PL138979B1 - Method of obtaining novel acrylic copolymers contaning amine groups - Google Patents
Method of obtaining novel acrylic copolymers contaning amine groups Download PDFInfo
- Publication number
- PL138979B1 PL138979B1 PL1982239101A PL23910182A PL138979B1 PL 138979 B1 PL138979 B1 PL 138979B1 PL 1982239101 A PL1982239101 A PL 1982239101A PL 23910182 A PL23910182 A PL 23910182A PL 138979 B1 PL138979 B1 PL 138979B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- formula
- group
- amino acid
- resin
- ether
- Prior art date
Links
- 229920006243 acrylic copolymer Polymers 0.000 title claims abstract description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 31
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 title claims description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 15
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 69
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 48
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 48
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 35
- -1 t-butoxycarbonyl (Boc) Chemical class 0.000 claims description 22
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 20
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 20
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 19
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 18
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims description 17
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims description 17
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 16
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 14
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 14
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 14
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims description 14
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 13
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 claims description 13
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 11
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 claims description 11
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims description 10
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims description 10
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 claims description 9
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 7
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims description 7
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims description 7
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 7
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims description 6
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims description 6
- UAOMVDZJSHZZME-UHFFFAOYSA-N diisopropylamine Chemical compound CC(C)NC(C)C UAOMVDZJSHZZME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 6
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 244000309464 bull Species 0.000 claims description 5
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims description 5
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 5
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims description 5
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-diisopropylethylamine Substances CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 claims description 4
- WTEOIRVLGSZEPR-UHFFFAOYSA-N boron trifluoride Chemical compound FB(F)F WTEOIRVLGSZEPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000012442 inert solvent Substances 0.000 claims description 4
- IZUPBVBPLAPZRR-UHFFFAOYSA-N pentachlorophenol Chemical compound OC1=C(Cl)C(Cl)=C(Cl)C(Cl)=C1Cl IZUPBVBPLAPZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 claims description 4
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 4
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000007614 solvation Methods 0.000 claims description 4
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 claims description 3
- 238000004873 anchoring Methods 0.000 claims description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 3
- 238000007334 copolymerization reaction Methods 0.000 claims description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 3
- 238000007327 hydrogenolysis reaction Methods 0.000 claims description 3
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 claims description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 3
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 claims description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 claims description 3
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 claims description 3
- 230000002522 swelling effect Effects 0.000 claims description 3
- WLPAQAXAZQUXBG-UHFFFAOYSA-N 1-pyrrolidin-1-ylprop-2-en-1-one Chemical compound C=CC(=O)N1CCCC1 WLPAQAXAZQUXBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- LHJGJYXLEPZJPM-UHFFFAOYSA-N 2,4,5-trichlorophenol Chemical compound OC1=CC(Cl)=C(Cl)C=C1Cl LHJGJYXLEPZJPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- YEDUAINPPJYDJZ-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxybenzothiazole Chemical compound C1=CC=C2SC(O)=NC2=C1 YEDUAINPPJYDJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000004042 4-aminobutyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])[H] 0.000 claims description 2
- 229920000178 Acrylic resin Polymers 0.000 claims description 2
- 239000004925 Acrylic resin Substances 0.000 claims description 2
- 229910015900 BF3 Inorganic materials 0.000 claims description 2
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical group [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N Diisopropyl ether Chemical compound CC(C)OC(C)C ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 claims description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- MDXGYYOJGPFFJL-QMMMGPOBSA-N N(alpha)-t-butoxycarbonyl-L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OC(C)(C)C MDXGYYOJGPFFJL-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 2
- OKJIRPAQVSHGFK-UHFFFAOYSA-N N-acetylglycine Chemical compound CC(=O)NCC(O)=O OKJIRPAQVSHGFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 235000010724 Wisteria floribunda Nutrition 0.000 claims description 2
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000001408 amides Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 claims description 2
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Chemical group BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052794 bromium Chemical group 0.000 claims description 2
- YZIYKJHYYHPJIB-UUPCJSQJSA-N chlorhexidine gluconate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O.C1=CC(Cl)=CC=C1NC(=N)NC(=N)NCCCCCCNC(=N)NC(=N)NC1=CC=C(Cl)C=C1 YZIYKJHYYHPJIB-UUPCJSQJSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 claims description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 2
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000004292 cyclic ethers Chemical class 0.000 claims description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 2
- 238000005202 decontamination Methods 0.000 claims description 2
- 230000003588 decontaminative effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 2
- 229940043279 diisopropylamine Drugs 0.000 claims description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 2
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 claims description 2
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N guanidine group Chemical group NC(=N)N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 2
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 claims description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 claims description 2
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 claims description 2
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 claims description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 229920000058 polyacrylate Polymers 0.000 claims description 2
- 229920005990 polystyrene resin Polymers 0.000 claims description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 2
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 claims description 2
- 239000002002 slurry Substances 0.000 claims description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 2
- 238000001665 trituration Methods 0.000 claims description 2
- 101100400378 Mus musculus Marveld2 gene Proteins 0.000 claims 1
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N caesium atom Chemical class [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 claims 1
- 238000003466 welding Methods 0.000 claims 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 3
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 2
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 abstract 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 2
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 125000006307 alkoxy benzyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 150000004985 diamines Chemical class 0.000 description 1
- MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000006340 racemization Effects 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F220/00—Copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical or a salt, anhydride ester, amide, imide or nitrile thereof
- C08F220/02—Monocarboxylic acids having less than ten carbon atoms; Derivatives thereof
- C08F220/52—Amides or imides
- C08F220/54—Amides, e.g. N,N-dimethylacrylamide or N-isopropylacrylamide
- C08F220/56—Acrylamide; Methacrylamide
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F220/00—Copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical or a salt, anhydride ester, amide, imide or nitrile thereof
- C08F220/02—Monocarboxylic acids having less than ten carbon atoms; Derivatives thereof
- C08F220/52—Amides or imides
- C08F220/54—Amides, e.g. N,N-dimethylacrylamide or N-isopropylacrylamide
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J39/00—Cation exchange; Use of material as cation exchangers; Treatment of material for improving the cation exchange properties
- B01J39/08—Use of material as cation exchangers; Treatment of material for improving the cation exchange properties
- B01J39/16—Organic material
- B01J39/18—Macromolecular compounds
- B01J39/20—Macromolecular compounds obtained by reactions only involving unsaturated carbon-to-carbon bonds
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J39/00—Cation exchange; Use of material as cation exchangers; Treatment of material for improving the cation exchange properties
- B01J39/26—Cation exchangers for chromatographic processes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/04—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length on carriers
- C07K1/042—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length on carriers characterised by the nature of the carrier
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F8/00—Chemical modification by after-treatment
- C08F8/30—Introducing nitrogen atoms or nitrogen-containing groups
- C08F8/32—Introducing nitrogen atoms or nitrogen-containing groups by reaction with amines
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Dental Preparations (AREA)
- Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
- Polymerisation Methods In General (AREA)
- Separation Of Suspended Particles By Flocculating Agents (AREA)
- Graft Or Block Polymers (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Manufacture Of Macromolecular Shaped Articles (AREA)
Description
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarza¬ nia nowych kopolimerów akrylowych zawieraja¬ cych grupy aminowe, znajdujacych zastosowanie w syntezie peptydów w fazie stalej.Sposób wedlug wynalazku polega na tym, ze w temperaturze 0—25°C dziala sie etylenodwu- amina na zywice otrzymana przez kopolimeryza- cje trzech monomerów, zgodnie z opisem paten¬ towym nr 137 633 a mianowicie: — I. Pierwszego monomeru, nazywanego dalej podstawowym ogniwem lancucha, stanowiacego N- -akrylilopolimetylenoimine o wzorze 1, w którym Rx oznacza atom wodoru lub grupe -CH3, a Z oznacza grupe -(CH^^-, gdzie nx oznacza liczbe 4, 5 lub 6 lub Z oznacza grupe -(CH2)2-X-(CH2)2-, gdzie X oznacza atom tlenu lub grupe =N-CH3 lub N-akrylilodwualkiloamid o wzorze 2, w którym Rx ma wyzej podane znaczenie, a 1^ oznacza grupe -CH3 lub -C2H5.— II. Drugiego monomeru, nazywanego dalej czynnikiem sieciujacym, stanowiacego N,N'-dwu- akrylilodwuaminoalkan o wzorze 3, w którym n2 oznacza liczbe 1 lub 2, oraz — III. Trzeciego monomeru, nazywanego dalej czynnikiem funkcjonalizujacym, stanowiacego N- akryliloaminokwas lub ester o wzorze 4, w któ¬ rym Rx oznacza atom wodoru lub grupe -CH3, R3 oznacza atom wodoru lub grupe -CH3, a n ozna¬ cza liczbe 1, 2, 3 lub 5, lub asymetryczny N-akry- liloaminokwas (lub ester) szeregu o konfiguracji L, 20 25 33 2 Rx oznacza atom wodoru lub grupe -CH3, R3 ma wyzej podane znaczenie, o wzorze 5, w którym a R4 oznacza grupe -CH3 -CH =(CH3)2, -CH=(CH3)2, _ -CH2" grupe o wzorze 6, grupe o wzorze 7, grupe -CH2CH2-S-CH3 lub grupe -(CH2)4-NH2 lub tez stanowiacego N-akrylilo(L)proline lub jej ester metylowy, o wzorze 8, w którym Rx oznacza atom wodoru lub grupe -CH3, a R3 ma wyzej podane znaczenie. Wyzej opisana zywice, poddawana dzia¬ laniu etylenodwuaminy, mozna w uproszczeniu okreslic wzorem 9, w którym P oznacza reszte po¬ limerowa, a R oznacza atom wodoru lub grupe CH3. Zywice te równiez w dalszym ciagu opisu oznacza sie dla uproszczenia symbolem A.Tak wiec, sposobem wedlug wynalazku grupy aminowe wprowadza sie tworzac odgalezienie w drodze amidowania za pomoca etylenodwuaminy.W ten sposób ze zwiazku o wzorze 9 (A) otrzymuje sie zwiazek o wzorze 10 (B).W praktyce amidowanie wedlug wynalazku mozna dokonac jednym z nastepujacych warian¬ tów sposobu: a) w przypadku polimeru z grupa kwasowa (wzór 9, R=H) przez sprzezenie z etylenodwuamina przy uzyciu jednego z reagentów stosowanych w literaturze: dwucykloheksylokarbodwuimidu (DCC) w obecnosci czynnika aktywujacego, jak 1-hydroksybenzotriazol (HOBt) lub szesciofluoro- fosforan benzotriazol-l-yl-oksy-tris(dwumetylo- amino)fosfoniowy (BOP); 138 979138 979 b) w przypadku polimeru z grupa estrowa (wzór 9, R = CH ) przez mieszanie zywicy, w tem¬ peraturze pokojowej, z nadmiarem bezwodnej ety- lenodwuaminy.W przypadku b) systematyczne badania doswiad- 5 czalne pozwolily ograniczyc reakcje wtórne most¬ kowania i zachowac 90% poczatkowej zawartosci grup funkcyjnych.Opracowywany od 1962 r. sposób syntezy peptydów w fazie stalej przy uzyciu zasadniczo dwóch nos- 10 ników polistyrenowych (zywicy benzhydrylamino- wej MERRIFIELD i zywicy alkoksybenzylowej PAM) jest dobrze znany i stanowi przedmiot licz¬ nych publikacji (np. Erickson i Merrifield w mo¬ nografii The Proteins, Neurath & Hill tom 2, 15 Academic Press, 1976, strona 255; Birr. Aspects of the Merrifield Peptide Synthesis, Springer 1978; Barany i Merrifield w monografii Gross & Meien- hoffer, The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology, tom 2, czesc 2, Academic Press, 1980, strona 1). 20 Zywice zawierajace odpowiednie grupy funkcyjne estryfikuje sie lub amiduje N-ochronionym amino¬ kwasem zajmujacym w syntetyzowanym peptydzie pozycje C-terminalna. Po odblokowaniu funkcji aminowej dokonuje sie sprzezenia, jednym z licz- 25 nych sposobów opisanych w literatrze, z N-ochro¬ nionym aminokwasem zajmujacym w syntetycznej sekwencji pozycje przedostatnia. Operacje te powtarza sie do uzyskania na zywicy zadanego lancucha peptydowego. W ostatnim etapie peptyd 30 odcina sie od nosnika.Sposób ten ma w stosunku do syntezy w roz¬ tworze pewne zalety, zwlaszcza prostote i szybkosc procesu (nie jest konieczne wydzielanie i oczysz¬ czanie peptydu po kazdym sprzezeniu), latwa eli- B5 minacje nadmiaru reagentów i zanieczyszczen przez odsaczenie i przemycie nosnika, brak lub znaczne ograniczenie racemizacji. Wada jest ko¬ niecznosc praktycznie ilosciowego przebiegu kazdej reakcji sprzegania; kazda reakcja niepelna prowa- *° dzilaby do akumulacji niepelnych lancuchów pepty- dowych, które zanieczyszczalyby produkt koncowy.Stad wynika koniecznosc stosowania znacznego nadmiaru reagentów i powtarzania kazdej operacji sprzegania do uzyskania wyniku próby analitycz- tt nej swiadczacego o calkowitym zaniku na zywicy wolnej funkcji NH2. Jest to niekorzystne wówczas, gdy synteza wymaga stosowania aminokwasów innych niz naturalne, czasami rzadkich i drogich.W celu wyciagniecia korzysci zwiazanych z reak¬ cjami zachodzacymi w fazie jednorodnej, zapro¬ ponowano stosowanie polimerów rozpuszczalnych (Mutter i Bayer w monografii Gross & Meienhofer, The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology, tom 2, czesc A, Academic Press, 1980, strona 285), a zwlaszcza glikolu polietylenowego. Technika ta ma obecnie ograniczone zastosowanie, prawdopo¬ dobnie z powodu problemów eksperymentalnych, jakie wynikaja ze zmniejszenia rozpuszczalnosci, towarzyszacemu wydluzeniu lancucha peptydowe- 60 go; izolacji nosnika, wymagajacej ultrasaczenia, po kazdym sprzeganiu (Mutter, Hagenmaier i Bayer, Angew, Chem. Int. Ed. 1971, 10, 811; Bayer Gatfield, Mutter i Mutter, Tetrahedron, 1978, 34, 1829) lub krystalizacji przez dodanie eteru, po ewentualnej 65 50 55 eliminacji rozpuszczalnika (Bayer i Mutter, Chem..Ber., 1974, 107, 1344; Mutter, Uhmann i Bayer, Ann.Chem., 1975, strona 901; Corring i Jung, Ann.Chem., 1975, strona 1765 i 1776); odcinania psptydu od nosnika (Tjoeng, Tong i Hodges, J. Org. Chem., 1978, 43, 4190; Tjoeng i Hodges, Tetrahedron Letters, 1979, strona 1273; Mutter i Bayer i Gatfield, J. Org. Chem., 1980., 45, 5364).Te same trudnosci wystepuja w przypadku nos¬ ników rozpuszczalnych na bazie polistyrenu slabo sieciowanego lub nie sieciowanego, wymagajacych saczenia zelu (Birr, „Peptides 1972", North Holland Publ., 1973, strona 72) Andreatta i Rink, Helv.Chim. Acta, 1973, 56, 120£) lub wytracenia alkoho¬ lem (Narita, Buli. Chem. Soc. Japan, 1978, 51, 1477).Malo rozwinieta jest równiez technika syntezy przemiennej faza ciekla — faza stala (Frank, Meyer i Hagenmaier, Chem. Zeit, 1977, 101, 188).Ostatnio opracowano szereg nosników poliakry- lowych (zywica PAP, Walter, J. Amer. Chem. Soc, 1979, 101, 5383 i zywica Shepparda, JCS Perkin I, 1981, strona 529 i 538) i polimerów styrenowych (Atherton, Gait, Sheppard i Williams, Bioorg. Chem. 1979, 8, 774) majacych wlasciwosc pecznienia w sze¬ rokim zakresie rozpuszczalników. Stosowanie tych zywic ma szereg zalet, zwlaszcza latwiejsze odcina¬ nie polipeptydu od nosnika, po zakonczeniu syn¬ tezy; lepsza zgodnosc wlasciwosci solwatacyjnych nosnika i syntetyzowanej czesci peptydu, który to czynnik z natury ogranicza mozliwosci sprzegania.Szczególnie wykazano korzystny wplyw solwatacji ukladu zywica-peptyd na wydajnosc reakcji syn¬ tezy (Atherton, Woolney i Sheppard, Chem. Comm., 1980, strona 970). Jednakze zywic tych dotycza te same zastrzezenia, które sformulowano wobec zywic polistyrenowych, a wiec koniecznosc stoso¬ wania duzego nadmiaru reagentów (rzedu 2,5-krot- nego w stosunku do teoretycznego zapotrzebowa¬ nia) i koniecznosc kilkakrotnego powtarzania operacji sprzegania. W tym wzgledzie jest zna¬ mienne, ze w ostatnich syntezach dlugolancucho- wych polipetydów, stosuje sie metode operacji w roztworze np. Kenner, Rakage i Sheppard, Tetrahedron, 1979, 35, 2767; Nagaraj i Balaran, Tetrahedron, 1981, 37, 1263; Fuji i Yajima, JCS Perkin I 1981, strona 789, 787 i 804.Ostatnio zaproponowano nowy zel poliakrylami- dowy zmniejszajacy wyzej omówione róznice sol¬ watacji matrycy i syntetyzowanego lancucha po- lipeptydowego (Repton i Williams, Inst. J. Biol.Macromol. 1981, 3, 334). Wystepujace na tym nos¬ niku przeszkody steryczne sa takie, ze zywice te mozna stosowac jedynie do syntezy krótkich pepty¬ dów. Ponadto, koncowe odszczepienie grup ochron¬ nych wymaga bardzo dlugotrwalego (kilkudnio¬ wego) traktowania trójfluorkiem boru.Jak przedstawiono ponizej, kopolimery wytwa¬ rzane sposobem wedlug wynalazku stosowane jako nosniki umozliwiaja uproszczenie i znaczna po¬ prawe warunków syntezy peptydówej.Aby móc przeprowadzic synteze peptydu, ko¬ nieczne jest jeszcze przeprowadzenie modyfikacji zywicy wedlug wynalazku, przez wprowadzenie od¬ wracalnego ukladu kotwiczenia. Okreslenie tor138 979 6 oznaczajace miejsce wiazania pierwszego amino¬ kwasu na zywicy, wyjasnione jest blizej w pracy Mizoguchi i in. Chem. Pharm. Buli. 1970. 18, 1465.Przykladowo, mozna w tym celu stosowac zwiazek o wzorze 11, w którym X oznacza atom chloru lub 5 bromu lub grupe OH, a Y oznacza grupe -CH2-0- lub grupe -CHj- (Mitchell, Erickson, Ryabtsev, Hodges i Merrifield, J. Amer. Chem. Soc, 1976, Stahl, Walter i Smith, J. Amer. Chem. Soc. 1979, 101, 5383; Atherton, Logan i Sheppard, JCS Per- io kin I, 1981, strona 538; Atherton, Hubsher, Shep¬ pard i Wooley, 2, Physiol. Chem. 1981, 362, 833).Reakcja miedzy zwiazkiem o wzorze 10 a zwiaz¬ kiem o wzorze 11, z wytworzeniem produktu o wzorze 12, przebiega praktycznie ilosciowo, przy 15 uzyciu jednego z wyzej podanych czynników sprze¬ gajacych lub przez dzialanie na zwiazek o wzo¬ rze 10 aktywnym estrem zwiazku o wzorze 11 (spo¬ rzadzonym przy uzyciu 2,4,5-trójchlorofenolu, pieciochlorofenolu itp.), w obecnosci katalizatora 20 (HOBT, BOP) lub bez katalizatora.Inny uklad odwracalnego kotwiczenia mozna otrzymac przy uzyciu reagentu o wzorze 13, który kondensuje ze zwiazkiem o wzorze 10 z wytwo¬ rzeniem zwiazku o wzorze 14 (przebieg reakcji 25 przedstawiono na schemacie).Ten typ kotwiczenia, stosowany juz w przypadku rzywic polistyrenowych (Mizoguchi, Shigezan i Takamura, Chem. Pharm. Buli., 1970, 18, 1465; Wang, J. Org. Chem., 1876, 41, 3225) jest w przy- 30 padku nosnika poliakrylowego oryginalny.Przylaczenia aminokwasu C-terminalnego w pierwszym etapie i koncowego odciecia peptydu od nosnika dokonuje sie w warunkach jak wyzej podane. f85 Zawartosc grup funkcyjnych w zywicach sto¬ sowanych w syntezie peptydowej wynosi od 0,2 do 5 milirównowazników na gram, korzystnie 1,0 do 1,2 milirównowazników na gram.Przylaczenia do zywicy C-terminalnego amino- ^ kwasu z grupa NH2 ochroniona np. grupa odszcze- pialna kwasem, jak t-butoksykarbonylowa (Boc) lub grupa odszczepialna zasada, jak fluorenylome- toksykarbonylowa (Fmoc) mozna dokonac róznymi sposobami: * — przez przejsciowa sól cezowa, gdy X=C1 lub Br, — przez dzialanie dwucykloheksylokarbodwuimi- dem (DCC) w obecnosci 4-dwumetyloaminopiry- dyny (DMAP), jako katalizatora, gdy X=OH, 50 — w przypadku gdy X=OH, sporzadzajac syme¬ tryczny bezwodnik N-ochronionego aminokwasu i dzialajac na niego zwiazkiem o wzorze 12 w obec¬ nosci DMAP.Koncowego odszczepienia peptydu od nosnika 55 mozna dokonac: — za pomoca rozcienczonego roztworu nieorga¬ nicznej zasady, gdy Y jest g^upa metylenowa lub w przypadku zwiazku o wzorze 14; w przypadku uzycia NHj/CHjOH mozliwe jest uzyskanie C-ter- 60 minalnego amidu; — za pomoca rozcienczonego roztworu organicz¬ nego kwasu, takiego jak trójfluorooctowy, gdy Y jest grupa -CH2-Q-.Metodologia syntezy peptydowej. 65 Nosniki stanowiace przedmiot wynalazku maja wlasciwosci dobrej rozpuszczalnosci i znacznego pecznienia w szerokim zakresie rozpuszczalników protonowych i bezprotonowych jak równiez w wod¬ nych buforach o róznej wartosci pH.W tych warunkach, po sprzeganiu, zywica nio¬ saca C-terminalny N-Boc lub N-Fmoc aminokwas (lub peptyd, opracowywany i odpowiednio ochro¬ niony, zachowuje sie jak „pseudoroztwór" i wy¬ tworzony zel staje' sie przenikalny. Stwarza to warunki szczególnie korzystne, zblizone do panu¬ jacych w fazie jednorodnej, dla formowania wia¬ zan peptydowych. Po zakonczeniu reakcji,, dodanie trzeciego rozpuszczalnika (eteru, THF, dioksanu itp.) powoduje wyparcie rozpuszczalnika przenika¬ jacego zywice i wytracenie jej w postaci latwej do odsaczenia w przeciwienstwie do tego, co ma miejsce w obecnym stanie techniki.Te szczególne wlasciwosci zywic wytwarzanych sposobem wedlug wynalazku znacznie zwiekszaja szybkosc (co najmniej trzykrotnie w stosunku do uzyskiwanej dotychczas) i wydajnosc sprzegania.Wynika z tego mozliwosc znacznego zmniejszenia wartosci stosunku liczba moli N-ochronionego aminokwasu/stopien zawartosci grup funkcyjnych kopolimeru do 1,1-1,2, podczas gdy wartosci nor¬ malne sa rzedu 2,5. Ponadto, nigdy nie wystepuje zatykanie kolumn podczas posrednich operacji sa¬ czenia.Przemienne sprzeganie w fazie guasi-jednorodnej i wytracanie kopolimeru stanowi nowa, uprosz¬ czona i ulepszona metodologie syntezy peptydów w fazie stalej.Sprzeganie moze, przykladowo, obejmowac na¬ stepujace operacje: 1. Dodanie obojetnego rozpuszczalnika, takiego jak CHCly CH2012 lub DMA w celu speczniania zywicy obciazonej C-terniinalnym N-Boc-aimino- kwasem (lub odpowiednio ochronionym peptydem). 2. Przemycie liniowym lub cyklicznym eterem, takim jak eter etylowy, eter izopropylowy, THF lub dioksan. 3. Dodanie kwasu trójfluorooctowego w rozpusz¬ czalniku, w celu odblokowania grupy NH„. 4. Wytracenie zywicy przez dodanie eteru, jak w 2. 5. Odsaczenie i czterokrotne przemycie eterem, jak w 2. 6. Zobojetnienie przez dodanie dwuizopropylo- aminy w obojetnym rozpuszczalniku. 7. Czterokrotne przemycie eterem, jak w 2 i na¬ stepne wysuszenie w strumieniu azotu. 8. Sprzegniecie, przez mieszanie z roztworem sy¬ metrycznego bezwodnika N-Boc-aminokwasu (spo¬ rzadzonego oddzielnie) w chlorowanymi rozpusz¬ czalniku. 9. Wytracenie przez dodanie eteru, jak w 2 i od¬ saczenie. 10. Czterokrotne przemycie eterem, jak w 2.Powyzsza nowa metodologie wypróbowano, z powodzeniem, w syntezie peptydów biologicznie czynnych np. undekapeptydu Ac-Gly-Gly-Lys-Gly- -Gly-Ala-Arg -Lys-Val-Leu-Homoser.Przyklad. Synteza peptydu Ac-Gly-Gly-Lys-Gly- -GIy-Ala-Arg-Lys-Val-Leu-Homoser.138 979 7 Peptyd syntetyzuje sie na zywicy akrylowej otrzymanej przez kopolimeryzacje N-aikrylilopiro- lidyny, etylenodwuakrylamadu i N-akrylowej po¬ chodnej estru metylowego kwasu s-aminokaprono- wego zgodnie z opisem patentowym nr 137 653.Gruipy funkcyjne do nosnika wprowadza sie w na¬ stepujacy sposób: do 1 g zywicy z funkcja C02CH3 dodaje sie 3!2 ml redestylowanej etyleno- dwuaminy i miesza w ciagu nocy w temperaturze pokojowej. Zywice odsacza sie, przemywa zdeimi- neralizowana woda do odczynu obojetnego, a na¬ stepnie etanolem i eterem. Z kolei zywice suszy sie w ciagu 24 godzin pod zmniejszonym cisnie¬ niem. Tak spreparowana zywica zawiera 1 mili- równowaznik NH2 na gram materialu suchego.Stosuje sie 2 g zywicy, czyli 2 milirównowazniki NH2. Cykl operacja wiazania aminokwasu na nos¬ niku jest nastepujacy: 20 Rozpuszczalnik lub odczynnik bezwodny eter etylowy — — — kwas trójfluoro- octowy 30/CH2- -Cl2 70 (objeto¬ sciowo) — bezwodny eter etylowy Nr 1 2 3 4 5 6 7 1 - i s — dwuizopropylo- etyloamina lO/CHgCLj 90 (objetosciowo) i — bezwodny eter etylowy — — — dodanie syme¬ trycznego bez¬ wodnika sprze¬ ganego amino¬ kwasu w 50 ml CH2C12 | 1 9 10 11 12 13 14 15 | 16 | 17 Reakcja 1 plukanie . — — — odszcze- pienie grupy ochronnej — plukanie — — — zobojetnia¬ nie — 1 plukanie — — | — sprzeganie | Obje¬ tosc, 1 ml 75 — — — 50 50 75 — Czas, min 1 2 — — — 2 2 | 30 — — ! — — 50 — 75. — — j — 2 30 2 — — - L- 1 50 1 •'60 25 30 85 45 55 60 Rozpuszczalnik lub odczynnik bezwodny eter etylowy — — — dwuizopropylo- etyloamina 10/CH2C12 90 (objetosciowo) — I bezwodny eter etylowy — — 1 — dodanie syme¬ trycznego bez¬ wodnika sprze¬ ganego amino¬ kwasu w 50 ml eter etylowy — — — | Nr 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 26 29 30 31 32 Reakcja plukanie — — — zobojetnia¬ nie — plukanie — — — sprzeganie plukanie — — — 1 Obje¬ tosc, | ml 75 — — — 50 — 75 — — — 50 75 — — — | Czas, min 2 — — — 2 30 2 — — — 30 2 — — — Sprawdzanie przebiegu sprzegania za pomoca testu nirhydrynowego Kaisera.Jak opisano powyzej, dla kazdego wprowadza¬ nego aminokwasu systematycznie dokonuje sie dwóch sprzegan. Reakcje sprzegania przeprowadza sie przy uzyciu symetrycznych bezwO'dników, któ¬ re sporzadza sie w nastepujacy sposób: 1 rhmol ochronionego aminokwasu rozpuszcza sie w 20 mil bezwodnego CH^Cl^, roztwór oziebia sie do 0°C i dodaje 0,5 mmola dwucykMiekjsylo- karbodwurmidu rozpuszczonego w 10 ml CH2C12.Po 20 minuatch reakcji w 0°C odsacza sie wytra¬ cony dwucyikooheksylomocznik i przemywa 20 ml CI^Clj, roztwory laczy sie i kontaktuje z zywica, w reaktorze.Powyzszym sposobem mozna sporzadzac syme¬ tryczne bezwodniki Boc Gly OH, N£ZNa Boc Lys OH, Boc Val OH, Boc Leu OH, Boc Met OH i Ac Gly OH. W przypadku N<* N02, N« 3oc Arg OH produkt rozpuszcza sie w mlinimalnej objetosci DMF i uzupelnia oibjetosÓ do 20 ml za pomoca suchego chlorku metylenu; nastepnie reakcje prze¬ prowadza sie jak wyzej opisano.138 979 10 Po sprzegnieciu ostatniego aminokwasu zywice suszy sie pod zmniejszonym cisnieniem, w obec¬ nosci P205 w ciagu 24 godzin i zawiesza- w 50 ml kwasu trójfluorooctowego. Przez zawiesine prze¬ puszcza sie .w ciagu 2 godzin powolny strumien suchego HBr. Z kolei zawiesine plucze sie duza objetoscia CH2C12 i Et20. Powyzsza acydoliza od¬ blokowuje lancuchy boczne lizyny.Otrzymany proszek czerwonopomaranezowej • barwy zawiesza sie w 100 ml 2 M kwasu trój- fluorooctowego i dodaje 5 g pylu cynkowego. Po 12 godzinach mieszania w temperaturze pokojowej przemywa sie duza objetoscia 2|N HC1, woda, eta¬ nolem i na koncu bezwodnym eterem etylowym.Powyzsza wodoroliza odszczepia grupe nitrowa na grupie guanidynowej argindny.Po suszeniu zywicy w ciagu 12 godzin pod zmniejszonym cisnieniem, nad P205 otrzymuje sie 1 g polimeru, który zadaje sie 2,5 g bromocyjanu w 70 ml kwasu propionowego. Po 24 godzinach reakcji w temperaturze pokojowej produkt liofili¬ zuje sie, otrzymujac zadany peptyd, z wydajno¬ scia 45%.Zastrzezenia' patentowe 1. Sposób wytwarzania nowych kopolimerów akrylowych, zawierajacych grupy aminowe o za¬ wartosci korzystnie 2—5 milirównowazników na gram oraz ewentualnie stosunek liczby moli N-ochr.onionego aminokwasu do zawartosci grup aminowych korzystnie wynosi 1,1—1,2, znamienny tym, ze w temperaturze 0 do 25°C dziala sie ety- lenodwuamina na zywice otrzymana przez kopoli- 15 25 30 meryzacje trzech monomerów, a mianowicie pierwszego monomeru stanowiacego N-akrylilopo- limetylenoimiine o wzorze 1, w którym Rx oznacza atom wodoru lub grupe -CH3, Z oznacza grupe -(CH2)n-, gdzie nx oznacza liczbe 4, 5 lub 6 lub Z oznacza grupe -(CH2)2-X-(CH2)2-, gdzie X oznacza atom tlenu lub grupe = N-CH3 lub N-akrylilo- dwualkiloamid o wzorze 2, w którym R2 ma wy¬ zej podane znaczenie, a R2 oznacza grupe -CH3 lub C2H5, drugiego monomeru stanowiacego N,N'-dwuakrylilodwuaminoalikan o wzorze 3, w którym n2 oznacza liczbe 1 lub 2 i trzeciego monomeru stanowiacego N-akryliloaimdnokwas o wzorze 4, w którym Rx oznacza atom wodoru lub grupe -CH3, R3 oznacza atom wodoru lub grupe ^CH3, a n3 oznacza liczbe 1, 2, 3 lub 5 lub asymetryczny N-akryliloaminokwas (lub ester) sze¬ regu o konfiguracji L, o wzorze 5, w którym Rx ozna¬ cza atom wodoru lub grupe -CH3, R3 ma wyzej po¬ dane znaczenie, a R4 oznacza grupe -CH3, -CH = = (CH3)2, -CH2-CH=(CH3)2, grupe o wzorze 6, grupe o wzorze 7, grupe -CH2-CH2-S-CH3 lub grupe -(CH2)4- -NH2 albo stanowiacego N-akrylilo(L)proline lub jej ester metylowy o wzorze 8, w którym Rx ozna¬ cza atom wodoru lub grupe -CH3, a R3 ma wyzej podane znaczenie. 2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze reakcje przeprowadza sie w obecnosci dwucyklo- heksylokarbodwuimidu, gdy Rx oznacza atom wo¬ doru. 3. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze reakcje przeprowadza sie w obecnosci bezwodnej etylenodwuaminy, gdy R2 oznacza grupe CH3. :i CH?=C-C-N Z 1 II K^ o WZtfR 1 f1 CH9=C — C—N •*2 Ó X*2 WZtfR 2 Chb=CH- C- NH-(CH2)n9- NH- C — CH = Chb 2 u 2n2 n O 0 WZÓR 3 Ci-!o= C- C- N — (CHoU— C — 0R3 2 I II I 3 II Ri 0 H 0 WZCJR U138 979 CH2=C-C-NH-CH-C-OR, ©-{j-°R I » I II - o Ri o r4 o WZCfR 5 WZdR 9 (?)- C-NH-iCH2)2 — NH- CH O WZdR WZdR6 O -cHo-/ny_n« ho ^-y-^J-ch^ WZdR 11 WZdR 7 o CH2=C-C-N ' II O r~i ii ^-rNH_iuH2'2-NH-v-Y—v @-C-NH-(CH2)2-NH-C-Y—. ^~CH2X £ 0 " ÓR3 WZ0R 12 WZClR 8 @-C-NH-(CH2)2- NH2 H02C-CH-Br O .i R WZdR 10 WZdR 13 -C P4-C-NH-(CH9)9—NH-C-CH-Br v.y i! ^ II i O . O R WZdR U SCHEMAT Zakl. Graf. Radom — 1174/87 85 egz. A4 Cena 130 zl PL PL
Claims (3)
1. zastrzezenia, które sformulowano wobec zywic polistyrenowych, a wiec koniecznosc stoso¬ wania duzego nadmiaru reagentów (rzedu 2,5-krot- nego w stosunku do teoretycznego zapotrzebowa¬ nia) i koniecznosc kilkakrotnego powtarzania operacji sprzegania. W tym wzgledzie jest zna¬ mienne, ze w ostatnich syntezach dlugolancucho- wych polipetydów, stosuje sie metode operacji w roztworze np. Kenner, Rakage i Sheppard, Tetrahedron, 1979, 35, 2767; Nagaraj i Balaran, Tetrahedron, 1981, 37, 1263; Fuji i Yajima, JCS Perkin I 1981, strona 789, 787 i 804. Ostatnio zaproponowano nowy zel poliakrylami- dowy zmniejszajacy wyzej omówione róznice sol¬ watacji matrycy i syntetyzowanego lancucha po- lipeptydowego (Repton i Williams, Inst. J. Biol. Macromol. 1981, 3, 334). Wystepujace na tym nos¬ niku przeszkody steryczne sa takie, ze zywice te mozna stosowac jedynie do syntezy krótkich pepty¬ dów. Ponadto, koncowe odszczepienie grup ochron¬ nych wymaga bardzo dlugotrwalego (kilkudnio¬ wego) traktowania trójfluorkiem boru. Jak przedstawiono ponizej, kopolimery wytwa¬ rzane sposobem wedlug wynalazku stosowane jako nosniki umozliwiaja uproszczenie i znaczna po¬ prawe warunków syntezy peptydówej. Aby móc przeprowadzic synteze peptydu, ko¬ nieczne jest jeszcze przeprowadzenie modyfikacji zywicy wedlug wynalazku, przez wprowadzenie od¬ wracalnego ukladu kotwiczenia. Okreslenie tor138 979 6 oznaczajace miejsce wiazania pierwszego amino¬ kwasu na zywicy, wyjasnione jest blizej w pracy Mizoguchi i in. Chem. Pharm. Buli. 1970. 18, 1465. Przykladowo, mozna w tym celu stosowac zwiazek o wzorze 11, w którym X oznacza atom chloru lub 5 bromu lub grupe OH, a Y oznacza grupe -CH2-0- lub grupe -CHj- (Mitchell, Erickson, Ryabtsev, Hodges i Merrifield, J. Amer. Chem. Soc, 1976, Stahl, Walter i Smith, J. Amer. Chem. Soc. 1979, 101, 5383; Atherton, Logan i Sheppard, JCS Per- io kin I, 1981, strona 538; Atherton, Hubsher, Shep¬ pard i Wooley, 2, Physiol. Chem. 1981, 362, 833). Reakcja miedzy zwiazkiem o wzorze 10 a zwiaz¬ kiem o wzorze 11, z wytworzeniem produktu o wzorze 12, przebiega praktycznie ilosciowo, przy 15 uzyciu jednego z wyzej podanych czynników sprze¬ gajacych lub przez dzialanie na zwiazek o wzo¬ rze 10 aktywnym estrem zwiazku o wzorze 11 (spo¬ rzadzonym przy uzyciu 2,4,5-trójchlorofenolu, pieciochlorofenolu itp.), w obecnosci katalizatora 20 (HOBT, BOP) lub bez katalizatora. Inny uklad odwracalnego kotwiczenia mozna otrzymac przy uzyciu reagentu o wzorze 13, który kondensuje ze zwiazkiem o wzorze 10 z wytwo¬ rzeniem zwiazku o wzorze 14 (przebieg reakcji 25 przedstawiono na schemacie). Ten typ kotwiczenia, stosowany juz w przypadku rzywic polistyrenowych (Mizoguchi, Shigezan i Takamura, Chem. Pharm. Buli., 1970, 18, 1465; Wang, J. Org. Chem., 1876, 41, 3225) jest w przy- 30 padku nosnika poliakrylowego oryginalny. Przylaczenia aminokwasu C-terminalnego w pierwszym etapie i koncowego odciecia peptydu od nosnika dokonuje sie w warunkach jak wyzej podane. f85 Zawartosc grup funkcyjnych w zywicach sto¬ sowanych w syntezie peptydowej wynosi od 0,2 do 5 milirównowazników na gram, korzystnie 1,0 do 1,2 milirównowazników na gram. Przylaczenia do zywicy C-terminalnego amino- ^ kwasu z grupa NH2 ochroniona np. grupa odszcze- pialna kwasem, jak t-butoksykarbonylowa (Boc) lub grupa odszczepialna zasada, jak fluorenylome- toksykarbonylowa (Fmoc) mozna dokonac róznymi sposobami: * — przez przejsciowa sól cezowa, gdy X=C1 lub Br, — przez dzialanie dwucykloheksylokarbodwuimi- dem (DCC) w obecnosci 4-dwumetyloaminopiry- dyny (DMAP), jako katalizatora, gdy X=OH, 50 — w przypadku gdy X=OH, sporzadzajac syme¬ tryczny bezwodnik N-ochronionego aminokwasu i dzialajac na niego zwiazkiem o wzorze 12 w obec¬ nosci DMAP. Koncowego odszczepienia peptydu od nosnika 55 mozna dokonac: — za pomoca rozcienczonego roztworu nieorga¬ nicznej zasady, gdy Y jest g^upa metylenowa lub w przypadku zwiazku o wzorze 14; w przypadku uzycia NHj/CHjOH mozliwe jest uzyskanie C-ter- 60 minalnego amidu; — za pomoca rozcienczonego roztworu organicz¬ nego kwasu, takiego jak trójfluorooctowy, gdy Y jest grupa -CH2-Q-. Metodologia syntezy peptydowej. 65 Nosniki stanowiace przedmiot wynalazku maja wlasciwosci dobrej rozpuszczalnosci i znacznego pecznienia w szerokim zakresie rozpuszczalników protonowych i bezprotonowych jak równiez w wod¬ nych buforach o róznej wartosci pH. W tych warunkach, po sprzeganiu, zywica nio¬ saca C-terminalny N-Boc lub N-Fmoc aminokwas (lub peptyd, opracowywany i odpowiednio ochro¬ niony, zachowuje sie jak „pseudoroztwór" i wy¬ tworzony zel staje' sie przenikalny. Stwarza to warunki szczególnie korzystne, zblizone do panu¬ jacych w fazie jednorodnej, dla formowania wia¬ zan peptydowych. Po zakonczeniu reakcji,, dodanie trzeciego rozpuszczalnika (eteru, THF, dioksanu itp.) powoduje wyparcie rozpuszczalnika przenika¬ jacego zywice i wytracenie jej w postaci latwej do odsaczenia w przeciwienstwie do tego, co ma miejsce w obecnym stanie techniki. Te szczególne wlasciwosci zywic wytwarzanych sposobem wedlug wynalazku znacznie zwiekszaja szybkosc (co najmniej trzykrotnie w stosunku do uzyskiwanej dotychczas) i wydajnosc sprzegania. Wynika z tego mozliwosc znacznego zmniejszenia wartosci stosunku liczba moli N-ochronionego aminokwasu/stopien zawartosci grup funkcyjnych kopolimeru do 1,1-1,2, podczas gdy wartosci nor¬ malne sa rzedu 2,5. Ponadto, nigdy nie wystepuje zatykanie kolumn podczas posrednich operacji sa¬ czenia. Przemienne sprzeganie w fazie guasi-jednorodnej i wytracanie kopolimeru stanowi nowa, uprosz¬ czona i ulepszona metodologie syntezy peptydów w fazie stalej. Sprzeganie moze, przykladowo, obejmowac na¬ stepujace operacje: 1. Dodanie obojetnego rozpuszczalnika, takiego jak CHCly CH2012 lub DMA w celu speczniania zywicy obciazonej C-terniinalnym N-Boc-aimino- kwasem (lub odpowiednio ochronionym peptydem). 2. Przemycie liniowym lub cyklicznym eterem, takim jak eter etylowy, eter izopropylowy, THF lub dioksan. 3. Dodanie kwasu trójfluorooctowego w rozpusz¬ czalniku, w celu odblokowania grupy NH„. 4. Wytracenie zywicy przez dodanie eteru, jak w 2. 5. Odsaczenie i czterokrotne przemycie eterem, jak w 2. 6. Zobojetnienie przez dodanie dwuizopropylo- aminy w obojetnym rozpuszczalniku. 7. Czterokrotne przemycie eterem, jak w 2 i na¬ stepne wysuszenie w strumieniu azotu. 8. Sprzegniecie, przez mieszanie z roztworem sy¬ metrycznego bezwodnika N-Boc-aminokwasu (spo¬ rzadzonego oddzielnie) w chlorowanymi rozpusz¬ czalniku. 9. Wytracenie przez dodanie eteru, jak w 2 i od¬ saczenie. 10. Czterokrotne przemycie eterem, jak w 2. Powyzsza nowa metodologie wypróbowano, z powodzeniem, w syntezie peptydów biologicznie czynnych np. undekapeptydu Ac-Gly-Gly-Lys-Gly- -Gly-Ala-Arg -Lys-Val-Leu-Homoser. Przyklad. Synteza peptydu Ac-Gly-Gly-Lys-Gly- -GIy-Ala-Arg-Lys-Val-Leu-Homoser.138 979 7 Peptyd syntetyzuje sie na zywicy akrylowej otrzymanej przez kopolimeryzacje N-aikrylilopiro- lidyny, etylenodwuakrylamadu i N-akrylowej po¬ chodnej estru metylowego kwasu s-aminokaprono- wego zgodnie z opisem patentowym nr 137 653. Gruipy funkcyjne do nosnika wprowadza sie w na¬ stepujacy sposób: do 1 g zywicy z funkcja C02CH3 dodaje sie 3!2 ml redestylowanej etyleno- dwuaminy i miesza w ciagu nocy w temperaturze pokojowej. Zywice odsacza sie, przemywa zdeimi- neralizowana woda do odczynu obojetnego, a na¬ stepnie etanolem i eterem. Z kolei zywice suszy sie w ciagu 24 godzin pod zmniejszonym cisnie¬ niem. Tak spreparowana zywica zawiera 1 mili- równowaznik NH2 na gram materialu suchego. Stosuje sie 2 g zywicy, czyli 2 milirównowazniki NH2. Cykl operacja wiazania aminokwasu na nos¬ niku jest nastepujacy: 20 Rozpuszczalnik lub odczynnik bezwodny eter etylowy — — — kwas trójfluoro- octowy 30/CH2- -Cl2 70 (objeto¬ sciowo) — bezwodny eter etylowy Nr 1 2 3 4 5 6 7 1 - i s — dwuizopropylo- etyloamina lO/CHgCLj 90 (objetosciowo) i — bezwodny eter etylowy — — — dodanie syme¬ trycznego bez¬ wodnika sprze¬ ganego amino¬ kwasu w 50 ml CH2C12 | 1 9 10 11 12 13 14 15 | 16 | 17 Reakcja 1 plukanie . — — — odszcze- pienie grupy ochronnej — plukanie — — — zobojetnia¬ nie — 1 plukanie — — | — sprzeganie | Obje¬ tosc, 1 ml 75 — — — 50 50 75 — Czas, min 1 2 — — — 2 2 | 30 — — ! — — 50 — 75. — — j — 2 30 2 — — - L- 1 50 1 •'60 25 30 85 45 55 60 Rozpuszczalnik lub odczynnik bezwodny eter etylowy — — — dwuizopropylo- etyloamina 10/CH2C12 90 (objetosciowo) — I bezwodny eter etylowy — — 1 — dodanie syme¬ trycznego bez¬ wodnika sprze¬ ganego amino¬ kwasu w 50 ml eter etylowy — — — | Nr 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 26 29 30 31 32 Reakcja plukanie — — — zobojetnia¬ nie — plukanie — — — sprzeganie plukanie — — — 1 Obje¬ tosc, | ml 75 — — — 50 — 75 — — — 50 75 — — — | Czas, min 2 — — — 2 30 2 — — — 30 2 — — — Sprawdzanie przebiegu sprzegania za pomoca testu nirhydrynowego Kaisera. Jak opisano powyzej, dla kazdego wprowadza¬ nego aminokwasu systematycznie dokonuje sie dwóch sprzegan. Reakcje sprzegania przeprowadza sie przy uzyciu symetrycznych bezwO'dników, któ¬ re sporzadza sie w nastepujacy sposób: 1 rhmol ochronionego aminokwasu rozpuszcza sie w 20 mil bezwodnego CH^Cl^, roztwór oziebia sie do 0°C i dodaje 0,5 mmola dwucykMiekjsylo- karbodwurmidu rozpuszczonego w 10 ml CH2C12. Po 20 minuatch reakcji w 0°C odsacza sie wytra¬ cony dwucyikooheksylomocznik i przemywa 20 ml CI^Clj, roztwory laczy sie i kontaktuje z zywica, w reaktorze. Powyzszym sposobem mozna sporzadzac syme¬ tryczne bezwodniki Boc Gly OH, N£ZNa Boc Lys OH, Boc Val OH, Boc Leu OH, Boc Met OH i Ac Gly OH. W przypadku N<* N02, N« 3oc Arg OH produkt rozpuszcza sie w mlinimalnej objetosci DMF i uzupelnia oibjetosÓ do 20 ml za pomoca suchego chlorku metylenu; nastepnie reakcje prze¬ prowadza sie jak wyzej opisano.138 979 10 Po sprzegnieciu ostatniego aminokwasu zywice suszy sie pod zmniejszonym cisnieniem, w obec¬ nosci P205 w ciagu 24 godzin i zawiesza- w 50 ml kwasu trójfluorooctowego. Przez zawiesine prze¬ puszcza sie .w ciagu 2 godzin powolny strumien suchego HBr. Z kolei zawiesine plucze sie duza objetoscia CH2C12 i Et20. Powyzsza acydoliza od¬ blokowuje lancuchy boczne lizyny. Otrzymany proszek czerwonopomaranezowej • barwy zawiesza sie w 100 ml 2 M kwasu trój- fluorooctowego i dodaje 5 g pylu cynkowego. Po 12 godzinach mieszania w temperaturze pokojowej przemywa sie duza objetoscia 2|N HC1, woda, eta¬ nolem i na koncu bezwodnym eterem etylowym. Powyzsza wodoroliza odszczepia grupe nitrowa na grupie guanidynowej argindny. Po suszeniu zywicy w ciagu 12 godzin pod zmniejszonym cisnieniem, nad P205 otrzymuje sie 1 g polimeru, który zadaje sie 2,5 g bromocyjanu w 70 ml kwasu propionowego. Po 24 godzinach reakcji w temperaturze pokojowej produkt liofili¬ zuje sie, otrzymujac zadany peptyd, z wydajno¬ scia 45%. Zastrzezenia' patentowe 1. Sposób wytwarzania nowych kopolimerów akrylowych, zawierajacych grupy aminowe o za¬ wartosci korzystnie 2—5 milirównowazników na gram oraz ewentualnie stosunek liczby moli N-ochr.onionego aminokwasu do zawartosci grup aminowych korzystnie wynosi 1,1—1,2, znamienny tym, ze w temperaturze 0 do 25°C dziala sie ety- lenodwuamina na zywice otrzymana przez kopoli- 15 25 30 meryzacje trzech monomerów, a mianowicie pierwszego monomeru stanowiacego N-akrylilopo- limetylenoimiine o wzorze 1, w którym Rx oznacza atom wodoru lub grupe -CH3, Z oznacza grupe -(CH2)n-, gdzie nx oznacza liczbe 4, 5 lub 6 lub Z oznacza grupe -(CH2)2-X-(CH2)2-, gdzie X oznacza atom tlenu lub grupe = N-CH3 lub N-akrylilo- dwualkiloamid o wzorze 2, w którym R2 ma wy¬ zej podane znaczenie, a R2 oznacza grupe -CH3 lub C2H5, drugiego monomeru stanowiacego N,N'-dwuakrylilodwuaminoalikan o wzorze 3, w którym n2 oznacza liczbe 1 lub 2 i trzeciego monomeru stanowiacego N-akryliloaimdnokwas o wzorze 4, w którym Rx oznacza atom wodoru lub grupe -CH3, R3 oznacza atom wodoru lub grupe ^CH3, a n3 oznacza liczbe 1, 2, 3 lub 5 lub asymetryczny N-akryliloaminokwas (lub ester) sze¬ regu o konfiguracji L, o wzorze 5, w którym Rx ozna¬ cza atom wodoru lub grupe -CH3, R3 ma wyzej po¬ dane znaczenie, a R4 oznacza grupe -CH3, -CH = = (CH3)2, -CH2-CH=(CH3)2, grupe o wzorze 6, grupe o wzorze 7, grupe -CH2-CH2-S-CH3 lub grupe -(CH2)4- -NH2 albo stanowiacego N-akrylilo(L)proline lub jej ester metylowy o wzorze 8, w którym Rx ozna¬ cza atom wodoru lub grupe -CH3, a R3 ma wyzej podane znaczenie.
2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze reakcje przeprowadza sie w obecnosci dwucyklo- heksylokarbodwuimidu, gdy Rx oznacza atom wo¬ doru.
3. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze reakcje przeprowadza sie w obecnosci bezwodnej etylenodwuaminy, gdy R2 oznacza grupe CH3. :i CH?=C-C-N Z 1 II K^ o WZtfR 1 f1 CH9=C — C—N •*2 Ó X*2 WZtfR 2 Chb=CH- C- NH-(CH2)n9- NH- C — CH = Chb 2 u 2n2 n O 0 WZÓR 3 Ci-!o= C- C- N — (CHoU— C — 0R3 2 I II I 3 II Ri 0 H 0 WZCJR U138 979 CH2=C-C-NH-CH-C-OR, ©-{j-°R I » I II - o Ri o r4 o WZCfR 5 WZdR 9 (?)- C-NH-iCH2)2 — NH- CH O WZdR WZdR6 O -cHo-/ny_n« ho ^-y-^J-ch^ WZdR 11 WZdR 7 o CH2=C-C-N ' II O r~i ii ^-rNH_iuH2'2-NH-v-Y—v @-C-NH-(CH2)2-NH-C-Y—. ^~CH2X £ 0 " ÓR3 WZ0R 12 WZClR 8 @-C-NH-(CH2)2- NH2 H02C-CH-Br O .i R WZdR 10 WZdR 13 -C P4-C-NH-(CH9)9—NH-C-CH-Br v.y i! ^ II i O . O R WZdR U SCHEMAT Zakl. Graf. Radom — 1174/87 85 egz. A4 Cena 130 zl PL PL
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB8134861 | 1981-11-19 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL239101A1 PL239101A1 (en) | 1983-08-29 |
| PL138979B1 true PL138979B1 (en) | 1986-11-29 |
Family
ID=10525991
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL1982239100A PL137653B1 (en) | 1981-11-19 | 1982-11-18 | Method of obtaining new acrylic copolymers |
| PL1982239101A PL138979B1 (en) | 1981-11-19 | 1982-11-18 | Method of obtaining novel acrylic copolymers contaning amine groups |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL1982239100A PL137653B1 (en) | 1981-11-19 | 1982-11-18 | Method of obtaining new acrylic copolymers |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US4436874A (pl) |
| EP (2) | EP0081408B1 (pl) |
| JP (2) | JPS5896615A (pl) |
| KR (2) | KR860000526B1 (pl) |
| AT (2) | ATE14890T1 (pl) |
| AU (2) | AU556992B2 (pl) |
| CA (2) | CA1199448A (pl) |
| DE (2) | DE3265458D1 (pl) |
| DK (2) | DK162532C (pl) |
| FI (2) | FI70234C (pl) |
| MX (2) | MX169477B (pl) |
| NO (2) | NO161978C (pl) |
| NZ (2) | NZ202539A (pl) |
| PL (2) | PL137653B1 (pl) |
| ZA (2) | ZA828369B (pl) |
Families Citing this family (27)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4631327A (en) * | 1982-12-29 | 1986-12-23 | Polaroid Corporation | β-Elimination polymers useful for providing diffusion control layers in diffusion transfer photographic products |
| US4683292A (en) * | 1983-08-12 | 1987-07-28 | Immunetech, Inc. | Immunotherapeutic polypeptide agents which bind to lymphocyte immunoglobulin FC receptors |
| JPS60235638A (ja) * | 1984-05-07 | 1985-11-22 | Mitsui Toatsu Chem Inc | 吸着・分離方法 |
| EP0163404B1 (en) * | 1984-05-28 | 1990-06-27 | MITSUI TOATSU CHEMICALS, Inc. | Agent for absorbing and releasing water vapor |
| US4691026A (en) * | 1985-07-30 | 1987-09-01 | Air Products And Chemicals, Inc. | Self- and hydroxyl reactive formaldehyde-free cyclic hemiamidal and hemiamide ketal crosslinking monomers |
| US4788288A (en) * | 1985-07-30 | 1988-11-29 | Air Products And Chemicals, Inc. | Self-and Hydroxyl reactive formaldehyde-free cyclic hemiamidal and hemiamide ketal crosslinking monomers |
| US4663410A (en) * | 1985-08-06 | 1987-05-05 | Air Products And Chemicals, Inc. | Polymers of self- and hydroxyl reactive formaldehyde-free cyclic hemiamidal and hemiamide ketal crosslinking monomers |
| GB8822502D0 (en) * | 1988-09-24 | 1988-10-26 | Expansia Sa | New peptide synthesis method |
| US5175254A (en) * | 1988-09-24 | 1992-12-29 | Societe D'expansion Scientifque Expansia | Solid phase peptide synthesis using a polyacrylic support in aqueous solution |
| US5280093A (en) * | 1989-06-29 | 1994-01-18 | Rhone-Poulenc Chimie | Chiral polymers for the synthesis of pure enantiomers of amino acids |
| US6031074A (en) * | 1989-08-25 | 2000-02-29 | National Institutes Of Health | Automated Peptide design and synthesis |
| FR2652581B1 (fr) * | 1989-10-02 | 1991-12-13 | Rhone Poulenc Chimie | Procede de solubilisation de peptides et procede de synthese de peptides. |
| US7056935B2 (en) * | 1995-06-07 | 2006-06-06 | Gpi Nil Holdings, Inc. | Rotamase enzyme activity inhibitors |
| US20020042377A1 (en) * | 1995-06-07 | 2002-04-11 | Steiner Joseph P. | Rotamase enzyme activity inhibitors |
| US20040221844A1 (en) * | 1997-06-17 | 2004-11-11 | Hunt Peter John | Humidity controller |
| FR2791582B1 (fr) * | 1999-04-02 | 2001-06-08 | Expansia Sa | Utilisation d'un support polymerique acrylique en catalyse supportee |
| AR021155A1 (es) | 1999-07-08 | 2002-06-12 | Lundbeck & Co As H | Tratamiento de desordenes neuroticos |
| FR2802121A1 (fr) * | 1999-12-14 | 2001-06-15 | Expansia Sa | Supports polymeriques organiques possedant des ligands mono- ou bi-dentates et leur utilisation en catalyse supportee |
| US6620939B2 (en) * | 2001-09-18 | 2003-09-16 | General Electric Company | Method for producing bisphenol catalysts and bisphenols |
| US7112702B2 (en) * | 2002-12-12 | 2006-09-26 | General Electric Company | Process for the synthesis of bisphenol |
| US7098253B2 (en) * | 2004-05-20 | 2006-08-29 | 3M Innovative Properties Company | Macroporous ion exchange resins |
| US7674835B2 (en) * | 2005-12-21 | 2010-03-09 | 3M Innovative Properties Company | Method of making macroporous anion exchange resins |
| US7683100B2 (en) * | 2005-12-21 | 2010-03-23 | 3M Innovative Properties Company | Method of making macroporous cation exchange resins |
| US7674836B2 (en) * | 2006-07-28 | 2010-03-09 | 3M Innovative Properties Company | Method of making macroporous cation exchange resins |
| JP2015214592A (ja) * | 2012-09-11 | 2015-12-03 | 味の素株式会社 | 温度応答性ポリマー及びその製造方法 |
| JP7135284B2 (ja) * | 2017-09-29 | 2022-09-13 | 株式会社リコー | 組成物、硬化物、収容容器、像形性装置、及び像形成方法 |
| CN110128589B (zh) * | 2019-05-31 | 2021-12-03 | 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 | 一种氨基酸改性微球的制备方法及其产品 |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2845408A (en) * | 1954-08-04 | 1958-07-29 | Rohm & Haas | Linear polymeric amides and methods of making them |
| US3069390A (en) * | 1959-07-17 | 1962-12-18 | Borden Co | Polymeric amides from polymeric acrylic acid esters and n-aminoalkyl alkanol amines and reaction products therefrom |
| BE627745A (pl) * | 1962-01-31 | |||
| GB1108383A (en) * | 1965-12-23 | 1968-04-03 | Kodak Ltd | Acrylic polymers and light sensitive materials containing them |
| JPS4948668B1 (pl) * | 1971-06-26 | 1974-12-23 | ||
| US3814732A (en) * | 1971-10-21 | 1974-06-04 | Hoffmann La Roche | Modified solid supports for solid phase synthesis |
| NL7311320A (pl) * | 1972-09-01 | 1974-03-05 | ||
| FR2205538A1 (en) * | 1972-11-06 | 1974-05-31 | Ceskoslovenska Akademie Ved | Acrylate or methacrylate copolymer - useful as support for solid phase peptide synthesis |
| DE2430128C3 (de) * | 1974-06-22 | 1981-11-05 | Röhm GmbH, 6100 Darmstadt | Verfahren zur Herstellung trägergebundener Polypeptide |
| US3965070A (en) * | 1974-10-07 | 1976-06-22 | Rohm And Haas Company | Crosslinked vinylcarbonyl resins having α-amino acid functionality |
-
1982
- 1982-11-10 US US06/440,440 patent/US4436874A/en not_active Expired - Lifetime
- 1982-11-10 US US06/440,441 patent/US4439545A/en not_active Expired - Lifetime
- 1982-11-15 ZA ZA828369A patent/ZA828369B/xx unknown
- 1982-11-15 FI FI823906A patent/FI70234C/fi not_active IP Right Cessation
- 1982-11-15 ZA ZA828370A patent/ZA828370B/xx unknown
- 1982-11-15 FI FI823905A patent/FI70233C/fi not_active IP Right Cessation
- 1982-11-16 CA CA000415705A patent/CA1199448A/fr not_active Expired
- 1982-11-16 CA CA000415706A patent/CA1199449A/fr not_active Expired
- 1982-11-17 NZ NZ202539A patent/NZ202539A/en unknown
- 1982-11-17 NZ NZ202538A patent/NZ202538A/en unknown
- 1982-11-18 DK DK513382A patent/DK162532C/da not_active IP Right Cessation
- 1982-11-18 AU AU90678/82A patent/AU556992B2/en not_active Ceased
- 1982-11-18 MX MX007920A patent/MX169477B/es unknown
- 1982-11-18 NO NO823864A patent/NO161978C/no not_active IP Right Cessation
- 1982-11-18 PL PL1982239100A patent/PL137653B1/pl unknown
- 1982-11-18 DK DK513282A patent/DK162651C/da not_active IP Right Cessation
- 1982-11-18 NO NO823865A patent/NO161977C/no not_active IP Right Cessation
- 1982-11-18 AU AU90677/82A patent/AU553982B2/en not_active Ceased
- 1982-11-18 MX MX007921A patent/MX166906B/es unknown
- 1982-11-18 PL PL1982239101A patent/PL138979B1/pl unknown
- 1982-11-19 JP JP57203540A patent/JPS5896615A/ja active Granted
- 1982-11-19 DE DE8282402110T patent/DE3265458D1/de not_active Expired
- 1982-11-19 AT AT82402110T patent/ATE14890T1/de active
- 1982-11-19 KR KR8205234A patent/KR860000526B1/ko not_active Expired
- 1982-11-19 AT AT82402109T patent/ATE28468T1/de not_active IP Right Cessation
- 1982-11-19 DE DE8282402109T patent/DE3276811D1/de not_active Expired
- 1982-11-19 KR KR8205233A patent/KR860000559B1/ko not_active Expired
- 1982-11-19 JP JP57203541A patent/JPS5891703A/ja active Pending
- 1982-11-19 EP EP82402109A patent/EP0081408B1/fr not_active Expired
- 1982-11-19 EP EP82402110A patent/EP0079842B1/fr not_active Expired
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI70234C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av amino-funktionaliserade akrylkopolymerer | |
| US4859736A (en) | Synthetic polystyrene resin and its use in solid phase peptide synthesis | |
| US4107298A (en) | Antigenically active polypeptide and a process for its preparation | |
| US4786684A (en) | Benzylthioether-linked solid support-bound thiol compounds and method for peptide synthesis | |
| Tam et al. | Design and synthesis of multidetachable resin supports for solid-phase peptide synthesis | |
| US6897289B1 (en) | Peptide synthesis procedure in solid phase | |
| WO2019101939A1 (en) | Method for preparing peptides | |
| US5175254A (en) | Solid phase peptide synthesis using a polyacrylic support in aqueous solution | |
| Calas et al. | Solid-phase synthesis using a new polyacrylic resin: Synthesis of the fragment 14–21 of the amino acid sequence of histone H4 | |
| CA2212052C (en) | N.alpha.-2-(4-nitrophenylsulfonyl)ethoxycarbonyl-amino acids | |
| US4327075A (en) | Synthetic antigenically-active polypeptide and a process for its preparation | |
| US4764595A (en) | Resin support for solid phase peptide synthesis | |
| Renil et al. | Tetraethyleneglycol diacrylate (TTEGDA)-crosslinked polystyrene resin as an efficient solid support for gel phase peptide synthesis | |
| CA1333441C (en) | Solid phase peptide synthesis | |
| KR100418962B1 (ko) | 2-(4-나이트로페닐설포닐)에톡시카르보닐-아미노산류를사용하여 펩티드를 고수율 및 고순도로 제조하는 방법 | |
| WO2007060860A1 (ja) | ピロールイミダゾールポリアミドの固相自動合成 | |
| Verhaeghe et al. | A new route to sequential polypeptides combining solid phase synthesis and solution peptide synthesis | |
| CN110551178A (zh) | 一种含脯氨酸的首尾环肽合成方法 | |
| CN110498841B (zh) | 一种含丙氨酸的首尾环肽合成方法 | |
| GB1570762A (en) | Resin peptides | |
| JP2680080B2 (ja) | 新規カルシトニン誘導体 | |
| Katchalski | Novel Techniques for the Synthesis of Linear and Cyclic Peptides | |
| GB1567029A (en) | Synthesis of peptides |