NO314588B1 - HIV-peptider, antigener, vaksinesammensetning, immunoassay- testsett og en fremgangsmåte for å påvise antistoffer indusert av HIV - Google Patents
HIV-peptider, antigener, vaksinesammensetning, immunoassay- testsett og en fremgangsmåte for å påvise antistoffer indusert av HIV Download PDFInfo
- Publication number
- NO314588B1 NO314588B1 NO20004413A NO20004413A NO314588B1 NO 314588 B1 NO314588 B1 NO 314588B1 NO 20004413 A NO20004413 A NO 20004413A NO 20004413 A NO20004413 A NO 20004413A NO 314588 B1 NO314588 B1 NO 314588B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- xaa
- seq
- ser
- gly
- leu
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims description 103
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims description 52
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims description 33
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims description 33
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims description 33
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims description 33
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 10
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 title claims description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 5
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 40
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 26
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 19
- 101710147327 Calcineurin B homologous protein 1 Proteins 0.000 claims description 18
- 101710205625 Capsid protein p24 Proteins 0.000 claims description 18
- 101710177166 Phosphoprotein Proteins 0.000 claims description 18
- 101710149279 Small delta antigen Proteins 0.000 claims description 18
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 claims description 17
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 claims description 16
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 16
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 16
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 13
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 claims description 10
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000000470 constituent Substances 0.000 claims description 5
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 claims description 5
- 108010028921 Lipopeptides Proteins 0.000 claims description 4
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000002502 liposome Substances 0.000 claims description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 4
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 claims description 3
- 102000004457 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 claims description 3
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 3
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 claims description 3
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 claims description 3
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 claims description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 claims description 3
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 3
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 2
- BBBXWRGITSUJPB-YUMQZZPRSA-N Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O BBBXWRGITSUJPB-YUMQZZPRSA-N 0.000 claims description 2
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000000218 acetic acid group Chemical group C(C)(=O)* 0.000 claims 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 34
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 19
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 18
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 18
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 15
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 15
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 15
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 12
- 238000004989 laser desorption mass spectroscopy Methods 0.000 description 12
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 12
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 11
- 238000011161 development Methods 0.000 description 11
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 9
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 9
- 101710104359 F protein Proteins 0.000 description 6
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 6
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 6
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 6
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 description 6
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 5
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 4
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 4
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 4
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 4
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 4
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 3
- 101710177291 Gag polyprotein Proteins 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101710125418 Major capsid protein Proteins 0.000 description 3
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 3
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 3
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 3
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 3
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 3
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 229940021993 prophylactic vaccine Drugs 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 229940021747 therapeutic vaccine Drugs 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.C=CC1=CC=CC=C1C=C CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 229940033330 HIV vaccine Drugs 0.000 description 2
- 108010048209 Human Immunodeficiency Virus Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 2
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 2
- 210000001106 artificial yeast chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 108700004025 env Genes Proteins 0.000 description 2
- 101150030339 env gene Proteins 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 2
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 235000012976 tarts Nutrition 0.000 description 2
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 2
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 2
- ANAZDOWEOOFEET-UHFFFAOYSA-N (4-hydroxyphenyl) [4-(3-oxo-1h-2-benzofuran-1-yl)phenyl] hydrogen phosphate Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1OP(O)(=O)OC1=CC=C(C2C3=CC=CC=C3C(=O)O2)C=C1 ANAZDOWEOOFEET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- DHBXNPKRAUYBTH-UHFFFAOYSA-N 1,1-ethanedithiol Chemical compound CC(S)S DHBXNPKRAUYBTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 231100000699 Bacterial toxin Toxicity 0.000 description 1
- 241000588832 Bordetella pertussis Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 241000178270 Canarypox virus Species 0.000 description 1
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 206010008631 Cholera Diseases 0.000 description 1
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 description 1
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 1
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 description 1
- 239000004593 Epoxy Substances 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 108700039887 Essential Genes Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 101710114816 Gene 41 protein Proteins 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102100034353 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Malonic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 241000237988 Patellidae Species 0.000 description 1
- 208000000474 Poliomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 1
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101800001690 Transmembrane protein gp41 Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000000688 bacterial toxin Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000006229 carbon black Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000003749 cleanliness Effects 0.000 description 1
- 230000004186 co-expression Effects 0.000 description 1
- 230000002281 colonystimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000172 cytosol Anatomy 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000008482 dysregulation Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 108010078428 env Gene Products Proteins 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 108700004026 gag Genes Proteins 0.000 description 1
- 101150098622 gag gene Proteins 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 108091005601 modified peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 108010032806 molgramostim Proteins 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 230000016379 mucosal immune response Effects 0.000 description 1
- 125000001446 muramyl group Chemical group N[C@@H](C=O)[C@@H](O[C@@H](C(=O)*)C)[C@H](O)[C@H](O)CO 0.000 description 1
- JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N n-Triacontane Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 125000001312 palmitoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000009696 proliferative response Effects 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 231100000654 protein toxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- DCKVNWZUADLDEH-UHFFFAOYSA-N sec-butyl acetate Chemical compound CCC(C)OC(C)=O DCKVNWZUADLDEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 229940032094 squalane Drugs 0.000 description 1
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 1
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 125000004213 tert-butoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(O*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 229940125575 vaccine candidate Drugs 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55522—Cytokines; Lymphokines; Interferons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/57—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
- C12N2740/16211—Human Immunodeficiency Virus, HIV concerning HIV gagpol
- C12N2740/16222—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Oncology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Extraction Or Liquid Replacement (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
Følgende oppfinnelse omhandler nye peptider basert på konserverte deler av HIV gag p17 og p24, antigen i fri form eller bundet til bærer omfattende minst ett av de nevnte peptidene, vaksinepreparater som inneholder minst ett av antigenene, immunoassay-testsett og en fremgangsmåte for å detektere antistoffer, fremkalt av humant immunsvikt virus (HIV) eller HIV-spesifikke peptider ved å bruke slike antigener.
Det er et presserende behov for å kontrollere den globale HIV-epidemien, og utvikling av en vaksine mot HIV er en av de viktigste oppgaver i AIDS-forskning. Prinsipielt sett skal en vaksine aktivere antigenpresenterende celler, omgå genetiske restriksjoner i T-celleresponser og generere T- og B-hukommelses-celler. Variabiliteten i den virale populasjonen skaper ytterligere vanskeligheter i å finne en effektiv HIV-vaksine. Et gjennombrudd i de pågående forsøk på å utvikle en vaksine mot AIDS har hittil ikke blitt rapportert. Det er nå ålment akseptert at indusering av antigenspesifikk humoral og cellemediert immunitet er vesentlig for utviklingen av en effektiv profylaktisk eller terapeutisk vaksine. Alle tre armer av immunsystemet inklusive nøytraliserende antistoffer, CD8+CTL og T-hjelper-1 (Th1) -celler kan måtte være nødvendig for beskyttende immunitet mot HIV. Det er kjent at CTL kan klarere andre virusinfeksjoner (Ada, Immunol. Cell Biol., 72:447-454,1994) og at CTL kan lysere infiserte målceller tidlig i infeksjonen før viralt avkom kan produseres og frigjøres ved cellelysering, Ada et al., supra. Fokus hittil har konsentrert seg om utvelgelse av antigen, samt design og evaluering av ulike adjuvanser. Antigenene som har vært brukt i ulike in vitro og in wVo-studier har vært alt fra urensede proteiner til forskjellige syntetiske peptider fra mange av HIV proteinene. Et stort antall studier har blitt utført på V3-løkken av gp120. Indusering av både B- og T-celle responser har blitt observert, imidlertid har det blitt rapportert fra en in wfro-studie at et peptid fra den konserverte delen av gp41 har ført til forsterket infeksjon ( Bell S.J., et al., Clin. Exp. Immunol., 87 (1): 37-45, 1992).
Naturlig forekommende HIV-sekvenser i vaksinekandidater er ikke i stand til å stimulere en stabil immunrespons på grunn av virusets iboende evne til å skjule seg ved å forandre fremtoningen av de presenterte epitopene på celleoverflaten til infiserte celler. Immunsystemet narres til å tro at visse aminosyrekombinasjoner er relevante samtidig som de essensielle aminosyrene skjules.
Et nylig studium av antistoff-titer mot Gag p24 proteinet har vist at sakte progresjon mot utvikling av AIDS er assosiert med høye titere, mens rask progresjon mot utvikling av AIDS er assosiert med lave titer. Det er vist at personer med lave p24 antistoff-titer utvikler AIDS signifikant raskere enn personer med høye p24 antistoff-titer (Zwart G., et al. Virology, 201, p. 285-93, June 1994), noe som indikerer at Gag og p24 i særdeleshet kan spille en nøkkelrolle i å kontrollere utviklingen av AIDS.
Tidligere kjent teknikk som Troung et al., J. Medical Virology 51 (1997), s. 145-151, WO 98/29551, Chong et al., Int. J. Peptide Protein Res. 41 (1992), s. 21-27, US patent nr. 5 972 339 og WO 91/13360 omhandler alle deler av HIV-proteiner, enten i form av peptider, eller DNA-plasmider som koder for slike, som utgangs-punkt for utvikling av HIV-vaksine, testsett eller lignende. Imidlertid, til forskjell fra foreliggende oppfinnelse som vedrører peptider med en aminosyresekvens som inneholder modifikasjoner sammenlignet med nativ sekvens, er det kun native sekvenser som tidligere er benyttet, for eksempel HX-B2.
Nye HIV 24 peptider er beskrevet i WO91/13360, hvor peptidene er brukt i en metode for å skille mellom en falsk og en sann diagnostisert HIV.-positiv serumprøve.
Johnson R.P., et al., The Journal of Immunology, Vol.147, p.1512-1521, No.5, September 1,1991 beskriver en analyse av høyspesifisiteten til Gag-spesifikke CTL-responser i tre HIV-1 seropositive indivder. De Gag-spesifikke CTL-responsene ble funnet å være dannet av CD3+ CD8+-lymfocytter som var HLA klasse l-begrenset. Goulder P.J.R. et.al., Journal of Virology, Vol. 74, p.5679-5690, No 12, June 2000 har studert CTL responser fra ulike deler av p17 og p24 fra HIV i ulike populasjoner. Funnene viser at visse immunodominante regioner eksisterer, men små ulikheter i aminosyre sammensetning kan imidlertid føre til store forskjeller i respons.
EP-A-0 356 007 redegjør for antigene determinanter, spesielt angår den syntetiske polypeptidsekvenser som er beslektet med proteiner presentert i HlV-1 og som kan bli brukt som en basis for en potensiell vaksine mot AIDS.
Rosenberg E.S. et al., Science, Vol.278, 21 November 1997, p.1447-1450 beskriver at virus spesifikke CD4+ T-hjelpelymfocytter er kritisk for vedlikehold av effektiv immunitet i en rekke kroniske virusinfeksjoner, men er karakteristisk ikke-påvisbare i kronisk human immunsviktvirus type 1 (HIV-1) -infeksjon. HIV-1-spesifikke proliferative responser mot p24 var inverst relatert til virusmengde. De konkluderer at HIV-1-spesifikke hjelpeceller sannsynlig vis vil være viktige i immunterapeutiske intervensjoner og vaksineutvikling.
EP 0 230 222, EP 0 270 114, DE 37 11 016 og GB 2 188 639 alle i navnet F. Hoffmann-La Roche & Co. Aktiengesellschaft omhandler rekombinant ekspresjon og rensing av et HTLVIII Gag/Env-genprotein eller-fusjonsproteiner. Proteinene bestående av native sekvenser kan renses til homogenitet og brukes som en basis for diagnostiske tester for deteksjon av antistoffer mot virus assosiert med AIDS. Gag/Env proteinet kan også bli utformet til bruk som vaksine for beskyttelse mot AIDS gjennom profylaktisk immunisering.
Fra et diagnostisk og terapeutisk synspunkt er et hovedproblem med å bruke p24 som en del av en test eller en terapi knyttet til det høye antall epitoper på p24 som stimulerer produksjon av et stort antall antistoffer med dårlig spesifisitet, og som gjennom repeterte "boostringer" med potensielt muterte sekvenser kan skape autoantistoffer ("Autoantibodies to the alfa/beta T-cell receptors in HIV infection; dysregulation and mimicry". Lake D.F., et al., Proe. Nati. Acad. Sei. USA, (23): 10849-53, Nov. 8,1994). Videre er det rapportert at p24 antistoff-titer ofte ikke når de samme høye nivåene som overflateproteinene (Gp120 and Gp41). Vanligvis blir antistoffer mot p24 utviklet i den svært tidlige fasen av infeksjonen, men titeret stabiliseres ganske raskt etter den initielle fasen. Senere synker p24-titeret gradvis mens det motsatte er tilfelle med Gp160. Disse funnene kan også sees i relasjon til nye rapporter som viser at cytotoksisk T-celleaktivitet er motvirket av naturlige HIV-1 Gag varianter (Klenerman P., et al., Nature, 2:369 (6479), p. 355, 2 June 1994). Dette kan være en av grunnene til hvorfor en rask stabilisering av p24-titer sees og hvorfor den senere begynner å avta. Basert på de overstående bakgrunnsdata bestemte vi oss for å utforske mulighetene for å designe nye syntetiske peptider som kan etterape p17 og p24 epitoper uten å motvirke den cytotoksiske T-celleaktiviteten, i den hensikt å møte behovet for en effektiv profylaktisk eller terapeutisk vaksine.
Sekvensen av p17 identifisert som en mulig mal for utvikling av peptider som kan bringe frem CTL og antistoff-responser er publisert av Korber B., et al., Human Retroviruses and AIDS 1999 Eds.Theoretical Biology and Biophysics Group, Los Alamos National Laboratory, Los Alamos, NM. Den identifiserte aminosyresekvensen er lokalisert mellom aminosyre 33 og 53, jevnfør tabell 1: Både énbokstavs- og trebokstavskodene som definerer aminosyrene i sekvensene angitt i hele dette dokumentet følger internasjonale standarder og er angitt i lærebøker, for eksempel Lehninger A.L., «Principles of Biochemistry», Worth Publishers Inc., New York, 1982. Aminosyrene angitt til høyre forden andre kolonnen represenerer naturlig variasjon av sekvensen. En forandring i den totale ladningen til en epitop ved endring av aminosyrer kan gi en signifikant forbedring av immunogenisiteten. Endringene gir en mulig konformasjonsforandring fra den originale heliksstrukturen til en arkstruktur, som eksponerer epitopene til immunsystemet på en forskjellig måte og forventet i større grad.
For videre å øke antallet T-celle epitoper og redusere sannsynligheten for utvikling av unnslippingsmutanter innen Gag proteinet ble ytterligere tre peptidsekvenser fra p24 basert på de følgende tre sekvenser fra områdene 133-158,178-199 og 233-251, publisert i Human Retroviruses and AIDS 1999; "A Compilation and Analysis of Nucleic Acid and Amino Acid Sequences". Eds.Theoretical Biology and Biophysics Group, Los Alamos National Laboratory, Los Alamos, jevnfør tabellene 2-4 :
Et stort antall modifiserte peptider har blitt syntetisert for å bestemme unike sekvenser som både er spesifikke og sensitive mot HIV-1.
BESKRIVELSE AV OPPFINNELSEN
Peptidene har i henhold til oppfinnelsen sitt opphav i fire ulike konserverte områder på HIV-1 Gag proteinene p17 og p24 som, ifølge beskrivelsen over, har egenskapene tii å opprettholde unikheten av HIV-1-epitopene. I tilllegg besitter de nye peptidene i henhold til oppfinnelsen ingen kjente cytotoksisk T-lymfocytt (CTL) antagoniserende effekter og skal ha minst én potensiell CTL-epitop.
Peptidene som ifølge oppfinnelsen møter de over nevnte kriteriene er avledet fra HIV-1 Gag p17 og p24 protein og kjennetegnes ved at de omfatter minst én aminosyresekvens som innehar modifikasjoner i forhold til den naturlig forekommende sekvensen og er valgt fra gruppene av aminosyresekvenser:
hvor aminosyrene i kjeden kan ha følgende betydninger; Xaa i posisjon 1 av peptidderivatet er His, Lys eller Arg,
Xaa i posisjon 2 er Ile, Leu, Val eller Met,
Xaa i posisjon 3 er Ile eller Val,
Xaa i posisjon 4 er Trp eller Tyr,
Xaa i posisjon 5 er Ala eller Leu,
Xaa i posisjon 6 er Ser, Thr, Arg eller Asn,
Xaa i posisjon 7 er Arg, eller Ser,
Xaa i posisjon 11 er Arg, Lys, Gly eller Asn,
Xaa i posisjon 12 er Phe, Ser eller Tyr
Xaa i posisjon 13 er Ala, Thr eller Ser
Xaa i posisjon 14 er Val, Leu, Ile eller Cys,
Xaa i posisjon 15 er Asn, Asp eller Ser,
Xaa i posisjon 16 er Pro, Arg eller Ser,
Xaa i posisjon 17 er Gly, Ser, Ala, Asp eller Asn
Xaa i posisjon 18 er Leu eller Phe,
Xaa i posisjon 19 er Leu eller Met,
Xaa i posisjon 20 er Glu, Gly, Asp eller Ile,
Xaa i posisjon 21 er Thr, Ser eller Ala
peptidet omfatter minst seks påfølgende aminosyrer av sekvensen av SEKV ID NR : 1,
hvor aminosyrene av kjeden har følgende betydning; Xaa i posisjon 1 er Pro, Tyr eller Phe Xaa i posisjon 2 er Ile, Val eller Leu,
Xaa i posisjon 3 er Ile, Ala, Val, Met eller Leu Xaa i posisjon 4 er Gin, Ser, Thr eller Val
Xaa i posisjon 5 er Asn, Asp eller Thr
Xaa i posisjon 6 er Ile, Ala, Leu eller Met
Xaa i posisjon 7 er Gin, Glu Lys eller Gly
Xaa i posisjon 9 er Gin eller Ile
Xaa i posisjon 13 er utelatt
Xaa i posisjon 14 er Ala, Ser, Asn, Val eller Pro Xaa i posisjon 15 er Ile, Leu, Met eller Val,
Xaa i posisjon 16 er Ser eller Thr
Xaa i posisjon 17 er Pro eller Ala,
Xaa i posisjon 18 er Arg eller Lys,
Xaa i posisjon 19 er Thr eller Ser
Xaa i posisjon 20 er Leu eller Ser
Xaa i posisjon 21 er Asn, Phe eller Val,
Xaa i posisjon 23 er Trp, Tyr, Gly eller ingen
Xaa i posisjon 24 er Val, Leu, Gly eller ingen
Xaa i posisjon 25 er Lys, Arg, Gly eller ingen
Xaa i posisjon 26 er Val, Ala, Cys, Gly eller ingen hvor sekvensen av SEKV ID NR : 4 omfatter minst seks etterfølgende aminosyrer og -Z- er valgfri og har betydningene PEG, modifisert PEG og/eller [Gly]n, der n = 1,2 eller 3,
hvor Xaa i posisjon 1 er Tyr, Trp, Phe eller Gly Xaa i posisjon 3 er Thr, Ala, Val, Ile eller Leu Xaa i posisjon 4 er Pro eller Ser
Xaa i posisjon 5 er Gin, His, Gly, Thr, Ser eller Tyr
Xaa i posisjon 7 er Leu, Ile eller Val
Xaa i posisjon 8 er Asn eller Tyr
Xaa i posisjon 9 er Thr, Met, Leu eller Ala Xaa i posisjon 12 er Ser, Thr eller Asn
Xaa i posisjon 13 er Thr, Ile, Val eller Ala
Xaa i posisjon 14 er Val eller Ile
Xaa i posisjon 15 er Gly eller ingen
Xaa i posisjon 16 er Gly eller ingen
Xaa i posisjon 19 er Ala eller Gly
Xaa i posisjon 20 er Ala
Xaa i posisjon 21 er Met, Leu, Cys eller ingen
Xaa i posisjon 22 er Gin, Glu, His, Gly eller ingen hvor sekvensen av SEKV ID NR : 9 består av minst seks etterfølgende aminosyrer og broen -Z- er valgfri og har betydningene PEG, modifisert PEG og/eller [Gly]„, dem = 1,2 eller 3,
hvor Xaa i posisjon 1 er Trp eller Tyr
Xaa i posisjon 2 er Ser eller Ala
Xaa i posisjon 7 er Thr, Ala eller Ser
Xaa i posisjon 8 er Ser eller Thr
Xaa i posisjon 9 er Ser eller Thr
Xaa i posisjon 11 er Leu, Pro, Val eller Gin Xaa i posisjon 12 er Gin, Ala eller His Xaa i posisjon 13 er Glu eller Gly
Xaa i posisjon 14 er Gin eller His
Xaa i posisjon 15 er Ile, Leu, Val eller Met Xaa i posisjon 16 er Gly, Ala, Gin, Thr, Asn, Arg, His eller Ile Xaa i posisjon 17 er Trp eller Tyr
Xaa i posisjon 18 er Thr, Met, Leu eller Ile Xaa i posisjon 19 er Thr eller Ser
Xaa i posisjon 20 er Cys, Gly eller ingen
Xaa i posisjon 21 er Gly eller ingen
hvor sekvensen av SEKV ID NR : 15 består av minst seks etterfølgende aminosyrer, de terminale endene av sekvensene kan være fri karboksyl- eller aminogrupper, amider, acyler, acetyler eller salter derav, to eller flere av Cys-residuene kan danne deler av en inter-kjede disulfidbinding, en -S-(CH2)P-S- eller en - (CH2)p-bro hvori p =1-8, eventuelt avbrutt av ett eller flere heteroatomer slik som O, N eller S og/eller de nevnte peptidsekvensene er festet til en fast bærer.
De nye peptidsekvensene har potensiale til å tjene som gode antigen hvor antigenet inneholder minst ett peptid valgt fra gruppene av sekvenser SEKV ID NR : 1, SEKV ID NR : 4, SEKV ID NR : 9 eller SEKV ID NR : 15 . Antigenisiteten kan bli tilpasset gjennom å forandre forholdet eller konsentrasjonen av ulike peptider eller størrelsen til peptidene ved for eksempel dimerisering eller polymerisering og/eller festing til en fastfase. Antigen bestående av to eller flere polypeptidsekvenser, ifølge oppfinnelsen, som enten er festet sammen ved en bro for eksempel en disulfidbro mellom Cys-residuene til kjedene eller broer som Ci-Cealkylen, eventuelt avbrutt av ett eller flere heteroatomer som O, S, eller N eller foretrukkent ikke festet sammen. Kjedene kan bli festet til en fast fase i monomere, dimere eller oligomere former. Flere aminosyrer kan bli lagt til endene for å oppnå en «arm» for å lette immobiliseringen.
PEG betyr polyetylenglykol (HOtChbChbOJmH og kan være en del av broen -Z-, PEG kan valgfritt modifiseres av en dikarboksylsyre
(HO(CH2CH20)mCO(CH2)oCOOH) eller en terminal karboksylgruppe (HO(CH2CH20)m.1CH2COOH) hvor m= 1-10 og o=2-6, før brodannelsen.
Broen -Z- kan enten bestå av PEG, modifisert PEG, eller en kombinasjon av disse og/eller en eller flere Gly-residuer kombinert. Alternativt kan broen -Z- bestå av en Gly-bro [Gly]n hvor n=1, 2 eller 3.
Alle aminosyrene i peptidene i oppfinnelsen kan være i både D- eller L-form, selv om den naturlig forekommende L- formen er foretrukket.
De C- og N-terminale endene av peptidsekvensene kan være forskjellig fra de naturlige sekvensene ved modifikasjon av de terminale NH2-gruppene og/eller COOH-gruppene, de kan for eksempel være acylert, acetylert, amidert eller modifisert for å gi et bindingssete for en bærer eller et annet molekyl.
Peptidene ifølge oppfinnelsen består av minst 6 aminosyrer, foretrukkent mellom 10 og 30 aminosyrer. De dekker all naturlig variasjon av aminosyrer i de identifiserte posisjonene.
Polypeptidantigenene er ifølge oppfinnelsen enten i fri eller i bærerbundet form. Bæreren, eller den faste fasen til hvilket peptidene valgfritt er bundet, kan velges fra et bredt spekter av kjente bærere. Den må velges med hensyn til den planlagte bruken av de festede polypeptidene som et diagnostisk antigen eller som en immuniserende komponent i en vaksine.
Eksempler på bærere som kan brukes for f.eks. diagnostiske formål er magnetiske kuler eller lateks av ko-polymerer slik som styren-divinyl benzen, hydroksylert styren-divinylbenzen, polystyren, karboksylert polystyren, kuler av "carbon black", ikke-aktivert eller polystyren eller polyvinylklorid aktivert glass, epoksy-aktivert porøs magnetisk glass, gelatin eller polysakkarid partikler eller andre proteinpartikler, røde blodceller, mono- eller polyklonale antistoffer eller "fab"-fragmenter av slike antistoffer.
I henhold til en ytterligere utførelsesform av denne oppfinnelsen, kan antigenene danne deler av en vaksine muligens kombinert med bærere, adjuvanser eller kombinert med andre immunstimulerende elementer, slik som kanaripox-virus som bærer env-genet. Eksempler på bærere og/eller adjuvanser for vaksineformål er andre proteiner slik som humant eller bovint serumalbumin og "keyhole limpet" hemocyanin og fettsyrer. Immunstimulerende materialer kan deles inn i tre grupper; adjuvanser, bærere for antigener og konstituenter. Eksempler på adjuvanser inkluderer aluminiumhydroksid, aluminiumsalter, saponin, muramyl di-og tripeptider, monofosforyl lipid A, B. pertussis og forskjellige cytokiner inklusivt Th1-cytokinene IL-12 og IL-1. Et antall proteintoksiner kan brukes til å frakte pasasjerproteiner gjennom cellulære membraner inn i cytosol, noe som er nyttig i utvikling av CTL-vaksiner. Bærere inkluderer bakterielle toksoider slik som inaktivert tetanus og koleratoksiner, genetisk detoksifiserte bakterielle toksiner slik som varmelabilt enterotoksin fra E. coli, fettsyrer, levende vektorer slik som polio-kimærer og hybridproteiner som danner partikulater for eksempel gjær-retrotransposon- hybrid TY- partikler og HBcAg-partikler. Konstituenter som er ofte forekommende komponenter i moderne vaksiner består av mineraloljeemulsjon, Freunds fullstendige og ufullstendige adjuvans, vegetilske olje-emulsjoner, ikke-ioniske blokk ko-poiymere overflateaktive midler, squalen eller squalan, lipopeptider, liposomer og biodegraderbare mikrokuler. To nye adjuvanster som innehar signifikant potensiale for utvikling av nye vaksiner inkluderer olje-i-vann mikroemulsjon (MF59) og polymere mikropartikler. Substans som kan forsterke immunogenisiteten av antigenet kan anvendes og mange andre alternativer av bærere eller adjuvanser er gitt i US- eller europeisk farmakope.
Et egnet preparat av antigenet for immunstimulerende anvendelser kan også omfatte interferoner slik som INF-y, antivirale kjemokiner eller hematopoetiske vekstfaktorer slik som granulocyttmakrofag vekst (kolonistimulerende) -faktor.
En annen strategi for å øke stimuleringen og absorbsjonen i for eksempel tarmen er å administrere peptidene i oppfinnelsen med små peptider slik som di-, tri- eller tetrapeptider. Disse peptidene kan administreres i tillegg til eller i kombinasjon med peptidene i oppfinnelsen. Foretrukkent er at peptidene administeres sammen med tripeptidet YGG, bestående av aminosyrer i D- eller L-form, foretrukkent i D-form. Nye strategier for ikke-parenteral avlevering av vaksiner, for eksempel via mukosa omfatter; genfusjonsteknologi for å danne ikke-toksiske derivater av mukosa-adjuvanser, genetisk inaktiverte antigener med en delesjon i et essensielt gen, koekspresjon av et antigen og et spesifikt cytokin som er viktig for modulasjonen og kontrollen av mukosale immunresponser, samt genetisk materiale i seg seiv som vil kunne tillate DNA eller RNA-opptak og dets endogene ekspresjon i vertens celler.
En strategi for å utvikle varige responser der cellemediert immunitet er påkrevet, er å vaksinere med plasmid-DNA som koder ett eller fler spesifikke antigen.
For å beskytte mot HIV-infeksjon, burde vaksinen indusere både mukosale- og systemiske immunresponser og kunne bli administrert på enhver praktisk måte, parenteralt eller ikke-parenteralt, så som subkutant, intrakutant, intravenøst, intramuskulært, peroralt, mukosalt eller intranasalt for eksempel.
I en foretrukken utførelsesform av vaksinen ifølge foreliggende oppfinnelsen består den av antigen inneholdende peptider av SEKV ID NR : 1,4, 9 og 15, videre foretrukket brukes peptidene i forholdet 1:1:1:1.
I en ytterligere foretrukkent utførelsesform inneholder vaksinepreparatet antigenene ;
og
Sekvensene kan aktivere det humorale immunsystemet, og bidra med CTL-epitoper og aminosyre-endringene implementert innen rammen av CTL-epitopene er designet til å oppnå forsterket binding. Andre aminosyreforandringer har blitt gjort for å lette syntesen av peptidet og/eller øke løseligheten til peptidet.
En metode for å detektere antistoffer, indusert av HIV-1 eller HIV-1 spesifikke peptider eller proteiner, i en prøve av kroppsvæske ved anvendelse av foreliggende antigener er en ytterligere utførelsesform av oppfinnelsen. Også immunoassay testsett designet for denne deteksjonen og antistoffer som kan selektivt reagere med de nevnte antigenene er omfattet av foreliggende oppfinnelse.
BESKRIVELSE AV FREMSTILLING AV PEPTIDENE
Peptidene i foreliggende oppfinnelse kan produseres med en hvilken som helst kjent metode for produksjon av lineære aminosyresekvenser, slik som rekombinant DNA-teknikker. En nukleinsyresekvens som koder for et peptid i oppfinnelsen eller en multimer av de beskrevne peptidene, blir innført i en ekspresjonsvektor. Egnede ekspresjonsvektorer er for eksempel plasmider, kosmider, virus og YAC (gjær artifiselt kromosom) som omfatter nødvendige kontroll regioner for replikasjon og ekspresjon. Ekspresjonsvektoren kan være stimulert til ekspresjon i en vertscelle. Egnede vertsceller er for eksempel bakterier, gjærceller og pattedyrceller. Slike teknikker er velkjente på området og beskrevet for eksempel av Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, 1989. Andre velkjente teknikker er nedbrytning eller syntese ved kobling av en aminosyre-residue til den neste i væskefase eller fortrinnsvis en fastfase (harpiks) for eksempel ved den såkalte Merrifield-syntesen. Se for eksempel Barany and Merrifield i 'The Peptides, Analysis, Synthesis, Biology, Vol.2", E. Gross and Meinhofer, Ed. (Acad.Press, N.Y., 1980), Kneib-Coronier and Mullen Int. J. Peptide Protein Res.,30, p.705-739 (1987) og Fields and Noble Int.J.Peptide Protein Res., 35, p.161-214 (1990).
I tilfelle et bundet eller syklisk peptid er ønsket, underkastes aminosyresekvensen et kjemisk oksydasjonstrinn for å syklisere eller binde de to cysteinresiduene innen én - eller mellom to peptidsekvenser, når de passende lineære aminosyre sekvensene er syntetisert, se Akaji et al., Tetrahedron Letter, 33, 8, p. 1073-1076, 1992.
GENERELL BESKRIVELSE AV SYNTESE
Alle peptidderivater fremstilt i eksemplene gitt nedenfor ble syntetisert på en Milligen 9050 Peptide Synthesizer ved anvendelse av et standardprogram. Harpiksen anvendt var Tenta Gel P RAM med en teoretisk lading på 0,20 meq/g (RAPP POLYMERE GmbH, Tubingen). Sluttproduktet av syntesen ble tørket i vakuum natten over. Peptidet ble deretter spaltet fra harpiksen ved behandling med 90% trifluoreddiksyre i nærvær av etanditiol (5%) og vann (5%) for fjerning av beskyttelsesgrupper (1,5 timer ved RT). Deretter ble harpiksen filtrert og vasket på filter med ytterligere trifluoreddiksyre (100%) (2 x 20 ml). De samlede filtrater ble inndampet i vakuum (vannbad ved RT) og bunnfallet ble gnidd ut med etyleter (200 ml) og det utfelte produktet filtrert fra. Det faste stoffet ble raskt oppløst på filter med iseddik (100 ml) og tilsatt til 1,5 I 20% eddiksyre i metanol og behandlet med 0,1 M løsning av jod i metanol inntil en svak brunfarge gjensto. Deretter ble Dowex 1 x 8 ionebytter i acetatform (15 g) (Bio-Rad, Richmond, CA) tilsatt og blandingen filtrert. Filtratet ble inndampet og bunnfallet frysetørket fra eddiksyre. Produktet ble deretter renset ved reversert-fase væskekromatografi på en kolonne fylt med Kromasil® 100 - 5 C8 (EKA Nobel, Surte, Sverige) i et egnet system inneholdende acetonitril i 0,1 % trifluoreddiksyre vannløsning. Prøvene oppsamlet fra kolonnen ble analysert ved analytisk høyytelses væskekromatografi (HPLC)
(Beckman System Gold, USA) utstyrt med en Kromasil® 100 - 5 C8 Kolonne (EKA Nobel, Surte, Sverige). Fraksjoner inneholdende ren substans ble samlet, løsningsmidlet ble avdampet og produktet frysetørket fra eddiksyre. Den endelige HPLC-analyse ble utført på sluttproduktet og strukturen av peptidet ble bekreftet med aminosyreanalyse og massespektrometri (LDI-MS).
Alle aminosyrer anvendt i løpet av syntesen var L-aminosyrer og de ble beskyttet med en fluorenylmetoksy-karbonylgruppe ved a-aminofunksjonen. Sidekjedene ble beskyttet som følger:
Forkortelsene, i parentesene er:
Trt = trifenylmetyl
tBu = tert. Butyl
OtBu = tert. Butylester
Aminosyrederivatene ble tilveiebrakt av Bachem AG, Sveits.
EKSEMPEL 1
Fremstilling avHLIYLTRQLQRFALNPGLLIT-NH2 (SEKV ID NR : 2).
Peptidet blir syntetisert i amidform, fra tilsvarende utgangsmaterialer i henhold til den generelle beskrivelsen av syntese. Renheten blir bestemt ved HPLC-analyse og strukturen blir bekreftet ved aminosyreanalyse og massespektrometri (LDI-MS).
EKSEMPEL 2
Fremstilling av RLIYATRQLQRFAVNPGLLIT {SEKV ID NR : 3). Peptidet blir syntetisert i amidform, fra tilsvarende utgangsmaterialer i henhold til den generelle beskrivelsen av syntese. Renheten blir bestemt ved HPLC-analyse og strukturen blir bekreftet ved aminosyreanalyse og massespektrometri (LDI-MS).
EKSEMPEL 3
Fremstilling avYILQNIEGQLVGGGYAISPRTLVAYLRG-NH2 (SEKV ID NR : 5). Peptidet blir syntetisert i amidform, fra tilsvarende utgangsmaterialer i henhold til den generelle beskrivelsen av syntese. Renheten blir bestemt ved HPLC-analyse og strukturen blir bekreftet ved aminosyreanalyse og massespektrometri (LDI-MS).
EKSEMPEL 4
Fremstilling avFILQNIEGQLVGGGYAISPRTLVAGGGG-OH (SEKV ID NR : 6). Peptidet ble syntetisert f ra tilsvarende utgangsmaterialer i henhold til den generelle beskrivelsen av syntese. Renheten ble bestemt ved HPLC-analyse og strukturen ble bekreftet ved aminosyreanalyse og massespektrometri (LDI-MS).
Renhet (HPLC): mer enn 94 %
Molekylvekt (fri base): 2745
Molekylær formel: C123H198O37N34
REFERANSEEKSEMPEL 5
Fremstilling av PIVQNIEGQMVHQAISPRTLNAWVKV-OH (SEKV ID NR : 7). Peptidet ble syntetisert fra tilsvarende utgangsmaterialer i henhold til den generelle beskrivelsen av syntese. Renheten ble bestemt ved HPLC-analyse og strukturen ble bekreftet ved aminosyreanalyse og massespektrometri (LDI-MS).
Renhet (HPLC): ca. 85 %
Motekylvekt (fri base): 2929
Molekylær formel: C13iH2i4036N38 S
EKSEMPEL 6
Fremstilling avFlLQNIQGQLVGGGYAISPRTLVAG-OH
(SEKV ID NR : 8). Peptidet blir syntetisert fra tilsvarende utgangsmaterialer i henhold til den generelle beskrivelsen av syntese. Renheten blir bestemt ved HPLC-analyse og strukturen blir bekreftet ved aminosyreanalyse og massespektrometri (LDI-MS).
REFERANSEEKSEMPEL 7
Fremstilling avGATPQDLNTMLNTVGGHQAA-NH2 (SEKV ID NR : 10) .
Peptidet ble syntetisert i amidform, fra tilsvarende utgangsmaterialer i henhold til den generelle beskrivelsen av syntese. Renheten ble bestemt ved HPLC-analyse og strukturen ble bekreftet ved aminosyreanalyse og massespektrometri (LDI-MS).
Renhet (HPLC): 98 %
Molekylvekt (fri base): 1995.2
Molekylær formel: C82H135O29N27 S
EKSEMPEL 8
Fremstilling avYAIPQALNTLLNTVGGHQAA-NH2 (SEKV ID NR :
11) .
Peptidet ble syntetisert i amidform, fra tilsvarende utgangsmaterialer i henhold til den generelle beskrivelsen av syntese. Renheten ble bestemt ved HPLC-analyse og strukturen ble bekreftet ved aminosyreanalyse og massespektrometri (LDI-MS).
Renhet (HPLC): 98 %
Molekylvekt (fri base): 2051.4
Molekylær formel: C91H147O27N27
EKSEMPEL 9
Fremstilling avFAIPQALNTLLNTVGGGGHQAACG-NH2
(SEKV ID NR : 12). Peptidet blir syntetisert i amidform, fra tilsvarende utgangsmaterialer i henhold til den generelle beskrivelsen av syntese. Renheten
blir bestemt ved HPLC-analyse og strukturen blir bekreftet ved aminosyreanalyse og massespektrometri (LDI-MS).
REFERANSEEKSEMPEL 10
Fremstilling avGSDIAGTTSTLQEQIGWMT-NH2 (SEKV ID NR : 13). Peptidet ble syntetisert i amidform, fra tilsvarende utgangsmaterialer i henhold til den generelle beskrivelsen av syntese. Renheten ble bestemt ved HPLC-analyse og strukturen ble bekreftet ved aminosyreanalyse og massespektrometri (LDI-MS).
Renhet (HPLC): 90 %
Molekylvekt (fri base): 1995.2
Molekylær formel: C84H135O31N23 S
EKSEMPEL 11
Fremstilling avWSALAGTTSTLQGQLGWIT-NH2 (SEKV ID NR : 14). Peptidet ble syntetisert i amidform, fra tilsvarende utgangsmaterialer i henhold til den generelle beskrivelsen av syntese. Renheten ble bestemt ved HPLC-analyse og strukturen ble bekreftet ved aminosyreanalyse og massespektrometri (LDI-MS).
Renhet (HPLC): mer enn 94 %
Molekylvekt (fri base): 1990.3
Molekylær formel: C9oHi4o027N24
EKSEMPEL 12
Dimerisering via disulfidbro
Peptidsekvensene blir forbundet via et oksydasjonstrinn for å danne et dipeptid hvor cysteinresiduene danner en disulfidbro. Broen kan for eksempel formes ved oksidasjon med l2 som følger;
Like mengder av peptidene blir løst opp i eddiksyre/matanol (1:4) og 0,1 M l2 i metanol blir tilsatt, noe som gir en blanding av dimeren.
EKSEMPEL 13
En vaksine omfattende peptidene av SEKV ID NR : 1,4, 9 og 15 blir fremstilt. De frysetørkede peptidene blir oppløst i sterilt vann ved en endelig konsentrasjon på 4 mg/ml. Den endelige saltkonsentrasjonen av løsningen er fysiologisk kompatibel. Et preparat av en granulocyttmakrofag-kolonistimulerende-faktor (GM-CSF) blir også fremstilt, i henhold til produsentens anvisninger for anvendelse, til en endelig konsentrasjon på 0,3 mg/ml. De to løsningene blir administrert intrakutant. En typisk injeksjonsdose er 100
EKSEMPEL 14
En antigenløsning eller -suspensjon blir blandet med like deler Freunds adjuvans fra Behring, fullstendig eller ufullstendig og blir deretter fin-emulgert ved å bli trukket opp i og vigorøst presset ut av, en injeksjonssprøyte eller med en homogenator. Emulsjonen skulle forbli stabil i minst 30 minutter. Antigen-adjuvansemulsjonene er best injisert subkutant som et depot.
EKSEMPEL 15
Immunoassay for deteksjon av antistoffer fremkalt av HIV-1.
De magnetiske partikkelreagensene skal fremstilles i henhold til produsentens anbefalte protokoll. Dynal AS, er produsenten av Dynabeads som blir anvendt. Magnetiske partikler belagt med ligand betegnes Reagens 1. Et peptid ifølge oppfinnelsen kobles kovalent til den pre-aktiverte overflaten av de magnetiske partiklene. Det er også mulig å fysisk absorbere peptidet til overflaten av de magnetiske partiklene. Konsentrasjonen av partikler i Reagens 1 er innen området fra 1 mg/ml til 15 mg/ml. Partikkelstørrelsen varierer mellom 0,2 pm til 15 jim. Konsentrasjonen av peptider er innen området fra 0,01 mg/mg partikkel til 1 mg/mg partikkel.
Anti human-lg alkalisk fosfatase (AP) konjugert-antistoffreagens blir fremstilt i henhold til den anbefalte protokoll fra Dako AS. Denne protokollen er en standardprosedyre på dette området. Substratreagenset er betegnet Reagens 2. Substratløsningen fenolftalein-monofosfat blir fremstilt i henhold til den anbefalte protokoll fra Fluka AG. Denne protokoll er en standardprosedyre på dette området. Substratløsningen er betegnet Reagens 3.
Vaske- og inkuberingsbuffer som blir anvendt er standard 0.05M tris-basebuffer med de følgende ytterligere forbindelser; Tween 20 (0,01% til 0,1%), glycerol (0,1% til 10%) og natriumklorid (0,2% til 0,1%).
Forsøksprosedyren omfatter et inkuberingstrinn hvor 1 dråpe Reagens 1 blir blandet med 2 dråper vaskebuffer i hver brønn. Etter blanding, blir 30 \ i\ av prøve tilsatt og løsningen blir inkubert i 5 minutter. De magnetiske partiklene kan fanges med en magnet og væsken fjernes, før magneten blir fjernet. Deretter blir brønnene vasket to ganger i 4 dråper vaskeløsning, før inkubering med Reagens 2.1 dråpe Reagens 2 blir tilsatt 2 dråper vaskebuffer og løsningen blir inkubert i 5 minutter. De magnetiske partiklene kan fanges med en magnet og væsken fjernes, før magneten blir fjernet. Deretter blir vasketrinnet gjentatt før inkubering med Reagens 3. 2 dråper Reagens 3 blir tilsatt hver brønn og løsningen blir inkubert i 3 minutter. Resultatene kan leses mot en hvit bakgrunn. Positive resultater er røde {3+ = sterk rød) mens negative resultater er klart lysgule/brune løsninger som oppnådd i den negative kontroll.
Immunoassay testsett kan anvendes i deteksjon av antistoffer, fremkalt enten av HIV virus eller HIV-spesifikke peptider eller-proteiner, for eksempel peptidene ifølge foreliggende oppfinnelse.
De ovenfor nevnte Eksempler er bare ment som en illustrasjon på oppfinnelsen. Det må forstås at fagfolk på området kan modifisere peptidene, antigenene og vaksinene her beskrevet uten å fravike fra konseptet og omfanget av foreliggende oppfinnelse som angitt i kravene.
Polypeptidene ifølge foreliggende oppfinnelse kan anvendes i en kombinasjon av minst ett peptid valgt fra hver gruppe med sekvenser, SEKV ID NR : 1, SEKV ID NR : 4, SEKV ID NR : 9 og SEKV ID NR : 15 for å danne antigener og den aktive bestanddelen av en profylaktisk eller terapeutisk vaksine ment for å gi beskyttelse mot det humane immunsvikt-virus type 1 (HIV-1). Vaksinen kan omfatte forbindelser som har fordelaktige effekter i beskyttelse - eller stimulering av vertens immunsystem (menneske eller virveldyr) for eksempel interleukiner, interferoner, granulocytt makrofag vekstfaktorer, hematopoietiske vekstfaktorer eller lignende. Fortrinnsvis inneholder vaksinepreparatet ytterligere en adjuvans eller en konstituent, mer foretrukket er adjuvansen eller konstituenten Monofosforyl Lipid A (MPL ®) eventuelt med alun, Freunds adjuvans (fullstendig eller ufullstendig) eller aluminiumhydroksyd. Den optimale mengde av adjuvans/konstituent vil avhenge av typen(e) som velges.
Peptidene kan i henhold til oppfinnelsen bli modifisert med et C-terminalt tillegg av en enkel fettsyre slik som en palmitoylkjede for å danne en lipopeptidvaksine. Lipopeptidene kan videre introduseres inn i liposomemembraner ved "fryse-tine"-metoden noe som resulterer i at liposomene bærer peptidligandene på overflatene.
Peptidet eller vaksinepreparat kan være frysetørket før lagring. Vaksinen kan fortrinnsvis lagres ved lave temperaturer, i ampuller inneholdende én eller flere doseenheter, klar for anvendelse. En typisk doseringsenhet av peptidet ifølge oppfinnelsen er innen konsentrasjonsområdet: 0,05 ug-lmg pr. kg kroppsvekt, fortrinnsvis innen 0,15 ng-0,15 mg pr. kg kroppsvekt. Personer utdannet på området vil forstå at en egnet dose vil avhenge av kroppsvekten til pasienten, typen sykdom, alvorlighetsgraden av tilstanden, administreringsrute og mange andre faktorer. Vaksinen kan administreres opp til tjuefem ganger og gjennom injeksjon, typisk vil den administreres omtrent tolv ganger. Ved fremstilling av en injeksjonsløsning oppløses peptidene i sterilt vann til en endelig konsentrasjon på 1 mg/ml pr. peptid. Typisk er et injeksjonsvolum 100 \ l\ til 200 pl (2 x 100 Peptidet er fortrinnsvis ko-administrert med en egnet adjuvans og/eller en granulocytt-makrofag vekstfaktor for eksempel «Shering Plough» Leucomax®. Spesielt foretrukket er en kombinasjonsterapi hvor de her beskrevne peptidene er administrert sammen med peptider beskrevet i norsk patent nr. 311 807. Egnet administrering kan være intrakutan, subkutan, intravenøs, peroral, intramuskulær, intranasal, mukosal eller hvilken som helst annen egnet rute. Oppfølgingsdose-administreringer kan være nødvendige for å opprettholde beskyttelse. For fagpersoner på området vil det forstås at vaksinepreparatene ifølge oppfinnelsen er nyttige ikke bare i forhindring av infeksjon, men også i behandling av infeksjon.
Claims (16)
1. Peptid avledet fra HIV-1 Gag p17 og p24 protein, karakterisert ved a t det omfatter minst én aminosyresekvens som innehar modifikasjoner i forhold til den naturlig forekommende sekvensen og er valgt fra gruppene av aminosyresekvenser:
hvor aminosyrene i kjeden kan ha følgende betydninger; Xaa i posisjon 1 av peptidderivatet er His, Lys eller Arg, Xaa i posisjon 2 er Ile, Leu, Val eller Met,
Xaa i posisjon 3 er Ile eller Val,
Xaa i posisjon 4 er Trp eller Tyr,
Xaa i posisjon 5 er Ala eller Leu,
Xaa i posisjon 6 er Ser, Thr, Arg eller Asn,
Xaa i posisjon 7 er Arg, eller Ser,
Xaa i posisjon 11 er Arg, Lys, Gly eller Asn, Xaa i posisjon 12 er Phe, Ser eller Tyr Xaa i posisjon 13 er Ala, Thr eller Ser Xaa i posisjon 14 er Val, Leu, Ile eller Cys,
Xaa i posisjon 15 er Asn, Asp eller Ser,
Xaa i posisjon 16 er Pro, Arg eller Ser,
Xaa i posisjon 17 er Gly, Ser, Ala, Asp eller Asn Xaa i posisjon 18 er Leu eller Phe,
Xaa i posisjon 19 er Leu eller Met,
Xaa i posisjon 20 er Glu, Gly, Asp eller Ile,
Xaa i posisjon 21 er Thr, Ser eller Ala
peptidet omfatter minst seks påfølgende aminosyrer av sekvensen av SEKV ID NR: 1,
hvor aminosyrene av kjeden har følgende betydning; Xaa i posisjon 1 er Pro, Tyr eller Phe Xaa i posisjon 2 er Ile, Val eller Leu,
Xaa i posisjon 3 er Ile, Ala, Val, Met eller Leu Xaa i posisjon 4 er Gin, Ser, Thr eller Val Xaa i posisjon 5 er Asn, Asp eller Thr Xaa i posisjon 6 er Ile, Ala, Leu eller Met Xaa i posisjon 7 er Gin, Glu Lys eller Gly Xaa i posisjon 9 er Gin eller Ile Xaa i posisjon 13 er utelatt
Xaa i posisjon 14 er Ala, Ser, Asn, Val eller Pro Xaa i posisjon 15 er Ile, Leu, Met eller Val,
Xaa i posisjon 16 er Ser eller Thr Xaa i posisjon 17 er Pro eller Ala,
Xaa i posisjon 18 er Arg eller Lys,
Xaa i posisjon 19 er Thr eller Ser Xaa i posisjon 20 er Leu eller Ser Xaa i posisjon 21 er Asn, Phe eller Val,
Xaa i posisjon 23 er Trp, Tyr, Gly eller ingen Xaa i posisjon 24 er Val, Leu, Gly eller ingen Xaa i posisjon 25 er Lys, Arg, Gly eller ingen Xaa i posisjon 26 er Val, Ala, Cys, Gly eller ingen hvor sekvensen av SEKV ID NR : 4 omfatter minst seks etterfølgende aminosyrer og -Z- er valgfri og har betydningene PEG, modifisert PEG og/eller [Gly]n, der n = 1,2 eller 3,
hvor Xaa i posisjon 1 er Tyr, Trp, Phe eller Gly Xaa i posisjon 3 er Thr, Ala, Val, Ile eller Leu Xaa i posisjon 4 er Pro eller Ser Xaa i posisjon 5 er Gin, His, Gly, Thr, Ser eller Tyr Xaa i posisjon 7 er Leu, Ile eller Val Xaa i posisjon 8 er Asn eller Tyr Xaa i posisjon 9 er Thr, Met, Leu eller Ala Xaa i posisjon 12 er Ser, Thr eller Asn Xaa i posisjon 13 er Thr, Ile, Val eller Ala Xaa i posisjon 14 er Val eller Ile Xaa i posisjon 15 er Gly eller ingen Xaa i posisjon 16 er Gly eller ingen Xaa i posisjon 19 er Ala eller Gly Xaa i posisjon 20 er Ala
Xaa i posisjon 21 er Met, Leu, Cys eller ingen Xaa i posisjon 22 er Gin, Glu, His, Gly eller ingen hvor sekvensen av SEKV ID NR : 9 består av minst seks etterfølgende aminosyrer og broen -Z- er valgfri og har betydningene PEG, modifisert PEG og/eller [Gly]„, der n = 1, 2 eller 3,
hvor Xaa i posisjon 1 er Trp eller Tyr Xaa i posisjon 2 er Ser eller Ala Xaa i posisjon 7 er Thr, Ala eller Ser Xaa i posisjon 8 er Ser eller Thr Xaa i posisjon 9 er Ser eller Thr Xaa i posisjon 11 er Leu, Pro, Val eller Gin Xaa i posisjon 12 er Gin, Ala eller His Xaa i posisjon 13 er Glu eller Gly Xaa i posisjon 14 er Gin eller His Xaa i posisjon 15 er Ile, Leu, Val eller Met Xaa i posisjon 16 er Gly, Ala, Gin, Thr, Asn, Arg, His eller Ile Xaa i posisjon 17 er Trp eller Tyr Xaa i posisjon 18 er Thr, Met, Leu eller Ile Xaa i posisjon 19 er Thr eller Ser
Xaa i posisjon 20 er Cys, Gly eller ingen
Xaa i posisjon 21 er Gly eller ingen
hvor sekvensen av SEKV ID NR : 15 består av minst seks etterfølgende aminosyrer, de terminale endene av sekvensene kan være fri karboksyl- eller aminogrupper, amider, acyler, acetyler eller salter derav, to eller flere av Cys-residuene kan danne deler av en inter-kjede disulfidbinding, en -S-(CH2)P-S- eller en - (CH2)p-bro hvori p = 1-8, eventuelt avbrutt av ett eller flere heteroatomer slik som O, N eller S og/eller de nevnte peptidsekvensene er festet til en fast bærer.
2. Peptid ifølge krav 1,karakterisert ved at aminosyresekvensen av SEKV ID NR : 1 er valgt fra gruppene SEKV ID NR : 2 og SEKV ID NR : 3.
3. Peptid ifølge krav 1,karakterisert ved at aminosyresekvensen av SEKV ID NR : 4 er valgt fra gruppene SEKV ID NR : 5, SEKV ID NR : 6 og SEKV ID NR: 8.
4. Peptid ifølge krav 1,karakterisert ved at aminosyresekvensen av SEKV ID NR : 9 er valgt fra gruppene SEKV ID NR : 11 og SEKV ID NR : 12.
5. Peptid ifølge krav 1,karakterisert ved at aminosyresekvensen av SEKV ID NR : 15 er valgt fra SEKV ID NR : 14.
6. Antigen, karakterisert ved at det omfatter minst ett peptid ifølge krav 1.
7. Antigen ifølge krav 6, karakterisert ved at det omfatter minst ett peptid valgt fra hver av gruppene SEKV ID NR : 1, SEKV ID NR : 4, SEKV ID NR : 9 og SEKV ID NR: 15.
8. Vaksinepreparat, karakterisert ved at det omfatter et antigen ifølge krav 6 med et farmasøytisk godtagbart fortynningsmidde! og eventuelt en adjuvans, bærer og/eller konstituent og eventuelt ytterligere immunstimulerende forbindelse(r).
9. Vaksinepreparat ifølge krav 8, karakterisert ved at det omfatter minst fire peptider valgt fra hver av gruppene av SEKV ID NR : 1, SEKV ID NR : 4, SEKV ID NR : 9 og SEKV ID NR : 15.
10. Vaksinepreparat ifølge krav 9, karakterisert ved at det omfatter peptidene av SEKV ID NR : 3, SEKV ID NR : 8, SEKV ID NR : 11 og SEKV ID NR : 14.
11. Vaksinepreparat i henhold til kravene 8-10, karakterisert ved at peptidene oppløses i en steril vannløsning og den valgfrie immunstimulerende forbindelsen er en granulocyttmakrofag kolonistimulerende faktor.
12. Vaksinepreparat i henhold til kravene 8-11,karakterisert ved at preparatet omfatter en adjuvans valgt fra gruppen Monofosforyl Lipid A (MPL®), Freund's fullstendige eller ufullstendige adjuvans eller aluminiumhydroksyd.
13. Vaksinepreparat, karakterisert ved at et antigen ifølge krav 6 er utformet som et lipopeptid og/eller en liposomformulering.
14. Fremgangsmåte for påvisning av antistoffer, fremkalt av HIV eller HIV-spesifikke peptid(er) eller -protein(er), i en prøve av kroppsvæske karakterisert ved at den nevnte prøve gjøres til gjenstand for et immunoassay, hvor antigen(ene) velges fra peptidene ifølge kravene 1, 2,3 ,4 og 5.
15. Immunoassay testsett for påvisning av antistoffer, fremkalt av HIV eller HIV-spesifikke peptider eller -proteiner, i en prøve av kroppsvæske, karakterisert ved at det diagnostiske antigenet er et peptid ifølge et hvilket som helst av de foregående kravene 1 til 5.
16. Antistoff, karakterisert ved at det selektivt kan reagere med antigenet ifølge kravene 6 og 7.
Priority Applications (28)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NO20004413A NO314588B1 (no) | 2000-09-04 | 2000-09-04 | HIV-peptider, antigener, vaksinesammensetning, immunoassay- testsett og en fremgangsmåte for å påvise antistoffer indusert av HIV |
| CNA2006101517487A CN101104636A (zh) | 2000-09-04 | 2001-09-03 | 来自gag p17和p24保守区域的HIV肽以及它们在例如疫苗中的应用 |
| CNB018157424A CN1282656C (zh) | 2000-09-04 | 2001-09-03 | 来自gagp17和p24保守区域的HIV肽以及它们在例如疫苗中的应用 |
| CA002421193A CA2421193A1 (en) | 2000-09-04 | 2001-09-03 | Hiv peptides, antigens, vaccine compositions,immunoassay kit and a method of detecting antibodies induced by hiv |
| NZ524556A NZ524556A (en) | 2000-09-04 | 2001-09-03 | HIV peptides, antigens, vaccine compositions, immunoassay kit and a method of detecting antibodies induced by HIV |
| JP2002525174A JP2004508381A (ja) | 2000-09-04 | 2001-09-03 | Ｈｉｖペプチド、抗原、ワクチン組成物、ｈｉｖにより誘発される抗体を検出するためのイムノアッセイキット及び方法 |
| EP07014954A EP1878742A3 (en) | 2000-09-04 | 2001-09-03 | HIV peptides, antigens, vaccine compositions, immunoassay and a method of detecting antibodies induced by HIV |
| SK402-2003A SK287917B6 (sk) | 2000-09-04 | 2001-09-03 | Peptide derived from HIV-1gag p17, antigen comprising the peptide and use thereof, vaccine composition, antibody, nucleic acid, expression vector and host cell |
| AU8270601A AU8270601A (en) | 2000-09-04 | 2001-09-03 | Hiv peptides, antigens, vaccine compositions, immunoassay kit and a method of detecting antibodies induced by hiv |
| PCT/NO2001/000362 WO2002020554A2 (en) | 2000-09-04 | 2001-09-03 | Hiv peptides from conserved regions in gag p17 and 924 and their application in e.g. vaccines |
| HU0303134A HUP0303134A3 (en) | 2000-09-04 | 2001-09-03 | Hiv peptides, antigens, vaccine compositions, immunoassay kits and method of detecting antibodies induced by hiv |
| AT01961444T ATE406380T1 (de) | 2000-09-04 | 2001-09-03 | Hiv-peptide aus konservierten regionen in gag p17 und deren anwendung z.b. in impfstoffen |
| ZA200301740A ZA200301740B (en) | 2000-09-04 | 2001-09-03 | HIV peptides from conserved regions in gas P17 and P24 and their application in e.g. vaccines. |
| HK04102846.8A HK1059940B (en) | 2000-09-04 | 2001-09-03 | Hiv peptides, antigens, vaccine compositions, immunoassay kit and a method of detecting antibodies induced by hiv |
| US10/129,331 US7009037B2 (en) | 2000-09-04 | 2001-09-03 | Modified HIV-1gag p17 peptide and immunogenic composition |
| AU2001282706A AU2001282706B2 (en) | 2000-09-04 | 2001-09-03 | HIV peptides from conserved in gag p17 and 924 and their application in E.G. vaccines |
| EA200300336A EA006308B1 (ru) | 2000-09-04 | 2001-09-03 | Пептиды вич, антигены, вакцинные композиции, набор для иммуноанализа и способ обнаружения антител, индуцируемых вич |
| BR0114036-1A BR0114036A (pt) | 2000-09-04 | 2001-09-03 | Peptìdeos de hiv, antìgenos, composições de vacina, kit de imunoensaio e um método para detectar anticorpos induzidos pelo hiv |
| EP01961444A EP1322665B1 (en) | 2000-09-04 | 2001-09-03 | Hiv peptides from conserved regions in gag p17 and their applications, such as vaccines |
| DE60135564T DE60135564D1 (de) | 2000-09-04 | 2001-09-03 | Hiv-peptide aus konservierten regionen in gag p17 und deren anwendung z.b. in impfstoffen |
| ES01961444T ES2312465T3 (es) | 2000-09-04 | 2001-09-03 | Peptidos de vih de regiones conservadas en gag p17 y sus aplicaciones, tales como vacunas. |
| NZ535148A NZ535148A (en) | 2000-09-04 | 2001-09-03 | HIV peptides, antigens, vaccine compositions, immunoassay kit and a method of detecting antibodies induced by HIV |
| ARP010104196A AR033998A1 (es) | 2000-09-04 | 2001-09-04 | Peptidos de vih, antigenos, composiciones de vacunas, kit de inmunoensayo y un metodo para detectar anticuerpos inducidos por vih |
| MYPI20014139A MY136081A (en) | 2000-09-04 | 2001-09-04 | Modified hiv - 1gag p17 peptide and immunogenic composition |
| US11/211,576 US7612168B2 (en) | 2000-09-04 | 2005-08-26 | Modified HIV peptides, antigens, compositions, immunoassay kit and a method of detecting antibodies induced by HIV |
| AU2007202739A AU2007202739B2 (en) | 2000-09-04 | 2007-06-13 | HIV peptides, antigens, vaccine compositions, immunoassay kit and a method of detecting antibodies induced by HIV |
| ARP080105262A AR071262A2 (es) | 2000-09-04 | 2008-12-03 | Peptidos derivados de una proteina de vih-1gagp24, composiciones de vacunas kit de inmunoensayo y un metodo para detectar anticuerpos inducidos por vih |
| JP2011128389A JP2011219481A (ja) | 2000-09-04 | 2011-06-08 | Ｈｉｖペプチド、抗原、ワクチン組成物、ｈｉｖにより誘発される抗体を検出するためのイムノアッセイキット及び方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NO20004413A NO314588B1 (no) | 2000-09-04 | 2000-09-04 | HIV-peptider, antigener, vaksinesammensetning, immunoassay- testsett og en fremgangsmåte for å påvise antistoffer indusert av HIV |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO20004413D0 NO20004413D0 (no) | 2000-09-04 |
| NO20004413L NO20004413L (no) | 2002-03-05 |
| NO314588B1 true NO314588B1 (no) | 2003-04-14 |
Family
ID=19911533
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO20004413A NO314588B1 (no) | 2000-09-04 | 2000-09-04 | HIV-peptider, antigener, vaksinesammensetning, immunoassay- testsett og en fremgangsmåte for å påvise antistoffer indusert av HIV |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US7009037B2 (no) |
| EP (2) | EP1878742A3 (no) |
| JP (2) | JP2004508381A (no) |
| CN (2) | CN1282656C (no) |
| AR (2) | AR033998A1 (no) |
| AT (1) | ATE406380T1 (no) |
| AU (3) | AU8270601A (no) |
| BR (1) | BR0114036A (no) |
| CA (1) | CA2421193A1 (no) |
| DE (1) | DE60135564D1 (no) |
| EA (1) | EA006308B1 (no) |
| ES (1) | ES2312465T3 (no) |
| HU (1) | HUP0303134A3 (no) |
| MY (1) | MY136081A (no) |
| NO (1) | NO314588B1 (no) |
| NZ (2) | NZ535148A (no) |
| SK (1) | SK287917B6 (no) |
| WO (1) | WO2002020554A2 (no) |
| ZA (1) | ZA200301740B (no) |
Families Citing this family (35)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1307130A4 (en) | 2000-02-04 | 2005-01-12 | Beth Israel Hospital | VACCINE AGAINST THE VIRUS OF HUMAN IMMUNODEFICIENCY |
| EP2045282B1 (en) * | 2005-08-26 | 2011-03-23 | Novo Nordisk A/S | A method of modifying a macromolecular system |
| FI120376B (fi) * | 2007-01-17 | 2009-09-30 | Next Biomed Technologies Nbt O | Menetelmä biomuokatun, korkean affiniteetin polypeptidin valmistamiseksi |
| FI120349B (fi) | 2007-03-07 | 2009-09-30 | Next Biomed Technologies Nbt O | Menetelmä fuusiopolypeptidin valmistamiseksi |
| EP2344143A1 (en) | 2008-09-09 | 2011-07-20 | Mukesh Harilal Shukla | Bioactive composition for the treatment of the hiv/aids, method for manufacturing and using the same |
| WO2010045659A1 (en) | 2008-10-17 | 2010-04-22 | American Gene Technologies International Inc. | Safe lentiviral vectors for targeted delivery of multiple therapeutic molecules |
| US9733242B2 (en) | 2012-10-07 | 2017-08-15 | Sevident, Inc. | Devices for capturing analyte |
| US9910040B2 (en) | 2012-07-09 | 2018-03-06 | Sevident, Inc. | Molecular nets comprising capture agents and linking agents |
| FR2957933B1 (fr) * | 2010-03-24 | 2012-04-27 | Seppic Sa | Vaccin vivant pour maladies aviaires |
| EP2550362B1 (en) | 2010-03-25 | 2017-01-04 | Oregon Health&Science University | Cmv glycoproteins and recombinant vectors |
| US9493514B2 (en) * | 2011-01-06 | 2016-11-15 | Bionor Immuno As | Dimeric scaffold proteins comprising HIV-1 GP120 and GP41 epitopes |
| CA2832109C (en) | 2011-06-10 | 2021-07-06 | Oregon Health & Science University | Cmv glycoproteins and recombinant vectors |
| EP2568289A3 (en) | 2011-09-12 | 2013-04-03 | International AIDS Vaccine Initiative | Immunoselection of recombinant vesicular stomatitis virus expressing hiv-1 proteins by broadly neutralizing antibodies |
| US9402894B2 (en) | 2011-10-27 | 2016-08-02 | International Aids Vaccine Initiative | Viral particles derived from an enveloped virus |
| JP6310909B2 (ja) * | 2012-06-06 | 2018-04-11 | ビオノール イミュノ エーエスＢｉｏｎｏｒ Ｉｍｍｕｎｏ Ａｓ | 免疫原及び投薬反応物として使用するためのウイルスタンパク質に由来するペプチド |
| EP2679596B1 (en) | 2012-06-27 | 2017-04-12 | International Aids Vaccine Initiative | HIV-1 env glycoprotein variant |
| CN105189465B (zh) | 2013-03-21 | 2019-02-26 | 赛诺菲-安万特德国有限公司 | 合成含有乙内酰脲的肽产物 |
| WO2014147129A1 (en) | 2013-03-21 | 2014-09-25 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Synthesis of cyclic imide containing peptide products |
| EP2848937A1 (en) | 2013-09-05 | 2015-03-18 | International Aids Vaccine Initiative | Methods of identifying novel HIV-1 immunogens |
| US10058604B2 (en) | 2013-10-07 | 2018-08-28 | International Aids Vaccine Initiative | Soluble HIV-1 envelope glycoprotein trimers |
| EP3069730A3 (en) | 2015-03-20 | 2017-03-15 | International Aids Vaccine Initiative | Soluble hiv-1 envelope glycoprotein trimers |
| EP3072901A1 (en) | 2015-03-23 | 2016-09-28 | International Aids Vaccine Initiative | Soluble hiv-1 envelope glycoprotein trimers |
| JP6890831B2 (ja) | 2015-07-08 | 2021-06-18 | アメリカン ジーン テクノロジーズ インターナショナル インコーポレイテッド | Ｈｉｖ予備免疫化および免疫療法 |
| US10137144B2 (en) | 2016-01-15 | 2018-11-27 | American Gene Technologies International Inc. | Methods and compositions for the activation of gamma-delta T-cells |
| DK3402483T3 (da) | 2016-01-15 | 2024-01-02 | American Gene Tech Int Inc | Fremgangsmåder og sammensætninger til aktivering af gamma-delta-T-celler |
| US10888613B2 (en) | 2016-02-08 | 2021-01-12 | American Gene Technologies International Inc. | Method of producing cells resistant to HIV infection |
| DK3426777T3 (da) | 2016-03-09 | 2022-04-25 | American Gene Tech Int Inc | Kombinationsvektorer og fremgangsmåder til behandling af cancer |
| US11976292B2 (en) | 2016-06-08 | 2024-05-07 | American Gene Technologies International Inc. | Non-integrating viral delivery system and methods related thereto |
| IL284348B2 (en) | 2016-07-08 | 2025-06-01 | American Gene Tech Int Inc | Hiv pre-immunization and immunotherapy |
| JP7176756B2 (ja) | 2016-07-21 | 2022-11-22 | アメリカン ジーン テクノロジーズ インターナショナル インコーポレイテッド | パーキンソン病を処置するためのウイルスベクター |
| CA3057142A1 (en) | 2017-04-03 | 2018-10-11 | American Gene Technologies International Inc. | Compositions and methods for treating phenylketonuria |
| CA3064442A1 (en) | 2017-06-16 | 2018-12-20 | American Gene Technologies International Inc. | Methods and compositions for the activation of tumor cytotoxicity via human gamma-delta t-cells |
| US11352646B2 (en) | 2018-11-05 | 2022-06-07 | American Gene Technologies International Inc. | Vector system for expressing regulatory RNA |
| RU2727673C1 (ru) * | 2019-08-09 | 2020-07-22 | Федеральное государственное унитарное предприятие «Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов» Федерального медико-биологического агентства | Антитела против белка р17 ВИЧ-1 субтипа А |
| GB2610556A (en) * | 2021-09-02 | 2023-03-15 | 113 Botanicals Ltd | Extraction |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NZ235538A (en) * | 1989-10-12 | 1992-06-25 | Viral Technologies Inc | Peptides immunoreactive with antibodies to hiv p17; carrier-bound peptides, vaccines, immunoassay and a method for forming antibody enriched sera |
| SE468168B (sv) | 1990-02-20 | 1992-11-16 | Replico Medical Ab | Hiv-1, p24 peptider, diagnostiska antigener och foerfarande foer saerskiljande diagnostik av preliminaert hiv-1 positiva serumprov |
| DE4039925A1 (de) * | 1990-12-14 | 1992-06-17 | Behringwerke Ag | Ausgewaehlte peptide des gruppenspezifischen antigens (gag) von humanem immundefizienzvirus (hiv), ihre herstellung und verwendung |
| SE9101863D0 (sv) * | 1991-06-13 | 1991-06-13 | Replico Medical Ab | Peptider, diagnostiskt antigen, vaccinkomposition och foerfarande foer selektering av hiv-stammar |
| US6525173B1 (en) | 1997-01-02 | 2003-02-25 | Universidade Federal De Minas Gerais | Process for expression and production of recombinant protein hybrid protein (p24/p17) derived from human immunodeficiency viruses (HIV-1) |
| GB9703802D0 (en) * | 1997-02-24 | 1997-04-16 | Kingsman Susan M | Anti-hiv peptides and proteins |
| US5972339A (en) * | 1997-11-13 | 1999-10-26 | The General Hospital Corporation | Method of eliciting anti-HIV-1 helper T cell responses |
| CA2685270C (en) * | 1998-05-13 | 2014-07-29 | Pharmexa Inc. | Expression vectors for stimulating an immune response and methods of using the same |
| NO311807B1 (no) | 1999-03-04 | 2002-01-28 | Bionor Immuno As | HIV-peptider, antigener, vaksinepreparater, immunoassay- testsett og en metode for påvisning av antistoffer fremkalt av HIV |
-
2000
- 2000-09-04 NO NO20004413A patent/NO314588B1/no not_active IP Right Cessation
-
2001
- 2001-09-03 JP JP2002525174A patent/JP2004508381A/ja active Pending
- 2001-09-03 NZ NZ535148A patent/NZ535148A/en not_active IP Right Cessation
- 2001-09-03 EP EP07014954A patent/EP1878742A3/en not_active Withdrawn
- 2001-09-03 DE DE60135564T patent/DE60135564D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-09-03 SK SK402-2003A patent/SK287917B6/sk not_active IP Right Cessation
- 2001-09-03 HU HU0303134A patent/HUP0303134A3/hu unknown
- 2001-09-03 CA CA002421193A patent/CA2421193A1/en not_active Abandoned
- 2001-09-03 BR BR0114036-1A patent/BR0114036A/pt not_active IP Right Cessation
- 2001-09-03 EP EP01961444A patent/EP1322665B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-09-03 WO PCT/NO2001/000362 patent/WO2002020554A2/en not_active Ceased
- 2001-09-03 ZA ZA200301740A patent/ZA200301740B/en unknown
- 2001-09-03 NZ NZ524556A patent/NZ524556A/en not_active IP Right Cessation
- 2001-09-03 CN CNB018157424A patent/CN1282656C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-09-03 ES ES01961444T patent/ES2312465T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-09-03 AT AT01961444T patent/ATE406380T1/de not_active IP Right Cessation
- 2001-09-03 AU AU8270601A patent/AU8270601A/xx active Pending
- 2001-09-03 US US10/129,331 patent/US7009037B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-09-03 AU AU2001282706A patent/AU2001282706B2/en not_active Ceased
- 2001-09-03 EA EA200300336A patent/EA006308B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2001-09-03 CN CNA2006101517487A patent/CN101104636A/zh active Pending
- 2001-09-04 MY MYPI20014139A patent/MY136081A/en unknown
- 2001-09-04 AR ARP010104196A patent/AR033998A1/es active IP Right Grant
-
2005
- 2005-08-26 US US11/211,576 patent/US7612168B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2007
- 2007-06-13 AU AU2007202739A patent/AU2007202739B2/en not_active Ceased
-
2008
- 2008-12-03 AR ARP080105262A patent/AR071262A2/es not_active Application Discontinuation
-
2011
- 2011-06-08 JP JP2011128389A patent/JP2011219481A/ja active Pending
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO314588B1 (no) | HIV-peptider, antigener, vaksinesammensetning, immunoassay- testsett og en fremgangsmåte for å påvise antistoffer indusert av HIV | |
| JP5814331B2 (ja) | Ｈｉｖペプチド、抗原、ワクチン組成物、免疫学的検定キット及びｈｉｖによって誘発された抗体を検出する方法 | |
| AU2001282706A1 (en) | HIV peptides from conserved in gag p17 and 924 and their application in E.G. vaccines | |
| NO314587B1 (no) | HIV regulatoriske- og hjelpepeptider, antigener, vaksinepreparater, immunoassay testsett og en metode for påvisning av antistoffer fremkaltav HIV | |
| HK1124865A (en) | Hiv peptides, antigens, vaccine compositions, immunoassay kit and a method of detecting antibodies induced by hiv |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM1K | Lapsed by not paying the annual fees |