PL178609B1 - Izolat wirusa zespołu reprodukcyjnego i oddechowego świń zwanego PRRSV, sposób namnażania izolatu PRRSV, klon linii komórkowej, hodowla tkankowa zawierająca izolat PRRSV, szczepionka efektywna w ochronie świń przeciw PRRSV oraz sposób wytwarzania szczepionki efektywnej w ochronie świń przeciw PRRSV - Google Patents
Izolat wirusa zespołu reprodukcyjnego i oddechowego świń zwanego PRRSV, sposób namnażania izolatu PRRSV, klon linii komórkowej, hodowla tkankowa zawierająca izolat PRRSV, szczepionka efektywna w ochronie świń przeciw PRRSV oraz sposób wytwarzania szczepionki efektywnej w ochronie świń przeciw PRRSVInfo
- Publication number
- PL178609B1 PL178609B1 PL94310126A PL31012694A PL178609B1 PL 178609 B1 PL178609 B1 PL 178609B1 PL 94310126 A PL94310126 A PL 94310126A PL 31012694 A PL31012694 A PL 31012694A PL 178609 B1 PL178609 B1 PL 178609B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- prrsv
- virus
- respiratory syndrome
- isolate
- designated
- Prior art date
Links
- 241000700605 Viruses Species 0.000 title claims abstract description 57
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 44
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 24
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 title claims description 11
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 title claims description 5
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 title claims 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 3
- 238000009395 breeding Methods 0.000 title 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 title 1
- 241001135989 Porcine reproductive and respiratory syndrome virus Species 0.000 claims abstract description 80
- 241000282887 Suidae Species 0.000 claims abstract description 31
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims abstract description 30
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 8
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims abstract description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims abstract description 3
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 claims abstract description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 37
- 208000005342 Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Diseases 0.000 claims description 31
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 12
- 241000282552 Chlorocebus aethiops Species 0.000 claims description 11
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 11
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 10
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 10
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 10
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 claims description 9
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 claims description 9
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 claims description 7
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 claims description 5
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N Aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 206010000210 abortion Diseases 0.000 claims description 3
- 231100000176 abortion Toxicity 0.000 claims description 3
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 claims description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims description 3
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims description 3
- 208000029523 Interstitial Lung disease Diseases 0.000 claims description 2
- 241000710924 Togaviridae Species 0.000 claims description 2
- VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N beta-propiolactone Chemical compound O=C1CCO1 VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910003460 diamond Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000010432 diamond Substances 0.000 claims description 2
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 claims description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 2
- 229960000380 propiolactone Drugs 0.000 claims description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 claims description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 claims description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 claims description 2
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 claims description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 claims 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 2
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 claims 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 claims 1
- 206010039101 Rhinorrhoea Diseases 0.000 claims 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 claims 1
- 208000032625 disorder of ear Diseases 0.000 claims 1
- 206010015915 eye discharge Diseases 0.000 claims 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 claims 1
- 244000144980 herd Species 0.000 claims 1
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 claims 1
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 claims 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 claims 1
- 230000000366 juvenile effect Effects 0.000 claims 1
- 208000010753 nasal discharge Diseases 0.000 claims 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 claims 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 claims 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 claims 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 claims 1
- 206010041232 sneezing Diseases 0.000 claims 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 claims 1
- 208000012153 swine disease Diseases 0.000 claims 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 18
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 10
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 8
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 8
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 5
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 5
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 4
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 4
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 206010058874 Viraemia Diseases 0.000 description 3
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 3
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000001132 alveolar macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- IHPYMWDTONKSCO-UHFFFAOYSA-N 2,2'-piperazine-1,4-diylbisethanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CCN1CCN(CCS(O)(=O)=O)CC1 IHPYMWDTONKSCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000007990 PIPES buffer Substances 0.000 description 1
- UYCAGRPOUWSBIQ-WOYAITHZSA-N [(1s)-1-carboxy-4-(diaminomethylideneamino)butyl]azanium;(2s)-5-oxopyrrolidine-2-carboxylate Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1.OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N UYCAGRPOUWSBIQ-WOYAITHZSA-N 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940031567 attenuated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 230000012173 estrus Effects 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 238000003125 immunofluorescent labeling Methods 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000000937 inactivator Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 238000009413 insulation Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000004264 monolayer culture Methods 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000001360 synchronised effect Effects 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000004627 transmission electron microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5254—Virus avirulent or attenuated
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
- A61K2039/552—Veterinary vaccine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55555—Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55566—Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/10011—Arteriviridae
- C12N2770/10034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
- Y10S424/815—Viral vaccine for porcine species, e.g. swine
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
1. Izolat wirusa zespolu reprodukcyjnego i oddechowego swin, zwanego PRRSV, oznaczony jako ISU-P i zdeponowany pod numerem depozytu ATCC VR 2402. 2. Klon linii komórkowej oznaczony jako 9009B i zdeponowany pod numerem depozytu ATCC CRL 11302. 3. Sposób namnazania izolatu wirusa zespolu reprodukcyjnego i oddechowego swin, zwanego PRRSV, oznaczonego jako ISU-P i zdeponowanego pod numerem depozytu ATCC VR 2402 w hodowli tkankowej wraz- liwej na zakazenie i replikujacej wirus do ilosci wystarczajacej dla ochrony zwierzat przeciw PRRSV, albo do uzycia w diagnostyce PRRSV, lub identyfikacji molekularnej struktury PRRSV celem wytworzenia produktów rekombinacji, znamienny tym, ze inokuluje sie hodowle tkankowa wirusem i zbiera namnozony wirus. 7. Hodowla tkankowa zawierajaca izolat wirusa zespolu reprodukcyjnego i oddechowego swin, zwanego PRRSV, oznaczony jako ISU-P i zdeponowany pod numerem depozytu ATCC VR 2402. 9. Sposób wytwarzania szczepionki efektywnej w ochronie swin przeciw PRRSV, znamienny tym, ze dostarcza sie izolat wirusa zespolu reprodukcyjnego i oddechowego swin, zwanego PRRSV, oznaczony jako ISU-P i zdeponowany pod numerem depozytu ATCC VR 2402, uwalnia sie wirus z hodowli tkankowej, oraz do- stosowuje sie mase antygenowa przez rozcienczenie, zatezenie lub ekstrakcje dla wytworzenia immunologicz- nie efektywnej ilosci masy antygenowej, przeznaczonej do zywego zmodyfikowanego (autenuowanego), inaktywowanego, podjednostkowego lub rekombinantowego preparatu. 12. Szczepionka ewentualnie zawierajaca czynniki inaktywujace, adiuwanty i/lub konserwanty, znamien- na tym, ze zawiera izolat wirusa zespolu reprodukcyjnego i oddechowego swin, zwanego PRRSV, oznaczony jako ISU-P i zdeponowany pod numerem depozytu ATCC VR 2402. PL PL PL PL PL PL PL
Description
Przedmiotem wynalazku jest izolat wirusa zespołu reprodukcyjnego i oddechowego świń, zwanego PRRSV, oznaczony jako ISU-P i zdeponowany pod numerem depozytu ATCC VR 2402.
Następnym przedmiotem wynalazku jest klon linii komórkowej oznaczony jako 9009B i zdeponowany pod numerem depozytu ATCC CRL 11302.
Następnym przedmiotem wynalazkujest sposób namnażania izolatu wirusa zespołu reprodukcyjnego i oddechowego świń, zwanego PRRSV, oznaczonego jako ISU-P i zdeponowanego pod numerem depozytu ATCC VR 2402 w hodowli tkankowej wrażliwej na zakażenie i replikującej wirus do ilości wystarczającej dla ochrony zwierząt przeciw PRRSV, albo do użycia w diagnostyce PRRSV, lub identyfikacji molekularnej struktury PRRSV celem wytworzenia pro4
178 609 duktów rekombinacji, polegający na tym, że inokuluje się hodowlę tkankowa wirusem i zbiera namnożony wirus.
Korzystnie jako hodowlę tkankową stosuje się linię komórkową.
Szczególnie korzystnie jako hodowlę tkankową stosuje się linię komórkową z nerki zielonej małpy afrykańskiej, a zwłaszcza jako linię komórkową stosuje się klon linii komórkowej z zielonej małpy afrykańskiej oznaczony jako 9009B i zdeponowany pod numerem depozytu ATTC CRL 11302.
Następnym przedmiotem wynalazku jest hodowla tkankowa zawierająca izolat wirusa zespołu reprodukcyjnego i oddechowego świń, zwanego PRRSV, oznaczony jako ISU-P i zdeponowany pod numerem depozytu ATCC VR 2402, a zwłaszcza powyższa hodowla wytworzona na skalę handlową> 25 l przy mianie FAID50> 10 5,0/ml.
Następnym przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania szczepionki efetywnej w ochronie świń przeciw PRRSV, polegający tym, że dostarcza się izolat wirusa zespołu reprodukcyjnego i oddechowego świń, zwanego PRRSV, oznaczony jako ISU-P i zdeponowany pod numerem depozytu ATCC VR 2402, uwalnia się wirus z hodowli tkankowej, oraz dostosowuje się masę antygenowąprzez rozcieńczenie, zatężenie lub ekstrakcję dla wytworzenia immunologicznie efektywnej ilości masy antygenowej, przeznaczonej do żywego zmodyfikowanego (atenuowanego), inaktywowanego, podjednostkowego lub rekombinantowego preparatu.
W sposobie według wynalazku korzystnie jako hodowlę tkankową stosuje się linię komórkowąz nerki zielonej małpy afrykańskiej, a zwłaszcza linię komórek z nerki zielonej małpy afrykańskiej, która jest klonem linii komórkowej oznaczonym jako 9009B i zdeponowanym pod numerem depozytu ATCC CRL 11302.
Następnym przedmiotem wynalazku jest szczepionka efektywna w ochronie świń przeciw PRRSV, ewentualnie zawierająca czynniki inaktywujące, adiuwanty i/lub konserwanty, zawierająca izolat wirusa zespołu reprodukcyjnego i oddechowego świń, zwanego PRRSV, oznaczony jako ISU-P i zdeponowany pod numerem depozytu ATCC VR 2402.
Korzystnie szczepionka według wynalazku zawiera żywy, zmodyfikowany (atenuowany) PRRSV i ma postać płynną, zamrożoną albo liofilizowaną.
Szczególnie korzystna jest szczepionka zawierająca adiuwant na bazie oleju lub wody.
Korzystny adiuwant wybrany jest z grupy obejmującej adiuwant kompletny Freunda i adiuwant niekompletny Freunda.
Szczepionka według wynalazku korzystnie jako czynnik inaktywujący zawiera binarną etylenoiminę, betapropiolakton albo formalinę.
Innymi słowy, wynalazek dotyczy izolatu wirusa, oznaczonego jako ISU-P, przydatnego w wytwarzaniu antygenów do diagnostyki zespołu reprodukcyjnego i oddechowego świń, oraz do indukcji ochronnej odpowiedzi immunologicznej na PR.RSV. Wynalazek obejmuje także sposoby wytwarzania i użycia tych antygenów.
Korzystnie według wynalazku, izolat PRRSV można otrzymać przez wspólne hodowanie 10% (wagowo/objętościowych) homogenatów z płuc świń zakażonych wirusem i pierwotnych makrofagów pęcherzykowych świń albo ciągłych linii komórkowych w 35°C.
Wynalazek obejmuje dalej namnażanie wirusa do wysokiego miana w niektórych liniach komórkowych, jak ciągła linia komórek nerki zielonej małpy afrykańskiej (MA 104), oraz unikatową klonowaną pochodna tej linii (9009B).
Wynalazek obejmuje także sposoby wytwarzania i użycia żywego wirusa lub zabitych antygenów wirusa (otrzymanych konwencjonalnie lub przez rekombinację), a następnie szczepionki otrzymywane przez łączenie immunologicznie efektywnej ilości wirusa odpowiednio z rozcieńczalnikiem i/lub adiuwantem.
Stwierdzono, że bezpośrednia doświadczalna immunizacja macior żywym wirusem, albo kontakt z maciorami immunizowanymi żywym wirusem, zapobiegały niezdolności do reprodukcji po donosowej prowokacji zjadliwym PRRSV.
178 609
Wykazano również, że inaktywowane szczepionki PRRSV z adiuwantem chroniły świnie przed zakażeniem PRRS przy prowokacji, jak to wynikało z braku replikacji wirusa u osobników szczepionych w porównaniu z nieszczepionymi świniami kontrolnymi.
Jak powiedziano wyżej, obecny wynalazek jest nakierowany na otrzymywanie izolatu ISU-P wirusa PRRS, w celu wytworzenia antygenów wirusa do użycia w szczepionkach i badaniach diagnostycznych. Izolat ISU-P otrzymano z tkanki płucnej słabo urodzonej świni. Dla przykładu, 10% w/v homogenat tkanki płucnej, śledziony i węzła limfatycznego przygotowano w podstawowych minimalnych podłożach, uzupełnionych antybiotykami (MEM+A), celem zminimalizowania możliwości kontaminacji. Surowy homogenat klarowano przez wirowanie w 4°C przez 15 minut przy 1500 x g. Klarowny supernatant rozcieńczono 1:5 w MEM+A i 1,0 ml adsorbowano na 48-godzinnej zlewnej jednowarstwowej hodowli komórek MA 104 albo pierwotnych makrofagach pęcherzykowych, w butelkach 25 cm2. Po 2-godzinnym okresie adsorpcji w 35°C, hodowle przemywano dwukrotnie MEM+A, i dodano 5,0 ml MEM+A z dodatkiem 5,0% płodowej surowicy cielęcej poddanej promieniowaniu gamma. Butelki do izolacji wirusa inkubowano w 35°C w atmosferze 5% CO2 i obserwowano codziennie celem wykrycia efektu cytopatycznego (CPE). Efekt cytopatyczny PRRSV ISU-P zaczynał się zaokrągleniem się małych ognisk 5 do 10 komórek i rozwijał się w ciągu 4 do 7 dni po zakażeniu, aż większość komórek stawała się pyknotyczna i odklejała się od podłoża.
Obecność PRRSV w izolacie ISU-P potwierdzano barwieniem fluorescencyjnym, PRRSV grupowo-swoistym przeciwciałem monoklonalnym oznaczonym w publicznym obrocie jako SDOW17. Ponadto, niezabarwione komórki, zakażone wirusem, badano w transmisyjnym mikroskopie elektronowym na obecność cząstek wirusowych. Zaobserwowane cząsteczki wirusa były kuliste, zawierały otoczkę, a przeciętna średnica wirionu wynosiła 65 nm, średnica rdzenia 27 nm. Określony w ten sposób wirus z hodowli tkanek użyto do doświadczalnego przeniesienia później aborcji i niezdolności do reprodukcji na ciężarne maciory (tabela 1). Tabela 1 wskazuje, że ciężarne maciory, po kontakcie albo z homogenatami płuc zakażonych ISU-P (PRRS-hm) albo z ISU-P z hodowli tkanek (PRRS-tc) wykazują typowe oznaki zespołu reprodukcyjnego i oddechowego (PRRS). W grupach PRRS-hm nie urodziło się żadne normalne prosię, w grupach PRRS-tc tylko 4 z 33 prosiąt urodziły się normalne. Dla porównania, 29 z 30 (96,7%) nie eksponowanych świń było normalnych przy urodzeniu. Fakt, że ISU-P, nawet po oczyszczeniu w hodowli tkanek, może przenosić chorobę PRRS, potwierdza właściwą klasyfikację izolatu jako należącego do rodzaju Arterivirus w rodzinie TogaViridae. Stwierdzono także, że izolat wywołuje łagodne śródmiąższowe zapalenie płuc u świń zakażonych doświadczalnie.
Jest cechąwynalazku, że PRRSV według wynalazku można namnażać w pewnych komórkach w hodowli tkankowej, które efektywnie replikują wirus do poziomu wystarczająco wysokiego aby zapewnić masę antygenową niezbędną do szczepionek, które mogą chronić świnie i/lub ciężarne lochy przed prowokacją PRRS. Dla przykładu, PRRSV można namnażać w komórkach hodowli tkankowej oznaczonej MA 104 przez Whittaker BioProducts. Doświadczenia z namnażaniem wirusa, w identycznych warunkach hodowli, na komórkach MA 104 otrzymanych z trzech różnych źródeł, wykazują wysoki stopień zmienności komórek MA 104 pod względem zdolności replikacji PRRSV do wysokiego miana. Używana w opisanych tu badaniach jedna z hodowli komórkowych MA 104, oznaczona MA 104(M) przez Miles Inc., Agriculture Division, Animal Health Products Group, stale podtrzymywała replikację PRRSV do wysokiego miana. Ponadto klon linii komórkowej, wyprowadzony z MA 104(M) i oznaczony 9009B (Miles Inc. Agriculture Division, Animal Health Products Group), podtrzymuje replikację PRRSV do mian wyższych niż linia komórek rodzicielskich. Zatem do namnażania ISU-P preferowana jest hodowla komórek 9009B. Pełniejsza ilustracja namnażania ISU-P PRRSV w hodowli komórkowej jest przedstawiona niżej.
Komórki hodowli tkankowej (MA 104(M) i 9009B) hodowano i otrzymywano ze zmodyfikowanej podstawowej pożywki wg. Dulbecco z wysokązawartościąglukozy (DMEM/HG), uzupełnionej 5% płodowej surowicy cielęcej i buforowej 1,3 g/l dwuwęglanu sodu. Komórki pasażowano w takich ilościach, aby w ciągu 48 godzin otrzymać 80-100% zlewną hodowlę jedno6
178 609 warstwową. Wirus PRRSISU-P z przechowywanego zapasu, rozcieńczano w DMEM/HG + 5% płodowej surowicy cielęcej, buforowanym PIPES do pH 6,8. Wirus nakładano na warstwę komórek w niskiej dawce replikacyjnej (MOI) i inkubowano w 36°C. Zakażone hodowle obserwowano codziennie przez 4-7 dni, w celu wykrycia rozwoju CPE, po czym zbierano gdy CPE był wyraźny w 90-100%. Maksymalną masę antygenową wirusa otrzymywano po jednym cyklu zamrażania w -70°C i odmrażania. Średnie miana wirusa namnażanego w komórkach MA 104(M) wahały się od 103’° do 104’5 dawki zakaźnej oznaczanej immunofluorescencyjnie (FAUĄ/ml), natomiast miana z komórek 9009B wynosiły 105,5 do 106' FAID50/ml. Miana tej wysokości umożliwiająwłączenie wystarczającej masy antygenowej do szczepionki PRRSV na skalę handlową, o objętości większej niż 50 l.
Eksperci doświadczeni w technice powinni sobie uświadomić, że odkąd PRRSV można namnażać do wysokich poziomów masy antygenowej, można otrzymać pochodne tego wirusa, w tym podjednostki, efektywne zgodnie z wynalazkiem, sposobami znanymi w technice jak na przykład ekstrakcja z wirusa. Ponadto antygeny ochronne można identyfikować na poziomie molekularnym i reprodukować je drogą ekspresji przy użyciu rekombinacji.
Płyny zawierające wirus do preparatu szczepionkowego inaktywowano dwoma sposobami. Jako inaktywatory wybrano formalinę i binarną etylenoiminę (BEI). Inaktywację wykonano sposobami standardowymi. Inaktywację formaliną przeprowadzono mieszając płyny wirusowe z 37% formaldehydem ' handlowym, do końcowego stężenia formaliny 0,05%. Mieszaninę formalina-wirus trzymano w temperaturze pokojowej (około 25°C) przez 24 godziny, stale mieszając. Próbki pobierano w czasie 0, 8,12 i 24 godziny i badano na obecność żywego wirusa w komórkach 9009B. Efekt cytopatyczny i barwienie immunofluorescencyjne grupowo-swoistym przeciwciałem monoklonalnym wykryły żywy wirus PRRS tylko w czasie 0.
Inaktywacj ę BEI przeprowadzono łącząc 0,1M roztwór BEI (20,5 g/12-bromo-ety loaminy HBR w 0,175 N NaOH) z płynami wirusowymi do końcowego stężenia 1,0 mM BEI i pozostawiając mieszaninę w temperaturze przez 48 godzin, ciągle mieszając. Inaktywację wirusa przerywano przez dodanie 1,0 M tiosiarczanu sodu do końcowego stężenia 0,1 mM, mieszając przez 2 godziny. Próbki pobierano w czasie 0,2,4, 8,12,24 i 48 godzin i badano na obecność żywego wirusa jak opisano wyżej. Żywy PRRSV wykryto tylko w czasie 0, 2 i 4 godzin.
W preparacie zmodyfikowanej albo atenuowanej szczepionki według wynalazku PRRSV jest zmieniony tak, że może on nadal zakażać gospodarza w sposób ograniczony, ale nie może wywoływać obj awów choroby u gospodarza. Normalnie taka zmiana wirusa zachodzi przy pasażowaniu w komórkach, które nie sąnaturalnym gospodarzem, jak na przykład komórki nerki zielonej małpy afrykańskiej. Początkowo wirus może nie rosnąć dobrze lub wcale. W tym ostatnim przypadku może okazać się konieczne wymusić adaptację wirusa do hodowli komórek, co można wykonać dodając wirus do hodowli komórek w wysokiej lub niskiej dawce zakażającej (MOI). Alternatywnie wirus możnapasażować w sposób wymuszony lub ślepy wraz z komórkami, do osiągnięcia wystarczającego CPE, co wskazuje na adaptację wirusa. Gdy następuje adaptacj a, miano wirusa będzie wzrastać, jak to się obserwuj e przy pasażowaniu izolatu I SU-P wirusa PRRS z linii komórkowej MA 104(M) na linię 9009B. Jak widać w tabeli 1 PRRSV ISU-P pasażowany w hodowli tkanek (PRRS-tc) może być mniej zjadliwy niż wirus izolowany z homogenatówpłuc, co jest typowym wynikiem adaptacji. Dane w tabeli 2 wskazują, że sposób wytwarzania szczepionek według wynalazku szczególnie efektywnie zapewniają ochronę przed PRRS.
Inaktywowany PRRSV ISU-P miesza się z adiuwantem jak następuje. Adiuwanty wybrano z grupy obejmującej aiuwant kompletny Freunda, adiuwant niekompletny Freunda, adiuwant oparty na carbopolu i Diamond Scientific Adiuvant B (Adi B). Adiuwanty te reprezentują główne typy używane w wytwarzaniu szczepionek. Oba adiuwanty Freunda (FCA i FIA) oraz ADi B są oparte na oleju, carbopol jest adiuwantem wodnym. Inaktywowany PRRSV ISU-P ewentualnie może zawierać odpowiedni konserwant.
Preparaty szczepionkowe z FCA i FIA przygotowuje się przez emulsyfikację inaktywowanego wirusa, zwykle z równą objętością adiuwantu, przy pomocy 18 cm aparatu double luer lock
178 609 i dwu strzykawek. Płyny przepompowuje się szereg razy między strzykawkami, aż do otrzymania gęstej jednolitej emulsji. Emulsje ładuje się do strzykawek bezpośrednio do podania.
Preparaty szczepionkowe z Adi B przygotowano mieszając macierzysty Adi B z równąobjętością inaktywowanego płynu wirusowego PRRSV ISU-P. Adiuwant i wirus mieszano przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej. Szczepionką z adiuwantem przenoszono aseptycznie do wielodawkowych fiolek i przechowywano w 4°C przed użyciem.
Preparaty szczepionkowe oparte na carbopolu przygotowano mieszając macierzysty adiuwant carbopol z inaktywowanymi płynami wirusowymi, do końcowego stężenia adiuwanta 10% v/v/. Mieszano w temperaturze pokój owej przez 4 godziny. Szczepionkę z adiuwantem przenoszono aseptycznie do jałowych wielodawkowych fiolek i przechowywano w 4° C przed podaniem.
PRRSV ISU-P o mianie przed inaktywacją tylko 10’,θ FAID50/ml używano w różnych opisanych preparatach szczepionkowych.
Przeprowadzono dwa badania nad szczepieniem/prowokacją, aby wykazać, że izolat PRRSV ISU-P może chronić świnie przed zespołem reprodukcyjnym i oddechowym. W pierwszym badaniu 4 lochy immunizowano żywym PRRSV ISU-P przez nosowo-doustną ekspozycję na wirus, albo drogąbezpośredniąalbo przez kontakt z chorymi świniami. Dwie lochy w tym samym wieku pozostawiono nie immunizowane (nie eksponowane) i trzymano osobno jako kontrole. Świnie szczepione bezpośrednio (nr 57 i 58) otrzymały 3,0 ml inokulum wirusowego donosowo. W 14 dni po ekspozycji wstąpiła u nich serokonwersja, oznaczona testem pośredniej immunofluorescencji. Dwie lochy eksponowane przez kontakt (nr 476 i 480) immunizowano drogą nosowo-doustną po ich umieszczeniu w ścisłym kontakcie z chorymi świniami. Serokonwersja wystąpiła u nich 90 dni po ekspozycji; oceniano ją mianem IFA wyższym niż 1:20.
Po serokonwersji immunizowanych loszek, ich ruja uległa synchronizacji i zostały one zapłodnione. Ciążę potwierdzono ultradźwiękami. W 90 dniu ciąży, szczepione i kontrolne ciężarne lochy otrzymały jako prowokację donosowo 3,0 ml PRRSV o mianie 1x 104 FAID50
Lochy kontrolne nr 52 i 477 wykazały przez dwa do trzech dni po prowokacji wczesne objawy choroby: zmniejszony apetyt i podwyższenie temperatury ciała (103- 104°F). Nie stwierdzono przejawów choroby u loch eksponowanych na ISU-P (szczepionych). Wyniki te wskazują na ochronę przed klinicznym zespołem choroby oddechowej.
Wszystkie lochy obserwowano do odstawienia prosiąt od piersi (4 tygodnie po urodzeniu). Tabele 2 zawiera wyniki urodzeń w tym doświadczeniu.
Jako wyniki urodzeń notowano długość ciąży (ciąża jest zwykle skrócona przy zakażeniu PRRS), martwo urodzone płody, płody zmumifikowane, prosięta słabe. Wszystkie te trudności urodzeń wskazująna zakażenie PRRS ciężarnych macior. Dodatkowo notowano liczbę świń normalnych.
Żadna z macior kontrolnych nie urodziła normalnych prosiąt (0 normalnych na 22). Siedem z 22 prosiąt urodziło się martwych a 15 z 22 urodziło się słabych. Długość ciąży macior kontrolnych była skrócona o 2,5 dnia, co jest typowe dla PRRS u świń ciężarnych. W grupie immunizowanej (n = 50) 40 świń (80%) urodziło się normalnych. Sześć z 50 urodziło się martwych, a 4 z 50 płodów były zmumifikowane przy urodzeniu. W grupie szczepionych nie było prosiąt słabo urodzonych. Widać wyraźnie, że maciory uprzednio eksponowane na żywy PRRSV ISU-P, które zostały zapłodnione i następnie poddano prowokacji są chronione przed prowokacją, jak to wynika z braku bezpośrednich klinicznych objawów choroby u macior i z protekcji płodów przez nie noszonych.
Ponieważ odczynniki do testu IFA, których użyto w tym badaniu do oznaczenia stanu serologicznego macior, otrzymano z PRRSV ISU-P, i ponieważ istnieje bezpośrednia korelacja stanu serologicznego macior i ochronąprzed PRRS, należy sobie uświadomić, że izolat PRRSV ISU-P może być przydatny w testach diagnostycznych takichjak pośrednie testy immunofluorescencyj ne, co wykazano w tych badaniach, testy ELISA, testy neutralizacyjne surowicy, bezpośrednie testy immunofluorescencyjne i inne badania diagnostyczne znane w technice. Stąd też test diagnostyczny oparty na antygenie otrzymanym w PRRSV ISU-P można przygotować i użyć zgodnie z wynalazkiem.
178 609
W drugim badaniu nad szczepieniem/prowokacją, młode 4-6 - tygodniowe świnie zaszczepiono kilkoma inaktywowanymi PRSSV ISU-P szczepionkami z adiuwantem. Pula antygenu szczepionkowego została przygotowana przez inaktywację PRRSV ISU-P przy pomocy BEI, jak opisano wyżej, jako adiuwantu użyto albo carbopol, FCA/FIA, albo Adi B. Druga pula antygenu została przygotowana przez inaktywację PRRSV ISU-P formalinąjak opisano wyżej, i dodanie tych samych 3 adiuwantów. Trzy pozorne szczepionki przygotowano, aby się upewnić, że adiuwanty i komórki nie mogą stymulować fałszywej odpowiedzi immunologicznej. Pozorne szczepionki przygotowano dodając adiuwantów do niezakażonych komórek hodowli tkankowej. Każdą ze szczepionek zaszczepiono dwie świnie. Szczepionki podano podskórnie w dniach 0, 21,42 i 64. Siedem dni po ostatnim szczepieniu świnie otrzymały donosowo 103,5 FAID50 żywego zjadliwego PRRSV. Po prowokacji wszystkie świnie obserwowano codziennie na obecność klinicznych objawów choroby. Ponadto pobrano próbki krwi celem izolacji wirusa w hodowli tkanek. Stwierdzenie żywego wirusa w krążeniu krwi oznacza, że wystąpiła wiremia.
Miana neutralizacyjne surowic oceniano na początku badania, w dniu prowokacji i 19 dni po prowokacji. Należy zauważyć, że test neutralizacj i surowicy jest mniej czuły niż test IFA użyty w badaniu poprzednim. Dlatego też nie można porównywać wyników mian otrzymanych w obu badaniach.
Tabela 3 podaje wyniki prowokacji. Nie obserwowano klinicznych objawów choroby u świń szczepionych lub kontrolnych. Ponadto ani u świń szczepionych ani kontrolnych w okresie szczepienia nie pojawiły się miana neutralizacyjne surowicy. Wskazuje to, że w tym okresie nie było ekspozycji na żywy wirus (ujemne kontrole), a także, że szczepionki nie stymulowały odpowiedzi humoralnej wystarczająco wysokiej dla pomiaru testem neutralizacji surowicy. Fakt, że odpowiedź w postaci miana neutralizacyjnego surowicy była znaczna po prowokacji wskazuje, że u wszystkich świń prowokacja żywym wirusem PRRS była efektywna. Potwierdzeniem tego jest odsetek świń kontrolnych, które wykazały wiremię. Wszystkie świnie kontrolne z wyjątkiem jednej (87,5%) uległy zakażeniu. Odpowiedź immunologiczna u świń szczepionych była tak silna, że była w stanie zablokować wiremię, którą wykazała tylko jedna z 12 szczepionych świń (8,3%). Zatem szczepionki chroniły 91,7% świń.
Nie ograniczając się do jakiejś szczególnej teorii wynalazku, można sądzić, że wymuszone pasażowanie pierwotnego izolatu PRRSV przez specjalnie adaptowany klon MA 104(M) komórek zielonej małpy afrykańskiej (9009B) skutecznie zmodyfikowało jeden lub więcej epitopów tego wirusa. W wyniku otrzymano zwiększoną immunogenność tego wirusa, co umożliwiło wytworzenie szczepionki w dziedzinie, gdzie nie udało się to innym uczonym.
Tabela 1
Późna aborcja i niezdolność reprodukcji u macior eksponowanych na izolat ISU-P PRRSV w porównaniu z nie eksponowanymi maciorami kontrolnymi.
| I. Grupa eksponowana na PRRS | ||||||
| Maciora nr | Długość ciąży (a) | Preparat wirusa | Martwo urodzone | Słabe | Zmumifiko- wane | Normalne |
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
| 57 | 112 dni | PRRS-hmb | 6 | 8 | 0 | 0 |
| 54 | 108 dni | PRRS-hm | 6 | 1 | 0 | 0 |
| 649 | 112 dni | PRRS-hm | 3 | 7 | 0 | 0 |
| 58 | 112 dni | PRRS-hm | 4 | 4 | 3 | 0 |
| 166 | 112 dni | PRRS-tcc | 0 | 2 | 6 | 1 |
| 164 | 113 dni | PRRS-tcd | 2 | 2 | 5 | 1 |
| 80 | 110 dni | PRRS-tce | 2 | 2 | 2 | 2 |
| Ogółem | 23 | 26 | 16 | 4 |
178 609 ciąg dalszy tabeli 1
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
| II. Grupa nie eksponowana kontrolna | ||||||
| 52 | 114 dni | - | 0 | 0 | 0 | 11 |
| 56 | 115 dni | - | 0 | 0 | 0 | 12 |
| 163 | 116 dni | - | 1 | 0 | 0 | 7 |
| Ogółem | 1 | 0 | 0 | 30 |
(a) = Normalny okres ciąży świń - 114 dni b = PRRSV - dodatnie inokullun^homogenatu -puc świni gnotobiotycznej c = PRRS V - hodowli tkań ek, 10^n dawka ^kakn- immunoflimrescencyjna 50naml (FA ID 5F/ml) d =PRRSV z hoZświitkanek, Kl’ FArosO/ml e = PFRRSV z hod-wli owan ek K) ’ 1ΑΙΟ50/ηι1
Tabela 2
Wyniki urodzeń u loch immunizcwnuych ISU-P i nie immunizowanych
| Locha nr | Miano IFA | Długość ciąży | Martwo urodzone | Słabe | Zmumifiko- wane | Normalne |
| 57 V | + | 113 dni | 2* | 0 | 0 | 7 |
| 58 V | + | 114 dni | 4 | 0 | 3 | 11 |
| 476 V | + | 113 dni | 0 | 0 | 1 | 10 |
| 480 V | + | 114 dni | 0 | 0 | 0 | 12 |
| 52 C | - | 111 dni | 5 | 7 | 0 | 0 |
| 477 | - | 112 dni | 2 | 8 | 0 | 0 |
| Ogółem | 6 szcz. 7 kont. | 0 szcz. 15 kont. | 4 szcz. 0 kont | 40 szcz. 0 kont. |
+ niauo IFA>20 - miano IFA<20 V szczepiona C kontrolna
Tabela 3
Podsumowanie doświadczenia z iuaktykcwaną szczepionką PRRSY
| Grupa szczepionki | Średnia SN prowokacja | Średnia SN po prowokacjia | Izolacja wirusa | |
| BEI, PRRS-Carbopol | n=2 | <1:2 | 1:82 | neg/ueg |
| BEI, PRRS-FCA/FIA | u=2 | <1:2 | 1:4 | ueg/neg |
| BEI, PRRS-Adi B | u=2 | <1:2 | 1:5 | ueg/ueg |
| Form, PR-RS-Carbopol | u=2 | <1:2 | 1:23 | neg/poz |
| Form, PRRS-FCA/FIA | u=2 | <1:2 | 1:2 | ueg/neg |
| Form, PRRS-Adi B | u=2 | 1:3 | 1:8 | ueg/ueg |
| Grupa pozornej szczepionki pozorny AG-carbopol | n=2 | <1:2 | <1:2 | poz/poz |
| Pozorny AG-FCA/FIA | u=2 | <1:2 | <1:2 | poz/poz |
| Pozorny AG-Adi B | u=2 | <1:2 | <1:2 | poz/poz |
a = odpowiedź SN 19 dnia po prowokacji, koniec doświadczenia b = izolacja wirusa z osocza dowolnego dnia w testowym okresie 19 dni po prowokacji izolacja wirusa wykrywana CPE w komórkach 9009B i potwierdzana barwieniem immuucfluoresceucyjunm tych komórek PRRsV grupowo-swoistym przeciwciałem ncncklounlunn SDOW17.
178 609
Aczkolwiek wynalazek został wyżej opisany szczegółowo w celu ilustracji, należy rozumieć, że szczegóły są wyłącznie w tym celu i że osoby doświadczone w technice mogą wprowadzać modyfikacje, bez odchodzenia od ducha i zakresu wynalazku, chyba że może to być ograniczone zastrzeżeniami patentowymi.
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 60 egz.
Cena 2,00 zł.
Claims (16)
- Zastrzeżenia patentowe1. Izolat wirusa zespołu reprodukcyjnego i oddechowego świń, zwanego PRRSV, oznaczony jako ISU-P i zdeponowany pod numerem depozytu ATCC VR 2402.
- 2. Klon linii komórkowej oznaczony jako 9009B i zdeponowany pod numerem depozytu ATCC CRL 11302.
- 3. Sposób namnażania izolatu wirusa zespołu reprodukcyjnego i oddechowego świń, zwanego pRrSV, oznaczonego jako ISU-P i zdeponowanego pod numerem depozytu ATCC VR 2402 w hodowli tkankowej wrażliwej na zakażenie i replikującej wirus do ilości wystarczającej dla ochrony zwierząt przeciw PRRSV, albo do użycia w diagnostyce PRRSV, lub identyfikacji molekularnej struktury PRRSV celem wytworzenia produktów rekombinacji, znamienny tym, że inokuluje się hodowlę tkankową wirusem i zbiera namnożony wirus.
- 4. Sposób według zastrz. 3, znamienny tym, że jako hodowlę tkankową stosuje się linię komórkową
- 5. Sposób według zastrz. 4, znamienny tym, że jako hodowlę tkankową stosuje się linię komórkową z nerki zielonej małpy afrykańskiej.
- 6. Sposób według zastrz. 5, znamienny tym, że jako linię komórkową stosuje się klon linii komórkowej z zielonej małpy afrykańskiej oznaczony jako 9009B i zdeponowany pod numerem depozytu ATCC CRL 11302.
- 7. Hodowla tkankowa zawierająca izolat wirusa zespołu reprodukcyjnego i oddechowego świń, zwanego PRRSV, oznaczony jako ISU-P i zdeponowany pod numerem depozytu ATCC VR 2402.
- 8. Hodowla według zastrz. 7, znamienna tym, że jest wytworzona na skalę handlową >251 przy mianie FAID50> 105,o/ml.
- 9. Sposób wytwarzania szczepionki efektywnej w ochronie świń przeciw PRRSV, znamienny tym, że dostarcza się izolat wirusa zespołu reprodukcyjnego i oddechowego świń, zwanego PRRSV, oznaczony jako ISU-P i zdeponowany pod numerem depozytu ATCC VR 2402, uwalnia się wirus z hodowli tkankowej, oraz dostosowuje się masę antygenową przez rozcieńczenie, zatężenie lub ekstrakcję dla wytworzenia immunologicznie efektywnej ilości masy antygenowej, przeznaczonej do żywego zmodyfikowanego (autenuowanego), inaktywowanego, podjednostkowego lub rekombinantowego preparatu.
- 10. Sposób według zastrz. 9, znamienny tym, że jako hodowlę tkankową stosuje się linię komórkową z nerki zielonej małpy afrykańskiej.
- 11. Sposób według zastrz. 10, znamienny tym, że jako linię komórek z nerki zielonej małpy afrykańskiej stosuje się klon linii komórkowej oznaczony jako 9009B i zdeponowany pod numerem depozytu ATCC CRL 11302.
- 12. Szczepionka ewentualnie zawierająca czynniki inaktywujące, adiuwanty i/lub konserwanty, znamienna tym, że zawiera izolat wirusa zespołu reprodukcyjnego i oddechowego świń, zwanego PRRSV, oznaczony jako ISU-P i zdeponowany pod numerem depozytu ATCC VR 2402.
- 13. Szczepionika według zastrz. 12, znamienna tym, że zawiera żywy, zmodyfikowany (atenuowany) PRRSY i ma postać płynną, zamrożoną albo liofilizowaną..178 609
- 14. Szczepionka według zastrz. 13, znamienna tym, że zawiera adiuwant na bazie oleju lub wody taki jak Diamond Scientific Adiuwant B lub carbopol.
- 15. Szczepionka według zastrz. 14, znamienna tym, że adiuwant jest wybrany z grupy obejmującej adiuwant kompletny Freunda i adiuwant niekompletny Freunda.
- 16. Szczepionka według zastrz, 14, znamienna tym, że jako czynnik inaktywujący zawiera binarną etylenoiminę, betapropiolakton albo formalinę.Obecny wynalazek dotyczy izolatu wirusa zespołu reprodukcyjnego i oddechowego świń (PRRSV - porcine reproductive and respiratory syndrome virus). Dokładniej, wynalazek dotyczy antygenów diagnostycznych i ochronnych oraz szczepionki przeciw chorobie reprodukcyjnej i oddechowej świń, a także sposobów ich wytwarzania i stosowania.Krótki opis stanu techniki: zespół reprodukcyjny i oddechowy świń gwałtownie narasta jako problem chorobowy ekonomicznie rujnujący hodowców świń w USA i w Europie. Zespół opisano po raz pierwszy wUSA w roku 1987, podobne opisy pojawiły się dwa - trzy lata później z terenu Europy i Kanady. Zespół chorobowy określano różnymi nazwami, jak tajemnicza choroba świń, abortus blau (poronienie płodu niebieskiego), choroba niebieskich uszu świń, epidemiczny zespół poronieniowy i oddechowy świń (PEARS - porcine epidemic abortion and respiratory syndrome), zespół niepłodności i oddechowy świń (SIRS - swine infertility and respiratory syndrome). W tekście poniżej używa się nazwy zespół reprodukcyjny i oddechowy świń (PRRS - porcine reproductive and respiratory syndrome).Czynnik etiologiczny, wywołujący i przenoszący zespół chorobowy, został zidentyfikowany jako mały, kulisty, otoczkowy wirus o przeciętnej średnicy wirionu 62 nm i rdzeniu 25-30 nm, zamkniętym w otoczce. Wirus ten zaliczono próbnie do rodzaju Arterivirus, w rodzinie Togaviridae. Opisany tu izolat wirusa PRRS odpowiada tej próbnej klasyfikacji; wykazano, że przenosi on zespół chorobowy.Zespół chorobowy, związany z PRRSV charakteryzuje się ostrąi przewlekłąniezdolnością do reprodukcji u dorosłych samic świń, i ciężką do łagodnej chorobąoddechowąu młodych świń. Niezdolność reprodukcji charakteryzuje się zwiększoną czystością urodzeń zmumifikowanych, martwych i słabych prosiąt o znacznie mniejszych szansach przeżycia. Opisano również chroniczne problemy z powrotem rui u zakażonych macior. Następstwa choroby oddechowej wahają się od znacznej gorączki i śródmiąższowego zapalenia płuc do łagodnych obj awów ze strony górnych dróg oddechowych (np. kichanie, kaszel i wydzielina z nosa lub oczu) u młodych świń. Ostatecznie (1990) badania serologiczne i epidemiologiczne wskazują, że co najmniej 50% stad świń w USA było eksponowanych na PRRSV lub przeszło niezdolność reprodukcji lub chorobę oddechową, wskazujące na zakażenie PRRSV.W związku z niedawnym pojawieniem się tego zespołu chorobowego badania nad patogenezy epidemiologią i kontrolą choroby były ograniczone. Należało sobie uświadomić, że efektywne namnażanie i opracowanie antygenów zawierających PRRSV ułatwi rozwój szczepionki PRRSV, jako sposobu zapobiegania i kontroli zespołu reprodukcyjnego i oddechowego świń.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US1491593A | 1993-02-08 | 1993-02-08 | |
| PCT/US1994/000951 WO1994018311A1 (en) | 1993-02-08 | 1994-01-26 | Process for growing porcine reproductive and respiratory syndrome virus and its use in vaccines |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL310126A1 PL310126A1 (en) | 1995-11-27 |
| PL178609B1 true PL178609B1 (pl) | 2000-05-31 |
Family
ID=21768529
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL94310126A PL178609B1 (pl) | 1993-02-08 | 1994-01-26 | Izolat wirusa zespołu reprodukcyjnego i oddechowego świń zwanego PRRSV, sposób namnażania izolatu PRRSV, klon linii komórkowej, hodowla tkankowa zawierająca izolat PRRSV, szczepionka efektywna w ochronie świń przeciw PRRSV oraz sposób wytwarzania szczepionki efektywnej w ochronie świń przeciw PRRSV |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US5510258A (pl) |
| EP (1) | EP0683816B1 (pl) |
| JP (1) | JP3710095B2 (pl) |
| KR (1) | KR100374295B1 (pl) |
| CN (1) | CN1080300C (pl) |
| AT (1) | ATE197314T1 (pl) |
| AU (1) | AU681874B2 (pl) |
| BG (1) | BG63170B1 (pl) |
| CZ (1) | CZ289743B6 (pl) |
| DE (1) | DE69426228T2 (pl) |
| DK (1) | DK0683816T3 (pl) |
| ES (1) | ES2152304T3 (pl) |
| FI (1) | FI117513B (pl) |
| GR (1) | GR3035257T3 (pl) |
| HU (1) | HU218430B (pl) |
| NO (1) | NO317662B1 (pl) |
| NZ (1) | NZ261992A (pl) |
| PL (1) | PL178609B1 (pl) |
| PT (1) | PT683816E (pl) |
| SK (1) | SK98695A3 (pl) |
| WO (1) | WO1994018311A1 (pl) |
Families Citing this family (64)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP3128133B2 (ja) * | 1991-06-06 | 2001-01-29 | スティッチティング セントラール ディールゲネースクンディグ インスティトゥート | 豚の奇病の原因体であるレリスタドエイジェント、それを含むワクチン組成物、豚の奇病の診断キット及び診断方法 |
| US5846805A (en) | 1991-08-26 | 1998-12-08 | Boehringer Ingelheim Animal Health, Inc. | Culture of swine infertility and respiratory syndrome virus in simian cells |
| US6042830A (en) * | 1992-08-05 | 2000-03-28 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Viral agent associated with mystery swine disease |
| US6080570A (en) * | 1991-08-26 | 2000-06-27 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Method of producing a vaccine for Swine Infertility and Respiratory Syndrome |
| US6982160B2 (en) * | 1991-08-26 | 2006-01-03 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Immunogenic compositions that include SIRS virus |
| US6592873B1 (en) | 1992-10-30 | 2003-07-15 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Polynucleic acids isolated from a porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) and proteins encoded by the polynucleic acids |
| US5695766A (en) * | 1992-10-30 | 1997-12-09 | Iowa State University Research Foundation | Highly virulent porcine reproductive and respiratory syndrome viruses which produce lesions in pigs and vaccines that protect pigs against said syndrome |
| US6380376B1 (en) | 1992-10-30 | 2002-04-30 | Iowa State University Research Foundation | Proteins encoded by polynucleic acids of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) |
| US6773908B1 (en) | 1992-10-30 | 2004-08-10 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Proteins encoded by polynucleic acids of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) |
| ES2074950B1 (es) * | 1993-09-17 | 1996-03-16 | Iberica Cyanamid | Vacuna para la prevencion de la enfermedad reproductiva y respiratoria de la cerda. |
| US5690940A (en) * | 1995-06-21 | 1997-11-25 | Regents Of The University Of Minnesota | Low pathogencity PRRS live virus vaccines and methods of preparation thereof |
| ES2102971B1 (es) | 1996-01-25 | 1998-03-01 | Hipra Lab Sa | Nueva cepa atenuada del virus causante del sindrome respiratorio y reproductivo porcino (prrs), las vacunas y medios de diagnostico obtenibles con la misma y los procedimientos para su obtencion. |
| AU2277497A (en) * | 1996-03-01 | 1997-09-16 | Schering Corporation | Porcine reproductive and respiratory syndrome vaccine |
| US5866401A (en) * | 1996-03-01 | 1999-02-02 | Schering Corporation | Porcine reproductive and respiratory syndrome vaccine |
| US6015663A (en) * | 1996-03-01 | 2000-01-18 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Restriction enzyme screen for differentiating porcine reproductive and respiratory syndrome virus strains |
| US5976537A (en) * | 1996-07-02 | 1999-11-02 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Porcine reproductive and respiratory syndrome vaccine |
| FR2751224B1 (fr) * | 1996-07-19 | 1998-11-20 | Rhone Merieux | Formule de vaccin polynucleotidique contre les pathologies respiratoires et de reproduction des porcs |
| DK0835930T3 (da) * | 1996-10-09 | 2001-06-18 | Akzo Nobel Nv | Europæiske vaccinestammer af porcint reproduktions- og respirationssyndrom-virus. (PRRSV) |
| US20040224327A1 (en) * | 1996-10-30 | 2004-11-11 | Meulenberg Johanna Jacoba Maria | Infectious clones of RNA viruses and vaccines and diagnostic assays derived thereof |
| EP0839912A1 (en) * | 1996-10-30 | 1998-05-06 | Instituut Voor Dierhouderij En Diergezondheid (Id-Dlo) | Infectious clones of RNA viruses and vaccines and diagnostic assays derived thereof |
| WO1998035023A1 (en) * | 1997-02-07 | 1998-08-13 | Origen, Inc. | Method for growing porcine reproductive and respiratory syndrome virus for use as vaccines and diagnostic assays |
| CZ297371B6 (cs) | 1997-05-06 | 2006-11-15 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | Peptid mající 5 az 15 aminokyselinových zbytku vyvolávající tvorbu protilátek, protilátka reaktivnís tímto peptidem a diagnostická testovací souprava |
| AU8393398A (en) * | 1997-07-10 | 1999-02-08 | Regents Of The University Of Minnesota | Causative agent of sow abortion and mortality syndrome (sams), vaccine compositions, antibodies and method |
| UA78180C2 (uk) | 1997-10-03 | 2007-03-15 | Меріаль | Кільцевий вірус свині типу ii, вакцини та діагностичні реагенти |
| FR2772047B1 (fr) | 1997-12-05 | 2004-04-09 | Ct Nat D Etudes Veterinaires E | Sequence genomique et polypeptides de circovirus associe a la maladie de l'amaigrissement du porcelet (map), applications au diagnostic et a la prevention et/ou au traitement de l'infection |
| NZ513289A (en) | 1998-12-22 | 2003-04-29 | Pfizer Prod Inc | Infectious cDNA clone of north american procine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) virus and uses thereof |
| EP1157121B1 (en) | 1999-03-08 | 2013-04-24 | Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH | Prrsv replicon |
| ES2388909T3 (es) | 1999-04-22 | 2012-10-19 | The United States Of America, As Represented Bythe Secretary Of Agriculture | Vacuna contra el virus del síndrome respiratorio y reproductivo porcino basada en aislado JA-142 aislada |
| US6497883B1 (en) * | 1999-06-10 | 2002-12-24 | Merial | Porcine circovirus recombinant poxvirus vaccine |
| ES2170622B1 (es) * | 1999-12-03 | 2004-05-16 | Consejo Superior De Investigaciones Cientificas | Clones y vectores infectivos derivados de coronavirus y sus aplicaciones. |
| WO2001046390A2 (en) * | 1999-12-20 | 2001-06-28 | Agricultural Research Council | Method of inactivating microorganisms |
| ES2267719T3 (es) * | 2000-02-08 | 2007-03-16 | Regents Of The University Of Minnesota | Virus del sindrome reproductivo y respiratorio porcino y metodos de empleo. |
| US6740490B2 (en) * | 2001-01-29 | 2004-05-25 | Kansas State University Research Foundation | Identification and applications of porcine reproductive and respiratory syndrome virus host susceptibility factor(s) for improved swine breeding |
| US6841364B2 (en) * | 2002-01-22 | 2005-01-11 | Protatek International, Inc. | Infectious cDNA clones of porcine reproductive and respiratory syndrome virus and expression vectors thereof |
| US7906311B2 (en) | 2002-03-20 | 2011-03-15 | Merial Limited | Cotton rat lung cells for virus culture |
| RU2219946C1 (ru) * | 2002-04-25 | 2003-12-27 | Федеральное государственное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт защиты животных | Вирусвакцина против репродуктивно-респираторного синдрома свиней |
| RU2220202C1 (ru) * | 2002-04-25 | 2003-12-27 | Федеральное государственное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт защиты животных | Штамм "бд" вируса репродуктивно-респираторного синдрома свиней для изготовления диагностических и вакцинных препаратов |
| RU2232596C1 (ru) * | 2002-10-16 | 2004-07-20 | Федеральное государственное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт защиты животных | Способ изготовления вирус-вакцины против репродуктивно-респираторного синдрома свиней |
| SG153829A1 (en) | 2004-06-18 | 2009-07-29 | Univ Minnesota | Identifying virally infected and vaccinated organisms |
| US7632636B2 (en) | 2004-09-21 | 2009-12-15 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Porcine reproductive and respiratory syndrome isolates and methods of use |
| PT2281829E (pt) | 2004-12-30 | 2015-02-18 | Boehringer Ingelheim Vetmed | Composições imunogénicas de pcv2 para utilização num método de prevenção de infecção de pcv2 |
| US7691368B2 (en) | 2005-04-15 | 2010-04-06 | Merial Limited | Vaccine formulations |
| PT2369001T (pt) | 2005-06-24 | 2016-10-25 | Univ Minnesota | Vírus srrp, clones infecciosos, os seus mutantes e processos de utilização |
| US20080226669A1 (en) | 2005-12-29 | 2008-09-18 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Multivalent pcv2 immunogenic compositions and methods of producing such compositions |
| CN100523177C (zh) * | 2007-01-09 | 2009-08-05 | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 | 猪繁殖与呼吸综合症病毒弱毒疫苗株及其应用 |
| WO2008089094A2 (en) * | 2007-01-12 | 2008-07-24 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Non-simian cells for growth of porcine reproductive and respiratory syndrome (prrs) virus |
| US7666585B2 (en) * | 2007-06-15 | 2010-02-23 | Protatek International, Inc. | Construction of chimera PRRSV, compositions and vaccine preparations |
| CN101848995A (zh) * | 2007-06-25 | 2010-09-29 | 南达科他州立大学 | 重组的北美1型猪繁殖与呼吸综合征病毒及使用方法 |
| FI122778B (fi) | 2008-03-31 | 2012-06-29 | Metso Power Oy | Pyrolyysimenetelmä kattilan yhteydessä ja pyrolyysilaitteisto |
| CN101363865B (zh) * | 2008-05-26 | 2013-03-06 | 北京庄笛浩禾生物医学科技有限公司 | 一种猪蓝耳病毒胶体金检测试纸条、其制备方法及其应用 |
| KR101653177B1 (ko) * | 2008-08-25 | 2016-09-01 | 베링거잉겔하임베트메디카인코퍼레이티드 | 고병원성 돼지 생식기 및 호흡기 증후군(ｈｐ ｐｒｒｓ)에 대한 백신 |
| TWI627281B (zh) | 2009-09-02 | 2018-06-21 | 百靈佳殷格翰家畜藥品公司 | 降低ｐｃｖ－２組合物殺病毒活性之方法及具有改良免疫原性之ｐｃｖ－２組合物 |
| US9107859B2 (en) | 2009-09-10 | 2015-08-18 | Merial, Inc. | Vaccine formulations comprising saponin-containing adjuvants |
| SG192821A1 (en) | 2011-02-17 | 2013-09-30 | Boehringer Ingelheim Vetmed | Commercial scale process for production of prrsv |
| EP2675475B1 (en) | 2011-02-17 | 2015-07-01 | Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH | Novel european prrsv strain |
| EP2737059A1 (en) | 2011-07-29 | 2014-06-04 | Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH | Novel prrs virus inducing type i interferon in susceptible cells |
| US9187731B2 (en) | 2011-07-29 | 2015-11-17 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | PRRS virus inducing type I interferon in susceptible cells |
| CA2844927C (en) | 2011-08-12 | 2017-10-31 | Merial Limited | Vacuum-assisted preservation of biological products, in particular of vaccines |
| MX366051B (es) | 2012-12-07 | 2019-06-26 | Univ Illinois | Composiciones del virus del síndrome reproductor y respiratorio de porcino y sus usos. |
| US9579373B2 (en) | 2013-03-15 | 2017-02-28 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, compositions, vaccine and methods of use |
| EP3049106A1 (en) | 2013-09-25 | 2016-08-03 | Zoetis Services LLC | Pcv2b divergent vaccine composition and methods of use |
| TWI745278B (zh) | 2014-10-10 | 2021-11-11 | 以色列商艾畢克生物實驗有限公司 | 發泡性降低之疫苗組合物 |
| CN104694485A (zh) * | 2015-02-13 | 2015-06-10 | 广西壮族自治区兽医研究所 | Z-ietd-fmk在提高prrsv体外培养滴度方面的应用及其方法 |
| DK3471760T3 (da) | 2016-06-17 | 2025-01-27 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | Hidtil ukendte immunogene formuleringer, der omfatter lineære eller forgrenede polyacrylsyrepolymeradjuvanser |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5213795A (en) * | 1990-10-24 | 1993-05-25 | Oxford | Encephalomyocarditis virus vaccine |
| JP3128133B2 (ja) * | 1991-06-06 | 2001-01-29 | スティッチティング セントラール ディールゲネースクンディグ インスティトゥート | 豚の奇病の原因体であるレリスタドエイジェント、それを含むワクチン組成物、豚の奇病の診断キット及び診断方法 |
| KR0138092B1 (ko) * | 1991-08-26 | 1998-04-30 | 제임스 씨. 데세사레 | 미확인(Mystery) 돼지 질병 관련 바이러스제 |
| DE69214657T4 (de) * | 1991-08-26 | 2003-07-17 | Boehringer Ingelheim Vetmed | Vakzine gegen und diagnosemethode für das schweine-unfruchtbarkeits- und atmungs-syndrom (suas) |
| AU2696792A (en) * | 1991-09-16 | 1993-04-27 | David A Benfield | Vaccine for mystery swine disease and method for diagnosis thereof |
| ES2083764T5 (es) * | 1991-10-14 | 2009-04-01 | Intervet International Bv | Vacuna para el sindrome respiratorio reproductivo porcino (srrp) y diagnostico. |
| FR2682966B1 (fr) * | 1991-10-29 | 1994-12-02 | Rhone Merieux | Preparation d'antigenes et de vaccins du virus de la mystery disease, antigenes et vaccins obtenus pour la prevention de cette maladie. |
| US5695766A (en) * | 1992-10-30 | 1997-12-09 | Iowa State University Research Foundation | Highly virulent porcine reproductive and respiratory syndrome viruses which produce lesions in pigs and vaccines that protect pigs against said syndrome |
-
1994
- 1994-01-26 ES ES94907895T patent/ES2152304T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-01-26 JP JP51810194A patent/JP3710095B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1994-01-26 DK DK94907895T patent/DK0683816T3/da active
- 1994-01-26 KR KR1019950703246A patent/KR100374295B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1994-01-26 CZ CZ19952031A patent/CZ289743B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1994-01-26 NZ NZ261992A patent/NZ261992A/en not_active IP Right Cessation
- 1994-01-26 HU HU9502330A patent/HU218430B/hu not_active IP Right Cessation
- 1994-01-26 PT PT94907895T patent/PT683816E/pt unknown
- 1994-01-26 AU AU61285/94A patent/AU681874B2/en not_active Ceased
- 1994-01-26 SK SK986-95A patent/SK98695A3/sk unknown
- 1994-01-26 DE DE69426228T patent/DE69426228T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1994-01-26 EP EP94907895A patent/EP0683816B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-01-26 PL PL94310126A patent/PL178609B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1994-01-26 AT AT94907895T patent/ATE197314T1/de not_active IP Right Cessation
- 1994-01-26 CN CN94191129A patent/CN1080300C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1994-01-26 WO PCT/US1994/000951 patent/WO1994018311A1/en not_active Ceased
- 1994-06-01 US US08/252,612 patent/US5510258A/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-12-06 US US08/349,865 patent/US5587164A/en not_active Expired - Lifetime
-
1995
- 1995-08-04 FI FI953731A patent/FI117513B/fi active IP Right Grant
- 1995-08-07 NO NO19953091A patent/NO317662B1/no unknown
- 1995-08-08 BG BG99850A patent/BG63170B1/bg unknown
-
2001
- 2001-01-17 GR GR20010400077T patent/GR3035257T3/el not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| SK98695A3 (en) | 1996-11-06 |
| DE69426228D1 (de) | 2000-12-07 |
| DK0683816T3 (da) | 2001-01-08 |
| HU9502330D0 (en) | 1996-05-28 |
| CZ203195A3 (en) | 1995-12-13 |
| US5510258A (en) | 1996-04-23 |
| KR100374295B1 (ko) | 2003-12-24 |
| ATE197314T1 (de) | 2000-11-15 |
| AU681874B2 (en) | 1997-09-11 |
| HU218430B (hu) | 2000-08-28 |
| FI117513B (fi) | 2006-11-15 |
| FI953731L (fi) | 1995-08-04 |
| NZ261992A (en) | 1996-06-25 |
| NO953091L (no) | 1995-08-07 |
| BG63170B1 (bg) | 2001-05-31 |
| GR3035257T3 (en) | 2001-04-30 |
| CZ289743B6 (cs) | 2002-03-13 |
| DE69426228T2 (de) | 2001-03-01 |
| US5587164A (en) | 1996-12-24 |
| PL310126A1 (en) | 1995-11-27 |
| JPH08506486A (ja) | 1996-07-16 |
| CN1117742A (zh) | 1996-02-28 |
| JP3710095B2 (ja) | 2005-10-26 |
| NO317662B1 (no) | 2004-11-29 |
| EP0683816B1 (en) | 2000-11-02 |
| BG99850A (bg) | 1996-02-28 |
| AU6128594A (en) | 1994-08-29 |
| FI953731A0 (fi) | 1995-08-04 |
| CN1080300C (zh) | 2002-03-06 |
| ES2152304T3 (es) | 2001-02-01 |
| EP0683816A1 (en) | 1995-11-29 |
| WO1994018311A1 (en) | 1994-08-18 |
| HUT72917A (en) | 1996-06-28 |
| PT683816E (pt) | 2001-03-30 |
| NO953091D0 (no) | 1995-08-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PL178609B1 (pl) | Izolat wirusa zespołu reprodukcyjnego i oddechowego świń zwanego PRRSV, sposób namnażania izolatu PRRSV, klon linii komórkowej, hodowla tkankowa zawierająca izolat PRRSV, szczepionka efektywna w ochronie świń przeciw PRRSV oraz sposób wytwarzania szczepionki efektywnej w ochronie świń przeciw PRRSV | |
| Crawford et al. | Status of vaccines for porcine epidemic diarrhea virus in the United States and Canada | |
| EP0676467B1 (en) | European vaccine strains of the porcine reproductive respiratory syndrome virus (PRRSV) | |
| EP0830142B1 (en) | Prrs (porcine reproductive and respiratory syndrome) virus vaccine | |
| CA2189979C (en) | Improved modified live brsv vaccine | |
| US5976537A (en) | Porcine reproductive and respiratory syndrome vaccine | |
| EP0835929A1 (en) | New attenuated strain of the virus causing the porcine reproductive respiratory syndrome (prrs), vaccines and diagnostic means obtainable with said strain, and production process | |
| De Smit et al. | Prevention of transplacental transmission of moderatevirulent classical swine fever virus after single or double vaccination with an E2 subunit vaccine | |
| US3869547A (en) | Calf diarrhea virus vaccine and processes | |
| RU2187333C2 (ru) | Вакцина для защиты свиней от репродуктивного и респираторного синдрома и способ защиты свиней | |
| US5213795A (en) | Encephalomyocarditis virus vaccine | |
| JP3043353B2 (ja) | ワクチン | |
| CA2155533C (en) | Process for growing porcine reproductive and respiratory syndrome virus and its use in vaccines | |
| Welter | Stratagies for a Successful Coronavirus (TGE) Vaccine for Swine | |
| De Leeuw et al. | Comparison of intranasal and parenteral vaccination against Aujeszky’s disease in 12-week-old pigs from immunised dams | |
| MXPA97007302A (en) | New attenuated cepa of the virus causing the respiratory and reproductive swine syndrome (prrs), vaccines and diagnostic media obtained with the same and the procedures for your obtenc |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20080126 |