 19.9%) ca un solid alb. Stereochimia absolută a fiecărui izomer nu a fost determinată la această etapă.

O soluţie de 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(2-hidroxi-1-(tetrahidrofuran-3-il)etil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona stereoizomer 1c (80 mg, 0.144 mmol) în diclorometan (3 mL) şi acid trifluoroacetic (3 mL) s-a adăugat la 35 °C timp de 5 ore, şi apoi evaporat până la uscat. Reziduul s-a preluat în metanol (10 mL), răcit la 10 °C, şi carbonat de potasiu (99.5 mg, 0.720 mmol) s-a adăugat. După agitare timp de 30 minute la 10 °C, amestecul de reacţie a fost filtrat, şi tamponul de filtrare spălat cu diclorometan/metanol (10:1, 10 mL). Filtratul a fost concentrat în vacuum şi reziduul, purificat prin TLC prep. (CH2Cl2/MeOH = 10:1, Rf = 0.4 în CH2Cl2/MeOH = 10:1) obţinându-se Exemplul 1 (38 mg, 57%) ca un solid alb.

Prin aceeaşi procedură, stereoizomer 2c (90 mg, 0.162 mmol) a oferit Exemplul 2 (44 mg, 59%); stereoizomer 3c (110 mg, 0.198 mmol) a oferit Exemplul 3 (61 mg, 66%); şi stereoizomer 4c (100 mg, 0.18 mmol) a oferit Exemplul 4 (35 mg, 41%); totul ca un solid alb.

Analiza structurii unui monocristal prin difracţia cu raze X pe o moleculă mică pentru Exemplul 4 arată că acesta are o stereochimie absolută (S,S). Stereochimia absolută (R,R) s-a atribuit la Exemplul 1 deoarece spectrul 1HRMN al acestuia este identic cu cel din Exemplul 4. Spectrele 1HRMN ale Exemplulului 2 şi Exemplului 3 sunt identice unul faţă de altul, şi clar diferite faţă de cel al Exemplului 4, sugerând că acestea sunt stereoizomeri (R,S) şi (S,R), cu toate că configuraţia absolută a fiecăruia nu a fost determinată.

Exemplul 1: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1R)-2-hidroxi-1-[(3R)-tetrahidrofuran-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (stereochimia absolută alocată în baza structurii cristaline a compusului enantiomeric). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.63 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 3.94-3.90 (m, 1H), 3.81-3.80 (m, 3H), 3.59-3.57 (m, 2H), 3.51-3.49 (m, 2H), 3.17-3.10 (m, 1H), 2.98-2.95 (m, 2H), 2.71 (s.l., 1H), 2.30 (s, 3H), 2.29-2.25 (m, 1H), 2.25 (s, 3H), 1.83-1.78 (m, 1H). MS: 465 [M+H]+. Analiza chirală: 95.66% ee/de; timp de retenţie: 6.867 min; coloană: Chiralpak AD-3 150×4.6mm I.D., 3µm; fază mobilă: etanol (0.05% DEA) în CO2 de la 5% la 40%; debit: 2.5mL/min; lungimea de undă 220 nm.

Exemplul 2: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1R*)-2-hidroxi-1-[(3S*)-tetrahidrofuran-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (stereochimie relativă cunoscută, stereochimie absolută nedeterminată). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.62 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 4.13-4.11 (m, 1H), 3.78-3.75 (m, 1H), 3.69-3.68 (m, 2H), 3.61-3.59 (m, 3H), 3.51-3.50 (m, 2H), 2.98-2.95 (m, 2H), 2.65 (s.l., 1H), 2.30 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.77-1.75 (m, 1H), 1.42-1.37 (m, 1H). ). MS: 465 [M+H]+. Analiza chirală: 98.70% ee/de; timp de retenţie: 7.309 min; coloană: Chiralpak AD-3 150×4.6mm I.D., 3µm; fază mobilă: etanol (0.05% DEA) în CO2 de la 5% la 40%; debit: 2.5mL/min; lungimea de undă 220 nm.

Exemplul 3: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1S*)-2-hidroxi-1-[(3R*)-tetrahidrofuran-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (stereochimie relativă cunoscută, stereochimie absolută nedeterminată). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.62 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 4.12-4.11 (m, 1H), 3.80-3.78 (m, 1H), 3.69-3.67 (m, 3H), 3.67-3.62 (m, 2H), 3.61-3.50 (m, 2H), 2.98-2.95 (m, 2H), 2.65 (s.l., 1H), 2.29 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.77-1.74 (m, 1H), 1.42-1.37 (m, 1H). MS: 465 [M+H]+. Analiza chirală: 96.48% ee/de; timp de retenţie: 8.021 min; coloană: Chiralpak AD-3 150×4.6mm I.D., 3µm; fază mobilă: etanol (0.05% DEA) în CO2 de la 5% la 40%; debit: 2.5mL/min; lungimea de undă 220 nm.

Exemplul 4: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1S)-2-hidroxi-1-[(3S)-tetrahidrofuran-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (stereochimie absolută determinată prin Difracţie cu raze X asupra structurii monocristalului). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.64 (s, 1H), 6.13 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 3.95-3.90 (m, 1H), 3.83-3.81 (m, 3H), 3.60-3.55 (m, 2H), 3.55-3.52 (m, 2H), 3.32-3.19, (m, 1H), 2.99-2.96 (m, 2H), 2.75 (s.l., 1H), 2.32 (s, 3H), 2.31-2.29 (m, 1H), 2.27 (s, 3H), 1.84-1.79 (m, 1H). MS: 465 [M+H]+. Analiza chirală: 99.18% ee/de; timp de retenţie: 8.429 min; coloană: Chiralpak AD-3 150×4.6mm I.D., 3µm; fază mobilă: etanol (0.05% DEA) în CO2 de la 5% la 40%; debit: 2.5mL/min; lungimea de undă 220 nm.

Metoda B

Exemplul 5: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{1-[(3R)-3-fluoropirolidin-1-il]-2-hidroxietil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona.

Exemplul 6: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1ξ)-1-[(3R)-3-fluoropirolidin-1-il]-2-hidroxietil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona izomer A

Exemplul 7: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1ξ)-1-[(3R)-3-fluoropirolidin-1-il]-2-hidroxietil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona izomer B

La o soluţie de metil 2-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)-2-diazoacetat răcită în baie de gheaţă (Cpd U, 800 mg, 1.48 mmol) în diclorometan anhidru (10 mL) s-a adăugat HBr (800 uL, 4.42 mmol, 33%wt în HOAc), cauzând degajare de gaz. Soluţia a fost lăsată să se încălzească la temperatura camerei şi agitată peste noapte. Amestecul de reacţie s-a diluat cu grijă cu hidrogenocarbonat de sodiu apos saturat, şi extras cu etil acetat (2 x 50mL). Fazele organice combinate au fost uscate pe sulfat de sodiu, concentrate până la uscat, şi purificate printr-o coloană cu silicagel cu un gradient de eluţie de 0◇10%MeOH/EA obţinându-se racemic metil 2-bromo-2-(5,8-dicloro-2-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)acetat (5a, 655 mg, 88%) ca un solid. MS: 501.00/502.05. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.91 (s, 1H), 6.18 (s, 1H), 6.03 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.68 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.98 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.37 (s, 3H).

Un amestec de metil 2-bromo-2-(5,8-dicloro-2-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)acetat (5a, 162 mg, 0.323 mmol), (3R)-3-fluoropirolidină clorohidrat (144 mg, 1.15 mmol), N,N-diizopropiletilamină (0.35 mL, 2.01 mmol), şi N,N-dimetilformamidă anhidră (4 mL) s-au adăugat la temperatura camerei peste noapte. Amestecul de reacţie a fost porţionat între etil acetat (20 mL) şi apă (20 mL). Faza organică a fost separată, spălată consecutiv cu apă (20 mL) şi soluţie de sare de bucătărie (20 mL), uscată pe sulfat de sodiu, şi concentrată până la uscată pentru a obţine metil 2-(5,8-dicloro-2-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)-2-((R)-3-fluoropirolidin-1-il)acetat crud, ca un amestec de diastereomeri (5b, 162 mg, 98% randament), care a fost folosit în etapa următoare fără purificare suplimentară. LCMS: T=510.15/511.10/512.20.

Amestecul crud de diastereomeri de metil 2-(5,8-dicloro-2-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)-2-((R)-3-fluoropirolidin-1-il)acetat (5b, 152 mg, 0.298 mmol) în tetrahidrofuran anhidru (4.0 mL) a fost tratat cu borohidrură de litiu (2.0 M soluţie în THF, 0.45 mL, 0.90 mmol) urmat de puţine picături de metanol. Procesul de adiţie s-a repetat 4 ori, apoi reacţia a fost diluată cu 2 M NH4Cl (20mL) şi extrasă cu etil acetat (2 x 20mL). Fazele organice combinate au fost uscate pe sulfat de sodiu, concentrate până la uscat, şi purificate prin HPLC preparativă obţinându-se 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{1-[(3R)-3-fluoropirolidin-1-il]-2-hidroxietil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona ca un amestec de diastereomeri la carbonul benzilic (Exemplul 5, 32.2 mg, 22% randament în două etape). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.66 (s.l., 1H), 7.80 (d, J=3.67 Hz, 1H), 6.00 (s, 1H), 5.15 - 5.43 (m, 1H), 4.85 (s.l., 1H), 4.69 (s, 2H), 4.03 - 4.13 (m, 1H), 3.66 - 3.84 (m, 2H), 3.50 - 3.63 (m, 2H), 3.02 - 3.10 (m, 1H), 2.94 - 3.02 (m, 2H), 2.71 - 2.90 (m, 2H), 2.42 - 2.55 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.09 - 2.23 (m, 1H), 1.87 - 2.08 (m, 1H). MS: 482 [M+H]+.

Amestecul de diastereomeri ai 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{1-[(3R)-3-fluoropirolidin-1-il]-2-hidroxietil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onei (Exemplul 5, 20.0 mg, 0.0415 mmol) au fost separaţi prin SFC chirală preparativă pe o coloană Chiralcel OJ-3 4.6 x 100 mm 3u, eluţie cu 10% MeOH/DEA @ 120 bar, 4 mL/min, obţinându-se, după liofilizare, Exemplul 6 (Pic 1, timp de retenţie 1.18 min, 5.65 mg, 28%) şi Exemplul 7 (Pic 2, timp de retenţie 1.42 min, 6.23 mg, 31%). Configuraţia absolută pe carbonul benzilic în fiecare izomer nu a fost determinată.

Exemplul 6: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1ξ)-1-[(3R)-3-fluoropirolidin-1-il]-2-hidroxietil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - izomer A. MS: 482 [M+H]+. Analiza chirală: ~88% de, [α]D = +62.1° (c 0.01 MeOH)

Exemplul 7: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1ξ)-1-[(3R)-3-fluoropirolidin-1-il]-2-hidroxietil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - izomer B. MS: 482 [M+H]+. Analiza chirală: ~98% de; [α]D = -58.9° (c 0.01 MeOH)

Metoda C

Exemplul 8: (+)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{fluoro[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il]metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona

Exemplul 9: (-)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{fluoro[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il]metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona

La o soluţie de 2-{[2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il]metil}-7-bromo-5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă (Cpd S, 311.0 mg, 0.598 mmol) în tetrahidrofuran (5.0 mL) şi 1,4-dioxan (0.5 mL) la -40 oC (în acetonitril/baie de gheaţă uscată) s-a adăugat iPrMgCl-LiCl (1.3 M în THF, 0.850 mL, 1.10 mmol) şi reacţia s-a adăugat timp de 1 oră. N-Boc-4-formilpiperidină (0.242 g, 1.14 mmol) s-a adăugat apoi, şi balonul s-a încâlzit la 0 °C într-o baie cu gheaţă. După 1 oră la 0 °C, soluţia a fost diluată cu NH4Cl sat. ap. şi extrasă cu MTBE. Stratul MTBE s-a concentrat, şi uleiul rezultat purificat pe silicagel (Isco RediSepRf, 12 g, 10-70% gradient de etil acetat în heptan) pentru a obţine terţ-butil 4-((2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)(hidroxi)metil)piperidin-1-carboxilat (8a, 0.229 g, 59%) racemic ca un solid alb. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.66 (s, 1H), 7.36-7.44 (m, 2H), 7.18-7.31 (m, 3H), 6.71 (s, 1H), 5.42 (s, 2H), 5.04 (d, J=5.14 Hz, 1H), 4.83 (d, J=1.96 Hz, 2H), 4.08 (d, J=12.72 Hz, 2H), 3.23 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.73 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.53-2.71 (m, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 1.76-1.90 (m, 1H), 1.32-1.62 (m, 13H); MS 654, 656 [M + H]+.

La o soluţie de terţ-butil 4-((2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)(hidroxi)metil)piperidin-1-carboxilat (8a, 88 mg, 0.13 mmol) racemic în diclorometan (4 ML) răcită într-o baie cu gheaţă uscată /acetona s-a adăugat Deoxo-Fluor™ (50% în THF, 0.165 mL, 0.39 mmol). După agitare la -78 °C timp de 5 minute, baia de răcire a fost înlăturată şi amestecul agitat timp de 5 minute. Reacţia a fost diluată cu adiţia de NaHCO3 sat. ap., straturile au fost separate, şi stratul diclorometanic concentrat. Uleiul rezultat a fost purificat pe silicagel (Biotage SNAP, HP-Sil, 10g, 0-40% gradient de etil acetat în heptan) pentru a obţine terţ-butil 4-((2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)fluorometil)piperidin-1-carboxilat (8b, 0.075 g, 85%) racemic ca un solid alb, lipicios. MS: 656, 658 [M + H]+.

O soluţie de terţ-butil 4-((2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)fluorometil)piperidin-1-carboxilat (8b, (0.075 g, 0.11 mmol) racemic în acid trifluoroacetic (5.0 mL) a fost încălzită la 50 °C timp de 1oră. Amestecul de reacţie a fost diluat cu heptan şi concentrat în vacuum. Reziduul a fost dizolvat în etanol şi concentrat din nou. Solidul alb rămas a fost uscat în vacuum pentru a obţine 5,8-dicloro-2-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-7-(fluoro(piperidin-4-il)metil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (8c 0.085 g) racemic crud ca sare TFA. MS 466, 468 [M + H]+. Acest material a fost dizolvat în diclorometan (5 mL) şi răcit la 0 °C. Trietilamina (0.060 mL, 0.43 mmol) şi apoi 2-acetoxiacetil clorura (0.017 mL, 0.16 mmol) s-au adăugat, amestecul agitat timp de 30 minute, şi apoi câteva picături de metanol s-au adăugat pentru a stinge excesul de reagent. Soluţia s-a concentrat în vacuum, şi reziduul a fost dizolvat în metanol (5 mL) şi tratat cu carbonat de potasiu (0.100 g, 0.724 mmol). După 4 ore la temperatura camerei, reacţia a fost filtrată, concentrată, şi purificată prin SFC preparativă chirală (OJ-H, 21 x 250mm coloană, 32 mL MeOH: 8 mL CO2, 100 bar, 40 mL/min) pentru a obţine enantiomeri separaţi Exemplul 8 (pic 1, 9.6 mg, 15%) şi Exemplul 9 (pic 2, 8.1 mg, 13%) ca un solid alb. Stereochimia absolută a fiecărui izomer nu a fost determinată, dar măsurările rotaţiei optice s-au obţinut.

Exemplul 8: (+)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{fluoro[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il]metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona. MS 524, 526 [M+H]+. Rotaţia optică: [α]D = +9.9° (c, 0.1, DMSO). Analiza chirală: >99% ee; Timp de retenţie 8.13 min pe coloană Lux Cellulose-2 4.6 x 100 mm 3u, 60% MeOH @ 120 bar, 4 mL/min.

Exemplul 9: (-)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{fluoro[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il]metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona. 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6) δ 11.55 (s, 1H), 7.58 (d, J=4.95 Hz, 1H), 5.88 (s, 1H), 5.72 - 5.84 (m, 1H), 4.55 (q, J=13.75 Hz, 2H), 4.46 (s.l., 1H), 4.30 - 4.42 (m, 1H), 4.05 - 4.13 (m, 1H), 3.97 - 4.04 (m, 1H), 3.69 (t, J=13.39 Hz, 1H), 3.45 (t, J=5.78 Hz, 2H), 2.80 - 2.98 (m, 3H), 2.20 (d, J=18.71 Hz, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.61 (s.l., 1H), 1.46 (s.l., 1H), 1.34 - 1.42 (m, 1H), 1.23 (s, 5H); MS 524, 526 [M+H]+. Rotaţia optică: [α]D = -6.5° (c, 0.1, DMSO). Analiza chirală: ~95% ee; Timp de retenţie 10.29 min pe Lux Cellulose-2 4.6 x 100 mm 3u coloană, 60% MeOH @ 120 bar, 4 mL/min.

Metoda D

Exemplul 10: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(2-hidroxi-1-metoxietil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - izomer A

Exemplul 11: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(2-hidroxi-1-metoxietil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - izomer B

La o soluţie agitată de metanol uscat (12 mg, 0.36 mmol) şi tetraacetat de dirodiu (1.2 mg, 0.0028 mmol) în diclorometan (5 mL) s-a adăugat o soluţie de metil 2-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)-2-diazoacetat (Cpd U, 150 mg, 0.278 mmol) în diclorometan (5 mL) cu picătura într-o perioadă de 60 minute la temperatura camerei. După adiţie, reacţia a fost încălzită la reflux timp de 18 ore. Amestecul s-a concentrat şi purificat prin cromatografie rapidă (eluţie cu eter de petrol/EtOAc=10:1, Rf ~0.3), obţinându-se metil 2-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)-2-metoxiacetat (11a, 100 mg, 66%) racemic ca ulei maro.

La o soluţie agitată de racemic metil 2-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)-2-metoxiacetat (11a, 100 mg, 0.184 mmol) în tetrahidrofuran anhidru (10 mL) s-a adăugat borohidrură de litiu solidă (12 mg, 0.55 mmol) într-o porţie la temperatura camerei. Amestecul rezultat a fost încălzit la 60 oC timp de 1 oră. Amestecul a fost diluat cu apă (15 mL) şi extras cu etil acetat (3 x 15 mL). Extractele organice combinate au fost spălate cu NaCl saturat ap. (15 mL), uscate pe sulfat de sodiu, filtrate şi concentrate obţinându-se produsul crud (91 mg). Purificarea a fost realizată utilizând cromatografie rapidă (eluţie cu eter de petrol/EtOAc = 1:1) obţinându-se 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(2-hidroxi-1-metoxietil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (11b, 60 mg, 63%) racemic ca un solid alb.

O soluţie de 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(2-hidroxi-1-metoxietil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (11b 60 mg, 0.12 mmol) racemic în diclorometan (2 mL) şi acid trifluoroacetic (2 mL) s-a adăugat la temperatura camerei timp de 18 ore. Analiza prin LC-MS a arătat deprotecţia completă a grupului benzil, în afară de ceva ester trifluoroacetat la oxigenul piridonic, astfel încât amestecul s-a concentrat şi apoi metanol (10 mL) şi carbonat de potasiu (80.9 mg, 0.585 mmol) s-au adăugat. Amestecul rezultat s-a adăugat la temperatura camerei timp de 30 minute, moment în care analiza prin LC-MS a arătat deprotecţia completă a esterului-TFA. Amestecul a fost filtrat, solidul colectat a fost spălat cu DCM/MeOH (10:1, 10 mL) şi Filtratul a fost concentrat. Purificarea a fost realizată prin cromatografie rapidă (eluţie cu DCM/MeOH = 10:1, Rf ~ 0.6) obţinându-se o 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(2-hidroxi-1-metoxietil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona racemică (37 mg, 75%) ca un solid alb.

Loturi combinate de 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(2-hidroxi-1-metoxietil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă racemică (total 100 mg, 0.235 mmol) au fost separate prin SFC chirală pe un Chiralpak IC 250 mm x 30 mm, 10 µm coloană, eluţie cu 50% EtOH / NH4OH la un debit de 70mL/min. După liofilizare, Exemplul 10 (pic 1, 33 mg, 33%) şi Exemplul 11 (pic 2, 35 mg, 35%) s-au obţinut ca un solid alb-murdar. Stereochimia absolută pentru fiecare izomer nu a fost determinată.

Exemplul 10: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(2-hidroxi-1-metoxietil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - izomer A. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.23 (s.l., 1H), 7.53 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.92-4.89 (m, 1H), 4.78 (s, 2H), 3.80-3.71 (m, 1H), 3.68-3.62 (m, 2H), 3.53-3.51 (m, 1H), 3.33 (s, 3H), 2.94 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.29 (s, 3H). MS: 425 [M+H]+. Analiza chirală: 100% ee, timp de retenţie 7.717 min, coloană: Chiralpak IC-3 150 x 4.6mm I.D., 3 µm; fază mobilă: 40% etanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.35mL/min.

Exemplul 11 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(2-hidroxi-1-metoxietil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - izomer B. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.15 (s.l., 1H), 7.53 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.92-4.89 (m, 1H), 4.78 (s, 2H), 3.80-3.71 (m, 1H), 3.68-3.63 (m, 2H), 3.55-3.51 (m, 1H), 3.34 (s, 3H), 2.94 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.29 (s, 3H). MS: 425 [M+H]+. Analiza chirală: 100% ee, timp de retenţie 11.063 min, coloană: Chiralpak IC-3 150 x 4.6mm I.D., 3 µm; fază mobilă: 40% etanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.35mL/min.

Metoda E

Exemplul 12: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1R)-2-hidroxi-1-[(2S)-tetrahidrofuran-2-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona

Exemplul 13: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1R)-2-hidroxi-1-[(2R)-tetrahidrofuran-2-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona

La o soluţie de metil 2-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)-2-diazoacetat (Cpd U,1.78 g, 3.29 mmol) în tetrahidrofuran anhidru (20 mL ) s-a adăugat o soluţie de triflat de cupru (II) (120 mg, 0.332 mmol) şi (S)-(-)-2,2'-izopropiliden-bis(4-fenil-2-oxazolineă) (130 mg, 0.389 mmol) în tetrahidrofuran anhidru (4 mL). Soluţia rezultată a fost încălzită la reflux peste noapte în la 80°C într-o baie cu ulei. După răcire la temperatura camerei, amestecul de reacţie s-a concentrat până la uscat şi purificat printr-o coloană cu silicagel cu un gradient de eluţie de 0◇40% EA/HEP obţinându-se un amestec de diastereomeri cu (S) geomentrie la carbonul benzilic (atribuţie stereochimică prin analogie cu Jiménez-Osés, G. şi al., J. Org. Chem. 2013, 78, 5851-5857), metil (2S)-2-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)-2-(tetrahidrofuran-2-il)acetat (12a, 333 mg, 17%). MS:583.10/584.20 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.69 (d, J=2.20 Hz, 1H), 7.45 (d, J=7.58 Hz, 2H), 7.30 - 7.39 (m, 3H), 6.64 (s, 1H), 5.45 (s, 2H), 4.80 - 4.92 (m, 2H), 4.41 - 4.59 (m, 1H), 3.79 - 4.02 (m, 1H), 3.72 - 3.80 (m, 1H), 3.70 (d, J=5.01 Hz, 3H), 3.23 - 3.31 (m, 2H), 2.69 - 2.76 (m, 2H), 2.44 (s, 3H), 2.34 (d, J=3.79 Hz, 3H), 1.93 - 2.18 (m, 1H), 1.80 - 1.94 (m, 2H), 1.55 - 1.80 (m, 2H).

[Sub aceleaşi condiţii, utilizarea ligandului enantiomeric (R)-(-)-2,2'-izopropilidenă-bis(4-fenil-2-oxazoline) produce un amestec de diastereomeri cu (R) geomentrie pe poziţia benzilică, metil (2R)-2-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)-2-(tetrahidrofuran-2-il)acetat.]

Borohidrura de litiu (2.0 M soluţie în THF, 1.0 mL, 2.0 mmol) s-a adăugat la o soluţie de metil (2S)-2-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)-2-(tetrahidrofuran-2-il)acetat (12a 333 mg, 0.571 mmol) în tetrahidrofuran anhidru (10 mL), urmată de câteva picături de metanol. Gaz s-a degajat. Amestecul s-a adăugat la temperatura camerei timp de 1 oră, apoi s-a diluat cu 10 mL 2 M NH4Cl, diluat cu apă, şi extras cu eter (3 x 50mL). Fazele organice combinate au fost uscate pe sulfat de sodiu, concentrate până la uscat, pentru a obţine 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-((1R)-2-hidroxi-1-(tetrahidrofuran-2-il)etil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (12b, 280 mg, 88%) crudă, ca un amestec de diastereomeri cu (R) geomentrie la carbonul benzilic. Acest amestec a fost folosit în etapa următoare fără purificare suplimentară. MS: 555.20/557.20.

O soluţie de amestec crud de diastereomeri, 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-((1R)-2-hidroxi-1-(tetrahidrofuran-2-il)etil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (12b, 280 mg, 0.504 mmol) în acid trifluoroacetic (8 mL) s-a adăugat la 50 °C timp de 1 oră. După înlăturarea excesului de acid trifluoroacetic, reziduul a fost dizolvat în metanol (10 mL) şi tratat cu 4 M NaOH timp de 30 minute la 50 °C. Amestecul de reacţie a fost porţionat între etil acetat (50 mL) şi apă (50 mL). Faza organică a fost separată. Faza apoasă a fost acidulată la pH ~2-3, şi extrasă cu etil acetat (2 x 50mL). Fazele organice combinate au fost uscate pe sulfat de sodiu, concentrate până la uscat, şi purificat prin SFC chirală (Chiralpak AD-3 4.6 x 100 mm 3u coloană; eluţie cu 5-60% MeOH în 3 minute, 120 bar, 4 mL/min) oferind produşii diastereomerici separaţi, Exemplul 12 (pic 1, 32 mg, 14%) şi Exemplul 13 (pic 2, 77 mg, 33%). Stereochimia produşilor izolaţi a fost atribuită prin analogie cu Jiménez-Osés, G. şi al., J. Org. Chem. 2013, 78, 5851-5857.

Exemplul 12: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1R)-2-hidroxi-1-[(2S)-tetrahidrofuran-2-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.58 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 4.10 - 4.21 (m, 1H), 3.86 - 3.99 (m, 3H), 3.75 - 3.84 (m, 1H), 3.64 - 3.72 (m, 1H), 3.46 - 3.55 (m, 2H), 2.91 - 3.01 (m, 2H), 2.29 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.73 - 1.97 (m, 3H), 1.44 - 1.58 (m, 1H). MS: 465 {M+H]+. Analiza chirală: 91% ee/de; timp de retenţie 2.91 min pe Chiralpak AD-3 4.6 x 100 mm 3µ coloană; eluţie cu 5-60% MeOH în 3 minute, 120 bar, 4 mL/min.

Exemplul 13: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1R)-2-hidroxi-1-[(2R)-tetrahidrofuran-2-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.66 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.27 (dt, J=7.86, 6.16 Hz, 1H), 3.72 - 3.91 (m, 3H), 3.67 (t, J=6.79 Hz, 2H), 3.49 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.95 (t, J=6.17 Hz, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.01 - 2.13 (m, 1H), 1.68 - 1.92 (m, 2H), 1.49 - 1.62 (m, 1H). MS: 465 {M+H]+. Analiza chirală: 93% ee/de; timp de retenţie 3.21 minute pe Chiralpak AD-3 4.6 x 100 mm 3µ coloană; eluţie cu 5-60% MeOH în 3 minute, 120 bar, 4 mL/min.

Metoda F

Exemplul 14: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(propan-2-il)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona

Un complex de soluţie de 2-{[2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il]metil}-7-bromo-5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă (Cpd S, 500 mg, 0.961 mmol), trietilamina (0.30 mL, 2.2 mmol), şi [1.1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dicloropaladiu(II)-diclorometan (24 mg, 0.028 mmol) în 2-propanol (15 mL) sub azot într-un tub cu microunde plafonat a fost încălzită la 100 °C timp de 1 oră într-un reactor cu microunde. După înlăturarea solventului, produsul a fost extras în eter (3 x 10 mL) şi extractele organice combinate au fost spălate cu apă (2 x), uscate pe sulfat de magneziu, concentrate, şi purificate prin cromatografie rapidă (silicagel, 0 - 60% EtOAc în heptan), obţinându-se 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(prop-1-en-2-il)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (14a, 240 mg, 52%) ca o spumă albă. 1H RMN (400MHz, CDCl3) δ 7.37 (d, J=6.8 Hz, 2H), 7.30 - 7.20 (m, 3H), 7.18 (d, J=2.6 Hz, 1H), 6.55 (s, 1H), 5.35 (s, 2H), 5.16 (d, J=1.5 Hz, 1H), 4.85 (d, J=1.5 Hz, 1H), 4.80 (s, 2H), 3.20 (t, J=6.2 Hz, 2H), 2.65 (t, J=6.2 Hz, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.01 (s, 3H). MS: 481 [M+H]+.

O soluţie de 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(prop-1-en-2-il)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (14a, 75 mg, 0.16 mmol) şi oxid de platină(IV) (71 mg, 0.31 mmol) în etil acetat (5 mL) s-a adăugat sub o butelie de hidrogen timp de 2 ore. Catalizatorul a fost filtrat şi solventul înlăturat în vacuum. Produsul crud a fost purificat prin cromatografie cu fluide supercritice (SFC/ZymorSpher HAP 150 x 21.2mm coloană cu 8% MeOH @ 100 bar, 58 mL/min) obţinându-se 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(propan-2-il)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Exemplul 14 (7 mg, 10%), ca un solid alb. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.35 (s, 1 H), 5.90 (s, 1 H), 4.78 (s, 2 H), 3.63 (t, J=6.30 Hz, 2 H), 3.5 - 3.6 (m, 1 H), 2.90 (t, J=6.11 Hz, 2 H), 2.35 (s, 3 H), 2.24 (s, 3 H), 1.24 (d, J=6.85 Hz, 6 H). MS: 393 [M+H].

Metoda G

Exemplul 15: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(1-metoxipropil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - izomer A

Exemplul 16 : 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(1-metoxipropil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - izomer B

Un amestec de 2-{[2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il]metil}-7-bromo-5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă (Cpd S, 200 mg, 0.384 mmol), ester catecholic al acidului (Z)-3-hexenil-3-boronic (155 mg, 0.769 mmol) şi fluorură de ceziu (182 mg, 1.20 mmol) în dioxan (2 mL) şi apă (0.4 mL) a fost degazat cu azot timp de 5 minute. Tetrakis(trifenilfosfin)paladiu(0) (44.4 mg, 0.0384 mmol) s-a adăugat, amestecul degazat cu azot din nou, şi apoi încălzit la 100 °C pentru 4 ore. Amestecul a fost diluat cu apă (15 mL) şi extras cu EtOAc (3 x 15 mL). Straturile organice combinate au fost spălate cu soluţie de sare de bucătărie (20 mL), uscate pe sulfat de sodiu, concentrate, şi purificate prin cromatografie pe coloană (silicagel, Eter de petrol/EtOAc=10:1, Rf~0.5) pentru a obţine (E)-2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(hex-3-en-3-il)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (15a, 150 mg, 74.5%) ca un ulei incolor. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.37 - 7.34 (m, 3H), 7.19 (s, 1H), 6.62 (s, 1H), 5.43 (s, 2H), 5.28 (t, J=6.8 Hz, 1H), 4.88 (s, 2H), 3.28 (t, J=6.4 Hz, 2H), 2.73 (t, J=6.4 Hz, 2H), 2.45-2.43 (m, 2H), 2.42 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.19 (quint, J= 7.6 Hz, 2H), 1.04 (t, J=7.6 Hz, 3H), 0.89-0.86 (m, 4H).

Un flux de ozon a fost barbotat printr-o soluţie agitată de (E)-2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(hex-3-en-3-il)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă (15a, 864 mg, 1.65 mmol) în metanol (46 mL) la -78 °C până când o culoare mov deschis s-a obţinut (~10 minute). Azotul a fost barbotat în soluţie până când culoarea purpurie a dispărut, apoi dimetilsulfura (0.4 mL) s-a adăugat, şi soluţia agitată la 10 °C timp de 3 ore. Amestecul de reacţie s-a concentrat în vacuum şi reziduul a fost purificat prin cromatografie pe coloană (silicagel, eter de petrol/EtOAc= 6:1, Rf~0.5) pentru a obţine 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-propionil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (15b, 346 mg, 42.1%) ca ulei galben.

Borohidrură de sodiu (52.6 mg, 1.39 mmol) s-a adăugat la o soluţie răcită de 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-propionil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă (15b, 346 mg, 0.696 mmol) în metanol (20 mL), şi agitarea a continuat timp de 1 oră at 10 °C. Reacţia a fost diluată cu NH4Cl sat. (30 mL), extrasă cu etil acetat (3 x 25 mL). Straturile organice combinate au fost spălate cu soluţie de sare de bucătărie (25 mL), uscate pe sulfat de sodiu, şi concentrate în vacuum. Reziduul a fost purificat prin cromatografie pe coloană (silicagel, eter de petrol/EtOAc=2:1, Rf~0.6), obţinându-se 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(1-hidroxipropil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (15c, 300 mg, 86.4%) racemic ca un ulei incolor.

Terţ-butoxid de potasiu (111 mg, 0.985 mmol) şi iodometan (140 mg, 0.985 mmol) s-au adăugat la o soluţie răcită (10 °C) de 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(1-hidroxipropil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă (15c, 246 mg, 0.493 mmol) în N,N-dimetilformamidă (25 mL), şi agitate la 10 °C peste noapte. Reacţia a fost diluată cu apă (30 mL), extrasă cu EtOAc (3 x 35 mL). Straturile organice combinate au fost spălate cu soluţie de sare de bucătărie (35 mL), uscate pe sulfat de sodiu, concentrate, şi purificate prin cromatografie pe coloană (silicagel, eter de petrol/EtOAc=5:1), oferind 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(1-metoxipropil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (15d, 148 mg, 58.5%) racemic ca ulei galben.

Acid trifluoroacetic (9 mL) s-a adăugat cu picătura la o soluţie agitată de 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(1-metoxipropil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă (15d, 218 mg, 0.423 mmol) în diclorometan (9 mL) la 10 °C. Amestecul rezultat s-a adăugat la 25 °C peste noapte. Amestecul s-a concentrat în vacuum şi reziduul a fost purificat prin cromatografie pe coloană (silicagel, CH2Cl2/MeOH=10:1, Rf~0.55) pentru a obţine 5,8-dicloro-2-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-7-(1-metoxipropil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (15e, 150 mg, 83.8%) racemică ca ulei roz. Acest amestec racemic a fost separat prin SFC preparativă [coloană: (AD (250 mm*30 mm, 5um)), fază mobilă: 25% MeOH NH3H2O, Debit: 50mL/min, lungimea de undă: 220 nm, prelucrare: liofilizare] pentru a obţine Izomerul A (Exemplul 15, 45.65 mg, 31.4%) ca un solid alb şi Izomerul B (Exemplul 16, 31.8 mg, 21.2%) ca un solid albiu. Stereochimia absolută a fiecărui izomer nu a fost determinată.

Exemplul 15: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(1-metoxipropil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - izomer A. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.88 (s.l., 1H), 7.53 (s, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 4.69-4.66 (m, 1H), 3.65 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.24 (s, 3H), 2.93 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.76-1.72 (m, 1H), 1.65-1.60 (m, 1H), 0.96 (t, J = 7.0 Hz, 3H). MS: 423 [M+H]+. Analiza chirală: 100% ee; coloană: Chiralpak AD-H 250 x 4.6mm I.D., 5um; timp de retenţie: 8.04 min; fază mobilă: metanol (0.05% DEA) în CO2 de la 5% la 40%; debit: 2.5mL/min; lungimea de undă: 220nm.

Exemplul 16: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(1-metoxipropil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - izomer B. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 10.88 (s.l., 1H), 7.53 (s, 1H), 5.93 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.69-4.66 (m, 1H), 3.67-3.63 (m, 2H), 3.24 (s, 3H), 2.93 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.78-1.73 (m, 1H), 1.65-1.58 (m, 1H), 0.96 (t, J = 7.2 Hz, 3H). MS: 423 [M+H]+. Analiza chirală: 99.6% ee; coloană: Chiralpak AD-H 250 x 4.6mm I.D., 5um; timp de retenţie: 8.34 min; fază mobilă: metanol (0.05% DEA) în CO2 de la 5% la 40%; debit: 2.5mL/min; lungimea de undă: 220nm.

Metoda H

Exemplul 75: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{1-[1-(hidroxiacetil)azetidin-3-iliden]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona.

O soluţie de trifenilfosfină (15.83 g, 60.35 mmol) în diclorometan anhidru (16 mL) a fost răcită la 0 °C şi degazată prin barbotare cu azot timp de 5 minute. Tetrabromură de carbon (9.98 g, 30.1 mmol) s-a adăugat, şi soluţia agitată la 0 °C timp de 5 minute înainte ca o soluţie de ester terţ-butilic al acidului 3-oxo-azetidin-1-carboxilic (2.52 g, 14.7 mmol) în diclorometan anhidru (7 mL) s-a adăugat cu picătura cu seringa, timp de 1 minut. După agitare la 0 °C timp de 20 minute, reacţia a fost lăsată să se agite la temperatura camerei timp de 22.5 ore. Heptan (100 mL) s-a adăugat şi precipitatul rezultat a fost înlăturat prin filtrare. Filtratul a fost concentrat pentru a obţine 7.82 g solid albicios. Solidul s-a adăugat în 100 mL heptan cu sonicare, şi apoi solidele reziduale au fost înlăturate prin filtrare cu aspiraţie. Filtratul a fost concentrat pentru a obţine terţ-butil 3-(dibromometilen)azetidin-1-carboxilat (75a, 4.59 g, 95% randament) ca un solid alb. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 4.32 (s, 4H), 1.46 (s, 9H). MS: 226, 228, 230 [M-Boc+H]+.

La o soluţie de terţ-butil 3-(dibromometilen)azetidin-1-carboxilat (75a, 542 mg, 1.66 mmol) în THF (16.6 mL) le -78 °C s-a adăugat n-butillitiu (1.6M soluţie în heptan, 1.86 mL, 2.98 mmol). După 30 minute, reacţia a fost tratată cu iodometan (325 uL, 5.22 mmol) şi agitarea a continuat la -78 °C timp de o oră. Reacţia a fost diluată cu NH4Cl sat. ap. şi extrasă cu MTBE. Stratul organic s-a concentrat şi purificat pe silicagel (Eluţie cu 0-25% etil acetat în heptan) pentru a obţine terţ-butil 3-(1-bromoetilidenă)azetidin-1-carboxilat (75b 0.230g, 53% randament) ca un ulei limpede. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 4.38-4.43 (m, 2H), 4.31-4.37 (m, 2H), 2.14 (quint, J=1.74 Hz, 3H), 1.46 (s, 9H).

Un complex de lorură de izopropilmagneziu clorura de litiu (1.3M soluţie în THF, 2.00 mL, 2.60 mmol , 2.00 mL) s-a adăugat la o soluţie răcită (-40 °C, acetonitril/baie de gheaţă uscată) soluţie de 2-{[2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il]metil}-7-bromo-5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă (Cpd S, 657 mg, 1.26 mmol) în THF (12.6 mL), şi amestecul agitat timp de o oră. Clorură de Tri-n-butilstaniu (600 uL, 72.2 mmol) s-a adăugat, şi balonul s-a încâlzit la 0 °C într-o baie cu gheaţă timp de 30 minute. Reacţia a fost diluată cu NH4Cl sat. ap. şi extrasă cu MTBE. Stratul MTBE a fost spălat cu soluţie de sare de bucătărie, concentrat, şi uleiul crud rezultat purificat pe silicagel (eluţie cu 0-30% etil acetat în heptan) pentru a obţine 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(tributilstannil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (75c, 0.699 g, 76%) ca un ulei limpede dens. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.42 (d, J=7.09 Hz, 2H), 7.37 (s, 1H), 7.22-7.34 (m, 3H), 6.74 (s, 1H), 5.37 (s, 2H), 4.69 (s, 2H), 3.22 (t, J=5.99 Hz, 2H), 2.72 (t, J=5.87 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 1.51 (quint, J=7.76 Hz, 6H), 1.08-1.35 (m, 12H), 0.85 (t, J=7.34 Hz, 9H). MS: 731 [M+H]+ = 731.

Un amestec de 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(tributilstannil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (75c, 251 mg, 0.344 mmol) şi terţ-butil 3-(1-bromoetilidenă)azetidin-1-carboxilat (75b, 103 mg, 0.393 mmol) 1,4-dioxan (4.00 mL) a fost tratat cu tetrakis(trifenilfosfino)paladiu(0) (60.8 mg, 0.0526 mmol), şi iodură de cupru(I) (10.0 mg, 0.0525 mmol). Azot a fost barbotat prin amestec timp de 10 minute, apoi fiola a fost sigilată şi iradiată într-un reactor cu microunde la 120 °C timp de 2 ore. Dioxanul a fost înlăturat în vacuum, şi uleiul rezultat a fost purificat pe silicagel (eluţie cu 0-40% etil acetat în heptan) pentru a obţine terţ-butil 3-(1-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)etilidenă)azetidin-1-carboxilat (75d, 49 mg, 23% randament) ca o gumă transparentă. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.43-7.49 (m, 2H), 7.30-7.39 (m, 3H), 7.21 (s, 1H), 6.65 (s, 1H), 5.47 (s, 2H), 4.87 (s, 2H), 4.57 (s.l., 2H), 4.24 (s.l., 2H), 3.29 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.73 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.36 (s, 3H), 1.87 (s, 3H), 1.45 (s, 9H). MS: 622, 624 [M+H]+.

O soluţie de terţ-butil 3-(1-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)etilidenă)azetidin-1-carboxilat (75d, 49 mg, 0.079 mmol) în acid trifluoroacetic (5 mL, 70 mmol) s-a adăugat la temperatura camerei pentru 6 ore. Soluţia s-a concentrat până la uscat. Reziduul a fost dizolvat în metanol şi purificat prin SCX coloană (Varian Bond elute SCX, 2g, 100 % MeOH la 3.5M NH3 în MeOH) pentru a obţine 7-(1-(azetidin-3-iliden)etil)-5,8-dicloro-2-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona crudă (Exemplul 74, 38 mg, 100% randament) ca o gumă transparentă, care a fost folosită fără purificare suplimentară în etapa următoare. MS: 432, 434 [M+H]+.

La o soluţie răcită de 7-(1-(azetidin-3-iliden)etil)-5,8-dicloro-2-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă crudă (Exemplul 74, 24 mg, 0.056 mmol) în diclorometan (3.0 mL) s-a adăugat trietilamina (10 uL, 0.072 mmol) şi apoi acetoxiacetil clorura (6.5 uL, 0.060 mmol). Reacţia a fost agitată timp de 30 minute şi apoi s-a diluat cu metanol. Amestecul s-a concentrat, re-dizolvat în metanol (5 mL), tratat cu carbonat de cesiu (45 mg, 0.14 mmol), şi agitat la temperatura camerei peste noapte. Soluţia rezultată s-a concentrat până la uscat. Reziduul a fost dizolvat în DMF, filtrat, şi purificat prin HPLC preparativă pentru a obţine 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{1-[1-(hidroxiacetil)azetidin-3-iliden]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Exemplul 75, 9.38 mg, 34% randament) pulbere albă. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.54 (s.l., 1H), 7.51 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.81-4.99 (m, 2H), 4.51-4.60 (m, 3H), 4.48 (s.l., 1H), 4.19 (s.l., 1H), 3.83-4.01 (m, 2H), 3.46 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.88 (t, J=5.87 Hz, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.85 (s.l., 3H). MS; 490, 492 [M+H]+.

Metoda I

Exemplul 34: (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il](metoxi)metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona.

Exemplul 35: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il](metoxi)metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B.

Exemplul 36: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il](metoxi)metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A.

La o soluţie de 2-{[2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il]metil}-7-bromo-5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă (Cpd S, 311.0 mg, 0.598 mmol) în tetrahidrofuran (5.0 mL) şi 1,4-dioxan (0.5 mL) la -40 oC (într-o baie acetonitril/ gheaţă uscată) s-a adăugat complex de clorura de izopropilmagneziu clorura de litiu (1.3 M în THF, 0.850 mL, 1.10 mmol) şi reacţia s-a agitat timp de 1 oră. N-Boc-4-formilpiperidină (0.242 g, 1.14 mmol) s-a adăugat apoi, şi balonul s-a încâlzit la 0 °C într-o baie cu gheaţă. După 1 oră la 0 °C, soluţia a fost diluată cu NH4Cl sat. ap. şi extrasă cu MTBE. Stratul MTBE s-a concentrat, şi uleiul rezultat purificat pe silicagel (Isco RediSepRf, 12 g, 10-70% gradient de etil acetat în heptan) pentru a obţine terţ-butil 4-((2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)(hidroxi)metil)piperidin-1-carboxilat (8a, 0.229 g, 59%) racemic ca un solid alb. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.66 (s, 1H), 7.36-7.44 (m, 2H), 7.18-7.31 (m, 3H), 6.71 (s, 1H), 5.42 (s, 2H), 5.04 (d, J=5.14 Hz, 1H), 4.83 (d, J=1.96 Hz, 2H), 4.08 (d, J=12.72 Hz, 2H), 3.23 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.73 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.53-2.71 (m, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 1.76-1.90 (m, 1H), 1.32-1.62 (m, 13H); MS 654, 656 [M + H]+.

O soluţie răcită (0 °C) de terţ-butil 4-((2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)(hidroxi)metil)piperidin-1-carboxilat racemic (8a, 91.0 mg, 0.139 mmol) în THF (3.0 mL) a fost tratată cu iodometan (34 mg, 0.24 mmol) şi terţ-butoxid de potasiu (0.155 mL de 1.0M soluţie în THF, 0.155 mmol). Agitarea a fost continuată la 0 °C timp de 30 minute, apoi amestecul porţionat între soluţie de sare de bucătărie şi MTBE. Faza organică s-a concentrată până la uscat, pentru a obţine terţ-butil 4-((2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)(metoxi)metil)piperidin-1-carboxilat racemic crud (34b, 97 mg, 100%) ca o gumă. MS: 612, 614 [M+H - tBu]+.

Acid trifluoroacetic (0.10 mL, 1.35 mmol) s-a adăugat la temperatura camerei la soluţia de terţ-butil 4-((2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)(metoxi)metil)piperidin-1-carboxilat racemic crud (34b, 97 mg, 0.139 mmol) în diclorometan (5.0 mL). Amestecul s-a adăugat la temperatura camerei timp de 2 ore, la 35 °C pentru 4 ore, la temperatura camerei peste noapte, apoi la 40 °C pentru 6 ore. Soluţia a fost diluată cu heptan şi concentrată până la uscat, formând 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(metoxi(piperidin-4-il)metil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona racemică crudă (34c, 124 mg, 100%) ca o gumă. MS: 568, 570 [M+H]+.

La o soluţie răcită de 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(metoxi(piperidin-4-il)metil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona racemică crudă (34c, 124 mg, 0.139 mmol) în diclorometan (3.0 mL) s-a adăugat trietilamina (75 uL, 0.54 mmol) şi 2-acetoxiacetil clorura (16 uL, 0.15 mmol). Amestecul s-a adăugat la 0 °C timp de 30 minute. Acid trifluoroacetic (2.0 mL) s-a adăugat apoi şi amestecul agitat la temperatura camerei timp de 1 oră, apoi la 40 °C timp de 7 ore. Soluţia a fost concentrată până la uscat şi uscată suplimentar în vacuum înalt pentru 2 zile, oferind 2-(4-((5,8-dicloro-2-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)(metoxi)metil)piperidin-1-il)-2-oxoetil acetat (34d, 204 mg, 100%) racemic crud ca un ulei auriu. MS: 578, 580 [M+H]+.

Acetatul de 2-(4-((5,8-dicloro-2-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)(metoxi)metil)piperidin-1-il)-2-oxoetil racemic crud (34d, 204 mg, 0.139 mmol) a fost dizolvat într-o soluţie 7N de amoniac în metanol (4 mL, 28 mmol NH3), agitat la temperatura camerei timp de 1 oră, apoi agitat la 40 °C pentru 4 ore. Soluţia s-a concentrat până la uscat şi reziduul a fost purificat prin HPLC preparativă pentru a obţine (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il](metoxi)metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Exemplul 34, 19.87 mg, 27% randament din 8a) ca un solid alb. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.44 (s, 1H), 6.01 (s, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.56 (d, J=5.62 Hz, 1H), 4.35-4.45 (m, 1H), 4.02-4.17 (m, 2H), 3.57-3.68 (m, 1H), 3.43 (t, J=6.24 Hz, 2H), 3.10 (s, 3H), 2.86-2.92 (m, 2H), 2.75-2.85 (m, 1H), 2.40-2.54 (m, 1H), 2.20 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 1.78-1.87 (m, 1H), 1.60-1.69 (m, 1H), 1.18-1.47 (m, 3H). MS: 536, 538 [M+H]+.

Racematul (Exemplul 34) a fost suplimentar purificat prin SFC chirală preparativă, obţinându-se, după liofilizare, Exemplul 35 (Izomer B, timp de retenţie 13.019 min, 9.09 mg, 12% randament din 8a) şi Exemplul 36 (Izomer A, timp de retenţie 10.712 min, 8.36 mg, 11% randament din 8a) ca un solid alb. Configuraţia absolută a carbonului benzilic în fiecare izomer nu a fost determinată.

Exemplul 35: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il](metoxi)metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B. MS: 536, 538 [M+H]+. Analiza chirală: ~97% ee, timp de retenţie 13.019 min pe Lux Cellulose-4 4.6 x 100 mm 3u coloană, eluţie cu 50% MeOH, 120 bar, 4 mL/min.

Exemplul 36: 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il](metoxi)metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A. MS: 536, 538 [M+H]+. Analiza chirală: >99% ee, timp de retenţie 10.712 min pe Lux Cellulose-4 4.6 x 100 mm 3u coloană, eluţie cu 50% MeOH, 120 bar, 4 mL/min.

Exemplul 81: 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(R)-metoxi(oxetan-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona.

Exemplul 82: 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(S)-metoxi(oxetan-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona.

La temperatura camerei la o soluţie agitată de oxetan-3-ilmetanol (2.20 g, 24.97 mmol) în diclorometan (110 mL) s-a adăugat dicromat de piridiniu solid (5.87 g, 15.6 mmol) în cinci porţii. Amestecul negru rezultat s-a adăugat la temperatura camerei timp de 16 ore. Suspensia puternic maronie a fost apoi filtrată printr-un filtru de silicagel şi rămăşiţa de pe filtru clătită cu diclorometan (8 x 120 mL). Filtraţii de diclorometan combinaţi au fost parţial concentrat sub presiune redusă la temperatura camerei (27~30 °C) obţinându-se oxetan-3-carbaldehidă (81a, 3 g, ~26% randament) ca o soluţie incoloră, 18.7 wt% soluţie în diclorometan prin RMN. Soluţia a fost uscată pe magneziu sulfate, filtrată şi s-a utilzat imediat în etapa următoare. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 9.95 (d, J=2.4 Hz, 1H), 4.87 (m, 4H), 3.81 (m, 1H).

O soluţie de 2-((2-(benziloxi)-4-metoxi-6-metilpiridin-3-il)metil)-7-bromo-5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Cpd SS, 500 mg, 0.932 mmol) în TFH anhidru (7 mL) a fost răcită la -65 °C, apoi complex de clorură de izopropilmagneziu clorură de litiu (1.3 M soluţie în THF, 2.15 mL, 2.80 mmol) s-a adăugat cu picătura timp de 3 minute. Soluţia brună rezultată s-a adăugat la -65 °C timp de 10 minute, apoi încâlzit la -10 °C timp de 30 minute. La aceasta s-a adăugat oxetan-3-carbaldehidă (81a, ~2.2 g, ~4.8 mmol, ~18.7 wt% soluţie în diclorometan) cu picătura timp de 2 minute, cauzând schimbarea culorii în galben deschis. Agitarea a fost continuată la -5 °C timp de 30 minute. Reacţia a fost diluată cu acid acetic glacial (0.5 mL) şi diluată cu etil acetat (10 mL), apoi spălată cu. NaHCO3 sat. ap / NaCl sat. ap. (1/1 v/v, 3 x 15 mL). Stratul organic a fost uscat pe sulfat de sodiu, filtrat, concentrat, şi purificat prin cromatografie pe silicagel (eluţie cu 1/1 eter de petrol/etil acetat) pentru a obţine 2-((2-(benziloxi)-4-metoxi-6-metilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(hidroxi(oxetan-3-il)metil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (81b, 300 mg, 59% randament, racemat) ca un solid alb. MS: 543 [M+H]+.

Iodometan (133 mg, 0.938 mmol) s-a adăugat cu picătura la o suspensie răcită (-5 °C) de 2-((2-(benziloxi)-4-metoxi-6-metilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(hidroxi(oxetan-3-il)metil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (81b, 300 mg, 0.552 mmol) în TFH anhidru (5 mL). Terţ-butoxid de potasiu (1.0M soluţie în THF, 0.938 mL, 0.938 mmol) s-a adăugat, şi amestecul s-a adăugat la 0 °C timp de 1 oră. Amestecul de reacţie a fost porţionat între NaCl sat. ap. (15 mL) şi MTBE (3 x 15 mL). Extractele organice combinate au fost spălate cu NaCl sat. ap. (30 mL), uscate pe sulfat de sodiu, concentrate, şi purificate prin cromatografie pe silicagel (eluţie cu 1/1 eter de petrol/etil acetat) pentru a obţine 2-((2-(benziloxi)-4-metoxi-6-metilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(metoxi(oxetan-3-il)metil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona racemică (81c, 280 mg, 91% randament) ca o gumă galbenă. MS: 557 [M+H]+.

La temperatura camerei un amestec de 2-((2-(benziloxi)-4-metoxi-6-metilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(metoxi(oxetan-3-il)metil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă (81c, 100 mg, 0.179 mmol) şi PtO2 (21 mg, 0.092 mmol) în etil acetat (4 mL) s-au adăugat sub o butelie de hidrogen pentru 3 zile. Soluţia a fost filtrată printr-un filtru de CELITE. Balonul şi tamponul filtrului au fost clătite cu etil acetat (2 x 10 mL). Filtratele combinate au fost concentrare şi purificate prin cromatografie preparativă în strat subţire (silicagel, eluţie cu 10/1 diclorometan/metanol) pentru a obţine 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(oxetan-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (81d, 45 mg, 54% randament) racemic ca un solid alb.

Multiple loturi de 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(oxetan-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă racemică (81d, 140 mg total) au fost combinate pentru separare chirală prin SFC preparativă [Coloană: (R,R)Whelk O1 250mm*30mm,5um; fază mobilă: bază-ETOH; lungimea de undă: 220 nm; prelucrare: liofilizare] pentru a obţine Exemplul 81 (50.34 mg, 36% randament) ca un solid gri, şi, după purificare suplimentară prin TLC preparativă (silicagel, eluţie cu 10/1 diclorometan/metanol), Exemplul 82 (22.83 g, 16% randament) ca un solid brun. Difracţia cu raze X pe moleculă mică asupra structurii monocristaline pentru Exemplul 82 a arătat că acesta are stereochimie absolută (S), astfel încât stereochimia absolută (R) a fost atribuită enantiomerului acestuia, Exemplul 81.

Exemplul 81: 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(R)-metoxi(oxetan-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.34 (s.l., 1H), 7.49 (s, 1H), 5.93 (s, 1H), 5.05 (d, J=6.0 Hz, 1H), 4.78-4.61 (m, 6H), 3.88 (s, 3H), 3.50-3.48 (m, 2H), 3.38-3.37 (m, 1H), 3.31 (s, 3H), 2.94 (t, J=6.2 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H). MS: 489 [M+Na]+. Analiza chirală: 100% ee; timp de retenţie 9.85 min; coloană (R,R)Whelk O1, 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă 50% etanol (0.05% DEA) în CO2; lungimea de undă 220 nm.

Exemplul 82: 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(S)-metoxi(oxetan-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.38 (s.l., 1H), 7.49 (s, 1H), 5.92 (s, 1H), 5.05 (d, J=6.0 Hz, 1H), 4.78-4.64 (m, 6H), 3.87 (s, 3H), 3.50-3.47 (m, 2H), 3.38-3.37 (m, 1H), 3.31 (s, 3H), 2.93 (t, J=6.2 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H). MS: 467 [M+H]+. Analiza chirală: 98% ee; timp de retenţie 8.65 min; coloană: (R,R)Whelk O1, 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă 50% etanol (0.05% DEA) în CO2; lungimea de undă 220 nm.

Exemplul 83: 8-cloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(R)-metoxi[(3R)-tetrahidrofuran-3-il]metil}-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona

Exemplul 84: 8-cloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(R*)-metoxi[(3S*)-tetrahidrofuran-3-il]metil}-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona.

Exemplul 85: 8-cloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(S*)-metoxi[(3R*)-tetrahidrofuran-3-il]metil}-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona

Exemplul 86: 8-cloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(S)-metoxi[(3S)-tetrahidrofuran-3-il]metil}-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona.

Soluţie apoasă de tetrahidrofuran-3-carboxaldehidă (~4.0 mL de 50 wt% în apă, 4.0 g) a fost extrasă cu diclorometan (2 x 2.5 mL). Straturile organice combinate au fost răcite (15 °C) şi pentoxid de fosfor încet s-a adăugat. Soluţie întunecată rezultată a fost filtrată pentru a înlătura solidele şi filtratul galben (~16 wt% tetrahidrofuran-3-carboxaldehida în diclorometan prin RMN) a fost utilizat cu promptitudine precum este descris mai jos.

Complexul clorură de izopropilmagneziu clorura de litiu (1.3 M soluţie în THF, 3.73 mL, 4.85 mmol) s-a adăugat cu picătura la o suspensie răcită (-70 °C) de 2-((2-(benziloxi)-4-metoxi-6-metilpiridin-3-il)metil)-8-cloro-7-iodo-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă (Cpd UU, 910 mg, 1.617 mmol) în TFH anhidru (10 mL) timp de 5 minute. Amestecul brun rezultat s-a adăugat la -70 °C timp de 30 minute, apoi soluţia de tetrahidrofuran-3-carboxaldehida preparată mai sus (3.98 g de ~16 wt% în diclorometan, ~636 mg tetrahidrofuran-3-carboxaldehida, ~16.35 mmol) s-a adăugat cu picătura timp de 5 minute. Agitarea a fost continuată la -70 °C timp de 30 minute. Reacţia a fost diluată cu acid acetic glacial (0.5 mL) şi diluată cu etil acetat (80 mL), apoi spălată cu NaHCO3 sat. ap./ NaCl sat. ap. (1/1 v/v, 3 x 35 mL). Stratul organic a fost uscat pe sulfat de sodiu, filtrat, concentrat, şi purificat prin cromatografie pe silicagel (eluţie cu 1/1 eter de petrol/etil acetat) pentru a obţine 2-((2-(benziloxi)-4-metoxi-6-metilpiridin-3-il)metil)-8-cloro-7-(hidroxi(tetrahidrofuran-3-il)metil)-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (83a, 450 mg, 52% randament, amestec de 4 diastereomeri) ca un solid alb. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.37-7.46 (m, 3H), 7.20-7.31 (m, 3H), 6.39 (s, 1H), 5.44 (s, 2H), 5.22-5.31 (m, 1H), 4.87 (s, 2H), 3.88-4.02 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.65-3.82 (m, 3H), 3.16 (t, J=5.99 Hz, 2H), 2.71-2.89 (m, 1H), 2.55 (t, J=6.17 Hz, 2H), 2.44 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 1.66-1.95 (m, 3H).

Iodometan (225 mg, 1.58 mmol) s-a adăugat cu picătura la o suspensie răcită (-5 °C) de 2-((2-(benziloxi)-4-metoxi-6-metilpiridin-3-il)metil)-8-cloro-7-(hidroxi(tetrahidrofuran-3-il)metil)-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă (83a, 500 mg, 0.931 mmol în THF (15 mL), urmat de terţ-butoxid de potasiu (1.0M soluţie în THF, 1.58 mL, 1.58 mmol). Amestecul s-a adăugat la 0 °C timp de 1 oră. Acid acetic glacial (0.5 mL) şi etil acetat (100 mL) s-au adăugat, şi soluţia spălată cu NaHCO3 sat. ap. (3 x 20 mL) şi soluţie de sare de bucătărie (30 mL). Stratul organic a fost uscat pe sulfat de sodiu, filtrat, concentrat, şi purificat prin cromatografie pe silicagel (eluţie cu 1/1 eter de petrol/etil acetat), pentru a obţine 2-((2-(benziloxi)-4-metoxi-6-metilpiridin-3-il)metil)-8-cloro-7-(metoxi(tetrahidrofuran-3-il)metil)-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona ca un amestec de 4 diastereomeri (400 mg, 70% randament).

Stereoizomerii au fost separaţi prin SFC preparativă chirală (coloană: AD, 250*30mm, 5um, fază mobilă: 30% IPA+NH3H2O 60mL/min, lungimea de undă: 220 nm, prelucrare: liofilizare) pentru a obţine 140 mg de pic 12 (amestec de pic 1 şi 2) şi 120 mg de pic 34 (amestec de picuri 3 şi 4) ca un solid alb.

Amestecul din picul 12 (140 mg) a fost reseparat prin SFC preparativă (coloană: AD, 250*30mm, 5um, fază mobilă: 25% MeOH+NH3H2O 60mL/min, lungimea de undă: 220 nm, prelucrare: liofilizare) pentru a obţine picul 1 enantio-îmbogăţit (60 mg, 81% puritate chirală, purificat suplimentar precum este descris mai jos) şi picul pur 2 (1610b, 60 mg, 12% randament, 96% puritate chirală, folosit fără purificare suplimentară).

Picul 34 amestec (120 mg) a fost reseparat prin SFC preparativă (Coloană: AD, 250*30mm, 5um, fază mobilă: 25% MeOH+NH3H2O 60mL/min, lungimea de undă: 220 nm, prelucrare: liofilizare) pentru a obţine picul pur 3 (1613b, 50 mg, 9.8% randament, 95% puritate chirală, folosit fără purificare suplimentară) şi materialul din picul enantio-îmbogăţit 4 (50 mg, 88% puritate chirală, purificat suplimentar precum este descris mai jos).

Materialul din picul enantio-îmbogăţit 1 (60 mg, 81% puritate chirală) a fost purificat suplimentar prin SFC preparativă (coloană: AD, 250*30mm, 5um, fază mobilă: 25% MeOH+NH3H2O 70mL/min, lungimea de undă: 220 nm, prelucrare: liofilizare) pentru a obţine picul 1 pur (83b, 45 mg, 8.7% randament, 98% puritate chirală).

Materialul din picul enantio-îmbogăţit 4 (50 mg, 88% puritate chirală) a fost purificat suplimentar prin SFC preparativă (coloană: AD, 250*30mm, 5um, mobile: 25% MeOH+NH3H2O 70mL/min, lungimea de undă: 220 nm, prelucrare: liofilizare) pentru a obţine picul pur 4 (1613b, 45 mg, 8.7% randament, 99% puritate chirală). Stereochimia absolută sau relativă a fiecărui izomer nu a fost determinată la această etapă.

O soluţie agitată de 2-((2-(benziloxi)-4-metoxi-6-metilpiridin-3-il)metil)-8-cloro-7-(metoxi(tetrahidrofuran-3-il)metil)-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona pic 1 (83b, 45 mg, 0.082 mmol) în diclorometan (2 mL) a fost tratată cu TFA (2 mL) la temperatura camerei. Amestecul a fost încălzit la 30 °C timp de 16 ore, apoi soluţia a fost diluată cu diclorometan (20 mL) şi concentrată până la uscat. Reziduul a fost purificat prin cromatografie pe silicagel (eluţie cu 10/1 diclorometan/metanol) pentru a obţine 8-cloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(R)-metoxi[(3R)-tetrahidrofuran-3-il]metil}-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Exemplul 83, 18.55 mg, 50% randament, 100% ee) ca un solid alb. Difracţia cu raze X pe monocristalul unei structuri din Exemplul 83 confirmă configuraţia ei absolută (R,R). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.36 (s.l., 1H), 7.29 (s, 1H), 5.91 (s, 1H), 4.85-4.75 (m, 3H), 3.89-3.83 (m, 6H), 3.71-3.69 (m, 1H), 3.47-3.44 (m, 2H), 3.16 (s, 3H), 2.76-2.73 (m, 2H), 2.58-2.54 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 1.73-1.70 (m, 2H). MS: 461 [M+H]+. Analiza chirală: 100% ee; timp de retenţie 34.91 min; coloană: Chiralpak IC 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 50% etanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.0mL/min; lungimea de undă: 220 nm.

Prin aceeaşi procedură, picul 2 stereoizomer (1610b, 60.0 mg, 0.109 mmol) a oferit 8-cloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(R*)-metoxi[(3S*)-tetrahidrofuran-3-il]metil}-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Exemplul 84, 30 mg, 60% randament, 97% ee) ca un solid alb. Stereochimia absolută a acestui izomer nu a fost determinată, dar spectrul 1HRMN demonstrează diferenţe clare faţă de cel al Exemplul 83, sugerând că Exemplul 84 este fie izomer R,S sau S,R. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.33 (s.l., 1H), 7.30 (s, 1H), 5.91 (s, 1H), 4.84-4.77 (m, 3H), 3.89-3.86 (m, 4H), 3.73-3.68 (m, 2H), 3.60-3.58 (m, 1H), 3.46-3.44 (m, 2H), 3.19 (s, 3H), 2.75-2.73 (m, 2H), 2.64-2.62 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 1.98-1.95 (m, 2H). MS: 461 [M+H]+. Analiza chirală: 97% ee, timp de retenţie 39.01 min; coloană: Chiralpak IC 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 50% etanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.0 mL/min; lungimea de undă: 220 nm.

Prin aceeaşi procedură, picul 3 stereoizomer (85b, 50.0 mg, 0.091 mmol) a oferit 8-cloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(S*)-metoxi[(3R*)-tetrahidrofuran-3-il]metil}-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Exemplul 85, 16.06 mg, 38% randament, 100% ee) ca un solid alb. Stereochimia absolută a acestui izomer nu a fost determinată, dar spectrul 1HRMN demonstrează diferenţe clare faţă de cel al Exemplului 83, şi este identic cu cel din Exemplul 84, sugerând că Exemplul 85 este fie S,R sau R,S izomer. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.30 (s.l., 1H), 7.30 (s, 1H), 5.91 (s, 1H), 4.84-4.77 (m, 3H), 3.89-3.86 (m, 4H), 3.74-3.66 (m, 2H), 3.59-3.58 (m, 1H), 3.46-3.44 (m, 2H), 3.19 (s, 3H), 2.75-2.73 (m, 2H), 2.65-2.63 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 1.98-1.95 (m, 2H). MS: 461 [M+H]+. Analiza chirală: 100% ee, timp de retenţie 29.05 min; coloană: Chiralpak IC 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă; 50% etanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.0mL/min; lungimea de undă: 220 nm.

Prin aceeaşi procedură, picul 4 stereoizomer (86b, 45.0 mg, 0.082 mmol) a oferit 8-cloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(S)-metoxi[(3S)-tetrahidrofuran-3-il]metil}-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Exemplul 86, 14.79 mg, 39% randament, 100% ee) ca un solid alb. Cu toate că acesta are un timp de retenţie diferit pe coloana chirală, spectrul 1H RMN al acestui compus este identic cu cel din Exemplul 83, care s-a demonstrate că are configuraţie R,R prin Difracţia cu raze X asupra structurii monocristal. Acest lucru sugerează că Exemplul 86 este stereoizomerul S,S. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.29 (s.l., 1H), 7.30 (s, 1H), 5.91 (s, 1H), 4.84-4.75 (m, 3H), 3.89-3.83 (m, 6H), 3.71-3.69 (m, 1H), 3.47-3.44 (m, 2H), 3.16 (s, 3H), 2.76-2.73 (m, 2H), 2.58-2.56 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.73-1.70 (m, 2H). MS: 461 [M+H]+. Analiza chirală: 100% ee, timp de retenţie 32.28 min; coloană: Chiralpak IC 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 50% etanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.0mL/min; lungimea de undă: 220 nm.

Metoda J

Exemplul 87: 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[1-(1-metilazetidin-3-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A.

Exemplul 88: 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[1-(1-metilazetidin-3-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B.

O soluţie de acid 1-boc-azetidin-3-carboxilic (5.00 g, 24.8 mmol, şi CDI (4.23 g, 26.1 mmol) în diclorometan (100 mL) s-a adăugat la temperatura camerei timp de 1 oră, apoi N,O-dimetilhidroxilamina clorohidrat (4.0 g, 29.8 mmol) s-a adăugat şi agitarea a continuat la temperatura camerei timp de 16 ore. Suspensia rezultată a fost spălată cu apă (3 x 30 mL), NaHCO3 sat. ap. (3 x 30 mL), şi soluţie de sare de bucătărie (3 x 30 mL). Stratul organic a fost uscat pe sulfat de sodiu, filtrat, şi concentrat pentru a obţine terţ-butil 3-(metoxi(metil)carbamoil)azetidin-1-carboxilat (87a, 5.1 g, 84% randament) ca un lichid incolor. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 4.14 (s.l., 2H), 4.05 (t, J=8.6 Hz, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.65 (m, 1H), 3.20 (s, 3H), 1.43 (s, 9H).

Bromură de metilmagneziu (3M soluţie în THF, 10.4 mL, 31.3 mmol) s-a adăugat cu picătura la o soluţie răcită de terţ-butil 3-(metoxi(metil)carbamoil)azetidin-1-carboxilat (87a, 5.1 g, 20.88 mmol) în TFH anhidru (100 mL). Agitarea a fost continuată la 0°C timp de o oră, apoi la temperatura camerei timp de 16 ore. Amestecul a fost răcit la 0 °C şi diluat cu NaHCO3 sat. ap. (35 mL), apoi extras cu etil acetat (3 x 40 mL). Extractele organice combinate au fost spălate cu soluţie de sare de bucătărie (3 x 40 mL), uscate pe sulfat de sodiu, filtrate, concentrate, şi purificate prin cromatografie pe silicagel (eluţie cu eter de petrol/etil acetat de la 10:1 la 3:1) pentru a obţine terţ-butil 3-acetilazetidin-1-carboxilat (87b, (3.20 g, 77% randament) ca ulei galben deschis. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 4.05 (d, J=7.6 Hz, 4H), 3.41 (quint, J=7.6 Hz, 1H), 2.18 (s, 3H), 1.43 (s, 9H).

O soluţie de 2-((2-(benziloxi)-4-metoxi-6-metilpiridin-3-il)metil)-7-bromo-5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă (Cpd SS, 1.20 g, 2.238 mmol) în TFH anhidru (15 mL) a fost răcit la -60 °C, apoi complex clorură de izopropilmagneziu clorură de litiu (1.3 M soluţie în THF, 5.16 mL, 6.71 mmol) s-a adăugat cu picătura cu seringa timp de 3 minute. Agitarea a fost continuată la -60 °C timp de 10 minute, apoi la 0 °C timp de 20 minute. La aceasta s-a adăugat terţ-butil 3-(metoxi(metil)carbamoil)azetidin-1-carboxilat (87a, 892 mg, 4.48 mmol) cu picătura, apoi amestecul s-a adăugat la 0 °C timp de 1 oră. Amestecul a fost diluat cu acid acetic glacial (1 mL) şi diluat cu etil acetat (100 mL). Faza organică a fost spălată cu NaHCO3/soluţie de sare de bucătărie (v/v=1/1,3 x 50 mL) şi soluţie de sare de bucătărie (50 mL), uscată pe sulfat de sodiu, şi filtrată. Filtratul a fost concentrat pentru a obţine produsul crud (2.0 g, ulei galben), care a fost purificat prin cromatografie pe silicagel (eluţie cu eter de petrol/etil acetat = 1:1) pentru a obţine terţ-butil 3-(1-(2-((2-(benziloxi)-4-metoxi-6-metilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)-1-hidroxietil)azetidin-1-carboxilat racemic (87c, 450 mg, 31% randament) ca un solid alb. MS: 656 [M+H]+.

Acid trifluorometansulfonic (0.54 mL, 6.15 mmol) s-a adăugat cu picătura la o soluţie răcită de terţ-butil 3-(1-(2-((2-(benziloxi)-4-metoxi-6-metilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)-1-hidroxietil)azetidin-1-carboxilat racemic (87c, 450 mg, 0.685 mmol) în diclorometan anhidru (10 mL). Amestecul s-a adăugat la 5-10 °C timp de 1 oră, apoi re-răcit la 0 °C şi mai mult acid trifluorometansulfonic (0.54 mL, 6.15 mmol) s-a adăugat. După agitare la 2-5 °C timp de 12 ore, bicarbonat de sodiu sat. ap. s-a adăugat pentru a aduce soluţia la pH ~8. Amestecul s-a concentrat pentru a înlătura diclorometan, şi rămăşiţa apoasă diluată cu THF (20 mL). Bicarbonat de sodiu solid (288 mg, 3.43 mmol) şi di-terţ-butil dicarbonat (448 mg, 2.06 mmol) s-au adăugat şi amestecul s-a adăugat la 2-5 °C timp de 16 ore, apoi lăsat să stea la 15 °C timp de 18 ore. Soluţia a fost extrasă cu etil acetat (2 x 50 mL). Straturile organice combinate au fost spălate cu soluţie de sare de bucătărie (2 x 20 mL), uscate pe sulfat de sodiu, şi filtrate. Filtratul a fost concentrat pentru a obţine produsul crud (1 g, solid galben), care a fost purificat mai întâi prin cromatografie pe silicagel (eluţie cu 10% metanol în diclorometan) şi apoi re-purificat prin SFC preparativă (coloană: AD 250mm*30mm, 5um; fază mobilă: 35% bază-ETOH; lungimea de undă: 220 nm; prelucrare: concentrare) pentru a obţine terţ-butil 3-(1-(5,8-dicloro-2-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)vinil)azetidin-1-carboxilat (87d, 256 mg, 68.1%) ca un solid galben. MS: 548 [M+H]+.

O suspensie de terţ-butil 3-(1-(5,8-dicloro-2-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)vinil)azetidin-1-carboxilat (87d, 236 mg, 0.43 mmol) şi oxid de platină (80 mg, 0.35 mmol) în etil acetat (15 mL) şi metanol (5 mL) s-a adăugat la temperatura camerei sub o butelie de hidrogen timp de 3 ore. După filtrare pentru a înlătura solidele, Filtratul a fost concentrat şi purificat prin TLC preparativă (silicagel, diclorometan/metanol = 15:1 pentru a obţine terţ-butil 3-(1-(5,8-dicloro-2-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)etil)azetidin-1-carboxilat racemic (87e, 180 mg, 76% randament) ca un solid alb. MS: 549 [M+H]+.

O soluţie terţ-butil 3-(1-(5,8-dicloro-2-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)etil)azetidin-1-carboxilat racemic obţinut (87e, 180 mg, 0.327 mmol) în diclorometan (10 mL) s-a adăugat cu HCl (4.0 M soluţie în metanol, 5 mL, 20 mmol) la 14 °C timp de 30 minute. Soluţia a fost concentrată până la uscat, şi reziduul dizolvat în metanol (5 mL). NH4OH concentrat s-a adăugat pentru a aduce pH-ul la ~8, şi amestecul a fost concentrat dinnou la uscare, formând 7-(1-(azetidin-3-il)etil)-5,8-dicloro-2-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona racemică crudă (87f, 180 mg, 100%) ca un solid alb, care a fost folosită fără purificare suplimentară.

Acid acetic glacial (0.1 mL) s-a adăugat la o soluţie 15 °C de 7-(1-(azetidin-3-il)etil)-5,8-dicloro-2-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona racemică crudă (87f, 180 mg, 0.327 mmol) şi formaldehida (37 wt% în apă, 79.5 mg, 0.980 mmol) în metanol (5 mL), şi amestecul s-a adăugat la 15 °C pentru 45 minute. Cianoborohudrura de sodiu (41 mg, 0.653 mmol) s-a adăugat şi agitarea a continuat la temperatura camerei timp de 12 ore. Amestecul a fost diluat cu soluţie saturată de NH4Cl (2 mL) şi agitat la 15 °C timp de 30 minute, apoi concentrat pentru a înlătura solventul. Reziduul a fost dizolvat în diclorometan/metanol (v/v = 10:1, 50 mL) şi filtrat. Filtratul a fost concentrat şi purificat prin HPLC preparativă [coloană: Phenomenex Gemini C18 250*50 10u; fază mobilă: de la 4% la 34% acetonitril(cu 0.225% acid formic) în apă; lungimea de undă: 220 nm; prelucrare: liofilizare] pentru a obţine sarea formată a (±)-5,8-dicloro-2-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-7-(1-(1-metilazetidin-3-il)etil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onei (110 mg, 66%) ca un solid alb. Enantiomerii din această sare racemică au fost separaţi prin SFC preparativă [coloană: AD(250mm*30mm,5um); fază mobilă: 30% base-ETOH; lungimea de undă: 220 nm; prelucrare: liofilizare], şi fiecare enantiomer re-purificat separat prin HPLC preparativă [coloană: Phenomenex Gemini C18 250*50 10u; fază mobilă: de la 28% MeCN (0.05% amoniac) în apă la 48% MeCN (0.05% amoniac) în apă; lungimea de undă: 220 nm; prelucrare: liofilizare], obţinându-se izomer A (Exemplul 87, 15.67 mg, 16% randament) şi izomer B (Exemplul 88, 13.35 mg, 13% randament) ca un solid alb. Stereochimia absolută nu a fost determinată pentru fiecare dintre izomeri.

Exemplul 87: 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[1-(1-metilazetidin-3-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.44 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.73 (s, 2H), 3.91 (m, 3H), 3.77-3.68 (m, 2H), 3.41-3.37 (m, 3H), 3.16 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 2.95-2.92 (m, 2H), 2.90-2.83 (m, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.34 (s, 3H), 1.16 (d, J = 6.4 Hz, 3H). MS: 464 [M+H]+. Analiza chirală: 99% ee; timp de retenţie 5.511 min pe Chiralpak AD-3 150×4.6mm I.D., 3um coloană [fază mobilă: A: CO2 B:etanol (0.05% DEA); gradient: de la 5% la 40% din B în 5.0min şi ţinut 40% pentru 2.5 min, apoi 5% din B timp de 2.5 min; lungimea de undă: 220 nm].

Exemplul 88: 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[1-(1-metilazetidin-3-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.43 (s, 1H), 6.26 (s, 1H), 4.73 (s, 2H), 3.91 (m, 3H), 3.77-3.68 (m, 2H), 3.41-3.37 (m, 3H), 3.12 (s.l., 1H), 2.95-2.92 (m, 2H), 2.90-2.83 (m, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 1.16 (d, J = 6.4 Hz, 3H). MS: 464 [M+H]+. Analiza chirală: 100% ee; timp de retenţie 5.997 min pe Chiralpak AD-3 150×4.6mm I.D., 3um coloană [fază mobilă: A: CO2 B:etanol (0.05% DEA); gradient: de la 5% la 40% din B în 5.0min şi ţinut 40% pentru 2.5 min, apoi 5% din B timp de 2.5 min; lungimea de undă: 220 nm].

Metoda K

Exemplul 89: (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[1-(morfolin-4-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona.

Exemplul 90: (+)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[1-(morfolin-4-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona.

Exemplul 91: (-)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[1-(morfolin-4-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona.

La o soluţie răcită (-40 °C) de 2-{[2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il]metil}-7-bromo-5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă (Cpd S, 5.00 g, 9.61 mmol) în TFH anhidru (50 mL) şi 1,4-dioxan (5 mL) s-a adăugat complex clorură de izopropilmagneziu clorura de litiu (1.3 M soluţie în THF, 22.2 mL, 28.8 mmol) cu seringa. După agitare la -40 °C timp de 30 minute, clorura de zinc (1.0 M soluţie în eter, 11.5 mL, 11.5 mmol) s-a adăugat. Agitarea a fost continuată la -40 °C timp de 30 minute, apoi tetrakis(trifenilfosfin)paladiu(0) (1.11 g, 0.961 mmol) şi acetil clorura (1.51 g, 19.2 mmol) s-au adăugat. Amestecul s-a adăugat şi lăsat să se încălzească la temperatura camerei timp de 18 ore. Reacţia a fost diluată cu NH4Cl (sat. ap. 5 mL), diluată cu etil acetat (30 mL), şi spălată cu NH4Cl sat. ap. (40 mL) şi soluţie de sare de bucătărie (40 mL). Stratul organic a fost uscat pe sulfat de sodiu, filtrat, concentrat, şi purificat prin cromatografie pe silicagel (eluţie cu 0-30% etil acetat în eter de petrol) pentru a obţine 7-acetil-2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă (89a, 4.00 g, 78% randament) ca un solid galben. 1H RMN (400MHz, CDCl3) δ 7.45 (d, J=6.8 Hz, 2H), 7.39 (s, 1H), 7.38 - 7.27 (m, 3H), 6.63 (s, 1H), 5.43 (s, 2H), 4.86 (s, 2H), 3.29 (t, J=6.3 Hz, 2H), 2.75 (t, J=6.3 Hz, 2H), 2.63 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 2.34 (s, 3H). MS: 483 [M+H]+.

Borohidrură de sodiu (47.0 mg, 1.24 mmol) s-a adăugat la temperatura camerei la soluţia de 7-acetil-2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă (89a, 200 mg, 0.414 mmol) în metanol (5 mL). După agitare la temperatura camerei timp de 30 minute, amestecul de reacţie s-a concentrat şi purificat prin cromatografie pe silicagel (eluţie cu 0-30% etil acetat în eter de petrol) pentru a obţine 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(1-hidroxietil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (89b, 190 mg, 95% randament) ca un solid alb.

O soluţie răcită (0 °C) de 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(1-hidroxietil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-onă (89b, 190 mg, 0.391 mmol) şi trietilamină (119 mg, 1.17 mmol) în diclorometan (5 mL) a fost tratată cu clorură de metansulfonil (67.3 mg, 0.587 mmol), apoi agitată la 0 °C timp de o oră. Amestecul de reacţie a fost diluat cu diclorometan (30 mL); spălat consecutiv cu NH4Cl sat. ap., NaHCO3 sat. ap., şi. NaCl sat. ap; uscat pe sulfat de sodiu, şi concentrat până la uscat, formând 1-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)etil metansulfonat racemic crud (89c, 225 mg, 100% randament) ca un solid alb, care a fost folosit imediat fără purificare suplimentară.

O suspensie de 1-(2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il)etil metansulfonat (89c, 100 mg, 0.177 mmol), morfolina (46.4 mg, 0.532 mmol), şi carbonat de potasiu (73.6 mg, 0.532 mmol) în acetonitril (5 mL) s-a adăugat la reflux (85 °C) timp de 2 ore. După răcire la temperatura camerei, suspensia a fost filtrată pentru a înlătura solidele. Filtratul a fost concentrat şi a fost purificat prin cromatografie pe silicagel (eluţie cu 0-30% etil acetat în eter de petrol) pentru a obţine 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(1-morfolinoetil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona racemică (89d, 90 mg, 91% randament, 80% pur prin LCMS) ca o gumă. MS: 576 [M+Na]+.

O soluţie de 2-((2-(benziloxi)-4,6-dimetilpiridin-3-il)metil)-5,8-dicloro-7-(1-morfolinoetil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona racemică (89d, 90 mg, 0.16 mmol) în diclorometan (5 mL) şi acid trifluoroacetic (2 mL) s-a adăugat la temperatura camerei timp de 19 ore. Soluţia a fost evaporată până la uscat, şi apoi reziduul a fost dizolvat în toluen (10 mL) şi bazificat până la pH 8-9 prin adăugarea a câteva picături de NH4OH conc. Soluţia a fost concentrată şi purificată prin HPLC preparativă pentru a obţine (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[1-(morfolin-4-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona (Exemplul 89, 29.49 mg, 39% randament) ca un solid alb. 1H RMN (400MHz, CDCl3) δ 7.74 (s, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.87 - 4.70 (m, 2H), 4.00 (q, J=6.3 Hz, 1H), 3.76 - 3.59 (m, 6H), 2.99 - 2.81 (m, 2H), 2.53 (s.l., 2H), 2.36 (m, 5H), 2.29 (s, 3H), 1.24 (d, J=6.5 Hz, 3H). MS: 464 [M+H]+.

Materialul racemic (Exemplul 89) a fost purificat suplimentar prin condiţii de separare SFC chirală pentru a oferi compuşii cu Exemplul 90 şi Exemplul 91.

Compuşii suplimentari conform invenţiei au fost preparaţi prin modificările metodelor exemplificate aici. Datele selectate despre compuşii preparaţi şi caracterizarea corespunzătoare sunt prezentate în Tabelul 1 de mai jos.

Tabel 1

Nr. Ex. Structură/Nume IUPAC Metoda LCMs [M+H]+ 1H RMN (ppm) Note de stereochimie 1 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1R)-2-hidroxi-1-[(3R)-tetrahidrofuran-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona A 465 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.63 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 3.94-3.90 (m, 1H), 3.81-3.80 (m, 3H), 3.59-3.57 (m, 2H), 3.51-3.49 (m, 2H), 3.17-3.10 (m, 1H), 2.98-2.95 (m, 2H), 2.71 (s.l., 1H), 2.30 (s, 3H), 2.29-2.25 (m, 1H), 2.25 (s, 3H), 1.83-1.78 (m, 1H) R,R izomer; stereochimie determinată din datele difracţiei cu raze X pe monocristalul compusului enantiomeric (Ex. 4); Puritate chirală: 95.66%; timp de retenţie: 6.867 min; coloană: Chiralpak AD-3 150×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.5mL/min 2 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1R*)-2-hidroxi-1-[(3S*)-tetrahidrofuran-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona A 465 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.62 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 4.13-4.11 (m, 1H), 3.78-3.75 (m, 1H), 3.69-3.68 (m, 2H), 3.61-3.59 (m, 3H), 3.51-3.50 (m, 2H), 2.98-2.95 (m, 2H), 2.65 (s.l., 1H), 2.30 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.77-1.75 (m, 1H), 1.42-1.37 (m, 1H) Un singur enantiomer, fie R,S sau S,R dar stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 3; Puritate chirală: 98.70%; timp de retenţie: 7.309 min; coloană: Chiralpak AD-3 150×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.5mL/min 3 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1S*)-2-hidroxi-1-[(3R*)-tetrahidrofuran-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona A 465 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.62 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 4.12-4.11 (m, 1H), 3.80-3.78 (m, 1H), 3.69-3.67 (m, 3H), 3.67-3.62 (m, 2H), 3.61-3.50 (m, 2H), 2.98-2.95 (m, 2H), 2.65 (s.l., 1H), 2.29 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.77-1.74 (m, 1H), 1.42-1.37 (m, 1H) Un singur enantiomer, fie izomer S,R sau R,S dar stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 2 Puritate chirală: 96.48%; timp de retenţie: 8.021 min; coloană: Chiralpak AD-3 150×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.5mL/min 4 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1S)-2-hidroxi-1-[(3S)-tetrahidrofuran-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona A 465 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.64 (s, 1H), 6.13 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 3.95-3.90 (m, 1H), 3.83-3.81 (m, 3H), 3.60-3.55 (m, 2H), 3.55-3.52 (m, 2H), 3.32-3.19, (m, 1H), 2.99-2.96 (m, 2H), 2.75 (s.l., 1H), 2.32 (s, 3H), 2.31-2.29 (m, 1H), 2.27 (s, 3H), 1.84-1.79 (m, 1H) Cunoscut a fi S,S prin difracţia cu raze X pe monocristal; Enantiomer al Ex. 1; Puritate chirală: 99.18%; timp de retenţie: 8.429 min; coloană: Chiralpak AD-3 150×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.5mL/min 5 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{1-[(3R)-3-fluoropirolidin-1-il]-2-hidroxietil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona B 482 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.66 (s.l., 1H), 7.80 (d, J=3.67 Hz, 1H), 6.00 (s, 1H), 5.15 - 5.43 (m, 1H), 4.85 (s.l., 1H), 4.69 (s, 2H), 4.03 - 4.13 (m, 1H), 3.66 - 3.84 (m, 2H), 3.50 - 3.63 (m, 2H), 3.02 - 3.10 (m, 1H), 2.94 - 3.02 (m, 2H), 2.71 - 2.90 (m, 2H), 2.42 - 2.55 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.09 - 2.23 (m, 1H), 1.87 - 2.08 (m, 1H) Amestec de diastereomeri ce conţine (R)-3-fluoropirolidină Amestec separat în Ex. 6 şi Ex. 7 6 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1ξ)-1-[(3R)-3-fluoropirolidin-1-il]-2-hidroxietil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A B 482 HRMN nu s-a luat din cauza cantităţii limitate. Vezi Ex. 5 Un component al amestecului din Ex. Un singur diasteromer, ce conţine (R)-3-fluoropirolidină, alt centru chiral nedeterminat; >99% de (-), [α]D = -51.3° (c 0.01 MeOH) primul pic; RT 1.18 min Chiralcel OJ-3 4.6 x 100 mm 3u coloană; 10% MeOH/DEA @ 120 bar, 4 mL/min 7 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1ξ)-1-[(3R)-3-fluoropirolidin-1-il]-2-hidroxietil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B B 482 HRMN nu s-a luat din cauza cantităţii limitate. Vezi Ex. 5 Un component al amestecului din Ex; Un singur diasteromer ce conţine (R)-3-fluoropirolidină, alt centru chiral nedeterminat; ~88% de (+) [α]D = +62.1° (c 0.01 MeOH) al doilea pic; RT 1.42 min Chiralcel OJ-3 4.6 x 100 mm 3u coloană; 10% MeOH/DEA @ 120 bar, 4 mL/min; 8 (+)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{fluoro[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il]metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona C 524 RMN Enantiomerului, Ex. 9: 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 11.55 (s, 1 H), 7.58 (d, J=4.95 Hz, 1 H), 5.88 (s, 1 H), 5.72 - 5.84 (m, 1 H), 4.55 (q, J=13.75 Hz, 2 H), 4.46 (s.l., 1 H), 4.30 - 4.42 (m, 1 H), 4.05 - 4.13 (m, 1 H), 3.97 - 4.04 (m, 1 H), 3.69 (t, J=13.39 Hz, 1 H), 3.45 (t, J=5.78 Hz, 2 H), 2.80 - 2.98 (m, 3 H), 2.20 (d, J=18.71 Hz, 1 H), 2.11 (s, 3 H), 1.61 (s.l., 1 H), 1.46 (s.l., 1 H), 1.34 - 1.42 (m, 1 H), 1.23 (s, 5 H) >99% ee (+), [α]D = +9.9° (c 0.1 DMSO) Primul pic din coloană: Lux Cellulose-2 4.6 x 100 mm 3u coloană 60% MeOH @ 120 bar, 4 mL/min Pic 1 @ 8.13 min (prep: OJ-H, 21 x 250mm coloană, 32 mL MeOH: 8 mL CO2, 100 bar, 40 mL/min) 9 (-)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{fluoro[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il]metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona C 524 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6) δ ppm 11.55 (s, 1 H), 7.58 (d, J=4.95 Hz, 1 H), 5.88 (s, 1 H), 5.72 - 5.84 (m, 1 H), 4.55 (q, J=13.75 Hz, 2 H), 4.46 (s.l., 1 H), 4.30 - 4.42 (m, 1 H), 4.05 - 4.13 (m, 1 H), 3.97 - 4.04 (m, 1 H), 3.69 (t, J=13.39 Hz, 1 H), 3.45 (t, J=5.78 Hz, 2 H), 2.80 - 2.98 (m, 3 H), 2.20 (d, J=18.71 Hz, 1 H), 2.11 (s, 3 H), 1.61 (s.l., 1 H), 1.46 (s.l., 1 H), 1.34 - 1.42 (m, 1 H), 1.23 (s, 5 H) ~95% ee (-), [α]D = -6.5° (c 0.1 DMSO) Al doilea pic din coloană: Lux Cellulose-2 4.6 x 100 mm 3u coloană 60% MeOH @ 120 bar, 4 mL/min Pic 2 @ 10.29 min (prep: OJ-H, 21 x 250mm coloană, 32 mL MeOH: 8 mL CO2, 100 bar, 40 mL/min) 10 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(2-hidroxi-1-metoxietil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A D 425 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.23 (s.l., 1H), 7.53 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.92-4.89 (m, 1H), 4.78 (s, 2H), 3.80-3.71 (m, 1H), 3.68-3.62 (m, 2H), 3.53-3.51 (m, 1H), 3.33 (s, 3H), 2.94 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.29 (s, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 11; 100% ee; timp de retenţie 7.717 min; coloană: Chiralpak IC-3 150 x 4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 40% etanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.35mL/min 11 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(2-hidroxi-1-metoxietil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B D 425 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.15 (s.l., 1H), 7.53 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.92-4.89 (m, 1H), 4.78 (s, 2H), 3.80-3.71 (m, 1H), 3.68-3.63 (m, 2H), 3.55-3.51 (m, 1H), 3.34 (s, 3H), 2.94 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.29 (s, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 10; 100% ee;: timp de retenţie 11.063 min; coloană: Chiralpak IC-3 150×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 40% etanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.35mL/min 12 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1R)-2-hidroxi-1-[(2S)-tetrahidrofuran-2-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona E 465 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.58 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 4.10 - 4.21 (m, 1H), 3.86 - 3.99 (m, 3H), 3.75 - 3.84 (m, 1H), 3.64 - 3.72 (m, 1H), 3.46 - 3.55 (m, 2H), 2.91 - 3.01 (m, 2H), 2.29 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.73 - 1.97 (m, 3H), 1.44 - 1.58 (m, 1H) Un singur enantiomer: (R) la carbon benzilic şi (S) la THF 91% ee primul pic; RT 2.91 min Chiralpak AD-3 4.6 x 100 mm 3u coloană; 5-60% MeOH în 3 minute, 120 bar, 4 mL/min 13 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1R)-2-hidroxi-1-[(2R)-tetrahidrofuran-2-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona E 465 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.66 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.27 (dt, J=7.86, 6.16 Hz, 1H), 3.72 - 3.91 (m, 3H), 3.67 (t, J=6.79 Hz, 2H), 3.49 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.95 (t, J=6.17 Hz, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.01 - 2.13 (m, 1H), 1.68 - 1.92 (m, 2H), 1.49 - 1.62 (m, 1H) Un singur enantiomer (R,R); 93% ee al doilea pic; RT 3.21 min Chiralpak AD-3 4.6 x 100 mm 3u coloană; 5-60% MeOH în 3 minute, 120 bar, 4 mL/min 14 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(propan-2-il)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona F 393 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.35 (s, 1H), 5.90 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 3.63 (t, J=6.30 Hz, 2H), 3.5 - 3.6 (m, 1H), 2.90 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 1.24 (d, J=6.85 Hz, 6H) N/A 15 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(1-metoxipropil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A G 423 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.88 (s.l., 1H), 7.53 (s, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 4.69-4.66 (m, 1H), 3.65 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.24 (s, 3H), 2.93 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.76-1.72 (m, 1H), 1.65-1.60 (m, 1H), 0.96 (t, J = 7.0 Hz, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 16; 100% Puritate chirală; primul pic, RT 8.04 min; coloană: Chiralpak AD-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.5mL/min 16 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(1-metoxipropil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B G 423 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 10.88 (s.l., 1H), 7.53 (s, 1H), 5.93 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.69-4.66 (m, 1H), 3.67-3.63 (m, 2H), 3.24 (s, 3H), 2.93 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.78-1.73 (m, 1H), 1.65-1.58 (m, 1H), 0.96 (t, J = 7.2 Hz, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 15; 99.6194% Puritate chirală; al doilea pic, RT 8.34 min; coloană: Chiralpak AD-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.5mL/min 17 (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(1-hidroxipropan-2-il)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona A 409 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.54 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 5.93 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 3.79-3.71 (m, 3H), 3.64-3.61 (m, 2H), 2.91 (t, J = 6 Hz, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.43 (s, 1H), 1.27 (t, J = 6.4 Hz, 3H) Amestec racemic 18 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(2S)-1-hidroxipropan-2-il]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona A 409 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.54 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 5.93 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 3.79-3.71 (m, 3H), 3.64-3.61 (m, 2H), 2.91 (t, J = 6 Hz, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.43 (s, 1H), 1.27 (t, J = 6.4 Hz, 3H) Un singur izomer, cunoscut; (S) stereochimie determinată prin difracţia cu raze X pe monocristal; primul pic în următoarele condiţii SFC: Chiralpak AS-H 4.6 x 100 mm 5u coloană; 20% MeOH @ 120 bar CO2, 4 mL/min 19 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(2R)-1-hidroxipropan-2-il]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona A 409 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.54 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 5.93 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 3.79-3.71 (m, 3H), 3.64-3.61 (m, 2H), 2.91 (t, J = 6 Hz, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.43 (s, 1H), 1.27 (t, J = 6.4 Hz, 3H) Un singur izomer, cunoscut; (R) stereochimie determinată din datele difracţiei cu raze X pe monocristalul compusului enantiomeric (Ex. 18); al doilea pic în următoarele condiţii SFC: Chiralpak AS-H 4.6 x 100 mm 5u coloană; 20% MeOH @ 120 bar CO2, 4 mL/min 20 (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(1-hidroxibutan-2-il)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona A 423 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.49 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 3.94 (s, 2H), 3.71-3.66 (m, 2H), 3.52-3.50 (m, 3H), 2.95 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 2.29 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.90-1.82 (m, 1H), 1.65-1.55 (m, 1H), 0.85 (t, J= 7.6 Hz, 3H) Amestec racemic 21 (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{1-[(2-hidroxietil)(metil)amino]propan-2-il}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona A 466 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.63 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 4.75 (s, 2H), 3.97 (sxt, J=6.94 Hz, 1H), 3.79 (t, J=5.38 Hz, 2H), 3.52 (t, J=6.17 Hz, 2H), 3.33 - 3.40 (m, 1H), 3.00 - 3.19 (m, 3H), 2.92 - 3.00 (m, 2H), 2.72 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.33 (d, J=6.85 Hz, 3H) Amestec racemic 22 {5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il}acid acetic A 409 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.50 (s.l., 1H), 11.54 (s.l., 1H), 7.66 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.57 (s, 2H), 3.77 (s, 2H), 3.45 (t, J=5.50 Hz, 2H), 2.88 (t, J=5.07 Hz, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.12 (s, 3H) N/A 23 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il]metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona F 506 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.48 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.50 (d, J=13.57 Hz, 1H), 4.14-4.29 (m, 2H), 3.73 (d, J=13.45 Hz, 1H), 3.48-3.56 (m, 2H), 2.92-3.03 (m, 3H), 2.79 (d, J=7.09 Hz, 2H), 2.66 (t, J=12.53 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 1.93-2.06 (m, 1H), 1.70 (d, J=13.57 Hz, 2H), 1.21-1.34 (m, 2H) N/A 24 (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{1-[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona J 520 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.40 (s, 1H), 6.01 (s, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.27-4.49 (m, 1H), 4.00-4.18 (m, 2H), 3.49-3.73 (m, 1H), 3.41 (t, J=6.24 Hz, 2H), 3.23-3.30 (m, 1H), 2.75-2.95 (m, 3H), 2.41-2.63 (m, 1H), 2.19 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 1.80-1.89 (m, 1H), 1.67-1.79 (m, 1H), 1.28-1.36 (m, 1H), 0.97-1.22 (m, 5H) Amestec racemic 25 (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(1-hidroxipropil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona G 409 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 13.22 (s.l., 1H), 7.41 (s, 1H), 6.01 (s, 1H), 5.13 (dd, J=7.76, 3.36 Hz, 1H), 4.85 (d, J=13.94 Hz, 1H), 4.53 (d, J=13.94 Hz, 1H), 3.70 (dt, J=12.50, 4.94 Hz, 1H), 3.41 - 3.53 (m, 1H), 2.79 (t, J=5.99 Hz, 2H), 2.42 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 1.67 - 1.82 (m, 1H), 1.41 - 1.57 (m, 1H), 0.96 (t, J=7.34 Hz, 3H) Amestec racemic 26 (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(2S*,3R*)-3-hidroxibutan-2-il]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona A 423 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.52 (s, 1H), 6.13 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 3.91-3.84 (m, 1H), 3.53-3.48 (m, 3H), 2.97 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.31 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.29 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.14 (d, J = 6.0 Hz, 3H) Amestec racemic de izomeri (2R,3S) şi (2S,3R) enantiomeri separaţi sunt Ex. 47 şi Ex. 48 27 (+)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(1-hidroxipropil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona G 409 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 13.22 (s.l., 1H), 7.41 (s, 1H), 6.01 (s, 1H), 5.13 (dd, J=7.76, 3.36 Hz, 1H), 4.85 (d, J=13.94 Hz, 1H), 4.53 (d, J=13.94 Hz, 1H), 3.70 (dt, J=12.50, 4.94 Hz, 1H), 3.41 - 3.53 (m, 1H), 2.79 (t, J=5.99 Hz, 2H), 2.42 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 1.67 - 1.82 (m, 1H), 1.41 - 1.57 (m, 1H), 0.96 (t, J=7.34 Hz, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 28; [α]D = +48.8°(c 0.1 MeOH) >99% ee (+); RT 1.407 min; coloană: Chiralpak AS-3 4.6 x 100 mm 3u; 20% MeOH/DEA @ 120 bar CO2, 4 mL/min;

28 (-)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(1-hidroxipropil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona G 409 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 13.22 (s.l., 1H), 7.41 (s, 1H), 6.01 (s, 1H), 5.13 (dd, J=7.76, 3.36 Hz, 1H), 4.85 (d, J=13.94 Hz, 1H), 4.53 (d, J=13.94 Hz, 1H), 3.70 (dt, J=12.50, 4.94 Hz, 1H), 3.41 - 3.53 (m, 1H), 2.79 (t, J=5.99 Hz, 2H), 2.42 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 1.67 - 1.82 (m, 1H), 1.41 - 1.57 (m, 1H), 0.96 (t, J=7.34 Hz, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 27; [α]D = -47.5° (c 0.1 MeOH) ~99% ee (-); RT 1.893 min; coloană: Chiralpak AS-3 4.6 x 100 mm 3u ; 20% MeOH/DEA @ 120 bar CO2, 4 mL/min; 29 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(1-hidroxibutan-2-il)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A A 423 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.49 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 3.71-3.66 (m, 2H), 3.52-3.50 (m, 3H), 2.95 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 2.29 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.90-1.82 (m, 1H), 1.65-1.55 (m, 1H), 0.85 (t, J= 7.6 Hz, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 30; primul pic în următoarele condiţii SFC: Chiralpak AD-3 4.6 x 100 mm 3u coloană; 30% MeOH @ 120 bar CO2, 4 mL/min 30 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(1-hidroxibutan-2-il)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B A 423 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.49 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 3.71-3.66 (m, 2H), 3.52-3.50 (m, 3H), 2.95 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 2.29 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.90-1.82 (m, 1H), 1.65-1.55 (m, 1H), 0.85 (t, J= 7.6 Hz, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 29; al doilea pic în următoarele condiţii SFC: Chiralpak AD-3 4.6 x 100 mm 3u coloană; 30% MeOH @ 120 bar CO2, 4 mL/min 31 (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[2-hidroxi-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona A 479 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 11.65 (bs, 1H), 7.43 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.04-3.87 (m, 4H), 3.68-3.40 (m, 3H), 3.31-3.30 (m, 2H), 2.92 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 2.37(s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.05-1.82 (m, 2H), 1.32-1.28 (m, 4H) Amestec racemic 32 (±)-2-{5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il}propanitril G 404 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.55 (s.l., 1H), 7.77 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.61-4.68 (m, 1H), 4.58 (s, 2H), 3.42-3.50 (m, 2H), 2.87-2.95 (m, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.56-1.63 (m, 3H) Amestec racemic 33 (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(4-hidroxibutan-2-il)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona A 423 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.53 (s, 1H), 5.92 (s, 1H), 4.57 (s, 2H), 3.48-3.47 (m, 1H), 3.41 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.34 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.85 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 1.78-1.68 (m, 2H), 1.15 (d, J = 6.8 Hz, 3H) Amestec racemic 34 (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il](metoxi)metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 536 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.44 (s, 1H), 6.01 (s, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.56 (d, J=5.62 Hz, 1H), 4.35-4.45 (m, 1H), 4.02-4.17 (m, 2H), 3.57-3.68 (m, 1H), 3.43 (t, J=6.24 Hz, 2H), 3.10 (s, 3H), 2.86-2.92 (m, 2H), 2.75-2.85 (m, 1H), 2.40-2.54 (m, 1H), 2.20 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 1.78-1.87 (m, 1H), 1.60-1.69 (m, 1H), 1.18-1.47 (m, 3H) Amestec racemic 35 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il](metoxi)metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I 536 RMN racematului, Ex. 34: 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.44 (s, 1H), 6.01 (s, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.56 (d, J=5.62 Hz, 1H), 4.35-4.45 (m, 1H), 4.02-4.17 (m, 2H), 3.57-3.68 (m, 1H), 3.43 (t, J=6.24 Hz, 2H), 3.10 (s, 3H), 2.86-2.92 (m, 2H), 2.75-2.85 (m, 1H), 2.40-2.54 (m, 1H), 2.20 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 1.78-1.87 (m, 1H), 1.60-1.69 (m, 1H), 1.18-1.47 (m, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 36; ~97% ee; timp de retenţie 13.019 min; Lux Cellulose-4 4.6 x 100 mm 3u coloană; 50% MeOH @ 120 bar CO2, 4 mL/min 36 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il](metoxi)metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I 536 RMN racematului, Ex. 34: 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.44 (s, 1H), 6.01 (s, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.56 (d, J=5.62 Hz, 1H), 4.35-4.45 (m, 1H), 4.02-4.17 (m, 2H), 3.57-3.68 (m, 1H), 3.43 (t, J=6.24 Hz, 2H), 3.10 (s, 3H), 2.86-2.92 (m, 2H), 2.75-2.85 (m, 1H), 2.40-2.54 (m, 1H), 2.20 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 1.78-1.87 (m, 1H), 1.60-1.69 (m, 1H), 1.18-1.47 (m, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 35; >99% ee; timp de retenţie 10.712 min; Lux Cellulose-4 4.6 x 100 mm 3u coloană; 50% MeOH @ 120 bar CO2, 4 mL/min 37 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[2-hidroxi-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A A 479 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 11.65 (bs, 1H), 7.43 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.04-3.87 (m, 4H), 3.68-3.40 (m, 3H), 3.31-3.30 (m, 2H), 2.92 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 2.37 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.05-1.82 (m, 2H), 1.32-1.28 (m, 4H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 38; primul pic în următoarele condiţii SFC: Chiralpak AD-3 4.6 x 100 mm 3u coloană; 30% MeOH @ 120 bar CO2, 4 mL/min 38 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[2-hidroxi-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B A 479 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 11.65 (bs, 1H), 7.43 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.04-3.87 (m, 4H), 3.68-3.40 (m, 3H), 3.31-3.30 (m, 2H), 2.92 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 2.37 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.05-1.82 (m, 2H), 1.32-1.28 (m, 4H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 37; al doilea pic în următoarele condiţii SFC: Chiralpak AD-3 4.6 x 100 mm 3u coloană; 30% MeOH @ 120 bar CO2, 4 mL/min 39 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(4-hidroxibutan-2-il)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A A 423 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.53 (s, 1H), 5.92 (s, 1H), 4.57 (s, 2H), 3.48-3.47 (m, 1H), 3.41 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.34 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.85 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 1.78-1.68 (m, 2H), 1.15 (d, J = 6.8 Hz, 3H) Un singur enantiomer, stereochimie absolută necunoscută; primul pic în următoarele condiţii SFC: Lux Cellulose-4 4.6 x 100 mm 3u coloană; 50% MeOH @ 120 bar, 4 mL/min 40 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(4-hidroxibutan-2-il)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B A 423 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.53 (s, 1H), 5.92 (s, 1H), 4.57 (s, 2H), 3.48-3.47 (m, 1H), 3.41 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.34 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.85 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 1.78-1.68 (m, 2H), 1.15 (d, J = 6.8 Hz, 3H) Un singur enantiomer, stereochimie absolută necunoscută; al doilea pic în următoarele condiţii SFC: Lux Cellulose-4 4.6 x 100 mm 3u coloană; 50% MeOH @ 120 bar, 4 mL/min 41 (±)-5,8-dicloro-7-[(2R*,3ξ,4R*)-2,4-dihidroxipentan-3-il]-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona G 453 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.02 (s.l., 1H), 7.78 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.74 (s, 2H), 4.58 (dq, J=3.06, 6.48 Hz, 1H), 4.24 (qd, J=6.21, 7.79 Hz, 1H), 3.68 (t, J=6.11 Hz, 2H), 3.54 (dd, J=2.93, 8.07 Hz, 1H), 2.97 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.52 (s, 3H), 2.40 (s, 3H), 1.18 (d, J=6.36 Hz, 3H), 1.05 (d, J=6.36 Hz, 3H) Amestec racemic de 2,4-anti dioli, stereochimie pe poziţia-3 necunoscută. 42 5,8-dicloro-7-[(2R*,3ξ,4S*)-2,4-dihidroxipentan-3-il]-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona G 453 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.54 (s.l., 1H), 7.74 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.57 (s, 2H), 4.54 (s.l., 2H), 4.07 (quin, J=5.81 Hz, 2H), 3.44 (t, J=6.11 Hz, 2H), 3.24 (t, J=5.87 Hz, 1H), 2.86 (t, J=5.99 Hz, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.02 (d, J=6.11 Hz, 6H) Un singur achiral/mezo 2,4-sin diol, stereochimie pe poziţia-3 necunoscută 43 (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[2-hidroxi-1-(1,2-oxazol-3-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona A 462 1H RMN (700 MHz, DMSO-d6) δ 8.84 (d, J=1.51 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 6.65 (d, J=1.51 Hz, 1H), 5.88 (s, 1H), 5.14 (s.l., 1H), 4.88 (t, J=6.99 Hz, 1H), 4.57 (s, 2H), 3.93-4.00 (m, 2H), 3.43 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.86 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.15 (s, 3H), 2.12 (s, 3H) Amestec racemic 44 (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(1-metoxietil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona G 409 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.53 (s.l., 1H), 7.52 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.78 (q, J=6.24 Hz, 1H), 4.57 (s, 2H), 3.45 (t, J=6.24 Hz, 2H), 3.18 (s, 3H), 2.89 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.32 (d, J=6.36 Hz, 3H) Amestec racemic 45 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1S)-2-hidroxi-1-[(2R)-tetrahidrofuran-2-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona E 465 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.58 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 4.09 - 4.22 (m, 1H), 3.86 - 4.00 (m, 3H), 3.75 - 3.84 (m, 1H), 3.62 - 3.72 (m, 1H), 3.45 - 3.55 (m, 2H), 2.95 (t, J=6.17 Hz, 2H), 2.29 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.72 - 1.98 (m, 3H), 1.44 - 1.58 (m, 1H) Un singur enantiomer, S la benzil, R la THF 91% ee primul pic; RT 2.91 min Chiralpak AD-3 4.6 x 100 mm 3u coloană, 5-60% MeOH în 3 minute, 120 bar, 4 mL/min 46 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1S)-2-hidroxi-1-[(2S)-tetrahidrofuran-2-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona E 465 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.66 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 4.23 - 4.32 (m, 1H), 3.73 - 3.91 (m, 3H), 3.67 (t, J=6.79 Hz, 2H), 3.50 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.95 (t, J=6.17 Hz, 2H), 2.29 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.01 - 2.11 (m, 1H), 1.80 - 1.92 (m, 1H), 1.69 - 1.80 (m, 1H), 1.49 - 1.62 (m, 1H) Un singur enantiomer, S,S 92% ee al doilea pic; RT 3.21 min Chiralpak AD-3 4.6 x 100 mm 3u coloană, 5-60% MeOH în 3 minute, 120 bar, 4 mL/min 47 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(2S*,3R*)-3-hidroxibutan-2-il]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A A 423 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.52 (s, 1H), 6.13 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 3.89-3.86 (m, 1H), 3.54-3.48 (m, 3H), 2.97 (t, J= 6.2 Hz, 2H), 2.31 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.29 (d, J= 7.2 Hz, 3H), 1.14 (d, J= 6.4 Hz, 3H) Un singur enantiomer; stereochimie relativă cunoscută; stereochimie absolută necunoscută; 99.08% ee; primul pic, RT 9.67 min Coloană: Chiralpak AD-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% izopropanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.5mL/min 48 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(2R*,3S*)-3-hidroxibutan-2-il]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B A 423 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.52 (s, 1H), 6.13 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 3.91-3.84 (m, 1H), 3.53-3.48 (m, 3H), 2.97 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 2.31 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.29 (d, J= 7.2 Hz, 3H), 1.14 (d, J= 6.0 Hz, 3H) Un singur enantiomer; stereochimie relativă cunoscută; stereochimie absolută necunoscută; 96.73% ee; al doilea pic, RT 10.21 min Coloană: Chiralpak AD-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% izopropanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.5mL/min 49 (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(1-metoxi-2-oxopropil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona D 437 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.51 (s, 1H), 5.93 (s, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 3.75-3.60 (m, 2H), 3.39 (s, 3H), 3.00-2.90 (m, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.19 (s, 3H), 1.26 (s, 1H) Amestec racemic 50 (-)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 479 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.54 (s.l., 1H), 7.45 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.56 (s, 3H), 3.74-3.89 (m, 2H), 3.46 (t, J=6.11 Hz, 2H), 3.14-3.24 (m, 2H), 3.13 (s, 3H), 2.89 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.76-1.90 (m, 1H), 1.32-1.56 (m, 3H), 1.17-1.27 (m, 1H) [α]D = -56.4° (c 0.1, MeOH) ~96% ee (-); timp de retenţie 3.17 min; Lux Cellulose-4 4.6 x 100 mm 3u coloană; fază mobilă: 50% MeOH @ 120 bar, 4 mL/min 51 (+)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 479 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.54 (s.l., 1H), 7.45 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.56 (s, 3H), 3.75-3.89 (m, 2H), 3.46 (t, J=6.11 Hz, 2H), 3.14-3.23 (m, 2H), 3.13 (s, 3H), 2.89 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.76-1.89 (m, 1H), 1.32-1.57 (m, 3H), 1.16-1.26 (m, 1H) [α]D = +80.9° (c 0.1, MeOH) ~99% ee (+); timp de retenţie 4.15 min; Lux Cellulose-4 4.6 x 100 mm 3u coloană; fază mobilă 50% MeOH @ 120 bar CO2, 4 mL/min 52 (-)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(4-hidroxitetrahidro-2H-piran-4-il)(metoxi)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 495 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.54 (s.l., 1H), 7.62 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.56 (s, 2H), 3.61-3.69 (m, 1H), 3.43-3.59 (m, 5H), 3.12 (s, 3H), 2.86-2.92 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.57-1.75 (m, 3H), 0.92 (d, J=12.72 Hz, 1H) [α]D = -51.3° (c 0.1, MeOH) >99% ee (-); timp de retenţie 2.51 min; Lux Cellulose-4 4.6 x 100 mm 3u coloană; fază mobilă: 50% MeOH @ 120 bar CO2; 4 mL/min 53 (+)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(4-hidroxitetrahidro-2H-piran-4-il)(metoxi)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 495 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.54 (s.l., 1H), 7.62 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.62 (s, 1H), 4.56 (s, 2H), 3.62-3.68 (m, 1H), 3.43-3.59 (m, 5H), 3.12 (s, 3H), 2.85-2.93 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.57-1.74 (m, 3H), 0.92 (d, J=13.45 Hz, 1H) [α]D = +73.8° (c 0.1, MeOH) ~99% ee (+); timp de retenţie 3.85 min; Lux Cellulose-4 4.6 x 100 mm 3u coloană; fază mobilă: 50% MeOH @ 120 bar CO2, 4 mL/min 54 (3S)-3-{5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il}-3-[(3S)-tetrahidrofuran-3-il]propanitril A 474 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.80 - 13.19 (m, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.01 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 4.09 (t, J=7.76 Hz, 1H), 3.82 - 3.90 (m, 1H), 3.73 - 3.81 (m, 2H), 3.64 - 3.73 (m, 2H), 3.57 - 3.64 (m, 1H), 2.87 - 3.03 (m, 2H), 2.73 - 2.87 (m, 1H), 2.59 - 2.73 (m, 2H), 2.38 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 1.84 - 1.97 (m, 1H), 1.34 - 1.47 (m, 1H) un singur enantiomer din reagenţi chirali; stereochimie absolută S,S 55 5,8-dicloro-2-{[4-(difluorometoxi)-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il]metil}-7-[2-hidroxi-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B A 531 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.59 (s, 1H), 7.21-6.85 (m, 1H), 6.21 (s, 1H), 4.71 (s, 2H), 3.98-3.96 (m, 1H), 3.85-3.81 (m, 3H), 3.52-3.49(m, 5H), 2.98(t, J=6.2 Hz, 2H), 2.31 (s, 3H), 1.92-1.89 (m, 2H), 1.46-1.43 (m, 1H), 1.29-1.23 (m, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 56: 98.46% ee; timp de retenţie: 3.767 min; coloană: Chiralpak AS-H 150*4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 3 mL/min

56 5,8-dicloro-2-{[4-(difluorometoxi)-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il]metil}-7-[2-hidroxi-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A A 531 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.59 (s, 1H), 7.21-6.85 (m, 1H), 6.21 (s, 1H), 4.71 (s, 2H), 3.96-3.94 (m, 1H), 3.85-3.81 (m, 3H), 3.52-3.43(m, 5H), 2.98(t, J=6.2 Hz, 2H), 2.31 (s, 3H), 1.92-1.89 (m, 2H), 1.46-1.42 (m, 1H), 1.29-1.23 (m, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 55: 99.02% ee; timp de retenţie: 3.585 min; coloană: Chiralpak AS-H 150*4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 3 mL/min 57 (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[2-hidroxi-1-(pirolidin-1-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona B 464 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.50 (s.l., 1H), 7.68 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.65 (s.l., 1H), 4.58 (s, 2H), 3.90 (t, J=4.52 Hz, 1H), 3.56 - 3.76 (m, 2H), 3.40 - 3.49 (m, 2H), 2.87 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.33 - 2.44 (m, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 1.67 (s.l., 4H), doi Hs acoperit de semnalul DMSO. Amestec racemic 58 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{1-[(3S)-3-fluoropirolidin-1-il]-2-hidroxietil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona B 482 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.51 (s.l., 1H), 7.68 (d, J=3.55 Hz, 1H), 5.89 (s, 1H), 5.03 - 5.31 (m, 1H), 4.75 (s.l., 1H), 4.58 (s, 2H), 3.92 - 4.01 (m, 1H), 3.54 - 3.73 (m, 2H), 3.38 - 3.52 (m, 2H), 2.91 - 2.99 (m, 1H), 2.84 - 2.91 (m, 2H), 2.59 - 2.78 (m, 2H), 2.29 - 2.43 (m, 1H), 2.17 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 1.99 - 2.12 (m, 1H), 1.76 - 1.97 (m, 1H) Amestec de diastereomeri ce conţine (S)-3-fluoropirolidină Amestec separat pentru a obţine Ex. 62 şi Ex. 63 59 (±)-5,8-dicloro-7-[1-(3,3-difluoropirolidin-1-il)-2-hidroxietil]-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona B 500 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.51 (s.l., 1H), 7.66 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.83 (s.l., 1H), 4.57 (s, 2H), 4.03 (t, J=4.52 Hz, 1H), 3.54 - 3.70 (m, 2H), 3.38 - 3.50 (m, 2H), 3.04 (dt, J=14.37, 11.10 Hz, 1H), 2.79 - 2.94 (m, 3H), 2.62 - 2.78 (m, 2H), 2.18 - 2.30 (m, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.12 (s, 3H) Amestec racemic 60 (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[2-hidroxi-1-(morfolin-4-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona B 480 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.54 (s.l., 1H), 7.72 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.71 (s.l., 1H), 4.58 (s, 2H), 3.95 (t, J=4.65 Hz, 1H), 3.68 - 3.78 (m, 1H), 3.51 - 3.67 (m, 5H), 3.45 (t, J=6.54 Hz, 2H), 2.87 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.54 (s.l., 2H), 2.27 - 2.39 (m, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.13 (s, 3H) Amestec racemic 61 3-{4-[{5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il}(metoxi)metil]piperidin-1-il}-3-oxopropanitril - Izomer B I 545 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 11.40 (s.l., 1H) 7.46 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.82-4.73 (m, 2H), 4.64-4.57 (m, 2H), 3.68 (t, J=5.4 Hz, 3H), 3.47 (s, 2H), 3.20 (s, 3H), 3.09-3.02 (m, 1H), 2.95 (t, J=6 Hz, 2H), 2.52-2.48 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.89-1.87 (m, 1H), 1.75-1.68 (m, 2H), 1.61-1.51 (m, 2H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 71; 96.42% ee; timp de retenţie: 9.135 min; coloană: Chiralpak AS-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.35 mL/min 62 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1ξ)-1-[(3S)-3-fluoropirolidin-1-il]-2-hidroxietil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A B 482 HRMN nu s-a luat din cauza cantităţii limitate. Vezi Ex. 58 Un component al amestecului din Ex. 58. Un singur diasteromer ce conţine (S)-3-fluoropirolidină, alt centru chiral nedeterminat; [α]D = -58.9° (c 0.01 MeOH) ~98% de (-); primul pic; RT 1.233 min; Chiralcel OJ-3 4.6 x 100 mm 3u coloană; 10% MeOH/DEA @ 120 bar, 4 mL/min 63 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1ξ)-1-[(3S)-3-fluoropirolidin-1-il]-2-hidroxietil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B B 482 HRMN nu s-a luat din cauza cantităţii limitate. Vezi Ex. 58 Un component al amestecului din Ex. 58. Un singur diasteromer ce conţine (S)-3-fluoropirolidină, alt centru chiral nedeterminat; ~90% de (+); al doilea pic; RT 1.489 min; Chiralcel OJ-3 4.6 x 100 mm 3u coloană; 10% MeOH/DEA @ 120 bar, 4 mL/min 64 (±)-8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1S*)-2-hidroxi-1-[(3S*)-tetrahidrofuran-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona A 431 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.50 (d, J=7.83 Hz, 1H), 7.20 (d, J=7.83 Hz, 1H), 6.13 (s, 1H), 4.79 (s, 2H), 3.95 (dt, J=3.67, 8.31 Hz, 1H), 3.76-3.87 (m, 3H), 3.58 (t, J=7.95 Hz, 2H), 3.43-3.52 (m, 2H), 3.18 (t, J=8.44 Hz, 1H), 2.87 (dd, J=5.14, 7.09 Hz, 2H), 2.75 (dd, J=7.83, 15.89 Hz, 1H), 2.33-2.25 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 1.83 (qd, J=8.60, 12.10 Hz, 1H) Amestec racemic de R,R şi S,S izomeri (Alocat prin analogie cu Ex. 4, care a avut structură cristalină care a demonstrat stereochimie S,S) 65 (±)-8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1R*)-2-hidroxi-1-[(3S*)-tetrahidrofuran-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona A 431 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.48 (d, J=8.07 Hz, 1H), 7.19 (d, J=7.83 Hz, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 4.13 (t, J=7.95 Hz, 1H), 3.78 (dt, J=4.16, 8.31 Hz, 1H), 3.55-3.73 (m, 5H), 3.47 (t, J=5.26 Hz, 2H), 2.86 (dd, J=4.40, 6.85 Hz, 2H), 2.60-2.74 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.68-1.80 (m, 1H), 1.40 (qd, J=8.56, 12.23 Hz, 1H) Amestec racemic de izomeri R,S şi S,R 66 (-)-5,8-dicloro-7-[1-(3,3-difluoropirolidin-1-il)-2-hidroxietil]-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona B 500 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.51 (s.l., 1H), 7.66 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.83 (s.l., 1H), 4.57 (s, 2H), 4.03 (t, J=4.52 Hz, 1H), 3.54 - 3.70 (m, 2H), 3.38 - 3.50 (m, 2H), 3.04 (dt, J=14.37, 11.10 Hz, 1H), 2.79 - 2.94 (m, 3H), 2.62 - 2.78 (m, 2H), 2.18 - 2.30 (m, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.12 (s, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 67; [α]D = -65.35° (c 0.01 MeOH) >99% ee (-); primul pic; RT 2.120 min; Chiralpak IC-3 4.6 x 100 mm 3u coloană; 40% MeOH @ 120 bar, 4 mL/min 67 (+)-5,8-dicloro-7-[1-(3,3-difluoropirolidin-1-il)-2-hidroxietil]-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona B 500 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.51 (s.l., 1H), 7.66 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.83 (s.l., 1H), 4.57 (s, 2H), 4.03 (t, J=4.52 Hz, 1H), 3.54 - 3.70 (m, 2H), 3.38 - 3.50 (m, 2H), 3.04 (dt, J=14.37, 11.10 Hz, 1H), 2.79 - 2.94 (m, 3H), 2.62 - 2.78 (m, 2H), 2.18 - 2.30 (m, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.12 (s, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 66; [α]D = +92.77° (c 0.01 MeOH) ~99% ee (+); al doilea pic; RT 2.866 min; Chiralpak IC-3 4.6 x 100 mm 3u coloană; 40% MeOH @ 120 bar, 4 mL/min 68 (-)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[2-hidroxi-1-(morfolin-4-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona B 480 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.54 (s.l., 1H), 7.72 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.71 (s.l., 1H), 4.58 (s, 2H), 3.95 (t, J=4.65 Hz, 1H), 3.68 - 3.78 (m, 1H), 3.51 - 3.67 (m, 5H), 3.45 (t, J=6.54 Hz, 2H), 2.87 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.54 (s.l., 2H), 2.27 - 2.39 (m, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.13 (s, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 69; [α]D = -52.63° (c 0.01 MeOH) >99% ee (-) ; primul pic; RT 3.039 min; Chiralpak AD-3 4.6 x 100 mm 3u coloană; 20% MeOH/DEA @ 120 bar, 4 mL/min 69 (+)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[2-hidroxi-1-(morfolin-4-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona B 480 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.54 (s.l., 1H), 7.72 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.71 (s.l., 1H), 4.58 (s, 2H), 3.95 (t, J=4.65 Hz, 1H), 3.68 - 3.78 (m, 1H), 3.51 - 3.67 (m, 5H), 3.45 (t, J=6.54 Hz, 2H), 2.87 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.54 (s.l., 2H), 2.27 - 2.39 (m, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.13 (s, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 68; [α]D = +75.09° (c 0.01 MeOH) ~97.6% ee (+); al doilea pic; RT 4.327 min; Chiralpak AD-3 4.6 x 100 mm 3u coloană; 20% MeOH/DEA @ 120 bar, 4 mL/min; 70 (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il][(2H3)metiloxi]metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 539 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.54 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 4.66 (d, J=5.62 Hz, 1H), 4.43-4.56 (m, 1H), 4.11-4.28 (m, 2H), 3.66-3.80 (m, 1H), 3.53 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.99 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.84-2.96 (m, 1H), 2.50-2.64 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.86-2.01 (m, 1H), 1.74 (dd, J=2.20, 13.20 Hz, 1H), 1.28-1.58 (m, 3H) Amestec racemic 71 3-{4-[{5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il}(metoxi)metil]piperidin-1-il}-3-oxopropanitril - Izomer A I 545 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 11.61 (s.l., 1H) 7.46 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.82-4.73 (m, 2H), 4.64-4.57 (m, 2H), 3.68 (t, J=5.4 Hz, 3H), 3.47 (s, 2H), 3.20 (s, 3H), 3.09-3.02 (m, 1H), 2.95 (t, J=6 Hz, 2H), 2.52-2.49 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.89-1.87 (m, 1H), 1.75-1.68 (m, 2H), 1.62-1.51 (m, 2H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 61; 97.43% ee; timp de retenţie: 8.742 min; coloană: Chiralpak AS-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.35 mL/min 72 4-[{5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il}(metoxi)metil]piperidin-1-carbaldehida - Izomer A I 506 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.52 (s.l., 1H), 7.99 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 5.96 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.63 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.42 (d, J=11.6 Hz, 1H), 3.68 (t, J=6 Hz, 2H), 3.61 (t, J=13.2 Hz, 1H), 3.20 (s, 3H), 2.97-2.94 (m, 3H), 2.49-2.47 (m, 1H), 2.38 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.89-1.87 (m, 1H), 1.36-1.26 (m, 4H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 73; 94.43% ee; timp de retenţie: 8.623 min; coloană: Chiralpak AS-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.35 mL/min. 73 4-[{5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il}(metoxi)metil]piperidin-1-carbaldehida - Izomer B I 506 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.29 (s.l., 1H), 7.99 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.63 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.42 (d, J=12.0 Hz, 1H), 3.68 (t, J=6 Hz, 2H), 3.61 (t, J=12.8 Hz, 1H), 3.20 (s, 3H), 2.97-2.94 (m, 3H), 2.49-2.47 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.89-1.87 (m, 1H), 1.36-1.26 (m, 4H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex. 72; 92.36% ee; timp de retenţie: 9.05 min; coloană: Chiralpak AS-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.35 mL/min 74 7-[1-(azetidin-3-ilidenă)etil]-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona H 432 N/A N/A 75 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{1-[1-(hidroxiacetil)azetidin-3-ilidenă]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona H 490 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.54 (s.l., 1H), 7.51 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.81-4.99 (m, 2H), 4.51-4.60 (m, 3H), 4.48 (s.l., 1H), 4.19 (s.l., 1H), 3.83-4.01 (m, 2H), 3.46 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.88 (t, J=5.87 Hz, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.85 (s.l., 3H) N/A 76 7-[1-(1-acetilazetidin-3-ilidenă)etil]-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona H 474 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.46 (s.l., 1H), 7.44 (s, 0.56H), 7.43 (s, 0.44H), 5.81 (s, 1H), 4.72 (s.l., 0.88H), 4.49 (s, 2H), 4.40 (s.l., 1.12H), 4.36 (s.l., 1.12H), 4.05 (s.l., 0.88H), 3.39 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.81 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.10 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.78 (s.l., 3H), 1.76 (s, 1.32H), 1.68 (s, 1.68H) Rotamers (~4:5 ratio). N/A 77 8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-5-metil-7-{1-[1-(metilsulfonil)azetidin-3-ilidenă]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona H 490 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.72 (s.l., 1H), 6.98 (s, 1H), 5.93 (s, 1H), 4.79 (s, 2H), 4.65 (s.l., 2H), 4.29 (s.l., 2H), 3.62 (t, J=6.15 Hz, 2H), 2.89 (s, 3H), 2.73 (t, J=6.15 Hz, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.23-2.30 (m, 3H), 2.21 (s, 3H), 1.87 (s, 3H) N/A 78 8-cloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-5-metil-7-{1-[1-(metilsulfonil)azetidin-3-ilidenă]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona H [M+Na]+528 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.17 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 4.74 (s, 2H), 4.68 (s.l., 2H), 4.24-4.33 (m, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.38 (t, J=6.27 Hz, 2H), 2.99 (s, 3H), 2.80 (t, J=6.27 Hz, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.91 (t, J=1.51 Hz, 3H) N/A 79 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{fluoro[1-(hidroxiacetil)azetidin-3-ilidenă]metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona H 494 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.58 (s.l., 1H), 7.84 (d, J=5.6 Hz, 1H), 5.89 (s, 1H), 5.15-5.00 (m, 1H), 5.00-4.95 (m, 1H), 4.80-4.75 (m, 1H), 4.65-4.60 (m, 1H), 4.57 (s, 2H), 4.50-4.45 (m, 1H), 4.00-3.95 (m, 2H), 3.47 (t, J=6.0 Hz, 2H), 2.93 (t, J=4.8 Hz, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.12 (s, 3H). N/A 80 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[1-(piperidin-4-ilidenă)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona H 460 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.36 (s, 1H), 6.18 (s, 1H), 4.78 - 4.83 (m, 2H), 3.60 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.98 - 3.12 (m, 4H), 2.91 (t, J=5.14 Hz, 2H), 2.58 -2.69 (m, 1H), 2.47 - 2.58 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 2.05 (d, J=7.58 Hz, 2H), 1.97 - 2.01 (m, 3H) N/A 81 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(R)-metoxi(oxetan-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I [M+Na]+489 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.34 (s.l., 1H), 7.49 (s, 1H), 5.93 (s, 1H), 5.05 (d, J=6.0 Hz, 1H), 4.61-4.78 (m, 6H), 3.88 (s, 3H), 3.48-3.50 (m, 2H), 3.37-3.38 (m, 1H), 3.31 (s, 3H), 2.94 (t, J=6.2 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H). izomer R; stereochimie determinată din datele difracţiei cu raze X pe monocristalul compusului enantiomeric Ex.82; 100% ee; timp de retenţie 9.85 min; Coloană: (R,R)Whelk O1, 250×4.6mm I.D., 5um; Fază mobilă: 50% etanol (0.05% DEA) în CO2; lungimea de undă 220 nm 82 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(S)-metoxi(oxetan-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 467 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.38 (s.l., 1H), 7.49 (s, 1H), 5.92 (s, 1H), 5.05 (d, J=6.0 Hz, 1H), 4.64-4.78 (m, 6H), 3.87 (s, 3H), 3.47-3.50 (m, 2H), 3.37-3.38 (m, 1H), 3.31 (s, 3H), 2.93 (t, J=6.2 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H). Cunoscut a fi izomer S prin difracţia cu raze X pe monocristal; Enantiomer al Ex.81; 98% ee; timp de retenţie 8.65 min; coloană: (R,R)Whelk O1, 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 50% etanol (0.05% DEA) în CO2; lungimea de undă 220 nm 83 8-cloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(R)-metoxi[(3R)-tetrahidrofuran-3-il]metil}-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 461 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.36 (s.l., 1H), 7.29 (s, 1H), 5.91 (s, 1H), 4.75-4.85 (m, 3H), 3.83-3.89 (m, 6H), 3.69-3.71 (m, 1H), 3.44-3.47 (m, 2H), 3.16 (s, 3H), 2.73-2.76 (m, 2H), 2.54-2.58 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 1.70-1.73 (m, 2H). Cunoscut a fi izomer R,R prin difracţia cu raze X pe monocristal; Enantiomer al Ex.86; Diastereomer al Ex.84 şi Ex.85; 100% ee; timp de retenţie 34.91 min; coloană: Chiralpak IC 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 50% etanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.0mL/min

84 8-cloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(R*)-metoxi[(3S*)-tetrahidrofuran-3-il]metil}-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 461 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.33 (s.l., 1H), 7.30 (s, 1H), 5.91 (s, 1H), 4.77-4.84 (m, 3H), 3.86-3.89 (m, 4H), 3.68-3.73 (m, 2H), 3.58-3.60 (m, 1H), 3.44-3.46 (m, 2H), 3.19 (s, 3H), 2.73-2.75 (m, 2H), 2.62-2.64 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 1.95-1.98 (m, 2H). Un singur enantiomer, fie R,S sau S,R, dar stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.85; Diastereomer al Ex.83 şi Ex.86; 97% ee; timp de retenţie 39.01 min; coloană: Chiralpak IC 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 50% etanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.0mL/min 85 8-cloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(S*)-metoxi[(3R*)-tetrahidrofuran-3-il]metil}-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 461 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.30 (s.l., 1H), 7.30 (s, 1H), 5.91 (s, 1H), 4.77-4.84(m, 3H), 3.86-3.89 (m, 4H), 3.66-3.74 (m, 2H), 3.58-3.59 (m, 1H), 3.44-3.46 (m, 2H), 3.19 (s, 3H), 2.73-2.75 (m, 2H), 2.63-2.65 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 1.95-1.98 (m, 2H). Un singur enantiomer, fie R,S sau S,R, dar stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.84; Diastereomer al Ex.83 şi Ex.86; 100% ee; timp de retenţie 29.05 min; coloană: Chiralpak IC 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 50% etanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.0mL/min 86 8-cloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(S)-metoxi[(3S)-tetrahidrofuran-3-il]metil}-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 461 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.29 (s.l., 1H), 7.30 (s, 1H), 5.91 (s, 1H), 4.75-4.84 (m, 3H), 3.83-3.89 (m, 6H), 3.69-3.71 (m, 1H), 3.44-3.47 (m, 2H), 3.16 (s, 3H), 2.73-2.76 (m, 2H), 2.56-2.58 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.70-1.73 (m, 2H). izomer S,S; stereochimie determinată prin Difracţie cu raze X pe monocristal a compusului enantiomeric Ex.83; Diastereomer al Ex.84 şi Ex.85; 100% ee; timp de retenţie 32.28 min; coloană: Chiralpak IC 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 50% etanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.0mL/min 87 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[1-(1-metilazetidin-3-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A J 464 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.44 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.73 (s, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.67-3.78 (m, 2H), 3.36-3.42 (m, 3H), 3.16 (t, J=7.40 Hz, 1H), 2.90-2.96 (m, 2H), 2.82-2.90 (m, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 1.16 (d, J=6.78 Hz, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.88; 99% ee; timp de retenţie 5.511 min; Coloană: Chiralpak AD-3 150x4.6 mm I.D., 3 um; fază mobilă; etanol (0.05% DEA) în CO2 88 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[1-(1-metilazetidin-3-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B J 464 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.43 (s, 1H), 6.26 (s, 1H), 4.73 (s, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.64-3.75 (m, 2H), 3.34-3.42 (m, 3H), 3.12 (s.l., 1H), 2.93 (t, J=6.02 Hz, 2H), 2.83 (s.l., 2H), 2.35-2.40 (m, 3H), 2.33 (s, 3H), 1.16 (d, J=6.78 Hz, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.87; 100% ee; timp de retenţie 55.997 min; Coloană: Chiralpak AD-3 150x4.6 mm I.D., 3 um; fază mobilă; etanol (0.05% DEA) în CO2 89 (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[1-(morfolin-4-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona K 464 1H RMN (400MHz, CDCl3) δ 7.74 (s, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.87 - 4.70 (m, 2H), 4.00 (q, J=6.3 Hz, 1H), 3.76 - 3.59 (m, 6H), 2.99 - 2.81 (m, 2H), 2.53 (s.l., 2H), 2.36 (m, 5H), 2.29 (s, 3H), 1.24 (d, J=6.5 Hz, 3H) amestec racemic 90 (+)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[1-(morfolin-4-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona K (+) izomer al Ex.89 91 (-)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[1-(morfolin-4-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona K (-) izomer al Ex.89 92 5,8-dicloro-2-{[4-(difluorometoxi)-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il]metil}-7-[2-hidroxi-1-(tetrahidrofuran-3-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A A 517 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.31 (br.s., 1H), 7.42 (s, 1H), 6.72 (t, J=72 Hz, 1H), 6.09 (s, 1H), 4.70 (s, 2H), 3.82-3.96 (m, 4H), 3.61-3.65 (m, 4H), 3.20 (t, J=8.4 Hz, 2H), 2.97 (t, J=6.2 Hz, 2H), 2.70-2.72 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.21-2.23 (m, 1H), 1.75-1.81 (m, 1H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.93; Diastereomer al Ex.94 şi Ex.95; 100% ee; timp de retenţie 5.37 min; coloană: Chiralcel OJ-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: metanol (0.05% DEA) în CO2 from 5% la 40%; debit; 2.5 mL/min 93 5,8-dicloro-2-{[4-(difluorometoxi)-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il]metil}-7-[2-hidroxi-1-(tetrahidrofuran-3-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B A 517 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.25 (br.s., 1H), 7.42 (s, 1H), 6.72 (t, J=72 Hz, 1H), 6.09 (s, 1H), 4.70 (s, 2H), 3.82-3.89 (m, 4H), 3.61-3.66 (m, 4H), 3.20 (t, J=8.4 Hz, 2H), 2.98 (t, J=6.2 Hz, 2H), 2.70-2.72 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.21-2.23 (m, 1H), 1.76-1.81 (m, 1H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.92; Diastereomer al Ex.94 şi Ex.95; 100% ee; timp de retenţie 5.54 min; coloană: Chiralcel OJ-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: metanol (0.05% DEA) în CO2 from 5% la 40%; debit; 2.5 mL/min 94 5,8-dicloro-2-{[4-(difluorometoxi)-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il]metil}-7-[2-hidroxi-1-(tetrahidrofuran-3-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer C A 517 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.12 (br.s., 1H), 7.45 (s, 1H), 6.73 (t, J=72 Hz, 1H), 6.10 (s, 1H), 4.71 (t, J=13.3 Hz, 2H), 4.07-4.10 (m, 1H), 3.82-3.70 (m, 4H), 3.60-3.65 (m, 4H), 2.99 (t, J=6.2 Hz, 2H), 2.63-2.65 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 1.78-1.8 (m, 1H), 1.40-1.45 (m, 1H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.95; Diastereomer al Ex.92 şi Ex.93; 100% ee; timp de retenţie 5.80 min; coloană: Chiralcel OJ-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: metanol (0.05% DEA) în CO2 from 5% la 40%; debit; 2.5 mL/min 95 5,8-dicloro-2-{[4-(difluorometoxi)-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il]metil}-7-[2-hidroxi-1-(tetrahidrofuran-3-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer D A 517 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.36 (br.s., 1H), 7.45 (s, 1H), 6.72 (t, J=73 Hz, 1H), 6.09 (s, 1H), 4.71 (q, J=13.9 Hz, 2H), 4.06-4.08 (m, 1H), 3.70-3.83 (m, 4H), 3.59-3.63 (m, 4H), 2.98(t, J=5.4 Hz, 2H), 2.63-2.65 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 1.78-1.8 (m, 1H), 1.39-1.45 (m, 1H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.94; Diastereomer al Ex.92 şi Ex.93; 100% ee; timp de retenţie 5.98 min; coloană: Chiralcel OJ-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: metanol (0.05% DEA) în CO2 de la 5% la 40%; debit; 2.5 mL/min 96 (+)-8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1S*)-2-hidroxi-1-[(3S*)-tetrahidrofuran-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona A 431 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.48 (d, J=7.34 Hz, 1H), 7.18 (d, J=7.83 Hz, 1H), 6.10 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 3.89-3.98 (m, 1H), 3.74-3.86 (m, 3H), 3.57 (t, J=7.70 Hz, 2H), 3.42-3.51 (m, 2H), 3.16 (t, J=8.31 Hz, 1H), 2.82-2.89 (m, 2H), 2.64-2.80 (m, 1H), 2.32-2.23 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 1.74-1.89 (m, 1H) [α]D = +51.7° (c 0.2 MeOH); (+) izomer al Ex. 64 racemat; fie R,R sau S,S izomer; stereochimie absolută nedeterminată; Enantiomer al Ex.97 97 (-)-8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1R*)-2-hidroxi-1-[(3R*)-tetrahidrofuran-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona A 431 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.48 (d, J=7.58 Hz, 1H), 7.18 (d, J=7.83 Hz, 1H), 6.10 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 3.93 (dt, J=3.79, 8.13 Hz, 1H), 3.74-3.86 (m, 3H), 3.57 (t, J=7.83 Hz, 2H), 3.43-3.51 (m, 2H), 3.16 (t, J=8.44 Hz, 1H), 2.85 (t, J=5.75 Hz, 2H), 2.65-2.80 (m, 1H), 2.32-2.23 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 1.75-1.89 (m, 1H) [α]D = -27.4° (c 0.1 MeOH); (-) izomer al Ex. 64 racemat; fie R,R sau S,S izomer; stereochimie absolută nedeterminată; Enantiomer al Ex.96 98 (+)-8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1R*)-2-hidroxi-1-[(3S*)-tetrahidrofuran-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona A 431 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.48 (d, J=7.83 Hz, 1H), 7.19 (d, J=7.82 Hz, 1H), 6.10 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 4.13 (t, J=7.83 Hz, 1H), 3.78 (dt, J=4.16, 8.31 Hz, 1H), 3.55-3.73 (m, 5H), 3.43-3.50 (m, 2H), 2.83-2.89 (m, 2H), 2.61-2.74 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 1.69-1.79 (m, 1H), 1.34-1.45 (m, 1H) [α]D = +20.5° (c 0.1 MeOH); (+) izomer al Ex. 65 racemat; fie R,S sau S,R izomer; stereochimie absolută nedeterminată; Enantiomer al Ex.99 99 (-)-8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{(1S*)-2-hidroxi-1-[(3R*)-tetrahidrofuran-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona A 431 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.48 (d, J=7.83 Hz, 1H), 7.19 (d, J=8.07 Hz, 1H), 6.10 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 4.13 (t, J=7.83 Hz, 1H), 3.78 (dt, J=4.16, 8.31 Hz, 1H), 3.56-3.74 (m, 5H), 3.42-3.52 (m, 2H), 2.82-2.89 (m, 2H), 2.59-2.75 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 1.68-1.79 (m, 1H), 1.40 (qd, J=8.57, 12.20 Hz, 1H) [α]D = -33.1° (c 0.1 MeOH); (-) izomer al Ex. 65 racemat; fie R,S sau S,R izomer; stereochimie absolută nedeterminată; Enantiomer al Ex.98 100 (+)-8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[2-hidroxi-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil]-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona A 459 1H RMN (700 MHz, DMSO-d6) δ 7.27 (s.l., 1H), 5.89 (s, 1H), 4.50 - 4.61 (m, 2H), 3.84 (d, J=8.88 Hz, 1H), 3.21 - 3.74 (m, 7H), 3.15 (td, J=10.76, 3.59 Hz, 1H), 2.67 (t, J=5.81 Hz, 2H), 2.19 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.82 - 1.91 (m, 1H), 1.78 (d, J=12.64 Hz, 1H), 1.20 - 1.31 (m, 1H), 1.05 - 1.15 (m, 2H) [α]D = +10.8° (c 0.1 MeOH); 99% ee; stereochimie absolută nedeterminată; Enantiomer al Ex.101 101 (-)-8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[2-hidroxi-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil]-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona A 459 1H RMN (700 MHz, DMSO-d6) δ 7.27 (s.l., 1H), 5.89 (s, 1H), 4.50 - 4.63 (m, 2H), 3.84 (d, J=11.10 Hz, 1H), 3.20 - 3.75 (m, 7H), 3.15 (td, J=10.89, 3.67 Hz, 1H), 2.67 (t, J=5.89 Hz, 2H), 2.19 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.82 - 1.91 (m, 1H), 1.78 (d, J=12.98 Hz, 1H), 1.20 - 1.30 (m, 1H), 1.06 - 1.15 (m, 2H) [α]D = -9.7° (c 0.1 MeOH); >99% ee; stereochimie absolută nedeterminată; Enantiomer al Ex.100 102 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(2-hidroxi-1-metoxipropil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona D 439 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.52 (s.l., 1H), 7.54 (s, 1H), 5.96 (s, 1H), 4.88 (s.l., 1H), 4.77 (s, 2H), 4.08-4.11 (m, 1H), 3.65-3.70 (m, 2H), 3.31 (s, 3H), 2.99-2.91 (m, 2H), 2.37 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.05 (d, J=6.4 Hz, 3H). Amestec de 4 diastereomeri posibili 103 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{2-hidroxi-1-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloxi]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona D 481 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.52 (s, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.97 (dd, J=7.15, 2.87 Hz, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.00 - 4.05 (m, 1H), 3.83 - 3.91 (m, 1H), 3.72 (td, J=8.34, 4.10 Hz, 1H), 3.56 - 3.66 (m, 3H), 3.37 - 3.45 (m, 3H), 2.88 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.19 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 2.05 - 2.13 (m, 1H), 1.85 - 1.97 (m, 1H) Un singur izomer, (R) pe centrul THF, alt centru chiral nedeterminat; Diastereomer al Ex.104; 99% de; timp de retenţie 1.088 min pe Chiralcel OJ-3 4.6 x 100 mm 3u coloană; 10% MeOH @ 120 bar, 4 mL/min 104 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{2-hidroxi-1-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloxi]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona D 481 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.57 (s, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.91 (dd, J=7.03, 2.87 Hz, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.04 - 4.11 (m, 1H), 3.90 (d, J=9.66 Hz, 1H), 3.78 (q, J=8.07 Hz, 1H), 3.62 - 3.69 (m, 2H), 3.59 (dd, J=11.86, 2.93 Hz, 1H), 3.37 - 3.45 (m, 3H), 2.88 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.19 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 1.74 - 1.96 (m, 2H) Un singur izomer, (R) pe centrul THF, alt centru chiral nedeterminat; Diastereomer al Ex.103; 94% de; timp de retenţie 1.558 min pe Chiralcel OJ-3 4.6 x 100 mm 3u coloană; 10% MeOH @ 120 bar, 4 mL/min 105 5,8-dicloro-7-{(1R)-2-hidroxi-1-[(2R)-tetrahidrofuran-2-il]etil}-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona E 481 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.67 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.74 (s, 2H), 4.28-4.29 (m, 1H), 3.90-3.79 (m, 6H), 3.69 (t, J=6.8 Hz, 2H), 3.40 (t, J=6.0 Hz, 2H), 2.94 (t, J=6.0 Hz, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.10-2.07 (m, 1H), 1.90-1.86 (m, 1H), 1.77-1.75 (m, 1H), 1.60-1.56 (m, 1H). Izomer 1R,2R; Diastereomer al Ex.106; timp de retenţie: 3.480 min; coloană: Chiralpak AD-3 150x4.6 mm I.D., 3 um; fază mobilă 40% etanol (0.05% DEA) în CO2 106 5,8-dicloro-7-{(1R)-2-hidroxi-1-[(2S)-tetrahidrofuran-2-il]etil}-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona E 481 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.60 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.74 (s, 2H), 4.20-4.18 (m, 1H), 3.97-3.92 (m, 6H), 3.91-3.80 (m, 1H), 3.70 (s, 1H), 3.40 (t, J=5.6 Hz, 2H), 2.95 (t, J=6.0 Hz, 2H), 2.34 (s, 3H), 1.96-1.82 (m, 3H), 1.55-1.50 (m, 1H). izomer 1R,2S; Diastereomer al Ex.105; timp de retenţie: 2.507 min; coloană: Chiralpak AD-3 150x4.6 mm I.D., 3 um; fază mobilă 40% etanol (0.05% DEA) în CO2 107 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(1-metoxipropil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A G 439 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.56 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.73 (s, 2H), 4.70-4.72 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.40-3.43 (m, 2H), 3.26 (s, 3H), 2.95-2.99 (m, 2H), 2.34 (s, 3H), 1.74-1.79 (m, 1H), 1.62-1.67 (m, 1H), 0.99 (t, J=7.2 Hz, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.108; 100% ee; timp de retenţie 11.41 min; coloană: Pheno Lux Cellulose-2, 150x4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 50% MeOH (0.05% DEA) în CO2; Debit: 2.0 mL/min 108 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-(1-metoxipropil)-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B G 439 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.56 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.74 (s, 2H), 4.70-4.72 (m, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.40-3.43 (m, 2H), 3.26 (s, 3H), 2.95-2.99 (m, 2H), 2.34 (s, 3H), 1.73-1.77 (m, 1H), 1.62-1.67 (m, 1H), 0.99 (t, J=7.4 Hz, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.107; 99% ee; timp de retenţie 15.01 min; coloană: Pheno Lux Cellulose-2, 150x4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 50% MeOH (0.05% DEA) în CO2; Debit: 2.0 mL/min 109 7-[(1-acetilpiperidin-4-il)(metoxi)metil]-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I 520 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.03 (br.s., 1H), 7.46 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.74-4.82 (m, 2H), 4.64-4.65 (m, 2H), 3.77-3.79 (m, 1H), 3.68 (t, J=5.8 Hz, 2H), 3.19 (s, 3H), 2.90-2.96 (m, 3H), 2.41-2.47 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.07 (s, 3H), 1.83-1.86 (m, 1H), 1.52-1.57 (m, 2H), 1.34-1.41 (m, 2H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.110; 100% ee; timp de retenţie: 10.42 min; coloană: ChiralpakAD-H 250x4.6 mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.5 mL/min

110 7-[(1-acetilpiperidin-4-il)(metoxi)metil]-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I 520 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.01 (br.s., 1H), 7.47 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.74-4.82 (m, 2H), 4.62-4.65 (m, 2H), 3.76-3.79 (m, 1H), 3.69 (t, J=6 Hz, 2H), 3.19 (s, 3H), 2.90-2.96 (m, 3H), 2.41-2.47 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.07 (s, 3H), 1.83-1.86 (m, 1H), 1.52-1.58 (m, 2H), 1.34-1.40 (m, 2H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.109; 93% ee; timp de retenţie: 11.08 min; coloană: ChiralpakAD-H 250x4.6 mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.5 mL/min 111 5,8-dicloro-7-{[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il](metoxi)metil}-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I [M+Na]+ 574 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.06 (s, 1H), 7.44 (d, J=3.2 Hz, 1H), 5.93 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 4.62-4.64 (m, 2H), 4.10-4.14 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.72 (s, 1H), 3.47-3.53 (m, 3H), 3.20 (s, 3H), 2.84-2.96 (m, 3H), 2.46-2.60 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 1.70-1.72 (m, 1H), 1.58-1.59 (m, 2H), 1.33-1.46 (m, 2H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.112; 100% ee; timp de retenţie: 9.21 min; coloană: Chiralpak AD-3 150×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 30% etanol(0.1% etanolamina) în CO2 112 5,8-dicloro-7-{[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il](metoxi)metil}-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I [M+Na]+ 574 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.98 (s, 1H), 7.44 (d, J=3.6 Hz, 1H), 5.93 (s, 1H), 4.77-4.81 (m, 2H), 4.59-4.64 (m, 2H), 4.10-4.14 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.72 (s, 1H), 3.47-3.53 (m, 3H), 3.20 (s, 3H), 2.83-2.96 (m, 3H), 2.46-2.60 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 1.89-1.90 (m, 1H), 1.58-1.59 (m, 2H), 1.33-1.48 (m, 2H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.111; 100% ee; timp de retenţie: 11.45 min; coloană: Chiralpak AD-3 150×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 30% etanol(0.1% etanolamina) în CO2 113 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{[1-(hidroxiacetil)pirolidin-3-il](metoxi)metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 522 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.63 (s, 1H), 6.13 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 4.09-4.17 (m, 2H), 3.67 (s.l., 1H), 3.52-3.60 (m, 3H), 3.40-3.50 (m, 1H), 3.22-3.25 (m, 3H), 3.00-3.03 (m, 2H), 2.54-2.74 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.73-2.07 (m, 3H) amestec de diastereomeri 114 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(1-oxidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I 511 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.54 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.75-4.81 (m, 2H), 4.60-4.68 (m, 1H), 3.53 (t, J=6.2 Hz, 2H), 3.31-3.37 (m, 2H), 3.20 (s, 3H), 2.98-2.99 (m, 2H), 2.59-2.66 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.06-2.15 (m, 1H), 1.71-1.92 (m, 4H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.115; 100% ee; timp de retenţie: 6.190 min; coloană: Chiralcel OJ-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2 115 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(1-oxidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I 511 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.54 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.75-4.76 (m, 2H), 4.66-4.68 (m, 1H), 3.52 (t, J=6.4 Hz, 2H), 3.37-3.51 (m, 2H), 3.20 (s, 3H), 2.99 (t, J=6.0 Hz, 2H), 2.60-2.68 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.06-2.09 (m, 1H), 1.71-1.96 (m, 4H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.114; 98% ee; timp de retenţie: 6.995 min; coloană: Chiralcel OJ-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2 116 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(1,1-dioxidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)(metoxi)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I 527 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.56 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.83 (s, 2H), 4.70-4.75 (m, 1H), 3.52 (t, J=6.2 Hz, 2H), 3.23 (s, 3H), 2.99-3.20 (m, 6H), 2.30 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 1.97-1.99 (m, 2H), 1.91-1.95 (m, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.117; 100% ee; timp de retenţie: 1.170 min; coloană: Chiralcel OJ-3 50*4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2 117 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(1,1-dioxidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)(metoxi)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I 527 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.56 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 4.81 (s, 2H), 4.71-4.79 (m, 1H), 3.53 (t, J=6.0 Hz, 2H), 3.23 (s, 3H), 2.99-3.20 (m, 6H), 2.30 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.10-2.16 (m, 2H), 1.92-2.00 (m, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.116; 92% ee; timp de retenţie: 1.364 min; coloană: Chiralcel OJ-3 50*4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2 118 4-[{5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il}(metoxi)metil]piperidin-1-carbaldehida - Izomer A I 522 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.40 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.45 (d, J=2.0 Hz, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.78-4.82 (m, 2H), 4.63 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.40-4.44 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.59-3.62 (m, 1H), 3.49-3.52 (m, 2H), 3.20 (s, 3H), 2.91-2.96 (m, 3H), 2.46-2.50 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 1.88-1.89 (m, 1H), 1.26-1.57 (m, 4H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.119; 100% ee; timp de retenţie: 7.866 min; coloană: Chiralpak AS-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 20% metanol (0.1% etanolamina) în CO2 119 4-[{5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-1-oxo-1,2,3,4-tetrahidroizochinolin-7-il}(metoxi)metil]piperidin-1-carbaldehida - Izomer B I 522 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.29 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.45 (d, J=2.4 Hz, 1H), 5.93 (s, 1H), 4.74-4.78 (m, 2H), 4.64 (d, J=5.2 Hz, 1H), 4.41-4.44 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.59-3.63 (m, 1H), 3.51-3.52 (m, 2H), 3.20 (s, 3H), 2.93-3.01 (m, 3H), 2.47-2.53 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 1.89-1.90 (m, 1H), 1.75-1.77 (m, 1H), 1.26-1.57 (m, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.118: 94% ee; timp de retenţie: 9.458 min; coloană: Chiralpak AS-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 20% metanol (0.1% etanolamina) în CO2 120 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(4-fluoro-1-metilpiperidin-4-il)(metoxi)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I 510 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.58 (s.l., 1H), 7.49 (s, 1H), 5.90 (s, 1H), 4.85 (d, J=18.8 Hz, 1H), 4.57 (s, 2H), 3.51-3.46 (m, 2H), 3.16 (s, 3H), 2.91 (t, J=6 Hz, 2H), 2.58-2.64 (m, 2H), 2.19 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 1.93-2.03 (m, 3H), 1.68-1.87 (m, 2H), 1.36 (t, J=10.8 Hz, 1H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.121; 90% ee; timp de retenţie: 7.533 min; coloană: AD-H 250x4.6mm I.D., 5 um; fază mobilă: 5-40% izopropanol (0.05% DEA) în CO2 121 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(4-fluoro-1-metilpiperidin-4-il)(metoxi)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I [M+Na]+ 532 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.59 (s, 1H), 10.77 (s.l., 1H), 7.51 (s, 1H), 5.90 (s, 1H), 4.93 (d, J=18.4 Hz, 1H), 4.57 (s, 2H), 3.50-3.52 (m, 3H), 3.19 (s, 3H), 2.92-3.05 (m, 4H), 2.72 (s, 3H), 2.13-2.34 (m, 9H), 1.65 (s.l., 1H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.120; 91% ee; timp de retenţie: 7.810 min; coloană: AD-H 250x4.6mm I.D., 5 um; fază mobilă: 5-40% izopropanol (0.05% DEA) în CO2 122 7-[(1-acetilpiperidin-4-il)(metoxi)metil]-5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I 536 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.40 (s.l., 1H), 7.45 (d, J=2 Hz, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.77-4.79 (m, 2H), 4.63 (d, J=5.2 Hz, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.80-3.83 (m, 1H), 3.51 (s, 2H), 3.20 (s, 3H), 2.93-2.96 (m, 3H), 2.36-2.38 (m, 4H), 2.07 (s, 3H), 1.71-1.72 (m, 1H), 1.42-1.52 (m, 4H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.123; 100% ee; timp de retenţie: 9.93 min; coloană: ChiralpakAD-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2 123 7-[(1-acetilpiperidin-4-il)(metoxi)metil]-5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I 536 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.26 (s.l., 1H), 7.45 (d, J=2.4 Hz, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.73-4.82 (m, 2H), 4.63 (d, J=4.8 Hz, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.79-3.82 (m, 1H), 3.51 (s, 2H), 3.20 (s, 3H), 2.91-2.96 (m, 3H), 2.36-2.44 (m, 4H), 2.07 (s, 3H), 1.38-1.71 (m, 5H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.122; 97% ee; timp de retenţie: 10.60 min; coloană: ChiralpakAD-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2 124 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(tetrahidrofuran-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I 481 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.35 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 5.93 (s, 1H), 4.78-4.84 (m, 3H), 3.72-3.88 (m, 6H), 3.51-3.70 (m, 1H), 3.48-3.50 (m, 2H), 3.18 (s, 3H), 2.95-2.96 (m, 2H), 2.55-2.60 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 1.70-1.76 (m, 2H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.126; Diastereomer al Ex.125 şi Ex.127; 92% ee; timp de retenţie: 12.59 min; coloană: Chiralpak AD-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 40/60 hexan(0.1%DEA)/izopropanol(0.1%etanolamină) 125 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(tetrahidrofuran-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I 481 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.46 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 4.72 (d, J=8.8 Hz, 1H), 4.51 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.74-3.69 (m, 3H), 3.59-3.57 (m, 1H), 3.30-3.29 (m, 2H), 3.09 (s, 3H), 2.89-2.87 (m, 2H), 2.51-2.50 (m, 1H), 2.19 (s, 3H), 1.51-1.47 (m, 2H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.127; Diastereomer al Ex.124 şi Ex.126; 98% ee; timp de retenţie: 13.43 min; coloană: Chiralpak AD-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 70/30 hexan(0.1%DEA)/izopropanol(0.1%etanolamina) 126 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(tetrahidrofuran-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer C I 481 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.62 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 5.93 (s, 1H), 4.77-4.83 (m, 3H), 3.87-3.91 (m, 4H), 3.72-3.76 (m, 2H), 3.62-3.63 (m, 1H), 3.48-3.51 (m, 2H), 3.22 (s, 3H), 2.94-2.96 (m, 2H), 2.63-2.65 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 1.95-1.96 (m, 1H), 1.80-1.82 (m, 1H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.124; Diastereomer al Ex.125 şi Ex.127; 100% ee; timp de retenţie: 13.65 min; coloană: Chiralpak AD-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 40/60 hexan(0.1%DEA)/izoropanol(0.1%etanolamina) 127 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(tetrahidrofuran-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer D I 481 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.44 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.09 (s, 1H), 4.70 (d, J=6.4 Hz, 1H), 4.50 (s, 2H), 3.70-3.77 (m, 4H), 3.58-3.60 (m, 2H), 3.37-3.41 (m, 2H), 3.13 (s, 3H), 2.86-2.88 (m, 2H), 2.57-2.59 (m, 1H), 2.18 (s, 3H), 1.70-1.85 (m, 2H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.125; Diastereomer al Ex.124 şi Ex.126; 99% ee; timp de retenţie: 14.76 min; coloană: Chiralpak AD-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 70/30 hexan(0.1%DEA)/izopropanol(0.1%etanolamina) 128 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{[1-(hidroxiacetil)azetidin-3-il](metoxi)metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I [M+Na]+ 530 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.57 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.85-4.92 (m, 2H), 4.57 (s, 2H), 4.09-4.19 (m, 1H), 3.97-4.04 (m, 1H), 3.81-3.90 (m, 3H), 3.71-3.78 (m, 1H), 3.46 (t, J=6.40 Hz, 2H), 3.22 (s, 3H), 2.95-3.05 (m, 1H), 2.90 (t, J=5.9 Hz, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.13 (s, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.129; 100% ee; timp de retenţie: 8.161 min; coloană: Chiracel OD-H 150x4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2 129 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{[1-(hidroxiacetil)azetidin-3-il](metoxi)metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I [M+Na]+ 530 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.46 (s.l., 1H), 7.56 (s, 1H), 5.90 (s, 1H), 5.07-4.74 (m, 2H), 4.58 (s, 2H), 4.18-4.10 (m, 1H), 4.02-3.98 (m, 1H), 3.93-3.81 (m, 3H), 3.77-3.71 (m, 1H), 3.46 (t, J=6 Hz, 2H), 3.22 (s, 3H), 3.03-2.96 (m, 1H), 2.90 (t, J=6 Hz, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.13 (s, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.128; 96% ee; timp de retenţie: 8.511 min; coloană: Chiracel OD-H 150x4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2 130 8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(1,1-dioxidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)(metoxi)metil]-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I 507 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.75 (s.l., 1H), 7.24 (s, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.78-4.83 (m, 2H), 4.69 (d, J=5.20 Hz, 1H), 3.63 (t, J=6.00 Hz, 2H), 3.18 (s, 3H), 3.02-3.10 (m, 2H), 2.79-2.94 (m, 2H), 2.75 (t, J=6.00 Hz, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.03-2.22 (m, 3H), 1.86-2.02 (m, 2H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.131; 99% ee; timp de retenţie: 3.455 min; coloană: Chiralpak AD-H 250x4.6mm I.D., 5um; fază mobilă; 40% metanol (0.05% DEA) în CO2 131 8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(1,1-dioxidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)(metoxi)metil]-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I 507 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.75 (s.l., 1H), 7.24 (s, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.78-4.83 (m, 2H), 4.69 (d, J=5.20 Hz, 1H), 3.63 (t, J=6.00 Hz, 2H), 3.18 (s, 3H), 3.02-3.10 (m, 2H), 2.79-2.94 (m, 2H), 2.75 (t, J=6.00 Hz, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.03-2.22 (m, 3H), 1.86-2.02 (m, 2H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.130; 99% ee; timp de retenţie: 6.221 min; coloană: Chiralpak AD-H 250x4.6mm I.D., 5um; fază mobilă; 40% metanol (0.05% DEA) în CO2 132 8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(tetrahidrofuran-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I 431 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.11 (s.l., 1H), 7. 47 (d, J=8 Hz, 1H), 7.11 (d, J=7.6 Hz, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.81-4.83 (m, 3H), 3.83-3.89 (m, 1H), 3.70-3.73 (m, 2H), 3.61-3.64 (m, 3H), 3.19 (s, 3H), 2.82-2.85 (m, 2H), 2.64-2.66 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.95-1.97 (m, 1H), 1.81-1.84 (m, 1H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.133; Diastereomer al Ex.135 şi Ex.134; 99% ee; timp de retenţie: 6.84 min; coloană: ChiralpakAD-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2 133 8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(tetrahidrofuran-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I 431 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.18 (s.l., 1H), 7. 47 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.11 (d, J=8 Hz, 1H), 5.96 (s, 1H), 4.81-4.83 (m, 3H), 3.87-3.89 (m, 1H), 3.70-3.73 (m, 2H), 3.61-3.64 (m, 3H), 3.19 (s, 3H), 2.82-2.85 (m, 2H), 2.64-2.65 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.95-1.97 (m, 1H), 1.80-1.6 (m, 1H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.132; Diastereomer al Ex.135 şi Ex.134; 100% ee; timp de retenţie: 7.13 min; coloană: ChiralpakAD-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2

134 8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(tetrahidrofuran-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer C I 431 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.84 (s.l., 1H), 7. 47 (d, J=8 Hz, 1H), 7.12 (d, J=8 Hz, 1H), 5.96 (s, 1H), 4.80-4.88 (m, 3H), 3.71-3.88 (m, 3H), 3.63-3.65 (m, 3H), 3.16 (s, 3H), 2.83-2.86 (m, 2H), 2.51-2.60 (m, 1H), 2.38 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.69-1.74 (m, 2H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.135; diastereomer al Ex.132 şi Ex.133; 100% ee; timp de retenţie: 7.21 min; coloană: ChiralpakAD-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2; lungimea de undă: 220 nm 135 8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(tetrahidrofuran-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer D I 431 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.71 (s.l., 1H), 7. 47 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.12 (d, J=7.6 Hz, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.80-4.88 (m, 3H), 3.83-3.88 (m, 3H), 3.64-3.72 (m, 3H), 3.16 (s, 3H), 2.83-2.86 (m, 2H), 2.55-2.60 (m, 1H), 2.38 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.69-1.74 (m, 2H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.134; Diastereomer al Ex.132 şi Ex.133; 99% ee; timp de retenţie: 7.32 min; coloană: ChiralpakAD-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2 136 (+)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(1-metilpiperidin-4-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 492 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.58 (s, 1H), 6.16 (s, 1H), 4.81 (s, 2H), 4.72 (d, J=4.65 Hz, 1H), 3.58 (t, J=6.24 Hz, 2H), 3.26 (s, 3H), 2.99 - 3.10 (m, 4H), 2.40 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 2.17 (d, J=11.86 Hz, 2H), 1.68 - 1.85 (m, 3H), 1.54 (d, J=7.70 Hz, 2H). [α]D22= +70.1° (c=0.2, MeOH); Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.137; ~99% ee; timp de retenţie 10.03 min; coloană: Lux Cellulose-4 4.6 x 100 mm 3u; fază mobilă: 50% MeOH/DEA în CO2, 4 mL/min 137 (-)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(1-metilpiperidin-4-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 492 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.58 (s, 1H), 6.16 (s, 1H), 4.81 (s, 2H), 4.72 (d, J=4.65 Hz, 1H), 3.58 (t, J=6.24 Hz, 2H), 3.26 (s, 3H), 2.99 - 3.10 (m, 4H), 2.40 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 2.17 (d, J=11.86 Hz, 2H), 1.68 - 1.85 (m, 3H), 1.54 (d, J=7.70 Hz, 2H). [α]D22= -59.5° (c=0.2, MeOH); Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.136; >99% ee; timp de retenţie 7.25 min; coloană: Lux Cellulose-4 4.6 x 100 mm 3u; fază mobilă: 50% MeOH/DEA în CO2, 4 mL/min 138 5-bromo-8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{[1-(hidroxiacetil)azetidin-3-il](metoxi)metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I 554 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.77 (d, J=4.00 Hz, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.97-4.98 (m, 2H), 4.75 (s, 2H), 4.22-4.27 (m, 2H), 3.98-4.09 (m, 5H), 3.84-3.86 (m, 1H), 3.52 (t, J=6.40 Hz, 2H), 3.08-3.12 (m, 1H), 2.97-3.00 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.25 (s, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.139; 96% ee; timp de retenţie: 6.104 min; coloană: Chiralcel OD-3 150×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.5mL/min 139 5-bromo-8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{[1-(hidroxiacetil)azetidin-3-il](metoxi)metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I 554 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.77 (d, J=4.00 Hz, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.92-4.98 (m, 2H), 4.57 (s, 2H), 4.22-4.27 (m, 2H), 3.98-4.08 (m, 5H), 3.84-3.86 (m, 1H), 3.52 (t, J=6.40 Hz, 2H), 3.08-3.12 (m, 1H), 2.98-3.00 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.25 (s, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.138; 98% ee; timp de retenţie: 6.403 min; coloană: Chiralcel OD-3 150×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2; debit: 2.5mL/min 140 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(2R)-3-hidroxi-1-metoxi-2-metilpropil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I [M+Na]+ 475 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.55 (s.l., 1H), 7.47 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.66 (d, J=7.2 Hz, 1H), 4.57 (s, 2H), 4.38 (t, J=5.6 Hz, 1H), 3.40-3.50 (m, 4H), 3.09 (s, 3H), 2.85-2.95 (m, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.80-1.85 (m, 1H), 0.78 (d, J=6.8 Hz, 3H). Un singur izomer (2R), alt stereocentru necunoscut; Enantiomer al Ex.142; Diastereomer al Ex.143 şi Ex.141; 95% ee; timp de retenţie 6.36 min; coloană: Chiralpak AD-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2 141 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(2R)-3-hidroxi-1-metoxi-2-metilpropil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I [M+Na]+ 475 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.58 (s.l., 1H), 7.42 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.83 (d, J=2.8 Hz, 1H), 4.65 (t, J=5.2 Hz, 1H), 4.57 (s, 2H), 3.40-3.48 (m, 3H), 3.27-3.28 (m, 1H), 3.15 (s, 3H), 2.89 (t, J=6.0 Hz, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.85-1.89 (m, 1H), 0.66 (d, J=6.8 Hz, 3H). Un singur izomer (2R), alt stereocentru necunoscut; Enantiomer al Ex.143; Diastereomer al Ex.140 şi Ex.142; 99% ee; timp de retenţie 7.69 min; coloană: Chiralpak AD-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% izopropanol (0.05% DEA) în CO2 142 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(2S)-3-hidroxi-1-metoxi-2-metilpropil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I [M+Na]+ 475 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.56 (s.l., 1H), 7.47 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.66 (d, J=7.2 Hz, 1H), 4.56 (s, 2H), 3.40-3.50 (m, 5H), 3.09 (s, 3H), 2.89 (t, J=5.6 Hz, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.80-1.85 (m, 1H), 0.78 (d, J=6.4 Hz, 3H). Un singur izomer (2S), alt stereocentru necunoscut; Enantiomer al Ex.140; Diastereomer al Ex.143 şi Ex.141; 100% ee; timp de retenţie: 6.64 min; coloană: Chiralpak AD-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2 143 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(2S)-3-hidroxi-1-metoxi-2-metilpropil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I 453 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.57 (s.l., 1H), 7.42 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.83 (d, J=2.8 Hz, 1H), 4.57 (s, 2H), 3.40-3.50 (m, 5H), 3.16 (s, 3H), 2.89 (t, J=6.4 Hz, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.86-1.89 (m, 1H), 0.66 (d, J=6.8 Hz, 3H). Un singur izomer (2S), alt stereocentru necunoscut; Enantiomer al Ex.141; Diastereomer al Ex.142 şi Ex.140; 98% ee; timp de retenţie: 7.43 min; coloană: Chiralpak AD-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 5-40% izopropanol (0.05% DEA) în CO2 144 8-cloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(oxetan-3-il)metil]-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I 447 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.06 (s.l., 1H), 7.26 (s, 1H), 5.92 (s, 1H), 5.11 (d, J=6.8 Hz, 1H), 4.75-4.79 (m, 3H), 4.62-4.68 (m, 3H), 3.87 (s, 3H), 3.37-3.47 (m, 3H), 3.28 (s, 3H), 2.74 (d, J=3.2 Hz, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.24 (s, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.145; 100% ee; timp de retenţie: 5.041 min; coloană: Chiralcel OD-3 150×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2 145 8-cloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(oxetan-3-il)metil]-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I 447 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.26 (s, 1H), 5.92 (s, 1H), 5.11-5.12 (m, 1H), 4.76-4.78 (m, 3H), 4.62-4.68 (m, 3H), 3.87 (s, 3H), 3.37-3.47 (m, 3H), 3.28 (s, 3H), 2.74-2.75 (m, 2H), 2.33 (s, 3H), 2.24 (s, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.144; 99% ee; timp de retenţie: 5.168 min; coloană: Chiralcel OD-3 150×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2 146 5-bromo-8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(1-metilpiperidin-4-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I 538 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.45 (s.l., 1H), 7.55 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.70-4.73 (m, 2H), 4.58 (d, J=4.40Hz, 1H), 3.57-3.60 (m, 2H), 3.30-3.33 (m, 2H), 3.14 (s, 3H), 2.86-2.89 (m, 2H), 2.63 (s, 3H), 2.48-2.53 (m, 2H), 2.29 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 1.98-2.02 (m, 1H), 1.83-1.88(m, 1H), 1.74-1.79 (m, 2H), 1.58-1.63 (m, 1H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.147; 100% ee; timp de retenţie; 4.177 min; coloană: Chiralcel OD-3 100×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2 147 5-bromo-8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(1-metilpiperidin-4-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I 538 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.82 (s.l., 1H), 7.57 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.69 (s, 2H), 4.58 (d, J=4.40Hz, 1H), 3.57-3.60- (m, 2H), 3.12 (s, 3H), 3.01-3.07 (m, 2H), 2.85-2.88 (m, 2H), 2.38 (s, 3H), 2.29 (s, 3H) , 2.22 (s, 3H), 2.08-2.13 (m, 2H), 1.82-1.88 (m, 1H), 1.69-1.75 (m, 2H), 1.58-1.63 (m, 1H), 1.40-1.46 (m, 1H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.146; 100% ee; timp de retenţie; 4.202 min; coloană: Chiralcel OD-3 100×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2 148 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(1,1-dioxidotetrahidrotiophen-3-il)(metoxi)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I [M+Na]+ 535 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.25 (s.l., 1H), 7.43 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.71-4.85 (m, 3H), 3.60-3.76 (m, 2H), 3.27 (s, 3H), 3.18-3.25 (m, 1H), 2.88-3.16 (m, 5H), 2.79 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.16-2.27 (m, 2H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.151; Diastereomer al Ex.149 şi Ex.150; 97% ee; timp de retenţie: 1.865 min; coloană: Chiralcel OJ-3 100×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 15% metanol (0.05% DEA) în CO2 149 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(1,1-dioxidotetrahidrotiophen-3-il)(metoxi)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I [M+Na]+ 535 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 10.79 (s.l., 1H), 7.48 (s, 1H), 5.93 (s, 1H), 4.70-4.84 (m, 3H), 3.61-3.74 (m, 2H), 3.26 (s, 3H), 3.18-3.25 (m, 1H), 3.14-3.16 (m, 2H), 2.96 (t, J=6.27 Hz, 2H), 2.74-2.93 (m, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.94-2.19 (m, 2H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.150; Diastereomer al Ex.148 şi Ex.151; 100% ee; timp de retenţie: 1.949 min; coloană: Chiralcel OJ-3 100×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 15% metanol (0.05% DEA) în CO2 150 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(1,1-dioxidotetrahidrotiophen-3-il)(metoxi)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer C I [M+Na]+ 535 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.61 (s.l., 1H), 7.49 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.68-4.86 (m, 3H), 3.58-3.77 (m, 2H), 3.27 (s, 3H), 3.19-3.25 (m, 1H), 3.14-3.17 (m, 2H), 2.96 (t, J=6.15 Hz, 2H), 2.75-2.94 (m, 2H), 2.37 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.96-2.21 (m, 2H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.149; Diastereomer al Ex.148 şi Ex.151; 97% ee; timp de retenţie: 2.253 min; coloană: Chiralcel OJ-3 100×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 15% metanol (0.05% DEA) în CO2 151 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(1,1-dioxidotetrahidrotiophen-3-il)(metoxi)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer D I [M+Na]+ 535 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.72 (s.l., 1H), 7.43 (s, 1H), 5.96 (s, 1H), 4.71-4.86 (m, 3H), 3.58-3.78 (m, 2H), 3.22-3.31 (m, 4H), 2.87-3.19 (m, 5H), 2.73-2.85 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.16-2.27 (m, 2H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.148; Diastereomer al Ex.149 şi Ex.150; 100% ee; timp de retenţie: 2.596 min; coloană: Chiralcel OJ-3 100×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 15% metanol (0.05% DEA) în CO2 152 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(1,1-dioxidothietan-3-il)(metoxi)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I 499 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.47 (s, 1H), 5.96 (s, 1H), 4.93 (d, J=4.8, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.22-4.28 (m, 2H), 4.05-4.08 (m, 1H), 3.67-3.79 (m, 3H), 3.32 (s, 3H), 2.92-2.98 (m, 3H), 2.37 (s, 3H), 2.29 (s, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.153; 100% ee; timp de retenţie 5.106 min; coloană: Chiralpak AD-3 100×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2 153 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(1,1-dioxidothietan-3-il)(metoxi)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I 499 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.47 (s, 1H), 5.96 (s, 1H), 4.93 (d, J=4.8, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.22-4.28 (m, 2H), 4.05-4.08 (m, 1H), 3.67-3.78 (m, 3H), 3.32 (s, 3H), 2.92-2.98 (m, 3H), 2.37 (s, 3H), 2.29 (s, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.152; 100% ee; timp de retenţie 4.69 min; coloană: Chiralpak AD-3 100×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2 154 8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{metoxi[1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il]metil}-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I 514 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.35 (s, 1H), 6.13 (s, 1H), 4.79 (s, 2H), 4.56-4.70 (m, 6H), 3.42-3.53 (m, 3H), 3.19 (s, 3H), 2.72-2.87 (m, 5H), 2.31 (s, 6H), 2.25-2.28 (m, 3H), 1.64-1.83 (m, 5H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.155; 99% ee; timp de retenţie: 4.001 min; coloană: Chiralpak AD-3 100x4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2 155 8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{metoxi[1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il]metil}-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I 514 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.35 (s, 1H), 6.13 (s, 1H), 4.79 (s, 2H), 4.54-4.69 (m, 6H), 3.41-3.51 (m, 4H), 3.19 (s, 3H), 2.73-2.86 (m, 4H), 2.30 (s, 6H), 2.26 (s, 3H), 1.64-1.86 (m, 5H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.154; 96% ee; timp de retenţie: 4.312 min; coloană: Chiralpak AD-3 100x4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2 156 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{metoxi[1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il]metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I 534 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.57 (s.l., 1H), 7.44 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.50-4.65 (m, 3H), 4.45-4.50 (m, 2H), 4.35-4.40 (m, 2H), 3.46 (t, J=6.0 Hz, 2H), 3.30-3.35 (m, 3H), 3.12 (s, 3H), 2.89 (t, J=6.0 Hz, 2H), 2.60-2.70 (m, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.50-1.65 (m, 4H), 1.35-1.45 (m, 1H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.157; 100% ee; timp de retenţie: 2.263 min; coloană: Chiralpak AY 100x4.6 mm I.D., 3 um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2 157 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{metoxi[1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il]metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I 534 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.58 (s.l., 1H), 7.44 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.50-4.65 (m, 3H), 4.45-4.50 (m, 2H), 4.35-4.40 (m, 2H), 3.46 (t, J=6.0 Hz, 2H), 3.30-3.35 (m, 3H), 3.12 (s, 3H), 2.89 (t, J=5.6 Hz, 2H), 2.60-2.70 (m, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.50-1.65 (m, 4H), 1.35-1.45 (m, 1H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.156; 100% ee; timp de retenţie: 3.339 min; coloană: Chiralpak AY 100x4.6 mm I.D., 3 um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2

158 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(1,1-dioxidothietan-3-il)(etoxi)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I 513 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.26 (s.l., 1H), 7.49 (s, 1H), 5.94 (s, 1H), 5.03 (d, J=4.4 Hz, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.21-4.26 (m, 2H), 4.03-4.04 (m, 1H), 3.68-3.76 (m, 3H), 3.40-3.48 (m, 2H), 2.94-2.97 (m, 3H), 2.37 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.25 (t, J=7 Hz, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.159; 100% ee; timp de retenţie: 2.535 min; coloană: Chiralcel OJ-3 100×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2 159 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[(1,1-dioxidothietan-3-il)(etoxi)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I 513 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.35 (s.l., 1H), 7.49 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 5.02 (d, J=4.8 Hz, 1H), 4.77-4.8 (m, 2H), 4.21-4.26 (m, 2H), 4.03-4.04 (m, 1H), 3.68-3.76 (m, 3H), 3.40-3.48 (m, 2H), 2.94-2.97 (m, 3H), 2.37 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.25 (t, J=6.8 Hz, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.158; 100% ee; timp de retenţie: 22.782 min; coloană: Chiralcel OJ-3 100×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2 160 (-)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(tetrahidrofuran-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A I 465 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.61 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 3.83-3.91 (m, 1H), 3.67-3.76 (m, 2H), 3.58 (t, J=7.83 Hz, 1H), 3.53 (t, J=6.24 Hz, 2H), 3.22 (s, 3H), 2.99 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.64 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.93-2.05 (m, 1H), 1.78-1.89 (m, 1H) Un proton acoperit de solvent. [α]D = -48.0° (c 0.1 MeOH), >99% ee; Stereochimie absolută şi relativă nedeterminat; Enantiomer al Ex.161; Diastereomer al Ex.162 şi Ex.163 161 (+)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(tetrahidrofuran-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B I 465 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.61 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 3.83-3.92 (m, 1H), 3.67-3.76 (m, 2H), 3.58 (t, J=7.82 Hz, 1H), 3.53 (t, J=6.24 Hz, 2H), 3.22 (s, 3H), 2.99 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.64 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.93-2.04 (m, 1H), 1.78-1.92 (m, 1H) Un proton acoperit de solvent. [α]D = +74.7° (c 0.1 MeOH), 90% ee, Stereochimie absolută şi relativă nedeterminat; Enantiomer al Ex.160; Diastereomer al Ex.162 şi Ex.163 162 (-)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(tetrahidrofuran-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer C I 465 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.61 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 3.76-3.90 (m, 3H), 3.70 (q, J=7.50 Hz, 1H), 3.53 (t, J=6.24 Hz, 2H), 3.18 (s, 3H), 2.97-3.03 (m, 2H), 2.54-2.66 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.62-1.81 (m, 2H) Un proton acoperit de solvent. [α]D = -68.8° (c 0.1 MeOH); >99% ee; Stereochimie absolută şi relativă nedeterminat; Enantiomer al Ex.163; Diastereomer Ex.160 şi Ex.161 163 (+)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(tetrahidrofuran-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer D I 465 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.61 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 3.76-3.91 (m, 3H), 3.70 (q, J=7.58 Hz, 1H), 3.53 (t, J=6.24 Hz, 2H), 3.18 (s, 3H), 2.96-3.03 (m, 2H), 2.60 (sxt, J=7.38 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.63-1.81 (m, 2H) Un proton acoperit de solvent. [α]D = +59.4° (c 0.1 MeOH); >99% ee; Stereochimie absolută şi relativă nedeterminat; Enantiomer al Ex.162; Diastereomer al Ex.160 şi Ex.161 164 (-)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il][(2H3)metiloxi]metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 539 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.54 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 4.66 (d, J=5.62 Hz, 1H), 4.44-4.56 (m, 1H), 4.12-4.27 (m, 2H), 3.66-3.78 (m, 1H), 3.53 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.99 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.85-2.96 (m, 1H), 2.51-2.66 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.86-2.00 (m, 1H), 1.69-1.79 (m, 1H), 1.31-1.54 (m, 3H) [α]D = -36.9° (c 0.1 MeOH); Stereochimie absolută nedeterminată; Enantiomer al Ex.165; (-) izomer al racematului Ex. 70 165 (+)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il][(2H3)metiloxi]metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 539 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.54 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 4.66 (d, J=5.62 Hz, 1H), 4.43-4.56 (m, 1H), 4.12-4.27 (m, 2H), 3.67-3.78 (m, 1H), 3.53 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.99 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.84-2.96 (m, 1H), 2.49-2.67 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.86-2.01 (m, 1H), 1.69-1.79 (m, 1H), 1.32-1.56 (m, 3H) [α]D = +139.1° (c 0.1 MeOH); Stereochimie absolută nedeterminată; Enantiomer al Ex.164; (+) izomer a racematului Ex. 70 166 (+)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(piperidin-4-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 478 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6) δ 7.42 (s, 1H), 5.91 (s, 1H), 4.55 (s, 2H), 4.51 (d, J=5.50 Hz, 1H), 3.43 - 3.45 (m, 2H), 3.10 (s, 3H), 2.87 (t, J=5.59 Hz, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.45 - 1.74 (m, 2H), 1.20 - 1.40 (m, 3H) Patru protons acoperit de solvent [α]D = +73.0° (c 0.1 MeOH); 97% ee; Stereochimie absolută nedeterminată; Enantiomer al Ex.167 167 (-)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(piperidin-4-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 478 1H RMN (700 MHz, DMSO-d6) δ 7.43 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.54 -4.58 (m, 2H), 4.52 (d, J=5.72 Hz, 1H), 3.46 (t, J=5.94 Hz, 2H), 3.11 (s, 3H), 2.83 - 3.00 (m, 4H), 2.17 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.62 - 1.72 (m, 1H), 1.51 - 1.62 (m, 1H), 1.29 - 1.42 (m, 1H), 1.19 - 1.28 (m, 2H). Doi protoni acoperiţi de solvent [α]D = -59.7° (c 0.1 MeOH); 99% ee; Stereochimie absolută nedeterminată; Enantiomer al Ex.166 168 (+)-8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il](metoxi)metil}-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 516 1H RMN (700 MHz, DMSO-d6) δ 11.55 (s.l., 1H), 7.26 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.52-4.62 (m, 3H), 4.44 (s.l., 1H), 4.28-4.39 (m, 1H), 4.04-4.11 (m, 1H), 3.96-4.04 (m, 1H), 3.57-3.71 (m, 1H), 3.40 (s.l., 2H), 3.08 (s, 3H), 2.82 (t, J=11.88 Hz, 1H), 2.72 (t, J=5.94 Hz, 2H), 2.43-2.48 (m, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.79-1.88 (m, 1H), 1.65-1.74 (m, 1H), 1.15-1.37 (m, 3H) [α]D = +60.2° (c 0.1 MeOH); 99% ee; Stereochimie absolută nedeterminată; Enantiomer al Ex.169 169 (-)-8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il](metoxi)metil}-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 516 1H RMN (700 MHz, DMSO-d6) δ 11.55 (s.l., 1H), 7.26 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.51-4.60 (m, 3H), 4.44 (s.l., 1H), 4.29-4.39 (m, 1H), 4.04-4.10 (m, 1H), 3.95-4.04 (m, 1H), 3.58-3.70 (m, 1H), 3.40 (s.l., 2H), 3.08 (s, 3H), 2.82 (t, J=11.99 Hz, 1H), 2.72 (t, J=5.94 Hz, 2H), 2.43-2.47 (m, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.79-1.87 (m, 1H), 1.66-1.72 (m, 1H), 1.16-1.36 (m, 3H) [α]D = -31.2° (c 0.1 MeOH): ~80% ee; Stereochimie absolută nedeterminată; Enantiomer al Ex.168 170 (+)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[{1-[(2R)-2-hidroxipropanoil]azetidin-3-il}(metoxi)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 522 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.54 (s.l., 1H), 7.55 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 5.00 (dd, J=4.89, 5.87 Hz, 1H), 4.91 (d, J=4.89 Hz, 1H), 4.57 (s, 2H), 4.02-4.24 (m, 3H), 3.78-3.89 (m, 1H), 3.66-3.75 (m, 1H), 3.46 (t, J=5.99 Hz, 2H), 3.21 (s, 3H), 2.94-3.04 (m, 1H), 2.90 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.15 (d, J=6.85 Hz, 3H) [α]D = +123.5° (c=0.1, MeOH); >99% de; Un singur diastereomer ce conţine (R)-2-hidroxipropanamida; alt centru chiral nedeterminat; Enantiomer al Ex.173 Diastereomer al Ex.171 şi Ex.172 171 (-)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[{1-[(2R)-2-hidroxipropanoil]azetidin-3-il}(metoxi)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 522 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.54 (s.l., 1H), 7.55 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.97 (dd, J=6.05, 15.34 Hz, 1H), 4.91 (t, J=6.42 Hz, 1H), 4.57 (s, 2H), 4.17-4.29 (m, 1H), 4.00-4.14 (m, 2H), 3.70-3.86 (m, 2H), 3.46 (t, J=5.62 Hz, 2H), 3.21 (d, J=1.96 Hz, 3H), 2.93-3.03 (m, 1H), 2.90 (t, J=5.99 Hz, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.14 (dd, J=4.34, 6.66 Hz, 3H) [α]D = -110.6° (c=0.1, MeOH); >99% de; Un singur diastereomer ce conţine (R)-2-hidroxipropanamida; alt centru chiral nedeterminat; Enantiomer al Ex.172 Diastereomer al Ex.170 şi Ex.173 172 (+)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[{1-[(2S)-2-hidroxipropanoil]azetidin-3-il}(metoxi)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 522 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.53 (s.l., 1H), 7.55 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.96 (dd, J=6.11, 15.41 Hz, 1H), 4.90 (t, J=6.36 Hz, 1H), 4.56 (s, 2H), 4.17-4.27 (m, 1H), 4.00-4.12 (m, 2H), 3.68-3.87 (m, 2H), 3.46 (t, J=5.87 Hz, 2H), 3.21 (d, J=1.96 Hz, 3H), 2.93-3.02 (m, 1H), 2.89 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.14 (dd, J=4.16, 6.60 Hz, 3H). [α]D = +69.5° (c=0.1, MeOH); >99% de; Un singur diastereomer ce conţine (S)-2-hidroxipropanamida; alt centru chiral nedeterminat; Enantiomer al Ex.171 Diastereomer al Ex.173 şi Ex.170 173 (-)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[{1-[(2S)-2-hidroxipropanoil]azetidin-3-il}(metoxi)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 522 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.54 (s.l., 1H), 7.54 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 5.00 (t, J=5.26 Hz, 1H), 4.91 (d, J=4.89 Hz, 1H), 4.57 (s, 2H), 4.01-4.26 (m, 3H), 3.77-3.90 (m, 1H), 3.66-3.74 (m, 1H), 3.46 (t, J=5.87 Hz, 2H), 3.21 (s, 3H), 2.93-3.03 (m, 1H), 2.90 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.15 (d, J=6.36 Hz, 3H) [α]D = -105.1° (c=0.1, MeOH); ~88% de; Un singur diastereomer ce conţine (S)-2-hidroxipropanamida; alt centru chiral nedeterminat; Enantiomer al Ex.170 Diastereomer al Ex.172 şi Ex.171 174 (+)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(1-metilazetidin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 464 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.48 (s.l., 1H), 7.47 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.89 (d, J=7.09 Hz, 1H), 4.56 (s, 2H), 3.46 (t, J=6.11 Hz, 2H), 3.10-3.19 (m, 4H), 2.97-3.09 (m, 2H), 2.79-2.94 (m, 3H), 2.62-2.71 (m, 1H), 2.17 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 2.12 (s, 3H) [α]D = +88.5° (c=0.1, MeOH); >99% ee; Stereochimie absolută nedeterminată; Enantiomer al Ex.175 175 (-)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(1-metilazetidin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 464 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.48 (s.l., 1H), 7.47 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.89 (d, J=7.09 Hz, 1H), 4.56 (s, 2H), 3.46 (t, J=6.11 Hz, 2H), 3.10-3.19 (m, 4H), 2.97-3.09 (m, 2H), 2.79-2.94 (m, 3H), 2.62-2.71 (m, 1H), 2.17 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 2.12 (s, 3H) [α]D = -70.2° (c=0.1, MeOH); >99% ee; Stereochimie absolută nedeterminată; Enantiomer al Ex.174 176 (+)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{metoxi[1-(metilsulfonil)azetidin-3-il]metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 528 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.54 (s.l., 1H), 7.61 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.87 (d, J=5.14 Hz, 1H), 4.57 (s, 2H), 3.97 (t, J=7.46 Hz, 1H), 3.75-3.87 (m, 2H), 3.67 (t, J=8.31 Hz, 1H), 3.45 (t, J=6.24 Hz, 2H), 3.23 (s, 3H), 2.99 (s, 3H), 2.93-3.03 (m, 1H), 2.89 (t, J=5.99 Hz, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.12 (s, 3H) [α]D = +104.4° (c=0.2, MeOH); >99% ee; Stereochimie absolută nedeterminată; Enantiomer al Ex.177 177 (-)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{metoxi[1-(metilsulfonil)azetidin-3-il]metil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 528 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.54 (s.l., 1H), 7.61 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.87 (d, J=5.14 Hz, 1H), 4.57 (s, 2H), 3.97 (t, J=7.34 Hz, 1H), 3.76-3.86 (m, 2H), 3.67 (t, J=8.31 Hz, 1H), 3.45 (t, J=6.11 Hz, 2H), 3.23 (s, 3H), 2.99 (s, 3H), 2.94-3.02 (m, 1H), 2.89 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.12 (s, 3H) [α]D = -111.7° (c=0.1, MeOH); ~97% ee; Stereochimie absolută nedeterminată; Enantiomer al Ex.176 178 (±)-7-[azetidin-3-il(metoxi)metil]-8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 430 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.37 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 4.99 (d, J=5.50 Hz, 1H), 4.77 (s, 2H), 3.79-3.95 (m, 2H), 3.55-3.72 (m, 2H), 3.46 (t, J=5.99 Hz, 2H), 3.29 (s, 3H), 3.16 (dd, J=7.76, 14.12 Hz, 1H), 2.81 (t, J=5.93 Hz, 2H), 2.29 (s, 6H), 2.25 (s, 3H) amestec racemic 179 (+)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(1-metil-5-oxopirolidin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 492 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.54 (s.l., 1H), 7.55 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.74 (d, J=5.87 Hz, 1H), 4.56 (s, 2H), 3.47 (t, J=6.11 Hz, 2H), 3.16 (s, 3H), 3.09 (dd, J=6.36, 9.54 Hz, 1H), 2.90 (t, J=5.87 Hz, 2H), 2.70-2.78 (m, 1H), 2.67 (s, 3H), 2.26-2.35 (m, 1H), 2.17 (s, 3H), 2.07-2.16 (m, 4H) Un proton acoperit de semnalul apei. [α]D = +51.2° (c=0.1, MeOH); >99% de; Stereochimie absolută şi relativă nedeterminat; Enantiomer al Ex.180 180 (-)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[metoxi(1-metil-5-oxopirolidin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 492 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.54 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.74 (d, J=6.11 Hz, 1H), 4.56 (s, 2H), 3.47 (t, J=6.24 Hz, 2H), 3.16 (s, 3H), 3.09 (dd, J=6.24, 9.66 Hz, 1H), 2.90 (t, J=6.11 Hz, 2H), 2.69-2.77 (m, 1H), 2.67 (s, 3H), 2.26-2.34 (m, 1H), 2.18 (s, 3H), 2.08-2.16 (m, 4H) Un proton acoperit de semnalul apei. [α]D = -69.5° (c=0.1, MeOH); ~99% de; Stereochimie absolută şi relativă nedeterminat; Enantiomer al Ex.179 181 (+)-8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{metoxi[1-(oxetan-3-il)azetidin-3-il]metil}-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 486 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.52 (s.l., 1H), 7.29 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.91 (d, J=6.85 Hz, 1H), 4.56 (s, 2H), 4.52 (t, J=6.48 Hz, 2H), 4.28-4.38 (m, 2H), 3.60-3.74 (m, 1H), 3.40 (t, J=6.11 Hz, 2H), 3.16-3.25 (m, 2H), 3.06-3.15 (m, 4H), 2.97-3.06 (m, 1H), 2.68-2.79 (m, 3H), 2.22 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.12 (s, 3H) [α]D = +110.8° (c=0.1, MeOH); ~99% ee; Stereochimie absolută nedeterminată; Enantiomer al Ex.182 182 (-)-8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{metoxi[1-(oxetan-3-il)azetidin-3-il]metil}-5-metil-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona I 486 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.53 (s.l., 1H), 7.29 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.91 (d, J=7.09 Hz, 1H), 4.56 (s, 2H), 4.52 (t, J=6.48 Hz, 2H), 4.33 (td, J=5.93, 8.19 Hz, 2H), 3.66 (quin, J=5.93 Hz, 1H), 3.40 (t, J=5.99 Hz, 2H), 3.15-3.23 (m, 2H), 3.13 (s, 3H), 3.09 (t, J=7.46 Hz, 1H), 3.00 (t, J=6.97 Hz, 1H), 2.68-2.78 (m, 3H), 2.22 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 2.12 (s, 3H) [α]D = -85.3° (c=0.1, MeOH); >99% ee; Stereochimie absolută nedeterminată; Enantiomer al Ex.181 183 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{1-[1-(hidroxiacetil)azetidin-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A J 492 1H RMN (400 MHz,CDCl3) δ 11.37 (s.l., 1H), 7.17 (s, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.19-4.27 (m, 1H), 3.92-4.00 (m, 4H), 3.57-3.74 (m, 4H), 3.16-3.22 (m, 1H), 3.01-2.88 (m 3H), 2.36 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.19 (d, J=6.01 Hz, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.184; 96% ee; timp de retenţie: 2.459 min; coloană: Chiralcel OJ-3 100×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2

184 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{1-[1-(hidroxiacetil)azetidin-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B J 492 1H RMN (400 MHz,CDCl3) δ 11.70 (s.l., 1H), 7.17 (s, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.22-4.38 (m, 1H), 3.89-4.00 (m, 4H), 3.55-3.75 (m, 4H), 3.16-3.23 (m, 1H), 2.99-2.86 (m 3H), 2.36 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.19 (d, J=6.01 Hz, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.183; 94% ee; timp de retenţie: 2.661 min; coloană: Chiralcel OJ-3 100×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2 185 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{1-[1-(metilsulfonil)azetidin-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A J [M+Na]+ 534 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.59 (s.l., 1H), 7.55 (s, 1H), 5.89 (s.l., 1H), 4.57 (s.l., 2H), 3.97 (s.l., 2H), 3.77 (d, J=12.30 Hz, 2H), 3.62 (s.l., 2H), 3.44-3.47 (m, 2H), 2.98 (s, 3H), 2.85 (s.l., 2H), 2.15 (d, J=14.05 Hz, 6H), 1.13 (d, J=6.02 Hz, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.186; 100% ee; timp de retenţie 5.299 min; coloană: Chiralpak AD-3 100×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2 186 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-{1-[1-(metilsulfonil)azetidin-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B J [M+Na]+ 534 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.57 (s.l., 1H), 7.55 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 4.57 (s, 2H), 3.97 (t, J=8.03 Hz, 2H), 3.74-3.83 (m, 2H), 3.62 (d, J=9.29 Hz, 2H), 3.44 (s.l., 2H), 2.99 (s, 3H), 2.87 (d, J=6.02 Hz, 2H), 2.15 (d, J=16.56 Hz, 6H), 1.13 (d, J=6.78 Hz, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.185; 99% ee; timp de retenţie 5.807 min; coloană: Chiralpak AD-3 100×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2 187 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[1-(1-metilazetidin-3-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A J 448 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.50 (s.l., 1H), 6.14 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.13 (d, J=7.53 Hz, 2H), 3.77-4.02 (m, 3H), 3.68 (d, J=10.29 Hz, 1H), 3.53 (t, J=6.02 Hz, 2H), 2.88-3.01 (m, 5H), 2.32 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.22 (d, J=6.78 Hz, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.188; 100% ee; timp de retenţie 5.295 min; coloană: Chiralpak AD-3 150×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2 188 5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[1-(1-metilazetidin-3-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B J 448 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.48 (s, 1H), 6.14 (s, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.09 (t, J=8.41 Hz, 1H), 3.73-3.89 (m, 3H), 3.53 (t, J=6.27 Hz, 2H), 3.44 (t, J=8.53 Hz, 1H), 3.07-3.19 (m, 1H), 2.97 (q, J=5.77 Hz, 2H), 2.74 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.20 (d, J=6.78 Hz, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.187; 100% ee; timp de retenţie 5.420 min; coloană: Chiralpak AD-3 150×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2 189 7-[1-(azetidin-3-il)etil]-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A J [M+Na]+ 456 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7.12 (s, 1H), 5.92 (s, 1H), 5.33-5.37 (m, 1H), 4.89-4.93 (m, 1H), 4.36-4.39 (m, 1H), 4.13-4.17 (m, 1H), 3.82-3.91 (m, 3H), 3.65-3.70 (m, 3H), 3.19-3.23 (m, 1H), 2.88-2.91 (m, 2H), 2.40 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 1.15 (d, J=6.80 Hz, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.190; 100% ee; timp de retenţie 6.673 min; coloană: Chiralcel OD-3 150x4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2 190 7-[1-(azetidin-3-il)etil]-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B J 434 1H RMN (400 MHz,CDCl3) δ 7.15 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 5.33-5.37 (m, 1H), 4.82-4.92 (m, 1H), 4.38-4.42 (m, 1H), 4.13-4.17 (m, 1H), 3.82-3.91 (m, 3H), 3.65-3.70 (m, 3H), 3.19-3.23 (m, 1H), 2.88-2.91 (m, 2H), 2.40 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 1.15 (d, J=6.80 Hz, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer Ex.189; 97% ee; timp de retenţie 5.996 min; coloană: Chiralcel OD-3 150x4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2 191 8-cloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-5-metil-7-{1-[1-(metilsulfonil)azetidin-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A J 508 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.23 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.69-4.78 (m, 2H), 4.10 (t, J=8.03 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.74-3.85 (m, 3H), 3.46 (dd, J=6.78, 8.03 Hz, 1H), 3.34-3.38 (m, 2H), 3.02 (dd, J=6.78, 17.32 Hz, 1H), 2.93 (s, 3H), 2.77 (t, J=6.27 Hz, 2H), 2.33 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.20 (d, J=6.78 Hz, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.192; 96% ee; timp de retenţie 4.765 min; coloană: Chiralpak AD-3 100x4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2 192 8-cloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-5-metil-7-{1-[1-(metilsulfonil)azetidin-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B J [M+Na]+ 530 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.23 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.74 (d, J=1.25 Hz, 2H), 4.10 (t, J=8.16 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.74-3.86 (m, 3H), 3.46 (dd, J=6.65, 7.91 Hz, 1H), 3.34-3.38 (m, 2H), 3.05 (m, 1H), 2.93 (s, 3H), 2.74-2.81 (m, 2H), 2.33 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.20 (d, J=6.78 Hz, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.191; 100% ee; timp de retenţie 5.207 min; coloană: Chiralpak AD-3 100x4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2 193 8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-5-metil-7-{1-[1-(metilsulfonil)azetidin-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A J 492 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.33 (s.l., 1H), 6.96 (s, 1H), 5.93 (s, 1H), 4.72-4.87 (m, 2H), 4.10 (t, J=8.03 Hz, 1H), 3.69-3.84 (m, 3H), 3.60 (t, J=6.02 Hz, 2H), 3.50 (t, J=7.28 Hz, 1H), 2.85-2.95 (m, 1H), 2.84 (s, 3H), 2.71 (t, J=6.02 Hz, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 1.17 (d, J=6.78 Hz, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.194; 100% ee; timp de retenţie 5.024 min; coloană: Chiralpak AD-3 100x4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2 194 8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-5-metil-7-{1-[1-(metilsulfonil)azetidin-3-il]etil}-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B J 492 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.82 (s.l., 1H), 6.96 (s, 1H), 5.93 (s, 1H), 4.72-4.87 (m, 2H), 4.09 (t, J=8.03 Hz, 1H), 3.67-3.84 (m, 3H), 3.60 (t, J=6.02 Hz, 2H), 3.50 (t, J=7.28 Hz, 1H), 2.89 (d, J=9.29 Hz, 1H), 2.84 (s, 3H), 2.71 (t, J=6.15 Hz, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 1.17 (d, J=6.78 Hz, 3H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.193; 95% ee; timp de retenţie 5.219 min; coloană: Chiralpak AD-3 100x4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% etanol (0.05% DEA) în CO2 195 8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-5-metil-7-[1-(oxetan-3-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A J 415 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.67 (s.l., 1H), 6.91 (s, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.86 (t, J=6.8 Hz, 1H), 4.80 (2H, s), 4.55-4.65 (m, 2H), 4.30 (t, J=6.0 Hz, 1H), 3.90-4.00 (m, 1H), 3.60 (t, J=6.0 Hz, 2H), 3.25-3.40 (m, 1H), 2.70 (t, J=6.0 Hz, 2H), 2.69 (s, 3H), 2.37 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.13 (d, J=6.8 Hz, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.196; 99% ee; timp de retenţie: 2.854 min; coloană: OJ-3 100x4.6 mm I.D., 3 um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2 196 8-cloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-5-metil-7-[1-(oxetan-3-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B J 415 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 11.72 (s.l., 1H), 6.91 (s, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.86 (t, J=6.8 Hz, 1H), 4.80 (s, 2H), 4.55-4.65 (m, 2H), 4.31 (t, J=6.4 Hz, 1H), 3.90-4.00 (m, 1H), 3.60 (t, J=6.0 Hz, 2H), 3.25-3.40 (m, 1H), 2.70 (t, J=6.0 Hz, 2H), 2.69 (s, 3H), 2.37 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.13 (d, J=6.8 Hz, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.195; 99% ee; timp de retenţie: 3.078 min; coloană: OJ-3 100x4.6 mm I.D., 3 um; fază mobilă: 5-40% metanol (0.05% DEA) în CO2 197 8-cloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-5-metil-7-[1-(oxetan-3-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A J 431 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.75 (s.l., 1H), 6.89 (s, 1H), 5.91 (s, 1H), 4.80-4.88 (m, 3H), 4.57-4.61 (m, 2H), 4.28 (t, J=6.4 Hz, 1H), 3.86-3.93 (m, 4H), 3.31-3.42 (m, 3H), 2.70 (t, J=6.0 Hz, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 1.13 (d, J=6.8 Hz, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.198; 97% ee; timp de retenţie: 1.521 min; coloană: Chiralpak AD-3 150×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 40% izopropanol (0.05% DEA) în CO2 198 8-cloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-5-metil-7-[1-(oxetan-3-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B J 431 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.39 (s.l., 1H), 6.90 (s, 1H), 5.92 (s, 1H), 4.81-4.89 (m, 3H), 4.57-4.61 (m, 2H), 4.30 (t, J=6.0 Hz, 1H), 3.87-3.94 (m, 4H), 3.31-3.43 (m, 3H), 2.71 (t, J=5.2 Hz, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 1.13 (d, J=6.8 Hz, 3H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.197; 94% ee; timp de retenţie: 2.081 min; coloană: Chiralpak AD-3 150×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 40% izopropanol (0.05% DEA) în CO2 199 (±)-5,8-dicloro-7-(1-ciclopropil-2-hidroxietil)-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona J 435 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7.67 (s, 1H), 6.10 (s, 1H), 4.76 (s, 2H), 3.77-3.90 (m, 2H), 3.45-3.55 (m, 2H), 2.96 (t, J=6.24 Hz, 2H), 2.79-2.86 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.11-1.22 (m, 1H), 0.64-0.74 (m, 1H), 0.35-0.50 (m, 2H), 0.02-0.11 (m, 1H) amestec racemic 200 5,8-dicloro-7-{1-[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il]etil}-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A J 536 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.19 (s, 1H), 7.23 (d, J=3.2 Hz, 1H), 5.91 (s, 1H), 4.82-4.73 (m, 2H), 4.70-4.50 (m, 1H), 4.15-4.11 (m, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.70-3.66 (m, 1H), 3.54-3.40 (m, 4H), 2.92-2.86 (m, 3H), 2.64-2.58 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 1.84-1.62 (m, 2H), 1.50-1.40 (m, 1H), 1.26-1.19 (m, 5H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.201; 90% ee; timp de retenţie 26.03 min; coloană: Chiralpak AD-H 250×4.6mm I.D., 5u; fază mobilă: 50/50 hexan(0.1% DEA)/etanol(0.1% etanolamina) 201 5,8-dicloro-7-{1-[1-(hidroxiacetil)piperidin-4-il]etil}-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B J 536 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.03 (s, 1H), 7.23 (d, J=3.2 Hz, 1H), 5.92 (s, 1H), 4.82-4.73 (m, 2H), 4.70-4.50 (m, 1H), 4.14-4.11 (m, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.70-3.66 (m, 1H), 3.47-3.40 (m, 4H), 2.92-2.86 (m, 3H), 2.64-2.61 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 1.84-1.62 (m, 2H), 1.50-1.40 (m, 1H), 1.26-1.19 (m, 5H). Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer Ex.200; 97% ee; timp de retenţie: 51.00 min; coloană: Chiralpak AD-H 250×4.6mm I.D., 5um; fază mobilă: 50/50 hexan(0.1% DEA)/etanol(0.1% etanolamina); 202 (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[1-(4-metilpiperazin-1-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona K 477 1H RMN (400MHz, CDCl3) δ 7.72 (s, 1H), 5.93 (s, 1H), 4.84 - 4.71 (m, 2H), 4.01 (q, J=6.3 Hz, 1H), 3.63 (t, J=6.1 Hz, 2H), 2.90 (d, J=3.5 Hz, 2H), 2.42 (s.l., 6H), 2.35 (s, 3H), 2.28 (s, 6H), 1.79 (s.l., 2H), 1.24 (d, J=6.5 Hz, 3H) amestec racemic 203 5,8-dicloro-7-[(dimetilamino)(oxetan-3-il)metil]-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer A K 480 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.34 (br.s., 1H), 7.43 (s, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.61-4.88 (m, 4H), 4.48 (d, J=10.04 Hz, 1H), 4.25-4.34 (m, 1H), 4.21 (t, J=6.90 Hz, 1H), 3.82-3.95 (m, 3H), 3.49 (d, J=1.76 Hz, 3H), 2.89 (t, J=6.02 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.13 (s, 6H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.204; 88% ee; timp de retenţie 3.994 min; coloană: Chiralpak AD-3 100×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% izopropanol (0.05% DEA) în CO2 204 5,8-dicloro-7-[(dimetilamino)(oxetan-3-il)metil]-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona - Izomer B K 480 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 12.32 (s.l., 1H), 7.46 (s.l., 1H), 5.96 (s, 1H), 4.57-4.88 (m, 4H), 4.50 (s.l., 1H), 4.28 (t, J=6.90 Hz, 1H), 4.19 (d, J=6.27 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.52 (s.l., 3H), 2.88 (s.l., 2H), 2.37 (s.l., 4H), 2.15 (s.l., 5H) Un singur izomer, stereochimie absolută necunoscută; Enantiomer al Ex.203; 97% ee; timp de retenţie 4.325 min; coloană: Chiralpak AD-3 100×4.6mm I.D., 3um; fază mobilă: 5-40% izopropanol (0.05% DEA) în CO2 205 (±)-5,8-dicloro-2-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil]-7-[1-(piperazin-1-il)etil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona K 463 1H RMN (400MHz, CDCl3) δ 7.72 (s, 1H), 5.94 (s, 1H), 4.85 - 4.69 (m, 2H), 4.02 (q, J=6.4 Hz, 2H), 3.62 (t, J=6.4 Hz, 2H), 2.90 (s.l., 6H), 2.55 (s.l., 2H), 2.42 - 2.31 (m, 5H), 2.29 (s, 3H), 1.24 (d, J=6.5 Hz, 3H) amestec racemic

Date şi Testări Biologice

Purificarea TS şi mutantului EZH2 Y641N

TS şi mutantul EZH2 au fost purificaţi utilizând aceeaşi procedură. Genele pentru proteinele EZH2, EED, SUZ12, şi RBBP4 au fost claante în vectori pBacPAK9 (Clontech). RBBP4 a fost FLAG-marcată la capătul N-terminal. Exprimările baculovirusului acestor proteine au fost utilizate pentru a co-infecta celulele de insecte SF9. Peletele de celule de insecte au fost lizate într-o soluţie tampon ce conţine 25mM Tris pH8.0, 300mM NaCl, 0. 5mM TCEP, inhibitor de protează fără EDTA complet (Roche), 0.1% NP-40. Supernatantul din lizat a fost incubat cu răşină anticorp FLAG® M2 (Sigma). Răşina a fost spălată pe coloana cromatografică şi elută cu 0.2 mg/ml FLAG peptidă. Eluatul a fost incubat cu nucleazele omnicleave (Epicentre Technologies) la 4oC peste noapte, apoi concentrat şi încărcat într-o coloană Superdex 200 (GE Healthcare). Coloana Superdex 200 a fost elută cu 25mM Tris pH8.0, 150mM NaCl, 0.5mM TCEP. Fracţiile ce conţineau complexul PRC2 au fost extrase.

Protocolul Testării Nucleozomului: (Acelaşi protocol a fost folosit pentru testarea EZH2 Y6412N TS şi mutant)

A. Prepararea compusului

1. Se prepară10 mM de soluţie de stocare în 100 % DMSO din material solid

2. Se diluează serial 10 mM de soluţie de stocare fie 2 sau 3 ori în 100% DMSO pentru a genera compuşi pentru o doză cu răspuns de11 puncte

B. Prepararea reagentului

1. Se pregăteşte o soluţie tampon de testare 1x ce conţine 100 mM Tris pH 8.5, 4 mM DTT şi 0.01% Tween-20

2. Se diluează oligonucleozomii HeLa şi histona recombinantă H1 purificate (New England Biolabs) soluţie tampon de testare la 1.67x.

3. Se diluează complexul proteic PRC2 4 (EZH2, EED, SUZ12, RbAp48) la 3.5x în soluţie tampon de testare.

4. Se pregăteşte 10x 3H soluţie SAM în soluţie tampon de testare utilizând 0.94 µCi/godeu de SAM radioactiv (Perkin Elmer) şi suficient SAM neetichetat (Sigma) pentru 1.5 µM concentraţie finală.

5. Se diluează TCA la 20% în apă DI.

C. Reacţia enzimatică

1. Condiţiile reacţiei finale sunt complex proteic PRC2 4 la 4 nM când se utilizează EZH2 TS sau 6 nM când se utilizează Y641N mutant EZH2, 1.5 µM SAM, 25 µg/mL oligonucleozomii, 50 nM rH1 într-un volum de reacţie 50 µl.

2. Se adaugă 1 µl de compus diluat la placa de testare (plăci din polipropilen cu baza în formă de V cu 96 de godeuri) sau 1 µl de DMSO pentru godeurile de control.

3. Se adaugă 30 µl de nucleozomi pe placa de testare.

4. Se adaugă 14 µl de complex proteic fie PRC2 4 TS sau Y641N mutant pe placa de testare

5. Se adaugă 5 µl de 3H SAM pentu a porni reacţia.

6. Se opreşte reacţia după 60 minute cu adiţia de 100 µl de 20% TCA

7. Se transferă 150 µl de reactive diluată pe o placă de filtrare pregătită (Millipore #MSIPN4B10).

8. Se aplică vacuum asupra plăcii de filtrare pentru a filtra amestecul de reacţia prin membrană.

9. Se spală placa de filtrare cu 5x200 µl de PBS, se usucă şi uscare într-un cuptor timp de 30 minute.

10. Se adaugă 50 µl de fluid de scintilaţie microscint-20 (Perkin Elmer) la fiecare godeu, se aşteaptă 30 minute şi se numără pe un contor de scintilaţie lichidă.

11. Unii compuşi au fost testaţi sub condiţii SAM ridicate. În acest caz, testul este precum este descis mai sus cu excepţia faptului că reacţia conţine 15 uM SAM. SAM este adăugat la test ca un depozit 3.3x cu un total de 14.5 uCi/godeu.

D. Analiza datelor.

1. Valorile IC50 au fost determinate prin potrivirea datelor într-o ecuaţie cu 4 parametri IC50 utilizând programe de calculator de potrivire a curbei de proprietate.

2. Pentru compuşii testaţi sub condiţii SAM ridicate, valorile Ki app s-au obţinut prin potrivirea curbei de răspuns la dozaje la un model pentru inhibiţia competitivă utilizând programe de calculator de potrivire a curbei de proprietate.

Prepararea oligonucleozomilor HeLa:

Reagenţi

Pelelet de celule: 15L HeLa S3 (Accelgen) + 6L HeLa S3 (proprii)

Mnase (Worthington Biochemicals)

Echipamente

SW-28 Rotor

Omogenizator Dounce / B Pistil

Soluţii tampon

Lizat: 20 mM Hepes pH 7.5, 0.25M Sucroză, 3 mM MgCl2, 0.5% Nonidet P-40, 0.5 mM TCEP, 1 Tabletă de protează Roche

B: 20 mM Hepes pH7.5, 3 mM MgCl2, 0.5mM EDTA, 0.5 mM TCEP, 1 Tabletă de protează Roche

MSB: 20 mM Hepes pH7.5, 0.4 M NaCl, 1mM EDTA, 5% v/v Glicerină, 0.5 mM TCEP, 0. 2mM PMSF

LSB: 20 mM Hepes pH7.5, 0.1M NaCl, 1mM EDTA, 0.5mM TCEP, 0.2 mM PMSF

NG: 20 mM Hepes pH7.5, 1 mM EDTA, 0.4m NaCl, 0.2 mM PMSF, 0.5 mM TCEP

Depoazitare: 20 mM Hepes pH7.5, 1mM EDTA, 10% Glicerină, 0.2 mM PMSF, 0.5 mM TCEP

Protocol

A. Nuclee

Se resuspendă ~10L peletă în 2x40 mL lizat utilizând omogenizator dounce

Se roteşte 3000xg 15'

Se repetă 2

Se resuspendă peletul în 2x40 mL B

Se roteşte 3000xg 15'

B. Resuspendarea Nucleelor

Se resuspendă peletul în 2x40 mL MSB. Spin 5000xg 20'

Se resuspendă peletul în 2x15 mL HSB

Se extrag şi omogenizează 40 Lovituri pentru a împărţi AND-ul

Se peletează 10000xg 20'

Se dializează O/N 4ºC în LSB cu excepţia Lotului A care a fost dializat LSB la 50nM NaCl pentru 3 ore

C. Digestia Mnazei

Testarea digestiei Mnazei (200ul)

1. Se încălzeşte 37ºC pentru 5 minute

2. Se adaugă CaCl2 la 3mM şi se adaugă 10U de Mnază

3. La 37ºC timp de 30 de minute de ia câte o probă de 25µL fiecare 5 minute

4. Se procesează reacţia cu 1 µL 0.5M EDTA, 40 µL H2O, 15 µL 10% SDS, 10 µL 5M NaCl, şi 100 µL vortexare cu fenol-cloroform după fiecare adiţie

5. Se învârte 5' 13k

6. Se pornesc 5 µL de fază apoasă 1% gel de agaroză

7. Se notează timpul în care se obţin fragmentele ~2kb

8. Se selectează 15 minute pentru A & B şi 20 minute pentru C & D pentru intensificare

Se adăugă NaCl la 0.6M

D. Gradient Zaharoză 1

Se toarnă 6x 34 mL de gradient de la 5 la 35% zaharoză în NG utilizând un purificator AKTA în 38.5 mL tubuti polialomer

Se conduc ~4.0mL deasupra digestiei MN1

Se roteşte 26k 16 ore 4ºC

Se iau fracţii de 2 mL de deasupra

Se pun pe Pagina de Gel

Se dializează fracţiile 7-14 0/N 4ºC în 4L LSB cu excepţia Lotului D care a fost 2x 2 ore

Se repetă 3X

E. Finalul

Se extrag toate şi se concentrează în Amicon (oarecum tulbure)

Se adăugă 10% Glicerină

Se torc/răsucesc 5K 15'

1.8 mg/mL la 80 mL pentru 144mg Total

Activitate Biologică

Activitatea biologică a exemplelor selectate în testarea nucleozomului EZH2 sunt prezenate în Tabelele 3. Datele sunt prezentate ca valoarea IC50 (µM) sau Ki app (µM) a Y641N EZH2 TS şi Mutant aşa cum este indicat.

Tabel 2.

Nr. Ex. Testarea nucelozomului EZH2 TS IC50 (µM) Testarea nucelozomului EZH2 TS (10X SAM) Ki (µM) Testarea nucelozomului EZH2 Mutant Y641N IC50 (µM) 1 0.001 0.003 2 0.002 0.004 3 0.066 0.302 4 0.316 1.954 5 0.033 0.189 6 0.019 0.136 7 0.171 1.617 8 0.652 5.016 9 0.005 0.035 10 0.326 1.980 11 0.038 0.174 12 0.004 0.016 13 0.003 0.018 14 0.008 0.040 15 0.003 0.019 16 0.004 0.040 17 0.035 0.125 18 0.126 0.115 0.995 19 0.013 0.010 0.132 20 0.011 0.053 21 0.015 0.109 22 7.817 95.165 23 0.009 0.067 24 0.004 0.008 25 0.084 0.693 26 0.027 0.057 27 0.037 0.300 28 0.126 1.894 29 0.017 0.107 30 0.004 0.020 31 0.004 0.006 32 0.093 1.133 33 0.012 0.070 35 0.002 0.000 0.002 36 0.105 0.136 0.443 37 0.001 0.002 38 0.378 0.740 39 0.040 0.242 40 0.006 0.024 41 0.012 0.082 42 0.012 0.102 43 0.039 0.348 44 0.022 0.144 45 0.103 0.345 46 0.121 0.423 47 0.138 0.847 48 0.008 0.050 49 0.215 0.996 50 0.077 0.129 51 0.000 0.002 52 0.298 1.038 53 0.001 0.017 54 0.004 0.012 55 0.162 0.843 56 0.000 0.004 57 0.406 1.352 58 0.057 0.513 59 0.025 0.155 60 0.031 0.180 61 0.031 0.127 62 0.035 0.262 63 0.528 4.104 64 0.007 0.043 65 0.006 0.047 66 0.009 0.081 67 1.599 19.543 68 0.007 0.074 69 0.417 4.308 70 0.000 0.006 71 0.000 0.003 72 0.041 0.128 73 0.000 0.002 74 0.005 0.051 75 0.002 0.020 76 0.005 0.043 77 0.022 0.132 78 0.004 0.040 79 0.017 0.133 80 0.001 0.007 81 0.0002 0.003 82 0.006 0.131 83 0.0004 0.004 84 0.0002 0.002 85 0.052 0.238 86 0.061 0.637 87 0.00001 0.002 88 0.028 0.122 89 0.008 0.088 90 0.459 5.634 91 0.001 0.023 92 0.001 0.009 93 0.159 1.332 94 0.323 4.870 95 0.001 0.012 96 0.204 2.99 97 0.003 0.027 98 1.22 8.72 99 0.003 0.017 100 0.309 3.73 101 0.0003 0.007 102 0.018 0.178 103 0.052 0.320 104 0.673 7.77 105 0.0008 0.013 106 0.0006 0.008 107 0.0019 0.018 108 0.0017 0.016 109 0.086 0.911 110 0.00004 0.002 111 0.00002 0.001 112 0.021 0.125 113 0.0008 0.005 114 0.016 0.152 115 0.0003 0.005 116 0.071 0.340 117 0.0004 0.005 118 0.0001 0.003 119 0.015 0.100 120 0.002 0.014 121 0.029 0.255 122 0.073 0.236 123 0.0002 0.005 124 0.058 0.892 125 0.0009 0.008 126 0.056 0.165 127 0.0002 0.0022 128 0.184 1.167 129 0.0008 0.008 130 0.220 1.99 131 0.0007 0.005 132 0.001 0.013 133 0.837 8.635 134 0.131 1.926 135 0.002 0.014 136 0.0001 0.003 137 0.133 1.166 138 0.046 0.249 139 0.0005 0.0085 140 0.103 1.17 141 0.002 0.016 142 0.008 0.109 143 0.276 1.77 144 0.0002 0.005 145 0.070 0.272 146 0.0001 0.0035 147 0.128 0.543 148 0.056 0.439 149 0.539 2.267 150 0.0001 0.003 151 0.0008 0.009 152 0.0003 0.004 153 0.416 3.10 154 0.0446 0.553 155 0.0013 0.027 156 0.375 1.711 157 0.0006 0.009 158 0.578 5.13 159 0.0016 0.017 160 0.021 0.086 161 0.0004 0.004 162 0.148 2.971 163 0.0004 0.004 164 0.200 1.971 165 0.0003 0.005 166 0.0002 0.002 167 0.062 0.850 168 0.0007 0.008 169 0.0151 0.070 170 0.0008 0.014 171 0.328 2.63 172 0.0008 0.012 173 0.016 0.206 174 0.0006 0.013 175 0.085 1.00 176 0.0003 0.005 177 0.049 0.282 178 0.003 0.020 179 0.001 0.009 180 0.390 2.16 181 0.001 0.041 182 2.23 9.15 183 0.056 0.517 184 0.0006 0.005 185 0.001 0.012 186 0.014 0.240 187 0.001 0.010 188 0.014 0.151 189 0.0007 0.006 190 0.016 0.100 191 0.0003 0.005 192 0.117 0.605 193 0.001 0.010 194 0.044 0.309 195 0.046 0.216 196 0.0002 0.003 197 0.033 0.062 198 0.00001 0.001 199 0.003 0.037 200 0.0001 0.002 201 0.007 0.037 202 0.016 0.207 203 0.055 0.204 204 0.002 0.062 205 0.0007 0.008

Toate publicaţiile şi cererile de brevet citate în specificaţie sunt incorporate aici prin referinţă în întregime. Cu toate că invenţia descrisă anterior a fost descrisă într-un anumit nivel de detalizare prin intermediul ilustrărilor şi exemplelor, va fi foarte clar specialiştilor în domeniu în lumina învâţămintelor acestei invenţii că anumite schimbări şi modificări pot fi făcute fără a se abate de la spiritul sau domeniul revendicărilor însoţitoare.

1. WO 2012/142513 A1 2012.10.18

Claims (24)

1. Un compus cu formula (I): (I) sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, unde: R1 este selectat din grupul ce constă din F, C1-C4 alchil, C1-C4 alcoxi, C(O)R5, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri şi heteroaril cu 5-12 membri, în care fiecare C1-C4 alchil sau C1-C4 alcoxi menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6, şi fiecare C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7; R2 este H, F sau C1-C4 alchil; L este o legătură sau o C1-C4 alchilenă; R3 este selectat din grupul ce constă din C1-C4 alchil, C1-C4 alcoxi, OH, CN, C(O)R8, COOR9, NR10R11, OR12, C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri şi heteroaril cu 5-12 membri, unde fiecare C1-C4 alchil sau C1-C4 alcoxi menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6, şi fiecare C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7; R4 este H, halo sau C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6; R5 este C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14; fiecare R6 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi; fiecare R7 este independent C1-C4 alchil, OH, F, CN, C1-C4 alcoxi, =O, sau C(O)R13; R8 este C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14; R9 este H sau C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14; R10 şi R11 sunt independent H sau C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R14; R12 este selectat din grupul ce constă din C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri şi heteroaril cu 5-12 membri, unde fiecare C3-C8 cicloalchil, heterociclil cu 3-12 membri sau heteroaril cu 5-12 membri menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7; fiecare R13 este independent C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R15; fiecare R14 şi R15 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi; şi X şi Z sunt independent C1-C4 alchil, C1-C4 fluoroalchil, C1-C4 alcoxi sau C1-C4 fluoroalcoxi.

2. Compusul sau sarea conform revendicării 1, unde R2 este H.

3. Compusul sau sarea conform revendicării 1 sau 2, unde R4 este Cl, F, Br sau CH3.

4. Compusul sau sarea conform revendicării 1, 2 sau 3, unde X este CH3, OCH3 sau OCHF2 şi Z este CH3.

5. Compusul sau sarea conform oricărei din revendicările 1 - 4, unde R1 este C1-C4 alcoxi substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6.

6. Compusul sau sarea conform revendicării 5, unde C1-C4 alcoxi menţionat este OCH3.

7. Compusul sau sarea conform oricărei din revendicările 1 - 4, unde R1 este C1-C4 alchil substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6.

8. Compusul sau sarea conform oricărei din revendicările 1 - 7, unde L este o legătură şi R3 este heterociclil cu 3-12 membri substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7.

9. Compusul sau sarea conform revendicării 8, unde heterociclil cu 3-12 membri menţionat este selectat din grupul ce constă din oxetanil, tetrahidrofuranil şi tetrahidropiranil, fiecare substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7.

10. Un compus cu formula (I-A):

(I-A) conform revendicării 1, sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, unde: R1 este C1-C4 alcoxi; R2 este H; L este o legătură; R3 este heterociclil cu 3-12 membri, substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7; R4 este H sau Cl; fiecare R7 este independent C1-C4 alchil, OH, F, CN, C1-C4 alcoxi, =O, sau C(O)R13; fiecare R13 este independent C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R15; fiecare R15 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi; şi X şi Z sunt independent C1-C4 alchil, C1-C4 fluoroalchil, C1-C4 alcoxi sau C1-C4 fluoroalcoxi.

11. Compusul sau sarea conform revendicării 10, unde R3 este heterociclil cu 3-12 membri selectat din grupul ce constă din oxetanil, tetrahidrofuranil şi tetrahidropiranil, fiecare substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7.

12. Un compus, conform revendicării 1, care este 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidro-piridin-3-il)metil]-7-[(R)-metoxi(oxetan-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona, sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia.

13. Un compus, conform revendicării 12, care este 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidro-piridin-3-il)metil]-7-[(R)-metoxi(oxetan-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona.

14. Un compus, conform revendicării 1, care este 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidro-piridin-3-il)metil]-7-[metoxi(oxetan-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona, sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia.

15. Un compus, conform revendicării 1, care este 5,8-dicloro-2-[(4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidro-piridin-3-il)metil]-7-[(S)-metoxi(oxetan-3-il)metil]-3,4-dihidroizochinolin-1(2H)-ona, sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia.

16. Un compus cu formula (III): (III) sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, unde: R1 şi R3 luaţi împreună formează un heterociclil cu 3-12 membri substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7; R2 este H, F sau C1-C4 alchil; R4 este H, halo sau C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R6; fiecare R6 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi; fiecare R7 este independent C1-C4 alchil, OH, F, CN, C1-C4 alcoxi, =O, CHO, C(O)R13, SO2R13 sau heterociclil cu 3-6 membri; fiecare R13 este independent C1-C4 alchil, unde fiecare C1-C4 alchil menţionat este substituit opţional cu unul sau mai mulţi R15; fiecare R15 este independent OH, F, CN sau C1-C4 alcoxi; şi X şi Z sunt independent C1-C4 alchil, C1-C4 fluoroalchil, C1-C4 alcoxi sau C1-C4 fluoroalcoxi.

17. Compusul sau sarea conform revendicării 16, unde R1 şi R3 luaţi împreună formează un heterociclil cu 3-12 membri selectat din grupul ce constă din azetidinil, pirolidinil, piperidinil şi homopiperidinil, fiecare substituit opţional cu unul sau mai mulţi R7.

18. Compusul sau sarea conform revendicării 17, unde R7 este CHO, C(O)R13 sau SO2R13 şi fiecare R13 este independent C1-C4 alchil substituit opţional cu unul sau mai mulţi R15.

19. O compoziţie farmaceutică, care cuprinde un compus conform oricărei din revendicările 1 - 18, sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, şi un purtător sau excipient farmaceutic acceptabil.

20. O metodă pentru tratamentul creşterii anormale a celulelor la un subiect, care include administrarea la subiect a unei cantităţi terapeutic acceptabile a unui compus conform oricărei din revendicările 1 - 18, sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia.

21. Metodă, conform revendicării 20, unde creşterea anormală a celulelor este cancer.

22. Metodă, conform revendicării 20 sau 21, unde subiectul este un om.

23. Un compus, conform oricărei din revendicările 1 - 18, sau o sare farmaceutic acceptabilă a acestuia, pentru utilizare în tratamentul creşterii anormale a celulelor la un subiect.

24. O combinaţie a compusului, conform oricărei din revendicările 1-18 sau a unei sari farmaceutic acceptabile a acestuia şi a unui sau mai multor agenţi anti-cancer suplimentari.