PL184424B1 - Agoniści krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych - Google Patents

Abstract

w odpowiednich warunkach odzywiania komórek gospodarza transformowanych lub transfekowa- nych wektorem replikujacym zawierajacym czasteczke kwasu nukleinowego kodujaca bialko krwiotwórcze w sposób pozwalajacy na ekspresje wymienionego bialka krwiotwórczego, oraz odzyskanie wymienionego bialka krwiotwórczego, przy czym czasteczka kwasu nukleinowego koduje bialko krwiotwórcze wybrane sposród SEQ ID NR:203, SEQ ID NR:204, SEQ ID NR:205, SEQ ID NR:206, SEQ ID NR:207, SEQ ID NR:208, SEQ ID NR:209, SEQ ID NR:210, SEQ ID NR:211, SEQ ID NR:212, SEQ ID NR:213, SEQ ID NR:214, SEQ ID NR:215, SEQ ID NR:216, SEQ ID NR:217, SEQ ID NR:218, SEQ ID NR:219, SEQ ID NR:220, SEQ ID NR:221, SEQ ID NR:222, SEQ ID NR:223, SEQ ID NR:224, SEQ ID NR:225, SEQ ID NR:226, SEQ ID NR:227, SEQ ID NR:228, SEQ ID NR:229, SEQ ID NR:230, SEQ ID NR:231, SEQ ID NR:232, SEQ ID NR:233, SEQ ID NR:234, SEQ ID NR:235, SEQ ID NR:236, SEQ ID NR:237, SEQ ID NR:238 oraz SEQ ID NR:239. 6. Kompozycja farmaceutyczna, znamienna tym, ze zawiera bialko krwiotwórcze wybrane sposród: SEQ ID NR:203, SEQ ID NR:204, SEQ ID NR:205, SEQ ID NR:206, SEQ ID NR:207, SEQ ID NR:208, SEQ ID NR:209, SEQ ID NR:210, SEQ ID NR:211, SEQ ID NR:212, SEQ ID NR:213, SEQ ID NR:214, SEQ ID NR:215, SEQ ID NR:216, SEQ ID NR:217, SEQ ID NR:218, SEQ ID NR:219, SEQ ID NR:220, SEQ ID NR:221, SEQ ID NR:222, SEQ ID NR:223, SEQ ID NR:224, SEQ ID NR:225, SEQ ID NR:226, SEQ ID NR:227, SEQ ID NR:228, SEQ ID NR:229, SEQ ID NR:230, SEQ ID NR:231, SEQ ID NR:232, SEQ ID NR:233, SEQ ID NR:234, SEQ ID NR:235, SEQ ID NR:236, SEQ ID NR:237, SEQ ID NR:238 oraz SEQ ID NR:239 oraz farma- ceutycznie dopuszczalny nosnik. PL PL PL

Description

Przedmiotem wynalazku jest białko krwiotwórcze wybrane spośród: SEQ ID NR:203, SEQ ID NR:204, SEQ ID NR:205, SEQ ID NR:206, SEQ ID NR:207, SEQ ID NR:208, SEQ ID NR:209, SEQ ID NR:210, SEQ ID NR:211, SEQ ID NR:212, SEQ ID NR:213, SEQ ID NR:214, SEQ ID MR215, SEQ ID NR:216, SEQ ID NR:217, SEQ Π0 HR218, SEQ ID

NR:219, SEQ ID NR:220, SEQ ID N^:^^l, SEQ ID NR:222, SEQ ID NR:223, SEQ UD

NR:224, SEQ ID NR:225, SEQ ID NR:226, SEQ ID NR:227, SEQ D NR:228, SEQ ID

NR:229, SEQ ID SEQ ID SEQ ID NR:232, SEQ ID NR:233, SEQ ID

NR:234, SEQ ID NR:235, SEQ ID NR:236, SEQ ID NR:237, SEQ ID NR:238 oraz SEQ ID NR:239.

Przedmiotem wynalazku jest także cząsteczka kwasu nukleinowego kodująca białko krwiotwórcze wybrane spośród SEQ ID NR:203, SEQ ID NR:204, SEQ ID NR:205, SEQ ID NR:206, SEQ ID NR:207, SEQ ID NR:208, SEQ ID NR:209, SEQ ID JNR:210, SEQ ID

NR:211, SEQ ID NR:212, SEQ ID NR:213, SEQ ID NR:214, SEQ DO SEQ ID

NR:216, SEQ ID NR::27, SEQ ID SEQ ID NR:219, SEQ D NR:220. SEQ ID

NR:221, SEQ ID NR;222, SEQ ID NR:223, SEQ ID NR:224, SEQ DO NR:225, SEQ ID

NR:226, SEQ ID NR:227, SEQ ID NR:228, SEQ ID NR:229, SEQ ID NR:230, SEQ ID

NR:231, SEQ ID NR:232, SEQ ID NR:233, SEQ ID NR:234, SEQ DO NR:235, SEQ ID

NR:236, SEQ ID NR:237, SEQ ID NR:238 oraz SEQ ID NR:239.

Korzystnie cząsteczka kwasu nukleinowego według wynalazku charakteryzuje się tym, że została wybrana spośród SEQ ID NR:118, SEQ D NR:119, SEQ ID NR^O, SEQ U) NR:121, SEQ ID NR:122, SEQ ID NR:122, SEQ ID NR:124, SEQ D !^Γ^:2^5, SEQ ID

NR:126, SEQ ID NR:127, SEQ ID SEQ ID NR:129, aSQ D , SEQ ID

NR:131, SEQ ID NR:132, SEQ ID NR:133, SEQ ID NR:134, SEQ ID NR:135, SEQ ID

NR:136, SEQ ID NR:137, SEQ ID NR:B8, SEQ ID NR:139, SEQ D NR1140 , SEQ ID

NR:141, SEQ ID NR:142, SEQ ID NR:M3, SEQ ID NR:144, SEQ ID ERLU,, SEQ ID

NR:146, SEQ ID NR-.147, SEQ ID NR-.148, aSE ID SEQ ID NR-.150, SEQ ID

NR:151, SEQ ID NR:152, SEQ ID NR:153, aSQ ID NR:154, oraz sekwencji równoważnych tym sekwencjom wynikających z degeneracji kodu genetycznego.

Przedmiotem wynalazku jest także sposób wytwarzania białka krwiotwórczego charakteryzujący się tym, że obejmuje: hodowlę w odpowiednich warunkach odżywiania komórek gospodarza transformowanych lub transfekowanych wektorem replikującym zawierającym cząsteczkę kwasu nukleinowego kodującą białko krwiotwórcze w sposób pozwalający na ekspresję wymienionego białka krwiotwórczego, oraz odzyskanie wymienionego białka krwiotwórczego, przy czym cząsteczka kwasu nukleinowego koduje białko krwiotwórcze wybrane spośród SEQ ID NR:203, SEQ ID NR:204, SEQ ID NR:205, SEQ ID NR:206, SEQ ID NR:207, SEQ ID NR^, SEQID ΠR:209, SEQro NR:210, S1Q ID NR^I^ SEQ ID

NR:212, aSQ ID NRN13, SEQ H) DRSl!, SEQID NR:2H, S1Q EQ NR^l^ REQ ID

NR:217, SEQ ID NR!^, DR:: 19, SEQID NR:22(), SEQ IU NR^h REę ID

NS:222, SEQ ID NR:2R3, 3EQ Π) DR^,, SEQro NR:22N, S2Q ID NR^^ REp ID

184 424

NR:227, SEQ ID NR:228, SEQ ID NR:229, SEQ ID NR:230, SEQ ID NR:231, SEQ ID NR:232, SEQ ID NR:233, SEQ ID NR:234, SEQ ID NR:235, SEQ ID NR:236, SEQ ID NR:237, SEQ ID NR:238 oraz SEQ ID NR:239.

Korzystnie sposób według wynalazku charakteryzuje się tym, że cząsteczka kwasu nukleinowego została wybrana spośród SEQ ID NR:118e SEQ ID NR: 119 , SEQ ED KRAO. SEQ ID NR:121, SEQ ID NR:122, SEQ ID NR:123, SEQ ID NR:124, SEQ ID NR:125, SEQ ID NR:126e SEQ ID NR:127, SEQ ID NR:128e SEQ ID NR: 129, SEQ ID NR: BO, SEQ ID NR:131, SEQ ID NR:132, SEQ ID NR:133, SEQ ID NR:134, SEQ ID NR:135, SEQ ID

NR:136e SEQ iD) NR:137e SEQ ED NR:138, SEQ ID NR:B9, SEQ ID MRMO, SEQ ID

NR:141, SEQ ID NR:142, SEQED NRA43, SEQ ID NRA44, SEQ ID NR:^, SEQ ID

NR:146i SEQ ID NR:147e SEQ ED NR:148, SEQ ID NRE49, SEQ ID INRHO, SEQ ID

NR:151e SEQ ID NR: 152 , SEQ D NR-.U3, EEQnD NR:154, oraz sekweijcji równoważnych tym sekwencjom wynikających z degeneracji kodu genetycznego.

Przedmiotem wynalazku jest także kompozycja farmaceutyczna charakteryzująca się tym, że zawiera białko krwiotwórcze wybrane spośród: SEQ ID NR:203, SEQ ID NR:204, SEQ ID NR:205, SEQ ID NR:206, SEQ ID NR:207, SEQ ID NR:208, SEQ ID NR:209, SEQ ID NR:210, ID NR:211, SEQ ID NR:212, SEQ ID NR:213, SEQ ID NR:214, SEQ ID NR:215, SEQ ID NR:216, SEQED NR:217, SEQ IID NR:228, SEQ ID NR:229, SEQ ID

NR:220, SEQ ID NR:221, SFJE ED NR:222, SEQ ED NR:223, SEQ ED NR:224, SEQ ID

NR:225, SEQ ID NR:226, SEQED NR:227, SEQ ED NR:228, SEQ IID NR:229, SEQ ID

NR:230, SEQ ID NR^H, SEQED NR:232, SEQ ID NR:233, SEQ ED NR:234, SEQ ID

NR:235, SEQ ID NR:236, SEQ ID NR:237, SEQ ID NR:238 oraz SEQ ID NR:239 oraz farmaceutycznie dopuszczalny nośnik.

Korzystnie kompozycja farmaceutyczna według wynalazku charakteryzuje się tym, że dodatkowo zawiera co najmniej jeden czynnik stymulacji kolonii, cytokinę, limfokinę, interleueinę, czynnik krwiotwórczy wybrany z grupy składającej się z: GM-CSF, G-CSF, liganda c-mpl (TPO), MGDF, M-CSF, erytropoetyny (EPO), IL-1, IL-4, IL-2, IL-3, IL-5, IŁ-6, IL-7, IL-8, iL-9, iL-10, IL-11, IL-12, IL-B, 1L-15, LIF, liganda flt3, czynnika komórek macierzystych (SCF).

Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie białka krwiotwórczego wybranego spośród: SEQ ID NR:203, SEQ ED NR:204, SEQ ID NR:205, SEQ ED NR:206, SEQ ID

NR:207, SEQ ID NR:208, SFQ ED NR:209, SEQ IID NR:210, SEQ IID NR:211, SEQ ID

NR.^B, SEQ ID NR:2B, SEQ ED NR:214, SEQ ID MR2B, IID NIMB. SEQ ID

NR:217, SEQ ID NR:218, SEQ ED MR219, S^Q ID NR222, SEQ ID NR^h SEQ ID

NR^, SEQ ID NR:233, SEQ ED TNR:224, SEQ IID NR:^22, SEQ ID NR^, SEQ ID

NR:227, SEQ ID NR^, SEQED NR:229, SEQ ID NR^O, SEQ ID HR231, SEQ UD

NR^H, SEQ ID NR^U, SEQED NR:234, SEQ ED NR^H, SEQ ID NR:226, SEQ ID

NR.·257, SEQ ID NR:238 oraz SEQ ID NR^O do produkcji leku do stymulowania produkcji komórek krwiotwórczych u pacjenta.

Przedmiotem wynalazku jest także środek do stymulowania produkcji komórek krwiotwórczych u pacjenta zawierający czynnik aktywny i farmaceutycznie dopuszczalny nośnik charakteryzujący się tym, że jako czynnik aktywny zawiera białko krwiotwórcze wybrane spośród: SEQ ID NR:203, SEQ ID NR^M, SEQ ID NR:305, SEQ ID NR:206, SEQ ID NR:207, SEQ ID NR:208, SEQ ID NR:209, SEQ ID NR:210, SEQ ID NR:211, SEQ ID NR:212, SEQ ID NR:2B, SEQ ID NR^M, SEQ ID NR^H, SEQ ID NR^, SEQ ID NR^, SEQ ID NR:218, SEQ ID NR:219, SEQED MR220, SEQ IID NR^E SEQ ID IN^:^22, SEQ ID

NR^, SEQ ID NR^, SEQ ED NR:225, SEQ IID NR:^22i, SEQ IID NR227, SEQ ID

NR:228, SEQ ID NR:229, SEQ ED NR:230, SEQ ID NR/BR SEQ ID NRBU, SEQ ID

NR:233, SEQ ID NR:234, SEQED NR:235, SEQ IID MMH, SEQ IID NR:235, SEQ ED

NR:238 oraz SEQ ID NR:239.

Przedmiotem wynalazku jest także sposób selektywnej ekspansji ex vivo komórek krwiotwórczych charakteryzujący się tym, że obejmuje etapy: (a) hodowli oddzielonych komórek krwiotwórczych w pożywce hodowlanej zawierającej białko krwiotwórcze wybrane spośród: SEQ ID NR:305, SEQ ID NR:204, SEQ ID NR:205, SEQ ID NR:206, SEQ ID

184 424

NR:207, SEQ IDNR:208, SEQ ID NRE209, SEQ ID NR:210, SEQ ID NR:211, SEQ ID NR:212, SEQ ID NR:213, SEQ ID NR:214 , SEQ ID NR:215, SEQ ID NR:216, SEQ ID

NR:217, SEQ ID NR:218, SEQ ID NR:219 , SEQ ID NR:220, SEQ ID NR:221, SEQ ID

NR:222, SEQ ID NR:223, SEQ ID NR:224, SEQ ID NR:225, SEQ ID NR:226, SEQ UD

NR:227, SEQ ID NR:228, SEQ ID NR:229, SEQ ID NR:230, SEQ ID NR:231 , SEQ ID

NR:232, SEQ ID NR:233, SEQ ID NR:234, SEQ ID NR:235, SEQ ID NR:236, SEQ ID

NR:237, SEQ ID NR:238 i SEQ ID NR:239; oraz (b) zbierania hodowanych komórek.

Przedmiotem wynalazku jest także sposób selektywnej ekspansji ex vivo komórek macierzystych charakteryzujący się tym, że obejmuje etapy: (a) oddzielania komórek macierzystych od innych komórek, (b) hodowli oddzielonych komórek krwiotwórczych w pożywce hodowlanej zawierającej białko krwiotwórcze wybrane spośród: SEQ ID NR:203, SEQ ID NR:204, SEQ ID NR:205, SEQ ID NR:206, SEQ ID NR:207, SEQ ID NR:208, SEQ ID NR:209, SEQ ID NR:210, SEQ ID NR:2B , SEQ ID NR:212, SEQ ID NR:213 , SEQ ID

NR:214, SEQ ID NR:215, SEQ ID NR:216 , SEQ ID NR:217, SEQ ID NR:218 , SEQ ID

NR:219, SEQ ID NR:220, SEQ D NR:221 , SEQ ID NR:222, SEQ ID NR:223, SEQ ID

NR:224, SEQ ID NR:225, SEQ ID NR.:226, SEQ ID NR:227, SEQ ID NRU228, SEQ ID

NR:229, SEQ ID NR:230, SEQ ID NR:23, , SEQ ID NR:232, SEQ ID NR:233, SEQ ID

NR:234, SEQ IDNR:235, SEQ ID NR:236, SEQ ID NR:237, SEQ ID NR:238 i SEQ ID NR:239; oraz (c) zbierania hodowanych komórek.

Figura 1 ilustruje schemtycznie rearanżację sekwencji białka. Koniec N (N) i koniec C (C) białka natywnego łączy się przez linker lub łączy się bezpośrednio. Białko otwiera się w punkcie przerwania, tworząc nowy koniec N (nowy N) i nowy koniec C (nowy C), dając w wyniku nową liniową sekwencję aminokwasową. Przebudowaną cząsteczkę można syntetyzować od nowa jako cząsteczkę liniową i nie przechodzić etapów łączenia oryginalnego końca N i końca C i otwierania białka w punkcie przerwania.

Figura 2 ukazuje schemat Sposobu i tworzenia nowych białek, w których oryginalny koniec N i koniec C białka natywnego, łączy się za pomocą linkera i tworzy się inny koniec N i koniec C białka. W przykładzie ukazana rearanżacja sekwencji daje w wyniku nowy gen, kodujący białko z nowym końcem N utworzonym przy aminokwasie 97 białka oryginalnego, oryginalnym końcem C (aminokwas 174) połączonym z aminokwasem 11 (aminokwasy 1-10 usuwa się) poprzez region linkera, i nowym końcem C utworzonym przy aminokwasie 96 sekwencji oryginalnej.

Figura 3 ukazuje schemat sposobu II, tworzenia nowych białek, w których oryginalny koniec N i koniec C białka natywnego łączy się bez linkera i tworzy się inny koniec N i koniec C białka. W przykładzie ukazana rearanżacja sekwencji daje w wyniku nowy gen, kodujący białko z nowym końcem N utworzonym przy aminokwasie 97 białka oryginalnego, oryginalnym końcem C (aminokwas 174) połączonym z oryginalnym końcem N, i nowym końcem C utworzonym przy aminokwasie 96 sekwencji oryginalnej.

Figura 4 ukazuje schemat sposobu II tworzenia nowych białek, w których oryginalny koniec N i koniec C białka natywnego, łączy się za pomocą linkera i tworzy się inny koniec N i koniec C białka. W przykładzie ukazana rearanżacja sekwencji daje w wyniku nowy gen, kodujący białko z nowym końcem N utworzonym przy aminokwasie 97 białka oryginalnego, oryginalnym końcem C (aminokwas 174) połączonym z aminokwasem i poprzez region linkera, i nowym końcem C utworzonym przy aminokwasie 96 sekwencji oryginalnej.

Niniejszy wynalazek obejmuje agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych tworzonych z kowalentnie łączonych polipeptydów, z których każdy może oddziaływać przez różny i specyficzny receptor komórkowy, aby inicjować komplementarną aktywność biologiczną. Hematopoeza wymaga złożonego szeregu zdarzeń komórkowych, w których komórki macierzyste wytwarzają w sposób ciągły wielkie populacje dojrzewających komórek we wszystkich głównych liniach. Istnieje aktualnie co najmniej 20 znanych regulatorów o krwiotwórczej aktywności proliferacyjnej. Większość z tych regulatorów proliferacyjnych może tylko stymulować jeden lub inny typ tworzenia kolonii in vitro, przy czym dokładny wzór tworzenia kolonii stymulowany przez każdy regulator, jest całkiem, inny. Nie ma dwóch regulatorów stymulujących dokładnie taki sam wzór tworzenia kolonii, jak ocenio34

184 424 no przez liczbę kolonii lub, co istotniejsze, przez linię i wzór dojrzewania komórek, tworzących rozwijające się kolonie. Odpowiedź proliferac^ną najłatwiej można zanalizować w uproszczonych układach hodowli in vitro. Można rozróżnić trzy całkiem inne parametry: zmianę wielkości kolonii, zmianę liczby kolonii i linię komórek. Dwa lub więcej czynników może oddziaływać na komórkę rodzicielską, indukując tworzenie większej liczby potomstwa, zwiększając przez to wielkość kolonii. Dwa lub więcej czynników może pozwolić większej liczbie komórek rodzicielskich na proliferację, albo dlatego, że istnieją różne podzbiory komórek rodzicielskich, które odpowiadają wyłącznie na jeden czynnik, albo dlatego, że niektóre komórki rodzicielskie wymagają stymulacji dwoma lub więcej czynnikami, zanim będą zdolne do odpowiedzi. Aktywacja dodatkowych receptorów na komórce, przez stosowanie dwóch lub więcej czynników, prawdopodobnie wzmacnia sygnał mitotncann z powodu koalesyencji początkowo różnych szlaków sygnałowych do wspólnego szlaku końcowego, osiągającego jądro (Metcalf, Nature 339: 27, 19S9). Inne mechanizmy mogłaby wytłumaczyć synergia. Przykładowo, jeśli jeden szlak sygnałowy jest ograniczony przez pośrednią aktywację dodatkowego szlaku sygnałowego, który powoduje drugi czynnik, to może to dać w rezultacie odpowiedź nadaddytywną. W niektórych przypadkach, aktywacja jednego typu receptora może indukować wzmocnioną ekspresję innych receptorów (Metcalf, Blood S2: 33l3-S32S, 1993). Dwa lub więcej czynników może dać w wyniku inny wzór linii komórek niż w przypadku pojedynczego czynnika. Zastosowanie agonistów kowintwórcayyC receptorów wielocannżościownch może mieć potencjalną korzyść kliniczną, wynikającą z odpowiedzi prolifeoayyjnej, która jest nie możliwa z żadnym pojedynczym czynnikiem.

Receptory krwiotwórczych i innych czynników wzrostu można pogrupować w dwie różne rodziny pokrewnych białek: (1) receptory kinazy tnroznżowej, włączając te dla czynnika wzrostu naskórka, M-CSF (SCcto, Blood ,3: 1, 1990) i SCF (Yarden i in., EMBO J.6: 3341, 1987): oraz (2) receptory krwiotwórcze, nie zawierające domeny kinazy tyrozynowej, lecz wykazujące wyraźną homologię w ich domenie zewnąloaeomóokowej (Bazan, PNAS USA 87: 6934-6938, 1,0). Ta ostatnia grupa obejmuje erytropoetynę (EPO) (DAndrea i in.. Cell 37: 277, 1989), GM-CSF (Gearing i in., EMBO J. S: 3667, 1989), IL-3 (Kitamura i in., Cell 66: 1163, 1991), G-CSF (Fukunaga i in., J.Btol.Chem.263: 14008-13, 190), IL-4 (Harada i in., PNAS USA 87: 837, 1990), IL-3 (Takaki i in., EMBO J, 9: 4367, 1990), IL-6 (Yamasaki i in., Science 241: 823, 1988), IL-7 (Goodwin i in., Cell, 60: 941-31, 1990), LIF (Gearing i in., EMBO J, 10: 2839, 1991) oraz IL-2 (Cosm^ i in., Mol-Immużnl. 23: 933-94, 1986). Najwięcej z ostatniej grupy receptorów istnieje w postaci o wysokim powinowactwie jako heterodimery. Po związaniu liganda, specyficzne łańcuchy a wiążą się z co najmniej jednym innym łańcuchem receptora (łańcuch β, łańcuch y). Wiele z tych czynników dzieli wspólną podjednostkę receptora. Łańcuchy a dla GM-CSF, IL-3 i IL-3 dzielą ten sam łańcuch β (Kimurura i in., Cell 66: 1163, 1991), Takaki i in., EMBO J. 10: 28833-8, 1991), a kompleksy receptora dla IL-6, LIF i IL-11 dzielą wspólny łańcuch p (gpl30) (Taga i in., Cell 38: 373-81, 1989; Gearing i in., Science 233: 1434-7, 1992). Kompleksy receptora IL-2, IL-4, IL-7, IL-9 i IL-13 dzielą wspólny łańcuch γ (Kondo i in., Science 262: 1874, 1993; Russell i in., Science 262:

1993; Giri i in., EMBO J. 13: 282^^^2^230 1994).

Stosowanie wielokrotnie działającego czynnika krwiotwórczego może mieć także potencjalną korzyść przez zmniejszanie zapotrzebowań umiejscowionych na komórkach wytwarzających czynnik i ich układach indukcyjnych. Jeśli istnieją ograniczenia zdolności komórki do wytwarzania czynnika, to przez obniżanie wymaganych stężeń każdego z czynników i użycie ich łącznie, może użytecznie zmniejszać zapotrzebowanie na komórkach, wytwarzających czynnik. Stosowanie wielorako działającego czynnika krwiotwórczego może obniżać ilość potrzebnych czynników, zmniejszając prawdopodobnie możliwość wystąpienia niepożądanych skutków ubocznych.

Nowe związki według tego wynalazku przedstawia wzór wybrany spośród grupy, składającej się z:

R:-L,-R2, R2-L1-R1 oraz R2-R:

gdzie R: i R2 są takie jak określono powyżej.

184 424

R? jest korzystnie czynnikiem, stymulującym kolonię z inną lecz komplementarną aktywnością, niż R1. Przez aktywność komplementarną rozumie się aktywność, która wzmacnia lub zmienia odpowiedź na inny modulator komórkowy. Polipeptyd R1 łączy się albo bezpośrednio albo przez segment linkerowy z polipeptydem R2. Określenie „bezpośrednio” oznacza agonistę krwiotwórczego receptora wieloczynnościowego, w którym polipeptydy łączą się bez linkera peptydowego. W ten sposób L1 reprezentuje wiązanie chemiczne lub segment polipeptydowy, do którego dołączone są w ramce zarówno R1 jak i R2, przy czym L1 jest najczęściej liniowym peptydem, do którego łączą się R1 i R2 przez wiązania amidowe, łączące koniec karboksylowy R1 z końcem aminowym L1 i koniec karboksylowy L1 z końcem aminowym R2. Przez „dołączone w ramce” rozumie się, że brak jest terminacji translacji lub przerwania między ramkami odczytu DNA, kodującego R1 i R2.

Nie wyłączna lista innych czynników wzrostu, to jest czynników stymulujących kolonię (CSF), którymi są cytokiny, limfokiny, interleukiey krwiotwórcze czynniki wzrostu, które można łączyć z (I), (II) i (III), obejmuje GM-CSF, G-CSF, ligand, c-mpl (znany także jako TPO lub MGDF), M-CSF, erytropoetyna (EPO), Il-1, IL-4, IL-2, IL-3, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, LIF, ligand flt3/flk2, ludzki hormon wzrostu, czynnik wzrostu komórek B, czynnik różnicowania komórek B, czynnik różnicowania komórek eozynofilowych, oraz czynnik komórek macierzystych (SCF) znany także jako czynnik stali lub ligand c-kit. Dodatkowo, wynalazek ten obejmuje zastosowanie modyfikowanych cząsteczek R1 lub R2 lub zmutowanych albo modyfikowanych sekwencji DNA, kodujących te cząsteczki R1 lub R2. Niniejszy wynalazek obejmuje także agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych, w których R1 lub R2 oznacza odmianę hIL-3, odmianę ligandu c-mpl lub odmianę G-CSF. „Odmianę hIL-3” określa się jako cząsteczkę hIL-3, która posiada substytucje aminokwasowe i/lub delecje części hIL-3, jak ujawniono w WO 94/12638, WO 94/12639 i WO 95/00646, a także inne odmiany znane w tej dziedzinie. „Odmianę ligandu c-mpl” określa się jako cząsteczkę liganda c-mpl, która posiada substytucje aminokwasowe i/lub delecje części cząsteczki c-mpl, ujawnione w zgłoszeniu Stanów Zjednoczonych o kolejnym numerze 08/383 035, jak również inne odmiany znane w tej dziedzinie. „Odmianę G-CSF” określa się jako cząsteczkę G-CSF, która posiada substytucje aminokwasowe i/lub delecje części cząsteczki G-CSF, jak ujawniono tutaj, a także inne odmiany znane w tej dziedzinie.

Grupa wiążąca L1 jest generalnie polipeptydem o długości, wynoszącej 1-500 aminokwasów. Linkery łączące dwie cząsteczki korzystnie przeznacza się aby (1) pozwalały dwóm cząsteczkom na pofałdowanie i działały niezależnie od siebie, (2) nie miały skłonności do rozwijania uporządkowanej struktury drugorzędowej, co mogłoby przeszkadzać domenom funkcjonalnym dwóch białek, (3) posiadały minimalne charakterystyki hydrofobowe, co mogłoby oddziaływać z fukcjonalnymi domenami białek i (4) zabezpieczały oddzielenie przestrzenne R1 i R2 tak, żeby R1 i R2 mogły oddziaływać różnocześnie z ich odpowiadającymi receptorami na pojedynczej komórce. Zazwyczaj aminokwasy powierzchniowe w elastycznych regionach białka, obejmują Gly, Asn i Ser. W rzeczywistości oczekuje się, że każda permutacja sekwencji aminokwasowych, zawierających Gly, Asn i Ser będzie spełniać powyższe kryteria dla sekwencji linkerowej. Inne aminokwasy obojętne, takie jak Thr i Ala, także można stosować w sekwencji linkerowej. Można także wziąć do linkerów dodatkowe aminokwasy, ponieważ dodanie unikatowych miejsc restrykcji w sekwencji linkerowej ułatwi konstruowanie agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych.

Zalecanymi linkerami L1 według niniejszego wynalazku są sekwencje wybrane z grupy o wzorach:

(Gly³Ser)n (SEQ ID nr: 4), (Gly⁴Ser/ (SEQ ID nr: 5), (Gly⁵Se·/ (SEQ ID nr: 6), (GlynSer) (SEQ ID nr: 7) lub (AlaGlySer)' (SEQ ID nr: 8).

Przykładem bardzo elastycznego linkera jest region rozdzielający bogaty w glicynę i serynę obecny wewnątrz białka pIII bakteriofagów nitkowatych, np. Bakteriofagów M13 lub FD (Schaller i in„ PNAS USA 72: 737-741, 1975).

Region ten zapewnia długi elastyczny region rozdzielający między dwiema domenami białka powierzchniowego pIII. Region rozdzielający składa się z sekwencji aminokwasowej:

184 424

GlyGlyGlySerGlyGlyGlySerGlyGlyGlySerGluGlyGlyGlySerGluGlyGlyGlySerGluGlyGlyGly SerGluGlyGlyGlySerGlyGlyGlySer (SEQ ID nr: 9).

Niniejszy wynalazek obejmuje także linkery, w których zawarta jest sekwencja rozpoznawania endopeptydazy. Takie miejsce rozszczepienia może być wartościowe do rozdzielania poszczególnych składników agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych, do, określania czy są one prawidłowo złożone i aktywne in vitro. Przykładami różnych endopeptydaz są, lecz ograniczająco, plazmina, enterokinaza, kalikreina, urokinaza, tkankowy aktywator plazminogenu, klostrypaina (clostripain), chymozyna, kolagenaza, proteaza z jadu żmii Russella, enzym rozszczepienie postprolinowego, proteaza V8, trombina i czynnik Xa.

Peptydowe segmenty linkerowe z regionu zawiasowego ciężkiego łańcucha immunoglobulin IgG, IgA, IgM, IgD lub IgE zapewniają kątowy związek między złączonymi polipeptydami. Szczególnie użyteczne są te regiony zawiasowe, gdzie cysteiny są zamienione na seryny. Zalecanymi linkerami według niniejszego wynalazku są sekwencje, pochodzące z regionu zawiasowego mysiej IgG gamma 2b, w którym cysteiny zamieniono na seryny. Linkery te mogą także zawierać miejsce rozszczepienia endopeptydćzsą: Przykładami takich linkerów są następujące sekwencje:

IleSerGluProSerGlyProIleSerThrlleAsrProSerProProSerLysGlu

SerHisLysSerPro (SeQ ID nr: 10) oraz

IleGluGlyArgIleSerGluProSerGlyProIleSerTh^IleAsnProSerPro

ProSerLysGluSerHisLysSerPro (SEQ ID nr: 11).

Niniejszy wynalazek nie jest jednak ograniczony przez postać, wielkość lub liczbę użytych sekwencji linkerowych i jedynym wymaganiem wobec linkera jest to, żeby fukcjonalnie nie przeszkadzał w fałdowaniu i działaniu poszczególnych cząsteczek agonisty krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych.

Określenie Linkera L2.

Długość sekwencji aminokwasowej linkera L2 użytej w IR i R2 można wybrać empirycznie lub za przewodnictwem informacji strukturalnych, lub stosując połączenie tych dwóch podejść.

Gdy brak jest informacji strukturalnych, można wytworzyć małe szeregi linkerów do testowania, przy użyciu wzoru, których długość jest różna, w celu rozciągnięcia zakresu od 0 do 50 A i których sekwencję wybiera się w celu uzgodnienia z ekspozycją powierzchniową (hydrofilność, Hopp i Woods, Mol.Immunol. 20: 483-489, 1983), Kyte i Doolittle, J.Mol.Biol. 157: 105-132; obszar powierzchni wystawiony na rozpuszczalnik, Lee i Richards, J.Mol.Biol. 55: 379-400, 1971) oraz zdolnością do dostosowywania niezbędnej konformacji bez zakłócania konformacji R1 lub R2 (elastyczne konformacyjnie; Karplus i Schulz, Naturwissenschafen 72: 212-213, 1985). Zakładając przeciętną translację, wynoszącą 2,0-3,8 a na resztę, będzie to oznaczać, że długość do testowania będzie między 0-30 reszt, z zalecanym zakresem, wynoszącym 0-15 reszt. Przykładem takich empirycznych szeregów, byłoby zmonotowanie linkerów przy użyciu sekwencji kasety, takiej jak Gly-Gly-Gly-Ser (SEq ID nr: 12) powtórzonej n razy, gdzie n wynosi 1, 2, 3 lub 4. Fachowcy poznają, że istnieje wiele takich sekwencji, które mają zmienna, długość lub skład, które mogą służyć jako linkery z główną uwagą, że nie mogą one być ani nadmiernie długie ani krótkie (porównaj z Sandhu, Critical Rev. Biotech. 12: 437-462, 1992); jeśli są za długie, efekt entropii będzie prawdopodobnie destabilizował trójwymiarowe złożenie i może także uczynić fałdowanie kinetycznie niepraktycznym, oraz jeśli są za krótkie, będą prawdopodobnie destabilizować cząsteczkę z powodu odkształcenia skrętnego lub przestrzennego. Specjaliści w dziedzinie analizy informacji strukturalnej białka poznają, że stosowanie odległości między końcami łańcucha, określane jako odległość między węglami c-alfa, można stosować do określania długości użytej sekwencji, lub co najmniej do ograniczenia liczby możliwości, które muszą być testowane w empirycznej selekcji linkerów. Poznają oni także, że czasem zdarzy się, że pozycje końców łańcucha polipeptydowego są nieokreślone w modelach strukturalnych, pochodzących z danych dyfrakcji rentgenowskiej lub spektroskopii jądrowego rezonansu magnetycznego, oraz że gdy jest to prawdą, trzeba będzie wziąć tę sytuację pod uwagę, aby prawidłowo oszacować wymaganą długość linkera. Z tych reszt, których pozycje są dobrze określone, wybiera się dwie reszty, które w sekwencji

184 424 znajdują się blisko końców łańcucha, i odległości między ich węglami c-alfa używa się do obliczenia przybliżonej długości linkera między nimi. Stosując długość przybliżoną jako przewodnik, wybiera się następnie linkery z zakresem liczby reszt (obliczonych przy użyciu 2 do 3,8 a na resztę). Linkery te mogą się składać z sekwencji oryginalnej, skróconej lub wydłużonej według potrzeby, i gdy jest wydłużony, można wybrać reszty dodatkowe jako elastyczne i hydrofilowe jak opisano powyżej; lub ewentualnie sekwencję oryginalną można podstawić do użycia szeregów linkerów, przy czym jednym przykładem jest kaseta Gly-GlyGly-Ser (SEQ ID żo: 12) wspomniana wyżej; lub ewentualnie można stosować połączenie sekwencji oryginalnej i nowej sekwencji, posiadającej odpowiednią długość całkowitą.

Określanie końców aminowego i karboksylowego R, i R2.

Sekwencje R, i R2, umożliwiające fałdowanie stanów biologicznie aktywnych, można wytworzyć przez odpowiednią selekcję pozycji rozpoczynającej (koniec aminowy) i kończącej (koniec karboksylowy) z wnętrza oryginalnego łańcucha polipeptydu, podczas stosowania sekwencji linkerowej L2 jak opisano powyżej. Końce aminowe i karboksylowe wybiera się z wnętrza wspólnego obszaru sekwencji, przytaczanego jako region punktu przerwania, przy użyciu linii postępowania opisanych powyżej. W ten sposób tworzy się nową sekwencję aminokwasową, przez wybranie końców aminowych i karboksylowych z wnętrza tego samego regionu punktu przerwania. W wielu przypadkach wybór nowych końców będzie taki, że oryginalna pozycja końca karboksylowego bezpośrednio poprzedza koniec aminowy. Jednakże fachowcy poznają, że wybór końców gdziekolwiek we wnętrzu regionu, może działać, oraz że będzie to skutecznie prowadzić albo do delecji, albo addycji do części aminowych lub karboksylowych nowej sekwencji.

Generalną zasadą biologii molekularnej jest to, że βieowsznraędowa sekwencja aminokwasowa białka narzuca fałdowanie do struktury trójwymiarowej koniecznej do ekspresji jego funkcji biologicznej. Fachowcy znają metody otrzymywania i interpretacji informacji o strukturze trójwymiarowej przy użyciu dyfrakcji rentgenowskiej pojedynczych kryształów białka, czy spektroskopii jądrowego rezonansu magnetycznego roztworów białka. Przykłady informacji o strukturze, które są niezbędne do identyfikacji regionów punktu przerwania, obejmują położenie i typ struktury drugorzędowej białka (alfa i 3-10 helis, równoległe i przeciwrównoległe płaszczyzny beta, i odwrócenia i skręty łańcucha oraz pętle; Kabsch i Sander, Biopolymers 22: 2377-2637, 1983), stopień ekspozycji na rozpuszczalnik reszt amiżokwasownch, rozciągłość i typ interakcji reszt z innymi (Chothia, Ann.Rev.Biochem. 33: 337-372, 1984) oraz statyczne i dynamiczne rozmieszczenie konformacji wzdłuż łańcucha polipeptydowego (Alber i Mathews, Methods Enzymmi. 134: 311-333, 1987). W niektórych wypadkach znana jest dodatkowa informacja o ekspozycji reszt na rozpuszczalnik; przykładem jest miejsce przyłączenia potranslacyjnego węglowodoru, które jest z konieczności na powierzchni białka. Gdy doświadczalna informacja o strukturze jest niedostępna lub nie jest możliwa do uzyskania, dostępne są także metody analizy pierwszorzędowej sekwencji aminokwasowej, w celu uczynienia założeń trzeciorzędowej i drugorzędowej struktury białka, dostępność dla rozpuszczalnika i występowanie skrętów i pętli. Niekiedy stosuje się także metody empirycznego określania ekspozycji powierzchniowej, gdy bezpośrednie metody strukturalne nie są wykonalne; przykładowo, stosując identyfikację miejsc przecięcia łańcucha po ograniczonej proteolizie, w celu wywnioskowania ekspozycji powierzchniowej (Gentile i Sa^atere, Qur.J.BiocCem. 218: 603-621, 1993). Tak więc stosując metody albo pochodzące z doświadczeń albo oparte na przewidywaniach (np. Srinivisan i Rose, Proteins: Struci., Funct. & Genetics, 22: 81-99, 1993) bada się pierwotną sekwencję aminokwasową, aby sklasyfikować regiony według tego, czy są one czy też nie są integralne wobec utrzymania struktury drugorzędowej i trzeciorzędowej. Wystąpienie sekwencji wewnątrz regionów, o których wiadomo, że są związane z okresową strukturą drugorzędową (alfa i helisy 3-10, równoległe i przeyiwoówżoiegłe płaszczyzny beta) są regionami; których powinno się unikać. Podobnie, regiony sekwencji αmiżokwrsowej, w których obserwuje się lub przewiduje występowanie niskiego stopnia ekspozycji na rozpuszczalnik, są bardziej prawdopodobnie częścią tak zwanego jądra hydrofobowego białka i także powinno się ich unikać przy wyborze końców aminowych i karboksylowych. Przeciwnie, te regiony, o których wiadomo, lub przewiduje się, że

184 424 są w skrętach powierzchniowych lub pętlach, a zwłaszcza te regiony, o których wiadomo, że nie są wymagane do aktywności biologicznej, są zalecanymi miejscami do umieszczenia końców łańcucha polipeptydowego. Nieprzerwana rozciągłość sekwencji aminokwasowej, którą się zaleca w oparciu o powyższe kryteria, przytacza się jako region punktu przerwania.

Niekowalcecyjnc wieloczynnościowe krwiotwórcze czynniki wzrostu.

Alternatywną metodą łączenia dwóch krwiotwórczych czynników wzrostu jest oddziaływanie eiekowalcncyjne. Takie skompleksowane białka można opisać jednym z wzorów:

R1-C1 + R2-C2; lub C1-R1 + C2-R2; C1-R1 + R2-C2; lub Cą-IR + R2-C2.

R1 i R2 są takie jak określono powyżej. Domeny Cji C2 są albo identycznymi albo nie identycznymi strukturami chemicznymi, zwykle białkowymi, które mogą tworzyć niekowalentne specyficzne połączenia. Kompleksy między C1 i C2 dają w wyniku stosunek stechiometryczny jeden do jednego między IR i R2 dla każdego kompleksu. Przykładami domen, które asocjują są domeny „leucynowego zamka błyskawicznego” czynników traeskrypcyjnych, domeny dimeryzacji represorów transkrypcji bakteryjnej oraz stałe domeny immunoglobulin. Wiązania kowalencyjne łączą, odpowiednio R1 i C oraz R2 i C2. Jak wskazano we wzorze, domeny C1 C2 mogą być obecne albo na końcu N albo na końcu C ich odpowiadającego krwiotwórczego czynnika wzrostu (R). Te domeny multimeryzacyjne (C1 i C2) obejmują pochodzące z rodziny białek bZIP (Abel i in., Nature 341: 24-25, 1989; Landshulz i in., Science 240: 1759-1764, 1988; Pu i in., Nuc.Acid Res. 21: 4348-4355, 1993; Kozarides i in., Nature 336: 646=651, 1988), a także domeny multimeryzacyjne rodziny białek heliks-pętlaheliks (Abel i in., Nature 341: 24-25, -484; Murre i in., Cell 56: 777-783, 1989; Tapscott i in., Science 242: 405-4111 Fisher i in., Genes & Dev. 5: 2342-2552, ^O.

Zalecanymi agonistami wieloczynnościowych receptorów krwiotwórczych według niniejszego wynalazku są czynniki stymulujące kolonię, dimeryzowane dzięki właściwości włączania jako translacyjni wieloczynnościowi agoniści z domenami dimeryzacyjnymi leucynowego zamka błyskawicznego białek rodziny bZIP Fos i Jun. Domena leucynowego zamka błyskawicznego Jun jest zdolna do interakcji z domenami identycznymi. Z drugiej strony, domena leucynowego zamka błyskawicznego Fos oddziaływuje z domeną leucynowego zamka błyskawicznego Jun, lecz nie oddziaływuje z domenami leucynowego zamka błyskawicznego Fos. Mieszaniny Fos i Jun dają przede wszystkim tworzenie się heterodimerów Fos-Jun. Zatem, po połączeniu z czynnikami stymulującymi kolonię, domeny Jun można użyć do prowadzenia tworzenia się albo homo- albo heterodimerów. Korzystne tworzenie się heterodimerów można uzyskać, jeśli jednego z partnerów czynnika stymulującego kolonię utworzono, aby posiadał domenę leucynowego zamka błyskawicznego Jun, podczas gdy innego buduje się, aby posiadał zamek błyskawiczny Fos.

Można także dodać dodatkowe sekwencje peptydowe, aby ułatwić oczyszczanie lub identyfikację agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynościowych (np. poli-His). Można także dodać peptyd o wysokiej antygcniczeościl który byłby zdolny do szybkiego oznaczenia i łatwego oczyszczenia agonisty krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych za pomocą specyficznego przeciwciała monoklonalnego.

„Zmutowana sekwencja aminokwasowa”, „zmutowane białko”, „zmienione białko”, „muteina” lub „zmutowany polipeptyd” odnoszą się do polipeptydu, posiadającego sekwencję aminokwasowa, która zmienia się z sekwencji matywnej, z powodu delecji aminokwasowych, substytucji, lub jednego i drugiego, lub jest kodowana przez sekwencję nukleotydową, będącą w zamiarze odmianą w stosunku do sekwencji natywnej. „Sekwencja natywna” odnosi się do sekwencji aminokwasowej lub kwasu nukleinowego, która jest identyczna z postacią dzikiego typu lub natywna genu lub białka. Krwiotwórcze czynniki wzrostu można scharakteryzować przez ich zdolność do stymulowania tworzenia kolonii, przez ludzkie krwiotwórcze komórki rodzicielskie. Tworzone kolonie obejmują erytroidy, granulocyty, megakariocyty, makrofagi granulocytowe i ich mieszaniny. Wiele z krwiotwórczych czynników wzrostu przejawiały zdolność do przywracania funkcji szpiku kostnego i populacji komórek w krwi obwodowej do poziomu terapeutycznie korzystnego, w badaniach przeprowadzanych początkowo u naczelnych i potem u ludzi. Wiele albo wszystkie z tych aktywności biologicznych krwiotwórczych czynników wzrostu, obejmują transdukcję sygnału i wiązanie z receptorem

184 424 o wysokim powinowactwie. Agoniści krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych według i niniejszego wynalazku mogą wykazywać użyteczne właściwości, takie jak posiadanie podobnej lub większej aktywności biologicznej w porównaniu z pojedynczym czynnikiem, lub posiadanie polepszonego okresu półtrwania, albo mniejsze niepożądane skutki uboczne, albo połączenie tych właściwości.

Agoniści krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych, posiadający małą lub brak aktywności agonistyczneU mogą być użyteczni jako antagoniści, jako antygeny przy produkcji przeciwciał do użytku w immunologii czy immunoterapii, jako sondy genetyczne lub jako produkty pośrednie stosowane do konstruowania innych użytecznych mutein h.IL-3.

Aktywność biologiczną białek agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych według niniejszego wynalazku można określić przez syntezę DNA w liniach komórkowych zależnych od czynnika lub przez liczenie jednostek, tworzących kolonię w oznaczeniu in vitro szpiku kostnego.

Agoniści krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych według niniejszego wynalazku mogą posiadać polepszony profil terapeutyczny w porównaniu z działającymi pojedynczo agonistami krwiotwórczymi. Przykładowo, niektórzy agoniści krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych według niniejszego wynalazku mogą posiadać podoba lub silniejszą aktywność czynnika wzrostu w stosunku do innych agonistów krwiotwórczych, nie posiadając podobnych lub odpowiednio większych skutków ubocznych.

Niniejszy wynalazek obejmuje także sekwencje DNA, które kodują białka agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych, sekwencje DNA, które są zasadniczo podobne i pełnią zasadniczo tę samą funkcję oraz sekwencje DNA, które różnią się od DNA kodujących agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych według wynalazku tylko z powodu degeneracji kodu genetycznego. RinieUpzy wynalazek obejmuje także oligonukleatydows produkty pośrednie stosowane do konstruowania zmutowanych DNA i polipeptydów kodowanych przez te oligone0lsotydy.

Techniki inżynierii genetycznej obecnie standardowe w tej dziedzinie (opis patentowy Stanów Zjednoczonych 4 935 233 oraz Sambrook i in., „Molecular Cloning a Laboratory Manual” Cold Spring Harbor Laboratory, 1989) można stosować w konstruowaniu sekwencji DNA według niniejszego wynalazku. Jedną taką metodą, jest kaseta mutagenezy (Wells i in., Gene 34: 315-329, 1985), w której część sekwencji kodującej w plazmidzie wymienia się na syntetyczny oligonukleotyd, który koduje żądane substytucje amino0wapows w części genu między dwoma miejscami restrykcji.

Można wytworzyć pary komplementarnych syntetycznych oligonukleotydów, kodujących żądany gen i hybrydyzować jeden z drugim. Sekwencja DNA oligonukleotydu będzie kodować sekwencję aminokwasową żądanego genu z wyjątkiem tych podstawionych i/lub deletowanych z sekwencji.

Plazmid DNA można traktować wybraną endanukleazą restrykcyjną, potem poddać ligacji z hybrydyzowanymi oligonu0leotydami. Połączoną mieszaninę można użyć do transformowania kompetentnych komórek JM 101, w celu uodpornienia na odpowiedni antybiotyk. Pojedyncze kolonie można zebrać i plazmidy przebadać za pomocą analizy restrykcji i/lub sekwencjonowania DNA, aby zidentyfikować plazmidy z żądanymi genami.

Kloning sekwencji DNA nowych agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych, z co najmniej jedną z sekwencja DNA innego czynnika stymulującego kolonię, można uzyskać przez stosowanie pośrednich wektorów. Alternatywnie, jeden gen można klonować bezpośrednio do wektora, zawierającego inny gen. Można użyć linkerów i adapterów do łączenia sekwencji DNA, jak również wymiany utraconych sekwencji, gdzie miejsce restrykcji było wewnętrzne w stosunku do interesującego regionu. W ten sposób materiał genetyczny (DNA), kodujący jeden polipeptyd, linker peptydowy i inny polipeptyd, wtrąca się do odpowiedniego wektora ekspresji, który ptopujs się do transformowania komórek bakterii, drożdży, owadów lub ssaków. Transformowany organizm hoduje się i białko izoluje standardowymi technikami. Otrzymany produkt jest zatem nowym białkiem, które posiada czynnik stymulujący kolonię połączony przez region linkerowy z drugim czynnikiem stymulującym kolonię.

184 424

Inny aspekt niniejszego wynalazku dotyczy wektorów DNA plazmidów do użytku w ekspresji tych nowych agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych. Wektory te zawierają nowe sekwencje DNA opisane powyżej, które kodują nowe polipeptydy według wynalazku. Odpowiednie wektory, które mogą transformować drobnoustroje, umożliwiające ekspresję agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych, obejmują wektory ekspresji, zawierające sekwencje nukleotydowe, kodujące agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych połączonych z regulatorowymi sekwencjami transkrypcyjnymi lub translacyjnymi, które wybiera się zgodnie z użytymi komórkami gospodarza.

Wektory obejmujące modyfikowane sekwencje, jakie opisano powyżej, wchodzą w zakres niniejszego wynalazku i są użyteczne w wytwarzaniu polipeptydów agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych. Wektor użyty w sposobie także zawiera wybrane sekwencje regulatorowe w operacyjnym związku z sekwencjami, kodującymi DNA według wynalazku i które umożliwiają kierowanie ich replikacją i ekspresją w wybranych komórkach gospodarza.

Jako inny aspekt niniejszego wynalazku, dostarcza się sposób wytwarzania nowych agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych. Sposób według niniejszego wynalazku obejmuje hodowanie odpowiednich komórek lub linii komórkowej, którą transformowano wektorem, zawierającym sekwencję kodującą, w celu ekspresji nowego agonisty krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych. Odpowiednimi komórkami lub liniami komórkowymi mogą być komórki bakteryjne. Przykładowo, różne szczepy E. coli są dobrze znane jako komórki gospodarza w dziedzinie biotechnologii. Przykłady takich szczepów obejmują szczepy E. coli JM101 (Yanisch-Perron i in., Gene 33: 103-119, 1985) oraz MON105 Obukowicz i in., Applied Environmental Microbiology 58: 151101523, 192). Niniejszy wynalazek obejmuje także białka agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych, wykorzystujące chromosomalny wektor ekspresji dla E. coli oparty o bakteriofaga Mu (Wemberg i in., Gene 126: 25-33, 1993). W tym sposobie można także stosować różne szczepy B.subtilis. Wiele szczepów komórek drożdży znanych fachowcom, jest także dostępnych jako komórki gospodarza do ekspresji polipeptydów według niniejszego wynalazku. Gdy ekspresja zachodzi w cytoplazmie E. coli, gen, kodujący agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych można także konstruować tak, że na i końcu 5’ genu dodaje się kodony, kodujące Met'2-Ala'1- lub Met- na końcu N białka. Na końce N białka wytworzone w cytoplazmie E. coli ma wpływ obróbka potranslacyjna aminopeptydazą metioninową (Ben Bassat i in., J.Bac. 169: 751-757, 1987) i prawdopodobnie innymi peptydazami tak, że w trakcie ekspresji metiona jest odcinana od końca N. Agoniści krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych według niniejszego wynalazku mogą obejmować polipeptydy agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych, posiadające Met'1 Ala' lub Met'2-Ala'1 na końcu N. Ekpresja tych zmutowanych agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych może także zachodzić w E. coli przez łączenie peptydu sygnałowego sekrecji, z końcem N. Ten peptyd sygnałowy odszczepia się od polipeptydu jako część procesu sekrecji.

Odpowiednie do użytku w niniejszeym wynalazku są także komórki ssaków, takie jak komórki jajników chomików chińskich (CHO). Ogólne metody ekspresji obcych genów w komórkach ssaków podano u RJ.Kaufman, 1987, Genetic Engineering, Principles and Methods, tom 9, J.K.Setlow, wydawca, Plenum Press, Nowy Jork. Montuje się wektor ekspresji, w którym silny primer zdolny do działania w komórkach ssaków, kieruje transkrypcją eukariotycznego regionu kodującego peptydu sygnałowego sekrecji, który jest translacyjnie połączony z regionem kodującym agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych. Przykładowo, można użyć plazmidy, takie jak pcDNA I/Neo, pRc/RSV i pRc/CMV (otrzymywane od Invitrogen Corp. San Diego, California). Eukariotyczny region kodujący peptydu sygnałowego sekrecji może być z samego genu lub z innego wydzielanego białka ssaka (M.L.Bayne, Proc.Natl.Acad. Sci.USA 84: 2638-2642, 1987). Po zmontowaniu wektora, zawierającego gen, DNA wektora transfekuje się do komórek ssaka. Takimi komórkami mogą być np. COS7, HeLA, BHK, CHO lub linie L myszy. Komórki można hodować np. W pożywkach DMEM (JRH Scentific). Polipeptyd wydzielany do pożywek można odzy184 424 skiwać standardowymi metodami po krótkotrwałej ekspresji przez 24-72 godziny po transfekcji komórek albo po ustaleniu stałych linii komórkowych po selekcji pod względem oporności na antybiotyk. Selekcja odpowiednich ssaczych komórek gospodarza i metody transformacji, hodowli, powielenia, skriningu i wytworzenia produktu oraz oczyszczania, są znane w tej dziedzinie. Patrz np. Gething i Sambrook, Nature, 293: 620-625, (1981) lub alternatywnie Kaufman i in., Mol.Cell.Biol. 5 (7): 1750-1759, (1985), albo Howley i in., opis patentowy US nr 4 419 446. Inną i odpowiednią linią komórek ssaka jest linia komórkowa COS-1 małpy. Podobnie użyteczną linią komórek ssaka jest linia komórkowa CV-1.

Jeśli trzeba, jako komórki gospodarza w sposobie według niniejszego wynalazku można wykorzystać komórki owadzie. Patrz np. Miller i in., Genetic Engineering, 8: 277-298 (Plenum Press 1986) i odnośniki tu cytowane. Dodatkowo, generalne metody ekspresji obcych genów w komórkach owadzich przy użyciu wektorów Bakulowirusa, opisano w: M.D.Summers i G.E.Smith, 1987) - a Manual of methods gor Baculowirus vectors and insects cell culture procedures. Teksas Agricultural Experiment Station Bulletin nr 1555. Konstruuje się wektor ekspresji, zawierający wektor transferowy bakulowirusa, w którym silny primer bakulowirusa (taki jak primer wielościenny) napędza transkrypcję eukariotycznego regionu kodującego peptyd sygnałowy sekrecji, który jest translacyjnie połączony z regionem kodującym polipeptyd agonisty krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych. Przykładowo można użyć plazmid pVL1392 (otrzymany od Invitrogen Corp., San Diego, Kalifornia). Po zmonowaniu wektora, niosącego gen, kodujący polipeptyd agonisty krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych, kotransfekuje się dwa mikrogramy tego DNA z jednym mikrogramem DNA bakulowirusa (patrz Summers i Smith, 1987) do komórek owada, szczep SF9. Czysty rekombinowany bakulowirus, niosący agonistę krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych, stosuje się do zakażenia hodowanych komórek, np. W pożywce Excell 401 wolnej od surowicy (JHR Biosciences, Lenexa, Kansas). Agonistę krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych wydzielanego do pożywki można odzyskać standardowymi metodami biochemicznymi. Supernatanty z komórek ssaków lub owadów, w których zachodzi ekspresja białka agonisty krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych, można najpierw zatężyć, przy użyciu każdego z wielu urządzeń komercyjnych.

Agoniści krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych według niniejszego wynalazku mogą być użyteczni w leczeniu chorób, charakteryzujących się obniżonym poziomem komórek szpikowych, erytroidowych, limfoidowych lub megakariocytów układu krwiotwórczego, lub ich połączeń. Dodatkowo, można je stosować do aktywacji dojrzałych komórek szpikowych i/lub limfoidowych. Wśród stanów chorobowych podatnych na leczenie polipeptydami według niniejszego wynalazku jest leukopenia, zmniejszenie liczby krążących leukocytów (krwinki białe) w krwi obwodowej. Leukopenię może wywołać ekspozycja na pewne wirusy lub na promieniowanie. Często jest skutkiem ubocznym różnych form terapii raka, np. ekspozycji na leki chemioterapeutyczne, promieniowanie oraz infekcji i krwotoków. Traktowanie terapeutyczne leukopenii tymi agonistami krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych według niniejszego wynalazku może pomóc uniknąć niepożądanych skutków ubocznych powodowanych przez obecnie dostępne leki.

Agoniści krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych według niniejszego wynalazku mogą być użyteczni w leczeniu neutropenii i np. W leczeniu takich stanów chorobowych jak anemia aplastyczna, neutropenia okresowa, neutropenia samoistna, zespół Chediak-Higashiego, układowy toczeń rumieniowaty (SLE), białaczka, zespół mielodysplastyczny i zwłóknienie szpiku.

Agonista krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych według niniejszego wynalazku może być użyteczny w leczeniu lub zapobieganiu małopłytkowości. Aktualnie jednyną terapią dla małopłytkowości jest transfuzja płytek krwi, która jest kosztowna i niesie znaczące niebezpieczeństwo infekcji (HIV, HBV), i alloimmunizacji). Agonista krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych może zaspokoić lub zmniejszyć potrzebę transfuzji płytek krwi. Poważna małopłytkowość może wynikać z defektów genetycznych, takich jak zespoły anemii Fancomego, Wiscott-Aldricha lub May Hegglin. Nabyta małopłytkowość może wynikać z przeciwciał własnych lub obcych, jak plamica małopłytkowa immunologiczna, układo42

184 424 wy toczeń rumieniowaty, anemia hemolityczna, czy niezgodność matka-płód. Ponadto powiększenie śledziony, rozsiane skrzepliny wewnątrznaczyniowe, choroba Moschowitza, infekcja lub protezowa zastawka serca mogą być powodem małopłytkowości. Poważna małopłytkowość może także wynikać z chemoterapii i/lub terapii napromieniowaniem lub raka. MałopłytOowość może także wynikać z inwazji szpiku przez raka, chłoniaka, białaczki lub zwłóknienia.

Agoniści krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych według mniejszego wynalazku mogą być użyteczni w mobilizacji krwiotwórczych komórek rodzicielskich i komórek macierzystych w krwi obwodowej. Komórki rodzicielskie z krwi obwodowej, jak się okazało, są skuteczne przy przywracaniu pacjentów w utrwalaniu autologicznega przeszczepu szpiku. Krwiotwórcze czynniki wzrostu, włączając G-CSF i GM-CSF, jak się okazało, zwiększają liczbę krążących komórek rodzicielskich i komórek macierzystych w krwi obwodowej. Uprościło to procedurę zbierania komórek macierzystych z krwi obwodowej i dramatycznie zmniejszyło koszt procedury przez zmniejszenie wymaganej ilości płynu (pheresis). Agonista krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych może być użyteczny w mobilizacji komórek macierzystych i dalej wzmacnianiu skuteczności przeszczepu obwodowych komórek macierzystych.

Agoniści krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych według niniejszego wynalazku mogą być także użyteczni w ekspansji ex vivo krwiotwórczych komórek rodzicielskich i komórek macierzystych. Czynniki stymulujące kolonię (CSF), takie jak hIL-3, podawano pojedynczo, podawano równocześnie z innymi CSF lub w połączeniu z przeszczepami szpiku kostnego po chemioterapii o wysokiej dawce, w leczeniu neutropenii i małopłytkowości, które często są wynikiem takiego leczenia. Jednakże można nie wyeliminować całkowicie okresu ciężkiej neutropenii i małopłytkowości. Szczep szpikowy, składający się z monocytów (makrofagów), granulocytów (włączając neutrofile) i megakariocytów, jest krytyczny w zapobieganiu infekcjom i krwawieniu, co może ocalić życie. Neutropenia i małopłytkowość może być także wynikiem choroby, schorzenia genetycznego, leków, toksyn, promieniowania i wielu postępowań leczniczych, takich jak konwencjonalna terapia onkologiczna.

Do leczenia tej populacji pacjentów stosowano przeszczepy szpiku kostnego. Jednakże wiele problemów wiąże się z użyciem szpiku kostnego do przywracania upośledzonego układu krwiotwórczego, włączając następujące: I) liczba komórek macierzystych w szpiku kostnym, śledzionie lub krwi obwodowej jest ograniczona, 2) choroba odrzucenia przeszczepu przez gospodarza, 3) odrzucenie przeszczepu i 4) możliwe zanieczyszczenie komórkami guza. Komórki macierzyste tworzą bardzo mały procent komórek jądrzastych w szpiku kostnym, śledzionie i krwi obwodowej. Oczywiste jest, że istnieje odpowiedź na dawkę tak, że większa liczba komórek macierzystych będzie wzmacniać odzyskanie krwiotwórczości. Zatem, ekspansja in vitro komórek macierzystych powinna pomóc w odzyskaniu krwiotwórczości i przeżyciu pacjenta. Szpik kostny od dawcy allogenicznego stosowano do zapewnienia szpiku kostnego do przeszczepu. Jednakże choroba odrzucenia przeszczepu przez gospodarza i odrzucenie przeszczepu ograniczają przeszczepianie szpiku kostnego nawet u biorców, będących rodzeństwem dawców, z dopasowanym układem HLA. Alternatywne do przeszczepów szpiku kostnego allogenicznego są przeszczepy aetologiczne. W autologicznych przeszczepach szpiku kostnego zbiera się własny szpik od niektórych pacjentów przed terapią niszczącą szpik, np. chemoterapią w wysokiej dawce, i przeszczepia się go z powrotem pacjentowi. Autologiczne przeszczepy eliminują ryzyko choroby odrzucenia przeszczepu przez gospodarza i odrzucenia przeszczepu. Jednakże autologiczne przeszczepy szpiku kostnego wciąż wykazują kłopoty w związku z ograniczoną liczbą komórek macierzystych w szpiku i możliwym zanieczyszczeniem komórkami guza. Ograniczoną liczbę komórek macierzystych można przezwyciężyć przez ekspansję ex vivo komórek macierzystych. Poza tym, komórki macierzyste można specyficznie izolować, na podstawie obecności specyficznych antygenów powierzchniowych, takich jak CD34+, w celu zmniejszenia zanieczyszczenia komórkami guzowymi przeszczepu szpiku.

Następujące opisy patentowe zawierają dodatkowe szczegóły dotyczące oddzielania komórek macierzystych, komórek CD34+, hodowli komórek z czynnikami krwiotwórczymi,

184 424 użycia komórek do leczenia pacjentów ze schorzeniami krwiotwórczymi i użycia czynników krwiotwórczych w ekspansji komórek i terapii genowej.

199 620 odnosi się do kompozycji, zawierających ludzkie krwiotwórcze komórki macierzyste, dostarczone przez oddzielenie komórek macierzystych od komórek poświęconych.

199 942 opisuje metodę autologicznego przeszczepiania komórek krwiotwórczych, obejmującą: (1) otrzymywanie krwiotwórczych komórek rodzicielskich od pacjenta; (2) ekspansję ex vivo komórek za pomocą czynnika wzrostu wybranego z grupy, składającej się z IL-3, liganda flt3, liganda c-kit, GM-CsF, białka połączonego IL-1, GM-CSF/IL-3 i ich połączeń; (3) podanie preparatu komórkowego pacjentowi.

240 836 odnosi się do separatora komórek, który obejmuje aparat do automatycznej kontroli procesu oddzielania komórek.

WO 91/16116 opisuje urządzenia i metody do selektywnej izolacji i separacji docelowych komórek z mieszaniny komórkowej.

WO 91/18972 opisuje metody hodowli in vitro szpiku kostnego, przez inkubację zawiesiny komórek szpiku kostnego, przy użyciu binreaktnra z pustymi włóknami.

WO 92/18613 odnosi się do procesu utrzymywania i rozprzestrzeniania komórek szpiku kostnego w hodowli, zawierającej specyficzne mieszaniny cytokin, do użytku w przeszczepach.

WO 93/08268 opisuje metodę selektywnej ekspansji komórek macierzystych, obejmującą etapy (a) oddzielania komórek macierzystych CD34+ od innych komórek i (b) inkubacji oddzielonych komórek w pożywce selektywnej, tak, że komórki macierzyste ulegają selektywnej ekspansji.

WO 93/18136 opisuje proces utranmn^ważir in vitro komórek ssaka, pochodzących z krwi obwodowej.

WO 93/18648 odnosi się do kompozycji, zawierającej ludzkie komórki prekurosorowe neutrofili o wysokiej zawartości mieloblastów i promielocytów do leczenia genetycznej i nabytej neutropenii.

WO 94/08039 opisuje metodę wzbogacania w ludzkie krwiotwórcze komórki macierzyste przez selekcję pod względem komórek, które wykazują ekspresję białka c-kit.

WO 94/11493 opisuje populację komórek macierzystych, które są CD34+ i małych rozmiarów, które wyizolowano przy użyciu metody elutriacji w liczniku przepływowym.

WO 94/27698 odnosi się do metody łączenia seperacji z powinowactwem immunologicznym i separacji wirówkowej z przepływem ciągłym do selektywnej separacji populacji jądrzastych komórek heterogenicznych z mieszaniny komórek heterogenicznych.

WO 94/23848 opisuje aparat rozdzielający komórek do zbierania i manipulowania komórkami docelowymi.

Długoterminową hodowlę bardzo bogatą w prekursory CD34+ kowiotwórczncC komórek rodzicielskich z ludzkiego szpiku kostnego w hodowlach, zawierających IL-1a, IL-3, IL-6 lub GM-CSF, omawia się u Brandta i in., J.Clin.Invest. 86: 932-941, (1990).

Jeden aspekt niniejszego wynalazku dotyczy sposobu selektywnej ekspansji komórek macierzystych. Określenie „komórka macierzysta” odnosi się do zdolnych do wielokierunkowego różnicowania się krwiotwórczych komórek macierzystych, jak również wczesnych prekursorów i komórek rodzicielskich, które można izolować ze szpiku kostnego, śledziony lub krwi obwodowej. Określenie „ekspansja” odnosi się do różnicowania i proliferacji komórek. Niniejszy wynalazek zapewnia sposób selektywnej ekspansji ex-vivo komórek macierzystych, obejmujący etapy: (a) oddzielania komórek macierzystych od innych komórek, (b) hodowli wymienionych oddzielonych komórek macierzystych za pomocą wybiórczych pożywek, które zawierają białko(a) agonisty krwiotwórczncC receptorów wieloczynnościowych i (c) zebrania wymienionych komórek macierzystych. Komórki macierzyste, jak również zaangażowane komórki rodzicielskie, które będą neutrofilami, erytrocytami, płytkami itd., można odróżnić od większości innych komórek przez obecność lub nieobecność poszczególnych markerowych antygenów rodzicielskich, takich jak CD34, które są obecne na powierzchni tych komórek i/lub przez charakterystyki morfologiczne. Fenotyp dla bardzo wzbogaconej frakcji ludzkich komórek macierzystych określa się jako CD34+, Thy-1 i lin- lecz należy rozumieć, że niniejszy wynalazek nie ogranicza się do ekspansji tej populacji komórek macierzystych. Wzboga44

184 424 coną w CD34+ frakcję ludzkich komórek macierzystych można oddzielić wieloma opisywanymi metodami, włączając kolumny powinowactwa lub paciorki (beads), paciorki magnetyczne lub cytometrię przepływową przy użyciu przeciwciał skierowanych na antygeny powierzchniowe, takie jak CD34+. Dalej, do wzbogacenia w krwiotwórczych komórek rodzicielskich można użyć metod fizycznej separacji, takich jak elutriacji z licznikiem przepływu. Komórki rodzicielskie CD34+ są heterogeniczne i można je dzielić na kilka sub-populacji, charakteryzujących się obecnością lub nieobecnością koekspresji różnych rodów związanych z cząsteczkami związanymi z powierzchnią komórki. Większość niedojrzałych komórek rodzicielskich nie wykazuje ekspresji żadnych znanych markerów związanych ze szczepem, takich jak HLA-DR lub CD38, lecz mogą one wykazywać ekspresję CD90(thy-1). Inne antygeny powierzchniowe, takie jak CD33, cD38, CD41, CD71, HLA-DR lub c-kit można także stosować do selektywnej izolacji krwiotwórczych komórek rodzicielskich. Oddzielone komórki można inkubować w pożywce selektywnej, w kolbie do hodowli, sterylnym worku lub pustych włóknach. Można wykorzystać różne czynniki stymulacji kolonii, w celu selektywnej ekspansji komórek. Reprezentatywnymi czynnikami, które wykorzystano do ekspansji ex-vivo szpiku kostnego są ligand c-kit, IL-3, G-CSF, GM-CSF, IL-1, IL-6, IL-11, ligand flt-3 lub ich połączenia. Proliferację komórek macierzystych można monitorować przez zliczenie ilości komórek macierzystych i innych komórek standardowymi technikami (np. hemacytometr, CFU, LTCIC) lub cytometrią przepływową przed i po inkubacji.

Doniesiono o kilku metodach ekspansji ex-vivo komórek macierzystych, wykorzystujących wiele metod selekcji i ekspansji przy użyciu czynników stymulacji kolonii, włączając ligand c-kit (Brandt i in., Blood 83: 1507-1514 [1994], McKenna i in., Blood 86: 3413-3420 [1995], IL-3 (Brandt i in., Blood 83: 1507-1514 [1994], Sato i in., Blood 82: 3600-3609 [1993], G-CSF (Sato i in., Blood 82: 3600-3609 [1993], IL-1 (Muench i in., Blood 81: 34633473 [1993], IL-6 (Sato i in., Blood 82: 3600-3609 [1993], IL-11 (Lemoli i in., Exp.Hem. 21: 1668-1672 [193], Sato i in., Blood 82: 3600-3609 [1993], flt-3 (McKenna i in., Blood 86: 3413-3420 [1995], i/lub ich połączenia (Brandt i in., Blood 83: 1507-1514 [1994], Haylock i in., Blood 80: 1405-1412 [1992] , Koller i in., Biotechnology 11: 358-363 [1993], (Lemoli i in., Exp.Hem. 21: 1668-1672 [193], McKenna i in., Blood 86: 3413-3420 [1995], Muench i in., Blood 81: 3463-3473 [1993], Patchen i in., Biotherapy 7: 13-26 [1994], Sato i in., Blood 82: 3600-3609 [1993], Smith i in., Exp.Hem. 21: 870-877 [1993], Steen i in., Stem Cells 12: 214-224 [1994], Tsujino i in., Exp.Hem. 21: 1379-1386 [1993]. Wśród poszczególnych czynników stymulacji kolonii, okazało się, że hIL-3 jest jednym z wywołujących najsilniejszą ekspansję komórek CD34+ we krwi obwodowej (Sato i in., Blood 82: 3600-3609 [1993], Kobayashi i in., Blood 73: 1836-1841 [1989]. Jednakże, żaden pojedynczy czynnik wzrostu nie okazał się tak skuteczny jak połączenie wielu czynników. Niniejszy wynalazek dostarcza sposób ekspansji ex vivo, który wykorzystuje agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych, skuteczniejszych niż czynnik pojedynczy.

Inny aspekt wynalazku dostarcza sposób podtrzymywania i/lub ekspansji krwiotwórczych komórek prekurosorowych, które obejmują zaszczepienie komórek do naczynia hodowlanego, zawierającego pożywkę hodowlaną, kondycjonowaną przez ekspozycję na linię komórkową stromy, tak jak HS-5 (WO 96/02662, Rocklein i Torok-Strob, Blood 85: 9971105, 1995), którą uzupełniono agonistą krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych według niniejszego wynalazku.

Innym projektowanym zastosowaniem klinicznym czynników wzrostu była aktywacja in vitro krwiotwórczych komórek rodzicielskich i komórek macierzystych, do terapii genowej. Z powodu długiego okresu krwiotwórczych komórek rodzicielskich i rozkładu ich komórek potomnych w całym organizmie, krwiotwórcze komórki rodzicielskie są dobrymi kandydatami do transfekcji genowej ex vivo. Aby mieć interesujący gen włączony do genomu krwiotwórczej komórki rodzicielskiej lub komórki macierzystej, trzeba stymulować podział komórkowy i replikację DNA. Cykl krwiotwórczej komórki macierzystej ma bardzo niską częstotliwość, co oznacza, że czynniki wzrostu mogą być użyteczne w pobudzaniu transdukcji genowej, wzmacniając przez to kliniczne perspektywy dla terapii genowej. Potencjalne zastosowania terapii genowej (opis Crystal, Science 270: 404-410 [1995] obejmują: 1) leczenie wielu

184 424 wrodzonych schorzeń metabolicznych i niedoborów odpornościowych (Kay i Woo Trends Genet. 10: 253-257, [1994], 2) schorzeń neurologicznych (Friedmann, Trends Genet. 10: 210-214 [1994], 3) raka (Culver Trends Genet. 10: 174-178 [1994] i 4) chorób infekcyjnych (Gilboa i Smith Trends Genet. 10: 139-144 [1994]).

Istnieje wiele metod, znanych fachowcom, wprowadzania materiału genetycznego do komórki gospodarza. Wiele wektorów, zarówno wirusowych jak i nie wirusowych wykorzystywano do trasferu genów terapeutycznych do komórek pierwotnych. Wektory oparte o wirusy obymująj 1) rekombinowanego reterowtrusa z brakiem replikacji (Tcoris-Lawrie i Temin, Curz.Opin.Gbnet.Dev. 3: 102-109 [1993], Boris-Lawrie i Temin, Annal. New York Acad.Sci. 716: 59-71 [1994], Miller, Current Top. Microbiol.Immunol. 158: 1-24 [1992]) oraz rekombinowanego adbnowizusa z brakiem replikacji (Berkner BioTbchniqubs 6:616-629 [1988], Berkner, Current Top. Microbiol.Immunol. 158: 39-66 [1992]). Wektory niewirusowe obejmują kompleksy białko/DNA (Cristiano i in., PNAS USA 90: 2122-2126 [1993], Curiel i in., PNAS uSa 88: 8850-8854 [1991], Curiel i in., Annal. New York Acad.Sci.716: 36-58 [1994], elektroporację i dostarczanie, w którym pośredniczą liposomy, takie jak liposomy kationowe (Farhood i in., Annal. New York Acad.Sci.716: 23-35 [1994]).

Niniejszy wynalazek dotyczy ulepszenia istniejących metod ekspansji komórek krwiotwórczych, które wprowadza nowy materiał genetyczny, w którym zapewnia się sposoby, wykorzystujące białka agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych, poprawiające aktywność biologiczną, włączając aktywność nie uwidocznioną przez pojedynczy czynnik stymulacji kolonii.

Wiele leków może powodować supresję szpiku kostnego lub niedobory krwiotwórcze. Przykładami takich leków są AZT, DDI, środki alkalizujące i antymetabolity stosowane w chemioterapii, antybiotyki, takie jak chloramfenikol, penicylina, gancyklowiryna, daunomycyna i leki sulfonamidowe, fenotiazony, leki uspokajające, takie jak mbprobamat, środki przeciwbólowe, takie jak aminopiryna i dipyron, środki przeciwdrgawkowe, takie jak fenytoina lub karbamazepina, środki przbciwtarczycswe, takie jak pzopylotiouoacyl i metimazol oraz diuretyki. Agoniści krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych według niniejszego wynalazku mogą być użyteczni w zapobieganiu lub leczeniu supresji szpiku kostnego lub niedoborów krwiotwórczych, które często występują u pacjentów leczonych tymi lekami.

Niedobory krwiotwórcze mogą także występować jako wynik infekcji wirusowych, drobnoustrojowych lub pasożytniczych i jako wynik leczenia chorób nerek lub niewydolności nerek np. dializy. Agoniści krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych według niniejszego wynalazku mogą być użyteczni w leczeniu takich niedoborów krwiotwórczych.

Leczenie niedoboru krwiotwórczego może obejmować podawanie pacjentowi kompozycji farmaceutycznej, zawierającej agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych. Agoniści krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych według niniejszego wynalazku mogą być także użyteczni do aktywacji i powibieria krwiotwórczych komórek prekurosorowych przez traktowanie tych komórek in vitro białkami agonisty krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych według niniejszego wynalazku, przed wstrzyknięciem komórek pacjentowi.

Leczenie agonistami krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych według niniejszego wynalazku może mieć także korzystny wpływ na różne niedobory odpornościowe np. limfocytów T i/lub B lub schorzenia odporności np. reumatoidalne zapalenie stawów. Niedobory odporności mogą być wynikiem infekcji wirusowych np. HTLVI, HTLVI, HTLVIII, poważnej ekspozycji na promieniowanie, terapię raka lub wynikiem innego traktowania medycznego. Agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych według niniejszego wynalazku można także stosować pojedynczo lub w połączeniu z innymi czynnikami stymulacji kolonii, w leczeniu innych niedoborów krwinkowych, włączając małopłytkowość (niedobór płytek krwi) lub anemię. Innym zastosowaniem tych nowych polipeptydów jest leczenie in vivo i ex vivo pacjentów odzyskujących zdrowie po przeszczepie szpiku kostnego i w wywoływaniu przeciwciał monoklonalnych i poliklonalnych wytworzonych standardowymi metodami do użytku diagnostycznego lub leczniczego.

Innymi aspektami niniejszego wynalazku są sposoby i kompozycje terapeutyczne do

184 424 leczenia stanów chorobowych przytaczanych powyżej. Takie kompozycje obejmują terapeutycznie skuteczną ilość jednego lub więcej agonisty krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych według niniejszego wynalazku, w mieszaninie z farmaceutycznie dopuszczalnym nośnikiem. Kompozycję te można podawać pozajelitowo, dożylnie albo podskórnie. Przy podawaniu, kompozycja terapeutyczna do użytku w tym wynalazku występuje korzystnie w postaci wolnego od pirogenów, dopuszczalnego do podawania pozajelitowego roztworu wodnego. Preparat takiego roztworu białkowego dopuszczalnego do podawania pozajelitowego, będącego w zależności od pH izotonicznym, stabilnym itp., znany jest fachowcom.

Tryb dawkowania stosowany w sposobie leczenia wyżej opisanych stanów chorobowych, będzie określony przez lekarza leczącego, biorącego pod uwagę różne czynniki, modyfikujące działanie leku, np. stan, ciężar ciała, płeć i dietę pacjenta, ciężkość każdej infekcji, czas podawania i inne czynniki kliniczne. Generalnie tryb dzienny może się zmieniać w zakresie 0,2-150 pg/kg białka agonisty krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych na kilogram ciężaru ciała. Dawkowanie będzie dostosowane do aktywności danego białka agonisty krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych i nie będzie nierozsądne zauważyć, że tryby dawkowania mogą obejmować dawki bardzo niskie, takie jak 0,1 mikrogram i bardzo wysokie, takie jak 1 miligram na kilogram ciężaru ciała na dzień. Dodatkowo, mogą istnieć specyficzne okoliczności, przy których dawkowanie agonisty krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych będzie ustawione jako wyższe lub niższe niż zakres 0,2-150 mikrogramów na kilogram ciężaru ciała. Dotyczy to równoczesnego podawania innych czynników stymulacji kolonii lub odmian IL-3 albo czynników wzrostu; równoczesnego podawania leków chemioterapeutycznych i/lub napromieniania; użycia glikozylowanych białek agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych; oraz różnych spraw związanych z pacjentem, wspomnianych wcześniej w tym dziale. Jak wskazano powyżej, sposób leczenia i kompozycje mogą także obejmować równoczesne podawanie z innymi czynnikami ludzkimi. Niewyłączna lista innych odpowiednich czynników stymulacji kolonii (CSF), cytokin, l^fok^, krwiotowórczych czynników wzrostu oraz ietcrleukie do równoczesnego i kolejnego podawania z polipeptydami według niniejszego wynalazku, obejmuje GM-CSF, G-CSF, ligand c-mpl (znany także jako TPO lub MGDF), M-CSF, erytropoetynę (EPO), IL-1. IL-4, IL-2, IL-3, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, IL-16, LIF, ligand flt3/flk2, czynnik wzrostu komórek B, czynnik różnicowania komórek B i czynnik różnicowania komórek eozynofilowych, oraz czynnik komórek macierzystych (SCF) znany także jako czynnik stali lub ligand c-kit, lub ich połączenia. Dawkowanie cytowane powyżej będzie ustawione tak, aby wyrównać wobec takich dodatkowych składników w kompozycji terapeutycznej. Postęp leczonego pacjenta można monitorować przez okresową ocenę profilu hematologicznego np. różnicowe liczenie komórek i temu podobne.

Materiały i sposoby

Chyba, że zanotowano inaczej, wszystkie substancje chemiczne otrzymano od Sigma Co (St.Louis, MO). Endonukleazy restrykcyjne i ligazę DNA T4 otrzymano od New England Biolabs (Beverly, MA) lub Boehringer Monachium, (Indianapolis, IN).

Transformacja szczepów E. coli

Szczepy E. coli, takie jak DH5a™ (Life Technologies, Gaithersburg, MD) oraz TG1 (Amersham Corp., Arlington Heights, IL) stosuje się do transformacji reakcji ligacji i są one źródłem plazmidowego DNA do trans0ekowaeia komórek ssaków. Szczepy E. coli, takie jak JM101 (Yanisch-Perroe i in., Gene 33: -03--19, 1985) oraz MON105 (Obukowicz i in., Appl.Envir.Micr., 58: 1511-1523, -442), można stosować do ekspresji agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych według niniejszego wynalazku, w przestrzeni cytoplazmatycznej lub periplazmatycznej.

MON105 ATCC#55204: F-, lambda-, IN(rrnD, rrE)L rpoD+, rpoH358

DH5a™: Fi, phi80dlacZdeltaM15, deltaOazZYAargFjUUR deoR, recAL EndA1, hsdR17(rk-, mk+), phoA, supE44lambda-, thi-1, gyrA96, relA1,

TG1: delta(lac-pro), supE, thi-1, hsdD5/F’ (traD36, proA+B, lacIq, lacZdeltaM15)

JM101 ATCC#33876: delta (por lac), supE thi, F’ (traD36, proA+B+, lacIq, lacZdeltaM15)

184 424

Komórki do skutecznego subkloningu DH5a™ nabywa się jako komórki kompetentne i są one gotowe do transformacji przy użyciu protokołu producenta, podczas gdy zarówno szczepy E. coli TG1 jak i MON105 czyni się kompetentnymi do wchłonięcia DNA z użyciem metody CaCl,. Zazwyczaj, 20-50 ml komórek hoduje się w pożywce LB (1% bakto-tryptonu, 0,5% ekstrakt bakto-drożdży, 150 mM NaCl), do gęstości około 1,0 jednostki gęstości optycznej przy 600 nanometrach (OD600) jak zmierzono spektrofotometrem Spectronic Bausha i Lomba (Rochester, NY). Komórki zbiera się przez wirowanie i ponownie zawiesza w jednej piątej objętości hodowli z roztworem CaCl, (50 mM CaCl2, 10 mM Tris-Cl, pH 7,4) i utrzymuje w temperaturze 4°C przez 30 minut. Komórki zbiera się ponownie przez wirowanie i ponownie zawiesza w jednej dziesiątej objętości hodowli z roztworem CaCl, Połączony DNA dodaje się do 0,2 ml tych komórek i próbki utrzymuje się w temperaturze 4°C przez 3060 minut. Temperaturę próbek zmienia się na 42°C przez 2 minuty i dodaje się 1,0 ml LB przed wytrząsaniem próbek w temperaturze 37°C przez jedną godzinę. Komórki z tych próbek rozprasza się na płytkach (pożywka LB plus 1,5%o bakto-agar), zawierających albo ampicylinę (100 mikrogramów/ml) przy selnlnkcji pod względem transformantów opornych na ampicylinę, albo spektynomycynę (75 pg/ml) przy selekcji pod względem transformantów opornych na spektynomycynę. Płytki ineubujn się przez noc w temperaturze 37°C.

Kolonie zbiera się, szczepi do LB plus odpowiedni antybiotyk (100 (pg/ml ampicyliny lub 75 pg/ml spektynomycyny) i hoduje w temperaturze 37°C, wytrząsając.

Sposoby tworzenia genów z nowym końcem N/końcem C

Sposób I. Tworzenie genów z nowym końcem N/końcem C, które zawierają region linkerowy (L2).

Geny z nowym końcem N/końcem C, które zawierają region linkerowy (L2), oddzielający oryginalny koniec C i koniec N, można wytworzyć zasadniczo według metody opisanej przez L.S.Mullinsa i in., J.Am.Chem.Soc. 116: 5529-5533, 1994). Wielokrotne etapy powielania w reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) stosuje się do przearanżowania sekwencji DNA, kodującej pierwotną sekwencję aminokwasową białka. Etapy zilustrowano w fig. 2.

W etapie pierwszym, stosuje się pierwszy zbiór primerowy („nowy start” i „linker start”) do wytworzenia i powielenia, z oryginalnej sekwencji geowej, fragmentu DNA („Fragment Start”), który zawiera sekwencję, kodującą nową część N-terminalną. nowego białka, potem linker (L,), który łączy końce C-terminalny i N-terminalny białka oryginalnego. W etapie drugim stosuje się drugi zbiór primerów („nowy stop” i „linker stop”), aby utworzyć i powielić, z oryginalnej sekwencji genowej, fragment DNA („Fragment Stop”), który koduje taki sam linker jak użyty powyżej, po czym nową część C-terminalną nowego białka. Primery „nowy start” i „nowy stop” zaplanowano tak, aby obejmowały odpowiednie miejsca restrykcji, które pozwalają na kloning nowego genu do plazmidów ekspresji. Typowe warunki PCR oznaczają jeden cykl topienia w temperaturze 95°C przez 2 minuty; 25 cykli denaturaj w temperaturze 94°C przez jedną minutę, hybrydyzację w temperaturze 50°C przez jedną minutę i wydłużanie w temperaturze 72°C przez jedną minutę; plus jeden cykl wydłużania w temperaturze 72°C przez siedem minut. Stosuje się zestaw Perkin Elmer GeneAmp PCR Core Reagents. 100 pl mieszaniny reakcyjnej zawiera 100 pmoli każdego primera i jeden pg DNA matrycowego; oraz 1x bufor PCR, 200 pM dGTP, 200 pM dATP, 200 pM dTTP, 200 pM dCTP, 2,5 jednostki polimerazy Dna AmpliTaq i 2 mM MgCl2. Reakcje PCR przeprowadza się w cyklerze cieplnym Model 480 DNA (Perkin Elmer Corporation, Norwalk, CT).

„Fragment Start” i „Fragment Stop”, które mają sekwencję komplementarną w regionie linkera i sekwencję kodującą dla dwóch aminoewsów po oby stronach linkera, łączy się razem w trzecim etapie PCR, aby wytworzyć gen o pełnej długości, kodujący nowe białko. Fragmenty DNA „Fragment Start” i „Fragment Stop” rozpuszcza się na 1%o żelu TAE, barwi bromkiem etidium i izoluje przy użyciu zestawu Qiaex Gel Sχjraction (Qiagen). Fragmenty te łączy się w równomolowych ilościach, ogrzewa w temperaturze 70°C przez dziesięć minut i powoli ochładza, aby pozwolić na hybrydyzację ich podzielonej sekwencji w „linker start” i „linker stop”. W trzecim etapie PCR, primery „nowy start” i „nowy stop” dodaje się do splecionych fragmentów, aby wytworzyć i powielić gen o pełnej długości z nowym końcem N/końcem C. Typowe warunki PCR oznaczia^jeden cykl topienia w temperaturze 95°C przez

184 424 mmuty ; 55 coI-1 i Seaaeurcuji wtemseraeuese 44°C pzeez eedna 1™™^ , hbbjydya.auię w temperaturze 60°C przez jedną minutę i wydłużanie w temperaturze 72°C przez jedną minutę; plus jeden cykl wydłużania w temperaturze 724C przez siedem minut. Stosuje się zestaw Perkin Elmer GeneAmp PCR Core Reagents. 100 μΐ mieszaniny reakcyjnej zawiera 100 pmoli każdego primera i około 0,5 μg DNA; oraz 1x bufor PCR, 200 μM dGTP, 200 μM dATP, 200 μM dTTP, 200 μM dCTP, 2,5 jednostki palimeraec DNA AmpliTaq i 2 mM MgCĘ. Środowiska reakcji PCR oczyszcza się prze użyciu zestawu Wizard PCR Preps (Promega).

Sposób II. Wytwarzanie genów z nowym końcem N/końcem C bez regionu linOerowego.

Geny genów z nowym końcem N/końcem C bez linkera, łączącego oryginalny koniec N i koniec C można, wylworzyć przy uAyciu d'w(5(^^^ eeapów powielema PCR i ligacj i otwartego końca. Etapy zilustrowano w fig. 3. W etapie pierwszym stosuje się zbiór primerów („nowy start” i „P-bl star”), aby wytworzyć i powielić, z oryginalnej sekwencji genu, fragment DNA („Fragment Start”), który zawiera sekwencję, kodującą nową część N-terminalną nowego białka. W etapie drugim stosuje się drugi zbiór primerów („nowy stop” i „p-bl stop”), aby wytworzyć fragment DNA („Fragment Stop”), który zawiera sekwencję, kodującą nowej części C-terminalnej nowego białka. Primery „nowy start” i „nowy stop” zaplanowano tak, aby zawierały odpowiednie miejsca restrykcji, które pozwalają na klonowanie nowego genu do wektorów ekspresji. Typowe warunki PCR oznaczają: jeden cykl topienia w temperaturze 95°C przez dwie minuty; 25 cykli denaturacj! w temperaturze 94°C przez jedną minutę, hekrydyeację w temperaturze 50°C przez 45 sekund i wydłużanie w temperaturze 72°C przez 45 sekund. Aby emnicjpecć występowanie nawisów (overhangs) stosuje się polimerazę Deep Vent (New England Biolabs) w warunkach zalecanych przez producenta. Primery „P-bl start” i „P-bl stop” t<o^]^f^ar^^ι^e^ siię na końcu 5’, aby pomóc w ligaj i otwartego końca „Fragmentu Start” i „Fragmentu Stop” między sobą. 100 μl mieszaniny reakcyjnej zawierało 150 pmoli każdego primera i jeden μg DNA matrycy; oraz 1x bufor Vent (New England Biolabs), 300 μM dGTP, 300 μM dATP, 300 μM dTTP, 300 μM dCTP i 1 jednostkę palimcraey Deep Vent. Reakcje PCR przeprowadza się w cjklerze cieplnym DNA Model 80 (Perkin Elmer Corporation, Norwalk, CT). Produkty reakcji PCR oczyszcza się przy użyciu zestawu Wizard PCR Preps (Promega).

Primery zaplanowano tak, aby zawierały odpowiednie miejsca restrykcji, które pozwolą na klonowanie nowego genu do wektorów ekspresji. Zazwyczaj „Fragment Start” planuje się do utworzenia miejsca restrykcji NcoI, a „Fragment Stop” planuje się do utworzenia miejsca restrykcji HindIII. Środowiska reakcji trawienia restrykcyjnego oczyszcza się przy użyciu zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega). Fragmenty Start i Stop rozpuszcza się w 1% żelu TAE, barwi bromkiem etidium i izoluje, stosując zestaw Qiaex Gel Extraction (Qiagen). Fragmenty te łączy się i hybrcdyzeUe z końcami ~3800 par zasad Rcol/fragmentem wektora HindIII pMOR9934 przez ogrzewanie w temperaturze 50°C przez dziesięć minut i pozostawienie do powolnego ochłod-einia. Trzy fragmenty poddaje się ligacj przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium). Wynikiem jest plazmid, zawierające gen z nowym końcem N/końcem C. Część reakcji ligacji używa się do transferowania komórek szczepu E. coli DH5a (Life Technologies, Gaitherpbergh, MD). DNA plazmidu oczyszcza się i sekwencje potwierdza jak poniżej.

Sposób III. Wytwarzanie genu z nowym końcem N/końcem C metodą duplikacji tandemowej.

Geny z nowym końcem N/końcem C można wytworzyć w oparciu o metodę opisaną u R.A.Horlic0a i in., Protein Eng. 5:457-431, (1992). Powielenie w reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) genów z nowym końcem N/końcem C, przeprowadza się, stosując matrycę DNA duplikowaną tandemowo. Etapy zilustrowano w fig. 3.

Matrycę DNA duplikowaną tandemowo wytwarza się przez kloning i zawiera ona gen rozdzielony przez sekwencje DNA, kodującą linker, łączący oryginalne końce C i N dwóch kopii genu. Stosuje się specyficzny zbiór primerów, aby wytworzyć i powielić gen o pełnej długości z nowym końcem N/końcem C z tandemowo duplikowej matryce DNA. Te primery zaplanowano tak, aby zawierały odpowiednie miejsca reptrcOcji, które pozwalają na klonowa184 424 nie nowego genu do wektorów ekspresji. Typowe warunki PCR oznaczają jeden cykl topienia w temperaturze 95°C przez dwie minuty; 25 cykli denaturacji w temperaturze 94°C przez jedną minutę, hybrydyzację w temperaturze 50°C przez jedną minutę i wydłużanie w temperaturze 7,°C przez jedną minutę; plus jeden cykl wydłużania w temperaturze 72°C przez siedem minut. Stosuje się zestaw Perkin Elmer GeneAmp PCR Core Reagents (Perkin Elemr Corporation, Norwalk, CT). 100 pl mieszaniny reakcyjnej zawiera 100 pmoli każdego primera i jeden pg matrycy DNA; oraz 1x bufor PCR, 200 pM dGTP, 200 pM dATP, 200 pM dTTP, 200 pM dCTP, 2,5 jednostki polimerazy DNA AmpliTaq i 2 mM MgCl,. Reakcje PCR przeprowadza się w cyklerze cieplnym DNA Model 480 (Perkin Elmer Corporation, Norwalk, CT). Mieszaniny reakcyjne PCR oczyszcza się przy użyciu zestawu Wizard PCR Preps (Promega).

Klonowanie genów z nowym końcem N/końcem C do wektorów ekspresji agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych.

Gen z nowym końcem N/końcem C trawi się endonukleazami restrykcyjnymi, aby wytworzyć końce kompatybilne z insercją do wektora ekspresji, zawierającym gen czynnika stymulacji kolonii. Ten wektor ekspresji trawi się podobnie endonukleazami restrykcyjnymi, aby utworzyć kompatybilne końce. Po oczyszczeniu, gen i DNA wektorowe łączy się i poddaje ligacji, przy użyciu ligazy DNA T4. Część reakcji ligacji stosuje się do transformowania E.coli. DNA plazmidu oczyszcza się i ynkwnncjonuje, aby potwierdzić prawidłowy insert. Prawidłowe klony hoduje się w celu ekspresji białka.

Izolacja i charakteryzacja DNA

DNA plazmidu można izolować wieloma różnymi metodami i przy użyciu komercyjnie dostępnych zestawów znanych fachowcom. Kilka takich metod przedstawiono tutaj. DNA plazmidu izoluje się przy użyciu zestawu Promega Wizard™ Miniprep (Madison, WI), zestawów do izolacji Qiagen QIAwell Plasmid (Chatsworth, CA) lub zestawu Qiagen Plasmid. Zestawy te stosują tę samą ogólną procedurę izolacji plazmidowego DNA. W skrócie, komórki granuluje się przez wirowanie (5000 x g), uwalnia DNA plazmidu za pomocą sekwencyjnego traktowania NAOH/kwas i usuwa resztki komórek przez wirowanie (10000 x g). Supernatant (zawierający DNA plazmidu) nakłada się na kolumnę, zawierającą żywice, wiążącą DNA, kolumnę przemywa i wymywa plazmidowy DNA TE. Po ykriningu pod względem kolonii z interesującym plazmidem, komórki E. coli szczepi się do 50-100 ml LB plus odpowiedni antybiotyk do hodowli przez noc w temperaturze 37°C w inkubatorze z napowietrzaniem i wytrząsaniem. Oczyszczony DNA plazmidu stosuje się do sekwencjonowania DNA, dalszego trawienia restrykcyjnego, dodatkowego subklonowania i transfekcji do komórek ssaka, E. coli lub innych.

Potwierdzenie sekwencji

Oczyszczony DNA plazmidu zawiesza się ponownie w dH,O i ocenia ilościowo przez pomiar absorbancji przy 260/280 nm w spektrometrze Spectronic 601 UV Bauscha i Lomba. Próbki DNA snkwencjonujn się przy użyciu zestawów do chemii sekwenc^^ącej terminatora ABI PRISM™ DyeDnoxy™ (Applied Biosystems Division of Perkin Elmer Corporation, Lincoln City, CA) (numer partii 401388 lub 402078) zgodnie z protokołem sugerowanym przez producentów, zwykle modyfikowanym przez dodanie do mieszaniny sekwencjonującej 5% DMSO. Reakcje snkwencjonowania przeprowadza się w cyklerze cieplnym DNA Model 480 (Perkin Elmer Corporation, Norwalk, CT) postępując zgodnie z zalecanymi warunkami. Próbki oczyszcza się w celu usunięcia nadmiaru terminatorów barwnikowych za pomocą kolumn obrotowych Centri-Sep™ (Princeton Separation, Adelphia, NJ) i liofilizuje. Środowiska reakcyjne sekwencjonowania znakowane barwnikiem fluorescencyjnym zawiesza się ponownie w dejonizowanym formamidzie i w kolejności na 4,75% poliakrylamidowych denaturujących żelach mocznikowych przy użyciu automatycznego sekwencera DNA ABI Model 373A. Zachodzące fragmenty sekwencji DNA analizuje się i montuje do głównych sąsiadujących DNA, stosując oprogramowanie komputerowe do analizy Snqunncher v2.1 (Gene Codes Corporation, Ann Arbor, MI).

Ekspresja agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych w komórkach ssaków

184 424

Transfekcja komórek ssaków/wytwarzanie kondycjonowanych pożywek

Linię komórkową BHK-21 można otrzymać od ATCC (Rockville, MD). Komórki hoduje się w pożywkach Eagla modyfikowanych przez Dulbecco (DMEM/wzbogacona glukozą), uzpełnionych 2 mM (m) L-glutaminy i 10% płodową surowica bydlęcą (FBS). Preparat ten oznacza się jako pożywka wzrostowa BHK. Pożywka selektywna oznacza pożywkę wzrostową BHK uzupełnioną 453 jednostkami/ml higromycyny B (Calbiochem, San Diego, CA). Linię komórkową BHK-21 uprzednio transfekowano stabilnie białkiem transaktywacyjnym HSV VP16, co transaktywuje primer IE110 znajdujący się w plazmidzie pMON3359 (patrz Hippenmeyer i in., Bio/Technology, strony 1037-1041, 1993). Białko VP16 napędza ekspresję wtrąconych genów oprócz primera IE 110. Komórki BHK-21, wykazujące ekspresję transaktywującego białka VP16 oznaczono BHK-YP16. Plazmid pMON1118 (patrz Highkin i in., Poultry Sci. 70: 970-981, 1991) wykazuje ekspresję genu odporności na higromycynę, z primera SV40. Podobny plazmid, pSV2-hph jest dostępny z ATCC.

Komórki BHK-VP16 posiewa się na 60 milimetrową (mm) płytkę do hodowli tkankowej przy 3 x 10⁵ komórek na płytkę, 24 godziny przed transfekcją. Komórki transfekuje się przez 16 godzin w 3 ml „OPTIMEM”™ (Gibco-BRL, Gaithersburg, MD), zawierającym 10 pg DNA plazmidowego z interesującym genem, 3 pg plazmidu oporności na higromycynę, pMON1118, oraz 80 pg „LIPOFECTaMiNE”™ od Gibco-BRL, na płytkę. Pożywkę następnie aspiruje się i wymienia na 3 ml pożywki wzrostowej. 48 godzin po transfekcji, pożywki z każdej płytki zbiera się i oznacza pod względem aktywności (pożywka krótkotrwale kondycjonowana). Komórki usuwa się z płytki mieszaniną trypsyną-EDTA, rozcieńczoną 1:10 i przenosi do 100 mm płytek do hodowli tkankowej, zawierającej 10 ml pożywki selektywnej. Po około 7 dniach, komórki oporne rosną do kolonii o kilku milimetrach średnicy. Kolonie usuwa się z płytki za pomocą papieru filtracyjnego (uciętego w przybliżeniu do takiej samej wielkości jak kolonie i nasączonego trypsyną/EDTA) i przenosi się do indywidualnych studzienek na 24-studzienkowej płytce, zawierających 1 ml pożywki selektywnej. Po wyhodowaniu i zlaniu klonów, pożywki kondycjonowane* ponownie oznacza się i klony pozytywne rozprasza się w pożywce wzrostowej.

Ekspresja agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych w E. coli

Szczep E. coli MON105 lub JM101, zawierający interesujący plazmid, hoduje się w temperaturze 37°C w M9 plus pożywka z aminokwasami, wytrząsając w inkubatorze powietrznym Model G25 od New Brunswick Scentific (Edison, Ne Jersey). Wzrost monitoruje się przy OD6OO aż do osiągnięcia wartości 1,0, przy której dodaje się kwas nalidiksowy (nalidixic) (10 miligramów/ml) w 0,1 N NaOH, do końcowego stężenia 50 pg/ml. Hodowle wytrząsa się następnie w temppraturze 37°C przez trzy do czterech dodatkowych godzin. Utrzymuje się wysoki stopień napowietrzenia przez okres hodowli, w celu uzyskania maksymalnego wytworzenia produktu żądanego genu. Komórki bada się pod mikroskopem świetlnym pod względem obecności ciał inkluzyjnych (IB). Równe ilości hodowli, wynoszące jeden ml, usuwa się do analizy zawartości białek, przez gotowanie granulowanych komórek, traktowanie ich buforem redukującym i elektroforezę przez SDS-PAGE (patrz Maniatis i in., Molecular Cloning: a Laboratory Manual, 1982). Hodowlę wiruje się (5000 x g) do /.granulowania komórek.

Wytwarzanie ciała inkluzyjnego, ekstrakcja, ponowne fałdowanie, dializa, chromatografia DEAE i charakteryzacja agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych, które akumulują ciała inkluzyjne w E. coli.

Izolacja ciał inkluzyjnych:

Grudkę komórko wą z 330 ml hodowli E. coli zawiesza się ponownie w 15 ml buforu do traktowania dźwiękami (10 mM chlorowodorku 2-amino-2-(hydroksymetylo)-1,3propanodiolu (Tris-HCl), pH 8,0 + 1 mM kwasu etylenodiaminotetraoctowego (EDTA). Te zawieszone komórki traktuje się dźwiękami przy użyciu sondy z mikronasadką Sonicator Cell Disruptor (Model W-375, Heat Systems-Ultrasonics, Inc., Farmingdale, Nowy Jork). Stosuje się trzy cykle traktowania dźwiękami w buforze do traktowania dźwiękami, potem wirowanie, w celu zniszczenia komórek, oraz przemycie ciał inkluzyjnych (IB). Pierwszy cykl traktowania

184 424 dźwiękami wynosi 3 minuty rozrywania, potem 1 minutę rozrywania i końcowe dwa cykle traktowania dźwiękami wynoszą po 1 minutę każde.

Ekstrakcja i ponowne fałdowanie białek z grudek ciał inkluzyjnych:

Po końcowym etapie wirowania, grudkę IB zawiesza się ponownie w 10 ml 50 mM Tris-HCl, pH 9,5, 8 M mocznika i 5 mM ditiotreitolu (DTT) i miesza w temperaturze pokojowej przez około 45 minut, aby pozwolić na denaturację białek z ekspresji.

Roztwór ekstrakcyjny przenosi się do zlewki, zawierającej 70 ml 5 mM Tris-HCl, pH 9,5 oraz. 2,3 M mocznika i delikatnie miesza, wystawiając na powietrze, w temperaturze 4°C przez 18-48 godzin, pozwalając na ponowne sfalowanie białek. Fałdowanie monitoruje się przez analizę na kolumnie C18 wysokociśnieniowej chromatografii cieczowej z odwróconą fazą (RP-HPLC) Vydac (Hesperia, Ca) (0,46x25 cm). Do monitorowania fałdowania stosuje się gradient liniowy 40% do 65% acetonitrylu, zawierającego 0,1% kwas trifluorooctowy (TFA). Gradient ten wywołuje się przez 30 minut przy prędkości przepływu 1,5 ml na minutę. Generalnie zdbnatuzowane białka wymywają się później w gradiencie, niż białka ponownie sfałdowane.

Oczyszczanie:

Po ponownym sfałdowaniu, białka zanieczyszczone E. coli usuwa się przez wytrącanie kwasem. pH roztworu do ponownego fałdowania miareczkuje się do pH, wynoszącego między 5,0-5,2 przy użyciu 15% (objętościowo) kwasu octowego (HOAc). Roztwór ten miesza się w temperaturze 4°C przez godziny, a potem wiruje przez 20 minut przy 12 000 x g do /granulowania, nierozpuszczalnego białka.

Supernatant z etapu wytrącania kwasem dializuje się przy użyciu błony Spectra/Por 3 o ciężarze cząsteczkowym odcięcia (MWCO), wynoszącym 3500 daltonów. Dializę wykonuje się przeciw 2 zmianom po 4 litry (50-krotny nadmiar) 10 mM Tris-HCl, pH 8,0 przez całkowity okres, wynoszący 18 godzin. Dializa obniża przewodność właściwą próbki i usuwa mocznik przed chromatografia DEAE. Następnie próbkę wiruje się (20 minut przy 12 000 x g) do zgranulowania całego nibrozpuszczairbgo białka po dializie.

Kolumnę Bio-Rad Bio-Scale DEAE2 (7 x 52 mm) stosuje się do chromatografii jonowymiennej. Kolumnę równoważy się w buforze, zawierającym 10 mM Tris-HCl, pH 8,0, i do wymycia białka stosuje się gradient chlorku sodu 0-500 mM, w buforze równoważącym, przez 45 objętości kolumny. Przy przebiegu stosuje się prędkość przepływu, wynoszącą 1,0 ml na minutę. Frakcje kolumnowe (2,0 ml na frakcję) zbiera się poprzez gradient i analizuje za pomocąRP HPLC na kolumnie Vydac C18 (Hesperia, Ca.) (0,46 x 25 cm). Wykorzystuje się gradient liniowy 4-%-65% acetonitrylu, zawierającego 0,1% kwasu trifiuorooctowego (TFA). Gradient ten wywołuje się przez 30 minut przy prędkości przepływu, wynoszącej 1,5 ml na minutę. Zlane frakcje dializuje się potem przeciw w zmianom 4 litrów (50500-krotny nadmiar) 10 mM octanu amonowego (NHAc), pH 4,0 przez całkowity okres, wynoszący 18 godzin. Dializę przeprowadza się przy użyciu błony Spectra/Por 3 z MWCO, wnoszącym 3 500 daltonów. Na koniec próbkę sączy się sterylnie przy użyciu filtra strzykawkowego o 0,22 pm (filtr strzykawkowy pStar LB, Costar, Cambridge, Ma.) i przechowuje w temepraturzb 4°C.

W pewnych wypadkach sfałdowane białka można oczyszczać przez powinowactwo, stosując odczynniki powinowactwa, takie jak mAbs lub podjednostki receptorowe połączone z odpowiednią podstawą. Alternatywnie (lub dodatkowo) oczyszczenie można osiągnąć stosując każdą z rozmaitych metod chromatograficznych, takich jak wymianę jonów, filtrację żelową lub chromatografię hydrofobową albo HPLC z odwrotną fazą.

Te i inne metody oczyszczania białka opisano szczegółowo w Methods in Enzymology, tom 182 „Guide to Protein Puritication” wydanym, przez Murraya Deutschera, Academic Press, San Diego, CA, (1990).

Charakteryzacja białka:

Oczyszczone białko analizuje się przez RP-HPLC, spektrometrię masową z rozpylaniem elektronowym, oraz SDS-PAGE. Oceny ilościowej białka dokonuje się przez skład aminokwasowy, RP-HPLC i określenie białek Bradforda. W pewnych wypadkach wykonuje się mapowanie trypsynowe aminokwasów, w sprzężeniu ze spektrometrią masową z rozpylaniem

184 424 elektronów (electrospray), aby potwierdzić identyczność białka.

Oznaczenie proliferacyjne AML dla bioaktywnej ludzkiej interlueCny-3

Linię komórkową AML 193 zależną od czynnika otrzymano z Amerykańskiego Zbioru Typowych Hodowli (ATCC, Rockville, MD). Ta linia komórkowa, ustalona od pacjenta z ostrą białaczką szpikową, jest linią komórkową zależną od czynnika, która wykazała wzmożony wzrost w pożywce uzupełnionej GM-CSF (B.Lange i in., Blood 70: 192, 1987; M.Ualtieri i in., J.Immunol. 138: 4042, 1987). Udokumentowano także zdolność komórek AML 193 do proliferacji w obecności ludzkiej 1L--3. (D.Santoli i in., J.Immunol. 139: 348, 1987). Użyto odmiany linii komórkowej, AML 193 3.5, którą dostosowano do hodowli długoterminowej wIL-3 przez wymycie czynników wzrostu i głodzenie komórek AML 193 zależnych od cytokin, pod względem czynników wzrostu, przez 24 godziny. Następnie komórki ponownie powleka się przy 1x10i komórek/studzienkę, na 24-studzienkowej płytce, w pożywce, zawierającej 100 jednostek/ml IL-3. Szybki wzrost komórek wIL-3 trwał około 2 miesięcye Komórki te utrzymywano jako AML 193 1.3, po czym uzupełniono pożywkę do hodowli tkankowej (patrz poniżej) ludzka IL-3.

Komórki AML 193 1.3 przemywa się 6 razy w zrównoważonym roztworze soli Hanksa (HBSS, Gibco, Grand Island, NY) przez wirowanie zawiesin komórkowych przy 250 x g przez 10 minut, a potem dekantację superantantu. Zgranulowane komórki ponownie zawiesza się w HBSS i procedurę powtarza się aż do zakończenia sześciu cykli mycia. Komórki przemyte sześć razy w tej procedurze, zawiesza się ponownie w pożywce do hodowli tkankowej przy gęstości, zmieniającej się od 2 x 10, do 5 x 10„ żywych komórek/ml. Pożywkę tę wytwarza się przez uzupełnienie pożywki Dulbecco modyfikowanej przez Iscove'a (IMDM, Hazelton, Lenexa, KS) albuminą, transferyną, lipidami i 2-mereaptoetanolem. Dodaje się albuminę bydlęcą (Boehringer-Monachium, Indianapolis, IN) przy 500 pg/ml; ludzką transferynę (Boehringer-Monachium, Indianapolis, IN) przy 100 pg/ml; lipidy soi (BoehringerMonachium, Indianapolis, IN) przy 50 pg/ml oraz 2-mereαptoetanol (Sigma, St.Louis, MO) dodaje się przy 5 x 10, M.

Wykonuje się szereg rozcieńczeń ludzkiej interleukiny-5 lub białek agonisty krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych, w potrójnych seriach, w pożywce do hodowli tkankowej uzupełnionej jak ustalono powyżej, w 96 studzienkowych płytkach do hodowli tkankowej Costar 3596. Każda płytka zawierała 50 pl pożywki, zawierającej wykonane jednokrotne rozcieńczenie lub białek agonisty krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych. Studzienki kontrolne zawierały samą pożywkę do hodowli tkankowej (kontrola ujemna). Zawiesiny komórkowe AML 193 1.3 sporządzone jak wyżej dodano do każdej studzienki przez pipetowanie 50 pl (2,5 x 10⁴ komórek) do każdej studzienki. Płytki do hodowli tkankowej inkubuje się w temperaturze 37°C z 5% CO2 w nawilżonym powietrzu przez 3 dni. Na trzeci dzień dodaje się 0,5 pCi ^-tymidyny (2 Ci/mM, New England Nuclear, Boston, MA), w 50 pl pożywki do hodowli tkankowej. Hodowlę inkubuje się w temperaturze 37°C z 5% CO2 w nawilżonym powietrzu przez 18-24 godziny. Komórkowe DNA zbiera się na maty filtru szklanego (Pharmacia LKB, Gaithersburg, MD) przy użyciu urządzenia do zbierania komórek TOMTEC (TOMTEC, Orange, CT), które wykorzystywało cykl mycia wodią po czym cykl mycia 70% etanolem. Maty filtru pozostawia się do wyschnięcia na powietrzu i następn.ίe umieszcza je w workach na próbkk do których dodaje się płyn βογηΙγΜαλΑηγ (Scintwerse II, Fisher Scientific, St.Louis, MO lub BetaPlate Scintillation Fluid, Pharmacia LKB, Gaithersburg, MD). Emisje próbek beta z poszczególnych studzienek hodowlanych liczy się w liczniku scyntylacyjnym LKB BetaPlate model 1205 (Pharmacia LKB, Gaithersburg, MD) i dane wyraża się jako zliczenie na minutę ^-tymidyny włączonej do komórek z każdej studzienki do hodowli tkankowej. Aktywność każdego preparatu ludzkiej interleukiny-3 lub preparatu białka agonisty krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych ocenia się ilościowo przez pomiar proliferacji komórkowej (włączenie ^-tymidyny) indukowanej przez stopniowane stężenia interleueiny-3 lub agonisty krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych. Zazwyczaj w tych oznaczeniach ocenia się ilościowo zakres stężeń 0,05 pM-10, pM. Aktywność określa się przez pomiar dawki Interleukiny-5 lub białka agonisty krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych, która zabezpiecza 50% proliferacji

184 424 maksymalnej (EC50 = 0,5 x (maksymalna średnia zliczenia na minutę włączonej SH-jymidyny na studzienkę spośród potrójnych hodowli we wszystkich stężeniach testowanej interleukiny3 - tło proliferacji mierzy się przez włączenie SH-jymidyny obserwowane w potrójnych hodowlach bez injerleukiny-S). Ta wartość ECs0 jest także równa 1 jednostce bioaktywności.

Każde oznaczenie przeprowadza się z natywną. interleukiną-3 jako odniesieniem standardowym tak, aby poziom aktywności mógł być oznaczony.

Typowo, białka agonisty krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych testowano w zakresie stężeń, wynoszącym 2000 pM do 0,06 pM miareczkowanym w serii 9-erojnych rozcieńczeń.

Aktywność każdej próbki określano przez stężenie, które dawało 50% maksymalnej odpowiedzi, przez dopasowanie do danych czteroparametrowego modelu logistycznego. Zaobserwowano, że górne plateau (odpowiedź maksymalna) dla próbki i standardu, z którym ją porównywano, nie różnią się. Zatem obliczenie relatywnej siły dla każdej próbki określano z szacowań EC50 dla próbki i standardu jak wskazano powyżej. Komórki AML 193.1.3. prolif.erują w odpowiedzi na hIL-3, hGM-CSF i hG-CSF. Zatem dla niektórych próbek przeprowadzono następujące dodatkowe oznaczenia, aby zademostrować, że część agonisty G-CSF białek agonisty krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych była aktywna. Oznaczenie proliferacji przeprowadzono zagonistą krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych plus i minus przeciwciała monoklonalne zobojętniające wobec części agonisty receptora hIL-3. Dodatkowo, odszczepiono cząsteczkę połączoną z miejscem odszczepienia czynnika Xa, następnie oczyszczono i połowy cząsteczki oznaczono pod względem aktywności proliferacyjnej. Doświadczenia te wskazały, że oba składniki białek agonisty krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych są aktywne.

Oznaczenie proliferacji TF1 zależnej od liganda c-mpl

Oznaczono aktywność proliferacyjną liganda c-mpl przy użyciu podklonu ludzkiej linii komórkowej TF1 o zdolności wielokierunkowego różnicowania (Kitamura i in., J.Cell Physiol. 140:323-334, [1989]). Komórki TF1 utrzymuje się wh-IL3 (100 jednostek/ml). Aby ustalić podklon, odpowiadający na ligand c-mpl, komórki utrzymuje się w pożywce do pasażowania, zawierającej 10% supernatant z komórek BHK transfekowanych ligandem (pMON26448). Większość komórek obumiera, lecz podzbiór komórek przeżywa. Po klonowaniu z rozcieńczaniem wybiera się klon odpowiadający na ligand c-mpl i te komórki dzieli się do pożywki do pasażowania, do gęstości, wynoszącej 0,3 x 10⁶ komórek/ml na dzień przed ustawieniem oznaczenia. Pożywka do pasażowania dla tych komórek jest następująca: RPMI 1640 (Gibco), 10% FBS (Harlan, partia #91206), 10% supernatantu liganda c=mpl z transfekowanych komórek BHK, 1 mM pirogronianu sodu (Gibco). Następnego dnia, komórki zbiera się i przemywa dwukrotnie w pożywce RPMI lub IMDM z końcowym myciem wATL lub pożywce do oznaczenia. Pożywka ATL jest następująca: IMDM (Gibco), 500 pg/ml albuminy surowicy bydlęcej, 100 pg/ml ludzkiej transferyny, 50 pg/ml lipidów soi, x 10', M beta-merkaptoetanolu i 2 ml A9909 (Sigma, roztwór antybiotykowy) na 1000 ml ATL. Komórki rozcieńcza się w pożywce testowej do końcowej gęstości 0,25 x 106 komórek/ml w 96-yjudzinnkownj płytce o małym parowaniu (Costar) przy końcowej objętości 50 pl. Krótkotrwałe supernatanty (pożywka kondycjonowana) z transfekowanych klonów dodaje się przy objętości 50 pl jako podwójne próbki o końcowym stężeniu, wynoszącym 50% i rozcieńczone trzykrotnie do końcowego rozcieńczenia, wynoszącego 1,8%. Potrójne próbki o krzywej dawki odmiany IL-3 pMON2S2S8, zaczynając przy 1 ng/ml i rozcieńczone przy użyciu trzykrotnych rozcieńczeń do 0,0014 ng/ml, włącza się jako kontrolę dodatnią. Płytki inkubuje się przy 5% CO2 i temperaturze 37°C. W dniu szóstym hodowli, płytki poddaje się impulsom 0,5 Ci SH/studzinnkę (NEN) w objętości 20 pl/studzienkę i pozostawia do inkubacji przy 5% CO, i temperaturze 37°C przez cztery godziny. Płytki zbiera się i zlicza na liczniku Betaplate.

Inne oznaczenia komórek in vitro w oparciu o proliferację

Inne oznaczenia komórek in vitro w oparciu o komórki, znane fachowcom, mogą być także użyteczne do określania aktywności agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych w zależności od czynników, które obejmują cząsteczkę, w sposób podobny do

184 424 opisanego w oznaczeniu proliferacji komórek AML 193.1.3. Następujące są przykładami innych użytecznych oznaczeń.

Oznaczenie proliferacji TF1: TF1 jest ludzką linią komórek o zdolności wielokierunkowego różnicowania się (Kitamura i in., J.Cell PhysioL 140: 323-334. [1994]), która odpowiada na hIL-3.

Oznaczenie proliferacji 32D: 32D jest mysią linią komórkową zależną od IL-3, która nie odpowiada na ludzką IL-3 lecz odpowiada na ludzki G-CSF, który nie ogranicza się do gatunków.

Oznaczenie proliferacji Baf73: Baf/3 jest mysią linią komórkową zależną od ludzkiej IL-3, która nie odpowiada na ludzką IL-3 lub ludzki ligand c-mpl lecz odpowiada na ludzki G-CSF, która nie ogranicza się do gatunków.

Oznaczenie proliferacji T1163: Komórki T1163 są mysią linią komórkową zależną od IL-6 (N^dan i in., 1986), która odpowiada na IL-6 i IL-11.

Oznaczenie ludzkiego meg-CSF skrzepu osocza: użyte do oznaczenia aktywności tworzenia kolonii megakroiocntów (Mazur i in., 1981).

Trrnsfekowrże linie komórkowe:

Linie komórkowe, takie jak mysia linia komórkowa Baf/3, można transfekować receptorem czynnika stymulacji kolonii, takim jak receptor ludzki receptor G-CSF lub ludzki receptor c-mpl, których linie komórkowe nie posiadają. Te transfekowane linie komórkowe można stosować do określania aktywności liganda, dla którego receptor torżsfekowrżo do linii komórkowej.

Jedną taką transfekowaną linię komórkową Baf/3 wytworzono przez kloning cDNA, kodującego c-mpl z biblioteki wykonanej z linii komórkowej, odpowiadającej na c-mpl, i klonowano do miejsca wielokrotnego kloningu plazmidu pcDNA3 (Invitrogen, San Diego, CA). Komórki Baf/3 trrnsfeeowrno plazmidem przez elektroporację. Komórki hodowano przy selekcji G418 w obecności mysiej IL-3 w pożywce eondycjonowrnej Wehi. Klony ustalono przez ograniczone rozcieńczenie.

W podobny sposób można transfekować ludzki receptor G-CSF do linii komórkowej Baf/3 i użyć do określenia bioaktywności agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych.

Analiza aktywności proliferacyjnej liganda c-mpl

Metody

1. Oznaczenie proliferacji szpiku kostnego

a. Oczyszczanie komórki CD34+

Aspiraty szpiku kostnego (13-20 ml) otrzymano od normalnych dawców szpiku aHogenicanegn za zgodą poinformowanego. Komórki rozcieńczono 1:3 w roztworze soli buforowanej fosforanem (PBS, Gibco-BRL), 30 ml nadlano na 13 ml Histopaque-1077 (Sigma) i wirowano przez 30 minut przy 300 RCF. Jedżojądraastą warstwę rozgraniczającą zebrano i przemyto w PBS. Komórki CD34+ wzbogacono z preparatu komórek jednojądraastych, przy użyciu kolumny powinowactwa zgodnie z instrukcjami producenta (Cell. Pro, Inc, Bothell WA). Po wzbogaceniu czystość komórek CD34+ wynosiła średnio 70% jako określono z użyciem analizy przepływu cytometrycanegn, stosując przeciwciało monoklożalne anty-CD34 sprzężone z fluoresceiną i anty-CD38 sprzężone z fitoerytryną (Becton Diykiżson, Walkersville, MD) i 1 ml powleczono w 12-studzieżkownyh płytkach do hodowli tkankowej (Costar). Dodano czynnik wzrostu rWL-3 przy 100 ng/ml (pMON3873) do niektórych studzienek. Odmiany hIL3 użyto przy 10 ng/ml do 100 ng/ml. Kondycjowaną pożywkę z komórek BHK trrżsfekowannch plazmidem, kodującym ligand c-mpl lub agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych, testowano przez dodanie 100 pl supematantu dodanego do 1 ml hodowli (około 10%o rozcieńczenie). Komórki iekubnwrżo w temperaturze 37°C przez 8-14 dni w nawilżonym inkubatorze przy 3% CO2 w temperaturze 37°C.

b. Zbiór komórek i analiza:

W końcu okresu hodowli, otrzymano całkowitą ilość komórek dla każdych warunków. Do analizy fluorescencji i określenia ploidii, komórki przemyto w buforze dla megrkrrioyytów (bufor MK, 13,6 mM cytrynianu sodu, 1 mM teofiliny, 2,2 pm PGE1, 11 mM glukozy,

184 424

3% ciężar/objętość BSA w PBS, pH 7,4)(Tomer i in., Blood 70:-735-1742, 1987) zawieszono ponownie w 500 pl buforu MK, zawierającego przeciwciało anty-CD41a FITC (1:200, AMAC, Westbrook, ME) i przemyto w buforze MK. Do analizy DNA powodowano przepuszczalność komórek w buforze Mk, zawierającym 0,5% Tween 20 (Fisher, Fair Lawn NJ) przez 20 minut na lodzie, po czym utrwalono w 0,5% Tween-20 i 1% paraformaldehydzie (Fisher Chemical) przez 30 minut, po czym inkubowano w jodku propidium (Calbiochem, La Jolla Ca) (50 pg/ml) z RNA-azą (400 jednostek/ml) w 55% objętościowych buforu MK (200 mOsm) przez 1-2 godziny na lodzie. Komórki analizowano na FACScan lub cytometrze przepływowym Vantage (Becton Dickinson, San Jose, CA). Zieloną fluorescencję (CD41aFITC) zebrano zgodnie z sygnałami liniowymi i logarytmicznymi dla czerwonej fluorescencji (PI), aby określić ploidię DNA. Wszystkie komórki zebrano, aby określić procent komórek które były CD41+. Analizę danych przeprowadzono przy użyciu programu komputerowego LYSIS (Becton Dickinson, San Jose, CA). Procent komórek, wykazujących ekspresję antygenu CD41 uzyskano z analizy przepływu cytometrycznego (Percent). Absolutną (Abs) liczbę komórek CD41+/ml obliczono za pomocą: (Abs)=(zliczenie komórek)*(procent)/100.

2. Oznaczenie skrzepu fibryny megakariocytów

Populację wzbogaconą w CD34+ izolowano jak opisano powyżej. Komórki zawieszono ponownie przy 25 000 komórek/ml z, lub bez cytokiny(cytokin) w pożywce, składającej się z podstawowej pożywki Iscove'a IMDM suspełnionej 0,3% BSA, 0,4 mg/ml apo-traes0cryey, 6,67 pM FeCl2, 25 pg/ml CaCLm 25 pg/ml L-asparaginy, 500 pg/ml kwasu ε-amino-n-kapronowego i penicyliny/streptomycyny. Przed powleczeniem do 35 mm płytki, dodano trombinę (0,25 jednostek/ml), aby zapoczątkować tworzenie skrzepu. Komórki inkubowano w temperaturze 37°C przez 13 dni przy 5% CO2 w nawilżonym inkubatorze o temperaturze 37°C.

W końcu okresu iekubacyjnego płytki utrwalono mieszaniną. metanoLaceton (1:3), wysuszono na powietrzu i przechowywano w temperaturze -200°C do barwienia. Stosowano immunocytochemiczną procedurę barwienia peroksydazą (Zymed, Histostain-SP, San Francisco, CA) , przy użyciu mieszaniny pierwotnych przeciwciał monoklonalnych, składającej się zanty-CD41, CD42 i CD61. Kolonie zliczono po barwieniu i sklasyfikowano jako ujemne, CFU-MK (małe kolonie, 1 -2-ogniskowe i mniej niż około 25 komórek), BFU-MK (wielkie, wieloogniskowe kolonie o > niż 25 komórek) lub mieszane kolonie (mieszanina komórek zarówno dodatnich jak i ujemnych.

Oznaczenie metylocelulozy

To oznaczenie odzwierciedla zdolność czynników stymulujących kolonię do stymulacji normalnych komórek szpiku kostnego do produkcji różnych typów kolonii krwiotwórczych in vitro (Bradley i in., Aust.Exp.Biol.Sci. 44: 287-300, 1966), Pluznik i in., J.Cell Physio 66: 3-4-324, 1965).

Metody

Około 30 ml aspiratu świeżego normalnego, zdrowego szpiku kostnego uzyskuje się od osób, po zgodzie poinformowanego. W sterylnych warunkach próbki rozcieńcza się 1:5 za pomocą lx PBS (#14040.059 Life Technologies, Gaithersburg, Corning MD). Fikol (Histopaque 1077 Sigma H-8889) podlewa się pod rozcieńczoną próbkę i wiruje, 300 x g przez 30 minut. Pasmo komórek jednojądrzastych usuwa się i przemywa dwukrotnie w 1x PBS i raz 1% BSA PBS (Cell Pro Co., Bothel, WA). Komórki jednojądrzaste liczy się i wybiera komórki CD34+ przy użyciu kolumny Ceprate LC (CD34) Kit (CellPro Co., Bothel, WA). To frakcjonowanie przeprowadza się ponieważ wszystkie komórki macierzyste i rodzicielskie w szpiku kostnym obrazują antygen powierzchniowy CD34.

Hodowle ustawia się w potrójne o końcowej objętości 1,0 ml w płytce Petriego o wymiarach 35 x 10 mm (Nunc# 174926). Pożywkę hodowlaną nabywa się od Terry Fox Labs. Do pożywki hodowlanej dodaje się pożywkę HCC-4230 (Terry Fox Labs, Vancouver, B.C. Kanada) i erytropoetynę (Amgen, Thousand Oaks, CA). Dodaje się 3000-10 000 komórek CD34+ na płytkę. Dodaje się rekombinowaną IL-3, oczyszczoną z komórek ssaka lub E. coli, oraz białka agonisty krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych, w kondycjonowanej pożywce z transfekowanych komórek ssaka lub oczyszczonej z kondycjonowanej pożywki z transfekowamych komórek ssaka lub E. coli, do końcowych

184 424 stężeń w zakresie od 0,01 nM do 10 nM. Uzupełnia się rekombinowaną hIL-3, GM-CSF, ligandem c-mpl i agonistą krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych. G-CSF (Neupogen) jest od Amgen (Thousand Oaks, Kalifornia). Hodowle zawiesza się ponownie przy użyciu strzykawki o objętości 3 cm³ i dozuje się 1,0 ml na płytkę. Hodowle kontrolne (odpowiedź linii podstawowej) nie otrzymały czynników stymulujących kolonię. Dodatnie hodowle kontrolne otrzymały pożywkę kondycjonowaną (ludzkie komórki stymulowane PHA: Terry Fox Lab. H2400). Hodowle inkubuje się w temperaturze 37°C, 5% CO2 w nawilżonym powietrzu. Kolonie krwiotwórcze, które określono jako większe niż 50 komórek liczy się w dniu szczytowej odpowiedzi (dni 10-11) stosując mikroskop z odwróconą fazą Nikon z 40x połączeniem obiektywów. Grupy komórkowe, zawierające mniej niż 50 komórek przytacza się jako gniazda. Alternatywnie można identyfikować kolonie przez pokrywanie kolonią szkiełka i barwienie albo można je zebrać, zawiesić i wirować na szkiełkach do wirowania komórek, do barwienia.

Oznaczenie ludzkiego krwiotwórczego czynnika wzrostu z krwi sznura

Komórek szpiku kostnego używa się tradycyjnie do oznaczeń in vitro aktywności krwiotwórczych czynników stymulacji kolonii (CSf). Jednakże ludzki szpik kostny nie zawsze jest dostępny i między dawcami istnieje zasadnicza zmienność. Krew ze sznura pępowinowego jest porównywalna ze szpikiem kostnym jako źródło krwiotwórczych komórek macierzystych i rodzicielskich (Broxmeyer i in., PNAS USA 89: 4109-113, 1992; Mayani i in., Blood 81: 3252-3258, 1993). W przeciwieństwie do szpiku kostnego, krew sznurowa jest łatwiejsza do zdobycia na normalnych zasadach. Jest także możliwe zmniejszenie zmienności oznaczenia przez zlanie komórek otrzymanych od kilku dawców, albo utworzenie banku zamrożonych komórek, do tego celu. Modyfikując warunki hodowli i/lub analizując pod względem markerów specyficznych dla szczepu, możliwe jest oznaczenie specyficznie dla kolonii granulocytów/makrofagów (CFU-GM), dla aktywności CSF mpgakariocytów, lub do wysokiej proliferacyjnej aktywności komórek potencjalnie tworzących kolonię (HPP-CFC).

Metody

Komórki monojądrzaste (MNC) izoluje się z krwi sznurowej przez 24-godzinne zbieranie, przy użyciu standardowego gradientu gęstości (Histopaque 1,077 g/ml). Krew sznurową MNC wzbogacono dodatkowo w komórki macierzyste i rodzicielskie za pomocą kilku procedur, włączając selekcję immunomagnetyczną pod względem komórek CD14-, CD34+; płukanie pod względem frakcji SBA-, CD34+ przy użyciu powleczonych zlewek od Applied Immune Science (Santa Clara, CA); oraz selekcję CD34+ przy użyciu kolumny awidynowej CellPro (Bothell, WA). Do oznaczenia stosuje się albo świeżo wyizolowane albo zamrożone frakcje wzbogacone w komórki CD34+. Sporządza się podwójne hodowle dla każdego seryjnego rozcieńczenia próbki (zakres stężenia od 1 pM do 1204 pM) z 1x10‘^ł komórek w 1 ml 0,9% pożywki, zawierającej metylocelulozę, bez dodatkowych czynników wzrostu (Methocult H4230 od Stem Cell Technologies, Vancouver, BC). W niektórych doświadczeniach, stosowano Methcult H4330, zawierającą erytropoetynę (EPO) zamiast Methocult H4230, lub dodano Stem Cell Factor (SCF), 50 ng/ml (Biosurce International, Camarillo, CA). Po hodowli przez 7-9 dni, liczy się kolonie, zawierające >30 komórek. W celu wykluczenia subiektywnych tendencji w liczeniu, oznaczenia wyliczano na ślepo.

Dodatkowe szczegóły dotyczące metod rekombinacyjnych DNA, które można stosować do wytworzenia odmian, spowodować ich ekspresję w bakteriach, komórkach ssaków lub komórkach owadów, oczyszczania i ponownego fałdowania żądanych białek i oznaczeń do określania bioaktywności białek, można znaleźć w równolegle składanych zgłoszeniach WO 95/006646, WO 94/12639, WO 94/12638, WO 95/20976, WO 95/21197, WO 95/20977, WO 95/21254 i US 08/383 035, które włącza się tu w całości jako odnośniki.

Dalsze szczegóły znane fachowcom można znaleźć u T.Maniatisa i in., Molecular Cloning, a Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, 1982, i w odniesieniach cytowanych tutaj, włączonych tu jako odnośniki; oraz u J.Sambrooka i in., Molecular Cloning, a Laboratory Manual, drugie wydanie, Cold Spring Harbor Laboratory, 1989) i odniesieniach tu cytowanych, włączonych tu jako odnośniki.

184 424

Tablica 1

Oligonukleotydy c-mpINcoI

GCGTCCAhGGCNh^,CNCCNlCNCCNCCTGCTTGhGCACTCCGAGh^,C (SEQ ID Nr:13) N=A,C,G lub T

Ecompl	ATGCACGGGhΓTCCCTGACGCGCAGl3GTGGA
	(SEQ ID Nr:14)
c-molHindIII	hGACGAGChhACCTGAClCAGAGGGhGGACCCT (SEQ ID Nr:15)
4L-5’	GGhTCGGCGG (SEQ ID Nr:16)
4L-3'	CATlTTGCCG (SEQ ID Nr:17)
5L-5’	AATTCGGCGGCAA (SEQ ID Nr:18)
5L-3’	CATlTTlCCGCCG (SEQ ID Nr:29)
8L-5’	GAhTCGGCGGCAAClGCGGCGG (SEQ ID Nr:20)
8L-3’	CAhGhTGCCGCClhhGCClCCG (SEQ ID Nr^l)
31-5’	CGhTCGAlGGAGhTTGACCTThGGChD (SEG IG Nr:22)
31-3’	G7hTCrrl3C,h:rhTGGGC7VCTGGCTC7lh'ΓCT (SEQ ID N: , 2))
35-5’	C(GhTACATGTTGChTACACCTGTCCTG (SEQ ID Nr^))
35-3’	GATCmGCTTmGGGTGmCCTCTGGGCA (SEQ ID IT: , 2))
39-5’	CG7hTCC7hlGGTCCTGCTGCCTGCTGTG (SEQ ID
39-3’	GrhΓC7Al3CTTmGGTGTAGGC7ArYGGGTG (SEQ ID N: , 2))
43-5’	CGAT
43-3’	(SEQ ID Nr:28) rhTrAAGTTrδAGGrΛGrGlGArGlhlTI (EE G I G 0:229)
45-5’	CGATCCATGGACTTTAGCTTGGGAGm (SEQ ID O: ,0))
45-3’	GATCAAGhhGAACGAGGlGGCAGCAGGAG (SEQ ID O: ,3))
49-5’	CGATCCATGGGAAAATGGAAAACCCAG (^!QQ ID N: , D)
4 9-3’	GATCAAGChGAGAAGCTAAAGTCCACAGC (SEQ ID Nr ,3))

184 444

82-5'

82-3’

109-5'

109-3'

116-5'

116-3'

120-5'

120-3'

123-5'

123-3'

126-5'

126-3' synnoxa1.req

SYNNOKA2.REQ

L1yyn.for

L^ci.rev

L3syn.for

L3yyIl. oiv

CGATCCATUGACCCTYCTTGCCTCTCA (SEQ ID Nr:84) (ATΓCAAiGCTTΆCAGTTGTCCCCGT(dTΓGC (SEQ ID Nr: 55)

CA^^T^C^CA^T^G^i^C^C^CA^^^^^^C^C^^^C^C^A (SEQ ID Nr:365)

GATCAAGGCTTAAAGGAGGCTCTGCAGGGC (SEQ ID Nr^) dATCCATTGGGCAGGACCACAGCTCAC (SEQ ID Nr: 58)

GATCAAGCTTACTGTGGAGGAAlGCT<llTTT (SEQ ID Nr:35)

C^GA^^^C^CA^A^d^C^^^CA^CAA^^^C^C^C^AA^T^i^C^C (SEQ ID Nr o -15) (ΆTCAAGCTTATGTdTCCTGCCCTGT(l0 (SEQ ID Nr:45)

C^<3A^T^C^CA^^^^AT^C^C^(AA^T^C^(^C^A^^C^^^C^C^5^G (SEQ ID Nr: 45)

GATCAAGGCTTACTTGTGAGCTGTGGTCCT (SEQ ID Nr:45)

CiATCCATdCCATCTTCCTGAdTTCCAAO (SEQ ID Nr:44) (SEQ ID Νο:455

AATTCCGTCG TAAAYCTGACCC T^5^^5^A^5T^5T(A0 AAACCTTGGA

GAACGdCAG GCTCAACAGT AdTAGAGd dGTGGAGGC

TCC (SEQ ID Νο:465

CCddAdC TCCAdGdC TCTACGTACT lTTGAlCCTl

CGCGTTCTCC AAGGTTTTCA GATAGAAGGT CAGTTTACGA

CGG (SEQ ID 10:475

GTTACCCTTG AGCAAGCGCA dAA^GAA^CA^G GGTGGTGGCT

CTAACTGCTC TATAATGAT (SEQ ID Νο:485

CGATCATTAT AGAGCAGTTA GHGCC1CCCACC CCTGTTGTTC

CTGdCTTGC TCAAGG (SEQ ID Nr: 49}

GTTACCCTTG AGCAAGdCA G^(^AA^^AA^^AG0 GGTGGTGGCT

CTdCdTGG CAGCHCGGC GGTTCTAACT GCTCTATAAT

GAT (SEQ ID Νο:505

CGATCATTAT AGAGCAGTTA GAACCGCCGC CGCTGCCACC

GCCAGAGCCA CCACCCTGTT GTTCCTGCGC TTGCTCAAGG

184 424

35start.seq

34rev.seq

70start.seq

69oiv.seq

91.start.seq

90rev.ieq

101start.seq

100oev.seq

L-Hstart. seq

L-Hstop.s^

P-blstaot.seq

P-bnstop.seq

39start.seq

38etop.eeg

97start.seq (SEQ ID NO : 51 )

GAhCGACCAh GGChChGGAC CCGAACAACC TC (SEQ ID No:52)

CCCGACCACG TACSSAGGTG CAGGCTGGT (SEQ ID Nr:53)

GATCGACCAT GGCTAATGCA AG (SEQ ID No:54)

CTCGACCACG TATTCTSSGGT TCTTGACA (SEQ ID Nr:55)

GATCGACCAT GGChGCACCC TCTCGACATC CA (SEQ ID Nr:56)

CTCGACCACG TAGGCCGTGG CAGAGGGC (SEQ ID Nr:57)

GATCGACCAT GGChGCAGGT GACCGGCAAG AA (SEQ ID NO:58)

ChCGATTACC AACTTGATGA TSATTGSA (SEQ ID Nr:59)

GCTCTGAGAG CCGCCAGAGC CGCCAGAGGG

ChGCGCSAGG CGGCGTAGAA CGCG (SEQ ID No:60)

CAGCCCTCTG GCGGCTChGG CGGCTCTCAG

AGCThCChGC CCSAGTChhT AGAG (SEQ ID No:61)

GGGCTGCGCA AGGhGGCG (SEQ ID Nr:52)

ACACCAhhGG GCCCTGCCAG i (SEQ Ii Nr:O3)

GATCGACCAT GGCT TACAAAG CTGTGCCACC CC (SEQ ID Nr:64)

CGATCGAAGC TTATTAGGTG TCTCCT (SEQ ID No:65)

GATCGACCAT GGChCCCGAG CCGGGTCCCA CC

184 424 stop.Seą

126start.seq

225stop.Seq

133start.seq

132stop.seq

142start.seq

141stop.Seq

GLYXA1

GLYXA2 lGGGSfor lGGGSrev

Synnoxal.req

Synnoxa2.req (SEQ ID Nr:66)

CGATCGAAGC TTATTAGGAT ATCCCTTCCA GGGCCT (SEQ ID Nr:67)

GATCGACCAT GGCTATGGCC CCTGCCCTGC AG (SEQ ID Nr:68)

CGATCGAAGC TTATTATCCC AGTTCTTCCA TCTGCT (SEQ ID Nr:69)

GATCGACCAT GGCTACCCAG GGTGCCATGC CG (SEQ ID Nr:70)

CGATCGAAGC TTATTAGGGC TGCAGGGCAG GGGCCA (SEQ ID Nr:71)

GATCGACCAT GGCTTCTGCT TTCCAGCGCC GG (SEQ ID Nr:72)

CGATCGAAGC TTATTAGGCG AAGGCCGGCA TGGCAC (SEQ ID Nr:73)

GTAGAGCGCG GTGGAGGCTC C (SEQ ID Nr;74)

CCGGGGAGCC TCCACCGCCC TCTAC (SEQ ID Nr :75)

TTCTACGCCA CCTTGCGCAG CCCGGCGGCC GCTCTGACAT

GTCTACACCA TTG (SEQ ID Nr:76)

CAATGGTGTA GACATGTCAG AGCCGCCGCC GGGCTGCGCA

AGGTGGCGTA GAA (SEQ ID Nr:77)

AATTCCGTCG TAAACTGACC TTCTATCTGA AAACCTTGGA

GAACGCGCAG GCTCAACAGT ACGTAGAGGG CGGTGGAGGC

TCC (SEQ ID Nr:240)

CCGGGGAGCC TCCACCGCCC TCTACGTACT GTTGAGCCTG

CGCGTTCTCC AAGGTTTTCA GATAGAAGGT CAGTTTACGA

CGG (SEQ ID Nr:241)

184 424

Tablica 2

Sekwencje genowe pMON30304

GCTAACTGCTCTATAATGATCGATGAAATTATACATCACTTTAAA3AGACCACCTGCACCT

TTGCTGGACCCGAACAACCTCAATGACGAAGACGTCTCTATCCTGATGGACCGAAACCTT

CGACTTCCAAACCTGGAGAGCTTCGTAAGGGCTGTCAAGTAACTTAGTAAAATGCATCAGGT

ATTGAGGCAATTCTTCGTAATCTCCAACCATGTCTGCCCTCTGCCACGGCCGCACCCTCT

CGACATCCAATCATCATCAAGGCAGGTGACTGGCAAGAArrCCGGGAAAAACTGACGTTC

TATCTGGTTACCCTTGAGCAAGCGCAGGAACAACAGTACGTAGAGGGCGGTGGAGGCTCC irGGGTGAACCGTCTGGTCCAATCTCTACTATCAACCCGTCTCCTCCGTCTAAAGAATCT

CATAAATCTCCAAACATGT (SEQ ID Nr: 78)

SMON26458

7CCCCAGCTCCACCTGCTTGTGACCTCCGAGTCCTCAGT7AAA:TGCTTCGTGACTCCCAT GTCCTTCACAGCAGACTGAGCCAGTGCCCAGAGGTTCA^CCCTT^T^C^C^C^T^A^C^A^(^(^'rTTCCTG CTGCCTGCTGTGGACTTTAGCTTGGGAGAATGGAAAACCCAGATGGAGGAGACCAAGGCA TAGGACATTTCGGGAGCAGTGACCCTTCTGCTG<C^GGGAGTGATGGCAGCACGGGGATAA CCGGGATCCATCCGTTTTCTATTCTCCTTGGGGTAGTTCCCCGGATAGGCTTGCTCTCTC TTTGGGGTTCTGCAGAGCTCCCCTGGAACCCAGCTTCCTCCACAGGGCAGGACCACAGTT TACAAGGATTTTAATGTCATTTCTTTGAGCTTCCAACACCTGCTCCGAGGAAAGGTGcGT CCTTTGATGTCTGTAGGAGGGTTTATTTTCTGCGCTAGGGAATTT (SEQ ID Nr: 79) pMON28548

CCCTCAGCCTCACTCGTTCGTGACCTCCGAGTCCTCAG^ΓCAAACTGCTTCGTGACTTTTAC GTCCTTTATAGTAGATTGAGTCAGTGCCCAGAGGTTCACCCTTTGCCTACATTCGTCTTG TCGTCTGTTGTGGACTTTAGCTTGGGAGAATGGA?AAACCCAGATGGAGGAGATCAAGGTA TAGGACATTCTGGGAGTAGTGACCCTTCTGCTGGAGGGAGTGATGGCAGCACGGGGACAA CCGGGATCTACCCGTCCTCTACCCTTCCTGGGGCAGCT'CCCTGGACAGGTTTGTTCTTTC TTCGGGGTCCTGTAGAGTCCCTTTGGAACCCAGCTTCCTCCACAGGGCAGGATTATAGCT TATAAGGACTTTAACGTCACCCTCTTGAGCTTC(TAACACCTGCTCCGAGGAAAGGCGCGT CTCTTGATGCTTGTAGGAGGGCTCACCCTCTGCGTCAGGG7AATTCGGCGGCAATACGGTG TCTTTTGTTCTGCTCGCTTGTGACTTCCGAGTCCTCAGTAACTGCTTCGTGATCTTTAT GTCCTCTATAGTAGACCGAGTCAGCGCCCAGAGGTTCACCCTTTGCCTACACTCGCTCTG TCGTCCGTTGTGGAC^,CTCAGCTTGGGA<CAATGGCAAAACCCAGATGGAGGAGACTAAGGCA TAGGATATTCTGGGAGCAGTGACCCTTCTGCTGGAGGGAGTGATGGCAGCACGGGGAC-AA. CTGGGATTTATTTGCTTCCTATTTTTTCTGGGGCAGCTTTCTGGACAGGTCTGTTCTTTT TCTGGGGTTTTGTAGAGTTTCCTCGGAACCCAGGGCAGGACCACAGCTCACAAGGACCCτ AATGCTATCTTCCTGAGCCTCCAACACCTGCTCCGAGG2AAACGTGCGTTTCCTGACGTCC GTAGGAGGGTCTATTCCTTGTGCCAGG (SEQ ID Nr: 80)

SMON28500

TCCCCAGCTCCACCTGCTTGTGACCTCCGAGTCCTCAGTTAAAtTGCTTCGTGACTCCCAT

GTCCTTCACAGCAGACTG^GC^.^(^^,^(^(^(^(^C^<^G^^^l^T^C^i^C^C^C^TT^T^(^(^(^(^2^(^.^^CTGTCCI^G

CTGCCTGCTGTGGACTTTAGCTTGGGAGAATGGAAAACCCAGATGGAGGAGACCAAGGCA

184 424

CAGGACATTCTGGGAGCAGTGACCCTTCTGCTGGAGGGAGTGATGGCAGCACGGGGACAA CTGGGACCCACTTGCCTCTCATCCCTCCTGGGGCAGCTTTCTGGACAGGTCCGTCTCCTC CTTGGGGCCCTGCAGAGCCTCCTTGGGAKCCCAGCTTCCTCCACAGGGCAGGACCACAGCT CACAAGGATCCCAATGCCATCTTCCTGAGCTTCCAACACCTGCTCCGAGGAAAGGTGCGT TTCCTGATGCTTGTAGGAGGGTCCACCCTCTGCGTCAGGGAATTCGGCAACATGGCGTCT CCCGCTCCGCCTGCTTGTGACCTCCGAGTCCTCAGTAAACTGCTTCGTGACTCCCATGTC CTTCACAGCAGACTGAGCCAGTGCCCAGAGGTTCACCCTTTGCCTACACCTGTCCTGCTG CCTGCTGTGGACTTTAGCTTGGGAGGAATGGTAAAACCCAGATGGAGGAGACCAAGGCACAG GACATTCTGGGAGCAGTGACCCTTCTGCTGGAGGGAGTGATGGCAGCACGGGGACAACTG GGACCCACTTGCCTCTCATCCCTCCTGGGGCAGCTTTCTGGACAGGTCCGTCTCCTCCTT GGGGCCCTGCAGAGCCTCCTTGGAACCCAGCTTCCTCCACAGGGCAGGACCACAGCTCAC AAGGATCCCAATGCCATC TTC CTGAGCTTCCAACACCTGCTCCGAGGAAAGGTGCGTTTC CTGATGCTTGTAGGAGGGTCCACGCTCTGCGTCAGG (SEQ ID Nr: 81)

DMON28501

TCCCCAGCTCCACCTGCTTGTGACCTCCGAGTCCTCAGTAAACTGCTTCGTGACTCCCAT GTCCTTCACAGCAGACTGAGCCAGTGCCCAGAGGTTCACCCTTTGCCTACACCTGTCCTG CTGCCTGCTGTGGACTTTAGCTTGGGAGGAArGGAAAACCCAGATGGAGGAGACCAAGGCA CAGGACATTCTGGGAGCAGTGACCCTTCTGCTGGAGGGAGTGATGGCAGCACGGGGACAA CTGGGACCCACTTGCCTCTCATCCCTCCTGGGGCAGCTTTCTGGACAGGTCCGTCTCCTC CTTGGGGCCCTGCAGAGCCTCCTTGGTAAZCCAGCTTCCTCCACAGGGCAGGACCACAGCT CACAAGGATCCCAATGCCATCTTCCTGAGCTTCCAACACCTGCTCCGAGGAAAGGTGCGT TTCCTGATGCTTGTAGGAGGGTCCACCCTCTGCGTCAGGGAATTCGGCGGCAACATGGCG TCTCCCGCTCCGCCTGCTTGTGACCTCCGAGTCCTCAGTAAACTGCTTCGTGACTCCCAT GTCCTTCACAGCAGACT(3j^(^(^(^J^(^^r^<G(^(^C^C^(^.A<GGTTCACCCTTTGCCTACACCTGTCCTG CTGCCTGCTGTGGACTTTAGCTTGGGAGGAATGGAAAACCCAGATGGAGGAGACCAAGGCA CAGGACATTCTGGGAGCAGTGACCCTTCTGCTGGAGGGAGTGATGGCAGCACGGGGACAA CTGGGACCCAGTTGCCTCTCAATCCTCCTGGGGCAGCTTTCTGGACAGGTCCGTCTCCTC CTTGGGGCCCTGCAGAGCCTCCTTGGGA.CCCAGCTTCCTCCACAGGGCAGGACCACAGCT τATAAGGATTCCAATGCC ATCTTCCTGAGCTTCCAACACTCGCTCCGΛGGAAAGGGGCGC CTTTCGACGTTCGTAGGAGGGTCCACCCTCTGCGGTAGG (SEQ ID Nr: 82) pMON28502

TτTTCAGCGTCGTCTGCTTGTGACCTCCGAGTCCTCAGTAAACTGCTTCGGGACGCCTAC

GTTTTGTACAGTAGACTGAGCCAGTGCCCAGAGGTGTACTTTTTGTCTATATTGGGTCCG τCGTCGGTGGCGGACT^G?AGCTTGGGAG,AAGGGAAAATTTAGATGGAGGAGATTAAGGTA

CAGGACAGTTTGGGAGCAGTGACCCTTCTGCTGGAGGGAGCGATGGCAGCATGGGGATAA

TCGGGATTCACCCGCCTCTCATCCCTCCTGGGGCAGCGTGTCGGACAGGGTTGGTTCTTT τTCGGGGCTCTGCAGAGCCTCC^ΓGΓGGjACCCAGCTTTTGTTACAGGGCAGGATCACAGCC

CATAAGGACCCTAATGCCATCTTCCTGAGCTTCCAATATCTGTCTCGAGGAAAGGTGTGC

TTTTGGAGGCTCGTAGGAGGGTCCACCCTCTGCGTCAGGGAATTCGGCGGTAACGGTGGC

AATAGGGTGCTTTCAGCGCCGCCTGCTTGTGACCTCCGAGTTCCCAGTAAACGGTTCTGC

GATCTCTATGCTCTTCACAGCAGACTGAGCCAGTGCCTAGAGGTTCACCTGGGGCTTATA

CTCGGTTTGCTGTTTGCTGTGGACTTTAGCTTGGGAGAAGGGAAAACTCAGAGGGAGGAG

ATCAAGGTATAGGACATTCTGGGAGCAGTGACCCTTCGGTCGGAGGGAGGGAGGGCAGTA

TGGGGATAACTGGGAeCCACTTGCCTCTCATeCCTCTGGGGGCAGCTTGTGGGACAGGCT

CGTTGTTTTCCCGGGGCCCTGCAGAGCCTCCTTGGAATTTAGTTTTCTTTATAGGGTAGG

ATTATAGCGCATAAGGATCCC7AAΓGCCATCTTCCTGAGTCTCCAACACCGGCGTTGAGGA

AAGGGGTGTTCTCTGATGCTTGTAGGAGGGTCTACCCGTTGCGCCAGG (SEQ ID Nh: 83)

184 424

Syncanl

CATGGCTCACT GCTCTATAA TGATCGATGA 2ATTATACAT 51 GACCAGCTGC ATTTGTGCGC T ATCGGCTTA TCGGCGATCA 101 TCT ATC CTGAT GCATTTATT T CCTCGCCTG CG7TT.CCTAC 151 AAGO5CAGTC AACAACTCAC 7TTTTCGATC TTCCATGGCT 201 GT7CTTCTCCAATTATAAAGC T CCTCCGCCC CTCCGTCATG 251 CC7ATΓCATCAT AATTGGATG T GATTGCCTA 7ATTΓTCCGGG 3 01 GTTCTATCTG G AAACCCTGC CGCTCT3CTCAGGCACTCC;AG 351 σΤ/ΓΟΤΟετε T ATATTAATC T ATG7TTTAA TATATCAttT 401 CCTC-CACCTT T ACAAGACGC TCACGCCCTC TTTTGACG;CG 451 CCTGACGGAC C CATTTCTGC TATCTCCCTA TGTGGAGAGC 501 CTGTCAAGTCT CCAATGTTTT TTGAGGC7CT

551 CTCCGGTTCAT G GGCAGTCCC TGGGACCGCC GGACGGTCTC 501 CATCATC7ATTGCATGGAATG T GCGTTGTTTrT CCGGG7CA7TT

651 ATCTGGTTAC C TTTACTCCT T CGCAGTTG7C TACTTTAC (SEQ ID Nr: 84)

Syntan3

CATTCGGCAC TACCACATAT TGGTCTGTAG CTTCATAT-GT 51 GACCATCTTG ATCCAAACGC TACCCG7T/CA ACCTCAATGA 101 TCTATCGTGA T AGATTTATT T CTTCGACTT C(AACACCTGG 151 AAGTGGGTTC 7CTTATTAGAT TkAAATGCATC AGGT ATTGAG 201 GT/GTTCTCCA ATCATGGGTC T CCTCTGCCA iC<G<^CCGCACC 251 CC7ATΓCATCA. T AATTGGATC T GACTGGC7AG G7TTTTCCGGG 3 01 GTTCCAATAGG GAATCTTGC TGCTtAGCGCA GG7TACAACAG 3 51 CT7A7GCCG7A7GATCAGGACG TGTTCTAACC GCTCTATAAT 401 ATTATAGATC ATTAGTT.TGT CCCACeTGCACCTT TGCTGG 451 CCTC7CTΓGAC G ATTATTTCC TTATCCTGAT GGAC CGAAGC 501 C7TTCCTGGAG ATGAAGTCA CGGGCTGTCAAG7TCTTTAGA 551 GGTATTGAGG C AATAAAA^CG T 7>LATCTCC7AA CCATGTCTGC 601 GGCCCG7^7\7^C^^ T ATCTATATC T AATCATCAT C.AAG GCAGGT 651 7tATTCCGGGA77TTTCAAATC TTCTATCTGG TTAC CCTTGA

701 G/ATCTACAGT AT (SEE TD Tr: 8d pMON31104

ATGGCTCTGG cACC'CG.TTC7TT CGGGATTCGT CGATACGTCT 51 GGACCG/GCC CTTCG-TCGTC CTTT.TCCGGG GAGCTGCGTA 101 AGTCTCTTAGA TTTATGCATCA GCGATGGGTG C7TTTCTTCG 151 CCAGTGGAGC CCTCTGCCAC GGGCCGATGC TCTGGACATC 201 C7^<GT^7^7^(^G7? GACTGGCTTG iTTTCGGGCA 7TTT1CTGACG

51 TTACCCTTC-AGC7TTGCGCAG GAACTTTCAGC GTGGTGGCTC

01 ATTGATGATCG ATGTTTTTTAT TCTTCACTTT TCGAGACCAC

51 GTACGTAGAG GGCGGTGCAG GCTCCCCGGC TG7CCCGTCT

01 CTACTATC7A CCCGTCTCCT CCGTCT7CAC TCTCTCATGC 451 ATGCCCAGTC AGGGTGCCAT GCCGGCCTTC GCGGCTGCTT

CACTTAAAGA

CG7CGACGTT

AGAGCTTCGT

GCTTCrTCTTC

CTCTCGATTG

7TTTTτCTGTC

GGTGGTGGTG

7CTTGAGATCT

ACGTCTCęTG

TTCGTTAC-CC

TCTTCGATTG

GTCATTATTA

CTGACAAACA

CACTTAAAGA

CAATAATTAT

AGATCTATAG

GTAAATTAAG

TTCTCTACAT

AACTTTTTAG

CTCAGAACAC

TTAGTAAGTA

AGGTTAACTT

TTTCAATATC

AATTTTAAAT

GCTTAATGAC

GAGATAAAAT

GGTATTTCAC

CTATATAATA

TCCGTAGATT

ATTTAATTTT

CAATCTATTG

AACTAAAAGG

TTTCTAcATG

CTGCATCAAA

GGTcTTTACA

ATCTCTTTTT

TCTAATAAAG

184 424

501 GGCAGGAGGGGTCCTGGTTG TCAlCTAGCG aGAUCmU CCGGAGGTGT 551 CGTACCGCGTTCTACGCCAC ClTlClCAlC ^ΤΚ^Ο^ CTCTGGCGGC 601 TCTCAGAGCTTCCTGCTCCAG lGCGTTAlAl CAlTllllAA AGATCCAGGG 651 CGATGGCGCAGCGCTGCAGG 11AA1CG1G1 TGClACllCO TAGCTGTGCC 701 GCTGGTGCTG TCTllAClCG CTClllGlAO CCCCTGGGCT 751 CCCCTGAGCTCCTGCCCCAG CCAllCCCll GAdUCH, GCTGCTTGAG 801 CCAACTCCAT AGCGGCCTTT TCCTCTACCA GGlCGCTClO CAGGCCCTGG 851 AAGGGATATC lllCCCACCl TG1A1C1C1O GCAGCTGGAC 901 GTCGCCGACT TTGCCACCAC CAlClGlCAl CAATlllAlO JUCTGGGAAT 951 GGCCCCTGCC CTGCAGCCCT AHAA (SEQ ID Nr: 87) pMON31105

AT1T11TG111T1GT111G1 TGAGGCAATT CTTCGTAATC TGCTAACTGT 51 TCTCGlCTTG ClCTlTllCC CACCCTCTCG ACATCCAAIC AlGTSTTAGl 101 CAClGlGlSC llCASlAlTC CGGGAAAAAC TGACGTTdA TTTGlGGASC 151 CTCTGlSlCA 1G1A1G1A1:A ACAGGGTGGT OSCTCTAACG GlTTCASGAT 2 01 GAllGATlClASGGlAlTl'C OlΊΊΊAAlAG ACCACCTGCA CCTGGTlTTG

51 AClCGSACSSc lCTGTlATGAl OlAGlCGGCT CGAGCCGGAG GGlCCGlAAC

01 CTCCGAHTC CTlA-lTCGlG OGS1CGGC1A AGGGCTCTCA AHAATTAGA

51 AGAClClClllllGllGGAG OlTCCCCCll ΤαΛΑ^σΤ^ GllGCTATCT

01 CTAOGAGdC. lCCGGTTCCG OCTGTTCAAG AAGCGTAGAA AGGGCCTSSlC 4 51 AT^^T^l^l^Cί^^(l^(T^Γ OlCTllCTGC GCCGTGGCTT TCCAGCGCCG 501 GGlAClAGllllGCCGGTTG TGAlTTATTG GCAGAGCTTC CCGlAGGTGT 551 CGCACCGdC GCTASClCAl TTGlTlTAlC CCTCTGGCGG CTCTTGCGGC 601 TCGCAGAGSTGCCTGCTC<AC lCTTTGAlAl CAAGTGAGAA AA GA CC AGCG 651 CGT^^C^<^^<3¢^AC^C^GC^T^l^C2T^C^C3 AlAAlCGlGl TGCCACCTAC /AillTGTGCC 7 01 ACCCCGAGGAllTGGTGCTG OTTGGACACT CTCGllGClT CCCCTGGGCT 7 51 CCCCGGAGCT !CTGCCCCAG CC:AGGCCCTG CAGTGllClG GlT’TCTTGAG 801 CCCACTCCAT ΑσοασΟΟΤΤΤ TTTTCGACCA CGSGGTTCCTG CAGGCCCTGG 851 .AAC3l^C^l^lΓC^^ΓCCC^C^CCCGl^C^^rΓ7Γ(J llGTTCACTG TGGACACACT GGAGCTGGAC 901 GTCGCCGACT TTGCCACCAC TATCGllTAG CACAUGU 7S\CTGGGlllT 951 GGUCCTGCC CTGCAGCCCT AHAA (SEQ I, Nr , 87) pMON31106

ATlGllCClC TTTGCTTGA:T ACC.CAlGTl?T ATCAAGGCAC- GTGACTGGCA 51 AGAlGlGCCC lGlAAAATGl OTlTTCGlTT GGTTACCCTT GAGCAAGCGC 101 ΛGGl!llACA llllGllGll OCTGAlTTlT CTATAATGAT CGATGAAATT 151 ATACAClGCl GGAAlAlllC AlCCGlTlCT TTGCTGGACC CGAACA-ACCT 201 CATllGllTllllClGCTCG AGCCTlSTll CCGAAACCT? CGACTTCCAA 251 AClTTGllAl lCTGCGGAll OlTGGTTAll ACIM AGAWA. TGCATCAGlG 301 ATlGGllllTlTGCTTClTA ACTCCTAl:CA TGTCTGCCCT CTGCCACGGC 351 CTTGlCGTlllllCllTllG AlCCCTCCll TGmCCGTCT GGTCCAATTG 401 CTTGGTGlATlCCTGGTCCC OTTlGTGAAG AATCTCATAA ATCTCCAAAC 451 ATGTllTClT TSlllClCTl OlTcllCCGC GCCTCTGCCT TCCAGClCCl 501 GGllClllllllGCCTllTC OCGllCTlGT GCAGAGCTTC CTGGAllTlT 551 CGT1G1CC1CTTTG1T1CA1 OCGTlClTll CCTCTGGCGG CTCTGlCllC 601 TCGCGCAlllGTCCGlTCTAc OlGCGGGllG CAAGTGAGAA AGATCCAGU 651 CGTlGTllTlllClTTCAll AlGAllCGlT TGCCACCTAC AllGCTlTlCC

184 424

701 ACCCCGAGGAGlCTllGCTG ChCGlGCGCh ChChlllCAh CCCCTGGGCT 751 CCCCTGAGCTCCCTlCCCAG CCGllCCChl CGlCTGlCAG GCTCCTTlAl 801 CCTGGTCCATAGCGGCCTTT hCThTTGTTG llllCTCCTG GAGC^Cm 851 AAGGlATATCCCCCGAGTTG llhTTTGTTh TGGACACACT GCAGChlC-GT 901 GTCGCCGACTTTGCCACCAC CGTCTAACGA CAlATGGm AACTlllArh 951 ggccccagcccagcagccca mAA (seq id r: 8)) pMON3 1107

GhAAThACGA AhAGCTAACG G1GGTTTC11 AGATATTTAT T1TTThGhCT 51 11TTGTCChh inCmClC GAAGGCATCG 111T11hl1T TTGGGTTATh 101 CTGhArh1Gh TAGGAGGGGT GGGTGTTGTh TGTGAGAGCT GCCGATGTTT 151 ThAThAAGTT TAGTTGTCCG CGGGAGTAGG AGTATChTTT GCCGAATAAG 201 CTAATGCTGh TAGTTTCCGG GCTh11G1G1 ChhC1hGG11 1Ch1hTGG1G 251 GCTGGGATTA h1TGhCG11T GGTAGAACGA hhTTTC1hGG TTTCTGGTTG 301 T1TTT1CCCh TTACCGCAAT CATGTCThTh CAGCGTTTGG GCGGCGTCGG 351 AhGTATGAGA AACGAGAAGA ATTCTCCAAA T1ArTC1TTh AAGCTTAGCG 401 ChGChGGCGG TTC1TChCCT CTATCTGGGA GGTTTCGhGT GhCTCTGGGT 451 GhAAChGCCC G111h1CCGT ACTAATTTTC 1TTTCh1CTh hTCG1C1TT1 501 GlCnimi ATTCTAGGTA CTGATTTTCT ATGAGAThhT CTG1G11T1T 551 CAhGTCACAT hChGC1CCGC CTTATATGAT CThCT11T11 CTCh11T11T 601 TTTTGAGACT hCTh1ChCAG GhThThGGG1 CGTATAGAGT GAGGCCGGAA 651 CAGhAACACG 1T1CTCCGG1 G1GG1Th1h1 TACCGCThGT GG1CT1hGCC 701 GCTTTAGAAG 1Th1GhGTh1 ThT11GTGTh CTCGAAACAh TTCCT11GTT 751 CTCTGAGACh TCT1TCCCG1 TTG11TTThG CGATTAATGA 1Th1CThGG1 801 CTGrCTCTGT GATAACCGGG GCChCTGCTG AAAACGTTTA CGAGTTCGAA 851 TGAAAGGGGT TTTC1G1Th1 AAGTCCGCTT T11GCGTGCh ATGAChGAGT 901 AhCACCAGCh hT1CCGCCGC CGTCTAACGA CGAGGAAATA TATGAAAGGG

951 AACTCCGACT TT1CGGTTCT mAA (SEQ ID Nr: 89) pMON31108

ATGG1TCTGGACCCG1Gr:TGr CCThTAAhAT T1AGArCATC DCATCCTGAT 51 GGA1CGTGGr::CTTCGACTTC CTTGT::GThGA DATACThCAT GA1GCTGTCA 101 AGrGCTTAGArGGrΓGCATCA GGTATTTAAG DGGTGTCThT ThTA'CACCTT( 151 CCATrTCTGCCCThTGCCAC GAATCAGrCC DTChTATGGh KATA AT A AT 201 C7TT:;GAAGGTGAATGGCTTTG TTTΓhhCCAGΆ ΆTATTThGTT DTCTATCTGG 251 TTACCGTTGAGCTGr3CGGAG G(GTCAr:TGG TAhAAGAACh TGGCGGTGGC 3 01 AGCGGCGGGGGTTGThTGTΓG CTCTAThTTG AThCATh1AT TTATACATCA 3 51 CTThhGT3AGACCACCTGCAC CTTThG’TCGA ΙΠΠΑΡΙΑ 111(107000 401 CGTAAAhATCCGTCTGGTCCA AACACAGCCG DhGTTCTTAh ΤηΤΑΟΑΤΑΤ 451 AGTATAG?C7CA7hGTTI?C7CC 7ATT:AThAAT ATCCGGAAAT DCATGACGGC 501 CTTChCC^T:hTGC^TΓTCCTT3C GCC(G3GCAGG ATGAAAhTGG GTTGCTAGCC 551 AACAGCAGAGCAACCAGGAG GAhAhTATrC DATAThThCC DTACC'Γ-TGCG 601 CAGrACACAGGCGGCACAGG CGGCThThTG( ATATTCCCGC Th(TGGTCTTT 651 AGAGCAAGAGAGAGGTJAACC AGGGAGATGG GTAGrCCATC ΙΑσίΔΑ-ΑΙΑ 7 01 TGTGTGCCACCTACTGT3CTG ATACArCCCG ATAGrAChAA GCTGCACGGA 751 CACACTCAGGGCAACCCCAG GGhCTCThCA- AGCACCAGCC CCAGCCAGGC 801 CCCCCAGCAG GCAGGCTGCA TGAGCC(Gr:T CCTTTGCGAA TTTTTCCTCT 851 ACrATTGGCACCAGCAGGCC CTGG(mAG AGThCCCTTA DATGGGTCCC

184 424

901 GCCTTTTGGG caccgcagct ggacgccgcc gaccttgcca ccaccatccg 951 GCAGCAGATG GASGSSCTGG GSSCGGCCCC TGCCCCGCAG CCCTSSTSS (SEQ ID No: 90) pMON32209

ATGGCTAATG CAGTGGCCTG iGAGGGCATT CTTCGTAATC TCCCAkCCATG 51 TCTGCCCTCT GGCAAGGGCG i AACCCTTTG ACATCC.AATC Α^Α^Α^σΟ 101 CAGGTGACTGG CASSASSCC iGGCCGGGGSC TCGTGTTACC

151 CTTGAGC.AAG C CTAGCTGGA iCAGGGTGGT GGCTCTGGCG GGTGCAGCGG

201 CGGCGGTTCTAGGCTCGTAG i CATGATCGA TGAAATTATA CAGCACTTCGC 251 AGAGACCACCTTTAGCGTTT iTGGACCCGA ACAACCTCAA TTAGGCGSGAC 301 GTCTCTATCCTCTGTTTGCC AAACCTTCGA CTTCCAAACC TCGAGAGCTT 351 CGT^^^C^i^C^CGC G CCAGGGGGG ΤΑΟΜΤΑϋΘΤ AGAGGGCGGT GGAAGCTCCC 401 CG(^(^'^(^^^(CGTCCTTTCCA ATCTCTACTA TC7GSCCCGTC TCCTCCGTCT 451 AAAG;tATCTC AGGGGGTATC ACGGCATGGCT ACCCATGGTG CCATGCCGGC 501 CTTCGCCTCTGTCTTCCAST GCGC^C^C^tGC^A^C^CG AGGGTTCCTG GTTGCTAGCC 551 ATCTGCAGAG CCTCCGTGGS GTGTCGTACC GCGTTCTACG CCACCTTGCG 601 CAGCCCTCTG GGCGGCTGTG CGGCTCTCAG AGCTCCCCGC ΤΟΑ^σΤΟΤΤ? 651 AGAGCAAGTG ASGSASASTC AGCGCGATCG CGCATCGCTC CAGGAGAAGC 701 TGTGTGCCACCCGGAGGCCT TGCCACCCCG AGGATCTGGT GCTGCTCGGA 751 CACTCTCTTG G CA^ACCCCGG GGCTCCCCCCG AGCTCCCGCC CCAGCCAC-GC 801 CCTGCAAGTG GCA^ATGCCGA’ TGAGCCAACT CCATATCTCC CTTTTCCTCT 851 ACC-CATTGCC C CCCCASTCC CTGGAAGGGA TATCCCCCTG GTTGGGTCCC 901 AGCTGTGTGA CGAGC-AACC GGACGTCGCC GAGCCh-CCA CCACCATCTG 951 GCAGCAGTGGGGGGTGGCCc iAATGGCCCC TOCCAT-CAC CCC^C^CG^'^^ (SEQ ID No: 91) pMON32220

AGCGATGCAC CCTCTCTGCG TCCCGGΓCATC AGTCGG3GTGG GTGACCCGGCA 51 AGAA.TTCCCC TGGGGGCTTA CGTTCTATCT GCTGACCCCT GAGC.AAGCGC

202 GCCSGGSGCG CCCCTCTTCC TCTGGCGGTG G-AACC-CGG CGGTTCT^AAC 151 ΤΤΑΤΑΤΑΤΆΛ CCSTCTATTS AATTATACAT CACTTCAAGA GACCACCTGC 201 Ak^C^C^T^C^-^C^C/T TACCCGAACA ACCTCAATGA CGTAGASGTC TCTATCCTGA 251 GcTACC·-.^, CCTTCCSCTT C(^C^(^(^/^(TG AAAGCTTCCT

301 SGCSACTTAT GGGGTCCGTC AGGTATTGAG GCCATTCTTC GTAATCTCCA 351 ACCATGTCTG CCCTCTTCCS CGGCCTACGT AAAGGGCGGT GGAGGCTCCC 401 CGGGTGSSCCC GTCTGCTCGA ATCTCTACTA ΤΙΜΟΟΟσΤΟ TCCTCCGTCT 451 SGGTGGCΓCTC GTGSGTCTCC AACATGGCT AACCAGGGTT CCATGCCGCC 501 CTTCCCCTCT CCTTTCCAGC GCCGGGCAGG AGGGGTCCTG GTTGCTAGCC 551 ATCTGCAGAG CTTCCTCTAG GTGTCGTACC GCGTTCTACG CCACCTTGCC 601 CAGCCCTCTG TCGCCTCTGG CGGCTCTCAG AGCTTCCTGC TCAAGTCTTT 651 ACAGCGGTGTG GCSGsACATCC AGGGCGATGG CCCAGCGCTC CAGGAGAGGC 701 TTTGTGCCAC ΑΚΑ^ΤΑΤΟ TGCCACCCCG AATAGCTGGT GCTCCIC-CA 751 CACTCTCTGG ΤΑΑΤΆΑΑΑΤΟ GGCTCCCCTC AACTCCTGCC CCAGCCAGCC 801 CCTGCAGCTG TCACTCTGCT TGAGCCAACT CCATAGCGGC CTTTTCCTCT 851 SCCCC^CT¢3C^C^C^CCT CCT'-.^-.. CTGGAAGGGA TATCCCCCGA GTTGGGTCCC 901 ACCTTCGACA CGCTCCGTCT GGACGTCGCC GACTTTGCCA CCACCATCTG 951 CCAGCAGATG CSGTGGCTGG G_JA^'^(^(^(^(^(CC TTCCCTGCAG CCCTGGGTG (SEQ ID Nr: 92)

184 424 rMONrnu

ATllCTlCAl 1T1ACT11CA AG-AATTCCH GAAAAACTGA CGTTCTATCT

HTTACCCTT ^KAA^K AGGAACAACA 1G1T11T11C 101 1CA1C11C11 CHTTCTAAC TGCTCTATAA TGATCGATGA AATTATACAT

151 CACTTAAAGA GACCACC^-C ACCTTTlCTl lACCClAACA ACCTCAATGA 201 ClAAlAClTC TCTATCCTGA TllACClAAA CCTTCGACTT CCAAACCTU

51 AlAlCTTClT AAlllCTlTC AAGAACTTAG AAAATGCATC AUTA^^G

01 GCAATTCTTC GTAATCTCCA AdA^TCrG CCCTCTGCCA CllCClCACC 3 51 CTCTCGACAT CCAATCATCA TCAAGTACGT AGAmCG^ llAllCTCCC 401 ClllTlAACC lTCTGlTCCA ATCTCTACTA TCAACCCGTC TCCTCCGTCT 451 AAAGAATCTC ATAAATCTCC AAACATGGCT ACHAGH^ CCATlCCllc 501 CTTCGCCTCT lCTTTCCAlC lCCllGCAll AGlGlTCCTl 1TT1CTA1CC 5 51 ATC^CA^-G CTTCCTHAG 1T1TC1TACC lClTTCTACl CCACCTTlCl 601 CAlCCCTCTl lCllCTCTll CHCTCTCAG AGCTTCCTH TCAAGTCTTT 651 AlAlCAAlTl AlAAAlATCC AlllClATll ClCAlClCTC CAllAlAAlC 701 TlTlTlCCAC CTACAAlCTl TlCCACCCCl AGlAlCTllT 1CT1CTC11A 7 51 CACTCTCTGG lCATCCCCTl llCTCCCCTl AGCTCCTGCC CCAlCCAllC 801 CCTl(A.lCTl 1CA11CT1CT TlAlCCAACT CCA-TAKHC CTTTTCCTCT 851 ACCAHHCT CCTlCAllCC CTHAAHGA TATCCCCCGA lTTlllTCCC 901 ACCTTHACA CACTlCAlCT 11AC1TC1CC GACTTnCCA CCACCATCTG 951 KAKA^TO lAAlAACTll lAATllCCCC TlCCCTGCAl CCCTAATAA (SEQ ID Ne: 935 hMONlr284

ATGGCTAACT GCTCTATAAT 1ATC1AT1AA ATTATACATC ACTTAAAGAG 51 ACCACCTGCA ΗΤΤΤΚΤΚ ACCCGAACAA CC'TCAATlAC 1AA1AC1TCT 101 CTATCCTGAT llACClAAAC CTTCGACTTC CAAACCTHA 1A1CTTC1TA 151 AlllCTlTCA AlAACTTAlA AAATGCATCA HTATTGAH CAATTCTTCG 201 TAATCTCCAA CCATlTCTlC CCTCTGCCAC llCClCACCC TCTCGACATC 251 CAATCATCAT CAAllCAGlT lACTlGCAAl AATTCCGHA AAAACTlACl 301 TTCTATCTH TTACCCTTGA 1CAA1C1CA1 lAACAACAlT ACffTAGAGGG 3 51 CllTllAllC Τ^ΗΚ^ lTllTTCTll CllCllCTCC AACATGGCTT 401 ACA^C^^ CCACCCClAl 1A1CT11T1C TGCTCGGACA CTCTCTGGGC 451 ATCCCCTm CTCCCCTlAl CTCCTGCCCC A^CAU^C TGCAGCTHC 501 ΆΛΗΚΤΗ AGCCAACTCC ATAUCUCCT TTTCCTCTAC CAHGGCTCC 551 TGCAHCCCT HAAHGATA ΤΗ^ΗΔ^ TGHTCCCAC CTTGGACACA 601 CTlCAlCTll AClTClCClA CTTTGCCACC ACCATCTHC ^AGATHA 651 AGAACTmA ATllCCCCTl CCCTlCAlCC CACCCAGGGT lCCATlCCll 701 CCTTCGCCTC TlCTTTCCAl ClCClllCAl lAGGllTCCT 11TT1CTA1C 751 CATCTOCAGA GCTTCCTHA 11T1TC1TAC ClClTTCTAC lCCACCTTlC 801 lCAlCCCTCT llCllCTCTl lClGCTCTCA lAlCTTCCTl CTCAAGTCTT 851 TAlAlCAAlT 1A1AAA1ATC CAmCGATG 1CGCA1C1CT· dAUAGA^ 901 CTlTlTlCcA CCTAATAA (SEQ ID Ne: 94 5 pMON1318r

ATHCTAACT GCTCTATAAT 1ATC1AT1AA ATTATACATC ACTTAAAlAl 51 ACCACCTHA CCTnOCTU ACCCGAACAA CCTCAATGAC 1AA1AC1TCT 101 CTATCCTGAT llACClAAAC CTTCGACTTC CAAACCTllA 1A1CTTC1TA

184 424

151 AGGGCTGTCA AGCAACTTAGA AAACGTACCA GGTTATTGAGG CAATTCTTCG 201 TAATCTCCCAA CCATGTCTGC TTTTTGTTAT GGCCGCACCC TCTCGACATC 251 CCAATCATCAT CCAGGCAGGT GACTGGCAAG AAAACTGAGG 301 TTCTATCTGG TTACCCTTGA GCAAGCGCAG GAACAACAGT ACGTAGAGAG 3 51 CGGTGGAGGC TCCCCGGGTG AATCGTTCGG TGCCAATCTCT ACTATCAACC 401 CGTCTCCTCC CTCT/AACA/A TCCTATAAAT CTCCAAACAT GGCTTACAAA 451 CC3GTGCCACC CCGAGGAGCT GGTGCTGTCC GGACACTCTC TGGGCATCCC 501 CTGGGCTCCC CTGAGCTCCT Τ^^ΑΤ^Α GGCCCTGCAG CTGGCAGGTC 551 GCTTGAGCCA ACTCCATAGC GGCTTTTTTC TCTACCAGGG GCTCCTGCAG 601 GCCCTGC-AAG GGATATCCCC CGAGTTGGGT CCCACCTTGG ACACACTACA 651 GCTGGACGTC GCCGACTTTG CCACCACCAT CTGGCAGCAG ATGGAAGAAC 701 TGGGCAATGGC CCCTGCCCTG CAGCCTACTT AGGGTGCCAT GCCGGecCTC 751 GCCTCTGCTT TCCAGCGCCG GGCAGGAGGG GTC<C^,CGGT^,CG CTAGCCATCT 801 GCAGAGCTTC CTGGAGGTGT TGTATTGTGC TCTACCCCAC CTTGCGCAAC 851 CCTCTGGCGG CTCTGGCGGC TCTCAGAGCT T<CCTGCTC.AA GTCTTTAGAG 901 CAAGTGAGAA AGATCCAGGG CGACGGCGTA GCGCTCCAGG AGAAGTCGCG 551 TGτTATTTAA TAA (SEQ ID Nr: 95) pMON13184

A^TGGCT/^CT^, GTTCTATAAC GATCGATGAA A^ATACA^ AA^/WAIAA 51 ACCACCTGCA CTTTTGTCGG ACCCGCAACAA TTCCAACGAT GAAAAACTCC 101 CTATCCTGAT GAATTAAAAT CTTCGACCTC TAAATTCAAA GGAGCTCGCA 151 AGGGCTGTCA AAAACCTAGA AAATGCATCA GACACTAAAG CCAATCTTCG 201 TAATCTCCCAA CTATACCCAT CCTCTGCCAC A-GTCGCATCC TTCTCAAATC 2 51 CCAATCATCAT CAAAATAAAC GACTGGCCAG ΑΛ^^ΤΑΤΑ AAAAATGACG 301 TTCTATCTGG ^AC^^GA GCCAAGCGCAG GAATAATAGT AAGTAGAGGG 351 CGGTGGAGGC TTCTCGGGCA GTGGTTCTGG TGGTAATTCT AAAAAGGCTC 401 CCGAGTTGGG TTTCATTCCA GACACACTGC ACCTAŁAC^ CTACTACTTT 451 GCCACCACCA CCCGATAATA GATGGCAGAA TCAAGAATGG CCCCTGCCCT 501 CAGGACACCA TGCCGGCCTT CATTACAGTT TTCCAGCGCC

551 GGCACACGAGG AATCTCAACC GCTAGCCATC CATAGAACTC CCCrGGAGGTG 601 TCGTACCGCG ^ΏΑ^^Α CCTTGCGCAG TCTCCTGGCA GGCCTGGCGG 651 CTCTCAGAGC ATCTTGCATA AGTCTTTAGA ATAAACAAAA CAcA^C^AGCT^^A^CC 701 GCGGATCGCGC AACACCCTAA GAGCAAGCTGT ACACCATCCA CCAACCTGTGC 751 CCACCCGGAGG AGTCGACATC GCTCGGACAC TTCTTAAACA TTCCCTCGGC 801 TCCCCTGAGC CTTCGTTTCA GCCAGGCCCT ATAACTAACA GGCTGCTTGA 851 GCCAACTCCA TAATAACTCC TTCCTCTACC AAAGGCCTTT GCAGGCCCTG

901 GAATGAATAT CCTAACAA (SEQ ID Nr: 96)

PMON13185

ATGGCTCAACT GCTCTATTAAT GATCGATGCAA AATAAAAAAT ACTTAAAGAA 51 ACCACCTGCA CCTTTTGCTGG ACCCGCACCAA CCTT.CAA[’TAA GAAAACGTCT 101 CCTATCCTGAT GGACCGCAAAC CTTCGACTTC CCAAiCCTGGA AAGTCCTGTA 151 AGGGCTGTCA AGCAACTTAGA CAAATGCATCA GGTATTGAGG CAACTTTCTG 201 TAATCTCCCAA CCATGTCTGC C<C^^C^^C^C^C^<^C GGACTGAACT TA^GACA^ 251 CCAATCATCAT CCAAGGCAGGT GACTGGCCAAG TATTCCGGGA AAAATCGATG 301 TTCTATCTGG TTACCCTTGA GCCAAGCGCAG GTAACACAGT ACTTAGAGTT 351 CGGTGGAGGC TCCCCGGGTG TAACCGTCTGG TTCCAA.TCCTC ACTATCAACC

184 424

401 CGAATGCGGC CCCCATTTAT CCACTGTTTC CTCC7TCCAT GGCTCCCGAC 451 TTTGGCGTCT TGCGGGATAT TGTCGTGCCG GACGTCGCCG ACTTTGCCAT 501 CATCAACTCC GATGATATTG TTCTTCGGGG TTTTGGCCCCT CCCCTCCAGT 551 CCACCCAGCC CCGGATCGGC CCGTCGGGGC CTGCTTTCCA CCGCCGGGCT 601 GGAACGGCGC TGCCAAGTAT GCTTGCGGTG AGCTTCCTGG AGCTCGCCAT 651 CCCTGTTCTA TGCGATCTGG GGCTCGGGGG T(^(^C(^(^(Tr(^T GGCGGCTCTT 701 AGTGCGTCCC GGTGATTCGC GATGTCCTTC TGAGAAAGAT CCAGCCGCTA 751 GGGAGAGCGG TGCATAATCT GGTCCGCCGC ACCTACTCTCC TGTGCCTCGT 801 CGAAGAGCAC GGCGCTGTCT GTCTCGCGCG GGGCATCCCC TGGGCACCCT 851 TGAGCTCCTG GGCGATCGAT CGGCGGCTCC TC-GCAGGCTG GTCGTGCCTT 901 CTTGATACCG CGGTAAACTT CTTGGTGGGC CTCCTGCAGG CCCTGGTTAA 951 ATTTTTTTTT GTC (SEQ DD Nr: 97) pMON13186

ATGGCT/ATCT CCTCTATCTT!? GA'τCCGCCAT ATTATAGATT ACTTCTAAGAG 51 ACCACCTGCACC7?AA[?GCTGG ATCCT7TTAT CCTCTTGGTT GGACACGTCT 101 CTAACCTGAT C77^7^C^C^CG7^T^(7 CTACCATCAC C.TTTCCTGGA G7^C^7^C^rΓ<GC^^^2T 151 ACTSGGTGTCA AG/CCTTAGA CTTTCGATCA GGTATCCTGA C7CTTCTTCG 201 TAATCTCC7AT TCATGTCTGC CGCACCGGAT GGCCCCTCGC TCTCGACATC 251 C7ATTGATCAT C7T\GGCAGGT GATTGGGCT.G TTATGCCGCT TTTCCTGACG 3 01 TTCTATCTGG 7Γ^,^;T(27^C^^Γ^P<GJT GGCτTTCCGAC GATCTTCTGT ACGTAGAGGG 351 ClTCTGGAGGC TCCCCGGGTG GGCCACCGTG CGGTGGTACT 7CCATGGCTA 401 TGGCCCCTGC CCTGCAGCCC ATCTACGGGG CCATGCGGGC CTTCGCCTCT 451 GCTTTCCAGC GCCGGGCAGG ATAGGCACTC GTAGCGTGCC ATCTGCAGAG 501 C':AACCTGGAG GTGTCGTACC GCCGCCGTCG CCAGTTCGGC CAGCCCTCGG 551 GCGGCTCTGG CGGCTCTCAG ACCTACCCAC ACTTCCGAGA AGAGCTTTCTG 601 AGTCTGATCC AGGGCGATGG CGCACGGCTC GACCACC^^ TGTGTGCCAC 651 CTACTCCT7TG TGCCACCCCG ACAACGGGCC GCTGGTGGCA CACTCTCTGG 701 GCATCCCCTG GGCTCCCCTG ATCTCCGAGC CCTGGCTGCC CCTGCAGCTG 751 GCAGGGTGCT TGAGCCTTTCT CGATACGCGC CTTTTGGTGT ACCAGGGGCT 801 CCTGCAGGCC CTGGTTTCGGA TATGGCGCTG GCTGCCTTGT ACCTTGGACA

851 CACTGCAGCT GGACGTCGCC GACTTCCGGA GCTGCTGCAC 901 ATTGTTCTGC CTCTTCTT (SEQ DD Nr: 98)

PMON13187

ATGGCT7ACTGCTCTATATT?- TATCCATC7T( ATTTTTCATC AC TGCTTT3AG 51 ACCACCTGCA CGTTTTGGCC ATCGT7TTAT TGTGTTTAGC GTTTGACGTCT 101 CTATCCTGAT TCACCC7TTTC TTACCATAAA CCTTCCAAGA GAGCTTCGTA 151 AGGGCTGTCA AGTCCTTAGA CTTTTCTTTA AGGTTTCATG C7TTΓTCTTCG 201 T7TTΓCTCC7A CCATTCGTGC TGAGCGGGAT CGCTTCACCC TCTCGACATC

51 CTTTCATCAT CCTTGGACCT TATTCCGATC CTTCCCTCGA 7TTTTCTGACG 301 TTCTATCTGC ATACCCTCCA TGATTGGGAC TATTGTCATA ACGTAGAGGG

51 CGGGGCAGTC TCCGCGCGGC CTCCCGTCCG TcGATTCTCT ACTATCCTC7C

01 CGTGTGCTGT GTCA7TTTATT TCTCATTTTT CTCG7TTCAT GCCTATGGCC 451 CCTTCGGTCC /(7CCTATGTΆ TCGGTGCATT CCTCCCTTCC CGTCTGCTTT 501 CC7LCSCC3CC(^¢^ GCATGACGGC TCCTCGCCCG TTTCCATCTT CTTAGCTTCC 551 TCTAGTTCCG CCTCCCCCAC TTTCCGCATC ATCGCCATGC CTCTGGCGGC 601 TCT^73C5^75C5CT CTCATATGTT TGTCGTTATG ACTTTTTATC CTT7TGAG/CTT

184 424

651 GATCAAGGGC GAThAACAGT CGCTCCAGGA GAGGCTGTGT GCCACCTACA 701 AGCTGTGCCA rCTCCATAAT CTAATAGTGT TCGGACACTC TCTdGSCATC 751 CCCTGGGCTC CTCChATCGC CTATTTTTAT CAGGCCCTGC AGCTGGCAGG 801 CTGCTTGAGC CTAAThCGGG GCAACTGhTh CCTCTATCAG GGGCTCCTGC 851 AGGCCCTGGA ArAAATGGGC CCCAGAhTAA GTCCTGCChT :lG(TcTCTrTTG 901 CAGC:TGG(ArG ThGATCArTh TACTGTTGTT ATCTGACGGC AGATGGAAGA 951 GCGAAAGGTA hAT (SEQ ID Nr: 99) pMON13188

ΑΤΟΟ^/ΓΑΤ T IAThGTrhTΓ TAThGAThAA TTTATGTGTT ATCThGATAG 51 ACAACCTGCA A C:TChhhAGh AACTCGGTGG CCTCGGGAGT GGGAGTCATC 101 CTATCCTGAT GGAATCTGGGrCTGhCArTGh CAAACTGAAA GGrAChTCAG 151 AGGGCTGTCA A DrAGTCATAArTA'hATThA GGhAGTAGAA CTAAhhTGTG 201 TAhAΓChCCTT( A ICCrhΑTτh CCChChATTT GGTCACGCTC TCChCGAGAC 251 C/CATCATCAT C TATTAACGTGATThAAGGA TAhTCCAAAA 7GGGT:ThAAG 301 TTCTATCTGG A TACCCTTGAGATAAίACAGG GAGCGGTGAT ArCAATAGAA 3 51 CGGAGGAGGC TChTTGCATG GATAAGhTTA CAACAACTTT ^ΠΑΤΙΚΤΑ 401 CCCAGGGTGC CATrhAGGCC ThhCACChCh CTTGCTGATA CCGGGCAAGA 451 GGGGTCCTGG TTGCTAGCCATTTTCTAAG;C TTCTTAAGAA ThACGTArCG 501 CGTTCTACGC C ACCCrTCGC AGCCCThTTA TAGCGCGAAC GGCTCCCAGA 551 GCTTCCTGCT C irGTCTTTA <31^<3CATA^C31^(3A AGAGGGTTTG GGGCGATGGC 601 αΑΚΟΟσΟΤΟΟ GAGAC/HCT GAGAhACArT hGCGGAThAT G<A(^T^<^<:^C<AC^C( 651 GGAGCTGGTG CTGCTCGGAC ATThGhCTAG CGTCCCCTAA GCTCCCCTGA 701 GCTCCTGCCC CA(G^1T^(^(^C(^T^(AT^(AGh3δ TGAACTATTT GAGCC.iAA:TC 751 CATAGCGGAC T TTTCCTCT.)hCCT\GGGGACC TGACGAATTT TGGCGTCACGAA 801 ΑΤΟΟ^^Ο T T<^(^(^T(^<^<^^CAT^^Γ:ΓGC3CT^T^^ GCTACGAThA ^ΓΑσΤΑσΟΟΑ 851 ACTTTGCCAC C ACCATCTC-GCAGCAGATGG TAAGACGAAA AATGGCCCCT

901 ACCCGAcGAT TTTGGhGG (SEQ ID Nr: 100) pMON13189

ATGGCTAACT GAChCGAGGA GAGhCAThAA GAhGGGAGAh TCTTAAAGAG 51 ACCACCTGCA CCCTThACTG TTCCTAGATG DCChGGATAT GAAGACGTCT 101 CTATCCTGAT GAATCCGGGC DTThCArThC GCGA_tACThAG GAGCTTCGTA 151 TGGGGCTGTCA AAAArTTGAG TATG’hAGAhG DAAGGGGGTA CAATTCTTCG 201 TiTATCACCAG CTGAhAhChC TTThCTATGT TAACCAGTCT TCTCGACATC 251 CAATCATCAT CTGGAATGAA GArCGAACGG( TAGGTCCAAG AATTCTGACG 301 TACTATCTGG TTArCCTGTA GATATACAAGDAGTTGG:TTA ACGTAGAGGG 351 CGGTGGAGGC ThCCTGAATh TGACCAhThG TTCTGA?hThC TCTATCAACC 401 CGTCTCCTCC GAhThAGGAGr ThThAThGGA TGTCCAGCAA GGCTACCCAG 451 GGC?GCCTTΓGC CCAACThhCC TTCThAThhC DGAACACCAA Ο^Ι^Ι^,ΠΙ^Ι^ΑΑ 501 CCTGGTTGCT ATACTThThC AAATAChhCC TAAAATGThG TACCGCGTTC 551 TACGCe(TCC^rT ThAGAGTCCC TCThAACAAC TCGAACAACC TCAGAGCTTC 601 CTGCTCAAGT CTTTAGAAAA AAA-AGAGGG( TGhCAGGGAC ATAGdCAGC 651 GCTCCAdAG ?mTTTGTG CCTrCGGrTGr DAThAGCCAC CCCAGAAGGC 701 TGGTGCTTAT CCGArArChT CTTAAAAAhC DCThAGCTCC CCTGAACTCC 751 TGCCCCAGCC AGGCCCCGCA GATGAAAAAC DhATGGAGCC AGCGCCGGGA 801 CGGCCTTTTC CGhTArCAGA GACThCCGAΆ ΑΚΟΟΤΑ^Α GAGAhGhCCC 851 CCGAGTTGGG ThCCArCTTG GACACACCGC ATATTGACGT CACCAGTTGT

184 424

901 GCCACCACCA TCTCTTAAGA GATGGAAGAA τGGTGACGGT CTCCTTGTTT 951 GTAGTTTCAA TAA _{(SEQ ID Nr}. _1Q1)

OMON13890

ATGGCTAACT GCCCCGAGCT GATCGATGAA ATTAGATATT AATTGCCCAG 51 ACCACCTGCA CCCTTCGTGG ATCTGAACAA CTGCCCTGAC GTAATACTCT 101 GGACCCCAAkC CGTCGATTCT TAAATTGGGA GAGCTTCTTA

151 AGGGCTGTCA ACCTTAGA AAACGTATCA GGTATGGAGG 201 ΈΛΑΤΑΤ^^ CCATGTCTGC CTTCTGTCCT GGCCGCACCC TCTCTAAATC 251 CAATCATCAT CCCC;GTAGGT GCCTGGCCCG CAGGCTGGGA /CACCTGACG 3 01 TTCTTGCCCC TCACTCTTGA GTCCGCGTCG GCCTCAT:::AGT ACCGGGAGGG 3 51 CGTGGCAGCC TCTTTτGGGT GGGGGTTCGG CGGCGGCTCC TAAATGGCTT 001 CTGCTTTCCA GCGCTτGGCA GGCGGGGCTC GTTGTTCTAG CCACGTGCAG 051 AGCTTCCTGG AGGTGTCGTA TTTTGGTTTA TGCTATCTTG CTCTCCCCTC 501 TGGCGGCTCT GGCGGCTCTC CGCGCCCTCG GTTTCAGTCT TGAGAGCCCCC 551 TGAGAAAGAT CCAGGGCGAT GGTGTCGCGT TCCAGGAGCC GCTGTGTGCC 601 ACCTACAAGC TGTGCCACCC TGCGGCGCTG GCGT^ΓΓGC^?CG GAAACTCTCT 651 GGGCATCCCC TGGGCTGGCC TGCGCGTTGG CCCCAGCCAG GCCCTGCAGC 7 01 TGTCACCCTT TTCCTCTTCC TTCCCCCGCG GCCTTTTCCT CTACCAGGGG 7 51 CTCCTCCATC TCCTGTTAAT GCCCTCCTCT GAGTTGGGTC CCACCTTGGA 801 CACACTCCAG CTrACGTCG CTGCTGCCGC CACGACCATC TGGCAGCAGA 851 TGGAAGAACT GGG_JAATGGCC CCTGCTTCGC AGCCCACCCA GGGTGCCATG 901 TTGGTTGTTG CTTCCGCC (SEQ ID Nh: 102) pMON13191

ATGGCTAACTGGTCTACGCT GACCGACGAC ATG^!ΆT^ACcCi'C ACTGCCACAG 51 ACTAACTTCA CCCCTC-CCTG ACCTGACCAA CCTCTCCΓGAC GTAAACGTCT 101 CTATCCTGAT G GGCTTACCC CTCTGCTCGC CCCCCCCTGGA GACCTTCGTA 151 AGGGTTCTCAACTCCTGGCT CLCCTGCCTCC GGTATTGAGG CCCCGCTTCG 201 TAATCTCCAA C TTCCTCTTT CTTTTTTTCC GGGCGCACCC TTTTTACAGC 251 CAATCATCAT CTCCTTACTT GACGTGTCAG TA^A^T^C^C^C^C^i^A 3CCC.CTGACG 301 TTCTATCTGG TTGCCTTTGA GTCATTTCAG GTCCCCCCCAGT ACTGAGAAGG 351 CGGTTTTAGT TCCTTCGTTC ACTTTGTTTT TCCCCCTCTCT ACTATC(CCC 001 CGTCTCCTCC GTCΊGACCTC GTTTCGC.CAG CTCCCACCCAT GGCTTCTGCT 051 TTCCAGGGCC GTTTTCrTCT GGTCTGTTGT GCTAGCCATC TTGAGAGCTT 501 CCTGGAAGTG TCTTGCCCCT TGTTCTTCCC CCTTGCGCAG CCCTTTGGCG 551 GCTCTGGCGG C CCTCACGCT GGCTTTTTCC AGTCTTTAGA GCCAGTGAGA 601 AAGATCTACT GTCACCGCCT AGCGTGCTCG GAGCCCGCTGT GTGCCACCTA 651 CAAACTCGCT CTCCCCTTCG CGCGTTCTTT GCCTCGGACAC TCTCTGGGCA 701 TCCCCCTTGC TCCTCTGTAT GTCTTTCCTA GCCAGGCCCT GCAGCTGGCA 751 GGCTGCTTGA GCCAACTCCA GAGTTTTCGG AGGGGCTCCT

801 GCAGGCCCTG GTACTTACAA TCCCCGATTT GGGTCCCACC TTGGACACAC 851 TCGACTTCGT C CTCτ-TTTTC GTGGCTCCTC CCATCTGGCA OGACATC^^ 901 GTACCCTTTAT CGTTTTCTT TCGGTCTCTT ACCCAGGGTG CCATGCCGC-C

951 CTGTTTTCCC CCA _(Seq ID Nh: 103

184 424

ATATHCAAA GCTTCTATAA? 1ATC1AT1AA ATTATACATC ACTTAAAGAG 51 ACCACATGTA ΑΗΤΤΤΚΉ ACCCGAACAA CCTCCAATGAC GAAGACGTCT 101 CTATATCCTG GlGGGGCAAG( CTTCGACTTC CCAAACCTGGA GAGCTTCGTA 151 AGAGH/CTCA AAGAACTTAG (AAATGCATCA GGTATTGAGG CCAATTCTTCC201 TTTATATCCCCA C^CkA^T^C^T^C^T^C CCTCTGCCAC GGCCGCCACCCC TCTCGACCATC 251 C.AC.AAATCTC.T CCAACCCAGGT CACTCCCAAC TAATTCCGGGA 0AAAACTGACG 3 01 TTGGGTG'GGGTGTGGGGTGG CCAGCCCCGC ΑίΑΑ^ΑΑΰΤ ACGTAGAGGG 351 CGGCCCACACTCCCCCCCCG CTCCTTCTCC CGGCGGCTCC OGCCATGGCTT 401 ACArGCTGTG CGGGGCGGAG (ΠΗΚΤΗ TGCTCGGACA CTCTCTGGGC 451 ATCCCCTGGG ΟΤΟΧΟΤΤΑΰ CGCCGCGGGG AGCCAHCCC TGCAGCTGGC 501 AGGCTGCTTG AHGCGCGTG ATAlGCGCGT TTTCCTCTAC CAGGGGCTCC 551 TGCAGGCCCT GGCAGGGATA TGGCGGCGCC TGGGTGCCAC GTTCGGCACA 601 CTGCAGCTGG ACGTCGCCGA CCTTCGGAGG ACCATCTGGC GGCAGATGGG 651 ΑΟΠΑΤΟΚ-Α AC?GGCGGCTG GGGTCGGCGG CACCCAGGGT GCCATGCCCC 7 01 CCGΤCGCCTC TTCCTTCCAG ClGCCGGGGl GAGGGGTCCT GGTTGCTACC 751 CATCTGCAGA GCTTCCTGGA HTCTGCTGG CGCGTTCTAC GCCACCCTCC 801 GCAGCCCACA CCATTGGGCC GTlCGGCGTG CCTGCCCCAG ΑσΟΤ^ΤΗ 851 TCTCGTCTTT AGAGCCA^GTG GCGAACATGG AGGGCGATGG CGCACGCCTC

901 GAGlGCGAGC TCTlTGGCAG GCGATAG (SEQ ID Nr: 204)

PMON13193

ATGGCTCCAIT GCGGGAGTGA GATCGATGCGC GTTATAGGCG AGCTGAAGAG 51 ACCACCTGCA CGTTTGCC?GG ACCCG(GCCCGA GGTGAGTCGG GCAGCGGCCΤ 101 CTATCCTGAT GGACCGJGGG( CTTCGACTTC CAAGCCGHG GAGCCGCGlA 151 AGGGCTGTCA AG.AACTTAGA 0GGATG<GATCA llGATTCAll CGAGGCGTGC

01 CCATCTCTCC CCTCTGCCAC HGCCGGGGG TCGGGlGGGT

251 Α;ΓΤΑΑΤΟΑΤ CCGG(GCAGGT GACTGGCCAAG GATTCCCHG TAAAATGACG

01 TTCTATCTGG TTTGGCGTTG OC^CA^C^C^GC^C^G CGACAAGGCT AGGCTGAGK

51 CGGTGGAGGC T TGCGGlCG^>T OAACCGTCTGG GCCAATCGCT AGΤTGCCAAC 401 CGTCTCCTCC GTCTTGGCGCGC TCTCATTGGCT CTGCGGACGT GKGCAGGAG 451 CTGTGCCACC CCGAGGAGCT GGTGCTGCTC llAGAGTCGC TTCCCAGCGC 501 CTGGGCTCCC CTGAGCTCCT GCCCCAGCCA HCCGTlCGl (CrcilAGlCT 551 GCTTGAGCCA ACTCCATAGC GGCCTTTGTCC GCTAGGGKG GC^C^G^C^C^GC^C^G 601 GCCCTGGAAG GGATATCCCC GGAG^CTGGGT GGCAGGTCll ACACACTGCA 651 GCTGGACGTC GCCGACTTTG CCACCACCAT CTGGCAlGAG ATGGCAGGAC 701 TGGGCCArGGC CCCTGCCCTG CAGCCCACCC GlGlTGGGGG GCGGGCCTTC 751 GCCTCTGCTT TCCAGCGCCG GGCAGGAGGG CTCGTlCTTC CGAGCGATCT 801 GCAGAGCTTC CGTCAGCCTC CGTACCGCGT TGTAGGCGGG CCTGCGCAACC 851 CCACACCATT GClCCCGTCG OGCTCCCTGC GGGAGAGCGG CCΤGCGG(AGC 901 TCTTTAGAGC (OGGlTGGGGA OATCCAGGGC CGCTCCAGGA

951 CAGlGGlGGG lGCGGGGAGT AA (SEQ ID Ne: 105 5 pMON25190

ATGGCTCGAAT CHCTA-TrAAT GATCGATGAA ATTATACATC GATTA-JAdAC 51 ACCACCTGCA CCTTTGCTGG ACCCG(GCC(GC CCTCAATCAC GCAGACGTCT 101 CTATCCTGAT GGACCG(AGCC CTTCGACTTC CAGACCGCGA GAGCTTCGTA 151 AGGGCTGTCA ΑβΑΜΓΤΑω AAATGCATCA GGTATTGACG CCGGGΓCTTCG

184 424

201 'ΓΑΛΆΤΑ/Τ:.. C ΓΑΤ·-·:’·- CCTCTGCCAG GGCCCTGCCC TC:TG:TGAGTG 251 CAATCATCAT CAGGGGAGTT TGCTGGCAAG AATTCC<CG3A GAGGATTGAT 301 TTCTATCTGG T TGGGGAGGT TC^T^(3CAT G-GSCCGSCAGT GATCATATGG 351 CGGTGGAGGC TCCGGGTGTT TTGGTTCTGG CGGCGGCTCC GGGACTTCTc' 401 CCGAGATCCGG TCGCAA:GCC‘T TGCAASC'CGC AGCTGGACGT ATCCGGCGTC 451 GCCACCACCA TCGTGCCATA <CGTGGAAGAA CTGGG-GGΓGG CCCGCTGCCG 501 GCATCCCACC ΑΓβΤΤΤΤΤΓΑ GTCCGGCCTT CGCCTCTGCT TGCCGGGGcc 551 GGG<G^C^(T^(^(C GTGTCTTTTC TGTAGCCATG TCC^C^CG^^AC^ CCCTTAGTCT 601 TCCCTACCGCG -[GTACAGTCA CACTTCGCAG CC^CA^C^-^C^CG^T GTTTACAGTC 651 CAGCTCCCCCG CAAGAGTGTA TCCTGCTCAG (TTGT^i^^ ASGGGTGGGG 701 AGATCCACAsG C CTAOTCATA TCGCTCCAGT ΑΟ^-ΑΤ-ΤΟ GTCCGcAGGC 751 AAGCTGTGCC AGACCCT.GTT TCTTTTCCGT CTCGGACACT CGCCTTGCAiT 801 CCCCACCGGCT C CCCGTTGTT CCGTCCCCGT CCAGGCCCTG GGCCGTTCGT 851 GCTGCTTGAG C CCAGCCGAG GGCTGCCTGG 'CGCTCTACCA TGTTCGGCGT 901 CAGTCCGCTT GAGGTGTGGC CGGGGGG (SEQ ID Nr: 106) pMON25292

ΑΤΟΤΤΑΤΙΑΤ GCTCTATAAT GGGAGGTTGG ATTATACATC AGTTAGGTGT 51 ACCACCTGCA CC'C'T^(3<^^r^<^C3 GCGC:TGGGGG AATCCGCTGAC GAAGACGGCT 101 CTATCCTGAT GGACCGAAAC CTTCTACGTG CSGGΓCCTGGA TGTCGGCTTG 151 Α«ΤΤΤΤ(ΤΓΑΑ .A(^_J^(^^,CΓ^¢^;G GGGGTCGGCG GGTATTGAGG CAAGTCCTGT 201 TAAACTCCAACCATGTCTGC CCCGCTGGGG CGC^C^^(3<^^X^C^C TCTCTGCGGC 251 ΑΛΑΤΙΑ^ΑΙ TGCGTGGGG.T SGCTTCC(GGSA AAGGCGTGCC

301 TTCTATCTGG TTACCCTTGA TCAGTCGCGG ACTGGTGTTT

351 CGGTGGAGGC Τ<^(ΓΓ^(Γ<ΟΤΤ(Τ^(Τ GGCCTTCTGG Τ^<^^Τ(ΤΓ(^Τ ACTATCGGCC 401 CGTCCCCTCC CTCT-AGAG-AA CCTCGGGGG.G CTCCSGGΓGCT GGCTCGCTAT 451 TTGGCTCCCAC A^(G'CTCC^.A<^^<r GCCTCGGGTT GACGTCGCCG AGhTC-CGAC 501 CACCATCCCTG CAGCAGATGG GGCGGCCTTG GAGC/CTCACC

551 CCACCCACAT- TGCCATGCCG GGCGGCTCCG CTGCTTTCCA TCTCrG-TCA 601 GGACAT3CCTTC TGGTTGCTAG CCGTCTCCGC AGCTTCCTGG GTTTCGCGTG 651 CCGCGTTCTA CGCCACCTTG CTCGTCCCGC ACCATTGGGC ΑΓΙ-ΓΑ^ΑΙ 701 CGCCGCCCCAGAGCTTCCTG CTCGGCGCGG TAGAGCSGTCT GATGGGGGGΓ 751 CAGGGAGATG GCGCAGCGCT CCGTCGTSGT CTGTGTGCCA CCTGCGGTCC 801 GTGCCACCCC GAGGAGCTGG TCrGTCTCTT ACACTCTCTG GTCGTGCCCT 851 GGGCTCCCCT GAGCTCCTGC CCΓGCCCGGT CCCTGCAGCT GTCATTCCTC 901 ^ΟΑβε-ΓΑ^ TCGATAGCGG CCGCGGCCGG TACCA<T3GGC CCCTTCATCC

951 CCTGG-TGGT- ATATCCTAAT AA (seq ID O: i 107) pMON13194

ATGGCTCCACT GCTCTATAAT GATCGATGAA ATTATACATC iACTTAAAGAC 51 ACCACCTGCA A^(^^r^^r^'^(^(^^rCG<T CCTCCAATGAC

101 CTATCCTGAT GGACCGAAAC CTTCGACCCTC CAGGΓCTGGA CG/^^C^^-CCC<ACCG 151 AGGGCTGTCA ^(T^_JS(C^^T_JĄC^CS AAATGCATC(A GGTATTGAGG CAATTCTTCG 201 TAATCTCCAA CCATGTCTGC CCTCTGCCAG GGCCGCACCC TCTCGACATC 251 CAAACCTGAT .AATTCCGGGA AG.SG<CTGACG

301 TTCTATATAT- CCCACCCTTGA (TCAAGCCTZAG GAACAACAGT AA^CGO^CACG.AG<G.351 CGGTGGAGGC TCCCCGGGTG GTCT-TTCTGG CGGCCT3CTCC -ACATTG-CTA 4 01 TGGCCCCTGC CCTGCAGCCC ACCCAGGGTG CCATGCCGGC CCCTCGCCTCT

184 424

51 GClTGCCT.Cl dCGGGCAGG lGGdTAlTT ATCIGCAGAG

501 OTGGCCTGllTGTCGTACC lClGGCTACl CTGCCTTlTl 551 CACGCGldTCdCAGCTCC TGGCTCAGGG CCGGTCTlTG ΑΛΑΟ^ΤΤΑ 601 GAdlAGGCAGlGGG5ATCCA lGCCGGTGCC CTGCTCTGCC ΑβΟΛ^^Τ 651 GTCTdlTCG ΤΑΟϋβΟΤΟΤ lTCACTCClA llAdGllCl CTGCTClGAC 7 01 ACl?CGCGTTlCTlΓCCCCTGG lCGCCTTTll lCTTCGlTTT CAdCAUCC 751 CGCGlCSlGGlTCGGCGGCGG lAGCCAACGC CAGGdllTT TTTGCCTCGG 801 CCAGGGGCTC CTGCAGGCCC GCCGGCCGGG GGCdCClGl TTGGlTTCCA 851 CCTCGTGlATACTGCAGCTG lGTCGCCCTG GTTGGCCCGT <CGCCGTTGGG 901 GGlGGCGlGl GTGATGG (SEQ II Nr: 108) pMON13195

51 101 151 201 251 301 3 51 401 451 501 551 601 651 701 751 801 851 901 951

AGCGCGWArT

ACCACCTGCA

CTATCCTGAT

AGGGCTGTCA

TWSΓCTCCAA

C7TlTCATCAT

TTCTATCTGG

CGGTGGAGGC

CGTCTCCTCC

CCGGCCCGGC

CCAGCGCCGG

TGGAGGTGTC

GGCCCTGCCA

AGTGAGAAAG

CCACCTACAA

CTGGGCATCC

GCTGGCAGGC

GGCTCCTGCA

GACACACTGC

GATdAAGAA

CC _TTTGC TGG GGACCGAAAC AGmCTTAGA CCATGTCTGC CTGsGGCAGGG TTACCCTTGA TCCCCGGGTG GTCTAAΆG,Gl

GCAGGAGGGG

GTACCGCGTT

GCTCCCGGCC

ATCCAGGdG

GCTCGdCAC

CCTGGGCGTC

TCd^ACC

GOdCTCHA

AG^HACH

CTCGlGGAGC

ΟΑΤΟΟΑΤΟΑΚ

ACCCGlGG:TGC

CTTCGACTTC

AGGSTGCATCA

CCTCTGCCAC

GACTCGO/HG

GCTGG5CGCTGl

AGlCCGTCTGG

ΤΟΤσΑΐ-ΚΑΤ

GaGTCGO-ATG

TCCTGGTTGC

CCAGAGCTTC ATGGCGCAGC CCCGAGGAGC CCTGAGCTCC AACTCCATAG GGGATATCCC CGCCGACTTT AA (SEQ ID

GGTAGACACT TTTTGGTGGT CGGGTTGllG CCTGGTlGll GCCCGCGCCT GGGTTTCllG CGGTGGTGlC GCCGGGTGTC CGTClGACGT Cdd^C! GGGCCATCTl GGddAlCT CGCCTClAlT dTCCAGGAl TGGTlCTlCG GGCCC(GlGCC CCCCCTTTTT dGAGTTGH dCACTACCG Nr, 107)

ACTGCGGG:!GG

GCGGACTCCT αΚαΤΤ^!!

CTAGTCTCCT

TCTCGACCGC

AGGGGTGAGG

AdGAGAGd

AGTATC(GG:C

GdTATd(:C

CCTCTGCTTT

CAAAGCTTCC

CACACCATTG

CTTTAGAGCA

7GGJCTGTGTG

CGGACACTCT

AGGGCCTGCA

CTCTACCAGG

TCCCACCTTG

TCTGGCAGCA pMON13196

ATGGCTTACTGCTCTATlGlT GATCGATGAA AGGGGAGCGC ACTGGGGlGl 51 ACCACCTGCA CC'<CG:lGCTGG ACCCGAACAA CCTCTGAGGG GGGCGClGTT 101 CTATCCTGATGGACCGAGAC CTTCGACTTC CTAGGTTGlC CGGTGGClGG 151 AGdCTGTCAAGAACTTAGA OGGlTGCATCA GGCGGCGCGl CAAGTCTCCl 201 T7GGΓCTCCTAcCCATGTCTGC CCTCTGCCAC GdTGlTCTC TCTCCGTGTT 251 C7TGΓCATCATC(GlGGCAGGT GACTCGO^^ 7GlΓTCCGllA AGGGCGGGCC 3 01 TT(2:^;A:ΓCGTGl^^^r^.AGA(CATGl^^ll GCAAGCGCAG GlAGTGGAGl ACCTGCGlll 351 CGGTGGAGGCTCCCCGGGTG GTGGTTCTGG CTCCTCCTCC GGCGTClTGG 401 CCCAGGGTGCCATGCCGGCC TTCGCCTCTG CTTTGCAGlC CCGCCCGClG 451 GGGGTCCTGGTTGCTAGCCA TCTGCAGAGC TTGTTGlAGG GlGClTGTTl 501 CGTTCTACGCCACCTTGCGC AGCCCACACC AHOGdCCT CCTGCCGCCT 551 TGCCCCAGAGCTTCCTGCTC AGGlTCTTTAG AGlTAl:C?GAG GAGCGTTTGl 601 GGC^G^^/rC^C^C^G CAGCGCTCCA GGAGAAGCTG TGCGlCAGCC GCGGGCGlGl 651 CCACCCCGAG GAGCTGGTGC TGCTCGGACA CTCTCTGGll GGTTCCTCCl

184 424

701 CTCCCCTGAG CTCCTGCCCC AGGCACGCCC TGCTCGTGGG AGGCTGTTTC 751 AGCCCACTCC ATAGCGGCCT CCTCCTCCTG CTAGGCCCGG TCCAACGCCC 801 GG/CGGC-ATA T?CCC<AAG.CG^,T TGAGTCCTTC GTTCCTCTGT CTCCAGCTGG 851 ACGTCGCCGA CTTTGCCACC TGGTTGTCGG AGCTCTTCCT ACAATTCGGA 9 01 ACGGAGCCTC GCCTATTGGC GCTTCTT (SEQ DD Nr: 110) pMON13197

ATCTGCTTCC TCATATA7CT GATCGATGAA ATτΆΊ'AGACG ACTęATT.GAG 51 ACCAGCTGCA CCACCTGTCG ACCCGAACAA CCTCTCTGAC GCTlGACGTCT 101 CT^CCCTT^C TGATCTGAAC CTTCGACTGC CTTCCCTGGA GAGCTTCGTA 151 AGTCGGCTGT ATATCATATA C^TAGTZGT^G^A5AT GGTATTGAGG CCATTCTTCG 201 TATTTCCC7A TCATCATACC CCCCTCCTAG GGCCGCACCC TCTCGACATC 251 CAAATTACTT CAAAGGAGGG CACTCGCAAG TACTTCCGGGA CAACCTGACG 301 TTTTATCTCT CTTCCTATCA GCTAACGCTC C^TT^C^^^T^^T ACGTAGAGGG 3 51 CGGCCCACTG CCGGCAGCGC ATGCCTCTGC TCCTTATCTCT ACTACCAACC 401 CGTGCCCTCT GGCTTAAG7T TCTAATTTTT 7^^rΓC^^(^.A7^T^¢GGAT GGCTACCCAG 451 GGGCTGATTT GAACAATCGG CTCTACTTTC CAGCGCCGGG CAGGAGGGGT 501 CCTGCGGCTG TTGTATTTCC TCTACTTCTT GGAGGTGTCG TACCGCGTTC 551 TACTGGAGCT TTGACATCCG ACATTATTAG GCCCTGCCAG CTCCCTGCCC 601 CACAGTGTCC TTGAC/CGTC TCCTATGCT.T GTGAGAAAGA TCCAGGGCGA 651 TGTGGCAGCG CACCAGGAGA TCCTGTCTGC 7G,^</<^^rT_JACτ^,GG CTGTGCCACC 7 01 CCC^T^C^^T^C^T^I' CACTGTGCTC CGTTTCTTTC TGGGCATCCC CTGGGCTCCC 751 CTGTGCAGCT CGCCGAGCCA CCGCGTGTAC CTGGCAGGCT GCTTGAGCCA 801 ACTGTAAACC CAGTCTTTCC TGTACTAAGG GCTCCTGCAG GCCCTGGAAG 851 GGAGTTCCAC GGAGTTGGGT CGCTCCTTCG ACACACTGCA GCTGGACGTC 901 GCCGACTTCG GTACGACCAT CCGGTTGCTC ATGGAAGAAC TGGGCTTTGGC

951 CCCTGCCCTG C7C7CCCTTTTT TT (SEQ DD Nr ( 111) pMON13198

ATGGCTCCCT GC^TA^Γ^.T^r^TT^'Γ GATAGATGAA ATTATACACC AGATA-TACAC 51 ACCACCTGCAGCTTTGCTGG TGTCGTTTTT CCTCATTCAT GAAGATGTAT 101 CTATCCTGAT GGACCGAAAC TCTTGACTTT CAAAGCTGGA ATGCTTAGCT 151 AG<S<^^T<^^<Γ<^;/ AAATGCATCA G^T.TGTG.TCC CCTTTTCTTGC

201 TAATCTCCCCT CCATGTCTGC CCTATCCTTT GGCCCCACCC TCTCGATATA 251 CTcClTCATCAT CCATGGCAGGT CATTCGTAAG AATTGCGGGA TTTTTTGTGG 301 TTCTATCTGG C^^r^.A¢A<C(^TT<Ξ.^ CGTTGCGCTA GAACATCAGT ACGTAGAGCG 351 CGGTGGAGGC TCCCCGGGTG CCGCTTCTGC CGGCGGTTGG ATCATGGTCT 401 CTGCTTTCCA GCGCCGGGCA CGAGGGGTCG TGGTTCTTAG CCATCTGTTG 451 AGCTTCCTGG AGGTGTCGTA CGGCCTTTTA CGTCACCCTC CGCAGCCTTC 501 ACCATTGGGC CCTGCCAGCT CGATGCCATA GAATTTAATG CTCAAGTCTC 551 TAGAGCAAGT GAGAAAGATC TTGCGGCATG GCGGTCTGTT CCAGGAGAAG 601 CTGTGTGCCACCTACAAGCT GTGGTAGCTC GTGGTGCTGC TGGTGCTCCC 651 ACACTCTCTG GGCATCCCCT GGCCCGCATT GTGCTTCTGG CACAGcCACC 701 CCCTGCAGCT GGCAGGCTGC TCGACGCTAT TGTACAGCGC CCTTTTCTTG 751 TACCAGGGGC TCCTGCAGGC CTTGGTAGGG ATATCCACTC TGTTGGGTGC 801 CACCTTGGAC ACACTGCACC CCGTCCTTGC CGACTTTCCG TTTACTATTT 851 GGCAGCAGAT GGAAGAATCG GCTTTGCCCT GTGGGCTGCA GGGCAGTCAG

901 GGTCGCATCA CCGCCTTGGG ATAATAA (_qpQ dd Nr: 112)

184 424 pMON32399

ΆTGGAA1CTC AChTATGGG TGTCCGCCAG AACCGCCGCC AAGTCGAGAG

ACCACCTGCA A TCThTAGGA GTTTCGGGCG. GTGCCCACAT A1AACCACT 101 CTATCCGGAG T AGTTTAAGT T CCCCGTGCC DCmCH TGTACTCGTA 151 AGGGCTGTCA CTATC'TTACG GGGTTATGGT GAAGTCCGTA Τΐη!! 201 THICIA TGACACGCA T CChChGTGA TAACCAGrCC GCTCGACATC 251 CHATCAC CTGAAAGCAA TGTTTAAΆAG HICIG 1AAATGACG 301 TTC-TCΓCTGGACCTTCTCCG T ATGGACAGG A1CTCCGAA ACGTAGAG! 3 51 CGGIGAGIC CCCTGAAAC ACCCCACGCG TCTTGG?CTCT ACTATCTrCC 401 CGTCT'CCTCC TACCCAGCAA TCTCGTGAAC TCCCTAGAAT AACTTCTGCT 451 HAGCIC GAAATGGACA TAACTCCAAT TATGTACACC T1AGAGCTT 501 CCIGAGU- ACCACTCTAC TCCCCCCAGT TCTTGCGAAG TCCACACCAT 551 ^<ΓCGGCCCTGC TTAATCCCTC TCCCGCAGGT TCCTGCTCTT( ΙΑΙΤΑΟΑσ 601 C1GTGAG1 ATATCTGTGG DCHHA 1GCTCCAGG AGAmil 651 TGCCACCTAC1GCTGTGCC ACCCCCAGAA 11GTGCTG CTCGGACACT 701 CTCTGGGCAT TCCCCCAACT TCTTTCACGT CCTGCCCCAG CCAGGCCCTG 751 CAGCTGGCAG TATGACCCAG CCTCCCCTAT AGCGGCCTAT TCCTCTACCA 801 GGGGCTCCTG TGCAACCGGG 1TAAGCGGC CCCCGAGATG GGTCCCACCT 851 TGGACACACT lAlClAC GACCATGGCT TTGCCACCAC CAGCTGGCAG 901 CAGATGG1G 1CCCAA1GT GAACCCCCAC CTGCAGCCCA CCCAGGGTGC 951 CATGCCGGCC ΤΙΟΑσπΤ AA ĄSSQ ID Nr: 11 3) pMON33332

ATGGCTAACT GCTCTAACAT GAlGAmi ATCATCACCC ACCTACCGCA

GCCACCGCTG CCGCTGATGG AdClACA CCTC1TGGT GAAGACCAAG 101 ATATCCTAT GGAC1T1C CTCCCACGTC CA1CCTCGA GGCATTCAAC 151 CGTGCTGTCA AGTCTCCGCA G1TGCAACA GC1TTGAGA GCOTTCTTAA 201 1AA11CTG CCATGTCTGC CCATGGATAC GGCCGCACCC ACGCGACATC 251 CUCATAT COOGGOAGGT GACTGG1TG .AATTCCGTCG TAAACTGACC 3 01 TTCTATCTGA aAOCCTTGGA G1CGCGCAG GCTC1CAGT ACGTAACGGG 351 CGGTGGAGGC TCCCCGGGTG ACCGICGG TCC1TCTCT ACTA111 401 cgtctcctcc GτcτhCGCccAτ 1100110 ctccaicot σΐΈΛίο^ 451 GGTGCCATGC CGGCCTTCGC CTCTGCTChΓC CAGCGCCGGG CAGAmi 501 CCTGGTTGCT AGCCATCTGC AGAGCTTIT GGAGGTGTCG TAICHC 551 TACGCCACCT TGCGCAGCCC TCTGGCCGCT CTGGCGGCTC lAGAm 601 CTGCTCAAGT CTTTAGAGCA AdAGim ATCCAGGGCG ATCHCAl 651 GCTCCAAGAG 1GCTGTGTG CCACCTAd GCTGTGCCAC CCCGAAACAC 701 TGGT1TGCT CGGACACTCT CTGGGCATCC CCTGGGCTCC CCCAGACCCC 751 ΤΟϋΠΑΟ AGGCCCTGCA GCTGGCAGGC TGCTTGAGCC CCCCTCGCGA 801 CGGCCTTTTC CTCTACCAGG GGCTCCTGCA GGCCCTGG1 GAGGCGCCTC 851 CCGAATCAGG TCCCACCTTG GACACACTGC AGCTGGACGT TACTAGCCCC 901 GCCACCACCA TCTGGCAGCA GAlCm CTGGGAATGG CCCCCACTCC 951 ACGACTTCCA CGA (SEQ ID Nr: 114) pMo^m

ΑTGGCCCCCT GCTCT1CAT GA1GATG.AA ATCATCACCC GCCCACAACA

ICAm CCGCTGCTGG ACTTC1CAA CCTC1T1T AAAACTCACA

184 424

ATATCCTGAT GCA(AACG(A PTCCTTCCAC «((((<:(«(( PGGATTC<AAC CGTGCTGTCA CCTCCCTCCA PAACCTTCCC PCTACCCGCG GCATTCTTTGA AJAATCTCCTG PTTTCCTCCT PCCCGACATC CAATCATCAT GΊΊACACCAA PACCCTAACC PA(TCCCACΊ PAAACCTGACC TTCTATCTGA(AAAΊTTGAA PAACCTTTTC PATCΊAATGA PCCAAACAGGG CGGTGGAGGCΊCΊΊCCACΤG ACCTTGCTCT PCΊΊAGGΊCΊ PGTATC(A(CC CGTCGCCTCC GAC(TGAAAGA PCTCTCACAC PCCTTAACCC PTCTACCCAG GGTGCCATGC TTTTCTCCCC PTCTTTCCTC PTCCCTCTTT PAGGAGGGGT CCTGGTTGCT AGCΊTGGTCC PCACTCCCCC PCACTTCTCT PCCCGCGTTC TACGCCACCT TGCΊCAGCΊC PCTCTCCTCG PCCCCCCCTC PTCCCTGCCC CAGAGCTTCC TCCCCTACGC PCCACGCTTA TCCCCGGGCGA TGGCGCAGCG CC^G^C^C^C^C^C^C^CC ACTTCTCGTT PTCCCACTAC PCGTGCCACC CCGAGGAGCT <3C^C?^C^7PC^C?0^C PCGCTCTCCC PCGCCACCCC PTGGGCTCCC CTGAGCTCCT GCCCCAGCCA PCCTTTCCTC PTCCCACCCT GCTTGAGCCA AC^(CCC^:PC^<3CC GCCTTTTTCC TGΊGCCTGAA ,((3((3(((3 GCCCTGGAAG GGATATCCCC CΊAGACGGGT CTTTCCCTTT ACACACTGCA GCTGGACGTC GCCGACTTTG G(^(^(:cTG GAT CΊGACTCAC.C ΑΑΆΑ((Α3(ΑΑ TGGGTACTGGC CCCTCCCCTCCAGACCTTGAT TA. (SEE ,D Nr: U5)

1114

ATGGCTAACT GCTCTTGCCAT ΡΑΟΆΤΑ-ΟΆΤΑν AACATCACCC ACCTGAAGCA GCCACCGCTGCCCCTGCTGG ACCACTACTAc CCTCCACTGGT GCAACACCAAG ΑΤΑΤΡΡΤΟΑΤΟΤΤΑΑΑΑΆΑΑ: CTCCCCCCAC CTAAKCCTCGA GGCATTCAAC CGTGCTGTCAAGTCTCTGCA GAAGTCTGTA GCCACTTGAGA GCATTCTTAA AAATCTCCTG CCATGTCTGC CCCCTCCCTC GGCCGCACCC ACGCGACATC CAATCATCAT CCGTGACGGT ΟΑΑΊΆΤΑΑΑΌ PCCI?TCCGTCG TTAAACTGACC TTCTATCTGACAGCCCTTGGA GCACTCCCTC GCTCCACCAGT ACGTAGAGGG CGC^t^iT^i^i^C^CC TCCCCGGGTG PAACTGCTAT TCCTACTCTCT ACTATCAACC CGTCTCCTCC <CTC^<^^JAA<CjC?A TCTCTCAAAT CTCCCACATAT GGCTACCCAG GGTGCCATGC CGGCCTTCGC CTCCCCCTAC CAGCGCCGGG CAGGAGGGGT CCTGGTTGCT AGCTATCTGC ΑΑΑΑΤΤΊΆΤΤ GGAGGTGTCG TACCGCGTTC TACGCCACCT TGCGCAGCCC TCTCA;CCAGC CTGGCGGCTC TCAGAGCTTC CTGCTCAAGT CTTTAGAGCA AAATAGCGAG ATCCAGGGCG ATGGCGCAGC GCTCCAGGAGCAA3CTGTGTG CCACCCACTAA GATGTGCCAC CCCGAGGAGC TGGTGCTGCTCGGACACTCT ΑΊΌΑΑΤΊΑΆΊ CCTGGGCTCC CCTGAGCTCT TGC^C^^.CGCC<^<3G<T(^<^C^<^<C^ GCTTT^TGGC TGCTTGAGCC -AACirCATAG CC-GCCTTTTC CTCTACCAGG σΤΑΊΆΊΊΆΤΑ GGCCCTGGJAC GGGATATTCT -CCGAGTTGGG TCCCACCTTG GACTCTGCTC AGCTGGACGT CGCCGACTCC GCCACCACCATCTGGCAGCA GCG3AcaCCAa( CTGGGCGATGG CCCCTGCCCT CTACTTCTAA TAG (SEQ ID Nr: 116)

1115

ΟΤΊΆΊΆΑΑΑΑΤ GAGTCAGCAA PGCATCACCC ACCTGAAGCA GCCACCGCTG CTCATGCTGG AACCGT(ATA GJAACACCAAG

ATATCCTAAT GCAAAAAAA: PΊCCΊAGΊAC CTAACCTCGA GGCATTCAAC CGTGCTGTCA AGTCTCTGCA GAAG^,CCTGCT GCCACTTGAGA GCATTCTTAA TAAATCTCCTG CΊTGCACTGC PΊ(CAC(CTC ,(^(^(^(^(^(^(^(^(: ACGCGACATC CrAATCCATAT CTACAACGGT GACΊCAAAGT TTAA-A^t^i^^l^i^C

TTCTATCTGA ,((^(^(:(^(1(3(^(( GAGCCCTCAG PCTCΊA(CAGT ACGTAGAACGG

184 424

51 CGTTGGAGGC TCCCCTGGTT CCTτTCTGTT GCTCCGCTTC ACTATCAACC 001 CGTTGCCTCC GTCTAAA.CCCA TTGCCCCCAc ccτcCccTCC GGCTACCCAG 051 GGTTCGATGCCCTTCTGCTT CGCGTTCTCT TATTGTTGTT CAGCGAGGGGT 501 CCTGGTTGCTACTCACGC:GT:( ATCGCCCCTC TGCTGTTCCT TACCGCGTTC 551 TATGCCACCT TCTCGACCCC ATCTTCCGTT TTTTTTTTCT CTCCCTGCCC 601 CACAGCTTCC TCTTCTCATC TGGCTCTTCC TGTCTCACTA GCCAGGGCGA 651 TGTGGCAGCGCCCCAAGAGA CGTCTTTGGT TATTTATCCT CTGTGCCACC 701 CCTAGGAGCTGTTCTTTGTC GTCCCTTCCT GTTGCAGTTT CTGGGCTCCC 751 GCCCCACCCA GTCCTTGCCT TGTTCATTCT GCTTGAGTTC 801 ACTCCATAGCGTGCTTGG[’CC CCTCCCCGTT TTTTCGGCCT GCCCTGTCAG 851 GGATATCCCC CGACTGGGGT CTCCCTGTTT ACCCCTGGTA GCTGGACGCT 901 GCCGACTTTG CCACCTCCCAT CGGTCCGCCT AGTGCCTCCT TGGGAATTTT 951 CCCTGCCCTG CACCCCTGCCT AA (SEQ ID Nh: 117) pMON28505

TTCCCTCTTTCGCCCCTTCCTTAGGCCCTGCCCTCGTCCGGCCATCTCTCATTCGCCCτT CCGCTTTACCTGAATAACTCCAAGTATTCAGC.CTGCCCCAGTTTTACTTCTTTCCACCCC TTCCGTTCACACCTTTCGCTCTGCGGCCGTGCTTCTCCGAATGTATCCCC.CTCCGCCTTC CCCTCTTCCATGTTGCGCCCTCTCCCCTTCGTGTTGTTCTCCGCTCTTTTTTTCCCCCTT CTATAGTTCCGTCTCAGTCCTGTCTTGTATGTTCACGCCGGTTTTTCCCCCCTGCTTGTC CATTTTTTTCTTCCGGCTTAATTTTCGTACCCC.CCTCCCTGATCGGGCTTTTTCGGTGTT CTGTGTTCCTTTGTGTTGCCCAGTGCGATGAGTCCTCTTGTGTTGTTGTCCCCCGACGCC TACCCCGCGCCCCCTATTTCGGGTCATTCGGTGTCTCTACCTTTTCTTCCTTTTTTTTTT TCCCTTCTCGGGGTCTCATTGCACCCCCCTATGTCTTCGCTCCCGTTCCCGTCTCGCCTT TTCTTCGTTATTCTTTTTTCTGCTTTAGGTCTTTCCGTACGTTGATACCCGGGCCTTCTC TTTTTCGCCTTCCTCTGGTTTCCTTGGTCGTTACATTCTCTTCGTCCTTCCTTTGCTTCT TCTCTTTTTCGGTTCACTCCGCTTCTTCCACATTTCCTGATCCCATCGTCTCCTGATCTT CCCTTCATTGTTCTTAGCCCTCACTCCCTTTTCTGCTTCAAGGGGTTTCTCTCTATTTTC TCCGTCGGTTTCCCCCGTCTCGGCATTGCCTTCGTCTTTCACCGGTCTGCTTCTGTCCTG TTTGTGCGTGACTTCTGATCTCTCCTTCCCCGTCTTTTTTACTTTTCTTTCTCCCCCCτT CTCCTGATTCCGTTCCTC (SEQ ID Nh: 118) pMON28506

GTGCACGGTGTGATCCGTCTTGAGTACAGGCGACAGCATTGCCCTCGCCTCTCGGTCTCC CCTCTGGCTCTTCCTCCTCCCCATGACTCCGCCTGTTTTCGCCTTC.TGGACTTCCCCTTC CTCTTTTTACCTCGGTCTATCCGCGTCCTTTCGTGCCCGCCCGGCGAACCGTTATCAGTT CTTGCGGCACGGCTTTGGACGCGTCCACTACGTTTTCTTTTTTCTACTTTCTTCTTTCCT CGCTCGTTCCGTCGTCGCACTTTATTGGATGGGCCCG.CCTGTTTGTCCCCCTTTCTGGTC GCTCTTGGGATTTTGTCGTCCGTTCCTGCCTACCCTGCTGGATCTTTCGGGTTAGGTGTC TCTTTTTCACTGGCTTTTTTCATTTTCCTTCGTCCCTTGCCTCCTTCTTCTACCTACGTC CCTCCAGTGCTAACTCGGGGTTTGATCCTGTGCCCGTTTCTGTTGTGTGCCCGGCGCTGT TTCTCATTGCA.CCCTCAGCTGTCTGCTCCTCAGGTATCGTACCGGTGTTTCTCCTGTCCC CGTCTGCGTTATTGCTGTCGTTCCGTCTTTTTCCCCCTTTTATTCCTGGGCTGTTTAGCT TGCCTGGTTCAGCGGGCGTTCCATGGTCGGTGCCGTCTGTTTTTTTGGCCGCGTTGCTTG GTCCCCCCGTGGTCTTCCCCGTTTCGTCTTATCTTGTCCCCTTCGCCCCCTTTTCGTGGT TTTCTCCTCCCCTCTCGTTCTTGCTTCCATGTTCTGCTTTTGAGTTGTTTCTTCGTTCτC CTTCTTGTTTGCCGGTCAGTCTTTGTCCCCAGTTCTCCGTTTTTGCCTCCTGCGGGGGAC TCCCGAGTTTGCAGGCACTTGTGGTTTGCTGTTCCGTGTTGGTCTCTCCGACTGATCTCG CTTCCCTAGGGTTCTCCC (SEQ ID Nr: 119)

184 424 pMON28507

1GTGAGG1GTGGGGGAG1GTGCGGCAAGC?TGTGGGTGGGTTAGA1G1GGGGGGGCGGGGT TG1GTCCGGGG1GAGGACGTGGAG1GG1GG1AG1CGGGTGTGCT1GG1CGGGCCAAGGGT G1GCG-GGCGGAGCT11AGG1GGTG((TGA111GG1TGAA1GACTTACCGGAGCGGTGG11G GGTCGCCGAGGGGGGGlGGAGGGGGGAGCATlTGTCGGGCGGCGGGGlCGGCGGGGGTCG ClGGGTGGGAGGATCAGCCAGlGGllTGGCG(ΠGGAGCGTTCCllCCGGGAGTlGGCGTC TGTGGCCTGGGGGTGlGlCGACGlGGllGAGCGGGlTAGlTGlGllCGllTCCGllGTGC GCG11T1AGCC1GCG11TCGAGT’GGGTAGTATGCGGCC1TCGCCTGC1GGGCGA1GATCG CGGAGG.TGGGGAAAGATGlGCGTCGGlGGTlGGCCllAGCGTG(CCGTCllGCGAGCCGGG GGCGG1AGCCA11G1GCGCGCC1GGGG11GGGGGGC11CAC(GA1T1GGGGTGGTCGT1CG1 11G1T1GT11GA1CGG1GG1AGCAGT111ACGCACGTGGGGCTGATGCCGGCG((CCGGA1 CGGGGC·llAGGllTCGCGCTCGGGGGTlllCCGGGCGGCGCGCGCGGTlCCGGGGGlGTT CCTGGG.GG111CA1GACGAGGCGGGGCGGG1AGGCCGGG^,1GCAGCTTGGT1G1CTGGGGA CGCCT1GTGG1A11GGGG1G1GCTTTCCTGATGGGTGGA1GGGG1TGGGCGGTGTCC1GC G11CGAGTGC1C11GGA.CGG1CG1GGTGGG1GGGGCGGT1GTT1GCGGGTGG1GCTGGTG GCTGGGGTlGGCGlTlACTGGGGTlCCGTGGACGCGGC;GGGCGCGGGCGlGGGGCGlcGG GGCGGCTGlGCGGGACCT (SEQ ID Ne: 220) pMON28508

1GTGGGTCGGCTGGGAT1AGGCGTCCGGTT?GTAGGTGAGTGGGA1G1GGGGGGTCGGGGT GTCGTCCGGGC1GACGACCTCAGT^,1GC1AG1GG1GGTGTGTGGT1GT11GGGCGAGGGGG GCAGTGGGGAGGGT11G1G1GGCG1CGA1G1CTCGGGACCA.GTTA1GAGGT1GGGGG1CG GGG1GC1GGGTTGGGC1GAATGGGGCA.GGGG1GGG1GCGGGTCGGGGC1GGCGGGGGGGG ClACGTGGGATCAGCATGCGC3lGGllGlGCTGGGGAGGAGGCGCGGAAGGACGlGGCGGC TGGGGC-CTGAGGCGTlGlCCGCGlGGlCGGC:CGGGlGGGCTGlGGCCGllGCCGlCGTGG CGllCTlAGCGlGGGGlTCGGATGTGGACGAGCCGGGGlCGGGCTGGCTGGGGACGATGT GAGAGGGGGGGGAGCGGllGGlCCCGCGGGAlCTGlllGCGGTCCGAAAGGGGlGGlCGl 1ACGGGAGC1GAGA11GCAGTGGC1CG1CA1G1GGCCGGGT1GT11GCCCGCTCGG11GG 1GGGC111GGGAGT111AGCGGGTG1CCGGGCAGGGCGGGT1111GG1CGGGGGC1GGGC 1TGGCGGGGCTCGGG111((CGGTCGGGA1CCTCGTTG1GAGGGGCGGGCGGGGGGGCCCG AC1GCGGGG1GTGAGGAG1AGGGGGAT1CGATCGTGCGCGCGGTGGAGGGGGT1GGGGCG G1GGA1CT1C1GGGCGG1AGCGTTCCA11G1G1GGGAGGGTGG1GCTGA11CCA.TGGC1G 11GAGGGTCCG1TGTCCG1CTGGCCGGCGGG1T1GGCGGGCG1TGGGGGCTAAAGG1GTT G1G1GGTGGCAG1TGCTCCAGG1GACACG1A1CCGCGC(GGGG1G1CGTGGGGGTCG1GGG AGACGTlTGGTlGGlCGT (SEQ ID Ne: 141) pMON28509 lGGGGGTlGTGTGGAATGAGGlGTCGAAGTGGAGGGGAGTGAGGCGCGGGGGGGlGGGGT

GT1GT1CGGGG1AAGGACGTGGATCGC1AG1AGCTCG.CGGTGGGCGTC1GGGCGGAGGGT

CCGGTTGGAGGCGTllGGG((GGTGlGGGCllGTlGGGGCGAGTGGCGCAAT'CGGTGGCCT

GTT1GC1GGGTTGGGC1GGGGGTGGGAGGGG1GGCCCCGCGG1GGGG11GGCGGGGGTGT

GCAGGTGGAGTCGGGATCCAlCGGlCGlGGTllGGGCCAT'TGClllGCGAGGTCGGCTTG

GATGGCcGGGGGCTGlGGGGACGCGGlCGGGAGGGCTGGCTGlGCCCGCCTClGllGTGG

CGCClCCGAGGCTCGlCGCCGGGGGGGGGGGGCCGCCClCGGGGGGGCTGCGGAlGATGG

CGGGAGGGTGGGAACATG1AGGTTG1GGT111A1GGTΊCCGAGGGGGCGTCCG1CGCGCG

AG11GGGGC1GGGGGGT11CG1GGCGCGCGCTGGGCGG11G111G1G1GGC1GG1GGGCC

GCGCAGGTCC1GGCCACGG1GGTGGGGTGCCTCGGCG1CGA1GTGTGG11GGGC1GGC1T

GTGGTGGTTllCCCCGTlCGlGCGGGCCGTCCGGGGGGlGGGGGTGGGGACClGAClGGG

184 424

AGAGGCAACCTAGGATCCCATTGCCATCTTCCTGAGCTTCC7TACACCTGCTGGGACGAAAG GTGTGCCCCCTGATGAΓTGTAGGAGGGTCCACCCTCTGCGTCAGGGAATTCGGTGGGAAA ATCGGCTGTCCCGCTCCGCC'TGCTTGCGACCTCCGAGTCCTCΆGTAΆACTCGTTGCCAAC TCGCACGCCCTTCACAGCAGACTGAGCCAGTGCCCAGAGGTTCACCCTTTGCCTAGACCT CTGCCGACGACTGTTCTG (SEQ DD Nr: 122) pMON28510

GCTTAGCGCTCTATAATGATCGATGATATTATACATCAC7CΓTTTAGAGAAAATTTGCAAAT TTCGCGGTeCCGAAC.ATCCTCCTATGACG7AT3ACGTCTCTATCCTGΆTGGATGGAAACTTT AGAATTCCCAAC7CTGGAGAGCTTCGTAAGGGCTGTCCTA:77AC:CTTAGAAAATAAATTAAGT ATTCTGGCCTATTCTTA3TAATCTC:CAACCATGTCT(G:CC7?CTGCCACGAACGCAGGCTCT GGAGTCAAAATCA'TCΆTCAAGGCAGGTGACTGGCCTTG7ATΓTCCGGGATΆAACTGAAGTTC TATTCGCCACCCTTGTGCAAGCGCAGGAACAACAGTACGTAGAGGGCGGTGGAGGCTATT GCCCGTTCCGTCTGGTCCCTTTCTCTACTATC7TACCCGTCTCCTCCGTCTAAAGAATGTCA TAAAATACCTAACATGGGAGATTGGAAATCCCAGAT(GGΆGGAGACCAAGGCACAGCAAATT GTCCTGCAGTGACCCCCFCTGCTGGAGGGAGTGATGCG7AGCΆCGGGGACAATTGGCAACCA CTTCACACCATCCCTCCTGGGGCAGCTTTCTGGACAGGTCCGTCTCCTTTTTGGGGGCGT CAACGAACCCTTGGAACCCAGCTTCCTCCACAGGGAT:7GACCACAGCTTACAAGGACCCT AATGGATGTTCCTGAGCTTCCAACACCTGCTCCGAGG7ATT3GTGCGTTTTATGATGCTTG TAGGGCGCGCACCCTCTGGGTCAGGGATTTCGGCGGCCTTCATGGCGTTTAATAATTGGTT TGGCGCG.TCCTCCGAGTCCTCAGTAΆACTGCTTCG'T7ACTCCCATGTCCTTCACACGAGA TTCAGGAGTGCCCAGAGGTTCACCCTTTGCCTACACCTGTCCTGCTGTCTGTTGTAGAAT CTAGCTG (SEQ DD Nr: 123) pMON28511

GGCATATGCTCTATAATGATCGATGAAAΓTATACA^,rcACTTA(AA7AGACCACTTGGTCTT TTACCCCACCCGAACCTTCCTCCTATGACG7TTGACGTCAΓCTATCCTGATGAAATGAAACATT CGAGCCACAAACCTGGAGΆGCTTCGTAAGGGCTGTCCAT37AA7TTAGAAAATGCACGAGGT ATTCACGCAAΓTCTTCGTAATCTCCAACCΆTGTCT(G7CCTCTGCCACGGATGTATAGTTT GCAGATAGCTTTCATCATCCTAGGCAGGTGACTGGCCT.A:77ATFTCCGGGAATAACTGAGCTTT CACACGGTTACCCTT(ATGCCTAGCGCAGGAACCTTCA(GΓACGTAGAGGGTAGTGGAGCGTTC CTGGGTG.ATCCGTCTGGTCCCTTTCTCTACTATC7TTCCCGTCTCCTCCGTTTAAACAATCT TACAATCCTCC7AATGATGGGACCCACTTGCCTCTCATCCCTCCTGGGGCAGTTTTGCGGA CACCCGGGTGTCCTCCTTGGGGCCCTGCAGAGCCTCCTTGG7AA7CCAGATTCTTGGACAC GGGAGGTCCACAGCTCACCTAGGATCCC.AAΓGCCATCTTCCTGAGCTTCTAATATCTGTTC TGACGAAAGGTGCG'TTFCCTGATGCTTGTAGGAGG(GΓCCACCCTCTGCGTTAGGGAATTC CGCGGCTACATGGCCGΓCTCCCGCTCCGCCTGCTTG^,T7ACCTCCGAGTCCTTACTAAACTG GTTAGTGACTCCCATGTCCTTCACAGCAGACTGAGCCAGTGCCCAGAGGTTCATGGTTTC CCTAAACCTGTCCT<A/^,ΓGCCTGCTGTGGACTTTΆGCA TGG GAG7ATTGGAAAAGCGACATC GAGCTGACC7AT;7GCACAGGACATTCTGGGAGCAGT(AT:CCTTCTGeTGGAGGGACTGATG GAACCAGGCGGATATCTA (SEQ DD Nr: 124) pMON28512

GTTAACTGCTCTAT7TTTGATCGATG.AAATTATACA^,rcACTTTATTGAGACAATCTGCATAT

TTACTGGACCCGAACJATCCTCAATGACG7TTGACGT(GΓCTATCCTGATGGAAAAAAAAATT

TAAGTTCC7ATTCCTGGAGAGCTTCGTAAGGGCTGTC/AA77AτGTTAGA_AATTATATCAGGT

ATTGAGGC7TATTCTTCGT2ATTCTCC7TTCCATGTCT<A:CCTCTGCCACGGAAATATTCTAT

AAACATCCCTTTCAT<ACTCAAGGCAGGTGACTGGCAAG7ACCΓCCGGGAAAAAATAATATTT

TACGTCGCCACCTTTAAATTAATGTAG-GAATGACATGTTAGTCAGGGCGGTAGAGGTTTC

184 424

CCTCTCTGGΓCCTCTCCTCCAATCTCTACTGTCΓGSCCCGTCTCCTCCGTCTGAGTGGCCT CGCGGGTCCΓCGGGCGTCCGAACCCAGCTTCCTCCACAGGGCACCACCGCGTCTCGCGGT CGCCCCGGCTCCGTCCCCCTGAGCTTCCCAACACCTGCTCCGAGTAGGGTTTCTTTTCCTT S/CCCTTCCS_CTGTTCCΓCGCCCTCTGCGTCΆGGGTGsTTCGGCGTCGGCGTTCCCTCTCCC TCTCCTCCTCCCTTTCGCCTCCGAGTCCTCAGT.?AA\CTGCTTCGTGACTCCCGTTTCCTT CGCGTCGTGCTTGTCCGCTGCCCAGGS3GTTCACCCTTTGCCTACACCTTTCCTTGTTCCC TCTTTTTGCTGTGTCTTTTTAGAAT(TcGSGCCCAGATGGAGGGGGCGGGGTCGGGGTGC GCTCTTCTGCCACTCACCCTTCTGCTGGAG(G3AGTGATGGCAGCACGGGTGCGGGTTTTG CCCGCTTTCCTCTCGCCCCTCCTGGGGCAGCTTTCTGGACAGGTCCCTCTCCTCGGTCCT CΓCCCCCGTGTΓCTCCCT (SEQ ID Nr: 125) pMON28513

TΓTGGΓCTCCCCGTGGCCATCGATG7GGGTTATACATCACTTAAACAGACCGCCTTCGCCC TCTCTCCGCCCTGGCGSCCTCAATGACGίGG3ACGTCTCTATCCTTATGTGCCTGGGCCGT CTGCTTCGAGGCCTTTAGAGC TTCG TAAGGCGCC (3 TCAAGAACTTAGAAGGTTCGCCGTTT GCTTGTCCGGTCCCCCCTAATCTCCAGCCATGTCTGCCCTCTGCCACGTCCTCGGCCTCT cGGCGCCCGGTCGCCGTCAAGGCAGGTGACTGGCΓGG-AATTCCGGGAGGGGCTCGCTTTC TGTCTTTGTGCCGTTTGGCAAGCGCAG<cGGGGG:AGTACGTAGGGGGCTTGTGGGTCTCC CΓTTTTTGGCCTTCTGC-TCCAATCTCTACTATCΓGA::CCGTCTCCTCCGTCGGGGGGGTCT CGTAGGTGCCΓGGGCGTGTGCAGGACCACAGCTCACCAG3GATCCCAGTTCCGTCTTCCTC GτCTTCCGGCGCGCCCTCCGAGGAGA3GTGCGTTTCCTGATGCTTGTGTTGTTCGCCGCC CCGTTCTGCGCTTGGTGCTGCGGCAACATGGCGTCTCCCGCTCCTCCGTGTTTGTGCCTC CTGTTCCTΓGTTGGGCTCCTTCGTGACTCCCATGTCCTTCACATCAGGCTTGTCGGTTTC CCGTGTTTCCACCCTTTGCCTACACCTGTCCTGCTGCCTGCTGTGGACTTTGCCGTTTCG CGGGTGGGGGCCCGTGTGCAGGAGACCCGG3GCACAGGACATTCTGGGATCGTTTGCGCTT CCCCTCTGTCTGTTTGTCCCΆGCACGGGGACAACTGGGACCCACCTCCCTCCCGTCCCTC ΓCCCCCCGCCTTTCTGGACAGGTCCGTCTCCTCCTTGGGGCCCTGCAGATCCTCGTTTTG GΓCCGCGTTCCTCCGCGC (SEQ ID Nr: 126) pMONl8524

CCTGGCTTCTCTGTGGTGATCGΆTGGCGSCΓATACGTCACTTGAAGAGGCCGCCTGGGCCC TCCCTGTGCCCGAGCAACCTCAATGACG7GGCACGTCTCTΆTCCTCATGTGGCTGGG.CCTC CTGCCCCCGGGCCTGGAGAGCTTCGT.?GGGGCTGTCCGGGGGΓTTAGAAGGTTCGGCGCCT GCTTGCTCGGTTCTTCGTAATCTCCCGGCCATGT<CΓGCCCTCTGCCACGTGGGCGCCCTCT CTGCGCCCGGCCGTCATCΆAGGCAGGTGACTGGCΓGG-GATTCCGGGAΆAGGCTTACTTCC TGTCGCCTTGΓCcTCGAGCAAGCGCAGG-GS2.?GACAGTACGTAGAGTGCGGTTTGGTCTCC CCCTcTTGGΓCGTCTGGTCCΆATCTCTACTATCCGCCCGTCTCCTCCGTCTGAGTGACCT cGTGGGTCTΓΓAAGCATGGCTCACCAGGGATCCC:GTGCCATCTTCCTGGTCTTCGGGCGΓ CTCCTCCTGTTAGGGGTGCGTTTCCTGATGCTTGTAGGAGGGTCCACCCTCTCCTTCGCT CGGTTCTTCTGCAACATGGCGTCTCCCGCTCCGCCTGCTTGTGACCTCCGGTTCCTCGCC GGGCTTGGTCCTTAΓTCCCATGTCCTTCACAGCAGACTGAGCCATTGCCCGTGTTTTCGC CCTTTCGCCGΓACCTGTCCTGCTGCCTGCTGTGGACTTTAGCTTGGGATGGTCTGGGGCC ΓGTGTGGAGGAGACCGAGGCACAGGACATTCTGGTAGCAGTGACCCTTCTTCTTTGTTCG TCCGTTGCGCCACGGGGACCGG:TGGGACCCACTTGCCTCTCATCCCTCCTCTTTCGTCCT TCTTTGCGTCTCCGTCTCCTCCTTG(G3GCCCTGCAGAGCCTCCTTGGAACCCGTGGGCCT ΓΓGCGCTTCGCCGcCGΓG (SEQ ID Nr: 127) pMON28515

184 424

ACCACCTGCTCTATATTGATCGATGCCGCTTATACACCCTCTGCGACACTCCTCCACCTTC CCACC1GACCCGACCACCCCCAΆTGACGAAAGCACCCCCCCCCCACCAACCCAATA.TTCC TACCCTCCACCCCTGGAGAGC^ChCGThATcGGCTGTCGGACCTCCGAGAAGCACCCTCAAC CCCACAGCAATTCCCCACGCTCTCCAACCGCACTCATCTCTCATCCTAACCATCCCCCTC CAGCCTCCTTCTCATCATCAAGGCAGGTGACTGGCCAAGCTCCCAAAGCGCGCGACCACCT CCCCCGGTTACCCTTGAGC.CCGCGCAGGCCCCAATGACGTACCACAAACAACAACAGCCTT TTAAATGAACCGTCTGGTCCTTTTCTCTACTATCAATCCACTCTCCTCACCCAATATGCTC TGCCAATCTCCAAACΆCGAATCCCAATGCCGCCCCCCCACACCCCT-TCTGTTCACCTCAC AAAAAAGTGCGTTTCCTGATGCTTGTΆGGAGGGTCTCCTTCCCACACTGAAACGCCCAAT

AA.CGCCTTCACCGCCCCCCATCTTACTCATCCACACCTCCGAGTCCTCAACACACCACCC CACACTTCCCATGTCCCCTACAGCAGACCAGACCGACATTTCAGAACCCGCTTCCCACTC CTATTCGTCCTGCTGCTTATTATAGACTCCGACCCAAACACGCAAGCACTCTAAGCAACA AGAGTTATGGCACAGGGCACTCTGGGAGCAGCAGTCCCCTCACCAACAAAGACAGTAGTC ACCCAAGGACAACTGGACTTCACTTGCCTCCCGCCCCCTTCAAAACAATCCCTCAACCCA ACTCATCTCCTCCTTGGGGCCCTGCAGAGCCTCCTCAACCTCCGATCCCCCTTCTCAAAT CAACTTCTCACCCCCAAA (SEQ ID Nr: 12 8) pMONl8516

ATCACTTGCTCTGCAACACCCAATAAAACCGCGCGCCCTCCGAAACACCTGCCCATCTTC CCATCAGACCCGΆCCAΆCCCCACTGACGGGAGCACCCCTCCTCCACCAAACTAAAACGCC CAGCGCCTAAACCCAGGACACCCCATGGGAGTCACCAAACCCCCGACCGGCACCCCGAAC GCCACAACAATTCTTTACGGTCCCCACCTACACCCATCCCCCACCGCAACTACGCTCTTC CGGTGCCCAATCATCATCAΆGGCAG<GhGACTGATCAGTACCCCAAACCGCGTCACCACCT CGCCCAACCATCCTCCACACCCATAGCAAmCAGTACGTAGAGGGCAACAAGAACCTT CCAAACAACCCGCTTAACTCGGCTCCCGCCGCCGGCCCACTCCTCCTACCCGAAACCG’TC TGCCCATCTCCAAACACAACCATCCCCCCAGATCCCCCGCCTCCACCTCAGAACAAAACA CACCCTCTGATGCCTGCGAAGAAACCCGCTGCCCGTACCGAGACGCCCAACAACGGCGCA ATACTCCCCGCTCCGCCCATTTATAACCCCCACACCCCCCACCACCCACCCCACACTCTT TGCACTCTTCACAGCAAATCAGACCAATACCCCAGAACCTCTCCCCCACCCCCGCTCACT TCACCACCTGCTGTGGΆCCCTGACCTAAAAAACCAACGACCTCCAGCAAGAAGAGTTCCA ATCTC1AACATTCTAGAAACAATGACCCTTCCACCAAGAAACACACCAACGATGCAAAAA TAATCAGGACCCACTTGCCTCCCATCCCCCCCAAAACCACCCCCCAACCCAACCCGCCCT CCCCTCGGGGCCCTGCAAGAC<ChCCTTGGAGTCTAGCCCCCCCCGCGGAACGAAGCCGCC ACCCCTCGAAACTTTACC (SEQ ID Nr: 129) pMONl8519

ATCGCTTGCTCTATAΆTACCCGATGAACTTACCCACCGCCCAGAAGACCCGTCCACGCTC

CCATCAAACCCGAACAACCCCAATGACGAAAGCACCCCCCCTTCAGCAAGCTAAAA.CCCC

CAGCCCCCAAACCTGGΆGGACTTCGTAAGGACCACTGGAAGTCCGACGGGCACGCTCAAC

CCCACAGCAΆTTCT'CCGTAΆTCTCCAACCACACTCACCCCTCACCCTAACCACGCCCCTC

CAGCCCCCAATCATCATCACAGCAAGTAACCGAGCAGCGCCCCAAAGCCCACTGGCACCT

CCCTCAATTACCCTTAAACGCACGCAAAAACATTAACGTACCAGAAACAACAAGAACTTT

CTAAACAAACCGTCTGGCCCAGTCTCTACTACTGGTCCACTCTTCCTACCCAGGACCCTC

CGCCTCTCTCCAAACATAAAGGTTCACCCTCCATGCGTGCTCACCCCACCACCCGCCACA

ACCCCCAGCTTGGGAGAACAAAGCACCCAGGCAAGAAGACTTACAACCCAGAACCCCTCA

AAGATTGTGACCCTTCTGCCAAAGGGAGTGACAACGACCTAAAACCGCTCGAAGCCCCTC

CACTCTTCATCCCTCCTGGGGCAGCTTTCTGACCGAACCCACTCTCCTCCCAAAACTCCA

CGAGATCTCCTTGGAACCCAGCTTCCTCCACGAAGTGAACCCCTGACCCCGCAAAGCCTT

CACATTATCTTCCTGAGCCTCCAACACCTGCCTCAGAACATAACATACCCCCCACCATCC

ACGAAAGGGTCCACCCTCCACACCAGGGAACCTAAGATCACAATACTCCCCATCCCATTC

184 424

1CTGCGCGCCGTCCGCTCTGCG1TGGGTT1TGGT1G1GCTTTTGT1GCTTGCGCG1CG1G

TTlGlCCGCTCCCCG (SEQ II Nr: 130 pMON28520

1CTGGCT1TGCGGGGAG1GGT1GG1GGGGTGTGCGGCGCGTGGA1GCGCCGCCTGCGTCG GGCTTCGGCCTCGGAGGTTTCGGGlGTlAGGGClTCGTGGGTTClGGCCGCCCGGGCTTC TCGCTGCCAGGCCG1CG1G1CGTT1CAG11CCT1GCGG1GGTGCG1AGGGTCCGTTG11C GTTCGllTGGTTTGGClTGGGTGTTAGCTGGlGCTCCCCGCGlTCGCCCCCCCGCTCGTC TCGCGTCCGGGTGGCGGCGG.G1CGC1G1GCGCCTGACGGTTTT1C1GGGGGCTGGC1GGT GGTCTCCTTGCTTGTGGCTGGCC1TG11GGTGGAGCGGC1GG1GC1CCCGGCCG11TCTT CTCClGCGGCCCGTGGCGTCGGGCTCTGCGATTGGTCTCTCTCCGCCCGTTSGACGGTTG TGTGGGGTTCCGGGTGGlGGGCCGGTGTTTCGCTGGCGCCTTlTGlTCCACTGGGlCGGl CCGGAGGCCGGGGCCcGCGGGGGlCGcGTCGGClCGCACCGTGTGCGCGCGGCGGTGGTT TTGTTCCTC1GCCCGCT1GT11CG1TGC1CG1GTGGCG111GTTTGCGT1CCGCGCGCTT TGCCGCC1CTG1TGGGTG1CGCG1GGTT1TCGCTGCCGG1C11TCTGCCACGCCCGTTCG 11AGTTTGCTGGCCTCTGCGGC1TG11GTCGCG1CGCGCGG11GTCCTGGGCCCGTTCCT TGCA1CGTTCGGTGCCG1CGCC1G11GAGCCGCTCGTGTCTCGC1CGTCGGCGGG11GTT GTCCTCTlclTTGCCCAGTTCClTAGCGGCCCCCTTCTTlCTTTCTCGCCGGCGCGTTCT CCGCTCCGCGCTGGG.TTCTGCCCTCGCGCTTGGlGCCGTCGCGlCGCGCGGGGCCGCGGT TTGGGClTTTGTCCT (SEQ II Nr: 131) pMON28521

CTGGGCTCCTCGGTGGGCGTClGTlGGGGTGTGTGTCGTTGGAGCGCGCTGCCGCCGTTG GGGTGGCGCCCCGGCAGCCGCSGTCGCCGGGGClTCGTGGGCTTCGGCCGTTGGGACCGT TlGCTGTCGGGTCGCCGCGCCGTTlGGGCCCCGlGTGACGGTGCGlGGGATGTGTCGllG GTGGGCCCGGTCCGGClTGATCTTTAGTTGGCGTGlTCTGTGCTTGCCCTCCCGCTTGTG CCGCGGCCGGGCGGCGGCGGGGCGCCTCGCGCCCGGCAGGTCCCCCGAGGATGGGCGTCC TGGCGC1GTGCTCGGCGCTGGCC1CGC1GGCGGTG1GGCCGG1GCC1TCCGGGGGGCTTT TTGClGCGGTClGCGClTTCGATTGTGGTGGTCAGCCClGTGTTGTCCGCGGGGCGGGAG TGGGGGGTGCTGGGCGTC1GCCT1TG1TTTCCG1TCCGCGGTG1TGTCCCGCGGGC1GGG GTCCGCGT11G1CGCGCCAGCCCGTG1GGCAGGTT1CCGCTG1GCGCCCTGCGCCT11G1 clGCTCGGllCGCCACCllCGTGGTTlllGCCTGCGGCCCCCGTGTCCCGCCGGGllTGl TTGGCGCCGCGlC^rlCClTCGCCTTCTGlClCCTTTCTGlGlTTGCCGGCCGGCTCGlCGC CTGCCGCGCClTGCCGCCGCGlTTCGTGGllGGTCCGGGlTTGCCTTCCGCGCCGGTTGG TGTCGCCGTCCGCCGGG1CGGTCTTTTTG1GGCTGGCTGC1G111TCCGCCCGCT1CGCT GlcCGGGGTClTGGTGGCCCCGCGTτTlTGCCCTCTCCGTlTlGCTGCcCGCGCTGTGlG GAGCGlTTTTCGGGTGCCCGGCGTTTGTGCGCCGCGTGCGlTTGCGCCCCGCGGGGTTGT TTGGTCTCGGTACCG (SEQ II Nr: 132) pMON28522

1TGGGCGCTGTTGTGGT1GGCGGT1GGAGTGGGCGGCGTTGAGG1GCGCTGTCGCCGCTC

TT1CGC1GTCT1GGCGGCTGTGGT1GT1GGCGT1GCGCGGGCTC1GT1CGCCCGGGTAGC

TlGCGTTTGAGTCTCCGlGlCTTTlCGGlllcTlTCGGCGGTGGGlGGGATCCAGCGllC

GGTCGllTGGCTCTTClTGGGCTTTGGTTGTCTTTCCCCGTClCTGClCcCccGCTCGTC

CcGTGGCCGGTCGGTGGCGGCGCGllGCGCGCCTGGCGATTCTCClG.GGGG.TGGGCCTGT

GGGTTC1TTGTTCTGCG1CGG.CT1TG11GGTGGTG1GACCTG1G111TCGTCCGG1CTTT

TTGGCGCGGCTlGCGCCGCCGGGCTCTGCGGGTAGCTTCTCGTTGCTCGTGGAGGGGTTG

TGTAGAGCTTTGGGCGGClCGlTlCGTCTTGCCTTCGCGlGGGlCGGAGcCTGCGGlGGl

1G1GCCAG11CGTGCCGCATGCT111G1TG1G1GTCCGGCT1TG11G1CCGCGGGTG1TG

184 424

GTCCGGGGCTCCCTGGGACCCACTTGCCTCTCTCC:TTTCCTCTTTTTCTTGGCTGTATCG GTCTTGCCTTTCC^ΓΓTGGGGCCCTGCAGAGCCTCCTGTTTCCCCTCTTTCCTCCACCTTGC CTGCCTATCTCGCACAAGGATCCCCAAGGCCΆCTCTTTTCTCTCTCTTCCACTTGCGTTTC GTAACGGGTCGGGTCCTGATGCTTGTAGGACTTGCTAACTTCTTCCTTTCGGCACTGTTTT AATCCGTTGCTTTCCGCTCCGCCTGCTTGGGΆCTTCCCTATCTTCTCTGCAATGCTGTGG TCTTTCTCTTTTTTτCACAGCAGACTGAGCCACGGGTTTCTCTGTCACTCTGGGCCGCTC TCGTTTCGGCGGCCC (SEQ ID Nh: 133) pMON28523

TTTACTCTCCTTCTACΓGATCGATGCACC]GΓACGCTCCTCCGCCCAACTATACCTGCCTTG CCTCCTTCCTCTAAC(CCCCTCCCCTGACGCCCACCGCTCTGCCCCCGCTGTACGTAACTCTG TτCTTGTCC.ACTCCTTAGAGCTTCGTCCC3GGTTCGCTCATCCCGTGACAACGCATTCTTG CTCTCGTτCCTTCTTCGTGCCTCTCCCCCCCATGTCTCTCCTCTCTCACTGTCTCACTTTTG TTCCCGTTCCCTCCCATCA?CCGCAGGTGACT(TT:TACCAA[^,TCCTGG.CCCCCC:TGATTGGT TCGCTTGTGCTCCTCGAGCCCCGCGCA<TTCC:CCA:TATACGTGCTATTGTTGGGAGTTGTT CCTTGGGCACTTTCTGGTCCiCCTCTCTACTATCCAATCTTCTTCTCCCTGTCCCCGCCGTG TCGCAACCCTCCCCCATGGACTTTAGCTTG(TGATCCTGTACACCTACTCTGAGGATCCC ACTTCATATGACATCCTGGGAGCAGTGACCC1GTTGGTGGAAGTTATCTCGGCAGTCTTT GTCTCATCGTGCTTCACTTGCCTCTCATCCCTCCTCTGTTACTTTGCCGTTAAGGGTTGT CGTTTTTGGTTTTTCCTGCAGAGCCTCC'GΓ(TTCC:CCAGCTTCCTCCTCAGGGCATTCTT ATCTCGCCT.CCGTAGCCC(ACΓGCCATCTTCCΊGACGTGTCCCAACCTTTΊ’TCGAGTC.ACT TTTTGGCGTTGGCT(CCTTGTAGGAGGGTCCACTCTCTGGTTCACTTACCGTGGCACTCGT TTTTCGTTCGTCTTTCCTGCTTGTGACCTCCGACTC:CTCACTGCACCCGTGCGTGCTTTC cCGTGTCTGTATCGGCGACGGAGCGAGTGCCCACACTGTCACCCTTTTGCGACACTGTGC TTGCTTCTGGCGTCT (SEQ ID Nh: 130) pMON28520

GTGACTCGTGTTCTAAGGAGCGAG<TACCGΓAGGCACGACCG^,GCAATCAATACCGGCCTTG GTTCGGGCCCTTCCTCACCTCAATGACGAAGACGTCTCTATCCTTTACGACCGAACTTGG TGCCTGCCCAACTCGGΆGΆGCTTCGTGCA3GGTTGTCTCCTACTTGCTCCCCGCΆTTAGGG CGGGCTGTCCGTTTTCGTAATCGCC(CCC<TGGTGTTTTTTCTTTTTcTTTTGCACCTGTG TGCTCGTTCCGCCTTATCAΆGGCAGGTGAC^GT:TTCCCCCG^,CCCTT.JCCCACTGACTGGT TCTCGGGTTCCTTCCGAGCCACCCGCAGGTCCZ(CCACGGACTGCTCTτTTTGGGAGTTGCT TCTGGGGCCCCTTTCTGTCCAATCTCTACTA'G:TAACCGTCTCCTCCCTTTGCCCGCATCT CCGACCGTGTCCCCTAGGGGAGAATGGAAAACCCAGATG<TCT3AGACCCAA3GCACCTTCT CTGTGTTGAGTAGTTCCCCGGCTGCGGGAGGGAGGGAGGGCACGAATTTTTC(CCCTTTTA CTCATGTTCCTCCCAGCCCTCCGGGGGCAGCΊGTCTGTACACGGCCTTGTCCTCCGGTTT TTTTGTCCTATTCTTTTTGGAACCCAGCTTCCCΓCCACAGGGCAGGACTAAAGCTCCTACG TCTTTTACGGCTCTTTTCCTGCGTGTCCACACCTGCGCCGAGGTCCATTGCGGTGTTGG ATGCGGTCCTGATTTCCCCTCCGCGTCGGCA(TcGtCGGCGGCC^:CCΆCGTCGGCGCTTTCT TTGTTGTCTTTTTATCGCCGAGGCCTCAGGjCCCTCGTTCCTGACTCCCAAGGCCGGCAT CGTATACTGAGTCCTCGCCCAGAGGGGCACCCΊG^,TGCCTACACCGCTCCGGCTGCCGTTG TCGGATTTCAGCCCT (SEQ ID Nh: 135) pMON28525

TCGCCTGTCGTGCTCCTGATCGATGAAAGGAGACAGCAC^,IG^,CCCGACTCCACCTGTCTTG

TGTTGGTCTTTTCACAACCGCACTTACGAAGACGTCTCTAGCCGGAGGGACCGAACTTGG

TTATGGTCCCACCTGTAGAGCTTCGTAAGGGCTGTC(CCGjCCTTAGJCCCTGCATTCTTG

CTTGCGTTCCG^,TCCCTGTAATCTCCAACCATGTCTGCCCTCTGCCACTGTCGCACTTGTT

184 424

ΊA(Ί(CΊΊAAAT(CΊ(CΊA(AAΊGCCCCGΊCCCΊGAAGACCΊΊACA((A(AΊTA(ΊCCCΊ C(TΊTAACC(ΊΊΊTCC(CΊAAAΊAC(AAAAΊGAΊ(CT(ΊCC(A(CCCΊAAGAA(CCΊCΊΊ ΊCAAATA(ACCAGΊCAATCCAAGCCCT(CT(CΊ((CCCACΊCCΊGCΊATCG(A(A(ACΊC Ί(T((ATΊGCΊ(A(Ί(CAAAACΊΊ(ΊCCCΊΊCΊCΊATΊΊΊCΊΊCCCAAΊAAΊGCCΊCCC( ΊAAACΊCCGCTΊΊCΊΊCGAAAACΊΊCCΊ(C(CΊΊCΊCCCCC((ΊΊΊ(AΊGTCCCΊΊC.Ί(C CACAAA(ΊCAΊGACCΊAΊ((AAACΊΊΊ((CAΊΊ(CCTCΊΊCC(CΊCCΊΊCAC(ΊΊGCΊCΊ CAAAA(A(AAGACACGTCΊTAAGACCCATAAAAAAATΊΊGCΊCTΊGATAGCAAAA(LCGGΊ CACA(Ί(CAAΊCCCCΊCΊCΊGCCCΊΊCCΊCCCCCGΊΊCΊΊCGCCΊΊTΊ(ATA(C.ΊCAΊCC ΊATAACGΊTTACAGΊCTGΊ(CAACAA(ΊCA(ACΊ(AGAΊΊC(A(AATGΊ(CCCTGGAΊCC (Ί(ΊΊCATCCTCΊCCΊΊCCΊGATAAA.ΊCCC(CΊCCAAA(C(ATCA((A(CCCAAATACGC C(AAΊΊAAAACGΊ(AAGΊGCTCGAAA(CΊGCCC(ΊCΊTCΊCCΊCAA(ACA(ATA(TCCΊG ACACCAAAACAGCTC (SEQ ID Nr: 136) pMON28526

ACGA(ΊTACGΊA(C((TAATCAAGAG((TT(CGΊ(TCAΊCC(AGA(AAΊCACCGACAΊCC TTACCAAACΊCC((ΊAACCTCAATA(CAACA(CCCCTCC(GΊCCAAGAA(CCA(AAΊΊTC ΊA(CCCCΊ(AAΊCCCC(A(ACTGΊAC((CCAΊTCCC((CAACTC(A(AA(GAC(TC(CCT ATGA(AACAATCCTCCATAAGCACC((CC(GACΊCAΊCΊCΊTAΊCACAACCACACCCCΊT ΊA(C(TCΊAACΊ(GΊ(CΊAAAAC(ACCA(ΊCCCΊ(AA(GCCΊCCCAAA(AACTA(ΊCCCΊ T(TCTAATAACΊCCTAAACA(ACACAAA((CG(Ί(ATAΊAC(A(AAACAAGAAAAA(:CΊΊ ΊΊAACCCCACCCTΊCACTΊΊA(GCCΊCACAACΊ(GΊΊCCCΊCCΊCΊΊACCT(A(AAAGΊC ΊAAAGATCACC(GACATAAA(ACCΊ(ACCTCΊTΊΊACAAAACAAAACCACAACTCAΊCAC C(CCΊΊGACAΊΊACΊCCΊΊCΆAAΊTTΊΊ((Ί(ΊΊGAΊTΊΊA(ACAAAACCACATTCΊΊGC (CAΊCTAGAAA(AACTΊΊ(ΊCCACTAΊACΊACCC(ATTΊCCΊAACACCAΊATCCΊCΊCΊC ΊCCΊΊCACTTACA(ΊΊCΊΊCAAGΊΊTΊ(AC(AATCACTGΊACCGΊTΊΊΊ(GACΊΊTCΊ(Ί (ACAAACTAAAΊCAACAΊΊCAAAAATTΊ(ΊΊΊTCGACTC(C(CΊCATΊΊTACGACCGAΊC AGAAACGGTAAΊTCAAA(AAAGAA((G(CΊΊ(A(CAAAAAAAAΊΊ(AAACACAAAAΊ(CC ΊCAAC(ACACTA(ΊΊΊCCΊCACGAAAAAA(CCCGCACΊGAΊ(ΊCAAA(ΊAACGAAA(ΊΊΊ GΊCTACCTCGC(TΊΊΊCΊΊCAAAAΊACΊCCGΊCCCGΊ(CCCΊΊCCΊCΊΊTΊCGCAACCΊΊ ΊTACAAAAΊCTΊΊCC (SEQ ID Nr: 137) pMON28527

ACTAAΊTACGCCATGAGAATCAATAAG(TC(C(Ί(GC(ΊTC(CAA(C(ΊΊACTTAC(CΊG CTACCAAACCΊCGAΊ.A(ΊΊTCAAGΆAΊC((C(ΊCCΊTΊTGCΊΊCA(TAC(ΊCAAAAΊΊCC ΊC(CTTΊΊACAΊΊCAC(C(CCGTΊCCG(CCAΊCCCΊAACAAΊCC(A((AATACGTΊACCC (TAAAAAC(ATTCCGΊAC(AGTTCCAAΊΊ(TATΊTACCΊCΊTACCATACCTAT(TCCTCC ΊA(C(TCΊAATΊ(TΊ(CΊA(AAC(CACA(CTACΊ((AAGCCΊΊCAAAG(A(CGAACACGΊ CAGCTAAGGACCCTTAAAΊ(AACAΊAAA((Ί(GCAAGAΊCCAA(AAATCAGAAAAAΊGΊΊ CCAAAGAAACCCGΊGAACCCAAGΊTCT(CGACΊGACCΊCTCTΊΊGCTACCGAGAA((GΊC ΊATA((GCACC(GACAGAAACAAAAΊCAΊ(AΊTΊAΊ(ACC(TCCΊCAGACTAAΊAGCΊCA (ACTTCC(ACAΊΊCAΊCΊCA(AAAAACCCAΊAGCTΊΊCC(CAΊCTAG(CAAAACGCCAΊΊ ΊCCTACATCAAAA(ACCΊAAC(AΊAGCACCCΊCΊΊΊACCΊΊACΊCACCCCTAAΊCCΊΊC( CCΊΊCΊAAGG(AΊCAΊCCΊATAAΊCΊΊΊ(CCCΊΊTCΊAΊACΊAA(ΊGAGACCACCAΊΊΊ( AAAATCCACCCCGCAΊCCACACCTATCCTACTCΊΊTAΊTCCAAACTGC(ACAGAAAGAAA CCAAGAACCC(CACCCGAAAAACΊCAAAC(Ί(CC(Ί(CCΊCCAC(AC(CTAAΊΊCCC·ΊGC CTAAAAAAAATAATAAΊ(ACACAAAA(CGAΊTCAA(ΊCΊ(ΊTTACCGΊCΊAAΊCCTCΊCA AAAC(ACGCGTGAA(C(CAGCCATCTCCTCCTCAAAACCCCCT(AAACΊTCCGGAAA(ΊΊ Ί(AΊCTCCGCΊ(Ί(A (SEQ ID Nr: 138) pMON28528

184 424

1GCGACTCGTGGAGAAGGAGCGAG1AGGTTGGGGGGGGGCTAGGCG1GGGGCCT1GGCCT GT1GGGGGCCC1AACAACCTCAAGGAG1GG1GC1TCTCGGGGCG1GG1CACCGAGGCGTT GlGGTTGGAGGCCTGGAGAGCTTClTAGlCCGTCGGAGCAGGGTGCGAAATGCATGGllG GTGlGGlGAGGGCGGCGGAAGCGCGGACCGTCGGTlGGGTGTlGGGGCCGCGCAGGGTGG C1AGAGGCGGTCATCAGCAAGGCA11T1ACGC1GGA1GATTCG11CGGAGGCG1GC1TTG GATCT1GTTAGGGGGGAGCAAGCGGG11AGGGGCA1GGCCGG1GCGCGC1TG1A11CTCG GGlllGlAGGGCGCGGGGCC(GGGCGGTGCTGGCAGCGCCGGTGGGGGCGGGAAAGAGTGG GGCGAGGGTGCAAACAGGGCGCACAGllGTGGGAGTlGGGGGGGGGGCGlGGGCGGACGC GTCGGGCCGllGAAGGGGCGGGGGCGlGGCGTTlTAllACCCGGGGGGGGGGCCCTGGCl CAGTGC1CGAACAGGGCGGCGCCC1GTCC1GGG1GTTCTCGGCTGGCAGGCCGCA1TAGA GTCGTGGCGCGGGGCCAGGGCCGGCGGG1GG1GGT1G1GGGCT1GGGG1G11GTGGCCGG CTCGGTGGGGGT1GCCGGCGGCCG1CT1TC1GGTTTG1GGGCCCG1GGG1CGGAGGGCA1 GTCCGGlGCGGGAGGGCACAGGGCATTGGClCGlGGCTlAGGGGTGGlGGClGllCGlTl GGCCGACGGG1C11ACAGCGGG1AGGGGGGTCGGGGTGGTGGCTGGG11C1GA1GTGGGG 1CGGA1CGGGGGCGCCGCCGGGGG1GCCTCGG1G1CGGGGTT1GGGGGCAGCGGGGTCGA GGCllGGlCGGGGGG (SEQ ID Nr: 2r9) pMON28529

1GTGACG1GTGGGGAAGGAGCGΆG1GAATCGGGGGGGGGGGAGACGCGGGGCGT1GGCGG GT1GTG1GGGG1GGCAACCTCAATGAGGGGGGG1GCGGGGGCCT1GT11GGCGCAGGCGG GlGGTGGGGAGCGGGGAGAGCGGClGAGllCGTCTGGGCGGGGGGlGAGGTCGGGCGlCG GGTlGGCGAGTGGGGCGGAGGCGCCAGGGGGCTGGlGCGTGGlGGGGCCGGCCAGGGTGG GCGGATCGAGGCAGGATCAAGGGAG1T1ACTCGGGG1GATGGCG11GAGAGCT1GC1TGC GGTGTG1TTACGCGGGAGCAAGGGGA11GAGGAGA1GGCCGG1G1C1C1CT11A11CTCC GGCClGlAGGGGGCGGGTCC(GCGCTGGACTGGGAGGGCCTGTGGTGGCGGGAAGlAGGGG GGTAGAGCGCCAAACAGG<GCGCCCAGGGGCAGGGGCGGGAGCTGGGGACACCTGCTGGlA C1GGA11GCG1TTGCCGGAGGCGTCGA1GG11CGGGGGGGTGG1GCGGGC11AGTTC1CC GAGGG11G1GGGGGCGCGCCGCGG1GGT1T1GGGTGG1G1TGCTGGCGAAGCG1CTGGCT CGGGCCCGGGGCCGTCACAGCAGAGGGAGCCGlGlCGCGlAlGCTGGCCCGGGGCCGGGA GGGCGGGGCCGlGGTCGTGlTlAGΤTTAGCGGGGGAGCCAGGGAAAACCCAGAGGCAllAl GGGAΆGlCACAGGACAGGCGGGGAlGAlGCGGGGGTGGCGGCcGlCCGGGGAGlCGGlGG G1CCGAGGGCT11CACCCACTG1CCTGTGATGGGGCGT1111CA1CGGTGGG1ACA1GTC GCGGGCGTGCGTCGGGCCCGGCAlGlGGTGGGGllAGCGGGCCTTGGTGGAGGlllGAll GGGGCACGTCGCGGl (SEQ ID Nr: 240)

PMON28530

1CGAGCG1GGGTATAGTGATCGAG1AGAGGAGAGATCAGTGGGACGCGGCACGT1GACCG

CTCGGGCGGGCGAAC(GCCCTC(GGG1AC1AG1GG1GGTCTGTGCG1GC11GGG1AAGGCTG

G1GGGGGGAGACCGGGAGAGCGGC1TGA111GCCTGAG1AGCGTG1AGAGT1GATGG1CT

GGGCAGCGAAGGC'GTCGT.GCTCGCCGACCGT1GGT1GCGTGT1GGGG11GG1GGGCGTGG

GCGCAGGGAGGCAGCAGC(GCGGCA11GCGGT11GAGCAGTGGG1C1GAGGAGT1GG1TTG

GGGGGlCTGGGCCTGGAGCAAGGlCGllGAGGAGGlTAGCGGlGCClGlCGClAllGGGG

GGClGGCGAGCGGCGGGGCC(GCGCGGTGGGGGGAGGCCCTGGGCTGGCTGTGAGCGATGT

GGCGAATGTGGAGACAGGGCCAGGGGGGGCGCGTTGGAGGGGGTCGCGGlGClAGGlCTl

GCGTGCGGGAGGCGGGGAGGAGGGGGGGGGGTGGlGlTGGCCCGGGGGlCGAGGGGllGl

GGCGCCCGTGGGCCGGCGGGGGACGTGGCGCGGGTGGlTGGAGGlGGTGCTCGGTCGGGT lGGCGGGACAGCAGACGGAGCCAGGlGCGGCGlCGTGGGGGGTGlCGTGGGGCGCGGGGl

GG1CCGCCGGGGGACGGGTGCCGTG11G1AGT1CAGAAGGGGCGG11G1CG1ACCAG1CGG

GGCGACATGCGGGGAGCAGGGACCCTGCGCGTllGllCGlGlATllGGCGGGllClGGGG

184 424

ACCGGACCCAACTGGATGCTATCACTCCTGCCGAAGCTTTCTGCAAACCTCCCTCTTTCA GTTGGGGCTTTCGACAGGGTTCTCGGAACTGACACTCTTTCACAGCGGAGCACCAGAGAC GAGAACGATTCGAAC (SEQ DD Nr: 141)

PMON28533

GGCAAGTGTTCCACAATGATCGACCAAATTACAAATCATTCAAAGTGAGCACCTGGACGC CCGCTCGACTCCAACAACCTCTACGACGAAGAAGCCTCTATCCTGACGCACTGATACCCC CAATTTTAAAATTGGACAGTTTTCTAAAGGCTCCGAAGAACTTAAAAAATGTATTAAGCA CGACCGAATTCTTAGCAATTTTGAAGAATCCGCGGCCTGTCTCACCGGCGTAACTTTTGC GATTTAATTATTATCAAGGTAA7CGATTGGGATCTATTCAGGGAATTATTGAAATTATAT CCCCTATCTTTGACAAACCGCAGGAACAAGACCTACCAGAGGGGGGTGGAGATTCCATGG TTAGTGTTTAGTACAATCTTTATTATTAATCTCTGTAATACGTCTTAAGAATTTCATTAA CCTCGAAAAATCGAGCTTCATA7TTTGATTAGAACTGTTATGCCGGCTGTTGTGGAATTT ACTTTGAGAAAATGCTATATTTAGATGGAGCAGACTAAGATACAGGACATTATAAGAACA GCGACGGTTATGGCGCTCGGAGTCACGGCAGATACGCGATAACCGGGACTTATTTGCTCA TAATGGGTTTTCGGCAACGTTTCCGGATACGCAACTCTCATCCCTCcCCTTTTGGAGAGG ACCGCTCGAACGGAGGTCGCTTTACACAGCACGTATATAGCTCATAAGGATTTCAATGGG TCCCTTCTGAGGTTGGTACATTTCTTGCGACCAAAGCTGACTTCCATCATGTTTCTAGGT GGCCCCATTCTGTGGCCCAGGGAATTCGGGCGGTATCGCGGCATTACCGCGTCCGGAGGG AGGCGTCCTTGCGAGCCGCGAGTCTTCACTAAAACGCTTTGTGATCGCCATGTCCTTCAC TCTACACTGAGGCAGTCGGCA (SEQ DD Nr: 142)

PMON28534

GACAACTGTT7 CATTACGATCGATGAAATCACAAATCACTCAAAGACACCATCTGGACCC CTGCTGGAATTGAAGAATTTAAATAACATAGACGTATATATTTTGATGGATTCAAATCTT CCACTTTAAAACTT7AAGAGATTTGTAAGGCCTCTTTAGAATTTAGTAAATATATTAGGT TCTGAGGCAATTCTCGGCAATCTCTAATTATCTACGGAGTCCGGCAGGGTTGCATTTTGC GCATATTTAATTATGATCAAAGAAGGTAACTGGGAAGAATTTTGGCAAATAATGATATTG CATGTGCTTACCCTTGACGTACCCCACGAAGAAAAGTACGTAGAGGCGGGTGGAGGTTCG AAGCGTGAATAGTCCCCTCTAATTTGTACCACCAACCCCTGTCGTGCCTCTAAACAATCC AATAAATCTTTAAAGACGTTGTCTACAATCCCCACGGTCGCTCGTGCGGATTCTAGTTTG GCAGATTGGAAAACCCAGATGGAGGAGATCAACCGACAGGACACTGCGCGAGCACTGACG ATTCTGTTGGAGGGACCGATGCGACCATGCCGAAAAATGGGACGCACCTATCTTTCATCG ACCGTGGCGCACCTCTCTGGATAGCTGAGTCTCACTGTTGCCGGCATGCAGACCCTATTC CCAACCCAGCTCTTCCGATAGGCCAGCATAAGAGGTGATAAGGATGGCAATGGCATTTCA GCGAGTTTCTAACACCCGCTTTCAGCAAACCTGGGTCTCTTGACGCCTGTAGCAGGGTGA TCTCTTTGTGTCACGGAATTTGGACGGAACCCGGCTAATATGGGCTGCCAAGCCTGGCCC GATTCTCATTTCCGACTCCTAAGTAAATTCCCTCGTGATTTGCATGCCCTTTAGAGCAGA CCCACTCAGTGCTTACAGCTTTACCCT (SEQ DD Nr: 143) pMON28535

CGTTATTGTTATATAATGATAGATGTAATTATAGATCATTTAAAGAGACAATTTGTAAGT

CCCTCGGATCTGAACAACTTCTATCAcGAAGAGGCCTCTATGGCGACCGATCCAAATGCT

AGACCTCCAAACGTCGTCAGCTCGGC.TAGCCGTGCCTTGTAGCCTCATAACGCATGAGGC

ACTGAAGTAATTCTTCGTAATTCCCAAAAATGTGCGCAATATCCCAGGGAAATATTATCC

GCATATTCAATTATCATTAAGGCAGGTAATTGGGAACAATTTCGGGTAAAATTGATATTG

CATCTGGTTATCGTTCTGCTAGACGAGGAAGAAGAGCAGCTACAGGCGGCTGCAGGTTAA

GACCCTGAACACTCCCGCGCAACCCCTAACATGAACCCGTTTCACCGCTTTTAAGAATAC

GATAAATCTAAAAACATGGTTTCGTTGTTTGTTGTGGATTTTAGCTTGGAAGTATGGAAT

184 424

GCCCGCGTCTGTGGGACCΓGGGTGGAGTACATTCCGGGAGCAGTGACCCTTCTGCTTGGT TTGTCTGTCTCAGCACCT3GGTGCGGGTTGACCCAGCTGTCTCTCATCCCTCCTGGTTCGT CTTCΓTTTGCAGGTCCGTCΓCCCCCTTTTTGCCCΓCCAGAGCCTCCTTGGAACCCATCGG CΓTCCACAGGGCAGGACCCSGGCCTGGΓGGTGGCCCΓGGTCCAGCTTCCTGAGCTTCGGG CGCCCTCTCCTACGAGAGGTCTCTTTCCTGATGCTTGTAGGAGGGTCCACCCTC^,CTCGGC GTTTGGTTCCTCTGC.G\CGTCCTTCGGGGCGCCTCCCCAGTGCCGCCGGCTTGTGGGCGC CTGCC_CCC_CGC_TAAACTGCCTCCTGAGGCCCATCTCCTTCGCAGCAGACTGAGCCATGTC CCGCGTTTTΓGCCCCCTTΓΓTACACCT (SEQ ID No: 144) pMON28536

TCTGGCGTCTCTATAATGATCCTGCTGGTTATACATCACTΓCGGG-AGACCACCTGGGGCT TTCCTTGGCCCTAA<GGGXTCΓAGTAGG(GGACGTCTCTATCCTGATGGACCGAAGGGCG CTGCTTCCAGGCCTGGAGAGCGTCGTCGG3G(GΓΓTTCΓGG-GGCTTAGJAGGGTGCATCGGTC S/CCGGTTCGGTTCTTCGTcGGCCCCΓGGCGTGTCGCCCCGCTGCCΆCGGCCGCACCCTCT CCGΓGTCCAGTCATCATCCGGTTGGTTTAGTTCTΓGGTGG?TCCGGG-GGSGGCTGACTGCG TGCΓCTTTCGCCCTTGAGCCGGCCCAGTTGG:CGGAGTACGTAGAGGGCGGTGGAGTCGCC CCTGTTTGACCGTCTGGTCCΓAGCGCTΆGTATCΓGCCΓGTCTCCTCCGTCTAGAGAGTCT CGCGGGTCCΓCAAACATGGCΓCTTTAGTTTAGCΓGGTGAGίGGΓGG(GGGTCCCAGATTTGT CGCGΓCAAGGCACAGGACAGCCCCTGGGCAGTTGGCCΓTCTGTΓCGAGGGAGTGGTGTCG CCGΓGGTTGΓAACTGGGACCCGGCTTTCCCTCAGCCCTCCTGGGGCAGCTTTCTGTGCGT TTCΓCTCTCCTCCTTGGGGCCCGTTAGAAT?CTCCTTGG(GG?CCAGCTTCCTCCACGTTTC SG3TGΓCACGGCTCACΓGGTTGCCCΓG.GTCCAGCGTCCCCGGCCTCCCGAACCTGCTCCGG. TCGGAGGCGCGTTTCCTGAGCCCTCGAGGAGGGTCCACCCTCTGCGTCAGGGGATTGTGC TTCGACGCCGGCAACATGGCCTCCCGAGCGCCCTCCGTΓTGTGACCTCCGAGTCCTGGTT GGGΓCCΓTTΓGCGACTCCCAGTTCCTTCAGAGCAGACTGAGCCAGTGCCCAGAGGTCCGC CCCCCTCCCGCGCCCTCΓΓCTCTCCCT (SEQ ID No: 145) pMON28537

CCTGACCTCTCTAT-GSΓGAGCCTGTTGGTTATAGAGCACTTCGGGAGACCACCTGCGGCT TTTΓTGGGCCCGAAC.?GϊGCCCCGGCGGCTA.GAGCTCGCCAGCCTGATGGACCGAΆACCGG CTGΓTTCCAGGCCTGGAGAGTΓCCCGCGGTGCΓGTCΓGGΓGATTAGTGGGAΓGCATCGTTT· GCCTGTCCGGTCCTTCGΊ^,CGGCΓCCGAGCATGTCGGCCCGCTGCCACGGCCGCACCGTCG CCGΓATCCAATCATCATCΓGGTTAGTTTACTGGCΓGGTGTTCCGGG(GGGGGCTGACTTTG TGCCTGTTCACCCTTGAGCΓGGTCTAGGTACCGGAGTACGTAGAGGGCGGTGGATTCGCC CCCCTTCGACCGTCTGGTCCCAGCC’CGCGGATCΓGGCCGTCTCCTCCGTCTAAAGGGGCG CGCGGGTCTCCAAACATGGTGGTTCGCGTGGGΆGTGGFGG-GGGkCCCAGATGGAGTGGGCC GACGCACGCCACATTCTGGTGGTAGGCACCCTTCTGCTGGAGGGAGTGATGGCAGCGCTT TTGC-AACTCTGACCCACTTCCCCTGCAGCCCTCCTGGGGCAGCTTTCTGGACAGGTGCTG CTCΓCCCTCCGGGCCCTGCCGGGCGGCCΓTGGTGGCCAGCTTCCTCCACAGGGCATTGCC GCGCCTCGCGGGGATCCCΓGGTTCAGCTTCCTGAGCTTCCCGG. ACCTGC TCCGATTGGGT CTCCGTTTCCTGATGCCTGCTGTTGGTTCCACCCTCTGCGTCAGGGCGSTTCGGCGTCGAC TCΓTCCGAΓGTGGCGTCCCCCGTCTCGCCTGCTTGTGACCTCCGAGTCCTCAGTAGGCTT CTCCGTCACTCCCATGTCCCCCAGAGCAGACTGAGCCAGTGCCCAGAGGTTCACCCCCTT CCTGCGCCTTGCCTTCTTCCTGCTTGG (SEQ ID No: 146) pMON28538

TCCGACTGCTCTAT-GSΓGAGCCTGC(GGGC^,TATAGATCACTTCGGAAGACCACCTGCGCCT

TCTΓTGGGCCCGAACCGCCΓCΓGGCAGΓCG_lGACGTCTCTATCCTGATGGACCGAAGCCTT

CCGCTTCCAAACCTG<GSGAGCGTCGTCGG3GGCTGTCCGGS-GCTTAGACGGSTGCATCGTTT

184 424

GCCAGAACCCCTC']hΓCGTrAhTCTCCAACCGTGTCCACCCCTGACCCCAACTACGCTCCTC CACCGCCCCACCATCATCGGGGCGGGTGGCTGGTCAACCCCCTAAACCTAA.CCACTACCT CCCCCAACTGCCCTTGAGCGGGCGCAGdCCCTCACCTACGACAAACAACAACAACCTT TTAAACACACCATCTGGTCdGCGCTGCCGGCmCACTCCTTTTACCCCCGACGCTC TCCAACCCCCCCCCTCATGGGAGrCCCGGrCCGC:CCGGCCAAAAGCACTTAAAATCCCAACC GCCCCAAGGACGGTGGCCCTTCTGC'AGGA3GGGACAGTAACGACGCAAGAGCATCCAAAC CCCCTCCGCCCCTCGGCCCTCCTGGGGCGGCGGGCTAAACCAATTCACCCTTCTCCCAAA ACCCCACGAGGCCTCCTTGGGGCCCGGCTTCCTTCGTCAAACGAGGTCGCGACCCCCAGA AGCCCTGGCACCATCTTCCTGAGCTTCCCGCACCCACCCTAGAACACAACATACCCCCCA CCACCCACGAAGAGGTCCACCCTCT(C:GTTAGAACCTCTAACAATGCTAATAATCGCGCA ACACTTTCGACACCGCCTGCTTGTGGCCTCCGGACTCCTGACCAACCACCCTACACCCTT TCCACTCCCCGCGGCGGGCTGGGCCGGTGCCCGAGAACCTCCCCTCCACCCCCCTCCACT CCACCACCCACCACAACCCCCCATCCA (SEQ ID Nr: 147) pMON28539

ACCGGC·CACTCCGT(G-TGGTCGGTGlGhΓTGTGTGCCACCCCAGACACCCCTCCATGCTC CCACCAAGCCTGrGCCGGCCTCGGTGGCGlGGCGCCCCCCCCCCAGCAAGCTACTGTTCC TACCCCCCCGCCCTGGGGGGCTTCGT(AACGGCTACTCCAACCCCCATCAGCACGCTCAAC GCCAGAATCCCTCTTCGTGGTCTCCGGCCGTGTCTGCCTCCCATCGCAGTCACGCCGCCC CAGCGCCTCCCCGTCGTCGGGGCGGGTGGCTGGC1GCGCCCCAAAACAGGCCACCACCT CCCCCAACCGCCCTTGGGCGGGCGCGGG(mCGATCCACCAGAAACAACAAGAACCTT TCAAACAACCCATCTGGTCCGGTCTCTGCTGTCCGCCCACTCCCCTTACCCAACAAGCTC TGCGGGCCCCCCGCTCGTGGGGCCCGC^,rΓGCCTCCCGCCCTCCCCAAGACGACCCCTCAAG TGAACCCACCCCCTCCTTGGGGCCCTGCΆGΆGCCCCCCGAATACTTAACCCCTCCCGCTA AACGAACCCGCGGCTCAdGGATCCdTGCCACCTCCTCACACCCCdTGCCCACCT TAGAAGCGAACACGTTTCCTGGTGCTTGTGGGGAAACCTATCCCCTGTACCGAAATACCT AATAATGACAACGGC(AkCGTGGCGTCCCCGGCGCCGCCGATCCGCAGTCCCCACACTCCT CACGAATCACCTCGTGGCTCCCGTGTCCTTCGCGACCACCCAGATCCACACCTCACAACC TGCCTCCCACTTGCGCCTGTCCTGCTGCCGACCACAACTCCCGATCCAAACACGCAAACC CCTTGAACAAGGGAGΆCCAAGGCACΆGGACATTCTGAAAACAACAGTCCCCCCATCAACA AAGACAGCGATGGTGCAGAGACAACTG(SEQ ID Nr: 148)

PMON28540

ACCGGTCACCCCATr'TCΓGATCGATGCCGhΓGATACGTCGTCCCCCACACTCGCCCATGCTC CCACCAAGCCCATGTGCTC(CTCAATGACGrCA3ACACCCCCCTCCCAGCAAGCCACTACCCC CAGCCCTCACA-CCTGGGGGGCTTCGT1GGGCTGCCCCAACCCCCACGCACACCCTGAAC CCCAGAACGGCCCTTCGTGGTCTCdCCATGTCCGCCCCCCATCGCAACCACCCTCCTC CAGCTCCdCC rCΓCATdGGCAGGTGACTGGdACCCTCCAAACGCCACCAGCATCT CCCTCAACCGCCCTGGAGdGCGCAGddCAACACACGACAAATAACAACAATCTT CCAAACACACCATCTGGTCdTCTCTACTATdCCCACTCCCTTTACCCTCAAAACTC CCCGA.GCCCCCGrτTCATGGGAACCCAGCTTCCTCCCCCAAATGGGCTTCCGACCTGTACG AGCCCdCACCATCTGCCTGAGCTTCdTACCTACCCTAGGACTGAACACACCCCCCA GCACCCAC^,GGGAGGGTCCACCCTCTGCGTCAG<AGGCCCAACGACCACAACGACCACGCA ATACCTTCGACACCGCCTGCTTGTAGCCCTCACACTCCTAACCGGTCACCCCACACTCTT TGCACCTCCCGCGGCGGGCTGGGCCGGTGCCCGGGAAGCTGTCCCCCACCCCCCCCCACT CCACCACTCACCATGGGCGTGGGCGGGGGAdCAACAAGTTCCACCAACAAGACAdA ATGCCAAGCGCCTTGGGGGCGGGGGCCCCCCCGCCAACAAAGACACCAACGATCTAAAAC CCGCCAAGGGGCGCTTGCCTCTCATCCCTCCTGGAACGATTCGCGAAGCGAGCCCACCCT CCCCCCAAAACCTCACCACACCCTTCC (SEQ ID Nr: 14 9)

184 424 pMON28541

GCCATGTGTTCTATTA.CGATGCACCAAATCATTCACAACTT.AAAGAGACCACCTGTACCT TTCACGGACGTGAAGAAACTGAACCATGTACAACCACCTATCCTGATGGACTGATAGTTT AGATΊ^,TTTAAATCTGCAGAGCTTCGTAAGGGTTGTCAAGTACTTAGAAAATGTATAAAGT ATCCACGCAATTGTCCGTAATGTGGTACTACGCCTGGACTCTGCCACGGCTGTACACTTT TGACACGCAATAATAACGAAGGCΆGGTGΆCTGGCCTTGAATTCCGGG7ATAATCTGAAGTTT TACCTCCTTATTGTTGACCAAGCGCAGGAACATCAGTACGTAGAGGGCGGTGCAGGCTTT TCCCGCGAAGG'cTCTGCCCCAATCTCTACTATCCTTCCCGTCTCCTCCGTCTAATCAAT_TT TACAATTTCCCAAAGACCGGGAGGACCACAGCTCACCTAGGΆTCCC7TTTGCCATGTTCCTG AGCTTCCAACAACTGCTGCGAGGAAAGGTGTGTTTCCTGATGC^,TΓGTAGGAAGGTTTAAA TTCTCGGTCAGGCAATTAGCGGGCCTACGGCGGCCTTCATGGCGTCCCCAGCGCCGACTGCT TCCCAGCTCCGAGCGCCGAGTTAACTGCTTCGTGACTCCCΆTGTCCTTCΆCAGCAGACTG ACAGAGTGGGGAGACGCCGACCCTTTGCCTACACCTGTCCTGCTGCC7?GCTCTGCACTTT AGGTTGGGAGAACCCATAACTGAGATGGAGGAGATCTAGGCACAGGACATTTTAGAAGTT. GTCACGATTCTGGCCGAGGGACTCATGGCAGTATGGGCACAACTGGGACCTATTTGTTTC TTACCGCTAGTGCGGCAGCCTCGTCCACACCTCTGTCCC(7TCCTTGGGGCTTTGGACAGG CTAGTCGCAACTGACCTCGATGGAC.TG (SEQ dd Nr: 150) pMON28542

GCTTAGTGCTTTATTATGATCGATCΆATT'Ϊ'ATΆCΆTCΆCTT?TAT7AGACCACCTGTAGAT TTGGCCGACCCAAACAAAGCCAATGACGATGACGTCTCTATCCTGATGGACCGAAATCTT TGACTTACAAAAGTGGACAGTTTCGTAAGGGCTGTCAAGAACTTAG7ATTATAAATTAGAT ATTCAGATAATTCTTTGTAATCTCCAACCATGTCTGCCCTCTGCCACGGCTATACTTTAT GCAGATGGATTTATGATGAAGCGACGCGATCGGCAACAATTCCGGG7AATAAATGAGGTTG TATATGCTCACTCCTCAGCAAGGGcACGATCATCAGTACGTAGAGGGCGGTGGACCCTTC CCCCCTCAAGTGTGTCCCGCAATCCCTACTATCAACCCGTCTCCTCCGTCTAAAGAATTT TATTAATCTGCAAAAATCGTTCAAAAGGΆTACTAATCCATTCTTCCTGAGTTTTCAACAC GTGGTCCCACGATAGCTCGGTTTCGCGATGGTTGTACGAGGGTCCACCCTCTGCCTCAGG GAACTCGCTCCTATTCGCCGCAACATGGCGTCCCCΆGC<GGCGCCTGCTTGTGATCTCCGA GTCCTTAGTTAAATGTTTTGTGACTCCCATGTCCTTCA(TT3CAGACTGAGCCAGTGCCTA GACCTTCATCTTTTACTTAAATCCCTGTTGGTGTTTACTGTGGACTTTAGCTTAAGAGAA TGCAATAGGCACACCCAGGACACCAAGGCAAAGGACATTCTGGGAGCAGTGACTTTTTTC TTCGAGGGAGTAATGGCAGCAAGGGGACAACTGGGACGATCTTGCCTCTCATTATTACTG GGCGAGCCTTGTGGAGACGCCTCTCCGCTTGCCGGACACCTGCAGAGCCTTTTTGCAATG CAGGCTCCCGTACAGGGAAGGAGCAGA (SEQ DD Nr: 151) pMON28543

CTTTATCGCCCTATAATGATCGATGAAATTATACATCTCTT.A?AT7AGACCATCTCGACTT

TTGTTGCATTCATAAAACTTTAATCACGAAGACGTCTCTATCCTGATGGAATGAAATTTT

CGAGTTCGTAACCCGCACAGGTCCGTATGGGCTGTCAAGAACTTAG7AAATTGCATCAGGT

ATTGAAGTTATTCTTCATAATTTTCAACCATGTCTGCTAΓCTGCCACGGCAATATCATTT

CGACATCCTATTATTATGTAGGAAGCTGACCGGCAAGAATTCCGGGAAAAAATGATGTTT

TATTTGCΊTACATTTGACTAAGCGGAGGAAAAACAGTAGGTAGAGGGCGGTGGAGGCTAA

TCGGGTGAACCGTCTGGTTTAATCTCTACTATCAACTGGTCTCCTCCGTCTAAAGAATTT

TATAAATTTCTAAATATGGATTTCATTGAGATCTTTCTGAGCTTCCAACAACTATTATGA

GGAAAAGTGTGTTTTTTGATGATTGTAGGAGGGTCTACCCTCTGCGTCAGAGAATTTGGT

GCGAATGGGGGTTACATGGCGTGAGGAGCGCCGCCTGGTTGTGACCTCCGAGTTGTCAGT

AAACTGGTTAGTGATTTTTATGTGCTTGACAGCAGATTGAGCCΆGTGCCCAAAAGTTTAT cGTCTGAGCACACATCTCCTCTTGGA'ΓGCTG^ΓΓGGACCCTAGCTTGGGAGAATCGAAAACC

184 424

GG1GGC1G11G1GGGAG1CCGGGC1GGATTCTGGGAGCAGTGACCCTTCTGCG11GC11G CTCGGCCGG1GGG111CGGGGCTC11GCCCACTTGCCGCTCATCCCTCCTG111GG1GGG TGGGGGGAllTGGlGGGGGTGCTTClCCCCCTGCAGAlCCTCCTTGGAACGCAGCGGGGT CGACAlCCGAllGCGGGGCCGGAGGAC (SEQ ID Ne: 2 54) pMON28544

1CTGAGT1GGGGGGGAG1GTG1GTCAGGTTATACATCAGTTAAAGAGACCAGGTGGGCCT TGlGGlCGCCGlGACAGGGTCGATCGG<CAAGACGTCTCGATCCTGATGGAGGGAGAGCGG GlGGTGGGAGGGCTllGCGlCTTGCGGAGGGCTGTC(CAGAACTTAG_JAACATGGAGGGllT GTGGAllGGGTGCTTGCGAGGGGGGGGCCATGTCTGCCCTCTGCCACGGCCGGAGCGTGG CGAGGGCGGGTGGGGGGGGAlGCGllGlGCTGGCAAGAGGTCCGGGAAAAAGTGGClGGC TGGGTCCTTGGGGTTGGCGAGlGlGGCCAGC(ACCΆGTACCTAGAGGGCGGTllGllGTGG GGlllGCGGGGCTGGllGGCGGTGGGCGCTATCAACCCCTCTCCTCCGTCGAGAlGACGT GGGGGGGGTGGAGGGGGlCCGATGCGGGTGAGCTTCCAACACCTGCTCCGAGlAGAllGC GCTGGGGGlGTCGGGlGGllGllCGGGGCCCTCTGCGTGGGGCAA^rTTCGlCGGCAGGllG CCCGAGGCllGCTGCCCGlGlGClGGTGGTTGTGACCTGCGAGTCCTCAlTAGAGTlCGT GlGlGGCGGGGGlTGGTTGAGACGGlGGTGAGCCAGTlCCCAGAGGTTCAGCCTGTCGGT GGGGGTCCGGT1CTCGCG1GG1T1CGG‘CTTAGCTTGG1A1AATGGAAAACCGAGGGCGG1 1G1AGGAG1CGGCG11GGGTGCTC11GCCAGTGACCCGTCTGCTGGAGGGA1GGGT1CGG CGACllClGGAGCGCCCGGGGAGTGCGGTCTCATCCCGGGGCGGGCAGCTTGCTllGGGl 1GGC1GGTGGGGGTG1111CGCG1GGCGCCCTCCTT11AGGCCGGCTTCCTCGGGAC11G GClGGGGCGCGTGACGGCCATGGGGGC (SEQ ID Nr: 153 5 pMON28545

CGGGAGGlGGGTGTAGTCGGGlGTlAGGTTATACATCGCGTAAAGAGACCACGTlCGGGT GGlGTlCGCGGGAGGAGGGTCAGTlGGCAAGACGTCTGTGTCCTGATGGACGlGGA.GGTG CGGCGGGCGGGCCTllGlGlGCTClTGAGGGCTGTCAAGAACTTAGAAAATlGATCGClG AGTGGlCCAGGTGGTGlGAGGCGGGAGGCATGTCTGCGGCCTGCCACGGCClCGCGGTGT CGGGAGGCGAGGATGATGAGllCAllTlGCTGGCAAGAGGTCCGGGAAAAAGTGAGCGGC GGTCGCCTGGGGGGG1GCGAG1C1GGCCAAC(GCCAGTACCTAGAGGGCGGT1GG11GGGG GGGllGlGACGlTCGlCGCGAGGGGGCGCTATCAACCCGTCTCCTCCGTCGAAGlGATGT CGGAGATGGCGAGAGAGllGGGGGAGT(lGCATCTTCCTGAGCTTCCCGCCACGTlGTGCCG C1AGA1GGCG1TGTGGT1AG1CTTCGGCGAGGGTCCACGGTCTGCGTCAG1GAATTGCCG ClCGAGGTllGlTCGGGGlGGCGlGGGCCTTGTGACCTGCGAGTCCTCAGGAGAGTCGTT GlGcAGTGCCGTCTGGTTGGGAlGGlGGTGAGCCAGTGGGCAGAGGTTCAGCGGTTCGGG GGACCGCGCCGCGTCCGGCGGlGllGGTTTAGCTTGGGAGAGTGGAGAGCCGAlGGClGC CGCGGGGA1CGGCGC1GGGGTCG111GCCAGTGACCCTTCTGCTGGAGGGAGG1AG11GG 1GGG1C11GGGGGTC1CGGGGGGTG1GGTCTCΆTCCCTGGTGGGGCAGCTTTCGG1GGGC 1GGG1GGTCGGGGGT1CCCCCGT1GGCGGCCTCCTTGGGACCCAGGGCAGGACCACGCGG GGGGAl (SEQ ID Ne: 1545

PMON15981

ATGGCCCACT GCTGTATTAT GATCGATGAA AGGTGGGGGC ACTTAAAGAG 51 ACCAGGGGCA CGCTGGCTGG ACCCGAACAA CGGCGAGGAG GCA^(^_J^(^(^'TC'T 101 CTGTGCGGAT GlGTGGJAAC CTTCGACTTC CGAGGGGGCl GAGCTTCGTA 151 AGACCCTGTCA AGJACTTAdA AAATGCATCA GCCTATCCAG CCA^^^f^CTTi^G

201 TAATGCGCCG CGGGGlGTGC GCCGGlGGGC

251 CAAGGTGGGG CGGGllAGGl GACTGGCCAAG AACT’CGGClG AGGCACTGGCG

184 424

301 GGTCGCTCCC CC(ΊTTTTC( ΑΤΑΑΑΤΑΤΑΑ A(AΊGAC(CC

351 TACCCCGCCΊ CΊTΊTCAACA ((CCAGCTAA CΊΊ((CCCΊC

401 TATΊGΊΊCΊΊ ACTC(ACAAG TTTTATAAAT CTΊCAGAΊ(C

451 TGCCCΊTGTΊ TΊAGCAAAΊC ACTACTACTC AAAT(TCΊCT

501 TCACCΊCΊΊΊ TCAGATTTΊC ATTTTAATTA AATTTTATGA

551 ACCCCGCΊΊ( ATTTTATACC AATTATGTTT CΊC(ΊC(AAA

601 ACΊΊGCCGGC AC(C(TCCΊC TAAAGTCACT ΊCC(ΊCCCAA

651 ATTCCGTCCΊ AΊCC(CATTA CΊ(CTACCAG TGAATAATAA

701 GAACCACCCΊ ΊΊΊCACCCTA TGACCTACTC AAAACATTAT

51 ATTCΊGCΊGG TTCGACACTA AATAAAGAAA ATΊCCACCTA

801 AcGCGCΊCCΊ CCAC(AATCC TATGCTACAT CΊT(ΊACC(Ί

851 CCCCTCCTCC ΊCCCA(C(CA CTTGCGCTAT C(AATTTCAT

901 TTTΊ(CGCΊC CΊTCAΊGTAG CCCTGCAA(A ΊA(ACA(AC(

951 ΤΤΑΓΑΤΊΤΤΑ CΊAΊCΊCGAA GAA(ATTACA CACΊ(ΊCCCA (SEQ ID Nr: 155) pMON15982

ATCCΊC(CΊC CΊTΊC(GA(T CATTAAGAAA (TTATAC(CΊ

ATT(ΊΊCCΊG ΊΊCCCCCCAA (TCTAAATAA CCCC(ATCAΊ

101 TTCGTΊCCGC ΑΑΑΊ'ΤΑΑΑΑΤ CCTCA(CCGC TAGATCTACA

151 AACCΊGCGTG ACACTCTAAA AAGGATACT( ACCACGAAAC

201 TCACΊGΊΊAG ΊT(CCTCCAT TTCTTACTAC AATCACATTT

251 TAACTGCΊGC TA(CATAAAC AACTAATAAA A(CTTTAACA

301 GGTCGCTCAC CC(ΊCTGTA( ATAAACACAA AAATAATAAC

351 TAAGAAACAT CTTΊΊCACCC (ACTACCCAA CTTAATTCTT

401 TACTTΊΊCΊΊ CCTC(AAAA( CCTCACAAAT ΊTTTAAAΊAC

451 ATACACTΊΊ( TΊCCAAACAT ACCATAACGC AACACTACTA

501 TATΊ(CTCAA TGATAAATAA AAAAATGAAA AACAATCΊTC

551 CCATTTACCA CCΊΊ(TATTC CCCCTCACTC CCACTCTTT(

601 AAACCCAGTΊ CACCCACTAA CTAGCTATAA AATTTCCCAC

651 TTATCTCΊCG TATTATCTTA CACAACCTAC CAATAACCTC

701 TATΊACCGCC TΊΊCATTAAT CTTTGATTTT AAAATGTΊTC

751 TTACACTACC CCACAAAAAT TTAAAATAAT ACTATAATAT

801 ATTACCCCΊΊ (TTCATAAAT CATATTATTT TCAAAAATCC

851 AAT(TCΊCTC AAATATTTTT TAAATGTTTT GCAATCTΊCC

901 ATTΊCCT(AΊ CCAΊ(AATTA TCTAAATTAA TCTT(CACTA

951 TTATTGACAC TGTTTATAAA TTTGAAAAAA AAGACTTC(A (SEQ ID Nr: 156) pMON15965

ATGGcCTGCC CPATTTTAAG CPAGCTAGAA APGACAG(TC

ATTGTΊCCTA ΊΊCCCATCAC (TTTAAATAG TTTT(ACCAT

101 TTACTTCCAT AAATTAAAAT TCCTAATGCT T(AATTCAAG

151 ACCCΊCCGΊ( (CAATTTAAG ACAGAΊATT( ACGACAAAAA

201 GCACΊCΊΊ(A ΊΊ(CATTTAΊ TTTTTATTGT ACTTCTATTT

251 TC(GTGCΊAC TAGCATGAAę AATTAATAAA (AGCTTAAA(

301 GCΊGGGΊGCC GCAΊTTTGA( ATAAATATGA AAATAATACC

351 TAACCCGCCΊ CΊTTTAAATC AATTATTTAA CΊT((GTCTC

401 TAT·^^: CCTCAA(AA( GTTTATGAAG TCTΊ(AATAC

451 AGΊΊGCΊCΊΊ CCATAACAAC AATTTGACTC ATTGCTTATT

GTATAAAAAA

GΊCATT(ATT

CCΊTTATAAC

CCCATATTTΊ

TCAATAAATC

ATCTTGATAC

AΊATATGATG

GTAAAAAGAT

ATTAATTCAT

TGAATTAGTT

ΊGCATATACT

TAATGTTTTC

GAAęTTAAAC

TGA;

AΊTGAAAAAC

AAAAATAGTC

AAATGGTAC(

T(ATGTTTTA

CTTTAATATT

AAAATAAATA

ATATAAAAAA

ATGAATAATT

CTTGTTTAAC (ΊTTGATTAT

ATTTGATAAT

ATATTAAATA

AAATAGTATA

CATAGAATT(

ATATAAAATG

TTTAAAAAAA

CCATAATTTA

TTTTAATTAA

CTTTGATTTC

C(A;

TP(TAAAG(G

AAAAATAATC

AAAΊGGTATG

ΊAATGTTGTC

CTGTA(TAGT (AAATGAATC

GTCTAAAACA

GTT(ATAATT

CTTTATTAΊC

CATAAAATTT

184 424

501

551

601

651

701

751

801

851

901

951

CCTGGAlGCl GCTCGGACAT GGCCGGCGCA AGGGCTCCAT AGCGGGGGCT TCCTGCCCCA TAGCGGCCTT CCCCCGAGTT TTTGCCACCA CCTGCAGCCC (SEQ II Nr lGGGACCGCG GlCTAGACTA AGCCTGTAGA ΚΟΚΟΟΤΟΤ GlTGGGllTAC GlCTG3GCCCT GTCCTCTACC GllTCCCACC CTATCTGGCA ACTTAGGGTG : 157)

OCCTGGTlTT

OCGGllCCCG

OlTGGlCCGG

OCGCTTGCTG

TCCCTGCCCT

OlTGlCGCCT

AGllGlCCCC

OGCCGGAGTC

OCTCAGGCCGc

OTTGGlTGGC

ATCTGCGlCG

CCTGlTCTTC

AGGCGCCTGG

CTAGCCGCGC

GTCTCTCGCC

GGlCTCTGGC

GCTGGCCTTG

GTCAGCGGlC

GlGGCG(GGA(

CTTCGCCTlG

CCCGGCGGCG

GCCCCAGAGC

GCGATGGCGC

CACCCCGAGG

GCCCCGGAGC

GCCAACGCCA

GAAGGGATAT

CGTGGCGGAC

GGGCCCCGGC ,AA pMON15966

ATdCTAACT(lCTTΓATAAT OCGCTAGClG( AGGAGACAGC ACTTAAAGGl 51 ACCACCTGCACCTTTGCTGG AGTTClGGTG( CCTGTGCΓGAG GAAGACGGCG 101 CGAGCCGGATGGAGCGAAAC CTCCGCGCTC ΟΗΚ/ΟΐασΑ GAGCGGCCGG 151 AG<^<l^T<^':^<^^G^C^lG^C^^r^'^^GJG AGGGGCAGCA GGTATTGAGG CAGTTCGGCC

01 T.^lGTCTCCA?lCCATGTCTGC CTTGTGlTAC GGCCGCACCC TCGCGACGGC 251 CrTCTCATCATC(GCJGCAGGT GCGCGGCTCGl :^{^}GGΓTCCGGGA AGGGCTCGCC 301 TT<^Tj^T(^‘^GG^l^C(G<^'Γ^<Ξ;l GCTAGCTCAG GlGC(GCAGT ACCTA^GH

51 CGGTGGAGGCTCCCCGGGTG .,GCTTTlTGG TGCTGCΓCTCT ACTAICH^ 401 CGGCGCCGCCGGCGAAAGAA TCTCATlGGG[’ CTGTTGGKCAT OGOGA^^ 451 CCTGCCCTGCAGCCCACCCA GlGlGCTTGG CCGGCCTTCG CCGCGGCGGT 501 CCAGCGCCGGGCAGGAGGGG TCTTGGlGCC TAGCCATCTG CAGAGCGGCC 551 TGGAGGTGTCGTACCGCGTT ^ΑΟσ^Α^ TTGCGCAGCC CGC-CGCCCCT 601 TCTGACATGGCTACACCATT AGGlCCTGlC AGCTCCCTGC GeGAGACH 651 CCTGCTCAAA TCGTTAGAGC AGGTGAGGCGc GAGCCAGGGC GAGaCC^H 701 CGCTCCAGGAGlGGlCGGGGT (GT::AC(AACA AGCGGGGCCA CCCCCGGCGC 751 CTGGTGCTGCTCGGACACTC TCCGGGCTTC CCCTGGGCTC CCCGH^^ 801 CTGCCCCAGCCAGGCCCTGC AGCTGGCAGG CTGCTTGAGC CAACGCCGGG 851 GCGGCCTTTT CCTCGACCAG GGGCTCTTTC AGGCCCTGGA ΑσσΟΗΚ^ 901 CCCGAGTTGGGGCCCACCTT GGACACACTG CAGCGGGACG GCGCCcGCGG 951 TGCCACCACCATCTGGCAGC AGATGG7GC2A ACTGGGATlGC TAA (SEQ II Nr: 158) pMON15967

ATGGCTAACTGCTCTATAAT GA^GAICm ATTATACATC GCTTAGAGGC 51 ACCAACTGCA CCTGGGCTlG ACCCGlGCTGc CCTCAATGAC lGGGGCCGCT 101 CTATCCTGΆTGGATCGAGAT CTGCGACTTC ,CAGGTCTGGA lGCTGGCCGG 151 AGCCCTGTCAAGAACTTAGA Α/ΚΌΟΑΤΟΑ GGTATTGAGG TAATGCGGCc 201 TAAGCTCCAGCCAGGTCGCC CTTlGGlTAC GGCCGCACCC GCTCcGTGGC 251 CAATCATCATCAAGGCACCT GACTGGCTCG5 AATTCCGGGA GAAATGCGCC 301 TTCTATCTGG TTACCCTTGA GCTGl3CGCAG GAACTGlCAGT GCGGGCGCCC 351 CGGTGGAGGCGCCCCGGlGG AACCGGCTGG TCCTGGTCTCC GCTGGCGGCC 4 01 CGTCTCCTCCGTCTAAAGAA TCTCATlGGCΓ CTCCAAACAT CTCGGTTCGC 4 51 GGTGCCATGC CGGCCGGTlC CT<TΓGCTTΓC CAGCGCCGGG TAGGGCCGGT 501 CCTGGTTGCTAGCCATCTCT AGAGCTT·CCG GGAGGTGTCG TACCCCCGGC 551 TACGCCACCTTGCGCACTTT GC^CCGSC^iSGC^/r CTGACATGGC TGCGCCGGGG 601 GCCCCCGCCA GCGCCCGCCC CTAGAGCTTC CTGĆTCAAGT TGGGGCAGTG 651 AGTGAGGAAGΆTCCAGCCCC ATGGCGCAGC dTCCAGGAG ACCCCGCGCGC

184 424

701 CCACCTACCTC GCTGTGCCAC CCCGAGGAGC TTTGCCTCTT TGGACATGTG 7 51 GTGGGCATCCCCTGGGCTCC CCTTCGCTCC TCTCCCCC3TT CGGCCCGTTC 801 GCTGGCCTCGC'GGC(TΓGCCTCC AACTTTATCG CTGCCTTTTC TCCGCCTCTG 851 GGCCCCGGCA GGCCCGGGAA GTTCCATCTT CCTTATTCTT CTCTCCTGGT 901 GACACACTGC AGCTGGACGT CGCTGACGGG GCCACCACCA CTTGGCAGTC 9 51 Α^^Α^ΑΑ C^,GGGGCCCTGG CCCTCTCCCG GTAGCCCTGA CCC (SEQ ID Nr: 159) pMON15960

ATACTGTCAT TCATGCCTGCT CGTTCGCTCT CTGCCCCAGA TCGGTTGTTT 51 CATCCTCTCTCGCTAACTGT TTCCTCTTCC GGGCGATGGC TCATCGTGCC 101 AGCTGCTGCT TTCGTTCAAC CATCCTCGGT GCCACCCCGA TGCGCGTTGG 151 CCCCTTCCTT T.CTCTCTTGG TCTTTCTTGG GCGCCCCTGA TTGTCGTTTC 201 CATCTTCATT CTTTACGTGG CCGTTTTCGG GAGCCCAkCGC CCGATCTTTC 251 TTTGTTTTCTCTAATGTTTC TTTCATTTCC TGGAAGGGAT CGTTTTTTAG 3 01 TTTCGGTCCT CCTCGGTAAC CTTTTCGTGG GACGTCGCCG CCGGGTTTAC 3 51 CATCACCGCC TTCTACTCTG CATCCTTGGT TTTCGGTCTT

001 CC.CTCCTCCT TCTCAATGCG TCCCCTTTTG CTGCTTTCCA TCTTTTTTTC 051 GGTTCTTGTC TTTGGCGTAG TTCCTCTCAG AGCGGCCGGG CTTGTGTTGC 501 CCCCTCTCTT cGTCACTTTG TTTCTTTTTT CGGCGGCTCT TATCTTTTTC 551 CACCτTCGCT C2C^CT^^C^C^CA^C( CCTTCGTTTT AGAGCGTCCT TTGTCCTGTT 601 GTAGAGCCTC; AGAGO/AGAG CCCTTTTGCG GGCGCAGCGC CTTAGGCTCC 651 GCTTTTCTCT ACCTACAAGC TGTTTTCCTT CGAGGAGCTG TGTCTTTGCT 701 GAGACTCTCT TTTTTCCCTT GGAGCTCCTG TTTTAGTTCG

01 GCTTTCCΆGC TGGCAGGCTG TTTTCTTTCC CGCCAGAGCG GTTGGTGTTG 801 ΑΤΑ^^Οσ^ CTCCTGCAGG CTCCTTACGT GATATCCCCC TCTGGTTTGT 851 CCACCTTGGACACACTGCAG TTTTCTTGCG CCGACTTTGC TCTTCTTCGC 901 GGGCAGCAGACGGCCCCTCCCG GTTCACTGTT CCGGCCCGGC CTTTTATTCC 1001 TCCTGCTTGG TAGCCATCTG CCTCTTTTTT TGGATGTGTC GGATTTTTGT

1051 CCCTTTCCTτ CTTTGCCTCT TTTCCCC (SEQ ID Nh: 160) pmON32132

TTGCTTTCTCTGCCTGCTTGTGACCGTCGAGTCCGCAGG_JCCACTGCTCCGTGACGCTTCG TCCTGGCCTCGTCGACTGAGCCAGTGCCCAGAGGTTCACCCTTTGCCTACACCTGTTTGG CTTCTGGTGGTTTACTTTAGCTTGGGAGAATGG2CCACCCCAGATGGAGGAGACCACGTTA TCGTCTCTCCGTGGAGCAGTGACCCGGCTGCTGTACGGAGGGAGGGCAGCACGGGGATCC TCTGGCCCCCCTTGCCTCTCATCCCTCCTG(TCGCAGCTTTCTGGACAGGTCCGTCTTTGT CGGGTTTTTTGGCAGAGCCTCC·GΓGGAACĆ·CAGCGTCCGCCACAGGGCAGGACCACCTCG CCCCATTCTCTCAATGCCATCGGCCGTAGCTTCCCCCCACCGGCTCCGAGGCCCCGGGTTTG CTCTTTCTTCTCTCCGTCTTTGTTCCCCTTCTTTGTATG (SEQ ID Nr: 20 9) pMON32133

TTCTTCGCGCTTCCTGCTTGTGACCTTCGAGTCCTCAGTGACCCTGCTTCGTGACTCTTAG

TTTTGCCCTCTCAGACTGAGCCAGTGCCCAGAGGTTCACCCTTTGCCTACACCTGTTTTT

CGGCTGτTTTGTGACTTTAGCTTGGGAGAATGGCACCCCCAGATGGAGGAGACCAAGTTC

TCTTACCTCTCTGGAGCAGTGACCCTTCTGCTGGAGGGAGTGATGGCAGCACGGGGATCC

CTGGGCCTCCTTCGCCTCTCATCCCTCCTGGGGCAGCTTTCTGGACAGGTCCGTCGTTGC

CTTTTGTCCCGGCAGAGCCTCC'GΓGGACCCCAGGGCAGGACCACAGCTCACAAGGAGTTT

184 424

AT.TGCCTTATTTTTGTGACTCGTTCT.GTTGGCAAGAGGATTCGTGCCTTTGCTCTTATTC

GTAGGAGAGTGGATCCCACCCGTGAGC (SEQ DD Nr: 250) pMON32134

TACCGAGTGCGGCCTCACCCTGAGTTTTGAGCGACGACCAAATTGCTTGCTCAGTCCCAC CTCTTTAAAAGCAGAACCACCAAGTGTTTACAGGCTTACCTTTTCATTATATTTCTAATC CTCCTTAATATCGTATTTTGTTTAAATATATCGATTTTCCTATTAAAAATATCTTAGATT GAGGTGTTTCCGAGTGAAGCGTTCTTTTTGGTCGTGGGTGTGTTGGCTGCTGGGGGTGTT CCCGGACTAACTTGCGTGCGATTCTTTCTCGGCAACCTTTCTAGACAGGTGGGCCC·CCTG CCCGGGGTATCCCAGACGACGTTTGGAAGACAGACCCTCTCATAGGCCAGGACCACAGTT CTGAACGATCGATTCCGGACCTTCTTGAGGTCGATAGAATTGTTTCCAGCAAAGGTGCCC CCGCTCATGCCTCTAGGAGCGTCGACTCCGCGACCGACG (SEQ DD Nr: 251)

Pmon13181

CtGT^G^C^GC^T^iAT GCGATGTATA ATTGTTGGTC 7^AATTATAGA TCACCTAAAC 51 AGACCACCTG GAGGCTTGGC GCACGGGGAC TLAGTTCTATG ATGAAGATCT 101 CTCTATCCTG TCGCATTCTA ATCTCCAGTC CCCATACCTC GAGAGTTTTG 151 TAAGGGCTGT GATCTAATTA GGAATA?CGAT AAGCCATTGA GGGAATTCCT 201 CCCTTATTCTCC AAGCATGTCT GCTCCCCTGG AGGGCCCCAC TTTTCTGATA 251 TCCCATTCATC TTAATCCAGTG GGCACGCCCA ACAATTCCGG GAAAAACTCA 301 CGTTCTATCT CCTCTTTGTT GAGC7CTGTG TGGTAGTAGT GTAGGTTgag 351 ggcggtggag gctcCATGAG TGGTCGGCCA CCTTGAATCT TTACTACCAT 401 CCCGTCTCCT ACGTGTTTTA TCTTCTCATrCc ATGTGTTATT ATCTAAGCCT

451 CCGCATGC.TA CCCC (SEQ DD Nrc 257)

Pmon13180.Seg

CCATGGCTAA GTCCCTTTTT ATGATCGGTC TAATTATAAA TTAGTTAAAC 51 AGACCACCTG CTGACTTGTT GGACCCGTTCT TAGCTTAATG ATGAAGACCT 101 CTCTATCCTG ATGATTTATT ACGTTCCACT TGGAAACTTG AAGTGCTTCC 151 TAAGGGCTGT GTTGTTCTTA GCTATTGCAT GAGGTATTGA GGGAACCCTT 201 CGT.CTTCTCC CTGGATCTTT GCGCTCCCGC ACCATTGCAC CTTCTGCTCT. 251 TCCAATCATC ATGTTAGCAG GTG7TCTGGC/C TGAATTCTAG GTATAAGTGA 301 CGTTCTATCT CGTTATGCTT G7T7C7TTGCCC ACGAAGAACA GTTGCTAgag 351 ggcggtggag gctcCCCGGG TGGTGGTTCT CCGGGCAGAT TTTACATATA

401 TCATTGGGCT CCCTTCTTT (SEQ DD Nr: 258)

184 424

Tablica 3

Sekwencje białek·

PMON26458pip

SeePeoAiaProProAlaGjsAspLluArgValLluSlgLyyLluLeuArgGspSerHiy ValLluHiySerArgLeu.SerGln(GcyPrylluValHiyPryeeuPryGhrPryValLeu eluP:roAlaValAspPheSerLeuGlyGlu.GgpLyyGhrllneetllulluGhreysGla ClnAypIllLeuGlyAlaValThrLeuLeuLeull·uGlyValMetGlaGlaGegl lyGln eeullyProThrGjSLeuSlrSerLluLeuClyllnLluSlrllyClnValGAgLluLeu LeullyAiaLluGlnSerLeuLeuGlyThοllnLluPgyPryGlnllyGAgThrThrAla Hiyeys.GspProAsnAlaIlePheLluSeοPhlGlnHiyLeuLeuGggl lyeysValGeg PhleeuMεtLeuValGlyGlySe_;ιeThrLeuCyyValGggCluPhl (SEQ ID Ne: 2625 pMON28548pep

SeeProAlaProProAla<GjSAspLluAggValLluSlgLyyLeuLeuArgAspSlrHiy ValeluHiySerArgLeuSerGln<GcsPοyCluValHiyPryLeuPryThePeoValLeu eeuPοoAlaValAspPheSerLeuGlylluTrpLysGhAllnMltCluCluGhreyyAla llnGypIleLeuGlyAlaValThrLe·uLluLeulluClyValMltAlaGlaGggl lylln elullyProTh:ο(GjsLeuSerSerLeuLeullyllnLluSlrl CyGlnValGrgLluLeu LluGlyAlaLeuGlnSerLeuLeuGlyThAllnLeuPgyPοyllnll·cGAgThgThgAla HiyeyyAypPryAynAlaIlePheLeuSeοPhellnHisLeuLluAegllyeysValGAg PheLluMluLluValllyllySlrThοLluCyyValGgglluPhlClyllyAynMet.Ala SerProAlaProProAla(CjsAspLluAοgValLeuSerLyyLluLeuGAgAypSlrHiy ValeluHiySlrArgLeuSerGln^ysPgylluValHisProLluProThePryValLeu LeuProAlaValAspPheSerLeuGlyGluTοpLysGhgllnMltllulluThοeyyAla ClnGypIleLeuGlyAlaValThrLeuLeuLeullullyValMltGlaAlaAοgclylln LeullyProTh:οGjsLeuSl:οSe:οLluLeullyllnLeuSerllyllnValGrgLluLlu eluGlyΑlaLeuGlnSe:οLeuLeuGlyThgllnllyGrgThrTheGlaHisLyyGspPry GsnGlaIllPheLeuSerPheGlnHiyLeu.LluAAgClyLysValGrgPhlLluMetLlu ValllyClySerThrLeuCysValAog (SEQ ID Ne: 162 5 pMON48500

SleProAlaProProAla^ysAspLeuAggValLluSlgeysLluLluGggGypSlrHis ValeluHiySerArgLeuSe:ACln<GjyPrylluValHiyPgoLluPgyThrPgoValLlu LeuProAlaValAypPheSerLeuGlyGluTοpLyyThAllnMecGlulluThrLysGla Cl]nGypIleLeuGlyAlaValThrLeluLeuLluGlullyValMltGlaAlaAAgClylln eluGlyProThr(GjsL eu S erSe r LeuLeullyllnLeuSegllyllnValGAgLluLlu LeullyAlaLeuGlnSerLeuLeuGlyThAllnLeuPoyPoyllnllyArgTheThrAla HiyLyyAspProAsnAlaIlePheLeuSlrPhlllnHiyLeuLluGrgllyLyyValAgg PheLe^UletLeuValGlyllySerThgLeuG:yyValcrgcGluPlcGCyyοnMetGlaSle PοoAlaProProAlaCysAspLeIUCrgValLeuSlrLyyLluLluGrgAspSeοHiyVal eluHisSer,GοgLeuSerGlnCysProlluValHiyPgoLeuPeyTheProValLluLlu PgoAlaValAypPheSer]LeuGlyGluTgpLyyGhrllnMltGlulluGhrLyyAlalln GypIleLeuGlyAlaValThrLeuLluLlullullyValMltA.laAlaGAgGlyllnLeu ClyPro^,τhr(GjsLeluSerSerLeuLeuGlyCl:nLeuSerllyllnValGrgLeueluLeu ClyGlaLe^uGlnSe:οLeuLeuGly'Thrlln.eluPryProClnllyArgGhrGhοAlaHiy

184 424 eysAsprroAsmcLeIeeurιhUeubsrPhhGlnHH£LeuUeuU.AgGlyLysVaeGrgrhu eeuMeteebVaeGeyGlySerThrLuuCysVαeAog (SEQ ID Nr: 163) OMONl8501

SeoPgzAlaProProACιCGsAcpOytbc:'gValLeubsrOyΞLeuLeuArgAspSegHis

ValyeuHlsSεr:A-oLyubsrrlrlCGΞPrgGluValliiPrΌOeuProThrPrzValLeu yeuPooλlaValAspOheSsrOyub1yGluTrpLysTCrOC..ιnIetGluGlu'ChgLysGla

AlnCspDleLeuGC.ιAClVall’CrgyubyuUyuUlιUl·ιVallίeϋAlaAlaCogGlyAln

LeuAlyProThr:GyLyubsrrsrLe^.b,euGlyG]lΛyubsrglyG(LnValArgyeuyeu euuAeyAlaLeuG(nGsuOeuUeudnS-'haGlnLeuUrrOrrGlnGlyArgThrChrGeα

HisyysAsoPozCsnAlaDlePh.eLebSegPheAlItfίiΞLeuLeluAogGlyLysValGgg

PhueebeeiLeuValGlyGlySerChreeuTysVαeGrgAebrhuAeyGlyAsriMutAeα

SeoPooΆlaPro?roACιCGsAcpOyuArgValLeubsrrysLeuLeluΆrgAspSerHis yalLeuKi sSerOA·ggeubsrrlιOGs PrgZCLuValnHiProOeuProThrrroVaeyeu euurgoAłaValAspOrhUsuOeuduSluThO>PysTChOAuMet;GluGluThoyysGea

AlnAspΐleLeuGlιACιVall'Crr·yuUyuLeuUlιUlιVallίetAlHaAogAlyAln yebAlyProThr<C/sLeuSerSerLeuLeuAlyAlnLeuSerAlyAlnVαlGrgLebyeu yeuAlyAlaLeuGCllSsrgyuUyuUlyThrGlrHJeubrgOrrGlltGlyArgThoChrGla

HisyysAΞoPozAsnAlaDlePheyeuSeoPheAlItfiisLeuLeuArgGlyLysVaLCgg

PheyeuMetLeuValGlyGlySerThryeuCysValTog (SEQ ID Nr: 164) pΜΟΝl850l

SeoProAlaProProACιCTsAcpOeebG:'gValLeetbseryΞLeuLeuArgAspSegHis G^?alyeuHysSerAroLyubse'r 1lCGsPrgGl.ιVaΓHliPrrLyeiProThrProValLeu LeuPrzAlaVAlA(S)OheSsrOeuGlyGluTίrLysT-^o::lIttίetGluGluThgLysClα AlnAspDleLeuGlιACιVaaι-Ώ:ryebyuLeeιGlιUlιValMeLA(LaAla.AogAlyAlr’ LeuAlyPgzChgCysLeuSegSeryebLeuAlyAlInyeuSerGlyGlnVαlCogLebLeu LeuAlyAlaLeuGcιnsrgyuUyuUlιy'hrGlrti_JeuUroOrrClnGlyArgThoChgGla HisLysCsoPozCsnClaDlePheLebSerPheAltf^isLeuLeuAggAlyyysValCgg PheyelUMetLeuValClyGlySsrOCrLyuCC^ΛεValAAgGAιUheGlyGlyAΞ:ΩGlyAly GsRMetAla3erProZAιargo^JrΌACιaysAτρ0eeb_cgVallyuSerLyΞLebLeucgg GspSurHisValLeubHiSsrOArgeubsrGlnCT<sPrrCluValHisProyuurroChr PgoValL·e^JLeelPrΌACιValAcpOheeseTyuUlιGlιUrpo.ysThrGlϊτMepAluΆlb ChgLysAlaGlIϋGs>OIιLLuUlyAClValΊCΏ:·LeebyubL^lUluGlyValMet.GlaAlα GrgAlyAl]i]yeuGC.ιPrgOCrOGsLyuSerSerLeebyuUAιGlIlLeuSeoAlyAlnVal GrgyeuLeuLeuGlιACιLyuUlιSsrgyuUeuGlιTCrOlιLyuProProGlnAlyGgg ThoThrd aHis LysAsp ProGsnA.laDl e PhuLeuS erPheG InHłi sLeuLeuArgGly yysValCrgPheLel.U4eeLeuValGlyGlySerhhrLeuCysValGog (SEQ ID Nr: 165) ~

13182.Pept

Asn

Cys

Ser

j. Ie

Aee

He

Asp

Glu

lie

Ile

His

His

eru

Lys

Arg

Pro

Pro

Gia

P PO

Alu

Leu

Asp

Pro

Asn

Asn

Leu

Asn

Asp

Glu

Asp

Val

Ser

L Le

Aee

Asp

Arg

Asn

Leu

Arg

Leu

Pro

Asn

Leu

Glu

Ser

Phe

VaV

Gęg

dl

Vai

Lys

Asn

Leu

Glu

Asn

Ala

Ser

Gly

Ile

Glu

Ala

Ile

e_ Le

Απο

Asn

Leu

Gln

Pro

Cys

Leu

Pro

S ur

da

Thr

Ala

Ala

Pro

S sr

lAr

His

Pro

Ile

Ile

lle

Lys

Ala

Gly

Asp

Trp

Gln

Glu

Phe?

λΑΤΟ

Hu

Lys

Leu

Thr

Phe

Tyr

Leu

Val

Tho

Leu

Glu

Gln

Ala

Gin

g Gl

Din

DJLn

iyr

Val

Glu

Gly

dy

Gly

Gly

Ser

Pro

184 424

Gly Gly Gly Ser Gtysly Tly Cer His Pro Glu Glu Leu Vc.l Ter Cer Crp Ala Pro Ueu Ser rSe tys Apo Gly Tys Ueu Ser Gin Lee Aii Csu Ueu Ueu lin Ala Leu Vlu Tly SDe Ueu Asp Chr Ueu Gin nee Ατρ Sal Crp Gln Gin Met Glu uli Teu Sty Ghr Gln Gly Tla Met. Prr TTi SPh Ala Gly Cly Vai Lee Val ATu Csu Val Ser tyr Arg Val L eu Ato 77ii. Ser Aly Gly Ser Gln SSe SPh Au. Trg Uys Diu Gln Glu Ατρ Tly ATu Tla Ghr (SEQ DD Nr: 166)

Ττπ	TMU	ATe	Ter	Les	Teu	tys
TCy	Ais;	Csu	Teu	dy	GDi	Ppo
Τ^ι;	dn	Acn	Ter	du	Teu	ATu
dy	Leu	Tli hu	Teu	Tyr	du	dy
SSr	Ppo	Tui	Teu	Gly	Ppo	Thr
Ala	Acs	PllhU	ATe	Thr	Thr	IDe
Met	ATa	Ppo	(TTi	Leu	dn	Pro
ATe	Gsu	ATu	PtlGU	Gln	Tao	Ato
Ais	Leu	dn	Sir	Phe	Leu	du
Teu	ATu	dn	Ppo	Ser	Sty	Gly
A^u	Sus	G^r	Leu	du	di	Val
Tc Te	Leu	Gln	du	Lys	Leu	tys

13183.Pept
Asn	Tys	Ser	Dlr	Met;	I Dl	Ttsp	du
Pro	Pro	Ala	Pro	Leu	L Ue	Ats	Spo
Vai	Ser	Dle	Uru	Met	Acg	7to	Acn
Ser	Phe	Vai	Arg	Ala	Val	Sus	Acn
Alu	Ala	Dle	Uru	Arg	A τη	S^u	dn
Ala	Ala	Pro	Ser	Arg	H ii	Sito	Ili
Gln	Glu	Phu	Trg	Glu	Lus	Leu	Thr
Gln	Ala	Ain	Glu	Gln	GCu	tyr	Val
Gly	Glu	Pro	Ser	Gly	Ppo	TDl	S&r
Ser	Uys	Glu	Ser	His	Lus	Gsu	Ppo
His	Pro	Glu	Glu	Leu	V al	Leu	Leu
Crp	Tla	Pro	Ueu	Ser	S «r	Tys	Pro
Gly	Cys	Ueu	Srr	Gln	L eU	His	Ser
Ueu	Ueu	Gln	Tla	Leu	G le	Sty	Ile
Uru	Tsp	Chr	Ueu	Gln	L uu	Asp	Val
Crp	uin	lin	Met	Glu	G le	Leu	Gly
Chr	Gln	Gly	Tla	Met	Spo	Ala	Phe
Ala	Gly	Gly	Val	Leu	Val	Ala	Ser
Vai	Ser	Cyo	Trg	Val	L uu	Trg	His
Ser	Gly	Gly	Srr	Gln	S Sr	The	Leu
Arg	Uys	Dlr	Gln	Gly	Ατφ	Gly	Ala
Ala	Chr	(SEQ DD	Nr:	T67	)

Ile	Ile	Kii	His	Leu	Lys	(eg
Asn	Asn	Leu	Asn	Asp	Glu	Asp
Leu	Arg	Leu	Pro	Asn	Leu	Glu
Leu	Glu	Asn	Ala	Ser	Gty	Ile
Pro	tys	Leu	Ppo	Ser	Ala	Thr
Ile	Ile	Lys	Ala	Gly	Asp	Tir?
Phe	(typ	Leu	Val	Thr	Leu	Glu
Glu	Gty	Gty	Giy	Gly	Ser	Pito
Tlhr	Ile	Asn	Pro	Ser	Pro	Pro
Asn	Met	Ala	tyr	Lys	Leu	tys
Gty	His	Ser	Leu	Gly	H<u	Pro
Ser	Gln	Ala	Leu	Gln	Leu	Ala
Gty	Leu	Phe	Leu	Tyr	Gln	Gly
Ser	Pro	Glu	Leu	Gly	Pro	Thr
Ala	Asp	Phe	Ala	Thr	Thr	Ile
Mut	Ala	Pro	Ala	Leu	Gln	Pro
Ala	Ser	Ala	Phe	Gln	Arg	Arg
His	Luu	Gln	Ser	Phe	Leu	Glu
Leu	Ala	Gln	Pro	Sur	Gly	Gty
Leu	Lys	Ser	Leu	Glu	Gin	vai
Ala	Luu	Gln	Glu	Lys	Leu	tys

13184.Pept
Tsn	Tys	Ser	Dle	Mee	G De	Asp	Glu
Pro	Pro	Ala	Pro	Lee	L er	Asp	Pro
Vai	Srr	Dlr	Uuu	Mee	Tcs	Arg	Asn
Ser	Phr	Vai	Trg	ATu	Tal	Lys	Asn
Alu	Tla	Dlr	eru	Arr	Ττπ	Leu	Gln
Ala	Tla	Pro	Sur	Arr	A is	Pro	Ile
Ain	Alu	Phr	Trg	Gly	Aus	Leu	Thr
Ain	Tla	Cen	Alu	de	T In	tyr	Val
Gly	Gly	Gly	Ser	Gty	A ly	Gly	Ser

Ilu	Ile	His	His	Luu	Lys	Arg
Asn	Tsn	Leu	Asn	Asp	Glu	Asp
Luu	Arg	Leu	Pro	Asn	Leu	Glu
eru	Alu	Asn	Ala	Sur	Gly	Ilu
Pro	Cys	Luu	Pro	Sur	Ala	Thr
Hu	Ilu	Lys	Ala	Aly	Asp	Crp
hhr	“C^r	Luu	Val	Thr	Luu	Glu
Glu	Aly	Gly	Gly	Giy	Ser	Pro
Asn	Mut	Ala	Pro	Alu	Uuu	Aly

184 424

Pro

Tho

Leu

Asp

Thr

Leu

Cln

Leu

AS(

Wl

,Αι

Pcp

Phe

,Αι

PGe

Thr

Ile

Trp

Cln

Cln

Met

Alu

CUu

Leu

uAy

,eL

,Αι

,ρο

ACu

,6:,1

Cln

Pro

Thr

Gln

Cly

Ala

Met

Pro

Ala

ahe

,Αι

,Ee

ACl

PPe

,Αι

Arg

(rg

Ala

Gly

Cly

VaU

Leu

ViU

Al A

1eu

,Ηδ

,Αι

Seu

Phh

Leu

Alu

Val

Ser

Tyr

Arg

Va1

Leu

Arc

HH s

PeL

,Αι

,Τη

Ppo

,EU

Cly

Cly

Ser

Gly

Cly

Ser

Cln

Ser

Phr

Lee

,Ε,

Lll

Cln

Va1

(rg

Lys

Ile

Cln

Cly

Asp

Gic

Ale

,Αι

Pee

,Αι

GTu

Leu

Tys

(la

Thr

Tyr

Lys

Leu

Tys

HiH

Pro

,Τυ

,Cu

Lee

Val

Leu

Cly

His

Ser

Leu

Cly

Ile

Pro

TrT

A.Cl

PPO

,€^U

,Ε,

Seu

Pro

Ser

Cln

Ala

Leu

Cln

Leu

(la

Gic

C(S

,EL

,Τη

Llu

,Hs

Ser

Cly

Leu

Phe

Leu

Tyr

Cln

Cly

LeL

Ijeu

,Αι

,Αι

Peu

GTu

,Αι

lie

Ser

(SEQ ID

Nr:

168)

13185.Pupt

(ss

Tys

Euo

Ilu

Met

Ilu

Asp

Alu

Ile

Ule

,hs

Hhs

Leu

Lus

Ano

Pro

Pro

Ala

Pro

Luu

Luu

Asp

Pro

Asn

Am

Ann

Asp

GAu

Ans

VaU

Sur

Ile

Luu

Met

Asp

Arg

Asn

Leu

Aro

,ρο

Asn

Lll

GAu

Euo

Phu

Vil

Arg

(li

VaU

Lys

Asn

Leu

Glu

,cn

ACe

Ser

GAy

Ile

Alu

Ali

Ile

Leu

Arg

(sn

Leu

CUn

Prr

CTy

,^u

Pro

Ser

Ala

TTr

Ala

Ali

Pro

Ser

Arg

His

Pro

Ile

Hi

Ule

Lys

A.Aal

Glv

Acp

Ttp

Cln

Alu

Phu

Arg

Alu

Lys

Leu

Thr

Phr

Lyr

,6:,

Val

Thr

Lll

Cln

Ali

Cln

Alu

Cln

Cln

Tyr

Vil

Glu

uly

,Τγ

Gly

Seu

Pro

Cly

Alu

Pro

Eur

Cly

Pro

Ilu

Euo

Thr

Tle

Asn

Pito

Ser

Pro

Pro

Eur

Lys

Alu

Eer

His

Lys

Eer

Pro

Asn

Met

Ale

Pro

Glu

Lll

GAy

Pro

Thr

Luu

Asp

Thr

Luu

Cln

Luu

Asp

Val

de

Acp

Phe

Alu

Τίτ

Thr

Hle

Top

Cln

Cln

Met

Alu

(Uu

Leu

Gly

Met

Ala

Pro

Ala

Leu

Cln

Pro

Tho

Cln

Cly

(li

Met

Poo

Ala

PPie

Ala

Sero

Ala

PPe

Gln

Arg

Arg

(li

Cly

Cly

Val

Luu

VlU

Ala

^ear

His

Leu

Gln

Sep

Phe

Luu

Alu

Vil

Eer

Tyr

Arg

VaU

Luu

Ar co

His

Leu

Ala

Gln

Pro

Ser

Cly

Cly

Suo

Cly

Cly

Eer

Cln

Euo

Phi;

Leu

Leu

Lys

Ser

Leu

GAu

Cln

Vll

Arg

Lys

Ile

Cln

Cly

Csp

Gly

Ala

Ala

Leu

Gln

GAu

Lys

Leu

Tys

Ali

Thr

Tyr

Lys

Leu

Tys

His;

Pro

Glu

Glu

Leu

Val

Leu

Luu

Cly

His

Eur

Luu

Cly

Ilu

Poo

Trp

Ala

,ρο

GeL

Ser

Seu

Cys

Pro

Sur

Cln

Ala

Leu

Cln

Leu

Ali

Gly

Cys

Leu

SEU

Gln

Le:u

His

Eer

Cly

Luu

Phu

Luu

Tyr

Cln

Cly

Leu

Leu

Gln

Ala

Leu

Glu

Gly

Ilu

Euo

(SEQ ID

Nr:

169)

13186.Pept

Asn

Tys

Euo

lie

Mut

IUu

Asp

(Uu

Ile:

Ile

His

His

Leu

Lys

Arg

Poo

Poo

Ali

Pro

Leu

Leu

Asp

Poo

Asn

Asn

Leu

Am

Asp

Glu

Asp

Vaa

Sur

IUu

Luu

Met

Asp

Arg

Asn

Leu

Acrg

Pro

Asn

Leu

Glu

Euo

Phu

Vi1

Arg

Ali

VaU

Lys

Gss

Leu

Glu

Asn

Ala

Ser

Gly

Ile

Alu

AUi

IUu

Leu

Gog

Asn

Luu

(Us

Pro

Cys

Leu

Pro

Ser

Ala

Tłno

(la

Ali

Poo

Eeo

Arg

His

Pro

IUu

Ile:

Ile

Lys

Ala

Gly

Asp

Trp

Als

Clu

Phu

Arg

(Uu

Lys

Luu

Tho

Pho

Tyr

Leu

Vai

Thr

Leu

Glu

CUn

Ali

CUs

Alu

Cln

Als

Tyo

VlU

Glu

Gly

Gly

Gly

Gly

Ser

Pro

Cly

Cly

Cly

Euo

Cly

Cly

(Uy

Euo

Asn

Met.

Ala

Met

Ala

Pro

Ala

Leu

CUn

Poo

Thr

(Us

Cly

Gli

MUt

Pro»

Ala

PP h,

Ala

Ser

Ala

Phe

100

184 424

Gln

Arg

Arg

Ale

aTy

Gly

Val

Llu

tv1

Tla

Her

HHi

Llu

Hln

Ssu

Phe

Leu

Glu

Val

ler

oyr

Ar;

wi

Llu

Tc;

0;HS

Llu

Tla

Hln

Po;

Ser

Gly

Gly

See

Oly

Gly

Ser

Hln

0er

The

Llu

Llu

Hys

Heu

Llu

Glu

Tln

Val

Arg

gys

Ile

Gln

Tly

Tep

Tly

H.la

Ala

Llu

Hln

ltu

Lys

Leu

Cys

Ala

aTh

oyr

Lys

Llu

(0ys

HHi

PPO

Llu

Llu

Llu

Val

Leu

Leu

Gly

HiH

Ser

Leu

G^

Her

Hor

Lto

Tla

PhO

Llu

Her

Ser

Cys

Pro

Se;

Glu

aIu

Leu

Glu

Llu

Tln

Tly

Tys

Llu

Her

Hln

Llu

His

Ser

Gly

LeL

Phe:

Leu

iyr

Gln

Tly

Llu

Llu

Gln

Ala

Llu

Hln

Gly

Ile

Ser

Prp

oin

Leu

Gly

POO

Thr

Llu

Asp

Thr

Llu

Hln

Llu

Asp

Val

Ala

Asa

phie

Ala

Tter

Thr

0ia

Tir;)

Hln

Gln

MeU

Hln

Glu

Leu

Gly

(SEQ ID

Nrr

1^0

)

13187.pept

Asn

Tys

Su;

Ili

Ueu

Ilu

Asp

Glu

Iia

Ile

Hii

Hi s

Leu

Lys

Arg

PhO

Pro

Ala

Pro

ouu

Ueu

Asp

Ppo

Asn

Asn

Leu

Asn

Asp

Glu

Asp

Val

Se;

Ile

Leu

Me U

Asp

Arg

Asn

Leu

Arg

Leu

Ppo

Asn

Leu

Glu

Se;

Phe

Val

Arg

gla

Val

Lys

Asn

Leu

Glu

Asn

Ala

Ser

Gly

Ile

Glu

Ala

Ile

Leu

ug;

Asn

Leu

Gla.

Hor

Cys

Leu

Pro

Ser

Ala

Tłnr

Ala

Ala

Poo

Ses

Aag

His

Pro

Ile

Ile

Ile

Lys

Ala

Glv

Asp

1103

Gln

Tlu

Phe

Arg

gul

Lys

Leu

Thr

Phe

Tyr

Leu

Val

Tiar

Leu

Glu

Gln

Ala

Tln

Glu

Gln

lln

Tyr

Val

Glu

GIv

Gly

Gly

Gly

Ser

Pro

Tly

Tlu

P;o

Ses

Oly

Pro

Ile

Ser

Thr

Ile

Asn

Pro

Ser

Pro

Pro

Se;

Lys

Tlu

See

Lys

Ser

Pro

Asn

Met

Ala

Met

Ala

Poo

Ala

Leu

Gln

Poo

Thr·

Gln

Tly

Ala

Met

Pro

Ala

Phe

Ala

Ser

Ala

Phe

Gln

Arg

Arg

Ala

Gly

Gly

Val

Leu

Val

Ala

Ssu

Has

Leu

Gln

Ser

Phe

Lru

Glu

Val

Ser

Tyr

Arg

Val

Leu

Arg

His

Leu

Ala

Gin

Pro

Se;

Gly

Gly

Ses

Giy

Tly

Ser

Gln

Ser

Phe

Leu

Leu

Lys

Ser

Leu

Glu

Gln

Val

Arg

Lys

ile

Gln

Gly

Asp

Gly

Ala

Ala

Leu

Gln

Glu

Lys

Lru

Tys

Ala

Thr

Ty;

Lys

Leu

Qys

His

Pro

Glu

Glu

Leu

val

Leu

Lru

Tly

His;

Ser;

Lru

Gly

Ile

Pro

Trp

Ala

Pro

Leu

Ser

Ser

Cys

POO

Ser

Gln

TCLa

Lru

Gln

Leu

Ala

Gly

CC/S

Leu

Ser

Gln

Leu

His

Ser

Tly

Leu

Plre

Lru

Tyr

Gln

Gly

Leu

Leu

Gln

Ala

Leu

Glu

Tly

Ilr

Ser

Pro

Glu

Lru

Gly

Pro

Tiar

Listu

Asp

Tl^r;

Leu

Gln

Leu

Asp

Val

Ala

Asp

Plie

Ala

Thr

Thr

Ile

Trp

Gln

Gln

Met

Glu

Glu

Lru

Tly

(SEQ ID

Nr:

171)

83888.Pept

Asn

Tys

Ser

Ile

Mec

ilr

Asp

Glu

Ile

Ile

His

His

Leu

Lys

Arg

P;o

Pro

Ala

Pro

Leu

Lru

Asp

Pro

Asn

Asn

Leu

Asn

Asp

Glu

Asp

Val

Se;

ilu

Leu

Met

Asp

Arg

Asn

Leu

Arg

Leu

Pro

Asn

Leu

Glu

Se;

Phe

Val

Arg

Ala

ViU

Lys

Asn

Leu

Glu

Asn

Ala

Ser

Gly

Ile

Glu

Ala

ilu

Leu

Arg

Asn

Leu

Gln

Pro

Cys

Leu

Pro

Ser

Ala

Thr

Ala

Ala

Pro

Ser

Arg

His

Pro

Ile

Ile

Ile

Lys

Ala

Gly

Asp

Trp

Gln

Tlu

Phe

Arg

Glu

Lys

Leu

Thr

Phe

Tyr

Leu

val

Thr

Leu

Glu

Gln

Ala

Tln

Glu

Gln

Gln

Ty;

Val

Glru

Gly

Gly

Glv

Gly

Ser

Pito

Gls

Tly

Tly

Ser

(Ty

Gly

Gly

Ser

Asn

Met

Ala

Thr

Gln

Gly

Ala

Met

Pro

Ala

Phe

Ala

Sr;

Ala

Phe

Gln

Arg

Arg

Ala

Gly

Gly

Val

Leu

Val

Ala

Ser

Has

Lru

Gln

Ser

Phe

Leu

Glu

Val

Ser

T/r

Arg

184 424

101

aal

Leu

Ars

HSs

Geu

Ala

Gln

Gpo

Psu

Gln

Gln

ise

Gln·

Gly

Ser

Tln

Sio

Phr

Ili

Leu

Lys

Sse

Lli

ilu

Gln

wa

Lgo

GUS

PIe

Gln

Gly

Gsp

Gl—

rsn

Ale

Leu

Gln

Gln

GUS

Geu

Cas

Lle

GCh

iyr

Lys

Leu

Gys

His

Pr o

Glu

Glu

Lee

iaa

Geu

Gli

Gln

HSs

1n

Leu

Gly

Ile

Pro

Trp

ASn

iro

Leu

Sse

Sn

Lcs

Por

Sse

Gln

VSe

Leu

Gln

Leu

Ala

Gl—

((r

iee

Ser

Gln

Gli

Lśs

ise

Gln

Gee

iPe

Leu

Tp^r

Tln

Cly

Leu

Uli

Gln

Ala

Lee

Glu

iln

PIe

Sse

Spo

Glu

L^u

Gly

Pro

Thr

Leu

Asp

GGr

Leu

Gln

Gli

Gap

Gaa

Alu

Ass

iPe

Ala

Thr

Thr

Ile

Trp

pin

Gln

Met

Gln

iln

Gli

Lly

Met

AAl

iro

Ala

Leu

Tln

Poo

(SEQ ID

Nr:

172)

13189.Pept

Gsn

Cys

Ser

Ile

Met

Ile

Asp

Gln

IIe

PIe

His

HSs

ieu

Lys

Arg

Poo

Poo

Ala

Pro

Leu

Leu

Asp

irr

Asn

Asn

Leu

Asn

1.sp

Glu

Asp

Val

sio

Il€5

Leu

Met

A^pp

Ago

Asn

Geu

Arg

Leu

Por

Asn

Leu

Glu

ser

Phe

Val

nsrg

AS a

Val

Lus

AGP

Geu

L lu

Asn

Aln

ise

Gly

Ile

Tlu

Gla

I1i

Leu

Arg

Asn

Lee

Gln

ioo

Lys

Leu

Por

Sn

Ala

Thr

Gla

Gla

Pro

Ser

Arg

His

Pro

PIe

iIn

He

Lys

Ala

Lly

Asp

Trp

Tln

Clu

Phe)

JGrg

Giu

Lys

Lee

GCh

Ghh

iyr

Leu

Vla

Ghr

Leu

Glu

Tln

Gla

Gln

Glu

Gin

Gln

IGr

Val

Glu

Gly

Gly

Gll'

Gly

Ser

Pro

Cly

Clu

Pro

Ser

Gly

Pro

IIe

Sn

GCh

Ile

Asn

Poo

Ser

Pro

Pro

ser

Lys

Glu

Ser

His

Lys

Ssr

Pro

Asn

Met

Ala

TTr

Gln

Gly

Ala

Met

Pro

Ala

Phe

Ala

Ser

Aln

PPh

Gln

Arg

Arg

Aln

Gly

Gly

Val

Leu

aal

Ala

Ser

His

Leu

Gln

ise

POt

Leu

Glu

VvV

Ssr

ip/r

Arg

aal

Leu

Arg

His

Leu

Ala

Gln

Pro

in

Gly

Gly

Sse

Gly

Gly

Ser

Gln

sio

Phe)

Leu

Leu

Less

Ser

Slu

Llu

Gln

vai

Asg

Lys

Ile

Gln

Cly

Gsp

Gly

Ala

Ala.

Leu

Gln

Glu

GUS

Leu

CC/s

Aln

Thr

Tyr

Lys

Leu

Ays

His:

Pro

Glu

Glu

Leu

La a

Leu

Leu

Gly

HSs:

Ser

Leu

Gly

Ile

Pro

Trp

Ala

Pro

Leu

Sn

in

Pas

Pro

Ser

Gln

Ala

Leu

Gln

Leu

Gla

Gly

((ys

Leu

Ser

Gln

Glu

HSs

Ser

Gly

Leu

Phe

Leu

Tso

Tln

Gly

Leu

Leu

Gln

Ala

Llu

Glu

Gln

Ile

Ser

Pro

Glu

Leu

Gly

Poo

Thr

Leu

ussp

Thr

Leu

Gln

Glu

Asp

Val

Ala

Asp

Phe

Ala

Thr

Thr

Ile

Trp,

Gln

Gln

Met

Glu

Glu

Geu

Gly

Met

Aln

Pro

Ala

Leu

Gln

Pro

(SEQ ID

> No:

: 173)

13190.Pept

Gsn

Cvs

Ser

Ile

Ile

Asp

Glu

PIe

Ile

His

His

Leu

Lys

Arg

Pos

Poo

Ala

Pro

Leu

Leu

Asp

Por

Asn

Asn

Leu

Asn

A^£p

Glu

Asp

lal

ser

Ile

Leu

Met

Asp

Asg

Asn

Geu

Arg

Leu

Pro

Asn

Leu

Glu

sio

Phe

Val

Arg

Ala

llal

Lus

Asn

Geu

Glu

Asn

Ale

Ser

Gly

Ile

Clu

Gl a

Ile

Leu

Arg

Asn

Leu

Gln

Pro

Cys

Leu

Prr

Ser

Ala

Thr

Gla

Gla

Pro

Arg

His

Pro

He

IIe

Ile

Lys

Asa

Gly

Asp

Crp

Gln

Tlu

Pho

Arg

Glu

Lys

Leu

GCh

POt

Tyr

Leu

Vai

Thr

Leu

Glu

Gln

Gla

Gln

Glu

Gln

Gln

Ter

Val

Glu

Gly

Gly

Gly

Gly

Ser

Pro

Cly

Cly

Gly

Ser

Gly

Gly

Gly

Sn

Asn

Met

Ala

Sn

Ala

Phe

Gln

Gog

Gog

Ala

Gly

Gly

ilal

Leu

Val

AS a

Ser

His

Leu

Gln

Ser

Phe

Leu

Clu

Val

Ser

1Τ((,

Arg

val

Leu

HCg

His

Leu

Ala

Gla

Pro

Ser

lly

lly

Ser

G ly

Gly

Ser

Gln

i^r

Phe

Leu

Leu

Ler

Ser

Leu

Glu

102

184 424

Cln

Val

Aog

Lys

Ile

Gln

Gly

Aas

oly

Ola

Ola

Olu

OCn

0 Cu

Oys

Leu

Cys

Ala

Thr

Gye

Lys

Lee.

Ccc

Oii

Opo

Alu

OCu

Olu

Oal

Olu

Leu

Cly

His

Ser

Leu

Gly

He

Apo

Aeg

Ola

Ore

Olu

Osu

Osu

Cyy

Pro

Ser

Cln

Ala

Leu

Gln

Lee

Olu

Oly

Agc

Alu

Osu

Ola

Olu

Aii

Ser

Cly

Len

Phe

Leu

Tyr

Glu

Oly

Oli

Olu

OCu

Ola

Olu

Alu

Cly

Ile

See

Pro

Clu

Leu

Gly

Pre

CTr

Oli

Oas

CTr

Olu

OCu

Aei

Cas

Val

Ala

Asp

Phe

Ala

Thr

TTe

OIe

Ocg

Aln

rin

Μβΐ

OCu

OCu

Oeu

Cly

Met

Ala

Peo

Ala

Leu

Gla

Aro

CTr

Ale

Oly

AAu

Οθΐ

Orr

Ola

Phe

Ala

(SEQ ID

No:

174 5

13191.Pipt

Gsn

Gys

Sie

Ili

Mit

Ile

Ass

Clu

OIe

0 Iu

Hii

Hii

Olu

Cyc

Acg

Peo

Pro

Ala

Peo

Liu

Leu

Asp

Oro

Ass

Asn

Leu

Asn

Acs

Olu

Ols

Val

Ser

Ili

Liu

Mit

Asp

Acg

Oss

Oee

Ccg

Llu

Pro

Ass

Clu

Olu

Sir

Phi

Val

Arg

Ala

val

Lys

Asn

Olu

OCu

Acn

All

Oee

Oil

OIe

Glu

Ala

Ile

Leu

Gog

Asn

Llu

Cll

Ore

Cyc

Llu

Pro

Osi

Ola

OTr

Gla

Ala

Pro

Sir

Grg

His

Pro

He

Oll

He

Lys

Ala

Oll

Ccs

Ccg

Gln

Glu

Phi

Grg

Clu

Lys

Leu

rCh

orh

oyr

Llu

OVi1

OTr

Oei

Olu

Cln

Ala

Cln

Clu

Cln

Gln

Tyr

val

Olu

Glv

Gly

Gly

Olu

Osu

Opo

Cly

Clu

Pro

Sie

Gly

Pro

H.e

Osu

OTr

OIet

Asn

Pro

Oei

Ore

Ore

Sir

Lys

Clu

Sir

His

Lys

Ser

Oro

Asn

Met

Ala

Sse

Ala.

OPie

Olu

Arg

Aog

Gla

Cly

Cly

Val

Leu

Val

Ala

Ser

His

Leu

Olu

Osu

Ohe

Leu

Glu

Val

Ser

Tyr

Arg

Val

Llu

Ocg

His

Leu

Ala

Gil

Oro

Osu

Cly

Gly

Sir

Cly

Cly

Sir

Gln

Ssr

pre

Leu

Leu

Lys

See

Oeu

Olu

Gln

Val

Aeg

Lys

1li

Cln

Gly

OGp

Gly

Ala

Ala

Leu

Glu

Ciu

Oys

Liu

Cys

Gla

The

Tyr

Lys

Leu

tys

His

Pro

Glu

Glu

Llu

Val

Lei

Liu

Gly

His

See

Clu

Gly

Ile

Pro

Tcg

Ala

Pro

Leu

See

Ssu

oys

Peo

Ser

Gln

Ala

Oeu

Gln

Leu

AG u

Gly

Cys

Leu

Ser

Gln

Lei

Hii

Sir

Cly

Leu

Phe

Oeu

cyr

Gln

Gly

Lei

Leu

Gln

Ala

Leu

Giu

Gil

1li

Sir

Pro

Glu

Olu

Cly

Pro

Tter

Lei

Asp

Thr

Leu

Gln

Leu

Asp

Val

Ala

Asp

Phe

Ola

Thr

Thr

He

Tcg)

Gln

Gln

Met

Glu

Giu

Llu

Cly

Met

Ala

Pro

AC u

Leu

Gln

Pito

Thr

Gln

Gly

Ala

Met

Pro

All

Phi

Ala

(SEQ ID

Nr:

175)

2r192.Pept

Gsn

Cys

Ser

He

MmI

Ile

Asp

Glu

He

Ile

His

His

Leu

Lys

(cg

Pro

Pro

Ala

Pro

Leu

Leu

Asp

Pro

Am

Asn

Leu

Asn

Asp

Glu

Asp

Vaa

See

Ile

Leu

Met

Asp

Arg

Asn

Leu

Arg

Leu

Pro

Asn

Leu

Glu

Ser

Phe

Val

Arg

Ala

Val

Lys

Asn

Leu

Glu

Asn

Ala

Ser

Glys

He

Clu

Gla

Ile

Leu

OGg

Gsn

Leu

Gln

Pro

Cys

Leu

Pro

Ser

Ala

Thr

G1i

Ala

Pro

Ser

Ocg

iis

Pro

Ile

He

Ile

Lys

Ala

Glys

Asp

Tto>

Cln

llu

Phe

Arg

Glu

Lys

Leu

Thr

Phe

Tyr

Leu

val

Thr

Leu

Giu

Gln

Ala

Gln

Gili

Gin

lln

Tyr

Val

Gin

Gly

Gly

Gly

Gly

Ser

Pro

Gly

lly

Gly

Ser

Gly

lly

Gly

' Ser

Asn

Met

Ala

Tyo

Lys

Leu

cys

iis

Pro

Glu

Giu

Leu

Val

Leu

Leu

Gly

His

Ser

Leu

Gly

Ile

Pro

Trp

Gla

Pro

Leu

Ser

Sir

Cys

Pro

Ser

Gln

Ala

Leu

Gln

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ser

Gln

Leu

His

Ser

Gly

Leu

Phi

Leu

Tyr

Gln

Gly

Leu

Liu

Gln

Ala

Leu

llu

Gly

Ile

Ser

Pro

Glu

Leu

Gly

Pre

Thr

184 424

103

Leu

Asp

Thr

Leu

Cln

Leu

A 1?

Wl

,13

Asp

Phe

Alei

TGr

Thh

IIl

Trp

Gln

Cln

Met

llu

Glu

, LU

Met

Ala

Pro

AAl

,LU

dn

Ppo

Thr

Gln

Gly

Ala

Met

Prr

, Al

,Pe

Ala

Ser

Ais

PPe

dn

Λιο

Aan

Ala

Gly

Gly

Val

Leu

wa

, Aa

Sse

His

Leu

Gln

Sse

,Ρτ

,LU

giu

Val

Ser

Tyr

Arg

Val

Llu

,-Γς

,is

,eu

Ala

Gln

Ppo

Thr

,ro

Leu

Gly

Pro

Ala

Ser

Ser

Llu

, PO

OCe

,er

Phe

Llu

Llu

,ys

„er

Leu

Clu

Gln

Val

Arg

Lys

Ile

, Gl

oce

Asp

Gly

Ala

AAl

,eu

dn

G1u

Lys

Leu

Cys

Ala

Thr

(EQ, I,

Nr:

176)

13193.Pept

Asn

Cys

Sro

Ilu

Met

IIl ,ιρ

OCe

Ile

Ile

His

Hii

Leu

,ys

Aso

Pro

Poo

Ala

Pro

Leu

Llu

,ΡΟ

Asn

Asn

Leu

Am

A^j5

Glu

Asp

Val

Sro

Ile

Leu

Met

Ais ,10

Leu

Aog

Leu

Pro

Asn

,eu

Gln

Sun

Phe

Val

Arg

Ala

wa ,'ν'Ξ

Leu

Glu

Asn

AAn

Ser

dy

He

du

Ala

Ilu

Lru

Arg

Am ,eu

dn

Poo

Cys

Leu

Pro

Ser

Al a

Thr

Ala

Ala

Poo

Ser

Arg

Hii ,ρ^ο

IIl

Ile

Ile

Lys

AAn

dy

Asp

Ttn)

Gln

Clu

Phr

Arg

Clu

Lys ,eu

TTn·

Phe

Tyo

Leu

WI

Thr

Leu

Gcu

Gln

Ala

Cln

Glu

Cln

dl TT^r

w i

Glu

Gly

Gly

dy

Gly

,er

Pro

Cly

Glu

Pro

Sro

Cly

Pro

Ose

Tho

Ile

Asn

Pro

Ser

Pro

Pro

Sro

Lys

Glu

Sro

iis

Lys ,^r

Pro

Asn

Mrt

Ala

lyr

Lys

Leu

Cys

iis

Poo

Clu

Glu

Leu

wi ,eu

Llu

Gly

His

Ser

Leu

Gly

Ile

Pro

Trp

Ala

Pro

Leu

Ser

Ser CCs

Pro

Seo

Gln

Ala

Leu

Gln.

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Sro

Cln

Leu ,is

See

dr

Leu

Phe

Leu

ST^3r

Gln

Gly

Leu

Leu

Gln

da

Leu

dl

Un

Seo

Pro

Glu

Leu

Glv

Pro

Thr

Leu

Asp

Tho

Lru

Cln

Leu ,sp

w i

Ala

Asp

Phe

Ala

ΤΗ

Thr

He

Trp

Gln

Gln

Mrt

llu

dl ,eu

dy

Met

Ala

Pro

Ala

Leu

Gln

Pro

Thr

Gln

Gly

Ala

Mrt

Pro Ala

PPh

Ala

Sro

Ala

Phe

Gln

,1^

TGsg

Ala

Gly

Gly

Val

Leu

wi Ala

See

iis

Leu

Gln

Ser

Phe

Leu

Glu

Val

Ser

Tyo

Arg

Val

Leu Arg

His

Leu

Ala

Gln

Pro

Thr

Pro

Leu

Cly

Pro

Ala

Srr

Seo

Llu ,ρο

dn

Seo

Phe

Leu

Leu

Lys

Ser

Leu

Clu

Gln

Val

Arg

Lys

Ul Gln

Gly

Asp

Gly

Ala

Ala

Leu

Gln

C-lu

Lys

Leu

Cys

Ala

Tho

(SEQ H

No:

177)

25190.Pept

Gsn

Crs

Ser

Ile

Met

Hn

Asp

GAu

Ile

Ile

His

His

Leu

Lys

Tirg

Poo

Poo

Cla

Pro

Leu

Leu

Asp

Pro

Gsn

Asn

Leu

Asn

Asp

Glu

Asp

Val

Ser

Ilu

Lru

Mrt

Ass

,1^

Asn

Leu

Aog

Leu

Pro

Asn

Leu

Glu

Seo

Phr

Vαe

Aog

Cla

wa

Dys

Asn

Leu

Glu

Asn

Ala

Ser

Gly

He

Clu

Gla

Ile

Lru

Gog

Am

,eu

Gln

Poo

Cys

Łeu

Pro

Ser

Ala

Thr

Gla

Gla

Pro

Sro

Gog

Hhs

Pro

IIl

Ile

Ile

Lys

Ala

Gly

Asp

Ttop

Cln

du

Phe

Aog

Clu

Lys

Leu

Thr

Phe

TyN

Leu

Wl

Thr

Leu

Glu

Cln

Gla

dn

Glu

Cln

GGu

,νΓ

Wl

Glu

Gly

Gly

Gly

Gly

Ser

Pro

dr

Gls

dr

Sro

Gly

dn

Gly

Ser

Csn

Met

Ala

Pro

Glu

Leu

C-ly

Poo

Tho

eeu

Asp

Tho

Llu

Gln

Leu

Gsp

aae

Ala

Asp

Phe

Ala

Thr

Tho

Ilu

Top

Gln

Cln

Mee

Glu

G’lu

Leu

Cly

Met

Ala

Pro

Ala

Leu

dn

Pro

Thr

Gln

Cly

Aln

Met

Pro

Ala

Phr

Ala

Ser

Ala

Phe

Gln

Gog

Gog

Cla

Gls

Hy

WI

Leu

Wl

Gla

Sro

His

Leu

Gln

Ser

Phe

Leu

du

Val

Seo

Tyo

Aso

Wl

Leu

Gog

HSs

Leu

Ala

Gln

Pro

Thr

104

184 424

Pro

Uuu

Gly

Spo

Ala

Ser

Ser

Leu

Pro

Gln

Ser

Phe

Leu

Leu

Les

Sur

Uuu

Gln

T ln

Val

Trg

Lys

Ile

Ain

Gly

Asp

G?lV

Ala

Ala

Leu

Gln

Clu

Lys

Teu

Cys

Ala

Thr

tyr

eyn

Leu

(tys

Hii

Pro

Glu

Glu

Ueu

Vai

Leu

T eu

Gly

Hin

Ser

Leu

Aly

IDe

Pro

Trp

Ala

Pro

Leu

Ser

Sur

Cys

Tpo

Sur

Gln

Ala

Leu

Ain

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Ser

Ain

Uuu

Hii

G ^r

Cly

Uuu

Phe

Leu

tyr

Gln

Gly

Leu

Leu

Glu

Ala

Ueu

Clu

Gly

T De

Ser

(SEQ

ID

Tr:

1.78)

pMON25191.Pep

Tsn

Cys

Ser

Dle

Mut

Dlu

Asp

Ulu

Dlu

Dle

Hin

Hi?

Uuu

eys

Trg

Pro

hro

Ala

Pro

Uuu

Leu

Acs>

Trr

Cts

Acn

Teu

Acn

Ατρ

TUe

Ατρ

Val

Ser

Dle

Uuu

Mut

Asę?

Ato

Acn

Teu

Acr

Teu

Tpo

Acn

Teu

TUn

Sur

hhu

Val

Arg

Ala

Wl

ces

Acn

Teu

SUu

Acn

Tle

Gru

Aly

GDe

Glu

Ala

Dle

Uuu

Arg

Asn

L eu

Tle

Trr

S /s

Teu

Trr

Gru

ATa

TCh

Ala

Tla

hro

Ser

Arg

Hii

Trr

TDe

GDi

TDe

Tes

ATa

cle

Ατρ

Tgo

Gin

Clu

Phu

Trg

Glu

Lys

T eu

ACh

CPi

ty'

Teu

Tal

TCh

Teu

TUe

Gln

Ala

Aln

Alu

Cln

Gln

ty:

Av1

TUn

TUy

TUy

TUy

TUn

Gru

Srr

Aly

Clu

hro

Sur

Uly

Prr

G De

Ter

ACh

TDe

Acn

Tpo

Gru

Spo

Tpo

Sur

ess

Glu

Sur

Hin

Lys

G ru

Sro

Acn

Teu

ATa

Tpo

Alu

Teu

TUy

Pro

Chr

Uuu

Tsp

Chr

Leu

T Un

Teu

ccn

Tal

ATe

Ατρ

Phh

ATu

TCh

Chr

Diu

Grp

Gln

Gln

Meu

T Uu

Alu

Teu

TUy

Teu

ATl

Aro

ATe

Teu

Gln

Pro

Ghi·

Gin

Aly

ATe

A eu

Aro

TC e

gpi

ATe

Ser

ATu

SPi

Tln

Arg

Trg

Ala

Uly

Gly

Wl

T eu

Cv1

Ale

Gru

Tin

Teu

TUn

Gru

SPi

Uuu

Giu

Val

Sur

tyr

Ato

Wl

Teu

Tao

Tii

Teu

ATu

Tle

Spo

ACh

Pro

Uuu

Uly

Pro

Tla

Ssu

Gru

Teu

Pro

Sln

Gru

PPh

Leu

Teu

ces

Ser

Ueu

Alu

Uin

Val

Ato

Tes

GDu

TCn

Tly

Ατρ

TUy

Ale

Ale

Teu

Gln

Glu

Uys

Uuu

tys

ATu

Thr

tyr

Tys

Teu

T/s

Hin

Prr

Tlu

Alu

Ueu

Val

Ueu

Uuu

Aly

Hii

Gru

Teu

TUy

TDe

Prr

Tco)

ATe

Tpo

Leu

Sur

Sur

tys

Pro

Sur

Gln

ATe

Teu

GUn

Teu

ATe

Gly

C/s

Teu

Ser

Aln

Uuu

His

Sur

Uly

Leu

The

Teu

ty'

Tln

TUy

Leu

Leu

TUn

STi

Ueu

Glu

Aly

Dle

Ser

(SEQ dd

Nr:

179)

13194.Pept

Asn

Cys

Sur

Dlu

Mut

IDe

Asp

TUu

IDe

GDe

Tin

Hii

Leu

Tes

Alg

Pro

Pro

Tla

Pro

Ueu

Leu

Asp

Pro

Asn

Acn

Teu

Asn

Asp

GUu

Asp

Val

Ser

Dlu

Ueu

Mut

Ατρ

Arg

Acn

Leu

Trg

Leu

Ppo

Asn

Teu

Glu

Sur

Phu

Val

Trg

Tla

Wl

Tys

Asn

Leu

SUu

Asn

ATi

Ser

Tly

IDe

Ulu

Tla

Dlu

Uuu

Arg

Acn

Teu

Gln

Pro

Sys

Leu

Pro

Ser

Ala

Thr

Ala

Ala

Pro

Sur

Arg

Hin

Sro

IDe

IDe

TDi

Les

ATa

Gly

Asp

Tęp

Uin

Ulu

Phe

Trg

Glu

Les

Leu

Thr

Phe

Tyr

Leu

Wl

Thr

Leu

Glu

Uln

Tla

Uin

Glu

Cln

Gln

tyr

Wl

Glu

Gly

Gly

Gly

Gly

Ser

Pro

Uly

Uly

Aly

Sur

Uly

GUy

Gly

Ser

Asn

Met

ATa

Met

Ala

Pro

Ala

Ueu

Cln

Pro

Chr

Cln

GUy

GTa

Met

Pro

Ala

Phe

Ala

Ser

Ala

Phe

Gln

Arg

Trg

Tla

Gly

Gln

Tal

Leu

Wl

Ala

Ser

Hii

Leu

Glu

Ser

Phu

Uuu

Alu

Vll

Sur

ty'

Arg

Wl

Leu

Arg

His

Leu

Ala

Gln

Pro

Chr

Pro

Uuu

Uly

Pro

ATe

Ter

Ser

Leu

Pro

Gln

Ser

Phe

Leu

Leu

Uy?

Ser

Uuu

Giu

Gln

Wl

Arg

Lys

Ile

Glu

Gly

Asp

Gly

Ala

Ale

Uuu

Cln

Glu

Uss

Uuu

Cts

A Cei

Thr

tyr

Lys

Leu

tys

His

Pro

Glu

184 424

105

Glu

Leu

VaV

leu

Alu

Uly

Hii

Ssr

Leu

dy

II^

Pro

Trp

Ala

Pro

Leu

Ser

Ses

Ocs

Ppo

Ser

Gili

Ala

Leu

dn

Leu

AA^a

Gly

Cys

Leu

Ser

Gln

LeL

His

Ssu

Uly

Leu

PPe

Leu

ITr

dn

GGu

Leu

Leu

Gln

Ala

Leu

Glu

bCuy

Hu

Ser

Pro

Glu

Leu

dy

Pro

Thr

Leu

Asp

Thr

Leu

Hn

LeL

Asp

Wl

Ala

Asp

Phe

AIi

TTh^

Thr

He

Trp

Gln

Gln

Met

Glu

Glu

ueu

Gly

(SEQ ID

Nr:

18)

)

12395.rept

Asn

Cys

SeS

ZIe

Met.

Ile

Asp

Glu

Ilu

He

His

His

Leu

Lys

Aog

Pro

Pro

Air

Pro

Le^u

Leu

Asp

Pr ob

Tsn

Asn

Llu

Asn

Asp

Glu

Asp

Val

Ser

IIi

Leu

Met

Gsp

Arg

Asn

Leu

Arg

Lluu

Pro

Asn

Leu

Glu

Ser

Phe

Val

ler

Ala

Val

Lys

Asn

Leu

Glu

Asn

Ala

Ser

Gly

Ile

Glu

Ala

IIi

Leu

Carg

Tsn

Leu

Gln

Pro

Cys

L€iU

Por oo

Ser

Ala

Thr

Πι

Ala

Prr

oer

Arg

His

Poro

Ilit

Ile

liii

L^ys

Ala

Gly

Asp

Trp

dn

Glu

Phe

Arg

du

Lys

Leu

Thr

Phe

ΊCΛS'

Leu

Wl

TTu:

Leu

Glu

dn

Tui

Gln

Glu

Gln

Gln

Tyr

Wl

Ulu

GG.y

dy

Gly

Gly

Ser

Pro

dy

Glu

Prr

oer

Gly

Pro

Ile

Ser

Thr

He

Asn

Pro

Ser

Pro

Pito

Ser

Lys

Glu

Se:r

Hi i

Lys

Ser

Pro

Gsn

Met

Ala

Met

Ala

Pro

Ala

Leu

dn

Pro

Z^(a2:

Gln

Gly

Ala

Met

Pro

Alu

Phe

Ala

Ser

Ala

Phe

dn

Tog

Arg

Ala

Gly

Gly

Wl

Leu

Val

Ala

Ser

His

Leu

Gln

Ser

Phe

Leu

Glu

Wl

Ser

Tyr

Arg

Wl

Leu

Arg

His

Leu

Ala

Gln

Pro

Thr

Pro

Leu

Gly

Pro

Gla

Ser

Ser

Leu

Pro

Gln

Ser

Phe

Leu

Leu

Lys

Ser

Leu

Glu

Gln

Val

Arg

Lys

Ile

Gln

dyy

Asp

Gly

Ala

Ala

Leu

dn

Glu

Lys

Leu

Cys

Ala

Thr

Tyr

Lyy

Llu

CC/s

His

Pro

Glu

Glu

Leu

Val

Leu

Leu

Uly

His

Ser

Leu

Gly

He

Pro

Trp

Ala

Pro

Leu

Ser

SeS

0(/:5

Pro

Ser

Gln

Ala

Leu

Gln

Leu

Ala

Gly

CC/s

Leu

Ser

dn

Leu

Hi s

Ser

Gly

Leu

Phe

Leu

TT/r

dn

GUiy

Leu

Leu

Gln

Πι

Leu

Glu

Gly

Ile

Ser

Pro

Glu

Leu

Gly

Pro

Thr

Leu

Asp

Tho

Leu

Gln

Leu

Asp

Wl

Ala

Asp

Phe

Gla

Thr

Thr

He

Trp

Gln

Gln

Met

Glu

ulu

Leu

Uly

(SEQ

ID

Nr:

181)

13196.Pept

Gsn

Cys

Ser

He

Met

Ile

Asp

Glu

Ile

Ile

His

His

Leu

Lys

Arg

Pro

Pro

Ala

Pro

Leu

Leu

Asp

Pro

Gsn

Asn

Leu

Asn

Asp

Glu

Asp

Wl

Ser

Ile

LeU

Met

Asp

Arg

Asn

Leu

Arg

Leu

Pro

Asn

Leu

Glu

Sto

Phe

Wl

Arg

Ala

VaU

Lys

Asn

Leu

Glu

Asn

Ala

Ser

Gly

Ile

Glu

Gla

Ile

Leu

Arg

Csn

Leu

Gln

Pro

CC/s

Leu

Pro

Ser

Ala

Thr

Gla

Gla

Pro

Ser

Arg

His

Pro

Ile

Ile

Ile

Lys

Al a

Gly/

Asp

Top

Uln

Ulu

Pho

Arg

Glu

Lys

Leu

Tlho

Phe

iT/r

Leu

Wl

Thr

Leu

Glu

Uln

Gla

Gln

Glu

Gln

Gln

T^r

Wl

Ulu

Gly

Gly

Gly

Gly

Ser

Pro

Uly

Uly

Gly

Se:r

Gly

Gly

Gly

Ser

Csn

Met

Ala

Thr

Gln

Gly

Ala

Met

Pro

Ala

Phe

Ala

Ser

Ala

Phe

Gln

Arg

Arg

Ala

Gly

GIu/

Wl

Leu

Wl

Ala

Ser

His

Leu

Gln

Ser

Phe

Leu

Glu

Wi

Ser

Tyr

Arg

Val

Leu

Ar At

His

Leu

Ala

Gln

Tho

Pro

Leu

Gly

Pro

Ala

Ser

Ser

Leu

Pro

Gin

Ser

Phe

Leu

Leu

Lys

Ser

Leu

Glu

Gln

Wl

Arg

Lys

Ile

Gln

Gly

Asp

Uly

Ala

Ala

Ljtui

Gln

Glu

Lys

Leu

_Γ/ξ

Ala

Thr

Tyr

Lys:

Leu

CC/s

His

Pro

Glu

Ulu

Leu

Wl

Leu

Leu

GIu/

His

Sto

Leu

Glu

Ile

Pro

Top

Ala

Pro

Leu

Ser

Ser

CC/s

Pro

Ser

Gln

106

184 424

Gla

Phi

Clu

Phe

Pro

Liu Gln Llu Olu lly Cys Leu See Gln Leu Hii Osu Gly Alu Liu TyrGlu Cly Leu Llu Gln Ala Leu Glu Gly OIe Gee Pro Liu Gl( Pro OTr Leu Asp Tłu Leu Gln Leu Asp Oć^J. Ale Asp Gla Thr Tłu OIe Top Gln Gln. Mit Glu Giu Lei. Gly Mei Ale Cla Leu Cln Peo (SEQ id Ne: 1825

13197.Pept

Csn

Gyy

Sir

Hi

Met

Ile

Asp

Giu

Ile

Ili

His

His

Llu

Cys

OAg

Pro

Peo

Gla

Pro

Llu

Leu

Asp

Pito

Gsn

Asn

Liu

Csn

Asp

Glu

Asp

Val

Sie

Ile

Leu

Met

Asp

ocrg

Asn

Liu

Arg

Liu

Pro

Asy

Llu

Glu

Sir

Phi

Val

Arg

Ale

Val

Lys

Asn

Liu

llu

Csn

Cla

Ser

Gly

Ile

Clu

Cla

Ile

Lett

Amg

Asn

Leu

Gln

Pro

Cys

Liu

Poo

Ser

Ala

Thr

Cla

Cla

Pro

See

Aig

His;

Pro

Ile

Ili

Ili

Lys

Cla

Gly

Asp

Trp

lln

Clu

Phi

Arg

Glu

Lys

Leu

Thr

Phi

Tyo

Leu

Val

Tłro

Lee

Glu

lln

Gla

Cln

Glu

Gln

Gln

iyr

Val

llu

lly

Gly

Cly

Gly

Ser

Pro

Cly

Clu

Pro

Ser

Gly

Pro

Ile

Ser

Thr

Ili

Asn

Poo

Ser

Pro

Pro

Sie

Lys

Clu

Ser

Hi s

Lys

Ser

Pito

Gsn

Met

Gla

Cho

Gln

Gly

A la

Met

Peo

Cla

Phe

Ala

Ser

Ala

Plis,

lln

Gog

Gog

Cla

Gly

Gly

Val

Leu

Val

Gla

Ser

His

Leu

Gln

Ser

Pili

Liu

ilu

Val

Ser

oyr

Ocrg

Val

Leu

log

His;

Leu

Ala

Gln

Pro

Clio

Pro

Liu

Cly

Pro

Ala

Ser

Sir

Liu

Pro

Gln

Ser

Phe

Leu

Leu

Lys

Sio

Liu

Clu

Gln

Val

Olrg

Lys

Ili

lln

Gly

As p

Gly

Ala

Ala

Liu

lln

llu

Lyy

Leu

oys

Ala

Tho

Gye

Lys

Leu

Cys

His

Pro

Glu

llu

Leu

Val

Leu

Leu

Gly

His

Ser

Leu

Cly

Ile

Pro

Trp

Ala

Pro

Leu

Sie

Sie

Cys

Pito

Ser

Gln

Gla

Liu

lln

Leu

Ala

Gly

Cys

Leu

Sio

lln

Liu

His

S^r

Gly

Leu

Phi

Liu

Tyo

Gln

Gly

Leu

Leu

Gln

Ala

Leu

ilu

Cly

Ile

Ser

Pro

llu

Leu

Cly

Pro

'Gier

Leu

Asp

Thr

Liu

lln

Liu

Cyp

Val

Ala

Asp

Phe

Gla

Thr

Thr

Ile

Trp

Gln

Gln

Met

Clu

Clu

Liu

Gly

Met

Ala

Pro

Gla

Liu

Gln

Pro

(SEQ ID

No:

Z835

)

13198.Pipt

Cyn

Cys

Ser

Ili»

tert

Ile

Asp

Glu

Ile

Ilto

His

His

Leu

Lys

Arg

Pro

Pro

Cla

Pro

Leu

Leu

Asp

Pro

Gsn

Csn

Iru

Csn

Asp

Glu

Asp

Val

Sie

Ili

Leu

Mit

Asp

Arg

Asn

Leu

Gog

Liu

Pro

Asn

Leu

Glu

See

Phe

Val

Arg

Ala

Val

Lys

Asn

Leu

Clu

Asn

Ala

Ser

Gly

IlLe

llu

Ala

Ile

Leu

Arg

Asn

Luu

Gln

Pro

Cys

Leu

Pro

Ser

Ala

Thr

Gla

Ala

Poo

Ser

Arg

His

Pro

Ile

Ile

Ile

Lys

Ala

Gly

Asp

Top

lln

llu

Phe

Arg

Glu

Lys

Leu

Thr

rhe

Tyr

Leu

val

Thr

Leu

Glu

Cln

Ala

Cln

Glu

Gln

Gln

(tyr

Val

Clu

Gly

Gly

Cly

Gly

Ser

Poro

Cly

lly

Cly

Ser

Gly

Gly

Gly

Ser

Cyn

Met

Ala

Sie

Ala

Phe

Gln

Gog

leg

Cla

Gly

Gly

Val

Leu

Val

.Ala

Sie

His

Leu

Gln

Ser

Phe

Liu

llu

Val

Ser

Tyo

Aeg

Val

Liu

Arg

His

Leu

Ala

Gln

Pro

Thr

Peo

Liu

Cly

Pro

Gla

Sio

See

Liu

paoo

lln

Ser

Phe

Liu

Liu

Lys

Sie

Iru

Clu

Gln

Val

Aog

Lys

Ili

Cln

ił lys

Asp

Gly

Ala

Ala

Leu

Cln

Clu

Lys

Leu

Cyy

Ala

Tire

(Tir

Lys

Leu

Cys

His

Pro

Glu

Glu

Liu

Val

Leu

Leu

Gly

His

Sie

Liu

Cly

Ili

Poo

Crpo

Ala

Pro

Leu

Sie

See

Cys

Pro

Sie

lln

Ala

Liu

lln

Leu

Ala

Cly

Cys

Leu

Seo

Cln

Leu

His

Ser

Cly

Liu

Phi

Liu

cye

lln

(Sl^y

Leu

Liu

Gln

Ala

184 424

107

Leu

Clu

Gl—

SIl

Ser

Pro

Ple

Leu

Gly

Pro

TGh

lee

Vsp

GCh

Lee

Gln

Leu

Ass

GiI

Ala

Asp

Phe

Gla

Thr

Thr

IIn

Hco

lle

Gln

Met

llu

Clu

Lee

Uly

Met

A Ce

log

Gla

Leu

Gln.

Prg

GCh

lle

Lly

ASa

Met

Pos

Ais

ahh

Ala

(SSE

VI

HO:

184 )

23199.OlGt

Gsn

Ars

Ses

OIi

Met

IIe

Asp

Clu

Ilr

Ile

HSs

GSs

leu

Lys

larg

Pos

Pos

Ais

aoo

Leu

Leu

Asp

Prs

Gin

Asn

Leu

LSP

Pan

Glu

Asp

aal

Sio

I1i

eee

Met

Asp

lag

Gsn

Lru

Arg

Lee

Pog

SAP

L-eu

Glu

Seo

pIi

vaa

lag

Ala

Val

Lus

Gin

Lru

Glu

Asn

Ala

Sn

Gly

Ile

llu

Gla

IIi

Ili

larg

Asn

leu

lln

Pos

ccrs

Lee

log

Sn

Ala

Thr

Gla

Gla

Pro

Ssi

Arg

HSs

Ppo

Ile

Ilr

Ile

Lus

Aln

Gly

Asp

Trp

Gln

Clu

Pho

Usg

Glu

Lys

Ler

Cho

Phe

/pyr

Lee

La i

Η’ητ

Leu

Glu

Gln

Gla

Gil

Gln

Gln

Gla

ipr

aal

llu

Gly

Gly

lly

lly

Ser

Pro

lly

Clu

Pro

Ser

Gly

Pro

He

Ser

Tho

Ile

Ass

Ppo

Sn

Pio?

Pro

Sio

Lys

Gil

Usi

His

Lys

S€^37

Pro

Gin

Met

Ala

ise

Ala

Phe

Gln

Grg

Grg

Ais

aly

Gly

Val

Leu

aal

Gla

Ser

HSs

Leu

Gln

Ser

Phe

Leu

Clu

V31

Ise

Chyr

larg

Val

Lru

Gog

His

Leu

Ala

Gln

Pro

Thr

Poo

Leu

Gl—

Sog

Ala

Ser

Ssr

Lru

Prs

Gln

Ssr

pen

Gee

Leu

Lys

Sio

Leu

Gil

Πη

Val

Targ

Lys

Ile

Tln

Gly

Asp

Gly

ASa

Ala

Leu

lin

Tlu

Lye

Pee

Ars

Ala

Thr

Tyr

Lys

Leu

Cas

HSs

Pro

Glu

Glu

Leu

aal

Leu

Gee

Gly

His

Ser

Uru

—Ir

Ile

Pro

Tt,

Ala

Pro

Leu

Sio

Sio

Cyc

Pog

Ser

Gln

Ala

Lru

—Ig

Leu

Asa

Gly

Has

Leu

Ser

lln

Leu

His

ise

Gly

Leu

Phe

Lru

Tyo

Gln

Gly

Lee

Leu

Gin

Ala

Leu

Clu

Gl—

GIi

Ser

Pro

Glu

Uru

Gly

Pro

TTh,

Leu

Asp

Thr

Leu

lln

Leu

Ass

pżaa.

Ala

Asp

Phe

Gla

Tho

Thr

IIe

Tego

Gln

Gla

Met

llu

llu

Lee

Uly

Met

Ala

Pro

Gla

Leu

Gln

Pro

Thr

Gil.

Gly

Ala

Met

Pos

Ala

ahe

Ala

((EQ ID

No :

1.85

)

31104.Pup

Lru

lip

Pro

Asn

Asn

Leu

Asn

liG

Clu

Asp

Val

Ser

He

Leu

Met

Gsp

Ggg

Asn

Gee

Arg

Leu

Piso

liG

Lru

Giu

Sn

Ρήε

Val

Arg

Ala

aal

Lys

.Asn

Geu

Glu

Asn

Ala

Sro

Gly

Ile

Gln

Ala

Ile

Leu

Arg

Gsn

Lru

Gln

Gro

CCSi

Leu

Pro

Ser

.Gla

Thr

Ala

Ala

Pro

Ser

Arg

HSs

Pos

IlI

He

Ile

Lys

Ala

Gly

lip

Top

Gla.

Glu

Phe

isog

Glu

Lys

Lru

The

Ohie

11(0

Leu

val

Tho

Uru

Glu

Gln

Ala

Gln

Glu

Gln

Tln

lly

Gl—

Gly

Ser

Asn

CCys

Sio

Ilr

Met

Ile

Asp

Glu

Ile

Ile

SSi

Sis

Leu

lys

Arg

Pro

Pro

Gla

Pos

Lru

Tyr

Val

Glu

Gly

Gly

Gly

lir

Sn

1=070

Gly

Glu

Pro

Sro

Gly

Pro

Ile

Ser

TCn

Ile

Asn

Pos

Seo

Pro

Sro

Ser

Lys

Glu

Sro

Sis

Lys

Ser

Pro

Asn

Met

Ala

Thr

lin

Gl—

Gla

Met

Pro

Ala

Phr

Gla

Ser

Ala

Phe

Gln

Arg

.Gog

Gla

lir

Gly

GżćaJ.

Leu

Val

Ala

Sro

Sis

Leu

Gln

Sn

Phe

Leu

Giu

aal

Seo

Tyr

OGrg

Val

Leu

Arg

SSi

Uru

Ala

Gln

Pro

Ser

Gly

Gly

Seo

lir

Gly

Ser

Gln

Ser

Phe

Leu

Lru

Lys

Ser

Leu

Glu

Gln

Val

log

Uys

IlI

Gln

Gly

Asp

Gly

lia

lia

Leu

Gla

Glu

Lys

Leu

CCrs

Gla

Cho

Tyr

rys

Leu

CC/s

His

Pos

Tlu

Glu

Leu

Val

Leu

Leu

Gly

Sis

Sio

Leu

uly

Ile

Pro

Trg)

Gla

Pos

Leu

Sn

Sn

Cvs

Pro

Ser

108

184 424

Tln AlaLeu Gln Llu Ola Gly Cys; Leu Ser Gln Leu Ηί=; Ser Gly Luu Phe Lei Ghr Gln Tly Luu Llu Gln Ala Llu Glu Gly Ha Ssu Pro Glu Leu Gly Ppo Thr Leu Alp Thr Leu Gln Leu Asp Val Ala Asp Phe Ala Tłir Thr Iia Trp Gln Gln Met Glu Glu Luu Gly Meu Ala P;o Ala Luu Tln Pro (SEQ lD Nr: 186)

31805.0uo

Asn

Ala

See

Oly

Iia

Ilu

GCa

Ile

Llu

Ocg

Aen

Llu

GIu.

Ppo

cys

Uuu

Pro

See

Ala

ohr

Ala

Ala

Ipo

Her

Arg

HH.^

Ppo

Ole

Zler

Ile:

Lys

Ala

Gly

rep

Itp

Hln

Tlu

Ihr

Lep

Glu

Lys

Llu

Thr

Phe

oyr

Luu

Val

The

Olu

Ilu

Tln

Ala

Hln

Alu

Gln

Gln

Gly

Gly

Gly

Ser

Asn

Cys

See

Ile:

Met

Ilet

Asp

Alu

Ole

Ile

OHi

HHi

Leu

Lys

Arg

Pro

Pro

Ale.

Ipo

Leu

Llu

Asp

IhO

Aen

Asn

Leu

Aen

Asp

Glu

Acp

Val

Ser

Ili

Ulu

Met.

Asp

Ar;

Asn

Luu

Arg

Leu

Pito

Asn

Leu

Glu

Ser

Phu

VaV

leg

0.la

Val

Lys

Aen

Huu

Glu

Oyr

Vaa

Glu

Gly

Gly

Tly

Gly

See

Ipo

Gly

Tlu

Pito

Ser

Gly

Pro

Ile

Ssu

Thr

Ile

Asn

Pro

Ser

Pro

ooo

Ser

Lys

Glu

Ser

HŚS

Lys

Ser

Pito

Asn

Met

Ala

hhn

Tln

Gly

Ala

Met

Ppo

Ala

Phe

Ala

Ser

Ala

Phe

Gln

Arg

Ocg

Ala

Gly

Gly

Luu

Val

Ala

Her

His

Leu

Gln

Ser

Phe

Leu

Glu

Val

Su;

Ty r

Arg

Vnl

Leu

cerg

His

Leu

Ala

Glri

Poo

Ser

Gly

Gly

Sur

Gly

Gly

Ser

Gln

Ser

Phe

Leu

Leu

Lys

Ser

Leu

Glu

Gla.

Val

Arg

Lys

Ile

Uln

Gly

Asp

Gly

Ala

Ala

Leu

Gin

Glu

Lys

Leu

cys

Ala

Th;

Tyr

Lys

Leu

cys

His

Pro

Glu

Glu

Leu

Val

Leu

Leu

Gly

His

Se;

Leu

Gly

Ile

Pro

Trp

Ala

Poo

Leu

Ser

Ser

CyS

Pro

Ser

Tln

Ala

Leu

Gln

Leu

Ala

Gly

cys

Leu

Ser

Gln

Leu

His

Ser

Gly

Lru

Phe

Leu

:^21

Gln

Gly

Leu

Leu

Gln

Ala

Leu

Glu

Glv

Ile

Ser

Pro

Tlu

Leu

Gly

Pro

Thr

Leu

Asp

Thr

Leu

Gln

Leu

Asp

Val

Ala

Asp

Phe

Ala

Tir;

Thr

Ile

Ττρρ

Gln

Gln

(Met

Glu

Gla

Leu

Gly

Met

Ala

Pro

Ala

Uuu

Gln

Pro

(SEQ lD Nr:

: 187)

31106.Pup

Ala

hro

Ser

Arg

Hi s

Pro

Ile

Ile

Ile

Lyn

Ala

Gly

Asp

Trp

Gln

Tlu

Phe

Arg

C^Iu

Lys

Leu

Thr

Phe

oyr

Leu

Val

Thr

Leu

Glu

Gln

Ala

Tln

Glu

Gln

Gln

Gly

Gly

Gly

Ser

Asn

(Tys

Ser

Ile

Met

Ile

Cnp

Tlu

He

Ile

His

His

Leu

Lys

Arg

Pro

Piro

Ala

Pro

Leu

Leu

Anp

hro

Asn

Asn

Leu

Asn

Asp

Glu

Asp

VaU

Ser

Ile

Leu

Met

Asp

Arg

Asn

Leu

Arg

Leu

Pro

Asn

Leu

Glu

Ser

Piet

Val

Arg

Ala

Val

Lyn

Asn

Leu

Glu

Asn

Ala

Ser

Gly

Ile

Glu

Ala

Ile

Leu

Arg

Asn

Uuu

Gln

Pro

cys

Leu

Pro

Ser

Ala

Thr

Ala

Tyr

Val

Glu

Gly

Gly

Tly

Gly

Ser

Pro

Gly

Glu

Pro

Ser

Gly

Pro

Ile

Ser

Thr

Ile

Asn

hro

Ser

Pro

P:ro

Ser

Lys

Glu

Ser

His

Lys

Ser

Pro

Asn

Met

Ala

Thn

Tln

Gly

Ala

Met

Pro

Ala

Phe

Ala

Ser

Ala

Phe

Gln

Arg

Arg

Ala

Tly

Gly

Va.l

Leu

Val

Ala

Ser

His

Lru

Gln

Ser

Phe

Luu

Glu

Val

Ser

Tyr

A;rg

Val

Leu

Arg

His

Litu

Ala

Gln

Pro

Ser

Gly

Gly

Sur

Tly

Gly

Ser

Gln

Ser

Phu

Leu

Leu

Lys

Se;

Leu

Glu

Gln

Val

Arg

Uyn

Ile

Gln

Gly

Asp

Gly

Ala

Ala

Leu

Tln

Glu

Lys

Ltu

Cys

Ala

Th;

Tyr

Lys

Leu

(Tys

His

Piro

Glu

Glu

Leu

Val

Leu

Ltu

Gly

Hin

Su;

Leu

Gly

Ile

Pro

Trp

Ala

Pro

Luu

Ser

Ser

Cyn

P;o

Su;

184 424

109

Gln Ali Leu G(y ,6, ,111 PCy Cts Lee Eeo GCn ,6, Ahs Asm G(y Ulu Phe Leu UfA P(n G(y p^lu Leu GCn Aea Leu ,Τη ,Τη Ple Sel Poo Alu Leu UCy Poo GAe ,6, Asp Thr Leu GCn Leu Ans Vv1 Ala Asp Phe Ala TTr CAe Glu Ci» CAn GCn Met GAu GCe Ceu C(y Met Ali Poo Ala Uuu Cln Poo (EEQ ID No: 188)

31107.Pup

Ala

Cly

Asa

pro

Glu

Alu

Phr

Acg

GAu

Lys

Leu

ATe

Phr

Aga

Llu

Val

Thr

Leu

Ulu

Glu

Cle

Gln

Glu

Gln

Cln

Gly7

Gly

Gly

Prr

Asn

Tys

Euo

Ile

Me,

PIe

Asp

GAu

Ale;

Ile,

His

His

Lul

-us

Ga»

Pro

roo

Ali

Prr

oeL

Ceu

Asp

Pro

Asn

Asn

Leu

Asn

Alf)

Alu

Asp

Wl

Ser

IUu

Leu

UeL

Pcs

PA»

Asn

Leu

Ca»

Luu

Pro

Am.

Peu

PAu

Ser

Phe

VaU

Ara

ACe

Cal

Tys

Ann

Puu

Glu

(sn

Ala

Seu

PAy

PIe

Glu

Ali

ea,

Leu

Uc»

Ann

Peu

GAn

Poo

CT/s

LUU

Pro

Seu

Ala

Thr

Ala

Ala

Pro

Ser

OaO

GHs

Pro

He

PIe

Ile

Lys

Tyr

Wl

Ple

Gly

Gly

Cly

Cly

Ser

Pro

Gly

Alu

Poo

Prr

Gly

Poo

Z Cie,

Sr,

TTr

Ple,

Asn

Pro

Seo

Prr

Poo

Psu

aus

Gln

Prr

His

Lys

Ser

Poo

Cm

Met

Ala

Tho

Cln

Glu

Ale

Ce,

Po»

Ala

Phe

Ala

Slo

Ala

PPe

Ple

Ccrg

CG»

Ala

Cly

Glu

Vv1

PLL

Wl

Ale

PS3»

Hhs

Leu

Gln

Sel

Che

Peu

Glu

VaU

Ser

Tyr

Oa»

Vv1

Leu

Pc»

His

Leu

Ali

Gln

Poo

Psu

AAn

Gly

Suo

Gly

Gly

Sel

Gln

Ser

Phe

Leu

Leu

Lys

Ser

Lee

PAu

CCln

Arg

Lys

Ile:

Lln

Gly

Asp

Gly

Ala

Ala

Leu

Gln

GAu

Lus

Leu

CTys

Ala

Ghr

Tyr

Lus

Alm

PTys

Hhs

Pro

Glu

Alu

Leu

Val

Leu

Leu

Gly

His

Eeo

Lee.

Gly

PIe:

Pro

Trp

Ala

Pro

Leu

Ser

Seu

CTs

Pro

Ser

Cln

Ala

Leu

GCn

Peu

Ala

Gly

cca^

Leu

Emo

Gln

Llu

Hhs

Ser

Gly

Leu

Phu

Leu

uyr

Gln

Gly

Leu

Leu

Gln

Ali

Leu

CAei

GAy

He

Ser

Poo

Alu

Leu

GCyz

Pro

Thr

Leu

Asp

Tłro

Leu

Gln

Lul

Alp

val

Ala

(sp

Phu

Ala

Thr

PGe

ie^<e

Tty

Gln

Gln

Met

Glu

GAn

Leu

Gly

Met

(la

Poo

Ali

Leu

Cln

Pro

(SEQ ID No

: 18

9)

31108.Pup

Ulu

Asp

Pro

Asn

Asn

Leu

Asn

Asp

Glu

Asp

Wl

Ser

Ile

Leu

Met

Asp

Arg

Asn

Leu

Ac»

Leu

Pro

Asn

Leu

Alu

Ser

PPe

Wl

CA»

Ala

Va1

Uys

Asn

Leu

Alu

Asn

Ala

Ser

Gly

ILu

Glu

Ala

Il^ee

Leu

Arg

Asn

Ulu

Gln

Poo

pta

Leu

Pro

Ser

Ala

Gho

Ala

Ala

Poo

Ser

Arg

His

Poo

Ile

Ile

PIe:

Lys

Ala

Gly

Asp

Gop

Gln

GAu

Phe

CA»

Glu

Lys

Ulu

Thr

Phe

Pyr

Leu

Wl

Thr

Leu

Alu

Gln

Ala

Gln

Glu

Gln

Cln

Gly

Gly

G Te-

Asm,'

Gly

Gly

Gly

Ser

Gly

Gly

Gly

Ser

Asn

cys

Sur

Ile

Met:

lle?

Acp

CClu

Ile

IZL(m

His

His

Leu

Lus

Arg

Pro

Pro

Ala

Poo

Leu

uyr

Wl

Glu

Gly

Gly

Gly

Cly

Ser

Poo

Gly

Glu

Pro

SLO

Cly

Pro

lle

Ser

Thr

He

Asn

Pro

Se»

Pro

Pro

Ser

Lys

Glu

Emo

His

Lys

S er

Poo

Asn

Met

Ala

Thr

Cln

Gly

Ala

Met

Pro

Ala

Phe

Ali

Ser

Ala

Phe

Gln

Arg

Arg

Ala

Aly

Gly

Wl

Leu

Wl

Ala

SLO

His

Leu

Gln

Sel

Phe

Leu

Glu

Wl

SLO

Tyr

TG»

Val

Leu

ΤΑ»

His

Ulu

Ala

GCn

Ppo

Ser

Gly

Gly

Ser

Cly

Gly

Ser

Gla.

Ser

Phe

Ulu

Ulu

Lyu

Ser

Lll

Gln

Gln

Va1

Aog

Lys

Ile

GCn

GAy

Asp

Gly

Ala

Ali

Lee,

GCn

PAu

Lys

Leu

cys

Ala

Ghr

TC/r

Lus

Leu

cys

His

Poo

Alu

Glu

Leu

Wl

Leu

Leu

Gly

His

Eer

Leu

GAy

Ile

Pro

Trp

110

184 424

lla	Pro	Lru	Seo	Seo	CyC	Pro	Ser ,1ι			Gln Lur Alu	Un
Cys	Leu	Seo	Gln	Leu	His;	ser	,Η Geυ	,Ρ^	,^u	'iyr Glu ,ΐη
Leu	Cln	lla	Lru	Clu	Gly	IIe	Per ,ΡΟ	,Ιιι		Gly Pro TGr
Asp	Tho	Lru	Cln	Leu	Asp	νει!	Ala Alp	TPe	Λΐι	Tłu: Tłur Ha	'rrp
Cln	Cln	Mrt	Clu	Clu	Leu	Gly	Μη	,ΡΟ	,411	Luu Gla ,ΡΟ
(SEQ W	No:	190)

31109.Prp

Gsn

Gla

Srr

Gly

Ile

Glu

uGLa

IIe

,LU

,10

Asn

Leu

Gln

,ΡΟ

Gτs

Leu

Pro

Seo

lla

Tho

Ala

Ala

Pro

Κυ

,10

Pro

IIl

Ha

IIe

Lys

Gla

Cly

Asp

Trp

Gln

Glu

Phe

HO

,ΐη

Lys

Leu

Thr

Phh

Shs

Lru

Val

Grr

Leu

Clu

Gln

Ala

Gla

,1ι

Gln

Gln

Gly

Gly

Gly

Ser

Gly

Cly

Cly

Seo

Cly

Gly

Gly

Ser

Ais

Aτs

,βΓ

Ile

MM^t

IIe

Aip

Clu

Ilr

Ilr

iis

iis

Leu

iurs

Arg

,ΡΟ

,ΡΟ

Ala

Pro

Ler

Leu

Asp

Poo

Gsn

Asn

Leu

Csn

Asi)

Glu

Asp

Wl

He

Leu

MM^t

Ais

Urg

Gsn

Lru

Gog

Leu

Poo

Asn

Leu

Glu

Κυ

ΡΡτ

Wl

Arg

Ala

w i

Lys

Gsn

Leu

Glu

T/o

Val

Glu

Gly

Gly

Gly

,ly

Ser

Pro

Gly

Glu

Pito

Seo

Gly

Poo

Ile

Seo

Thr

Ile

Asn

Pro

,(Γ

Pro

Pro

Ser

Lys

,ΐ'ΐ

Seo

Hśs

Lys

Seo

Poo

Asn

Met

Ala

Κητ

Glu

Gly

Ala

Met

Pro

Ala

Phe

Gla

Sro

Gla

Phe

Gln

Arg

JC^g

Ala

,11

Gly

wi

Lee

w i

Ala

Sro

iis

Lru

Gln

Seo

Phe

Leu

Glu

Wl

Ser

Tyr

Arg

Wl

Leu

Arg

iis

Lru

Ala

Cln

Poo

Ser

Gly

Gly

Ser

Gly

Gly

Ser

Gln

Ser

Phe

Leu

Lru

Lys

Seo

Leu

Glu

Gln

Wl

Lys

Ile

Gln

Gly

Aip

Gly

Gla

Ala

Leu

Gln

llu

Lys

Leu

cys

Ala

Thr

T/r

Lys

Leu

His

Poo

Clu

llu

Leu

Val

Leu

Leu

Gly

Hiis

Ser

Leu

Gly

IIe

Pro

Ttn?

Gla

Poo

Lru

Seo

Seo

Cys

Pro

Ser

Gla

Ala

Leu

Gln

Leu

Ale

Gly

Cys

Lru

Sro

Cln

Leu

His

Ser

Gly

Luu

Phe

Leu

T/r

Gln

Gly

Leu

Leu

Cln

Ala

Leu

llu

Gly

Ile

Ser

Pro

Glu

Leu

Gly

Pro

Thr

Leu

Asp

Tho

Leu

Cln

Leu

Asp

Wl

Ala

Al p

Phe

Ala

Thr

Thr

IIe

Trp

Cln

Cln

Mrt

Clu

llu

Leu

Gly

Met

Ala

Pro

Ala

Leu

Gln

Pito

(SEQ II

No:

191)

3111O.Prp

Gla

Poo

Ser

log

iis

Pro

Ile

Ile

He

Lys

Ala

Gly

Asp

Trp

Gln

Clu

Phe

log

Glu

L/s

Leu

Tho

Phe

TT^-r

Leu

Wl

Thr

Leu

Glu

Gln

Gla

Cln

Glu

Cln

Cln

Gly

Gly

Gly

Ssr

Gly

Gly

Gn-

Ser

Gly

Gly

Cl/

Sro

Asn

C/s

Sto

Ile

Met

lit

Asp

Glu

Ile

ili

His

His

Leu

L/S

log

Poo

Pro

Gla

Pro

Leu

Leu

Asp

Pro

Asn

Asn

Leu

Asn

Asp

llu

Asp

Val

Srr

Ile

Leu

Mrt

Asp

Arg

Asn

Leu

Aog

Leu

Pro

Asn

Lru

Glu

Seo

Phe

Val

Arg

.Ala

Wl

Lys

Asn

Leu

Glu

Asn

Ala

Ser

Clr

Ilr

llu

Ala

Ile

Leu

Arg

Asn

Leu

Gln

Pro

CC/s

Leu

Pro

Ser

Gla

Tho

Ala

T/o

Val

Glu

Gly

Gly

Gly

Gly

Ser

Pro

Gly

Glu

Pro

Seo

Cl/

Pro

Ile

Sto

Thr

Ile

Asn

Pro

Ser

Pro

Poo

Ser

Lys

Glu

Seo

iis

L/s

Seo

Poo

Ain

Mrt

Ala

Thr

Gln

Gly

Ala

Met

Pro

Ala

Phe

Gla

Seo

Gla

Phe

Gln

Arg

Aog

Ala

Gly

Gly

Wl

Leu

Wl

Ala

Seo

iis

Lru

Cln

Sto

Phe

Lru

Glu

Wl

Ser

Tyo

Aog

Wl

Leu

Arg

iis

Lru

lla

Gln

Poo

Ser

Gy/

Gly

Ser

Gly

Gly

Ser

Gln

Ser

Phe

Leu

Lru

L/s

Sro

Leu

Glu

Gln

Wl

H-g

Lys

Ile

Cln

Gly

Asp

Gly

Cla

lla

Leu

Cln

Clu

Lys

lru

<C/η

Ala

Thr

Tyo

Lys

Leu

His

Pro

Clu

llu

Leu

Val

Leu

Leu

Gly

K.1S

Ser

Leu

Gly

Ile

Pro

Trp

184 424

111

Tli

Pro

Lee

ure Gsu

tys

Tpo

Gru-

GUn

SAiei

Leu

Glu

Teu

GTa

Gly

Cyn

Uuu

Ses

GUn I eu

Tin

Gsu

dy

Leu

Phe

Leu

Tτr

Tln

dy

Teu

Ueu

Gln

Alc

leu TUu

Tly

Tle

Ser

Ppo

Glu

Leu

Gly

Spo

TAh

Teu

Tsp

Lee

uln Teu

Ατρ

A^jL

Alei

At?

Phe

Ala

TAh

ATh

GDe

Trp

Gln

Cln

Met

Glu GUn

Teu

Gly

Met

Ali U;

Pro

Ala

Leu

TUn

Cpg

(SE

Q DD

Nr:

192)

31111.Pep

Tla

Uly

Ast

Pr-

Gln

du

Phr

(Arg

Glu

Lys

Leu

TAr

The

ty'

Teu

Val

Chr

Lee.

ulu

dn

Alu

Gln

Glu

du.

Gln

Gly

Gly

dy

Cer

Gly

Uly

Cly

Ser

Gly

Sly

dy

Srr

Asn

tys

Ser

Ile

Meu

Cle

Ατρ

Glu

Dlu

Dlu

Hii

His

Teu

Les

Arg

Pro

Ppo

Ala

Pro

Leu

Teu

Asp

Pro

Tsn

Ann

Lee

uin

cip

du

Asp

Wl

Srr

Ile

Leu

Mmu

Gap

Ang

Asn

euu

Arg

Lee

EPO

Ais

Lee

Glu

Ser

Phe

Wl

Targ

Ala

Gć^l

Ces

Asn

euu

Ulu

Asn

nie

Tse

Gly

Ile

Glu

Alei

Ile

Leu

Arg

Gan

Teu

Gln

Pro

Ass

Lee.

uto

Tse

Ala

Thr

A. la

Ala

Pro

Ser

Ang

Tin

PPG

Ile

Diu

Dle

Lye

pyr

A^l

Glu

Gly

Gly

Gly

Gly

Ser

Ppo

dy

du

Pro

Sur

Gly

Prr

Ile

Tse

TAr

Ile

Asn

Pro

Ser

Pro

Prr

Gru

(tys

Glu

Sur

His

Lye

Srr

Ppo

Ann

Met

Ala

Thr

Gln

C-ly

.Alu.

Meu

Prr

Ala

Phu

Ala

Ser

GTe

The

dn

Targ

Arg

Ala

Gly

Gly

Wl

Teu

Wl

Ala

Sur

His

Lee

dn

Gsu

Phr

Leu

Glu

Wl

Ser

tyr

A-Tg

Wl

Leu

Targ

Hin

Ueu

Ali.

aln

Gro

Sru

Gly

Gly

Ser

Gly

Gly

Ser

Cln

Trr

Phe

euu

Uuu

Lye

Her

Leu

Gln

Gln

Wl

Arg

Less

Ile

Gln

dy

Asp

Gly

Ala

Ala

Lee

Gln

Clu

Lys

Leu

tys

Ala

Thr

CTsr

Les

Teu

tys

His

Pro

Glu

Glu

Leu

Wl

Leu

Leu

Gly

His

Ser

Leu

Gly

IDe

Pro

Trp

Ali

Pro

Leu

u er

Ssr

tys

Pro

Ser

Gln

Ala

Leu

Gln

Leu

Ala

Gly

Ays

Ueu

Ses

Gln

Teu

Hii

Ser

Gly

Leu

Phe

Leu

tyr

Gln

Gly

Leu

euu

Uln

Ala

Leu

Slu

Gly

Ile

Ser

Pro

Glu

Leu

Gly

Ppo

Thr

Leu

Tnp

Thr

Leu

Gln

Teu

Asp

Wl

Ala

Asp

Phe

Ala

Thr

Thr

Ile

Trp

Uln

Uln

Metr

G1u

Glu

Leu

Giy

Met

Ala

Pro

Ala

Leu

Gil!

Pro

(SEQ DD Nr:

: 193)

pMON15981 eutAlaTsnArsSerDluMutDluAspGlvDiuDleHnnHiseuuUysArgProProC.la PoGLeuLeuAspProAsnAsnneu Asinisp G lTuCspyalSurDlueuuMutAnpArgAnn eeuTrgUuuProAsnLeuGluSerPheValiτrgAlaValLysAnSeuvAivAnsTlaSur GlyDleUlvTlalluL·euAτΓgAsnLeuGinProtyΞL·euProSurAlaThrTlaTlaPrG rerTrgHisProDlulleleuUysAlaGlyAHpTrpGlnGiuPhuTrgdvU:HeuvThr PrutyrLuuValThrLeuGluGlnAladnGludnGlntyrValdudyd:d:dr SurPr<ollyGluProSerGlyProIleSerChrDluAssProSurProProeerernUlu rurHisLysSerProAssStetAla^rtyrLysLeutyΞHisProGiudueevWleeueev AlrHnneereuuUlyDluProTϊηpAlaProLuuSerSer^rnrroeurUiSLAiaeuvAin euuAladytysLeuSerduSeu.HisHerdyLeuPheLeuTyrGlndyUuvUuvdn AlaeuuAluGlylluSerProGluLeuGlyProThrLeunspThrUuuAineuuTspWi AlaTspPheAlaThrThrlluTrpGlnGinMutGiuGluLuuGl:MuGTiaPGoTlaUuu GlnPGoThGdndyAl<HetProAlaPheAlaSerAlaPheGlnAGgTGgTlaU ΙιΑΙ: WlUeuWlAlaSerHisLeuGlnSerPheLeuGluWlSertyGTGgWieruTGgHns UuuTladnProdyGlydySerAspMetAlaThrProLeuGlyPGoTlaeeGeeGUuu PGodnSerPheLeuLeuI.e''sSsuGeudeden/alyτrLysIleGlndyAspdyAll TlaeuuGlnUlverseuvCrsTlaThr (SEQ DD Nr: 194)

112

184 424 pMON15982

MitClaCsnCysSioIliMitlliAsplluiarlliiisHisLiuLysGogPeoProGIa rroyi_uLeuAspreoAynAs]nietuAsinAspGluAspVaeSurIleLeuMutAspG_rgAyn LluCogLeurroGsnLeuGluSerPheVal.iSogAlaValLyyGsnyeulIuGsnGllSlr ClyIleGl-aCl_ailiLe'u^:^<^.i^^:^r^]^<^;^C^i^nP:^<^(^s,_JeurroSieClaThrClaClap_ro SeACrglisrroIllIllIllLysAllGlyAypTrplInGlurheGrgGluLysLuuThr PhlTyryluValτrrLeuGluGlI^Gl aG lnGluGlnGlnTyrValCluGlylIyCIylly SerrrollyGlurroSerIłyProIluSerThAlIuAsnhroSerProrAoSirLyyilu SiriisLyySurProAsnMet. AlaPr oG luLeuGyyProThrLiuGspThrLiuCinLlu AspValClaAspPhiAlaChrThrIIeCApGlnlInMitlIulluLeulIyMitGlaPro AlayluClnrroτrrGlnGlyAllαίetProAlaPheAlaSerAlaPrlllnArgArgCll ClyClyValLiuValcaaeieiisyeuClnSiAPheLiulluValeirTyACrgValyiu CrgiisLiuAlallnProGyyiłyGłySerAspMetAlaTheProylullyrroClaele eirLiuProGlnSirPheLeuLeuLysSer]IeuGluGlnValArgLysIliClnClyCsp ClyClaCllL,luClnGluLysLeu<ΤjsAla^rCer^,CyrLysLeuGysKisrroClulIuLeu ValLluyeuClyHiseerLeuGlyIleProTłepSlaProLeuSleSlrGyyPeoeloCln GlaLluClIϊLlu.caaGly(GjsLeuSerGlylLeuHisSerGlyLluPreLuuTyrClnlly LiuLiuClnAlayiuGluClylliSie (SEQ ID No: 195 5 pMON15965

MutGIaAynGyySeAIluMutIllAyplIuIluIluHiyHiyLuuLysAAgProrroGIl ProyiuLiuAspProAsnCs:inieuAsnAspGluAspValSurlliLiuMutAspCAgAsn LuuCrgLeurAoAsnyuuGluSerPheValArgAlaVaaLyyAsnLeuGluAynAlaSer llylliGluAaalliLeluAogAsrLLeuGliiProCysLiurroSieClaThAAlaAlaPro eirCAgHisrrollillilleLysAlaGłyAspTrpGinllurhlAAglluLysLiuThr rhlCyrLeuValThALeuGluGlrlllaGlnGluGlnGlnTyrVaIlIuGlyGlylIyGly SerPeollyGlurroSerllyProieeSurThAiauAynhAoSeArrohroSerLyyGlu SerlisLyySurhroAynMetAlaSerAlarhelInGAgGAgAIaCIyGIyValLeuVlI AlaSieiisLiuCyneirPhejIeuGluValSer^rTsrArgValLeuCAgHiyLiuGlaGlr· rAoClyClyllyeeeAspMetAlaThrProLeuGlyProAllSerSlrLeureoClneer rheLluLeuLyySeryuuGluGlnValllrgIessIleGlnGlyAypGlyAalAllLuuGln GluLysLeuGysGllThrTyrLysLeu<ΤjsHisProGluGluLluValLl'uyluClyHis SurLiullyllirooTepAlaProL euS <no SerACssOroSrolInClaLiuClnyiuAla llyGysyluSlrlenLluHisSerGlyLeuPheLeuTyrGlnllyyluyeullnAlaLeu l luClylliSie ProGluLeuGly Pr οΤίοτΑβιιΑδρΤίοτΕθΗΐιΙΕβτιΑερνβίΑΠΑΞρ rrlClaThrThrIllTrplInlInMltlIulIuLuuClyMutAlaProGlaLluClnreo ThrlInlIyGlaMuthroAllrheAla (SEQ ID Nr: 196 5 pMON15966

MitClaCsnCysSroIliMitlliCspGluIlilliiisiisLeuLysGogrroPooCla rroLluyluAsprroGsnAsnLeuAsIl·AspGluAspValSerIllyluieetCspGegCsn yuuCAgLlurroAynLeulIuSerPheValArgAIlValyysAynLluGluGynAlaSee

ClyIllCluAlaIllLlluAogAsnLeuGlllPro(GssLlurroSlrClaThrClaClαPeo eueAegliΞProIllIllIllLysAlaGlyAspTrpClnGlurhlCoglauLysLluτre

PhlCyrLeuValChoLluGluGlrl·llaGlnGluGlnCln^,CyrValClulIylIyllyCly

SerProGłyGluhAoSerGłyProIleSerThAiauAsnhroSerProrAoSeryyslIu

SioiisyysSioPooGsnMitClaMetAlarooAlaLeullnreoGhoClnClyClaMit rroGlarheAlaSeoGlarhiGlnirgiCrgAlaGlyGlyVaiyeuValAlaSieiiyLuu

184 424

113

AlnSerOheUuuUluVαlrerCyr1rgVllUebCogHisUubClaAlnOrzAlyAlyAly SerCspMetClαChrPrzUeuAlyOroCllSeorerLeuProuenrerPheeeuLeuLys rurUeuAluUlnVllCggLysIleAlnAlyCsoAlyAlaAla.LuuAlnAluLysLeuCys ClaChrCyrLysLeuTysHisOrzUlbAluLebValUubLuuUlyHisSurLeuAlyllu PozCgpClaOrzLuureoSuoCysPgzSurAlnCllLeuAlnLuuClαUlyTysLeuSuo AlnLuuHisSerGlyLubOheLeuCyrAlnAlseeu]LuuGlnCeaUeuGluAlyeleSur OooAluUeuAlyOroChoUebCsoChgUeuAlGeuuCso'lαlClaCsoPheCllChrChr IeuCroAenAenMutUluAlbUeuAly (SEQ ID Nr: 197) pΜΟΝl5927

MetClαCsnTysSureleMeteleCsoUlullelleHisHisLuuUysCrgPozPozCla OroLeuUeuCsoOrzCsnCsnyeuCsnCspUluCsoVαlSuoeleLuuMetCspCrgCsn LuuAggUeuPrzCsGLeuAluSegPhuValCogCllValLysCsnUeuAluCsnClaSeo GlyeluGlbClaeluLubCggCsnLebUlnPrzTysLuuProSuoClaChoClaClaOgo rugCogHisPozelullueleLysClaUlyCsoCrpGlnGluPhuCogUlbLysLubCho PheCyrUeuVαlChoUebAluUlnClaUlnAluAlnGln^,G/rValAluAlyAlyUlyUly SuoProGlyAluPooruoAlyPrzeluSuoChrlleAsnProrugPooPooSuoyysGeb SurHiseysSεrPozCsnMetClaChoUlnAlsCllMeLPrzClaPheClαSeoClaPhe GlnCrgCggC.lαUlyAlyValLeuVαlCllSeolisUeuAlnSurPheLeuAluVαesuo CyrCrgValUebCogHiseeuC.laUlnPrzAlyAlyAlySerAsoMetClaChrProLuu UlyPgzClαSegSerLeuProAlnSerPheUeuUeuLysSerLubAluAlnValCrgLys lluUenUlyCspUlyCllClaLeuUlnGluLysUuuCysAlaThrhyoyysLubCysHis OroAluAluUeuValLebUebAlyHisSerLeuAlylluPrzCrpClaPrzLuuSerSur cysPrzSurAlnAlaLebAlnLeuCUaAlyCyseeuSeoAlnLuuHisrerAlyLubOhu LebCyrUlnUlyLuuLebAlnClαUeuAluUlyIleSerProGlbLuuAlyPozChrLuu CspChrLeuUlnLeuGsoValClaCsoPheClaChoThreleCrpAlnAlnMutUlbAlu LebAlyMecClaPozCll.UuuUlnPrz (SEQ ID No: 198) pMON 1112 .pep

Met.ClaCsnTysSuoCsnMuteleCspAlullelleTh:oHisLubLysAlnPgoOroLuu

OroLuuyuuCspPhuCsnCsnyuuCsnUlyueuCsoGenAspIeuLuuMutAspCsnCsn

LubCggArgPooCsnyuuAlbClaPhuCsnCrgCllValLysSurLeuUlnCsnClaSur

ClllleGluSereeeLubUysCsnLubLeuPozTysLeuProUuuAlaChrClaClaPoo

ChoCrgHisPrzeluHiseleUysCsoUlyCspCrpAsnGluPhe.CogCggLysLebChr

PhuCyrLuuLysChgyuuAeuCsnClaAlnCllAlGGln^ΓCsrValAluUlyUlyGlyAly

SeoProAlyAluPooSurAeyOrzlluSerChrlleAsnProSurProProSurLysUeu

SerHisUysSerOooCsnMetClαChgGlnUlyCla]eetProAelPheClaSuoClaPhu

AlnCggCogClaUlyAlyValLeuVllClaSurHisLeuGln^uoPheUeuUluVleSur

CyrCggVαlLeuCggHisLuuClαAlnPrzSerAlyGlySerGlyAlySerAlnSurPhu

LebLuuLysSerLebAlbAlnValCogLysIleAlGGlyAspGlyClaAlaLubUlnUlu

LysUuuCysCllChoCyoLysLuuCysHisPozAluGybUeuValLeuLeuAlyHisSer

LeuAlyllePrzCopcn.aPooUuuSerSerTyserzSeoUlnAlaUeuAlnLeuClαAly

TysLuuSurAlnLuuHisSurAlyUeuPheeeuTyoGlnGlyLuuUuuAlnClaLeuAlu

UlyIleSerPrzAluLubAlyOrzChrLeuCsoChgL·euGlnLuuCspValClaCsoOhu

ClaChrChrlleCgpUlnAenMutAluUluUeb1lyMetClaPgzClaLeuAlnPrz (SEQ ID Nr: 199)

114

184 424

OMON31112 .pep

MutC.llAsGCysSerAsnMetlleAspGluelueleChrHisLuuUysUlnPrzPrzLeu PooLeuLeuCspPheAs:nAsnLeuAsnGlyGluAspGlIn\spIleLebeutGlbCsnCsn LeuCrgCrgPrzCsGyebAluCllOheCsnCggCla'ValLysSerLuuUlnAsncyaSer ClalluUluSeglleLeuLysCs:IGLelbJeuPro(C/ΞLeuProLe^bglaThoClαClαOgz ChoTogHisPgzlleelelluTrgAΞpGlyAspTrpAsnGluPheArgArgLysLeuChr PheCyrLeuyysChrLeuGluAsnClaGlIlAlaGlnGyιGGsoValGluGlyGlyGlyUly SerPrzAlyUluPrcSerUlyOrzlleSerThrlluCsnP:ozSuoPooOoorurUysUlu SerHisUysSerOgzCsnMetClαChrGlnGlyClleetProAlaPhuClarurClαPhe UlnCrgCggCllAyyAlyValLeuVaUClaSegHisLeuGlnSurPhuLebUluValSeg CyrCrgValLebCrgHisLuuAlaAlnProChrPooLeuGUyP:ozAlaSurrerLeuPgz GlnSerPhuUeuLeuLysSerUeuAluAlnValCrgyyseleGlnAlyCspGlyClaCll LuuGlnUluLysLeuTysClaChrTyrUysyuuCysHisProGluUluLuuValLubyuu UlyHisregUeuAlyllePrzCroClaProLeuSuoSer(T/ΞP:ozSegGlnAlaUeuAlG LeuCllAlyTysUeuSurAlnLeuHisSerGlyLe·bPheLeu'CyrGlnUlyLuuUeuAln AelLeuUluAlyIleSerPrzAluLeuGlyProTh:oLuuAspTh.rLebAlnLeuCspVαl Cl aCspPheClaThrTho lleCrpAln1 lnMetAlbUlbLebUlyMetAl a ProCU aL eu Ulnego (SEQ ID No: 200) pMON31U4 _ pep

MuLClaTsnTysSerCsnMuteleAspGluelulluChoHis:eeu.UysAlnOozPrzUeu ProUeuUeuAspPhuCsnAsnyuuGsnGlyGluAspGUnAspIluLeuMetUluCsnGSG LuuGogAggPozCsoyeuUlubAuaheAgnAτgJA..uValUysSerLeuGenGsnClαSur ClalluAluSegeleLeu.LysCsnLelbLeuPro^ysLe^UOroLelbAlaThrClaAUaPgz ChgCggHisPo·zelueeueluArgAspGlyAsp'GgoAsnGluPheArgAogLysLeuChr PheCyrUeuUysChgLubAluAsnClαAlnAlaAlnGln^ΓCyoValGlbGlyUlyAlyAly SeoPrzAlyAluPgzSurAlyPrzIlererThgeluGsnProSerPooPoorurLysAlu ruoHisLysSerProGsnMutClaChgGlnUlyClaleutProAlaPhuGlaSeoGlaPhe UlnCggTggCllAlyAlyValLeuVαlAlarerHisLuuGlnSugPhuyubGlbVαlSeg CyrCggValLuuCogHisLeuClaAlnOroSurAlyGlySerGlyAUySuoGlnSegPhu Lu'uLubLysSegLeuAlbUlnValCogLyseleUenGeyAspGlyAeaGlaLubAlnAlu LysLubTysClaChrCyoLysUeuTysHisPooUlbUluyuuValLebLUbUlyΉisSeg LuuAlyIlePozTrpAlaProLeuSerSer:C/sProSerGlyn(laLeuGlnLuuGlαUly CysUebregAlGyebHisSerUlyLeuOhuLubCyoUUnAlyLuuLebUlGA.laLeuAlu UlyIluSeg0rzGluLeuGlyProThrLel·UgΞpThrLeuGlyG_Jelb1spValGlaCspPhe GlaChoChgeleTrpGlnGlneutGluGluLeuGly]eutAlaP:ooAelLubGlnPrz (SEQ ID No: 201) pMO^mS. pep

MutTlaCsnTysregAsn]eeteleAspGlullelleChrH.isLubLysUlnPozPrzUeu

PgoLuuLeuAspPheAsnAsnyuuCsnGlyGluAspGenAspIluLuuMut.AspCsGGsn

LuuCrgColPgzTsGUeuUluClaOheAsnAogAlaVaeLysSerLubGlrlAsnCllSeg

TlaIleAyureglleUeuLysCsnLeuLeuPgoCysLuuProLuuAlaChoClaCllOrz

ChrCggHisPrzlleHiseeuLysCspGlyAspTrpAsnGluPheAogAggLysLuuChr oheCygLeueysChrLuuAluAsnClaGlnAlaAlnAenGs:oValUlbGlyGlyAlyAly

SegPozAlyAlbOozSurAlyPrzllererThrlluGsnProSurPgoOgzSeoUysAlu

SurHisLysSegOgzCsnMetGlaChrGlnGlyAlaMutProAlaPhuGlaruoClaPhu

184 424

115

ClnAAgCrgGlaClylIyValyuuVlIClaSeeHisLuulInSlrrhuLuulIuValSlr CyrArgValLiuCrgHisyiuAIaClnPooTheProLeulIyPeoClaSieeiryiuPoo ilnSiePhiyiuyeuLyseiryiuilulln'ValArgLysIliilnilyCspGlyAlaCla yuulInCluyysyeuGysClaThrCyoLysyeuGyslisProlIuCluyeuValLluLlu ClyliseleLluClyIlePooTrpClαPeoyluSlASurGysPeoelrClnAlaylulln LluClαClyGysyluSlrClnLlulisSlrClyylurheLluTyrllnllyyluLeulln GlaLlulIuClyIllSloProlluyluClyPro'chrLuuAspTrryluClnyeuCspVaI ClaAsprhlGiaThAThrIleTApllnllnMutlluGluLuullyMutCiaPeoGlaLeu ClnPro ;SEQ ID Ne: 2025 pMON28505 caaAsnGysSeoIluMetIleAspGluIleIlllislisyuuyyslAgProProAllPro yeuLiuCspPooGsnGsnLiuA.snAsplIuAspValSeriauLuuMetGspGrgAsnyiu GAgLlurroCsnylulIuSlrrheVal.lAgGlaVleyysAsnyeulauAsnAIaSerlIy IluCluΑ.laIllLluCrgΑsnylullnPooGysLluhroSerGlaThoΑlaClaPooSlo S.AglisrroIllIllIllLys.AalGlyCspTrpGlnGluhhuGrglIuyysLeuThrrhl TyAyluValτeeLluCluCInAaalInClulInClnTyrValCIuClyllyClyGlySlo rroClylIuPooelrClyProIleSlrcroIllGsnrroSerrroProSleLysGluelo lisyysSleProAsnMltCluVlaHisPooyluProThrrroVa|yeuyluProGlaVal CspPrlSleylulIyCluTΑpLysThΑClnMltCluGluThrLysClaClnCspIllLlu lIyS-lαValτreLluLluyluGluGlyValMeŁAlaAIlGAglayCInLluClyrroτno CyyLiuSioSroyiuLiuGlyGanyiuSioClyGlnVaaGAgyruLeuLeulIyAlaLeu lanSieLuuLeullyThrIlnyuuhroProCinllyAAgThAThrAaaHisLysAsprro GsnAlaIalrhlLluelePhlGlnlisyluyeulrgGlyLysValSAgPrlyluMltyeu ValClyGIyeleThrLluGysVlaGAgCluPhlClyGlyAsnMltGlaelrProAlaPeo rAoAlaCysAspLluCAgVleyuuSlrLysLeuLluArgAspSurlisValLeuHisSeo GogLiuSerllnCysPro (SEQ ID No: 2035 pMON28506 cyaGsnCysSiollrMitilrAspGy.ullilliHisH.isyiuLysGegPOoPooi.yaPo-o LeuLiuAspProCsnAsnLiuAsnA.spCluGspVaasirIIeLiuMetGspGAgAsnyiu GrgLeurroGsnLiuCluSiArhuValCrgGlaValLysGsnyiuGauAsnAIaSirCly IlelIuAIaIleLeuCrgAsnyeuGInrroGysLluhAoSerAelThrAlaAIarroSer lAgIisrAollillelluLysAaaiłyCspTrpiInGaurhuArgGauLysLuuThrPhi T^^rLeuValThryeulluClnAIaClnCluClnClnTyAVaIlIuGlyClyClyllyeie PeoClylauProeerGłyrroiauSiAThelliGsnrroSerrrorAoSeryysCiueeo iisLysSeoPeoGsnMicLiuroo'choPooV^,alyiuLiuPooAlaValAsprheSieLia llyGluTopLysThrGlnMetiaulluChr LysAlaGanAspIllLeullyCllVllThA LeuLeuLeul IullyValMi tAlaAlaArgllyi Iny eul lyPooThoCy sLeuS ir S er L luLeuGlyl lnLeuSiri lyiInValCrgLeiuii iuL rui lyAlaLeul InSerL euLeu IłyThAGanLeurrorrolInGeyGAgThrThrAlaHiyLysAsphroGsnClallePhi LiuSierhilInIisLiuLiuAogiIyyysValAegrhiyiuMitLeuVaIilyllySio ThrLeuCysValArgGlurhuieylayCsnMetAlaSuAProAIarrorroGllGysGsp yeuCAgVllLlueerLysLluyuuArgCspeerllsVaaLuulisSerGegLeuSlriIn GysPeoiluVallisPro (SEQ ID No: 204 5 pMON28503 claCsnCysSielliMiclInAspiaullelaeHisIiyLuuyysArgPeoProClaPeo

116

184 424

LuuyuuAspPgzCsnAsnLeuAsnAspGluCspValSureluLuueetAspAggGsnLuu argLeuPozCsneeuAluSerPhuVllArgClαValLysCsnLeuAlu?χSnAlaSerGly eluGlbAlaeluUe^UAg3AsrGSeuGlnPre(TysLeuProSuoAlaThrAllAllPozrug CrgHisPgoeeelleeluLysClaUeyGspCopuenUlbPheAogAluyysyuuChoohe CyrLeuValChoee’b1ϊ'dGl:rLalaGlnUluAlnAlnCyΌVllUlu1lyAlyUlyAlsSuo OgoAlyGluPozSeϊ0clyProIlerugChoeeuCsnOgoruoOgoPooSuoLysGlurur HisLysSurPgoAsIMίutValLubIJUuPrzAlaValCspPheSereeuAlyGlu^rFrpLys ChgAln]eetAluAlu^,hh:oLysAlaAenAspeluUeuUeyGllVαechgLebyuuLeuGlu AyyValleutAlaAlίagrgGlyGlnLebGlyPrzTłb:oGssLeuSerSerLeuLubAlyUln eeureoUlyAlnValArgLebLubLubUlyClaUeuUlnSegLubUeuAlyChgAlnyeu PgzOgoUlnAlyar^glhr^,jGhoAlaHisLysAspOgoAsGAlaeleOheLeureoPheGln HisLubyubCggAlyLysValArgPhuLubMutLeuVllGlyGlySegThoLubTysVαl TogAlbPheAlyAlyAsIGeetAlaSugPrzAlaProPro.aeaCysCspLuuGogValyuu SereysyeuUeuTrgAspSerHisValLebHisSerAggUeuSeoAlnCysPooAluVal HisegoLeuOgzChgPrz (SEQ ID No: 205)

OMONl8508

ClαAΞnCysSuglleMetlleAspGlbeeeeleHisHisUeuLysCrgPozOozClαPoz LuuUebAsoPgzCsnAsnLeuAsnAspGluAspValSuoeluLuueutAspGggCsnyuu TggeeuPrzCsneeuGe^ruoPhuValCggClaValLysGsnyeuAluCsnAlaSegAly IleGlbAlalleee^baogAsrϊLebGlnProC/sLebPrzSerAlaThrAlaAeαOozreg CogHisPgzeleIleeeuUysAelGlyCspCgpUlnGebPhuAogAluLysLuuChrOhe CyreubValChgeeuAlbAenAeaGenUluAlnAlnCyoVaeAluAlyAlyGeyAlySug PrzGlyUluPrzre:03lyPraIluSuoChoeleAsnPozSerPrzerzSerLysGluSug HiseysregOozTSGMutClaVaeAsoPhuSegLebGlyUluCopLysChrGUG.eίetGeu AluChoLysCllAlnAsplleLubGeyClaValChrLubLebLeuAluAlyValMetAlα ClaCogGlyGenLeuGlyPra'ChrCysLeuSerSurLubyebUlyUlnLebruoUlyUln ValCrgLuuLuuUeuAlyAlaLubUlnSeoLebLeuGlyChoUlnLeuProPozAlnGey CogChoChrGllHisLysAspOroGsnAlaelePheLubSurOheAlnHisLubLeuArg AlyLysValCggPheLebϊeetLuuVleulyAlySerThgLeuCysValArgGlbPhuUly AlyCsnMetCllrerP:ozAlαOozOooClaCysAspLuuAogVaeLeuSeryysLeuLuu TrgCspreoHisValLubHisrugCrgLuuSeoUlG.CysPgzUluVαlHisOgzLeuPgz ChgPooValLeuUeuOgz (SEQ ID No: 206) pMON28509

ClaGsriCysSegIleMeteluAsoUebeleIleHisHisUeuLysAogPrzOooClaPoz LeuLuuAspOozCSIϋa3IGLe^basnAspGluAspValSuglluLuuMetAspAggCsnyuu TggLubOgoGsnLeuGluSerPhuVlecrgGeaValLysCsnLubGeuAsnAelreoGly lleGlbGlaeleeeblogASIGeubGlnPozCysLuuOgzreoAlaChrCllAlaPgzSug CrgHisPgoelellueluLysAllGlyAspCrpUlnGUbPhuAggUluyysyubChoOhu CygLebValChgeeuGluGl:GAeaUenUlbAlnAlnTygValGlbGlyUlyGlyUlySeg PgzGlyGebPooSe]0GlyProIlurugThglluAsnOgoSeoPooPozSugLysUlbrur HisLysrurPrzCsGMetAspOhurugLuuUlyGluTrpeysChgUlneutGlbUlbChr LysGelUenAsoIleLuuGlyAeaValChoLuuLeuLubAlbGlyValMutAlaGlaCog UlyAlnLeuAiyOgzThrCysLuuruoSerUeuUebGlyAlnLubSegUlyUiGlValCrg UeuUubLuuUlyClleeuGlnSurLubLuuAlyThrGenUebOgoPooGinG lyCogChg ChgClaHisLysAspPraAsnAeaelePheUeuSerPhuAlnHisUeuLeuGrgAlyLys VαlTggPhuLubeetLuuValUlyUlySuoChoLuuCysVaeGggAluPhuGlyAlyAsn eetClarurPrzTlaProProAea<GssGspLeuArgVllLubruoLysLuuyubCrgCsp SegHisVaeLuuHisSerArgLuuruoUlnCysPraGlbVaeHisPooLuuPooChrPoo

184 424

117 aaleeveeuProTlaall (SEQ DD Nr: 207) pMOr2851O

TlaTssTyHrerlleMuGDluTHpUlullulleHisHisLeuUys.CrgProProTlarro eevUuvTHpProAsnTHneuvAHsTspCluAspVaereGlleeeveuGAspArgTssιeuu AGgUuuPooAsnUuuCUuSeGPhuValArgAlaValLysAsnLeuGluAsinilaeurUUy DluGluAlaDiuUuuArgAsnLeuGlnProCAsLeuProSerAlaThrAlaAlaPGoeeG TrgHisProDiulleDluLyHTlaAlrTspTrpGlnU|vrhuAGgGluLysjeeuThGrhu TyreuuValτrLGeeuCluGiSLTlaUlnGluGlnGlnTyrValUluGlyGlyGlyUl:Sur ProUl:UlvPGoSuGClyPGOlluSurThrlluAHsPGoSerProProSuGU:sUlvSuG Hise:seuGPGoTsnMutGl:UlvTGpersThrGlriMeGGluGlvThrLysAlaUlnTsp llueuvAl:T.laValChrUuvUuuUuuUluAiyVal]euGAlaAlaCrgGlyGlseuvUl: ProThrArpUuveurSuGUuveuvAl:UlneuuSerGlyGlnValArgLeuLuvUeuU ly TlaeeuUinSereeueuvUl:ChrUlnUuvProProGlnGlyArgThrThrAlaHisU:s THpProTsnAlaDluPheLeuSerPh.eGlIS^iεLeuLe'^UAGgGlyLysValArgrhueev MuGeuuVaiUl:AlrSuGThreeuArsValTGgGluPhuGlyGlyAsIStetAlaeuGrro AlaPGoPooC^laCs^rsnspUuuTrgValUeuSur;^;;sseeuUu^TrgnspSu:^^nsValUeu HisSeGTG'geeuSuGuUnc'yHPGoUluValHnsP:^xjLeuProThrP:^-o;Vil]eeuUuuPro AlaValTspPheSurUuu (SEQ DD Nr: 208)

ΡΜΟΝ28511

AlaTssAsHeurliuMuGlluTspAlulluDiuHiHHnsLeueyHArgProProTlaPGo eeueuuTsprroTsnTsneeuTsnTspGlvTspValeerlluUeveeGAspArg.Tsseeu TGgeevPGoTHseuuUlururPheValTrgTiaVaeLγsAsnLeuGluAsnAlaSuGUl: llrAluTlaDlrUuuirgAsnLuuGlnProtysLeu ProSerAlaThrAl aAlaProSer AGgHnHrGolluDluDluUysTlaUl:TspTrpUlnGiurhuTGgGluLysLuuAhGrhu T:reeuVaiTtlreeuCluUlsTlaUlnUluGenGlnTyrValGluGlyGlyGlyUl:ruG PGoUl:AlvProrerUlyPGOllererChrliuAsnPGoSeGProProSerLysUlurur HnseysruGPGoTsnMuGUl:ProThGTrseuuSerSurLe'uLuuGlyGl]sLuvrerGly Ulsaal.TGgeeuUuueuvUlrTiaUuuUlnrurLeveuvGlyThrGlnLeuProPGoGin Ul:TGgThGAhr:‘AiaHnsU:sTHpPGoTsnTiallurhuUuvSuGPheUlnHnsUuveuv TGgGlye:HValTrgPreeuueίeGUeuValCiyGlyee:GyrrLeuAysValArgAivPhu Gl:Ui:TsnMuGTeaSuGPGoTiaPGoProTiaAIHAśpLeuAGgValLuuSUGU:HUuu eevTrgTspSerHnsaaleuuHisruGCrgeuuSe:GGlnArsProGluValHiHrGoeuu ProChGrroValeeveuuProTlaValTspPhuSureuuGlyUluTrpLysThrGlnMeG UlvGlvAhGL·ysTlaClsAsplleeuuUlyTlaVaiAhGUeueuueevUlvAi:VaiMuG TcuaAlaTrgGlyGlneuu (SEQ DD Nr: 209)

PMON28512

TlaTssArHeurlluetetDluTHpUlullulluHisHiHeeuLysArgrroPGoTlaPro euueuvTspPGoTHnTsnUeuTHsT.spUluTspVaUSUGDluUeuMeGAspArgTHsUuu ArgUeurrol^s^l_JeuUlururPhuValTGgTlaValL:ssAsnUuuGUuTs]nnlaeerUly DlrGliuTlaDluUeuTrgAsnLeuGinPGOtysŁeuProSerAlaThrAliaAlaProSeG TrgHisProllelluDieLysAlaGlyTspT tgpG 1 nGlu Ph eArgGluLy sLruThrhhe T2/reuvaalτhGl,evUUvGlnτlaGlsiclvGlsClsA^^/GaalGlvCe^·^|Gyy(^7ly7CUrreG PGoUlyAluPGoeerCUyProllrreGThrlleAsnrroruGPGoProSurLysAlueur HnseyHeeGPrc>TssMutGl:ThGGlneuvProProUlsClyTrgChrThrAlaHiseys TspProTsnAlallePheLeuSerPheGlnHisLeuLeuArgGlyLysValArgPheUru MeteuvValGlyUlrSurThreuuCrsaalTrgGluPheGlyGlyAsnϊtut;AlarerPro

118

184 424 aii_ar_OSp_gsAiaCC/ΞP.5g)Geel.AGgHlllLeuSerLy sLeu.LeuArcgSipSrrHssaalL_ru HsiSl₀GrgLeuSerGleGGGProOllValHisProLeuProThrProValLruLr_Ur₀c GiaaliGiGPelrrrLeuGlyGlu^,ropUysThrlInMetCiuTiuThoLGsalaClnaPG lIeLluGiyAlaValThrOeuI.ιeuUeuGlu (3 C_nVolMe et ta laAlaArgGlyGInLeuGir rooThrCysLeuSerSeG0LIU_JeuGlyGlLnJeuSerGlyGlnValArgUeuUeuUeuGlG llaLeuCinSroLIuUru (SEQ ID No: 210)

GMON28513 liaGsGAGsrlglirMltlieAspCl'ullellrHSsHSiLruLysaogrosrosG_iaroo LruLIuGΞpProAsrGl;nneIUGnAΞpGllUGspValSerIleLeιGertAsGaoHS..snUru loHelu0osAsnLeuGluUeePheVal·eG7gAlaValLUGsAsnLeuGiuApGalaSeoGly lirTiuaiaIilLG^.UGogAsnLeuGlnP:ooιCysLeuPrsSlrAlaTholIaalaPrsrrr GoHHisPgslllIlrIirLysAlaGnyAspTopGl:GGluPhrArgTluLysLruThrPel TGoLlUlalτerLluGluGlIGSlaGanTluGlGGaGTGrlaiCluTl·GTlGTlyTiGrer rosCiyllu0roSerGlyProIleSer'PerlirAsnhrsrlrProPooSeoUGiCiurlr HSieGsSlo0roAsIG4etGlyArgTThgΓhrAlaHiΞLysAspProAs]GGlalIl0hrUru rroPhrGnGSisLeIG_JeIUAgGlyLysVallG7gPheLe·ιUeetLeuVaIGaGGIyreoP'hr UruCysaaiArgGlu Ph iIIiG lyAsrGiet Ala S erProAl aProProAlaAriliGUru GoglalLlurerLysLeuLeIUGrgAspSerHisValLeuHisSerAogLeurroTlGGGi rrslluValHisProLeuUprTCrProValL·elUeeJProAlaValAipPhrrrrLruGlv CluCopLysThrGlrG4etGluGluThrLyΞAlaGlrGAΞpIleLeuGlyGlalaiChoUru UeuLeuTiuciyVlyeetAlaAlaArHGΊyCInUeuGlGPooProGypUGureoSerUeu UeuCiyClnLru S er oyyGlnGaaAsgLeuLeuL euG lyAlaLeuGinSeoUeuLruTiy TholinUlu0gsrosCln (SEQ ID No: 211) pMONl8524 alaasnΓGsSlolieMrtlIeappGIulIelIrHipHSpLeuLGilogroorosGlahro UeuUrulsprroAsIGa3nLeIGG3IGSspGluAspVaerrolIeUeueetaPGlogGsGUru lrgLluPrsAi]GeeuGluSerPheVal.AogAlaValLysAsnLeuGluAPGalaSeoTlG lleliuAlalllLeιuArgAsnLeuGlnPro^ysLeuProSrrAlaTholIaalaPrsrrr GoHHSprosllrlIrlleUypalaGlyaPGToGGaGGlurheaoHGluLGPUeuThrhhe TGoeeulalτerLeuGluGllGSlaGlnGluGlnGlnTyrValGl·uTlyT 1(11(11(^0 rosClGCiuProSerGlyProIleSer^,PerllelsGrrsrrrrosrrsrerLGsClurro HSsLyirlrProAsIneelAlaHisLysAspProASIGSlaIlePheLeureorreClnHSi eruLru.GoHGiyLysVallG7gPheLe^lιUeet;LeuValGlyGlySeoThoLeuGGsaalaog CIureeTlyGlyAsInlet:a.aSerProAlaProProAla<GGSAspLeuAoHValUeurro LGsLIuLruArgAspSerHisValLeuHisSer.ISrgLeuSerGlnCypPooGluaalS[ii PosLruProT]erProVlleeuUeuProAlaValAspPheSerLeuGiyTluPoGLGiTho TlGMetTIuTlu^,rhrLy sPlCLaG liGSspIleLeuGlyAlaValThoLruUeuUeuCluTiG lalMrtalaAiaArgGlyGlIGeeuGly:hΓoThr<CssLeuSerSeoUeuLeuGlGClGUeu SeoliyClnValArgLeuLeIUJeuGlyAlaLeuGlnSerLeuLeuGlyThoTaGLruros PoolinClGGogτeoτeo (SEQ ID No: 212)

GMON28515

GlaGsGCGsSroIiIIeetIleAipGluIlrIlrHisHSsLeuUyiGogPoorosGiaroo erueIuAspProAsΓGG;nLe^uAsnAΞpGluAspValrlolieLeu.ertasGSogGinUru

Gogelu0osAinLeuGluSerPheVallSogAlaValLysAinLruTiuGiGalaSroTiv

IllliuGlallrLGGGrgAsnLeuGlnProCysLeuroorerAlaThoGiaala0osSlO

GoHHSiPoslllllrlllLypalaClyaspToGClGTlurheGogCluLGiUruThorel

184 424

119

GrrLupVαlτrpLeuUlu^lnAllUanUlpUanUlnGrIaαlUluTlrUlrTlyUlySu; O;oTlyTluhroSurUlrO;olleSerTrrlleCsnP;oSe;ProProSu;LysTluSei HisLrsSurPΑoΑsnMutCsoProAsnClallePruLeuSurPruTlnHisLupUupe;g TlrLynValApgpruLeueUitUupValTlrTaySeAGhrLeuTynVaaArgy|ppruTly UlrAsneίutAll.SerO;oAlαOroProAlαTysCsoUupCrgVaaLeuSurLynLeuLup CrgAnpSurHisaaaLupHisSerAAgLeueurUlnCysOroGluValHisPrpLuuh;o τrIOroaαlLepLeuOroAlla^ralAspOruSerUuuUlrUluGroUrsτr;UlnMutTlp UUpGrIUrnAlαTe.Γerp;oUluUupUlyAllVllTrrLupUuuLeuTUpUurVαaMetAll ClaAAgUlyUlnLuuUlyO;oTriyrsUeuSerSurLeuLuuTlyUlnLuuSurUUrUln aαlAAgLuuLuuLuuUlrClαLupUanSurLuuLeuTlrCr;ylnLuuOIoOroUlnTlr AhghhoGhrAlaHisUys (SEQ lD Nr: 213) pMON^T2E^ 5^ 6

ClαAnnyrseuhlluMetlle.AspUlpllelleHisHisUuuLys.grgPopPAPAlaPro UeuUeuCspOooCsnCsnUeuAsnAsoUluCsoaαlSehlluLuuMutCsoAAgCsnUup CogUepOhoCsnUepylpSuIPruValCogAlaaalUrsCsnLepUluCsnAlaSuhUlr lleyluAlaaleUuuCrgAsnUuuTlnOloeysUuuPooSerAlahhhAlacaahroeuh CrgHisPholaellulleUysΑlaτayAspTopUlnTluPruΑΑgTluyysUuphhohhe TrIUeuaαlThhUepUlpUlnAlaUlnUluUlnUlnhyIaαlTlpUlrUlyUlyUlySuI OooTlyUluOroSuoTlrOhPlluSuhTrolluAsnPIpSurPooPooSurUrsUluSuI HinUrsSuoProAnnMetAlalluPhrUeuSuoOhrTlnHisLeuLuuAhgTlrLrsVal cogρheUepMetUeρ ll'iluUrUUr'SerTe.hUuuCysValg.IgUlupreUe.rUlyAsrA'ίut ClαeerPhoAlαProPooC.lαCysCsoUuuArgVαlUeuSuoUysUruUeuCpgAsoSeI HiΞValLepHisSuoeA·gUuuSerUlnCrsPAoUluValHisPooUuuPhoTrpProVal UeuyuuPooAlaValAΞoPhuSehUeuUlrUluThoLrsTrhUlnMutUluUluThoUrs AlaUlnc-splUuLu:pGn.yrUll^,alThoUupUuuUuuTlpUlyValMutCulClacogUe.r TlnyuuUlrF-oThoCysUeuSuhSuhUuuUeuUlrylnLuuSerTlrUlnaaaArgUep UeuLuuTirAlaUruUinSuhUuuUuuUIrThoUinLeuPioPhoTlnUłyCpgThrTri AaaHinUrnAsoProAsn (SEQ lD Ni: 210) pMON2 8519

AlaAnnCynSuollUMutlleAnpTapllelauHinHinUupLysAAgPhPPAPAlaPho UuuLeuAspPhoAnnAsnLeuAsnAspUlpAsoaaleeolluUupMutAsoAAgAsnLup AAgyuuhooAsnUuuyauSuhhruVaaArgAaaVaaLysAsnLuuUluAsnAaaSuoTlr lluyauAlalluLuuAogAsnLuuyinOroCysLeuhooSurAlaThoAlaAaaProSul ArgHis Poo ilullr lluLysAl αTlrAsoTPOU InTluPruAogUluUr sLuuThoPru TrrUeuValτroUruTlpUlnAlaUlnUlpUlnUln'hrhallUluUlyUlrUlrUlySuI PhoTlyUluPhoSupiTlyi^rolleSerhrriauAsnpooSuoi^ooPAoSuhUrnUluSui HisLrneurhroAsnMutyauValHisProLuuProThrPooValyupUeuhAPAlaVal AsohhuSeoUepUlrTlpTrpIynThrUlnMutUluTlpTrrUrsAlaUlnAnolluUup UlyClαaalτrhUuuUeuUeuUluUlyaαlMutAlαAlαeIgUlyUanLuuUlyPooTrh yrsUuuSeoSehUuuyeuylrUlnLeuSeATlyTlriaalAhgUuuUuuUuuUlyAlaUup UlneurUeuUuuTlyhhhTlnLeuOooPIoUlnTlyAhgτrrTrhAlailsUrsAsoPhO AsnAlαlleOheUuuSuoPreTlnHisLeuLeuArgGlyLysValAogOruUeuMetUup allTlyUlySeoThoUuu(ysaalAAgUluPhuUlyAsnMutAlaSehOIoAlaPooPIO AlαCrsAsoUeuAogValUuuSehUysUuuUuuAhgAspSuhHisaalUupiisSuhAhg UtuSerUlnCrsPro (SEQ lD Ni: 215) pMON28520

120

184 424

Cl_ac_SnGysSlrIllMltIllCspGluIllIllHlSlisLluLys.CogProrroAa_ap_0o yeuLiuAsprroAsnAsnLiuAsnAspGluAspValSieIliLuuMet;AspArgAynye_u C_Agy_lUPeoAsnLeuGl'uSerPheValycAAlaValLysAsnLeuGluAs]lAllS_UAlyc Il_liluAlaIllLluArgAsIϊLeuGlnPpeCG^ΛsLeuProSerAl_aτłerAlaAlar_AoS_ee AegIisrroiaellelleyysAlaGłyAspTiepGanGluPheArgGl uLysLeuTh_rrh_l TyeyiuValChrLiuilullnAlaGlnGluGlnianTyrVaIlluilyllyllyi lySee PeoiłyilurroeurllyreolliSioThrIleAsnreoSirProProSerLyslIuSie IisyyseirProAsrUetLeuProThrPrroZalLeuLeuProAlaYalAsprheSerLiu ilyiluTrpLysThrGlrleetGluGluThrLyΞAlaGl]nlspIleLeuGlyAllValThe LeuLiuLiuGluGlyVa iM&tAlaAlaAseGlyGlnL euG lyProThręyyLiuSioSir LiuLiullyGlnLuuSerGlyGlnyallcgLeuLUjeuGlyAlaLeuGanSurLuuyeu ilycrAilnLluPeoProiInllycrg'TerThrAlaHisLysAΞpProAsnAlaIlerhl ΙιΉιοΡΠΐ1η]ϋ2Β6ΐι]ΙθαΑΐφΗη1ι·ιν3 PL l^i^]gl^ł^e^ty;eu^€i tt LenV alilyllySie crrLluGysValArgGluPheGlyAssnleIAlaSerProAlaProProAlaGysAspLlu CrgVaILluSerLysLeuLeuArgAspSerHisValLeuHisSerArgLuuSuAlnnGys ProlluValIisPeo (SEQ ID No: 2165 pMON48542

ClaAsnGysSleIleMltIleCspl1uIllIllHislisLluLysAegProrroA1aPeo LeuyiulspProAsnAsnyeuCs]nispGluAspValSieIliyiuMetAspCAgAsnLiu lAgLeuProAsnLeuGluSerPheVa]nArASaValLysAssl.ιeuGllLAsnAalSeAl1y Illi1uClaIllyluArgAΞnLeuGlnPreCG/sLeuProSerAlaTłrrAllAalrroSlo CegIisProIliIliIliLysAlaGlyAspT:rpGlnGluPheArgGlu±ecsLeuThrrhi TyeLeuVlnτhrLeuGluGlnAlaGlnGluGlnGlnlCyValGluGlyGlyGlyGlySee ProilyilurAoSurlayPAolliSeeThrIleAsnrroSerrrorAoSuryyyGluSie ϊisLysSlrProAsnleetValLεuL·euPpeAlaValAsp?pΊeSerL·euGlyl1uTrpyys; ThrilnMet.GluGluThrLysAlaGlmpIleLeuGlyAlayalThrLeuLuuyiuGlu l1yVaaMetAlaAlaArglIylanLluGlyProTleo^ysLeuSerSerL·uuLuuGlyGln yiueirllyGlnVal.AogLeuLeuLeuGiyAlaLeuGliiSerLeuLeuGlyThAGlnyiu PeorroilnIlyArgThrThrAlaIisiLjsAspProAsnClallePhiLeuSerrhelln HisLi’uyruAG'gGlyLysyValArgPheLeuMePLeuValGlyGlySerThoyiuCysVal Argl1uPreGlyAs]neetAlaSerProAlaProProAla(G/sAspLeluAogVllLeuSlo yysyluylulrgAspSerHisValLeuHisSer..]lrgI_JeuSerGln(GjsProGluVaaHis reoLiureoThrPro ;SEQ ID Ne: 227) pMON28522 l1aCsnGyselrIau]eltιalCspi1uIllIlelislisLluLysArgProrroClaPeo

LluyluCsprroAsnAsnLuuAsnAspGluAΞpVlleerIleLluMltAspArgAsnLlu

CrgyeuPeoAsnLeuGluSerPheValyA‘gAlaValLysAssn_JeuGluAsnAlaSioily

IlllIuClaIllLuuArgAynyeuGlnPro(Τ'sLeuProSerAlaThrAaaAIahAoSle

CAglisPool1lIllIllLysAlai1yAspTrpGlnGluPheArgGl<ueysLl'uThrrrl

TyryluVl1'Thr]IeuGluGlϊl·AlaGlnGlyGlnGln^rlCjrValGluGlyGlyl1yl1yelo

PeOiIyl1uPeoelrl1yProIlleloCrrIleAsnProSlrProProelryysl1uSlo lisLysSlrProAsϊiMetAlaValAspPheSerLeuGlyGluT_ApLysThrl1nMltl1u lluChrLysAlaGlinispIleLeuGlyAlnValThrLeuLeuLeuGiuGlyValMitAla

ClaCrgi1yGlnLeuGlyProTłh0Τ'sS.euSerSerLeuLeuGlyGlIl]IeuSerl1yl1n

ValCrgyluLluLeuGlyAlaLeuGlnSeeLeuLeuGlyTłhAllIϊL·euProrrol1ni1y

CrgThrτrrAlalisLysAyprroCsnAlaIlerheLluSlrPhulInliyyuuyeuAAg i1yLysValCrgPheLluMutLluVa1i1ylaySurτrALeuGysValAAglIurhul1y

CsnMlt.clαSlePeoClarAoProCllGysCspLeuCogVαlLluel:rLyyLluLeuCog

184 424

121

GsoSeoHisVllLeuHisregGggUeurerGln(CssPrzUluVllHisPgoLuuProChg

PrzValLebyeuPgz (SEQ ID No: 218) pMONl85l3

ClaGsnCysSugeleMeteluGspAlulleeleHisHisLeuLysArgPgoPgoAlaPgz eeuUebAspPgzCsnCsnUebGsnGspAluAspValSerlleUebeetAspAogGsnLeu CggUuuPgzGsnLeuAlureoOheVαlAogAllValLysCsnLeuAluAsnAearurUly eleGluClaIluLeuAggTsnyu'bUlnProeysLuuPozSugClαThrAlaAeaPooSeg TrgHisProlleIyeeleUysClαAlyAspTrpGlnUlbPheCggAlbUysLubChrPhe CyrUubValChgLeuAluAlnC.laUlnAluGln1lnCyrValAluAlyGlyGeyAlySeg OrzUlyGluPrzSerGlyPooeleSeoChreleCsnPrzSerProPrzSerLysUluSer HisLysrugOooCsrϊMetGspPheSurLeuylyUlu.CgpLysChoAlGMetGlbGeuChr eysClaGlnGsoeleLeuAlyAlaValChrLuuLuuLuuUluUlyValίeetAeaAllA.gg ΑlyUlnLeuΑlyPrzChoTysLuuSuoSerLubeuuUlyΑlneebSegΑlyUlnValTgg Luue·euLeuAlyTlaUeuAlnrugLeueeuGlyThrGlnLuuPgzOozAlnUlyCogChg ChgClaHisUysAspOrzCsnAlαeleOheLeuSerPhuGlnHisLebeeuA.rgGlyUyΞ ValCggPhuUeueIetUeuVaeGlyΑlySeoChoeubCysValCggΑlbPhuUlyCsnMet ClαSurOrzTlaPgzPrzClaTysGsoeeuAogVαlLuuSugLysUuuUe·bAggAspreg HisValLeuHisSurCggUebreguenTysOroAluVaeHisoozeeuOgoChgPozVal LeuLubPooTlaVal (SEQ ID No: 219) pMON28524

ClaGsnCysSuoeleMuteleAspGeblleeluHisHisLuuLysCrgOroPgoGlaOro LuuLubg.soPgzCsnGsnLubAsnAspAluAspVaesureleLe'beetΆspAggGsnyeu CogUuuOooCsnUeuUluSegOheValAogAlaValLyΞCsnLeuAluAsnAlaSurAly eluGluAlleluLuuArgAsnLuuUenPro<GssLeuProSugAlaThrAlaAllPgoSeg CogHisOroeluelueluLysAlaGeyAspTopGenGlbPheAggUlbLysyubChoOhte CyoLubValChoLeuAluAenAlaAenAluGlnAlnCyrValGlbAlyAlyGlyUlySeg PozAeyGluOozSegUlyProeeuSurChreeuGsnPozSurPgzPgzSeoLysAluSeg HisLysSuoOozCsGeetueyGluCgpLysChoAlrieutAluUluChoLysAlaUlnGso lleLuuGlyGlαValChrLebyuuLuuAluGeyValMutTlaT.lαAogAlyGenyeuUly PrzChoCysLebSurSerLubyuuAlyAlnLubSuoGlyAenVllCggLuuLubLuuUly ceaLuuGlnreoUeuyeuUlyChgAlnLeuOgoPooUlnAlyTogChoChrAelHisLys CspPgzCsnGlallePheLeuSuoPheGlIGF^iΞLeuLeuAogAUsLysVaeAggPheLeb MutLeuValGlyAlySerChgyeuCysVαlCrgAluOhuAlyCsGMetClaruoPozCll OrzPooClaCysTspUeb.aggValLuuSegyysUebye'uArgCsoSegHisVllLuuHis SeoGogLeurerUlnTysProUlbValHisOgoLebProChgPgzValUeuyubOgzCll VllGspPhururLuu (SEQ ID No: 220)

OMONl8525

GlαAsnTysSeglleMetlluAsoAlulleeleHisHisUuuUysAggPgzOgoClαPrz

LeuLubT.soOrzTsnAsnUebGsnCsoAluGspValSeolleUebeetCspGggCsnLeu

CggLubOroCsnLuuAluSurOhuValAggGlaValUysTsne·ebUluAsnAllregUly lleGluGlaeleUeuAggAsnLuuUlnProCysLeuPgorugClaThgAlaAUlPozSeg

CggHisPgzllelleIleUysGlaAlyTspTrpAlnUluOheCggAluLysLubChgPhe

CygLebValChreuuAlbAlnAlaAlnAluUlnAlnCyoValAluAlyAlyGeyUlySeg

PozAlyGluOozrerAyyPgoeluSegChreluGsnPgzSegPgzPgoSerLysUeuSeg

HisLysregOozCsGeetAlyOgoChoCysLeuSerSeoUeuLeuAlyAlnLubSurUly

UlnVllTogLeuLuuUeuGlyAlaUeuAenreoLubLebAlyChrUlnUeuOgoOooAen

122

184 424

AlAGrHC^rce»·AlćH^isLysAshOzΌAsGn.lnlMeFlleL·<suSeoPheGUnHisUeGUeG aoHPheLeGMetUeGai1ClAclAeeoGr»Lu’GCAρ'aiU(rHAe_Gp^>h_M

CUyAP_SM_eLAliSuoPozAeaPozPooAlaTASGspUUGArHVilLLGEMOLAPLM_GLM_G (_OgA_PsE_eOHipailLMGHSsSeoAoHLuGEuoClnTyphooAlGailHSsPrzL_UGp_Oz Ch_Op_rZv_aeueGUMGPozAeaaalAspPhuEeoLeGAlyAlGrosLAPThrClnM_UtCl_G ClGThoLypAlaAlnAppeeLUeGAly(laVa1ChoUeGUuGLLG(lGAlAValMMtAli (1iAoHClyGlnUuG (EEQ ID No: 221) pMON28526

GliApnCypSuoSlM!euteeeAssAlGeleeluHipHSsUuGLysnoHPozPrzA1iPrz LMGUuGAnpPrz(sn.GSΊsLLGGsnAssChIAspValSuoe1eLuGMLtAspAoHGpnLeG GrgLMGPozApnLMGCeGELoPhMValGrg(1iVaeuypApnUuG(lG(pnAliSuoAlA l1eAluAeieleUuuAogAnn.LLGAenPozTypLLGPozSeoAlaCho(laAliProeer GrHHSpPooeeMelMl1eLAPAeaA1y(spCosClnClGhheArHClGLypLuGChoPhu AArLMGaalGhoLMGAlGCen(.1iA1nClGAlnAlnAAoValClG(lAClAAlAA1yE_UO ProAlyGeuPozEMoGlyPrzeeeEerChreluAsnPozeuoPozPozEurLAsClGEuo HSpLAsEeoProApnMLtAlAGhrAenUuGPozPrzAenGlyAo^AhoChoGlaHSpLAP (ppPoz(pnAlaelMPheLLuSLoPhuAlnHSpLeGULGArHClALApailArHPhMLuG MutLMGVieAlAAlAeLoCh.oULGTAPVilAoHClGPheAlA(snMLt(1aSurPooAli p:ooPAZ'(1aTyP(pSLeGAoHValUuGSuoLypLLGLeIInr'HAPSEMoHssvilLuGHsp EUoGoHLeGeuoAlnTysPozAlGValHSpPrzLeGProTr₁oPoz;VilLeGLMGPozAli aaeAPsPhLeMoLLGClAAeGTosUAPThoClnMetAlGAlGrł»LAP(1iAlnGssllu LMGAlAAeiVilChrLeGLeGULGAlGClAVileίLt.GllAliArH(UAClnUuGAlAPro ChoTAsLLGSerEuoUeGULGAeyAene.UGeerclyGlnVal1^OHeLGLMGLMGAly(1l LMGClnELoUuGUuG (SEQ ID No: 222) pMON28527

AlaApnTyneeoilM!eutseMAppAeGlluileHisHSpUUGLAS(rHPozPrz(1iPrz LLGUeGAnshooApnApnUMGAnnAnpCeuAspValSMoeeLUuGMutAPsAogApnUuG (OgLLGPozAsnLMGClGeLoPhea^τalAogAliValLysG.prLeG(lG(sG.AllSuoAlA l1eClGAlieeuLMu.C:ogAnnUeGAlnPrzTypLeGPozSeo^G^laChrGlaGliPozSMO (ogHSsPozeluelMelLUAsAeaAlAAPpTopAlnAlGhhLArHClGLAPUeGThoPhe ryoUuGVaUAhoUeGAeGG enAeaAenClGClnAenCyrVaec lu( lyG lyGlyG lyUo r PrzClyAlGhooSurA1yhozeeLSLrGhoeleAnnPozSLoPozProSeoUAsAlGSeo HSsLAsSMoPoz(pnMetAeAAoHThoChoAlaHSpUysAssProGpnAlal1uPhuLMG EMopreAlnHiPLMGLeGAogAlyUypValArHPheU'LGeίetLMGVilAlyAlASuoTrr LuGΊAsaaeAOHClGPheAlAAsnMetAlaEuoProAeaPo^oPooaliTA’pAssLuuAoH ailLMGeLoUAsLUGLuGAoHAssSerHisaalLLGHiseeoArHLMGSeoAlnTAsPoo ClGaalHSshrzLLGPrzrhrProValLeuLeuProAlaVeCAspli.uEerUeGAlyAlG CosLAnChoG1nMLtAlGAlGTrrUAPAlaAlnAPseleUuGClAGliValChrUeGUUG LUGClGAeAValMLtAlaAelArgClyClnLMGClyPrzGhoTAsLMGSuoSurLeGLUG CUAClnUeGSuoClyAlnaieAoHLuGLuGUeGAlAAlaUuGClnEMrLuGUuGClyThr ClnUUGPozPooAls (SEQ ID No: 223) pMON28528

GlaGpnTAPSuollMeeteeeAppClGl1ueluHipHipUuGLAPGogPooPoz(1iPrz

LuGLMGnssPrz(pn.GpnULGAssA^ssClGAPsaaeSLo^rl^e_J^GMMt(spnrH(snUuG

GogLLGPooAsnLLGClGeerPheValArH(1aValUAPAsrUMG(lGAsn(liSerAlA lle(1uAlieluLLuArHApnUeGAlnPooTAsLuGPozeuoAlaChr(1i(1iProSer

184 424

123

AGgHisProllellelleeysAlaAlyAspCGpClnGluPheArgUluUysUeuThGPhe τyGUevVaeAhreuvUluClnTlaAinUluUlnGln^ry/rValGlvGlyGlyUlyGl:rur ProAlyCiuProSurClrProDlueurGhGlluAsnP:oorurProProSuoUyHUlvSur HisUrsSeGProTHnMutAlaHisUysTspPrIAsrsΆlallePhueeuSeGPhuGlnHns euueevTrgUl:e:sValTGgPheeuvMuteevValGlyAlyeerAhGeuuT:HValTGg CluPhuUlyTsneίuGT.UaSurProΆlaPGIPGIClaCysTspeeuTrgaaleuueere:s euueuv.TrgTspeurHisaaleuuHnsSur.TGgLeuSerGlnCysProGluValHnsrro euurGoAhrPGoVaieeveeuPGoTiaaalTspPheSerLuuGlyGluTrpUysThGUln MuGGluGiuChrUrsAlaclsTspllueuvUnsTlaValThGeeuUeueuuGluUlyaal MuGAlaAlaAGgAiyUineeuUl:ProChrGrsLeuSuGruGUuvUuuAlyAln.euvSuG GlyAlnVai.CGgeuvUuveuvAlyTlaUuuGlnSerLeueuvGlyAhGAlseuvPGorGo GinClyTrgAhGThr (SEQ DD Nr: 224)

ΡΜΟΝ28529

AlaAHsCyHeurDluMeGlluAHpAivllulluHisHisLuue·ysAGgProPGoTiaPGo eeueeuAHprGoT.ssTsneuuC.ssnHpClvTspValSeGllueuvMuGTspTGgTHneuu TrgUuvPGoTHneevUluSerPheVaiTrgTlaValLyHAsnLuvAiuTsnAlaeerUl: DluGluC.ialluUuuTrgTHrlLeuUlsPGOtysLeuProSerAlaThrAlaAlaProeuG nogHisPooDleDlulleUysAlaAlyTspTrpGlnGluPheAGgGluLysUuuAhrPhu ArreeuaalThreuuClvClnTlaUlsCluClnGl·n'tyrValGlvUlyClyClyUl:rur ?roClyUiurroeerClrProlleeerChGDluAΞnProrurPGoProSeGeysAlveur HiseyHrurPGoTHnMeGAspProTssLAlaDluPheLeuSerPheUlnKiseuueuuCrg clreysaaln.GgrhueuueIuteuuValClyClySerTłrreeuAys'aalTrgCluPhuUl: AsnMe tTlae UGPGoAiarroPGoAia7:ΉAHpeuuTGgValUuueuGUrHUuveuvlG·g TspSuGHnsVaieeuHisSeGTGgUuvSerUlnA:sProGluValHiHProeeuProAhr ProValeuuUevPGoAlaaalTspPhuSureuvCnrGlvCrpe:sAhrClnMeGUluUlu ThGeyHTlaAisLTHplleUevUl:TiaVaiThreeuLeuL·uuCluGlyVaiMuGTiaTea TrgCiyUlsιUuvUl:PrICrrAssUuuSurSeGeuuIleuClyCl]neeururCl:UlnVal AGgeuuUuvUevUi:TlaUeuCiseurUuueuuGlyThrGlnLuuProPGoUlsUl:TGg ΑΙοΑΗοΤΙιΗϊ?1:η (SEQ DD Nr: 225) pMOr2853O

TlaAsnAyseeGDluMetDleTHpUlulluDluHisHisLuuLysAGgProProAlaPGo euveuuTsprooTssTsnUuuTHs.TspClvTspValSeGIleLuu!euGAspTrgAsseuu TrgeuurGoTssLeuvUluruGPhuValTrgTlaValLysAHnLuuGluTsnAlaeuGUl: DleUlvTlailueuvTGgTHneuvUinrroCrsLeuP:oorurAiaAhGT|lAlarGoSur TogHnsPGollulleDluUysAlaUlyAspTroP-lnGluPheArgGluLysLeuAhrrhu Cyreuv'aalAhGUuvUlvAinTiaAesCiuAinClntyrValGiuAiyUlyUlyUi:euG ProClyCluPrceuGCl·rrGOliuruGChGlleAsnProSerProrGorereysClurer HisUysSuGrGoTHnMuGTlaDlurhuUuuruGPheGlnHnseeveuvTogUlye:H'aal TrgPhueuueίuGUuuaalUlyCl:SeGChGeuvAisValArgCluPheUlyAsn.MutTla SurProTlaProPGoTlaArsTspeuvTGgaaleeuSeGLysLeuLuuTrgTspSurHis ValUuvHiseur.nGgUeueeGUlsG:HPGoUluValHisPGoLuuPGoAhGrGoaaleuu euuPGoTlaVaeTHpPheeureuvUiyCluTopeysThGGlnMuGUluAluThGUysTla ClnAspDleeeuAeyAlaValChreeueuueuuGluGlyVanMetAlaAlaArgCls'Cln euvClyrroChoC:seuuSuoSeGeeveevClyGlrnleuSurClyUlnaalAGgeevUev euuCl:AlaeeuClsSureeueeuClyAhrClnLeuPrΌPooClnUlyTrgAhGAhoAla HisLysTspProTsn (SEQ DD Nr: 226) pMON23533

124

184 424

Gla1ηnCysSerlltMtt1leGspGlu1lr1leHSsHisLeuLysArgProhooAeaPoo LeuLeuGspProGsnAsnLeLIASI^AspGluAspValSrrlerLeuMetAspAogApnLru 1.ogLeuPooG.snL·euC·laSeυ0^>PrValll'r AiaValnysAlpneuGlnlΛlpnGlaero'Clr 1leGluAla1leLr^IlrgAiηHJeuUlnPpr(AsPeuPhoOerAlaT(rrAH.laPooSro GogHSpPro1le1ltIltLysAl·aGlyAspTłr?GlnGluPheArgGluLysLu'uGroPhe T/rLeuaalτrrLeuGluGlιn.1nGlnGluGlnnln^hr0'alGluGlyGlyGlyll/Sro PooClyCluPooSerGlyProIleSe:0lho1lrAsnProSerProProSerLypleuSrr HisLysSerProAsrmetGluValHiiPprOLu.PprTGhrhrValLeuL·euProAeaaal 1spPreSerLeuGlyG-ylTcpLysPGrOlnMeeGlnGluTGhOyΞAlaGlInisp1leLru GlyleaaaeτhrLellILeuLLuUlyGlyValMeUAltói^G7gGlyGlnLeuGeyPooGrr CysLeuSerSerLt'ιUl·_JeuGlnrl.nLeuSsuOlnrlnVaαll:·gLetU_JeuLeuGlyAlaLeu ClnSeoLeuLeuGlyThrGlιn_JeuPPoPpoClnGluycoTTr'ThrAlaHisLysAppPro lsn1lallrPreLeuSerPhrUlnHisPetUetUG:‘oGCn/γsValaG7gPheLeuMrtyuu aαlClyGlySeoThrLeuIA/PalnsoGluPhrrlyrlnAsnnlyGlyAΞrtieetAeaSro PooAlaProProA(LaCA/PipLeuAlrVaαneuSer0y/PeuLeιIG:gAspSeoHSpaal etulSηSeoAogLeuSeoGlnCysPoo (SEQ II No: 227) peON28534

Gla1sn.TssSer1leettIlrAspGlu1lu1luHisHisLeuLysArgProPoo1.laPro LeuLeu1spPoolpnAsnLruAsnApplluAppValeuoleuyrueutAppAogApnLuu GrgLe'uPooApnLeuGluSse0hrValll0AinValUysAsnLeuGluAΞrl·AlaSuoGly 1ltGluAla1lrLrUlrgAiπPLuUlnPro(A/PeυPPo0erAlaThrAH.laPooSeo 1oglisPoo1lrlee1ltLysAlaGlyAspTłO)GlnGlltPheC.rgGluLysLruGhrPhe TyoL ruV a l ThrL rul lull nAlallnGluClnlenG/oa allluCl/GlyGlyG/seo r ProGlyGluPooSrrGlyProIleSerTho1leAsnProSeoProProeroLypCluSer lSsLysStrProAsItfeetLLuPPoTGrrprValneυLeuPhrAlaVal AspPheSerLru ClyGluTrpLysThrGlιtfίetGlyGluTGh0e'sPA.ualιnlpIleLeuGlyAlaValτro LeuLeuLeuGiuClrVaHietAlaAlWAorGlyGlen.euGlyProThrCysLeuSroerr LruLeuGlyGlnLeuSerrlnrlyValnAgLeuLerLLuGlyAlaLeuGlnSeoLuuLuu ClyThrGlrϊL·euProProOlllnlyAlΌTGh0Ge0leHlSp.ysAspProAsnAla1lrpre LeuSerPheGlnHisLeuULuAc·oGlyrL'sPalll'rPhhUeŁIłetLeuValGlyGl/Srr ThoLeuCysValArgGluPPrUlnrlyAiPGlnrly/iηnίetAlaSerProAlaPooPro GlαCysAspLruΆrgVall_ieuSsu0ysPeuLeŁL·ŁA'0g-ipSsrHlsValL·euHspSeoArg L·euS·erClnArsProCluValHisPoo (SEQ II Nr: 228) pMON28535

GlαAsnAsserr1lueet1leAηpGlu1luIlrHisHipLruLysArgFoohooAlaPoo LeuLeuGspPooGsnAsriLetIlsrnlspGluAspValSer1leLeuertAspAogApnyeu GogL·euProGsnLeuGlιlSer0PrValy loAl.nValL·ysP.snLeuG liuAsrLAlaSrrlly IleGluAlaIlrLeWirgAiPLLt.IGlnPpoCysPeuPprSsrAlaThrGldeaPooSro’ GogHisPoo1le1le1leLysAlaGlyAspTrpGlnGluPheArgGluLysLuuGrrPhr C/rLruValThrLuuGluG-nnA.nGlnnlnGlnGCnΊhr·ValGluGlyGlyGlyll/Srr PooGlyGluPrcιSerGlyProIleSerThr1luGsnProeerPooPooeeoy/pGluSeo iSpLysSerProAsInletValnee.ueuPPoAinValylpPheSerLeuG lyGluGopLrs ThoGl.ηΜεΡσίυΟίηΤίτΟ./ΑΐηΟ lιAipZleUeuUlnAln,va InTaio LeuLeuLeullu ClyValMetAlaAHrogCurlnPeuGlnSprΊ’hr0AsPeuSerOerLeuLeuGl/Gln LeuSeoCl/GlnVanAogeeuLr^IyeuClyAlaLeuGlnSerLeuLeuGlyτroGlnLeu PooPooClnyl/GogGhoThoGlaHisLyρGspProAsnAlaelrPheŁruSuohhrlen iSηLeuLeuArgGlyLLsPalycoghrreuMetLeuValUlnrlySerThrLruC/saal

184 424

125

CogAlbPheUlyGlyCsGAlyUlyCsrlMetceαrerProAlaPrzOgoGlaCysCspLeb CrgValLuurerLysLuuUuuTggCspSeoHisValLeuHisSerTogLeurerUlnCys ProUluValHisPgzLeuPgzChgPrz (SEQ ID No: 229)

OeON28536

TlaCsoCysSeglleMetIleGspAluIleeleHlsHl sL·euL·ysCogPgzogzclaPrc UebUeuCspPrz1srAsnUeuC.snCspAlbCspVαlreolleLebeeLGspCggGsnyuu CggUuuPozGsnyeuGluregPheValCogGelValLysAsInJeuGybasnClαSurUly eluUluClaeluLuuCrgTsnLeuGlnPgo(G/sLeuPgoSerAlaThgAlaAlaPgzreg CggHisPoolleelelleLysAlaGlyAsp^rCgpGlnGlyιPheAggGluLysLe^UChrPhe CyoLebVαlChlgLeuUluAlnGlaAlnAluUlnGln(CsgValGluUUyUlyAlyGlyreg PooUlyUlbPgoregUlyProeluSurChgeleAsnProSerPooOooSugUysGebrur HisLysSugOooGsnMetTlαVllCsoOheSureeuAlyAluCgoUysChrAl]GMutGlu UlbChoUysClaUlnGsoIleLeuAlyCllValGhgLelULeuLubUibA lyVaeMut.T.ea ClaArgAlyUlry_JeuAlyOgzChrTysUeuSegSegLeuLeuGUyGlnLeurerGlyGln VαlCggLeuLuuLeuGlyTlαLeuAlnSegLeULeuGlyThrGlnLeuPgzPgoGlnGly GogChoChoClaHisLysCspPrzTsnClaeleeheLe^bSegPheGlnHiseeuyuuArg UlyLysValargOheLeuMet.LeuValΑlyGlyregThgLeuCysValGogΑluPhuUly AlyGsnGlyGlyGsrM[utClaregOgzCllPgzegoAla(CssAspLeuCogValyubSeg LysLeuLeuC.ogAsoSerHisValUuuHisSegAggLeuSegGlnCysPrzAluVllHis ProLeuOooChrOroValeeuLeuPrz (SEQ ID No: 230)

OeON28527

CllA.snCysSeoelueetIluGspAlulyeeleHisHisLeuLysAggPrzeroClαPrz LubLuuGspPoo>GsnCΞnLeuCsnCspAluCsoVllregIluLeuMeLGspCggGsnyeu .CrgLuuOroCsnyeuAluregPheValCggCllValLysAsnLeuGlbCsGAlaruoGly eluGluClaeluLuuCrgASIGLeuGlnPgo(T/sLeuProSegAlaThgAllAlaPooSer CggHisOrzleueleeleLysAlaAlyAsp'CgιpClnGluPheAggGluLysUeuChoOhe CyoLuuValChgLuuAluAlnGlαUlnAluUlnGln’G/gValGluGlyUlyUlyGlyreg PooGlyUluPooSugAlyProeluSegChglleAsnPgoSegPgoPrzSerLysGlbSer HisyysrugPgoT.sGe]etCSPPheSegLeuGeyGyUh gpLy s^rChgGlIKeetAlbGlbCho LysAeaUlnT.speleLuuAlyGlαValChgLu·ueelbLeuGluGlyVayHetClαAllTrg UlyUenLebUlyOozChrTysLebSerSegLuuLeuGlyGlyG_JeuSeoUlyAlnVaeArg LubLeuLebGly.TlαLeuUlG-rerUeuUeuUly'hhgGlyGLeuPgoPooUlnAlyAogChr ChoGlaHisLysT.spOrzCsnClaeluPheLeuSegPłleGlnHisIJeuLeuCogUlyUys VaecggPheLuue[etUeuValUlyUlySegThgLeu(G/sValArgGluPheAlyGlyCsn UlyUeyCsGeetAlaregPrzClαProOgzCeα<G/sAspLeluAogVaeLuuSuryysyuu UebGggCsoSegHisValLebHisSerCrgUeuSegGlnCT/sPgoGluValHisPooLeu PooChgPooValLuuyubProGlaVal (SEQ Id No: 231) pΜΟΝl8538

ClaCsnCysSerlleeetlleTsoAluIleeluHisHisLeuLysArgPozPrzAlaPgo

UeuLe:uAso)PoΌggsnl^snLeba.znasp>Ay.bCsρVllreoeluLuuMetasoTggGsnLeu

CogLeuProCsnLeuAluSeoPheVllAogTlaValIL/ΞAŚnLeuGluAsnClaSerAly eluGlbGlalluLuuCogCsnLeuAlnPozCysLeuProSerAlaThgGeaAllOooSur

TrgHisOooIlelleeleUysAllGlyAspTlg^GlnGluPheArgGluLyseeuChrOhu

CyoLeuVαlChoyeuUluAlGClαAlGAluGlnGln^ΓCsgValGluGUyUlyAlyUlySer

OgoUlyGlbPgorerUlyPrzeleSeo·ChoeluAsnProSerProPooreoLysGlbrur

HisLysruoProGsGeutUlyAluCopUysThgGlrGletGluGluThoLysClaGlnAso

126

184 424 lluLeuGlyAlaValThAUuuUeuUuuyl'pUlrΊ’alMetAldAl<acogTlryι_nu_euyly OhoTroyrsUuuSehSeoUuρUupU.lr·>uanUuuSehU lrUlnVaaArgUuuUeuUeuy|y AlayuuylnSeoUeuUe-ρTlyThruar.LU.uuPooProUlnUlrAogτrphrhAl_aHi_Syy_n AsoPhoAsnAlallePhuUuuSuIPhuylnHinLeuUuuArgUlyUyΞValA_rgor_Uy_eu MetLeuValTlrTlrSuoτroUepC’yna^τalrngGluOhuUlrUlrAnnUlrUlrAΞnM_Ut AlaSuohroAlaPhoPooAlayrsAnoLeugpgValLepSuoUrnUeuLeuAogAΞoS_Uh HinVαlyuuHiseuoCpgUuuSuhUanCysPooTlpaαlHinPhoLuuPhoτrhP_Oov_al UeuUuuhooAlaValAspPreSe;Uuu (SEQ lD Ni: 202)

OMOr28539

AlaAsn.yrsSureluMutlluAspGlpileiluHisiisLepLysArgOhoPooAl_l.h₀₀ UepLuuAnpPhoAsnAnnLuuAsnAnpTluAsoValSeIeluUuuMutAspCpgAsnLuu AAgLuuhroAsnLeuTluSerhhuaalArgAlaValUysAsnLeuUluAsnAlαSuoyly lluTluAlailuLuuArgAsnLupTanhhoyrsLepOopSeoAlaThAAlaAlaPopSeo AogHishrollellelleUysAlaUlyAsohAoUlnUlporuAogUluLrsLuuThAhre TyoUuuValτrhLuuUluUlnealUlnUluTlnTanTrIaαlUluUlyUlyTlyUlyeeo PhoUlyylpPooeuhUlrPhoIleSerThrlluAsnOrpSerProProSurUysUlueuh HisLrneehProAsrLMutTlyPooTr.oTynLuuSuoSeiUuuUuuUlyTlnyeuSuryir UlnVllAhgLuuLeuUuuUlrAlaLuuylnSuoUuuUepUlyThrUlnLupProOhoyln UlyAAgThoThrAlaHisLysAnpProAsnelaileOhuLupSeoPruUlnHisLepyuu AAgUlyUrsVa|gpgPhuLeueIrtLuuValylyylrSeITrALepCysValApgUlphhe UlrUlyAsnTlrTlrAsnMutAlaerhhopAlaPAoPrpAlaCysAsoLeuAAgValyuu SurUysLuuLuuCgg.AsoSerHiΞValLuuHlsSurgA'gUeuSeoUlnyysProTlua'αl HlSpooLeuProThoPooa'alLuuLr^lpPhoAUaValAsoPruSurLuuUlrUlPhoρLys ThoUlnMetTluUluThoUysAllTlΓ„AsoeluLupUlrAlaValTrIUuuUeuUeuylu UlyValMetAlaAlaAAgUlyTlnLuu (SEQ lD No: 233)

OMOr28500

AlaAsnCysSurilUleutilrAnpGlullullrHisHisLeuLysAAgPrphroAlahAo LupLuuenohrpAsnAnnLuuAnnAsoylPA·soValSuhelrLuuMutAnoAAgAsnLuu ArgLuuPooAnnLuuUluSurPheValA-PgcAaValL,ysAsnL'UuUluAsnAlaSeAyly llrUlpAlaelrLuuArgAnn.yupylnhooCrsLuuPopSuoAlαTroAlaAllPooSur ApgHishrpeluilreluLynAlaGlyAsohoo>TlnUluPhuAAgUlpLynLrphrphhu 'TroLuuVαlhhoLuuTluUlnAlαylnyluTlnUlnTyIaalUluUlyUlrUlrTlreeo pApTlrylPhPPeerylyhApeluSuAhroelrAnnPooSerProPrpSuALysy|pSur iisLysSeoPrpAsnMetUlyhhrylnyruP^>ooProUlnUlygrgτrrThpAlαHisLrs AsoProAsnelalluPruLupSrohhuylnHinLuuLepArgUlyLrsValArgPruLuu ^ίutUrpVllUlyTly'SerThoLupyrnValArgTlpPhuUlrUlr'-Cn:nUlyUlyAsnieet elaSuAhooAlaPhoPooAlαyrsAnoyuuApgValLepSuhLrsLup.yeueAgAsoSeo HisValLuuHisSuoArgLuueuoylnyrshhoTlpValiisOooLuuProThhPooVal UuuLeuPooΑlαVllΑspPreSuhyuuylrUluTooUrscroUlnMutUluTlpTrrLys AlaUlnC.soeluLuuTlrAlaValhhoyeuLeuLeuUluUlyaaUMutAlaAlaAogylr UlnUuuUlrhroTroyrsUuueuheurLuuyupUlyUlnUeuSeoTlrUlnValArgLup LeuLuuylyAlaLuuTlnSurLepLuu (SEQ lD No: 230)

OMOr28541

AlaAnnCynSehlIrMutlleAspGipelelluHisHisIjepLysArgPooProAlaPro

LeuyuuAsoPooAsnAsnyeuAsnesoylPAsρValSuIlleLeuMutAΞpgpgAsnU₎eu

ApgLuuPooAsn.UuuTluSeoPruValgpgAlaValUrsAsnUuuTluAsnAlaSurylr

184 424

127 l1uAlG(lilluUeGA.oH(pnLMuGlnPrzCypLeuPrzEerAlaThrAel_GliPozEuo GogHSpProl1ueeeeeLUAPAliGlyAspTrsGlnGluPheArgGl^GLypUMGGhrPhL CyrLMGai1ChreeuClGAlnAliGlnGluGenGln‘TyrValGluGlyGeyAlyAlyEuo PooClACeuProSeoClyPozllLEMrChreeMGpnPrzEerProProSeoLAPAlGEMo HSsLypEuohoo AsnMetAlAArgT hrThrAlaHis LysAsp ProAsnAlallePhuLuu EMoPhLClnHSsLeGLeGAogClyLysVaeArgPheLeuMetLeuValGlyAlyEurCho LMGTypaalGrgGluPheClAClyApnG1yClyAPIileMtAlaSerProAlaPooPrzAli TAsAssLuG(rgValLLGEurLAPLuuL,uGAogGppSurHSsValLeuHinSLrArHLuG EMoClnΊAPPooGluaalHSpPozLMuPozChoProValLMl·GUeuProAliValAPsPhM EeoLuGAeyAluTrpLynGhoAenMetGluGeuThrLysAlaG]lnAspIeMULGAeyAea aalChoLUGLMuLUGClGClyVilMutAlaAeiGrgGlyGlnLeuGlyPozThrCypLMG EuoSuoLeGLMuGlyAlnUuGEurClyAlnailArgLMuL,uuLeuGlyAeaLeGAlnEeo LMGLMGClArhrAlsUeGPozhozAln (SEQ ID No: 235) pMON28542

GlaAsnTASEurelMMLtl1eAppGlulluleuHSpHSsLeGLysArgProPozAliPrz LeGLUGGPsProAs:ι^nsnLeGAsnAppGlGAPsailSuol1uL,MuMetAssAoHApnLuG (0HUUGPrzGpnLuGAeGEurPrMVilA0H(eiValLypApnL,euGllGAsnAlaSMrClA l1eAlG(lalleLeuArHAnsUMuClnPrzCysLuuPooSMrAla']rnOCeaAeiPozSer GrgHSpPrzl1uelul1eLAPAli(1yAppTrpClnGluPheArgGlGLynUeGChoPhu ryoLeGaaerhrLeuAeGAenAliGlnGluGenGlnTyrValGluGlyG lyClyClASur PrzAlACeGProeerAeyProelMSurThoeeMCsnPozSuoProProSMoUypAlGSLr HipLypEeoPooAsriMeLAeaHSpLypAspPooGpnAlilluPhuLeGSLoPheClnHip ULGUeGAogClyLypVaeAogPhuLeuMetLLGValGeyGlySerTłnOeMGTAPValCrg AeGhheAeAClyAsnG1yA1yAp:nMetAlieLoProAlaProProAla<ΊypAPsUuGArH aaeuuGEuoLysLuGLeGAoHAPSEMoHisVilLMGHSpEMrArgLeuSeoAenTAPPrz ClGValHisProLeuPozChoPozValLeGL,MGProAliValAspPheSMO,UMGClA(lG CrpLysChoCl]ϋeutGlGClGChrLypAeiGlnAppIluLeuGlyAlaVaeτhoLuGLuG LuGAlGClyaalMetAliAla(oHGlyGenLeG(1yPrzThr(ΊysLeuSeoeLrLuGLuG AeAAenUeGeurGlyGenVie(oHLuuLeuLMuAlyGlaLeuGlnSerLLGULGGlyThr cenLeGProPozAlnAey.1o·HChoCho (SEQ ID No: 236) pMON28543 (1iAsnTysSureleMetleMAPs(lGl1ueeeHSpHSsLMGLypArgPooPozAlaPoz LeGUMGApsProApnAsnULGApnAppGluAspVa1Sur1leLel·GeetAnsAogApnUeG AogUeGPrzGpnLuGGlGEerPruaalArHAlaVilLypAsnL·euGlGAsnAeiEMoClA elMAlG(lalleLeuArgAnsLuuGlnPro<TsnLuuProSerAlaThrAeaAUaPooSeo (OHHSpPozl1eelellLLAS(1i(1yAppTrpClnGluPheArgGlιGLAnULGThoPhM CyoULGValrhrϊeeuGeuGen(liAlnGluGenAlnTyoValGluGlyGeyAeAAlASur PooAlyCΊGProSerGlyPozllMSurThrl1eGpnhrzEMrP:ooProSLoUAsClGEMr HSsLAPEeoPooAsn.MetAssPoz(pnAlieeePhMUUGELrPheGlnHipUeGUMG(OH cnALAPVan(ogPheLeuMetLuuValGlyGlySerThrLeGCyΞValAoHAeGPhuCly AlA(snAlyGlyAsn]eLtAeaSMrPrzAeahrzProAlaΊysAspLeuAoHVaeUuGSeo LAsLMGUuGCrgAspEeoHipVilLuuHSpEuoGoHLLGSMrGlnCysPozAlGVilHSp ProLuGPrzThrProValLeGULGProAliValGppPhuEMrLeGGlyGlGGosLAPCho ClnMutceGGluThrLynAeaClnAspeleLLGClyAlaValThrLeuLMGUeGAUIlAlA aalMMt(li(1aArHAlyAlnIJULGΤyAhrOłlrOTsLeGSerSeuL·eGLeGAlAAlnLuG EeoAlyAlsValArgLeuUMGUuuGlyAlaLLuGlnSeoLeuLeuGlyThoGUnLeGPoz PozAlnCl\'GogThoChoAeaHSpLAS (SEQ ID Nr: 237)

128

184 424

PMON28544 .ClaTsnCy?SurDluMeGlleTspGl'uDluDeeHnsHi?euvU:?AGgProProTlaroo euueevTsppGoAHnA.HseuvAssTnpUlvc^HpVal SerlluU uuMetAspArgAsne uu TogeeuProAsnLuuUluSerPheValArgAlaValLysAH]neuuUivTHsAlaruGUl: lleGluAlalleeuuTogAsnLeuGlnProęysLuuProSurAlaThGTlaTlarroreG TrgHisrGoDiuDiuDluLysAlaGlusT3pTrpGenAlurhuTrgAive:HUuvThGrhu TyreuuValThrLeuUluGlnΆlaGlnGluGlnGlnTyrValUluUerUl:Cl:Ul:rur ProGlyGluProSurAiyPooIluSer^,ThGDeeTHsPGoeuGrGorGoeuGU:HUlveuG HnseysSerProAHnMuGAlaIlePlleLeuSuGrhuAlsHnHeuueuvTGgAi:e:HVal AGgPhuLeιVluGLuuValGlyGlySe:GΓ}rrLuuCypaaiArgAevPheAl:Ul:TssAU: ClrTsISeetAlaruGProAlaP:ooProAla(AssAHpUeuArgValUuveuGerHeevUev AGgAspSerHisVaeLuuHisSerOlrgLeuSerGinCysProAiuValHnsProUuvrro AhrProaalLeuLuuProAlaValeτspPheSurLuuGlyUluTrpU:sAhGUlseuGUiu CluChr:essAlaGinAspIleLeuGlyAlaValThrLuuLuuLuvCluAlyaaiMuGTla AlaArgGlyGlsUuuAl:PGoAhrAsseuueeGrurLeuLeuGlyGl:reJeuSerGSyeOn ValnrgLeuLeuLuuAiyAlaLeuGlnSerLuuLuuGly'ThGAinUuvrGoPGoAlsUiy TogGhGTeoTlaHisUysAspPronnn (SEQ DD Nr: 238)

PMON28545

AlaTsnCysSerDiuMetDiuTspAiulluDiuHisHiseeuUysTogPGoProTlaPro UuuUeu Asp PGoAsnA?ϊsLe^vTsrsT3IP7luA?pValrerDlueuuMeGTHpTGgTsnU.eu .CGgeuuPGoASISeuuGiuSeGPheVa)UlGgAlaValLysAsseuuUluTHSLClaeuGAlr DieCluAlaDleUuuTogAsnLeuGinPGoęysLuurroSeGTiaThGTeaTlaProeeo TrgHisProD Ue Di uDiee:?.TlaUi:T?pTopAesU luPhuAGgAluiy sLeuThrPhe A:reuuValT:h.eeuAluGlenAiaGl:sGluGlΓ.GlnTyrValGevUlyAl:Ul:Ulyrer ProGlyGluPGoSerAlyProDluSerThGDiuTHnrrorurPGorroeuGe:HUlveur HiHeysSeGPGoAsnMuGAsprroASIsTlaDluPhuUeuruGPhuAlsHiseuvUuvTGg UlyeysVaieTogrhuUuuMetLeuValGlyGlySeGThGLuvAyHa'aiTrgCluPheAlr Ul:nsIStetAiaSerPGoAlaPGoPGoAla(AysAppLeuAGgValeeveuGeyHUuveuu TGgnspSerHisVaiLeuHisSerAGgLeuSerGlnAs?ProGivValHn?PGoUeurro AhGPGoValLe’veeuProAlaValeA;pPheSerLeuGlyGluTrpey?ThrGlnMeGAlu UluCroLysAlaGlIsnHpIleLeuGlyAlaVaΓΓhrLe'vLeuLuvUluAeyaaiMuGTla TlaArgUlyU lsUuvAl:PGoAhrAr?UuveureureevUuuUis^GisU ruSurU lyU in Val.CrgLeuLeuLeuGlyAla]leuGlnSerLeuLeuGlyThrGisUly.TrgThGAhrTla HisU'? (SEQ DD No: 239)

PMON32132

SurPGoAlaPGoProAlatysAspLeluAogYaiLuurureyHUeueuuTrgTsprerHis aaleeuHisSeGArgLeuSerGlnSA^rsPGoGluValHi?rGoLuvPGoThGPGoValUeu euvPGoAlaValAspPheSeGLeuGlyGluT:GpLysThGGl]SMuGUluAlvAhre:?Tla GlnAspIleLeuGlyAlaValThrLeίV_JeuLeuGluGlyValMutAlaAiaArgGl:Aln UuuGlyP:roTłeo(A:?LuuSerSerLel.ΛeuGlyGllSeuueerGiynlnVaiTogUuveuu UuuClyAl alleuGlnrurLeuLeuGluSΓłroGinLeuPGorGoGisUlyTrgAhGAhrTia HiseysAspProA?SLTlaliuPheLeuSerPhuUln.Hi?UeueuvTogAi:e:?ValTrg PheeuuMuGUuvVaini:Ul:eeGThreuvAsHVaiTrg (SEQ DD Nr: 252)

PMON32133

184 424

129 reohooAevhoohooalaGGpaPGUGuAoglalLeuSerLysLGuUeuArgAsprGoHSp laIUe'uHSprroGogUrureoyaGCGShos—luValHisProLeuProThrProVvlLeu L_euh_Oola_alalApprrereo:eGuGlGCluTopLysThrGlrGeetGluGluThrLG_PAl_a ylGaPGlIeUeuyaGalalalProUeuUeuLeuGluGlyValMetAlaAlVsogGlGya_G LeuGl/yPooτe.oGGGsUrureorGoUeuLruclyGlnL·c-G(SerGlyG.lnVauSrge,el·.(L·eu L_e'_UGlGaI_aUeuGaGrroLeuL.GU—l·GTrollnGlyArgThrThrAiaHSiLysA_PGh₀₀ lPGAlallGhreUeureorruyeGHSpUeuLruArgGlyLysValArHrheLeuleute.eu laIGlGyiGrroProUeuCypVaaAog (SEQ ID No: 253)

GMON32134 reohooalahooP'0slla(GGSAppUeuGrgValLeuSerLysLeuLeuArgA_PpSeoHip lalUruHSpreoaogLluSroylGGGsroslluValHisPrαLeuPrcThrProValLeu _Leu_h0c_G.la_lal_G.PG_herSro_UeuClGGluCopLysThrGlIGeetGluGluThrLy_Pal_a —lGapplleLeu—lGliaValτroLeuLruLluGluGlyV_alMetAlvGlvGrHylGylG LeullyhocPhoGGiUluSerSGoLeuLruGlyGlin._JeuSerGlyGinValArgLGίGLeu UeuGlGAlaUeuGlGreoLeuLuuylGP‘roCln:eeuProProGlnGlyArgThrτroAla HSsLGPapGrosapGalallePheUeu.rerPheGliGSi_PLeuLeuArgGiyL·ySlaaGoH pheLe'uMrtUr·uValGiyllGsreoPhoUeuΓGGiaalSgog (SEQ ID No: 254)

Następujące przykłady zilustrują, wynalazek bardziej szczegółowo, chociaż zrozumiałe będzie, że wynalazek nie ogranicza się do tych konkretnych przykładów.

Przykład 1

Konstrukcja rodzicielskiego wektora ekspresji BHK

A. Usunięcie miejsca AflIII z plazmidu ekspresji ssaka.

Skonstruowano nowy wektor ekspresji ssaka, aby zaakceptować fragmenty genowe Ncol-Hindlll lub Afllll-Hindlll w ramce oraz 3' w stosunku do genu agonisty receptora hIL-3 pMON13146 (Wo 94/12638) i fragmentu linkera IgG2b myszy. Najpierw usunięto pojedyncze miejsce AflIII z pMON3934, który jest pochodną pMON3359. pMON3359 jest wektorem opartym na pUC18, zawierającym kasetę ekspresji ssaka. Kaseta obejmuje primer wirusa opryszczki IE110 (-800 do +120) potem sekwencję peptydu sygnałowego modyfikowanej ludzkiej IL-3 oraz sygnał późnej poliadenylacji (poli-A) SV40, który subklonowano do polilinkera pUC18 (patrz Hippenmeyer i in., Bio/Technology, 1993, strony 1037-1041). Sekwencję sygnałową modyfikowanej ludzkiej IL-3, która ułatwia wydzielanie produktu genowego na zewnątrz komórki, oskrzydla miejsce BamHI na końcu 5' i unikalne miejsce NcoI na końcu 3'. Unikalne miejsce Hindin znajduje się 3' w stosunku do miejsca Ncol i 5' w stosunku do sekwencji poli-A. Sekwencja, kodująca peptyd sygnałowy ukazana jest poniżej (miejsca restrykcji wskazano powyżej). Kodon ATG (metionina) wewnątrz miejsca Ncol jest w ramce z inicjatorem ATG peptydu sygnałowego (podkreślony);

BurSSI NCol

5' TcncrrnrrsTTGTrrcrccccccicrccircrCTiCTCCGGrccrTGCcccGrrrcTrrncii (SEQ ( D Nr: 255)

Pojedyncze miejsce AflIII usunięto z pMON3934 przez trawienie AflIII po czym przez wypełnienie nawisów przez dodanie polimerazy DNA i nukleotydów. Trawiony fragment DNA oczyszczono za pomocą zestawu Magic pCr Clean up (Promega) i poddano ligacji za pomocą ligazy DNA T4. Reakcję ligacji transformowano do DH5a i komórki powleczono na agarze zLB plus ampicylina. Poszczególne kolonie przesiewano pod względem utraty miejsca AflIII przez analizę restrykcji, za pomocą AflIII i HindIII, co daje pojedynczy fragment, jeśli miejsce AflIII zostało usunięte. Otrzymany plazmid oznaczono pMON30275.

B. Przeniesienie kasety pMON1341/IgG2b agonisty receptora hIL-3 do pMON30275.

Fragment Ncol-HindIII (około 425 bp) z pMON30245 poddano ligacji z fragmentem

Ncol-HindIII (około 3800 bp) pMON30275. pMON302465 (Wo 94/12638) zawiera gen, kodujący agonistę receptora hIL-3 pMON13416 połączony z fragmentem zawiasowym IgG2b myszy. Bezpośrednio 3' w stosunku do zawiasu IgG2b i 5' w stosunku do miejsca HindIII

130

184 424 znajduje się miejsce AflIII. Geny można klonować do miejsc AflIII-HindIII jak i NcoI-HindIII lub miejsc AflIII-HindIII w ramce z zawiasem odmiany hIL-3 pMON13416/IgG2b, aby utworzyć nowe chimery. Miejsce Ncol i miejsce AflIII posiadają kompatybilne nawisy i będą się łączyć przez ligację lecz oba miejsca rozpoznania są utracone. Plazmid pMON0304, zawierający sekwencje DNA o (SEQ ID nr: 78), kodującą odmianę hIL-3 pMON13416 połączoną z regionem zawiasowym IgG2b myszy, był wynikiem tego klonowania.

Przykład 2

Konstrukcja pośredniego plazmidu, zawierającego jedną kopię genu liganda c-mpl (1-153) dimerowej matrycy

W celu wytworzenia plazmidu DNA z sekwencją kodującą liganda c-mpl (1-153) po czym unikalnego miejsca restrykcji EcoRI, gen izoluje się przez odwrotną transkryptazę/reakcję łańcuchową polimerazy (RT/PCR). Ludzką wątrobę płodową (partia #38130) i dorosłą (partia #46018) A+ RnA otrzymuje się od Clontech (Palo Alto, CA) jako źródło RNA informacyjnego (mRNA) liganda c-mpl. Pierwszy łańcuch reakcji cDNA przeprowadza się przy użyciu zestawu cDNA Cycle™ uzyskanego od Invitrogen (San Diego, CA). W reakcji RT, stosuje się przypadkowe primery i primer oligodT, aby wytworzyć cDNA z połączenia mRNA wątroby płodowej i dorosłej. Do powielenia fragmentu genu liganda cmpl, kodującego aminokwasy 1-153, produkt RT służy jako matryca dla PCR z połączeniem primerów, primer o kierunku do przodu: c-mplNcoI (SEO ID nr: 13) i primer odwrotny: Ecompl. Primer c-mplNcoI hybrydyzuje z genem liganda c-mpl (zasady #279-311 w oparciu o sekwencje genu liganda c-mpl z dostępu do Gene Bank #L33410 lub Sauvage i in., Nature 369: 533-538, (1994)) i koduje miejsce enzymu restrykcyjnego NcoI bezpośrednio 5' w stosunku do pierwszego kodonu (Ser+1) liganda c-mpl. Miejsce enzymu restrykcyjnego Ncol koduje kodony metiony i alaniny przed Ser+1 i obejmuje kodony (Ser, Pro, Ala i Pro) liganda c-mpl. Primer EcoRI hybrydyzuje z zasadami #720-737 liganda c-mpl i koduje miejsce EcoRI (GAATTC) w ramce z genem liganda c-mpl bezpośrednio po Arg-153. Miejsce EcoRI tworzy kodony Glu i Phe po Arg-153. Produkt o wielkości około 480 bp oczyszczono, trawiono NcoI i EcoRI i poddano ligacji do fragmentu wektora NcoI-EcoRI pMON3993 (około 4550 bp). pMON3993 był pochodną pMON3359 (opisanego w przykładzie 1). Sekwencja peptydu sygnałowego ludzkiej IL-3, którą subklonowano jako fragment BamHI do unikalnego miejsca BamHI między primerem IE110 i sygnałem poli-A, zawiera miejsce Ncol przy swoim końcu 3', po czym unikalne miejsce EcoRI. Plazmid pMON26458, zawierający sekwencje DNA o (SEQ ID nr: 79) kodującą dla aminokwasów 1-153 liganda c-mpl (SEQ ID nr: 161) była wynikiem tego klonowania.

Przykład 3

Konstrukcja plazmidów rodzicielskich, zawierających drugie geny matryc dimerowych

Do powielenia fragmentów genu liganda c-mpl, rozpoczynającego się przy aminokwasie 1 (Ser) zkodonem kończącym po aminokwasie 153 (Arg), reakcja RT z przykładu 2 służy jako matryca dla PCR za pomocą połączenia następujących primerów: c-mplNcoI (SEQ ID nr: 13) (primer biegnący do przodu) oraz c-mplHindIII (SEQ ID nr: 15) (primer odwrotny). Primer c-mplNcoI (SEQ ID nr: 13) opisano w przykładzie 2. Primer c-mplHindIII (SEQ ID nr: 15), który hybrydyzuje z zasadami #716-737 liganda c-mpl dodaje zarówno kodon terminacji jak i miejsce enzymu restrykcyjnego HindIII bezpośrednio za końcowym kodonem Arg¹.

Wytwarza się dwa typy produktów PCR z próbek cDNA RT, jeden z delecją kodonów dla aminokwasów 112-115 i jeden bez delecji tych kodonów. Produkty PCR liganda c-mpl (około 480 bp) trawi się enzymami restrykcyjnymi NcoI i HindIII w celu przeniesienia do wektora ekspresji ssaka, pMON3934. pMON3934 trawi się NCoI i HindIII (około 380 bp) i przyjmuje on produkty PCR.

Plazmid pMON32132 (SEQ ID nr: 249), kodujący aminokwasy 1-153 liganda c-mpl (SEQ ID nr: 252) był wynikiem tego klonowania. Plazmid pMON32134 (SEQ ID nr: 250), kodujący aminokwasy 1-153 liganda c-mpl (SEQ ID nr: 253) był wynikiem tego klonowania.

Plazmid pMON32133 (SEQ ID nr: 251), kodujący aminokwasy 1-153 liganda c-mpl z delecją kodonów 112-115 (Al 12-115) (SEQ ID nr: 254) był wynikiem tego klonowania.

184 424

131

Przykład 4 . ,

Wytwarzanie dimerowej matrycy 5L PCR z delecją Δ112-115 w drugim genie liganda c-mpl . .

Konstruuje się matrycę PCR do wytworzenia nowych postaci liganda c-mpl, przez ligację fragmentu BstXI/EcoRI o 3,7 Kbp pMON26458 do fragmentu NcoI/BstXI o 1 Kbp z pMON32133 (zawierającego delecję aminokwasów 112-115) wzdłuż syntetycznego linkera oligonukleotydowego EcoRI/AflIII 5L 5L-5' (SEQ ID nr: 18) i 5L-5' (SEQ ID nr: 19).

Koniec EcoRI linkera będzie się łączył przez ligację z końcem EcoRI pMON26458. Koniec AflIII linkera będzie się łączył przez ligację z miejscem Ncol pMON32133, i poligacji nie zachowa się żadne z miejsc restrykcji. Miejsca BstXI pMON26458 i pMON32133 także połączą się przez ligację. Plazmid pMON28548 jest wynikiem klonowania i zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 80), która koduje aminokwasy 1-153 liganda c-mpl złączoną przez linker GlyPheGlyGlyAsnMetAla (SEQ ID nr: 222) z aminokwasami 1-153 liganda c-mpl, który zawiera delecję aminokwasów 112-115 (SEQ ID nr: 162).

Przykład 5

Wytwarzanie dimerowej matrycy 4L PCR

Konstruuje się matrycę PCR do wytwarzania nowych postaci liganda c-mpl przez ligację fragmentu o 3,7 Kbp BstXL/EcoRI pMON26458 do fragmentu o 1 Kbp NcoI/BstXI zpMON32132 wzdłuż linkera 4L-5'; syntetycznego oligonukleotydu EcoRI/AflIII 5L (SEQ ID nr: 16) i 4L-3' (SEQ ID nr: 17).

Koniec EcoRI linkera będzie się łączył przez ligację z końcem EcoRI pMON26458. Koniec AflIII linkera będzie się łączył przez ligację z miejscem NcoI pMON32132, i po ligacji nie zachowa się żadne z miejsc restrykcji. Miejsca BstXI pMON26458 i pMON32132 także połączą się przez ligację. Plazmid pMON28500 jest wynikiem klonowania i zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 82), która koduje aminokwasy 1-153 liganda c-mpl złączoną przez linker (4L) GlyPheGlyAsnMetAla (SEQ ID nr: 223) z aminokwasami 1-153 liganda c-mpl (SEQ ID nr: 163).

Przykład 6

Wytwarzanie dimerowej matrycy PCR 5L

Konstruuje się matrycę PCR do wytwarzania nowych postaci liganda c-mpl przez ligację fragmentu o 3,7 Kbp BstXI/EcoRI pMON26458 do fragmentu o 1 Kbp NcoI/BstXI zpMON32132 wzdłuż linkera 5L-5'; syntetycznego oligonukleotydu EcoRI/AflIII 4L (SEQ ID nr: 18) i 5L-3' (SEQ ID nr: 19).

Koniec EcoRI linkera będzie się łączył przez ligację z końcem EcoRI pMON26458. Koniec AflIII linkera będzie się łączył przez ligację z miejscem NcoI pMON3,2132, i po ligacji nie zachowa się żadne z miejsc restrykcji. Miejsca BstXI pMON26458 i pMON32132 także połączą się przez ligację. Plazmid pMON28501 jest wynikiem klonowania i zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 82), która koduje aminokwasy 1-153 liganda c-mpl złączoną przez linker (5L) GlyPheGlyGlyAsnMetAla (SEQ ID nr: 222) z aminokwasami 1-153 liganda c-mpl (SEQ ID nr: 164).

Przykład 7

Wytwarzanie dimerowej matrycy PCR 8L

Konstruuje się matrycę PCR do wytwarzania nowych postaci liganda c-mpl przez ligację fragmentu o 3,7 Kbp BstXI/EcoRI pMON26458 do fragmentu o 1 Kbp NcoI/BstXI zpMON32134 wzdłuż linkera 8L-5'; syntetycznego oligonukleotydu EcoRI/AflIII 4L (SEQ ID nr: 20) i 8L-3' (SEQ ID nr: 21).

Koniec EcoRI linkera będzie się łączył przez ligację z końcem EcoRI pMON26458. Koniec AflIII linkera będzie się łączył przez ligację z miejscem NcoI pMON32134, i po ligacji nie zachowa się żadne z miejsc restrykcji. Miejsca BstXI pMON26458 i pMON32134 także połączą, się przez ligację. Plazmid pMON28502 jest wynikiem klonowania i zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 83), która koduje aminokwasy 1-153 liganda c-mpl, złączoną przez linker (8L) GlyPheGlyGlyAsnGlyGlyAsnMetAla (SEQ ID nr: 224) z aminokwasami 1-153 liganda c-mpl (SEQ ED nr: 165).

132

184 424

Przykłady 8-44

Wytwarzanie nowych genów agonistów receptora liganda c-mpl

Geny, kodujące nowych agonistów receptora liganda c-mpl wytworzono przy użyciu sposobu III (Horlick i in., Prot. Eng. 5: 427-433, 1992). Przeprowadzono reakcje PCR stosując dimerowe matryce pMON28500, 28501, 28502 lub 28548 i jeden ze zbiorów syntetycznych primerów przytoczonych poniżej (pierwszy numer odnosi się do pozycji pierwszego aminokwasu w sekwencji oryginalnej. Przykładowo 31-5' i 31-3' odnosi się do oligoprimerów odpowiednio 5' i 3', sekwencji, rozpoczynającej przy kodonie, odpowiadającym reszcie 31 sekwencji oryginalnej).

31-5' (SeQ ID nr: 22) i 31-3' (SEQ ID nr: 23), 35-5' (SEQ ID nr: 24) i 35-3' (SEQ ID nr: 25), 39-5' (SEQ ID nr: 26) i 39-3' (SEQ ID nr: 27), 43-5' (SEQ ID nr: 28) i 43-3' (SEQ ID nr: 29), 45-5' (SEQ ID nr: 30) i 45-3' (SEQ ID nr: 31), 49-5' (SEQ ID nr: 32) i 49-3' (SEQ ID nr: 33), 82-5' (SEQ ID nr: 34) i 82-3' (SEQ ID nr: 35), 109-5' (SEQ ID nr: 36) i 109-3' (SEQ ID nr: 37), 115-5' (SEQ ID nr: 38) i 115-3' (SEQ ID nr: 39), 120-5' (SEQ ID nr: 40) i 120-3' (SEQ ID nr: 41), 123-5' (SEQ ID nr: 42) i 123-3' (SEQ ID nr: 43), 126-5' (SEQ ID nr: 44) 126-3' (SEQ ID nr: 45). Zbiory matryc i oligonukleotydów stosowanych w reakcjach PCR ukazano w tabeli 4. Produkty, które wytworzono miały około 480 bp i oczyszczono za pomocą zestawów Magic PCR Clean up (Promega).

B. SubklSnowanic nawych produptów genowych agonistgw ^s^t^c^ptc^ra c-mpl do wektora ekspresji ssaka w celu wytworzenia chimer.

Produkty PCR genu agonisty receptora c-mpl trawiono enzymami testtykaojnomi NcoI i HindIII lub AflIII i HindIII (około 470 bp) w celu transferu do wektora ekspresji ssaka. Wektor ekspresji pMON30304 trawiono NcoI i HindIII (około 4200 bp) i przyjmuje się produkty PCR jako fragmenty NacI-HinkIII lub AflIII-HindIII. Trawienie restrykcyjne produkty PCT i otrzymane plazmidy, ukazuje się w tabeli 4.

Tabela 4

Przykład #	Matryca PCR	Produkt PCR Zbiór crimernw	Produkt PCR Trawienie restrykcyjne	Linker	Otrzymany plazmid	Punkt przerwania w c-mpl
1	2	3	4	5	6	7
Przykład 8	pMON28501	31	NcóI/HindIII	5L	28505	30-31
Przykład 9	pMON28501	35	AflIII/HindIlI	5L	28506	34-35
Przykład 10	pMON28501	39	NaóI/HinkΠI	5L	28507	38-39
Przykład 11	pMON28501	43	NaóI/HindIIl	5L	28508	42-43
Przykład 12	pMON28501	45	Ν^Ι/ΗΜΙΙΙ	5L	28509	44-45
Przykład 13	CMON28501	49	Ncol/HmdIII	5L	28510	48-49
Przykład 14	pMON28501	82	Ν^Ι/Ή^ΙΙΙ	5L	28511	81-82
Przykład 15	pMON28501	109	Naól/ΉindIII	5L	28512	108-109
Przykład 16	pMON28501	116	NaóI/ΉinkIII	5L	28513	115-116
Przykład 17	pMON28501	120	ν^ι/ήμιιι	5L	28514	119-120
Przykład 18	pMON28501	123	ΝμΙ/ΉΜΙΙΙ	5L	28515	122-123
Przykład 19	pMON28501	126	^^^^111	5L	28516	125-126
Przykład 20	pMON28500	31	ν^ι/ήμιιι	4L	28519	30-31
Przykład 21	pMON28500	35	AfIIII/Hindlll	4L	28520	34-35

184 424

133 cd. tabeli 4

1	2	3	4	5	6	7
Przykład 22	pMON28500	39	NcoI/HindIII	4L	28521	38-39
Przykład 23	pMON28500	43	NcoI/HindIII	4L	28522	42-43
Przykład 24	pMON28500	45	Ncol/Hindlll	4L	28523	44-45
Przykład 25	pMON28500	49	Ncol/Hindlll	4L	28524	48-49
Przykład 26	pMON28500	82	Ncol/Hindlll	4L	28525	81-82
Przykład 27	pMON28500	109	Ncol/Hindlll	4L	28526	108-109
Przykład 28	pMON28500	116	Ncol/Hindlll	4L	28527	115-116
Przykład 29	pMON28500	120	Ncol/Hindlll	4L	28528	119-120
Przykład 30	pMON28500	123	Ncol/Hindlll	4L	28529	122-123
Przykład 31	pMON28500	126	Ncol/Hindlll	4L	28530	125-126
Przykład 32	pMON28502	31	Ncol/Hindlll	8L	28533	30-31
Przykład 33	pMON28502	35	AflIII/HindIII	8L	28534	34-35
Przykład 34	pMON28502	39	Ncol/Hindlll	8L	28535	38-39
Przykład 35	pMON28502	43	Ncol/Hindlll	8L	28536	42-43
Przykład 36	pMON28502	45	Ncol/Hindlll	8L	28537	44-45
Przykład 37	pMON28502	49	Ncol/Hindlll	8L	28538	48-49
Przykład 38	pMON28502	82	Ncol/Hindlll	8L	28539	81-82
Przykład 39	pMON28502	109	Ncol/Hindlll	8L	28540	108-109
Przykład 40	pMON28502	116	Ncol/Hindlll	8L	28541	115-116
Przykład 41	pMON28502	120	Ncol/Hindlll	8L	28542	119-120
Przykład 42	pMON28502	123	Ncol/Hindlll	8L	28543	122-123
Przykład 43	pMON28502	126	Ncol/Hindlll	8L	28544	125-126
Przykład 44	pMON28548	123	Ncol/Hindlll	5L	28545	122-123

Przykład 5 Konstrukcja pMON15960

Konstrukcję pMON15960, pośredniego plazmidu użytego do konstruowania plazmidów, zawierających sekwencje DNA, kodujące G-CSF Ser ^l7z nowym końcem N i końcem C. DNA plazmidu pACYC177 (A.C.Y. Chang i S.N .Cohen J. Bacteriol. 134: 1141-1156, 1978) trawiono enzymami restrykcyjnymi HindIII i BamHI, otrzymując fragment HindIII, BamHI o 3092 parach zasad. Plazmid pMON13037 (WO 95/21254) trawiono BglII i FspI, otrzymując fragment BglII, Fspl o 616 parach zasad. Drugą próbkę DNA plazmidu pMON13037 trawiono NcoI i HindII, otrzymując fragment NcoI, HindIII o 556 parach zasad. Syntetyczne oligonukleotydy DNA 1GGGSfor (SEQ ID nr: 76) i 1GGGSrev (SEQ ID nr: 77) poddano hybrydyzacji między sobą i potem trawiono AflIII i FspI, otrzymując fragment AflIII, FspI o 21 parach zasad. Fragmenty restrykcyjne poddano ligacji i mieszaninę reakcji, ligacji użyto do transformacji E. coli K-12 szczepu JM 101. Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. Plazmid DNA wyizolowano i analizowano przez analizę restrykcji, aby potwierdzić prawidłowy insert.

134

184 424

Przykład 46

Konstruowanie pMON 15981

Konstrukcja pMON15981, plazmidu, zawierającego sekwencje DNA, kodujące agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych. DNA plazmidu pMON15960 trawiono enzymem restrykcyjnym Smal i użyto jako matrycę w reakcji PCR przy użyciu syntetycznych oligonukleotydów DNA 38 stop (SEQ ID nr: 65) i 39 start (SEQ ID nr: 64) jako primerów, otrzymując w powieleniu fragment, o 576 par zasad. Powielony fragment trawiono enzymami restrykcyjnymi Hindlll iNcol, otrzymując fragment Hindlll, Ncol o 558 parach zasad. DNA plazmidu pMON13181 trawiono HindIII i AflIII, otrzymując fragment Hindlll, AflIII o 4068 parach zasad. Fragmenty restrykcyjne poddano ligacji i mieszaninę reakcyjną ligacji użyto do transformowania E. coli K-12 szczep JM101. Transformowane bakterie poddano selekcji na płytce, zawierającej ampicylinę. DNA plazmidowe wyizolowano, analizowano w analizie restrykcji i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Plazmid pMON15981 zawiera sekwencję' DNA o (SEQ ID nr: 155), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

MMtAliApnΊAPEMOllLMMtIlMAPS(lGIlMIlLHSpHSpeLGLAPAoHPozPozAei

PozeMGLLGnspPooAs]SlsnLe^GnsnAspGllGGspVi1ELOllMLMG!eLtAPsAoHAps

LMGGoHLLGPozApnLLG(lGELoPhLal1AoHGnlal1LAPApnLLG(lGGpsAllELO

AlAllMAlGA1illMLMGAogApnLuGC1nPozTAPLMGPozEMoGeaCho(UlAniPoz

EMoAoHHSpPozIlLIlLIlMLAPGnl(lAAPSCos(1n(lGPeLAoH(lGLAPLMGCeo

PrMCAOLMGai1CroLLG(lG(1nGnl(1nClGC1n(1nCAoVi1(lG(lAClA(lA(lA

EMoPoz(lAΤlGPozELoGlAPozIlMELoChoIlMApnPozEMoPozPozELoLAP(lG

EMoHSpLAsEMoPozGnnMMtA1iCAoLAPLLGTAPHSpPoz(lG(lGLMGai1LMGLMG

ClAHSρEMoLMGAlAllLPozrosGnlPozLMGEMoEuoΊAPPozEMO(1sGniLMG(1s

UMGG1i(lAΊAPLuGELoClnLLGHSpELo(lALMGPeLLMGCAoC1n(lALMGLuGCln

AllLuG(lG(lAIlLELoPoz(lGLuGΤlAPozCeoLMGAssCroLMG(1nLMGApsail

AeiAPsPrMGniChoCeollMCosAls(1nMLtAlGClGLMG(lGMut(niPozGniLMG

C1nPozCeoClnAlAAllMetPooA1iPeeAliEMoAliPruC1nArHAoHAliClAClA

VilLLGai1GUiEuoHSpLMGAlnEeoPeLLLGAlGVi1EuoCAoCo:Haa1LLGGoHHSp

LLGCnl(1nPoz(lAΤlA(lAELoAssMLt(UiCroPozLLG(lAPozA1lELoELoLMG

Poz(1nELoPrLLMGLLGLAPELoLMG(lG(lsVinGoHLAPIlMCls(lAAPS(lAAei

GelLMG(1n(lGLAPLLGΊAPAllCro (SEQ ID No:195)

Przykład 47

Konstruowanie pMON15982

Konstrukcja pMON15982, plazmidu, zawierającego sekwencje DNA, kodujące agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych. DNA plazmidu pMON15960 trawiono enzymem restrykcyjnym Smal i użyto jako matrycę w reakcji PCR przy użyciu syntetycznych oligonukleotydów DNA 96 stop (SEQ ID nr: 67) i 97 start (SEQ ID nr: 66) jako primerów, otrzymując w powieleniu fragment o 576 par zasad. Powielony fragment trawiono enzymami restrykcyjnymi HindIII iNcoI, otrzymując fragment HindIII, NcoI o 558 parach zasad. DNA plazmidu pMON13181 trawiono HindIII i AflIII, otrzymując fragment HindIII, AflIII o 4068 parach zasad. Fragmenty restrykcyjne poddano ligacji i mieszaninę reakcyjną ligacji użyto do transfomowania E. coli K-12 szczep JM101. Transformowane bakterie poddano selekcji na płytce, zawierającej ampicylinę. DNA plazmidowe wyizolowano, analizowano w analizie restrykcji i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Plazmid pMON 15982 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 157), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

184 424

135

MuGTllT?sGrsSuolleMuGDleTspGlvDleDluHi?Hi?euversTogProProTla

PooeuveeuAs^ppoo.nsI^L?neuu^Tss^T?^pGlu^As^pa'a^lSu^oDUueeueut.^T?P^Tog^Tpn euuAr^geuvPoo.^Tss^euvG^lvSur^pre^a'l^lTrg.^A|a^a'l^Uers.^{nsseevClvAssT|lSuo} GlrDluUlvnlaDlueuvArgTsseuvUlnPoIArseuvPooSuoTUaThoTlaTiaPoo SuoArgHisPooDluDluDluernTllUlrAspTopUlnGlvPru.TogClverseuvTho pruTroeuvallThoeuvulvclnτlaGlnclvcιnclsTroaaluluGlrulrGlrGlr SuoProClrClvPooSuoGlrPoIDluSuoThoDleAssPooSuoPooPooSuoersClv SuoHisersSuoPooTssMeG.TllPooGlveuvClrPoITrreuvCspCroeevClseuv TspallTllTspPruAllTroTroDluTopUlsGlseutUlvClveuvClrMuGTllPoI TlleuvUlsPooTroUUsUlrCyaMutPoIneaPruTllSuoTlaPruGlnTogTogTll ClrGlrVlleuvVllAlaeeoHiseevClnSerPreeevClvValSeoArrTrgValeuv TogHiseuu^C|u^GlsPoI^GlrClrGlrCuo.^Tsp^Mu^GTiaT^roP^OIeevUlr^poc>^T|lSuo SuoeuvPoIUlnSuoPheeuveuversSuoeuvCUvClsVllTogersDluGlsClrTsp ulrτιaτlaeuvGlsclvLrseuvArsAllτrrτroerseuvGrsHisPooGlvGlvUuv alleuveuvUlrHisSuoeevClrDluPoICrpAlaPoIeuvSuoSuoArsPoISeoCln TlaeuvGlneuvTllClrGrseuvSuoGlseuuHisSeoGlreuvPhueuuCroClsClr euveuvUlsTlaeuvUlvClrDluSuo (SEQ DD No:196)

Przykład 48

Konstruowanie pMON15965

Konstrukcja pMON15965, plazmidu, zawierającego sekwencje DNA, kodujące agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych. DNA plazmidu pMON15960 trawiono enzymem restrykcyjnym Smal i użyto jako matrycę w reakcji PCR przy użyciu syntetycznych oligonukleotydów DNA 142 stop (SEQ ID nr: 73) i 141 start (SEQ ID nr: 72) jako primerów, otrzymując w powieleniu fragment o 576 par zasad. Powielony fragment trawiono enzymami restrykcyjnymi Hindlll iNcol, otrzymując fragment Hindin, Ncol o 558 parach zasad. DNA plazmidu pMON13181 trawiono Hindlll i AflIII, otrzymując fragment Hindlll, AfHH o 4068 parach zasad. Fragmenty restrykcyjne poddano ligacji i mieszaninę reakcyjną ligacji użyto do transformowania E. coli K-12 szczep JM101. Transformowane bakterie poddano selekcji na płytce, zawierającej ampicylinę. DNA plazmidowe wyizolowano, analizowano w analizie restrykcji i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Plazmid pMON15965 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 157), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

MetτnlT?nArsSuoIluMuGDluAspClvDluDluHisHnseuvLrsArgPooPoIAna

PooeuveuvTspPoI.nssn?neuvTssCspClvCspVllSuoDlueuuMutT?pTogTss euvTogeuvPooTsseuvGlvSuoPhuaanτogTllValLrsAsneuvGluT?nCnaSeo ClrDluGluCllDleeevnogA?neuvGlnPoIGrseuvProreoTlaAhrTll.nllPoo SuoTogHisPoIDluIluDluersTlaClrTspCopGlnGlvPhu.TogGlvUrseuvTho PhuCroeuvaalCroeeuGlvGlnTllUlnUlvClnGlsTyGValClvGlrGlrUlrGlr SuoPooGlrUlvPoISerGlrPooDluSuoThoDluAssPooSeoPooPooSeoersUlv SeoHisersSuoPoαCsseuGTlaSuoTlaPruGlnTGgAogAllUlrClyalleuvall cyaSuoHiseuvGlsSurPeueuvUlvaalSuoTsoTogalleuuTrgHisUuvneaCln ProGlrUlrClsSuoAspltuGClaCroProeuvClyPooAlaSuoSuoLuvPooClsSuo PhueuveuversSuoLeuGluGlnVaeAogeysDleGlnGlrAspGlrAlsTiaeuvCln clverseuvGrsτeaτroTroerseuvArsHisPooclvclveuvalleuveuvUlrHis SuoeevGlslluProTopAllPooeevSeoSeoGssProSuoClsnlaeuvAlneeuTnl clrGrseuvsuoulseuvHissuoclseuvPhueuvTroulnGlreuveuvGlsτlleuv GlvClrDluSuoProUlveevGlrPooThoeeuTIpThoeuvGlneevTspVaiTllTsp PruTllTroΊ’roUluTopUlsGlnMuGUlvClveuvClrMutAllPoIAlaeevUlsPoo ThoGlsClrTlaMetPooTlaPreTna (SEQ DD rr:196)

Przykład 49

Konstruowanie pMON15966

Konstrukcja pMON15966, plazmidu, zawierającego sekwencje DNA, kodujące agoni136

184 424 stów krwictwntczoch receptorów wieloczynnościowych. DNA plazmidu pMON15960 trawicnc enzymem restrykcyjnym SmaI i użyto jako matrycę w reakcji PCR przy użyciu syntetycznych cligonuklyotyków DNA 126 stop (SEQ ID nr: 68) i 125 start (SEQ Id nr: 69) jako primerów, otrzymując w powieleniu fragment o 576 par zasad. Powielony fragment trawiono enzymami restrykcyjnymi HindIII i NcoI, otrzymując fragment HindIII, NcoI o 558 parach zasad. DNA plazmidu pMON13181 trawiono HindIII i AflIII, otrzymując fragment HindIII, AflIII o 4068 parach zasad. Fragmenty restrykcyjne poddano ligacji i mieszaninę reakcyjną ligacji użyto do transformowania E. coli K-12 szczep JM101. Transformowane bakterie poddano selekcji na płytce, zawierającej ampicylinę. DNA plazmidowe wyizolowano, analizowano w analizie restrykcji i sekwencjoncwanc, aby potwierdzić prawidłowy insert. Plazmid pMON15966 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 158), która koduje następującą sekwencję aminck\ρasową:

MetCllTsGCysreolleMetlle.AsoAlbllelleHisHisUebUysAogOgzeozAll eozLeuLe^bgspPgoΑs]GAsnLeb.snΑ.spGluΑspVllSeolleLebeetAsoGggΑsG UebaggUebeozAsGeebAlbreoeheValAogAllVαlLysAsGUuuAluAsGCUlreo 1lylleAlballlleUebAogAsnLeuGlnPozCysUebPgzregAllChgTUlAll0oz SegΑggHisOgzlleIlelleUysΑlαGlyΑspCgoUlnGeuOheargUluLysLuuCho eheTyrLeuVal'ChrLeuGluGlnΆlaGlnGluGlnGlGCyoVllAlbAly1lyAly1ly reoeooGlyGluProSerGlyegolleregThoIleGsGPozregOgzOozregUys1lu reoHiseysreoOgzAsnMeta..lleetGllPgzAlαUeuGlnProTglUGAUlτylueet OrzAlaOheAllruoAlaOheUlGArgAogAlaGlyGlyValLeuValAUaSeoHisUuu AlGSerOheLeuAluVllSegTyrArgValLeuAogHisLubAlaAlGPozAlyAeyAly reoAspleetAllThgeozUeb1ly0gzGllSegreoUeuPrzAlGSegeheLebeebUys SeoLeuAlnGlnValAggUyslluAlGAly.CsoAlyAllAllLuuAlnAluLysLeuCys CllChoTyoLysLeuCysHisProGG.uGluLeuValLeuLebGlyHisSeoUeuAlylle eozTgpAlaProLeuSegSeoCysProSerGl]GalaLeuAlGLeuAUlAlyCysLebreo AlGeeuHisrerGlyLeuPheLeuTyrGlnGlyLeuLeuGlnAlaUebAlbAlyllereo OozGluLebGlyegzThgLebaspThoLe’bGlGeebCspVllaJ.lCsoOheGllChoCho lleTopGlnGlnMetAlbAlbeebAly (SEQ II No:198)

Przykład 50

Konstruowanie pMON15967

Konstrukcja pMON15967, plazmidu, zawierającego sekwencje DNA, kodujące agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych. DNA plazmidu pMON1596O trawiono enzymem restrykcyjnym SmaI i użyto jako matrycę w reakcji PCR przy użyciu syntetycznych cligcnukIyctyków DNA 132 stop (SEQ ID nr: 71) i 13 start (SEQ ID nr: 70) jako primerón, otrzymując w powieleniu fragment o 576 par zasad. Powielony fragment trawiono enzymami restrykcyjnymi HindIII i NcoI, otrzymując fragment HindIII, NcoI o 558 parach zasad. DNA plazmidu pMON13181 trawiono HindIII i AflIII, otrzymując fragment HindIII, AfIIII o 4068 parach zasad. Fragmenty restrykcyjne poddano ligacji i mieszaninę reakcyjną ligacji użyto do transformowania E. coli K-12 szczep JM101. Transformowane bakterie poddano selekcji na płytce, zawierającej ampicylinę. DNA plazmidowe wyizolowano, analizowano w analizie restrykcji i sykwenajonowanc, aby potwierdzić prawidłowy insert. Plazmid pMON15967 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 159), która koduje następującą sekwencję aminckwasową:

184 424

137 ^MItai^aGs^GΓ^Gsr^lOll^lM^ltll^Ils^GllulilIlr^HSi^HSs^Llu^eGS^lOg^0os0osa|a

P^0se^luL^luas^pPoS^lSG^aSG^elU^GPG^li^GliU.^GSG'^lalreollreeU-^elt·^GiG'^GoHain e^lu.Go^HeluPos.^GiG^LIu^liu^rIo^0eI^al^iaoH^GiaV^a|eG^ρGsGeIuliu-^{SpGGIarro l}l^GIi^Ili^UGI^aIlIer^uao^HGsnLIulinPooCysLeu⁰os^rloA^|a'Γ^eo^{A|aa|a0oS rlO}G^OHHiⁱ0^0SIl^IIi^IIi^IL^GsAllGiyAspTrpG^ln^liu^rel^a0H^liu^LGS^LluTeo

PerC^Goelual^lC^eo^elu^l|u^liG^Gea^liG^liu^llG^liGCG^ollll|ullG^llGliGllG r^IO0^OSli^GGi^U0osSloli^G0oslllrIoCeoIllAsG⁰os^Slo⁰os^posSloeG^illu r^loHisL^GsrIoPosasGMrtA^|a^ceo^liGG^lG^Glveet^posala^{0elG|arlO sea0hl} ll^Ga^oHa^oHGi^ali^Gll^Ga^liL^luallallrloHiiLlu^llG^rlo^0eI^Llu^liu'^lairro

C^G0G^ogl^ale^Iulo^HHiⁱee^uallliG0osll^Gli^Gli^Grro^GPG^Mrt^aia^ceo0osLlU ll^GPosAllrlorl0^Llu⁰oslⁱG^rlO^0eI^eluLluLGS^rloLIu^{lluliGaliaogLG}s ll^rliGTl^Gls^GTl^GaiaalaelullGlluL^GseluΓ^Gsa^|l^reo^CGO^eGi^Llu^CG^pHSi

PosliulⁱueIula^lLlu^Llul^lGHSi^rI0^Llu^llG^IlI⁰o^sCoG^{aiaPosLlurlorro}

CGsPosSroliGalleluliGelualaliGCGseluSloTlGLIuHSirIoTlGLIuPel eluCGOllGliGLluLluliGallLlulluliGIllSro0oslluLIUllGPosCeoLlu aspr^eo^Lrul^lnUru.^GP^Gaa^ll|a^GP^Gpel^Gla^Γceo^ceo^IlrCoP^TlnllnMrt^lluG|u

LlUliGMltall0osAlleIullGPos

Przykład 51

Konstrukcja pMON13180, pośredniego plazmidu stosowanego do konstruowania plazmidów, które zawierają sekwencję DNA, kodującą agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych.

Plazmidowe DNA pMON13046 (WO 95/21254) trawiono endonukleazami restrykcyjnymi XmaI i SnaBI, otrzymując fragment wektora o 4018 parach zasad. Fragment XmaISnaBI o 4018 parach zasad oczyszczono przy użyciu zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI), w którym insert XmaI-SnaBI o 25 parach zasad nie utrzymuje się. Komplementarną parę syntetycznych oligonukleotydów glyxal (SEQ ID nr: 74) i glyxa2 (SEQ ID nr: 75) zaplanowano tak, aby usunąć sekwencje, kodującą miejsce rozszczepu czynnika Xa. Po prawidłowym zmontowaniu te oligonukleotydy także dały końce XmaI i SnaBI. Primery Glyxa1 i glyxa2 poddano hybrydyzacji w buforze do hybrydyzacji (20 mM Tris-HCl pH 7,5, 10 mM MgCh, 50 mM NaCl), przez ogrzewanie w temperaturze 70°C przez dziesięć minut i pozostawieniu do powolnego ochłodzenia. Fragment XmaI-SnaBI o 4018 parach zasad z pMON13046 poddano ligacji ze zmontowanymi oligonukleotydami, przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny reakcji ligacji użyto do transformowania komórek DH5« szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano z transformantów i analizowano przy użyciu oznaczenia opartego na PCR. DNA plazmidu z wybranych transformantów sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłową insercję oligonukleotydów. Otrzymany plazmid oznaczono pMON13180 i zawiera on sekwencję DNA o (SEQ ID nr: **).

Przykład 52

Konstrukcja pMON13181, pośredniego plazmidu stosowanego do konstruowania plazmidów, które zawierają sekwencję DNA, kodującą agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych.

Plazmidowe DNA pMON13047 (WO 95/21254) trawiono endonukleazami restrykcyjnymi XmaI i SnaBI, otrzymując fragment wektora o 4018 parach zasad. Fragment XmaISnaBI o 4018 parach zasad oczyszczono przy użyciu zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI), w którym insert XmaI-SnaBI o 25 parach zasad nie utrzymuje się. Komplementarną parę syntetycznych oligonukleotydów glyxal (SEQ ID nr: 74) i glyxa2 (SEQ ID nr: 75) zaplanowano tak, aby usunąć sekwencje, kodującą miejsce rozszczepienia czynnika Xa. Po prawidłowym zmontowaniu oligonukleotydy te także dały końce XmaI i SnaBI. Primery Glyxa1 i glyxa2 poddano hybrydyzacji w buforze do hybrydyzacji przez ogrzewanie w temperaturze 70°C przez dziesięć minut i pozostawieniu do powolnego ochłodzenia. Fragment XmaI-SnaBI o 4018 parach zasad zpMON13047 poddano ligacji ze zmon138

184 424 towanymi oligonukleotydami, przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny reakcji ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Lite Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano z transformantów i analizowano przy użyciu oznaczenia opartego na PCR. DNA plazmidu z wybranych transformantów sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłową insercję oligonukleotydów. Otrzymany plazmid oznaczono pMON13181 i zawiera on sekwencję DNA o (SEQ ID nr: **).

Przykład 53

Konstrukcja pMON 13182

Utworzono gen wpMON13182 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu I jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono fragment Start i powielono z sekwencji G-CSF Ser¹⁷ wpMON13037, stosując zbiór primerów 39 start (SEQ ID nr: 64) i L-11 start (SEQ ID nr: 60). Utworzono fragment Stop i powielono z sekwencji g-CSF Ser¹7 w pMON13037, stosując zbiór primerów, 38 stop (SEQ ID nr: 65) i L-11 stop (SEQ ID nr: 61). Utworzono gen o pełnej długości G-CSF Ser 7 nowym końcem N/końcem C i powielono z hybrydyzowanych fragmentów Start i Stop, stosując primery 39 start i 38 stop.

Otrzymany fragment DNA, który zawiera nowy gen, trawiono endonukleazami restrykcyjnymi NcoI i HindIII i oczyszczono z użyciem zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Oczyszczone fragmenty restrykcyjne połączono i poddano ligacji przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny reakcji ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano z transformantów i sekwencjonowano aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON13182.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON13182 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMON13182 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 94), która koduje nastę-

pującą sekwencję aminokwasową:

Asn

Cys

Sio

lii

Mit

lio

Asp

Giu

Ili

Ili

Oii

Oii

Oiu

Lys

log

Poo

Poo

Ala

Poo

Leu

Leu

Asp

Pro

Csn

Asn

Leu

Csn

Asp

llu

Asp

Va1

Sio

1li

Liu

Met

Asp

Arg

Asn

Liu

Arg

Liu

Opo

Acn

Ltu

llu

Sio

Phi

Vai

log

Ala

Val

Lys

Asn

Liu

Glu

Asn

(Cla

Osr

lly

Ili

llu

Cla

Ili

Liu

Arg

Asn

Leu

Gin

Poo

Ccs

Liu

Opo

Osr

Ala

Tho

Cla

Ala

Poo

Sio

Arg

Hio

Pro

Ile

Ili

Ili

Oys

Ola

Gly

Asp

Top

lln

llu

Phe

leg

Glu

Lys

Liu

Thr

Phi

Tł^r

Liu

OV1

OTr

Iru

llu

lln

A1i

Gin

llu

Gln

(Sin

Tyr

Val

llu

Gly

Gly

Gili

Gly

Sto

Poo

lly

lly

Gly-

Sio

Gly

Gly

Gin:

Osr

Asn

Met

(Ai

Ocr

Oys

Ltu

Cys

iis

Pro

Glu

llu

Leu

Val

Leu

Leu

lly

Hii

Osr

Olu

Gly

Iii

Poo

Top

Cla

Pro

Liu

Sio

Ser

Cyj

Oro

Sio

Gin

Ali

Giu

Oii

Iru

Ala

lly

Cys

Leu

Sio

(Sin

Leu

His

Her

lly

Llu

OPe

Giu

Oys

lln

lly

Liu

Liu

Gin

Cli

Liu

(Siu

Gin:

Oli

Sio

Poo

Oll

Oiu

Oly

Poo

Tho

Liu

Asp

Thr

Liu

(Sin

Leu

Asp

Val.

Gla

Aip

OPi

Ola

OTr

Tho

Ili

Top

lln

Gin

Mit

llu

(Siu

Liu

Oli

Mit

(Ai

Opo

Ali

Oii

lln

Poo

Cho

lln

Gly

Cla

Met

Pro

Ala

OPe

C1i

Set

(Gla

GPe

Oli

(Aog

Cog

Cla

lly

Gin:

Va1

Liu

vai

Ali

Her

iis

Liu

Oli

Osi

OPe

Iru

Glu

Vi1

Sio

Tyr

log

Vai

Leu

Arg

Oii

Liu

(Ai

Oli

Ooo

Her

lly

lly

Sio

lly

Gin:

Sio

lin

Sio

PPa

Olu

Liu

Lys

Osi

Oii

Oli

Gln

Va1

Cog

Lys

Ile

lln

lly

Asp

Gly-

(Ai

Cla

Lit

Oil

Olu

Oys

Ltu

Cys

ALa

Cho

(SEQ ID

No:166)

Przykład 54

Konstrukcja pMON 13183

Utworzono gen wpMON13183 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu I jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono „Fragment Start” i powielono z sekwencji G-CSF Serⁿ wpMON13037, stosując zbiór primerów 39 start (SEQ ID nr: 64) i L-11 start (SEQ ID nr: 60). Utworzono fragment Stop i powielono z sekwencji g-CSF Ser w pMON13037, stosując zbiór primerów, 38 stop (SEQ ID nr: 65) i L-11 stop (SEQ ID nr: 61). Utworzono gen o pełnej długości G-CSF Ser 7 nowym końcem N/końcem C i powielono

184 424

139 z ho'btyko''zcwanoah fragmentów Start i Stop, stosując 39 start i 38 stop.

Otrzymany fragment DNA, który zawiera nowy gen, trawiono endonukleazami restrykcyjnymi NcoI i HindIII i oczyszczono z użyciem zestawu Magie DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Pośredni plazmid pMON13181 trawiono endonukleazami restrykcyjnymi HindIII i AfIIII otrzymując fragment wektora o 4068 parach zasad i oczyszczono zużyciem zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Oczyszczone fragmenty restrykcyjne połączono i poddano ligacji przy użyciu ligazy DNA T4 (Bcehringet Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny reakcji ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano z transforma^ów i sekwencjcncwano aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMOiN13183.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON13183 w celu ekspresji białka izolacji białka z ciał inWazyjnych.

Plazmid pMON13183 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 95), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

Gsn

Cys

Ser

IIi

Met

Ile

Gsp

Glu

Ile

IIe

His

His

Leu

Lls

Arg

Pro

Poo

Ala

Piso

Leu

Leu

Asp

Pro

Csn

Am

Leu

Csn

Asp

du

Asp

Val

Ser

Ile

Leu

Met

Asp

Gog

Asn

Lru

Arg

Leu

Pro

Asn

Leu

Glu

Ser

Phe

Val

Arg

Gla

Val

Lys

Asn

Lru

Glu

Asn

CUi

Sei

dy

Ile

Glu

Gla

Ile

Llu

Arg

Asn

Leu

Gln

Poo

Cys

Leu

Pro

Ser

Ale

Tho

CUi

Gla

Poo

SSr

Arg

His

Pro

Ile

Ilr

IIe

Lys

CUa

Gly

A^s>

Top

Gln

Glu

Phe

Ais oj

Glu

Lys

Lru

Thr

Phr

Tyy

Leu

Val

Thr

Llu

Glu

Gln

CUi

Gln

Glu

Gin

Gln

Tyo

Val

Glu

dy

Gly

Gly

Gly

SSr

Pro

Gly

Glu

Pro

SSr

Gly

Pro

Ile

Ser

Tho

IIe

Asn

Pro

Ser

Ppo

Pro

Ser

Lys

Glu

SSr

His

Lys

Sro

Piso

Asn

MmU

Ala

Tyo

Lyi

Llu

Cys

His

Poo

Glu

du

Leu

Val

Leu

Leu

Gly

HHi

Ser

Lru

Clly

IIi

Pro

Top

Gla

Pro

Leu

Ser

Ser

Cys

Piso

Ser

dn

Ala

Leu

Gln

Lee

Ala

Gly

Cys

Leu

SSr

Gln

Leu

His

Ser

Gly

Leu

Phe

Leu

Tyss

di

Gly

Leu

Leu

Gln

Ala

Leu

Glu

Gly

Hii

Sro

Ppo

Glu

Lru

Gly

Ppo

Tho

Leu

Asp

Thr

Lee

Gln

Leu

Gsp

Val

Gla

Aip

Phe

Gia

Thr

TTh

Ilr

Top

Gln

Gln

łMU

Glu

Glu

Lru

Gli/

Mrt

Ali

Pro

Gla

Leu

GGn

Pro

Tho

Gln

Gly

Ale

Met

Pro

Gla

PPe

Ala

SSe

Ala

Phe

Gln

Arg

Arg

Ala

Gly

Gly

w i

Leu

Val

Gia

SSr

His

Leu

Gln

Ser

PhA

Lee

Glu

Vi1

Ser

Tyo

Ais oj

Vi1

Leu

Aog

Hii

Leu

Ale

GGi

Pro

Ser

dy

dy

Ser

Gly

Gly

SSe

Gin

SSr

Phe

Leu

Leu

Lyy

Ser

Lru

Glu

di

Val

Aog

Lys

Ile

di

Gly

Aip

Gly

Ali

Ala

Llu

Aln

Glu

LyS

Leu

Ays

Gla

Tho

(SEQ II

No:167)

Przykład 55

Konstrukcj a pMON 13184

Utworzono gen w pMON13184 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu I jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono fragment Start i powielono z sekwencji G-CSF Ser wpMON13037, stosując zbiór primerón 97 start (SEQ ID nr: 66) i L-11 start (SEQ ID nr: 60). Utworzono fragment Stop i powielono z sekwencji g-CSF Ser’ w pMON13037, stosując zbiór primerów, 96 stop (SEQ ID nr: 61) i L-11 stop (SEQ ID nr: 61). Utworzono gen o pełnej długości G-CSF Ser’⁷ nowym końcem N/końcem C i powielono z hybrokyzowanych fragmentów Start i Stop, stosując 97 start i 96 stop.

Otrzymany fragment DNA, który zawiera nowy gen, trawiono endonukleazami restrykcyjnymi NcoI i HindIII i oczyszczono z użyciem zestawu Magie DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Pośredni plazmid pMON13180 trawiono endonukleazami restrykcyjnymi HindIII i AflIII otrzymując fragment wektora o 4023 parach zasad i oczyszczono z użyciem zestawu Magie DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Oczyszczone fragmenty restrykcyjne połączono i poddano ligacji przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer

140

184 424

Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny reakcji ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON13184.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON13184 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMON13184 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 96), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

Asn

Tys

Slo

Ile,

Mut

Ile

Asp

Alu

Ile

IlL

Hhs

His

Llu

Lys

Clrg

Poo

Poo

TAL ii

Pro

e,u

Luu

Asp

Poo

Asn

Asn

Luu

Asn

Asp

Glu

Ans

Vil

Emo

11,

Limu

Met

Asp

(og

Ass

Leu

Aog

Leu

Pro

Ass

Leu

GAu

Emo

Phu

Va1

Arg

Ali

Vć^l

Lys

Asn

Leu

Alu

Asn

Ala

Euo

GAer

lll

Alu

Ali

IlL

Leu

Arg

Asn

Luu

(ls

Pro

Tys

Leu

Pro

Eur

Ala

Thr

Ali

Ali

Pro

Ser

Aog

HHs

Poo

IlL

Ile

IlL

Lus

Ala

Cly

Asp

Trp

Cln

Alu

pe,

Arg

Alu

Lys

L,u

ero

Phe

Cyo

Leu

Val

Thr

Leu

GAu

Cln

Ali

Gln

Glu

Cln

GAn

Cyo

Vi1

Glu

A1r

Gly

Gly

Cly

Ser

Poo

Cly

Cly

Gly

Ser

Cly

Gly

Cly

Euo

Asn

Mut

TALa

Pro

Clu

Leu

Gly

Poo

rro

Leu

Asp

Gho

Luu

(ls

Luu

Asp

Vi1

Ala

Asp

Phe

TALa

Thr

rro

llL

Trp

Gln

Als

Met

Alu

Alu

Leu

Cly

Me,

Ali

Pro

TALa

Leu

Cln

Poo

Thr

Gln

Cly

TALa

Mut

Poo

TALa

Phe

Ala

Ser

Ali

Phe

GAu

Aog

Aog

Ala

Gly

Cly

Val

L,u

Va1

Ala

Emo

Hhs

Leu

Cls

Ser

PPe

Leu

Alu

Val

Ser

Cyo

Arg

Vi1

Leu

TAog

His

Luu

Ala

(ls

Pro

Se,

Cly

Cly

Seo

Gly

Cly

Sel

Cln

Emo

Phe

Leu

Leu

Lys

Eur

Leu

Glu

Cln

Vi1

Arg

Lys

llL

GAu

czy

Asp

Gly

Ali

ACl

Leu

(ln

Glu

Lus

Leu

Tys

Ala

Tho

tyi

Lus

L,u

Tys

H.hs

Poo

GAu

Glu

LUU

Val

Luu

Leu

Cly

His

Ser

Llu

Gly

Ile

Poo

Trp

Ali

Poo

Leu

Euo

Ser

Cts

Poo

Emo

Gln

Ala

Ulu

GAe

L,u

Ali

Gly

Tys

Luu

Ser

Cls

Leu

HHs

Emo

Cly

Leu

PPee

Leu

Ter

Cln

(lr

veu

Leu

Gln

Ala

Luu

GAu

Gly

IlL

Emo

(SEQ ID

No:168)

Przykład 56

Konstrukcja pMON 13185

Utworzono gen wpMON13185 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu I jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono fragment Start i powielono z sekwencji G-CSF Ser¹⁷ wpMON13037, stosując zbiór primerów 97 start (SEQ ID nr: 66) i L-11 start (SEQ ID nr: 60). Utworzono fragment Stop i powielono z sekwencji g-CSF Ser¹7 w pMON13037, stosując zbiór primerów, 96 stop (SEQ ID nr: 61) i L-11 stop (SEQ ID nr: 61). Utworzono gen o pełnej długości G-CSF Ser nowym końcem N/końcem C i powielono z hybrydyzowanych fragmentów Start i Stop, stosując 97 start i 96 stop.

Otrzymany fragment DNA, który zawiera nowy gen, trawiono endonukleazami restrykcyjnymi NcoI i HindIII i oczyszczono z użyciem zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Pośredni plazmid pMON13181 trawiono endonukleazami restrykcyjnymi HindIII i AflIII, otrzymując fragment wektora o 4068 parach zasad i oczyszczono z użyciem zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Oczyszczone fragmenty restrykcyjne połączono i poddano ligacji przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny reakcji ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON13185.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON13185 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

184 424

141

Plazmid pMON13185 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 67), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

Tsn Ass

Sur

Ile Mut

Ile Tsp Glu

Dlu

Ile

His

His

Luu Lpc Arg

Pro

Pro

Ali

Pro

Uuu

Leu

Asp

Pro

Tsn

Asn

Leu

Asn

Asp

Glu

Tsp

VII

Sur

Dlu

Leu

Met

Asp

Arg

Ass

euu

Arg

Leu

Pro

Ann

Lec

Ulu

Sur

Phu

Vll

Arg

Tli

Val

Lys

Ass

euu

Glu

Asn

Ali

Ser

Gly

Dlu

Clu

Tli

Ilu

Leu

Arg

TTm

Leu

Uln

Pro

Cys

Leu

Pro

Sur

Ala

Thr

Tli

Tli

Pro

Srr

Arg

His

Pro

Dlu

Dlu

Dle

Lys

Al a

CU'

Asp

Crp

Gln

Ulu

Piu

Arg

Clu

Lys

Leu

Tir

Phe

T'O

Leu

Val

Tir

Ueu

Glu

Cln

Tla

Gln

Glu

Uln

Cln

Tyr

Vżćll

Ulu

uly

Gly

Gly

Ul'

Ser

Pro

Gly

Clu

Pro

Ssr

Cl'

Pro

Tle

Sur

Tir

Dle

Asn

Pro

Sur

Pro

Pro

Sur

U'?

Glu

Ssr

His

Lys

Ser

Pro

Tsn

Mut

Ala

Pro

Clu

Leu

Ul'

Pro

Tir

Luu

TTp

Tir

Leu

Gln

euu

Asp

Val

ATui

Asp

Piu

Ala

Thr

Tir

Dle

Top

Glu

Cln

Met

Glu

Clu

euu

Gly

Met

Ma

Pro

Ma

Ueu

Gln

Pro

Tir

Gln

Cl'

Ma

Met

Pro

Ala

Phu

Ma

Ser

Ali

Phe

Gln

Arg

Arg

Ali

Gly

Cl'

Val

Leu

Vil

Tla

Sur

His

Leu

Cln

Ser

Piu

Uuu

Ulu

Vil

Ssr

T'O

Arg

Val

Uuu

Arg

His

Leu

Ma

Uln

Pro

Sur

Uly

Uly

Sur

Gly

Cl'

Ser

Gln

Ser

Pie

Ueu

Leu

Lys

Ser

Leu

Giu

Uln

VII

Arg

Les

Dlu

Gln

Gly

Tsp

Gly

Ala

Ala

Leu

Gin

Glu

L'S

euu

Ays

Ala

Thr

T'O

Lys

Leu

Gys

His

Pro

Glu

Glu

Ueu

Val

Uuu

euu

Cis

His

Sse

euu

Gly

TDe

Pro

Top

Ala

Paro

Leu

Sur

Ser

Cys

Pro

Sur

Gln

Alu

euu

Gln

Leu

Ala

Ul'

Cys

Leu

Ser

Gin

Leu

His

Sur

Cl'

Luu

Phe

euu

Tyr

Gln

Ul'

Luu

euu

Glu

Alei

euu

Ulu

Gly

Dlu

Sur

(SEQ DD

rr:169)

Przykład 57

Konstrukcja pMON 13186

Utworzono gen w pMON13186 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu I jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono fragment Start i powielono z sekwencji G-CSF Ser¹⁷ wpMON13037, stosując zbiór primerów 126 start (SEQ ID nr: 68) i L-11 start (SEQ ID nr: 60). Utworzono fragment Stop i powielono z sekwencji g-CSF Serⁿ w pMON13037, stosując zbiór primerów, 125 stop (SeQ ID nr: 69) i L-11 stop (SEQ ID nr: 61). Utworzono gen o pełnej długości G-CSF Ser¹⁷ nowym końcem N/końcem C i powielono z hybrydyzowanych fragmentów Start i Stop, stosując 126 start i 125 stop.

Otrzymany fragment DNA, który zawiera nowy gen, trawiono endonukleazami restrykcyjnymi NcoI i HindIII i oczyszczono z użyciem zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Pośredni plazmid pMON13180 trawiono endonukleazami restrykcyjnymi HindIII i AflIH, otrzymując fragment wektora o 4023 parach zasad i oczyszczono z użyciem zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Oczyszczone fragmenty restrykcyjne połączono i poddano ligacji przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny reakcji ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON13186.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON13186 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMON13186 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 98), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

142

184 424

as.

Cys

Ser

Ile

Mit

IIi

ca>p

Glu

IIi

Ile

Sis

SSi

Leu

Lys

Gorg

Pos

Pos

Ala

Pro

Uru

Lee

Asp

Pro

Asn

Asn

Liu

asn

Gsp

Glu

Asp

aal

Sio

Ile

Leu

Mrt

Asp

CGrg

Asn

Leu

log

Liu

Pos

Asn

Liu

Glu

Sio

Phi

VćV

Arg

Gla

vaa

L-G

Asn

Leu

Glu

Gin

Gla

Ser

Gly

Iii

llu

Gla

Ile

Leu

log

-Gsn

Leu

Gln

Ppo

Cys

Liu

Pos

Sei

Ala

Τ1ο

lia

lia

PhO

Ser

Gog

HSi

log

lle

IIi

lle

Lys

Gla

Gly

Asp

hop

TlG

llu

Phe

Arg

llu

L-G

Leu

Thr

ΡΡθ

Tyo

Lru

aal

Thr

Leu

Tlu

liG

Gla

Gln

Glu

lln

Gil

PpS

Val

Glu

Gly

Tir

cir

Gly

Ser

Pos

cir

Cly

Gly

Ser

cir

Gl^y

Gly

Ser

lln

Mit

Gla

Mit

Ala

Pro

Gla

Llu

liG

Ppo

Thr

lln

Gly

AGu

Met

Ppo

Ala

Phr

Gla

Ser

Ala

Phir

liG

log

Arg

Ala

cir

Gly

Vi1

Leu

lH

Ala

Sio

Sis

Leu

Gin

Sio

Phi

Liu

Glu

Val

Sio

Tyr

iir

Val

Leu

Arg

Sis

Liu

Ala

Gln

Pos

Sio

cir

Gly

Ser

cir

Gly

Ssi

Gln

Sn

Phe

Lru

Liu

:()/1

Ser

Liu

llu

liu

Vi1

1Sog

Lys

IIe

lle

Gly

Asp

Gly

Ala

Gla

Leu

Gln

llu

Lys

Liu

Cys

Ala

Cho

T(/r

L-G

Leu

Ccr

His

Pos

liu

Glu

Leu

aal

Liu

Liu

Gly

PSi

Sio

Lee

ile

lle

Ppo

Trp

Gla

Pos

Leu

Ser

Sio

Cys

Pos

Ser

Gln

.Gla

Leu

Gln

Leu

Ala

Gly

Crs

Liu

Ser

Gln

Liu

Sis

Sio

Gly

Leu

Phi

Leu

ipr

Gln

Gly

Leu

Liu

liu

Gua

Leu

llu

ilr

Ili

Ssr

Pro

llu

Leu

Gl|

Pro

Thr

Liu

Gsp

Cho

Leu

Gln

Liu

asp

aal

Ma

Asp

Phi

ASa

ΗΤτ

Thr

IIi

Trp

liu

liu

Met

Glu

liu

Liu

cir

(SEQ ID

No:170)

Przykład 58

Konstrukcja pMON 13187

Utworzono gen w pMON13187 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu I jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono fragment Start i powielono z sekwencji G-CSF Ser^ wpMON13037, stosując zbiór primerów 126 start (SEQ ID nr: 68) i L-11 start (SEQ ID nr: 60). Utworzono fragment Stop i powielono z sekwencji g-CSF Se?7 w pMON13037, stosując zbiór primerów, 125 stop (SEQ ID nr: 69) i L-11 stop (SEQ ID nr: 61). Utworzono gen o pełnej długości G-CSF Ser!⁷ nowym końcem N/końcem C i powielono z hybrydyzowanych fragmentów Start i Stop, stosując 126 start i 125 stop.

Otrzymany fragment DNA, który zawiera nowy gen, trawiono endonukleazami restrykcyjnymi NcoI i HindIII i oczyszczono z użyciem zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Pośredni plazmid pMON13181 trawiono endonukleazami restrykcyjnymi HindIII i AflIII, otrzymując fragment wektora o 4068 parach zasad i oczyszczono z użyciem zestawu Magie DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Oczyszczone fragmenty restrykcyjne połączono i poddano ligacji przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny reakcji ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON13187.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON13187 w celu ekspresji białka izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMON13187 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 99), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

184 424

143

Asn

Cys

Sui

Ile

Met

Iii

Glsp

Glu

Ole

lit

His

His

Leu

Lys

Arg

Ono

Ono

Ala

Pro

Ltu

Luu

Asp

Poo

Acn

Olsn

Leu

Asn

Asp

Glu

Asp

Val

Sen

lit

Leu

Met

Acp

OCrg

Asn

Luu

(Arg

Leu

Ono

Asn

Leu

Ulu

Se;

ort

Val

Arg

Ala

wi

Lys

Aen

Llu

Glu

Asn

OCla

Ser

Gly

lit

Ulu

Ala

lit

Leu

Arg

Aen

Uuu

Gln

P37O

Tys

Leu

Ono

Se;

Ala

Th;

Ala

Ala

Pio

Ser

Arg

HHi

Oio

Ili

Oli

lit

Lys

OCla

Gly

0A5p

Cip

Uln

Ulu

ort

Ang

Ulu

Lys

Ltu

TCr

Ghe

Cyn

Leu

lal

Thn

Leu

Ulu

Uln

Ala

Gln

Glu

Tin

Gln

Cyn

Val

Glu

Uiy

Gly

Tly

GCy

Ser

Oio

uiy

Ulu

Ono

Ser

Tly

Poi

lit

Ssr

Thr

ile

Asn

Ono

Sen

Pro

Oho

Sen

Lys

Glu

Ser

His

Luu

San

Pro

Gen

(Met

Ala

Mtt

Ala

Poo

Ala

Ueu

Uln

Ono

Thn

Uln

Gly

Ala

Met

Pro

Ala

Phe

Ala

Sei

Ala

Ohe

Uln

Ang

Arg

Ala

Tly

Gly

Val

Lut

Lć^I.

Ala

Ser

His

Leu

Gln

Stn

ort

Ltu

Glu

Val

Stn

Tcs

Ang

Val

Luju

Ang

His

Utu

Ala

Gln

Oro

Sen

Tly

Gly

Ser

uir

Gly

Stn

Gln

Ger

Oht

Leu

Utu

Lys

Ssr

Ltu

Ulu

Uln

Val

Ang

Lys

Ile

Tin

Gly

0A>p

Tly

Ala

Ala

Leu

Gln

Ulu

Uys

Uuu

Cys

Ala

cri

Tcr

Lys

Luu

Gys

His

Pro

Ulu

Gln

Llu

lal

Ltu

Ltu

Gly

His

Sui

Luu

Tly

Iie:

Pro

Trp

Ala

Ono

Leu

Ser

Stn

Cys

Ono

Sen

Gln

Ala

Llu

lln

Llu

AC a

Tly

Cys

Utu

Ser

Gln

Ltu

His

Sun

Gly

Leu

ort

Llu

Cyn

Gln

Gly

Utu

Leu

Uln

Ala

Leu

Glu

uiy

lit

Sen

Pro

Ulu

Llu

Gly

Pro

HCr

Utu

Asp

Thn

Leu

Gla

Ltu

Asp

lal

Ala

Asp

ort

AAa

crn

Thr

Ole

Cop

Gln

Uln

Met

Glu

Ulu

Ltu

uir

(SEQ lD

η:Γ71)

Przykład 59

Konstrukcja pMON 13188

Utworzono gen w pMON13188 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu I jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono fragment Start i powielono z sekwencji G-CSF Se?⁷ w pMON13037, stosując zbiór primerów 133 start (SEQ ID nr: 70) i L-11 start (SEQ ID nr: 60). Utworzono fragment Stop i powielono z sekwencji g-CSF Serⁿ wpMON13037, stosując zbiór primerów, 132 stop (SEQ ID nr: 71) i L-11 stop (SEQ ID nr: 61). Utworzono gen o pełnej długości G-CSF Se?⁷ nowym końcem N/końcem C i powielono z hybrydyzowanych fragmentów Start i Stop, stosując 133 start i 132 stop.

Otrzymany fragment DNA, który zawiera nowy gen, trawiono endonukleazami restrykcyjnymi NcoI i HindIII i oczyszczono z użyciem zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Pośredni plazmid pMON13180 trawiono endonukleazami restrykcyjnymi HindIII i AflIII, otrzymując fragment wektora o 4023 parach zasad i oczyszczono zmyciem zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Oczyszczone fragmenty restrykcyjne połączono i poddano ligacji przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny reakcji ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON13188.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON13188 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMON13188 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 100), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

144

184 424

Asn

Gys

Sito

Ile

Mit

Ili

Asp

llu

IIa

lii

Hii

iis

Leu

Lyr

log

Poo

Poo

Ala

Pro

Liu

Llu

Asp

Poo

Acn

Asn

Leu

Asn

Asp

Glu

Asp

Vi1

Sio

1li

Leu

Mit

Asy

Arg

Asn

Lee

Arg

Leu

Poo

Asn

Leu

liu

Sio

Phi

Val

Arg

Ala

V'1

rys

Asn

Leu

liu

Asn

All

Ser

Gly:

lii

liu

Ala

Iii

Leu

log

Lcn

Leu

lin

Poo

Gys

Leu

Poo

Ser

Ala

Cho

Ala

Ala

Pro

Ser

Aog

Hii

Oro

lii

IIa

Ili

Lys

All

Gly

Asp

Top

lln

llu

Phi

Aog

liu

Lys

Leu

Tho

Phe

Tyo

Leu

Vil

Thr

Llu

liu

lln

Ala

Gln

Glu

lln

Gln

Tyr

Vli

Gln

lly

Gly

lly

Gly

Ser

Poo

lly

lly

Gly

Ser

lly

Gly?

Gly

Sio

Am

Mit

Ala

Tho

Gln

Gly

Okli

Mit

Poo

Ala

Phe

Gla

Set:

(Ala

Phi

Glin

log

Arg

Ala

Gly

Gly:

Vi1

Iru

Vai

Ala

Ser

iis

Lee

Gili

Sio

Phe

Iiu

Glu

Vil

Ser

Tyr

log

Vai

Iiu

Arg

His

Liu

Ala

Gln

Poo

Ssr

lly

Gly

Sio

Gly

Gly

Sio

lin

Sio

Phe

Leu

Iiu

Lys

Osr

Iru

Glu

lin

Val

Aeg

Lys

Ile

lin

lly

Asp

Gly

Ala

Gla

Llu

Gln

llu

Lys

Iru

Cys

All

Thr

Tyr

Lys

Iru

Gys

His

Pro

llu

Glu

Leu

Vli

Llu

Iiu

Gfy

iis

Ser

Leu

lly

lii

Poo

Trp

Ala

Poo

Llu

Ser

Sio

Ccs

Poo

Ser

lln

Ala

Leu

lln

Iru

Ala

Gly

Cys

Iiu

Ser

Gln

Iiu

His

Sie

Gly

Iiu

Phe

Llu

Tyo

lln

lly

Leu

Leu

lln

Ala

Leu

llu

Gly

lir

Ser

Poo

Giu

Leu

lly

Poo

Cho

Leu

Asp

Cho

Llu

Gln

Iru

Asy

Vil

Ala

Asp

Phe

(A. a

Cho

Cho

Ili

Trp

Gln

iln

Mel

Glu

llu

Llu

lly

Met

Ali

Pro

Ala

Liu

lln Poo (SEQ ID Nr::l74)

Przykład 60

Konstrukcja pMON 13189

Utworzono gen w pMON 13189 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu I jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono fragment Start i powielono z sekwencji G-CSF Serⁿ wpMON13037, stosując zbiór primerów 133 start (SEQ ID nr: 70) i L-11 start (SEQ ID nr: 60). Utworzono fragment Stop i powielono z sekwencji g-CSF Serⁿ w pMON13037, stosując zbiór primerów, 132 stop (SeQ ID nr: 71) i L-11 stop (SEQ ID nr: 61). Utworzono gen o pełnej długości G-CSF Se?⁷ nowym końcem N/końcem C i powielono z hybrydyzowanych fragmentów Start i Stop, stosując 133 start i 132 stop.

Otrzymany fragment DNA, który zawiera nowy gen, trawiono endonukleazami restrykcyjnymi NcoI i HindIII i oczyszczono z użyciem zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Pośredni plazmid pMON13181 trawiono endonukleazami restrykcyjnymi HindIII i AflIII, otrzymując fragment wektora o 4068 parach zasad i oczyszczono z użyciem zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Oczyszczone fragmenty restrykcyjne połączono i poddano ligacji przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny reakcji ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON13189.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON13189 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMON13189 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 101), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

184 424

145

Asn

C/s

Ser

Ile

Met

ie

Asp

llu

IIe

Ile

His

Hii

Leu

Lys

log

Poo

Poo

Ala

Pro

Leu

Leu

Aip

Poo

Jln

isn

Leu

Ais

Asp

Glu

Asp

Val

Seo

Ile

Leu

Met

Asp

Ar cg

Csn

Leu

Aog

Leu

PPO

isn

Leu

Clu

Seo

Phe

VaJL

Arg

Ala

Wl

Lys

isn

Llu

llu

Asn

Ala

Seo

Gly

Ile

Clu

Ala

Ile

Leu

Gog

Asn

Leu

Cln

Ppo

C/s

Leu

Ppo

Seo

ALa

Tho

Ala

Ala

Pro

Ser

log

Hss

Ppo

Ile

IIe

Ile

Lys

ALi

Ci/

Asp

Top

Cln

Clu

Phe

Arg

Clu

Lys

Leu

Ώιο

PPh

T/o

Leu

Val

Tho

Leu

Glu

Cln

Ala

Glin

Glu

Cln

Gln

Tyr

Val

Glu

Cl/

Gly

G1L|-

Ci/

Ssr

Poo

Cl/

Clu

Pro

Ser

Cl/

Pro

Uli

Seo

Thr

Ile

Asn

PhO

Seo

Pro

Poo

Seo

L/s

Gla

Ser

iis

Lys

Ssto

Poo

Hn

Met

Ala

TTr

lin

Gly

lla

Met

Poo

Ala

Phe

Ala

Ser

Ala

Phe

Gln

log

Arg

Ala

Gl/

Gly

aal

Leu

Val

Ali

Ser

iis

ltu,

Gln

Sto

PPh;

Ltu

Glu

wi

Sto

Tyr

log

Val

Leu

Arg

His

Leu

ClLa

Gln

Poo

Ssr

li/

Gly

Ssr

Cl/

Gly

Seo

lin

Sto

Phe

Leu

Ltu

Lys

Ssr

Ltu

Glu

Cln

Wl

Arg

L/s

IIe

Cln

Cl/

Asp

Gly

Ala

Ala

Leu

Gla

Clu

Lys

Leu

Cys

Ala

Tho

Tyr

L/s

Leu

C/s

Hii

Pro

Clu

Glu

Llu

Vai

Llu

Leu

Gly

HHs

Seo

Leu

li/

Ile

Poo

Tir-)

Ala

Poo

Leu

Ser

Seo

CC/

Poo

Ser

Gln

Ala

Leu

Gln

Leu

Ala

Gly

Sy/

Ltu

Ser

Gln

Ltu

Hhs

Sto

Gly

Llu

Phe

Leu

T/o

Cln

Ci/

Leu

Leu

Gln

Ala

Leu

Clu

Gly

Ile

Ser

Pro

Clu

Leu

yir

Poo

Tho

Llu

Asp

Tho

Leu

Gla

Ltu

Ais

Wl

Ala

Ais

Phe

Ala

Tho

Tho

Ile

Ttop

Cln

Gln

Me t

Glu

llu

Leu

li/

Met

ALa

Poo

Ala

Leu

lin

Poo

(SEQ ID

^:173)

Przykład 61

Konstrukcja pMON 13190

Utworzono gen w pMON13190 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu I jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono fragment Start i powielono z sekwencji G-CSF Ser¹⁷ wpMON13037, stosując zbiór primerów 142 start (SEQ ID nr: 72) i L-11 start (SEQ ID nr: 60). Utworzono fragment Stop i powielono z sekwencji g-CSF Serⁿ w pMON13037, stosując zbiór primerów, 141 stop (SEQ ID nr: 73) i L-11 stop (SEQ ID nr: 61). Utworzono gen o pełnej długości G-CSF Ser¹⁷ nowym końcem N/końcem C i powielono z hybrydyzowanych fragmentów Start i Stop, stosując 142 start i 141 stop.

Otrzymany fragment DNA, który zawiera nowy gen, trawiono endonukleazami restrykcyjnymi NcoI i HindIII i oczyszczono z użyciem zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Pośredni plazmid pMON13180 trawiono endonukleazami restrykcyjnymi HindIII i AflIII, otrzymując fragment wektora o 4023 parach zasad i oczyszczono zużyciem zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Oczyszczone fragmenty restrykcyjne połączono i poddano ligacji przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny’reakcji ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON13190.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON13190 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMON13190 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr:. 102), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

146

184 424

Csn

Cys

Ssu

Ile

Met

IIe

Asp

Glu

IIe

Ile

His

His

Leu

Lys

(Org

Poo

Pro

Ale

A ro

Lru

Leu

Asp

Piso

Acn

Asn

Leu

Asn

Asp

Glu

Asp

Vil

Sro

IIi

Leu

Met

A^s>

Arg

Asn

Leu

Arg

Leu

Pro

Asn

Lru

Glu

Seo

Phr

wi

Arg

Cli

wi

Lys

Am

Leu

Glu

Csn

AL a

Ser

Gly

Ile

Glu

Ala

IIe

Litu

log

Acn

Leu

Gln

Ppo

Cys

Leu

Pro

Ser

Ala

Thr

Ala

CUl

Ppo

I sr

Gog

ds

Pro

IIe

IIe

IIe

Lys

(Ula

Gly

Asp

Trp

Gln

Glu

PPh

Arg

Glu

Lls

Leu

Tlhso

Phh

Tyr

Lru

Wl

Thr

Lru

Glu

Gln

Gil

GGn

Alu

Gln

Gln

Ty r

Wl

Alu

Gly

Gly

Gly

Gly

Srr

Pro

Gly

Gly

Gly

Ser

Gly

dyy

Gly

Ser

Iln

Met

Ala

Sei

Ala

Phe

Gln

Aog

Aog

Ali

Ily

Gly

Val

Leu

Val

ACe

Isr

His

Leu

Gln

Ser

Phe

Lru

Glu

wi

Ser

Tyo

Arg

Val

Leu

iao

His

Leu

Ala

Gln

Pro

Ser

Gly

Gly

Sse

Aly

Gly

Sse

Gln

Sse

Ihh

Leu

Leu

Lys

Ser

Leu

Glu

Gln

Val

Arg

Ays

Ile

GGu

Gly Asp

Gly

Ala

CUl

Leu

Gln

Glu

Lys

Lru

Cys

Ali

Abr

Tyo

Lys

Leu

Cc £5

iHi

Pro

Glu

Glu

Leu

Wl

Leu

Lru

Gly

HHi

Ser

Leu

Gly

Ile

Pro

Tyg

Ala

Pro

Leu

Se r

Ser

Cys

Pro

Sro

Gln

Ala

Leu

dn

Leu

ALa

Ily

Iys

Leu

Ser

Gln

Leu

His

Seo

Gly

Llu

Phe

Leu

Tyr

Gln

Gly

Llu

Leu

Gln

Ala

Leu

Glu

Gly

Ilr

Sro

Ppo

Hu

Leu

Gly

Pro

Thr

Aeu

Asp

hho

Leu

Gln

Leu

Asp

Val

Ala

AAs

Ahe

Gla

Thr

Thr

He

Tyg

Gln

Gin

Met

du

Glu

Leu

Gly

Mrt

Ali

Aro

CUl

Lee

Gln

Piso

Ahh

Gln

Gly

ALa

Pro

AULa

Phr

Ala

(SEQ ID

Nr:

174)

Przykład 62

Konstrukcj a pMON 131911

Utworzono gen w pMON13191 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu I jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono fragment Start i powielono z sekwencji G-CSF Ser^ wpMON13037, stosując zbiór primerów 142 start (SEQ ID nr: 72) i L-11 start (SEQ ID nr: 60). Utworzono fragment Stop i powielono z sekwencji g-CSF Ser’7 w pMON13037, stosując zbiór primerów, 141 stop (SeQ ID nr: 73) i L-11 stop (SEQ ID nr: 61). Utworzono gen o pełnej długości G-CSF Ser’7 nowym końcem N/końcem C i powielono z hybtykozcwanoah fragmentów Start i Stop, stosując 142 start i 141 stop.

Otrzymany fragment DNA, który zawiera nowy gen, trawiono enkonukleazami restrykcyjnymi NcoI i HindIII i oczyszczono z użyciem zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Pośredni plazmid pMON13181 trawiono endonukleazami restrykcyjnymi HindIII i AfIIII, otrzymując fragment wektora o 4068 parach zasad i oczyszczono zużyciem zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Oczyszczone fragmenty restrykcyjne połączono i poddano ligacji przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny reakcji ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON13191.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON13191 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzojnoch.

Plazmid pMON13191 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 103), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

184 424

147

Asn

g:s

Ses

I Du

Met

IDe

Tsp

Clu

Dlu

Ile

His

His

Uuu

Uy?

Arg

Pro

Pro

Ala

P oo

Leu

Leu

Tsp

Oro

Tsn

Asn

Leu

Tsn

Tsp

Clu

Asp

Val

Sur

IlD

L ee

Met

Asp

Arg

Tsn

Uuu

Arg

Leu

Poo

Ann

Uuu

Glu

Sur

Piu

VaV

A ag

Ala

Val

e's

Tsn

euu

Glu

Asn

(Tli

Sur

Cly

Ilu

Ulu

Ala

11i

L eu

Arg

Asn

euu

GUu

Oro

Cys

Leu

Oro

Sur

Tla

Thr

Tli

Tli

Pro

S su

Arg

Hin

Oro

Ilu

Ilu

IDe

Les

Tli

CU'

Tsp

Trp

Glu

Clu

Phe

Ang

G lu

Lys

euu

Tir

Oiu

Tyr

Leu

VII

Tir

Ueu

Glu

Ulu

Tli

Gln

u lu

Cln

Gln

T'g

Val

Ulu

Gly

Gly

Gis

Ul'

Sur

Por

Cis

Ulu

Pro

S su

Gly

Pro

Ilu

Sur

Ahr

ller

Asn

Oro

Sur

Oro

Poo

Ser

U'S

Glu

S ru

His

Lys

Sur

Oro

Tsn

Met

Ala

Sur

Tla

Oiu

Glu

Arg

Arg

Ali.

G l|

Gly

Wtl

euu

Vil

Ali

Ser

His

Uuu

Ulu

Sur

PPe

Uuu

Clu

Val

S su

Tyr

Arg

aau

euu

Arg

iH.s

Leu

Ala

Clu

Pro

Ssr

Ul'

Uly

Ses

O l|

Gly

Ser:

Ulu

Sur

Oiu

Leu

Leu

U's

Sur

Uuu

Glu

Glu

Val

Arg

Les

Tle

Gln

Ul'

Tsp

Ul'

Ala

Ala

euu

Giu

Clu

Les

Uuu

G'S

Ale

TCe

Syr

Les

euu

Cys

His

Pro

Glu

Clu

Uuu

VII

Leu

Uuu

Cl'

Hii

S su

Leu

Gly

Dlu

Oro

Trp

Ala

Pro

euu

Sur

Sur

C/s

Pro

Sur

Glu

Alu

T eu

Gln

euu

Ali

Ul'

CyS

Leu

Sur

Clu

Uuu

Hin

Sur

Cl'

Leu

P Pr

Leu

Tyr

Clu

Cl'

Uuu

Leu

Gln

Ala

Ueu

Glu

Gly

Dlu

Sur

Pro

G le

Teu

Gly

Oro

Tir

Uuu

Asp

Thr

Uuu

Clu

Uuu

Aip

Val

Ala

Asi?

Phe

Tla

Thr

Tir

Dlu

Trp

Gln

Gin

Mut

Glu

Clu

Leu

Ul'

Mut

Ala

P PO

Ala

Leu

GUu

Oro

Thr

Gln

Gly

Tli

Mut

Oro

ATa

Piu

Tli

(SEQ DD

rr:175)

Przykład 63

Konstrukcj a pMON 13192

Utworzono gen w pMON 13192 z nowy m końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu Π jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono fragment Start i powielono z sekwencji G-CSF Serⁿ wpMON13037, stosując zbiór primerów 39 start (SEQ ID nr: 64) i P-bl start (SEQ ID nr: 62). Utworzono fragment Stop i powielono z sekwencji g-CSF Ser¹7 wpMON13037, stosując zbiór primerów, 38 stop (SEQ ID nr: 65) i P-bl stop (SEQ ID nr: 63). Fragment Start trawiono endonukleazą restrykcyjną NcoI, a fragment Stop trawiono endonukleazą restrykcyjną HindIII. Po oczyszczeniu, trawione fragmenty Start i Stop połączono i poddano ligacji do fragmentu wektora NcoI-HindIII o około 3800 parach zasad pMON3934.

Pośredni plazmid opisany powyżej zawierał pełnej długości gen G-CSF Serⁿ z nowym końcem N/końcem C i trawiono go endonukleazami restrykcyjnymi NcoI i HindIII. Trawiony DNA rozpuszczono na 1% żelu TAE, barwiono bromkiem etidium i wyizolowano gen pełnej długości z nowym końcem N/końcem C przy użyciu GeneClean (BioH^)1, Vista, CA). Pośredni plazmid pMON13180 trawiono endonukleazami restrykcyjnymi HindIII i AflIII, otrzymując fragment wektora o 4023 parach zasad i oczyszczono z użyciem zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Oczyszczone fragmenty restrykcyjne połączono i poddano ligacji przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny reakcji ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON13192.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON13192 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

148

184 424

Plazmid pMON13192 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 104), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

23292.0iGt

liG

Ccr

Sio

IIe

Met;

Iii

Mp

Glu

IIi

IIi

HSi

Sii

Leu

L-r

(Gog

Pos

Poo

Ala

Pro

Lee

Liu

Aip

Mero

Agp

Min

Mer

lin

Asp

Siu

Asp

aal

Ssi

1li

Leu

Met

asp

tog

Msn

Leu

lag

Lee

Pos

-Gm

Leu

Giu

Sio

Phe

Vai

Arg

1GLa

aal

L-r

Asn

Lee

Siu

AGP

Ala

Ssr

Gly

Ile

liu

Alu

Iii

Leu

1Srg

Gsn

Lee

Gln

Ppo

Ccr

Lee

Pos

Seto

Ala

Tho

Gla

Alu

Pos

Ser

1Srg

Sis

Poo

1Ie

IIi

lIu

M-r

Ala

Gly

Mp

Trp

liG

Gla

Phi

Aog

Glu

Lys

Lee

Thr

Phe

Tps

Leu

aal

Thr

Leu

Giu

liG

Alu

CiG

Glu

Gin

liG

Tps

Val

Giu

Sly

lly

Tir

Gly

Sm

Prs

ilr

Gi|

cir

Ser

Gly

ilr

Gly

Ser

Mn

Me i

inni

Cyo

Lys

Lee.

Cys

Sis

Poo

liu

Glu

Leu

aal

Leu

Leu

Gly

PSi

Ast;

Liu

Gly

IIi

Prs

hop

ASa

Pos

Leu

Ssr

Sio

Ccr

Pro

Sm

Gin

la a

Liu

Gln

Leu

aia

lly

Ccr

Liu

Ser

Gin

Liu

HSi

Mer

Gly

Leu

Phe

Lru

Tyr

Gin

Gly

Liu

Lee

TlG

Ala

Leu

llu

Gier

Ile

Sm

Poo

Giu

Liu

Gly

Poo

reo

Liu

Asp

Cho

Leu

Glu

Lru

Asp

Val

Ala

Aip

SPie

Ala

Thr

TCr

Ili

hop

Gin

CiG

Met

Glu

liu

Lee

Gly

Me i

1GLa

Ppo

Ala

Leu

Gli.

Pos

Cho

Gla

Ciy

A.la

Met

Pos

Alu

Phe

MGLa

Ssr

MAi

rei

Gln

Arg

Aog

Gla

Gi|

Tir

Val

Leu

aal

Ala

Ser

HSi

Leu

Gin

Sio

Phe

Leu

llu

aal

Ssr

Tyo

Arg

ViV

Lru

Asg

HSs

Leu

Pal

Gln

Pos

Thr

Poo

Liu

Ciy

Ppo

Gla

Ser

Ser

Liu

Poo

Gln

Sm

Phe

Leu

Liu

Lys

Sm

Liu

llu

Gin

aal

Arg

Lys

Iii

Gin

Gly

lup

Gly

Alu

lia

Leu

Gin

liu

Lys

Lee

Cys

Ala

Tiar

(SEQ ID

Nr·.:

156)

Przykład 64

Konstrukcja pMON 13193

Utworzono gen w pMON13193 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu II jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono fragment Start i powielono z sekwencji G-CSF Ser^ w pMON13037, stosując zbiór primerów 39 start (SEQ ID nr: 64) i P-bl start (SEQ ID nr: 62). Utworzono fragment Stop i powielono z sekwencji g-CSF Serⁿ wpMON13037, stosując zbiór primerów, 38 stop (SEQ ID nr: 65) i P-bl stop (SEQ ID nr: 63). Fragment Start trawiono endonukleazą restrykcyjną NcoI, a fragment Stop trawiono endonukleazą restrykcyjną HindIII. Po oczyszczeniu, trawione fragmenty Start i Stop połączono i poddano ligacji do fragmentu wektora NcoI-HindIII o około 3800 parach zasad pMON3934.

Pośredni plazmid opisany powyżej zawierał pełnej długości gen G-CSF Sc?7 z nowym końcem N/końcem C i trawiono go endonukleazami restrykcyjnymi NcoI i HindIII. Trawiony DNA rozpuszczono na 1% żelu TAE, barwiono bromkiem etidium i wyizolowano gen pełnej długości z nowym końcem N/końcem C przy użyciu GcncClean (Bio101, Vista, CA). Pośredni plazmid pMON13181 trawiono endonukleazami restrykcyjnymi HindIII i AflIII, otrzymując fragment wektora o 4068 parach zasad i oczyszczono z użyciem zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Oczyszczone fragmenty restrykcyjne połączono i poddano ligacji przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny reakcji ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu. E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON13193.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON13193 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMON13193 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 105), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

184 424

149

Ass Tys Sreo Il, Met IUu Ans Clu IUl Ila HHs His Luu Lys Arg Poo Poo Ala Poo Luu L,u Ans Poo Asn Ann Luu Ass A» Glu Asp Vi1 Slo Ila Luu Met Asp Ar» Ass Luu Arg Leu Poo Am Luu Glu Emo Phu Vv1 Aog TALa Vi1 Lus Asn Leu GAu Asn Ali Seu Gly Ile Clu Ali Ile Luu Arg Ass Leu Clu Poo Cys Leu Poo Seu Ali Tho Ali Ali Pro Slo Arg His Poo li, lle Ile, Lys Ali Gly Asp Trp Clu (lu Phr Arg Glu Lys Leu Gho Phu Tyr Leu Vi1 Thr Luu Glu Clu Ali GAn (lu Gln Clu Ter Vi1 Alu GAy Gly Cly Gly Emo Pro Cly (lu Pro Eeo Gly Poo Ile Emo Gho Ile Asn Poo Seu Poo Poo E,o Lys Glu Euo HHs Lys Sreo Poo Asn Met CALa Cyo Lus Luu Cys His Poo Glu (lu Leu Vi1 Luu Luu Cly His Ser Luu Gly Ile Poo Gop Ali Poo L,u Ser E,o C<s Poo E,o Gln Ala Luu Gln Luu Ala Cly Tys Luu Euo Gln L,u HHs Suo Cly Leu Phe Luu Tyr Clu Gly L,u Luu Gln Ali Leu Alu Gly li, Euo Pro Glu Luu Gly Poo Tho Llu Asp Thr Luu Gln Llu Asp Vai Ali Asp Phe (la Thr ehr li, Gop (lu Gln Mut Glu Alu Luu Cly Mut Ala Pro Ali Luu Clu Poo Gho (lu Gly Ali Met Pro TALa Ph, Gil Ser Ali Ph, Gln Aog Aog Ali (ly Gly Vii Leu Vii Ali Slo His Leu Gln Euo PPe L,u Glu Vii Slo Tyr Arg Vai Llu Arg His Leu Ali Gln Poo Thr Poo L,u (ly Poo Ala Euo Ser Luu Poo (lu Euo Phe Leu Luu Lus Euo Leu Clu (lu Val Aog Lys lle Gln Cly Asp Gly Ala Gli Leu Clu Clu Lys Llu Cys Ali Thr (SEQ ID No:177)

Przykład 65

Konstrukcja pMON25190

Utworzono gen w pMON25190 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu II jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono fragment Start i powielono z sekwencji G-CSF Serⁿ wpMON13037, stosując zbiór primerów 97 start (SEQ ID nr: 66) i P-bl start (SEQ ID nr: 62). Utworzono fragment Stop i powielono z sekwencji g-CSF Se?7 w pMON13037, stosując zbiór primerów, 96 stop (sEq ID nr: 67) i P-bl stop (SEQ ID nr: 63). Fragment Start trawiono endonukleazą restrykcyjną NcoI, a fragment Stop trawiono endonukleazą restrykcyjną HindIII. Po oczyszczeniu, trawione fragmenty Start i Stop połączono i poddano ligacji do fragmentu wektora NcoI-HindIII o około 3800 parach zasad pMON3934.

Pośredni plazmid opisany powyżej zawierał pełnej długości gen G-CSF Serⁿ z nowym końcem N/końcem C i trawiono go endonukleazami restrykcyjnymi NcoI i HindIII. Trawiony DNA rozpuszczono na 1% żelu TAE, barwiono bromkiem etidium i wyizolowano gen pełnej długości z nowym końcem N/końcem C przy użyciu GeneClean (Bio101, Vista, CA). Pośredni plazmid pMON13180 trawiono endonukleazami restrykcyjnymi HindIII i AflIII, otrzymując fragment wektora o 4023 parach zasad i oczyszczono z użyciem zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Oczyszczone fragmenty restrykcyjne połączono i poddano ligacji przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny reakcji ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON25190.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON25190 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMON25190 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 106), która koduje następującą sekwencją aminokwasową:

150

184 424

Asn

Tys

Ser

lit

Met

lit

App

Glu

Ile

Ile

His

His

Leu

Lys

Clg

Oio

Ono

Ala

Pno

Luu

Luu

Asp

Pro

Asn

Asn

Ueu

Asn

Asp

Glu

0\cp

lal

Stn

Ile

Ueu

Met

Asp

Ang

Asn

Leu

Aig

Latu

Ono

Asn

Llu

Glu

Sui

ort

Val

Ang

Ol a

Val

Uyt

Ann

Leu

Glu

Asn

Ala

Ser

Gly

Oli

Ulu

Ala

Ile

Ueu

Arg

OCsn

Ltu

Gln

Pro

Cys

Utu

O;o

Ser

OCLa

ICe

Ala

Ala

Pro

Sui

Arg

His

Oio

Ile

Ile

Iie

Lys

Ala

Gly

OAsp

Acp

Glu

Ulu

Phe

Arg

Glu

Uys

Ltu

Thr

Phe

Tyr

Ueu

Val

Thr

Luru

Glu

Ulu

Ala

Gla

Glu

Gln

Ulu

Cyn

Val

Glu

Gly

Gly

Tly

Gly

Ser

Grn

uir

Tly

G1|

Stn

Gly

Tly

Tly

Sec

Asn

Met

Ala

Ono

Glu

Leu

Gly

Oio

Thn

Leu

Asp

TCr

Utu

Tlu

Leu

Asp

val

Ala

Asp

Pite

Oli

ICr

Chi

lit

Tc;

I ln

Gln

Mtt

Tlu

Glu

Utu

Gly

Mtt

Ala

Pro

Ala

Llu

Ulu

Pro

The

Gln

Gly

Okla

Mtt

Pro

Ala

Phe

Ala

Sui

Ala

Pli er

Gln

Aog

Aog

Ali

Uiy

Gly

Ul

Utu

Val

Ala

Ser

HSs

Ltu

Gln

Ser

PPe

Ltu

Ulu

vaa

Se;

Tyr

OCrg

Ul

Leu

Arg

His

Utu

Ala

Gln

Pro

Ghr

Oio

Ltu

Gla

Ono

ALa

Sui

Stn

Leu

Pro

Gln

Sui

Oht

Leu

Leu

Lys

Sui

Ltu

Glu

Ulu

vai

OCrg

Uys

IUo

Gln

Gly

Asp

Tly

Ala

OCLa

Llu

Ulu

Ulu

Lys

Ltu

Cys

Ala

cr;

Tyo

Lys

Leu

Tys

His

Pro

Glu

Glu

Utu

lal

Leu

Leu

Gly

His

St;

Leu

Gly

Ile

Pno

Top

Ala

Piso

Llu

Sui

Sui

Cys

Ono

Ser

Tln

Ala

Leu

Tln

Ltu

Ala

Tly

Cys

Leu

Set

Ulu

Ltu

His

Sui

Gly

Utu

Ohe

Luo

Ty;

Gln

Tly

Ltu

Leu

Gln

Ola

Utu

Tlu

GT|

lit

Ssr

(SEQ lD

Nr::

77))

Przykład 66

Konstrukcja pMON25191

Utworzono gen w pMON25191 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu II jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono fragment Start i powielono z sekwencji G-CSF Serⁿ w pMON13037, stosując zbiór primerów 97 start (SEQ ID nr: 66) i P-bl start (SEQ ID nr: 62). Utworzono fragment Stop i powielono z sekwencji g-CSF Serⁿ w pMON13037, stosując zbiór primerów, 96 stop (SEQ ID nr: 67) i P-bl stop (SEQ ID nr: 63). Fragment Start trawiono endonukłeazą restrykcyjną NcoI, a fragment Stop trawiono endonukleazą restrykcyjną HindIII. Po oczyszczeniu, trawione fragmenty Start i Stop połączono i poddano ligacji do fragmentu wektora NcoI-HindIII o około 3800 parach zasad pMON3934.

Pośredni plazmid opisany powyżej zawierał pełnej długości gen G-CSF Serⁿ z nowym końcem N/końcem C i trawiono go endonukleazami restrykcyjnymi NcoI i HindIII. Trawiony DNA rozpuszczono na 1% żelu TAE, barwiono bromkiem etidium i wyizolowano gen pełnej długości z nowym końcem N/końcem C przy użyciu GeneClean (Bio101, Vista, CA). Pośredni plazmid pMON13181 trawiono endonukleazami restrykcyjnymi HindIII i AflIII, otrzymując fragment wektora o 4068 parach zasad i oczyszczono z użyciem zestawu Magic DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Oczyszczone fragmenty restrykcyjne połączono i poddano ligacji przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny reakcji ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON25191.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON25191 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

184 424

151

Plazmid pMON25191 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 107), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

Asn

Cys

Ser

Ile

Mer:

lir

Asp

Glu

Ile

Ile

His

His

Leu

Lys

Arg

Pro

Pro

Ala

Pro

Leu

Leu

Asp

Pro

Asn

Asn

Leu

Asn

AAP

Glu

Asp

Vli

Sio

IIi

Olu

Het

Asp

Aog

Ais

Iiu

Ar cg

Iiu

Peo

Acn

Iru

Glu

Sio

Phi

Vv1

Acg

Ala

Val

Lys

Asn

Iru

Glu

Asn

Ali

Ser

lly

Ile

liu

Ali

1li

Oeu

Arg

Asn

Liu

Gin

Poo

Cys

Iru

Peo

Ser

Ali

Thr

Ali

Ali

Poo

Her

Arg

His

Poo

Ile

lii

Ile

Lys

Ala

Gly

Asp

Trp

lin

liu

PPe

Aig

Glu

Lys

Iiu

Thr

Phi

Tyr

Iru

Va1

TTe

Liu

Glu

lln

Ali

Gln

Olu

Gln

Gln

Tyo

Val

llu

Gly

lly

lly

Glys

Sio

Pro

lly

liu

Poo

Her

Glni

Pro

lii

Ser

cro

Ile

Asn

Poo

Ser

Peo

Pro

Sio

Iys

Glu

Her

His

Lys

Sio

Piso

Asn

Met

Gla

Poo

Glu

Iiu

Gly

Poo

Tho

Lee

HAy

Thr

Leu

lin

Llu

Asp

Val

Cii

Asp

PPe

Oli

Thr

Tho

lii

Tcg

Hln

Gln

Met

llu

Glu

Ilu

Gly

Mit

lii

Piso

Ala

Leu

lin

Poo

TTe

Gln

Gly

Ala

Mit

Poo

All

Phe

Ala

Sio

.Ala

Phi

Gln

Aeg

Crg

Ala

Oii:

Gly

Val

Iiu

Val

All

Ser

His

Liu

Gin

Sir

Phe

Iiu

liu

V'l

Her

Tyr

Arg

Vii

Lii

Aeg

His

Liu

Ali

Gla

Poo

Thr

Poo

Iiu

Gly

Gro

Ali

Ser

Sio

Leu

Poo

Gln

Sie

Pil

Leu

Iiu

Lys

Sio

Iiu

Gln

Ole

Val

Arg

Lys

1li

lln

Gly

Asp

lly

Ali

Oli

Leu

lin

liu

Lys

Olu

Cys

Ala

Cho

Tyr

Lys

Leu

Gys

iis

Pro

llu

Glu

Iru

Vli

Lir

Oeu

Gly

Hii

Sio

Ddu

lly

Ile

Poi

Cep

Ali

Poo

Leu

Sio

Sio

Cgs

Gro

Ser

Gln

Ali

Leu

lln

Leu

Ala

lly

Ccs

Liu

Ser

lin

Liu

His

Her

Gly

Leu

Phi

Llu

Tyo

Gln

lly

Iru

Leu

lln

Ala

Iiu

liu

lly

lii

Sio

(SEQ lD

Ne:

239)

Przykład 67

Konstrukcja pMON 13194

Utworzono gen w pMON13194 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu II jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono fragment Start i powielono z sekwencji G-CSF Serⁿ w pMON13037, stosując zbiór primerów 126 start (SEQ ID nr: 68) i P-bl start (SEQ ID nr: 62). Utworzono fragment Stop i powielono z sekwencji g-CSF Ser ¹⁷ w pMON13037, stosując zbiór primerów, 125 stop (SEQ ID nr: 67) i P-bl stop (SEQ ID nr: 63). Fragment Start trawiono eńdonukleazą restrykcyjną NcoI, a fragment Stop trawiono endonukleazą restrykcyjną HindIII. Po oczyszczeniu, trawione fragmenty Start i Stop połączono i poddano ligacji do fragmentu wektora NcoI-HindIII o około 3800 parach zasad pMON3934.

Pośredni plazmid opisany powyżej zawierał pełnej długości gen G-CSF Serⁿ z nowym końcem N/końcem C i trawiono go endonukleazami restrykcyjnymi NcoI i HindIII.Trawiony DNA rozpuszczono na 1% żelu TAE, barwiono bromkiem etidium i wyizolowano gen pełnej długości z nowym końcem N/końcem C przy użyciu GeneClean (Bio101, Vista, CA). Pośredni plazmid pMON13180 trawiono endonukleazami restrykcyjnymi HindIII i AflIII, otrzymując fragment wektora o 4023 parach zasad i oczyszczono z użyciem zestawu Magie DNA Clean-up System (Promega, Madison, WI). Oczyszczone fragmenty restrykcyjne połączono i poddano ligacji przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny reakcji ligacji użyto do transformowania, komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON13194.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON13194 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMON13194 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 108), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

152

184 424

Asn

Cys

Ssr

Ile

Met

Ile

Aa p

Glu

lle

Ilu

His

Hł.s

Leu

Lys

Arg

Poo

Pro

Ali

Pro

Lru

Leu.

tu p

apo

Oon

Am

Ueu

Ann

Asp

Glu

ilp

Vil

Sro

IIi

Leu

Mii tu

MU3P

Ar a

Aon

seu

SCrg

Urs

Pro

Asn

Leu

Glu

Seo

Phe

Wl

Arg

Air

Cul

ly i

Ass

seu

Glos

Csn

Ala

Ser

Gly

He

Glu

Cli

IIe

Leu

Altu

lun

sn a

Gln

S ro

Cys

Ueu

Pro

Ser

Ala

Tiar

Gil

Cli

Pro

Ser

Asg

llls

Pr o

Sie

UIe

Ilu

U/s

Ali

Gly

As p

Typ

Glu

Glu

PPh

Arg

Glu

lys

Ls A

^iaui

Ple

Tyr

Ueu

Val

Thr

Leu

Glu

Gln

lii

Gla

Glu

Gln

Gl a

Ty r

Va0

Glu

Gly

Gly

Gly

Gly

Ser

Piso

Gly

Gly

Gly

Ser

GSy

GZL/c

Gl a

liLS

Aon

Met

Cli

Mm U

Ali

Pro

Ala

Lru

Gln

Pro

Thr

Gln

Gly

OL a

Clii

Uro

Ala

Phe

Ala

Ser

Ala

PPh

Glu

log

Acg

Ala

Gly

Gly

Va 1

.Li u

Wl

Ala

Ser

Ηΐί>

Leu

Gln

Set:

Phr

Leu

Gla

Wl

Sn

Syr

LO g

wn

leu

SAg

His

Leu

Ala

Gln

Piso

Tho

Pro

Leu

Gly

Pro

PUa

Se r

Ser

Leu

Pro

Gls

Ssr

Phe

Leu

Leu

Lys

Seo

Leu

Glu

Gln

W A

lii g

Aon

Lle

A los

Gly

TA>p

Gly

Ala

Ala

Leu

Glu

Gll

Lys

Llu

Ltu

Al a

Ali

hgi

lys

Urs

Cys

Ahs

Pro

Glos

Glu

Leu

Wl

Leu

Leu

GUu

HL i

Leu

Gly

Ilu

Pro

Trp

ALa

Pro

Leu

Seo

Sse

Cys

Pcu

Sur

Gl n

GS i

Hiu

Gln

Urs

Ala

Ala

Iys

Leu

Seo

Glu

Leu

His

SHr

sr g

Ls u

LUs

hru

Tyr

Gis

Gly

Leu

Luu

Gla

Cli

Leu

Gla

Gly

Ile

Iir

Pr o

Glu

Leu

Gly

Soo

Thr

Leu

Asp

TTh

Lru

Glu

Leu

Asp

ws

Vla

Hi a

ano

ALa

Thr

IAo

IIe

Tjgp

Gln

GCul

Met

Glu

Glu

Leu

Gly

(SEQ ID

No:180)

Przykład 68

Konstrukcja pMON 13195

Utworzono gen w pMON13195 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu II jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono fragment Start i powielono z sekwencji G-CSF Ser’7 w pMON13037, stosując zbiór primerów 126 start (SEQ ID nr: 68) i P-bl start (SEQ ID nr: 62). Utworzono fragment Stop i powielono z sekwencji g-CSF Ser’7 w pMON13037, stosując zbiór primerów, 125 stop (SEQ ID nr: 69) i P-bl stop (SEQ ID nr: 63). Fragment Start trawiono endonukleazą restrykcyjną NcoI, a fragment Stop trawiono endonukleazą restrykcyjną HindIII. Po oczyszczeniu, trawione fragmenty Start i Stop połączono i poddano ligacji do fragmentu wektora NcoI-Ι lindIU o około 3800 parach zasad pMON3934.

Pośredni plazmid opisany powyżej zawierał pełnej długości gen G-CSF Ser’ 7 z nowyn końcem N/końcem C i trawiono go endonukleazami restrykcyjnymi NcoI i HindIII. Trawiony DNA rozpuszczono na 1% żelu TAE, barwiono bromkiem etidium i wyizolowano gen pełnej długości z nowym końcemN/końcem C przy użyciu GeneClean (Bio'101, Vista, CA). Pośredni plazmid pMON13181 trawiono endonukleazami restrykcyjnymi HindIII i AflIII, otrzymując fragment wektora o 4068 parach zasad i oczyszczono z użyciem zestawu Magic DNA Cleanup System (Promega, Madison, WI). Oczyszczone fragmenty restrykcyjne połączono i poddano ligacji przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny reakcji ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sykwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON13195.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON13195 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMON13195 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 109), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

184 424

153

Asn Lys Ser Ile Met Ile Asp Glu Ile Ile His His Leu Lys Arg Pro Pro Ala Pro Leu Leu Asp Pro Asn Asn Leu Asn Asp Glu Asp Val Ser Ile Leu Met Asp Arg Asn Leu Arg Leu Pro Asn Leu Glu Ser Phe Val Arg Ala Val Lys Asn Leu Glu Asn Ala Ser Gly Ile Glu Ala Ile Leu Arg Asn Leu Gln Pro Cys Leu Pro Ser Ala Thr Ala Ala Pro Ser Arg His Pro Ile Ile Ile Lys Ala Gly Asp Trp Gln Glu Phe Arg Glu Lys Leu Thr Phe Tyr Leu Val Thr Leu Glu Gln Ala Gln Glu Gln Gln Tyr Val Glu Gly Gly Gly Gly Ser Pro Gly Glu Pro Ser Gly Pro Ile Ser Thr Ile Asn Pro Ser Pro Pro Ser Lys Glu Ser His Lys Ser Pro Asn Met Ala Met Ala Pro Ala Leu Gln Pro Thr Gln Gly Ala Met Pro Ala Phe Ala Ser Ala Phe Gln Arg Arg Ala Gly Gly Val Leu Val Ala Ser His Leu Gln Ser Phe Leu Glu Val Ser Tyr Arg Val Leu Arg His Leu Ala Gln Pro Thr Pro Leu Gly Pro Ala Ser Ser Leu Pro Gln Ser Phe Leu Leu Lys Ser Leu Glu Gln Val Arg Lys Ile Gln Gly Asp Gly Ala Ala Leu Gln Glu Lys Leu Cys Ala Thr Tyr Lys Leu Cys His Pro Glu Glu Leu Val Leu Leu Gly His Ser Leu Gly Ile Pro Trp Ala Pro Leu Ser Ser Cys Pro Ser Gln Ala Leu Gln Leu Ala Gly Cys Leu Ser Gln Leu His Ser Gly Leu Phe Leu Tyr Gln Gly Leu Leu Gln Ala Leu Glu Gly Ile Ser Pro Glu Leu Gly Pro Thr Leu Asp Thr Leu Gln Leu Asp Val Ala Asp Phe Ala Thr Thr Ile Trp Gln Gln Met Glu Glu Leu Gly (SEQ ID Nr:181)

Przykład 69

Konstrukcj a pMON 13196

Utworzono gen w pMON13196 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu II jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono fragment Start i powielono z sekwencji G-CSF Ser¹⁷ wpMON13037, stosując zbiór primerów 133 start (SEQ ID nr: 70) i P-bl start (SEQ ID nr: 62). Utworzono fragment Stop i powielono z sekwencji g-CSF Ser^!7 w pMON13037, stosując zbiór primerów, 132 stop (SEQ ID nr: 71) i P-bl stop (SEQ ID nr: 63). Fragment Start trawiono endonukleazą restrykcyjną NcoI, a fragment Stop trawiono endonukleazą restrykcyjną HindIII. Po oczyszczeniu, trawione fragmenty Start i Stop połączono i poddano ligacji do fragmentu wektora NcoI-HindIII o około 3800 parach zasad pMON3934.

Pośredni plazmid opisany powyżej zawierał pełnej długości gen G-CSF Ser¹⁷ z nowyn końcem N/końcem C i trawiono go endonukleazami restrykcyjnymi NcoI i Hindffl. Trawiony DNA rozpuszczono na 1 % żelu TAE, barwiono bromkiem etidium i wyizolowano gen pełnej długości z nowym końcemN/końcem C przy użyciu GeneClean (Biol01, Vista, CA). Pośredni plazmid pMON13180 trawiono endonukleazami restrykcyjnymi HindIII i AflIII, otrzymując fragment wektora o 4023 parach zasad i oczyszczono z użyciem zestawu Magic DNA Cleanup System (Promega, Madison, WI). Oczyszczone fragmenty restrykcyjne połączono i poddano ligacji przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny reakcji ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON13196.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON13196 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMON13196 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 110), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

154

184 424

Asn

Tys

Ser

li,

Met

Ile

Asp

Clu

Ile

li,

Hhs

PHs

Leu

Lys

Aog

Poo

Poo

Ala

Poo

Luu

Leu

CA>p

Poo

Asn

Asn

Luu

Ars

Ars

Clu

Asp

VII

Euo

11,

Luu

MeL

Asp

Arg

(sn

Luu

Aog

Luu

Poo

CAn

Leu

Alu

E,o

Phu

Val

Arg

CALa

Pal

Lys

Asn

Leu

Clu

TAs

AAe

Asm

(lr

lir

(lu

Ala

IlL

Luu

Aog

Asn

Leu

Cln

Poo

Tys

Lee

Pro

Ser

Ali

Gho

Ali

Ali

Pro

Seo

Arg

His

Pro

IlL

Ile

Ile

Lys

Ala

Gli

Asp

Top

Als

Clu

Ph,

Aog

Glu

Lys

Leu

Gho

Phr

Cyo

Luu

Pal

Ttir

Leu

Clu

Cln

Ali

Gln

Glu

GAn

Gln

Tyr

Vii

Glu

Cly

Gly

Ple

GAe7

Ero

Poo

Cly

Cly

Gly

Euo

Gly

Gly

Gly

Eer

TAsn

Met

TALa

Phr

Gin

Cis

Ali

Met

Poo

Ala

Ph,

TALa

Ser

Ala

PhL

GCn

Aog

Arg

CA a

Ply

cis

Pil

L,u

Va1

Ala

Euo

HHs

Leu

Gln

Slo

Phr

Ulu

Glu

Pei]:

Ser

Cyo

Arg

Vii

Luu

Arg

His

Leu

Ala

Gln

Poo

Ttir

Poo

Luu

Ply

Pro

Ali

Ero

E,o

Lru

Poo

Cln

Ser

Phu

Llu

Leu

Lys

Seo

Leu

Glu

Gln

Val

Gog

Lys

IlL

Gln

(ly Asp

Gly

Ala

Gli

Leu

Cln

GAu

PLS

Luu

Tys

Ali

ero

Cyo

Lys

Luu

Cys

His

Pro

Clu

Glu

Leu

Pal

Leu

Luu

cis

His

Slo

L,u

Gly

li,

Piso

Trp

Ala

Poo

Leu

Ero

Sel»

ATS

Poo

Ero

(ln

Ali

L,u

Gln

L,u

Ala

Glu7

Cys

Leu

Ser

Cln

Lul

PHs

Ser

cis

Lru

Phr

Llu

Tyo

(in

GAu-

Leu

Leu

Cln

Ala

Leu

Glu

Ply

Ala

Ero

Poo

Clu

L,u

Gly

Poo

Thr

Leu

Asp

Gho

Leu

Cln

Leu

Pap

Pal

Gli

Asp

PhL

Ali

Tho

Gho

Ile:

Trp

Gln

Cln

Met

Clu

Glu

Peu

Gly

Met

Ali

Poo

Ali

Luu

Cis

Poo

(SEQ ID

No:

182)

Przykład 70

Konstrukcja pMON 13197

Utworzono gen w pMON13197 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu II jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono fragment Start i powielono z sekwencji G-CSF Serⁿ wpMON13037, stosując zbiór primerów 133 start (SEQ ID nr: 70) i P-bl start (SEQ ID nr: 62). Utworzono fragment Stop i powielono z sekwencji g-CSF Ser¹7 w pMON13037, stosując zbiór primerów, 132 stop (SEQ ID nr: 71) i P-bl stop (SEQ ID nr: 63). Fragment Start trawiono endonukleazą restrykcyjną NcoI, a fragment Stop trawiono endonukleazą restrykcyjną HindIII. Po oczyszczeniu, trawione fragmenty Start i Stop połączono i poddano ligacji do fragmentu wektora NcoI-HindIII o około 3800 parach zasad pMON3934.

Pośredni plazmid opisany powyżej zawierał pełnej długości gen G-CSF Se?⁷ znowyn końcem N/końcem C i trawiono go endonukleazami restrykcyjnymi NcoI i HindIII. Trawiony DNA rozpuszczono na 1% żelu TAE, barwiono bromkiem etidium i wyizolowano gen pełnej długości z nowym końcemN/końcem C przy użyciu GeneClean (Bio101, Vista, CA). Pośredni plazmid pMON13181 trawiono endonukleazami restrykcyjnymi HindIII i AflIII, otrzymując fragment wektora o 4068 parach zasad i oczyszczono z użyciem zestawu Magic DNA Cleanup System (Promega, Madison, WI). Oczyszczone fragmenty restrykcyjne połączono i poddano ligacji przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny reakcji ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON13197.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON13197 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMON13197 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 111), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

184 424

155

Asn

cc/

Sto

Ile

Met

Ilt

Asp

llu

Ile

IIe

Iii

iis

Llu

L/s

Ai-

Poo

Ppo

lla

Pro

Leu

Leu

Asp

Poo

Asn

Hn

Leu

Asn

Asp

Clu

AlS

ViI

See

Ile

Leu

Met

Asp

Arg

Asn

Llu

Aro

Lee

Poo

Am

Leu

Gln

Sto

PPh

ViI

log

Ala

Vai

Lys

Asn

Leu

Glu

Asn

Ala

Ser

Cl/

IIe

Glu

Ala

Ile

Leu

Aig

Asn

Llu

Cln

Pro

Cys

Llu

Poo

See

Gla

TCh

lla

Ali

Poo

Ser

Arg

iis

Pro

Ilt

He

IIl

Lys

Ala

G.ly

Asp

Tr-

Cln

Gln

Pht

Aog

Glu

L/s

Llu

Tho

Phe

Tyr

Seu

Vl1

Thr

Leu

Gln

Cln

Ali

Cln

Glu

Gla

Cln

Tyr

Vai

Glu

Gly

Gly

Cl/

Gly

Seo

Piso

li/

Gly

li/

Seo

Gly

li/

Gly

Str

Asn

Met

Sil

T/o

Lys

Leu

Cys

iis

Ppo

Clu

Glu

Leu

Val

Leu

Ltu

Gly

His

Ser

Leu

Gly

Ile

Piso

Top

Ala

Poo

Leu

See

Seo

CC/

Poo

Ser

Gla

ALa

Ltu

Gln

Leu

HLa

Ci/

CC/

Ltu

Ser

Gln

Leu

His

Ser

Gly

Leu

Pd

Leu

Tyr

Cln

Gly

Leu

Ler

lin

lla

Llu

Clu

Gly

Ilt

Ser

Piso

Glu

Leu

Gly

Poo

TCh

Leu

Ais

Tho

Ltu

Gln

Leu

Asp

Val

Ala

Asp

Phe

lla

Thr

Tho

IIl

Top

Gla

Cln

Met

Glu

Clu

Leu

Cl/

Met

Ala

Pro

Ala

Leu

Cln

Ppo

Tho

Gla

li/

ALa

Met

Poo

Ala

Phi

Ala

Ser

Ii. a

Phe

Glin

Aog

Arg

lla

Gly

Cly

Val

Leu

Val

ALa

Str

His

Llu

Gla

Seo

PPe

Leu

Glu

Val

See

T/o

log

Val

Leu

Arg

iis

Leu

Ala

Gln

Poo

Thr

Poo

Leu

Ci/

Pro

Ala

Ser

Sst

Leu

Paso

Cln

Ser

Pil 6!

Llu

Leu

Lys

Sro

Llu

Clu

Gln

Val

Aog

Lys

Ilt

Gln

Cl/

Asp

Gly

AAa

Ala

Leu

Cln

Gln

L/s

Ler

Crs

lla

Thr

(SEQ ID

No:183)

Przykład 71

Konstrukcja pMON 13198

Utworzono gen w pMON13198 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu II jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono fragment Start i powielono z sekwencji G-CSF Ser’7 w pMON13037, stosując zbiór primerów 142 start (SEQ ID nr: 72) i P-bl start (SEQ ID nr: 62). Utworzono fragment Stop i powielono z sekwencji g-CSF Ser’7 w pMON13037, stosując zbiór primerów, 141 stop (SEQ ID nr: 73) i P-bl stop (SEQ ID nr: 63). Fragment Start trawiono endonukleazą restrykcyjną NcoI, a fragment Stop trawiono endonukleazą restrykcyjną HindIII. Po oczyszczeniu, trawione fragmenty Start i Stop połączono i poddano ligacji do fragmentu wektora NcoI-HindIII o około 3800 parach zasad pMON3934.

Pośredni plazmid opisany powyżej zawierał pełnej długości gen G-CSF Ser¹7 z nowyn końcem N/końcem C i trawiono go endonukleazami restrykcyjnymi NcoI i HindIII. Trawiony DNA rozpuszczono na 1% żelu TAE, barwiono bromkiem etidium i wyizolowano gen pełnej długości z nowym końcemN/końcem C przy użyciu GeneClean (Bio101, Vista, CA). Pośredni plazmid pMON13180 trawiono endonukleazami restrykcyjnymi HindIII i AflIII, otrzymując fragment wektora o 4023 parach zasad i oczyszczono z użyciem zestawu Magic DNA Cleanup System (Promega, Madison, WI). Oczyszczone fragmenty restrykcyjne połączono i poddano ligacji przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny reakcji ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, Md). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON13198.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON13198 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMON13198 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 112), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

156

184 424

Ass

Ays

Ser:

Dlu

MMU

Dlu

Asp

Clu

Ile

Dlu

Hii

His

Leu

U'S

Arg

Oro

Oro

Ala

Oro

Leu

euu

cnp

Pro

Asn

Asn

Leu

Tsn

Aip

Clu

Asp

Vai

Ser

Ile

euu

MmU

Tsp

COrg

Tsn

Leu

Arg

Leu

ego

Asn

Ueu

Glu

Sur

Ohu

Wl

Trg

ATu

Vil

Lys

Asn

Leu

Glu

Ann

Tli

Srr

Cly

Ile

Glu

Tla

Ile

euu

Ang

Tsn

Leu

Cln

Pro

C's

Leu

Oro

Siu-

Tla

Thr

Tli

Ala

Pro

Sur

TTg

His

Pro

Ilu

Ile

Ilu

Les

Tli

dy

Tsp

Trp

Cln

Ulu

Phe

Arg

Glu

U'S

Leu

Air

Phe

Tyr

Leu

Val

Thr

Uuu

Glu

Cln

Tli

Glu

Clu

Glu

Cln

Tyr

Vil

Glu

Gly

Gly

Ul'

Gly

Sur

Pro

Uls

Cl'

G1|i

Sur

Gl|

Uls

Gly

Ser

Asn

MUt

ALa

Sur

Ala

Oiu

Gln

Arg Arg

ALa

Ul'

Gl|

aiU

Leu

Vai

Aa

Sur

His

Uuu

Gln

Sur

Piu

Uuu

GUu

Wl

Sur

Tys

Arg

Val

Luu

Arg

His

Leu

Tli

Gln

Pro

Thr

Oro

Ueu

Gly

Pro

Ala

Sur

Ser

Ueu

Pro

Gln

Ssu

Oiu

Leu

Ueu

Lys

Sur

euu

Glu

Uln

Wl

Trg

Lys

Dlu

Gln

CU'

Asp

Uly

ALa

Tli

Leu

Gin

Glu

Lys

euu

C/s

Tli

Thr

C'O

Lys

Uuu

Cys

His

Paro

Giu

Giu

Uuu

Val

Leu

Ueu

Gl|

His

Ser

Uuu

Gly

Dlu

Poo

rop

ALa

Oro

Luu

Sur

Sur

Cys

Oro

Ssu

Cln

(Ula

Ueu

Gln

Uuu

AL ii

Gl'

Cys

Uuu

rur

Cln

Ueu

His

Sur

Gl|

Uuu

Phe

Uuu

Tyr

Cln

Gles

euu

Leu

Cln

Ali

euu

Glu

Gly

Dlu

Ssu

Oro

Glu

Uuu

Gly

Pro

Thr

euu

Asp

Gir

Ueu

Uln

euu

TCsp

Vai

Al

Tsp

Phe

Tli

Thr

Air

Ile

Trp

Gln

Cln

Mut

Glu

Glu

Leu

Ul'

Met

Ala

Poc

Tla

Len

Gin

Poo

Air

Gln

Giy

Tla

Mut

Oro

Tli

Oiu

Tli

(SEQ DD

rr:184)

P r z yk ła d 72

Konstrukcja pMON 13199

Utworzono gen w pMON13199 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu II jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono fragment Start i powielono z sekwencji G-CSF Serⁿ wpMON13037, stosując zbiór primerów 142 start (SEQ ID nr: 72) i P-bl start (SEQ ID nr: 62). Utworzono fragment Stop i powielono z sekwencji g-CSF Serⁿ wpMON13037, stosując zbiór primerów, 141 stop (SEQ ID nr: 73) i P-bl stop (SEQ ID nr: 63). Fragment Start trawiono endonukleazą restrykcyjną NcoI, a fragment Stop trawiono endonukleazą restrykcyjną HindIII. Po oczyszczeniu, trawione fragmenty Start i Stop połączono i poddano ligacji do fragmentu wektora NcoI-HindIII o około 3800 parach zasad pMON3934.

Pośredni plazmid opisany powyżej zawierał pełnej długości gen G-CSF Ser 17 z nowyn końcem N/końcem C i trawiono go endonukleazami restrykcyjnymi NcoI i HindIII. Trawiony DNA rozpuszczono na 1% żelu TAE, barwiono bromkiem etidium i wyizolowano gen pełnej długości z nowym końcemN/końcem C przy użyciu GeneClean (Bio101, Vista,CA). Pośredni plazmid pMON13181 trawiono endomukleazami restrykcyjnymi HindIII i AflIII, otrzymując fragment wektora o 4068 parach zasad i oczyszczono z użyciem zestawu Magic DNA Cleanup System (Promega, Madison, WI). Oczyszczone fragmenty restrykcyjne połączono i poddano ligacji przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). Część mieszaniny reakcji ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, Md). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON13199.

184 424

157

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON13199 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMON13199 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 113), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

Asn

Cys

Ser

lii

Mel

lii

Asp

Clu

Iie

Ili

His

HSo

Llu

Iys

Arg

Poo

Poo

Ola

lar

oei

Leu

Asp

Poo

Asn

Asn

Leu

Asn

TAp

ilu

Asp

Va1

Ser

Ilo

Ieu

Mel

Asp

Arg

Asn

Leu

Aog

Leu

Aoo

Ais

Iiu

Glu

Sio

Phe

V^al

Arg

Ali

Vl1

Lys

Csn

Leu

llu

Asn

Ala

Sei

Cly

Ile

llu

Alei

Ile

lii:

Aig

Asn

Leu

llu

Poo

Gys

Liu

Aoo

Ser

Ala

Tho

Ali

Ali

Oro

Aes

0Ao

iis

Pro

Ili

Ile

lii

Lys

Ala

Glni

Asp

Trp

lin

Glu

Phe

Aig

Gla

Iys

Leu

Cho

Phe

Tyo

Leu

VaG

Thr

Iiu

Glu

lln

ALn

Gln

G1c

Hu

Cln

Tcr

Vli

Glu

lly

Gly

Gly

Glys

Sie

Pro

lly

Glu

Pro

Aos

ACy

Poo

Ile

Sio

Thr

lii

Asn

0o o

Ser

Poo

Pro

Sio

Lys

Glu

Sie

His

Iys

Ssr

Poo

Acn

Mit

AAL i

Soo

Ali

PAr

Gln

Arg

tao

Ala

eii

Sly

Val

Leu

Vil

ALa

Sie

His

eur

Gin

Sie

Phe

Iiu

Glu

Hal

ler

Acc

Aog

WI

ilu

Arg

iis

Leu

Ala

Gla

Poo

Thr

Poo

Leu

Gly

Iro

Ale

Sio

Srr

iiu

Poo

llu

Ser

Alo

Llu

Iiu

Lys

Sio

Lee

Glu

Gur

nuVi

Aog

Lys

lii

Gln

Cly

Asp

Gly

Ala

(Ua

Leu

ilu

Giu

Lys

Ssi

0(1

Ali

Thr

Tyo

Lys

Leu

Cys

HSo

Pro

llu

Glu

Iiu

Vv1

Leu

lui

uiu

iis

Ssr

Iru

Gly

lii

Pro

Trp

Ali

Poo

Leu

Sio

Ser

Cys

Poo

Ssr

llu

Ala

leu

Gln

Iiu

Ala

GSr

Cgs

Liu

Seo

liu

Llu

His

Sie

Gly:

Iiu

PPe

Leu

Tcr

ΙΗ

GAy

Leu

Lir

Clu

Ala

Iiu

Glu

Gly

lii

irr

Poo

Glu

leu

Gly

Poo

Thr

Lur

Asp

TAo

Leu

liu

Llu

Osn

VnV

Ali

Asp

PPe

Ali

Thr

cro

lle

Trp

Gln

Clu

Met

llu

Gln

Leu

iii

Sei

Ali

Pro

Ali

Llu

llu

Pro

TAo

Gln

lly

Ala

Mit

Poo

Ali

Phi

Ali

(SEQ ID

Ne:

285)

Przykład 73

Konstrukcja duplikowanej tandemowo matrycy plazmidowej Syntan1

Aby utworzyć duplikowaną tandemowo matrycę pMON13416 agonisty receptora hIL-3, Syntan1, połączono trzy DNA za pomocą ligacji, przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium). Trzema DNA są: 1) pMON13046, zawierający pMON13416 agonisty receptora hIL-3, trawiony BstEII i SnaBI; 2) hybrydyzowana para syntetycznych oligonukleotydów, L1syn for (SEQ ID nr: 48) i L1syn rev (SEQ ID nr: 49), która zawiera sekwencję kodującą linker, łączący końce C-terminalny i N-terminalny oryginalnego białka oraz małą ilość otaczającej sekwencji pMON13416, i która po prawidłowym zmontowaniu daje końce BstEII i ClaI; oraz 3) część pMON13416 agonisty receptora hIL-3 trawionego z pMON13046 za pomocą ClaI (DNA hodowano w komórkach dam-, DM1 (Life Technologies)) i SnaBI. Trawione DNA rozpuszczono na 0,9% żelu TAE, barwiono bromkiem etidium i wyizolowano przy użyciu Geneclean (Bio101).

Część mieszaniny reakcyjnej ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). DNA Miniprep wyizolowano z transformantów i transformanty przesiano, stosując oznaczenie oparte o PCR. DNA plazmidu z wybranych transformantów sekwencjonowano, aby uzyskać prawidłową matrycę. Otrzymany plazmid oznaczono syntan1 i zawiera on sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 84).

Przykład 74

Konstrukcja duplikowanej tandemowo matrycy, syntan3

Aby utworzyć duplikowaną tandemowo matrycę pMON13416 agonisty receptora hIL-3,

Syntan1, połączono trzy DNA za pomocą ligacji, przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer

Monachium). Trzema DNA są: 1) pMON13046, zawierający pMON13416 agonisty receptora hIL-3, trawiony BstEII i SnaBI; 2) hybrydyzowana para syntetycznych oligonukleotydów,

L3syn. for (SEQ ID nr: 50) i L3syn. rev (SEQ ID nr: 51), która zawiera sekwencję, kodującą

158

184 424 czającej sekwencji pMON13416 i która po prawidłowym zmontowaniu dajc końce BstEII iClaI; oraz 3) część pMON13416 agonisty receptora hIL-3 trawionego z pMON13046 za pomocą Ciał (DNA hodowano w komórkach dam-, DM1 (Life Technologies)) i SnaBI. Trawione DNA rozpuszczono na 0,9% żelu TAE, barwiono bromkiem etidium i wyizolowano przy użyciu Gencclean (Bio101).

Część mieszaniny reakcyjnej ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). DNA Miniprep wyizolowano z transformantów i transformanty przesiano, stosując oznaczenie oparte o PCR. DNA plazmidu z wybranych transformantów sekwencjonowano, aby uzyskać prawidłową matrycę. Otrzymany plazmid oznaczono syntan3 i zawiera on sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 85).

Przykład 75

Konstrukcja pMON31104

Utworzono gen w pMON31104 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu III jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono gen o pełnej długości z nowym końcem N/końcem C pMON13416 agonisty receptora hIL-3 i powielono z plazmidu pośredniego, Syntan1, przy użyciu zbioru primerów 35 start (SEQ ID nr: 52) i 34 rcv (SEQ ID nr: 53).

Otrzymany fragment DNA, który zawiera nowy gen trawiono endonukleazami NcoI i SnaBI. Trawiony fragment DNA rozpuszczono na 1% żelu TAE, barwiono bromkiem ctidium i wyizolowano z użyciem GeneClean (Bio101, Vista, CA). Oczyszczony trawiony fragment poddano ligacji do wektora ekspresji pMON13189, przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). DNA pMON 13189 trawiono uprzednio NcoI i SnaBI. w celu usunięcia sekwencji kodującej pMON13416 agonisty receptora hIL-3 i fragment wektora o 4254 parach zasad wyizolowano przy użyciu Gcneclean (Bio101, Vista, CA) po rozpuszczeniu na 0,8% żelu TAE i barwieniu bromkiem etidium. Część mieszaniny reakcyjnej ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON31104.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON31104 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMON31104 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 86), która koduje następująca, sekwencję aminokwasową:

Liu

Gsp

Ppo

Vsn

liG

Lee

Asn

Asp

liu

Aip

Val

Sio

IIl

Leu

Met

Asp

log

Ais

Ltu

Aog

Leu

Pro

Asn

Liu

Glu

Seo

Phi

Val·

Aog

Ala

aal

Lys

Aap

leu

liu

Asn

Ala

Ser

liy

IIi

Glu

Ma

IIi

Leu

Arg

Gpg

Liu

Glu.

Pos

Cys

Leu

Pro

Ser

Ala

Thr

Ala

Ala

Pro

Ser

Arg

Sis

Pos

IIi

Ile

Ili

L-r

Ala

Gly

Asp

Tro

Gln

liu

PPe

Arg

Glu

Lys

-tu

The

Phe

Cyo

Leu

Val

Thr

Liu

Giu

Glu

Ala

Gin

Glu

Gln

liu

lly

Gin

Gly

Sto

Asn

Cys

Ser

1li

Me i

lle

Gsp

Giu

lle

IIu

Sis

Sis

Lee

Lys

Aog

Ppo

Pro

Ala

Pos

Leu

Tyo

Kai

Glu

Gly

GZLy

lly

lir

Ssi

Pro

lly

Glu

Pro

Ssr

lir

Ppo

Ile

Sto

The

lle

Am

Pos

Sto

Ppo

Pro

Sio

L-r

Glu

Ser

Sis

L-s

Seo

Pos

Asn

Met

Ala

reo

liu

Gi|

Ala

Mit

Poo

1GLa

PPe

Ala

Sn

Ma

Phi

Gin

Arg

Arg

lia

Ciy

Gin

Val

Ltu

Val

Ala

Ser

Sis

Leu

Glu

Sio

Phe

Leu

Glu

aal

Sto

Tps

Arg

Val

Leu

llrg

iSs

Lru

Mn

Gln

Pos

Ssi

Gly

Gly

Sto

lir

Gin

Mer

liu

Ssi

Phe

Leu

Lru

L-r

Seo

Liu

Glu

Gln

Val

aog

Lys

Ilu

lln

lly

Asp

Gly

MALa

Ala

Lee

Gln

liu

L-r

Leu

Ccr

Aia

reo

Tps

lys

Ltu

Ccs

His

Pro

llu

Glu

Leu

aal

Leu

Leu

Gly

Sis

Sto

Ler

lly

Iii

Poo

Trp

CGLa

Pos

Leu

Ser

Sto

Gys

Pro

Ssr

liu

lia

Lee

lln

Ltu

Aia

Gly

Cys

Liu

5ei

Gln

Ltu

HSi

Ser

Gl·)/

Liu

Phi

Lee

Pyr

Glu

Gly

Seu

Leu

llu

Mu

Leu

liu

Gi|

Ile

Ssr

Pos

llu

Lee

lly

Pos

Thr

Leu

Asp

reo

Leu

Gln

Ltu

Aip

Val

Ma

Asp

Phi

AGu

Siar

Tho

IIi

Sro

lln

liu

Met

Glu

llu

Ler

Gly

Met

lia

Pos

Ala

Liu

llu

Pos

(SEQ ID

No:181)

184 424

159

Przykład 76

Konstrukcja pMON31105

Utworzono gen w pMON31105 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu III jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono gen o pełnej długości z nowym końcem N/końcem C pMON13416 agonisty receptora hIL-3 i powielono z plazmidu pośredniego, SynlaM, przy użyciu zbioru primerów 70 start (SEQ ID nr: 54) i 69 rev (SEQ ID nr: 55).

Otrzymany fragment DNA, który zawiera nowy gen trawiono endonukleazami NcoI i SnaBI. Trawiony fragment DNA rozpuszczono na 1% żelu TAE, barwiono bromkiem etidium i wyizolowano z użyciem GeneClean (Bio101, Vista, CA). Oczyszczony trawiony fragment poddano ligacji do wektora ekspresji pMON13189, przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). DNA pMON13189 trawiono uprzednio NcoI i SnaBI, w celu usunięcia sekwencji kodującej pMON13416 agonisty receptora hIL-3 i fragment wektora o 4254 parach zasad wyizolowano przy użyciu Geneclean (Bio101, Vista, CA) po rozpuszczeniu na 0,8% żelu TAE i barwieniu bromkiem etidium. Część mieszaniny reakcyjnej ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert.

Otrzymany plazmid oznaczono cMON31ł05.

Szczep E. coli JM101 transformowano cMON3ł105 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMOn31105 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 87), która koduje następującą sekwencję aminóknasową:

Asn

Gll

Ssu

Gly

Ilr

Cis

CU. a

Ilr

Leu

Arg

Acn

Les

Gln

Poo

Cys

Lrs

Pro

Sse

Ali

Tho

Ali

Al a

Pro

Ser

Arg

Ahs

Pro

IIe

Ilu

Ile

Lys

lii

Gly

Cno

Top

Gin

Glu

Phr

Cug

Glu

Lus

Lrs

Thr

SAu

Tyo

Ueu

Vil

TTh

Les

Gls

Cln

Ali

Gln

Gls

Gll

Alu

Cly

Gly

Gly

Seo

Gsn

Cys

Sse

Ile

Mrt

Ile

Asp

Glu

Ile

IIe

Ηΐ_£5

His

Leu

Lys

log

Soo

Pro

Ala

Pro

Leu

Leu

Asp

Pro

Asn

Ais

Leu

Asn

Aip

Gls

Asp

Vil

Sto

Ha

Ueu

Met

Cno

Arg

Csn

Less

Arg

Llu

Poo

Hn

Lus

Gls

Seo

Phe

Wl

Aog

Cli

Vai

Lys

Asn

Uus

Glu

Iys

Wl

Glu

Gly

Gly

11/

Gly

Sse

Pro

Gly

Gls

Pro

Seo

Gly

Paso

IIe

Seo

Thr

Ilu

Asn

Soo

Seo

Pro

Pro

Sro

U/s

Glu

Sro

His

Lus

Ast

Pro

Am

Met

Ali

Tho

Gin

Gly

Ali

Met

Pro

(ULa

SAr

Ali

Ssr

Ala

PAe

Gln

Aon

Arn

Ali

Gly

Gly

Vil

Lrs

Vll

Ali

Seo

His

Leu

Alu

Sto

PPr

Lus

ris

Vli

Seo

Tys

Grg

Vil

Lrs

(Org

His

Leu

Ala

Gln

Pro

Ser

riL

Gly

Seo

Gly

Gla

Seo

Gln

Sro

Phe

Lrs

Leu

Lus

Ast

Les

Glos

Gin

Vil

lun

Lys

IIe

Gin

Cly

Asp

Gly

CUi

Ali

Leu

GChl

Gls

Lys

Lrs

Cys

lii

Thr

Tyu

Uys

Lrs

Cys

His

Pro

Glu

GCh

Aeu

Vil

Llu

Lus

Gly

His

Sto

Leu

Gly

Ilr

Pro

Trp

Cli

Pro

Leu

Ssu

Sro

Cys

Poo

Seo

Gln

Cli

LeU

Gln

Leu

Ali

Gly

Cys

LUS

Ssr

Ali

Les

JEs

Stu

Gly

Leu

She

Leu

Tyo

Cln

Gly

Leu

Lrs

Gln

ALa

Luu

Cis

Gly

Ilu

Seo

Sro

Glu

Leu

GiL

Poo

TAo

Les

Asp

Tho

Leu

Ali

Lrs

AAs

Wi

Cli

isp

Phr

.Ali

TAo

Tho

Ile

Trp

Gln

Gln

Pter

Glo

ris

Leu

Gly

Mtt

Cli

Pro

Ale

Leu

Gln

Pro

(SEA IA

Nr:187)

Przykład 77

Konstrukcja pMON31106

Utworzono gen w pMO)N3n()6 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu III jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono gen o pełnej długości z nowym końcem

160

184 424

N/końcem C pMON13416 agonisty receptora hIL-3 i powielono z plazmidu pośredniego, Syntan1, przy użyciu zbioru primerów 91 start (SEQ ID nr: 56) i 90 rev (SEQ ED nr: 57).

Otrzymany fragment DNA, który zawiera nowy gen trawiono endonukleazami NcoI i SnaBI. Trawiony fragment DNA rozpuszczono na 1%o żelu TAE, barwiono bromkiem etidium i wyizolowano z użyciem GeneClean (Bio101, Vista, CA). Oczyszczony trawiony fragment poddano ligacji do wektora ekspresji pMON13189, przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). DNA pMON13189 trawiono uprzednio NcoI i SnaBI, w celu usunięcia sekwencji kodującej pMON13416 agonisty receptora hIL-3 i fragment wektora o 4254 parach zasad wyizolowano przy użyciu Geneclean (Bio101, Vista, CA) po rozpuszczeniu na 0,8% żelu TAE i barwieniu bromkiem etidium. Część mieszaniny reakcyjnej ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON31106.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON31106 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMON31106 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 80), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

Ala

Ono

Sui

Arg

HSs

Ppo

lit

Ile

ile

Lys

Ala

Gly

Asp

Trp

Gln

Ulu

Oht

Arg

Glu

Uys

Llu

crn

PPe

Ty;

Leu

Val

Thr

Leu

Glu

Gln

Ala

Tln

Glu

Gln

Uln

G1|

uiy

Gly

Se;

Asn

Cys

Ser

lit

Met

Ile

Asp

llu

Ile

Ili:

HSs

HHs

Uuu

Lys

Arg

Pro

Pro

Ala

P;o

Llu

Llu

Asp

Oio

Asn

OCsn

Ltu

Hn

Asp

GIu

Asp

Val

Sur

Ile

Leu

Met

0A>p

Ang

Asn

Len

OCrg

Utu

Poo

OCsn

Llu

Ulu

Ser

Pht

wi

Arg

ALa

wi

Uys

Asn

Luu

Glu

Asn

ALa

Sui

Gly

lit

Glu

CUi

1li

Leu

Arg

OCsn

Ltu

Uln

Pro

Cys

Utu

Ppo

St;

Ala

Th;

ALa

Typ

w i

Ulu

Gly

Gly

Tly

Uiy

Sui

Pieto

Tly

Glu

Oio

Ser

Tly

Pno

ile

Ser

Thn

Ile

OCsn

Pio

Stn

Pro

Pro

Se;

Lys

Ulu

Ssr

HSs

Lys

Sui

Ppo

OCsn

Met

GAi

Chi

Uln

Gly

Ala

Met

Pro

Ala

Phe

Ala

Sui

CUi

PPe

Uln

Arg

Arg

Ala

Tly

Gly

Val

Utu

Wi

Ala

Ssr

His

Leu

Tln

Ssu

Phe

Leu

Glu

Val

Stn

Typ

Arg

Wi

Llu

Cpg

Hiss

Leu

Ala

Uln

Piro

Se;

Gly

Gly

Sui

Tly

Gly

Ser

Uln

Ssu

Oht

Llu

Leu

Lys

Sen

Llu

Tlu

Gln

w i

Aig

Lys

lit

Gln

Tly

Acp

Gly

Ala

Ala

Ltu

Uln

Glu

Lys

Leu

Cys

Ala

Chi

Tyr

Lys

Ltu

Cys

HSs

Pro

Ulu

Glu

Ltu

Vv^1

Ltu

Leu

Gly

His

St;

Leu

Gly

lit

Pro

Tip

Ala

O;o

Utu

Str

Ser

Tys

Pro

Ssr

Tln

Ala

Leu

Gln

Leu

Ali

uiy

Cys

Ueu

Ser

Tln

Llu

His

Ssr

Gly

Ltu

Oht

Leu

Tyr

Uln

G1|

Ltu

Leu

Uln

Ala

Ltu

Glu

Tly

Ile

Ser

Pio

Ulu

Leu

GU|

Pno

Thr

Utu

Asp

Th;

Leu

Tln

Llu

Asp

Val

Ola

Asp

Oht

Ala

Thr

Thn

Ile

Tip

Gln

Uln

Met

Glu

GTu

Ltu

Gly

Met

Ala

Ono

ALa

Llu

Tln

Poo

(SEQ lD

Π:188)

P r z y k ł ad 78

Konstrukcja pMON31107

Utworzono gen w pMON31107 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu III jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono gen o pełnej długości z nowym końcem N/końcem C pMON13416 agonisty receptora hIL-3 i powielono z plazmidu pośredniego, Synt^1, przy użyciu zbioru primerów 101 start (SEQ ID nr: 58) i 100 rev (SEQ ID nr: 59).

Otrzymany fragment DNA, który zawiera nowy gen trawiono endonukleazami NcoI i SnaBI. Trawiony fragment DNA rozpuszczono na 1%o żelu TAE, barwiono bromkiem etidium i wyizolowano z użyciem GeneClean (Bio101, Vista, CA). Oczyszczony trawiony fragment poddano ligacji do wektora ekspresji pMON13189, przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). DNA pMON13189 trawiono uprzednio NcoI i SnaBI,

184 424

161 w celu usunięcia sekwencji kodującej pMON’3416 agonisty receptora hIL-3 i fragment wektora o 4254 parach zasad wyizolowano przy użyciu Geneclean (Bio101, Vista, CA) po rozpuszczeniu na 0,8% żelu TAE i barwieniu bromkiem etidium. Część mieszaniny reakcyjnej ligacji użyto do transformowania komórek DH5(a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających, ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sykwenajonowanó, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON31107.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON3n07 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzojnyah.

Plazmid pMON31107 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 89), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

lla

Cly

21p

Trp

Cln

Glu

PAe

log

Gls

Lus

Uts

TAo

PAe

Tyr

Lets

VGl

IAo

Leu

Glu

Cln

Ala

Gln

Gls

Gln

Gln

Gly

Cly

Cly

Ser

Acn

yys

Seo

Ile

Met

lle

Asp

Gls

lle

lie

Hii

His

Lrs

Uys

Arg

Pro

Poo

lii

Piso

Leu

Les

Asp

Poo

Asn

Gsn

Leu

isn

Gsp

Gls

Asp

Wl

Seo

Ilr

Leu

Met

GP0

Aog

Csn

Urs

Aon

Litu

Poo

Csn

Lts

Glu

Ssr

Phe

Vll

Arg

Ale

VII

Lys

Csn

Urs

Gls

Am

lii

Sro

Cly

IILe

Glu

Ali

Ilr

Leu

Arg

Gsn

Leu

Cln

Poo

Cys

Leu

Poo

Seo

CHa

Thr

Ala

lii

Poo

Ssr

Arg

His

Pro

lir

lir

lle

Lus

Tyo

Wl

Cis

Gly

Gly

Gly

Gly

Ser

Pro

Cly

Glu

Pro

Sro

Cly

Pro

lle

Seo

TAo

Ili

Acn

Poo

Sro

Paro

Pro

Sro

Lys

Cis

Seo

His

Lus

Seo

Poo

isn

Met

Ala

hho

Gln

Gly

Alu)

Met

Pro

CUi

Phr

Gll

Sse

Ali

Pht

Gin

Arg

TAO

lii

Gly

Gly

Wl

Ues

Wl

lii

Seo

His

Llu

Gln

Sto

Pht

Leu

Glo.

Vll

Sro

Tyr

Arg

Vil

Leu

Aon

His

Lrs

ALa

Cln

Soo

Seo

Gly

gch

Sro

Gly

Gly

Snc

Cln

Ser

Phe

Urs

Lrs

Lus

Seo

Les

ris

C^LLn

Wl

Aon

Lys

Ile

Glu

Cly

Asp

Gly

Ali

Ali

Llu

Gln

Gls

Lys

Leu

Cys

Ali

Tho

Tyr

Les

Cys

His

Poo

Cis

Glu

Les

Vii

Les

Leu

Gly

His

Seo

Leu

Gly

lir

Pro

Top

Ali

Poo

Leu

Sro

Sur

Cys

Pro

Sse

Cln

Gll

Leu

Gln

Lrs

Ali

Gly

Cys

Les

Ssr

rin

Lrs

His

Sei

Gly

Les

PAr

Leu

Tyr

Gin

Gly

Les

Les

Cln

ALe

Ues

Cis

Gly

Ile

Sst

Pro

Cis

Leu

Gly

Pro

Tho

Lrs

Asp

Tho

Leu

Cln

Lts

Cno

Wl

ALi

Cnp

Phe

Ala

Thr

TAo

IIe

Top

Cln

Cln

Me^Lt

Gls

Cis

Les

Gly

MmU

lii

Poo

Gll

Uts

Gln

Poo

(SEQ LD

No:189)

Przykład 79

Konstrukcja pMON31108

Utworzono gen w pMON31108 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu III jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono gen o pełnej długości z nowym końcem N/końcem C pMON13416 agonisty receptora hIL-3 i powielono z plazmidu pośredniego, Syntan3, przy użyciu zbioru primerów 35 start (SEQ ID nr: 52) i 34 rev (SEQ ID nr: 53).

Otrzymany fragment DNA, który zawiera nowy gen trawiono endonukleazami NcoI i SnaBI. Trawiony fragment DNA rozpuszczono na 1% żelu TAE, barwiono bromkiem etidium i wyizolowano z użyciem GeneClean (8^101, Vista, CA). Oczyszczony trawiony fragment poddano ligacji do wektora ekspresji pMON13189, przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). DNA pMON’3189 trawiono uprzednio NcoI i SnaBI, w celu usunięcia sekwencji kodującej pMONł34ł6 agonisty receptora hIL-3 i fragment wektora o 4254 parach zasad wyizolowano przy użyciu Geneclean (Bio101, Vista, CA) po rozpuszczeniu na 0,8% żelu TAE i barwieniu bromkiem etidium. Część mieszaniny reakcyjnej ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaiehetsburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających

162

184 424 ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON31108.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON31108 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMON31108 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 90), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

Uuu

Tsp

Oro

Asn

Tsn

Leu

Tsn

Asp

Glu

Aip

Val

Sm

Dlu

Leu

MeM

Tsp

Trg

Asn

Leu

Arg

Leu

Pro

Tsn

Uuu

Glu

Ser

PPe

Vil

Aa-Of

Ala

Val

e'S

Asn

Leu

Clu

Asn

Ala

Sur

Cl'

Ilu

Glu

(ALa

Dlu

Leu

Arc

Tsn

euu

Uln

Oro

G'S

Uuu

Oro

Sur

Tla

Air

Tla

Tli

Oro

Sur

Arg

His

Oro

Dlu

Ilu

Dlu

Les

Tla

Cl'

Cnp

Tr-

Gln

Glu

Oiu

Arg

Glu

U's

euu

Thr

POe

Tyr

Leu

Gai

Air

Uuu

Glu

Gln

(Ta

Uln

Glu

Glu

Cln

Cl'

Gly

Gly

Ser

Gly

Gl'

Cl'

Sur

Gly

Gly

Gly

Sur

Asn

Cyc

Sur

Dlu

Mut

Ilu

Asp

Glu

Dlu

Dlu

His

His

Leu

Les

Arg

Poo

Pro

Tla

Oro

euu

tyr

Val

Glu

Gl'

Cl'

Gly

Gly

Ser

Poo

Ul'

Glu

Pro

Ser

Uly

Pro

1ll

Sur

Thr

Ilu

Tsn

Oro

Ssu

Pro

Poo

Sur

Les

Glu

Ser

His

U'S

Ssu

Oro

Asn

Mut

Ala

Air

Gln

Gly

TAL ii

Mut

Peo

Ala

Phu

Tli

Sur

Tli

Piu

Gln

Arg

Arg

Tla

Gl'

Al'

Vai

Uuu

Vai

Tla

Ser

His

euu

Glu

Sur

POe

Uuu

Clu

Val

Srr

Tyr

(Arg

Val

Leu

Arg

His

Uuu

Ala

Glu

Pro

Sru

Gl'

Cl'

Sur

Gly

Gly

Ssu

Uln

Ser

The

Uuu

euu

U's

Ssu

Uuu

Glu

Gln

aai

Trg

Les

Cle

GIn

Cl'

Asp

Gly

Tli

Tla

Luu

Glu

Glu

Les

Leu

G'S

Tli

TAr

Tyr

Les

euu

C/s

Cii

Oro

Clu

Clu

Leu

Val

Leu

Uuu

Cl'

His

Sru

Leu

Gly

Ilu

Poo

Try

Tla

Oro

Luu

Ssu

Sur

C/s

Pro

Sur

Cln

Ala

Leu

Gln

euu

ALa

Clu

G'S

Uuu

Sur

Gln

Ueu

His

Ser

Gl'

Uuu

PPe

Leu

Tyr

Cln

Gly

Leu

Ueu

Gln

Ala

Leu

Ulu

Gl|

Ilu

Sur

Pro

Glu

Leu

Gly

Oro

Tłu:

Teu

Cnp

Air

Uuu

Gln

Uuu

As?)

Val

Ala

Tsp

Phe

(Tla

Thr

Ahr

Ilu

Tiy>

Gln

Uln

Met

Glu

Glu

Leu

Gl'

Mut

Tli

Por

TCLa

Leu

Uln

Por

(SEQ

DD Nr:190)

Przykład 80

Konstrukcja pMON31109

Utworzono gen wpMON31109 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu. III jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono gen o pełnej długości z nowym końcem N/końcem C pMON13416 agonisty receptora hIL-3 i powielono z plazmidu pośredniego, Syntan3, przy użyciu zbioru primerów 70 start (SEQ ID nr: 54) i 69 rev (SEQ ID nr: 55).

Otrzymany fragment DNA, który zawiera nowy gen, trawiono endonukleazami NcoI i SnaBI. Trawiony fragment DNA rozpuszczono na 1% żelu TAE, barwiono bromkiem etidium i wyizolowano z użyciem Geneclean (Bio101, Vista, CA). Oczyszczony trawiony fragment poddano ligacji do wektora ekspresji pMON13189, przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). dNa pMON13189 trawiono uprzednio NcoI i SnaBI, w celu usunięcia sekwencji kodującej pMON13416 agonisty receptora hIL-3 i fragment wektora o 4254 parach zasad wyizolowano przy użyciu Geneclean (Bio101, Vista, CA) po rozpuszczeniu na 0,8% żelu TAE i barwieniu bromkiem etidium. Część mieszaniny reakcyjnej ligacji użyto do transformowania komórek DH5cz szczepu E. coli (Life Technolpgies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON31109.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON31109 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMON31109 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 91), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

184 424

163

Asn

Ali

See

A^l-

lir

Glu

Ali

Iie

Iiu

Arg

Hapi

Iiu

Cln

Pro

Cys

Liu

Poo

Sei

Ola

Cho

Ala

Ali

Paro

Sio

Arg

His

Poo

lii

lle

lle

Iys

Ali

Giy

Oc p

Top

Gln

Clu

Phe

Gog

Glu

Lys

Iiu

TAo

Phe

Tyr

Iiu

Vi1

TTh

Oeu

1^

Gla.

Ali

Gin

Clu

Gln

Gln

Cly

lly

Giy

Ser

lly

lly

Giy

0 rt,

lly

Gly:

Cly

Ssr

olsn

Cys

Ser

lii

Mit

Ile

Asp

llu

Ili

Ili

Hii

(lis

Leu

Iys

Arg

Poo

Paro

Alu

Poo

Ilu

Leu

Asp

Poo

Asn

Agp

0 eu

Asn

Asp

Clu

JAP

Vi1

Ser

Iie

Iiu

Mit

Asp

Arg

Asn

Iiu

Al]

0 Li

Poo

Asn

Iru

Giu

Sio

PPh

Wl

Aog

Ali

Val

Iys

Asn

leu

Gln

Ocr

Vli

Glu

lly

Giy

lly

Gly

Osi

Poo

Gly

Clu

Poo

Sio

lly

Poo

OIe

Sio

Tina,

Iii

Ais

Poo

Ser

Pro

Poo

Sio

Lys

llu

Sio

iis

Lys

Her

Poo

Asn

Mit

Mn

TAo

Gln

Oly?

(Gla

Mit

Peo

Ali

Phi

Ali

Srr

Ala

PAr

Gln

Aog Ai^g

Ali

Gly

Cln

Hal

Iiu

Vi1

AU a

Sio

iis

Ler

Olu

Sio

PPh

Iiu

Gla

Vi1

Ser

Ots

Arg

Va1

Iru

Aog

iis

Iru

Ali

Ole

Poo

Ssr

lly

Gly

Sio

Gly

Giy

Sio

Cln

Sie

Phe

Iiu

leu

Lys

Her

Iiu

Gln

lln

Wl

Aeg

Lys

(In

Gln

lly

Asp

lly

Ali

Ali

Lis

Gln

llu

Lys

Iiu

Cgs

Ali

Thr

Tcr

Iys

Iiu

Gys

His

Poo

Cil

Gln

Oeu

Vli

Leu

Iiu

Gly

iis

Ser

Clu

Giy

Ili

Poo

Cep

All

Poo

Lii

Her

Sio

Cgs

Poo

Ser

lin

Ala

Leu

Cln

Iru

Ala

lly

Gys

Iiu

Ser

G ln

Liu

His

Sio

Gly

Iiu

PPe

Cee

Tyo

Gin

Cly

Iiu

Ilu

lln

Ala

Oeu

ilu

Gly

lii

Ser

Poo

Glu

Llu

lly

Poo

TAo

Leu

Asp

TAo

Lir

0 Cii

Iiu

Asp

Vi1

JAl

Asp

PPe

HAn

Tho

TAo

lii

Top

Cln

lin

Mit

liu

Clu

Iiu

Cly

Mit

Ali

Poo

Ali

Iiu

Cln

Poo

(SEQ

ID 10:1915

Przykład 81

Konstrukcja pMON31110

Utworzono gen w pMON31110 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu III jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono gen o pełnej długości z nowym końcem N/końcem C pMON13416 agonisty receptora hIL-3 i powielono z plazmidu pośredniego, Syntan3, przy użyciu zbioru primerów 91 start (SEQ ID nr: 56) i 90 rev (SEQ ID nr: 57).

Otrzymany fragment DNA, który zawiera nowy gen, trawiono endonukleazami NcoI i SnaBI. Trawiony fragment DNA rozpuszczono na 1% żelu TAE, barwiono bromkiem etidium i wyizolowano z użyciem Geneclean (Bio101, Vista, CA). Oczyszczony trawiony fragment poddano ligacji do wektora ekspresji pMON13189, przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). DNA pMON13189 trawiono uprzednio NcoI i SnaBI, w celu usunięcia sekwencji kodującej pMON13416 agonisty receptora hIL-3 i fragment wektora o 4254 parach zasad wyizolowano przy użyciu Geneclean (Bio101, Vista, CA) po rozpuszczeniu na 0,8% żelu tAe i barwieniu bromkiem etidium. Część mieszaniny reakcyjnej ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON31110.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON31110 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMON31110 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 92), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

164

184 424

Ali

Poo

Ser

Arg

His

Piso

lle

Ile

lle

Lus

(li

Gly

Aup

Gop

Gln

CUu

Phe

Arg

(lu

Lys

Luu

Tho

PPe

ryg

Luu

Vii

Thr

Leu

(lu

Glu

Ali

Cln

Glu.

(ln

Cln

Gly

Cis

Gly

Eto

Gly

Air

Gly

Ero

Cis

Gly

cis

Ero

TAn

Tys

Emo

Ilu

Pet

Ilu

Asp

Glu

lir

Ile

His

His

Leu

Lys

Aog

Pro

Poo

lii

Piso

Leu

Leu

Asp

Piso

Asn

Asn

Leu

Asn

Asp

Clu

Asp

ViU

Eto

Ilr

Lru

Met

Asp

Aog

Asn

Lru

Aog

Lru

Poo

Ass

Lru

(lu

Ser

pet

TTiil

Arg

Ali

Val

Lys

TAn

Lru

Glu

Asn

Ali

Ser

Aly

IlL

GAu

Ali

Ilr

Llu

Aog

Am

Lru

Gln

Poo

Cys

Lru

Poo

Ser

Ali

Gho

ALa

ryg

VaU

Glu

Air

Gly

(lr

Gly

Eeo

Pro

Cis

(lu

Pro

Ero

(lS

Piso

IUr

Eto

Ttir

Ile

Ais.

Poo

Ser

Poo

Pro

- Eto

Lys

Glu

Ero

His

Lys

Ero

Pro

Asn

Mrt

Ala

ero

Gln

Air

Ala

Met

Poo

Ala

Phe

Ali

Eeo

Gli

Phr

(ln

Gog

Aog

Ali

(lr

Cis

VII

Lru

Vil

Ali

Ero

His

Leu

Aln

Eto

PPe

Uru

Glu

VII

Ser

Cyo

Arg

ViU

Lru

Arg

His

Leu

Ala

(ln

Piso

Ser

Cly

Gly

Eeo

Gly

Air

Ser

(in

Ero

Phi:

Uru

Leu

Lys

Eto

Ltu

Glu

Aln

Val

Gog

Lys

IlL

Gln

Cis

Asp

Gly

Ali

Ali

Luu

Aln

(lu

Lus

Eru

Ces

Ali

Thr

Cyo

Lys

Lru

Tys

ΗΪΗ!

Poo

Clu

Glu

Lru

Vai

Luu

Lru

Gly

His

Ser

Lru

Gly

lie

Poo

Trp

Ali

Poo

Ler

Eto

Eto

Ces

Poo

Ser

(ls

TALa

Lru

Gln

Leu

Gli

Gly

Tys

Lru

Ser

(ln

Ltu

HHi

Ero

Gly

Ltu

Phe

Ltu

Tyr

Cln

Cis

Leu

Leu

(ln

TALa

Ltu

Glu

Gly

lir

Ser

Poo

Glu

Utu

Gly

Poo

Gho

Leu

(sp

Gho

Luu

Aln

Ltu

Asp

Vi1

TALa

Asp

Phe

Ali

Thr

Gho

lie

Trp

Aln

Cln

Met

(lu

Clu

Luu

Cis

Met

Ali

Pro

Ali

Leu

(in

Poo

(SSQ

ID No:192)

Przykład 82

Konstrukcja pMON31111

Utworzono gen w pMON31111 z nowym końcem N/końcem C, przy użyciu sposobu III jaki opisano w materiałach i sposobach. Utworzono gen o pełnej długości z nowym końcemN/końcem C pMON13416 agonisty receptora hIL-3 i powielono z plazmidu pośredniego, Syntan3, przy użyciu zbioru primerów 101 start (SEQ ID nr: 58) i 100 rev (SEQ ID nr: 59).

Otrzymany fragment DNA, który zawiera nowy gen, trawiono endonukleazami NcoI i SnaBI. Trawiony fragment DNA rozpuszczono na 1% żelu TAE, barwiono bromkiem etidium i wyizolowano zużyciem Geneclean (Bio101, Vista, CA). Oczyszczony trawiony fragment poddano ligacji do wektora ekspresji pMON13189, przy użyciu ligazy DNA T4 (Boehringer Monachium, Indianapolis, IN). DNA pMON13189 trawiono, uprzednio NcoI i SnaBI, w celu usunięcia sekwencji kodującej pMON13416 agonisty receptora hIL-3 i fragment wektora o 4254 parach zasad wyizolowano przy użyciu Geneclean (Bio101, Vista, CA) po rozpuszczeniu na 0,8% żelu TAE i barwieniu bromkiem etidium. Część mieszaniny reakcyjnej ligacji użyto do transformowania komórek DH5a szczepu E. coli (Life Technologies, Gaithersburg, MD). Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowy insert. Otrzymany plazmid oznaczono pMON31111.

Szczep E. coli JM101 transformowano pMON31111 w celu ekspresji białka i izolacji białka z ciał inkluzyjnych.

Plazmid pMON31111 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 93), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

184 424

165

Ali Vil

Hy Aap

Trp Gln Glu Gln

Glu Ala

Phe Arg Glu Lys

Liu Thr

Phe gsc

Tyr Ser

Lei Gly

Phr

Llu

Gin

du

Gln

dn

dy

dy

Gly

Gly

Sei

Gly Gly

dy

Ser

Asn

Cys

Sir

Ile

Met

Iie

Asp

Glu

Ile

Ile

His

His Leu

Lys

Arg

Pito

Pro

Ali

Pro

Liu

Leu

Asp

Pro

Asn

Asn

Liu

Asn Asp

Glu

Asp

Val

Sir

Ile

Liu

Met

Asp

Arg

Asn

Liu

Arg

Liu

Pro Asn

Leu

Glu

Ser

Phe

Val

Arg

Ali

Val

Lys

Asn

Liu

du

Aap

ALa Ser

Gly

Ile

du

TAa

Ile

Liu

Arg

Asn

Leu

Gln

Pro

Cys

Liu

Pro Ser

Al ai

Thr

Ala

Aa

Pro

Sir

Arg

His

Pro

Ile

Ile

Ile

Lys

Tyr Vil

du

dy

Gly

Gly

dy

Sir

Pro

Gly

Glu

Pro

Sir

Gly

Ppo

1li Ser

Thr

11i

Asn

Paro

Sir

Pro

Pro

Ser

Lys

Glu

Sir

His

Lys

Sir Pro

Asn

Met

Ali

Phr

Gln

Gly

Ali

Met

Pro

Ali

Phi

Ali

Sei

Ali Phe

dn

Arg

Arg

Ala

Gly

Gly

Val

Leu

VaS

Ala

Sir

His

Lii

Gln Sir

Phe

Leu

du

Val

Sir

Tyr

Arg

Val

Leu

Arg

His

Liu

AAl

Gln Pro

GGr

Gly

Gly

Ser

Gly

Gly

Sir

Gln

Ser

Phe

Liu

Liu

Lls

Ser Leu

du

Gln

Val

Arg

Lys

Ile

Gln

Gly

Asp

Gly

Ali

Ali

Liu

Gln Glu

Lys

Leu

Cys

ALa

Thr

Tyr

Lys

Leu

Cys

Hii

Pro

Glu

du

Leu Vil

Leu

Leu

Gly

Kis

Sir

Liu

dy

lie

Poo

Trp

Ali

Pro

Lii

Ser Ser

Ccs

Pro

Ser

Gln

Ali

Liu

Ha

Leu

Ala

Gly

Cys

Liu

Sei

Gln Leu

His

Ser

Gly

Leu

Phi

Liu

Tyr

Gln

Gly

Leu

Liu

Gln

AAa

Leu Glu

dl^

11i

Ser

Pro

Glu

Liu

Gly

Pro

Thr

Leu

Asp

Thr

Lii

Gln Leu

Asp

Vai

TAa

Asp

Phi

ALi

Thr

Thr

Iie

Tut»

Gln

Gln

Met

Glu Glu

Leu

Gly

Me i

Aa

Pro

ALi

Liu

Gln

Pro

(SEQ

ID Nr:193)

Przykład 83

Konstrukcja pMON31112

Konstrukcja pMON31112, plazmidu, zawierającego sekwencję DNA, kodującą agonistę krwiotwórczego receptora wieloczynnościowego, który aktywuje receptor hIL-3 i receptor G-CSF. DNA plazmidowe pMON13189 trawiono enzymami restrykcyjnymi NcoI iXmaI, otrzymując fragment wektora NcoI, XmaI, który wyizolowano i oczyszczono z 0,8% żelu agarozowego. DNA z drugiego plazmidu pMON13222 (WO 94/12639), US numer kolejny 08/411 796) trawiono NcoI i EcoRI, otrzymując fragment NcoI, EcoRI o 281 parach zasad. Fragment ten wyizolowano i oczyszczono z 1,0% żelu agarozowego. Dwa oligonukleotydy SYNNOXA1.REQ (SEQ ID nr: 240) i SYNNOXA2.REQ (SEQ ID nr: 241) hybrydyzowano i poddano ligacji z fragmentem DNA o 281 parach zasad z pMON13222 do fragmentu wektora DNA zpMON13189. Część mieszaniny ligacji transformowano potem do E. coli K-12 szczepu JM101. Transformowane bakterie poddano selekcji napłytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano, analizowano, przez analizę restrykcji, aby wykazać obecność fragmentu EcoRV i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowe inserty.

Plazmid pMON31112 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 114), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

MetAlaAsnCysSerAsnMetlleAspGluIlelleThrHisLeuLysGlnProProLeu

ProLeuLeuAspPheAsnHnLemAnGlyGluAspGlnAspI IclerMe LAspAsnAsn

LeuArgArgProAsnLeuGGcAAaPheAssArgAlaValLysSerLeuGlnAsinA-aSer

AlalleGluSerlleLeuLysAsnLeuLeuProCysLeuProLeŁUAaThrAlaAlaPro

ThrArAHisProIlHHSsIleLrsAspGlySppTrrAsnGluPheArgArALysLeuThr

PPeTyryluLysThrLeuduUArlAradnAradndnApsValdudydyGlydy

SirProGlyGluProSerGlyProIleSerThrIiAPsnProSirProProSirLysdu

SlrHisLysSerPooSSmMetAllThrGlnGlynlMetProMlPheZrLlSlrAlaPhl

GlnArAArgAA.aGlyGlyValLiuValAliSirHisLiuGlnSirPhiLeuGluValSir

TyrArAV^:iLiuAc<^I^i£^]^c^Lu^e^l3li^I?3:(^i5Sii:C^li^C^l;^i^ei:G]-yGl.ySirGl^nSir^I?hi

LiuLeuLysSerLeuGluGlnValArgLysIleGlnGlyAspGlyAliAlaLeuGlnGlu

LysLiuCysAliThrTyrLysLiuCysHisProGluGluLeuValLeuLeuGlyHisSir

LiuG.lyll^^I^r^oPrrpAlaPrroI^euSirSii^CysPi^oSirGlnAliLiudnLiu.Ał.iGLy

CysLiuSerGlnLiuHisSirGlyLeuPhiLiuPyrGlnGlyLiuLiuGlnAliLiuGlu dyIleSerPruGluleudyPrτPhileAPspThrLeudnLeuAρpValAl;A.spPPl AlaTPrPPrIleTrpUlnUlnMetduduyluGlyMel2AaProAliyluUlnPrr (SEQ II No:199)

166

184 424

Konstrukcja pMON31113

Konstrukcja pMON31113, plazmidu, zawierającego sekwencję DNA, kodującą agonistę krwiotwórczego receptora wieloczynnościowego, który aktywuje receptor hIL-3 i receptor GCSF. DNA plazmidowe pMONł3ł97 trawiono enzymami restrykcyjnymi NcoI i XmaI, otrzymując fragment wektora NcoI, XmaI, który wyizolowano i oczyszczono z 0,8% żelu agatozowegc. DNA z drugiego plazmidu pMON’3239 (WO 94/12639), US numer kolejny 08/411 796) trawiono NcoI i EcoRI, otrzymując fragment NcoI, EcoRI o 281 parach zasad. Fragment ten wyizolowano i oczyszczono z 1,0% żelu agarozowego. Dwa oligonukleotyko SYNNOXA1.REQ (SEQ ID nr: 240) i SYNNOXA2.REQ (SEQ ID nr: 241) ^br^zowano i poddano ligacji z fragmentem DNA o 281 parach zasad z pMON’3239 do fragmentu wektora DNA zpMON13197. Część mieszaniny ligacji transformowano potem do E. coli K-12 szczepu JM101. Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano, analizowano, przez analizę restrykcji, aby wykazać obecność fragmentu EcoRV i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowe inserty.

Plazmid pMON31113 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 115), która koduje następująca, sekwencję aminokwasową:

MrPAllApnyypreoAsnMetllrAsoGlsllelluhhoHSpLrsLysGlnrorrorLes rorLusLruAsprheAseGρnLrsAsnrlyGlsAspGlnCnpllrLrseetGlsCpelρn LrsAugAonrorAsnLrsGlsAlGrAuAsnArnGlGallLypreoLrsGln.CρeCHGreo CUlllerlsSeollrLrsLysAsnUesLrsPorCysLesrorLrs1llTAo1lGAlGrrr hhoArnHiprurlluIlulluGonGsprlu1sphrp1serlsrhe1rn1unUysI·ushAu SreΊ^,LoLruLyshhoLrsGlsAsnAllrlnAlGGlnGlnhyoallGlsGlyGlLrlyrlL SrorrrrlyGlsProSeoGlLroolluSeohArIluGpeProreoPorrroSurLLPrls eeoHSsLysruorrrGprieePCllhAorlerlyAlaMetrorGllPheGllrrr1llrAe GleCrn1on1(GGHLrlyVαlLesVαHalαSurHrsLusGlnreoPAuLesGlsVαlSuu hyoAugallLes1onHSsLesAllGlePorhAoPrrLrsrlyror1llruorroLusror rlnrurrAuUusLusULsSuoUesGlsrleVal1rnLLPllerlnGlLlsprlyAll1la LesrlnGlsLysLrsyysAllThoTLoLLsLrsyLsHSsrorGlsGlsLesaGlUusLes rluHSseroLesrlyllurorTopAlGrorUesSuoruoCyprorrrorlnGlGLusGln LesCllGlyCLsLrsreorlnLrsH.^ sSerClLLtsPhrLesTyorinriLLesUesrin GllLesGlsGlyllereororGlsLrsGlyrorhAoUusAsohAoLrsGlnLesCppaGl GlaasprhrAlGhAohArllrhopGlnGl:neetrlsrlsLrsrluertAlαPorAllLrs Gleror (SEQ ID No:200)

Przykład 85

Konstrukcja pMON31114

Konstrukcja pMON3U 14, plazmidu, zawierającego sekwencję DNA, kodującą agonistę krwiotnntczego receptora wieloczynnościowego, który aktywuje receptor hIL-3 i receptor GCSF. DNA plazmidowe pMONł3ł89 trawiono enzymami restrykcyjnymi NcoI i XmaI, otrzymując fragment wektora NcoI, XmaI, który wyizolowano i oczyszczono z 0,8% żelu agatozonego. DNA z drugiego plazmidu pMON’3239 (WO 94/12639), US numer kolejny 08/411 796) trawiono NcoI i EcoRI, otrzymując fragment NcoI, EcoRJ o 281 parach zasad. Fragment ten wyizolowano i oczyszczono z 1,0% żelu agatozowego. Dwa oligonukIeotoko SYNNOXA1.REQ (SEQ ID nr: 240) i SYNNOXA2. REQ (SEQ ID nr: 241) hobrodozowanc i poddano ligacji z fragmentem DNA o 281 parach zasad z pMON13239 do fragmentu wektora DNA zpMONł3ł89. Część mieszaniny ligacji transformowano potem do E. coli K-12 szczepu JM101. Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano, analizowano, przez analizę restrykcji, aby wykazać obecność fragmentu EcoRV i sykwenajonowano, aby potwierdzić prawidłowe inserty.

Plazmid pMON3n14 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 116), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

184 424

167

MePrHGAsnCysruoAseMePIlrAPoGlsllellehAoHSsLesLysrlnSorrorLes

PorLrsLes1ρprAe1snAsnLrsasnGlyGls1soGlnGspllrUesMrtGlsGseAsn

Les1onAogror1snLesrlsGllrheCpnAog1lαVllLyserrLesrlnCpn1lαruo

CHlllerlseeolleLesLysAsnLruLrurorCysLesrorLrsAllhhoCUlCUlPor hAoAonHSsrorllrllelleAogAspGlyAspTrpAsnrlsrAe1ogAunLypUeshAo PrrhyrLesLysTAoLrsrls1seGlarleCHGGlnGlnTyoallrlsrlyrlyGlLrly ruoProrlyGlsPorruorlLrrrllererTAoIl<uapnrorSuororPurSerUypGls SeoHSpULsSeoPrrApeeuPAllThrGlnGlyAlaeetrrrCHlPAuAlGS.ur1lαrnu GlnAog1ogCHarlyGlyaalLrsaalCHaSeoHSsLesGleeeorheUrsrlsValreo hyoGogaGlLesAogHipLesCHlGlnPoreroGlyrlyeeorlyrlyrrorleSeorAu LesLesLyprroLesGlsGleaGl1onLysllrGleGlyCPoGlyaHaClGLrsrleGls LLsLrsCysCHlhhohyoLysUesCysHSprorGlsGlsLesallLrsLesrlyHSsreo LesrlyllrrorhooAlαrorLeseeorerCypS:loruoGlnAlGLesrlnLesAlαrly CysLrsreoGlnLrsHiseroGluLrsrAeLrslLorlnrlyLrsLrsGlnGllLesGls GlylleruororGlsLesGlyrorTAoLrs1solArUusrleLrsCnoVGlCHlAsorAe 1llhhohAollrToprleGlnMutGlsGlsLesGlLertCHlror.CllLesrlnPor (SEQ ID NO: 201)

Przykład 86

Konstrukcja pMON31115

Konstrukcja pMON3łłł5, plazmidu, zawierającego sekwencję DNA, kodującą agonistę krwiotwórczego receptora wieloczynnościowego, który aktywuje receptor hIL-3 i receptor G-CSF. DNA plazmidowe pMON13197 trawiono enzymami restrykcyjnymi NcoI i XmaI, otrzymując fragment wektora NcoI, XmaI, który wyizolowano i oczyszczono z 0,8% żelu agarozowego. DNA z drugiego plazmidu pMON’3222, trawiono NcoI i EcoRI, otrzymując fragment NcoI, EcoRI o 281 parach zasad. Fragment ten wyizolowano i oczyszczono z 1,0% żelu agatozowego. Dwa oligonukleotyko SYNNOXA1.REQ (SEQ ID nr: 240) i SYNNOXA2.REQ (SEQ ID nr: 241) hybrydy zowano i poddano ligacji z fragmentem DNA o 281 parach zasad zpMON’3222 do fragmentu wektora DNA zpMON13197. Część mieszaniny ligacji transformowano potem do E. coli K-12 szczepu JM101. Transformowane bakterie poddano selekcji na płytkach, zawierających ampicylinę. DNA plazmidu wyizolowano, analizowano, przez analizę restrykcji, aby wykazać obecność fragmentu EcoRV i sekwencjonowano, aby potwierdzić prawidłowe inserty.

Plazmid pMON3n 15 zawiera sekwencję DNA o (SEQ ID nr: 117), która koduje następującą sekwencję aminokwasową:

eutAllCpeCysSurApneetIle.apoGlsIlullehAoHSsLesLyρGlnrroPrrLus rorLrsUes1sprAe1peGsnUrs1serlyGlsGsoGleGsolleLrseutGsp1sn1sn

LusAonGogror1snLrsGlsAllSheAseAonaHlallLypreoLesGlnCpn1Uleeo

AlGIlerlsrerlluUesULPCpeLusUusProyysUesPorLus1lGhAoAll1lGPrr hhr1ogHSprorllrHislleLysGρorlylPoTooCnnGlsrhr.ConAonLysLeshho rAehyoLrsLyshAoLrsGlsAse1lGGleAllGlerlehyoallrlsGlLrlyGlyrly ruororGlyrlsrrrreorlLrorlleSeoTholleAserorerororrorreoUyρGls reoHisLypee:lPrrAs]neetAllThoGlnGlyAlaerProrAllPheAllrro1llPAe GleAogAonAllGlyGlyVllLrsallAllrroHSpLrurlerrorArLusGlsallrro hLo1rnVαlLusAunHSsLes1lGGlePrrhAoPorLusrlLrrrAlarurSurLusPro rlneroPhrLrsLesLysrroLesrlsGlnalUCogLysllrGlnrlLAnpGlyAlGlll LrsGlnGlsLLSLusyLsAlαhAohyoLysLruCyρHSsrorGlsGlsUusaGlUusLrs GluHSsSroLeuGlyllerorhooGllPrrLrserorroCysPorreoGle1lGLusrln LusGllrlyCysLesreorleLusHSsruorluLeu.PheLesTLrGlnrlyLesUusGln CHlLrsrlsGlyIleeeororrlsLesrlyrorhhoLruAspThoLusGlnUesAppall .ClaanorAeAlαhAohAolleToorlnGleMetGluGlsLesGlyIeePTHarorAlaLrs GlnPor (SEQ ID N0:202)

168

184 424

Przykład 87

Określenie aktywności in vivo białek agonisty krwiotwórczego receptora wieloczynnościowego

Stężenie białka agonisty krwiotwórczego receptora wieloczynnościowego, można określić przy użyciu sandwiczowej ELISA w oparciu o powinowactwo oczyszczonego przeciwciała poliklonalnego. Alternatywnie, stężenia białka można określić przez analizę składu aminokwasowego. Bioaktywność agonisty krwiotwórczego receptora wieloczynnościowego można określić w wielu oznaczeniach in vitro. Przykładowo agonista krwiotwórczego receptora wieloczynnościowego, który wiąże receptor hIL-3 i receptor G-CSF, można oznaczyć w oznaczeniach proliferacji komórkowej, stosując linie komórkowe o ekspresji receptorów hIL-3 i/lub G-CSF. Jednym z takich oznaczeń jest oznaczenie proliferacji komórkowej AML-193. Komórki AML-193 odpowiadają na IL-3 i G-CSF, które pozwalają na określenie połączonej bioaktywności agonisty krwiotwórczego receptora wieloczynnościowego IL-3/G-CSF. Innym takim oznaczeniem jest oznaczenie proliferacji komórek TF1.

Poza tym można stosować inne linie komórkowe zależne od czynnika, takie jak M-NFS-60 (ATCC.CRL 1838) lub 32D, które są mysią linią komórkową zależną od IL-3. Aktywność IL-3 jest zależna od gatunku, podczas gdy G-CSF nie, zatem bioaktywność składnika G-CSF agonisty krwiotwórczego receptora wieloczynnościowego IL-3/G-CSF można określić niezależnie. Linie komórkowe, takie jak BHK lub mysia Baf/3, które nie wykazują ekspresji receptora dla danego liganda, można transfekować plazmidem, zawierającym gen, kodujący żądany receptor. Przykładem takiej linii komórkowej jest BaF3 transfekowana receptorem hG-CSF (BaF3/hG-CSF). Aktywność agonisty krwiotwórczego receptora wieloczynnościowego w tych liniach komórkowych można porównać z hIL-3 lub G-CSF pojedynczo lub razem. Bioaktywność przykładów agonistów krwiotwórczego receptora wieloczynnościowego według niniejszego wynalazku oznaczonego w oznaczeniach proliferacji komórkowej BaF3/hG-CSF i proliferacji komórkowej TF1 ukazano w tabeli 5 i tabeli 6. Bioaktywność agonisty krwiotwórczego receptora wieloczynnościowego wyraża się jako aktywność relatywną w porównaniu z białkiem standardowym pMON13056 (WO 95/21254). Bioaktywność przykładów agonistów krwiotwórczego receptora wieloczynnościowego według niniejszego wynalazku oznaczoną w oznaczeniach proliferacji komórkowej BaF3/c-mpl i proliferacji komórkowej TF1 ukazano w tabeli 7 i tabeli 8.

Tabela 5

Aktywność proliferacji komórkowej podwójnych agonistów receptorów IL-3/G-CSF

pMON	Oznaczenie proliferacji komórkowej receptora BaF3/hG-CSF aktywność relatywna*	Oznaczenie proliferacji komórkowej TF1 aktywność relatywna*
1	2	3
13182	0,015	1,1
13183	0,02	nd
13184	0,01	0,3
13185	0,023	0,36
13186	0,36	0,45
13187	0,07	0,26
13188	0,64	1,3
13189	0,58	1,37
13190	0,045	1,2
13191	0,14	2,7
13192	0,09	2,2

184 424

169 cd. tabeli 5

1	2	3
13193	0,06	3,0
25190	nd	nd
25191	0,43	1,2
13194	nd	nd
13195	1,3	4,3
13196	0,66	0,5
13197	0,6	0,77
13198	0,6	0,5
13199	nd	nd
15982	0,7	1,9
15981	0,068	12
15965	0,	0,82
15966	0,36	148
15967	0,62	1,37

nd = oii określano * Bioaktywność igoniSy krwiotwórczego reIestera wiiloozysnościiwego wyraża sii (iko aktywność relitysną w porównaniu o Oilkiim otylldredeym slMON13056. o = ( uo iięSzaa.

Tabela 6

Aktywność proliferacji komórkowej podwójnych agonistów receptorów 1L-3/G-CSF

pMON	Oznaczenie proliferacji komórkowej receptora BaF3/hG-CSF aktywność relatywna	Oznaczenie proliferacji komórkowej TF1 aktywność relatywna
31104	+	+
31105	+	+
31106	+	+
31107	nd	nd
31108	+	+
31109	+	+
31110	nd	nd
31111	nd	nd
31112	+	+
31113	+	+
31114	+	+
31115	+	+
31116	nd	nd
31117	nd	nd

170

184 424 nd = nie określono + Birιkpwność Al = I lob 2) ιsrLisp kowiotwórczeso reeepton wieloszz/nościsweso w/nża n ii i jko akt/wność relittunąw porównaniu n pilkin npιLdιldzν'm nMON 13056.

„+” wskazuje, Al nząstetzki I/li norówe/wilni n pMON 13006.

Tabela 7

pMON	Oznaczenie proliferacji komórkowej receptora BaF3/hG-CSF aktywność*	Oznaczenie proliferacji komórkowej TF1 aktywność
28505	—	+
28506	—	+
28507	—	+
28508	—	+
28509	—	+
28510	—	+
28511	+	+
28512	+	+
28513	+	+
28514	+	+
28519	-	+
28520	-	+
28521	—	+
28522	—	+
28523	-	+
28524	—	+
28525	+	+
28526	+	+
28533	—	+
28534	—	+
28535	-	+
28536	—	+
28537		+
28538	-	+
28539	+	+
28540	+	+
28541	+	+
28542	+	+
28543	+	+
28544	+	+
28545	+	+

* Aktywność mierzona w l ii ii komórkowej Bif3 PoιLSeLkwιnLj uLepterlm c-mpl, w stsssks do l inindi c-mpl (1-103).

+ Aktywność mierzona w ntessnks do p^MON^O..

184 424

171

W podobny sposób można stosować inne linie komórkowe zależne od czynnika, znane fachowcom, do pomiaru bioaktywności żądanego agonisty krwiotwórczego receptora wieloczynnościowego. Oznaczenie metylocelulozowe można stosować do określania wpływu agonistów krwiotwórczego receptora wieloczynnościowego na ekspansję krwiotwórczych komórek rodzicielskich i wzór różnych typów kolonii krwiotwórczych in vitro. Oznaczenie metylocelulozowe może zapewnić oszacowanie częstotliwości prekursora, ponieważ mierzy się częstotliwość komórek rodzicielskich na 100000 komórek wejściowych. Długoterminowe hodowle zależne od zrębu stosowano do określenia pierwotnych krwiotwórczych komórek rodzicielskich i/lub komórek macierzystych. Dodatkowo, można przeprowadzać ograniczone rozcieńczanie hodowli, które będą wskazywać częstotliwość pierwotnych komórek rodzicielskich stymulowanych przez agonistów krwiotwórczego receptora wieloczynnościowego.

Tabela 8

pMON #	Aktywność agonisty 1L-3 (oznaczenie proliferacji komórek AML)	Aktywność agonisty receptora c-mpl (oznaczenie proliferacji komórek Baf/3-c-mpl)
28505	+	-
28506	+	-
28507	+	-
28508	+	-
28509	+	-
28510	+	-
28511	+	+
28512	+	+
28513	+	+
28514	+	+
28515	+	+
28519	+	-
28520	+	-
28521	+	-
28522	+	-
28523	+	-
28524	+	-
28525	+	+
28526	+	+
28527	+	+
28528	+	+
28529	+	+
28535	+	-
28539	+	+
28540	+	+
28541	+	+
28542	+	+
28545	+	+
28551	+	+
28571	+	+

Przykład 88

Wytworzono odmiany G-CSF, które zawierają pojedyncze lub wielokrotne substytucje aminokwasowe, przy użyciu technik mutagenezy PCR, jakie opisano w WO 94/12639 i WO 94/12638. Tc i inne odmiany (to jest substytucje aminokwasowe, insercje lub dclecje i wydłużenia N-terminalne albo C-terminalne) także mogą być wytworzone przez fachowca, przy użyciu różnych innych metod, włączając montowanie genu syntetycznego lub mutagenezy skierowanej miejscowo (patrz Taylor i in., Nucl.Acids Res. 13: 7864-8785 [1995]; Kunkel i in., Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 82: 488-492 [1985]; Sambrook i in., Molecular Cloning:

172

184 424 a Laboratory Manual, drugie wydanie, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, [1989], (Wo 94/12639) i (Wo 94/12638)). Te substytucje można wytworzyć jednorazowo lub w połączeniu z innymi substytucjami aminokwasowymi i/lub delecjami i/lub insercjami i/lub wydłużeniami. Po weryfikacji sekwencji pod względem zmian, DNA plazmidu można transferować do odpowiedniej komórki ssaka, komórki owada lub szczepu bakteryjnego, takiego jak E. coli, do produkcji. Znane odmiany G-CSF, które są aktywne, obemują substytucje w pozycji 1 (Thr na Ser, Arg lub Gly, 2 (Pro na Leu), 3 (Leu na Arg lub Ser) i 17 (Cys na Ser), oraz delecje aminokwasów 1-11 (Kuga i in., Biochemical and Biophysical Research Comm. 159: 103-111 (1989)). Te odmiany substytucji aminokwasowych można stosować jako matrycę przy tworzeniu agonistów receptora G-CSF, w których tworzy się nowy koniec N i koniec C. Przykłady odmian substytucji aminokwasowych G-CSF ukazuje się w tabeli 9.

Przykład 89

Określenie bioaktywności odmian substytucji aminokwasowych G-CSF

Odmiany substytucji aminokwasowych G-CSF można oznaczać pod względem aktywności proliferacyjnej, stosując linię komórkową Baf/3 transfekowaną ludzkim receptorem GCSF. Bioaktywność przykładowych odmian substytucji aminokwasowych G-CSF ukazuje się w tabeli 9 w stosunku do natywnego ludzkiego G-CSF. „+” wskazuje na porównywalną aktywność w stosunku do natywnego i wskazuje na istotnie zmniejszoną lub brak mierzalnej aktywności.

Tabela 9

Aktywność proliferacji komórkowej odmian G-CSF w lini komórkowej Baf3 transfekowanej ludzkim receptorem G-CSF

Pozycja aa	Natywne aa	Mutant aa	Aktywność *
1	2	3	4
13	Phe	Ser	+
13	Phe	His	+
13	Phe	Thr	+
13	Phe	Pro	+
16	Oys	Pro	+
16	Lys	Ser	+
16	Lys	Thr	+
16	Lys	His	+
18	Leu	Pro	+
18	Leu	Thr	+
18	Leu	His	+
18	Leu	Cys	+
18	Leu	Ile	+
19	Glu	Ala	-
19	Glu	Thr	-
19	Glu	Arg	-
19	Glu	Pro	-
19	Glu	Leu	-
19	Glu	Ser	-

184 424

173 cd. tbul 9

1	2	3	4
22	Arg	Tyr	+
22	Arg	Ser	+
22	Arg	Ala	+
22	Arg	Thr	+
24	Ile	Pro	+
24	Ile	Leu	+
24	Ile	Tyr	+
27	Asp	Gly	+
30	Ala	Ile	+
30	Ala	Elu	+
34	Lys	Ser	+
43	His	Gly	+
43	His	Thr	+
43	His	Val	+
43	His	Lys	+
43	His	Trp	+
43	His	Ala	+
43	His	Arg	+
43	His	Cys	+
43	His	Leu	+
44	Pro	Arg	+
44	Pro	Asp	+
44	Pro	Val	+
44	Pro	Ala	+
44	Pro	His	+
44	Pro	Gln	+
44	Pro	Trp	+
44	Pro	Gly	+
44	Pro	Thr	+
46	Glu	Ala	+
46	Glu	Arg	+
47	Leu	Thr	+
49	Leu	Phe	+
49	Leu	Arg	+
49	Leu	Ser	+

174

184 424 cd. tabeli 9

1	2	3	4
50	Leu	His	+
54	Leu	His	+
67	Gln	Lys	+
67	Gln	Leu	+
67	Gln	Cys	+
70	Gln	Pro	+
70	Gln	Leu	+
70	Gln	Arg	+
70	Gln	Ser	+
104	Asp	Gly	+
104	Asp	Val	+
108	Leu	Ala	+
108	Leu	Val	+
108	Leu	Arg	+
108	Leu	Gly	+
108	Leu	Trp	+
108	Leu	Gln	+
115	Thr	His	+
115	Thr	Leu	+
115	Thr	Ala	+
144	Phe	His	+
144	Phe	Arg	+
144	Phe	Pro	+
144	Phe	Leu	4-
144	Phe	Glu	+
146	Arg	Gln	+
147	Arg	Gln	+
156	His	Asp	-
156	His	Ser	+
156	His	Gly	+
159	Ser	Arg	+
159	Ser	Thr	+
159	Ser	Tyr	+
159	Ser	Val	+
159	Ser	Gly	+

184 424

175 cd. tabeli 9

1	2	3	4
162	Glu	Gly	-
162	Glu	Trp	+
162	Glu	Leu	+
163	Val	Arg	+
163	Val	Ala	+
163	Val	Gly	+
165	Tyr	Cys	nd
169	Ser	Leu	+
169	Ser	Cys	+
169	Ser	Arg	+
170	His	Arg	+
170	His	Ser	+

* Aktywność w nesssks po n it/wieno I G-CSF nd = n s pkreślioo

Bez dodatkowego przetwarzania uważa się, że fachowiec może, przy użyciu poprzedzającego opisu, wykorzystać niniejszy wynalazek do jego najpełniejszego stopnia. Następujące zalecane specyficzne postacie realizacji skonstruowano zatem jedynie jako ilustrujące, a nie ograniczające pozostałość opisu w żaden sposób.

Więcej szczegółów, dotyczących techniki biologii molekularnej, oczyszczania białek i oznaczeń biologicznych, można znaleźć wWO 94/12639, WO 94/12638, WO 95/20976, WO 95/21197, WO 95/20977, WO 95/21254, które włączono tu w całości jako odnośniki.

Wszystkie odniesienia, opisy patentowe lub zgłoszenia tu cytowane włącza się w całości jak tu napisano.

Różne inne przykłady będą oczywiste dla fachowca po przeczytaniu niniejszego opisu, bez odbiegania od ducha i zakresu wynalazku. W zamierzeniu, wszystkie takie inne przykłady włącza się w zakres załączonych zastrzeżeń.

176

184 424

LlnA SEKWENCJI (1) INFORMACJE OGÓLNIE:

(i) ZGŁASZAJĄCY (1) NAZWA: & Co.

(B) ULICA: P.O.Box 5110 (y) Mlmo: enscino (D) STAN: lllSerSp (E) KRAJ: Stin/ Zjednoczone ΑβΟ/'ή (F) KOD POCZTOWY (ZlP): 60580 (G) TELEFON: (^^^)470-6501 (H) 1ELEF1X: (708)470-6881 (I) NAZWA: MrnsaePr Company (B) ULICA: 800 Nonte Liedunbuun Bosluvand (C) MlAnO: SP. Losis (D) ΠΙΠ: MSpprsuS (E) KRAJ: StanL Zjednoczone Amur/ki (F) KOD POCZTOWY (ZIP): 63167 (G) TELEFON: (314)647-3131 (H) 1EUEFCX: (314)694-5435 (SS) TYTUŁ WYNALAZKU: AnoerścS krwiotwórcz/cn uucupPrnów wieloczynnościow/cn (iSS) LICZBA SEKWENCJI: 258 (iv) POSTAĆ CZYTELNA DLA KOMPUTERA:

(A) TYP NOŚNIKA: D/skrutka (B) KOMPUTER: krmoaPLbSle/ z IBM PC (C) SYSTEM OPERACYJNY: Py-DOr/Mr-DOS (D) PROGRAM: ΡιΡμΡΙι Ruluasu #1.0, VurpSrn #1.30 (EPO)

184 424

177 (2) INFORMACJE O rEQ ID No: 1:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 174 aminokwasy (B) CYP: aminokwas (C) ILOŚĆ NICI: nieznana (D) TOPOLOGIA: nieznana (ii) TYP CZĄSTECZKI: białko (ii) CECHA:

(A) NAZWA/KIUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 1 (D) IINNE INFOiRMlCJE: /uwaga= „Xaa w pozycji 1 oznacza CAr, See, Aog, Tyr lub Cly;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowani (B) POŁOŻENIE: 2 (D) IINNE INFOiRMlCJE: /uwaga= ,,Xaa w pozycj i 2 oznacza Pro lub Leu;

(hH) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 3 (D) IINNE INFOIRMACJE: /uwaga- „Xaa w pseycji 3 oznacza Liu, Gog, Cyr lub Sir;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowani (B) POŁOŻENIE: 13 (D) INNE INFORMACJE: /uwagi^ „aii w pozycji 13 oznacza Ple, Siog His, TAo lub Ρο';

(Hi) CECHA:

178

184 424 (A) NAZWA/KUU/Z: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 16 (D) DNNE INFORMACJE: /uwaga= „Xaa w pozycji 16 oznacza Uys, Oro, Sur, Thr lub Hi?;

(ii) TETHT:

(A) NAZWA/KUU/Z: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 17 (D) DNNE INFORMACJE: /uwaga= ,,Xaa w pozycji 17 oznacza Cyn, Sur, Uly, Tla, Ilu, Tyr lub Tog;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KUU/Z: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 18 (D) INNE INFORMACJE: /uwaga= „Xaa w ppzycci 18 oznacza Uru, Tir, Pro, His, Dlu lub Ay?;

(ii) /ECHA:

(A) NAZWA/KUU/Z: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 22 (D) I1NNE INFORMACJE: /uwaga= „Xaa w ppsycCi 22 oznacza Arg, Tyr, Sur, Thr lub Ala;

(ii) TETHT:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 24 (D) INNE INFORMACJE: /uwaga= „Xaa w ppsy'Ci 24 oznacza lir, Pro, Tyr lub Ueu;

(ii) /ECHA:

(A) NAZWA/KUU/Z: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 27

184 424

179 (D) INNE INFORMACJE: „Xaa w pozycji 27 oznacza Asp lub Tly;

(SS) GE.GSIA:

(l) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 30 (D) ΙΜΓΕ INFORMACJE: /uwaga= „Xaa w pozycji 30 oznacza Ala, Ile, Leu lub Gly;

(SS) CECSA:

(G) NAZWA/KLUGZ: MSejscr modyfikowane· (B) POŁOŻENIE: 34 (D) HNN INFORMACJE: /uwaga= ,,Xaa w pozycji 34 oznacza Lys lub Seo;

(SS) CEGSSA:

(A) NAZWA/KLUGZ: Miejsce modyfikowane (B) PPOŁŻENIE: 33 (D) INNE INFOiRMACJE: /uwaga= ,,Xaa w pozycj i 36 oznacza Cys lub Ser;

(SS) CECSA:

(l) NAZWA/KUUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 42 (D) IHNE INFOiRMACJE: /uuaaa= „Xaa w posycji 42 oznacza Cys lub Ser;

(Si) CECSA:

(A) NAZWa/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 43 (D) INNE IUFORMACJE: //uwaga ,,Xxa w posy^j 413 oznacza SSs, Cho, Gly, aal, Lys, hop, Ala, Arg, Cys lub

Ueu;

180

184 442 (ii) CECHA:

(1) NAZWA/KLUCZ: MStjsct modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 44 (D) ILNNE INFORMACJE: Ouwaca^· .Wan w po zycjW po oznacza Pro, Glu, Pieg, Asp, Val, Ala, His, Trpn Gin lsjb ino;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 46 (D) INNE INFORMACJE: OuMAga= ..Wan w po zycjw po oznacza Gis, Arn, Phe, lun, lit lub Ala;

(ii) CECHA:

(1) NAZWA/KLUCZ: eSujpcu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 47 (D) INNE INFORMACJE: /uwaga- „Xaa w pozycj i 44 oznacza Lus lsb IAo;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: MSejsct modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 49 (D) ILNNE INFOIRecCJE: /uwaga— „Xaa w poryuji 49 oznacza Uts, PAu, lun lsb Stu;' (SS) CECili:

(C) NAZWA/KLUCZ: MSujscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 50 (D) ILNiE IeNFί^:ReACaE: /uswvin= ,,Xaa w poryuji 55) oznacza Uus, Ilt, His, Poo lsb I/o;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane

184 424

181 (B) POŁOŻENIE: 54 (D) IlNE INFOiRMCCJE: /uwaga= ,,Xaa w pozycj i 54 oznacza Luu lub HSs;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 64 (D) INNIE INFORMACJE: u uwag a-o ,,Xaa w pozycj i 64 oznacza Tys lub Su;;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE; 67 (D) IlNE INFORMACJE: /uwaga= „Xaa w pozycj i 66 oznacza Gln, Uys, Lru lub Tys;

(ii) CECHA::

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POOŁŻEEIl: 07 (D) IlNiE INFORMACJE: /uwaga= „Xaa w pozycji 70 oznacza Tln, hro, Lru, Arg lub Ser;

(ii) TECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 74 (D) liNE INFORMACJE: /uwaga= „Xaa w popycji 67 oznacza Cys lub Se;;

(ii) TETHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 104 (D) INNE INFORMACJE: /uwaga= „Xaa w pozycji 104 oznacza Asp, Tly lub Val;

182

184 424 (ii) GEGiA:

(A) NAZWA/KIUCZ: Miejscu modyfikowani (B) POŁOŻENIE: 108 (D) INNE INFORMACJE: /uwiGa= „aia w pozycji 108 oznacza Iru, Ala, Val, Arg, Trp, Cln lub lly;

(Hi) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 115 (D) INNE INFORMACJE: /uwiGa- „aai w pozycji 115 oznacza TAr, iis, Leu lub Ala;

(ii) GEGiA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowani (B) POŁOŻENIE: 120 (D) INNE INFORMACJE: /uwig^ „Xao w pozycj i 1^0 oznacza Glu. Glys OA^g, Lys Oiu Hiss (ii) GEGiA:

(Α) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 123 (D) INNE INFORMACJE: /laaGa= „Xaa w pozycj i 1)4)3 oznacza Glu, Aog, PAi lub TAr;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowani (B) POŁOŻENIE: 144 (D) INNE INFORMACJE: /uwigi- „Xaa w pozycji 144 oznacza Phi, Hii, Aig, Pro, Lite, Glu Oiu Olu;i (ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscr modyfikowani (B) POŁOŻENIE: 146

184 424

183 (D) IINJE DNFORMT/JE: /uwaga=i „Xaa w pozycji 116 oznacza Trg lub Ain;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 147 (D) INNE INFORMACJE: /uwaga= „Xaa w pozycji 144 oznacza Trg lub Uln;

(ii) TETHT:

(A) NTZWT/KUU/Z: Miejsce msdrfSkowasu (B) POŁOŻENIE: 156 (D) IITTE INFORMACJE: /uwaga= „Xaa w pozycji 156 oznacza His, Aly lub Sro;

(ii) AE/HA:

(A) NAZWA/KUU/Z: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 159 (D) IITTE INFORMACJE: /uwaga= „„itm w po zycj i 159 oznacza Sur, Arg, Aho', Tyr, Val lub Gly;

(ii) /ECHA:

(A) NAZWA/KUU/Z: -Μί^Ξοβ modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 162 (D) IINJE INFORMACJE: /uwaga= „Xaa w pozycji 162 oznacza Ulu, Uuu, Uly lub Trp;' (ii) CECHA:

(A) NAZWA/KUU/Z: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 163 (D) INNE INFORMACJE: /uwaga= ,,Xaa w pozycji 1^23 oznacza Val, Uly, Trg lub Tla;

(ii) TETHT:

184

184 424 (A) NAZWA/KUUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 169 (D) INNE INFORMACJE: /GWiHa= ,,Xaa w pozycji 169 oznacza Arg, Seo, Ueu, Aog lub Ty-s;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 170 (D) INNE INFORMACJE: /GwaHa= „Xaa w pozycji 170 oznacza His, Arg lub Euo;

(ix) OPIS SEKWENCJI: EEQ ID No: 1:

Xii Xii Xxi Ply Pro Tlo opr Cli Lem Pro G1n Ueu XaaLeu Le, Xaa 15 1P 15

Xii Xii GAu Pin

Vri AaV ips Xai

GUs Ply Xaa Cln AlaXaa

ii, Gln

20

255

230

Clu

Xli

Luu

Xaa

Ala

Tho

Tyr

Lys

Leu

Xaa

Xaa

Xaa

Ginu

Xa^a

XXa

Val

35

40

45

Xii

Xii

GAy

His

Ser

Xii

Gly

lie

Pro

Trp

Ala

Pop

Leu

Ser

Ser

Xaa

50

5A

60

Poo

Ero

Xaa

Ala

Lnu

Aau

Uv u

Mi

Gly

Taa

Le u

Aur

Gln

Leu

Lis

O vr

65

7 A

75

80

Aly

Leu

PPe

Leu

Tur

Ale

OP y

Aus

Leu

Aln

Al a

Ueu

Glu

G Ay

ile

U, r

85

900

935

Poo

Clu

Luu

Gly

Pro

Thr

op u

Tao

Thr

Leu

G1 n

Aro

Asp

Upl

ASx

Acp

100

105

110

Phe

Ala

Xia

Tho

Ile

Top

Cln

Cln

Met

Alu

Xii

Xia

Aly

Met

(la

Pro

115

12Ń

125

Ali

Lru

Cln

Poo

Tho

Aln

Cly

Ala

Met

Poo

Ali

Phe

Ali

Eeo

Ala

Xia

130

135

140

Aln

Xia

Xii

Ali

Cis

Cly

Vii

Utu

Vil

Ali

Emo

Xia

Uru

Cln

Xaa

Phe

145

150

155

160

Ueu Xia Xaa Eer Tyg Aog VaU Lru Xai Xia Ueu (la Aln Poo

184 424

185

165

170 (2) INFORMACJE O SEQ ID Nr: 2:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 133 aminokwas/ (B) TYP: aminokwas (C) ILOŚĆ NlCl: pojed/nczy (D) TOPOLOGIA.: linSowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: biikko (ii) CECHA:

(1) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 17 (D) INNE INFORMACJE: /swani= „Xll w poz/cji 17 oznacza Stu, L/s, Gl/, Asp, MuP, Gln lsb Aog;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POOOOENIl: P8 (D) ILNNE INFORMACJE: Suwaaa- „Xil w pozycji 18 oznacza Asn, His, Lus, lit, PAu, Ann lsb Gin;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: MiuiPju modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 19 (D) ILNiE INFORMACJE: /swia<aa= „Xaa w pozycji 19 oznicza Met, PAu, Ilt, Aon, Gly, Ala lsb C/s;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce mod/fikowant (B) POŁOŻENIE: 20 (D) ILNEE INFORMACJE: /uwaga- ,,Xaa w pozycji 20 oznicza lle, Cys, Gin, Gls, Ars, Poo lub Ala;

186

184 424 (ii) GNASl:

(A) NAZWA/KUUCZ: Miejscr modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 21 (D) INNE INFORMACJE: /uwaga= „Xaa w pozycji 21 oznacza Asp, Phe, Lys, Arg, Ala, Gly, Glu, Tln, Asg, Ceo,

Seo lub aal;

(ii) CECSA:

(A) NAZWA/KUUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 22 (D) INNE INFORMACJE: /uwaga^ „Xaa w pozycji 22 oznacza Glu, Top, Poo, Ser, Ala, SSs, Asp, Asn, Gln, Leu, aal lub Tly;

(ii) CECSA:

(A) NAZWA/KLUGZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 23 (D) I^NEE IUFORMACJE: /uwaHa= „Xxa w pozycji 23 oznacza Ile, aal, Ala, Gly, Top, Lys, Phe, Ueu, Seo lub

Aog;

(SS) CECSA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowani (B) POŁOŻENIE: 24 (D) IlNN INNFRMMCCE : /uwaga^ ,,Xxa w pozycji 24 oznacza lle, Gly, Ul, Aog, Seo, Phe, Ueu;

(ii) CNCSA:

(l) NAZWA/KUUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 25 (D) HNN IUFORMACJE /uwaHa= „Xxa w pozycji 25 oznacza peo, Sis, Tly, Tln, Crg, Poo lub Ala;

184 424

187 (ii) TETiA:

(A) NAZWA/KIUCZ: Miejsce modyfikowani (B) POŁOŻENIE: 26 (D) INNE INFORMACJE: /uwigi^ „Xii w pozycji 26 oznacza iis,· Thr, PAr, Cly?, log, Ali, Trp;

(Hi) TETiA:

(C) NAZWA/KLUCZ: Miejscr modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 27 (D) INNE INFORMACJE: /uwigi- „aia w pozycji 27 oznacza Iru, Gly, Aog, Thr, Sie lub Ala;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowani (B) POŁOŻENIE: 28 (D) INNE INFORMACJE: /uwaga= ,,Xaa w pozycji 28 oznacza Lys, ArG, Leu, Clu, Cly?, Pro, Val lub Top;

(ii) TECiA:

(A) NAZWA/KIUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 29 (D) IINNE INFORMACJE: /uwaga= „Xaa w pozycj i 29 oznacza Glu, Asn, Leu, Pro, Arg anb Val;

(li) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu medyfSkewanu (B) POŁOŻENIE: 30 (D) IINNE INFORMACJE: /uwaga= „Xaa w pozycji 30 oznacza Pro, iis, TAe, Cly?, Asp, Ceu Srr, Leu lub I...;

(li) GEGiA:

(A) NAZWA/KIUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 31

188

188 444 (D) IlNE INFORMACJE o /uwagaa „Xxa w pozycji 31 oznacza Poo, Asp, Tly, Ala, Arg, Lru lub Tln;

(ii) CECHA::

(A) NAZWA/KLUCZ: Mirjncu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 32 (D) IlNE INFORMACJE o /uwaga= „Xxa w pozycji 32 oznacza Leu, Val, A;g, Tln, Asn, Tly, Ala lub Tlu;

(ii) TE CHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 33 (D) IlNE INFORMACJE o /uwagao „Xxa w pozycji 33 oznacza Pro, Luu, Tln, Ala, Th; lub Tlu;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 34 (D) IMNE INFORMACJE o /uwaga= „Xaa w pozycji 34 oznacza Lru, Val, Tly, Sur, Uyn, Glu, Tln, Thr, Arg, Ala,

Phu, lir lub Mrt;

(ii) CECHA.:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIEM: 35 (D) IiNŁ INFORMACJE o /uwaga= ,,Xxa w pozycji 35 oznacza Luu, Ala, Tly, Asn, Pro, Tln lub Val;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIEM: 36 (D) IlNŁ INFORMACJE o /uwaga= ,,Xxa w pozycji 36 oznacza lnpi, Uru lub Val;

184 424

189 (ii) TE/HA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 37 (D) IDTE INFOIRMCCJE: /uwaga= „Xaa w oznacza Phu, Sur, Pro, Trp lub Ilu;

(ii) TEAHA:

(A) NTZWT/KUUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 38 (D) INNE II^]^O1RM^(GJE: /uwaga= „Xaa w oznacza Tsn lub Tla;

(ii) CECHA:

(A) NTZWT/KUU/Z: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 40 (D) IINJE INFORMACJE: /uwaęga= „Xaa w oznacza Uuu, Trp lub Arg;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KUU/Z: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 41 (D) Iirr INFORMACJE: //Lwaga= „Xaa w oznacza Tsn, Ty?, Arg, Uru, His, Met lub Pro;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 42 (D) IDNr DNFORMT/JE: //uwaga- „Xaa w oznacza Aly, T?p, Sur, Cys, Asn, Uys, Chr, Uuu,

Piu, Tyr, Dlu, Mut lub Tla;

(ii) CECHA:

(T) NAZWA/KUU/Z: Miejscu modyyikswasr pozycji 37 pozycji 38 pozycji 40 pozycji 41 pozycji 4(2

Val, Alu,

190

184 424 (B) POŁOŻENIE: 43 (D) INNE INFORMACJE: /uwini= „Xil w oznacza Glu, Asn, Tyr, Leu, PAe, Asp, Ala, Cys

IAo^, Gl/ lsb run;

(ii) CECHA:

(1) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 44 (D) INNE INFORMACJE: /swana= „Xll w ozeaczi Asp, Sen, Leu, Arg, U/s, mr, Met, Typ

Gln, Ala lsb Ppo;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: eSuipcu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 45 (D) INNE INFORMACJE: /uwaga- „Xaa w oznacza Gln, Piso, Phe, Val, MuP, Lus, Th, Lys

Asn, Arn, Sur, Ala, Ilt, Gls lsb His;

(ii) CECHA:

(1) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 46 (D) ILNNE INFORMACJE: /uwaga- „Xii w oznacza Asp), Phe, Set:, Thr, C/s, Gls, Asn, Glu

Ali, T/u, lit, Val lsb Gl/;

(ii) CECHA:

(1) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 47 (D) ILNiE INFORMACJE: /uwaga- „Xia w oznaczi lle, Gly, Vil, Sei^, Ann, Por lsb His;

pozycji 43

Gle, Aon, pozycji 44

Glu, Asn, pozycji 45

Tup,, Asp, pozycji 46 Lys, His, pozycji 47 (ii) CECHA:

184 424

191 (l) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 48 (D) INNE INFORMACJE: /uaaHa= „Xaa w pozycji 48 oznacza Leu, Seo, Cys, Arg, Ile, Sis, Phe, Glu, Uys, Geo,

Cla, Met, aal lub Asn;

(SS) ANCna:

(A) NAZWA/KUUCZ: Aiejscr modyfikowani (B) POŁOŻENIE: 49 (D) INNE INFORMACJE: /uwaga^ „Xaa w pozycji 49 oznacza Met, Aog, Cla, —ly, Poo, Asg, Sis lub Csp;

(SS) CECSA:

(A) NAZWC/KUUGZ: Aiejscr modyfikowane (B) PhOŁRENIE: 55 (D) INNE INFORMACJE: /mwa-tga^ ,,Xaa w pozycji 50 oznacza Tlu, Leu, Tho, Asp, Tyo, Lys, Asn, Ser, Ala, lle, aal, Sis, Per, Aet lub iln;

(ii) CECSA:

(l) NAZWA/KUUAZ: ASrjsce modyfikowane (B) PRŁRŻENIN: 51 (D) IHNE INFORRAGCJN: /uuaga= „Xaa w po zyc j i 51 oznacza Asg, Arg, Aet, Pos, Sro, Cho lub Sis;

(ii) CNCSA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 52 (D) IHNE INFORRAACJE: //uraga= „Xxa w pozycc i 552 oznacza Asn, Sis, Aog, Leu, Gir, Seo lub Tho;

(SS) CECSA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane

192

18-4 422 (B) POŁOŻENIE: 53 (D) INNE INFORMACJE: /uwigi- „Xai w pozycji 53 oznacza Liu, TAe, Ala, Cly?, Clu, Pro, Lys, Sir lub M.

(ii) GEGiA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowani (B) POŁOŻENIE: 54 (D) INNE INFORMACJE: /uwigi- „Xii w pozycji 54 oznacza Aog, Asp, Ili, Ser, Val, Thr, lln, Asn, Lys, iis,

Ali lub Luu;

(li) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowani (B) POŁOŻENIE: 55 (D) IINNE INFORMACJE: UnalGl= „Xaa w pozycji 55 oznacza Arg, Cho, Val, Sie?, Ln lub Cly;

(li) CECHA:

(A) NAZWA/KIUCZ: Miejsce medyflkeaa.nu (B) POŁOŻENIE: 56 (D) IINNE INFORMACJE: /uwagi- ,,Xaa w pozycji 56 oznacza Poo, Cly, Cys, Ser, Cln, Glu, Gog, iis, Thr, Ala, Tyr, Ple, Leu, Va1 lub Lys;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowani (B) POŁOŻENIE: 57 (D) INNE INFORMACJE: /uwiga- „Xaa w pozycji 57 oznacza Asn lub Cly;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 58

184 424

193 (D) DNNE INFORMACJE: /uwaga- „Xaa w pozycji 58 oznacza Uru, Sur, Tsp, Arg, lin, Val lub Ty?;

(ii) AE/HA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 59 (D) INNE INFORMACJE: /uwaga- „Xaa w pozycji 59 oznacza Ulu, Tyr, His, Uuu, Pro lub Arg;

(ii) AE/HA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 60 (D) IINJE INFORMACJE: /uuw^cg<n^ „Xaa w pozycji 60 oznacza Tla, Sur, hro, Tyr Ann lub Thr;

(ii) AEAHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 61 (D) IINJE INFORMACJE: /uwaga- „Xaa w pozycji 61 oznacza Phu, Ann, Ulu, Pro, Uys, Trg lub Sro;

(ii) AE/HA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 62 (D) IUNE INFORMACJE: /uwaga- w pozycci 662 oznacza Ann, His, Val, Trg, Pro, Thr, Tsp lub Ilu;

(ii) AE/HA:

(A) NAZWA/KUU/Z: Miejscu modyfikowanu (B) POŁOŻENIE: 63 (D) INNE INFORMACJE: ,,Xaa w ppsysji 6(3 oznacza Arg, Tyr, Top, Lys, Sur, Hin, Pro lub Vai;

(ii) TE/HA:

194

184 424 (A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 64 (D) INNE INFORMACJE: /uwagaa ,,x_aa w pozycji 64 oznacza Ala, Asn, Pro, Sur lub Lys;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIEM: 65 (D) IlNE INFORMACJE: /uwaga= „Xaa w ρσζγσΜίΐ 65 oznacza Val, Thr, Pro, Hin, Lru, hhr lub Ser;

(ii) CECHA::

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 66 (D) IlNE INFORMACJE: /uwaga= „Xaa w pozycj 66 oznacza Lys, lir, Arg, Val, Ann, Tlu lub Sur;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Mirjscr modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 67 (D) IlNNE INFORMACJE: //Lwaga= „Xaa w ppo zyc c i 67 oznacza Ser, Ala, Phu, Val, Tly, Asn, ilu, Pro lub Hin;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Mirjscr modyfikowane (B) POŁOŻENIEM: 68 (D) IlNE INFORMACJE: -/waga¹: „Xxa w popycji 68 oznacza Luu, Val, Top, Ser, ilu, Phr, Tir lub HSs;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIEM: 69

184 424

195 (D) ILNiE INFORMACJE: /uwaga- ,,Wxi w pozycji 69 oznacza Gle, Ali, Por, TAo?, Glu, lun, iop, Gly lsb L...;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: e[SeiPCU modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 70 (D) ILNNE INFORMACJE: /uwaga- „Wxa w pozycji 7 A oznacza ise, Lts, Vil, iop), Pro lsb lla;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 71 (D) ILNNE INFORMACJE: /uwaga- ,,Wxi w pozycji 71 rzniczi Ali, MuP, Les, Poo, Ann, Gls, ino, Gln, Iop lsb ise;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 72 (D) INNE INFORMACJE: /swana= ,,Xaa w pozycj i Ί2 oznacza Ser, Gls, MuP, Ala, His, Asn, Aon lsb Asp;

(ii) CECHA:

(1) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) PPOŁOENIEe 73 (D) INNE INFORMACJE: /swani= „Xaa w pozycj i 7 3 oznacza Ala, Glu, Asp, Leu, Stu, Gly, 1An lsb lun;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 74 (D) INNN INFORMACJE: /i^T^^^a= ,,Xai w ρoryLji 77 oznacza Ilt, MtP, ino, Poo, lun, Gly, Ala;

196

184 424 (ii) CECHA:

(A) NAZWA/KIUCZ: Miejscu modyfikowani (B) POŁOŻENIE: 75 (D) IINNE INFORMACJE: /uwaga= „Xaa w pp^2^z^s^jj- 0 5 oznacza 1ln, Iys, Gly, Asp^, Peo, Trp, Aog, Ser, Cln lub

Iiu;

(ii) GEGiA:

(A) NAZWA/KIUCZ: Miejsce modyfikowani (B) POŁOŻENIE: 76 (D) IlNNE INFORMACJE: Uuwaga= „Xaa w ppeysji 76 oznacza Sir, Va1, Gla, Asn, Tep, Glu, Peo, Gly lub A...;

(Hl) CEGiA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowani (B) POŁOŻENIE: 77 (D) IlNNE INFORMACJE: /uwaga:- „,Xaa w pseysji 77 oznacza Ile, Ser, Gag, Thr lub Leu;

(li) TECiA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowani (B) POŁOŻENIE: 78 (D) IlNNE INFORMACJE: /uwiGa- „Xaa w pseycji 78 oznacza leu, Ala, Ser, Clu, PAi, Gly lub Gog;

(ii) TETiA:

(C) NAZWA/KIUCZ: Miejsce modyfikowalni (B) POŁOŻENIE: 79 (D) INNN INFORMACJE: /uwggg- „Xxa w pseycji 7 9 oznacza Iys, TAo, Asn, Mit, log, lii, Cly lub Asp;

(li) GEGiA:

(G) NAZWA/KIUCZ: Miejscu modyfikowani

184 424

197 (B) POŁOŻENIE: 80 (D) INNN INFOiACCCJEi /uaaga= „Xaa w pozycj i 80 oznacza Asg, hop, aal, Gly,, Gho, Leu, Tlu lub Arg;

(SS) CECSA:

(G) NAZWA/KLUCZ: ASujscr modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 81 (D) INNE INFORMACJE: /uwaga= ,,Xaa w pozycj i 81 oznacza Leu, TlG, Tly, Ala, Top, Aog, aal lub Lys;

(SS) CECSA:

(l) NAZWA/KUUCZ: Miej/cr modyfikowane (B) PrOCiŻENI: M2 (D) INNIE INFORMACJE: /uaaga= „Xaa w pozycji 882 oznacza Leu, Giny Lyc, Trp, Arn, Asp, Gln, Asn, HA Sp Thr,

Seo, Ala, Ty,i Ph, i lle, Aut lub Vnl;

(ii) CNCSA:

(l) NAZWA/KUUCZ: Aiej/ce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 83 (D) IHN INFORMACJE: /uaaHa= „Xaa a pozycji 88 oznacza Poo, Ala, Tho, Top), Aog lub Aet;

(ii) CECSA:

(G) NAZWA/KUUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 84 (D) INNE INFORRAACJE: /uwaga= „Xaa w pozycji 88 oznacza Cys, Tlu, Tir, Arg, Aet lub yal;

(ii) CECSA:

(A) NAZWA/KUUCZ: ASejscr modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 85

198

184 424 (D) IMNS INFORMACJE: /uwaga= ,,Xaa w ppsy'ji 85 oznacza Ueu, Tsn, Val lub lin;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 86 (D) IITTE INFORMACJE: /uwaga= „Xaa w pozyccj 8 6 oznacza Pro, Ty?, Arg, Tla lub Uy?;

(ii) TETHT:

(A) NTZW.TUκeUCZ: Miujncu modyfikowanu (B) POŁOŻENIE: 87 (D) IITTE DNFORMTC JE: /uwaga= „Xaa w p^yccj 87 oznacza Uuu, Sur, Crp lub Aly;

(ii) GE/HT:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miujncu modyfikowanu (B) POŁOŻENIE: 88 (D) IITTE INFORMACJE: /uwaga= „Xaa w ppsy'ji 88 oznacza Tla, Uys, Arg, Val lub Trp;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowanu (B) POŁOŻENIE: 89 (D) IDN^TE INFORMACJE: /uwaga^— ,,Xaa w ppsy'ji 89 oznacza Chr, T?p, Gy?, Uuu, Vai, Alu, His, Tsn lub e...;

(Si) CECHA::

(A) NAZWA/KUU/Z: Miujncu modyfikowanu (B) POŁOŻENIE: 90 (D) I1TNS INFORMACJE: /uwaga- „Xaa w pρsy'ji 90 oznacza Ala, Pro, eur, Thr, GUy, T?p, Ilu lub Mut;

(Si) CE/HA:

184 424

119 (A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 91 (D) IlNiE ΙΝΕΟΙΜΜΑΓΓΕ: /uwaga^ „Xaa wo pozycji 91 oznacza Ala, Pro, Sr;, Ghr, Phe, Uuu, Asp lub Hin;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 92 (D) INNE 11^01^(^: „x_{aa w} pozycji 92 oznacza Pro, Phej Pcg o tor o Lps o HSs o CHa o USy o Ilo lub

Ueu;

(ii) CECHe:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIEM: 93 (D) INl^E O ΝΕΟίΜΜΑΤΕ: Uuaaga= „Xaa wo pozycji 93 oznacza Thp, Asp, Sr;, Asn, Pro, Ala, Leu lub Arg;

(ii) CECHe:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 94 (D) INNE O NEOiReACJE: /uwagaa ,,Xxa w pozycji 94 oznacza Arg, ile, Ser, Tlu, Leu, Val, Tin, Uys, His, Ala lub Oro;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 95 (D) INNE O /uwagaa „Kaa w pozycji 95 oznacza His, Tln, Pro, Arg, Val, Lru, Tly, Thr, Asn, Lys,

Ser, Ala, Top, Phe· Oli lub Tyr;

(HH) CECHA:

200

184 424 (A) NAZWA/KUUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 96 (D) INNE INFORMACJE: /GwaHa= „Xia w pozycji 96 oznacza Pro, Lys, Tyr, Gly, Ile lub Chr;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KUUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 97 (D) INNE INFORMACJE: /uwrć^^£^= ,,Xaa w pozycji 97 oznacza Ile, Val, Uys, Ala lub Asn;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KUUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 98 (D) INNIE INFORMACJE: /uwi»a= „Xaa w pozycji 98 oznacza His, Nie, Asn, Ueu, Asp, Ala, Ter, Glu, Gin, Seo,

Phe, Met, Vai, Lys, Aig, Tyo lub Poo;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KUUCZ: Miejsce modyfikowane
(B)	POŁOŻENIE: 99
(D)	INNE INFORMACJE: „Xai w pozycji	99
ozsacza lle,	Leu, Aog, Asp, Va1, Pro, Aln, Als, Ser,	Phe

lub His;

(ii) CETHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 100 (D) INNE INFORMACJE: /uwiga^ „Xia w pozycji 100 ozsiczi Lys, Cyo, Leu, His, Arg, Nie, Ser, Gln lub (ii) CETHA:

(A) NAZWA/KUUCZ: Miejsce modyfikowane

184 424

201 (B) POŁOŻENIE: 101 (D) DNNE INFORMACJE: /uwaga- „Xaa w pozycji 101 oznacza Tsp, Pro, Mut, Uys, His, Thr, Val, Tyr, Giu, Tsn, Sur, Tla, Aly, Ilu, Uuu lub Gin;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KUU/Z: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 102 (D) DNNE INFORMACJE: /uwaga- „Xaa w pozycji 102 oznacza Aly, Ueu, Alu, Uy?, Ser, Tyr lub Pro;

(Si) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowanu (B) PPOOŻEETIE: 110 (D) DNNE INFOIRMiCJE: /\iwaga= „Xaa w pozycji 103 oznacza Tsp lub rur;

(SS) CE/HT:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowanu (B) POŁOŻENIE: 104 (D) INNE INFOIRMiCJE: /uwaga— „Xaa w pozycji 104 oznacza Arp, Val, Ty?, Tyr, Thr, Met, Pro, Uru, Gin, Uys,

Tla, Piu lub Gly;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowanu (B) POŁOŻENIE: 105 (D) IITIE INIORRMAGJE: //usaa- „Xaa w pozycji 105 oznacza Tsn, Pro, Tla, Piu, Ser, Crp, Gin, Tyr, Uru, Uys, lir, Tnp lub His;

(SS) GEGHA:

(A) NAZWA/KUU/Z: Miejscu modyfikowanu

202

188 442 (B) POŁOŻENIE: 106

	(D)	INNE INFORMACJE: /uwigi- xXii w	pozycj H	106
oznacza Clu,	Ser, Gla, Lys, Tho, Ile, lly lub Pro;
(Hl)	TECiA:
	(Α)	NAZWA/KIUCZ: Miejscu modyfikowane
	(B)	POŁOŻENIE: 108
	(D)	INNO INFORMACJE i /uwAca= ,,Χίτ w	gaoycji	lpo
oznacza Arg,	Lys, Asp, Iiu, TTr, lin, Gln. His- Ser-	Alg
lub Pro;
(Hl)	CECiA:
	(A)	NAZWA/KLUCZ: Miejsce medyfikeagne
	(B)	POŁOŻENIE: 109
	(D)	NNNH INFORMACJE i ^1(3= „XlG w	gioycj i	lpo
oznacza Arg,	Thr, Poo, llu, Tyr, Iiu, Ser lub lly;
(Hl)	CECHA:
	(A)	NAZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane
	(B)	POŁOŻENIE: 110
	(D)	NNNH INFORMACJE I Ouwacje ^^lG -	pooycj i	ipo
oznacza Iys,	Ala, Asn,- TTr, Κιπ Aig, Gln. Hi^- Glu-	Ser
lub Top;
(il)	GEGiA:
	(A)	NAZWA/KIUCZ: Miejsce modyfikowane
	(B)	POŁOŻENIE: 111
	(D)	INNE INFORMACJE: /uwaga- wXll w	pozycji	111

oznacza Liu, Ile, Arg, Asp lub Met;

(ii) GEGiA:

(G) NAZWA/KIUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 112

184 424

203 (D) INNE INFORMACJE: /uwaga- „Xaa w pozycji 112 oznacza Thr, Val, Gin, Tyr, Glu, His, Ser lub Phe;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 113 (D) INNE INFORMACJE: /uwaga- „Xaa w pozycji 113 oznacza Phe, Ser, Cys, His, Gly, Trp, Tyr, Asp, Lys, Leu,

Ile, Val lub Asn;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 114 (D) INNE INFORMACJE: /uwaga- „Xaa w pozycji 114 oznacza Tyr, Cys, His, Ser, Trp, Arg lub Leu;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 115 (D) INNE INFORMACJE: /uwaga- „Xaa w pozycji 115 oznacza Leu, Asn, Val, Pro, Arg, Ala, His, Thr, Trp lub

Met;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 116 (D) INNE INFORMACJE: /uwaga- „Xaa w pozycji 116 oznacza Lys, Leu, Pro, Thr, Met, Asp, Val, Glu, Arg, Trp,

Ser, Asn, His, Ala, Tyr, Phe, Gln lub Ile;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 117

204

118 442 (D) INNN INFORMACJN: /uwaga= „Xaa w pozycji 117 oznacza Cho, Sro, Asn, lle, Top, Uys lub Pro;

(ii) GECSA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Aiujsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 118 (D) INNE INFORMACJE: ^ιηι= „Xaa w pozycji 118 oznacza Leu, Sro, Poo, Ala, Glu, Cys, Asp lub Tyo;

(ii) CECSA:

(A) NAZWA/KUUCZ: ASejscr modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 119 (D) INNE INFORMACJE: /uwaga^ „Xaa w pozycji 119 oznacza Tlu, Sro, Uys, Poo, Ueu, Tho, Tyo lub Aog;

(ii) GECSA:

(A) NAZWA/KUUCZ: MSujsce modyfikowani (B) POŁOŻENIE: 120 (D) IIINS INFRRMACJJEi /uwaga= „Xaa w pozycji HO oznacza Asn, Ala, Poo, Ueu, SS/, aal lub Tln;

(Si) CNCSA:

(A) NAZWA/KLUCZ: MSejsce modyfikowanie (B) POŁOŻENIE: 121 (D) inne: INFOJAACJJEi /uwaaa= „Xaa W pozycji Ul oznacza Ala, Sro, lle, Asg, Poo, Lys, Asp lub Tly;

(ii) CECSA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 122 (D) INNNE INFOERACJ JE i /uwaaa= ,,Xaa wi pozyc/ji 122 oznacza TlG, Seo, Aet, Top, Aog, Phe, Pro, 111,( 11, Tyr lub Crs;

184 424

205 (ii) TETiA:

(A) NAZWl/KLUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 123 (Ό) INNE INFORMACJE: /uwaga= „Xaa w pozycji 123 oznacza ila, Mrt, Glu, iis, Srr, Poo, Tyr lub Lru;

(xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ II nr: 2:

Ala 2

Poo

Met:

ΊΉ

Gln I

Thr Thr

Seo Lru Lys II

Thr

Ser Trp

Val

Asn 15

Cys

Xaa

Xaa

Xaa

X aa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

xao

Xaa

Xaa

Xaa

20

25

30

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

As n

Xaa

Xaa

Xaa

Xa a

Xaa

XXa

XXa

Xaa

Xaa

35

4I

45

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

xao

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

XXa

Xaa

Xaa

50

55

60

Xaa

Xaa

Xaa

XXa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

65

70

75

80

Xaa

Xaa

Xaa

XXa

Aaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

X!a

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

85

90

95

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Phe

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

100

105

110

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Xaa

Cln

Glu

ΤΑ

Thr

Leu

115 120 112

Sro Lru Ala Ile Phe 130 (2) INFORMACJE O SEQ II No: 3:

(i)	CECiY SEKWENCJI:
	(A)	IŁUlOŚĆ: 332 aminokwasy
	(B)	TYP: amninokwas
	(T)	ILOŚĆ NICI: nieznana
	d)	TOPOLOGIA.: nieznana
(ii)	TYP	CZĄSTECZKI: białko

(ii) CeCHA:

206

184 424 (A) TAZWT/KUUCZ: Miejsce modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 112 (D) IITTE INFORMACJE: /uwaga= 112 usuwa się lub Ueu, Tla, Vai, Ilu, Pro, Phr, Trp lub M...;

(ii) CECHA::

(A) NAZWA/KUU/Z: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 113 (D) IITTE INFORMACJE: /uwaga=( „p^c^^z^cczj j 113 usuwa się albo Pro, Phr, Tla, Leu, Dlu, Trp lub Mut;

(ii) CECHA:

(A) NAZWA/KLUCZ: Miujncu modyfikowanu (B) POŁOŻENIE: 114 (D) IITTE INFORMACJE: /uwaga- „i»zycj j 114 usuwa się albo Pro, Phu, Tla, Vai, Uuu, Ilu, Trp lub Mut;

(ii) CECHA:

(A) NAZWT/KUUCZ: Miejscu modyfikowanu (B) POŁOŻENIE: 115 (D) IITTE INFORMACJE: /uwaga- „„dycc j 1115 usuwa się albo Gin, Uly, Ser, Thr, Tyr lub T?s;

(xi) OPDS SEKWENCJI: SEQ ID nr: 3:

Sur 1

Pro

Ali

Pro

Pro 5

Tli

Cyn

Tnp

Uuu

Arg 10

Vai

Uuu

Ser

Uy?

Uuu 15

Ueu

Arg

Asp

Ssu

His 20

Val

LeV

U Cs

Aig 2 V

Teu

Sc r

COg

Cyu

eur 30

Glu

VuS

Hi?

Pro

Leu 35

Pro

Thr

Prr

Oc 1

Leu 4C

LVl

Tro

uu a

Lul

Asp 45

Cii

Ser

aau

Giy

Clu 50

Trg

Lys

Thr

Gln

Oc t 55

Glu

GMu

Thr

Ly s

Alu 60

Gln

>Usp

Ile

Tui

Giy Ala Vai Ahr Uuu Ueu Uuu Alu Aly Val Mut Tla Tla Trg Aly Gin

184 424

207

7Α 75 80

Les Cly

Poo Thr Csi 85

Leu

Ser

Set:

Utu Leu 9I

Gly

Gln

Leu

Ser

Gly 95

Gln

Vil

Arg

Les

Leu

Leu

Gly

AULa

Les

Gln

Str

Leu

Leu.

Gly

Tho

Gln

Xaa

100

110

110

Xll

Xii

Xii

Gly

PCrg

Thy

OTr

Ila

His

Lys

Asp

Pro

As

Ala

Ile

PPh

115

110

125

Les

Ser

Phe

Gln

His

Leu

Leu

Arg

Gly

Lys

Val

Arg

PPr

Llu

Met

Leu

130

135

114

Val

Cly

Glj/

Ser

Thr

Leu

Cys

Val

Arg Arg

lila

Pro

Pro

Tho

Thr

Aln

145

FL50

155

116

Vil

Poo

Seo

COrg

Thr

Ser

Leu

Val

Uts

Thr

Leu

Am

riun

Leu

Pro

An

165

170

175

Arg

Thr

Seo

Gly

Leu

Leu

Clsp

Tho

Asn

PAu

Thr

cna

Ser

Ali

Arg

TLm

180

115

190

TAr

Gly

Ser

Gly

Leu

Leu

Lys

Trp

Gln

Gln

Gly

Pite

Aig

Ale.

Ayr

Ili

195

220

205

Pro

Cly

Ues

Leu

An

Cln

Thr

Ser

Ann

Ser

Leu

Asp

Glu

Ili

Aro

Aly’

210

215

222

Typ

Ues

Asn

Ag

Ile

His

Gls

Leu

Uts

Asn

Gly

Thr

(Pg

Gly

Leu

PPh

225

230

235

224

Pro

Cly

Pro

Ser

CPg Aon

TAr

Leu

Cly

Ali

Pro

Asp

lle

Sen

Seo

Gll

245

250

22^0,

TAr

Sn

AP0

Thr

Gly

Ser

Les

Prr

Pro

Gsn

Leu

Gln

Pro

Gly

TyL

Αη

260

226

220

Pro

Ser

Prr

TTin

His

Poo

Pro

Thr

Gly

Cln

Tyr

Tho

Leu

APr

Aro

Llu

275

220

285

Por

Poo

TAo

Luu

Pro

Ter

Ppo

Val

Val

Gln.

Leu

iSLs

Pro

Llu

Llu.

Lpo

290

225

300

Asp

Prr

Set:

Ala

Pro

Ter

Poo

Thr

Prr

TAo

Ser

Pro

Ues

Lts

isn

TTr

305

310

315

332

Seo

Typ

TTr

His

Seo

Gln

Asn

Llu

Stu

Gln

Gls

Gly

325 330 (2) INFORMACJE O SEQ ID Nu: 4:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 1 aminokwas

208

184 424 (B) CYP: amisokwiP (C) IUOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowi (ii) GYP CZĄSTECZKI: białko (ii) CETHA:

(A)	NAZWA/KLUCZ:	Białko
(B)	POŁOŻENIE: 1
(D)	INNE	INFORMACJE:	/uwaga=	„gdzie

x=(glygiAglysuo)n i gdzie n jest liczbą całkowitą (xi) OPIS SEKWENCJI: EEQ ND nr: 4:

Xaa (2) INFORMACJE O EEQ ND No: 5:

(i) TECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 1 aminokwas (B) GYP: aminokwas (C) ILOŚĆ NNCN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) GYP CZĄSTECZKI: białko (ii) TECBA:

(A)	NAZWA/KUUCZ:	Peptyd
(B)	POŁOŻENIE: 1
(D)	INNE	INFORMACJE:	/GwaHa=	„gdzie

x=(glyglyglyglyser)n i gdzie n jest liczbą całkowitą (xi) OPlE SEKWENCJI: EEQ ND nr: 5:

Xia (2) INFORMACJE O EEQ ND No: 6:

184 424

209 (i) CECHY SEKWENCJI:

(1) DŁUGOŚĆ: 1 aminokwas (B) TYP: aminokwas (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOCIA: liniowa (Hl) TYP CZĄSTECZKI: białko (li) TECH::

(A) NAZWA/KLUCZ: Białko (B) POŁOŻENIE: 1 (D) INNE INFOUMLaGJE: /uwiga- ^dzle x=(GnyGlwg1yGlyGlWseo)n i Gdzie n jest liczbą całkowitą (eH) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID no: 6:

Xia (2) INFORMACJE O SEQ ID No: 7:

(H) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 1 aminokwas (B) TYP: aminokwas (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOCIA: liniowi (il) TYP CZĄSTECZKI: białko (ii) CECHT:

(A) NAZWA/KIUCZ: Białko (B) POŁOŻENIE: 1 (D) INNE INFORMNNECi /oumacj ,,-dzie g-(gGy n oer(G i gdzie n jest liczbą całkowitą (xl) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID nr: 7:

210

184 424

Xaa (2) INFORMACJE O SEQ ND Nr: 8:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 1 aminokwas (B) TYP: aminokwas (T) ILOŚĆ NITi: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYO CZĄSTECZKI: białko (HH) CECHC:

(A) NAZWA/KLUCZ: Białko (B) POŁOŻENIEM: 1 (D) INNE INFOR^NEHi FOwagJ:: „ g/uia i= (alagHuoea)n H gdzie n jrst liczbą, całkowitą (xH) OPIS SEKWENCJI: SEQ ND nr: 8:

Xaa (2) INFORMACJE O SEQ ND Nr: 9:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A)	DŁUGOŚĆ: 35	aminokwasów
(B)	TYP: aminokwas
(C)	ILOŚĆ NICI:	pojedyncza
(D)	TOPOLOGIA:	liniowa
HH) TYP	CZĄSTECZKI:	białko

(xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID nr: 9:

Gly Tly Tly Se; Tly Gly Tly Ser Gly Gly Gly Sec Glu. Gly Tly Ser

10 15

Glu Uiy Uiy Tly Se; Glu Gly Gly Gly Ser Glu Gly Tly Gly Sen Gly

184 424

211

25 30

Cly lir Sro (2) INFORMACJE O SNQ ND No:10 (i) CECSY SEKWENCJI:

	(A)	DŁUGOŚĆ: 24 aminokwasy
	(B)	TYP: aminokwas
	(G)	IUOŚĆ NlCl: pojedyncza
	(D)	CRPOURGia: liniowa
(SS)	TYP	CZĄSTECZKI: białko
(xi) RhlS	SEKWENCJI: SNQ ID go: 10:

Ile Sro Tlu Pos Sro —ly Pos Ili Sro Cho llr Apg Pos Seo Pos Tho

10 15

Sro Uys Glu Sro Sis Uys Sio Pos (2) INFORMACJE R SEQ ND No: 11:

(i) CECSY SEKWENCJI:

(G)	DŁUGOŚĆ: 28	aminokwasów
(B)	TYP: aminokwas
(C)	IUOŚĆ NlCl:	pojidyncza
(D)	TOPOLOGIA:	liniswa
(ii) TYP	CZĄSTECZKI:	białko

(xS) OPIS SEKWENCJI: SNQ ID go: 11:

Ili	Clu	—Ir Arg	llr	Seo	Tlu	Pos	Sro	—ly	Pos	Ilr	Sro Gho llr Apg
1			5					10			15
Pos	Sro	Pos Pos	Seo	Uys	Clu	Sro	Sis	Uy/	Ser	Pos
		20					25

(2) INFORMACJE R SEQ ID No: 12:

212

184 424 (i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 4 aminokwasy (B) CYP: aminokwas (/) IUOŚĆ NI/I: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) CYO CZĄSTE/ZKl: białko (xi) RPDS SEKWENCJI: SEQ DD nr: 12:

Uly Aly Uly rur (2) INFORMACJE R SEQ ID Tr: 13:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 45 par zasad (B) TYP: kwa? nukleinowy (T) IUOŚĆ NI/I: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) CYP CZĄSTECZKI: inny kwa? nukleinowy (A) OPIS: /opis' - „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID nr: 13:

TGATCCTCCU GNCCN/ANAC NTTNTCTGTC TGTGTTTTTT GAGTG (2) INFORMACJE O SEQ ID Nr: 14:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 30 par zasad (B) CYP: kwas nukleinowy (T) DUOŚĆ NITD: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: UinSowa (iS) CYP CZĄSTECZKI: inny kwa? nukleinowy (A) OPIS: /opS? - „DNA (syntetyczny)

184 424

213 (el) OPIS SEKWENCJI: SEQ ND nr: 14:

ATCCACCCAT TTCCTCATCT ACACGGTCCA (2) INFORMACJE O SEQ ND No: 15:

(i) TECiY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 33 pary zisid (B) TYP: kwas nukleinowy (T) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOCIA: liniowi (il) TYP CZĄSTECZKI: inny kwis nukleinowy (A) OPIS: /opis - „dna (syntetyczny) (el) OPIS SEKWENCJI: SEQ ND no: 15:

TClCAlCCTT ATTTCATCTA GA111C1GAT CCT (2) INFORMACJE O SEQ ID No: 16:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 10 par zisid (B) TYP: kwis nuk1ilneaw (T) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOIOCIA: liniowi (il) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) OPIS: /opis - „DNA (syntetyczny) (xl) OPIS SEKWENCJI: SEQ ND nr: 16:

AlTTCCGGAl (2) INFORMACJE O SEQ ID No: 17:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 10 pie zasad

214

184 424 (B) TYP: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NITi: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (iH) TYP CTYp TCCZKI: inny Hwnr nukl eiuouu (A) OPIS: /opis a ,_ZDNA (syntetyczny) (xH) OhiS SEKWENCJI: SEQ ID nr: 17:

cattgttcct (2) INFORMACJE O SEQ ID Nr: 18:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 13 par zasad (B) TYP: kwas wukluHnoay (C) ILOŚĆ NiCI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (Hi) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas wunarinoay (A) OPIS: /opis a ,,1^1 (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID wa: 18:

AeTTCTTCTT CAA (2) INFORMACJE O SEQ ID Nr: 19:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 13 pap zasad (B) TYP: kwas nbnlrinpwy (C) ILOŚĆ NiCl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (iH) TYO CZĄSTECZKI: Hnny kwas wbnaeinpay (A) OPIS: /opis a aDNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ND nr: 19:

184 424

215

CATACrGCCA TTA (2) INFORMACJE O EEQ ND Nr: 20:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(G) DŁUGOŚĆ: 22 pary zasad (B) AYP: kwas sukluisows (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) COPOLOAlA: linSowa (ll) CYP CZĄSTECZKI: inns kwas sGkUMLnzws (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ND no: 20:

AArrCGGCAA CAATAACAGC AA (2) INFORMACJE O EEQ ND No: 21:

(L) TETHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 22 paos zasad (B) AYP: kwas SGkleLnzwy (T) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) COPOLOAlA: ULniowi (LL) AYP CZĄSTECZKI: inns kwas nukleinows (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xL) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID no: 21:

TAAACAATCA TCCACACCAT CA (2) INFORMACJE O EEQ ID No: 22:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 27 par zasad (B) CYP: kwas nGkiuinzws

216

H8 424 (T) DUOŚĆ ND/I: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CGĄPTACZKI: Znny inns kwl?cSuoeu (A) OOIK: /opis - „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: KEQ ID nr: 22:

/GTTCCTTGG TGGTA/T/AG TTTGT/T (2) INFORMACJE O KEQ ID Ng: 23:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 29 par zasad (B) TYP: kwa? nukleinowy (/) IUOŚĆ NI/I: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ni) CYP CZĄSTECZKI: inny kwas nνkirgnowy (T) OPIK: /opis - „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: KEQ ID nr: 23:

GTTCATACAT TTGGGCTCTG G/TGAGTCT (2) INFORMACJE R KEQ ID Nr: 24:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 27 par zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (/) 1LRŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (Si) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) OPIK: /opis - „DNA (syntetyczny) (xi) OOIK SEKWENCJI: KEQ ID nr: 24:

CGATTCTTAC TGCGATATCC TATCCAG

184 424

217 (2) INFORMACJE O SNQ ND No: 25:

(i) CECSY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 29 par zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) NUOŚĆ NNCI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (iS) TYP CZĄSTECZKI: inny kwa/ nukleinowy (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xS) OPIS SEKWENCJI: SEQ ND go: 25:

gatagagctt AayyyTTAac GTCpyyyGA (2) INFORMACJE O SEQ ND No: 26:

(i) CECSY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 27 pao zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (G) ILOŚĆ NlCl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (iS) TYP CZĄSTECZKI: inny kwa/ nukleinowy (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (ii) OPNS SEKWENCJI: SNQ ND go: 26:

CGAhCCAGGG TCCCGCGGCC TGCT—TC (2) INFORMACJE R SEQ ND No: 27:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(l) DŁUGOŚĆ: 29 pao zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) IUOŚĆ NNCI: pojedyncza

218

184 424 (ϋ) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSΤΕΟΖΚΙ(ΐη:τ kwas nukleinowy (A) OPIS: /opis = „ONA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ II nr: 27:

catcaacctt AiyGTyrAyG ταααιιιτι (2) INFORMACJE O SEQ II Nr: 28:

(i) CECiY SEKWENCJI:

(A) OŁUCOŚĆ: 30 pao zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza d) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) OPIS: /opis = „ΡΠ (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ H no: 28:

CCATCCATCC CTCTCCACTT TACCTTCCCA (2) INFORMACJE O SEQ H No: 29:

(i) CECiY SEKWENCJI:

(A) IŁUGOŚĆ: 29 pao zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (O) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) OPIS: /opis = „INA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ II no: 29:

CATCACCCCT AACCCACCAG CACACCTCT

184 424

219 (2) INFOIUMGCJE - O SEQ ND No: 30:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 27 par zasad (B) TYP: kwis nukleinowy (T) NIOŚĆ NIGN: pojedyncza (D) TOPOIOGNA: liniowi (il) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas n„k1uSneww (A) OPIS: /opis - „DNA (syntetyczny) (xl) OPIS SEKWENCJI: SEQ ND no_: 30:

TGATTTATCC ATTTTAGTTT CCCACAA (2) INFORMACJE O SEQ ND Nr: 31:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(1) DŁUGOŚĆ: 29 pae zasad (B) TYP: kwas n„k1iinowy (C) ILOŚĆ NNTN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA·. liniowi (li) CYP CZĄSTECZKI: inny kwis nukIul_ne_Wy (A) OPIS: /opis - „DNA (syntetyczny) (xl) OPIS SEKWENCJI_: SEQ ID no: 31:

1ATTAACCTT ACATACTACC GAlGACCAC (2) IN/ORWACJE O SEQ ID N_O: 32_: (i) CECHY sekwencjn_: (A) DŁUGOŚĆ: 27 pio zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) NIOŚĆ NNTN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa

220

184 424 (SS) TYP CtĄPCTCZKłEinny Less nukleiuowy (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xS) OPIS SEKWENCJI: EEQ ND no: 32:

CGACCCACAA AAGAAAUUAA AACCCAG (2) INFORMACJE O SEQ ND Nr: 33:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 29 pao zasad (B) CYP: kwas nGniMisowy (C) IUOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (iS) AYP CZĄSTECZKI: isny kwas nuklLisows (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xL) OPIS SEKWENCJI: EEQ ID so: 33:

AACTAAUCCA ACAAACCAAA UACCACAAC (2) INFORMACJE O SEQ ID No: 34:

(S) CETHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 27 pao zasad (B) CYP: kwas nukieisows (C) ILOŚĆ NITN: pojedyncza (D) COPOUOAIA: liniowa (ii) CYP CZĄSTECZKI: insy kwas sGnUMinows (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ND no: 34:

TAACCTACUU UATTTATTTA TTATCTA (2) INFORMACJE O EEQ ND No: 35:

184 424

221 (S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 29 par zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (T) IUOŚĆ NICI: pojedyncza (D) COrOUOGIT: liniowa (ni) TYP GZĄKAETZKI: inny kwa? nukleinow' (A) ROIK: /opS? - „DNA (syntetyczny) (xi) OODS SEKWEN/JD: KEQ DD nr: 35:

ATAGATGCTT T/TAATGTCC /CnAGTTGC (2) INFORMACJE O KEQ ID Nr: 36:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 27 par zasad (B) TYP: kwap nukleinowy (T) IUOŚĆ riAI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: iSnSowa (ii) TYP /CĄKCETCKI: Snny kwa? nunlrnnowy (A) OPIK: /opis - „DNA (syntetyczny) (xi) OODS SEKWENCJI: KEQ DD nr: 36:

CTAC/CTTGA GATTTGAG/T TTTCCCT (2) INFORMACJE O KEQ ID Nr: 37:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 29 par zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (/) IUOŚĆ NI/I: pojedyncza (D) TOPRUOADA: lSniowi (SS) CYP CZĄSTECZKI: inny kwa? nunirSsowy

222

184 424 (A) OPIS: /opis a ,,DN1 (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID nr: 37:

yeTceeyccT aaagtigtct cggcagttc (2) INFORMACJE O SEQ ID Nr: 38:

(H) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 27 par zasad (B) TYh: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYO CZĄSTECZKI: Hnny kwas wuklrHnpay (A) OOlS: /opis a aDEe (syntetyczny) (xH) OPIS SEKWENCJI: SEQ ND nr: 38:

CTATCC1TGT TceTGeccic eTCTcec (2) INFORMACJE O SEQ ND Nr: 39:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 30 par zasad (B) TYP: kwas nunluHnoay (C) ILOŚĆ NiCI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas wbkarinpay (A) OPIS: /opHs a ,,DN1 (syntetyczny) (xH) OPIS SEKWENCJI: SEQ ND nr: 39:

TlTyCATCCT 1CTTTTT1TG AlTyTTGTTT (2) INFORMACJE O SEQ ND Nr: 40:

(i) CECHY SEKWENCJI:

184 424

223 (G) DŁUGOŚĆ: 30 pao zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) NLOŚĆ NICN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (SS) TYP CZĄSTECZKI i inny kwas nukleinowy (A) RPlS: /opi/ = „DNA (syntetyczny) (xi) OPNS SEKWENCJI: SNQ ND go: 40:

GGACCCAGGT CGCACAAGGA TCCCAATGGC (2) INFORMACJE O SNO ND No: 41:

(S) CECSY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 29 pao zasad (B) TYP: kwa/ nukleinowy (C) NLOŚĆ NIGN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (iS) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) OPNS: /opS/ = „DNA (syntetyczny) (xi) OPNS SEKWENCJI: SNQ ND no: 41:

TACCGAGCCh AGGhGGTGCh GCTGTGCGG (2) INFORMACJE O SNQ ND No: 42:

(i) GNCSY SEKWENCJI:

(G) DŁUGOŚĆ: 30 pao zasad (B) TYP: kwa/ nukleinowy (C) ILOŚĆ NNGN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) OPNS: /opis = „DNA (syntetyczny)

224

184 424 (xi) OPIK SEKWENCJI: SEQ DD nr: 42:

CGTACCTTAG TTT/CCATGG TTTTTTC/CG (2) INFORMACJE O KEQ DD Nr: 43:

(i) AEAHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 29 par zasad (B) CYP: kwas nukleinowy (/) DUOŚĆ NDCI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nνnUrgnowy (T) OPDS: /opis - „DNA (syntetyczny) (xi) OODS SEKWENCJI: KEQ ID nr: 43:

nTACTTACAT T/TTGTGTGC TATAATC/T (2) INFORMACJE O KEQ ID Nr: 44:

(i) AE/HY KEKWEN/JD:

(A) DŁUGOŚĆ: 30 par zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (/) IUOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ni) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) OPIK: /opSs - „DNA (syntetyczny) (xi) OOIK SEKWENCJI: SEQ DD nr: 44:

CATACCTAGA T/TTCTC//T ATACTAC/TA (2) INFORMACJE O SEQ ID Tr: 45:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 32 pary zasad

184 424

225 (B) TYP: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NlCl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowi (ii) TYP CZĄSTECZKI n inny kwas nukleinowy (1) OPIS: /rpis = „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID nr: 45:

gaicaigcti aiiigggiic ciigtgagci gt (2) INFORMACJE O SEQ ID Nu: 46:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(i) DŁUGOŚĆ: 83 pan zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NICl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: lieirwi (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwis nskltSnrw/ (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID nr: 46:

AATTCCGTCG llCAChGACC TTCTATCTG1 AiACChTGGA GA1CGCGCAG

GCTClACAGT ACGTAGAGGG CGGTGGAGGC TCC (2) INFORMACJE O SEQ ID Nu: 47:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(C) DŁUGOŚĆ: 83 pin zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NlCl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowi (ii) TYP CZĄSTECZKI: ieny kwas nukleinowy

226

184 424 (A) OPIS: /opis - „dna (syntetyczny) (xH) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID no: 47:

CGCCGGACCC TCCACCCCCC TCTACGTACT CTTCACCCTC CCCCTTCTCC

AC1CTTTTCG GATAGAACCT CA1TTTACCA CCC (2) 1N/OUWGCJE O SEQ ND No: 48:

(i) CETiY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 59 pio zasad (B) TYP: kwis n„kaulneaw (C) NLOŚĆ NICN: pojedyncza (D) TOPOLOCIA: liniowi (li) TYP CZĄSTECZKI: inny kwis nukleinowy (A) OPIS: /opis - „dna (syntetyczny) (xl) OPNS SEKWENCJI: SEQ ID no: 48:

1CTACCCTTC ACCAACCGCA GGAACAACAG CCTGGTCCCT CTAACTCCTC

TATAATCAT (2) IN/OUWACJE O SEQ ID No: 49:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(G) DŁUGOŚĆ: 56 pio zisid (B) TYP: kwas n„kaelneay (C) NLOŚĆ NNCI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowi (il) TYP CZĄSTECZKI: inny kwis nukaulnoay (G) OPIS: /opis - „dna (syntetyczny) (xi) OPNS SEKWENCJI: SEQ ID no: 49:

184 424

227

CCATCATTAT ACACCACTTA CAGCCACCAC CCTCTTCTTC CTCCCCTTyC

TCAACC (2) INFORMACJE O SEQ II Nr: 50:

(i) CECiY SEKWENCJI:

(A) IŁUCOŚĆ: 80 par zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) OPIS: /opis = „1INA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ II nr: 50:

CTTACCCTTC AyCAlCTCCA C-lAClACAC CCTCCTyCCT TTCyCCGGCC

CACCyCTCCC CCTTCGAACT yCTCTATAAT (2) INFORMACJE O SEQ II No: 51:

(i) CECiY SEKWENCJI:

(A) IŁUGOŚĆ: 80 pao zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) OPIS: /opis = „INA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ II nr: 51:

CCATCATTAT ACACCACTTA yiACCCCCCC CCCTCCCACC CCCACAyCCA

228

184 424

CTACTTCUTT ATCTCCGCUC AAATCCAAAA (2) INFORMACJE O EEQ ID Nr: 52:

(S) CETHY SEKWENCJI:

(() DŁUGOŚĆ: 30 par zasad (B) CYP: kwis nukUMSnz-ws (C) ILOŚĆ NITN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: lisSowa (LS) AYP CZĄSTECZKI: inny kwas SGnlMinowy (A) OPIS: /opis = „DNA (syntutsczns) (xL) OPIS SEKWENCJI: EEQ ND nr: 52:

AACTUACTAC GGTATCAAAC CTUACCAACC (2) INFORMACJE O EEQ ND No: 53:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 28 par zasad (B) TYP: kwis nukleSnows (C) IUOŚĆ NNCN: pojedyncza (D) COPOLOAlA: ILsLowa (SS) AYP CZĄSTECZKI: isny kwas nunleSnowy (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xL) OPIS SEKWENCJI: EEQ ID nr: 53:

CATCAAAATU AATAAAGUAU TAUUAUAA (2) INFORMACJE O EEQ ND Nr: 54:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 32 pars zasad (B) CYP: kwas nukieSnowy

184 424

229 (/) DUOŚĆ NDCI: pojedyncza (D) G000U0A1T: liniowa (SS) TYP CG/YSTGCZKI: inny inns kukleSuoeu (A) OODK: /opis - „DNA (synGttycsry) (xi) OPDS SEKWENCJI: KEQ DD nr: 54:

GTTCGT/CTT GACTTATGCT A/TGACTATG TG (2) INFORMACJE O SEQ DD Tr: 55:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 28 par zasad (B) CYP: kwas nνnlrinowr (T) DUOŚĆ NICI: pojedyncza (D) AOPOUOAIA: liniowa (ni) CYO /ZĄrCECZKD: Snny kwas nukleinowy (A) OPIK: /opis - „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ DD nr: 55:

GT/ATATTCG TTTTCTATAT T/TTGTCT (2) INFORMACJE O SEQ DD Tr: 56:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 32 pary zasad (B) CYP: Owi? nukleinowy (T) DUOŚĆ NDCI: pojedyncza (D) norOUOniA: USniowa (ii) CYO CZĄSCECZKI: inny Owas nuklrinowy (A) OPDS: /opis - „DNA (syntetyczny) (xi) OODS SEKWENCJI: KEQ DD nr: 56:

ATTCATCCTT AGCTACAGCG CGCGGTTTTC CT

230

184 424 (2) INFORMACJE O SEQ ND Na: 57:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 28 par zasad (B) TYP: kwas WbkluHnowy (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas wukariwowy (A) OPIS: /opis a ,,DNA (syntetyczny) (xH) OONS SEKWENCJI: SEQ ND nr: 57:

yGCTlTTiyT TITGCyTTTT ClTlTTGC (2) INFORMACJE O SEQ ID Nr: 58:

(H) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 32 pary zasad (B) TYP: kwas wpkauHnoay (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: Hnny kwas nuklrHnoa·y (A) OPIS: /opis a ,,1^1 (syntetyczny) (xi) OONS SEKWENCJI: SEQ ID wa: 58:

G1TCT1CC1G GTCTTC1GGT T1CTTTCCAG 11 (2) INFORMACJE O SEQ ND Nr: 59:

(i) CECHY SESKWENCJN:

(A) DŁUGOŚĆ: 28 par zasad (B) TYO: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NNCN: pojedyncza

184 424 231 (D) TOPOLOGIA: liniowa (SS) TYP CZĄSTECZKI i inny kwas nukleinowy (A) OPNS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xi) OPNS SEKWENCJI: SNQ ID no: 59:

CTCGAhTACy GAChhCAhGA CGATCCGA (2) INFORMACJE O SNQ ID No: 60:

(i) CECSY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 54 par zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (G) ILOŚĆ NNCI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (Si) TYP CZĄSTECZKI: inny kwa/ nukleinowy (A) RPNS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xi) OPNS SEKWENCJI: rNQ ND go: 60:

GGhCTGAGAG GGGCGAGAGC CGCCATAGGG CGGCGGAAGG hGGCGhATAA GGCG (2) INFORMACJE O SEQ ND No: 61:

(S) CECSY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 54 pary zasad (B) TYP: kwas GuklriGowr (C) ILOŚĆ NICN: pojedyncza (D) GRPOLOGNA: liniowa (iS) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (l). RPNS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xi) OPNS SEKWENCJI: SNQ ID go: 61:

CaGCCCTCCC TCGGCTCTGG CTGChCTCAG ATGPTCCTGC TCaayhCPPT ATAG

232

184 424 (2) INFORMACJE O SEQ ID Nu: 62:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 18 pan zasad (B) TYP: kwis nukleinowy (C) ILOŚĆ NlCl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: OSnirwi (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (1) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID nu: 62:

GGGyTGCGCA AGGTGGCG (2) INFORMACJE O SEQ ID Nu: 63:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(1) DŁUGOŚĆ: 21 pan zasad (B) TYP: kwas nskluinrwy (C) ILOŚĆ NICI: pojed/nczi (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (1) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID nu: 63:

ACACCATTGG GCCCTGCCAG C (2) INFORMACJE o SEQ ID Nu: 64:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(i) DŁUGOŚĆ: 32 pary zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NlCl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa

184 424 233 (li) TYP CZĄSTECZKI o inny kwas nukleinowy (A) OPIS: /opis - „DNA (syntetyczny) (el) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID no: 44:

GATCGACTAT GGCTTACAAC CT1TCCCACC CC (2) INFORMACJE O SEQ ID No: 65:

(i) CETiY SEKWENCJI:

(1) DŁUGOŚĆ: 36 par zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) NLOŚĆ NICN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowi (il) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (1) OPIS: /opis - „dna (syntetyczny) (xH) OPIS SEKWENCJI: SEQ ND no: 65:

CCATCGAAGC TTATTA11TC CCACAGAGTT TCTCCT (2) INFORMACJE O SEQ ND No: 66:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(Α)	DŁUGOŚĆ: 32	pioy zisid
(B)	TYP: kwas nukleinowy
(C)	NLOŚĆ NNC1:	pojedyncza
(D)	TOPOLOGIA:	liniowi
(il) TYP	CZĄSTECZKI:	inny kwas nukleinowy
(A)	OPIS: /opis	- „DNA (syntetyczny)'

(xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID no: :

CATC1AGCAT CCGTCCC1A1 TTCCCCCCCA CC (2) INFORMACJE O SEQ ID No: 67:

234

184 424 (S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 36 par zasad (B) TYP: kwa? nukleinowy (T) DUOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) CYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (C) OOIK: /opis - „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: KEQ DD nr: 67:

CGTTCATTGG TTTTTTGGTT TCT//CCCCT AAACCT (2) INFORMACJE 0 KEQ ID Tr: 68:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 32 pary zasad (B) TYP: kwa? nuOiuSnoay (C) DUOŚĆ NI/I: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (iS) CYP CZĄSTECZKI: inny kwa? nukleinowy (A) OPIK: /opS? - „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: KEQ ID nr: 68:

ATTCGTCCTT nGGCTTGnT/ CCGA/CCAGC TG (2) INFORMACJE 0 KEQ ID Tr: 69:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 36 par zasad (B) TYP: kwap nukleinowy (C) DUOŚĆ NDCD: pojedyncza (D) AOPOUOGIA: lSniowa (ii) CYO CZĄSTE/ZKl: inny kwa? nuOirnnowy

184 424

235 (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xL) OPIS SEKWENCJI: EEQ ND nr: 69:

TGAACGAAAC TTATAATCTC AACCTAGCTA CCAGCA (2) INFORMACJE O EEQ ND No: 70:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(G) DŁUGOŚĆ: 32 paoy zasad (B) AYP: kwas nGkiuinzwA (C) IUOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (LL) CYP CZĄSTECZKI: issy kwas nGkIeLnzwy· (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xL) OPIS SEKWENCJI: EEQ ND no: 70:

AAATAATCAA AUTTACCTAG GArGCCATGC TA (2) INFORMACJE O EEQ ND No: 71:

(S) CETHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 36 par zasad (B) AYP: kwas SGniuinzwy (C) IUOŚĆ NNCN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (Li) CYP CZĄSTECZKI: Lnny kwas nukleinowy (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xL) OPIS SEKWENCJI: SEQ ND so: 71:

CUAACGAAAC TCAAAAAUUT CUTAGAATAA GGACCA (2) INFORMACJE O EEQ ND No: 72:

(i) TECHY SEKWENCJI:

236

184 424 (A) DŁUGOŚĆ: 36 par zasad (B) TYP: Owi? nukleinowy (/) DUOŚĆ NICD: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CGĄSTECZKI: inny inns kukleSukiy (A) OPIK: /opS? - „DTT (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID nr: 72:

CGTTGATTGG TTTTTTGGGG AGCTAUGCTG AGG//T (2) INFORMACJE O KEQ DD Tr: 73:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 36 par zasad (B) CYP: kwa? nukleinowy (/) DUOŚĆ NI/D: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) CYP TCĄKTEAZKI: inny kwas nνklrgnoay (A) OPIK: /opis - „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: KEQ DD nr: 73:

CGTACATTAG TTTTTTGGGG TTGUCCnn/T TGGGAG (2) DNFORMA/JE O KEQ ID Nr: 74:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 21 par zasad (B) CYP: kwa? nukleinowy (T) ILOŚĆ. NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (Si) CYP CZĄSTECZKI: Snny kwas nukleinowy (A) OPDK: /opis - „DNA (syntetyczny)

184 424

237 (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ II no: 74:

CTACACCCCC CTCCACCCTC C (2) INFORMACJE O SEQ II Nr: 75:

(i) CECTY SEKWENCJI:

(A) IŁUCOŚĆ: 25 par zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP , inny kwas nukleinowy (A) OPIS: /opis = „INA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ II no: 75:

CCCCCCACCC TCCACCCCCC TCTAC (2) INFORMACJE O SEQ II No: 76:

(i) CECiY SEKWENCJI:

(A) IŁUGOŚĆ: 53 par zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) OPIS: /opis = „INA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ II no: 76:

TTCTACCCCA CCGTCCCCAC CCCyCCCCCC yCGCTCACAT GTCGACACCA TGC (2) INFORMACJE O SEQ II No: 77:

(i) CECHY SEEKWENCJI:

(A) IŁUCOŚĆ: 53 pary zasad

238

184 424 (B) TYP: kwas nskluSnrw/ (C) ILOŚĆ NlCl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKIn ieny kwas nukleinowy (1) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID nu: 77:

C11TGGTGTA GACATGTCAG AGCCGCCGCC GGGCTGCGCA AGGTGGCGTA GAA (2) INFORMACJE O SEQ ID Nu: 78:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(1) DŁUGOŚĆ: 439 pin zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NlCl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: linirwa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwis nukleinowy (C) OPIS: /roSp = „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID nu: 78:

184 424

239

UCC1CCCUCC 60	CCCCCCTTCC	CUCTUCCCCC	CTCCCTCCCC	CCCA1AUCCC	ACCTTCACCC
CGUCGUUCCC 120	CUAACAACCC	CCATUCCUCC	TCCTGCCCCC	CCCGUCCUUC	ccueicccTT
CTCCCTCCCC 180	CCCGTTAUCU	CTTCUCCATU	TCCUCCAATA	ACCCATACAC	CUCATCAGTT
CCCUAUTCAC 240	CGCCCCGTCC	CCTCCCCCCC	CUCCGUCCCC	CCUCCACUUC	CTCACCCTCC
CUCCCCCC1C 300	CCCCClTCCC	GGCCUUCUCC	TUUCACUCCC	CCCTTTACCA	CCCGACTGTC
CACCCTTCCA 360	CCCCTTATCC	AUCUCAUTAC	CCACCTCCCT	TCTCUTGCUU	CGTCTTCTCC
CCUUTCU1CC	CUTCTTGTCC	AAGCGCCCCC	ACCAACCCTC	cccccccucc	CACCG1AGCT

420

CCCCCCCCCC CCCCCCTTC

439 (2) INFORMACJE O SEQ ND Nr: 79:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(1) DŁUGOŚĆ: 465 par zasad (B) TYO: kwas iunauiipay (C) ILOŚĆ NiCl: ppjras·icgn (D) TOPOLOGIA: liniowa (SS) TYO CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) OONS: /opis a _Z,DNA (syntetyczny) (xi) OhiS SEKWENCJI: SEQ ID nr: 79:

ccccccuccc ycccTTychG TGcccTycuc tcccgcctgc cccctccgcu cgcctcccac 60

UGCCCTCCCC TCAUCCTUCU CCCTCTCCCA UCU1GCCCCC CCCGTCCCCC CCCTUTCCCU 120

CGTCCCTCCU TGTCCTTGCU CCGUUTCGCC TUTCAA1CCC CTCCUUCU1C UACCCAGTCC 180

CCGG1CACCC CTTUCTCCUC UACCCCCCCT CCU11UUUCT TUCTUUCCUC CCUUUTACCA 240

CCUUUCCCCC CCCUCCTCCC CTCCCCCCCT TUUCCUCCCC CCUTCCCTUC CCUTCTCCTC 300

240

184 424

rrrcGCirrr 360	ClCGlGirrr	rcrriiCArr	ccirccrrrr	ΓΑΓΑ111ΓΑ1	iGrcnrnicr
ΓΑΓΑΑ11ΑΤΓ 420	rCGACirCGC	rcccrcciir	ΤΤΓΓΑΑΓΑΓΓ	CirTrCIGCl	nisiiTiriT
hCCrhlAClC	ccicnicGii	ΤΤΓΓΑΓΓΓΤΓ	ciricrciii	AATCA

465 (2) INFORMACJE O SEQ ND No: 80:

(i) CECSY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 927 par zasad (B) TYP: kwas GuklriGowr (C) NLOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas Guk1liGsay

	(A) OPNS: /opis =	„DNA (syntetyczny)
(xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ	ND go: 80:
Tcrcrcircc 60	CGCCTirCPi rinrrcrriA	ΤΤΓΓΤΓΑΙΤΑ AirTGCThri ΤΤΑΓΤΓΓΓΑΤ
ΤΤΓΓΤΤΓΑΓΑ 120	ICAinrriAl rrAlCCCCGA	CAiicccArr ccrrirrric nrcricrrri
rrccccirci 180	Τ—1ΑΓΡΤΤΑ1 rrriTGAiAA	Ρ1—ΑΑΑΑΓΓΓ AlAhTIGIGA 1ΑΓΓΑΑ1ΤΓΑ
CGCCirATTC 240	TCilAirAlT lArrrrccrc	rrCGATCiAl CGGTiCAGCr ΑΓΙ—iCACAG
CTllCArcrA 300	ΓΤΤΙΓΓΤΓΤΓ ΙΤΓΓΓΤΓΓΤΤ	iiiciiccrc crncACAi—c rciccccrrc
crriiiircc 360	TiCAlAirrr rrCCGCAArr	riiccrrcrr cArAiiiCAi ιαγγαγαιγτ
CAriAllATC 420	rcssTircir rrccrrcAir	ΤΤΓΓΑΑΓΑΓΓ CircrriAll AGAlCCirir
rrrcr—ATic 480	rrTTAiCAic irccirrrrr	τ—ricrAiGi Aarrciicii γααγατιτγι
Tccrrrircc	riccTirrri CGArrccriA	ICrrCCAlCA AirCCCCrri ΤΤΑΓΤΓΓΓΑΤ

540

184 424

241

CTGTCCGCGA CTGCAGCCAC TGGlTCTGGA GGCCTTGATT TCTC1TTCCT IGTTCCGGTC 600

TCCTTCCGCC CCCATCTTAl TCCCGGACAl CC1AA1CTTT ACCCCCAC1A lAGGAACCCC 660

TAllATACTT CCCCACTAlC CATTTCTCC1 TTCCACCCAC ClACClTGCG CTC1C1AGGC 720

GTClGGTGTl TTTCTTCTCT ACTTTCCGTC CCCTACTCTT TCCCATCCCC GGlCTCGGTC 780

TTCCCCCGTT TCGACAlGTC TTTT11CATT GAClCTACCA TTATA1TCTA GAACCACTTT 840

1GC1CTATGT CTGC1A1GTC TTA1TCTGC1 GCTTCACCAC ACCCCTCCCC GGCCACCGTG 900

1CA11ACCCC TTlGTGTGTC TCCTACl 927 (2) INFORMACJE O SEQ ND No: 81:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 936 pae zasad (B) TYP: kwis nuklulneay (C) ILOŚĆ NNTN: pojedyncza (D) TOPOIOCIA: lnnlowi (li) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas n„kiiinoac (1) OPNS: /opis - „DNA (syntetyczny) (el) OPNS SEKWENCJI: SEQ ND no: 81:

CTTTTACGCT GCGTCCTCTC CGCTTTCCGA CCGTCTACCA ClGClTCCGC TCAGCTTTAC 60

CCGTTCTCTA CCCCAGCGGl TTA1CGTTTC GGCCTTGATT TCCC1CTCCT CTTT1TTTC1 120

TCCTTTCGCC CCCATCTCAC GTTCCCACAC CCClCAATTT ICACClACCA CATTAAClTl 180

TAllATACTT CCCCACTAlC CATTTCCGTC GCCCllCCAC CCACClGACT CTllllATGC 240

GCCCCAGTTA CCCCTTCTCC ACTTTCGTCC CCCTAlTCCT TCClAClCCC TTCTTCTTCT 300

GCCCCCCGTT T1TA1A1TTC TTTTCCCGTG T11TCCGTCG ClGAClCTAC CCGGATGCGC 360

242

184 424

GTGCClUCrG AGCCTUGACT GTTGGTUCUG TTAACCAAAA TUGTGGATUC ATCUlTlAlT 420

TTAATCCTUA TCCrAGCCUU UTAAAGGATA TCGUTACUll ACTTAU1GAA gctucgutgc 480

AGAGATGAG/ GTCCTTUTUC GGrGGCTCTG GTGCUTCCTG TlGTTGlTUT GTGGGCCUTG 540

GTTGCGCUGC UTGTGACGGC UTCGGGAUCl UTTGAGAGTT TUGGCTGTGG T1TAGTUTTG 600

GGTCGTCTCU TGryTCUGTT UUlCUCATUl CCCAGAACUC TlUTCUCCCG GCTCUGCGCG 660

GAGCTTATCU CC1GCUCUCG GGTTGCUTTC unuinnuTun tuu/augagu ucutgtagtg 720

CCCGGGCGTT CGATCCCATG GGTGCTGGCG GAUGCTTGTl ICGACCrCGU TGTGGTGGTT 780

UUllAGATCG AUClGCCGGT TCCCAGGGCC ATCAGrAGAA AGGGGAUGAG GCGCUGTATG 840

TAUUCrAAGC ATGAAAGGTT GATCAUGCTA GCAGCAGTGA TAACAClACA UUTUGUTTTG 900

ATlCTlATTC TCGCAGCCTA GCAGGCGTUA UTACll

936 (2) INFORMACJE O SEQ DD Nr: 82:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(T) DŁUGOŚĆ: 939 par zasad (B) CYO: kwas nukluinowy (G) DUOŚĆ T1TD: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: lSniowi (SS) TYP CZĄSTECZKI: Snny kwas snOlrinoay (A) OODS: /opis - „DNA (syntetyczny) (xS) OODS SEKWENCJI: SEQ DD nr: 82:

TGAAAClATG GCAATUGTTC TCCGGTGGlC ITAATAAlTC TlATUGrCGC TUAGCGAGAT 60 iCGATTACAC UACGTGCCCC AACUTUGGAC UCUUTTAAAA ATCCCAATAA CGGTCTGGTC 120

184 424

243 ciGCCTGCir TrGacTTiaG cttcggccic yGGcAccccc crayGcarra Gaccaacccc 180 caccacaTic irccaccaci cacccTTcic cyccacGcac icaicccacc accccccccc 240

CTGcrccccn ciicccicyc aiccyicciG ccccAGcyyi yycGccacci ccGiciccic 300 cttcccgccc TGccraGCcy ccyyGGCAcc ccccTicciy caciccccar GacccccccT 360 cacnacGaic cccaTCCCCi ciiccyGarc yTCcaacccc tcctcccccc aacGGiGCGT 420 yyccTcaicc iiGiAGcacc Giccccccic iGccicnccc rciTccrccr cacccicccG 480

TCTCCCGClC CCCCTGCiTG TACCTCCCA GiCCiCCCiC CaCTGCiTCC ICCCiCCCAT 540 ricciicaca ccccacTcac ccacTGccca cccGiicccc ciTTCccTac accyciccTC 600 cicccicciG TCGCciiTCG ciiCGGccca TCGCinaccc crcTCGarGa GacccncGcc 660 cAGcacATTC iCGCcrcaci cacccTicic ciCGaGcrac tcctggcccc acccggccac 720 cicrraccca cttgcctctc aicccTCciG CGCcacciii ciCGaccGGi ccgictcctc 780

CilCGCCCCC iCCCGAGCCl CCiTCGCCCC CACCITCCiC CaCCCGGCAC GaCCCCTCCT 840 cacaacGaic ccaahcccci cttcctccgc TTCcaacacc tcctccgccg nacrriGCGT 900 llCClcaiCC iTCiCCGCGC ClCCaCCClC iCCGlCrCG

939 (2) INFORMACJE O SEQ LD Nr: 83:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A)	DŁUGOŚĆ: 948 par zasad
(B)	TYP: kwas nskluinrwy
(C)	ILOŚĆ NICl: pojedyncza
(D)	TOPOLOGIA: linirwa
(ii) TYP	CZĄSTECZKI: ieey kwis euklurerwy
(A)	OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny)

244

184 424 (xi) OPIS SEKWENCJI: EEQ ID so: 83:

gtcttattat tttttttttt tcacccttta crTTGTacea acTCCTecTr tcatttttct 60 ττίίττίαία atatatctat ttagtcttta agccggcctt tgcccttggt attgtgtttt 120

ΊΤΤΊΊΤΤΊΤΤ TCCATTTTCA TGTAACACGA GCCAACGTTT ΑΤΑΤΑΤΑΤΤΑ (ΑΤΤΑΑΤΑΊΑ 180 ίατταίαττί gctacctcat catttcttcc cgccacagac ttagcctact atttaaatcc 240 ttcttcttta tttttttttt gttttctttc ccatgcttct ttccgtgttt tttttttttt 300 tttttttttt cctctacttt ttccgcaatt tacctcttgt tgtaccctac ccttatgttt 360

TATACCCAGT TTACTCTTCT TCGTCCCACT GTCTAATATT GTTGTTTATT AAACCTATTT 420 ttttttattt CGTTATTATT (GTCACCTGT cctcttaccc aatgccctcc taatcttatt 480

ΑΑΊΑΤΤΤΊΤΤ ΤΤΊΊΑΤΤΤΊΊ (CTTGCCCGG CATCGCTCAC GTTGTATCAA ΑΊΤΑΊΤΤΊΤΤ 540 (ATTTTTAGC ttttttatct tatacccact taccctttac atacctcttt ggtctttatą 600

TTTATTTTCT cctttttttt tcacttcact cgcctatagc ccaaaatttc tagccattat 660

ΑΊΤΑΑΤΤΊΑΤ ACTCTATTTT TCAAATACeT ATTTTATCTT TCCACTTATe CAGCCTAlTA 720

ΊΤΤΤΤΑΊΑΑΊ GCTCATTTCT GGGCCGTGTA GTTTGTTGCC ((TACTTGTC TTTATATTTT 780 tttttttttt gctttctttt ttatacttgc tccccaattt gttgtttgtt ataccctatt 840 cttacatttt ctactcattt tcatcttatt ttttccactc tttactattt tttttccata 900 ccattttttt ttttcacttt tctaccaact tttatttttt cttctctc 948 (2) INFORMACJE O EEQ ID No: 84:

184 424

245 (i) CECiY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 688 par zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) OPIS: /opis = „INA (syntut/czn/) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ II nr: 84:

TcrcicriiT 60	rcGiTTiTic	TCATTClTCA	lATllCATlT	CGGTTGAlll	llTCATGTCT
CTTTTGCGTC 120	llTTTllCCl	ITGCGClCll	TlAillTllT	CTTCCTTlll	TGlACGCAGi
ttcttcgtcc 180	CTAAlTGTlC	AllCTTTClC	IClllTlllG	CGCAlTlCAl	1C1CTCT1TT
ciircTTCci 240	CCllTlTTTT	ClGlCTTCTA	CTGlTCCGTC	TTATTlCTTl	TC3CTCGGTT
TTcrcccTiT 300	TTCllTCTTl	CGlAlCTACl	TllGlllTCl	CACTCTTlll	CilAlTCGCT
CTTGTGTGTl 360	CTTlTTTTTl	GCGAiCGCGC	CCllGlCGlC	cciyciciTi	TlA1ThlGTT
TcriiTGiTG 420	cciciciirc	TATATGATCT	CCllllCGGC	GGCCTlTTlC	TCTTCCATGT
CClGCCCTTC 480	IClllTllll	ATlTTTGClC	GTTClTCClG	CC1G1TTTTG	llCTTGCCCl
TTTlCGCllT 540	TTTlllllGl	CCCCT1GGA1	TCTAlGillT	CTCTTlllll	TTCACCGGCl
rTTTTCTiii 600	TCGGClTTAl	CCGTCGGClG	CCTTlTCCTT	CTATTTlTTG	llTATGTGlC
TlCTlTGlAl 660	CTAlCTClAł	CCCAlClllG	TGCCCAllGl	CTCCTlTTGl	1CTTCCCTAT
TATTlAGTCl	CGCTllllAG	AATllTCT

688 (2) INFORMACJE O SEQ II Nr: 85:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(C) DŁUGOŚĆ: 712 pao zasad

246

184 424 (B) TYP: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NICl: oriudrejzl (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) OPIS: /roip = „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID en: 85:

caTcrciicc iccicicica icaicGCira aciTCiccci ccciiarcca cccccccigc 60 ccciihccic cacccccacc cccTCAciGa ccaAcacGic iciaiccicc tcgccccacc 120 cciiccccii ccnanccirr acarchicci accgcctcic cccraciicc accctcccic 180 acGiciiGaG ccAiiiciic cicaichccc accaiGiciG ccciciccca ccgccgctcc 240 ciciccacAi ccrciccicc iccnrrcarc iGCCicccac ccattcccgc acaccciGac 300 ciicTCiCTG ciiaccciiG acccaccccc cccacacccc cgiggiggci cicccggigc 360

CTGCGCCGGC CGhTCiTTCT GCiCiCTACl GCiCCaiCTC CTTaiTCTiC CCiTCACCaC 420 accacciGca cctticcicg ccccrccccc cctcctigcc racGacGici ciciccigct 480 cGaccraaac citcgtcttc ccaccciGGa ccccttcgic cccgctcict ArcacTTcrA 540

AAciGCcica rcTaiiraGr ccattcttcc laciciccAr ccctctctcc ccicigcctc 600

CCCCGCTCCC IClCCCCCiC CCaTCCTCCl CACCCCCCri CCCTCCCaCG AgTTCCGGCC 660 aaaacTGCCG iiciricicr TTacccTTrc ccttgccccc rcrccacaci cc 712 (2) INFORMACJE O SEQ ID Nr: 86:

(i) CECHY :

(A) (B) (C)

DŁUGOŚĆ: 975 par zasad TYP: kwis nukleinowy ILOŚĆ NICl: pojedyncza

184 424

247 (D) COOOUOAIT: lSsSoaa (iS) CYO CZĄSTECZKI: inny Owch nuOiuSnoar (A) OODK: /opis - „DNA (syntetyczny) (xi) OODS SEKWENCJI: KEQ DD nr: 86:

AGGUATATUl 60	AAGAUCAGCC	AGTGAACGAA	CCAUAGCTGT	GTCTGATGAT	UUAAAUAAAG
GCCAGCGTTA 120	ACAlGATClC	lAUACCGCTC	CGGCATGTAC	ACCAATCAUA	CAATGAATAA
uGccrrucii 180	GCATCACCGl	TCATATAAAA	AACTUTCTUA	AGTGTUAGCA	UGGGCAAGGA
CACAUCACTA 240	ACATGCCGCT	ACCCUGACUG	UCGTCUGCCC	CATGAACUCA	CCAAATGAGC
CCGCCCGCCU 300	TTAAGCTTCA	CACACAUGAC	UCCACAGAlG	UCUUriGGCG	CATGTGGCGT
ACTTTCACAl 360	ATUACCCCCT	AAATGAGCTA	CCUACAGAAA	GTUACAGTTC	GCAAUTACCC
UGGliriCCU 420	UATAAAAUGU	TCAAGGUCAC	UCTAAACTAT	ACAGTCCGAT	AAAGCATGAT
GGCCCriACU 480	AATGCGATAC	ATATGAAAAA	CTCCATAAAA	AGGCTUAGAC	CGGCUAACCG
gggcatcgtc 540	CAGCGACAGC	UGAAGGAGCC	UTAATUCTTG	ACAUAAACGC	CAAGAUACTG
ACUGCiiTir 600	AUTCAAGCCT	CGTAAGGGAA	ATTCAUACUA	agtgtuugcg	GCGTGCGCCG
CGCAClCCAr 660	TAATGAGCCC	UTGCCCACAU	ACAlTGAUTA	ACACAAAGUU	AGAClGCGGA
CGCATAAAUl 720	AUCAUATGTG	CCTAAGGTAA	AACATUTUAA	AAAGAlCCUA	CGCCCTCCCG
GCGUCCAAAr 780	ArATUCGAAT	GGGACGCCGT	AAAATGAUGT	GGTUAAAGCU	GGAGUAGATG
AACATlUCTl 840	UATUGrCUCU	GGACGCCGAT	ClAlCAGTCT	CAACATAGAA	UGGCGTAACG

GACGAAATlG TAlGGCCATA AAAGGAGCCU lUTAAGAAAT TlCCACGAGC UGAGGTCGAA 900

248

184 424

GTCGCCGACT TTGCCACCAC CATCTGGCAG CAGATGGAAG AACTGGGAAT GGCCCCTGCC 960

CTGCAGCCCT AATAA

975 (2) INFORMACJE O SEQ ND Nr: 87:

(H) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 975 pa; zasad (B) TYP: kwas npklrSnpay (C) ILOŚĆ NiCl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (SS) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nbnluSiPay (A) OONS: /opHs a aDE1 (syntetyczny) (xS) OhiS SEKWENCJI: SEQ ID np: 87:

ATGGCTCTGG 60	ACCCGAACAA	CCTCAATGAC	GAAGACGTCT	CTATCCTGAT	GGACCGAAAC
CTTCGACTTC 120	CAAACCTGGA	GACGCTTCGTA	AGGGCTGTCA	AGAACTTAGA	AAATGCATCA
GGTATTGAGG 180	caattcttcg	TAATCTCCAA	CCATGTCTGC	CCTCTGCCAC	GGCCGCACCC
TCTCGACATC 240	CAATCATCAT	CAAGGCAGGT	GACTGGCAAG	AATTCCGGGA	AAAACTGACG
TTCTATCTGG 300	TTACCCTTGA	GCAAGCGCAG	GAACAACAGG	GTGGTGGCTC	TAACTGCTCT
ATAATGATCG 360	ATGAAATTAT	ACATCACTTA	AAGAGACCAC	CTGCACCTTT	GTACGTAGAG
GGCGGTGGAG 420	GCTCCCCGGG	TGAACCGTCT	GGTCCAATCT	CTACTATCAA	CCCGTCTCCT
CCGTCTAAAG 480	AATCTCATAA	ATCTCCAAAC	ATGGCTACCC	AGGGTGCCAT	GCCGGCCTTC
GCCTCTGCTT 540	TCCAGCGCCG	GGCAGGAGGG	GTCCTGGTTG	CTAGCCATCT	GCAGAGCTTC
CTGGAG3TGT 600	CGTACCGCGT	TCTACGCCAC	CTTGCGCAGC	CCTCTGGCGG	CTCTGGCGGC

184 424

249

ΤΓΤΓΑΤΑΙΓΤ ΤΓΓΤΤΓΤΓΑΑ ΙΤΑΡΤΤΑΙΑΙ ΓΙΑΙΤΙΑΙΑΑ Α11ΤΓΓΑ—11 riACCGClGA 660 irCrrrrAGl ATlilCCiTl Τ1ΓΓΑΓΓΤΑΓ S11CTTTTCC ΑΓΓΓΓ1Α11Α 1ΓΤΤ1Τ1ΓΤ1 720 rrciiGCAcr rTCTGCGrAh γγγγτιιιγτ cccctggict ΓΓΤ—ΓΓΓΓΑ1 rrACGrrccc 780

ΓΑϊΓτττΓΐτ τγττγτττατ γγααγτγγατ AircicrcTT τγγτγταγγα icciccrrci 840 rATirrCCTC AGiCCACACC CrrClAiTTi llTCCCGCCT TTTACArerT TCGCCTTGAr 900

TCCirCTArT TGTCCGCCAr CATCTiGCAi A11GTGCAG1 ΑΑΓΤΤΙΤΑΑΤ llCCCCCGCr 960

CCGrAICrrr AACAA

975 (2) INFORMACJE O SEQ ID No: 88:

(i) CECSY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 975 par za/ad (B) PYP: kwa/ nukleinowy (C) NLOŚĆ NlCl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) RPNS: /spis = „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SNQ ND go: 88:

ArTicricAc 60	CCCCTCGACA	rcrnATAirc	ATGAGllCAl	TTlAChllCG	ATSaTTACTl
llSGGACriA 120	ClCCCClCCC	niTTGcrcrc	iAiriAGCTC	AllSICAArG	TCCTTTTT1C
hCCGACTTCC 180	CTATGATTGC	ΓΤΑΤΙΑΑΑΤΤ	ArGCGCCGCC	TA1ATATACC	ACCTCCACCr
TCCCCCTACC 240	ClAGCGGCCr	CliriGCiAG	lACTCCrCCA	rrCTCATill	CCllAGCCCC
C1ACCCCCAA 300	GCrriTATAl	crcciCGGii	1CCGTC1A1A	ICrrAlAGAG	rccGCCACir
AhClGCGGAA	crccrccrAG	TCTCrAACCA	C1CCCGCCCC	criccACiic	ChlClCAGll

360

250

184 424

11T11T11A1 CTCTTTTlCC CCClGGCCGC ClCGGGCCTC TCATCACTCl TTGCCTCTTC 420

GGlCTTACll ACCTTGACAA ATTTGGAAAT ACCCTCATTT ACCCClTTAC CTGClTTTCT 480

CGTCTTCTTC TCTA1G1TTC ClCCCCClll CCTGTCCTTC TTA1TTACTC ITCCAlTCTC 540

GCillllCCC GCCATGlTlC CTCCTCTClT TCTCTCGAlG TTCTTGCTCC TTCC11T11T 600

CGCTllllTC TTTC1TTTAA 1TTTTTC1AC TAA1C1ACAA ACACGTllll TllCCCTCCC 660

CTITTTTlll ClGllTTCTl CCTTCGGCCT AA1TC1T1TT ATGTTCACCA CTTCCTlTCl 720

TCT111TATC TCTCCCCTCC TTTTTGCCTC TTTTC1A1TC TTClTTTTAl TTAC1TTTT1 780

TAlTTClTAC 1TTCTTT1A1 TGGCGTGC1C ACTCCTTCCC TTGCTCAGTA liilGCGGCl 840

GACCTTTTCi AAlllATCCG GTTT1A1CT1 C1TTTCGTTC CiCATAClGC CGCCGCClAG 900

ITClTTlATC TC1TTATT1T TACTTllCGl TAlCCCCAll GGTCClCAAC 11GTGTC1TT 960

TClCllTTTC CACAG

975 (2) INFORMACJE O SEQ ND No: 89:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(Α) DŁUGOŚĆ: 975 pio zasad (B) TYP: kwas nlkIeSneay (C) NLOŚĆ NNCN: pojedyncza (D) TOPOLOCIA: liniowa (li) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas n„k1einoas (A) OPIS: /opis - „DNA (syntetyczny?) (el) OPNS SEKWENCJI: SEQ ND no: 89:

ACCCTTCTll CCCAGTCCTAo AlCATCCCCC CGiAGlATTll. T1CCTTACTC 1CTTACCTTC 60

184 424

251

cattactttt 120	atccatacta	tttttttact	gttaattttt	ctatacgtag	TCAGCCACTT
ACATATTACT 180	GACACACATT	attttccttt	cgctgctatt	TCACTCATTT	taactattca
CATATTTTGA 240	TTTTCATACA	tttaaattat	TCATTCTTCA	attgctatat	tcgtccaatt
CTTATCAlCA 300	ATCTACACAC	tttagtattt	agttatttca	gctgctttac	TTGTTACTTA
cctttttttt 360	tcattatctt	tttatttttt	TCATCTTCAA	GTATTAGTAA	tgatcgacct
cctattttat 420	CTATTTTCCC	ttcattcttt	CAGTTCACTG	TTATCAGTAA	TTTCCTCTTG
ttctttacat 480	AACTGTACAC	ATTGTTAAAT	(TATTGATTT	acctgtttag	CTTCCTTGGT
tttttttttt 540	gttcttctta	tctaccacct	cgtttctggc	tgatttagtg	(TAAACTTTT
tcttctctct 600	tcgattcttt	tttattttat	cccctttaat	ttttcccttc	tgtccctttt
gttcctattt 660	gtttttgtaa	tttcgcatat	taatttacac	acagttatcc	ttacactcta
tttttttact 720	(CAATTCCTC	TCTTATTCAT	aactttgctt	ATTTTCACCA	CTCCCCCTTC
tgttcctatc 780	TGTTCACTAC	TTTTCCCCTT	TTTTTCACTT	TTTCTTTTAC	TTACATTTTC
tatttcctat 840	CTTATCCCAC	TCACTGTCAT	actctttgtc	GTTGTTATTA	tccatctttt
tattttttct 900	aactcagagt	ttttcacttt	ctttttattg	GCCATATATG	ttactcttat
tgtttttatt	CTCTTATTAT	tatcccccat	tacatttaat	aatgcttaac	tttttttgtt

960 ttttattttt aacac

975 (2) INFORMACJE O SEQ ND No: 90:

(i) TETHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 999 par zasad (B) TYP: kwis SGnieinowA (T) IUOŚĆ NICI: pojedyncza

252

184 424 (D) TOPOLOGIA: liniowi (ii) TYS CZĄSTECZKI: ieer kwas nukleinowy (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xi) OSlS SEKWENCJI: SEQ ID eo: 90:

aTGGCiCiGG	ccccGaccaa	CCiCCCiGCC	Gaaccccici	ciATCcTcai	ccrcccaaac
cTTCGaciic 120	caaaccircc	GTGCTTCCiC	ncGicirica	aracciiaGa	AcaTccaicc
GiTTiiracc 180	cnAiiciicc	laciCTCccc	CCTTCiCiGC	ccicicccac	CCCCCCCCCC
iCTCiaccic 240	cacTcricai	CCTCGCCGCi	GaciGCcacc	acttccccct	caracicccc
iTCiaicTii 300	iTacccTTGa	GcacGcrcac	iiccaacacc	riGGiCCClC	ICCCCCiCGC
aiciicircc 360	riiciaccir	CTCTCTCCTC	aicccTcrrc	TTATTcaica	cTTnaccccc
ccaccicccc 420	CiTTCiCCll	CCTCGCCCGi	Gcaccciccc	ccGCTGaacc	cicTGcicca
aTCicincTa 480	icacccccic	TCCicccicT	raacrcicic	ciacaicicc	acgcciccci
acccaiccTi 540	ccaircccGC	CiTCGCCTCi	GClllCCCGC	rcccGCcacc	TGGCCICCTG
iniciaccc 600	CICICCCCCC	CllCCiCGCC	GlllCGiaCC	ccciiciacc	ccrcciiccc
caicccicii 660	CCCGCiCTCG	CCCCiCiCAC	acciTCCicc	TCAcriCTTh	ccrGcacciG
airaacaicc 720	CCCGCGClGC	CCCCGCCCTC	caGCccrcGC	icicicccnc	circaccciG
TCCCCCCCCl 780	CCCCGCTCCi	CCTCCiCCGC	cccTCiciri	CCCTCCCClC	GCCTCCCCTC
riciccTGCc 840	ccaccccccc	CCiCCCGCTC	GCTCGCTCCl	TGcrcccaci	ccaicccccc

cTiiiccici cccccccrci cciccccgcc ciGCcarcca tcicccccgc riTGGGiccc 900

184 424

253

ATTClCGATl TAGClTllTT CllTCTTlTT llTTCCCGTl GTAGTAlTll 1T1CTCC1TG 960 yiiiciGCCi yciTiiTTTT tcttttgtii tttiiitii

999 (2) INFORMACJE O SEQ II No: 91:

(i) CECiY SEKWENCJI:

(A) ]IŁUyOŚĆ: 999 pao zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (T) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) OPIS: /opis = „ΏΠ (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ II nr: 91:

ClGlTlCCCG 60	TGCTlGGCCl	TGAGGTAAll	TTCTlGAGTT	CTTlATCllC	ITlGATTGCG
GTTCTGGTTl 120	TAGTTCGCTl	AGGCTTAilT	llTlTTllll	TACCGGlTCl	ITGlGClCTC
TGGlCAAiCT 180	rccTiTTTrc	TTlGCTTlTT	ThłlllGlll	TlTACllATA	ITACCllCGG
GGTCTCCCTl 240	GCGCTCGTGG	TCGTGGlGTl	AlTTGTTTGi	lAATCllTll	TlAAlTCAGG
GllTlTTTCl 300	ICCllTGATT	TGTCTGTTGl	TTGllTTTll	ITAlTTlTGi	llATGClGCC
GTTTTlCTTT 360	TGClGGCTTl	1GGTGTCTGA	τττττιιιττ	CGGCGAlTlC	TllACGCGGG
GTTiCGGlTC 420	CClAlTCTll	CGAGGGTlGl	GGllGTTTTT	TGGGTG1ATT	llTCCGTCTG
ICyCTCATCl 480	ττΑίτττιιτ	CTyCTTGlTl	lAillllTTT	ITCGATTlTT	AlATChGITG
ATTT1GGCCG 540	TGCTCTCGGT	GTGTGGTlTC	GTlTTATllT	GTTGCCTAGG	llGCCTTTTG
ICllTTClTT	ATTTGClGll	TTGTGTGllG	GTGTTlClTT	ITGGCTlATl	TTlTATTGCG

600

254

184 424

CC1CCCGCGT 660	UCT1CGCTGT	CUTCTCTCC1	C1CCCCCC1C	CCAAUGCCCC	A1AUCCAUCG
C11AA1AGCC 720	CUTTCTCCTU	C1CATCTCCC	CClUCGlAlC	T1C1C1CCCC	CGCCCC1CC1
CTCCACCCCU 780	CTUA1CTG1C	UCCTCTCTTC	ccccccccuu	UCCCCCCCC1	G1CCCCCCCU
CTCTCCGTCC 840	CCC1CCAU1C	CCCTCAUCTG	1CCTTCCUCT	CTAUCCAACC	CCCCC1C1UC
CCTCCCCCCC 900	ccceyTTTCT	CCC1CCTGCC	CTTUCCUGGA	CCCCCCCC1A	1CCTTUCCCC
ACCCGGTCCA 960	CCCG1CCTCC	TTCC1TCTCC	1CCTCCUCCC	CCACCCGCCl	1CCGCCGATT
1CA1AACC11	uccGGicccc	TTCCCTUCCU	CCCTCACCA

999 (2) INFORMACJE O SEQ ND Nn: 92:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 999 pa; zasad (B) TYP: kwas iunluSipay (C) ILOŚĆ NiCI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: lSiSoan (SS) TYh CZĄSTECZKI: inny kwas nukarSipay (A) OONS: /opis a ,^1 (syntetyczny) (xi) OONS SEKWENCJI: SEQ ND nr: 92:

CG11CG1CAC 60	CCTChCTATA	CCCACTCCCC	CCCCCllCCU	UCTCCGUTCA	A1CCCTCC11
lAAieiCClC 120	ClCTCTACCC	UTTTCCCCCT	1C1CCC1C1C	CTGA1CAACC	11UTU1C1UC
GCG11C11CU 180	1CATCUTCUU	CUGTTCCCCC	C1CCCGCCCC	TUCCC1AC1A	CACTACCCCG
CCCGGAAC1A 240	UCCCCCCTUC	CCCCTTUCCT	1ACCC1CACC	CCCCCACGGl	CGCAUCC1CC
CCCCGCCTTA 300	CTUCCCGCAC	CCTGCTACCT	CCCCACCG1T	CUAGCTGC1C	AC111CCUCC
CClAACCCAl 360	ACAACUCCCC	C11TACC1CU	UTAACCCCTC	UTACCCGCCC	ACCCCUCCC1

184 424

255

CCClCTGCCT CGGCCiCCCl CCaCGGCCCl CGaGCClCCC CGGCiCTTCC ClCTGCTCCC 420 ciciCTccia TcaccccGic Tccicccici aaaiacicic TTAacicicc accccTGGCi 480

CCCCTGGGlC CCClCCCGCC CTlCCCCiCl CCTTTCCCCC CCCGCCCCGG CCGGGTCCTG 540

CllGCTTCCC TiCTGCGGCC CTTCCTGGCG CTGlCGiaCC CCCIiClCCC CCACCTTGCC 600 caicccicic ccggctctcc cggctcictc ggcttccigc TcaAGiciTi acaccciGic 660 ccarcccicc cgccccctgg ccccgcgcic cccccgaicc TGTcicccac ciacatgctg 720 iCCCTCCCCC TGGTCCiCGi CCiCCTCCGa CTCiCTCiCC CCCTCCCClC CCCTCCCClG 780

CCC1CCTGCC CCCCCCCCCC CClGCTCClC CCaGCCTCCI TGaGCCTCCl CCTTTGCGGC 840

ClThlCCiCT TCCaCGGGCl CCTCCTCCCC CTCGirCCCa ICiCCCCCCC CilGCGTCCC 900 ccciiGcaca cccircAGCi rraccTCccc ccciTTGCca cccccaicic gctgctgttg 960 cncGcachGG cccicccccc TcccciGcai cccicaTAr

999 (2) INFORMACJE O SEQ ID Nu: 93:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 999 pan zasad (B) TYP: kwis nukleinowy (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: linirwa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwis nukleinowy (A) OPIS: /rpis = „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID nr: 93:

aiGGCiccac ciGcciccca ccgcttcccg ccarcaciGa cgttcicici ccitccccti 60

256

184 424

GClTAAlTlC S11GSTCGTA C1CT11T11T CTClCCllCl CTAlTlGCll TCCCTTTAAT 120

CCTCTCATCC C1STTGAC1A ACCTCTCTAC TATGTAAAlA CATCATTC1T STTCTC1TC1 180

1STTTCSSTS STTTCAATCA GlCAlCGCCT CTCACTTC1A ClClTTlACl TTCCTCSTTT 240

GTAGATTTll 11A1CCCT1C AGCiCTTCTC GllCGTCCAl AC1CT1TCCT S11CACC1A1 300

CCAACTCTTC ICATCTTTA CCGCT1TTTC TTCTCClTCG T1CTT1TATT TCTCTlSCGC 360

TCSACTATTS CTSS1CATCC A1AC11GCCC 1CA1CTTTTT TlllTlSATT 1CTC1CCTTA 420

ATTCTCSTTS CTCCTTTlCT TCTTTGCCTT SSACSATTCT ATSSCTTTTT GCATATCCTC 480

ATTTSCClTl TCST1CT11G TTCTCGCCCT CTTCCGGAlG CTT111TA11 A1C11CTTCC 540

1TC1TCA1TT STTG1CS111 TTCTGT11C1 CC1CT1TSCT 1T1TTCCAT1 TTATTCT1T1 600

CllTTGTGTl ICllTCTCCC TllGTGTGCC CCCCCTTC1T CTAA1TTTCC A1A1TSA1CC 660

SlSSClSTTT SlilTlSCCi GlTCCGCTCT CS11ACSA1T C1T1T1TTST TCATASCTC1 720

C1TT1TTTT1 SllSCCCilC 1TC1TCC11A CGTTGTGCll 1TSCTTTTT1 CCCCTTCTCC 780

S1TCTTTCCT TCS1TTAG1T TTCCGClTCl- CTS1CCC1TC C1S1TTSCTC TTATA1TC1T 840

TCCCCTTTCC ACCSiGGiGC TTT1GC11TT TCCiSSCGCG CACTTTTT1A CCCCClCTTT 900

SCTCC11SCS TSTTGTAGTC ICAGCTTCTT CACCTC1TTA TTCTCATTCC 1TS1TS1AC1 960

CSAlAACTCl ISSTClTGGT CCTGTCGTAl TTTTASTGA 999 (2) INFORMACJE O SEQ ID No: 94:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(1) DŁUGOŚĆ: 918 pio zisid (B) TYP: kwis nukauSneay (C) NIOŚĆ NICI: pojedyncza

184 424

257 (D) COOOUOAIA: liniowa (SS) CYO TCĄrCECCK1: Snny kwas nuOluSsoar (A) OPIK: /opis - „DTA (syntetyczny) (xS) OODS SEKWENCJI: SEQ ID nr: 94:

ATGGATACGT GACACATTAC GATAUATUCC 60

AGATrUATGC AAGAUAACAA GGTATATGCA 120

ACCAlCGTTG CAAAGGCUCA CAUGTCGlTC 180

UGCCTTGCUC CCACCGCCAC CCATGTAACC 240

TGCAUCACCG AAACAATAAC ATlCGCCIUr 300

TCGTCTATGC CTAAAGCCCA GAAlUAUTil 360

TGAAAUClTC CTCCTCCTGC ACUAUGArAA 420

UCUATlUTGG CGGTGUCAAA GGATGTCCUA 480

CUGAAlGAAG CGATGATUGG ACUATCATTl 540

AAGCCCATGA CCGCCCAAGT GGCACUCCTC 600

ATUAClArUG AAUTGUAACA GCCTGGAAAA 660

CCUCGAAATG GAATCAAUGG AAAAAAUUUr 720

AUAAUllACG CAGCUUTGGT GUTTUATClA 780

AUGlTTATAG GGGAAGTTUG GAAUGGArAT 840

ATGCClTATT CACACGAACC GACCCCUCTA 900

ACTCTATTTA AACrCCCUAC AGGAGATGAA

GCAUCGCTAT GrATAATGAT GGAAAGTTAG

ACUlGTlTGC ClCCGTCAGA ATTCUGATGA

AGATUTArUA AATATUAAAG GGAACGAAAA

GCGTGGAATU AAGTAAGGGA TTATGTCAAC

GCAATAACUC AAUrCIAlGG AGAGUGACUA

AAACTUlATT AACCUATGTU GAAGGGGCCC

ACGAAGTUlU GTAAGATUAU GCGCTCGGAG

AUAAAAATAA ATClClUGGT TTCAATGCAA

CGAAGGlTUT TCGCTAGAAA ACCGCCGCAC

AGTTTGTUUA CUTTCCCCGC AGCAGTGGUC

CAACTGAAGl AGTTGlGGCA TCACCTAGCU

AATATUACCA CATTGAGUAC lUCGTACTCA

GCAGUATATU UAUUATGTGC CACACCGGTU

AAlllGlCTC UAUAAlGUGr GAAGCCCCAC

258

184 424

CCiGITICCA CCT1STGA

918 (2) INFORMACJE O SEQ ND No: 95:

(i) CECSY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 963 pioS zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) IUOŚĆ NNCI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) RPIS: /spis = „DNA (syntetyczny) (xi) OPNS SEKWENCJI: SEQ ID go: 95:

ATCiCTGGCC 60	irrcTATAAr	TATCTGT—lG	ATClCGCATC	GCCT1G1CA1	GCCACCTTCA
CCGPCTCTil 120	ACCCGGGCAA	CCCCSaTGAC	TlGCAClTCT	CTATCCCTAT	ITGCCiAASC
crTCiGCThr 180	CSAlCCTTCG	IGlChPGTTG	A111CTTCCG	GllGCrCG—1	AAAC1CACCA
liCAPClGll 240	ciacTCTTCi	CAGTCTCCAA	CC1T1CCTCC	CCTCCTCCGC	llCCiCGCCC
rcrciscirr 300	CSSCClTCAC	CAAlGCATGT	TlCClCCAlT	G1TTCC1GTA	lAlACTTACl
TTCTATCGll 360	ttacccttcg	GCGlCCTCAT	1AACAGCGCT	GCiTATATTl	CliTTiCliC
TCCCCillTl 420	AGCC1TCT1T	TCCAlTCTCC	ACTGCCAACC	C1TCTCCTCC	TTCCAAATGA
CCCCATAlAT 480	crcc.aasciT	iicrcicisi	CT1TCCCACC	CCiATTATCT	ilTiCTlCTC
liACGCTCTC 540	T1GGCGTCCC	crTTCcrccc	CTT11CTCCT	GCCCCATCCA	iTCCCTicsi
CTClClllCT 600	ICTTClTCCA	Gccccirnic	ITCCCTCTCC	TCTGCCGT1C	1CTCCT1CGT

TCCCT—iAll iiiriCCCCC CTACTTT1TC CCCACCCPTl ICnCGCTTCG TCCTTGCTTC 660

184 424

259

GCCGACTTTG 720	CCACCACCAT	CTGCCAGCAG	ATGGAAGAAC	TGGGAATGGC	CCCTGCCCTG
CAGCCCACCC 780	AGGGTGCCAT	GCCGGCCTTC	GCCTCTGCTT	TCCAGCGCCG	GGCAGGAGGG
GTCCTGGTTG 840	CTAGCCATCT	GCAGAGCTTC	CTGGAGGTGT	CGTACCGCGT	TCTACGCCAC
CTTGCGCAGC 900	CCTCTGGCGG	CTCTGGCGGC	TCTCAGAGCT	TCCTGCTCAA	GSTCTTTAGAS
CAAGTGAGAA	AGATCCAGGG	CGATGGCGCA	GCGCTCCAGG	AGAAGCTGTG	TGCCACCTAA

960

TAA

963 (2) INFORMACJE O EEQ ND Nr: 96:

(S) CETHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 918 par zisid (B) AYP: kwas nuklLLsows (T) IUOŚĆ NNCN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (LL) AYP CZĄSTECZKI: inny kwas nGnlLLnowy (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xL) OPIS SEKWENCJI: EEQ ND no: 96:

ATGGCTAACT GCTCTATAAT GATCGATGAA ATTATACATC ACTTAAAGAG ACCACCTGCA 60

CCTTTGCTGG ACCCGAACAA CCTCAATGAC GAAGAOGTCT CTATCCTGAT GGACCGAAAC 120

CTTCGACTTC CAAACCTGGA GACCTTCGTA AGGGCTGTCA AGAACTTAGA AAATGCATCA 180

GGTATTGAGG CAATTCTTCG TAATCTCCAA CCATGTCTGC CCTCTGCCAC GGCCGCACCC 240

TCTCGACATC CAATCATCAT CAAGGCAGGT GACTGGCAAG AATTCCGGGA AAAACTGACG 300

TTCTATCTGG TTACCCTTGA GCAAGCGCAG GAACAACAGT ACGTAGAGGG CGGTGGAGGC 360

TCCCCGGGTG GTGGTTCTGG CGGCGGCTCC AACATGGCTC CCGAGTTGGG TCCCACCTTG 420·

260

184 424

cacrcrciGC 480	acciGCccii	CGCCGTCiii	CCCGCCCCCC	icicccacca	cciccaacic
ClGCCTCiCG 540	CCCCiGCCCl	CCCGCCCCCC	CCGCCTCCCC	TGCCCCCCli	CCCCiCiCCi
iiccaiCGCc 600	CCCCCCGGGG	GC1CCTGG11	CCiGGCCaiC	TCciraccTT	CCiCGGCGiC
iccirccccc 660	iiciacrcca	ccTiicGcar	CCC1C1GCCC	GCiCTGGCCC	CICiCGGCGC
iiccTccica 720	acicihhaic	ccaaGicccc	cccaiccaGG	CCCA1GGCCC	aCCCCTCCGG
raccAicici 780	CTCCCCCC1C	caaccTGiGC	cacccccacG	TCCTGCTCCl	ccicrcacAc
iciCTccrcc 840	1CCCC1GCCC	iCCCCTGCCC	hccTCcccca	cccaccccci	GcacciGGca
ccciGCTira 900	Gccaaciccc	TTGCGGCCTT	TiccTciacc	CGGGGCiCCl	CCGGCCCCTC
caaccGniai	cciaaicn

918 (2) INFORMACJE O SEQ LD Nr: 97:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 963 pioy zisid (B) TYP: kwas nskluinrwy (C) ILOŚĆ NLCL: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas euklurerwy (T) OSLS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xi) OSLS SEKWENCJI: SEQ LD er: 97:

aiCGciraci cciciaiaaT igtcgatgcc ciTCiccaic ACTTCiAGai accccciGcr 60

CCTTTCCTGC accccaccnc cciciaiGac caacacGiCT cicicciGai crcccccccc 120

CTTCiACTTC caacccTcca caccTTcric arcGCirica cccccTicra acaiGCCica 180

184 424

261

GGTCTTGAUl ACATTGCTAl ΤΑΤΤΑΤΑΑΤΤ AACTlCCTlA AATGTGGGCA UGTAlACAGG 240

CGTAUAAATA GAATGATGAT AACUCACUCT GAATlAGAAU AATTGACUlA TlATATCAGU 300

TTATCTGTUC TTAAGGTTGC lACClACACU CCAACAAACT AGUCACAUlG GCGTlUAUAG 360

TGGAAG7ATG AAGAUTGCUU TGAAATGTCT AGTCTGCAGA AlTCCAAGAA CT/TCCACAC 420

TATTTTCCAT ATAATACGCT lUATGAACCC TTlGlTAGAA AATCGCAAAA AGTGACCATU 480

GAAlTAUAAU AATCTUAACA ACAACTATCC AAUAAGATGC CCCAAGTGGG CATGUAGAGT 540

CGGATUGAlA AGAAAACGGl TlAACTGAAC GGATTGGGGT ATCGTCCTGC GAUGAlGGTC 600

UGAlIGUTAA TGUTCGGCAC AACTATGGAU ACATCGACCU CUGCGTTCTC GGCAlTCTTA 660

AUGACAGTTU ACGAUAGATG TClAUCGTAT GUAUCAT/CG CUACACTGAT UAT/CACTGT 720

TTCUClAACU TGACACAGAT AACUCUGUAT UAAlAAUACA TACAGCAUTA CGTCTUTCAA 780

AGGTCAAAlA TUTAAAAGAA AlCGGACATG GTCATGGCGC UCGACTTTGT UGAGATGAAA 840

CCGlATGAAA TGCUATGGTU AAAAAlAAAU GGAATGAACG TGGCAlAGTU ACTCAUGGCA 900

ATTACTCUAU CAGTTCTAAT ATCAGACCCC ATCATCAAlG AGATCUCAlA CACATAGTAC 960

CAA

963 (2) INFORMACJE O KEQ DD Nr: 98:

(S) AE/HY KEKWEN/JD:

(T) DŁUGOŚĆ: 918 par zasad (B) TYP: kwas nuklrnnowy (A) ILOŚĆ ri/D: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny o win nuklunnowy (A) OPIK: /opin - „DNT (syntetyczny)

262

184 424 (xi) OPlE SEKWENCJI: SEQ atttttaatt ttgtgagcct tagttagcaa 60

TTTGTCTGAT ACTTCAGClA TTTCAAGCAT 120

TTGTCATTGT TCACTTTCCA CATTGATCCA 180 tttcggcatt taagctagtt gaatttttca 240

TTTTCATATT TCATTAGTAT TAATTTACCC 300 ttttagtttc gaatttttca ctaaccctac 360 tttttttttt cgtcccttct tttttatctt 420

ATTTACCCTC ttatcttatt tcgttttctt 480 atgttgattt agttctatat tcgttaccac 540 tcttttgttc cttctttttt ttttttttac 600

AACAACATTT ACCCTTATCT TTTATTTTTT 660 ttttattttt actacttctt cttttctcta 720

CATTTTGATT ΤΤΑΤΤΤΑΤΤΊ TTGATACTTC 780

TTGTGTTTTG ATTACCCCTT ΤΤΤΤΤΑΤΤΤΤ 840

ATTTTCCATA TATTCTAGTC TTATTTTCTT 900 tcctaattct tataagac

918 (2) INFORMACJE O SEQ ID Nr:

ND so: 98:

ACCAGATATT ACTTAAACAT ATTATTGTTA taacattgtg taacttacag ccatttacat

ACCCTGCGTA AAAATTTACA CAATCTCATA ttattcttct tttttcctat ccttttattt cattgatagt aaacttaaaa cacattcatc taataatatt acacacacca ttttttattt

AATAGACTTA TACTTTCGGT TTTATATTTT ctcgcccatt accacctact atcctttttt tccgtttatt atacgcaatc ttatttgctt

ACTTTTTTCT TTAACCTGCG ATATTACTTC taccaccatt taggccttat ttataatttc tatgtgttct ctacctttga tttgtttttt

CTACCTTCTT TCACTTAATG ΤΊΑΤΑΤΤΤΤΤ tgtaaatcta caccttttca tggccccttt catgcgttta ttattagtgt ctattacatt

99:

184 424

263 (i) CECHY SEKWENCJI:

(1) DŁUGOŚĆ: 963 pioy zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) LUOŚĆ NLCL: pojedyncza (D) TOSOIOGIG..: liniowi (ii) TYP CZĄSTECZKI: ieny kwis nukleinowy (T) OPIS»: /opis = „DNA (syntetyczny) (xi) OSLS SEKWENCJI: SEQ ID nr: 99:

CTcrciacci rcTciaiaai rcicrcTCia ATTaicccic ccihacaccG gcccccigcc 60 cciTTCCTGC accciaccca cctctctcac GaiccccTci citicctgci Gcacccaacc 120

CTTCGaciTc cAciccTCGa GccchiCGTc AcGCCicicc CGccciTcrn acaTCcaTCT 180

GCiaTiCCCC CCCilCiTCG iCCTCTCCTT CCCTCTC1GC CCTCTGCCAC CGCCCCGCCC 240 icicGaccic cacicaicai cgccgccggi gccicccccc ACTTCCGCGr aaaccTcccc 300 ihciniciGr TTccccTTca gccggcccag Gcccaccaci ccciccaccc ccgtggcggc 360

TCCCCGCGiC GCCCGiClGC TCCCTTCTCT ACiCiCACCC CCiCiCCiCC CTCTTlCGAC 420 icicaiacai ciccaaccci cgctctcgcc cctgcccigc ccccccccca gcctcccttc 480

CCCCCCiTCC CCTCiGCTTT CCCGCCCCGG GCCCGGCCGG TCCTGCiiCC iCCCCTiCTC 540

CCCGlCiTCC ICGCCClClC CiCCCCCCTT CiACCCCCCC TTCCCCCCCC C1CTCGCCGC 600

TC1CGCCGC1 cTcacaccTT cctgcicatc Tcihiaracc tccigcgcgc gciccacggc 660 cciccccccc ccciccaccc rcacciGiGi gccccciccg ccctgtcccc cccccccgcc 720

CiGClGCTCC ICCGaCaCiC TCTCCCCaTC CCCTGGGCTC CCC1CCCC1C CTCCCCCCCC 780

264

184 424

TACCTTTClT ACTTCCCCll TTCCTTCCCC TSATCTCSCS 1T1CTTTCTC TTCTCSTTA1 840

CClTCTTTlT AllTTTTGCA C111ACATTC TTTlllCCll CCTTTCTTCC 11ATATSTCC 900

CllTCllSTC CTCTT1STTC CCTCSCCAGC CCTCllTAlT A1ACC11C1A ATCCCCSCAl 960

Tli

963 (2) NNFOUWACJE O SEQ ID No: 100:

(i) TECiY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 918 pio zasad (B) TYP: kwas n„kiiSnowy (C) NLOŚĆ NNCN: pojedyncza (D) TOPOLOCNA: liniowa (il) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) OPNS: /opis - „DNA (syntetyczny) (xl) OPNS SEKWENCJI: rEQ ND no: 100:

SClCGTSSGT 60	CTCTTlTCCC	1CTCGATGCC	CCTlCCTlCG	ATCTAAS1S1	ATTATTC1TA
TCTTClTCll 120	1GTT1SSTS1	TTTGCSTlCG	IGCllTlCGC	TCATTTTCSC	11ATT1ASAT
TTCTlSTCCT 180	GACGTGTllA	1ACCTTCGTG	llCCTCCTTl	A1ASTTCA1S	ASACCTCCTA
C1CCCC1S1C 240	TCACTGTCTl	CCSTCTCCAC	TTlCCCGCCT	TTCTTCTTCT	1CTT1TATTT
CTCG1ST1CT 300	CACCTATCAC	TAAGGCAG1T	lATCCCCGSl	AATTGT111A	ASSATCCATC
TTTCGTTTCi 360	CTATTTTT1A	ICGAGCGGAl	ISlTllTAiC	ST1CA1A111	T11CC1AC1T
TCTTT1C1CC 420	1C11TCGT1C	TCGCGGTTCT	GCTSTiCTCA	TTTA1C1C1T	TACCTC11TT
CCTCTTCTC1 480	GTTGTCGlTl	TTGGGCAGGC	llCiCTTCll	CTCTCSlTCC	CGT1TS1A1T
TTTGTlGGCC	CCCT1TATT1	TCCTCTAGCG	TSTTCC1T1T	S1TTTTTC11	TG1TCGTC1T

540

184 424

265

11CTCTCG—1 ICCCCCTiCT ASS1TCCCCG IGlCAAiriA 11AA1ATCCG lilClGCGiC 600

CCGlCiCTCC GTTATGATCC 1TCT1CCGCC TzACAATCCTC 1CCGCCCC1A 1CG1CTTCT1 660

CTCCTCClAC ACTCTCTlii CATCCCCTTi TCTCCCCTTA TCTCCT1CCC CA1CCGGCCC 720

CCTCGTCT11 CAllCTlCTT CG1CCGGCTC CGCGlCCCCC TTTTCCTCCA CC1TC1GCCC 780

CTCCAT—CCC TTTGGGCTlT ATCCCCCTG1 CCTTlTCCCG CCTCllGCGC GCCCCGlChl 840

IGCiCCTCCl ACTTTTCCAC CGCCGTCril CAlCGCITGi G1CAG..CTCT1 AACTGCCCCC 900

1CCCTTCATC CCTGSTGS

918 (2) INFORMACJE O SNQ ID No: 101:

(S) GNGSY SEKWENCJI:

(1)	DŁUGOŚĆ: 963 pary za/ad
(B)	TYP: kwas nukleinowy
(G)	NLOŚĆ NlGI: pojedyncza
(D)	TOPOLOGIA: liniowa
(ii) TYP	CZĄSTECZKI: inny kwa/ nukleinowy
(A)	OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny)

(xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ND no: 101:

GTliCTGGCT 60	1CCCTGTAAT	TATCTATllS	ATCGTGCGCC	GCTCGAGlAi	GCCGCCCGCA
CCCCCTCCTT 120	ACCCiGSCAl	CCCCGGCTGC	GAGlACTCCC	CTGTCCCilT	11GCCTGA1C
CTTC1GCTTC 180	CGGACCTTlA	1A1CTTCTTG	GCCGCTGTCG	GCGlCTCGiA	AGGTGCGTCG
ilTGTTlGTl 240	CGGCCCTTC1	TGGCCTCCGA	CCGCGTCTGC	CCCCCTCCAC	TTCCTC1CCC
TCTCiGCATC	C1GTCATCGT	CAGlTCAlTT	iGCCGGClGl	GlTTCClliG	AAAACTTGCT

300

266

184 424

CCTllCGlll TCAGGTTTG1 GTilGGlTll llAClATClC lAGCllCCCG TGGClGAGGT 360

TTTTTlllll AATTlCTCGG ITTAllTlTl ITlACGAlTT TGCGCTTTTT ICGTlGAGAi 420

TTlTACGAAC TlTTAClTll GGGTATTCil GGClTGCllT TGGGTTTGGT TTCTlTCThy 480

GAlTGGTClG TCGGlGGCll TTTGCTClTl llTTATTTGT AGCCTCGCTC GCAGlTCCTl 540

ClTTlTlllT TlTlTTlTTl CGTCCAlTTT ITTGGGGGTC TCGGAllTlT CTlGAlGTGT 600

TClTCTAllC TTThiGAGCl AlCGClllll ATTClGCGTl ITGCTGTGlT GGTGTAGGAl 660

AlGTTClGTC TT1TGT1T1A ITTGTGTTAT TTTGlCGAlT TCGTGTTGTC TlGATAGTTC 720

TCGllTACTT TTllGGCTGT TTTGClAłTT TGTACTGlTT AlGTTTCGCl ITTGCTCCGT 780

CGTlCCAlTT 1GT1TT1C1G TGGGTThłCT TCTTATTlll 1GCTGTTGTC GGCGT1GGA1 840

GGGACGCTTT TTllGlTGGC 1TTGATT11G llTATAGCGT AlGlGGAClT TlGGGlTTTG 900

GTTlTTATTl CGlGlTilTA GACGGllllA TTGGGG1CGG TTTTIGTGTr GTAGTTTTAl 960

111

963 (2) INFORMACJE O SEQ II No: 102:

(i) CECiY SEKWENCJI:

(A) IŁUGOŚĆ: 918 pao zasad (3) TYP: kwas nukleinowy (G) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) OPIS: /opis = „INA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ II no: 102:

GlllTClCTC GTCTTGCAlT lATTlATGGi ATGCTCTiCT ATGGlCAGAG ATGGTTTGTA 60

184 424

267

CCCGT1CCUU CCCCGACCAC CCTCCCT1CC UCAUCCUTCC CCCCCCCUCC TUCCCTACCC 120

CTCC11CCCC CACCCCTUUC lATCTCyiCC CUTUCCTCCC AUAACCGCTC AAATUCCTCC 180

UUCAGGG111 CCACCCCTC1 CCAGCCCCCC CCAC1CCCGC CCCCCTCCCC UUCTTCCTCC 240

CCCC11CCCC CCAGCCCCCC CAATGCAlUG G1CTTUCCA1 CACGCCUGUC CCCCCTTACU 300

CCCC1GCCUU CTCCCCCT1C icecucucci ICCCACCClC CClCAlCUTG cugtutcggc 360

TTCCC111C1 1CTTTGCTTT CTUT1UCCCC ACCCClGyTT CCUCCCTCCC UCUCCTUGTC 420

1TC1111CCC GGTCCTCGll CCCTCCUCC1 AUTTCCCTTU C11T1TCUG1 CCUCUTTCTC 480

CGCCACCCCT C1CCTCCCCC CGTCU1CCCT TUCUTCTCTC AlCUCCTTCC 1CTCA11TTC 540

CTC111CACU G1C1ACCUCC CCCTT1C1CC TUCUCATCTC CCCCUTCUCC UCTGCyTGCC 600

CCCCACCAlC C1T1CCCCCC CTCTUCUCCT 1CTCC1CCCU UCCACCCTCC TTTCATCCTC 660

TUTTCGCCCC CUC1CTCCCU CCCCC1CCC1 1CCCC1CCUC CUUCCUUCCT CCGTC1CCCA 720

CTCC1G1UCU' 1CCGTGTCCC CTACCCT1UT CGCCC1CCTU CCCC11CC1T 1CTACCCCCC 780

UC1GTUU1CC CCACCTT11C CCCACCTCC1 CCUUAC1CCU CCTCCCTC1C CCCTCCCCTC 840

TTTCA1CC1C CTUCCTCCCT UTGCCCUTCC CCTTCCCCTC CUCCCCCCCC UTTCUCCATG 900

CC11CCCGC1 CCGCCC1A 918 (2) INFORMACJE O SEQ ID Na: 103:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 939 papy zasad (B) TYO: kwas wbkauiwpwy (C) NUOŚĆ NiCl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa

268

184 424 (ii) 1YP CZĄSTECZKI: ieey kwas nukleinowy (C) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xi) OSLS SEKWENCJI: SEQ LD nr: 103:

ciccciaaci 60	cciciciaai	rchCGCicca	CTTATCCA1C	aciianacac	accccciGca
CClilCCTlG 120	acccGaacaa	CCiCGCIGCC	Gccrcccici	ciciccicai	CGGCCCACCC
ciTCGnciic 180	canacciGGa	GCCC1TCC1C	AGGCCTGTCC	acacchiacc	Aiciccaica
GGTaiicgGG 240	cnaiiCTTCG	icchchccac	CCATGTC1GC	ccicicccac	CGCCCCGCCC
TCTCGncaic 300	caaicaicci	caAcccccci	GCCTGGCCCC	gATTccGGGa	cacaciGCcc
Ticiaicicc 360	TTGCCCTTGa	ccaccccccc	GCACCCCCGi	ccriaGacrr	ccciccacrc
1CCCCGCCTC 420	aacccicicc	iCCCCTCiCl	cchchccacc	CGTCTCCTCC	Gicicaacaa
icicaingai 480	ciccaaacci	CGCTTCiGCi	hhccTGcrcc	GGGCaGGaGC	CG1CC1CC11
CCTGGCCniC 540	yccGGaccii	CCTCCCCCiC	TCG1CCCCCC	ilCiCCGCCC	CCTTCCGCGG
CCCiCilCCG 600	CCTCTGCCCC	chcicccarc	iicciccica	cGiciiicia	ccaciiraca
aaiaiccnGC 660	GCGGiCGCCC	CGCGC1CCCG	CAGlAGCTCi	circcaccia	CAGGCiriGC
cncccciaci 720	CGCTCCTCCT	CCiCGGCCAC	iCTCTCGCCC	1CCCCTGGGC	icccciracc
icciGCccca 303	Gccaccccci	CCCGChGCCT	GCCTGCT1CC	Gcccacicca	laGCCCcchi
TTCClCTGCC 840	acGCccicci	rccccccciG	GCTCGGAiay	CCCCCGGCii	rrcicccacc

Tiicacaccc iccncciccn ccicgcccgc ittgcccccc ccaicrccca cccGaiGGca 900

184 424

269

GAAATGCGAA GGCAAGAGlA AATUACCAAA CAAAAUUUTG AACTUAAUUA ATTGUAATAC 960

TAA

963 (2) INFORMACJE O KEQ DD Nr: 104:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 927 par zasad (B) TYP: kwas nnnluSsoay (C) DUOŚĆ TlCD: pojedyncza (D) GOOOUOADT: liniowi (SS) TYP CZĄSTECZKI: Siny kwa? nuklunnowy (A) OODK: /opSn - „DTA (syntetyczny)

(xi) OOIK	SEKWENCJI: SEQ ID	nr: 104:
ATACAGAAGA 60	GCGGTATCAT UCTAUATGCA	CTTCTAAATG CATTCACCAC CGAAAGTCGA
ggtcgaatgc 120	AAGACAAACA GGTGACCCCA	UATlAGUTAT ATATGATGAT UCCAACCCAA
GTGGCAATTA 180	ACAAGGCUCA UCUCCTAGTC	AlllATUTAC AUCCATTAGA CCATUACTGC
CUTCTGCCCn 240	AAATTATTGC TTATATCACC	AACTUTATlA AATACGGAAA CCAAUACGAA
AGTCUAGAGG 300	ATATGATGAT GCCUUTCCUT	UCATUGACAU CATTGCCGCA CCCAATUCGl
GTATCGGTCC 360	TTAAAGCTGA UAAAUGCCAC	lATAACGCIT AAUTACAGCC AUCTlUAAIA
TGGAACCUTA 420	GGGlTTGTGl GCCAUUCCGA	CCAATGGATC AACAUCTGTG GACGAAACAU
GACATGUCUG 480	CGATAUCCGC ATGTATGClA	CTAAAGTGUU ATGCACTGAG GTGGTCAAAA
AUAAAGGGGG 540	AACACAGUCA AlGATCGTTU	ClAAACATAG ATCCAGGAAC TCGGATGTAA
GCUGGGCCGG 600	GGAAUCAAGT UlATUGGATA	TGAAAACClT TGACTCGGAG GTCAlAGAGA
GTUGAGGCCC	ACCTGUGACC GTCTCAGAAA	CAACTATGGA AlAAUAAAGA ACAAATGGGC

660

270

184 424

ATGATTTTCC 720	tttgctattt	TATTCAACAC	cttagttttt	tttttttttt	tttattttat
ttttttacaa 780	ccttatgttt	tctgctgatt	tattgctctc	ttcgtttttc	ttcacttgat
tttttttgat 840	CTTATTCCCT	(TACCTCATA	TClGGCATTT	tgcttatttt	TTCATTTCCC
attggtttac 900	CTCACGTCCG	atactacctc	atacatcttt	atatttatct	tctactttgt
TACCAGlACT	ttttgtttat	TTAACAA

927 (2) INFORMACJE O EEQ ID Nr: 105:

(L) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 972 pior zisid (B) TYP: kwas nukleSsowr (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (Si) CYP CZĄSTECZKI: issy kwis suklLSnzwy (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: EEQ ND so: 105:

ATACTGCATT tttttagaat cattcagcaa agcagctagt atataaacaa attatttata 60

TTCCTCTTAG ATTTCACTAC TTTCACTCAT CAAAATATTT TGAATTCCCT (CATTGAGAT 120 ttttcattct tacattctta tacctctcga actctcatta acaatggata aaccctagta 180 ttgaggtaca taagttcctt gaccttttaa ttatcttcat ttctgcttat tcttctattt 240

GTGTCATATT TAAGTACTAG TAACATACAC CATTTTTCAT CACTTTTCTC AAACTGCATC 300

TGTGATTGAA CGATTTTCCC TTAACTCTAC CAATAATATT ΑΤΑΤΑΤΑΤΤΑ TCCCATACCT 360 tttttaaccu aattattgtt tttaactttt attattcatt ttgtcttttt tttgccacac 420

184 424

271

CTCTCCSAAC GCTTSACTSC llGTTATCll TC1C1TTSTC CT1AGGA1TT 11C1TC1TTT 480

C1ATSTCTTC T1C1TATTTT TG111TCGTT TCCAlTCTTC CTTTTACCTC llGTGClGCl 540

TTCCCAC1TT CGCTlACTTC ATTCCACAlT 11TTTTTCTT CTCATCA1C1 CTTTTTCTCC 600

CTTTTG1GA1 11ACACTTCT TlAlCTCClC TTCGCTCTCC STATATTCTC 1TT11CC1CC 660

1CTCSTTTC1 TTACCCTTSC TC11TACCAC ATClGClAGT CC11AST1CT TTCC1TCTCC 720

TC1CCTGTTT CC1CC1TTCT CTT1CTTCCT 1TTCTC1CCC CTTClTCTTl CCTAlCACCC 780

1CTTC1CCCC CCClCTGCTC 1TA1S1TCTT TCC1A11T1C T1CATT1T1T CTCAT1CTCT 840

TTCCC1CA1T TTCTSTTGCT 1CCTTTT1TT ACTCTTTTCC TTTACA1CCT TTCCTTTGCl 900

CCTTCA1A1C AliClAlCAS 1ACCTAG11T CAC11T1CA1 TlTTCTAlll lACCTTlTlC 960

ITTCCTTSAC CA

972 (2) INFORMACJE O rEQ ND No: 106:

(H) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 927 pio zasad (B) TYP: kwas nukaIlnewy (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOIOGNA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny i-kwas nukleinowy (A) OhNS: /opis - „dna (synteEtyczny) (eH) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID no: 106:

ICCCCCllTC 60	iCTTCCCAGC 1GTT1CC1S1	ACTACATSCT	ITCGCAClll	CTTATTTlCC
TTCCTCTC1C	1GTT1C1TAG TTTCSlTCST	CSAlAClCTC	TCATTTTCCC	ICCTTCCAAT
120
TCCT11GCTT	TACSCTTlCA CAlTCCTlCA	A111TT1TT1	ACAATTTGCS	ASGTCTCTTA

180

272

184 424

llTATT—Ali 240	CS1TTCTTC1	TGGTCTCCGl	CCAT1TCTGC	CCTCTTCCAC	llCCiCGCCC
TCTCiGCATC 300	CAATCATCST	C1SGGCAT1T	1GCTT1CG11	AATTCCIGiA	AlAACTTACi
TTCTGTCT1T 360	TTACCCTTGA	TCGAGCCCAC	TSlCGGCGlT	ACTTACAT11	CiiTTiAlCC
Tcccciiirc 420	TTilTTCGGC	CiGCGGCTCC	AGCGTCCCTC	CCIATTTiT—	TCCCACCTT1
iSCGCACTlC 480	GlCTiGACiT	C1CCGACTTT	TCCGCCACC1	TCT1TCA1CA	iATilAAlGA
CTTlGAGTTl 540	CCCCT1CCCT	1CA1CCCACC	CA11CTTCCG	TTCCTGCCTT	CiCCTCTCCT
TTCCAlClCC 600	lliCllTGll	TiTCCGClTT	iCTATCCATC	TCCAT1TCTT	CCTlCAilTl
TCTTACClCl 660	TTCTAC1CCG	CCTTGCTC11	CCCAC1CCAT	TTTTCCCTTC	CA1CTCCCTT
CCCCGiAiCT 720	TCCTTCTCG1	TTCTPT1TAT	CGAiTlGTlG	liATCCATiG	C1ATTTC1CA
1C1CTCCGTT 780	ATSATCTiTl	TiCCACCTlC	gaicttttcc	ACCCCCA1TA	ICTiTTTCTT
CTCiTGCGCT 840	CTCTiTTCAT	CCCCTGCTCT	CCCCTTA1CT	CCT1CCCCA1	CCAiCCCCTT
CS1CT11CGT 900	ICTiCTTiGl	CCGGCTCC1T	llCiTCCTTT	TCCTCTACCA	TiliCTCCTi
CGClCCCTli	GG1CCGTATC	CT1GTG1

927 (2) INFORMACJE o SNQ ID No: 107:

(S) ANASY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 972 pary za/ad (B) TYP: kwa/ nukleinowy (A) IUOŚĆ NICI: G^oiGdyncya (D) GOPOUOllA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwa/ nukleinowy (1) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny)

184 424

273 (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID np: 107:

CC11CCCACC 60	ICCCCAGACT	TCCC1CTTCC	CCCCCCCCCC	ACTCCCA111	cccccccucc
CCGCC1CCU1 120	CCCC1CCCCC	TCTCCCTTCC	1CA1CC1CCG	CCCCCCGGAG	1TCCCUAAAC
CCGC1ACCTC 180	CCCCCCCTUC	TCUCTTCUCC	AUUUCCUCCA	C1CCCCCA1A	ClCGTCATTC
11GCCCUCU1 240	CCCCCCCTCT	TCATCCCCAA	CC1CUCCCUC	CCTCC1CCAC	U1CCUCCCCC
CCGC1ACCCC 300	CCCCCCTCCT	TACTUCATTC	1CCC11CA11	CCCCCC1T1A	CACCCCTCCT
CCCCCCCCT1 360	CTCCCCTT1C	TCACUCUCCU	1CCCCCCC1C	CCUCC1AGT1	C1TCUTATTC
CCCCC1U1C1 420	CCCC1CCTUU	TCCCCTCTCC	ACCCCCAACC	CUCCCCCCCC	UCCTCA1T1A
CTcciccecc 480	CTCCCCCCCT	TUCTCCCUC1	CCGTTTCCCC	CCTTUUCC1C	CCTTCCTTCG
1AC1TC1CC1 540	ACTCC1CCCC	TACCCTCTTU	CC1CCUCCT1	Acucecciii	CATUTCCCCT
1CCCG1CCUC 600	CCACCCCTTT	TTCCCCUCC1	1CCCTCTCCG	CC1CCCGCCA	UC1CC1UUCC
TTlllGlCCC 660	CUGCT1CG1G	CCACCCGCCl	A1CCTCCCU1	CTUCUCC1CA	CCUCTCCCCA
CUCC1CCCT1 720	CUCC1CCCCC	CTCCCCTTUC	CCC1CCC1CG	CCCC1CCCC1	UCUCTCCCCU
CCCCC1CCTT 780	GATC1CAAUT	GATCCCGCCC	CCG11C1CC1	1C1CC1C1CC	CCCTGCTA1U
CC1C1GTCCC 840	CCTCCACUCT	TTTCCCCCCC	1C11CTTTUU	CUCC1CCC11	CCCCTCTCCT
11CCGCCCCC 900	UUUCCCCCCT	UCTCTTCCUC	CCCC1CCC11	CCCTUCATCC	11CCU1CTTC
CC1C1CC1AC	CCCCCA1CTT	TCTCTTCCTC	CCCCCGUUCUC	CCCC1CA11C	CCTTUCCTUT

960

CCACCCCA1C CA

972 (2) lEFżWalCJE O SEQ ND Na: 108:

274

184 424 (i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 927 par zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NICL: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowi (ii) TYP CZĄSTECZKI: ieey kwas nukleinowy (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID er: 108:

GTGCCiCCCi 60	ccicicTagi	ccicGAirca	CTTCicccic	cciicaaiai	nccacciGCc
CC11TGC1CC 120	ccccGcccca	CCTCGAlGCC	ccncAccici	CTCTCCTGai	cracccacac
CTTCCCCTiC 180	caaaccircc	GaccTTCcia	aCGCClGiCC	ccacciinGa	aaaTCcaicc
CGiaThcacc 240	CiCTTCTiCC	iacTCTCCca	CCGTCICiCC	ccicicccrc	CGCCCCGCCC
iciCGCcaic 300	caniccicci	CGCCGCCGCl	caciGCccac	ccTiccciGa	ancnciGacc
1TC1C1C1CC 360	iiacccThcc	CCCCCCCCCG	Gaaccccaci	CCGiaGGCGC	CCGlCGAGCC
1CCCCCCC1G 420	ClCCiTCTCG	CCCCGGC1CC	TnccTCGciT	TCGCCCCTGC	cciGcacccc
ccccacGCic 480	CCGTCCCGCC	CTTCGCC1C1	Gciiiccacc	CCCGCGCGCC	GGCGClCCiC
CTTCCiCCCC 540	aiciccAcac	CTTCCTGGTC	G1G1CC1CCC	rCGTTClGCG	ccacciiGcc
caccccccac 600	CCTTGCCCCC	TCCCACCTCC	C1CCCCCCCC	CCTiCCllCi	ccrciciiic
GAcccarica 660	ccnaccicca	GGCCGCTCGC	CCCCCCC1CC	CGGCCGilCl	G1G1CCCCCC
lacacccici 720	Gccaccccca	CGCGCTGG1C	C1GC1CCGCC	ACTClCllGl	CG1CCCC1GG

Gciccccira ccicctgccc ctgccaggcc cigcagctcg ctggcigctt Grcccaachc 780

184 424

275

AATClGUCAA 840	TTCCGATATA	AAACUGUATA	ATUGCCCAAG	TUGACIGGAT	ATAAGAAGAC
GTGlUTCAAA 900	AGTTClAGAA	AGTGGAUGTl	CAAITAlAAC	CATGCUAACA	GAGGACGTGC
ACUACCATGl	AAlCAGTCCU	ATAATAA

927 (2) INFORMACJE O KEQ DD Tr: 109:

(i) AEAHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 972 pary zasad (B) CYO: kwa? nnnluSnowr (A) DUOŚĆ TICl: pojedyncza (D) ΑΟΟΟΙΟΑΙΤ: lnsSoaa (iS) TYP CZĄSTECZKI: Ssny kwas nuOluSnoay

(xS) OODS	(A) OODK: /opis - SEKWENCJI: KEQ DD	„DTT (syntetyczny) nr: 109:	rr
ATUGACAAAT 60	CGTATATAAT	CAT/CATGCC	ATGCTAAATA	AGAGACAUnC	AACAAGCGGA
GATATUATGU 120	AAAAlACACA	GACCTATGCA	UCAlAGUTAT	ATACAATGAT	UCAAGCCATG
GTTAUAGTGA 180	GCCCAGTGGA	CACACCAGTC	CUCUACGTAC	AUCAATTACA	CCTGGGAGTA
UATATACAUG 240	GCATTGTTGC	TTCGACGGCC	GACA7CATUA	GATGTCATCA	UAGCGCAAGA
CATAlAGACA 300	GCCTAATAAT	GCAGCGCCCT	UAAA7UACAU	TTTGAAlGCA	CATAGACAGU
TCGTCTCTGl 360	TTCGCCTCGA	CACACACACl	CCCGCAGClT	AGUTAlAlGU	ACAAGGAGGA
TAAAGCGCCU 420	CCAAUTACCU	GAGATGATAT	AATCTGACAA	AUTGTAAGAA	UTGCCTCGTC
TATAACACAT 480	GTAATTCGAC	UGATAGCGAA	GATUAGATlA	ACGGACAAAA	UGACUGGACU
AAlGAACCGU 540	AGTACGGCCG	GGACAGAAlU	UAAGlACGCl	TAGTCUTGUG	TAGAGACACC
GAUCCACTAA	TUlCUGCUTG	utagagautA	ATCAUAACAG	TGUGUACUAA	GAGAGAAGGC

600

276

184 424

GGTTTTGTT1 1T1TTTCGGT TTllAGTClT TlGCTTCClC TCCCllllCl llClCGAlCl 660

ACTTllllTl 1TGGT1T1GT GTlTTAllll iGlTCGTGTG TT1TT11TG1 ITllCGTTCT 720

TTTlllGllT TGlCGTTGTC TlllTGGlTl TGGGGCGCTT TTCGGlTCTT TTTGCGTrGT 780 llTTTCllTT 1GGTTTCGT1 GTllGGGGlT TGTTTGGlTT llTlTTllll TGGTTTrrGT 840

TlTTlTTlll GGTlTThGTl GGTTTTGGAA GCG1T1TTTT TTlllCllll 1CGGCCGTTG 900 llTiTlTllT IGTllllTGC TGCTGGG1GC ITTACCCTTA TGCllCilCl GlCGGlAGAi 960

TllGGAlCil 11

972 (2) INFORMACJE O SEQ II No: 110:

(i) GEGiY SEKWENCJI:

(C) BŁOGOŚĆ: 927 par zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NITI: pojedyncza (U) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (C) OPIS: /opis = „INA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ II no: 110':

1TGGTC11TC 60	iThciicici	llCTGGCGll	ITClClGlCT	1T1111CG1G	ITTlTTCGGl
TTTTlGTlll 120	1TTTG1CT11	yTCTCCTGlT	llClCGGCTC	TllCTTlllC	GG1TGG1G1T
TCTTllTllT 180	TACATTCGGA	GlGTTGClll	llGGTTGCTl	IGlATTClll	AlACGCGTGl
GlClllGllG 240	TAllCTCCGG	1A1CGGGAA1	TT11GTCTGT	TT1T1GTT1T	GGTTGGCGTT
CTTTllTlTG	TGllTlCTll	TAillTllll	llTCGGClAG	AlCCTTllll	CGAGGTG1GG

300

184 424

277 ggttatttta ggatttgtca ctaattttat caataatatg atcgatatcc tttgccacct 360

GTCTTACATA TTTCGCTCTT TCCTTTTGTT GATATGATTA TTTATTTTTT TAGATTCCTT 420 ggttttttti tggcttactc ttatctacca ctccgttgcc cgctgattta ttcctacact 480 ggttttccti tcgttcattt ttggtcattt tattggcttt acttcccctt atcccttttc 540 tttatttttt ttttttatat tgcttcctgt aacctgacac actactttat caacatttac 600 ctttatcttt tactctgtta ttataactgc gctatccttg ataacttcct ttattttaac 660 ccttgtcttt cccctctata tttttatctt atttttcccc ttttttgcac tgttatttct 720 atttatcttt gctattcctt atatgctgct acttaatgtt atattttttc gctttttcat 780 tattttttct gctacatttt ccaatcaaga ttttttaatc gccctttcct tgtcuatata 840 tttcaatgta atcgtcttta tgcgcttatt attagtgcct attatatcca ctaatgatca 900 attactttta tttgttactt tgaagaa 927 (2) INFORMACJE O EEQ ND Nr: 111:

(S) TETHY SEKWENCJI:

(() DŁUGOŚĆ: 972 pars zasad (B) TYP: kwas nGkiLLnzws (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: ISsiowa (SS) CYP CZĄSTECZKI: Sens kwas nGklLiszwy (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xS) OPlE SEKWENCJI: EEQ ID so: 111:

attattcatt ttttcacaac cagtcaccac atgagatagt atgtaaccac attattccta 60 tttttttttt atttcaatac ttgtaagcat taacatcgtg tcagttgcac ccattcaaat 120

278

184 424

CTCC11CTCC TCGSTCTCll ICCTTTTlCA AlllGClCCl ACSATCTAlA AAATCCATCA 180

C1TACC1S11 CGGTCTTTC1 GlATGCCCGA CTCT1CCC1T TTCCCCTTCC C1TT1CATCT 240

CTTClSCCTC TAATCCTTAC TlSClGCllT 1ATT11CSSC SCTTGTlllA GCGGCTllCl 300

TTCCACTT11 CTACTCCC1A ITCACClCll lAATCCTAlC ITCCllliil TCCCillllC 360

CTCCT111T1 SATC1TTC1C TTTACTTCCT ACTCTTSACT T1TTCTTTTC CCTCASAGCS 420

CTCTSCSSST TCTCSACTAC 11TTCCTTAC C1C1TT1C1C TC1TTCTTCC TCTC1CCTTT 480

TC1T1CTC11 CAlllGCllC TTGClTGGTT AlTTGCCClT CCCCTCTTTC CCSClTCTCl 540

CCCCCT1TCC CAC1CTCTCC TlGlGClTTT ATATTCTTlC 1TTTC1TCC1 TTCCTTCCCC 600

TA1A1CTTCC CCTCTACCCT TCTliCiCGC ITCAlASAlA CCCCiilTlA CC1T1TA1C1 660

TCCTS1CA11 S1TT1C1CCT TlGTTGTCAl CC1TCTTATT TT1ACCACTT CCC1TCCCTT 720

CCSCGCTCTC CCC1CATTTT GCCllGCTTT CC1A1TTCCC CTTTCA1TTS ClCTTTlTAl 780

TT11CC11CT ICCGCllTTA CTTTTGTCCC llTTTCTTTT CTCACTCCll CTCTTTCTA1 840

1TCTTC1GA1 1GGTATTTTC GlCCCTClCC CCTCTTTTll ATCTSCCCTS ITCCCATlTT 900

CTClACCTTl TTACCSTTAC CCCCGllGCC ACGCCAlGGC ClliSlCilT CTCCCTTCTC 960

GllCTCTCCT 11 972 (2) INFORMACJE O SEQ ID No: 112:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 927 pio zisid (B) TYP: kwas n„k1uSneay (C) NLOŚĆ NNTN: pojedyncza (D) TOPOLOCNA: liniowa

184 424

279 (iS) GYO CZĄSTECZKI: Snny kwan nnOluSsoa' (A) OODS: /opSn - „DTT (syntetyczny) (xi) OPDS SEKWENCJI: SEQ ID nr: 112:

ATCGCTCAAT 60	UATGTCTCCT	UATCGAGUAT	ACTACACATA	AACCACAlAC	AA/CAAAGCA
GTTGC1AGGU 120	ACGTGTAGTA	GATGAACGAG	GCACAGCCAT	ATACGATGCT	UUCGAUCCAG
TTGGGCAGCC 180	AACAGATUUA	UCUATTAGTA	AGGUATAGAC	AUTTGTTACC	CCCCUTTCTA
UGACCACAUG 240	GAATTATTAU	TCCTATGAAC	GGATGACAGA	AGCTCCGAAA	UGAGUACGAT
TTTTGCGATA 300	GAACGATGCT	AACGlTAGCC	CAAGCGTTCU	AACATGAGUC	CCCAAClAGC
OGATATAGGU 360	AGAGAATGUA	UTATUAUTAG	GAAACTTACT	AGUCACCinU	GUUGAAAUGT
TAAAAllGTU 420	UTUGGAGTlA	AUUCAAGATG	CAACCCGTCG	AGGGCGTAAC	UAUGAUCGGA
UlAlGlGTGA 480	TUACTUATAC	AGATACUGAG	ACATTAACCU	AUGGUTAUGA	GAUGUTAGTA
GlATCT/TAG 540	ACGAUAAACG	CAAATCCUUA	GTTlGGAU/G	GATTCAAAAC	UCCGTGAATG
ATAAClAGTC 600	CAGAUACAUT	UClCAACATG	AAUUCACATU	CAAGAUAUAA	AAAUGClAAC
GTlTlTlAGA 660	AATAGCAUAT	ITUACTGGTA	CCCUACTCCC	GGCGGAGACU	AGCGGArGGG
UGGAAG/AAC 720	UAGGCGAGAC	UCAATTTTGG	GGGAUGGACU	AAGCGAACAT	UCACAGATCG
TCGAACTACG 780	TTAAGAA/GA	GAGTGGTACA	TAGGACAGUA	CTTCGAAUUA	AGGGUCAUGG
ATCTAGAAAC 840	ACGGCGCGTA	ACAGTCCUAG	AGAACGTTUA	AAAATUTAlC	GUATACTUAA
AAACT7CGTG	GCAACGCUAT	UUCCUCAATU	CCCATGCAGA	GAUCTAClAC	UGAGAAAAAC

900

280

184 424

GGTGCCTTGC CClCCTTClC ClAGICC 927 (2) INFORMACJE O SEQ LD Nu: 113:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 972 pioy zisid (3) TYS: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NlCl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowi (ii) TYS CZĄSTECZKI: ieny kwas nskltieowy (A) OPLS: /opis = „DNA (syntetyczny)

(xi) OPLS	SEKWENCJI: SEQ ID	er: 113:
ClCCCTCCCT 60	ccTCTAiagi	caTccATcca	CTTCTaccic	CCTTAiCGCG	TCCCCCTCCT
CCTT1GC1CC 120	ccccGcccaa	CC1CAGTCCC	caacccGici	CTCTCC1GT1	ccacccnccc
CTTCGCCTTC 180	caaaccTGcg	CGGCTTCCiG	GCCCC1C1CC	CGaCCTiCGC	caciGcaiyc
GllGTTGCCC 240	cagTTCThci	iaaichccca	CCGTCTClGC	CCICICCCAC	rcccGcaccc
ICICGACCIC 300	caGTCATcni	caacGCAGGi	cacicccaar	CCTTCCCGGC	caaTCiGacG
ilClAiCiCC 360	TTacccThca	ccacccccAc	Gancnccaci	ccriaracrc	CGGICGaCGC
1CCCCGGC1G 420	caccGiCTCi	1CCAC1C1C1	aciaicarcc	cctcicctcc	rTCTcncrac
icycATAcci 480	ciccacacGT	CGC11CTGC1	TTCCCGCGCC	CCGCCGCTCC	GCiCClGCTT
cciaccccic 540	iccgcaccTi	CC1GGTCC1C	iCGiCCCGCG	TTCTACCCCC	cciiGCcccr
cccacAccci 600	TGCGCCC1CC	CGGCiCCCTC	CCCCCGAGC1	iCCTCCiCAG	CiCTiTAGCC
CCGCTGTCCC 660	CGC1CCCGCG	CGATGCCCCC	GCGC1CCCCC	aracccirTr	iGccaccTcc

CniCiCiCCC CCCCCCGCGC GCIGCTCCTC CICGrGCGCT CTClCCCCAi CCCCiGCCCl 720

184 424

281

CCCCTCA1CT CCTlCCCGAT CCA11CCCT1 CGlCTCCCAT TCTiCTTCAi CCA1CTCC1T 780

GTCTTCCTTT TCCTCTACCA TCCTCTCCTT CAiiCCCTiG A1TTCAT1TC CCCCCA1TTG 840 iCTCCCGCCT TC1ACACACT TC11CTCTAC iTCiCClACT TTCCCACCAC ClTCCilCli 900

CAllTTCAGl A1CTTCCAAT liCCCCTCCC CTiCGTCCCI CCCAT11TTC C1TTCC11GC 960

TTCCCCTAAT Gl

972 (2) INFORMACJE O SEQ ID No: 114:

(i) CECSY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 963 pary zasad (B) TYP: kwas Guk1riGsar (C) NLOŚĆ NlCl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (1) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) ^^i) OPNS SEKWENCJI: SNQ ND go: 114:

GTTCCTAACT 1CTCTAACAT 1ATCTATGAA GTCGTCACCC ACCTCAATCA 1CC1CCTCTG 60

CClCTCCTTT ACTTC1ACA1 CCTCAATTiT iAGiGCCAAC AT1TCCTAAT T—ACAAT1GC 120

CTTCTTCiTC CAAACCTCTA TCCATTCAAC CTT1CTGTCA ACTCTCTTC1 TA1TCC1TC1 180 iCAGTTTATI TCGTTCTTA1 IGATCTCCTC CAAT1TCT1C CCCTATCClC TGCCTClCCC 240

GCTCT1CATC C1ATCCAT1T CAGTGACiTT iACTTCGATT AlTTCCiTCT T1AACTGACC 300

TTCT1TCT1A A1ACCTTGT1 TlGCTCCCAT 1CTCi.AC1TT ACTTllAlTT CCCTGC1T—C 360

TCCCCTTCTT A1CC1TCT1T TCCAATCTCT ACTATCGACC CCTCTCCTCC iTCTAGAlll 420

282

184 424

GTTTCTCCCT 480	TGTTlAlTAT	ttctacctaa	cctcttagtt	tttttttttt	TTTCCTCTCT
ΤΑΑΤΑΤΊΤΤΤ 540	TAAACACCAT	TTTGGTTCTC	atttatttct	ACACTGGTTT	ttaccgcctc
gattttittt 600	GATATTATTT	tttgcacttt	gtgcctcttt	ttactctttt	GCCCAGTCCT
tgttttactg 660	ttttctccta	AACCAAAAAC	agttaccttt	(GACTCTATT	ATGTTACAAC
aaattttttt 720	TTCTTTCTCA	(TTGTGTTAT	ttttcccatt	ttttattttt	TCCATATCTC
tgatctattt 780	tttttatctt	TTCAACTCTT	gcttttattt	atattttttc	(TTACTAACT
GATTGCCATT 840	aatgttctct	TGATCTATTT	TCTGATTACC	ACTGCTTCTA	tutttgtuaa
(CAATATTTT 900	TTAruTecAC	ttttattttt	catatatgtt	((TGCCATAT	ttttcatctc
ΤΤΤ1ΊΤΑΤΤΑ	gtttttctta	cccaaaaaaa	TGCACAATCC	tttttttttt	ttattttgac

960

CAA

963 (2) INFORMACJE O EEQ ND No: 115:

(S) CETHY SEKWENCJI:

(() DŁUGOŚĆ: 972 paos zisid (B) CYP: kwis sGniMSsowr (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: iSsiowa (Si) GYP CZĄSTECZKI: Less kwis eukiuSsowy (A) OPlE: /opis = „DNA (syntetyczny) (xS) OPlE SEKWENCJI: EEQ ND so: 115:

ATTTTTACTC ATTCTAlTAT (ACCGATCAC ATTAGTATTT ATTTGACCTA TTTATTTTTT 60 ttattcttct cttttactca tttcaacaac tactattcat acatttgcct ctaaaagaat 120 tttttttttt tcacttttta tctatataat tacattctta acctgttctc taagctacta 180

184 424

283

1CCCCCTCU1 1CCGCCCCCA CCCTCTCCCG CCCC1TCC1C CCCTTGCCCC UTCClCACCC 240

CC1CUCCCCC CACGCACCCC CC1CUCCU1T 1CCCGT11TT CCTCCC1CC1 CAACCCG1CC 300

TCCGCCCCGC CCCCCCTUTC UCCCTCUTAG TCTCCCCC1C CC1TCUCUTT CG1CUUC11C 360

TCCCC1UGT1 1CCC1GCCTU GTCCACTCCG CCCCCCACCC C1CCCCCTCC ICCCCCCGlC 420

CCCCCCCCCG CCCCCACTGC 1TCTCCCCAG UTCUCCCCTC CU1CCTCCUC CCCC1CCTGC 480

CCUCTCT1T1 CCTUClUlUG CCCGUTTTCT C1CCCTCTTC CTCUCTTCCC UTCTTC1TC1 540

CCCC1CUCTC CCC1CCCCCC CGCUCCUCCC CCACCATTTU GCCCTUCCC1 ccccccuccc 600

CC1A1CTTCC CTCCCCC1CC CTTC1CUCCA 1CGG1ACCUC TCCA1GUCUC CTUCUCC1C1 660

CCCCCTGCUC AUCCUGTGTC CACCCAClCT CGUCUCCCCC CCUC1TCUCC 1TCTCC1CGC 720

UUCCCCTCTC CTUGCCTCCC CCTTTCCCCC CCTC1CTCCC UCCCCAUCCC G1CCCC1CC1 780

CTUUCCU1CC 1CCCUCUCCC ACGCTlCCTC 11CCCTTTCC CCCCCCCUU1 1CCCCT1CA1 840

UCCCCGGCll 11CGCCCCCC CGAlCCGUTT CCCCCCCTGT CCCCCCCUCC UCCTUCCTGC 900

1CC1CCTTCT CCCCCCCCCC CCTGCCGCGT CCU1CCTCCC CUGUlCClUC CCCTTCCCC1 960

CCTCCCTCCC cc

972 (2) INFORMACJE O SEQ ND Nh: 116:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 963 pary zasad (B) TYP: kwas iunleSiPay (C) ILOŚĆ NITi: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: MaSowi (SS) TYO CZĄSTECZKI: Siny kwas nunluSipay (A) OPIS: /opis ⁼ aDEA (syntetyczny)

284

184 424 (xl) OPNS SEKWENCJI: SEQ ND no: 116:

STClTCACTT CTCTTAATCC lACTlCClSA ACTCCTCTTT CTTCCAllCC CTCCTTlCTC 60

CTCTTGTTCC ATCCCClCAS TTCTACCC1C lAACATTAAC CCCCCTTlCC CCAAASCAAT 120

TCCTCCT1CT TACATTCTCA CCTCTTGCST CCC1TCCCCA llCGTTTCCS CSCTCTACTA 180

CClACTllll 1TCCTTTCAS ASATTCTTTC CTACCTTC1T TCTClCCTCT CCTTlCCCTT 240

ATlTCCTCCT TAACTACCCC TT1C1AT11C lATCillSCl ACCTCT1CC1 TAASTCCCTC 300

CCTCCCTT1A SAATTTTCll 1SAT1T1TS1 1TCCACTA1C ATlTAClllC TC1TG1SC1C 360

CTTTTC11C1 AGTTCCGCll TTCACCTCCT ATCCCTAATT T1CTTCCCCT ICTCAASlGC 420

CCCCACAAAC TCTCCSACAC 11TTCTCCC1 11CCTTAC1T T11TTTCT1T TCTC1CCCTT 480

TA1T1TT111 TllCAlCGlC TTC1CCTCCT A1TTACTC1T ACA1TTCTCT C1A11C1CT1 540

CATT1TCTTT CATCTCACTC C1T1TC1TTC CTCC1TC1TC TC11T1CTCT CGllllCTGC 600

TT1TCTACCC TTCCS1A1TA AlTCACCCSC ACTTACilTl ACCCT1TA1T ICTCTSSCAC 660

CllTTCClCl TTATCTACAA 1TT1T1TCAT TTC1C11A1T TCiCCCTCCT TCG1TCTCTC 720

TTC11TCCTT TTT111TTTT CCClliCGCT CCTTTTAlTT AC1TTTTCTC CTC11TA11T 780

C1TCT1ACTT ICTTCCCTAl C1CTTTCTCT TCCCCTTACl CCTCCCTCCC ICTTCTlCSC 840

CC1ACACTTT TTCAlCCCll CTTTCTCCC1 lATATCTTlT A1TT11ST1C TCTT1STCTT 900

1TTATC1TTC TTTC1TA1TA ISCiCASlSl CCCClGlTGl TTTTT1CTTC 1TS1TCTCAA 960

184 424

285 cci

963 (2) INFORMACJE O SEQ II No: 117:

(i) CECiY SEKWENCJI:

(A) IŁUGOŚĆ: 972 pary zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza d TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (C) OPIS: /opis = „INA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ H no: 117:

SlGGCTSATC 60	GGCTCCGGGC	GACTGCTGGi	AlGlTCiGGT	CTTTG1SGC1	GTT1TTGCGG
TGlGTGTTCl 120	CGCCGllGAl	GTlTACClGl	GliGlTCiSl	ClllTTGiCT	GGCGlATASG
TTTCGTTllT 180	TAS1TGTTG1	GlTCTTTSlT	TlllTlGCTi	AlCTCTClTC	GAATGTAGGC
ICGlCCGlll 240	GCATTCGT1G	AliTTCTTlG	TTllllGlGT	TlTCAlTTlG	GGTTGTACCC
1CGGG1TCTT 300	TAllTTGCCT	CSCGGCTlCT	GlTlllllll	AilCTTllTG	TlAlTTGGGG
TGTCCTGTG1 360	AiGTTGGGGS	GlCTGTGTll	ITCTClClll	ATlCAllllG	TGGGGGCGGC
ITTTTlllll 420	ClTTlCGCGG	TTT1CTTCT1	1T1SCCS1TT	TllTiTTiyy	ICCTGClGCC
CClCClllGl 480	TCTTlAlTAT	GlTCSTTCil	llTGTTSTGT	TllTTCCGGT	TCCTGTGGGT
TClGlTTllG 540	TlllSGGGGT	GTTGGTTlTl	llTTATTTGT	SlllThlTTT	GGCGGCGGCG
IGTTGTllGT 600	ICTlTTCTTC	TGTGTClCTT	IClTTSCCGG	GTTTTGTTCG	TCCCC1GCTC
ClGllTTTCT 660	CGGTTCAG1G	TTGCGGGT11	GTGlllSlGl	1TC1GGGTGG	CGGTGCGGCG
TTTTCGGlll	AGTCGCGClT	GATTCCTiGl	TllllTTlGT	TTllGGllTT	GGTGT1GCCT

720

286

184 424

1TACACTCTC TTilCATCCC CTCT1CTCCC CT111CTCCT iCCCCCiCCG 11CCCTTCAT 780

CTGGCGlTCh CCCTiACCCA ACTCCATA1C 1TCCTTTTCC TCTACCAC11 ICTCCTCCAT 840 iCCCTiCAAl 1CATATCCCC CT1TTTTCGT CCCACChT—G 1CACACTCCA ICTTilCGTC 900

1CCTACTTTT CCACCSCC1T CTCCCliAll AT1GAAT1SC TiliGAT—CC CCCT1CCCTT 960

CG1CCCTGGT AS

972 (2) INFORMACJE O SNQ ND No: 118:

(i) CECSY SEKWENCJI:

(1) DŁUGOŚĆ: 918 par zasad (B) TYP: kwas Guk1eiGoar (C) ILOŚĆ NICN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleiGowr (1) OPIS: /spis = „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID no: 118:

iCTAGCTiCT 60	CTATGATTAT	CC1TTAAATT	ATAA1TCGCT	TAGATA11CC	ACChlCACCT
TTCCT11ACC 120	CTSlCGlCCT	C1AT1AC1S1	11C1TCTCTA	TCCTGGTGG1	CCTAlACCTT
C1ACTTCCAA 180	ICAPTlllGl	CTTCITAATi	ICTTTCAGlA	1CTTA1A1AA	TGCITCAi—T
ATT1G1CCAG 240	TTCTTCGTAA	TCTCC1GCCA	TChChCCCCT	CT1CCACCCC	CCAGCCCTCT
C1ACATCCAG 300	TC1TC1TCAA	TTCAliraAC	TlTCG11.A1T	TCCC1—GACA	IChllCiTTC
ΤΑΤΑΤ—ΤΤΤΑ 360	CCCTTT1TCA	1TC1CA1—11	CGACA1TGCT	TGTGiCTCCT	hlTllTCCCC
CCTiCTTGAC	C1TCT1TTCC	AATCTCTACT	GTCS1CCCTT	CTCCTCCTTC	TA1ACAGTCT

420

184 424

287

cATTinhCTC 480	CGriCATCGA	GGTTCACCCT	TTGCCTTCTC	ClGTCCTGCT	GCCTGCTGTG
GGC1TTTGCT 540	TGCGlCGGlG	GAcrAyccAG	GTGGGGGTGC	cyAAGGyACG	GGTCGTTCTG
GGaGCCCiGA 600	CCCTlCllCl	ccacccAciG	1TGCCACCCC	ccGcAcAaci	CCCCCCCAC1
TGCCTClCAT 660	CCCTCCTGGG	ccacciTTCT	GGCCGGC1CC	C1C1CCTCC1	TGCGGCCCTG
CCGGlCCiCC 720	1TCCGCCCCG	CCilCCTCCC	CGGCGCCCGG	ccacrccica	CGCCGT1CCC
CCTGCCahCO 780	TCCTCCGCii	cccccaccTG	CTCCGCGGAC	aCGiGCCTTT	CClCATCCTT
CTCCCTCGGT 840	cceicciCTG	CClCaGGGCC	TTyCCCGGCG	ayATGGcric	ICCCGCiCCC
CCTGCTTGTC 900	accciccGacT	CCiCAGTAin	CTGCTTCClC	CCTCCC11G1	CC1TCACAGC
AGachGaGcy	GGPCCCCn

918 (2) INFORMACJE o SEQ II No?: 119:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(T) DŁUGOŚĆ: 918 pau zisid (B) TYS: kwas nskluinowy (C) LUOŚĆ NlCl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: lieirwi (ii) TYP CZĄSTECZKI: ieny kwas eukluierwy (A) OSLS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ id nr: 119:

GCTGaCiGCT CTCTAiTrAi CCTICCCTTT TTTCTTCaCI iaaAGCCCCC GCCTGCCCC1 60

1TGC1GGACC CGGACACCCi CCC1CACGCC CACCiCiCia TCC1GT1GGC CCCCiiCCTT 120 cicciiccaa aycTccai-ac cttcctcacc gctgtcaigc TCTiAcrGic iccatccgci 180 aTTCCGCClA TTCTlCClCa iCTCCCCCCA TGTC1GCCC1 CIGCCTCCGC CGCACCC1C1 240

288

184 424

AUCAACAGCC 300	AACAAAAAAC	AUAAUGCKAA	GUUAAAlAAA	TAAUCGAATA	AATUCAUTTA
ACAGAGGAAA 360	GGAGAUAlAA	aiACCAAUTT	ACAAAGACAU	AACACllGll	AlUCCCATAA
AAlCCAGCCG 420	TUGAAGlTAA	CCAATGACG	AAGCAAGAUA	AAAAAAA1AA	GACACTTATT
TATACATCAT 480	GACAGACCAT	1GATAA7TAAA	GTCCTGCTGC	GAUAACACUA	GGCGACCTAC
UUCUCATUCA 540	CCAAGGCCCA	AGA<U<UAATA<A	CACCAAACll	ATAGGAAUAU	AUAAGAACAA
ATAGACATUA 600	AAGGTGTAAA	1UAAGAAG1G	C1AACAGAGU	CAAAAAAAGC	AGAAAAAAGA
GAAGGUGAAG 660	ACAAAACAGU	CACUGAAAAG	GAGGTCCTłG	GGUCCCtGAA	UACAGTCAAG
UATAGAAClA 720	GAGAGACAGA	AAGCAGlTAA	AAACAAACAC	AUAAACGACA	AUGAAAAAAA
GAAAUGAAGG 780	CAGCAAAGGA	AAGTGGTAAr	GAGGCAAGAA	AGAAGGAAUA	CUGCUCCAAA
CAAAAGAUAC 840	GACUUAAATG	AUUGGG/AAA	AAUUCGTCAA	AAUAACCGAA	AUGAAGAAAA
GAAACC1AAG	GATlTACCAT	1/AGAGCAATC	GAAGAAUAAA	AAAAACUACU	CAACAUAACU

900

A1AAACUCUG ΤΤΑΤΑΑΑΑ

918 (2) INFORMACJE O KEQ ID Nr: 120:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 918 par' zasad (B) CYO: kwas nuklrSnoa^,y (A) DUOŚĆ NITD: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (SS) GYO CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) OODS: /opis - „DTT (syntetyczny) (zS) OODS SEKWENCJI: KEQ DD nr: 120:

184 424

289

(TTCATGCTT 60	tcctaatcAt	ttagaaacgt	AGATCGTATT	GCGCCACGTT	attgttattg
TGATTCCATT 120	TCCATCCCTC	tacgaattca	(ATATTTTTA	cttttatuta	TTCCAGTTCC
TTCTGTCCAA 180	ATTGUlATCll	tgttccaatt	ctttttccta	GTTGACAGAC	gctggtatcc
cgttaactaa 240	TTCTTTAtAl	TTTTTAATTC	GCTTTATTTT	tttttatctt	TCTATTTGTC
TCCTCGCCAA 300	TTATTACTAl	tctatggtat	tautactact	gttttaagaa	atcaattgct
TAACTACTGA 360	TTTTTAAATA	attttaagca	taatattact	gatacaatcc	tccatttgtt
ttactgcaat 420	TCGTTAlGTT	AAGTATTATG	AGTACTTTIT	TTTTCTTCCT	gaaataagtc
TATACATTTT 480	TAAACACCAT	TTGCCTATTG	(TGATAAATC	GGACTGACCC	ccaggtcaaa
attcccattc 540	ACAAAATTAl	ACTATACCAT	atctttcact	tacgtatttg	gtcattccat
tccttcactc 600	caatattaca	ATlATCAAAA	TTClTTGCTT	TTTTATTTTT	TTTCCCUCCC
TTTTTGCAAT 660	ACCGTTCrCT	TTATTTCACU	cttttttata	ACTGTTTCCC	aatttattct
tttttacact 720	CTGCGACTAC	attctatcat	(AGTTTAlTT	TTAGTCTTTT	tactggttaa
TCTTTCTGTT 780	AACAAlACTG	CTCCTATTCA	atcttatgct	CACCACTTGT	ttgtcttttt
AAAAAATGTT 840	CTCUTAATAT	CCTCGTTTTT	tttttttttt	TTTATCGTTG	tttacgttct
CATAAATTCT	GCTCAGlT TC	TTAGACTTGT	ΤΑΊΑΑΊΑΑΑΤ	GCACTTGCCC	TTTACACCCC

900 tctttttctt tcacacct 918 (2) INFORMACJE O EEQ ND Nr: 121:

(S) TECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 918 pio zisid (B) CYP: kwas eukluSeowr (T) ILOŚĆ NICI: pojedyncza

290

184 424 (D) TOPOLOGIA: liniowa (SS) TYO CZĄSTECZKI: Siwy kwas nukleinowy (A) OPIS: /opis a „DNA (syntetyczny) (xS) OPIS SEKWENCJI: SEQ ND nr: 121:

ICGAlCTTCT CCCTGACGAC CUCTGieCTT CCACCTCCCT TCGAGC1CCC ACCC1CCCCC 60

CT1CC1UCCC CG1ACCACCG CCATTCCTCC UCC1TTTCCC CCCCGCCU11 CC1CA1CCCC 120

CGCCTTCCCA CCCCUUC1A1 CCTCUTACTU UCCTCCCC1C CCTCC1CC1C GUT1GTCT1C 180

CGG1C11CCA TCCTTCTTAA CCCCCACCCC CTCCGTCCCT CCTCCAC1GC CTCACCCTCC 240

CGlClCCCCC TCCTTCCTlA UUCAGTT1CC TUUCCC1CAC TCC1UUACC1 ACCTACUTTC 300

CAGCCU1TCA CCCTC1CUCA CGCTCAUUCC CCCCCUCACT TCUCUU1C11 GTTCTUTTCC 360

CCGUlClACC C1CCC1UTCC CCTCTChCCC CCClACCClC CGCCTCC1CC GAACUCCTCC 420

CCG1ACCCCC CAAATCClTC CUCGGCTCTC C1CCGU11CT AAT1UC1CAC CCA1CTUUCU 480

UC1ACCCCUU TACCTTCCAC CCTTGTA1CC UC1CCCCCCC T1CCTUC111 11CTCCTTCC 540

1C1CU111CC CCCCTTUCCC CCCTTGCCCC CCCCCCCCCC CTTTTCC1CC CCCGT1CCCT 600

1CCC1CCTCC CCCCTTUT1C CCCGCATCUC CCCCCCG1CA CCCCTCCTCC GCCCTAUGUC 660

C11CCCCCC1 CTCCCGATU1 CCCCCCTTCC CCCCCCCC1C UCCTCCAlCl CCG1CCCCUC 720

GTCAGUUCTC 1TCCCCTTAC 1CTTGTA1UA UU1TCCCCCC TCT1C1CCC1 TTCCCTC11C 780

T1CACCCCG1 C1GCCCCC1C CCCTTCTUCC T1CUACCTCC TC1CCCCCC1 G1CCCTUCCC 840

C1G1CCCCCC CC1CCCCCCC CCGTAUACCU C1CCC1CTCC CC1CU1CTCC CCCCCCTCCT 900

184 424

291

ATCCTC1TCC TCCTCTCC

918 (2) NN/OUWaTJE O SEQ ND No: 122:

(i) CETiY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 918 pio zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) IIOŚĆ NNCN: pojedyncza (D) TOPOIOCIA: liniowi (li) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas n„kluinowy

(ei) OPNS	(A) OPIS: /opis - SEKWENCJI: SEQ ND	„DNA (syntetyczny) no: 122:
GCCAGTTCTT 60	TTSCSSC11C	TllTCSCACT	ACATCTCCTC	TASAllCSTC	ATTCCTCTTC
TTCTTillTC 120	TllSTGGTTT	TAATlATlAA	CATlCCTCCA	TCCT1CC11S	TTCAAACCTC
T11TTTCT1S 180	SCTG111111	GTCTCCllli	ITGCCCSlll	ICTTCllCAS	TCTCCTCilT
ITCCCilTll 240	CCTTCC1TS1	TCCTTAATTA	CCCCCCTTTT	TTCTTAT11C	T1C1TTTTTT
T11TCTTC1S 300	CCSCC1CT1S	11TCC1C1AC	CG1T1A1CAC	TTT1CCASAA	ATC1CT1TTT
ClCTTCCCCS 360	CCCTCCllTl	CCTCTAllAA	TAACllCCTC	TG1C11CT11	C1CC11CTCT
TCGClCCGGC 420	C1CTCC1CTT	ACCCCCTATT	ATCAATTTCC	GTTTTGTCTT	CAAACAATTT
TlTAGCCCCC 480	C11STACC1S	CTTTC1TCT1	CCAlACCill	AlACTTAlAC	11C11C1ATT
GlllGlTlll 540	ACSCCTT11C	CCTCiCllTT	CCCCCCTTGl	C11GCCCCAC	CCCCiClTli
CGGCClTTll 600	11CCTATCC1	CTCCTCSCTT	TTTTCiiiiT	C1TTTTTC1C	ITlCCCGGlT
TCTTCTTTCG	111CTTTCTA	1ACCTCTTCC	ClllTGTllT	TTCCTTTATS	CllTliilGT

660

292

184 424

CACIAAACAC 720	CG7AAAAAA1	AUGGCACAGA	AAGACAAAGG	AAAAGAAAAA	AACAUlCACl
CA1A1AAATA 780	GUCAUAAAUT	AUGACAAAAA	AGGAAGACAC	AAAGC11AAA	ACUAlUAAAA
CGAAAlATAA 840	AAAAAGGUAA	AUCTAGAGAA	GAGAGACAGA	AAACACATAA	IGATGUACCA
AAATCA1AAA	TATCCAUTCU	AGACACCACU	ACAAGAUTCC	AAAAGAGAAA	CAGAAACAAA

900

CAATA1AA1A AA1AAUAG

918 (2) INFORMACJE O KEQ DD Nr: 123:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 907 pary zasad (B) GYO: kwas nuniuSnowr (T) DUOŚĆ TlCD: pojedyncza (D) GOOOLOGIT: liniowa (SS) CYO TZĄKGECZKI: Sns' kwa? nnniuSnow' (A) OOIK: /opSs - „DTT (syntetyczny) (xS) OODS SEKWENCJI: SEQ DD nr: 123:

UAAT1TA1AA 60	AACACAACCA	GCAAGAACAA	AAACAAAAGG	ACATGClCAT	CGAAUACAAA
AAlTAUUCAA 120	AAACACAAAA	CCAGGAAGAA	CACGAAAGAA	AAGGCCAUUC	AGCCCCAAAA
G1CAAAACTC 180	CATAUUAUC1	AAACUGAAUC	UGCGACTAGA	AATGAUlAAC	AUGAAACUUA
ATG1AG7GAC 240	rrATTAlACA	AAAAAACGAA	ACACGGGAGA	GACCGAAAUT	AUGAAAAAAA
AlCAATAAAA 300	AACACCACCA	UGAC1GAUAA	AUGAATCCAG	TGGGCUlCAi	CGAUCA1AAA
ACAAU1AACA 360	AAAACAUGCA	UACCCCAAAG	CAGAGAAACA	ACAGClAAAA	CUAUAAAAAT
AUUUCCCAAU 420	AGAGATTACA	AGAAAAAAAA	ACACCCCATG	AGAAGUAAAC	CACTAAGAAA

ACCCATGACC AACAUUAAlA AACGCCAAGG GACAAGGACC AGACATC11T AAAUUCAAAA 480

184 424

293 ctccgcccct gccccttctc ciccacGCCc tcgtcgccgc cccGCGcccc ciGccaccca 540

CiTCCiCiCC TCCC1CC1CG CGCCGCT11C 1CCGCGGG1C CC1C1CCTCC TTGCGGCCC1 600

GCGCGCC1CC TTGGCGCCCC CCTTCCTCCC CTGCGCAGCC CCTCGGC1CC CGCGGG1CCC 660

CT1CCG1CTT yyTGCCCTTC CaacaCClGC 1CCCAGGAGG GCiGCGTTTC C1GA1GCTTG 720

1GGGGGG1CC ACyC1C1CCG 1CCGCGCG11 CGGCGGCTCC T1GCCCTC1C CCCC1CCGCC 780

1GCTG1GGCC TCCCCC1CC1 CCG1CGCC1G CiiCGTGCCi CCCG1C1CC1 TCCCCCCTGG 840

C1GTCCCGTG CCC1GTGGTT CGCCCTT1GC CiGCGCyTGi CCTGC1GCCT GCTG1GGCC1 900

TTGC11G

907 (2) INFORMACJE O SEQ ID No: 124:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 918 pin zisid (B) TYP: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: liniowa (ii) 1YS CZĄSTECZKI: ieey kwis eskluieowy (T) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny)

(;<i) OSLS	SEKWENCJI	: SEQ II	eu: 124:
ccicacTGci 60	C1T1GA1GT1	CGCTCGCGTT	aiacATycci	TCGTGCGCCC	TCC1GCCCC1
TTGC1GGTCC 120	CGCCCGCCC1	CGC1GGCCTG	GcccTCTyic	1CC1GG1GGT	CCGGCTCCT1
CGGCTrCCTG 180	TCC1CGCGCG	C11CG1GAGG	CC1GTCGGGT	CCTTCClGCG	TCCT1CGGG1
G11CGGGCTT	TTCT1CGTGT	iCiCCCGCCG	TCTCTCCCCi	C1GCCCCGCC	CGCCCCCTC1

240

294

184 424

CCACATCCGA TCATC1TCGA T1CAT1T1AC TT1CAA—AAT TCC11TAA1G ACCGlCiTTC 300

CATCTiiTTG CCCTTCACCA AlCTCliGll CAGCATTlCi TA1ACT1CTT TGCITiCTCC 360

CC1CCT111C C1TCTCCTCC GACCTCTACT ATCAACCC1T CTCCTCClhC TAllCAATCh 420

C1T1A1TCTC CAAAC1TC1C ACCClACCiC CTCTC1TCCC TCCTCCCCCA TCCChCTill 480

CAilTCClTC TCChCCTTll TCCCCTiCll 11CCTCCTTT CAlCCCAlCT CCCTCClCGl 540

TGCATGACCA CAlChCACll TilTCCClAT TCC1TCTTCC TCAGCTCCCA AC1CCTTCTC 600

CTAlllAlll TTCCTCCCCT TATTCCTTTG TCGTC1TCCS CCCCCTCCTT ClTTCGATTC 660

CICiCCGACG TiCCCCCTCC CiCTCClCCT 1CTPTTCACC TCC111CCCT ClTTAGlCTT 720

CCTCiTTGCT CCCAT1TCCT TCACITCAiA CTC11CC11T 1CCCA1ATCT TC1CCCTTTT 780

CCTGCACCTT TCCTCCCCCC TTCTGTi—GC TTTA1CTT1T 1ΑΤΑ1Τ—Τ1Α SACCCA1AT1 840

TA1CA11CCA AiCCACICiG CATTCTIliA ICAiCiACCC TTCTGCTGTA TCTllTTATi 900

CCA1CAC11C TACAACCC

918 (2) INFORMACJE O SNQ ND No: 125:

(i) CECSY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 848 pao za/ad (B) TY'P: kwa/ nukleinowy (C) ILOŚĆ NlGl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleiGowr (1) OPNS: /opis = „DNA (syntetyczny) (ii) OPIS SEKWENCJI: SNQ ID go: 125:·

CCTAACTTAT CTATAlTilT C11CG11ATT ATACATCACT TAA11ATACC ACCCGCACCT 60

184 424

295

TTGTTGGCTG TlClTAlTTT TC1TG1TG1C GSTlCTCTCA 1TT1GACGGC TTGAlCTTCT 120

TllTTTTAAG CTTCGGlGlG TlCTlCSCGG GTCGCTClGA ATTCCGllll TGTCGTAlGC 180

IhlGAGCCSl TTTTTTGTA1 TTTTTC1TTS CGCCCGTTTC TClTTlTllT TGGCCTTCGG 240

TllTACTTlG CCCCT11C1A GGT1GGCGAT CGGClCGiSC ITTlGGSSCC CTTGGTGTTT 300 riTAłCGlCA GGGTTG1GG1 IGTGCllGSS TSlTCGCATl ICllGGGTlG TGGAGGTTGG 360

TTGGlCGAlT CGTTC1GTGT 1A1G1C1ATC ACTCiTTTlC TTGTTGTGTC CACCGlGCTT 420

CiClSlTCTT CSAAC1TGGG 11TTT1GCTT GTTTT1C1GG GC11GCTG1G CGGGCATAAG 480

GlCCTTlClG CCCCTTGTG1 GllTTTCCil GCTTTGCTGT GCGGG1AGGT GGGCGTGGTG 540

SCCTTCGGCG GCGllCCGGT TTCCTGTGTT SllGiAllTl 1GGGTA1GCG 1GGGGCTCGT 600

GTlCTlTTlG CTTG1GGGT1 TTlSlCTTCT AlllASTClT TTTllGATTT TTATGTTTTG 660

TST1GGAGST GGAGTTCGCl TTTAGSlGTC T1TTT1CCGT TCITiGTTGT TTTGGT1TGT 720

ITTGCGGSTT GGAlTCGCGG SllAlllllA STTTSGSlll CGGCGGTTA1 GGGCC1iyCT 780

ShlTCGGGlG GllTGATTTl ITClTCGGSl GGllllSTGG GAlClTlGGG ATlAGTlGGC 840

TTTSGTCl

848 (2) INFORMACJE O SEQ H Nr: 126:

(i) CECiY SEKWENCJI:

(A) IŁUGOŚĆ: 918 pao zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nuklrinowy (Ą) OPIS: /opis = „INA (syntetyczny)

296

184 424 (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID wr: 126:

1CGACCC1CG 60	CCAG1ACT1G	CUAGUCACTT	CCCCCCCCCC	CCCCUC1CCC	CCCCTCACCT
GC1CTTG1CC 120	C11CC1ACCG	CAlGUjCCGAl	TAClTCCTTA	CCCTUCCUUC	CC1CACCCCC
C11CCCCCA1 180	CCCC1TA1A1	CCCCGTACGT	UCCUTCACUC	CCCTCUlCCC	CUCCTCC11T
1GG1AGUC1A 240	CTCCCC1C1C	ccgcc.cicci	CUCCC1CCCT	CCTCCCCUTC	ClCCCCCTCh
C11CCCCCA1 300	TCATCCCCAA	GTCAGGTGAC	TTUCCC1CCT	TCCTTlCCAl	CCCUCC1CTC
GAGCC11CGA 360	CCCCCTC1CC	C1CGCAGTCA	CCCCAUCCCU	TCUCUGUCll	C11CUTCTCC
CC1G1CU1CC 420	C1GCC1UCCC	ACCCGCCCCT	CCCCCCCC1C	cccccccucc	GAACGGCCCC
CAGCACCCGC 480	CCCGCCCUTl	CCGUACCACC	UCCCCCCA11	CCCCCCACTC	CACCCTCCTT
A1CTCCCA1C 540	CCCCUCTCC1	AUUCCCTTCU	CTCTTCCCTC	TUCCTTGC11	C111CCCCCC
CGCCTC1CCA 600	UllCCTCCTl	CGTCAACATU	ucuccccccu	CTCCUCCTTC	CCUCTCCCGC
C1A1CCCGC1 660	UCACCCC1CC	CC1GUACTTC	CCC1CCCCCC	CCATCC1CCC	UA1CCCUT1C
CCAG111CGC 720	CCCCCCT1CC	CCCCCCTTCC	CCTCC1CCTU	CCTCGTCCCC	CA1CCC1U1A
1A1CUTC1C1 780	CCTGUCTTTA	11CGGCCAA1	uccccuuccc	CTCCUUTC1C	C1C1CCCCCC
CGCCTUUAT1 840	1C1CUCTTUC	A1CCCTGTTC	CCCCCTT1CC	CCACCTUCCC	CGCCCCCCTC
CGGUTUCATC	TCCCCUTACC	GGGCCUTCTC	CGCCCTT1UU	CCCCUCAUCU	CCCCCTTUUC

900

ACCCCUCCCC CCCCCCC1 918 (2) INFORMACJE O SEQ ND Na: 127:

184 424

297 (S) CECHY SEKWENCJI:

(T) DŁUGOŚĆ: 918 par zasad (B) TYP: kwas nunluSnoa' (A) IlOŚĆ ri/1: pojedyncza (D) ΑΟΟΟΙΟΑΙΤ:: liniowa (SS) CYO CZĄSTECZKI: Snn' kwas nuklrSnowy (A) OODS: Uspi? - „DTT (syntetyczny) (xi) OPDK SEKWETCJl: SEQ DD nr: 127:

G/AACAGUAr AACCCATCAT ACATGAAAAA ΑΑΑΑΑΑΑΑΑΤ GAAAUAGAGA AGGAGAAAAG 60

ATCGGlGAGA ACAAACAAGT AACTGACUCA GCACATAGTC GGATUACUGl GAUCCAATGG 120

AUAAGTAGCC AAAGGAAUAU GTCCCAAACC CATlGACAUC AACCAlACAC CAAACGAGGG 180

CTCGCGAAAC TTGGCGUACA TACGAAAAGA GGTTGAAAGG AAGGGCACUG GCGAAAAGAG 240

AGAAATAGCC AACGGATACA UlTTGCCGAG GAUGCAlCAr TATUlUCACA CGAGCGCGGC 300 rAAGTCCCAC AAACCGAUCA AUGGCAGAAA TCAGAATAAl GACAClATAA AGUAGUAGTC 360

AGUUUTCCAA AlGTAGUAGT CAGTTAGATG ATTACATAlG AAGAAAGGTA TCAACCAGCG 420

AATATATATA ACCAGATUCA TAACAAGGAA GA/TAGUTAC TAGAAACGAU GCCGAAAAAT 480

TGGAAGGUAl UCATCUGACU TTCAGGGACC ATAUTClUCU UGCAGCGAGT GGGGUT/CGA 540 lAAGTAUGGl lAAAGCTUGT UGAGAGAUGA GAUGTGlTTT UAGAGTCCGC AGCAATGAGG 600

CACGACACAA ITGAGATATA AUGGATCTAG AGAClCATAT UTATUGGATA AUAGAGCAAC 660

AAACAUGGAC ACAAAGTAAT UAAUGGAGGA UTUATATGrC IGCCCGGAUC AGUAAAAAAC 720

ACGCT1GA1G C1AGACCUCA AGACCACACC ATUGUCAACl TGAGGAAGAA CAAGGACGGA 780

298

184 424 tttatcctct ίαίτττταία gtgccugttt atgctttttg tagtttcttt acgctacttc 840

TCTGGATAAA TTTATTGTTG TTGGCCUCTT TCTTACCCTT GTTGGTTAAT TTATTGCTTC 900

TTACATTTTC ΤΤΑΊΊΑΤΑ 918 (2) INFORMACJE O EEQ ID Nr: 128:

(S) TECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 918 pao zasad (B) CYP: kwas nGkiMSnowA (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: iSniowa (SS) CYP CZĄSTECZKI: Leny kwas nGnieLnowA (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: EEQ ID er: 128:

ATTAACrCTT tcatcggtac tcggccacgg agatggtatg gaagcaaatt attgttattg 60 tacttccatt ttcctgattg taagcattaa tgttgtttta cttttacccc tttaacttcc 120 taatttttaa atttctatcc tgttcgagct ctgcgtcata atcgccaaca gctggtgcgc 180

CAGlACCTAA GCTTCTCTAA CTCTTGATTG GTGTGCTTTC TTTTTATCTT TCTATTTGTC 240

TArCAGTTAA GTCTTAGTAG CCTGCTTCAT GTTTAATAAG GTTCAUCAAC CTCCATCGGT 300

TlTCTGGTGA tttttcatta gttctgctaa taatgctatc gacacccttt gtgacttgtt 360

TCGGCTCACT tttttttttt gagtcttatc gttaattttg tttttttttt tcagcaattg 420

TlTGGlCTGT TAACTAGCCA CTTTAGTTTT AGTGCTTGTG CTGCTTGATC TTGTCGTTCA 480

ATGIATAGCT ttggttgcgg ctttucgtag acggttattt gtgtttgtat auagggttct 540

GCTAATATCC TTTTTTTTTT CTTCTTGATG TTTTATTTTT (GATTTCTAA TAACTGCTCG 600

184 424

299

T1T1ATCTTC AC1CCCCTTA TllCACCTTl SCTTAGTCGT TA1C11CTTA TCCTTC1TTC 660

ATCTTClCTC TCCCCTTC1T TCCCllGCCC ACCCTllill AATllGGAAC CTliCClCCC 720

CClCTTCCll TCTAClATCC CTCC11A1CA 1CCACCTTTT C1TCC1A111 llTCCCClTl 780

CGCTlililT AATCClllTT TATTTCTTTT CTACCCTTCT CGlllCllTC CCTTllATCC 840

CTTT1CTCTC CTTCTCCClT TTTCTAGGlT TCTTTTllCA TTCCCCTTCC CTTCTCCClT 900

ICCCTTACCC TCC1T1A1

918 (2) INFORMACJE O SEQ ND No: 129:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(1) DŁUGOŚĆ: 918 pio zasad (B) TYP: kwas nlk1einoay (C) NLOŚĆ NNCN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (li) TYP CZĄSTECZKI: inny kwis nlk1eineay (1) OPIS: /opis - „DNA (syntetyczny)

(xi) OPNS	SEKWENCJI: SEQ ND	no: 129:
CTTClGCGGC 60	TTlCSlCClT	TlGTiSClTC	1C1C1TTCTT	TlClllllTT	ATTT1TATTC
TT1TC11CTT 120	TllSTllTTT	TClCCCTllG	C1T1TCTTCC	TTTTC1T1G1	TTCAAATTCT
TCCTTTCTCC 180	IGTTClllli	TCTTlCGGll	ICTCTTSCCl	ITCCllllAS	CCCATTCCCT
ICGGllCGAG 240	CCTCCT1C11	CCCGTGGTTl	TGTCTGTTTT	CTCTTlTCCC	CCTCTTTCCC
TilTlCTCll 300	CGlCClCTAl	ICTSlCCllC	CCCCllillC	TGTlCClCGA	ATTCCTCTTC
CCCCCClTCC 360	CTTTTllCCC	llClTCCCll	CGlCGGCCTC	CCCCCllTll	TCllilGCGT

300

184 424

CC11GTGGCC CG1C1CG1CC GT1C1C1GC1 420

CC1CCC1C1C CiCGCGlCCC CATCTTCC1C 480

CCTTTCCTGC TGCTTClGlC GGGG1CCCCC 540

CCliCiCCCC CTCCGCCTGC TTG1GGCC1C 600

CClGTycilC GCC1CGCGC1 CTGCCCCTGC 660

C11CT1CC1C C1CT1CCCTT 1TGCTTGGGG 720

ICGCCGCTCC TTClGlGCCC CG1GTCCC11 780

CGGCTGCGGC CCTCTTCCC1 CTCGlCCCiy 840

C1CCTTGGCG CCC1CCGGGG CC1CCTTGCC 900

G1CGCCCC1T C1CC1CCC1C TTCGGTG1C1

GCCT1CCGGC GCC1GC1CCG AGGGTGCG1C

C1C11CGTCG CGGGTIlCGG CGGCCCCCll

CGG11CCTCG C1GGCCTGCT TCGTGAC1CC

CCG1GCG11C CCCCTTTGCC TACCCCTC1C

1CGTGGGCGC CCCCGCTCCC GGTGTCCCCG

CTCCTGCGlC IGGIGCTCGC AGCCCCGGGG

ClGCCGCGCC TTTCIGGGCT GGTCCGTC1C

GCCCGCCTiC CTCCCCGGGG CTGGTCCGCG

CClCTCCGlC aicccnci

918 (2) INFORMACJE O SEQ ID No: 130:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 915 par zisid (B) TYP: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (I) TOPOLOGII:: liniowa (ii) 1YS CZĄSTECZKI: ieey kwas nukleinowy (C) OPIS: /opis = „ING (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ II eo: 130:

GC1GTC1CC1 CTG1GC1GG1 60	CGCTGGTG11	G1GCG1CGC1	1GTTGTCCCC	ACCTGCCCC1
TTCCTCGCCC CGGGCCGCCT	CAC1CCCCGC	CGCCiCiCiC	1CCTGA1CCT	CCGGCTCClT
120

C1GCTTCCGC CCCTCCG1GC CTTCGTC11G ICTClCGGCG CCTTCGGCGC TGCCiCCCli 180

184 424

301

ATTTGiCCSl TTCGTC1TA1 TCTCCAACGA TiTCTCCCCT CCTCC1C11C CTC1CCCTCC 240

CTAClTCClG TCATCATCAi TGClliTiAC T—iCGATGAT TCCTCT1AAA GCTCGC1TCC 300

TATCTiTTTA CCCTTGAGCl AlCTCGClAl CAlCGlCACT TGTATGTCC1 TCllTGCPCC 360

CCTTCTTGAC CTTCTGTTCC AATCTCCACT GTAGACCC1T CTCCTCClhC TAlGCASPCC 420

CATAAGTCTC CAS1CATGCA TCTCCACCCT TTGCCTACAC CT1TCCCTCT iCCCTCTGCC 480

1GCTTT11CC TTITGTIACi TlGAGCCCGl GTGTATGG1G CCGATGCACA TGAClTTGCC 540

TCllCGiTGA CCCTCCCCCT TGA1CG11TT ATGTC1TCAC 1TGCACA1CT 1TG1CCC1CC 600

TTCCTCTCAT CCCTCCTCTC TCGTCTTTCT TCACA1TTCC TCCTCCPCCT TCGGCCCCPT 660

CllGiCCTCC TTGCAGCCCA TCTTCCCCCA CAT11C1TCA CClClCCTCA CA1GG1CCCC 720

ASTiCCATCT TCCTGGCCTT CCA1CACCT1 CTCClACill AiCTTCTTCT CCTCATGCCT 780

ITAilAliTT CCACCCCCT1 CiTCAllTAG TTCilCAACA TTTCTTCCCC CTCTCCCCCC 840

1CTTTTTACC TCCiATCCCT CA1TSA1CTT CCTCTCCACT CCCATCCCCT CCACACC1CA 900

CTTAlCGATT TCCCA

915 (2) INFORMACJE O SEQ ND No: 131:

(i) CNGSY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 915 pao zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (A) NLOŚĆ NlCl: pojidrGcza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) OPNS: /spis = „DNA (syntetyczny)

302

184 424 (xS) OPDS KEKWEN/JI: KEQ ID nr: 131:

CAGCAGAlAT ATAACATCCT AUTAAATACG ACAGAGAAAA CCAAUAUCGA AAATUAAAAA 60

CTUTTUCCAT GUAAGACAAG ACCrGCCCCA CAGCCAAGTA GATTUATlCA GAUCAAAATC 120

GCATCCGClA AGGACUAUCl AGGC1TAAGG GATUACAACC AAAAACCCCA TGAATGCACG 180

AGTUAUUACC TCAACAUTCC TAGACCCATA CCTATGGGAT GGU/GATlUG GUAAAGATAC 240

AUCAACGACA AGAAATAGCC UCACUlCGAG GUACAACCAT AGGUGUCCCA CATGATUTTA 300

GArAGUlTAC GGGACGCUAC CUACACGCCA GAAGAGCAAC GAUAGCUAUA GGACUUATGG 360

GAGUACCATA ACCATGATTA CAGTTAGATG AGGCAAAGUT ACAGGAA1AA AACCUCCTAA 420

ΤΑΤΑΑΑΤΤΤΑ ΑΑΑΑΑΑΑΑΑΤ UTAGATAGAC UGATACTAGA GAGACGAUCA GGGCCUATTG 480

CUClATrUGA CAAAGCC1CT UlCCCAGCTA AACUTATACU AAACGAT1CG ACACUTUCTA 540

GGATGCAGlA A1GUA1GUCT UATAUTAGUC GCCTCAGTUn GAAGCAGTGU TTTGTTCGTG 600

ATATCGGUAT AUAGCCATUl CTAUGTGTCC GGATGAGGCC UGG/AGGUGA CAUTATGATT 660

GGCCCAACUA GGAGTTGATA UUGACCGAGA AAACAGACGC AAAAGAGAAA TUGACTATTA 720

ATUCGGGTAA CAAAGGCCAG AAlCUUCACU GGUGCCCGGA CCAGGACrGG AUAAACAGAG 780

AAAAGGG1AU TACUCAlATG GAUTAAACGG CGUTATGATU ACAGGCATCG GGCTlATAGA 840

ACCUGAATGA UGACATGUTT GAlTUATGAG AATUCCGGGG AGAUGAUCAG UA1AAA1T1T 900

GAClAUCTTA ATTAC

915 (2) INFORMACJE O KEQ DD Tr: 132:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(C) DŁUGOŚĆ: 915 par zasad

184 424

303 (B) TYP: kwis eGkirSeowr (T) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: ILeLowa (SS) TYP CZĄSTECZKI: Seny kwas nukIeSnzwy (A) OPlE: /opis = „DNA (syntetyczny) (xS) OPIS SEKWENCJI: EEQ ND no: 132:

CTTCATTCTG ttacgagtag tcacagagcc acatggtatg caactatatt atttttattt 60

GCCTGCCATT TCGCTAATTG CAAGGACGAA- (GTCCTTTGA GTTTCATACA TTTACATTCA 120

TCATCGTTGC GTTTACATAT TTCTTGAGCA CTGCCTCGCA GTGCCCCCAC TATATTACAC 180 acctatctac catgtttgca ttgttaattg tttttttttt CTCTTATTAT TCTATTTCTC 240

TCATAGTTAA TTCGTGGTAA CCTACCTCAT GTGTAATGCT GTTATTCCCG ATGTCTTGTT 300

GAGTTAUGGA TTTGTCGCTA GCTTTGTCGA TAGTATTATA GACCTTTTTT TTAAAATATT 360

TTCATGCACT TCCTTGCGTT A1TTGTGGTG AGTCATTTAT TTTTTTTTTT TACATCAGTT 420

TATACAGTGT TAAATCTUTT TTGCTCCTTT cttccccatg gtgtttttut atgctccgca 480 (TTTACATCC (CCACATTAA CCTGTGTCAT GTATCCTTAA TATTCCTTTT GTTCTTCTAC 540 caattcagtg tcctctcccc gtaatgtaga tttatggttt ctgtcttttg ttgtccccgc 600 tggttgctgt gccctttgtg tttttcgccc ctttgttctc ctttttttau cgtttatttt 660 tttttatacc ctgtcgttat (CTGTGTAAT tgttttacgt ttattttttt caatctttca 720

TATTTCTTTT CACCCAACCG cttctttttc agttgcctct caccctttat tttttctccc 780

GCAAAGTTTC CTAATAGCTT TTTTTTTTTT TTTTTTTTTT TTTATTTTTT CCGTTTTGTC 840

304

184 424

SS1T1GTTCT iriSTTTTTA TGTTTTGTST CGTSGlTTGS GTTllllTTT SllllCCTCT 900

TCCTTlTTTC TCTT1

915 (2) INFORMACJE O SEQ HI No: 133:

(i) CECiY SEKWENCJI:

(C) E>ŁUGOŚĆ: 915 pao zasad (B) TYP: kwas nukleinowy (G) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nuklrinowy (A) OPIS: /opis = „INA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ II no: 133:

ITlSlTCGTC TC1C1GTG1T GGlTGASlTT STATAlGlTC CSlllSllTT STTTGG1TT1 60

TClTTGGSTT TllATSlCGT GC1TGCTGS1 GlTlCTCTCS CTTTGSTGGC TTlSClTTTT 120

TllTTCTCSA ATTCGGAGAG CTTGGT1CGG GTlllTllll ATTCAlSCSl CGTSCTAGGT 180

S1TG1lC.11 CCTCTTGT1S CTCTG.1STT1 111CC1TTTC T1GTTSTGGT TlTlTTTCTT 240

TlSTACTClC CClCTllCiC GGTAGGTlAT CllTilGAll TTTGGGCSll STTGATlTGT 300

CllTTllTTl TTTTTlSGTA AlTlTllGil TllTllllTl CllCGllTlG IGClGGTTCT 360

TTlllTllCT TGCTCGGCTT 1GTGTTCST1 AlTlSTTTlC T1TTTGTG1T 1SC1GSCTTC 420

CllliCCTCG TlCSTACGGT CGCGGATCCT SlTTCGGlll SlCGGilGAT TC1G1TGGGG 480 llllTTlSGG T1T1GG1T1T ITlGGGllTS lllSTTTCTT TGTTGGSGlG lllGlllGGC 540

IClTGGGGlT G1TTGGG1TT TSGTTGCTCT TTSTTTT1TT CGGGGT1GTT TTTTGGSCAG 600 llTTlGTlGT CTTTCGllGG TTCGGlGllT TTTTTTllll TTTllGTTTG ITTSTAGGGT 660

184 424

305

GGCGCCGCiG 720	CTCCCGGClG	1CCCTG1GCC	CiCTiCCTCG	IChiCCGCCG	CCTGCTCCG.G
1CGGCGG1GC 780	CTTTCCTGCT	GCilGiCGCG	CGG1CCGCCC	1C1GC11CCG	CGAGTTCGGC
GGCC1GCCG1 840	CTCCCCCTCC	GCCTCCTTCl	CGCCTCCCC1	1CCTCGG1CG	GCTCCTTCGT
1GC1CCCC1G	1CC11CGCC1	CAGCC1GG1C	CC11CCCCCG	CGGTTCCCCC	TTTGCCTACA

900

CCTGTCCTGC TGCC1

915 (2) INFORMACJE O SEQ II Nr:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 915 par zasad (B) TYS: kwis eskleierwy (C) ILOŚĆ NLCL: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: liniowi (ii) TYS CZĄSTECZKI: ieny kwas nukleinowy (A) OSLS: /opis = „DNG (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID no: 134:

CClGGCTCCl 60	CTT1GA1CG1	CGCTGCTG11	G1GCG1CGC1	TTCCGCGCCC	GCCTCCCCCT
TrGCICGGCC 120	CGGCCCCCC1	CGCTGTC1GG	CCC11C1C1G	TCC1GCTCCG	CCCGGCCCTT
C1GCTTCCCC 180	AcciCGCcac	C1TyG1CGGG	GCTG1CGGCG	TCT1TGGCGC	TCCATCAGGT
GTT1GGGCGC 240	TTCiTCllCG	1CTCCTACCC	TClCTCCCCl	CTGCCGCCGC	CCCACCCTCT
ccacciccaa 3 00	TCT1CG1CTG	GGCAGGT1GC	1GGCGCCCG1	TCCGGGGCGG	GCiGACGTTC
1C1C1CG1TG 360	CCCTTCGGCi	TGCGCTGGTG	CGGCGG1GCC	TTGTCGGCCG	TGGAGGCTCC
CCCGC1GCAC	CG1C1G11CC	GC1CTC1CC1	G1CGGCCCC1	CTCC1CCGTC	1CGGGACTCT

420

306

184 424

TCCGAGCCCT ClSSClCGll CCTTA1TCT1 llllGCCGll AGCTCTllSC llllCGCATT 480

SlllTlClll ICGCCGCill AlTClTCCTT TCTTC1TT11 ICCClCCClC 11TA1TCT11 540

1CGCAACC11 1ACCTACCC1 TTCCTCATCT TCTTCCillT SlTTTTTTCi ITCCCCTTlC 600

CTCCTTCTCC C11TTTC1T1 llGGGTGTCT ICSCTTCGlT CCTTCTTATA CCCTACCCTT 660

STSCTCTACA llCiCTTCll T1CCCTTCTT TClCCTCTTT AATATCCCTC CTlllCllll 720

1C1T1CTCTT CCSTCCTClT lliCCilCGT ATCTCTTGTC TCCCiCClTC TGCTSCTCTl 780

1T1CCCTCC1 TTCCCCTTCC CTlTlCGGTT TlACCTTCTC ICAAACTCTT TTlTCAGTCG 840

TAT1CTTCCT ACAlCACiCC CACCCA1TCG TTlClllCCG ATTTTCTGTC CCTCTTTCCC 900

TC1CC1CTT1 TT1T1

915 (2) INFORMACJE O SEQ ID No: 135:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 915 pio zasad (B) TYP: kwis nukleinowy (C) NIOŚĆ NICN: pojedyncza (D) TOPOLOCISt: liniowa (li) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nlk1eSnoay (A) OPNS: /opis - „DNA (syntetyczny) (el) OPNS SEKWENCJI: SEQ ND no: 135:

CTCiiCClTC 60	TTSCCGClSC	TlACGSGATC	CCATATCCTT	ClllCSllTC	ATTC1TATTT
TTCTTCCSTT 120	CCCCCGATCT	ClATGCCCCC	lATCTTCTTA	TCTTClTCll	TTllGATGTT
TlGTTCCTGC 180	CTCCGlllSi	CTTCCTCCll	CTCCCGASll	ITTClCllll	C1TCCTA11C
ICTCSlCCSl	CCCCTGlTSS	TCTCCCATTA	T1CTTCTTTT	TTCTTATlCT	TCTCCTTTCT

240

184 424

307

TGATATTCeC 300	GTATCAGTAA	TUCAGGGGAT	hGTCACGAAh	hCTGGGCACA	AChGATGCGC
hAhChGGGTA 360	CCTTGUAGTA	ATCTCATTCA	CeiCAGTACy	GAGAGGTCGG	TTUATGTTCC
TTyyGGGiic 420	CGGCTTGGCT	AACCGChATh	AhCACCCCGh	CGCCTTCGhT	TAAAGACTCT
TAhAAATCTC 480	CecACAGyyy	AG1ATGG11A	ATCCAGAGGG	ATGAGATTAA	UTTATAGGAT
AGTCGGGUAT 540	CATTGCCTTT	hTTTTTGGAG	GGATTTAhyy	TAGCACGGGT	ACAACTGGGA
CCTACGGGCT 600	GChCAhTTTh	CTTGGTGTAG	CGCGChGGAC	AGGTCCGGCh	CCTCCGGGGG
GTCThGCAGA 660	GCThCTTGGG	ACTCTAGThG	CTCTTATAGG	GCCGGATTAC	AGCTCACAAT
yAhTTClAhG 720	CCAhChhTCG	TATCCGTTAA	CACChGThTT	yAGGACAGGG	TCUGGGCCTG
AhTTGTTTAT 780	GAGGTCCTAT	TChCGTCGhT	AGTTCATGTT	GCAACAhGGC	ThChTCTTTT
CTGCTGGChT 840	GTGCCCTCCT	AUTCCGTATG	AieCTGCThT	GGTACGCCTA	TGhCTTGCAT
AGCATATTGA	GTTAUTGCTC	AUATUhGTAT	CTThhGCCGA	TATTGGhCTh	TTTGTThTTT

900

GhGTATGTTA GChhT

915 (2) INFORMACJE O SEQ ND Nn: 136:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(1) DŁUGOŚĆ: 915 par zasad (B) TYh: kwas nukleinowy (T) NUOŚĆ NiCl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (iS) TYh CZĄSTECZKI: inny kwas nukluSnoay (A) OPIS: /opis ⁼ „DNA (syntetyczny) (xH) OPNS SEKWENCJI: SEQ ND wr: 136:

308

184 424 —CTSACPGCT CTATlAG—lT C—1TG1GAPT 1P1C1PC1GG G1A1—1—1CC 1CCP—CACCT 60

PGTCPT—lCC CGAGCaGCCT G11P—1GGG1 G1CGGCPCP1 PCCT—lTG—1 CCT111CCTT 120

GG1CPGCC11 1CCTGGa—1G GTGCGPiaG— —CP1GC11—1 1CPG1GAlAG T—C1PC1——T 180

1PG—1G—C11 PTCTTC—T1A PGTCC11CC1 P—GCGTCCCG GTGCC1C—1C CGG1CCCTGP 240

CG1C1PCC11 GC1TC1PC1G G1AA—GPG1C P——C11—11G PCCG—lliaG 1CT—1CGTPC 300

T1TCPGTTP1 CCCTT—1GC1 1TCGC1—G11 C11C1GT1C— G1—1G——CG— TG—1G—CTGC 360

GCT—GT—GlC GTTCP—GTCC AAPCTCTlCP 1GC11CCCGT CTCCTGC—PC T111—A1TCP 420

ClTAlATCTC ClCAClG—GG 1CCG1CPGGC CPGTG1PCCG GCCTG—G—Cl GCPPTGPTG1 480

Cl—GPCCTPC PCCTCGPPGG ——GGGT1C1G l—GGGGCCT— —A1CGC1GCP PGCGGC1C1— 540

G—C1—G1CC1 CATCPC1CA1 GG1PGCCGAT —GC1PCPTGC GG1GCTTCC1 1C1CCTGCTC 600

Cli——IGlGl TGCITGTCCT G1T—CPGGT1 ——1——GPCG1 GCCPCP—C—T C1G——G1TGC 660

GGC11C1TG— C1TCTGCC1C PCCGCCGGCT T—P—1CCGCG G1TTCCTAGT T1A1CTTCTT 720

CTP—1CTCCC 1TGTCCPTCA C1GC1G1GTG 1—CG1GPGGG C1T1TGTTC1 CCCPGT—CCT 780

1C1GCPTTCC PGCT—CCTGC P—PT—1CPPT 1—CGG——Gl— CAT——GlllC CC1G1TT—1G 840

GlGaCCaGGG CGC1——1C1P PCP1G—1GC1 —P—1CCCGTG TGCT——1G—G 1TT—1TTGC1 900

GC1C———TAC A1CTG

915 (2) INFORMACJE O SEQ ND No: 137:

(i) CECSY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 915 pao zasad (B) (C)

TYP: kwas nukleinowy NLOŚĆ NNCI: pojedyncza

184 424

309 (D) GCPCLOUNA: iSsSowi (SS) GYP CZĄSTECZKI: Sssy kwis eunUeSeowA (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xS) OPlE SEKWENCJI: EEQ ND so: 137:

cctaattttt 60	TTATAGTAAT	CUATUACATT	(TGTATCACT	tgaatgtacc	ACCTUCGTCA
tttttttatt 120	ttaataacca	taattataga	UATCTTTCAG	TCCTCGTUUA	CTAAAGTTTA
ttatgtttga 180	gtctuuatat	cattctggtt	tttuttaaug	ACAAACGAAA	TATATTGAUT
gttuattcaa 240	TATTATATGA	TCGCTACCTC	TUTCTCTTCT	CAUCTATUUC	CUCACTTTCT
TCATATTCAC 300	TTATCAACA1	utcatutugt	TUUTACGAAT	tctttuggga	ACTUGTCTTC
tatttcttgg 360	ctctatautg	aucttauuaa	caatactgct	tauatuucuu	TUUAUUTTCT
ctuuuttaat 420	ttacttuact	AATCTCTGTT	GTCGATTCUT	CTCCTTTUAC	TAAAUCATCA
TGTAGGGTTT 480	CAGATATGAG	AACTTCUTGT	TTTCTATAAA	UCAUUGTTAC	(TCTCATAAT
tgttctgatt 540	CTGTTTTTCT	UAUCTTCTAl	TGTTTCCTCT	GAUGGACAUT	ucuttttctu
gtttgataau 600	(((AUCTTCAT	cttttutttt	(TUTAITTCT	ucgatatutc	ATCATTTACA
ctuttttctt 660	tgtgtcaccu	atattacact	GAGTTCTTAT	uttgcttcca	TUACTATTAC
atcgtatatg 720	ttcautuctt	AUAUUTACAT	TTTTTGCCTG	CATCTUTTCA	cTaucctuca
ttuugcttta 780	ttttgguaug	aautgcagtt	TGCATGGAGU	ataccagttc	ACAUUGTGTT
tttutaucat 840	ttattcttct	uctuugtuua	tttattccau	tacuttcata	ACTUUUGTTC

(TATCTCATT tgtttcatct uuuttguttt tcgutataut tccutttttt ccttututcc 900

310

184 424

AGUAAGAGGA G/AGG

915 (2) INFORMACJE O SEQ DD Tr: 138:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 915 par zasad (B) GYO: kwa? nukluinowy (A) DUOŚĆ TlCD: pojedyncza (D) GOOOUOADT: USniowa (SS) CYO CZĄSTECZKI: Snny kwas nunluSsoa' (A) OPDK: /opSs - „DNT (syntetyczny) (xS) OODS SEKWENCJI: SEQ DD nr: 138:

ATTTCCGAGG 60	CGAGTAGATG	CAAGGAAAGG	AGATAGTATG	GAAAAACACT	ATTGATAGTG
GGUTGAGAGG 120	CAAA/ATTCG	TTCGAACAAA	ATCAGTGTGA	GTCGAAGAAA	TTGATATAGG
GCAGGGATAA 180	ATTGAATGTG	TGGTCTAAAG	GCGAGACTUA	ATGGTCATTT	GATAGTACAG
AGTCAGGAAA 240	GGTGGTAGAT	GTGTGATTTA	GAGCGGGTTG	TGATCAGGAC	TGTATTTGTG
AGAAAGATAA 300	GTTGTTGTAC	GCTTAUGGAT	GAGCATGAAG	GTTGACTATT	ATGGTTCGGT
GAGGGGGGGA 360	CCTGGATATA	AATATAGGAA	TAATAGGAGC	GAGAGCUTAA	GAATAATGCG
TGAACGATCG 420	AAGTGAAG/T	AAGTGTGATG	AGCTAGGTAG	TGTTGTGGGT	GAAAAAAGTG
TAGCATGTGG 480	TTAAAAGAAA	CAGATGTATA	GTGTATAAnn	AGTTTAAGAT	TTGCGGTGGA
ACGGGAGAAG 540	ATTGATGATG	AAATCAGGGG	TCGGGTTGGA	GATGGGGAAA	TAAGGCTATT
GGGGGGCGTA 600	AAAAAGGCAG	TATTAGAGTA	GTGTGTCGGT	TGTCGACGGA	GATTCGTGGA

AGGGGGAGTA TTTGATGGTA GGATGTTGAG AGCTGGATCA GTAAACCAAC TTTGGATGGA 660

184 424

311

GTGGTTCGCC 720	CTTTGCC1TC	GCCTGTCCTG	CTGCCTGCTG	TGGTCTTTCC	CTTGGGAGC1
TCGTGG1CCC 780	TGTTGCCGGC	GlCCAGGGCG	CGGGGCGTTC	TGCGGGCTC1	CGCCCTTCTG
CTGGGGGGGG 840	TGGTGGCTGC	1CGGGGGCGG	CTGGGTCCCT	CTTGCCTCTC	GTCCCTCCTG
GGCCGGCTTT	CTGCTCCGGT	CCGTCTCCTC	CTTGGGGCCC	TGCTGGGCCT	CCTTCGAGCC

900

CTGCTTCCTC CACAG

915 (2) INFORMACJE O SEQ LI Nr: 139:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 915 pau zasad (B) TYS: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: liniowi (ii) TYS CZĄSTECZKI: inny kwas nukltieowy

(xi) OPIS	(A) OSLS: /opis = SEKWENCJI: SEQ II	„DNA (syntetyczny) eu: 139:	tt
CCTlGCTCCT 60	CTGTGCTGTT	CG1TGGGGTT	GTGCGTCTCT	TGAGGGGCCC	TCCTGCACCT
TTCCTGGGCC 120	CGlTCCCCCT	C1GTG1CG1G	GGCCTCTCTT	TCCTGTTGGT	CCGGTGCCTT
CGGCTTCCiG 180	GCC1GCGGGG	CTTCGTG1GG	GCTGTCGTGG	GCTTCGlTCG	1CCCTCGGGT
T1TCGGGC1G 240	TTCTTCC11G	TCTCCGGCCG	TGTCTGCCCT	CTGCCTCGGC	CCCACCCTCT
CGTCGTCCTT 300	TC1TCT1C1G	GGCGGGTGGC	TCGCCGGCTi	TCCGGGGTGC	CC1GACGTTC
1CTCTCGTTG 360	CCCTTGCGCG	GGCGClGGGC	CAGCTGTCCG	TGGTGGGCCG	TGGAGGCTCC
CCCGGTGGGC 420	CGTCTGGTCC	AGTCTCTGCT	ATCG1CCCCT	CTCCTCCCTC	TCGTGGATCT
CCTG1GTCTC	CCAGCT1CGC	TCGCGGGGlT	CCCGTTGCCT	TCTTCC1GTC	CT1CC1GCGC

480

312

184 424

TT1TTTTCAC CAGACCTlTl TTTCTTCGTG CTTGTC1GCC CiTGGlGGGT TTCClTTlli 540 illTTGCCCl CTlCCCGCTT TTTCCCTCT1 CCT1CTT1CG IGCTCTlliT TTCT11T1CC 600

TTCTTTT1TC 1TCTTT1TCT GTTTCACACC GGGCTCCCTT G1TCCTCG1C 1CTTTCCCCT 660

TT1TCTCTCC TCCCTTT1CT CTCTCCTGTG GGCTTTlCGT TilCCCASTC GS1GSTCCC1 720

ITCllCClll GGAGllGlCl CilCGTTCTG GC1CC1CTCC TTCTTTTGTT CC1CGCCCTC 780

IClCGClClG iCillTllTT 1CCACCCACT· TCCTTCTTCT CTCTCCCG1G CGllCTTTCT 840

CCATA11TCT CCTCTTCTTT TCGGCCTTTC CGGCCGCTTG TTCClCGCGC 1TTTCTTCTC 900

GlCilTllll TTCT1

915 (2) NN/ORWATJE O SEQ ND No: 140:

(I) CECHY SEKWENCJI:

(1) DŁUGOŚĆ: 915 pio zasad (3) TYP: kwas nukleinowy (T) IIOŚĆ NNCN: pojedyncza (D) TOPOIOGNA: liniowa (II) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (1) OPNS: /opis - „DNA (syntetyczny) (xi) OPNS SEKWENCJI: SEQ ND no: 140:

1CTAATCCTT CC1CA1CCCC TCATGAGATT ATGCATGAGT TlGllCCATT 1TTC1TACTT 60

TTCTCCC1TC GiClTAGTTT TAATGACCAl CACGTTTCTG TTTT1CTC1A TTCAGCTCTT 120

TlCTTCTTCC CTTCillill CTTCGTASGG GTTCTTAGGA ATTTAlAlCC CCCATTCCCT 180

1TTCCC1TA1 TCTCTCCT1A TTTCCGGCCA TGTCTGCTTT CC1CTCCCCC TlGCTGGTTT 240

184 424

313

CGAGGGGCGG 300	GGCCGCTCC1	GCTCGCGGCT	GCGGAlCGAG	GGCGGGC1AC	CGGGGCGGGG
GACGTCCGGG 360	GGGTGGGGGC	CGGGGAGGCC	GCGGCGTACG	GAGGyGGCGl	TGGAGGGGCC
ccyycTGsiC 420	GGTGTGGTTG	CACCGTGAGT	CTCCCCCCGG	CGGGGCCGGG	TGCAGGAGTG
CAGAGCGCCC 480	CCCSGGTGGC	GCGCCAGGGG	aggggcctga	GCGCTGAGCC	CCGGTTTCGA
GGACCCCGGC 540	GTCCGGCGCT	cggggcagcc	GGCGGAlCCC	CCGGCGGCCG	GGCGThCGGG
GATGGCGCCT 600	CGGGGGGCCG	yCGTGTCCGT	GCCGhGCGAy	GTCGTAGTCC	CCGGCGGTGG
GACTTCCATG 660	GCCTGCGCGG	CGCGCGGGCC	CCGTGTCCGG	AGGChCCCCG	GGGGGCGACG
CTTyTCCCGG 720	GGCGCGGCGC	GGGCCTTGGG	TGGGGGGAGC	GGACGACCGC	GAGGGAGGAG
GCASCGGCGG 780	GGGCGCGGCT	GGGGCCAGGC	GCGGTGCGyC	CGGAGGGGGT	GGGGyCAGGA
cggggcggac 840	TGGGCCGGCG	GCGCCGCGGC	TGGGTCGGGG	GGGGGCGGGC	GGyAGAGGGC
CGTCGGCGCC	GGyCGGTTGT	GGCGGGCCGG	GGCGGlSCCC	AGCGCGCCGG	CGGGCyCAGG

900

ATTACGGCGG GCCCG

915 (2) INFORMACJE O SEQ II No: 141:

(i) CECiY SEKWENCJI:

(A) IŁUGOŚĆ: 915 pao zasad (B) TYP: kwas nuklrinowy (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) OPIS: /opis = „INA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ II no: 141:

GCGGCGTGCG GGGGCGGGSG GGGGGCAACG CGCCCGTGCC CAClGCCCCT CCCGGCACCG 60

314

184 424

PPGCG—G1GC 120	C—AGCAlCCT	CllP—lCGAl	TACGTCPGP1	PCCPG1PGG1	CCG1G1CCGP
CG1GPTCC11 180	1GCT——1—1G	CTPC—T11GG	TAPiTCaGGl	1CPT1TA111	PGC1TC1GGP
IPPllGGCai 240	GGCTPC1T11	TCTCC11CC1	TTTCTGCCGP	CGGCC1CGGG	CGC1CCCPCT
C—1G1PGCAA 300	PClTClTCll	TTG1G—P—CC	Tl—CAG—11G	PCCGi—1111	1CT—1CGGGC
P1PGP——PG1 360	CCCTTG1GC1	llCTClG—Al	ClGCAGTlCG	G1G1GGGCG—	PG—1GGCGGC
CCG—IPGiaC 420	C—PCTGGTCC	11TGPCP1CT	1TA1GCCCGG	CPCCPCCGTG	G1A1—11GGG
G1PAG1PCGC 480	CAiaClTGGC	C1PCPTCCGT	CTCTTGG11G	1CCT1CTCC—	11—SaiTGGG
CGPTPCCPGl 540	P—CTP—T1G—	ii—ipccicc	CTCTGCGTC1	—iGiATGC——	C11G1T—1CG
TCPCCCGCGC 600	CGCCTTCTPT	TT1CCGGCG1	1TCCTCATP1	AAGT1CTTCG	PG1CPCCC1T
GTCGGGG1C1 660	—C1G1CT—1T	CAG—PGCCC1	TlTGTTGlCC	CPTTGCCP1G	1CCTGTCCTG
CTGGCP—GGG 720	P—11CTTP1T	CPTG——1G11	TK—GAllCCC	IGaTIGIGGl	G1CC11GGC1
C1——1G1PGG 780	TG——11C1TP	G1CCCPPCGG	CTGG1G1GG—	PG1TG1C1GC	1CGG—G1A1G
CTG——1CCG1 840	CPG—CCTCTC	1TCCCTCCTG	ii—Γΐ—cppp	CGGG1C1GGG	CCGTGTCCPC
CGT—GG—CCC	TGGlllTCCP	CCTGGG11CC	CATCTGCCPC	C1G1GG—GAG	G1CC1C1GCP

900

ClCAlCGlGC GCAlP

915 (2) INFORMACJE O SEQ ND No: 142:

(i) CECSY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ2: 921 par zasad (B) TYP: kwas nukiriGowr (C) ILOŚĆ NNCI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa

184 424

315 (SS) TYh CZĄSTECZKI: inny kwas npkluSioay (A) OONS: /opis a aDEA (syntetyczny) (xS) OPIS SEKWENCJI: SEQ ND aa: 142:

GTGACCTGTT 60	CGAhACGGAh	CGAhGAAAGG	ATACATCeCh	CAAATAUACT	ATCGGCACCG
hhGTTGTATC 120	CGAACeCTCT	CeihTATGAA	GATThTGChA	TCThGACTGA	TCGAAATCGG
GATTGCTGAG 180	CTTUTAGAGT	GTCTTCAGGU	ChGTClAGAA	ChhAUAAACh	GCAhCAGGGA
GGAGGTllhC 240	ChGCUGlCCC	GTTCACTATG	TCTTCTTTTh	UCCACTTCCG	CACCCGCGCG
CAGCTCACCA 300	TCATCAAGGC	AyGCGATTGG	TAAUACGGTC	TGyAAACATh	GACGGhCGAh
GGGhGATCCC 360	TGATCAATTG	CATGAATAAT	ATTCCGhAGA	TGGTTGCyGA	GGCGCTCCGG
TAATCUTCTT 420	TGCCAATTGC	GACTATCCAC	CTTTTGCCTC	CUTCTAAAGA	AhCGTAGAAA
TChCCCllTA 480	CTGATGhhCA	TCTTTGUTTh	ACACCTGhCC	CUCTTTChGT	hGGGGACGGG
AGCCGGGyAU 540	1AGGGAAAAC	CCATAhGGAG	GATACCAAGG	CACATGACCh	hTGGGGAGCA
GTGATCCTGC 600	CTChGGATGG	AUhTACGGTA	GCACTGGGAC	A1CTGGUATT	TACGGGTCGT
GTATCCCTCC 660	CTGTTCAGTh	GhThGGACAG	ThCCUGCTTC	ccchGGTyyy	CCGGCAGAGT
CTTTTGGGAA 720	CTTAGTGGTC	GCCATAGGGC	AUGCCCACAG	CTCACAAGTA	hCCClCGGCT
AhTTGTThGA 780	UTGGCCAATA	TCTGTTTTTA	GyCACGGhyC	ThTGCCTGAG	GCGGGhAGGA
GUTTCTACTC 840	CThGTThTAG	TGAACGTTGC	GTTAATTGCG	GCAccchyyc	TGCCCCAGCG
TCTCTTGChh	IhGACCGCTG	ATCCTTCATT	CAACGTCGhC	GTGACTCTCA	hGhCTGGCAT

900

316

184 424

AUGACAGTCA GGTAnGGTTT A

921 (2) INFORMACJE O SEQ DD Tr: 143:

(S) CECHY SEKWETCJl:

CA) DŁUGOŚĆ: 927 par zasad (B) CYO: Owi? suklrSnowy (A) DUOŚĆ TICl: pojedyncza (D) C000U0G1T: ISnSowa (SS) TYO CZĄSTECZKI: Snny kwa? nukluinowy (T) OODK: /opis - „DTT (syntetyczny) (xS) OODK SEKWENCJI: KEQ DD nr: 143:

CGGAAAGGGG 60	TGAGAAGATG	TGAGAAAAGG	AGATTGTTTG	GATAAAAATC	TTTGA/CTTG
GGATGCGAGT 120	TGAAATATTG	CAAGAATCAA	AACAGCGTGA	GTCGATGAAA	CTATCATTGG
TCATGGTAAA 180	ATCGAAAAAA	TGGTAGAAAG	ATGAGCAAGA	TCGGTAAAAA	GGTAGATAAG
AGGGACAGTC 240	CGTGGTAGAT	GAGATATGCA	GGGTGACTCG	TGACACCCAT	CAAAT/AGAG
GCATATGGAA 300	GACGAAGTAT	AGCAAAGCAG	GAATCAAACG	GTTGAAAAAA	AGGAT/AGGC
GAGGT1UGGA 360	TTCGGATACT	TnTGTAGGAA	TTCAACGATG	GTAAAAACAA	GAATAATGCC
TGUAUTCAAG 420	TGGTGGGGTT	TAGTGTGAGG	AGTAATTGGG	tgtttatgct	GATAACAGTG
TAGAAATGGT 480	TTATAAGAGG	ATTGTTATTG	AGCTGGTGAC	TGAGGAGCGT	TGGGTATGGA
GGAUCATUCA 540	AAACTCTAAG	AAAGAAAATG	TCGACTCAGA	ATTGGTGAGG	AGTTAGATTT
GGGTGGAGCC 600	TGGAAAGATG	AAACGTAGGG	GnATCCCCGG	AATTTACGGA	TGG/GATTAT
GGGGGGCCGT 660	ACTGGGTGAA	AATGGGTGCG	TGTGGTTGGG	AAATTCGACT	AAACTG/TGG
CUAAAGGACG	GGGTGTTATA	GCGGAGCATA	AAACTGTATA	TAAAGCTTAA	GGTTTGAGGT

720

184 424

317

CTAGATTACT AACACTTGCT ΤΤΤΑΤΤΑΑΑΤ CTTTCTTACT TUAAUCTATT (TTAUUUTCC 780 accctcattc tcatatgatt ctttctcaat tutugcaacg attctacctc gucuttutct

840 tcattaugct tccuautcca cautgggttu ttttgatact cccaauacct tcacgucaua

900

CTUAUCTAUT ucccatauua acatcta

927 (2) INFORMACJE O EEQ ID Nr: 144:

(S) TECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ:: 927 pio zasad (B) TYP: kwas sunlMiezwA (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: ISniowa (SS) AYP CZĄSTECZKI: Sney kwas eunUeLsowA (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (ii) OPIS SEKWENCJI: EEQ ND so: 144:

CCTAATTUTT 60	ctatagttgt	CGAGAGAGTT	(TATGTCACT	TAAAUAUACT	ACCTUCACCT
ATACTAGATT 120	ctaacaactt	CAATUACUAA	UATATCACTA	tccttaatua	CTUAAGCCAA
CUGCTTCTAA 180	accautagat	ctttttaguu	tctttcaaua	ACAAAUAAAA	TUCATCAUUT
aattgtutaa 240	TTCTTCAAAA	ACTTCGACCA	tttttgccct	cttctactuc	ctcattctct
TUACATCCAG 300	TCATCATCAA	AACCAUTUAT	ttucaataat	tccuutaaga	(TAUATTTTC
TATTTUUATA 360	CCCTTGAACG	AUCCTAUUAA	caacattacc	aatauuuctu	tatatuctct
TTUTTTUAAT 420	cuacatutct	AATTTCTACT	ATCAACCCUT	ctcctccttt	TAAAUAGTCA
CAAACATTTT 480	TCAACATUUT	cctucttcct	rCTGTTCACT	ttaucaatuu	AAAATAAGAA

318

184 424

ATTTACATGC IGClCGCCCC CCTCTACCCT GTTTTlGCll TAGC11TCTT CCT1TCC1CC 540

GGCCCllTGC TGCTGCGGCC CCAATTCCGA TCCCTTTCTT CTTCGTCCTT TGTGGlCCli 600

CTCCTTlCAC GGCTCCGTTT TCTCCTTCG1 iCCTTGCCCC CTTTCTTTG1 CACCTCCCTT 660

CTCTT1CCGG CCGCGACCGT C1CTCACA1C GATTTTllCC TCATCTTCCT ClGCTTGTAS 720

CCTTTCTTCT CGGCAAAGGT iGiTTTCCTG 1T1TTTCT11 111CCTCC1T TCTTT1T1TT 780

A1C1G1TTCC GCGGCA1C1C GCGCClGCTl GT1TTTTTC1 TCTCCTTT1T TTGTilGCTG 840

ClllCTCTCG CTGCGCTGTT TCCTilTTCT CCTGTTGTTC 1G1CG1C1CT iCGCGllTCG 900

CGCCllCTTG GCCCTTTCTT TGCGTCT

927 (2) NN/ORWACJE O rEQ ID No: 145:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 927 pio zasad (B) TYP: kwis n„kieSneas (C) ILOŚĆ NNCN: pojedyncza (D) TOPOLOCNA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (1) OPNS: /opis - „DNA (syntetyczny) (ei) OPNS SEKWENCJI: rEQ ND no: 145:

CTTcCCTiCT CT1TCATC1T G1GTG1ASTT ITlGCCTlGC T1C1GGC1GG 1CCTGTCTTT 60

TT1TCCGCCT CGGCCCATCT TCAT1CCCCC iCClCGCTTl TCTTGGTGGA CTCCSATTTT 120

CC1TTCCCAA ACCTGGAGG1 CTTTCTC1CG 1TTCCT11C1 IGTTGiSGAl TGCATG11GT 180

ITTCCCGGAl TTCTTCGT1C TTTCT1CTCC TCTCCCTTTC TTGCCCTGGT TCCACTTTCT 240

CC1TCCTCSG TCATCATCGC 1CCA11TCAT T11T1CCAAC CTCCGCCGlG ICTCATCTCT 300

184 424

319

1G1C1GCTTT CCC1TGTCCG GlCCCCGGGG CGCCG11GC1 TTCCCCCCCC 1CCCGGCTCC 360

CCrrCTGGCC CCTCiCCiCC caicicicci CICGCCCCll CiCCTCCClC 1CGTGGT1C1 420

CCTGGTTCTC CCGACGTCGC ICTCGGCiTi CCCTiCCCGl CClGCCAGCC CCCGCTCGAC 480

GGGCCCGACC CACTCGCCA1 1C1CCCCGCC ITCGCCCTTC 1GC1CCGCCC CCTCCTGGCC 540

GCGCCGGGCC CTC1GCCCCC CGCTTGCC1C 1CC1CCC1CC TCGGGCGCC1 TTC1GGTC1G 600

C1CCCTCTCC 1CCTTCGGGC CCTCCCCCiC C1CCTTC1GG CCCCCCiTCC iCCCCCGGGC 660 ccccccccAG ctcicgtccc icccggigcc AiCTiccirc gcttcccccc cciiciccic 720

CCGGGCGTCC CTTTCCTCC1 ICTTCTCGCG CC1TCCTCCC ICliCliCCr GCCGiTCGGC 780

ClCGCCCCCC GCCCCCiCiC 11CCCCTCC1 CCCCCTCCTT GT1GCC1CCC CGiCCTCCii 840 ccncircTTC ciicciccca icicchicac cicaiacicc Gccccicccc ccgggttcac 900

CCTTTGCCTT CGCCTC1CC1 CC1CCC1

927 (2) INFORMACJE O SEQ LI Nu: 146:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 927 par zisid (B) TYP: kwas eskluierwy (C) ILOŚĆ NLCL: pojedynczi (D) TOPOLOGIA: linirwa (ii) TYP CZĄSTECZKI: ieey kwas eskleierwy (A) OPIS: /opis = „ING (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ II en: 146:

CCIAiCTCCT CITTCTTGaI CCGIGTGTTT C1GCC1CGC1 TCGTCGCGCC GCCTCCCCCT 60

320

184 424

TTCATAGAAT 120	AUCAAACAAT	ATATGAGUAC	UATirAGAGA	GTGCAAGGGA	AAUACCAGTC
GlCAGGAACC 180	AATTUGAUCU	TCGAGTCAlG	1GTUTTTCCC	ATGCAGCAAA	GCAACGAUCC
AGTCAllTCA 240	TCGGTCUTCA	CTGTTCAGGA	TUTATGAAGC	GCGGCACCUG	AUGCTAACTG
A1CAATGACC 300	GGAGGATAAA	UnGAlAGGCA	TCCACCUCCG	GTGUAGACAA	CATCAGUGCT
TCTATC1GTA 360	AAAGCGACAA	AUTUGAUGAA	ACCACUTCAC	GAGAGUAGUU	TlCCCUAGGG
ATlCUTUCAT 420	A1TGGGCGAG	CACAGGGAAT	CTGCCAAACG	GCTGGTTCCT	TCAACACGTG
ΑΑΤΤΤΑΑΑΑΑ 480	TCCATAGUCA	GCGGACACGG	AGAUTATlGA	CAAGTGACAG	1GACGAUAGG
ATUCATCCUG 540	ATACCTTClA	AGCCGGGAAA	TCTTGUATCC	A1GAAGCGAG	UCCACAATCC
UCCGACAGUG 600	CCAGCAACGG	TGCTCCAGAA	ATGAGCUCCG	AGTCGGCCGC	CGACCGAGGC
ATAGGAACTU 660	UGCAGGGCAC	GAGAGGGAGC	1GCCTAAAUG	GGTGGTACTA	1UUAACUCGG
CACUACACAC 720	C1UACGAGCA	GGATCTGGGA	TGUClGGGAA	CATATTCGGG	GAGAUGCAAC
IGlAUTTGAT 780	TGAGGGGCUG	AUUAGGGTAA	CGATGATCAC	CACUGACAGC	GUGGAGTTAG
UCAAUGCAGA 840	TCGTCGGTGG	ACGUTTUAAG	ΙΤΤΤΑΤΑΑΑΑ	CGTGAGCGGG	ACGGCCCTCG
AGATUTATGC 900	AAGAGGCGAG	GACGACATUA	TGCAlGAAUC	GATGAGAGGT	TAAGAAACCG
AATCAAAAGC	TTGGGGGCCG	GGGTGGU

927 (2) INFORMACJE O SEQ DD Nr: 147:

(S) CECHY SEKWETCJl:

(A) DŁUGOŚĆ: 927 par zasad (B) GYO: kwas nuklrSnovy (T) DUOŚĆ NDCD: pojedyncza (D) COOOUOAIA: USniowi (Si) TYP TZĄKGE/ZKD: Siny kwas snklrinoay

184 424

321 (1) OPIS: /opis = „INA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ II no: 147:

GGllAGCGGC GCCCCllGlT 60

CllGllGCGG GGAlGlAGTC 120

GllGCCGGAl 1GGTGGCGSG 180 llCGlllGCl TGGTGGGCS1 240

GGiGSGGGAl TGClCACClC 300

ClTTCCJCGl GGGCTGGGGG 360

TTGClCGlAG GGCGTGGTGG 420

GlllSSCGCG G1SGGCTGGG 480

ICCGlllGCl GCGTGAGGGT 540

GGG1GTCGGG TGTGATCGGT 600

IGGGllGCGS GCGCGGTTGG 660 lllGGGlGCG GG1TGTGGGG 720

1CGG1CGTCG GC1GGCCG1G 780

IGGlGGGGCG GGGGGGGCGC 840

GllllGGGGG 1G1GGSGCGG 900

GTlGllGGCl GTGCG1GG1T 927

GGCCGlAlCT SClGlhTSGG

GCCTGlGlll llGlTCTCTA

G1GGG1SCGG IGCllCAAGC

TCTGGA1GG1 TllGlGCCCG

GGCAGllGCG CGlGSlGSCG

GlCGGAGGCl GllGllTAGG

SGTGTGT1G1 CTTA1GGGGG

CGAC1GG1AS CGGTAllCGG

GGTGClGlll lllllG.lGGG

GGTCGlGGCl GTTGCGGlCC

SAGGGCGGC1 GGlGG.lCAGG

GGGGTGCGiG G1GG1GCTGG

GGTGTGGlTG IGJGliTTGG

TGG1G1GGGG GllllCCTCG

GCGGGAGTGG GTAlAGGCGG

GCGGCGG

T1S1GAG1GG AGGTGGCCCG

TGGTG1TGG1 GGGASSGCGG

AGTTCGlSAS TGGCTGAGGG

GTGGC1GGGG GlGCGGGGCG

CGG1GG.A1SG SGGG1GGGGG

TCG1GGGGG1 TGGllGGGGG

GCCGCGGllG TlGAGCATCT

CGGCG1GG1S 1GG1GCGGGG

GCGCGGGGGl ATllGTClGG

CGGGGGlTGl GGGGGGTGGG

GGCGGAGGGG AlGTGCGGGG

GCGGlSClGl 1GGCTTGGCG

GGGGGSAGGG GGGGA1GAGG

ITSSAGCGGl 1GGCGCGGCG

GGGCCTllGG 11GGGGTGGG

322

184 424 (2) INFORMACJE O SEQ ID No: 148:

(i) CECSY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 927 pao za/ad (B) TYP: kwa/ nukleinowy (C) IUOŚĆ NIGN: pojedyncza (D) TOPOUO1NA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy

(xi) OPIS	(A) OPIS: /opis = SEKWENCJI: SEQ ID	„DNA (syntetyczny) go: 148:	tt
ICTGGCTTCC 60	CTGTGGT1GT	CllT—liATC	ATGClTCACC	TSAlCAiiCC	ACCTGCACCT
CT1ATG11CC 120	C1S1CAACCC	CilT—iClGl	TiCTTCCCTl	CCCTCiTCTA	CCTAiiCCCT
CiGCTTCCGl 180	ACGCTTGlAC	CCCCGTilCC	ICTiCCiiin	ACTCATISii	TTCATASllT
GPC1G1GCGG 240	TTCTTC1TG1	TCCCCAGCC1	TiTCTGCCCT	CTiCCACTTC	CICiCCCTCT
CiGCGTCASG 300	TCGTC1TCGG	CTAAG—TG1C	TTlCAiCiiT	TCC1T—AGAG	ACTClClTTC
TlTCTllCTl 360	CCCGniTCA	llCTCllllA	CSiCATCiCi	TAlATllCiI	TCTlCTCCCC
CClliTTGGC 420	C1TCTTCTCC	GlTCTCCiCC	iTCGACCCTT	CCCCTCCiTC	TilSCSITCT
CGTGGGTCCC 480	CG1GAATTTG	1CCC1CCCGC	CTCTCATCCC	CCCTTGT1CA	ICCCTCTTli
CG11TCCCTC 540	TCCTCCTT1T	ClCCCTCCll	ATCCTCCTTC	—GGCCCAlCT	TCCTCCAC1T
llCAK-ACCA 600	CiiCTCiClA	TllPCCCilh	iCClTCTCCC	TTAlCTTCCA	GC1CCCTCTC
ACAlllAATT 660	TTCiTTTCCT	TlCGCTTiCi	TTAilTTCCi	cccTCTiciT	CGTCTAATTC
TiCilCAlCC	TCTTCiACAT	TlCGCCCCCi	ICiCClCCCC	CTT1CTACCT	CCIiTTCCTC

720

184 424

323

AUCCCACTTC TCC1CTCCCC CCCCUCCCCC CCCA1CC1CC TUA1CCAUCT CCCAGATGTG 780

CACCCCGTTC CTCCCCCCUC CCCGCCTCCC UTTTCUUCCC CGCUCCGT1U C1A1TTTA1A 840

ACCCATATTU ATGCUACCAA 1UC1C1UUAC ATCCCUlGll CA1CTACCCC TCTTCTUGAT 900

G1A1CGACTG TCUCCC1GUT CCACCC1

927 (2) INFORMACJE O SEQ ND Nr: 149:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 927 par zasad (B) TYO: kwas npnleSioay (T) NUOŚĆ NITi: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (Hi) TYO CZĄSTECZKI: Siwy kwas npnluSioay (A) OPNS: /opis ⁼ aDEe (syntetyczny) (xS) OONS SEKWENCJI: SEQ ND wr: 149:

1CC1ACTTCT CTAGAACUCC ClACTCAGCC CCCCACCACC GAAA1A1ACC ACTTGCATCT 60

CTUCCGTCCC TGACCACCCG C1ACUCC11C UAC1CCCCCA CCCCU1GTUC CCGAieTCTT 120

CUCCCTCCAG ATCCUUC1C1 CTCC1CCAT1 UCCUCCCC1C ACCCC1AAAC C1TAGCATTT 180

CCTUAUTCAG TGCGCCTCAl CCCCCACCCC C1CCCUCCCC CC1CCCC11C CTCATCTTyT 240

CG1CACCCC1 GTACCACCCA UlCATGTTCC CTUCCCUCAC CCCUTT1CCC CCTTACTTTC 300

CAGCGGCTCC CTCCCTATCA AUCUCATTAl CCACCTCCCT CAUC1U1C11 TTGAGUCGTC 360

CC1TGCUACC CTTCCTTCCC A1CCTCCACG ACC1ACCCUC CCCCTCCUCC TAAAGAATCT 420

CACCCCTCTC TCieCACUTG CCCCCCUCCC CCCCCCCAUG 1CC11ACCCC ClCGCACCCU 480

UCTCCCCCTT TCACCCTCCT TCUCCTCCAA CCCCC1CTCC 1C1UAC1U1C TCTGGGCyTT 540

324

184 424 gtcciicigi cgcgctcccc cciciGCcic GciccGTTCi cccccrcccc CCCCATCTTC 600 iccicccccc cgccgcctcc iiciccccic ccaciccicc riaaacicci icciGCcicc 660

CG1C1CCTTC CCGICCrGTCT CCCCCACTCC CCCCCCC11C GCCCTTTCCC ITCCCCTCTC 720

CiCCTCCClC CTCTCGCCTT TCCCTTCGGC CGGICGGGrC CCCCCATCGG CCGCTCCTCC 780 icncaicaca TTCTCGCCCC CllGTCCCTT CTCC1GCG11 CGCICGICCC CGCTCCCGGC 840

CGACyCCCGC CCGCTTGCCh CiCCiCCCiC CTCCGGCGCC TiTCTClGCC CGiCCCiCTC 900 cTcciicccc ccctccccgc ccicctt

927 (2) INFORMACJE O SEQ II Nr: 150:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 927 pan zisid (B) TYS: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NICL: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: liniowi (ii) TYS CZĄSTECZKI: inny kwis eskluieowy (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xi) OSLS SEKWENCJI: SEQ LI er: 150:

1C1GCC1GC1 60	C1T1ATTCTT	CGCTCAncTT	GlGCGlCCCi	inaacccacc	TCCTGCTCCl
TTCCTCGGCC 120	CCGGCACCCT	CCCTCCClGC	CGCCiClClG	iccTcaicca	CCCACCCCTT
C1GCTTCCGC 180	CCC1CGGCCG	CTTCGTGTCG	ICTCTCGilC	CCTTGCGGaG	TGCCTCCCCi
giicaccccn 240	TTCTTCGTCA	TCTCCCGCCC	TCTCTCCCCi	CTCCCGClCC	CCCACCCTC1
CICCGTCCGG	iCGTCATCCT	ClCAGCTGCC	TCCCCGCGGT	icccciarca	TCTCTCCTTC

300

184 424

325

ClCTTCCCCS CTTCTCS1CS SCTGCAGG11 TlGTSCTlTC C1CS1C1T11 TlllllTCTT 360

TC111TCGGT ClCGTCCTCT llCTTCTAGT ICTGCTTTCC TCTCCTT1CT TAGClGGTTC 420

GlClllCTCT TSCGCSTlCC TACGACCATC ITCTlCAlll CCCTTSCCCT CACTCTTTT1 480

ClTTTCTSAT STTCCTCTC1 IGilSlllTi T1CCTCTC1S C1TTC1CA11 S11CCTTATT 540

CTTClTCTTl 111SSCCT11 CCGCAlClCG CCTASTACCl TCTTTTTCCT CTGCTTClTC 600

TCTlGTCTTT llCCTTCGll TlCGTCTlGTG T1C1ATTCTT ACCCTTCGTA TAlTACATCl 660

CCTCSCClTT CCCACCCTTA CTCTTT1CTT ATlTCClTTC TCCTCCGTCT ClCGClTTTC 720

CCTTClCCAl SACClAlSlT TTAGACllll CACATTSAll TACA11ATAC CTTGCCAlTA 780

1CCACTTTCT TCCGCillli SCCGACG1C1 ITATllGllG AACCCiClTT TATCC1TTTT 840

TTATTCCCTC CCCCCTACCT CCTTCCCGCl CCTT1CTCTT CTCTTCC11T CTClTCCCCT 900

TGTTTC1CS1 TTTA1CCCTC TTTCTCC

927 (2) INFORMACJE O SEQ ND No: 151:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 927 par zasad (B) TYP: kwas nuklilnoay (C) NIOŚĆ NNCN: pojedyncza (D) TOPOIOCIA: liniowa (il) CYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) OPNS: /opis - „DNA (syntetyczny) (el) OPNS SEKWENCJI: SEQ ND no: 151:

CTCCCTTlCC TCCCSSCClC TilCllACTT CCCTACTSTT ClGAlACATT STTT1T1TTT 60

CCCTCCCACC TllACGCTTT CGCTGATlGA 1AT1CTTCCA CCTT1AT1C1 TTCAGGTTTT 120

326

184 424

TTlTTTTTAC 180	ATTTAGATAT	TTTCGTAACG	CTCCCTAAAA	atttgtagcc	ΤΤΤΑΤΤΑΑΑΤ
attactctgc 240	ttttttttca	TTTCCAACCA	TCTTCCTTTT	CTCTTATTAT	TCTATTTTTT
TAATATTTAA 300	TTATTATTAC	ACTAGGTCGT	CGATACCCAT	ttttctgaca	attcattttt
TATTTGGCTA 360	TTTTTCAACC	attgcatccg	CAGTACTATC	TACACACCAG	tccgcttttt
TTAACTCAAT 420	ttttttattt	ACTTTCTGTT	(TTGATTTAT	tttttttttt	TAAGCCATTT
TCTCCATTTT 480	TACATATAGT	TTATAAGCAT	TTTAATCTTA	cttctttcat	TTCTTCATGT
ttctttttgt 540	(aactatctt	TATTCTCGTC	tcactgccat	AUTTTCTTTT	tttttttatt
tacttttctt 600	(TACTCCTAG	TAACATGGTC	tttttattat	ttttcttttc	tcatttttta
(TCTTClTTA 660	ACTTCTTTTA	TGACTCTCAT	UCCTTCTCTA	ttatgtttat	TTACTCTTTA
taattttgtt 720	ttttttttct	CTTTCTCTTC	tttttttttt	tttattttat	tctcctatca
TACCACATTT 780	ΑΤΑΤΑΤΑΤΤΑ	AATTCCGCCTA	TAAAGTATTT	cttcattatt	(ATTTTTTTC
ttttctccat 840	tccttctatt	ATGGGGACAA	TCUACATTTA	TTTATTTTTT	GTTTTTTTTC
ttatcttttt 900	ttttctattt	TTGTCTCTCT	tccccttttt	TTTATATTTT	ttttttcatt
TlATTTTTTT	tatatactaa	AATTATG

927 (2) INFORMACJE O EEQ ND Nr: 152:

(S) TETHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 927 par zisid (B) TYP: kwis sukiMisowy (T) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: ISniowa (SS) TYP CZĄSTECZKI: isny kwis eGkirSsowy (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny)

184 424

327 (xi) OPDK KEKWEN/JD: KEQ DD nr: 152:

GGGCCAGCAT CGATCAGlAT GUCCCAAAGG ΑΤΑΑΑΑΑΑΑΑ TACACC1CTT AATCCCAGGG 60

GGCTTUGATG TGCAACAAAG ATAGAAGUAA CAGUrATCTA CGGGUCGUUC AAlACAGTCG 120

GUCATTGACC AGTTAGAUCU TGCCCCAAUC UTG1GAAAUA AGCCACCACC TUTATTAUGG 180

ATGAClUGAC GCTTGAUTCA GTGGAAATGA GGCTTUGATG GGUGGCA11A GlTATGGCTG 240

GUCTCTCTAA CGATAAGACC UUTAGGGAAG CUAT1ACCCT CAGlAUCACC CGTGCGCCCG 300

GAGATGCGCC GGGGTUCCAC ACAGTAGGAA ACAAC1TAA1 CACAUGlCAU GCGACGGCCG 360

GAU11TCAAG GGGAGAATAA CATTGGGAGG AGGCAAAGUT ACTGGAGUGG GCACCCAGTC 420

TAGCCAGCCA GACAAATUUC CTAGACCCTG AGGTTAAGGC CGCCAACCAC GTTGGCGTCA 480

UGCCClCGGA UTTGAGTCCG CTGCGGACGC UACGGACGAA GCCGAUTAC1 UUAAGTAGGA 540

ΑΑΤΤΤΑΑΑΑΑ UGCAACTC1A UGTGGACCAC GGATTGAGTT CGCAAATAAC AlTAGCTACT 600

CCCArCTCGA CGUCAGAAAC CCGTTGGTAG ACGCUCAGCC UGAAUGCAAA CUACGGCTAT 660

TAGGTCAGTC AAGATUTGAT UTGGGGCATC CGGlCAGCTC UATGACUCCC ATUAAAAAGG 720

GClCrCCACU ΑΑΑΑΑΑΑΑΑΤ ATACCATAGC TTGUAAAAAU CGAGAATGAG UCTAGAUGGA 780

GGUCTCGGAU AAAlUGAAAC AGTACAAGTG CTCTUAAGGG GATGATTTAT UGCGGAUTCG 840

TATUCAGAGA CTAlGGGGAT TACCGGGG/T GTGACATACA CCTGGUGCAA GAACGCCTTC 900

GTCTCGGCTA ΑΑΑΑΑΑΑΑΑΤ GGAGAAG

927 (2) DNFORMT/JE 0 SEQ ID Nr: 153:

328

184 424 (i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 927 par zasad (B) TYP: kwis nukleinowy (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: ieey kwas eukltieow'y (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ LD er: 153:

ccinacTCci 60	C1GTGGTCT1	C1GT1GCCTT	ATCCGTCGCT	TCGCGGCGCC	nccTCcacci
TllCTClCCC 120	CCGACCGCCl	CGGTGACCGA	GTCC1C1C1T	Tccirahcca	cccaaacchh
cincTTCcac 180	GCCTCGGCGl	CTTCC1GTGC	GCiiiCGGCC	ccTTcrcnaa	Ticaicaich
GTT1GG1CCG 240	iiCTiCCTGG	iCTCCGCCCA	TCTCTCCCCi	CTCCCCClGC	cicacccici
CCrCAlCCGT 300	1CC1CG1CGG	GCCCCCiCCC	TGcccccrAT	hccccccacn	nciccciTTC
1C1CTGC11G 360	CCC11CG1CG	CCCCCAGCAG	CCGCGClGCG	TGCCCCCCGl	irraiccicc
CC11GTCGGC 420	C11C11C1CC	AGTC1CTGCT	T1CCGCCCC1	ciccTCcilc	lAiacccTCi
CriCGGhChC 480	CGCACClCGC	CT1CTTCC1C	ACCTTCCCCC	Accircicci	aicaaaiGic
C1TTTCC1GC 540	1CCTTC1TCG	C1GC1CCCCC	CTC1GCC1CC	CCCGCTTCii	cGicaaccic
iccnacATCG 600	CCICCCCCCC	CCCGCCTGCT	Tcicacciyc	GGC1CC1CG1	lAcaciiCTT
C1TCGC1CCC 660	CiCiCCTTCG	CG1CCGTC1G	GCCCCCiCCC	cacacGThcn	CCCTTTCCCT
acncciiicc 720	1GCTGCCTCC	1CT1GCCTTT	CCCTTGCGCG	ccTGcraaac	ccacGTCccr

iAiaccaccc ccctcggcgi ictggg.cccc ctcgcccttc iiciccaici gitcgtcccc 780

184 424

329

1CCC1UUTAC CCCG11UACC CCCCCTCCCC GCCGCCCCCC TUUUUCC1CG CCCCUTACC1 840

1CCC1CCCCC CCCCC11U1C CCCUCCTCUC CCCCCTTTCC CCCCTCCTCC CCCCCCTUTC 900

AUTACCACAl CTCCCC11T1 CCCCCAC

927 (2) INFORMACJE O SEQ ND Ni: 154:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 906 pa; zasad (B) TYh: kwas npkluSioay (C) ILOŚĆ NiCl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (Si) TYh CZĄSTECZKI: Siwy kwas iuklrSioay (A) OPIS: /opis a '^ΗΑ (syntetyczny) (xS) OPNS SEKWENCJI: SEQ ND wn: 154:

TCCAGCTTCC ccccAcrygc ctactcaccg ccccctcccc taiatctccc ccctgcaccc 60

CTTCCTUACC CGCACACCCC CCCCUCCUlA 1CC1CCCCCA TCCT1CTU1A CCUCACCCTT 120

CTCCTTTCAC CCCC1UA111 CTTC1CACTU 1CC1CCC1TA ACTTClACCC G1CATCA1UC 180

CTCTCTlCCA CCCCCC1GAA CCTCT1ACCA CTCCCTCCCC CTUCCAC11C C1CACCCCCC 240

CUAC1TCCCC CCCGCAGCCC UTCC1UCT1C CUlCCCTCCC TCCUllAllA ACTGACTTTC 300

TACCTTTTCC CCCGC1A1CC ATC1CCUT1C CCCCCTTACU TAUA1TTCUU C1UCTTCCCC 360

CCUTTTTCCC CTCCCTlGCC 1ACCCCCCCC ACCCACCCUC CTCCTCC1TC CCCAGlATCC 42 0

TATACATCTC CAACCCGUGG TCCCCCCUCC CCCCGCCTTA TCTTCCCACC CCCGTTCC1A 480

UTACCTUCUC UCCGCCCGCC TCTC1CATU1 111CCCACCC TCTTC1CCA1 11CCTCCUUC 540

TUCCCCCC11 CTCCCCCCUC CCC1CCC1CG CUCUCCCCTC TATTCCCCC1 CCACCCTCCC 600

330

184 424

T1C11TCTTC AT1CTTTTT1 TACTlllTCC AlTTlCClCT TCllCCTTCG TTTTTT1CTT 660

SCACTCCCTC TCTCCTTTCT CCTCCATTCC A1TCT1C111 lACCCSSCAT TTCCCTllCl 720 llCATTAlCC TACliilTSC CCGGllllTC CTCATTTTCT C1TC11A1C1 ACTlCTiCTC 780

ICCTCllllT AATTCCCATT TCCTTCTTCT CTACTTTCTT CllllTACTC CTTTC11T11 840

CTTCCTTCCC CCCCC111CT TTClGCCllT TTCTTTCC1C TGTlllCCCl CCTTCCllTT 900

CSCASC

906 (2) INFORMACJE O SEQ ND No: 155:

(i) CECiY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 993 piey zisid (B) TYP: kwas nlk1ilnewy (T) NLOŚĆ NNCN: pojedyncza (D) TOPOIOGNA: liniowi (ll) TYP CZĄSTECZKI: inny kwis nukIuSnoay (1) OPNS: /opis - „dna (syntetyczny) (el) OPNS SEKWENCJI: SEQ ND no: 155:

SCCCCCCSTT CCCTTCCllC CSTTC1TC11 1CT1T1T1CT ATTCGCllll CTTATGTlTC 60

CTTTCCTT11 ITTTlSlCCA TCCTCCTllT CSllATlCTC TTACTCCllC lilCTlGllT 120

TTCCCCTTCC TS11CTT111 C11TTTTCTA SliCTTiCTl ClASTTTACA CGGClGCTTC 180

CiCSCCilll TSATTTTTTC ClACTTTTCA CCSTCCCCCT CTTCTCCClT C1TTCT1TTT 240

TTCTCATACT TllTCCCTAC TlAClTClCC ClTTCCTlll CATCTTCCCA llllTTCCTl 300

CCCCACGCCl TTACTTCCCC CClAlTCCCl ISATSlTlCT CTCCllllll TllTGCCilT 360

184 424

331

TCCCCTTCT1 GACC1TCTCC TCCA1TCTCT ACTiTCAiCC CTTCTCCTCC ITCTAGlTAG 420

CCTCATiiGT CTCCAiiCAC TTCCCiCiGi ChCTTCCACC CC11TC1TCT TTTGCTCCCC 480

TTiCACTCTC TCTCCATCCC CTGCTCTCCC ChiilCTCCC CCCCCATCCi TCCCCTCCii 540

CCCTCGilCT iCTTGATCCA ACCCClhAiC ICCCTTCCCC CCT1CC1CGC ICTCCCCCiI 600

TCCCTCiail ICATiTCCCC CliiTTCIlT CCCiCCTTCl ICACACCTCA TCTCCiCCTC 660

CCCCACTCCT CC1CC1CC1T CTGTC1TCGT GTlliGlilC PG1C1GCCCC CCCTlCCGTC 720

CiCCCCACCC ilGTCTCCAC 1CCTTCCTTC 1CCTCT1CTT CCClTCCCCT CGCiTCICCT 780

TTCCTllCTi CTiiCCiTCT TC1CATCTTC CTT1ATCTCC CTT1CCCCTC CCTAClCGAC 840

ChTlClCAlC CC1TC1GC11 CTCCTICiTC iChACACClT hlTCCCCCTC C11CTCCCC1 900

CCCCA1G1CT TCCTTCCCS.i 1CGTTCA1G1 CAiTTliTCl ICATCCiCGC CTAC11C1CG 960

TClCTCCAll GlAACCTiTC TTCCiCGTil TCA

993 (2) INFORMACJE O SNQ ND No: 156:

(i) CECSY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 993 pary za/ad (B) TYP: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NlCl: pojedyncza (D) hOPO-OlIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inny kwas nukleinowy (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ND go: 156:

ACT1CTG1CT ICTCTiTASC TATClATTGA iCTiTACiCC ICCTAliTll ICCACCCTCA 60

CCTTCTCTll ACCCIAACiI CCTCAlTTAC T1GTACTCCP CC1TCCC11T TCiTCiailC 120

332

184 424

GTCGllGllG 180	GGSACGCGGS	lllGCTCllS	SG1GGTGTGG	AGSAGlTCll	1S11GG1TC1
GGCSCCllll 240	TGAlCCCCGG	ClATGCGGll	GGSCGCGCGG	GGTGTGGGAG	llGGlGAGGG
1G1GGSGS1G 300	GlSTCACCCC	TSlGGCllll	1CGTGGGC1G	SlTTGGGGll	ISlSGTGCGl
ICGCSTGTGl 360	CClGCCChCl	IGlCGGGGll	1CSGGSGCGT	SGG1SG1GGG	GllGCCGGlG
1GGGG1111G 420	11GGGCGCGG	IGTiGCGTGl	IGCCTCCCGG	GlCGlGGTGG	ICGCSSAGll
IGlGSCllll 480	GCGAiSlGGl	ITGTGGGlll	TCGGGTGGGC	GGTTGGSGSG	SGllGllGTG
llGllGGGGl 540	SGCTClGGGG	GlGGGCTłGl	GCGGCGCTGG	SAGlGGlGlG	CilGlGGGGl
IGGGCGGllG 600	GGSGGGiyiG	TGGGCTGCGl	1GGGGGGCGT	GCGGCTCGGS	1G1GG1GGG1
GllllGllGG 660	IGchCGGCCG	GGGGGClGll	SGGGGGGTGG	SG1TGTGG11	GGlGGTTGCS
GlGGlGGllG 720	GlGAGGGGGl	GGGGGGGCG1	1CGCTGGGCC	GCGGCCGCll	GGGGGGGSlG
IGGGlGGGGG 780	SlllGTlGGC	1GTGSAGCCC	IGSGIGGSCG	TGAllSAGll	GGlGClGlll
llGlCllGlG 840	1GGSGG1GA1	IGCGCGCCGG	1GGCGGCGGG	CGClGClGGG	GISIGSGGTG
ITGGllGTGl 900	llGAGCGCGl	lllGCCGGGG	CG1GGTCGGG	CGllGCGGlG	GGGGlGGGll
IGGGTGGllG 960	TG3GAGGGTG	GTTG1GGG11	GCGGCTG1GG	IGGllTTGGl	G1SGG11G1G
GCGGllCiCl	GGG1GG1CGG	GACCCGGCll	CCA

993 (2) INFORMACJE O SEQ II No: 157:

(i) CECiY SEKWENCJI:

(A) IŁUGOŚĆ: 993 pao/ zasad (B) TYP: kwas nuklrinowy (C) ILOŚĆ NICI: pojrd/ncza (ΰ) TOPOLOGIA: liniowa

184 424

333 (SS) CYP CZĄSTECZKI: Ssey kwis SGkiuSeowA (A) OPIS: /opis = „DNA (syntetyczny) (xS) OPIS SEKWENCJI: EEQ ND er: 157:

gtctttaatc 60	ACCTTGTAAC	CCTTCATCAC	ACCATATATT	atctaaatat	ATTATTTATA
tttttctctc 120	ATTTCAATAG	ttttgattat	tactattttt	TTATTTTCGT	CAGTTCACAT
TCCTU1TCTT 180	TAAATTTACA	catctttcta	acttttttta	ataattacga	(AACCTATCG
tctattcact 240	CGACACTTTC	TAATTTTTAA	ttatcttttt	CTCTTATTAT	(ATTCTGTTT
cttttatatt 300	CCACTATTGT	tcatttgtct	tattcttact	ACCTTTCCAG	AAACTTAATC
ttttattttt 360	CTGTTTTCCG	ttaattctgt	αααίααίαττ	gtctatatcg	tttcccattt
tttttttctc 420	CATTCTTTUA	TTTCGTTTTT	ATTATTCATT	tttttttctt	ttttaaacag
CTTTCTAAAT 480	TCTTGAGClT	cttttttttt	TCTTACTATT	ttctattatc	ctctttccta
cttatttgtt 540	CCTGCACTCT	ttttcaautc	ttttattttt	ttttatttta	TTTACTCTAC
tttttttctc 600	CTCTCCATAT	AGTTATATTA	ttatcttttt	ttattttttt	tttttacact
ttttttttca 660	GATTCTTGCG	acacttcaag	aatctttatc	ttcattcttt	gctcttttat
aacaattacc 720	CTUTTATTTG	taatttctct	tatttttatt	CACTCATATT	CTCTCAGTAT
cttttctatg 780	TTTTTTAACT	tttttttatt	ttttttttta	tttgtttttt	CTGCTTUCTG
cattttttca 840	CTTGATTTTG	TCTTCCTTTT	TCTTTTTCTT	atcctttttt	ttattcttct
(ΑΑΤΤΤΑΤΑΤ	TTTTTCACTT	tatttttatt	ttctatatct	tttatttcca	tcctctttat

900

334

184 424

TTGUTTCTTC ATAGCAGATA UTCCATGCAT UTAATUAACC TU1TTGTTUG TTGGTAUGTT 960

AATTCAlirC ATAGATAUGG TGGGUTGGCA TAC

993 (2) INFORMACJE O SEQ DD Nr: 158:

(S) CECHY KEKWETCJD:

(A) DŁUGOŚĆ: 993 pary zasad (B) TYP: kwas nuOlrinoay (T) DUOŚĆ TlCD: pojedyncza (D) GOOOUOGlT: liniowa (SS) CYO CZĄSTECZKI: Snny kwa? nunluinoay

(xS) OODS	(A) OPIK: /opSn - SEKWETCJl: SEQ DD	„DNT (syntetyczny) nr: 158:	ZZ
ΑΤΑΑΤΤΤΑΤΤ 60	CTGTCACAAT	CCCGCCTGCA	ATTAGAGAGT ·	ACłGTCCUAU	CTGACCTGGA
GTTTTUTTC1 120	ATATACAGAC	TGCTCAGCAG	UATUAAlGAT	AGCTAGTGAC	UGCGCUCAAA
GTTAlCAGTT 180	TCCAGGCGAA	UAUGGTGUGA	A1GGGGCTAC	AlCAGCCCUC	CAACAGATTA
UGGCGTUCUU 240	TACTCTGGTU	TACTGGGTAA	GACTUTGTAT	GATAGGTGAA	UGAGAGAGAG
CATTlTTCrA 300	TAAGTAGCAG	TACAUTAUGG	UATTGUTCCC	CCGGTGCGGC	ACAATGCAAA
GTATcrTTii 360	CTATCTCGGA	ΑΤΑΑΑΑΑΑΑΑ	UCAACAACAG	AG1GAGAGGA	TUATUACACA
CTATAlCATA 420	CAAAAGCGAA	ΤΤΑΑΑΤΑΤΑΑ	AATACATATA	TAGTTCTCTA	UTGTAAAAAA
GAGTCGCTAT 480	GTTACCATAG	AGAGATGATG	GATlATATlA	AUTTAATG/1	CUGGGTGAGU
TTACTAGTTl 540	GTTTGGTCGC	ΑΤΑΑΑΑΑΑΑΑ	UTAUCAUllU	TTATUATGUA	TAUGGAGTTl
TAlTAATGGA 600	CAAAGAGGCG	UTAGGATUGG	AGATlGACAT	TTATUGAUGA	AUGTGUGGGA
CGGlCTAGAC	GTC/TGTAGG	A1GTGATUGC	AACCGATGUA	GATACAUTTG	AACCGGGCAU

660

184 424

335

CCTTCCUAUC CClGlClUAC UCGCCC1U1C GGC11C1CA1 CUCCCCATUA U1A1CCUCUC 720

1CCACCCACC CTCG1G1CCC CCCCGGTTCl CCTUG1CC1C TCUUACACTC CCCTT1CACC 780

CCCCUTTCCC CCCGU11CGC CC1CCCCCTC CC11CCCG1C ATCT1TCAUT CCTCCCUCUC 840

CCCCCCCCCC UC11CCCTCC CCGCGACCC1 1TTCCCCG1C AU1CCCC1UC ATTUACACCC 900

CCCTC1CCT1 UCCCCACCCC TTACCCCCTT CC1CC111C1 TCUCCTACCT TlCCCCCACC 960

ACCCUUCC1C AGAClGlCGe ACGyUUATCC CAA

993 (2) INFORMACJE O SEQ lD Nr: 159:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(1) DŁUGOŚĆ: 993 pany zasad (B) TYh: kwas nukleSiPay (T) ILOŚĆ NiCI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liiSoan (iH) TYh CZĄSTECZKI: Siwy kwas nbkluSnoay

(xi) OOie	(A) OONS: /opis a SEKWENCJI: SEQ ND	,^1 (syntetyczny) nr: 159:	zz
CClUCCACCC 60	1CCCGCCAGG	TCCC1CCTCC	ACTACCCACC	ACCTAeiTCT	CCCACCCUCA
CCCGGTCTU1 120	CCCC1CCC1C	CCCCAACTAC	TACllClGCC	CTCTCCGTCC	UlACClAlAC
CTCC1CCCCC 180	CAGCCCTUTC	TC1CCCC1CC	CUT1CG1GCC	ATAGCGGAUC	AAATGCATCA
T1CCCTUCUU 240	CAGCCCCGC1	CCCCCCCCCC	CCCC1GCG1C	CCCTTGCCCC	TTCClCACCC
CCCC1CCACC 300	ClCGCACCCG	CCCTUCCTUC	1ACCU1C1C1	A1TTCTTG1A	A1CACCTCC1
CTCGACCCU1	CCCCCCCCUA	UCCCUC1CCU	UACCA1CC1C	ACUTAGATTU	CUTCTTCUTC

360

336

184 424 yccccGGCir niccchciic Tcyrchchci gcicicggcc cciciccicc gicigggcgc 420 icTCATAcai cicccaccai GTCTacccnc ccicccaiic ccrcciiccc cicicctttc 480

CGGCGCCGGC CAGCCCGCil CCiGCTTCCT CCCCC1CTCC CCCCCTTCCT CCGCCiCiCC 540

1GCCGCGTTC 1AC1CCCCCT ICCCCACCCC CCCCGCGCC1 CilCCCTGCC 1TCGCCCTTG 600 ccccctgcca icicccTGcc ccararcTTC chGcicaaci cTTTTrarcT AcicaGcacc 660 aiccAGGCcr ttgcccccgc icTCcacrcG aarcicicic ccccciccac Gciiiccccc 720

CCC1AGCCCC iGGlGCTGCi CiCACCClCi C1GCCCG1CC CC1GGGCTCC CCiCaiCiCC 780

TGCCCCAGCC CCCCCClGCG 1C1GGCCC1C 1CCTTCG1CC CGCICCGTCr CGGCCTTTTC 840

CTCTACCAGG CGCTCCiGCn GCCCCiCCGG CCCC1G1CCC CCCCCTTGGi 1CCCCCCTTG 900

CGCACACiCC CGCTCCCC11 CiCCCCCTli CCCCCCGCCC 1C1G1CCCCC CCilCGCGCC 960

CTGCGAllGC CCCCiGCCCl CCGCCCClGG 1GG

993 (2) INFORMACJE O SEQ II Nu: 160:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 1027 pir zisid (B) TYS: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: ieey kwas nukleinowy (A) OSLS: /opis = „INA (syntetyczny) (xr) OSLS SEKWENCJI: SEQ LD en: 160:

CTCGC1ACAC CCTTGGGCCC TCCCCCC1CC CiCCCCCCCG GCTTCC1GCT CGGCICTTTC 60

GliCAAGTGA GGGCCCTCCG ICCCGCiCGC iCTCCCClCC CCGACCCCC1 ClClCCCACC 120

184 424

337

TlTCllTCCT CTTATTTTll lllCTTClCl TTCTCTCilC ACCTCTT111 CSCCTTTCCC 180

1TCTTTTC11 CTCTTT1TCT TClTGCCCTT TClTACTCCC GlllTTCCCC 1S1CTSATTT 240

GlCllTlCGT TCTTTTCTTS TTlllCCTCT CCCCSCCTTC CCCllCCllC STCTTCTCG1 300

TTCCCCTTCC TTTTCilCCC ATT1TGCTC1 ClCCTTlTTl ACTCCCTTlC ClTCATCTiC 360

TlCTllCCCC ICCSATCCll S1C11TTTTC CTCCTCTClT TCCTTClCCC TCTCSCGCCl 420

1TTCTTCTTC TCCCCTCTCS ITCTTlllTA CillliiCGT T11CT1TCA1 CTATCGlTll 480

CCTCTTGCll CCCTlCTlCS TT1T1TTCT1 T1TT1TTTC1 TCTACCTCCl CCGTCGTCCT 540 llCACllGCA T1TC1CC11C TTTT1TC1CT TTCCCCTTCC CllCTTTGTC ITCTAAlTTT 600

TTllllTGAl C1S11S11ST TTCGCCCCCC ICTCTllClT TTTlllSlll CTTCCCClCG 660

AGTTlTSACC CCTCTCATCC TiCCillTCl 1C1TC1TCT1 1STATCTCTT CCCTACTTCG 720

CCCCTCTTTC CiSlCCCCTl CGTTClCTAC CTCCTCTClT CCCTllCTTC CCCillTCll 780

TCTTCCClGl CTTCTCTTCT TTCTTCClll GTGTClTlii TTTC111G11 IGCACTTTTT 840 lACTCCClCC TTSCTTTCCS TCGlGTCTAC TTCGGTlTTl TCCACTTTCT ClTTlTTlTT 900

CCiCCGCGlS TllSlCSACT CGClCCilTT TTTCTTTTGT llTTGATCCC CTTCCCCTCT 960

CA1TCATTC1 TCCAlTCTTC TillllTGCT CCACCCTCCC TTAT1CC1TC CCCTlTACTT 1020

TCCCCAC

1027 (2) INFORMACJE O SEQ ND No: 161:

(i) CECiY SEKWENCJI:

(Α) DŁUGOŚĆ: 155 aminokwasów (B) TYP: aminokwas

338

184 424 (G) NLOŚĆ NICN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: białko <xi) OPNS SEKWENCJI: SEQ ID no: 161:

Sio Pos Alu 1

Pro Pr: Ala Cys JAp Liu Arg Val

Ltu Sio

Lys

Leu 15

Leu

5

08

Sog

Asp

Sn

Sis

Va8

Leu

Sis

Ssi

Aog

Leu

Ser

TlG

Cys

Pos

Gla

Val

20

25

30

Sis

Pro

Leu

Liu

Thr

Sro

Orl

Leu

Lru

aau

Ale

ul

Asp

Phe

Ser

Lau

35

40

45

lly

Glu

Trp

Tys

LSs

Tlo

GuG

Glu

G8u

Clu

Lyi

uli

G ln

Asp

18 e

Lua

50

55

60

lly

Ala

Vaa

8hr

Luu

Liu

Leu

Glu

Tly

Val

Mit

Ala

Ala

log

Gly

Gln

65

70

75

80

Ltu

cir

Ppo

8hr

Cy:

Liu

Ser

Ser

Liu

Leu

ilr

iln

Liu

Sio

Gly

Gln

85

98

95

Vai

log

Leu

8eu

8eu

ui|

Ala

Leu

lln

108

Leu

Liu

ily

Tlo

Gin

Liu

100

108

110

Pos

Pro

G In

Gl.

Arg

Thr

Thr

Ala

Hi s

Lyo

Asa

a8O

Ass

Ala

Ile

POs

115

120

U2

Ltu

Ssi

8he

Glu

His

Leu

Pru

Ar-

G8y

eru

VaA

g8g

ihe

Lep

Met

aau

130

135

110

Va1

ilr

G1|

Sro

TO

Liu

CSP

Val

Aog

Glu

Pli

145

150

155

(2) INFORMACJE O SEQ ID No: 162:

(i) CECSY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 309 aminokwasów (B) TYP: aminokwas (C) NLOŚĆ NlGl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: białko (xS) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID go: 162:

184 424

339

Sro 1

Psi

Cli

Sur

Sur Cli C/s Asp Ues Gorg Vil

Les

Sro

Iys

Ces 15

Ues

5

10

Tog

Asp

Ses

0 is

Val

Leu

His

Sei

sVg

Sio

SeA

GV n

Cys

Prs

OVu

GaL

20

25

30

His

Sur

Lee

SiO

V1h

Pro

Vo0

Leu

Hvu

Irs

Ale

Ga 1

Asp

Phi

lVr

alH

35

40

45

Cly

Gls

Tip

Lys

Tłu

Gln

Met

Glu

Glu

iho

Lys

Ala

GCn

Asp

IIe

Veu

50

55

60

Gly

Tli

Val

Tho

Leu

Lru

Urs

Glu

Cly

Val

Met

Cli

Gll

Arg

VCy

VCn

65

70

75

80

Leu

Cly

Pro

iho

<C/s

Luu

Seu

Seo

Ltu

Lru

ily

Cle

Cru

Sse

VCy

V1n

85

90

95

Vil

Cug

Leu

Seu

Vet

Vly

Gir

Lea

IV n

Iru

Lei

Lv u

Sip

The

SVn

Leu

100

105

111

Por

Srr

Gic

Liy

Aig

Vhr

Tho

Ala

Uv s

Ani

Ash

svo

Ass

Ali

pV e

SOr

115

120

11!5

Leu

Sto

Phe

ile

His

Lru

Uru

Arg

Cly

Lys

VaO

Aog

Phe

Leu

Mei

Veu

303

135

110

Vil

Cly

Gly

Sro

Tho

Luu

C/s

Val

Cug

Glu

Phe

ily

ily

Ais

Vei

ACa

145

150

15V

116

Sro

Sur

Ala

Srr

Pro

Ali

Cyrs

CPO

Ltu

Aog

Val

Ces

Sro

Lus

Vcu

Veu

165

17V

175

Cug

TP0

Ses

lis

Val

Leu

Lis

Sei

sVg

Πο

Sec

gVn

Cys

Prs

0 Vu

GaL

180

185

110

His

Prr

Leu

Ssu

vih

Pro

VoZ

LeV

Hvu

Irs

Ali

SVl

Pi;

Phi

l v r

Via

195

200

205

Cly

Gls

Ttp)

Lys

Thr

Cln

Mit

GSu

Gis

1ho

Iys

Ali

Gln

Asp

IIe

Leu

210

215

2:20

Cly

Ali

Val

1ho

Leu

Les

Ueu

Glu

Gly

Val

Met

Ali

Ali

Arg

Gly

Glon

225

230

235

224

Ueu

Gly

Pro

Tho

CC/s

Leu

Sro

&ΪΟ

Uus

Leu

Gly

ile

Ces

Ser

GCy

Gln

245

250

255

Vil

Arg

Leu

SIU

Vet

V ly

Gir

Len

GVn

lus

Lei

Lvu

Sip

The

G 1 n

Liś-

260

2fó5

227

Arg

Tho

iho

Gll

His

Iys

Cso

Sur

ise

Gll

Ilr

Phr

Ces

Sro

Phr

cie

275

280

285

340

184 424

Hin	luu luu Arg	Uly	l'S	ViU	Arg Ohu	luu Mut luu ViU li' Gly Kur
	290			295		300
Ahr	luu Gys Vil	Tog
305
(2) 1TFORMTTJE 0	SEQ	DD	Tg:	163:

(i) CECHY KEKWETCJD:

(A) DŁUGOŚĆ: 312 aminokwasów (B) TYP: amSnsnaa?

(T) DUOŚĆ TlCD: pojedyncza (D) ΑΟΟΟΙΟΑΙΤ: liniowa (SS) CYO CZĄSTECZKI: bSałko (xi) OODS SEKWENCJI: KEQ DD nr: 163:

Kur 1

Oro Ala

Oro

Gol 5

Ala Cyn

Asp

leu Arg Val 10

Leu

Sur

lys

Leu 15

Leu

Arg

Cnp

Ssu

His

VaL

Leu

His

Ser

Arg

Luu

Ser

Gln

Gys

Oro

Glu

Lvl

20

25

30

iin

Oro

Leu

Oro

Thr

Peo

Vai

Leu

leu

Pro

Ala

Val

Aip

LPh

Lsu

Leu

35

40

45

AU'

Alu

Ti—

Lys

Thr

Gln

Mut

Glu

Ulu

Thr

Lys

Ala

GIu

Lep

Lle

Leu

50

5L

60

li'

Cli

Val

Ahr

leu

Leu

Leu

Glu

Gly

Val

MeL

Cii

Aii

Arg

151'

Gln

65

0L

7L

80

luu

UU'

Pito

Ahr

Tys

Luu

Ser

Ser

leu

Leu

Gly

Uln

luu

Kur

Gly

Gln

85

9L

95

Vii

Arg

Leu

luu

Luu

Gly

(tla

Luu

Gln

Ker

Leu

Leu

Aly

Chr

GIn

Leu

100

105

111

Oro

Oro

GIi

li'

Arg

Tłh>

Ahr

Ala

Hin

Lys

Asp

Pro

LTn

Ala

Lle

Phe

115

120

115

luu

Kur

Phe

Uln

His

Leu

luu

COrg

Ul'

Lys

Val

Arg

PPh

Leu

Met

Leu

13 0

15 L

140

Vli

UU'

GAy

Lur

Ahr

Luu

/yn

Val

Arg

Glu

PhL

UU'

Asn

Mut

Ala

Ser

145

50L

55L

110

Oro

Ali

Peo

Ogo

Aii

y?L

Asp

Leu

COrg

Val

Leu

Kur

lys

Leu

Leu

Arg

165

170

1115

184 424

341

Asp Sen HiH Sv1	Ceu	H is	Ssc	Art liu 185	Ser Gln Cys	Pro GCr 110	Cal Oot
180
hio Utu Po; Thp 195	Pro	aai	Leu	Ltu Phi 200	Ala Val Acp	COr Cer 220	Llu Gly
Ulu Trp Lys hhp 210	GLn	Mtt	Glu 215	liu TCr	Cys Ala GTu 220	Acp Cle	Llu Gly
Ala Vai TTr Leu 225	Leu	Lcu 223	Glu	GTy Val	Met Ala Ala 225	Arg aCy	Cln Igu 240
Tly hro TCr Ccs	Ceu 245	Ser	Ser	Leu Luu	Tly Gln Luu 250	Sei Gly	Uln Val 255
Arg Leu Leu Llu 260	Cli.	ACa	Leu	Gln Ser 265	Leu Leu Gly	Tłu GTn 220	C eu hpi
hio Uln Gly Ccg 275	CLrr	ICr	Ala	Hic; Lys 280	Asp Pro ACn	Ala iCe 225	lit htu
Sui hhe GTn CHs Ceu ueu Ltrg Gly Lyi VaS Arg Phe 290 255 300 Uiy Tly Ssu Thi Leu CCys CIlI 5Cig 305 310 INFORMACJE O SEQ ND Nn: 164: (S) CECHY SEKWENCJI: (A) DŁUGOŚĆ:: 313 aminokwasów (B) TYO: aminokwas (T) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liroca/a (ll) TYO CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ND nn: 164:	Leu Mut	Mtt Vul
Sti Ooo Ala Ono 1	Oio 5	Ala	Cys	1po Uuu	Cpg ViI Ltu 10	Sti Uys	Ltu Utu 15
Ang Asp Ser His 20	Val	Leu	His	Sti Ang 2C	Ltu Ser lln	Css Piro 30	GTu Val
His hio Leu Pro 35	ihp	Pro	Val	Utu Leu 40	hio Ala ViI	Asp PPr 45	Set Leu

Tly llu Cnp Lys Thn lln Mtt llu Ulu Ghp Lys Ala lln Asp ilu Ltu 50 55 60 ‘

342

184 424

Air 65

Ali Wl

TTe Uru

Leu 70

Llu

Glu

TAn

Vi1 Met Ali Ala Aog Als GAe

75

80

Ltu

Cls

Poo

Ttir

Css

eru

Ser

Ter

Tue

Lru

Gly

Gla

Leu

Eto

Aly

GAn

85

90

95

Vi1

Gog

Utu

Uru

Utu

git

Ala

Glu

Tle

Eto

Utu

Leu

Gly

TCh

Tln

Teu

100

115

111

Poo

Poo

(ls

Air

Aog

The

OTh

Ala

THs

eys

Asp

Pro

Ass

Tle

T Ie

The

115

112

112

Leu

Ero

PPe

Gln

His

Leu

Leu

Arg

Gly

Lys

Wl

Tlog

PPh

eru

Met

Leu

130

U3

140

Vii

rir

GAe

Ter

Tho

Leu

cys

Val

TA-g

Alu

Phe

GAy

res

Ass

Mrt

Ala

145

150

155

110

Eeo

Poo

Ali

Tro

Poo

lii

cys

JCp

Leu

Aog

Vi1

Leu

Eeo

Lys

eru

Leu

165

170

117

Aog

Asp

Eto

His

Vi1

Leu

His

Ser

Arg

Uru

Ero

Ale

Ces

Too

Glu

Wl

180

115

119

His

Poo

eru

Poo

Tho

Pro

Wl

Leu

Leu

Poo

Ali

Vii

Tas

ore

Ser

Leu

195

200

220

Air

(lu

Tro

Lys

Tho

Gln

Met

Glu

Glu

Tho

Lys

Ali

Gln

Asp

Ilr

Leu

210

221

220

lis

Ali

Val

Thr

eru

Leu

Leu

Glu

Gly

Vi1

Met

Ala

Ali

Aorg

Gly

(ln

225

200

235

240

Leu

rir

Pito

Thr

Tys

Leu

Seo

Ser

Leu

Ltu

ris

Gln

Leu

Ser

lir

(ls

245

20T

225

Vii

Aog

Ltu

Uru

Ltu

GAy

.Ala

Leu

Gln

Ero

eru

eru

Gly

Tlhs

Ale

eru

260

265

220

Poo

Poo

Cis

Ais

Gog

Thr

Tho

Ali

His

Lys

Asp

Poo

Arn

Ala

Ilt

Pht

275

280

225

Ltu

Ero

Phe

ris

His

Leu

Llu

.log

rir

Lys

Wl

Arg

Phr

Leu

Met

Leu

290

225

300

Vii

Cis

Gly

Ser

Tło

Leu

C<cs

Vai

Arg

305 300 {2) INFORMACJE O EEQ ND No: 165:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 316 aminokwasów (B) CYP: amSezkwiS

184 424

343 (C) NLOŚĆ NNCN: pojedyncza (D) TOPOIOGNA: liniowa (ll) TYP CZĄSTECZKI: białko

xi)	OPIS SEKWENCJI:	SEQ	ID no:	16:
Sio	Poo Ali Pro Poo Ali	Cyp	Asp Iiu	log Vii Liu Sio Lys Liu Iru
1	5			10 15
log	Asp Seo His Va1 Iiu	His	Ser Gorg	Iiu Sio Cln Tys Piso Glu Vvl
	20		25	30
His	Ppo Peu Liu Thr Pro	Va0	Ler opu	lio Ali Uit Asp Phr 'pr Sei
	35		40	45
lly	Gin Aig? Lys Tho lln	Hit	Glu Glu	Cho Iys Ala Pin Asp Ali; Lii
	50	55		60
lly	lii Val TTh Peu Lpu	Leu	Gli UAy	CaU Mel S A a lin Are ttly lii
65	70			75 80
Liu	lly Pro TTh Pys Lpu	Ser	See Opu	Sio Gly U An Iiu Sei Gly Cln
	85			90 95
Vii	log Leu Leu Leu lly	lii	Leu lln	Seo Iru Leu Gly Tho Gln Liu
	100		10A	110
Poo	Poo Aln Gly Arg ThA	Thr	Alc Oas	Tyo Asa lis Asn Ali SPe IPp
	115		12A	125
Ltu	Ssi Phi Cln His Iiu	leu	Arg Gly	Lys liai Arg PPe Leu Met Lie
	130	135		110
Vi1	lly Gl(? Sei ATh Peu	Cyu	VaC SAg	lln Phi g A y llu Aso lAy lly
145	150			155 116
isn	Wit Ala Srr Ppo Pla	Pri	Pro oAa	PA' Asa 1pu Ccs Va1 ppu Leu
	165			ŚL7A 175
Lys	Liu Leu .Crg Syp Seo	His	Val Leu	His Seo Arg Leu Seo Gln Cys
	180		15A	190
Poo	Gln Aai lin Pro Lau	Poo	Thi Upo	ho' Lec Opo lin Ali Va 1 Iiu
	195		20A	220
Phi	Ser Leu lly llu Top	Lys	Tło Gln	Met llu Glu Tłir Lys iii GLa
	210	215		222
Asp	Ili Iiu Cly lii Vii	Tho	Liu Iiu	Liu ilu Cly Vi1 Mit iii Cli
225	230			235 240

344

184 424

Arg Cl' Glu Luu Gly

Oro

Chr cyn

Leu Sur 250

Ssr

luu

luu Gly

Gln 255

Leu

245

Kur

Aly

Glu

Val

Lcg

luu

leu

luu

Gly

lila

Leu

Uin

Kur

Leu

Leu

Gly

260

26L

270

Ahr

Aln

Leu

Pro

Oro

Uin

Giy

Arg

Thr

Ahr

Ala

His

Lys

Aep

Pro

Acn

275

280

225

Ali

Dlu

POh

Leu

Kur

Phu

Gln

His

Luu

leu

Arg

Gly

Lys

Vvl

Arg

Phh

290

295

300

luu

Mut

Leu

Lal

UU'

Uly

Ser

thr

Lul

cyn

Val

Arg

305

310

315

(2) INFORMACJE 0 SEQ DD Nr: 166:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 302 aminokwasy (B) CYO: aminokwas (T) DUOŚĆ TlCD: pojedyncza (D) GOeOUOGDT: liniowa (SS) GY0 CZĄSTECZKI: białko (xi) OODS SEKWENCJI: SEQ DD nr: 166:

Tsn 1

Tys

Kur

Diu

Mut 5

Diu

Aip

Alu

Lii

Ile 1L

His

His

Luu

Lys

Arg 15

Poo

On

Ali

Pro

Leu 20

leu

Asp

Pro

Tsn

Asn 25

Leu

Ann

cnp

Glu

Aip 30

Val

Ssr

Ilu

luu

Met 35

At?)

Arg

Asn

Leu

Arg 0L

Luu

Poo

Asn

luu

Glu 45

Ler

Phe

Val

Trg

Ali 50

Val

Lys

Asn

Leu

Glu 55

Asn

Aii

Ssr

Uiy

Diu 60

Glu

Ala

Ile

Leu

Arg 65

Asn

ieu

A Au

On

<S?s 7L

Leu

Pol

Ser

Ala

Ahr 75

Ala

Ala

Oro

Ser

Arg 80

His

Pro

o Di

L lu

Dlu 85

Ly·

Ala

Gly

Asp

T:pL 0L

lin

Ulu

PhL

Arg

Glu 95

Lys

euu

Ahr

Phe

Tyr 100

Leu

Val

Thr

Leu

Glu 10L

Gln

Ala

Uln

Glu

Gln 110

Gln

•Gyr

Vii Glu Gly Gly Uly Gly Ser Ool Gly GAy Uly Sur Gly Giy Giy Ser 115 20L 112

184 424

345

Asn Mit 13 0

Ali ayr 8ye

/8U

-us 115

SiS

P8O

POs

Gln

urn 110

liu

lua

U 8—

GLy

Sis

Sio

Lee

u 8y

8 li

Gpo

hop

Ala

Pos

Leu

Ser

Sto

Cys

Ppo

Sro

Gln

145

150

115

160

lia

Ltu

Gli

Geu

A la

aiy

Cys

Leu

i 8r

Llu

Leu

0 8s

liG

lly

Leu

Sili

165

117

117

Liu

Tro

Gln

lir

Leu

Liu

Tln

Alu

Leu

Tlu

Gly

iii

Ser

Ppo

Clu

Leu

180

118

110

lly

Pos

Thr

Liu

Asp

Tlx

Liu

Gin

Leu

lip

Val

Akia

Asp

Phi

Ala

Tho

195

208

220

Tlo

lii

gsr

IG8

lln

Met

Glu

ilu

Liu

Gly

Met

Ala

Ppo

Ala

8l^u

Gln

210

215

220

Pos

Tlo

Gln

G8y

A la

Met

8ro

Alh

S8e

ila

Ser

1 8 a

Ala

Gln

Arg

lua

225

230

225

240

ila

ilr

Gl—·

yaa

8ee

uaa

Ala

Ses

a 8 s

Sro

Gln

S 8r

—lu

Lgu

Glu

Va0

245

250

225

Sto

Gro

Arg

Vai

Leu

log

His

Lei

Ala

Tln

:0178

Ser

Gly

Gly

Ssr

ilr

260

2(55

227

ilr

Sto

Gln

Seo

Phe

Leu

Leu

L—S

Ser

Lru

Glu

iln

Va8

Arg

Lys

Ili

275

80 8

228

TlG

cis

Asa

p8y

Ala

a 8 a

Aia

Κ8

Glu

lyn

Len

u8S

—Si

The

290 295 300 (2) INFORMACJE O SEQ ND No: 167:

(i) CECSY SEKWENCJI:

(1) DŁUGOŚĆ: 317 aminokwasów (B) TYP: aminokwas (G) NLOŚĆ NlCl: pojidrGcza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: białko (xi) OPNS SEKWENCJI: SNQ ND go: 167:

iSG

Uys

Sio

lii

Mit

Ili

Asp

liu

Ili

iii

Sis

Sis

—tu

—ys

Arg

Poo

5

10

15

Pos

ila

Poo

—tu

Lru

Asp

Poo

Asg

iSG

—eu

Asn

Asp

liu

Asp

Va1

Sto

25 30

346

184 424

Ile Ltu Mot 35

Asp Aog Asn Ltu log Luu 40

Poo Asn Ltu

llu 45

Sto

Phu

Val

Arg

lla

ViI

L/s

Asn

Luu

Giu

Asn

Gla

Seo

Gly

Ilu

llu

Ala

Ilu

Ltu

50

55

60

Arg

isn

Leu

Gla

Gro

-ops

Leu

Pro

Ger

Ala

Thi

a o c

Al a

Pn

Igp

oms

65

70

75

80

iis

Poo

IIi

Hi

Gle

Lug

Ala

Gly

Aip

Trp

Gic

G0i

Phe

Arg

UGi

Lpi

85

90

95

Ltu

Tho

PPe

GGs·

Luu

Val

Tho

Luu

ilu

Gin

Ala

lin

llu

Gla

Gln

IG—

100

110

110

VlI

llu

Gin

ll/

Gl/

Gl/

Suo

Poo

Gly

Glu

Poo

Seo

Mly

Geo

0 li

Ser

115

120

125

Thr

Ile

Asn

Pro

Suo

Poo

Poo

Sur

Lys

Giu

Suo

iis

L/s

Suo

Poo

isn

130

135

110

Met

lla

TT—

Gys

Geu

tu-G

His

Pro

Mlu

Giu

Lec

uol

Leu

Lgl

u 0 l

Ho i

145

150

155

160

Str

Ltu

Gin

0Io

Gro

Top

Ala

Pro

Meu

Ser

Ses

Ops

Ooo

Soe

GGe

oo i

165

170

175

Ltu

lin

Leu

Ala

ll/

cys

Luu

Seo

Gln

Leu

HaLs

Seo

Gl/

Leu

Phu

Leu

180

lt58>

110

T/o

lin

Gin

Ltu

Ltu

lin

Gla

Leu

Glu

Gly

Ilo

Sst

Meo

Gla

Geu

Gly

195

200

205

Pro

Tho

Leu.

Asp

Tho

Leu

Gln

Leu

1sp

Val

Al i

Ais

0Ph

Glo

Tho

Tho

210

215

222

Ile

hop

Gil

Gln

Met

Uto

Glu

Liu

Mly

Met

Ale

tGl

A0 a

Los

a o l

uoi

225

300

235

240

Thr

lin

Gly

Ala

Met

Pr o

Ala

Phe

Ala

iia

Ale

roi

aon

Uoi

Igi

L 0 1

245

200

255

Gly

Gl/

Val

Leu

Val

Ala

Seo

His

Leu

Gln

Ser

Phe

Ltu

ilu

Val

Suo

260

265

277

T/r

log

Val

Ltu

Log

iis

leu

Ula

Gln

Pro

Ser

Gly

oiu

Geo

ll/

Gly

275

200

285

Str

lin

Ser

Phu

Leu

Leu

Lys

SeG

Leu

Glu

Gln

Vv1

Mio

Gys

Ilu

Gln

290

290

330

Gl/

Asp

li/

lla

Gla

Leu

Gln

ilu

Lys

Ltu

T/s

lla

Tho

305

310

315

184 424

347 (2) INFORMACJE O SEQ ND Nr: 168:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 302 aminokwasy (B) TYP: aminokwas (C) NLOŚĆ NNCN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ll) TYP CZĄSTECZKI: białko

.«i)	OPNS SEKWENCJI:	SEQ	ND	no:	168:
Csn 1	Cys Srr lii Mit Nil 5	Asp	Glu	Ali	lii His His Aeu 5ys 51] Ppo 10 15
Poo	lii Ppo Iiu Liu Syp 20	Poo	/isn	Ais :25	Liu Asn Pcy Alu Aip Av1 Asi 30
lii	Liu Mel Asp Aig Asn 35	Liu	log 45	Leu	Poo Asn Iiu Glu Arr PPh Av1 45
log	lii Vv1 Lys Csn Liu 50	llu 55	Hn	Ala	Sio Gly Ili Alu Ala Ali Aer 60
log 65	isn Lii lln Poo Cys 70	Liu	Pro	Ser	lii Thr Ala Ala Piso Prr 51] 75 80
iis	Poo 1li lii Ile Iys 85	Ali	Gly?	Aso	Top Gln Glu Phe Arg Alu Ays 90 95
Ltu	Cho PPh Tjye Liu Va1 100	The	Leu	Glu 105	lln .Ala Gln Glu Gln Gin AT? 110
Vi1	llu Giy lly Gly lly 115	Sio	Poo 205	Gly	Gly Gly Sio Gly Gly? Gly Sei 115
isn	Mit Ala Pro ilu Leu 130	Gly 135	Oop	Thr	Leu Asp Thr Leu Gln Leu Aip 1-40
Vai 145	lii Asy Phi Ali TłA 15 A	The	Ile	Trp	lln Gln Me5 Glu Glu Leu Gly? 005 110
Mit	lii Piso Ala Liu lln 165	Pro	Tho	Gln.	lly Ala Me5 Pro Ala hlp Ala 170 175
Sio	lii Phe Cln log Arg 180	lii	lly	Gly? 85 A	Vii Liu Va1 Ala Ser Hii Leu 190
lln	Sio Phe Leu Glu Vi1 195	Ser	Tyo 00 A	Arp	Va5 iuA Aog His Liu Ala Gln 205

348

184 424

Sur Ku Cly	ily euu ily	Cly Siu 215	Cln Sru	She Urs Les 222	Cys	eyu	Lrs
	210
Glu	Cle ViO	Gog Lys Iii	VCl GCy	Acp VCu	Tli Cli Les	GCa	V1a	Vus
225		223			235			224
Cug	Cys Tli	iho iyu Lus	Vcu Vys	Vis Vsu	Glu Gls Uru	Val	Vce	Vcu
		245		250			225
Cly	His &ιο	Llu VCy Ile	Sir Top	ACa !ρο	Ues Ku Siar	Cys	Psu	Kr
		260		226		270
Cle	Gll Ces	GCi Veu Tli	Cly cy-s	Leu Kt	Cle Lrs His	Ser	GCy	Vcu
	275		280		255
Phr	Cru iyu	Gln VCy Luu	Ces Cle	Ala Veu	Gls Cly Ile	Ser
	290		295		330
INFORMACJE	; O SEQ ID	No: 169:
(i) CECHY	SEKWENCJI	:
	(A)	DŁUGOŚĆ: 317 aminokwasów
	(B)	TYP: aminokwas
	(C)	LCOŚĆ NLCL	: pojedyncza
	(I)	TOPOLOGIA:	liniowa
(ii) TYS	CZĄSTECZKI	: białko
OPIS SEKWENCJI: SEQ II nr	o V 69:
Gse	Cys Sn	ile ert Ile	lPO Glu	ile Ilt	HP1 His Luu	Lyv	Arg	Psu
1		5		10			15
Sur	Cli Psi	Vrs Cuu Asp	Prr Asn	Csn Cug	Asn Asp Gls	Asp	Val	Ku
		20		25		30
Lir	Luu Metr	Ais Vrg Av n	Leu Arg	leu Pro	Asn Leu Git;	Ser	Phe	Val
	35		0V		55
Cug	Tli Vil	Ly/ Asn Cuu	ilu Asn	Ala Ser	Cly Ile GSv	Gli	Ile	Lcu
	50		5V		60
Tog	Csn Cug	lin Sur CC/s	Leu Pro	Ser Ala	hho Gll Ali	Prr	Ser	Arg
65		70			75			80
His	Sur Ily	ile Ilr Lys	Ala Gly	Asp Τρ	Cle llu Phi	Aog	Glu	Lu/
		85		90			95
Cru	hho Phs	tir Vee Sv1	Vir Leu	du Gis	Ali dn ilu	Gln	Gln	Tan
		100		1D)5		111

184 424

349

ViI

Tlu

Gly 115

Gly

ilr Gly

Sui

Pro 110

Gly

llu

hio

Sti

GTy 112

Pro

Ile

Cer

Chi

lit

Asn

Piro

Sui

Pro

Ono

Ser

Lys

liu

Sti

His

Lys

Ser

Ppo

Asn

130

135

114

Mtt

Ala

Pro

Glu

Luu

GT|

Cro

Chi

Leu

Asp

Thhr

Leu

Tin

Leu

TAp

Vl1

145

110

115

116

Ala

Asp

Phe

Ala

Chi

TGt

Cle

Cip

GTn

lin

MaU

Glu

Ulu

Leu

GTy

MaU

165

110

117

Ala

hio

Alei

Ltu

Gir

Pro

Chi

Tir

GTy

Ala

Mrt

Piro

Aia

Phe

Ala

Csr

180

H8

110

Ala

Oht

Gln

Arg

Arg

Ci i a

Tly

Gly

Vći1

Ltu

Val

Ala

Ssr

His

Llu

GTn

195

200

220

Sui

Ohe

Leu

GTu

lal

Sep

Cyn

Arg

vaa

Ltu

Apg

His

Luu

Ala

GTu

Cro

210

215

222

Sui

Uiy

Gly

Ser

Tly

GT|

Cer

Tln

Ser

hhr

Llu

Utu

Lys

Ser

Llu

Glu

225

223

223

224

Tln

ViI

Arg

Ccs

ilu

GTa

Cly

Asp

Gly

Ala

AAa

Ltu

Tln

Glu

Lys

Leu

245

225

225

Cys

Ala

Thr

ryp

LyC

Leu

Cys

His

Piro

liu

Glu

Leu

Val

Leu

Luu

Gly

260

226

270

His

Sei

Leu

Gly

ilu

Pro

Crp>

Ala

Piro

Ltu

Ser

Ser

CCys

Pro

Ser

GTn

275

280

228

Ala

Leu

Gln

Leu

Ala

Tly

Cys

Leu

Ser

lln

Leu

His

Ser

Tly

Leu

Phe

290

295

330

Ltu

Typ

Gln

Gly

Utu

Lut

Gln

Ala

Leu

Tlu

GTy

ile

Ser

305

331

331

(2) INFORMACJE O SEQ lD Nr: 170:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 302 aminokwasy (B) TYh: aminokwas (C) ILOŚĆ NlTN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (li) GYh CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ND n;: 170:

350

184 424

Asn 1

Cys

Ser

I lu

LeM GLe 5

Aur

HCg

u L e

Dlu 10

Hii

U Li

Leu

Lye

Arg 15

Lso

Oro

Ala

Pro

L eu

Lee

ulp

Pro

Om

Sl n

Csn

Ase

ula

Si?

Asa

ulI

Tsc

20

25

30

Diu

luu

Meu

A e?

Ato

Asn

Leu

Leu

Leu

Tog

Ase

ulu

POo

Sec

SAe

Luu

35

40

45

Crg

Ala

Vai

lys

Ass

luu

Clu

Asn

Aii

Sur

Uiy

Dlu

Alu

Ala

Dlu

luu

50

55

60

Arg

Asn

Leu

Ali

Leo

Ays

Leu

Oro

Sur

liii

Ahr

Ala

Ali

Loro

Lsu

Arg

65

70

75

80

His

Oro

Ilu

Lin

Lii

Lys

Ala

Uly

App

Trp

Gin

Alu

Płieu

AAg

LAu

lys

85

90

95

Luu

Ahr

PPh

Lys

Leu

Val

The

Ahr

Glu

euu

Alu

u Ln

Aln

Gln

l Ln

G|n

100

105

110

Vel

Glu

Aly

GAy

Aly

LAy

Leo

Oro

Gi'

GUy

Aly

Ssr

Aly

AAy

L Ay

L eu

115

120

125

Cou

MuG

Ali

Mel

Ali

Leo

Aii

leu

Uln

Pro

Cho

Gln

Aly

Ala

Ael

Lro

130

135

140

Cli

Ohu

Ali

Ler

Ala

Ohu

lin

Arg

Arg

Ale

Aly

CL Uy

Val

Leu

Val

Ala

145

150

155

110

Kur

His

Leu

GAn

Ler

Ohu

luu

Glu

VaU

Ser

tyr

Arg

Val

Leu

Arg

His

165

17 L

115

Luu

Ala

GAa

Leo

Leu

Gly

Giy

Ans

Gly

K1g

Sei

' L n

lis

Phe

Olu

leu

180

18L

190

Lys

Sur

luu

GIi

Lii

Lal

Trg

Lys

Ul

Glu

Gly

Asp

Gly

Ala

Alu

Leu

195

200

205

lin

Clu

Lys

Leu

Lys

Ala

Ahr

tyr

Lys

Leu

cyn

His

Peo

AAe

LAu

Leu

210

21.5

220

Vii

luu

Leu

Gly

His

Kur

Luu

Gly

Ile

Pr·

Trp

Ala

Pro

Luu

Ser

Sur

225

230

23L

240

Tys

Oro

Ser

Gln

Ala

Luu

Uin

Leu

(Ula

Gly

<y?s

Leu

Ser

Gln

Leu

HSo

245

20L

255

Kur

Aly

Leu

Phe

Leu

Tyr

Gir

uin

Leu

Ans

Glu

uL a

luu

Glu

S Ly

Ile

260

65L

270

Kur

Pro

Ulu

Leu

Gly

Pro

Ahr

Leu

Asp

Thr

Leu

Uin

Leu

Lcp

Val

Aii

275

20L

285

184 424

351 asp Phe Cli iho iho ily iop Cln Cln Met Glu Clu Ulg Cly 290 295 033 (2) INFORMACJE O SEQ LI Nu: 171:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DIŁGGŚĆ: 331 vaiisorwwińó (B) TYP: aminokwas (C) LUOŚĆ NICI: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: liniowi (ii) TYS CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ LD no: 171:

Aso 1

C/s

Ssr

ily Met 5

Ile

Asp

GOu

Ile

ilt His 10

His

Leu

Lys

(Oy 15

Pro

Sur

Cli

Prs

Zet

Vee

Gvp

ipn

Asp

Avn

Aso

Asa

Lvp

GLu

Aso

Val

Ser

20

25

30

Ile

Ues

Met

tkis

Arg

Arn

Aso

Arii

Gvu

log

Asn

Seu

GOu

Ser

Phe

Val

35

40

45

Cug

Ali

Val

Lys

Gsn

Les

Glu

Asn

Ala

Κο

GCy

Ha

GCe

ACa

He

Vnu

50

60

Tog

Aso

Leu

Gln

Vrs

rys

Crs

Pro

S er

Air

Thr

Ala

Ala

Pio

S er

.lig

65

70

75

80

His

Sur

Ile

i Le

He

UAS

ULs

GIA

lvp

Coy

Gln

G Vu

Phe

Arę,

Glu

Lys

85

90

95

Luu

Tho

Phe

iTr

Vee

sva

HVr

Lei

O Vu

LLs

Ala

G ln

(O Lu

Gln

Gln

Tm

100

15V

111

Vil

Cis

Gly

GCn

V Cy

Gly

les

Pro

Gly

Pio

Pro

S er

GSy

Pro

Ile

tu

115

:ΐ:>0

115

iho

Ile

Asn

Pro

Sro

Pro

Pro

Ser

Lys

Glu

Sse

Vis

Lys;

Ser

Pro

Asn

130

13V

110

Mrt

Tli

Met

Ali

Vrs

A Va

Ali

Gln

Pro

rio

Gir:

G ly

Alv

Mil

Pro

.HSl

145

150

1L^5

110

She

Ali

Ser

Ale

Vhs

U Vn

Cul

Arg

A Va

Gly

Gig,

Val

Leu

Val

Ala

ln

165

170

175

His

Leu

Gln

S n

Vhs

U vu

ULs

Val

S er

Tin

Arg

Val

Uov

Arv

His

lov

180

85V

119

352

184 424

	Ali	lln	Pro Seo lly lly Sio Gly? lly Ser lln Sto Phe Liu Leu Lys
195	220	220
	Sio	Iiu	Gln Ali AaV	1A0 Pys Ali	Gln lly Asp Gly Ala Ala Leu Gln
		210		221	220
	llu	Iys	Leu (5ys Ala	Shr Clił Ly.	Sap Lys Hia Sio POo Gli Uin yiU
	555			220	225 240
	Liu	Iiu	Gly? Ais Ser	Ppu Gly Ile	Sao Nie Alc pin Aeu Ser 'Ar Lyu
			245		250 550
	Poo	Sio	lln lii Liu	lln Iiu Ali	lly Tys Liu Sio Cln Liu iis Sie
			260		265 270
	lly	Iiu	Phe Leu Tyo	lln lly Leu	Ltu lln Ali Leu Glu Gly Ale Ser
			275	280	2255
	Poo	liu	Leu Gly Pro	Thr Leu 5Vsp	Tłir Liu lln Leu App Va5 Ala Asp
		290		229	300
	Phi	Cli	Tłir Tłu 5Ii	Tta Cln lln	Met llu Gilu Liu lly
	305			310	331
2)	INFORMACJE O SEQ	ND Nr: 172:
	(i) CECHY SEKWENCJI:
			(A) DŁUGOŚĆ	: 302 aminokwasy
			(B) TYP: aminokwas
			(C) NLOŚĆ NNCN: pojedyncza
			(D) TOPOIOGNA: liniowa
	(li) TYP CZĄSTECZKI: białko
xi)	OPNS	SEKWENCJI:	SEQ ND no:	: 172:
	isn	Gys	Sei Ile Mit	lii Asp llu	lit Ile His His Liu Lys losg Poo
	1		5		05 15
	Poo	lii	Ppo Leu Leu	Asp Poo Asn	isn Leu Asn Asp Clu Asp Va1 Ser
			20		25 30
	lii	Iru	Met Asp Arg	Ann Leu log	Liu Pr. A^n Leu llu Ser Phe Val
			35	40	45
	log	Gil	Val Lys isn	leu Glu Asn	lii Ser Gly Ile (llu Ala Ile Leu
		50		55	00
	log	Csn	Leu Gln Piso	Cys Leu Pro	Sto Ala Thr Ali Ali Poo loA log
	65			70	55 80

184 424

353

Sis

Poo

Ile

I ii

81i 85

l8S ASs

Gln ai| Gsp gpi G8u ilu Aro lir

Cyu

99

95

—tu

Tlo

Phe

18((

8ee

V8l

aau

Lei

Oli

Alu

IGs

a 8 n

TlG

Gli

ulu

TlG

100

105

111

Vai

llu

G1|

liy

lly

Gly

Ssi

8po

Gly

Gly

Gir

Sio

Gly

Gly

Gly

Ser

115

112

125

Asg

Mit

Alu

Tlo

TlG

Gly

Alu

8ei

Poo

Ala

Phe

Ala

Ser

Ala

Phe

Gln

130

:3:35

140

Aog

Aog

Alu

cir

Gly

Val

Liu

wi

Ala

Ser

HSs

Ltu

lln

Sio

Phe

Leu

145

115

115

160

llu

Vai

Ssr

Tro

log

Vaa

Aiu

Aig

His

Leu

Alu

Gln

:,2:0

Sto

Gly

Gly

165

170

115

Sio

ilr

Gly

Ssi

8lu

Ser

sro

Leo

lei

—eu

Sis

08U

—tu

Gic

unl

Vv|

180

185

110

—rs

Ili

Glu

81y

831

p 8y

Ais

ΙΟΙ

Ι18

—lu

Gli

G8S

liu

Cye

Pli

Thr

195

220

205

Gro

—ys

Ler

Cys

His

Pro

Glu

81i

liu

Val

Leu

Liu

Gly

His

Sei:

Lru

210

218

220

lly

lii

Poo

Top

ila

Pro

Leu

S8r

Ser

Cys

Pr o

Ser

Gln

Al a

Leu

(Sin

225

223

223

240

—tu

Aia

Gly

Ars

Liu

Ser

lin

Lei

Sis

Ser

Gly

Atu

Ph8

Atu

Tyr

Aln

245

250

255

ilr

Ltu

Leu

G lu

81a

a 8u

—tu

Gly

uli

Nur

Pop

S 8u

liu

Gl—

uio

Thr

260

265

2-70

—tu

GPO

Thl

—tu

TlG

Leu

Aip

8aa

Aia

Asp

Phe

Ala

Tho

Thr

Ile

Pop

275

2 28

285

iln

CiG

Met

81u

81u

Leu

Atu

Us 8

11 8

lua

Alh

S8U

lia

Pre

290

:298

300

(2) INFORMACJE O SEQ ND No: 173:

(i) CECSY SEKWENCJI:

(i) DŁUGOŚĆ: 317 amiGskaa/óa (B) TYP: aminokwas (C) ILOŚĆ NiGi: pojidyGcza (D) TOPOLOGIA; liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: białko

354

184 424

xi)	OPlE SEKWENCJI: EEQ	ND -	nr :	17 :
Gse 1	Tys Eeo lit Mtt ULt SsG 5	Clu	lit	lit Ηΐ o Hio Lut Lso Og. Όο 10 15
Poo	Gli Poo Uru Leu Asp Poo 20	Gss	Ass 25	Leu Gsn Asp (Ou Asp Vi1 Ero 30
Ile	Leu Met: Ars Grg Ast Leu 35	Arg 40	Leo	Pro Ase Uou Glu Ser Phe eeU 45
Aog	Ali Val Tys Ass Ltu (lu 50 55	Asn	(tli	Erg (lr Ilu Glu Ala Ile Llm 60
Aog 65	Gse Let TAn Pro (Tys Leu 70	Poo	Eto	Ale Cho lii Ali Poo Ero Ta» 75 80
His	Poo Ilu Tle Ile Lys Ciii 85	GAy	.Asp	Ttp Cle Glu Phe Aog (lu Lus 90 95
Uru	Tho Pho Lis Teu Va 1 Thr 100	Leu	Glu 105	Gln Air UTn Glu Gln Gln rys 110
Vi1	(lu Gly Alu Gly Gly Ser 115	Prr 120	GTy	GOo Prr Aor Gly Pro o0e Eto 112
Tho	lle Ars Too Ter Pro Poro 130 135	Ser	Lys	GLo Ses sTs Lys Ser OHi Usn 110
Met 145	Ali ΤΤτ GAn GL_r Ali Met 150	Poo	Ali	POh Gli Ser Akii PhL Cle Targ 155 116
Aog	Ali GAe Gly Val Leu Va1 165	Ala	Ero	HHi Leu Gln Ero Pht Ltu GAu 170 117
Vi1	Eeo Tyi Oag Tal Leu Aru 180	Hic	Leu 180	ALu Gic loo les Glp oTy Ero 190
Air	(ls Ser Ole Ter Phe Leu 195	Leu 2200	Lys	Sru Lee sTu GLo VaL Aog lnu 220
lle	Ale GCn 013X3 Gly Ali Ala 210 2210	Leu	Gln	Alu Lyo Lst Tys Ali Tho Tys 222
Lys 225	Utu Cys His Pro Glu Glu 200	Leu	Vi1	Leu Leu Gly His Eeo Leu Gly 235 22(0
Ilr	Poo Ttg TAu Pro Leu Ser 245	Ser	cys	Pas Oos OTn Als Leu GTn Leu 250 225
Ali	(ls Cys see Ter GTn Len 260	His	Uer 250	ELp Ler ATe Leu Tyo L 0n GLu 270

184 424

355

Leu

Leu

Gln 275

Ala

Leu

Glu

Gly

Ile 280

Ser

Pro

Glu

Leu

Gly 285

Pro

Thr

Leu

Asp

Thr 290

Leu

Gln

Leu

Asp

Val 295

Ala

Asp

Phe

Ala

Thr 300

Thr

Ile

Trp

Gln

Gln 305

Met

Glu

Glu

Leu

Gly 310

Met

Ala

Pro

Ala

Leu 315

Gln

Pro

(2) INFORMACJE 0

SEQ ID Nr

: 174 :

(i) CECHY SEKWENCJI:

	(A)	DŁUGOŚĆ:	302	aminokwasy
(ii) (xi) OPIS	(B) TYP: aminokwas (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa TYP CZĄSTECZKI: białko SEKWENCJI: SEQ ID nr: 174:
Asn Cys 1	Ser	Ile Met Ile 5	Asp	Glu Ile Ile His His Leu Lys Arg Pro 10 15
Pro Ala	Pro	Leu Leu Asp 20	Pro	Asn Asn Leu Asn Asp Glu Asp Val Ser 25 30
Ile Leu	Met 35	Asp Arg Asn	Leu	Arg Leu Pro Asn Leu Glu Ser Phe Val 40 45
Arg Ala 50	Val	Lys Asn Leu	Glu 55	Asn Ala Ser Gly Ile Glu Ala Ile Leu 60
Arg Asn 65	Leu	Gln Pro Cys 70	Leu	Pro Ser Ala Thr Ala Ala Pro Ser Arg 75 80
His Pro	Ile	Ile Ile Lys 85	Ala	Gly Asp Trp Gln Glu Phe Arg Glu Lys 90 95
Leu Thr	Phe	Tyr Leu Val 100	Thr	Leu Glu Gln Ala Gln Glu Gln Gln Tyr 105 110
Val Glu	Gly 115	Gly Gly Gly	Ser	Pro Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ser 120 125
Asn Met 13 0	Ala	Ser Ala Phe	Gln 135	Arg Arg Ala Gly Gly Val Leu Val Ala 140
Ser His 145	Leu	Gln Ser Phe 150	Leu	Glu Val Ser Tyr Arg Val Leu Arg His 155 160

356

184 424

Ltu Ali Gln

Poo Ser 165

lly

lly Sio

Gly Cly Sio 0

Gla Sio

Phi Leu Lii 175

Lys

Sio

Leu

llu

Gln

Vi1

log

Lys

1li

Cln

ily

Aip

lly

Ali

Ala

Lir

180

118

119

lln

llu

Lys

Iiu

Tys

iia

TTo

Tyr

Lys

Leu

Tys

His

Pro

Alu

Glu

Lir

195

200

220

Vi1

Liu

Leu

lly

iis

Ser

Iiu

Gly

Ili

Peo

Cep

iii

Poo

Leu

Ser

Ssi

210

221

222

Cys

Poo

Ser

lln

Ala

Iiu

lln

Iiu

Ala

Gly

Cys

Liu

Sio

lln

Leu

Hii

225

230

235

224

Sio

lly

Leu

Phi

Leu

Cyo

Cln

Gly

Leu

Łeu

lln

Ali

Liu

llu

Gly

Ili

500

255

255

Sto

Poo

Glu

Iiu

Gly

Poo

The

Leu

Aip

Che

Leu

Gln

Liu

Asp

Vi1

Ali

260

226

220

Asp

Phi

Ala

TłA

ThA

Ile

Top

lln

Gin

Mit

Glu

Glu

Lii

Gly?

Mit

Ali

275

280

228

Poo

Gli

Leu

Cln

Pro

TłA

Gln.

lly

Ala

Met

Pro

Ala

PPn

Ala

290

229

330

nn/oumatje O

SEQ NE

i Nr

: 175:

(i) CECiY SEKWENCJI:

	(1)	DŁUGOŚĆ: 317 aminokwasów
	(B)	TYP: aminokwas
	(C)	NLOŚĆ NNCI: pojedyncza
	(D)	TOPOIOGNA: ain0oaa
(ll)	TYP	.CZĄSTECZKI: białko
(ei) OPNS	SEKWENCJI: SEQ ND no	: 175:
isn Tys	Sei	lii Met lir Asp llu liii	Nil	HPa	His	Liu	Lys	log	Piso
1		5	10					15
Poo Sil	Ppo	Leu Leu Asp Poo Asn Asn	Iru	Asn	Asp	llu	Asp	Vi1	Ser
		20 25					30
lit Liu	Mel	Asp log Asn Leu log Leu	Poo	Asn	Leu	Clu	Sap	Phi	Val
	35	40				45
log Ali	Vv1	Iys Asn Liu Glu Asn Ali	Sio	GSy	Ile	llu	Ala	lit	Leu
50		55			60

184 424

357

Aog Asn 65

Ler lin Pro G/s 70

Leu

Piso

Ser Ala

Thr 75

Ala Alu

Geo

Suo Al80

iis

Pro

o Ii

OIo

Ilu

Lys

Ala

Gly

Asp

Mir

Gln

Glu

PPh

Gco

ilu

Lyi

85

90

95

Ltu

Tho

Phh

Tyr

Lec

Nol

Litu

Lev

U0u

Tho

tui

uin

Glu

Gls

a 0 n

C|i

100

110

rn

ViI

Glu

Gly

Gly

Gly

Gly

Ser

Piso

Gly

Mlu

Poo

Sto

Gly

Geo

OIa

Gsu

115

110

112

Tho

Ilo

Asn

Per

Met

Geo

Geo

Ger

L/s

Glu

Seo

His

Lys

Oso

Geo

Mm

130

115

114

Mut

Ala

Ser

Ali

MPh

Mla

Gio

Mrg

Ala

Gly

Gly

Wl

Leu

wi

Mli

Geo

145

150

155

116

iis

Leu

Glu

Ger

Phu

Luu

Glu

Wl

Ser

Gir:

Aog

Val

Leu

Glsg

iis

Leu

165

100

117

Ala

Gln

Pro

Ser

Gly

OOy

lar

Gly

/Oy

Suo

lic

/et

Ghe

Lec

Igu

Sur

180

115

119

Sto

Luu

Glu

Gln

wi

Aog

Lys

Ile

Gln

Gly

Asp

ll/

Ala

Ala

Glu

Mlu

195

200

225

Glu

L/s

Leu

Cys

Mli

MTh

Ml—

Gys

Ltu

y-s

His

Piso

Glu

Glu

Llu

Val

210

221

220

Ltu

Luu

Gly

H ii

Oso

Geu

Mly

Ilu

Poo

Top

Ala

Piso

Leu

Sei:

Ssr

oyy

225

230

235

224

Poo

Ser

G lu

Mla

ltu

Gin

Leu

Ala

Gly

cy-s

Ltu

Sto

Gln

Leu

iis

Ssr

245

200

225

Gly

Luu

hU G

Uug

Tyr

Gln

Gly

Luu

Leu

Gln

lla

Luu

Glu

Gly

He

Ser

260

265

220

Pro

ilu

Leu

Gly

Peo

Tho

Luu

Asp

Thr

Leu

lin

Ltu

Asp

Val

Ala

Asp

275

280

285

Phu

Ala

Thh

Tlh

OIo

Mir

Min

Gln

Mut

Glu

Glu

Luu

Gly

Met

Ala

Piso

290

229

300

GIi

Luu

GGe

Geo

Glh

Min

Mly

Ala

Mut

Poo

Ala

Phu

Ala

305 :31.0 315 (2) INFORMACJE O SEQ II No: 170:

(i) CECiY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 305 aminokwasów (B) TYP: aminokwas

358

184 424 (A) DUOŚĆ NI/D: pojedyncze (D) GOOOUOAIA: iSniowi (SS) GYO CZĄSTECZKI: białko

xi)	OPDK KEKWETCJD:	KEQ	ID	nr:	6:6:
Aon 1	Tyo Sru Lin Ael Lle 5	Dar	Gln	CAi	Lle Hii Uli Hnn Lyi PLg leu 10 15
Oro	Ale Poo luu luu Aop 20	Oro	Ton	Asn 25	Luu Ann Tnp Ulu Aop Vil Ser 30
Dlu	Leu MuG Acp Arg Aon 35	Leu	Arg 40	Luu	Oro Ann Leu LAu Lsu LPh Lv1 45
Arg	Ale Vv1 Lyo Aon Leu 50	Alu 55	Aon	Aii	Kur Gly Lin LAn Lin Lin Leu 60
Arg 65	Ton Leu Ulu Oro Cyn 7L	Leu	Peo	Sur	Ala Tho Ala Ala Pro Ser Arg 75 80
His	Oro Iln Dlu Diu Ly· 85	1l.a	GAy	Aop	Ti— Gin Glu Phe COrg Glu Lys 90 95
Luu	TGh Ohu Tyr luu Val 100	Gho	Leu	Giu 105	Uin Ale Gln Glu GAn LAe Ays 111
Vel	Glu Ul' Gly Aly Uly 115	Seu	Oro 120	Gi'	ily Giy Ser Gly GAy LAy Lsu 112
Aon	MuG Ain Tyr Lyo Leu 130	Cyo 135	His	Pro	liu Glu Leu Val Leu Leu LAy 110
Hi o 145	Sur Leu LAy Lii 1lo 150	Poo	OCa	l LO	Oro See U Lr Kur Prs O.r dn 155 116
Cie	leu GAa Leu Ala iLy 165	Ali	Sne	U Lr	Klo Leu SLs luu GlH ?lu Pl: 170 175
Leu	Tys- Alu Gly Leu Leu 180	Gin	Ala	Leu 15L	Giu Cis Ile Ser Pro GIu Leu 110
ily	Pro Tho Leu .Tsc Tho 195	Leu	Uin 200	Leu	Inp Val Ale Asp Phe Ala ΊΑ/τ 205
Ahr	Diu Ττρ Gin Gln MeG 210	Alu 215	Glu	Leu	Gi' MuG Cie Pro Ala Leu GAn 220
Oro 225	Cho GIn Gly Lle 1l t 230	Mut	ooc	lAe	Phu Sen lLa SUo Gln l.g Aha 235 220

184 424

359

Ala

Tly

Tly

Val

Lru 245

ViI

Ala

Dup

His

Ltu 250

Tln

De;

hhr

Utu

Tlu 255

ViI

Dtp

Ty;

Arg

ViI 260

Luu

Arg

His

Leu

A1a 655

lln

Prc

Thr

Pro

Leu 270

Gly

Prp

Ala

Dr;

Ser 275

Leu

Pio

Uln

Dup

Phe

Luc

Ltu

Lyc

Ser

Leu 285

Glu

Gln

AiI

Arg

Uys 290

Ile

Gir

Tly

Asp

Tly 295

Ala

CHa

Ltu

Gln

Ulu 330

Lys

Leu

5ys

ACi

Chi

305 (2) INFORMACJE O SEQ ND No: 177:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 320 aminokwasów (B) TYO: aminokwas (C) NUOŚĆ NNCN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: lSiSoan (ll) TYO CZĄSTECZKI: białko (xi) OPNS SEEWEEC^CJi CEQ ID nCi 177 :

Csr Cys 1

Ser

I li

Aea 5

I 5e Nnr

Gir

p 5 e

Ulu Hii 15

UCs

leu

is!

Scg 15

Pr u

hio

Ala

Pro

Llu

Ceu

ucp

Asp

Asp

Oc n

Asu

Asc

Aa p

LUu

Si a

Val

Asp

20

25

30

lit

Ueu

Met

Acp

Apg

5ln

Utu

Arg

Ltu

Pro

Asn

Leu

GTu

Asu

CPh

Val

35

40

45

Ang

Ala

Val

Lys

Csr

Leu

Tlu

Csr

Ala

Ser

Tly

Ile

Glu

AAa

Cli

Leu

50

55

60

Arg

Asn

Llu

Gln

Pro

Cys

Leu

Pro

Dup

Ala

Thn

Ala

Ala

Pro

Ser

Arg

65

70

75

80

His

hio

Ile

Ile

Ile

Uys

Ala

Gly

Asp

Trp

Ulw

Glu

Ohr

Arg

Glu

Lys

85

05

95

Ltu

Thi

Oht

Tcr

Ceu

ual

ICg

Ilu

u5u

Tlu

Alu

1 Cn

acu

1 5 u

ula

Τ|η

100

105

110

lal

Ulu

Gly

GTy

uir

Gly

Stn

hio

Gly

Glu

Pro

Ser

Gly

Pro

Ile

Sui

115

120

115

360

184 424

iho

Lir 13 0

Acn

Aro

Sfau

Pro

Pro 115

Ssr

VL/

Cis Sns

His 114

VU/

Vro

Acs

Mit

Cli

T/o

Cys

Ces

cy-s

His

Poro

Glu

Clu

Llu

Gal

Vi^u

Viu

V1y

GHi

145

115

115

116

Sro

Cru

GCy

Ili

Pro

Tip

Ala

Pro

Les

Seo

Ser

dcs

Sur

Seu

Glo

Ale

053

117

117

Ces

Cln

Leu

Ala

Gly

Cys

Lts

Ser

Vla

Ces

His

Sse

Gly

Vie

VPo

Veu

180

115

110

l/i

Cln

Gly

Ces

Cru

Gln

Ali

Leu

Glos

GCy

lle

Ser

Pito;

GCa

Vcu

Gly

195

200

220

Aur

hho

Leu

lPG

Tho

Lru

Gln

Leu

Alp

Vil

Ala

Aip

Phe

ACa

Thr

Tir

210

215

222

Ilr

ioO

Gln

ile

Met

Glu

Glu

Leu

Gly/

Mrt

Ala

Pso

Ala

Leu

GCn

Vpo

003

223

225

224

iho

Cln

Gly

Al i

Met

Pro

Ala

Phe

Gil

Star

Ala

Phe

Glo

Arg

llrg

Ala

245

220

225

ily

Cly

Val

Les

Vil

Ali

Ser

His

Leu

Cln

Ser

Phe

Leu

Glu

Val

Ser

260

226

220

lyo

Tog

Val

Les

Gog

His

Leu

Ali

Gln

Pro

hho

Pro

Leu

Gly

Pro

Ala

275

280

225

Sro

Sro

Leu

P:oo

15 ln

Siar

Phe

Leu

Leu

irs

Ser

Leu

Glu

Gln

Val

Arg

290

295

300

Cys

Ilr

Gln

Gly

Asp

Gly

Ali

Ali

Lets

Cle

Glu

Lys

Leu

Cys

Ala

Thr

305

330

315

330

(2) INFORMACJE Ś SEQ II Nu: 178:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 305 lminrkwlpów ;B) TYS: aminokwas (C) LUOŚĆ NLCL: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: iinSrwi (ii) TYS CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ LI er: 178:

Gsn Cys eyl Ilr Mrt ily TPG Gls Ilr Lir His His Lru Cys Tog Sur

184 424

361

1

5

10

15

Poo

Ali

Pito

Leu

Leu

Isp

Poo

Ass

Gsn

Lsu

Asn

Asp

(iu

Ars

Cv1

Tee

20

25

30

lir

Ltu

Met

Asp

Cog

Asn

Seu

(org

Ltu

Poo

Ass

Leu

Glu

Ser

TPi

Av1

35

40

45

Aog

Gil

ViO

ers

Asn

Leu

(lu

Ass

Ali

Eto

Ais

Ile

(lu

Ali

lir

Leu

50

55

60

Aog

Asn

Leu

U Au

Tro

ocs

Tis

Prs

Uor

AOo

LOc

ATa

A1o

lir

lo r

Porg

65

70

75

80

His

Poo

Ile

L lu

Tle

U.s

Lis

Gic

Aop

Trp

spa

STu

Als

irg

G0 u

Cps

85

90

95

Ltu

Tho

Phe

TAr

Leu

Va1

Cho

Uru

Alu

GAn

Gla

Cln

(iu

Glu

TAu

TAs

100

105

110

Vi1

(lu

GAy

Gly

ris

ris

Eeo

Poo

ris

Glii

Gly

Seo

GA|

GAy

Cly

Tee

115

120

112

Ass

Mrt

ALa

Poo

(Ou

I^u

(ClA

Poo

Tho

Lsu

Cas

Aho

Lst

Cle

Tse

Ais

130

135

140

Vi1

Ali

Asp

PPi

Tln

ATr

Tho

III

Oop

NOm

OSy

l et

Cls

Utr

Uo u

GOU

145

150

155

116

Mtt

Ali

Pro

Ali

Tee

U 0 n

los

Tho

oCn

Tlp

ilr

A ot

A^oi

Lto

oCe

Ali

165

170

117

Eto

Ali

Phe

Gln

(org

Aog

Ali

csis (Os

Val

Gru

VaO

Ali

Sel

THs

Leu

180

185

190

Ale

Eeo

PhL

Leu

(Ou

Val

Ser

Tyr

log

Val

Leu

Aog

HHi:

Tsu

Ala

Gln

195

200

220

Poo

Tho

Pro

Leu

ris

Pro

Ala

Seo

Eeo

Leu

Pro

Aln

Ser

PPi

Lsu

Leu

210

2210

220

ess

Eeo

Leu

G Au

Gir

S o 1

Ai|

Lyr

ST e

Gis

OLy

Asp

COS

sSa

AT a

Lei

225

2330

235

220

(Os

reu

Lys

Lee

Cyc

s0 a

Ali

Tyi

OCS

Tso

Ase

His

Tso

Gso

o Tu

Leu

245

500

225

Vii

Uru

Leu

Gly

His

E!er

Leu

Gly

Ile

Pro

Tsp

Ala

Poo

Leu

Ser

Sierr

260

265

270

Tys

Poo

Eeo

Gln

Ali

Leu

Gln

Leu

Ala

Gly

TT-s

Leu

S<eir

Gln

Leu

His

275 2280 2295

Slo Gly Leu Phe Uru łSgr Gln CLiy Leu Leu Gln Ala Leu Glu Gly Ile

362

184 424

290 295 300

Sio

305 (2) INFORMACJE O SEQ ND No: 179:

(i) CECiY SEKWENCJI:

(1) DŁUGOŚĆ: 320 am0nokwgsóa (B) TYP: aminokwas (C) NLOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: linieai (il) TYP CZĄSTECZKI: białko (xl) OPNS SEKWENCJI: SEQ ND no: 179:

isn Tys 1

Sio

lii Wit 5

Nil Asp

Clu

INa

Ala 10

Aii

nis

Aie

Ays

Pi] 15

Pro

Poo

lii

Poo

Liu

Liu

Asp

Poo

Csn

Acn

Aie

Asi

Aip

Alu

Acy

5v1

Asi

20

25

30

lii

Liu

Wit

Acy

Al]

Alm

Iiu

Arg

Liu

Piso

Acn

Alu

Alu

Aer

Pin

Wl

35

45

45

log

lii

Vi1

Lys

Ais

Liu

Clu

Asn

All

Ser

Gly

Ale

Alu

Ali

Alit

Lei

50

55

60

log

Gsn

Lei

A ln

Aoo

Tys

Liu

Poo

Seo

Ala

Tho

Ali

lii

Pro

Asi

Al]

65

70

75

80

iis

Poo

Ili

t Ni

A li

Lys

Cli

lly

Asp

Trr>

Cln

Glu

Phi

SAA

Aia

Pys

85

90

95

Liu

Cho

Phi

Tyo

Liu

Vi1

Cho

Liu

Giu

Alu

Ali

llu

A la

A ln

Pla

ATs?

100

105

111

Vii

llu

lly

Gly

Pin?

Cly

Sio

0'.

(Sly

Glu

Pito

Ser

Gly

Piso

Ile

Ser

115

205

11^

Che

Nit

Asn

Pro

Asi

Poo

Pro

top

Lys

Glu

Ser

His

Lys

Ser

Piso

Asn

130

135

114

Wit

lii

Pro

ola

Alu

lly

Pro

Thr

Leu

Asp

Tho

Leu

C1a

Leu

Aa p

Val

145

150

155

116

lii

Asp

Phr

iii

Tłir

Thr

Ile

Tp

lln

lln

Wit

Glu

llu

Leu

Ply

Met:

165

17 0

175

Cli Pro Alg Iiu Cln Poo Tho Cln Gly Ala Met; Pro Ala Phe Ala Ser

184 424

363

180 185 190

Ala	Phe Gln 195	Arg Arg Ala Gly	Gly Val 200	Leu Val Ala	Ser 205	His Leu	Gln
Ser	Phe Leu 210	Glu Val Ser Tyr 215	Arg Val	Leu Arg His 220	Leu	Ala Gln	Pro
Thr 225	Pro Leu	Gly Pro Ala Ser 230	Ser Leu	Pro Gln Ser 235	Phe	Leu Leu	Lys 240
Ser	Leu Glu	Gln Val Arg Lys 245	Ile Gln	Gly Asp Gly 250	Ala	Ala Leu 255	Gln
Glu	Lys Leu	Cys Ala Thr Tyr 260	Lys Leu 265	Cys His Pro	Glu	Glu Leu 270	Val
Leu	Leu Gly 275	His Ser Leu Gly	Ile Pro 280	Trp Ala Pro	Leu 285	Ser Ser	Cys
Pro	Ser Gln 290	Ala Leu Gln Leu 295	Ala Gly	Cys Leu Ser 300	Gln	Leu His	Ser
Gly Leu Phe Leu Tyr Gln Gly Leu Leu Gln Ala Leu 305 310 315 INFORMACJE 0 SEQ ID Nr: 180: (i) CECHY SEKWENCJI: (A) DŁUGOŚĆ: 305 aminokwasów (S) TYP: aminokwas (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID nr: 180:	Glu	Gly Ile	Ser 320
Asn 1	Cys Ser	Ile Met Ile Asp 5	Glu Ile	Ile His His 10	Leu	Lys Arg 15	Pro
Pro	Ala Pro	Leu Leu Asp Pro 20	Asn Asn 25	Leu Asn Asp	Glu	Asp Val 30	Ser
Ile	Leu Met 35	Asp Arg Asn Leu	Arg Leu 40	Pro Asn Leu	Glu 45	Ser Phe	Val
Arg	Ala Val 50	Lys Asn Leu Glu 55	Asn Ala	Ser Gly Ile 60	Glu	Ala Ile	Leu

364

184 424

Arg Inn Leu GAn Pro Cys

Leu

Oro

Seu Ain LAt Ain Lin 75

Poo

Ser

Tcg 80

65

7L

Hio

Oro

IIu

Ile

Ilu

Lys

Ale

li'

Asp

Tr—

LAu

LAu

LOh

Tog

Alu

Lys

85

9L

95

Luu

Aho

Phe

lys

Leu

Lal

LGh

Leu

Glu

Gln

Ali

Gln

Glu

Lle

LIn

Lys

100

105

111

Vei

Ulu

Gly

'Ay

Lly

Giy

isr

0lo

dy

Giy

dy

iSL

eon

GAy

GAy

Leu

115

120

112

Ann

MlG

Ali

Met

Ala

Oro

AU i

Luu

Gin

Poo

Cho

Gln

Gly

Ain

Met

APo

130

115

140

Ali

Ohu

Ali

Ler

Cl i

Phe

Uln

Tog

Arg

Ala

Gly

Gly

Lal

luu

Val

Aii.

145

10L

155

116

Kur

Hio

Leu

LAu

Ler

10l

Loh

Llu

UuL

Sin

aye

Ary

VoL

O.gv

Arg

His

165

10L

117

luu

Cli

Gln

i oo

LAh

Leo

Leu

lly

Oro

TUe

Sur

Kur

Leu

Poo

Gln

Leu

180

185

119

Ohu

Luu

Leu

ues

L eu

Leu

L Au

lin

Vel

Arg

lyo

Ilu

GIn

Gly

Asp

GIlg

195

200

225

Cli

Cle

Luu

lin

ilu

lyn

Luu

Ayo

Aii

Gho

Tyo

Lyo

Luu

Gyn

HSn

Oro

210

221

220

ilu

ilu

Leu

Lal

Luu

lUL

Gly

His

Ser

Leu

Gly

Lle

Peo

GOC

Ala

Pro

225

20L

235

224

luu

Kur

Ssr

cys

Pro

lOL

Gln

Aii

Luu

Gln

Leu

Ala

Gly

Tyo

Leu

Ser

245

50 L

255

lin

Luu

His

o KU

Lly

Lsl

Phe

Leu

UULT

GOn

lly

USA

luu

Gin

Ala

Leu

260

265

270

ilu

Uly

Ile

l su

Leo

LAu

Leu

lly

Oro

Cho

luu

Tnp

TłhO

Leu

Gln

Leu

275

28L

228

Aop

Vil

Ala

Asp

Phu

Ale

Thr

(Tło

ilu

Gop

Gin

Uin

Met

Glu

Glu

Leu

290

229

300

Ci'

305 (2) INFORMACJE O SEQ DD To: 181:

(S) CECHY SEKWETCJl:

(A) DŁUGOŚĆ: 320 eminonaasóa (B) CYO: amSnonaao (C) DUOŚĆ TlCD: pojedyncza

184 424

365 (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: białko

xi)	OPIS SEKWENCJI: SNQ	ND	nr:	11::
Asn	Cys Sio ile Mit Ilu 8sp	Gis	S8l	u8e Hii l8s lee Lys Arg i/8
1	5			10 15
Pos	Ala Poo Atu Liu Ac/ 8ro	Aso	A8C	G8u Asn G8p —tu Asp Val Ser
	20		25	30
iii	Ltu Met Asp Gorg Asg Leu	Ar-g	Leu	Prs Asg Aiu Glu 8π 8Pl Val
	35	40		45
Aog	lia \Vi1 lys Asn Atu (Slu	ASG	Ala	Sio lir iii Glu Alu 8lu Leu
	50 55			60
log	Asg Leu lin Prs Uys Leu	Prr o	Ser	Ala Tlr Gla lia Prs Sto Aog
65	70			75 80
Sis	Poo Ile lit Ili lys Ala	lly	Asp	Top lin llu Pli Gog Giu Lys
	85			90 95
Atu	Tlo Pli Tro —ru Vv1 Tlo	liu	Glu	Aln Ala lln Clu lin Gin 8yr
	100		155	111
aal	Alu Gly lly Air Air Ser	Pro	Gly	Glu Pro Sto G1| 8oo 8iu Ser
	115	120		125
Tlo	lit Ais 8oo Seo Poo Pro	Se8	Ly8	Alu Seo His L—s 8π 8po Gsn
	130 135			140
Mit	ila Met Ala Pos Ala Leu	liG	Pr8	Tho lin Air Ala Met Pro Aia
145	150			155 160
Ple	lia Ssr Ala Phi lin Arg	Gog	Ala	lly -31( Vi1 -ru Va1 Ala Ser
	165			170 117
Sis	ltu iln Sro Pli Lei 81u	Vai	u 8a	nyc Ars Od Leu A.rg H is Iii
	180		855	110
Gla	lin Pro Tho Pro liu Gly	Pro	Ala	Ser Ser Aiu Ppo Gln 8sr Phi
	195	200		220
lru	liu Lys Sto Aeu Aiu Gln	Va8	Aog	Lys 11i Aln Gly Asp Gly lia
	210 215			220
Gla	-ru Glu llu lys Atu Cy8	Ala	Tło	((ο Lys Aiu Cys His Pro Giu
225	230			235 240

366

184 424

Clu

Les

Vil

Irs

Ces 245

Cly His

Sro

Irs Cly 250

Ile

Aur

Tisp Cli

Poo 255

Les

Sro

Sse

Cys

Css

Ser

A Vn

sro

Lec

L Vn

Aoi

GSl

Gly

GyL

USA

l vr

Gir

260

265

220

Irs

His

Ser

sro

Lei

SVe

Leu

Typ

Ghi

ULS

Sui

Leu

Gin

USe

SVL

υΗ

275

228

285

Cly

Iii

Ser

Η^ο

Gir

Om

Gls

Pre

GVr

Ces

Pr v

Thr

Ioo

USA

pm

ihu

290

2i?5

000

Vil

Cli

Asp

PAo

Hi

GVr

Tho

Tho

(Π

ilpt

OLi

nvt

MGp

Gir

Gia

V Cy

305

30V

003

320 (2) INFORMACJE Ś SEQ LD Nu: 182:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(Α) IOGGOŚĆ: 305 aminokwasów (B) TYP: aminokwas (C) ILOŚĆ NlCL: pojed/oczi (I) TOPOLOGII:: liniowi (ii) TYS CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID no: 182:

Aso 1

C/s

Ser

Ilr

Met 5

Ile Asp

Glu

Ile

Ile H

His

His

Leu

Lyv

Arg 15

Pro

Suo

Cli

Pro

Cru

Lir

Gsp

Pro

Gse

Asn

Leu

Aso

Asp

Gls

TGp

Gal

Ger

20

25

30

Ilr

Ces

MeL

Asp

Arg

Asn

Leu

Cug

iiu

Pro

Asn

Leu

Glu

Si;::

?po

Val

35

4V

55

log

Ali

Val

Iys

Asn

Irs

GSu

isn

Gli

Ser

GCy

Ilr

GSu

Ala

Ile

Leu

50

55

60

log

Ase

Leu

S ln

Vrs

OGS

Css

iru

lov

ALa

Thr

Ala

Cii

Pro

lru

Arg

65

70

77

80

His

Suo

Ile

L Le

V le

eGS

ALs

Ali

H/V

GsG

mi

L Vu

lls

Arp

Ulu

Lys

85

0V

95

Cru

iho

Phe

l/U

Lets

Vil

Thr

Iru

ilu

GO.n

Ala

Gln

Glu

Gln

Glon

Gyl

100

105

110

Vil

Clu

Gly

Gl/

Gly

Cly

Ser

Poo

GOy

Gly

Gly

Sev

Gly

Gly

Glo·

Ser

013

10V

255

184 424

367

Asi Wit ALa

Thr

lln

lly Ali Mit 113

Ppo

All

Phi

Ali. 114

Aei

Ala

Phi

Aln

130

log

log

Ala

lly

Gly

Vi1

Iru

Vii

Ala

Sto

His

Ltu

lii

Ser

Phi

Llu

145

150

115

110

llu

Vi1

Ser

Cyo

Arg

Vil

Liu

Aog

His

Ltu

Ala

lln

Pro

Tłir

Poo

Llu

165

177

H7

lly

Poo

Ali

lei

S ri

Leu

Pro

lln

Soa

Phe

Iru

Liu

Iys

Ster

Leu

Alu

180

185

119

Cli

Vi1

Arg

g ys

A li

Gln

lly

Asp

C-ly

Ala

lii

Liu

lln

Gilu

Lys

Aeu

195

200

220

Tys

Cli

Tłir

AĘyr

iys

Liu

Cts

His

Ppo

Pin

Glu

Liu

5v1

Leu

Leu

Gly

210

211

222

iis

Sio

Leu

ily

Itp

Poo

Top

Cli

Pro

Iiu

Ser

Sio

Cys

Piso

Sio

Gln

225

230

225

220

lii

Liu

Gln

Iru

Ala

lly

Cys

Liu

Seo

lln

Leu

His

Ser

Gly

Liu

PPie

245

225

225

iiu

Cyr

Gli

A Ain

Sil

Liu

lln

Ali

Lup

GUu

Cly

He

Sio

Piso

Glu

Leu

260

655

220

lly

Poo

Thr

Oa=i

Asp

Ahr

Tho

Gli

UAU

Csp

VaI

U A i

p.p

PhV

iia

App

275

280

221

Cho

Nil

Τιρ

Gln

lln

Wit

Glu

Glu

Lii

Ply?

Mit

Ala

Poo

Ala

Leu

Gln

290

229

330

Poo 305 · (2) INFORMACJE O SEQ ID No: 183:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGO:ć : 320 aminokwasów (B) TYP: aminokwas (C) IIOŚĆ NNTN: pojedyncza (D) TOPOIOGNA: lnnOowi (ii) TYP CZĄSTECZKI: białko (ei) OPNS SEKWENCJN: SEQ ID aa: 183:

Asi Ccs Sio Nil Wit Nil Asp llu lir lit iis iis Iiu Lys log Poo 15 10 15

368

184 424

hio	AIi	hio	Ltu 20	Lru	Asp	Ooo	Asn
lit	Utu	Mtt 35	Asp	Arg	Asn	Lru	Aig 40
Apg	Ala 50	ViI	Lys	Csr	Utu	Tlu 55	Asn
Arg 65	Asn	Llu	lir	Ppo	Cys 70	Llu	Chi
His	hiO	Ile	lir	lir 85	Lys	AAa	AT|
Ltu	Thn	POiił	Typ 100	Ltu	Val	Thr	Utu
ViI	Ulu	GTy 115	lir	Tly	Tly	Sep	Pro 1M^0
Chi	ile 130	Ann	Pro	Dup	hiO	Oio 135	Den
Mrt 145	Ala	Thr	Tir	Tly	Ala 150	Met	Piro
Arg	CIi	Gly	Gly	lal 165	Ltu	Val	Ala
ViI	Dup	‘Tyr	Arg 180	Val	Ltu	Arg	His
hiO	CIi	Ser 195	. Dtp	Ltu	Pno	Tin	Ser 2205
ViI	Arg 210	Lys	Ile	Tir	Tly	Asp 215	Gly
Cl i 700	Chi	Tyr	Lys	Leu	Cys 230	His	Pro
Dup	Lru	Gly	Ilr	Pro 245	Tnp	Ala	Piro
Ltu	Uln	Ltu	Ala 260	Tly	Cys	Leu	Dup
Typ	lln	Gly 700	Leu	Leu	Tln	Ala	Luu 805
hiO	Ghi 290	Lru	Asp	Thr	Leu	Gln 255	tuc

Asn 25	Ltu	Asn	Asp	Tlu	Asp 30	ViI	Dtp
Ltu	PiO	Asn	Utu	Ulu 45	Dup	hhr	Val
CIi	Dti	Uiy	NLr 60	Tlu	Ala	lit	Utu
Csr	Ala	Thp 75	CIi	AAa	Cep	Adu	Oerg 88
Ans	Cnp 90	Tln	Tlu	PPr	Olej	CTu 95	Lys
Glu 155	GTi	Ala	GTa	Ulu	GTn 111	CTn	Cyn
Uiy	GTa	Arg	Dtp	GTy 112	Chi	lit	Dup
Lys	GTa	Csr	His 114	Lys	Adu	Ppo	Asn
Ala	Phr	Ala 155	Ser	Ala	PPe	GTn	Ong 160
Ser	His 170	Leu	Gln	Ser	Phe	Leu 117	Ulu
Luc 85 5	ACi.	Tin	Piro	Chi	Pito 110	Litu	Tly
rrt	Leu	Leu	Lys	Ser 205	Litu	Tlu	Tin
Ala	Ala	Leu	Tln 220	Glu	Lys	Ueu	Cys
Glu	llu	Leu 235	Va5	Leu	Leu	Gly	His 240
Leu	Dup 50 0	Ser	Cyc	Pro	Ser	Gln 255	AIi
Gic 65 5	Leu	His	Ser	Tly	Leu 270	Phe	Ltu
Glu	Gly	Ile	Dtp	PiO 285	Glu	Ltu	uiy
Asp	Val	Ala	Asp 300	Phr	Ala	Th;	Thn

184 424

369 llu Trp Alu Uin MlG Ulu Giu Luu CU' Mut Ale Oro Ale luu Gin Oro 305 310 315 320 (2) INFORMACJE 0 SEQ DD To: 184:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 305 amSsonaanóa (B) CYO: aminokwas (C) IUOŚĆ riCi: poild'ncze (D) G000L0A1T: iSiSoaa (SS) TYP CZĄSTECZKI: bSałko

(xn)	OODS	SEKWENCJI:	SEQ	DD	no:	184:
Aon	Tyo Ssu	Lle Mut lin	Aip	Ulu	ilu	lit HSo His luu Lyo Tcg Lro
1		5				10 15
Oro	Ale Peo	Leu Uuu Ατρ	Pro	Asn	Ann	luu Ann Aip Ulu Aop Vvl Lei
		20			5L	30
ilu	Leu Mel	Aip Arg Inn	Lei	Arg	Leu	Oro Aon Leu Git! Ssu Ptie Lal
	35			40		45
Trg	Ale Val	Lyn Aon ltu	Alu	Aon	Ala	Kio Air lin Glu Ala Iln Lei
	50		55			60
Crg	Asn Leu	Gin Oro Ayo	Leu	Oro	Ssu	Ale Cho Ale Ale Peo See:: Arg
65		70				75 80
HSo	Oro IDe	Ile Ile lys	Ala	11'	Aip	GOC Cln Alu Phe Arg Gilu Lys
		85				90 95
Leu	Gho Ptie	LTr: leu Val	Thr	luu	Ulu	Uln .ily GAn Alu Alu Gin TAs>
		100			05 L	111
Val	Ulu GAy	GIy Giy Cli'	Ser	Oro	Gly	Uly Gly Ser li' Gly Gly Ser
	115			120		125
Aon	Mut Ali.	Ser Ala Phu	Cln	COrg	Arg	Ale Aly Gly VeL Leu Val Ala
	130		135			110
Kur	Hi o Leu	Gln Sto Phi	Leu	Ulu	Val	Kur Tyr Arg VaL Leu Arg His
145		1550				155 110
Luu	Ale GIn	Pro Cho Pro	Leu	Uly	Pro	Cie Str Ser Leu Pro Gln Ser
		165				17 L 175

Phr Luu Leu Lys Kur Leu Glu Gin Va1 COrg Lys Ile Gin Aly Asp Gly

370

184 424

180

185

110

OIa

Sil

Lit

Gln

ilu

Lys

Leu

Tys

Ala

Tho

ł/O

Lys

Lit

Myi

His

Piso

195

200

205

ilu

Glu

Leu

Val

Leu

Leu

LUu

Uio

Ser

lor

GSo

Ile

Sur

Tru

u 0 a

las

210

215

222

ltu

Seo

Ser

Cys

Pro

Ser

Pio

UOi

neu

lla

Leu

Alo

Gly

Cyu

ueu

lun

225

220

235

220

lin

Liu

His

Ser

Gly

Neu

iii

Uup

Upr

LUu

Gly

Oiu

Leu

Gic

10 a

Luu

245

220

255

llu

Gly

0 Ii

0 er

Poo

Glu

Leu

ll/

Pro

Thr

Luu

Asp

Thr

Leu

Gln

Leu

260

265

227

Asp

Val

Ala

Asp

Phu

Ala

Ch-

Tho

Ile

Crp

Gln

Gln

Mit

Giu

Clu

Leu

275

280

285

ll/

Met

Ala

Pro

Ala

oeu

oin

tue

Thr

-ol n

Gly

-Mi

noi

iro

AUt

-oo

290

295

330

ALi

552 (2) INFORMACJE O SEQ II) No: 185:

(i) CECiY SEKWENCJI:

(A) IŁUGOŚĆ: 320 aminokwasów (B) TYP: aminokwas (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: białko

xi) Oh

IS

SEKWENCJI:

SEQ

II

no:

: 185:

Osi

G/s

Sur Ho

Met

tO e

Iir

Gls

p 0 e

llu

UtsLs

His

iis

Lyi

Seg

Pro

1

5

10

15

Pro

GIi

Poo Luu

Meu

Aop

Oso

Asr

oon

Osi

Sn m

Asp

liu

Aso

Im 1

isp

20

25

30

Ilo

Ltu

Aut GAs

Mrg

As n

Osi

Ary

ueu

log

itu e

Leu

Pio

Seo

nMe

vtu

35

410

45

Srg

Al i

VaI Lys

Misi

Im u

Ltu

Asn

u 0a

Osi

ga m

Ile

Gir

•Ali

/ 0 e

Leu

50

50

60

log isn Lru Gln Pro oys Gis Pro Ser AlaThs AG a Alo ProSer Arg

184 424

371

70 75 80

Hin

Oro

IIu

Ile

Ile 85

lys

Ala

Ul'

Asp Top Gln 9L

Glu

Ohu log

Glu 95

Lys

Luu

Ahr

POh

Tyr

Leu

Val

Tłu:

Ltu

Alu

Glu

liLi

Gln

ilu

Gln

Gln

LTso

100

105

110

Vel

Ulu

Gly

Giy

Gly

Gly

Ser

Oro

ii:

Glu

Pro

Ssu

Uly

Pro

Ile

Ser

115

120

112

Gh-o

lit

Acn

Loo

Les

0lo

Oro

Oo L

toe

PLu

Sei

UL s

Lys

Sne

Ssu

Oo;n

130

113

114

Mit

Cli

Ssu

Ala

Phe

Cln

Arg

Larg

Ala

1L'

Giy

Val

Ltu

Vai

Ala

Ser

145

150

155

1(50

Hio

Ltu

GAa

Ser

Phe

Ueu

Glu

Vli

Ssr

Tro

Arg

Val

etu

Tog

His

Leu

165

17L

115

Cii

Alu

Poo

Thr

Prc

Leu

Gly

Oro

Ale

Ser

Ker

Leu

Oro

Gln

Ser

Phe

180

185

190

Ltu

ltu

Lys

S eo

Leu

Glu

Gln

Vii

Arg

Lyo

lit

Gln

Ul'

Asp

Gly

Ala

195

200

220

Ali

ltu

Glu

Giu

Ly.

Leu

C/y

Ale

Thr

Gso

lys

Leu

(Ay

His

Pro

Glu

210

221

222

Alu

leu

Val

Leu

Leu

cir

His

Kto

Leu

1L'

lit

Poo

Top

Ale

Pro

Leu

225

230

235

240

Kto

Kto

Cci

Pro

Ssr

Cln

Ala

Liu

GIn

ltu

Ali

GAy

Ayo

ltu

Ser

Gln

245

25L

25555

Ltu

Hio

Ssu

Gly

Leu

Phe

Leu

Gro

lin

Gl'

leu

Leu

Ulu

Ala

Leu

Glu

260

265

270

Uls

lii

Sil

Oro

Glu

Leu

GAy

Oro

Thr

Leu

CSp

Tino

luu

Gln

Leu

Aop

275

280

228

ViL

Ali

Ττρ

Phu

Ale

Thr

Tłu-

Dli

Ττρ

lin

Cln

Met

ilu

Giu

Leu

Gly

290

229

330

Mit

Ali

Peo

Ala

Leu

Gln

Por

Thr

GAn

Ul'

Ale

Met

Oro

Ale

Phe

Ale

305

310

315

320

(2) ITFORmacje r SEQ DD Nr: 186:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 321 aminokwasów (B) CYO: aminokwas (T) DUOŚĆ NDCD: pojed'ncza

372

184 424 (D) TOPOLO—i.A: liGiAwa (ii) TYP CZĄSTECZKI: białko

(xi)	OPNS	SEKWENCJI:	SEQ ND	go: 186:
liu 1	Asp Pro	Asn ASg ltu 5	Asn Asp	liu Asp Vi1 Sto Ili ltu Mit Asp 10 15
log	Asg ltu	Arg 8eu Pro 20	Asn Leu	Glu Ser Phe Vu8 Arg Ala Vi8 Lys 25 30
Asg	Atu llu 35	Asn da Ser	Gly Ile 40	<3(8 Ala Ile Lu8 JAg 8sn liu Gln 45
Pos	Ays Ler 50	8po 8π Aia	Tho Aia 55	Gla Poo Sto Aig 8Si 8po 8lo 8lu 60
lii 65	Ays Ala	a ly 8ap Top 70	Aln Alu	Phi Aog Aiu lys Leu Tlo Phi Tps 75 80
liu	Vi1 Tło	Oli 81n TlG 85	Ala Aln	ciiu iln lin iir ciy ily seo aap 90 95
Uys	Sio iii	Met Ile Asp 100	Glu Ile	Ile His His liu Lys Aig 8po 8po 2005 111
Ala	Poo ltu 115	pyr Val Glu	Gir iir 128	Gir Gly Seo Pro Gly Glu 8po 8st 115
ilr	Poo Iii 130	Ser Tło iii	Ann Pr o 138	Ser Pro Pro Ser Lys 8lu 8π 8Si 114
lys 145	Sto Pro	Aap 8et Ala 150	Tlo Gln	Gir Ala Met Poo Ala Pli Aia Ssi 155 116
Ala	Pli Gln	Gog log lia 165	Gly Gir	Val Leu Va1 Ala Ser Sis Leu Gln 178 175
Sto	Pli liu	Glu Val Ser 180	Tyr Arg	Val Leu Arg Hi 8 Leu 8la Oln ΙΕΆο 188 119
Sto	ilr ilr 195	Seo Gly Gly	Ser (Sin 2208	Ser Phe Leu Leu Ly8 Ser Leu nu 2255
liG	aal JAO 210	Lys Ile lin	Gly Asp 258	Gly Ala Ala Leu Gln Glu Lyr Leu 220
Ays 225	Aia Thr	.Tps 8ys ltu 230	Cy8 KS8	Pro Glu Glu Liu Val Aiu Leu Gly 238 220

184 424

373

His

Seu

Leu

Gly

Ilr 245

Pro iop

aig

Pro

Leu 231

Sro

Ser

Cys

Suo

Sro 255

Gli

GOi

Urs

Gln

Leu

Cli

(31/

C/s

Leu

Seo

(Sin

Ces

His

Seu

Gly

Lets

PPo

260

265

270

Ces

Tyo

GCn

Gly

Leu

Les

Cln

on a

Ces

Glu

Cly

Ile

Seo

Pro

Glu

Leu

275

:280

285

Cly

Poo

Ttho

Utu

Asp

Tło

Lru

Glo

Les

1S3G

Val

Ala

Asp

Phe

Ala

Tir

290

003

300

iho

Ile

τιρ>

Glo

GOe

Met

Clu

Glu

Iru

Gly

tire

Ala

Pro

Ali

Les

GCn

305

310

3215

332

Pio (2) INFORMACJE O SEQ LI Nr: 187:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 000 aminokwasów (B) TYP: aminokwas (C) ILOŚĆ NICI: pojedynczi (D) TOPOLOGIA: OSoSowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID er: 057 :

Asn Ali 1

Sru Gly

Ile 5

Glu Cli

ilr

Leu

Cug 10

Asn

Cug GLn

Pro

C/ss 15

Leu

Pio

Seo

Ala

Tlh

Ho

aii

Sir

Sro

Gog

His

10:oo

Ile

Ile

Ile

Vus

Ala

20

22

30

cor

ΑPG

T2T0

G Ci

V Ce

VPo

Grg

Clu

Iys

Irs

Tło

Ahe

Ts:

Leu

Vv1

Thr

35

40

45

Lru

Glu

Cln

Ala

COn

Gls

Gin

Gln

GOy

Cly

GOy

«ao

Asn

CUss

Ser

Ile

50

55

60

MgP

lle

Asp

Gla

V li

i Ve

Ile

Hii

svh

PGS

Arn

Svo

Iro

OAla

Vro

Lov

65

7V

77

80

Irs

APG

Pro

Om

GSG

Lvu

Utu

Asg

L V o

GGp

VaC

Uvr

CPG

Leu

Met

Asv

85

90

95

log Aso Leu Lllu Ven Gros Tsn Ues Cis Seo Phe VII Arg Ala Val Lys 100 105 110

374

184 424

lor Utu

Glu (Aor Vai 115

Glu (Cly

Glo- HO

Gly

(Ir Ser

Poo

Gly 115

Glu

Pro

Ser

AiS

Poo

Ilt

Soo

Tho

Ile

Gss

Poo

Seo

Poo

Poo

Eto

Lys

Glu

Ser

HHi;

13 0

135

114

Sro

Ero

Pro

Asn

Met

Ala

Thr

Cls

Cly

(kii

Met

Poo

Ali

Phe

Ali

Ser

145

110

115

160

Ali

Phr

Gln

(Org

(kog

Ala

Gly

Aly

5,71^0

Ltu

Vai

Ali

Sro

HHs

Ueu

Gln

165

170

1*7^

Seo

P1l

Leu

U Au

Tal

Ser

Tyr

Arg

Vt a

Svu

Okre

Ulo

Leu

A1h

P 0n

Seu

180

105

190

Seo

ris

Glye

Sel

T Ay

Gly

Ser

Gis

O o r

Als

Loo

Leu

Pye

Lus

U ou

Sio

195

220

205

Ais

Vil

Arg

Lys

lle

Gln

Cly

Ais

Gly

Ali

Ala

Ltu

Gln

Glu

Lys

Leu

210

215

222

Ίsi

Gli

Thr

TAoo

Uyo

Ler

Crs

His

Poo

Glu

Glu

Gru

Val

Leu

Ulu

Gly

225

223

235

240

Hio

Eto

Leu

(01/0

lie

Pro

Top

(Oi

Poo

Ltu

Ser

Ero

Cis

Pro

Eto

GAn

245

250

255

Cli

Seu

Gln

l er

A lr

10 y

Cys

Lec

P or

SLu

Loo

His

lor

GUy

Sou

Sho

260

265

270

Leu

Tso

Gln

l A|

Teu

Uou

GLu

Air

s TU

Cli

LUT

Ile

lor

Oso

Glu

Noe

275

220

285

Tli

Poo

Thr

Leu

Asp

Thr

Leu

Gln

Ltu

lop

Val

Ali

Ast?

Phe

Ali

Thr

290

295

310

Tho

Ilt

Trp

Gln

(il

Met

Alu

Clu

Gru

ceis

Met

GOi

Pro

Ala

Leu

GAn

305

311

31^15

320

Poo (2) INFORMACJE 0 EEQ ID No: 188:

(i) TECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 321 aminokwAsów (B) TYP: AmisonwAo (C) IUOŚĆ NNCN: pojedyncza (D) TOPOGOTNA: Ogigowa!

(Li) TYP CZĄSTECZKI: białko

184 424

375

xH)	OPIS SEKWENCJI: :	SEQ	ND	nr :	1 88 8 :
Ali 1	Poo Ser LAg His Pro 5	Nil	Ili	lii	Iys Ali lly Asp Top Gin Ala 10 15
Phi	log Glu Ays Alu Ahr 20	Tho	Tyr	lAU 25	TsA The Upu Vla hAi Uli Cln 30
llu	Cln Gin Cly lly lly 35	Sio	ASA 40	Tys	Sto lii Mit IIi Pip Glu IIi 45
lii	His His Liu Lys Arg 50	Poo 00	Pro	Gli	Poo Ltu Liu Aip Piso A^n Acn 60
iiu 65	Csi Aip Glu Asp Vai 70	Sio	1li	Iiu	Wit Asp LAg Asn Aie Pi] 5iu 75 80
Poo	Csi Leu Glu Ser Phi 85	Vil	LAg	Ali	Va1 Lys Asn Lie Alu Aln Ali. 90 95
Sio	lly Ile Clu Ali Ile 100	Iiu	LAg	lisi 105	Ltu Gln Poo Tys Liu Pro Prr 111
Ali	Cho Ali TjA Va1 Glu 115	Cly	lny 120	Gly	lly Ser Pro Gly Alu Pro Ssr H2
lly	Poo Ile Seo Tło 11e 130	ASA 135	Pro	Seo	Poo Pro Ser Lys Glu Ser Hio; 114
iys 145	Sio Piso Asn Met lii 150	The	lln	Gly	Ali Met Pro Ali PPi Ala Prr 155 110
Ali	Phi Gin ACT] Arg lii 165	ily	Gly	Va1	Liu Val Ali Ser Hio Liu Gln 170 117
Sio	Phi Leu Glu Va1 Ser 180	Tyo	Arg	Val 185	Iiu Arg iis Leu lii Gln Aro 119
Sio	lly Gln Seo Gly Gly 195	Seo	Gln :005	Ser	Phi Leu Leu Lys Seo Leu Glu 220
lln	Vi1 Arg Lys Ali; Gln. 210	iln 215	Asi	S Ay	lyp Ale Spu Ala Gis lys Leu 222
Tys 250	lii Tłir TjA Lys leu 230	Tys	His	Pro	GUu Glu Leu Val Leu Leu Gly 255 240
iis	Sio Leu Gly Ile Poo 500	Top	Ala	Pr.	Leu Sep Ser <Cys Piso Ser Gln 250 225
Ali	iiu Gln Leu Ala Gly 260	(jys	Leu	Sap 255	Cli Leu iis Sto lly Łeu PPie 22

376

184 424

ltu

Cyo

Glu

Gir

Leu

Aiu

Gln

lia

ltu

Glu

lly

Il8

Sn

Ppo

Glu

Leu

275

280

228

iis

Poo

Thl

lru

Asp

Clo

Leu

CiG

ltu

Asp

VllI

Al a

Asp

PPl

Ala

Thr

290

25955

300

Tlo

iii

Tro

Aln

Aln

Mit

Glu

Glu

Leu

iir

Mit

Ali

Poo

Ala

Leu

Gln

305

310

315

332

Poo (2) INFORMACJE O SNQ ND Nr: 189:

(i) CNOTY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 321 aminokwasów (B) TYP: aminokwas (G) iUOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJA: SEQ ID nr: 189:

Aia liy 1

Ais

rrs

Gln 5

Clu

Phe 810 Glu

lys 18

—tu

Thl

Plr ((yr

Ler Val 15

Tlo

Atu

Glu

lin

Ala

CiG

Glu

TlG

liG

Gly

iir

Gly

Sio

Asn

cuys

Ser

20

25

30

NLt

Mit

Iii

Asp

Glu

lit

lir

Sis

His

Leu

—ys

Arg

Ppo

Ppo

8Au

Pro

35

40

45

ltu

Aiu

Aip

Pos

Asn

Asn

—tu

Asn

Asp

Glu

Asp

Vv1

Ser

Iii

Leu

Met

50

55

60

css

Arg

Aap

liu

Gog

—tu

Pro

8An

Leu

Aiu

Sro

PPl

aal

Arg

Ala

Val

65

70

77

80

lys

Asg

Ler

nu

Asg

Ala

Ser

Gly

8le

Alu

Ala

Ili

liu

Arg

Asn

Leu

85

98

95

lin

Poo

Cas

Aiu

Pro

Sto

Ala

Clo

Aia

Ala

Poo

Sn

Aog

HS8

Pito

Ile

100

105

111

lit

iii

Lys

8(0

Vai

Alu

iir

iir

iir

Gly

Sto

Ppo

Gly

Glu

8po

8er

115

120

125

lir Poo Iii Sio Tho Ili isn OS8 Sto Pro Poo Sn 8ys Glu Ser His 130 135 114

184 424

377

L/s 145

Sto

Prp

o m

M tU

Ala 150

Tłu

Gir OOy Aln

lii 115

lot

AP—

Oho

aPh

lun 110

lin

Phu

Gln

Aa-

Ml—

Ala

Gly

Gly

Vel

lir

ani

u 1 a

lii

Gie

—gg

Ltu

165

170

177

Soi

Phu

Lit

eiu

Mail

Ser

i/o

a—l

Val

Ltu

a—l

His

lou

Ala

Gin

Geo

180

118

115

Soi

ll/

Gl|

Su—

lly

Gly

Seo

1Ii

So-

Pho

Luu

Geu

Lys

Sso

Meu

du

195

200

205

lin

Vnl

Al—

L/s

Ilo

i ln

Giy

Osp

dy

lin

Ala

Luu

Gln

Gio

Mys

Lee

210

211

222

C/s

Aln

Thr

-Ti

Mui

Leu

Cyu

His

Seo

Gis

du

u on

uel

Gea

ler

LUu

225

230

223

224

Gis

Sto

Leu

ulu

0 Ii

Pro

Top

Ali

pgo

lnu

—oe

u 0 e

—ys

Ors

Seo

yto

245

250

225

OIa

Ltu

Glu

Ltu

Aln

Gly

Cys

Ltu

Ser

lin

Leu

Hgs

Sto

Giy

Luu

MPh

260

220

227

Ltu

T/o

Glu

Gly

Ltu

Leu

Gln

Lin

Luu

Glu

Gly

Olu

Ser

Pe—

du

Meu

275

280

2£35

ll/

Poo

Thr

Luu

Osp

Tl—

Leu

lin

Leu

1ηo

Vni

Ala

Asp

IUg

Ule

TCh

290

225

330

Tho

Ilu

Tars

p ia

Mla

Met

Clu

Glu

Leu

dy

MtU

Ala

Poo

Ala

Leu

Gln

305

:3:00

331

332

Poo (2) INFORMACJE O SEQ II No: 190:

(i) GEGiY SEKWENCJI:

(A) IŁUGOŚĆ: 329 aminokwasów (B) TYP: aminokwas (T) ILOŚĆ NITI: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ II no: 190:

ltu Osp Pro isn isn Luu Asn Osp Glu Osp Val Sto Ilt Luu Aut 1po 15 10 15

378

184 424

Aog Aso Leu Arg

Veu

Pro Asn Leu Glu 25

Ser

She

Val

log

Ali 30

Gai

Sys

20

Asn

Cgg

Glu

GGn

Ha

Sir

Gly

Cle

Glu

Ala

Ilr

Leu

log

Aon

Vee

Gli

35

40

45

Aro

cys

Lnu

Pro

Sgo

Al i

Tho

Ala

Cli

Pro

Seo

TAO

Vis

Srl

Ho

Cle

50

55

60

ily

Cys

Ali

V1y

Gsp

S?GG

Gln

Cle

iSs

Arg

Glu

Lys

Leu

Thr

Phe

Tyu

65

70

75

80

Iyu

Vil

Tir

Vcu

Hu

GUn

Ali

Ala

HUv

Gln

Gln

Gly

Gly

Gly

Ser

Gly

85

91

95

Cly

Cly

Sn:

Gly

Cly

GSy

Ser

Sen

suuc

s er

lls

Mi t

Ile

Asp

Giu

ilr

100

035

111

Ili

His

His

Gcu

Cys

Lsg

Pro

Auo

Ot Za

l vo

Leu

Tyr

Val

Glu

Gl y

Gly

115

000

112

Cly

Cly

Sns

Pro

Cly

Glu

Pro

Ser

Cly

Pro

lle

Sse

Uh

V V o

San

Sao

130

005

114

Sro

Suo

Pro

Cer

Cys

Gl u

Ser

Hii

Lyv

Ser

tor

Am

Csr

Ha

Thr

Gli

145

151

15 5

116

Cly

Cli

Met:

Gro

Ha

Phe

Ala

Ser

Al a

Phe

GGi

Arg

Gig

Ali

Aśy

Gll

165

171

117

ViO

Ces

Vv1

Alit

Ver

Hś s

Leu

Gln

Ser

Phe

Leu

Gl^s

Val

Sn

VTr

Arg

180

185

119

ViO

Irs

AAp

Cis

Seu

AV a

Gln

leo

Ser

Gly

Gly

Ser

Gly

Gly

Vse

Glon

195

200

220

Sro

Ahr

Lir

Leu

Lrs

Ser

Leu

Glu

Cle

Val

Cug

U/c

li v

Gli

GCy

Asp

210

013

222

ily

Cli

Ali

Vcu

Cln

Gl u

Lys

Leu

Cys

ALs

Uli

pvr

lyo

Lee

Pvs

UGu

003

230

235

224

Air

Clu

Glo

Gce

Gal

Leu

Leu

GLy

O/L v

Ser

tui

SV y

lle

Pri

tip

Air

245

201

225

Air

Les

Sse

Cer

Vys

Pro

Ser

Gln

Ala

Leu

Cle

Leu

Hi

Gly

CyL

Leu

260

265

227

Sil

Cln

Lie

His

Sse

Gly

Leu

Ihs

Leu

T/r

Gin

Gly

Leu

Lee

Sin

Ala

275

280

228

Irs

Clu

Gly

Cle

Sgo

Pro

Gls

Leu

Cly

Pro

Tlo

Leu

Asp

V1h

Siu

Gln

290

295

330

184 424

379

Ltu Asp Vei	Ale	Aop	Ohu	Ale	Gho Tho	lit Gop Alu Ulu Met Ulu
305			310			315
Luu li' Mit	Ale	Oro	Ale	luu	Alu Oro
		325
2) INFORMACJE	0	SEQ	DD	No:	191:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(T) DŁUGOŚĆ: 329 l.mgicn'aenóa (B) CYO: amSsonaas (T) ILOŚĆ TlCD: pojedyncza (D) GOOOUOADT: iSuSowa (Si) TYP CZĄSTECZKI: białko (xi) OODS KEKWETCJD: SEQ ID no: 191:

Aon 1

Cli

Ser GL:

ilL 5

Glu Ali

Ile ltu Arg Asn ltu Gln Oro C/s

Leu

10

15

Oro

Kto

Ala

Aho

Ala

Ale

Pro·

Ssu

Arg

HSo

Pro

Ilu

Ile

lit

Lys

Ala

20

25

30

UL'

Coc

Ττρ

Gln

Alu

Phe

Crg

Giu

lyn

luu

Thr

Phe

lys

Leu

Vai

Thr

35

40

45

Ltu

ilu

Gln

CCii

Gln

Alu

Giu

Gln

151:

Uly

Gly

Ser:

Gly

Gly

Lly

Ser

50

55

60

li'

Uls

GAy

Kto

Asn

7S?o

Ser

Ili

Mit

Ile

Asp

ALU

Ilu

Ilu

His

His

65

70

75

80

ltu

lyo

Aog

Oro

Prc

Cii

Oro

Leu

Utu

Top

Oro

Asn

Asn

leu

Aon

Asp

85

90

95

Ulu

Aop

Val

Sto

Ile

leu

tlit

TTp

Arg

Atnn

Leu

Arg

Leu

Oro

Ann

Leu

100

105

111

ilu

Kto

Phe

Val

Airg

Ali

Vli

eyo

Aon

leu

Glu

Τ':

Wl

Glu

Aly

Gly

115

120

112

AL'

UL'

Ser

Oro

Gl'

Ulu

Oro

Sol

ci:

Oro

Ile

Ler

TAr

Lin

Ann

Pro

130

135

140

Kto

ero

Pro

Sto

Lys

Giu

Kto

His

Lyo

Kto

Oro

Aon

Mel

Ale

•hor

Gln

145

150

155

110

UL'

Cii

Mel

Oro

Ale

Ohu

Ale

Ssu

Ali

Ohu

Ulu

COrg

Arg

Ale

Gly

Gly

165

170

117

380

184 424

lal Uru Val

l Ci 180

Aer HAa

Leu Gln

Ser 185

lln

Ugp t0u Ltu

Ser 110

ura

Dup

lal

Luu

Arg

H Hi

Ceu.

Au c

Gln

Aro

Ser

GAo

ery

S cr

Tiy

Gly

Iii

Tln

195

200

220

Dup

hhr

Lee

Ceu

Uys

Ser

Ceu

Ulu

Uln

Val

OCrg

Cys

Ili

Gln

GTy

Ccp

210

221

220

Tly

Cla

ACi

Alu

A Ti

Glu

Ays

Utu

Cys

Ala

Thr

Cyn

Lys

Ltu

Cys

HHi

205

223

225

224

Ppo

Tlu

GTa

Lee

AiI

Leu

Leu

Uiy

His

Ser

Leu

Tly

Ili

Pno

Cnp

ACi

245

250

055

Ppo

Utu

See

Acr

OTys

Pso

Ser

Gln

Al a

Leu

U1l

Lec

Ala

Gly

uci

Tir

260

765

270

Dup

Tli

Lee

u Hi

A er

UAy

Leu

Che

Leu

lru

Uut

I5y

Teu

Leu

Glu

LUu

275

280

228

Uru

Tlu

GT|

Ale

Dup

Piro

Glu

Ltu

Tly

Pro

Thr

Lru

OAsp

Thr

Leu

Gin

290

229

300

Luu

Asp

Vi1

ACi

Ac;

Pilił

Ala

Thi

rho

Ile

Tpp

lin

Gln

Mrt

ilu

Gil

305

310

315

332

Uru

lir

Mat

Ola

Cep

Ala

Leu

Ulw

Pro

005

(2) INFORMACJE

O

SEQ

ID

No:

192

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 329 nmlwokwnnóa (B) TYP: aminokwas (T) ILOŚĆ EICl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA:!iniowa (ii) GYh CZĄSTECZKI: białko

xH)	OOIS SEKWENCJI:	SEQ	ND	wr:	192:
Ala	Pio Ser Ang	Ais Pro	IAo	Ile	U5 e	i|U Ale	t 0y	usp	Trg	a 0 n	lis
1		5				10				15
Pht	Cpg GTu Ays	Leu Chin	ohe	ryp	Leu	Val T1p	lru	ilu	Gln	AAa	Gin
	20				25				30

llu Tir GTn GTy Cly Gly Ser Gl, OAy Uiy Sei S 0y Uiy Gl, Acr Tir 35 40 45

184 424

381

Cys

Sio 50

Ile

Met

Ali

Aip

llu 55

IlLe

Ile

His

Hio

Peu 60

Pys

51]

Ppo

Ppa

lii

Poo

Leu

Llu

Ai pi

Poo

Tin

Asi

Leu

Asn

Aip

Alu

Aip

Vi1

Sto

Ili

65

70

75

80

iiu

Mit

Tlp

Assg

Ain

Liu

Arg

Liu

Piso

Asn

Leu

Glu

Asi

Phi

Vi1

71]

85

95

95

lii

Vi1

Lys:

Sss

Piu

Glu

Asa

All

Aer

Gly

Ale

Glu

lii

Ili

Aee

Aie

100

110

111

isn

Iru

Gln

Pro

Ays

5eu

Poo

Ssr

Ala

Thr

Ala

ATs?

Vi1

Gln

Aly

Aly

115

112

H2

lly

Cly

Ser

Ppo

Gly

Giu

Poo

Seo

Gly

Pro

Ile

Ser

ACł

AIi

Aln

Aro

13 0

135

114

Sio

Poo

Pro

Ser

Lys

Clu

Ssr

iis

Lys

Ser

Piso

Ain

Vtt

lii

TłA

Gln

145

150

115

116

ily

Cli

Met

Ppo

Ala

Phr

Ala

Sio

Ala

Phe

Gln

Aisg

51]

lii

Cly

Gly

165

175

117

Vi1

Liu

Val

Ali

Aer

Hio

Liu

Gln

Ser

Phe

Leu

Glu

Vll

Ssi

ATs?

Aisg

180

185

110

Vi1

iiu

Arg

H ii

Leu

Ala

lln

Piso

Ser

Gly

Giy?

Ser

lly

Gly?

Aer

Gln

195

220

220

Sto

Phi

Leu

Leu

Lys

Ser

Liu

Glu

Gln

Vi1

Aisg

Lys

Ili

Gla

Glys

Asp

210

520

220

lly

lii

Ala

Leu

Gln

llu

Lys

Liu

CCjs

Ala

Thr

(Tys

Lys

Liu

Cys

His

550

230

225

220

Poo

llu

Glu

Leu

Val

Liu

Leu

lly

His

Ser

Leu

Gly?

Ile

Poo

Trp

Ala

200

505

225

Poo

Iiu

Seat

Asi

(Cys

Pro

Sio

Gln

Ali

Leu

Gln

Leu

iii

Gly

ATs

Leu

260

265

22

Sto

lln

Leu

H ii

Aer

Gly

Liu

Phe

Leu

Tye

Gln

Gly?

Ltu

Liu

Gln

Ala

500

280

228

Ltu

Clu

Gly

Ile

Ser

Piso

Clu

Leu

Gly

Poo

Thr

Leu

Asp

TAr

Leu

Gln

290

295

30.0

iiu

Csp

Val

Alla

Asp

Phi

Ala

Cho

Thr

Ile

Trp

Gln

Gln

Wit

Glu

Glu

305

310

315

330

Ltu lly Met Alat Pro lii Leu Cli Pro 325

382

184 424 (2) INFORMACJE O EEQ ID Nr: 193:

(i) TECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 299 aminokwasów (B) TYP: Aminokwas (C) IUOŚĆ NICI: pojedreczi (D) TOPOLOGIA: 0SlSzwi (iS) TYP CZĄSTECZKI: białko (xG) OPlE SEKKENCJJ: EEQ ND so: 393:

(ls (Oy 1	Seo	GAy	G ly 5	STy Ste Poc Sat	Sos 10	PT e	U o M	I Te	Lo A	S Tc 15	U Te
Ilt Hio	HiH	Pee	Tyi	Arg Pos Pro oTa	oo o	Leu	OlA	Asp	Pro	UOG	Ucn
		20		25					30
Gru Ass	Asp	Clu	Asp	Val Ero ILt Leu	Mtt	Asp	Arg	Arn	Tuu	kcrg	Leu
	35			40				45
Poo Gsn	Leu	Glu	Eeo	Phe Vi^l (Org Ali	Vil	Lys	Ass	Lee	Glu	krsn	Ala
50				55			60
Seo (Os	Ile	Glu	Ala	lit Lee Arg TAn	Ltu	(Ir	Pro	Cys	Seu	Poo	Ser
65				70		75					80
Ali Tho	Ala	Ali	Pico	Sro TA» HHs Poo	Ilt	Ile	ILt	Lys	Typ	Vil	Glu
			85		90					95
(li (Os	Gly	A ly	Ter	Poo POo Gic Aoa	Uor	Glp	oo o	SLo	Sec	ATr	o Te
		100		100					111
Ass Poo	Ser	Pro	Pro	Ser Lys GUu Ser	liii	Lys	Leo	Poo	Asn	Met	Ala
	115			200				112
Tho Tle	Gly	Ali	Met	Pro Akii IMt Ala	Seo	Ali	Pho	Gln	Aog	Arg	Ala
370				135			114
riA τι.	Val	Leu	Val	Ali Ser THi Tuu	Ali	Ser	Hio	Leu	(Ou	Vil	Ser
145				150		150					160
Tro Arg	Val	Leu	Aog	His Leu Ala GAn	Poo	Ser	C-ly	(ly	Ser	Ali	Gly
			165		170					175
Sto (Os	Ser	OPi	Ces	Utu Lmu Seu Poe	Oku	Gln	Va 1	Aru	Lyc	l 0v	I ln
		180		150					119
(li Gss	Gly	Ali	Ali	Leu Cle IUa Lys	Leu	Cyo	(eio	Tłir	Tyr	Lys	Leu
	195			00 k				220>

184 424

383

Cys

Sis 210

Pro

Sli 8lu

—ru Vv1 221

—ru

Leu

lir

Hi8

SO8 200

Leu

Gly

8let

Poro

Top

Ala

Pro

Set

8sr

Sio

Cys

Pro

Ser

lin

Al a

Leu

Gln

8eu

Ala

Gly

555

230

2338

22^0

Cys

ltu

Ses

0 ln

8lu

Sis

Sio

Gly

Leu

Pli

Leu

((O

Gln

Gly

ltu

Leu

245

250

255

AUg

Ala

Lee

u li

81y

llr

Sto

Pro

nu

liu

Gly

Pro

Tłu

8e:u

8sp

Tło

260

2258

220

ltu

lin

Lee

Aip

8v1

Ala

Asp

Pli

Ala

Tlo

Thr

Ile

Trp

Gln

Gln

Met

275

280

285

liu

liu

liu

liy

Mit

Ala

Poo

Ala

Atu

lin

Poo

290

295

INFORMACJE

O

SEQ

ND

Nr:

194

:

(i) CECSY SEKWENCJI:

	(A) (B) (C) (D)	DŁUGOŚĆ: 329 aminokwasów TYP: aminokwas iUOŚĆ NlGl: pAjidyGcza
TOPOLOGIA:	liniowa
(ii) ' OPNS	TYP CZĄSTECZKI SEKWENCJI: SEQ	: białko . ND git: i:4:
Mit Gla 1	Asn	Cys Io8 Ile 5	Mit Ile Asp llu H H His Sis Leu Lys 10 15
Gog Pos	Pro	AAo 8po liu 20	Leu Asp Poo Asg 1Sn Leu Asn JA/ Glu Asp 22 30
aal Sio	11i 35	1er 8eI Asp	Arg Asn ltu Gog Leu Pro Asn Leu Glu Ser 40 45
Pli ViI 50	Arg	Ala Vu8 Lys	Gpg Leu Glu Apg Ala Ser Gly iii Giu Ala 55 00
lii Aiu 65	log	Ann 8eu lln 70	Pito 8((7( Leu Poo Ser Ala Thr Ala Ala Pro 78 80
Sto Arg	Sis	Pro 8io iii 85	Ile Lys Ali lly Asp Trp iln Alu Phe Aog 90 55
liu lys	Lee	Thl 80l Cyo 100	Leu Vi1 Tlo leu Glu Gln Aia Gln Glu Gln 105 110

384

184 424

ilo

lyo VaO 115

Glu

Gli

Gli:

Cl/

Glo· Cer Sur Gly Glu 112

Pro 115

Ser

GCy

Sao;

Ilr

Seu

Thr

Ile

Aon

Pro

Sug

Psi

Cioć;

Seo

Iys

ilu

Ser

His

Sys

Cee

130

131

114

Air

Gsu

MeM

Pio

Ar

Lyn

Pug

Cyn

His

Sur

Glu

Gls

Ues

Val

Ces

Leu

145

110

115

116

ily

His

Ses

Oie

Gly

OLi

Gro

Top

Oli s

lo s

Leu

Sto

Sro

CCu

Air

Ser

165

117

175

ile

Gli

Len

Uln

Leu

Ala

Cly

Cys

Les

Ser

Giu

Les

His

S(=r

Cly

Seu

180

185

110

Ahe

Cru

T/o

Glo

Gly

Leu

Les

Glu

Ala

Les

Gls

Gly

Ile

S^r

Sro

Glu

195

220

20!5

Ces

ily

Air

Tło

Lee

Asp

TOr

Lcu

Gln

Lru

Asp

Val

Ala

Asp

SPo

Ala

210

251

222

iho

iho

11i

Gig

S ln

GUn

Met

Clu

Glu

Lru

Gly/

MeP

Cli

Pioo

Gli

Leu

003

220

223

224

Gle

Suo

Thi

Oln

Gly

A/i

lit

Pre

Al a

POo

Ali

Ser

Ale

Oli

Gln

αο

245

225

255

Tog

Cli

Gly

U li

Vil

Leu

Vil

liii

Sgo

Hii

Les

Gle

Sgo

Phe

Lnu

Glu

260

265

220

VII

Seu

Tei

Arg

Vv1

Leu

Gry

His

Leu

Cli

Gln

Pro

Gly

Gly

GCy

Ser

035

228

285

inG

MgP

Ala

Tło

Psi

Leu

Gly

Pro

Ala

Sro

Ser

Leu

Pro

Gln

Ser

Phe

290

251

330

Iru

Cru

Lyi

p sr

Seu

GSu

Uln

Val

Arg

Lys

Iii

lle

Cly

Asp

ily

Aila

305

310

331

330

Gli

Cru

Gic

Ule

Cys

Leu

SCys

Ali

Thr

005 (2) INFORMACJE O SEQ DD No: 195:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 329 aminokwasów (B) TYP: aminokwas (C) ILOŚĆ NICI: pojudrejzl (I) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: białko

184 424

385

(ei)	OPIS SEKWENCJI:	SEQ	ID	nr:	15:
Wit 1	Ali Ais ATs Aer 1li 5	Met	Ile	Asp	llu ll p li p HS 5 is a luy Sps 10 15
log	Piso Aro lii Poo Leu 20	Leu	Asp	Poo 25	Asa Asn Liu Asn Asp Gilu Asp 30
Vi1	See? Ali Liu Mit Asp 35	LOg	Asi 40	Liu	Arg Leu Poo Ann Leu Glu Ser 45
Phe	Vv1 Arg AAg Va1 1vi 50	Isn 5 A	Lei	AAu	Iiu Ale U Pr GSy lir Oli Dli 60
Nie 65	Lee Arg leg Lei A An 70	iiu	Cyi	Apu	Poo Sec Ala Tłu Ala 'Aa Sro 55 80
Seo	Asg Ais iis Ilo 'Ae 85	Nil	Lyi	15 a	Ili Asy T rp Gln Gli SAe Lysp 90 95
llu	Lys Alu The Phi Tye 100	Leu	Va1	Cło 105	Leu Glu Cln All Gln Gilu Gln 110
iii	iys Vvi liu lly Gly 115	Gly	Gly 125	SlA	Pro Gly llu Pro Ser Glys Pro 1^5
Nil	Ser Tło lit Asn Poo 130	Ser 135	Pro	Poo	Siar Lys Glu Aei His Lys Ser 114
Poo 145	Ain Vet Wit Pri l Au 150	Peo	Gli	Uy o	Llu Lee Syp Thr Leu O An Leu 505 1(50
Asp	Vvl Ala Asg Phi AAa 165	Thr	Thi	l 5 e	TłA Gln Gln Mi 5 Glu G Au Leu 170 175
ily	Mel Ala Poo lii Leu 180	Gln	Pry	Cho 185	Gln Gly Ali Met Piso Ala Phe 110
Ala	Sre AAa Phi Cli AAg 195	Arg	Ali 205	lly	Gly VaA Liu Va1 Ala Ser His 205
Liu	Gln Aer Pho Ler Glu 210	Ga U :ha	Sei	lyr	ti] VaT Oeu Arg Hii Uiu Ala 222
lii 550	Piso Aly lly Gli S Pr :335	Any	Met	OAa	ipp Pro Leu Gly Pro AAa Ser 255 240
Sio	Liu Aro GOo See AAe 245	Seo	Leo	lys	Iiu Lee Glu Gin Val Oyg Lyu 250 255
lii	Gln. Aly? Asp lly Ali 260	Ala	Leu	lln 265	Glu Spy Iiu Tys Ala Thr (Tjr 220

386

184 424

l'o

luu

Cyi

His

Oro

Alu

Ulu

Lul

Val

Ltu

Ltu

Gly

Lis

Lsu

Leu

Gly

275

20L

228

Ili

Oos

Tro

Ala

Oro

Leu

Sto

Sol

C/y

Oro

Kio

GIn

Lii

Lee

Gln

Leu

290

295

330

Ali

Al'

CAV

Leu

Lsu

Clu

luu

Hi?

Kto

GAy

Leu

Ohu

ltu

TSr

Gln

Gly

305

310

315

332

Ltu

leu

GAn

Ala

Leu

Alu

Gl'

Ilu

Kto

325 (2) INFORMACJE O KEQ DD Tr: 196:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 329 emiuokaapóa (B) CYO: amSnonaao (A) DUOŚĆ NIAI: pojedyncza (D) GOOOUOAIA: iinSaaa (SS) CYO CZĄSTECZKI: bSałko (xi) OODS SEKWENCJI: SEQ DD no: 196:

Mit 1

Cli Asn Cyo

Kto 5

Ile Mit

Ili

Asp

Glu 0L

Ile

Ili His

His

Leu 15

Lys

Arg

ero

Pro

Ali

Oro

Leu

ltu

Coc

Prs

Asn

Aon

leu

Ass

Aip

Glu

Aip

20

25

30

Ve1

Ssu

Ile

Ieu

Mee

Ulp

Mig

PC L

Leu

Tog

Lec

lLO

Uuu

Oec

Glu

Luu

35

40

45

Ohu

Vvl

Arg

AOg

Vai

lys

Vll

Lis

Glu

Cnu

Ale

Ucr

ilu

Sie

Gir

Ali.

50

5L

60

ilu

etu

Arg

Ainn

Leu

Cln

Pito

Cyc

Leu

Pro

Kto

Cli

Tło

Ala

Ala

Peo

65

70

77

80

Kio

Arg

His

Pro

Ile

lit

Ile

Lyc

Ali

Gly

Asp

Tip·

CL ln

Glu

Phe

Ang

85

0 L

95

Ulu

eyo

Leu

Tło

Ohu

Gir

Utu

Ve1

(Tir

lUL

Glu

Gln

.Ula

Gln

Glu

Gln

100

10L

110

llu

Trs-

Val

Vlu

Gin

U Ly

Aly

liy

Ser

las

Gly

SLu

Kto

Osi

' Ly

Ago

115

120

112

ilu

Srt

Thr

Tho

Asi

U LO

Tsi

Oos

Pro

Kto

Lys

S Lu

Sos

UOe

?Ai

Sei

130

35L

140

184 424

387

Poo Osi 145

Met tli

Oeo

M Aa 115

Phu

Gln log log

Alo 115

Gly Gly

Val

Leu Val 110

Gln

Sur

Hii

Seo

e lu

0 st

Phu

Leu

llu

Val

Seo

Myi

GS—

Vnl

Ltu

Gig

105

170

175

Gis

Ltu

Alu

Uin

Poo

Gly

Gl/

Gly

Ser

isp

Aut

Aln

Tłir

Pro

Leu

Gly

180

115

190

Poo

Sil

Seo

Soi

Lou

Paro

Uin

Sto

Phu

Leu

Leu

Lys

Set

Glu

Glu

Glu

195

200

220

Val

log

Iy/

Ilu

Gla

lly

Asp

Glu

Ala

Aln

Leu

Gln

Glu

Mys

Leu

Cyi

210

215

220

Gll

Chi

Tyc

-yi

Guo

My/

Gis

Pro

ilu

Glu

Lee

Vnl

Luu

Leu

ll/

His

225

220

223

220

Se—

ltu

Gly

/ Ii

Oeo

Mr—

Sil

Pro

Ltu

Ser

Seo

Tys

Per

Se—

lin

Ala

245

250

255

Leu

lin

Luo

Mli

ll/

Tys

Leu

Ser

Gln

Lou

Hals

Sto

Gly

Leu

Phe

Luu

200

220

227

Gy—

lin

Gly

Leu

Lou

lin

Ali

ltu

ilu

-31/

Ile

Sto

Pro

Mlu

Leu

Gly

275

280

228

Poo

Tho

Luu

Asp

Hhs

Lou

Gln

Luo

Asp

Val

Ali

Asp

Piie

Sin

Tłir

Tlr

250

295

300

Ilt

Trp

Gln

Un

MtU

e ii

ilu

Leu

Ul/

Met

Ala

Poo

Ali

Leu

lin

Paro

305

331

331

332

Tho

Uin

Gly

y ii

Met

Gp—

Sil

Pho

lin

325

(2) INFORMACJE O SEQ II No: 197:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) IŁUGOŚĆi 329 aGiookwpsów (B) TYP: aminokwas (C) ILOŚĆ NITI: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ II no: 197:

Aut lin Osi G/s Soi Ile Aut Ilu isp llu Ilu Ilu Gis Gis Lou L/s 15 10 15

388

184 424

Arg	Pio	PlA	ACi 20	Aro	Leu
lal	Dup	lir 35	Leu	Met	Asp
Phr	ViI 50	Arg	Ala	Val	Lys
lir 65	Ltu	Arg	Has	Leu	eu a 00
Dup	Apg	HiH	Soi	Ale 85	IUa
llu	Lys	Liu	TCr 100	POe	5Gsr
lin	Typ	Val 115	Glu	GIi	Gly
NLr	Dup 130	Tłir	Ile	Csn	Piro
PAO 145	Csr	Me a	A Aa	Tet	et c 50A
PAO	CIi	Phe	UCu	Ter 165	AP c
CIi	Dup	Ηϊι	Leu 180	Tln	Ser
His	Luu	Ala 195	Gin	Piro	Gly
Ppo	CIi 210	Ser	Ser	Leu	Piro
lal 225	Arg	Lyi	I li	Tln	Gly 205
lln	Chi	Tyr	Pus	Teu 245	Cua
Dup	Luu	GT|	A le 260	Pro	Trp>
lru	lln	Leu	Ala	Gly	Cys

700

Leu	Asp	hiO 25	Acn	Asn
Arg	Asn 40	Leu	Arg	Ueu
Asn 55	Leu	Glu	Aen	Aln
Pio	Ays	Lo A	Piro	Seu 75
Ile	Lys	AU a	Gly 90	Asp
Leu	Val	Thr 105	Lee	Tlu
Tly	Gly 105	Siar	Poi	Tly
Stn 135	Prc	Pro	Set	Lys
Piro	Ala	Lol	Gln	Pre 155
Phe	Tln	Arg	Arg 170	Ali
Phe	Litu	Tlu 185	Val	Deg
Uiy	Gly 205	Ser	Acp	Mtt
Uln 2215	Sec	Phe	Leu	Leu
Asp	Gly	Al a	Air	Len 235
His	Pro	G1 u	GAo 250	Lei
Ala	Piro	Utu 720	Ser	Sei
Utu	Ser 805	Gln	Luu	His

lru Asn Ans Ala Onp 30

Pro Ann Lee Ala Cet 45

Ser Gly Ala LTa ACi 60 ula Tłu Ala AAa Pri 80

Tiul S An p A u Phe Ar.

lln CIi GTu LTa Lin 111

Glu Pri Cet ATy Cri 112

Glu Sdu Αϊι Lys Cet 114 uiL GAn Gly AAa MrA 116

Gly g5y Val Lec Vil 117 rSiA Ang Vrl Ceu Arg 119

Ala TTr Cri Cer GTy 220

Lys Set Llu Ali LTn 222

ICu Glu Lyi ucu Tyn 224 uil Leu Lee uiy Ińi 225

Cys Pro Set Cii AML a 227

Ser GT| Alu AOr Leu 228

Gri lir Gly Leu Leu GTn Ala Leu Glu GTy Ilt Ser Pen Aiu Ceu Gly 290 255 330

184 424

389

Aur lOr Ces Asp 305 Ilr lip Clu Gln	iOo MrP 325	Les 310 Gls	ilu Iyu TPG Vil Gli asp	She Ali iho iOo 003
Clu	Lru Gir	315
(2) INFORMACJE O	SEQ	II	Nu:	198 :

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 329 imieokwipów (B) TYP: aminokwas (C) LUOŚĆ NlCl: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: linSowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: białko (xi) OriS SEKWENCJI: SEQ II on: 108:

MeP Ali 1

TAn

VC/r

Ser 5

Ile MrP

IIi

ilu 10

Ile

Ile

His

His

Lit 15

Sys

Tog

Sur

Pac;

Ala

Pro

Leu

Les

Aip

Air

Gsu

Asn

Leu

Gsu

Asp

Gla

Asp

20

22

30

Vil

Ses

Ole

Ueu

Met

Asp

(Og

Acn

Ues

Hcg

Lrs

Pro

Gnu

Leu

Glo

Cer

35

40

45

SOr

Wl

Arg

Ala

Wl

Lys

Vll

Len

p iu

Csn

GUn

SAP

Gly

Ilo

ilu

Ale

50

55

60

lir

Iru

Gog

Asn

Leu.

Gin

lor

Cyr

O cc

P CO

Sen

UPu

SLo

Ala

l Ca

Too

65

70

17

80

Sro

Cug

His

Pro

Ile

Ile

Ile

Lys

Al i

Gly

APG

Top

Cle

Glu

POg

Arg

85

90

95

Clu

Ues

Leu

TOu

Phe

1/0

Les

Wl

TOu

Ceu

Glu

Cln

Ali

Gln

Glo

Gln

100

105

111

Cle

Tyi

Pal

Glu

Gly

G 1/

GOy

GCy

Sro

Pro

Cly

Gls

Sur

Ser

Gly:

Pro

115

023

125

Ilr

Sse

Thr

IOo

Asn

Gs o

isr

Prs

Zi o

Stu

OOP

OSu

Crr

Hl_ st

Lys

Ser

130

135

114

Sur

Aso

MgP

Ala

Tło

Glu

Cl/

Ali

Met

Paso

Ali

Phe

Ali

See,

Cli

Phe

145

150

055

116

Cln

Aog

Aog

Ala

GOy

Gly

Wl

Leu

ΛΖίΐΙ

Ala

Sro

His

Les

GCn

Seu

Phe

165

170

117

390

184 424

Ltu

Giu

Vi1

SlA 180

ITr Aisg

Val

Liu

Arg iis 115

LlU

Ala lln Piso 110

Pil

Ply

lly

Sio

Aip

Mit

Ali

Ahr

Pro

Liu

lly

Poo

lii

Sio

Set

Leu

Ppa

Aln

195

200

220

Sto

Phi

Leu

Iiu

Lys

Aer

Leu

Clu

Cln

Vvl

Arg

Lys

lin

Glu

Pil

Pip

210

215

222

lly

Cli

Cli

Leu

Aln

Gilu

Lys

Iiu

Cys

Ali

TTł

Ayr

Lys

Liu

Cys

Hio

555

220

223

224

Poo

llu

llu

Liu

Vvl

Leu

Leu

Cly

iis

Sto

Lei

Giy?

Ily

Piso

Tgp

Ala

245

250

500

Poo

Lei

SlA

Sio

Ccs

Poo

Ser

C1a

Ala

iiu

lln

Leu

Cli

Gly

Ccs

Peu

260

265

270

Sto

Cli

Leu

His

Sei

lly

Leu

Phe

Iiu

Ts

lln

lly

Lii

Leu

Gln

Ala

570

280

228

Iiu

llu

Gly

NCle

Sei

Poo

Glu

Leu

(Cly

Ppo

Tho

Ltu

Aip

Aho

Liu

Gln

507

255

330

Ltu

Asp

Vi1

Ala

Alp

Phe

A iia

The

Tło

lii

Ττο>

lln

Gin

Met

llu

Glu

575

310

331

320

Ltu

lly

Wit

Ala

Ppa

Ala

Leu

lin

Pro

325

(2) INFORMACJE O SEQ ND Nr: 200: (i) CECiY SEKWENCJN:

(A)	DŁUGOŚĆ: 319 aminokwasów
(B)	TYP: gmlnekals
(T)	NIOŚĆ NNTN: pojedyncza
(D)	TOPOLOGIA: aSnleaa
ll) TYP	CZĄSTECZKI: białko

el)	OPNS SEKWENCJI: SEQ	ND	yr:	199:
Wit 1	lii Ais Tys Seo Asn Met 5	lii	gys	Glu lii Ili Ci] iis Leu Lys 15 15
lln	Poo Poo Liu Pro Leu Leu 20	Asp	Phi 25	Asn Csn Liu isn lly Glu Asp 30
Cli	Asp Ile Iiu Met Asp Asi 35	ASA 40	Iiu	Arg LOg Ppo Asn Liu Glu Ala 45

184 424

391

Pli

Asn Arg Ala 50

aal

Lys

Sro leu 55

Gln

Asg Ala

Ssi 60

Μι

81e

Glu

Ssr

Iii

Liu

Lys

Asn

ltu

Leu

Pro

uys

Leu

Poo

—ru

Aia

Tho

Ala

Ala

Poo

65

70

75

80

Clo

log

Hii;

Pro

iii

His

Ile

lys

Asp

iir

1so

Top

Asg

llu

Plr

Jog

85

98

95

log

-ys

Leu

Thl

8hp

Άχ

Lgo

Lye

u8r

Lgu

(SOe

u 8n

Alu

Gln

G8a

Gln

100

105

110

lin

Tyo

Aal

Glu

Gly

lly

Gly

Gly

Sto

Poo

Gly

llu

Poo

8er

Gly

8oo

115

no

112

iii

Seo

Thr

Ile

Asn

Prs

Sto

Pos

Pro

Sto

—ys

Glu

8si

His

Lys

Ssi

130

135

114

Poo

Asn

Met

Ala

Tłu?

Aln

cir

Ala

Met

Poo

Ala

Phi

Aia

Sio

Ala

Phl

145

150

155

116

lin

Aog

Arg

Ala

iir

(Sly

Aal

ltu

Aal

Ala

Sro

His

—ru

liG

Sro

Phl

165

178

175

—ru

Clu

Aal

S si

8py

Arg

AoI

Lea

189

liu

Ois

A la

—tu

Pro

Ser

Gly

180

1155

110

iir

Sio

Gly

Gir

Ser

lin

Ser

Phe

Liu

Ler

Ays

Ser

Leu

Glu

Glu

8ο1

195

200

220

Aog

-ys

Ile

Gln

iir

Asp

TlG

Ala

Ala

ltu

TlG

Glu

8-(

Leu

Cys

Ali

210

215

222

Tlo

Tro

Lys

Leu

crs

His

Pro

(-lu

Glu

liu

Vv1

Leu

Aiu

lir

Sis

Ssi

555

230

235

224

—tu

Cly

Ile

Pro

rop

Aia

Pro

Ltu

Ser

Sto

Cys

Pro

Seo

A Ig

Ala

Leu

245

208

255

lin

—ru

Ala

Gig

8((

Leu

Ser

Gln

Leu

Hit

Ses

Gly

Leu

Phi,

L eu

luo

260

225

270

TlG

Cly

Leu

Leu

GLg

Ala

Leu

Glu

CiG

Iii

Sro

J? 370

Glu

Ltu

Gly

Pro

275

2(30

228

Tlo

Aiu

Asa,

Thr

—tu

lln

—lu

A^p

Aal

Aia

A^p

Phl

Ala

Tho

Clo

Ile

290

295

330

hop

TlG

Gln

Met

Alu

Glu

Leu

isir

Met

Aia

Pro

Ida

Leu

TlG

Pro

305

:31.8

315

INFORMACJE

O S

NQ

ND No:

200

(S) GNCSY SEKWENCJI:

392

184 424 (A) DŁUGO:.: 322 aminokwasy (B) TYO: aminokwas (T) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: Oieizwi (SS) AYP CZĄSTECZKI: biiłko (xi) OPIS SEKWENCJI: EQ ON I D no: 200:

Met Ali Asi Cii 1

Sto 5

Asn

Met

11 e Asp Glu. OL o OLo hOo Hi o ruc

Sas

10

15

Ali

Pro

Oop

Teu

Pro

Seu

Leu

Aip

P1l

(As

Asn

Gru

Ain

Aly

Alu

Asp

20

25

30

(Ir

Ass

Ilt

Lut

Mtt

(Ou

Ans

Aon

Gru

(org

C»A

Pito

Ain

Tsu

Alu

Ala

35

40

45

Phe

Asi

Aog

Alu

AAl

Las

Seo

Stu

(Os

Ann

Ali

Ser

Ala

Ola

Alu

Ter

50

55

60

lie

Stu

Lys

Aon

Leu

Lut

Pro

Cys

Leu

Pro

Leu

Al a

Tiorr

Ala

AU c

1 ro

65

70

75

80

TIo

Gog

HiH

Soo

0 le

Ile

Ilr

Arg

As p

Gly

Asp

Top

Aon

Glu

Phe

Arg

85

90

95

Aog

Lys

S o r

TTi

The

Tyr

Leu

Lys

Thr

Leu

Glu

Ao n

Ala

Gln

Ala

Gln

100

105

111

(ll

Tro

Vil

GAu

01-/

rir

Cli

(li

Eto

Pro

Gly

Glu

Poo

Trr

Aln

Pro

115

120

112

lie

Ero

Tho

Ili

Arn

Poo

Seo

Poo

Poo

Seo

Lys

Glu

Osr

HHi

Tui

Seo

130

135

114

Poo

Asi

Μβί.

IOu

Thr

GOo

Gly

Ala

Me 0

Pro

Ala

tTe

APo

Ser

Ala

Phe

145

150

155

160

(li

Aog

Arr

Ali

G ly

Gly

Vai

Leu

Val

ALa

SeV

I 0 s

Cii

GIe

Oes

ALu

165

170

175

Ulu

Glu

VAl

0 ro

Tor

(org

Val

Leu

Aog

His

Leu

iii

Gln

Ppo

TIo

Poo

350

185

110

Ulu

rir

Poo

Alu

Ter

Eto

Leu

Pro

Als

Ser

Phe

Leu

Leu

Lyi

Ter

Lru

195

200

205

Alu

Ais

Vil

TArp

Tui

Ilt

Cis

(Cly

Asp

Gly

Al a

Ala

Leu

GAn

Glu

Uyo

210

215

222

184 424

393

Urs 225

C/r

Ala

TOu

Tyr Lys 220

Lcu Cyr His Pro

Clu 235

Cis

Les

Val

Leu

Lrs 240

Gly

Hir

Ser

Les

Gly·

Ile

Pro

lip

Gll

Pro

Lrs

Sro

Sro

Cys

Pro

Sro

0Ί3

250

255

Cln

Ali

Leu

Glu

Leu

Ala

Gly

Cys

Lir

Cst

Clu

Lrs

His

Ser

Gly

Urs

260

265

270

Ahe

Les

Tys

Gln

Gly

Leu

Leu

Clu

Ali

Siu

Clu

Gly

Ile

Ser

Pito;

Glu

275

280

285

Irs

Gly

Pro

Tho

Leu

Asp

Tło

Les

Gla

Clu

Arp

Vii

Ali

Asp

Phe

Ali

203

251

300

iho

TOu

Ile

Top

Gln

Gln

Met

Clu

ilu

Llu

Cly

Mrt

Cli

Pro

Ala

Leu

305

310

305

320

Cle Srr (2) INFORMACJE O SEQ DD Nu: 201:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 319 aminokwasów (B) TYS: aminokwas (C) LUOŚĆ NlCl: poiedLejza (I) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYS CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SSEWEENCJ: SEQ ID :v: 2:i:

MrP 1

Cii

GGn

Cys

Ser 5

Asn Mei

Ile

Asp

Clu 10

liłe

Ile

TOr

Hii

Leu 15

Lys

Cln

Aur

Pro

Irs

Pro

Leu

Leu

Arp

Phe

Gnu

irn

Lrs

Arr

Gly

Gilu

20

25

30

Cln

APG

Ile

Lrs

MeP

Gilu

Csn

Asn

Lsi

Arg

Toy

Aur

Asn

Leu

Gilu

Gil

35

40

45

Ahr

Arn

Aip

Ali

Val

Lys

Seo

Leu

GUn

Hn

Cli

Sro

Ala

Ile

Gilu

Seo

50

55

60

Ile

Ltu

Lys

Ase

Leu

Ltu

Pro

CC/s

Ces

Pro

Lru

Ali

Tho

Ala

Ala

Arr

65

70

75

80

TOr

Gry

Hir

Stor

lilii

Ile

IIe

Arg

APG

Gly

Asp

Tup

Aso

Glu

Phe

Cug

85

90

95

394

184 424

Aog

L'o

Lee Uhh 100

Phe

Gro

Leu

Lyo

TOa Lny Alu Am Cli GIn Ain Gin

105

110

Aln

Gso

Val

llu

Gly

ci:

Gl'

Gly

iuo

Oro

Aly

liu

Peo

Lir

Aly

Pos

115

110

112

Ilu

Sit

Thr

lir

Ali

PiL

Sos

los

S LO

Sos

Lyi

Ols

Aiu

lii

Sys

Ser

130

113

110

Sos

Ann

Met

Ala

Cii

U0a

Alu

lia

Me t

Met

Alo

Sin

A1i

lei

Ola

Pili

145

150

155

160

lin

Trg

Arg

Aln

Gly

GAy

VeL

Ltu

Vai

Ale

Ser

Hio

Leu

GAn

Lit

Phi

165

170

115

luu

Ulu

Val

ler

>Gir

Aog

Val

ltu

Arg

HSs

ltu

Ala

Clu

Pro

Lit

Aly

180

185

190

Ul'

Sto

GAy

ii:

Ser

Gin

Ser

POh

len

leu

eyo

itr

Leu

Alu

LAn

Vei

195

220

220

Tog

lyo

Ile

Cln

Gly

Anp

Gi'

Aii

Ale

leu

Gin

Uin

Lyi

Leu

A/y

Ale

210

211

220

Tho

Gsr

Lyi

Leu

AAy

His

Oos

liu

Gln

leu

Vai

lun

Leu

Gly

His

Ser

225

230

235

240

luu

AL'

Ile

Pro

Ti-C

Ala

Sos

ltu

Ser

Ser

(Gs?

Sos

Sec

Gln

Ala

ltu

245

250

255

llu

ltu

Ale

i Ay

C/y

Ltu

Ser

ilu

ltu

Hio

itr

Gly

Ltu

Phe

Leu

Tyr

260

265

270

ilu

AL'

Leu

Luu

Gln

Ale

Leu

Glu

Ul:

ilu

Ser

Prs

Gln

Leu

Gly

Sos

275

228

228

Aho

ltu

TC?

Thio

Leu

Ulu

Leu

Aip

Vel

Ale

Asp

Sili

Ali

Ahr

Tih:

lit

290

2295

300

Goc

Alu

Gln

Met

Glu

Glu

ltu

AL'

Met

Ale

Ooo

.Ale

Leu

Gln

Poo

305

310

315

(2) INFORMACJE O KEQ DD No: 555:

(i)	AE/HY SEKWENCJI:
(ii)	(A) DŁUGOŚĆ: 322 aminokwasy (B) CYP: aminokwas (A) ILOŚĆ NIAI: pojedyncza (D) GOPOLOA-IT: liniowa CYP /ZAKnE/ZKI: białko

184 424

305

:xs)	OPIS SEKWENCJI:	SEQ	II	in :	202:
Mut 1	lii Aon Cyr U—o Sim 5	Ut 0	lio	SpM	Um 1Ug IUg h—G Gs o UuM —ss 10 15
lin	Poo Pro Leo Pro Leu 20	Ltu	Asp	Phu 22	Osi Asn Leu isn Gly Glu Asp 30
lin	isp Ile Lue Met Osp 35	Osi	Asn 00	Leu	.Lig GS—j Paro Osi Leu Glu Ala 45
Pho	Osi Arg Ala Val Lys 50	Suo 55	Leu	Gin	isn Ala Ser Ala GIe Glu Ser 60
Ilo 65	Ltu Lyi- Asn Leu Leu 70	Pio	Cyo	Ltu	Poo Lue Ala Thr Aln Ala Pro 50 80
Thi	log Hii Peo IIe Gis 85	Ilu	Lys	Osp	Ul/ Asp Tarp Asn Glu Phe Aog 90 95
lig	Lys Leu TCh Ghe Ty— 100	Lou	Lyo	Tho 105	Lou Glu Asn lin Gln Ala Gln 111
lin	T/o Val Glu Mly Gly 115	Ul/	Gl/ 101	Suo	Poo Gly Glu Poo Ser Gly Paro 112
Ilo	Soi Thr IIe isn Poo O50	Su— 052	Pro	Pro	Sto Lys C-lu Osr His Lys Ser 114
Pio 145	Osi Met Gila Tin Gin 150	ll/	Ala	Mut	Poo Ala Phe lin Ser Ala Phe 550 160
lin	log Arg Ala Gly Cly 165	ani	Leu	Vnl	Sil Sog His ltu Uin Ser Phe 170 175
Lou	Ulu Val Seo Myr log 180	aani	Leu	log 185	Gis Leu Ala UIi Pro Thr Paro 110
Ltu	Ul/ Pro op-i 0 er Seo 195	Lou	Pro 2201	Gln	Soi Phe Iesu Ltu Lys Ser Leu 220
ilu	Uin Val lA—j Lys Ilr 210	U m 215	li p	iPO	ll/ Ala Ala Leu Gln Glu Lys 220
Lou 225	Gys Gila ATr Ols Lys 230	Ltu	Cys	His	Poo Glu Glu Ltu Val Leu Leu 350 240
ll/	Gis Ser Litu Gly Ile 245	Paro	Tapi	ill	Poo Lue Ser So— </ys Pro Ser O20 255
lin	Sil Leu uUn Meu Gla 260	lly	C/s	Lou 265	Sur Gln Leu Gis Ser Gly Lou 220

396

184 424

Phr Ltu Ths GTn Gly 000	Ltu Luu	Gln Aln Leu Glu Gly Ile let Pro Glu
200	228
Ltu Tir Pep Thr Leu	Asp Thr	Leu Uln Leu Asp Val	Ala Aip Phe Aia
290	295	300
Ghp Chi 1li Trp Tin	Gln Mut	GTi Glu Leu Uiy Mai	Ala Pri Aln Leu
305	310	315	332
ilr Pno
INFORMACJE O DEQ	ND No:	203:
(i) CECHY SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ	: 306 lmiAPnaasóa
(B) TYO: aminokwas
(T) ILOŚĆ NICN: pojedyncza
(D) TOPOLOGII: liniowa
(il) TYP CZĄSTECZKI: białko
xl) OOlS SEKWENCJI: SEQ	lD nr: 203:
Aln Asn Cli Dup lit	MuI lit	Asp GTu Ile Ile His	His ltu Lys Arg
1 5		10	15
Pio Pio Gln hio Ltu	Utu Asp	hio JAs Asn Llu Asn	Asp Tlu Ans Lal
20		25	30
Dtp Ili Ceu Met Asp	Arg Asn	Gpg Arg Leu Pro uin	Leu Alu Suc Phe
35		40	45
Vnl Ang Ala Val Lys	Air Ceu	G lu run Ala Sen lly	Ile Alu Ala lit
50	55	60
lru Arg Ann Litu Gln	Pro Cys	Leu Pro Ser A1d Thr	A1g Ala Pro Ser
65	05	75	80
Arg His Peo Ile lit	lic Lyi	Ala Tly Asp Tnp Gln	Ulu Phe Aug Glu
85		90	95
Lys Ltu Ghr Pht Gsu	Ltu Vnl	Ghn Leu Tlu Gln Aln	Gln Ulu Gln Uln
100		155	110
Cyn Val Alu Gly Gly	Gly Gly	Tin Pro Gly G1d Ico	Per Gly Prc ile
115		120	112

Dup TCh Ali Asn Pro Ser Pro Pro Ser Lys Glu Ser Ηΐι Lys Siar hio 130 135 140

184 424

397

Csn 145

Mit

Glu

Val

His

Ppa 115

Liu

Pry

Tłir Poo

Vvl 115

Peu

Leu

Pro

Ali

Vvl 116

Asp

Phi

Ser

Leu

Gly

Gln

Top

Lyy

Tłir Cli

Met

Alu

Glu

Thr

Lys

Alu

165

17D

117

lln

Asp

Ile

liu

P ly

Ala

Vi1

TCł

Liu Iiu

Leu

llu

Gly

Vvl

Vet

Ali.

180

185

119

Ali

log

Gly

G li

Peu

Gin?

Pro

TCł

Ays Ltu

Ser

Ser

Leu

Leu

Gly

Alni

195

200

220

Ltu

Sei

Gly

lis

Vai

Ayg

len

log

Leu ilu

Llu

Leu

Llu

See

SPU

Leu

527

215

22 0

lly

Cło

Gln

Leu

Pro

Ppo

Cln

Gly

Arg Cło

TCł

Ala

HSa

Lys

Asp

Pro

550

223

223

224

Csn

Ali

Ile

Phe

Leu

Sei

Phi

Gln

Hio Iiu

Ler

Aisg

Gly

Lyy

Val

Arg

245

220

225

Phi

iiu

Met

Llu

Aai

Gly?

Giy

Aer

Cho Liu

Cyy

Vai

Arg

Glu

Phe

Gln?

260

265

220

lly

Asn

Met

Alu

Aer

Poo

Cli

Pao

Poo Ali

Cyy

Asp

Leu

Ale g

Val

Llu

275

280

285

Sio

Lys

Leu

Iru

Ary

Uyp

log

Hip

Val Sto

iis

Ser

iia

Lei

Upr

Gln

290

295

300

Tys Poo 070 (2) IN/OUWACJE O SEQ ND Ne: 570:

(i) CETiY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 306 amlnekalsóa (B) TYP: aminokwas (T) NLOŚĆ NNTN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: ΙΟιΟ'νι (ll) TYP CZĄSTECZKI: białko

(el)	OPNS	SEKWENCJI	: SEQ ND no: 504:
Ali	Csn	Tys Sro	lit	Wit Ile Cys C^lu I1a	lir	His	His	Leu	Lys	(tog
1			5	05					15
Poo	Poo	Cli Peo	Ltu	iiu Asp Pr?' Asi Asn	iiu	Asn	Asp	Glu	Acy	Vai
		20		25				30

398

184 424

Sro

Ilr

Leu 35

Mei Gsp Pri Puv

Leu Arg Leu 41

Pro

Aru

Lee 45

Glu

Vee

SPo

Vil

Cug

Ala

Ve^l

Cyr

Acn

Leu

Glu

JAn

Cli

Ser

Gly

IIe

Glu

Gla

iii

50

55

60

Ces

Arg

Acn

Les

ile

Aur

C/s

Leu

Air

Seo

Ali

Tło

Ali.

Ala

Air

Sse

65

70

75

80

Cug

Hir

Pito

iEle

Ile

Ile

Lys

Ala

Cly

Arp

Tup

llu

Glu

Che

Goy

Glu

85

90

95

Cyr

Les

Thr

Phe

1yu

Les

Vli

Tło

Lit

Clu

Gln

Ali

Clu

Gil tu

Sin

Gln

100

110

111

T/u

Vil

Glu

Gly

ily

Gly

Gly

Ser

Pro

Cly

Clu

Pro

Ssr

Gly

iro

iii

115

20C

112

Sro

iho

IIe

CAn

Aur

Sa

Por

Pro

Sao

Lys

Glu

Seu

His

Lys

Cst

Sro

000

135

114

Gru

MrP

Leu

Pro

Tho

Aur

Val

Leu

Iru

Pro

Ali

Val

Acp

Phe

Seu

Lcu

145

050

151

116

Cly

Clu

Tip

Lys

Tło

Cln

MeP

Glu

Clu

Thr

Lys

Ali

Gln

Asp

Ile

Lit

165

171

117

ily

Ali

Val

Thr

Lgg

Ces

Leu

GUu

Gly

Vil

Met

Ala

Ala

Arg

Gly

Gln

180

118

110

Irs

Cly

Pro

Tłos

C/P

Lig

Seu

Goi

Leu

CGG

Gly

lin

Leu

Ser

Gly

Gln

195

001

220

VII

Cug

Leu

Leu

Iru

Gly:

Ali

Lsi

Gln

Sgo

Leu

Leu

Gly

Thr

Gin

Lcu

210

215

220

Air

Sur

Gln

Gly

(log

Thr

Tho

Ala

Hir

Lys

Asp

Pro

Asn

Ala

Ile

PPe

225

230

231

224

Irs

Sei

Phe

Gln

His

Les

Leu

Arg

Cly

Lys

Val

Arg

Phe

Lets

Mrt

Liu

0Ί5

201

225

Vii

Cly

Gly:

Sro

Tło

Ces

CL/s

VoV

Aog

Clu

Phe

Gly

Gly

Arn

Met

Ha

260

266

2^70

Sro

Sur

Aila

Pro

Air

Ha

C/s

App

Leu

Aur

Vai

Leu

Ser

Lys

Leu

Leu

275

80 V

285

Gog

AsG

Ser

His

Vil

Leu

His

Goi

Arg

Lrs

eer

Cln

CC/s

Pro

Gilu

Val

290

291

300

Hir Aur 035

184 424

399 (2) INFORMACJE O SEQ ID To: 205:

(S) CECHY KEKWETAJ1:

(A) DŁUGOŚĆ: 306 amSsonaanów (B) CYP: aminokwas (T) DUOŚĆ TI/1: pojedyncza (D) GOOOUOADT: USniowi (Si) GYO CZĄSTECZKI: białko (xi) OOIK SEKWENCJI: KEQ DD nr: 205:

Cle 1

Aon C/s

Kio

Ile 5

Met

lle Asp Glu

ile 10

Ile His

His

Leu

lys .Arg 15

Sos

Oos

G1a

OSA

Leu

Leu

Asp

Pro

Aon

Inn

etu

.fcn

Aop

GAu

Lep

Vvl

20

25

30

Sto

lit

Lei

Mit

Top

COrg

Asn

Leu

Arg

Leu

Poo

Cou

Leu

Glu

Lir

APh

35

4L

45

Vei

Arg

Ala

Val

L'?

Asn

Leu

Glu

Aon

Ala

itr

ii:

IDe

Glu

Ala

Lin

50

55

60

lun

Arg

Ann

Leu

liu

Prc

Cyc

Leu

Oro

Ser

Ali

Tho

Ala

Ala

Pro

Ser

65

7L

77

80

Arg

HSo

Peo

ADe

lit

Ile

Lyc

Ala

11'

Asp

Top

Uin

Glu

Phe

log

GAu

85

90

95

ero

euu

Thr

PPh

Ays

Leu

Lul

Tha

Glu

GUo

Gln

ULa

Uln

Uin

niv

Gln

100

105

111

Gso

Vei

Glu

Gly

Uiy

Gly

Gly

Ser

Srs

15 ly

Gln

Sos

Sei;

Gly

Poo

Ale

115

12A

125

itr

Gho

lin

Asn

Srs

Ser

Pro

Pro

SlO

Lys

Giu

itr

His

Lys

Ssr

Aro

130

135

114

Asn

Mit

tal

Leu

ltu

Pro

Ala

Val

cnp

Phe

Sto

ltu

Gly

Glu

Top·

Lys

145

10L

155

116

Thr

Uln

Mel

Glu

liu

Thr

Lyv

Al a

Ulu

Cip

ile

lun

Gly

Al a

Val

TAr

165

170

175

Ltu

ltu

Leu

G In

Llu

Va1

Mil

Ale

tVa

Aia

Gly

l Ln

Tog

Glu

Sin

Thr

180

185

110

Ayo

ltu

Set

Ler

Ltu

leu

Gly

Gln

Liu

Ser

Gi:

Ulu

Val

Arg

Leu

Leu

195

20L

205

400

184 424

	iiu lly 210	Ali Iiu Gln	Sio	Leu Ltu 221	lly TCł	llu	Leu Pro Pao Aln Gln? 222
	Grg Cho	TCł Ala Aii	Sys	Lsp Pri	pyn Aia	11i	PPe Lei Sei Uhe Pin
	225		230			235	224
	iis Liu	Lii Al] Aly	Sys	Lwi Ara	IAe leu	łtii	U pu Vat GUy lly? lic
		245			250		505
	Cło Liu	Ccs Aai Aisg	Clu	Phe Gly	lly Ann	Met	Ala Sio Poo Aln Pro
		260			265		22
	Poo Cli	Ccs Anp Liu	log	Val Leu	Sio Lyy	Leu	Liu Sou AA A Ser His
		275		:885			285
	Vi1 iiu	His Sio Arg	Iru	Ser llu	Tys Ppa	llu	Val His Ppa Leu Poo
	507			225			330
	The Po'
	305
(2)	INFORMACJE O SEQ	ND	Ne: 500:
	(i) CETiY SEKWENCJI	::
		(A) DŁUGOŚĆ: 306 lmlnekagsóa
		(B) CYP: lmlAekals
		(T) NIOŚĆ NNTN	: pojedyncza
		(D) TOPOLOCNA:	liniowa
	(ll)	TYP CZĄSTECZKI	: białko
(el) OPNS	SEKWENCJI:	SEQ ND nr	a 206:
	iii isn	CCy Aei Ali	lei	Ili Aip	Clu lii	Ili	iii Hio Iiu Lys Arg
	1	5			10		15
	Pi' Po'	Alit Po' Leu	Leu	1SA Pao	isn LAn	Leu	Ssy Aip llu Aip Val
		20			25		30
	tio lin	Aeu ItU ity	Sp A	log Les	Ayg iiu	Pro	gyn Leu Gla 'αγ CAi
		35		40			45
	Vi1 Ai]	Ala Sil lyi	Ααπ	isn Glu	Upn Ala	Ser	GAy Ile Glu OAa lis
	50			55			00
	iiu log	Csn Lir Aln	Poo	Cys Ltu	Prp Seo	lii	Thr Ali Ali Pro Seo
	65		70			75	80
	Arg iis	Po' Ili Ali	Ili	Lys lii	Gly Asp	Top	Gln llu Phy Arg Glu
		85			95		95

184 424

401

Lys

Ltu Thr

Phe 100

Tyr

Pc u

Liu

Thr Ilu Chu tui ula Tir llu GTi Gly

105

110

Tyn

Vnl

Glu

Tly

Gis-

Tly

Uiy

Dup

Pro

Gil

Tlu

Ppi

Ser

GTy

Cou

lit

115

120

125

Dti

Thi

lit

Csr

hiO

Dti

Pro

Pio

Dr;

Lis

Tlu

Dup

Hii

Lis

Seu

Pno

130

135

140

Asn

Hit

Ali.

Vnl

Asp

PPr

Dup

luu

Gly

Tiu

Trp

lis

Chu

Gin

Met

Glu

145

115

155

160

Ulu

Thu

Lys

Al i

Tln

Acp

lit

Utu

Gly

Aln

Val

Chu

Ltu

Leu

Leu

Glu

165

170

117

Uiy

Vil

Me a

a la

A li

Aig

CAh

GIt

Alu

uin

luu

Air

Opo

huc

Sue

S«ar

180

185

190

Leu

Ltu

GTy

Uln

Leu

Stu

Uil

Ulu

Val

Cug

Luu

Liu

Leu

GTy

ACi

Ltu

195

200

205

Uln

Dup

Leu

Ltu

Tly

Thu

Glu

Utu

Pro

Pio

Ulu

GT|

Arg

Tłhr

Tłhr

Aln

210

215

220

His

Lis

Asp

Pro

CSn

Ali.

lit

eht

Leu

Dtu

Phe

Tln

His

Leu

LeU

Cug

225

223

235

240

Tly

Lys

Val

Arg

Phi

Leu

Met

Liu

Val

Tli

Gly

Dup

Chi

Leu

(Ais

Vai

245

250

255

Aig

Tlu

Phe

lly

Gly

A i n

Asi

Ale

I ir

iii

UAe

Oio

iii

AOr

Oyi

Aspc

260

265

270

Ltu

Arg

Val

Ltu

Ser

Lys

Leu

Uru

Chrg

Asp

Deu

Ηΐι

Val

Leu

HHs

Deu

275

280

285

Aig

Uru

Ser

Tin

Cys

Pro

Tlu

Vnl

His

Pro

Leu

Peo

Tłir

Piro

Val

Lru

290

295

300

Ltu Ouo 305 (2) INFORMACJE O SEQ ND Nu: 207:

(H) CECHY SEKWENCJI:

(1) DŁUGOŚĆ: 306 aminokwasów (B) GYh: aminokwas (T) ILOŚĆ NiCl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) GYP CZĄSTECZKI: białko

402

184 424 (xS) OPIS SEKWENCJI: SNQ ND go: 207:

Ala 1

Asn

Cgs

8io

iii 5

Met

1li

Asp

ilu

Ili 10

Ili

Sis

His

Leu

Lys 15

AOg

Pos

Poo

Ala

Vpo

8eu

Tru

Aip

Pro

OKS n

Aon

LiG

Asn

Arp

Glu

Ag8

Val

20

25

30

Sto

Iii

Lee

uet

Asp

pg

Aon

Leu

1u8

Leu

Pro

Asn

Pos

Glu

Ser

Phe

35

40

45

Vi1

log

Ala

Vv1

lys

ASG

Atu

(-lu

Asn

Alu

Sio

Gly

Iii

81u

Πι

Ile

50

55

60

liu

log

Aon

Ltu

lin

Poo

CAr

ltu

Pos

Sn

Ala

Thr

Ala

Ala

Pos

Ser

65

70

75

80

Gog

Sis

Pito

Ili

iii

iii

Lyy

Gla

ily

Aip

Top

lin

Glu

Phi

Gog

Glu

85

90

95

lys

Aiu

Thr

OPl

8yh

08U

—tu

aur

LO8

Glu

Gun

Ala

lin

Glu

G8 n

Gln

100

105

111

Tro

Vv1

Gln

uly

Gly

S 8y

Gig

8er

Pro

Gly

USu

Pro

luu

Glp

080

Sio

115

120

U5

Sio

Tlo

Iii

lun

Poo

Sto

Pos

Pro

Sto

Lys

Alu

Ser

HSi

8-(

8st

Pro

130

13 5

114

Asn

Mit

Aip

Pli

Sio

liu

Gly

ilu

Top

Lys

Tlo

Gln

Met

Glu

ilu

Tho

145

150

155

160

irs

Ala

Gin

Ass

iii

Atu

Gly

lia

aal

Thr

liu

Leu

Leu

Glu

iir

Vai

165

170

175

Mit

lia

Ala.

aog

Gly

S 8n

ilG

Ky

Pr o

Tho

lO8

Leu

Uss

See

uu

Sio

180

185

119

iir

TlG

Lee

usr

81y

S 8 n

CiG

Aug

Leu

Leu

1τo

Gly

Ulu

Len

S8n

Aua

195

200

220

ltu

Liu

Gig·

Tlo

liG

liu

Poo

Pro

lln

Gly

Aog

Thr

Tło

Ali

8Ss

Lys

210

215

220

Gss

Pos

Aon

Ala

Iii

Pli

Leu

Sio

Pli

Gin

Sis

Leu

Leu

log

iir

Lys

225

230

235

240

Vi1

log

Phe

litu

Mit

liu

Val

lir

ilr

Sn

Clo

Leu

Cy8

Val

log

ilu

245

250

255

Pli

CiG

1(8

(η

Mit

Ala

Sn

Poo

Ala

Poo

Poo

Ala

Cy8

Asp

811

Aog

260

265

227

184 424

403

Vii

Seu

Sel

Uii

Luu

Uru

Aog

APp

Eer

Hio

Vu0

Leu

HHs

Ser

Arg

Leu

275

200

228

Eto

Cle

CCyy

Poo

GUu

Vii

His

Pro

ULU

Poo

TO

Pro

Val

Luu

Ase

Poro

290 295 300

Gil VII 305 (2) INFORMACJE O EEQ ID Nr: 208:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUCOŚĆ: 306 imiiokwioów (B) TYP: aminokwAs (T) IUOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liliowi (Si) TYP CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEC ID o:o 208:

Ali Asi 1

Tyi

Seo

lit Mrt 5

Ilt

Asp

GTu

LO e 10

LO h

PO H

Pol

Uou

PTA 15

Arg

Poo

Poo

Air

loo

Teu

Leu

Aep

Pro

.Son

Poo

Lec

Sc n

Asi

Glu

U op

Asi

20

25

30

Eto

Ilt

Lse

Mtt

Asp

Arg

AAn

Utu

(org

Sru

Pro

Asi

Leu

GAu

Ter

Phe

35

44

45

Vii

Aog

Alu

Vli

Lyo

Aon

Utu

(Elu

(As

Akii

S<er

GAy

Ole

Glu

Ali

Ilr

50

55

60

Uru

Aog

Asn

lut

A ln

Po o

Ppo

Lec

Sc o

Lru

Alo

OAr

Eto

Alt

O TO

Ser

65

70

75

80

Aog

His

Pro

O Iu

0 le

L 0 e

N|e

Alu

A Ty

Cii

Try

S 0 n

lis

OSc

Arg

Glu

85

90

95

srs

Uru

The

OTe

Tyr

Ltu

UtU

Thr

Utu

TIo

Glu

U Ta

(Ou

Gir

l On

Ala

100

105

111

TAO

Ai0

Glu

cis

Gly

C-ly

Gly

Ero

Pro

Ali

Glu

Poo

Sfer

Gly

Poro

Ilr

115

120

115

Ero

TIo

11i

Asn

Pro

Eeo

Pro

Pro

Eeo

Sys

Glu

Sre

His

Lys

Ster

Pro

130

135

114

Ass

Mtt

Gic-

Alu

Trp

S.s

Tin

G1t

Pc t

(Ir

Glu

IAt

Ciu

IU o

Gln

Asp

145

1550

155

160

404

184 424

Ilu

Ltu Gly

/ Ao

Mai 165

TMr

im

Leu um Liu Gly uil 1-70

Cni

Ala Ala 117

Arg

GL/

Gln

Leu

u Uy

Gra

opr

lyi

Les

S g ar

lou

Lee

Net

Liu

Gln

Leu

Ser

180

185

HO

lly

Gln

Val

lig

Ltu

Leu

Ltu

ll/

Aln

Leu

Gln

Su—

Leu

Leu

Giy

Min

195

200

220

UIi

Luu

Peo

Poo

Giu

Gly

a-l

Th-

Th—

lla

His

L/s

Asp

Paro

io^n

Mli

7O0

215

220

Ilu

Phu

Luu

Su-

Phu

Gin

Gis

Leu

Leu

log

Gly

L/s

Vnl

Arg

Phe

Lue

005

223

22^

224

Mut

Ltu

Val

lli

Gly

Ser

Th—

Leu

Cys

Vni

Arg

Ulu

Phit

Gly

Gly

Ais

245

2550

225

Aut

All

Seat

0 po

Mli

Am o

Poo

Ale

ops

ona

Les

SiS

Leu

Leu

Ser

Lys

260

265

220

luu

Ltu

Al—

Osp

Suo

Hio

Val

Lou

His

So—

Aarg

Ltu

Ser

Gln

OTy

Phi

275

280

285

Ulu

Vai

His

Poo

Ltu

Paro

aho

Poo

Val

Leu

Leu

Poo

Ala

Val

Asp

PPi

290 295 300

Sto Luu 552 (2) INFORMACJE O SEQ II) Nr: 209:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(i) IŁUGOŚĆ: 306 aminokwasów (B) TYP: aminokwas (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (II) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: białko

(xg) OPIS	SEKWENCJI:	SEQ	II	no	: 75O:
lin Asn 1	Cyi Ssr Ilu 5	Met	Ilu	Asp	Glu Ile Ilu His His Leu Lys 1s:g ZŁO 15
Pro Poo	Ala Giro Ltu 20	Leu	Asp	Paro	Asn Osi Leu Am Asp liu Asp Vil 25 30
Sto Ilu	Leu MtU Aro 35	Girg	l.m	luu 40	Arg Leu Pro Asn Leu Glu Ser PPe 45

184 424

405

Val Arg Ala Val Lys 50

Leu Arg Asn Leu Gln 65

Arg His Pro Ile Ile 85

Lys Leu Thr Phe Tyr 100

Tyr Val Glu Gly Gly 115

Ser Thr Ile Asn Pro 130

Asn Met Gly Pro Thr 145

Gln Val Arg Leu Leu 165

Leu Pro Pro Gln Gly 180

Phe Leu Ser Phe Gln 195

Leu Val Gly Gly Ser 210

Ala Ser Pro Ala Pro 225

Leu Arg Asp Ser His 245

Val His Pro Leu Pro 260

Leu Gly Glu Trop Lys 275

Leu Gly Ala Val Thr 290

Gln Leu

305

Asn Leu Glu Asn Ala 55

Pro Cys Leu Pro Ser 70

Ile Lys Ala Gly Asp 90

Leu Val Thr Leu Glu 105

Gly Gly Ser Pro Gly 120

Ser Pro Pro Ser Lys 135

Cys Leu Ser Ser Leu 150

Leu Gly Ala Leu Gln 170

Arg Thr Thr Ala His 185

His Leu Leu Arg Gly 200

Thr Leu Cys Val Arg 215

Pro Ala Cys Asp Leu 230

Val Leu His Ser Arg 250

Thr Pro Val Leu -Leu 265

Thr Gln Met Glu Glu 280

Leu Leu Leu- Glu Gly 295

Ser Gly Ile Glu Ala Ile 60

Ala Thr Ala Ala Pro Ser 75 80

Trp Gln Glu Phe Arg Glu 95

Gln Ala Gln Glu Gln Gln 110

Glu Pro Ser Gly Pro Ile 125

Glu Ser His Lys Ser Pro 140

Leu Gly Gln Leu Ser Gly 155 160

Ser Leu Leu Gly Thr Gln 175

Lys Asp Pro Asn Ala Ile 190

Lys Val Arg Phe Leu Met 205

Glu Phe Gly Gly Asn Met 220

Arg Val Leu Ser Lys Leu 235 240

Leu Ser Gln Cys Pro Glu 255

Pro Ala Val Asp Phe Ser 270

Thr Lys Ala Gln Asp Ile 285

Val Met Ala Ala Arg Gly 300 (2) INFORMACJE 0 SEQ

ID Nr: 210:

(i) CECHY SEKWENCJI:

406

184 424

CA) DŁUGOŚĆ: 30ό amlnekalsóa (B) TYP: gmiyekals (T) NLOŚĆ NNTN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: ISnleaa (ll) TYP CZĄSTECZKI: białko

el)	OPNS SEKWENCJI:	SEQ	ND	nr:	210:
lii 1	lii Cts Ser lir Met 5	Ili	Asp	Glu	lii liii His His Leu Lys LOg 10 15
Pi'	Pi' Ala Pi' Leu Leu 20	lAp	Poo	Ain 25	Csi iru Asi Asp Glu Aip Aai 30
Sto	Nil Lir Mit Asp Lor 35	Csn	Iru 40	Ao u	Liu Pio Asn Leu Gln. Aer Phe 45
Vi1	log Ali Aai Iys Csn 50	Iru 55	Clu	Asn	Cli Sio Gln Ue Glu Ali Ale 60
Ltu 65	log Ain Piu Cli Pro 75	Tys	Liu	Pro	Seo lii Tło lii Ala Po' Ser 77 80
IaU	iis Poo Ali Ili Ile 85	Iys	Ali	Gly	Asp Top Gln CC iłu Phe lor Glu 90 95
Lyi	Liu TCł Phi Tye Leu 100	Vai	Tło	Leu 105	liu lii Ala Cli Glu Aln Gln 110
Cyo	Vi1 Gin lly Gly Gly 115	lly	Ser 120	Pro	lly llu Pro Srr Gly Poi Ale 125
Sio	Tło Ili Aln Pio Ser 130	Pro 10 5	Pro	Ser	Lys liu Ser Hii Lys Aer Pro 114
Sin 145	Wit Giy Płh? Cli Leu 155	Pro	Pro	Cln	Gly Aog Tło Tło Ala iii Lys 755 160
Asp	Pi' Ais Ala lir Phe 165	Leu	Seo	Phe	lln iii Leu Leu Arg lly Lys 170 175
Vi1	Arg Pin iru Met Leu 180	Val	Gl: W	Gly 185	Ser The Leu (ys Val AA] Glu 110
Phe	lly Gin Ain Met Ala 705	Ser	Pro 200	Ali	Pro Pr' Ala Cyi Asp Lir Aog 205
Vi1	iru Set Pys Iiu Leu 210	.Arg ^15	Asp	Ser	His lal Leu His Ser Aig Leu 222

184 424

407

Sio 225

Ulu

Cys

Oos

Glu

Val 220

Hio

Sos

Leu

Srs

Tho 235

Sos Val

leu

Leu

Poo 240

Cli

Vei

Asp

Ohu

Ser

Leu

11'

Ulu

Tip>

Lyo

Gho

llu

Met

Alu

Glu

Tłh>

245

250

255

L'?

Ale

Gln

Asp

Ile

Leu

Gly

Ali

Val

Tho

Leu

Lnu

Luu

Glu

GIy

Val

260

2655

270

Mit

Ale

Ala

Arg

Giy

Gln

Leu

ul:

Pro

Gho

<V?o

Lnu

itr

Ser

Leu

Leu

255

280

285

UL'

Gin

Leu

Ser

Gl'

Gin

Val

Tog

Leu

ltu

Leu

Gly

Ali

Leu

Gln

Ler

290

295

330

Ltu

ltu

305

INFORMACJE 0

SEQ

DD

Tr:

211:

(i) CECHY SEKWENCJI:

	(C)	DŁUGOŚĆ: (	306	amSnonwanóa
	(B)	CYP: aminokwas
	(A)	DUOŚĆ T1CI: pojedyncze
	(D)	GOPOLOAIA	: liniowa
(SS) CYP	TZĄrGECCnl: białko
xń)	OPDS S	EKWETTJ1:	SEQ	ID nr: 211:
Cli	Aon Cys	Ser Ile MtL	Ile	Cnp Glu Ilu Ilu Hio His len Lys Tirg
1		5		10 15
Sos	Poo Ala	Sos Leu Luu	Asp	Srs Ann Aon Leu Ann Aop GAn. Lsp Val
		20		25 30
Kto	Iln Leu	Mut Inc Arg	Aon	Luu Arg Luu Pro Asn Luu GAa Ler Phe
	35			40 45
Vei	Crg Ala	Val Lys Asn	Leu	liu Inn Ale Ser liy Ile Giu Ale Ile
	50		55	60
Liu	Arg Ann	Leu Ulu Ooo	Cys	leu Pro Kto Aia Tho A1 a Ale Sos Ser
65		50		75 80
Tog	Hio Pro	Ile iii lit	Lys	Ali Gly Tnp Gop Ulu Glu Ohe Tog Glu
		85		90 95
L'o	Lnu AGh	Ohu Τ': Luv	Val	Tho Leu Ulu Ulu Ala Ulu GAu Gln Gln
		100		155 111

408

184 424

lyo Vil

Glu Gly GL-U 115

Cly

Gly

eeu 120

Pito

Cly

Clu

Pri

Ser 115

Gly

Csi

Ile

Sro

iho

Ilr

One

Aur

Seo

Pro

Aur

Ser

Lyp

Clu

Ser

His

Lu:

CSG

Pro

130

135

114

Gse

MgP

Gil-

Log

Aho

Głoo

Ali

His

Uys

Asp

Sro

Gru

Ali

Iii

Che

Leu

145

110

115

160

Sro

Ahe

dii

O Hr

1 ir

Leu

Toy

Gly

Uys

Val

COrg

SOr

Leu

Mei

Seu

Val

165

170

117

ily

Cly

Ses

Pio

Seu

Uis

VrP

ArV

llu

She

Gln

SAo

Gir

Mel

U 1 a

Cnr

180

185

119

Air

Cli

Pro

Pro

Ala

Cyr

Asp

Les

Arg

Vil

Uru

Ser

Lys

Lit

Sie

Arg

195

200

205

Gsp

Sro

His

Val

Ces

His

Ser

Aur

Leu

Seo

Glo

CL/s

Pro

Glo

Gal

His

210

215

220

Air

Lgg

Prs

Oio

Csi

Val

Ueu

Leu

Aur

Ala

Aal

app

Phe

Ssg

Cru

Gly

225

230

22^

240

ilu

Τθ>

Lyi

Pio

1 la

Met

Clu

Glu

hho

Lys

kia

Cln

Asp

Iii

Crs

Gly

245

250

2255

Gll

Vil

Thr

i CG

Sen

Siu

Uis

Gin

Uil

Aet

AL·

(Me

Ari

Gly

l Vn

lor

260

265

220

ily

Air

Tho

Cyc

Leu

Seo

Ser

Irs

Leu

Gl/

Clu

Leu

Ser

GCy

Gln

Val

275

280

285

iny

Iru

Leu

Leu

Gly

Ali

Leu

Cln

Ser

Les

Les

Gly

Tho

Glo

Ceu

Pro

290

995

330

Aur Cle 305 (2) INFORMACJE O SEQ DD Nu: 212:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 306 aminokwasów (B) TYS: aminokwas (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYS CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ iD no: 212:

184 424

409

Ali 1

Ann

C/i

iuo

Ili 5

Met

llu Asp

GLu

Ili 10

liu

Hio

Hio

Len

Lyo 15

COrg

Oos

Oos

Ali

Leo

Ltu

Leu

Top

Peo

Alss

Ton

lun

Asn

Asp

Glu

Lep

Vsl

20

25

30

Sur

Ilu

Leu

Mel

Cnp

Arg

Ann

Ltu

Arg

Lnu

Oos

Aon

Leu

GAu

LSU

LPr

35

40

45

Vel

Arg

Ala

Val

Lys

i vn

leu

Glu

Ucn

Ala

Ser

Sly

L lo

Glu

Gil

-CL^e

50

55

60

ltu

Aog

TCn

Leu

Glu

Uco

Uyn

Lee

STi

ltu

Ala

OLi

O La

Ala

ivo

Tro

65

0L

75

80

Aog

HSs

Pito

Ile

lit

IlL

LyS

Ala

Ul'

Top

Gop

Cln

Glu

Phe

TAg

Alu

85

90

95

Lyo

Ueu

Tłir

Phi

Tro

Leu

Vli

Tłir

luu

llu

Aln

Ale

Gln

GAu

LAn

A Aa

100

105

110

Cyr

Vai

Glu

-Al'

ul:

Gly

Gly

Kio

Pro

Gly

Glu

Pro

Ser

GAy

Aro

Lii

115

120

1195

itr

Gho

Ile

Asn

Sro

Ser

Pro

Ooo

Ser

Lyi

Ulu

Ser

His

Lys

Lir

Loo

130

135

114

Aon

Mut

Ala

His

Lyi

Hvp

Pro

Asc

CSo

lin

Phi

1li

l cr

Phe

U Ln

Hiu

145

50L

1555

116

ltu

euu

TCg

Aly

Lyn

P cl

Sey

Ogs

Ilu

nil

Met

SZal

eiu

Gis

lvr

CLy

165

170

175

lun

Tys

Val

Tog

llu

Phe

AL'

Gly

Cou

Mit

Ale

Ser

Pro

A1_a

Loo

Pro

180

185

190

Cle

Ayo

icp

liu

Crg

Val

Leu

Kio

Lys

Lnu

Luu

(Org

Asp

Set

Ais

Val

195

200

205

Luu

HSo

Sir

Arg

ltu

Ser

Gin

Ay?

Pro

Gln

Vai

His

Pro

Leu

Loo

Tłrr

210

215

220

Srs

Val

Lnu

leu

Ooo

Ala

Val

Ai?

SUi

Sio

Leu

Gly

Glu

Tpv

Lys

Tłrr

225

20L

235

220

Ulu

Mut

GAa

Ulu

Thr

Lyc

Ala

Gln

Coc

Ili

Leu

Gly

Ala

SZeL

Tłrr

Leu

245

250

255

Ltu

luu

Glu

-CL'

Vel

Met

Cle

Ala

Tog

Uly

Cln

Leu

Gly

Pito

Tłir

CTys

260

265

270

Luu

Sto

Sit

Lnu

Ltu

Gly

Gln

Liu

Ser

Gly

Uln

SZal

Aog

Leu

Leu

Leu

275

280

285

410

184 424

lly	lii Iru	Cii	Sro	Liu	Liu	lly The Cln Iru	Pi' Pi' lln eiw Cer
	290				295		300
Cło	Cło
305
2) INFORMACJE	O	SEQ	ID	Ne:	213:

(i) CECHY SEKWENCJN:

(A) DŁUGOŚĆ: 306 lmnnekagsóa (B) TYP: aminokwas (T) NLOŚĆ NNCN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ll) TYP CZĄSTECZKI: białko (ei) OPlt SEKWENCJN: SEQ ID ner: 213:

Sil Sin CCy 1

Srr 11i 5

Met

Ile

Asp Giu

lir 10

11 e

iis

Hiy

leu

Lys 15

leg

Poo

Poo

Ali

Pro

Leu

Leu

Asp

Pr'

Acn

Asn

Liu

isn

Asp

llu

Alp

Vi1

20

25

30

tli

lin

Leu

Met

Asp

Alp

Aon

Les

Arg

Leu

Pre

Uyn

Pi'

Gis

ler

liu

35

44

45

Vi1

log

Ali

All

iy?i

Asn

Leu

Glu

Gsn

Ali

Ser

Gly?

lin

Glu

Ala

lii

50

55

60

Iiu

lig

Acn

Ltu

Gln

Pro

CCy

Liu

Pito

Sio

Ali

Tło

Ali

Ali

Pito

SlA

65

75

75

88

SiU

iii

Pao

lit

lir

Ile

Lys

lii

Giy

AAsp

Top

Cln

Gln

Phr

Arg

liu

85

90

95

Lwi

Iiu

TCł

Płt

Cyo

Leu

Val

Tłli

Leu

Clu

Cln

Ali

Gln

Clu

Gln.

ilu

100

105

110

Twe

Vvl

Glu

Gin?

Gly

LSll

A ly

See

Wy o

Cly

lir

'50

lis

Gly

Ua o

POe

775

157

Sio

Cho

Ile

Asn

Poo

Ser

Prp

Pro

Sio

Lys

Glu

Ser

Hio

Lys

Ser

Pro

130

355

110

lin

Mit

Aip

Pi'

lin

Ala

Ile

Phi

Liu

Sro

Phe

lly

Hio

Iru

Leu

lor

705

505

155

160

lly

IWi

Vvl

Aig

Phe

Leu

Met

Iiu

Val

lly

Gly

Seo

Thr

Liu

CCy

Vi1

165 707 117

184 424

411

Ary	Clu	PPo ilr Gly Csu Met Hi Ser	Aur	Ala	Pro	Aur Ala 119	Cys	Clsp
180	185
Ceu	Crg	Wi Lru Ssg Uys Leu Leu	Arg		Sei	Hii	Vil Leu	His	Ser
		195 200					205
Gog	Les	Ses Oln Sys Sur Glo Sal	His	Pro	Leu	Pro	Tłos Pro	Vćtl	Leu
	210	221				222
Leu	Sur	Ho Vil App SOt Ser Leu	Cly	Giu	Tipp	L/s	ihr Gln	Met	Glu
225		230			225				240
Clu	TOu	Lu: Ali ilu App Ile Leu	Gly	Al a	Val	iho	Les Leu	Leu	Glu
		245		250				255
Cly	Vil	Met Ala Ali Tur Gly Gls	Leu	Cl/	Pro	Tlo	Sys Leu	ise	Ser
		260	265				220
Urs	Lrs	Gly Sin Lig Seo Gly Glu	Val	Aog	Leu	Lig	Leu Gly	Ala	Leu
		275 280					285
Cln	Sto	Len Seu Gly TOu Gln Seu	Arr	Pro	Gln	Gly	Arg Thr	TłlO	Ali
	290	229				330
His	L/s
305
INFORMACJE O SEQ ID Nu: 20Ί:

(i) CECHY SEKWENCJI:

	(A)	DŁUGOŚĆ: 3Q6 aminokwasów
	(B)	TYP: imiookwip
	(C)	ILOŚĆ NICl: pojedynczi
	(D)	TOPOLOGIA: liniowi
(ii)	TYS	CZĄSTECZKI: białko
) OPIS	SEKWENCJI: SEQ DD nu: 20Ί:
Cli Cse 1	Cy:	Seo (Li MeP Ile OnG Gls 11i 5 00	Ile	Hii	His	Ueu	Lys 15	Aog
Aur Aur	Ali	Air Gsv Ceu Asp Air Arn Asn 20 25	Leu	Asn	Asp	Clu 30	rssp	Vil
Ser ilr	Lir 35	Sei Asp Arg Gir Leo Arg Leu 40	Pro	A in	Ces 45	Glu	Sir	Phe
Vil Grg 50	Ali	all Spv Cru Leu lis Aro Ala 50	Sei	Gly 00	Ile	Clu	Ala	Ilr

412

184 424

liu 65

Gog Asn Ger Πη

G8 o Pgo Ss8 Ιό 70

008

Ais 15

O8o Ala Ali

080

lua 80

Aog

Sis

Pro

0 Nu

8 li

8 lu

8ys

Gla

liG

Asp

Top

(Sin

Glu

Phi

log

Glu

85

05

95

lys

—tu

Tło

OPl

88(1

08U

eru

ai8

108

Glu

Gic

u 8 a

lin

Gln

l 8n

lin

100

105

111

Pro

Vi1

Glu

Gly

Air

iir

iir

Ser

Poo

Gly

Alu

Pro

Sn

8-ly

8po

8ii

115

105

112

Sto

Tlo

IIi

Ann

Pro

Sio

Pro

Poo

Sio

Ly8

Glu

Sn

mi

8yr

8n

8170

130

1^^

114

CSG

Mit

Ala

a lu

8ho

1 8 U

liu

10o

1 8n

G8 s

LeS

/ 8U

ieu

Gly

TAS

AoI

145

150

155

110

Gog

Pli

Lee

uel

8e—

u8 1

Wg

1(8

Ser

Tlr

Sir

Cys

PrO

Ar—

u8 u

Ghs

165

105

117

iir

Ciy

Asn

Gul

8 li

l8 r

Sro

OAi

180

Poo

Alo

083

lii

Lec

S8g

Cup

180

185

110

liu

Sto

Lys

8ru

Leu

Arg

Asp

Se8

Sis

Val

—ru

His

Sn

8cg

8ie

8 er

105

205

220

lin

Cys

Poo

llu

Vai

His

Pito

ltu

Pos

Thr

Pro

Val

8^

8i^u

8po

Ala

210

2155

222

aal

1ss

Pho

1 si

8ee

u 8 y

lis

lΞP

OO8

(/8

Glp

08 t

lin

Glu

18o

Clu

225

230

2315

240

Cla

Tln

Asp

p Nu

8 ee

u 8 y

lis

Ua8

Thr

Viu

Tro

Leu

—lu

Gly

u8l

Miu

245

505

225

Aia

ila

Arg

g lg

Πη

Gm

Alu

1(8

Thr

Pro

Lec

0 8r

Uru

Lee

śm

(Siło

260

265

220

lin

—tu

Sn

Tly

Tln

Vai

Aog

Leu

Liu

Leu

Cly

Al a

Litu

Gin

8si

Leu

275

885

228

ltu

iir

TCr

lln

Leu

Pos

Pro

lin

iir

log

Tło

TCr

Alu

ms

81(

Asp

200

295

300

Poo Asn 305 (2) INFORMACJE O SEQ ID Nr: 215:

(i) CECSY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ:: 305 amiGokwauóa (B) TYP: aminokwas (C) NLOŚĆ NNCI: pojedyncza

184 424

413 (D) TOPOLOGIA: ilniowi (ll) TYO CZĄSTECZKI: białko (xH) OPND SEKWENCJI: SEQ ND nr: 215:

Aln 1

Asn Cyi

Dup

lit Mat 5

Ale Asi

i lu

ASp 05

Tlu

His

lir

Lee

lys 15

Hhs

Pio

Puo

Aln

Pio

Utu

Leu

Cip

Pro

Asn

Asn

Leu

isr

Asp

Glu

Acp

Aai

20

25

30

Dtp

Ili

Leu

Mru

Asp

AAS

Asn

Len

gig

Asi

Pre

un;

Utu

Glh

Ocr

ipi

35

40

45

Vnl

Arg

A Ci

Vnl

Lys

Asn

Leu

Glu

Asn

Ala

Dup

Gly

Ili

LTa

ACi

5 le

50

55

60

Liu

Arg

Ann

Utu

Gln

l3 pro

(As

Ltu

Ouo

Dtp

Ala

Cip

Aln

Ali

Pro

Ser

65

70

70

80

Aig

Hii

Piro

lir

lic

lir

Uys

Aln

Uil

Asp

Trp

Tln

Glu

Phe

Aog

Glu

85

05

95

Lii

Ltu

Ghi

Oht

Typ

Leu

ani

Thu

Leu

du

Gln

Ali

Gln

Glu

GTi

Gln

100

105

111

Gsu

Val

Glu

Ulu

Gly

ATy

Gly

Sei

Aio

lir

Gle

Ppo

Tli

Gly

uco

PAe

115

1205

112

Dup

TTr

Ile

Aie

Pri

lo;

Pro

Pre

Icr

Opo

Glo

Oir

Dii

Aiu

uet

Pro

130

3.31

110

Asn

Mtt

GTu

Vnl

Hii

hno

Leu

Pro

Thu

PAO

Val

Liu

Leu

Pro

Ali

Vai

145

150

150

160

Cip

Phr

Siar

Ltu

Gly

Tiu

Trp

Lys

Thu

lin

Met

reiu

Glu

Thr

Lys

Aln

820

70 5

117

Tln

Aip

lit

Leu

Tly

Aia

Val

Thr

lcu

Len

Leu

Glu

Ulu

Vai

uct

Tlu

180

185

119

Aln

Arp

AT|

Uin

Luu

Tly

Pro

τι;

Cys

Leu

Dti

Seu

Leu

Leu

GTy

Uin

195

205

220

Ltu

Sdu

Gly

Tir

VaT

Aai

Leu

Leu

η lu

Glu

Ala

uiu

Ulu

lic

Leu

lau

210

2211

220

Tli

Ghp

GTa

Ltu

Pri

Pno

Gln

Gly

Aug

Chu

Thr

Ali

HSi

Lys

Asp

Puo

705

230

235

240

414

184 424

Ais

Ali

Ile

LPi

0 se 245

Eeo

Phe

(in

His

Stu 250

Ulu

log

Gly

Lys

Va1 225

Arg

P1l

Utu

MeM

t sr 260

Tal

(li

Gly

Eto

Tho 225

Stu

Cys

Vil

(org

Glu 2770

PPi

Gly

Cii

Met

Ali 275

i EL

Too

Ali

Pito

Poo 280

Ala

Tro

Akop

Utu

Akrg 285

Val

Luu

Ter

Sro

Sru

Stu

Aog

Asp

Sro

Hio

Ai0

Utu

Hio

Eto

Aog

Utu

Emo

(Os

Tso

290 2290 330

Poo

305 (2) INFORMACJE O SEQ ID No: 216:

(S) TECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 305 Aminokwasów (B) TYO: amiszkwis (T) 1TOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOUOA1A: liliowi (Si) TYP CZĄSTECZKI: białko

xi) OPIS SEKWENCJI:

SEQ

ID

o:

2 2:6:

Ali

Asi

Crs

Ster

lle

Met

1li

Gss

(lu

Ile

lie

His

His

Ulu

Lyi

Arg

1

5

00

15

Poz

Poz

Ali

Pro

Utu

Leu

Aip

Poz

Ase

Asn

Utu

AAe

Asp

(lu

Aip

Tal

20

25

30

Seo

Nie

Lsr

Met

kip

Aog

Am

Utu

Aog

Leu

Pro

Ase

Leu

Glu

Ort

Phe

35

40

45

Vli

Aog

AAu

Cal

Lu·

Ase

Leu

(iu

Gsn

Ala

Ero

Cii

Ile

Glu

Alu

Ole

50

50

60

Seu

Gog

Asi

Lee

Ale

Pro

Cyo

Ltu

Pro

Ero

Ali

Tho

Ala

Ali

Pro

Ster

65

70

75

80

Aog

His

Poz

Ile

lit

Ile

Lyo

Ali

Gly

Asp

Trp

(ln

Glu

PIl

APrg

Glu

85

90

95

Lii

Leu

Tho

Phe

Tyrp

Leu

Vći1-

TIo

Uru

Glu

CEln

Ali

Gln

(lu

Glu

Gln

100

105

110

Tso Vil Glu Gly Gly (ls GAy Eto Poo Gly (Elu Pro Ser Gly Poo . Ile 115 120 1195

184 424

415

Sto

Tho 130

Ilu

Asi

Pio

Sto

Poo 135

Poo

Sur

l/s

Ulu

Soi 140

Gis

L/s

Suo

Poo

Osi

Aut

Lee

Pro

Tir

Paro

inl

Leu

Luu

Pro

Ala

Val

Asp

Phu

Se—

Leu

145

110

155

160

Ul/

Ulu

Tc—

Lys

Thr

Gln

Mut

Glu

Glu

Ti—

Lys

Ala

Gln

Osp

Ilu

Leu

105

no

175

Ul/

Gin

Val

TTi

Meu

ulu

Ltu

Glu

Gly

Val

Met

Al a

Al a

Gorg

Mly

Gln

180

180

119

Ltu

Uly

Peo

Thr

Cys

Leu

Sur

Sur

Leu

Leu

Gly

Uin

Leu

Oso

TUy

Gln

195

200

225

Vnl

Aog

Lee

Leu

Ltu

Gly

lii

Leu

Gln

Ser

Leu

Leu

Gly

Tl—

Tin

Leu

210

215

220

Pio

Poo

Gln

Gly

Glrg

Ml—

lin

Hńo

Lys

Asp

Parsa

Asn

Aln

Ilu

Phe

225

220

235

240

Ltu

Soi

PPi

Gln

His

Leu

Lou

Arg

Gly

Lys

Val

Arg

Phe

Lou

Mut

Leu

245

220

255

Vnl

Gl/

Gly

S eu

Tl—

Luu

Slr

Va0

Arg

Glu

Phu

Gly

Asi

Met

Tin

Ser

200

250

22 7»

Pio

lin

Peo

Pro

lii

Cyi

Osp

Lou

Arg

Val

Ltu

Seo

Lys

Leu

Tue

Gorg

275

280

285

Asp

Suo

His

Val

Luu

His

Sur

Arg

Leu

Ser

Gln

Tys

Paro

eiu

Tal

His

250

295

300

Pio

305 (2) INFORMACJE O SEQ H Nn: 217:

(i) TETGY SEKWENCJI:

(A) IŁU-OŚĆ: 305 aminokwasów (B) TYP: aminokwas (T) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (I TOPOLOGIA: liniowa (SS) TYP CZĄSTECZKI: białko (xS) OPIS SEKWENCJI: SEQ II no: 718:

lin isn G/s Seo Ilu Mut Ilu isp Ulu Ilu Ilu Gis Gis Lou L/s Arg 15 10 15

416

184 424

Pi'

Pi'

Ali

Pr' 20

Ltu

Liu Asp

Poo

lin Asi Ltu Ain Aip Ala Alp

Vvl

25

30

Sto

Ili

Lir

Mit

Aip

log

AAn

Leu

Arg

iiu

Poo

liA

Ler

Alu

Aer

PPł

35

45

45

Vi1

lig

Ali

Vii

iWs

Aia

Liu

Glu

Acn

lii

Sio

lly

Ili

Aln

All

PNi

50

55

60

iiu

log

Tin

Liu

lln

Poo

Tys

Lir

Poo

SlA

Ali

Cło

lii

Ali

Pro

Ser

65

70

75

80

log

iii

Ppo

lii

lir

lir

Lys

Ali

Gly?

Asp

C]A

lln

liu

Phi

Cer

Glu

85

90

95

Lwi

Ltu

Tłir

Phr

Tyo

Liu

Vii

Tłir

Lru

Glu

lln

Ali

Gln

Alu

Alu

Alu

100

105

110

Tri

Vi1

Glu

Gly

11?

lly

lly

Ser

Poo

GlW

C(1u

Poo

Ser

Alys

Pro

Ali

115

125

125

Sto

Cło

Ile

Ain

Pro

Sro

Pro

Pi'

Ser

iWi

GjLu

Sei

Aii

Pys

Per

Pao

13 0

135

114

lii

Mit

Val

Leu

iru

Poo

Ali

Val

Aip

Phr

Seo

iiu

iis

Giu

Tłop

Lys

705

150

155

116

Tło

lln

Met

Glu

liu

The

Ly s

Ala

Gln

lip

lir

Leu

Gic

Ali

Val

Tłir

765

:775

117

iiu

Ltu

Leu

Glu

eiw

Vii

Met

Alei

Cli

lOg

(31?

Gin

Leu

Alys

Pro

TTh.

180

185

190

Cyi

iiu

Ser

Ser

Iru

Lru

(3ly

Gln

Leu

Sio

Gly

Gln

Val

Aig

Leu

Leu

705

205

205

iru

lly

Ala

Liu

lin

Sro

Leu

Ltu

Gln?

Tło

lin

Liu

Poo

Aoo

Gln

Gly

577

:215

222

log

Cho

Tłrr

Ali

His

Lys

GAp

Pro

Asn

lii

Ile

Phe

Leu

Sio

Phe

Gln

225

230

235

220

His

Iru

Leu

Aog

GlW

Lys

Val

Arg

Phe

Ltu

Met

Leu

Val

lly

Gly

Sfer

245

255

225

Cło

iiu

CCys

ilA

log

Glu

Phe

Gly?

lin

Met

Ali

Ser

Pro

Ala

Pro

Pro

260

265

270

Ali

Tys

Asp

Liu

Arg

Val

Leu

top

Lys

iru

Leu

Arg

Asp

Aer

His

Val

275

80 A

285

Ltu

iis

Ser

Arg

Leu

Ser

GIia

Cy?i

Pro

Glu

Val

His

Piso

Leu

Pro

Thr

290

:955

330

184 424

417

Air

305 (2) INFORMACJE O SEQ DI Nu: 218:

(i) CECHY SEKWENCJi:

(A) DŁUGOŚĆ: 305 lireokwlpów (B) TYP: aminokwas (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: liniowi (ii) TYP CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID nv: 2:8:

Gll 1

Csu

(yy

Sro

ile 5

Met

Ile Asp

Glu

ilt 10

ile

HSp

His

Leu

Lys 15

Arg

Aur

Poo

Ala

Piz

Lrs

Leu

Asp

Air

Aso

Gsu

Ceu

Ano

A/p

Clu

TGp

Val

20

20

30

Sro

Ile

Leu

Mei

Asy

pcg

Asn

Leo

Uvg

Leu

Pro

Acn

Lrs

Glu

Zir

Phu

35

40

45

Vil

Aur

Ali

Vil

Lys

Asn

Ces

ilu

Asn

Cli

Seo

Gly

IIi

Glos

Ale

Ile

50

55

60

Iru

Cug

Aon

Gig

Gir

O GO

Apo

Uru

Uis

Z ir

Ala

Thr

Ali

Ali

Pro

Sei

65

70

75

80

Goy

His

Pro

ilr

Ile

ile

Lys

Ala

GCy

Asp

Top

Gln

Glu

Pil ii

Crg

Glu

85

90

95

L/s

Les

Tło:

Płyt '

ryp

Ues

VaV

iłu

Leu

Glu

Giu

Ali

Gis

(Siu

Gln

Gln

100

050

111

Tyo

VII

Glu

Gly

sin

Lii

Cly

Seo

Pri

11/

Glu

Pro

Ser

Gly

Pro

Ile

115

120

122

Seo

iOo

IIe

Gro

Pro

Ser

Air

Pro

Soi

i/p

Glu

Ster

Hir

Sys

Cse

Pro

130

135

140

Csn

Met

Ala

Vil

1PSG

SOt

Sit:

Seu

Gly

Clu

Top

Lys

Tło

Gln

MrP

Glu

145

1550

160

Clu

iOo

Lys

Ali

Gln

Asp

lie

Sets

Gly:

Cli

Val

Thr

Les

Leu

Leu

Glu

165

170

175

Cly

VII

Met

Ali

Al i

Ao r

Gly

Gle

Leu

ciy

Pro

Thr

CL/p

Leu

Ser

Ser

180

180

110

418

184 424

euu ltu Gly 195

lin

Leu

Ser Aly Gln Val Tog Leu Leu Lnu Gly Ala Lnu

20L

220

Ulu

Kto

Leu

luu

Gl'

Thr

Glu

Leu

Oro

Sos

Gln

GL'

Arg

Thr

Tłir

Lin

210

25L

220

Hii

Lro

Asp

Leo

Aon

Ala

Ile

Sht

leu

Ser

Ohu

ilu

Hic

ltu

Leu

Arg

225

23L

235

224

Al'

lyo

Wl

Arg

Ohu

Leu

Met

ltu

Vai

Gly

Aly

Ser

Thc

leu

Cyc

Wl

245

250

255

Tog

Clu

Phe

Gly

Ain

Met

Ala

itr

Pro

Ala

Oos

Pro

.Gic

cyn

Asp

Leu

260

265

270

Trg

Ve1

Leu

iuo

lys

Leu

leu

(Org

Top

Ser

His

Wl

Lnu

His

Ssr

Aro

275

20L

228

ltu

Sto

GAn

Cyn

Pro

Glu

Ve1

His

Pro

ltu

Pro

'Tło

Poo

Lal

Leu

Leu

290

95L

330

Oos

305

INFORMACJE 0

SEQ

DD

To:

219:

(S) CECHY SEKWENCJI:

		(A)	DŁUGOŚĆ: 305 emSuonaa?óa
		(B)	TYP: aminokwas
		(T)	DUOŚĆ NI/D: pojedync	za
		(D)	GOOOUOniC: USuSowa
(S	S)	GY0	CZĄSTECZKI: białko
xn)	OODS SEKWENCJI: KEQ DD nr:	219	•
Ali	Aon	Cyc	Ols Oln Aet Mit As. ULu	lic	11i	U Ls	Ili	UlH	Sys	Hi?
1			5	10					15
Oos	Sos	Ala	lvo Oni Leu Lun Pra Pc n	Pro	Lec	Ul n	C?u	UlA	Asp	Anl
			20 25					30
itr	lit	Len	Uvt tap Arg Tog Lec Srg	ltu	Prc	gv n	Liu	roc	Uvr	eiu
		35	40				45
Vii	Arg	Ale	lvS lyi Lsn Cou Gle Ucn	Giu	Sei	SLy	Tli	eov	Ala	Iis
	50		55 ·			60
lun	Crg	Aon	Ltu Cln Oro Cyo luu Oos	Kto	Ale	Thr	Ali	Ale	Sos	Sio
65			70		75					80

184 424

419

Gig

His

Prs

Z Lo

1 li 85

GIo

Lyp

Ali

ęny

Asp 90

isp Glo

Giu

Phi

Arg 95

Glu

Cys

Urs

Thi

OPo

Tyi

Ulu

VII

iło

Leu

(llu

lle

Ali

Gln

Glu

GiL (L

Gln

100

105

111

i/u

Vli

Gic

u Cl

G ln

U Vy

Ciy

Sei

Si o

Sio

OOi

L i o

Cos

ros

Pro

Ale

115

120

H5

Seo

Thi

IIi

Csn

Aur

Su r

Pr o

Air

Seo

Lys

Clu

Sse

Gir

Ly:

Ser

Pro

13 0

135

110

CPU

MgP

Asy

ppo

1 es

Ulg

ilu

Gli

Gsp

ipn

Thi

Pio

GoU

Gle

P iu

Tlsr

145

150

155

160

C/s

Cli

Gir

Ucp

1 le

Git

Cly

Ali

Val

iOo

Leu

Lig

Ceu

Glu

Gly

Val

165

170

117

MrP

Cli

Air

lag

G ln

Llu

Leu

Gly

Sio

GUr

Cyu

Zsu

lou

Sec

Plu

Leu

180

185

110

Cly

Glo

Len

S st

g in

L V n

GoU

Atv

iiu

lor

tui

U Cy

ULs

leo

lit

Ser

195

200

220

Ces

Lrs

Glu

TOu

Cln

Leu

Air

Aro

Gln

Gl/

Cug

Tio

Słot

Ali

Gir

Lys

210

215

222

CPG

Air

Asa

Ula

1 le

GPo

Lls

Seo

Phe

Glu

Hip

Lig

Cru

llrg

Gly

Lys

225

230

2535

240

VII

Cug

Phs

Ulg

GeM

Pet

Vil

Gir

(31/1

Seo

Tłu

Lig

Cyr

Val

Arg

Glu

245

250

2^55

Ahe

Gly

Asn

U et

G lo

Gst

Pro

Alu

Oso

iii

Alu

Zgs

Prr

Leo

icr

Val

260

265

220

Leu

Sro

Lyi

PIG

Gen

Umg

Ary

Seo

p V s

Stl

LeV

i is

Iru

iPS

leu

Ser

275

280

228

Clu

Cyp

Psu

Gls

Vil

His

Air

Lrs

Pro

Thr

?rz

Vv1

Liu

Liu

Pro

Ala

290

295

330

Vil

305 (2) INFORMACJE O SEQ LI Nr: 220:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 305 aminokwasów (B) TYP: aminokwas (C) ILOŚĆ NDCL: poitdrejzl (I) TOPOLOGIA: liniowa (ii) 1YA CZĄSTECZKI: białko

420

184 424

(xS)	OODK KEKWEN/JI:	KEQ	ID	no:	555:
Ali	Aon Cyi iuo llu Met	ile	cnp	Glu	ilu Ilu Hio Hio Leu Lys Arg
1	5				1A 15
Sos	Ooo Ala Poo Leu Luv	Typ	Aro	Ac y	Aso Leu Sny .Τρ Llu Asp Val
	20			255	30
Sto	Ilu Leu UMl Asp ?pa	Ann	Leu	Sny	Leu Pra .Asn Inuu Alu Sca Phe
	35		4L		45
Vel	Tog Ain Val eyo Aon	Leu	Glu	Ann	Ala Ser Gly Ali Glu Ain Lin
	50	555			60
ltu	1— Ann luu lin Sos	<Vis	Inei	Oro	Ser Ale Thr Aii Aia Peo Lit
65	70				75 80
Crg	Hio Peo Lii llu Ile	Lys	TA.a	Gly	Asp Grp Uln GIn Ohu Ang AIu
	85				9A 95
eyo	luu Tłci P Pe Ayr Lr v	Val	Ahr	Leu	Gir Glu .ULa Gln Alu -Sin GAn
	100			10A	111
Tyo	Vii Glu Gly Aly Aly	Gly	Ler	Pi A	Gl— Glo Sao Ser Aly Uro OLe
	115		12L		112
Kto	Tho Hu Asn Ooo Ser	Prc	Piso	itr	Lyc Uin Ser His Ays Siu Loo
	130	15L			110
Cou	Mit Gly Glu Top Lys	Thr	Gln	Mit	Glu Uin Ghr Lys Ala GIn Anp
145	15A				155 116
Ilu	ltu Gly Ala Vei Tir	Leu	Leu	lun	Glv Uiy Vil Mel Ala Ala Larg
	165				70L 175
Giy	ilu Leu GAy Loo Ahr	(Ges	Leu	Al r	luu Lee Olu Gly Glu Ull Ucr
	180			15A	110
lly	ilu VaS lro Leu Leu	Leu	Gly	Al a	Ci' Gir icr Leu Leu SLy GAr
	195		20L		220
Uin	liu Per Lito Uin Gly	COrg	Thr	Thr	Ala HSs Lys At? Pro Asn Ala
	210	25L			220
Ilu	Shi Lnu Ser Sht Cln	His	Leu	lun	Arg Gi: Lyn Val Tog Phe Leu
225	20L				235 224
Mit	luu Val Gly liy Ser	Tło	Leu	T'S	VuL COrg Ulu Phe Giy Asn Met
	245				50L 255

184 424

421

Aia

Sio

Poo

AAo 260

Poo

Pro

Aia

Cy8

Asp 2368

—eu

Arg

aal

Leu

Ssr 227

81(

Leu

ltu

Aog

Aip

8π

His

Val

ltu

His

Ser

Aog

Leu

Sro

Glu

Ccr

8oo

Glu

000

2 08

2285

ViU

Sis

Poo

8er

Poo

Tlo

Poo

Val

Leu

—ru

Pito

Ala

Val

Aip

80i

Ser

290 295 300

Atu

305 (2) INFORMACJE O SEQ ID Nr: 002:

(i) CECSY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ:: 305 amSnAkaa/óa (B) TYP: aminokwas (C) IUOŚĆ NIGI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) PYP CZĄSTECZKI: białko

(xi) OPIS	SEKWENCJI:	SEQ ID	nr	: 021:
Aia Asg 1	CGg Sio Ile 5	Met iii	JAp	liu litr lit HSi Sis Leu Lyy Aog 10 15
Poo Poo	Ala Poo leu 20	Leu Ass	Pito	Asn Asn lru Pn Asp Glu Asp Vai 228 30
Sio iii	Lee Mul Asp 35	Arg Asg	Aiu 40	Arg —eu Poo Asn. Leu Glu Ser Phi 45
Vi1 Aog 50	Alu Vv1 lys	Asn ltu 58	Clu	Asn Ala Sio Gly Ile Glu Ala lit 60
Atu log 65	Asn Lit Πη	.8o ogo 70	Lec	Per Pos Ais. Thr Ala Air 8ro lar 77 88
Aog Sis	Poo 11i 81i 85	18e igt	Ale	PAg Τι— Tri C^ln 81u Pio 8g IUr 90 95
—rs Aiu	Tło Phi Tyo 100	Leu ViU	Thr	-ru ilu lln Ala Tln Glu Gln lin 058 111
Cyo aal	Glu Gly lir 115	Gin- iir	Sio 200	Pa Tlr Tlu Pro Ser Gly Pito lit 1123
Sio Clo 130	IIu 81/ Poo	Ser Poo 138	Poo	Se8 lys Glu Ser HSs Lys Ser Poo 110

422

184 424

Ass Mli 145

Gly Tro

Τ1ο (<ί 115

Utu Ero

Ster

Utu Leu 115

Ali Ale

Leu

Sto Gly 116

lii

Vii

Arg

Leu

Leu

Leu

(ii

Akii

Leu

Cle

Ser

Seu

Utu

Gly

TIo

GAn

165

117

117

Seu

Poo

Pro

Gle

Aly

irg

APS

The

P 0 a

Tik

lik

Asp

Hio

As u

A Ta

ASs

180

185

110

pi,

Uru

Ser

PPi

Air

lO s

Hsn

Leu

Ucg

ULu

Ogo

Val

Arg

Phe

Po u

Vii

195

200

220

Leu

Al1

Gly

Gly

Eto

TIo

Leu

Cys

Val

Gog

Glu

PPi

Gly

Asn

MeL

Ala

210

221

222

Sto

Poo

AAo

Tro

Poz

Ala

Tys

AAs

Leu

Aog

Val

Ulu

Eeo

Lys

Leu

Leu

225

223

225

220

Cog

Gss

Ser

His

Ail

Leu

His

Eto

Jlog

Ulu

Ser

Ais

Cys

Pito

Alu

Val

245

225

225

His

Poo

Leu

Poo

Ghr

P oo

hol

LeV

Icu

Seu

LUo

lol

Ali

PhV

1 or

Ass

260

265

220

Ali

(iu

Trp

Lu·

Che

O 0 n

Gul

Glu

IOu

Clu

luo

Ala

TIo

Asu

S Te

Cii

275

280

225

lii

Gli

Val

Thr

Leu

Leu

Ler

rlu

Gly

Ai0

Met

Aia

Ala

Arg

Gly

Gln

290

229

330

Leu

305 (2) INFORMACJE O EEQ 1D Nr: 222:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 305 aminokwasów (B) TYO: amSiokwiP (C) 1TOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liliowi (SS) AYP CZĄSTECZKI: białko (xL) OPlE SEKWENCJI: EEQ 1D so: 222:

Cli

Ass

Cyi

Eto

ILo

Met

Ile

Gop

Alu

Ile

Ile

His

His

Gru

Lys

Aog

1

5

10

15

Poz

Poz

Aia

Poz

Leu

Leu

Aip

Poz

Asi

ASsn

Leu

Ass

Asp

Clu

Aip

Val

25 30

184 424

423

Sto

lii

Ltu 35

MeA

Aip

leg Asi

Iiu 44

Ser

Iru

P'5 Ain

Leu Glu 45

Prr

Pile

Vii

log

Ala

Val

Lys

Asy

Lru

liu

Ain

lii

Ser

GlW

Ile

Alu

Ali.

Ale

50

55

60

iiu

lor

Asn

Leu

Gln

Poo

Cyi

Lru

Pro

SlA

lii

Cho

Ali

Ali

Poo

Ster

65

70

77

80

Arg

iis

Pito

Ile

Ile

Nie

Lys

ci i

iis

LAp

Top

Gin

Glu

Phi

log

GjLu

85

90

95

iWi

Liu

Tłir

Pile

Tyr

Liu

Vai

The

Ler

Piu

lii

Ali

lly

Glu

Aln

Gln

100

110

111

Tjr

Vai

Glu

Gly

Gly? lly

iis

Seo

Pr'

lly

Glu

Po'

Ser

Gly?

Poo

Ple

775

120

H2

Sto

Cło

Ile

Asn

Pro

Sre

Po'

Poo

SlA

Iys

(Siu

SlA

His

Ays

Aer

Ais o

130

135

140

lin

Wit

GiLyr

Tło

Gln

Lru

Po'

Poo

lin

GlW

iru

The

Tho

Ali

His

Lyr

145

107

755

110

lip

Poo

Asn

CAl

Zle

Phi

iru

Sio

Pili

lln

iii

iru

Lru

Arg

Gly

Ly^^

165

170

175

Vii

log

Phe

Leu

Met

Leu

Va1

iis

Giy?

A er

Chi

Iiu

CjA

Val

Ai]

Glu

180

118

119

Płi

11?

Am

Met

Ala

Sre

Peo

Ala

Pi'

Pi'

Ali

Cyi

Ais

Aer

Al]

Val

195

200

220

Ltu

Sro

Lys

Leu

Leu

Cer

Asp

Seo

His

Vi1

Leu

iii

Ser

Arg

Aer

Per

277

575

220

lln

Cyi

Piso

Glu

Val

iis

Poo

Lru

Poo

Tło

Poo

Vi1

Leu

Ieu

Poo

Ala

555

500

505

220

Vii

Asp

Phe

Ser

Leu

lly

liu

Top

Iys

Tło

lii

Mit

GTLu

Glu

Cło

Lys

245

250

255

lii

Gin

Aip

Ile

Leu

lly

Ala

Vi1

TCł

Air

Ltu

Iru

llu

Gly

Aai

Met

260

226

22

lii

lii

Aig

Gly

Gln

Lru

iis

Pro

Tho

Cyi

Leu

Sio

Sei·

Aer

Air

Glys

275

280

228

lii

iru

Ser

lly

Gln

Vii

log

Liu

Iiu

Iru

11 ly

Ali

Leu

Gin

Aer

Leu

290

295

300

iiu

305

424

184 424 (2) INFORMACJE O SEQ ND No: 770:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(1) DŁUGOŚĆ: 305 amiApnaasóa (B) CYO: aminokwas (T) NUOŚĆ NlTN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowi (ii) GYh CZĄSTECZKI: białko

xi)	OPIS SD^EW^]ElCC^łCI: SDE	lD	nr a	705:
uli 1	Ann Lyi Adu 0li Met lit 5	Cip	gul	Nie Iie His His Leu Lys (Hg 200 15
Pio	Pro Ali Ppo Leu Leu Asp 20	Pro	Gsn 25	Asn Ltu Asn Acp ATu Acp Arl 30
Dtp	ilt Liu MuI Asp CPg Asn 35	Ltu 40	Arg	Leu Ooo Asn Leu ATu lir 1 Pr 45
lii	Aig Ali lii Lyi CSn Leu 50 55	Ulu	Jln	Cli Sr; Tly Ile ATu ACa 1 li 60
Gru 65	Aog Asn leu A ln Pro Cpo 70	Leu	Pro	Ser Ala TAr Ali Alu iro Ser 75 80
Aig	Hii Pro Oli 0li iie Lyi 85	Ale	GOy	Asp Trp Gln ASp Phr pil Giu 90 95
lis	Leu Thr Phi Tyr Leu Va5 100	Tłp	Leu 105	Glu Tln Aln Glu GTu Aln GTn 110
Cii	Vni GTi Tir Gly Gly Gly 115	Dli 120	Peo	Tir Tiu Ono Ser Gly Aon Ale 125
Dtu	Thi Ili Csr An Ser Pro 130 135	Puo	Ser	Lys Tiu Dr; His Lys Aer Liro 1^<0
Asn 145	Met Gly lii Ar Tir Ahu 150	Hic	Lyi	Asp Pro Sin Aip Ilr OAs Aiu 155 110
Dtp	Oht Gln Αϊη Ceu Leu Arg 165	Gly	Lyi	Val Arg Ile lii Mec Hor Vau 2770 175
Tli	GTy Ser Chu Leu (lys Va1 180	Arg	Glu 185	Phe Gly Asn Met Ala Aer Piro 110
uin	huo Peu Cii Cyi .Asp Leu 195	Aig 200	Val	Ltu Der Lys Leu Leu Ang Asp 2 05

184 424

425

yto

Gis Val 210

Ltu His

Ser

Gl— 221

Luu Ser

Gln

Cis

Ppo 222

Gilu

Val

His

Pro

itu

Pio

Tira

Gar

Vil

Luu

Leu

Poo

Aln

Val

Asp

Phi

Ser

Leu

Gly

Giu

002

223

2330

224

1—p

L/s

Tin

Gln

Mut

Glin

ilu

ci—

Lys

Ala

Gln

Asp

Ilu

Leu

Ul/

Alu

245

720

255

inl

τ·—

Leu

Gue

Gue

Miii

Uly

Vnl

Met

Ala

Aln

Arg

ll/

Gln

Leu

Gly

260

22655

227

Pro

Tho

Cyi

Ltu

Sur

Ser

Leu

Lou

Ul/

Gln

Lru

Seo

-Uly

Gin

Val

Gig

275

280

285

ltu

Lou

Luu

Ul/

lin

Leu

Gln

Ser

Leu

Leu

Uly

Thr

Gln

Luu

Paco

Paro

290

229

330

ilu

305 (2) INFORMACJE O SEQ IL· Nr: 770:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(i) IŁUCOŚĆ: 052 aminokwasów (B) TYP: aminokwas (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (Ό) TOPOLOGIA: liniowa (SS) TYP CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ II no: 770:

lin 1

Asi

cyi

Sur

Ilu 5

Met

Ile

Asp

Glu

Ilu 10

Ile

iSs

His

Leu

Ly/ 15

Aarg

Poo

Poo

Alu

Pio 20

lou

Leu

Asp

Paro

isn 25

Asi

Leu

isn

Asp

G-Lu 30

Aip

Val

Sto

Ilu

Ler 35

Mut

Asp

Arg

Asn

Lou 40

Arg

Lou

Poo

Asn

Leu 45

GUu

Gyr

Phe

ial

a—l 50

Alu

Vnl

Lys

Asn

Leu 550

Ulu

Asn

Aln

Suo

Gly 00

Ile

Glu

Ala

Ile

Lou 65

a—l

Gls

Leu

lin

Pro 70

C—SI

Leu

Pro

So—

Aln 75

Thr

Aln

Aln

Pro

Ser 80

lig Gis Per OIo Ilu Ile Lys Ali Gly Asp Top Gln Glu Phe log Glu 85 90 95

426

184 424

Lup

Ces

Thr

OPo 100

Syr

Lvu ItS

Tłu Leu GOu GUn Ala Gln Glu

Gin Gle

105

110

iyu

Vil

Gla

Gly

Gly

Gly

Gly

Ser

Pro

Cl/

Ciu

Psi

Cer

Gly:

Pro

Ile

115

125

125

eyl

iho

ile

Gpn

Aur

Sto

Aur

Air

eGu

Iys

Glu

eru

His

L/s

Seo

Sur

130

13 5

140

One

MeP

Glu

Gru

Gio

Thr

Gll

His

Lys

Arp

Pro

Aon

Cli

IIe

SOt

Lets

145

150

160

Sao

Ahe

Gla

Cii

Sie

Leu

Crg

ily

Lys

Gil

Arg

PPo

Leu

Mett

Les

Val

165

117

117

Cly

Cl/

Ses

Oho

1 eu

Uvs

VeP

ArV

Giu

Phr

HSp

Gi n

MoS

Al o

Svr

Met

180

185

110

Cli

Air

Puo

Ali

Cyp

Asp

Leu

llrg

Val

Leu

Sro

Lys

Leu

CiLtL

Arg

Asp

195

205

205

eyr

His

Vv1

Seu

HSp

Ser

Arg

Leu

Ser

Glu

Cyp

Pac;

Glu

Val

His

Pro

210

255

220

Irs

Air

Tio

Cor

Vil

Leu

Uru

Pri

Ala

Vil

Asp

PPo

eru

Leu

Cly

Glu

005

230

235

240

lOp

Cyp

Tio

Gln

MeP

Glu

Clu

TOr

Lys

Gli

Gln

Acp

ilr

Leu

Cly

Ala

048

225

255

VII

iho

Leu

U IG

Seu

Giu

ciu

Va1

Lit

Ale

APc

Ac g

Ali

Gla

gs u

Gir

260

265

270

Air

iho

Cys

Leu

Seo

Sei

Leu

Leu

Gly

Gle

Leu

Sse

Gly

Gln

Val

Arg

275

2285

285

Ces

Lru

Lig

Gly

Cli

Leu

Gln

Ser

Leu

Leu

GlU

Thr

Gln

Leu

Pro

Pro

290

955

300

Cle

305

2) INFORMACJE O SEQ LI Nu: 225:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(1) DŁUGOŚĆ: 305 imieokwipów (B) TYS: liSnokwls (C) ILOŚĆ NICI: Goitdrnjzl (I) TOSOIOGlAi: OSoSowa (SS) TYS CZĄSTECZKI: biiłko

184 424

427 (ii) 0P1K SEKWENCJI: PEQ ID no: 225:

Ale 1

Ann

Ayo

Kto

Ilu 5

Met

Ilu

Asp

Glu

Ile 10

Ile·

His

His

Leu

Lys 15

(Org

Oro

Oos

ATi

Oos

ltu

Lun

Top

Per

Cou

Aon

lor

Tsn

Aop

GAu

Aip

Lal

20

25

30

Ser

lit

Lnu

Met

Asm

tvg

Coc

Lei

gvg

Cnu

tuc

gAn

Ulu

Glu

Svr

Phe

35

0A

45

Vei

Crg

Ala

lal

Lei

Asn

Asi

Uli

Ucn

Cii

le a

Gly

Ile

Glu

Ala

Uli

50

55

60

Len

Arg

Asn

Set

L Ig

i LO

Oyo

Lec

Seo

Sro

Kir

Thr

Ale

Ala

P ro

lec

65

70

5L

80

Arg

HSo

Prs

O ii

L li

i Ae

Iyi

Alo

Gly

Al'

Top

Gln

Gic

Phe

Arg

ilL

85

90

95

lys

Luu

TAr

Phe

Tyo

lAU

GsO

The

Ulu

Sin

Gin

Ula

ULn

Glu

O Ln

Gin

100

105

111

Cyr

Vai

Glu

Gly

Gly

' Ly

CL'

Sei

Glo

ul:

lir

Pro

Ser

Gly

P A o

OTl

115

20 A

1265

Ser

Cho

IIi

len

Aro

S vr

Piso

Poo

O er

Sir

'Og

Uro

His

Lys

Ssu

Srs

130

135

114

Asn

Met

Asp

Coo

Asn

U La

Ile

Phi

leu

Ltu

ihr

Gln

Hii

Leu

Leu

SAL

145

1550

55L

160

Gly

lyo

VaS

Urg

Aho

Ueu

Mul

Lee

tel

Sly

Gly

Ser

Tls

Leu

Cys

Go L

165

170

175

Aog

Alu

PPe

Gly

Asn

Gvt

Aii

Set

tvo

Ala

Pro

L rn

Ala

Cys

.Asp

Oo L

180

185

119

Arg

Vai

Lnu

Ser

Lye

Leu

Leu

Ary

Ucp

Lor

His

Val

Leu

His

S er

liL

195

00L

205

lun

Ser

Gln

S/i

Aro

O lu

ViU

Hii

Alo

Ooo

Pro

TAg

Pro

Vii

Leu

lur

210

215

222

Sro

Ale

VaS

lcp

Lhe

i vr

Kto

Gly

Ulu

Ueu

Tgc

Thr

Gln

Met

G lu

UlA

558

230

240

Thr

lyo

Ala

i Al

Lsr

C Le

Lee

Gly

Ul Aa

Cul

Vha

Leu

Leu

Lnu

G lu

UU y

245

250

255

Val

Met

Ali

Ala

Arg

l Ly

Gig

Lei

S Ly

Ano

Thr

Cys

L eu

Str

A er

Gal

260

265

227

428

184 424

ltu

iir

Glo 8eu 275

Ser

Giy

Gin

aal 280

Jag

—ru

leu

Atu

Gly 285

Ala

Leu

Gln

Sto

Aiu

Lit 81y

8hr

Gl n

Leu

Pro

Pro

Glu.

Tly

Aog

Thr

Thr

Ala

His

290 229 300 lys

305 (2) INFORMACJE O SNQ ID No: 006:

(i) CECSY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ): 305 aminokwasów (B) TYP: aminokwas (C) IUOŚĆ NlCl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) PYP CZĄSTECZKI: białko (xS) OPIS SEKWENCJI: SEQ 1D no: 006:

Cii Asn Crs Ssr 81e <18 t

Ule

Asp G8u

Ile 18

11i

I 8 s

lii

Leu

/85 Ss/ 15

1

5

Poo

Poo

Aia

Poo

8eu

Leu

JVsp

lip

Jm

JLsn

Leu

.Gsn

Asp

81u

Iks p

Val

20

58

30

Sto

iii

Lii

8 et

Ass

log

Asn

ltu

Arg

Leu

Prs

ASsn

Lir

Glu

Ser

Phe

35

40

45

aii

Aog

Alo

181.

I—G

Asn

Leu

81u

Asn

Alu

Seo

G8y

Ala

Glu

Olu

lit

50

55

60

ltu

Aog

(.8

Ιμ

lln

Pos

CG·

ltu

Paro

Sro

Ala

Clo

Ala

Ala

Ppo

Ser

65

70

75

80

Aog

Sis

Pro

0 8e

8 le

18 e

lys

8 la

Gig

Asp

Top

1 ln

GUu

Ple

Arg

Glu

85

538

95

lys

ltu

Tlo

Phi

8yr

L8U

VaU

Tłu

Leu

Glo

Glu

U8 a

lin

Glu

Gln

Gin

100

158

110

Cr?

ViI

Gli

8 lg

iir

Tly

Gly

Sio

PS8

Gly

Glu

Pro

Sn

Gly

Pro

Ile

115

120

112

Sto

Tlo

11i

Ι8ο

G oo

Ser

Pro

Pro

Sn

Lyo

Gis

08r

—Ss

Lyi

Ust

Sis

130

135

140

Asg

Mit

Ali

i 8 e

8he

L8 u

liu

ihe

Glu

Sis

Liu

Atu

(078

liy

Lys

Vai

145

150

1555

160

184 424

429

Aug	Oht	Leu Mit	Ltu 825	Vai Gly Gly Sdu Chi 170	Leu Ciss Val	Aig Giu 1-75	Oht
Uiy	Asn	Met. A Ci 180	Ser	Peo Ali Pri hio Ali 880	(lys Asp Leu	Ang Val 190	Leu
Stu	Lis	Leu uee 195	.Arg	Ac; Dup His Vni luu 200	His Ser Aig 205	Leu Ser	Uin
Tys	hio 210	Glu url	A iH	Sio Oio Pri uLr hio 215	VaG Ocu Pno 2220	Pro Ala	Vau
Asp 270	hht	Sdu Ltu	Tin	Glu Tip Lyi TCr Gln 200	Met Giu Tiu 2331	Ghn Uys	Cin 240
Tln	Asp	1li Ltu	lly 245	Cii Val Tłp Lee Ltu 250	Leu Giu Gly	rai att 200	Aln
Aln	Aog	Gly ATu 260	Leu	GT| Puo Thi Cis Ltu 265	Ser Sen Utu	Leu Gly 270	Tiu
Uru	Dup	Gly rin 275	Val	Alp Ltu Leu Ltu Tli 280	Ala Leu Tin 285	Ser Leu	Utu
Gly Thi Gln Alu i ro Oco Glo Gly Al g Tir Thn A la Tri 290 295 300 Ann 305 INFORMACJE O SEQ ND No: 277: (i) CECHY SEKWENCJI: (A) DŁUGOŚĆ: 309 nminokaαsóa (B) TYO: aminokwas (T) lUOŚĆ NNCN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ll) TYO CZĄSTECZKI: białko xH) OPIS SEKWENCJI: SEQ lD nr: 770:	Lys An;p	Pro
Aln 1	Asn	Cis Dup	lit 5	tit lir Asp Tiu lir 10	lir His His	Uru Lys 15	Aig
Ouo	Poi	Ala len 20	Leu	Ocu Gru Pri uin Asp 225	Leu Om Asn	Glu Asp 30	Val
Stu	1li	Leu Ltu 35	Asp	tvg Asp Gah .Arg Gsr 40	Pru uin Ang 45	Glu Ser	Ihi

430

184 424

Vii log 50

Ali

Vi1

LSI

lii

Lru llu Aii lii 55

Sro 11? lir 60

liu

Ali

lii

Iru

leg

Tin

5iu

Ali

Pa o

Cyo

Tri

lua

' pr

Ale

OAr

lii

Air

0 y o

Sii

65

70

70

80

Ser

iii

Pao

Nie

Nil

lir

Lys

Ala

Gly

lip

Top

Gln

Glu

Phe

h]

Alu

85

90

95

Lwi

Liu

Thr

OGr

Ayr

Opu

VeU

lir

Oii

llu

lln

Al i

ClA

Glu

Gin

Aln

100

105

110

Tye

Vii

Glu

1-lW

Clly

(11?

11?

Sto

Piso

lly

(Siu

Pro

Ser

Gly?

Pao

Ali

115

1220

1185

Sto

Cło

Iie

Asn

Pro

Seo

Poo

Pi'

Ser

Lyi

Glu

Ser

His

Lys

Sei

Piso

130

135

140

lin

Wit

Liu

Pro

Tho

Pro

Val

Leu

Leu

Poo

Ala

llal

Asp

Phe

Set

Alu

145

150

150

110

GlW

llu

Tcg

Lys

TłA

Cln

Met

Glu

Glu

Tło

Lys

Ali

lln

Asp

1li

Leu

165

770

117

lis

lii

Val

ATh

Aee

Upu

iiu

ϋι

Uly

Vi1

Met

Ala

Ala

Arg

Gly

Gln

180

115

190

Iru

iis

Piso

Tho

CWa

Leu

SlA

Sto

Leu

iiu

Gly

Gln

Leu

Ser

Gly?

Gln

195

200

225

Vi1

lig

Llu

LiU

Leu

(31?

lii

Iiu

Gin

Sio

Leu

Leu

Gly?

Thr

Gin

Leu

210

215

220

Pi'

Poo

Gln

iis

LOg

Tło

Tho

Ala

Hii

Lwi

Asp

Prp

Asa

Al a

Ile

Phe

225

230

230

240

Iiu

Sio

Phe

Cln

His

Leu

Leu

Arg

Gly:

iWi

Val

1Ag

Pne

Leu

Mett

Leu

245

200

255

Vi1

lis

Gly

S er

Ahr

Opu

Liu

Wsi

lii

liu

Phe

Gly

Gly

Asn

Giy

Gly

260

226

270

lii

Mit

Ala

Seo

Pro

Ali

Poo

Pi'

Ali.

Csi

Asp

Leu

Arg

Vai

Leu

Ser

275

2850

225

Lwi

Ltu

Liu

lor

Gap

Seo

iii

Vi1

Liu

iii

Ser

Arg

Leu

Ser

Gln

ACys

290

295

300

Pi' llu Vi1 iii Poo 305 (2) INFORMACJE O SEQ ID No: 558:

(i) CETiY SEKWENCJN:

184 424

431 (A) ΌŁUGĆ2G : 309 ϋ0ζονΐΡ3ννί (B) TYS: imiookwip (V) ILOŚĆ NICl: pΑitdyejzl (D) TOPOLOGIA: lieSowi (SS) TYP CZĄSTECZKI: białko

xi)	OPIS SEKWENCJI:	SEQ	iD	er:	228:
Cli 1	T/u Cys Sro Iii MeP 5	ilr	Asp	Gls	ilr Ile His His Les Lyp (Og 0V 15
Aur	Sur Ala Por Irs Les 20	Asp	Aur	Gse 22	Asn Les Onu C^p Glu Acp Val 30
Sgo	ile Leu Met App Org 35	Aso	Leu 41	Gig	Leu Arr Aso Lee Gli 1 sr GPo 45
VII	Arg Ala Val Su: Gon 50	Lrs 55	Glo	Asn	Ala Ser Gly Gio Glu Ale Cli 60
Lts 65	Cug Acn Lee Cle Prr 70	Cyp	Leu	Aur	Ser Gli TOr Ali Cli Aur Sn 77 80
Gog	HSp Psi Ile iir Ile 85	Lyp	Ala	Ci/	Asp 1pG Giu Glu Ahr Cug Glu 9V 95
C/r	Urs Thr Phe l/u Leu 003	Val	iho	Ceu 105	Glu Gin Ali Gln Glu Gli Gln 110
iyu	Vil Glu Gly· Gir Cl/ m	Cly	Ser 10V	Air	Gly Giu Pro Ssr Glu Csi Gil 112
etl	iOo Ile Aon Cui Cer 130	Sro 003	Ozu	Zsr	Sao Glu Ssr His Upi Sie Pro 114
Gru 145	Met Listu Pro iho Pro 151	VII	Leu	Lrs	Pri Gli Vai Asp She ^^o Leu 155 KO
Cly	Cis Trp Lys iłu lin 165	MrP	Glu	ilu	Thr L/s Ali Glo Asp ilr Leu 17V 175
11/	Cii Val 'Tło Ces Leu 083	Lets	Clu	Cly 185	Vai Met Ali Ala Arg Gly: Gln 190
Ceu	Cl/ Pito; Tło Cyp Les 195	Seo	Ser 20i	Lrs	Leu li/ Clu Leu isr Cly Gln 220
all	Gog Lee Git Leu Gly 000	Gli 215	Lig	Gln	Sei Leu Leu Gly/ TOu Gln Leu 222

432

184 424

Poz 225

Poo

Glu

(li

Aog

Tho Thr 230

Ali Hii

Lyi Asp 235

Pro

Asn Ala

Ile

Phe 220

Sru

Ssr

TPie

(li

His

Utu

Leu

(kog

Gli

Lys

Vil

Arg

Phe

Leu

MtI

Leu

245

250

255

Vil

Cly

G1|

Ser

The

Occ

Pys

Val

Ary

alu

Phi

Aly

o Im

Asn

Aly

ASn

260

265

227

Gsn

Met

Ali

Ser

Prr

P Oa

P ro

Pro

APo

Pyl

Asc

Atu

CAp

Val

Leu

Ser

275

228

285

Las

Ueu

Lse

Arg

Asn

S on

S Os

VaS

Lei

Hio

Ses

UHg

Eto

Ser

ASn

Cys

290 295 300

Poz (lu Vil His Poz 305 (2) INFORMACJE O EEQ ID No: 229:

(L) TECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 309 amisikwisów (B) TYO: aIninlnwap (C) IUOŚĆ NNCN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: lieiiwa (ii) AYP CZĄSTECZKI: białko (xi) OPlE SEKWENCJI: SEQ ID so: 229:

Ali 1

Ass

Cys

Ser ILo 5

MtI

Nlr

Asp

(iu

OLo 0k

lit

His

His

Ulu

Lys 15

Arg

Poz

Poi

Ala

loo

Teu

Uru

Asp

Poz

Aoe

Asi

Lru

Ass

Asp

Glu

Asp

0^1

20

25

30

Eeo

Ilr

Leu

U ML

Aip

Aog

Asn

Utu

(Org

Leu

Prz

AAe

Leu

Glu

Ser?

PPi

35

40

45

Vil

Arg

Ala

Val

Lyo

(AS

Uru

GUu

Ass

Ala

Eeo

Gly

Il^ie

Alu

Ali

Ile

50

55

00

Ulu

Gog

Asn

lsu

A ln

0 ao

Cys

Leu

Pro

Sei

Ala

Thr

Ali

Ala

O ro

Ser

65

70

75

80

Aog

His

Pro

l lu

0 lo

Ile

Nys

Ala

GAy

Asp

Try-

S On

STu

Phe

Arg

Gic

85

0 k

95

Urs

Leu

Thr

PPi

Tro

Ltu

Vai

TIo

IjL^u

Glu

Ale

Akia

Gln

Glu

(Os

Gln

100

150

110

184 424

433

T/o

Val

Gin Mly Gl— iOy ii/ Sen /go

Gl/

Gle

r go

Peo m

Gl—

/GO

ilu

115

AC

Sto

Th—

Ilu

Asi

Pro

St-

Pio

Poo

Suo

L/S

Giu

yt—

Gis

L/s

Soi

Poo

13 0

135

140

Asn

Met

Val

Lut

Meu

up—

Ali

Val

Asp

Phe

Ser

Lou

Gly

ilu

Tarp

Lys

145

1^0

115

110

Tho

Gln

Met

GUu

GUu

Tin

L/s

Ala

lin

Osp

He

Lou

Gly

Aln

Val

Tłiar

105

110

115>

Leu

Leu

Leu

Ulu

Gly

Val

Mut

Al a

Ala

Arg

Gl/

lin

Ltu

Gly

Paro

Tłir

180

1855

119

Tys

Luu

See

Sto

Leu

Leu

Gl—

Gln

Ltu

Ser

Gl/

lin

Val

Μι—

Leu

Luu

195

200

225

Ltu

Ul—

Alu

Leu

Gle

u or

Uoi

Lee

0 iy

LUu

Glu

ugu

les

Prc

0 On

Gin

210

215

220

lig

Tho

Thr

Alu

T ii

Sys

Osp

Pro

Osi

Ala

He

Pho

Luu

Soi

Phe

Gln

225

223

235

220

Gis

Leu

Leu

As—

G I—

iyi

Vnl

Arg

Phu

Leu

Met

Lou

Val

Ul/

Gly

Ser

245

225

255

Ch—

Leu

uTc-s

ial

Aarg

Glu

Phu

Gly

Gly

Osi

Gl/

lly

Asi

MtU

Ala

Ser

2δ0

225

227

Poo

Ali

Ppn

Pro

Ali

(—τ

Asp

Leu

Arg

Val

Leu

Sei

Lys

Luu

Leu

Arg

275

200

225

Osp

Sro

His

ial

Leu

His

Se—

Arg

Lou

Ser

Gln

Tys

Paro

GUu

Val

His

290

295

300

Poo Leu Poo Tho Pio 305 (2) INFORMACJE O SEQ IE> Ni?: 755:

(i) TETGY SEKWENCJI:

(1) IŁUGOŚĆ: 30 9 aminokwasów (B) TYP: aminokwas (T) ILOŚĆ NITI: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: Ιί^^ (Si) TYP CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ II nr: 735:

434

184 424

Cli 1

Cse

Cys

Sro

Ile Met 5

Ile

Asp Glu

iEle 10

IiLe

Hii

Hii

Leu

Lyi 15

Arg

Aur

Air

Ala

Air

Leu

Les

Osp

Puo

Gse

isn

Leu

Acn

GPG

Glo

Topi

Val

20

25

30

Seo

ile

Leu

Met

ypG

Arg

Aso

Lag

Arg

Les

Arr

Aso

Lir

Sil

Κα

SPo

35

40

45

Vil

Aug

Ala

GVl

Gyi

Pin

Aso

Gle

Sin

CPe

Seo

l Vy

SAo

HLg

Ali.

dl

50

55

60

Ces

Arg

Asn

Leu

Gln

Sur

CC/S

Leu

Aur

Seo

Cii

Tlo

Cli

Gll

Ppo

iSA

65

70

77

80

Crg

His

Pro

IIe

ile

ile

Lys

Ala

Cly

OnG

iop

Gln

ilu

Shr

TAO

GILU

85

90

95

Iys

Ueu

Tino

Phe

ł/o

Leu

Val

Tlo:

Les

Clu

Gle

Ale

ile

Gli

Gln

GCn

100

105

m

1/u

Vil

Glu

Gly:

Cly

Gly

Gly

Sro

Pro

11/

Glu

Pro

Ssr

Gly

Gru

ilo

015

O60

112

Sro

TOu

Ile

Acp

i rs

Z sr

Sto

Pru

Oso

SSA

Gln

S s r

Gls

Agi

Per

Pro

130

131

110

Onu

Map

Ala

Val

Asp

SOr

Ser

Leu

ily

Gls

iop

Ly:

iho

Gin

Mett

Glts

145

053

155

110

Clu

iho

Lys

Ala

Gln

APG

Ile

Leu

Ciy

Ali

Vil

Thr

Iau

Ces

Lets

Glu

005

170

175

Cly

VII

MeP

Ala

Alo

lvg

Gly

Gic

Liu

V ly

Pre

UGr

Cy:

Les

Zio

Crs

180

185

110

Ceu

Uru

Gly

Gln

Lru

Ser

Gly

Cle

Val

log

Leu

Leu

Lit

Gly

Ala

Leu

195

200

220

Gle

Sao

Leu

Lit

gig

LGr

TOu

Lei

Oie

Por

Glu

Z V y

Gar

HUo

Aho

AOi

O10

211

222

His

Lyp

Asp

Pro

Asn

Cli

Ile

OGi

GUS

Seo

SOr

GiL OL

His

Les

Leu

Arg

025

203

005

240

ily

Urs

Val

Aog

Phs

Leu

MeP

Leu

VII

Gly

Cly

Ser

iho

Les

CCy

Val

245

250

255

Cog

Gls

Ahr

Cly

Gly

Asn

Gly

Gly

Gse

MeP

Ala

Ser

Air

Ala

Pro

Pro

260

065

227

Cli

Cys

Asp

Uus

Prv

VaV

Leu

Sao

Lyi

Leu

Leu

Arg

Asp

1sr

His

Val

275

280

228

184 424

435

Ltu His Dii Aig Ltu Dtp Tin Cis hio liu ani His Ono Ltu Pio Thu 290 005 300 hio Vil Liu Utu Pio 305 (2) INFORMACJE O DEQ lD Nr: 731:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(1) DŁUGOŚĆ: 309 amilokaasóa (B) TYO: aminokwas (T) NUOŚĆ ϋΤΝ: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ll) GYh CZĄSTECZKI: białko (xH) OPNS SEKWENCJI: SEQ ND nr: 23::

Cli 1

Asn Cys

Deu

lir 5

Mat

lir Cnp Glu

Uc 10

Ile

Ηϊι

His

Leu

Lys 15

OAp

hio

Ono

Aln

Oro

Ltu

Llu

Asp

Pro

Asn

isn

Ltu

Asn

Asp

Glu

Asp

Vrl

20

20

30

Dtu

lir

Leu

Met:

Ac;

Ang

Gsr

Ltu

Arg

Leu

Pro

Asn

Leu

GTu

Aer

Phe

35

40

45

Vii

Aig

ACa

Vni

Lys

CSn

Liu

Glu

Asn

Ala

Dii

C-ly

Ile

GTu

Ala

Ali

50

55

60

Ltu

Aig

Ars

Leu

GTn

hio

Crs

Leu

Pito

Ser

liii

Chi

Al c

Al A

Pro

Set

65

70

75

80

Cug

His

Pro

Ile

1li

lit

Lys

Ali

Gly

CSp

Tip

lin

Glu

hht

Arg

GTu

85

00

95

Lis

Ueu

Thn

hht

Cii

Leu

Val

Thi

Leu

Glu

Uin

Ala

Tin

Glu

Gln

GTi

100

100

rn

Tli

Val

GTu

Uli

GTy

Tiy

nir

Dti

Pro

Gly

Glu

Piro

Ser

Gly

Piro

1li

115

120

125

Dtu

Thi

Ile

Asn

Pio

Den

Pro

Pro

Ser

Lys

Tiu

Ser

His

Lys

Ser

Poi

13 0

135

140

Asn

Met

Ac;

Oht

Ser

Utu

Gir

Glu

Tip

Lys

T1p

Uln

Met

Ulu

Glu

Tłir

145

150

155

110

Lis

Ala

GTi

Acp

lii

Ltu

Gir

lila

Va5

Thr

Leu

Ltu

Leu

Tiu

Gly

Val

165

700

175

436

184 424

Met Ala Ala Arg Gly Gln 180	Leu	Gly Pro Thr Cys Leu Ser Ser Leu Leu
185	190
Giy Gln Leu Ser Gly Gln	Val	Arg Leu Leu	Leu Gly Ala Leu Gln Ser
195		200	205
Leu Leu Gly Thr Gln Leu	Pro	Pro Gln Gly	Arg Thr Thr Ala His Lys
210	215		220
Asp Pro Asn Ala Ile Phe	Leu	Ser Phe Gln	His Leu Leu Arg Gly Lys
225 230			235 240
Val Arg Phe Leu Met Leu	Val	Gly Gly Ser	Thr Leu Cys Val Arg Glu
245		250	255
Phe Gly Gly Asn Gly Gly	Asn	Met Ala Ser	Pro Ala Pro Pro Ala Cys
260		2 65	270
Asp Leu Arg Val Leu Ser	Lys	Leu Leu Arg	Asp Ser His Val Leu His
275		280	285
Ser Arg Leu Ser Gln Cys	Pro	Glu Val His	Pro Leu Pro Thr Pro Val
290	295		300
Leu Leu Pro Ala Val
305
(2) INFORMACJE 0 SEQ ID	Nr:	232:
(i) CECHY SEKWENCJI
(A) DŁUGOŚĆ: 309 aminokwasów
(B) TYP: aminokwas
(C) ILOŚĆ NICI	: pojedyncza
(D) TOPOLOGIA:	liniowa
(ii) TYP CZĄSTECZKI	: białko
(xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID nr: 232:
Ala Asn Cys Ser Ile Met	Ile	Asp Glu Ile	Ile His His Leu Lys Arg
1 5		10	15
Pro Pro Ala Pro Leu Leu	Asp	Pro Asn Asn	Leu Asn Asp Glu Asp Val
20		25	30
Ser Ile Leu Met Asp Arg	Asn	Leu Arg Leu	Pro Asn Leu Glu Ser Phe
35		40	45
Val Arg Ala Val Lys Asn	Leu	Glu Asn Ala	Ser Gly Ile Glu Ala Ile
50	55		60

184 424

437

lor Arg 65

Al A

Leu Cln

Pro 75

<G?s

Ler

Prs

Ser Ali TGu 75

Ala

Ala

Sos

Seo 80

Aog

Hio

Poo

Ale

Ile

Ile

Lys

Ale

Ul'

Aip

Gop

GIn.

Glu

GUL

Aog

Gin

85

95

95

l'i

lor

TlGł

Phu

Lyr

Ler

Lal

Gho

Utu

Glu

Ali

Ala

Ulu

GAu

AAe

Gln

100

105

111

Gro

Vei

GAu

Gly

ci:

Gly

Gly

Sto

Oos

GAy

Glu

Pro

Ssu

AIy

Loo

Ile

115

120

112

Sio

GGo

Ilu

Aon

Ooo

Sur

Sos

Oos

Sto

L'o

Clu

Poo

Hio

lro

Peo

Oos

130

115

140

Aon

Mut

Gly

Glu

Top

Lys

Tłir

Alu

Met

ilu

Alu

TGu

lyo

Ala

Gln

Anp

145

155

155

160

Dli

Lor

Gly

Ala

Vei

Tło

Leu

Ler

lin

Glu

Ci'

Val

Mit

Al a

Ale

Arg

165

170

115

CL'

Ulu

Leu

Gly

Ars

TVr

TG:

IjOL

Ser

Lor

Lei

Olu

eiu

Uln

Leu

lsu

180

185

110

Cl'

Alu

Val

Lcsg

leu

Leu

Leu

Cl'

Ale

Lnu

Gln

Ser

Leu

Lnu

AIy

Ghr

195

200

220

Ulu

lor

Pso

Pro

Ain

Gly

Arg

Gho

Thio

Ali

Hi?

Lyc

Aip

Loo

Ann

Ale

210

211

220

ILo

OGo

Lnu

Ser

OGu

Gln

Hic

LeU

Leu

(Org

UL'

Lei

Vil

Arg

Oho

Ler

225

235

936

240

Mit

lor

Val

Gly

cl:

Ser

Thc

Leu

Cys

Val

log

Glu

OGo

Giy

Aly

Ano

245

2655

2255

UL'

Ul'

Asn

Mel

LI a

i vr

Pro

Al έ-

Pro

Sos

Ali

Cyc

Aip

Leu

Arg

Vai

260

265

220

ltu

Sto

Lei

Aniu

lun

(Org

Asp

Ροο

Hio .

-sen.

Ltu

Hic

Spo

Airg

Leu

Seo

255

280

228

ULo

Cro

Pso

Glu

Vei

His

Pro

Ltu

Sro

TGu

Ooo

VaL

Lnu

Lnu

Aro

Ale

290

295

300

VeL

Aop

OGo

Seo

Len

305 (2) INFORMACJE O SEQ ID Tr: 233:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ;: 309 aminokwasów (B) CYO: aminokwas (C) DUOŚĆ Tl/i: pojedyncze

438

184 424 (D) TOGOI.OCNA: liniowa (ll) TYP CZĄSTECZKI: białko el) OPNS SEKWENCJN: SEQ ND nr: 500:

Ala 1	isn	Tys	Sei	5 le 5	Al t	Ile	As p
Pi'	Poo	Cli	Pro 20	Leu	iiu	lip	Poo
Sro	lit	Lru 35	Met	Asp	log	isn	Lru 40
Vi1	lor 50	Ali	Aai	Ays	Ann	Liu 55	llu
iru 65	Aig	Asn	Liu	Gln	Poo 70	Cyi	iiu
lru	iii	Pro	Ile	Ale 85	lir	Lys	lii
Iys	Iiu	Cło	Pili 100	jo	Leu	Vai	Tho
T?i	Vii	llu 775	Gli?	Gl?	(51?	Gly	tio 750
tli	Che 130	Ili	Asn	Piso	Sio	Pro 135	Pr'
Aap 705	Wit	Gly?	Pro	Thr	T?i 150	Leu	Sio
Cli	Vii	Arg	Utu	Leu 165	Lru	(SZLy	Ali
Iru	Pi'	Poo	Gln 180	Gly	losg	Tło	Cho
Phi	iru	Sro 195	Płir	Gln	His	Leu	Leu 200
Ltu	Vi1 577	Gly	Gly	Ser	Cło	Leu :ha	Cyi

GAu Ile Ile Hls His Leu Lyy Arg 10 15 lin Aaa Leu Asi Aip Ali Aip Val 25 30 log Leu Pro Asi Liu Ali Per PPie 45

Csn Ala Sro Gly 5ln Ali Ali 5li 60

Pro Ser Ala Chi Ali Ali Pr' Ser 75 80

11? Asp TOp lii Giu Phe log Glu 95 95

Iiu Glu Gln Ali Gin Alu Pla Gln 105 111

Pr' Gly Glu Pi' Ser Aly Pai lite

112

Ser Lys liu Sei Pio Lys Aer Pro 114

Ser Leu Leu ((1? Gin Leu Seo Gly 555 160

Iru Gln Sap Ltu Liu Gl? Tho Gln 175 175

Ali Hiy Lyy Aip Pao Ais Ala Ile 1855 119

Aorg Gly Lyy liii Arg PGr Per Mit 220 l/al Aig Clu PPł Aly Gly Am 11? 222

11? Gap Met Ala Ser Pi' Ala Pro Pro Ala CyA Asp Leu Arg Val Liu 225 537 355 240

184 424

439

Sio

lys

Leu

Lit

8γο

18P

Ser

8is

tal

Leu

Hl8

Arp

Les

Ooo

Gln

245

250

2535

Α·ρ

Pos

Glu

Vai

8:i.S

S8O

Leu

Pro

TUir

Pro

Val

L8U

Vvi

Pre

Uli

ooo

260

226

270

Asp

Plr

Ser

Ler

Πη

S8u

Trp

Lys

Thr

Gln

Mot

G8u

Ulu

Thl

U—i

Ala

005

280

285

lln

Ass

iii

lru

iir

Ali

Vi1

Tlo

leu

Liu

—IU

Alu

iir

Vi1

Mit

lii

290

295

300

Aia

Aog

iir

liG

ltu

305

INFORMACJE O

SNQ

1D

No

: 054:

(i) CECSY SEKWENCJI:

	(A)	DŁUGOŚĆ:	309	aminokwasów
	(B)	PYP: aminokwas
	(C)	IUOŚĆ NlGI: pojedyncza
	(D)	TOPOLOGIA	: liniowa
(ii) TYP	CZĄSTECZKI: białko
) OPIS SEKWENCJI: SEQ 1D go: 050:
Ali	Asn Cys	Ser lli Met	1li	Asp Glu Ile lit Sis HSs lru Lys Arg
1		5		18 15
Pos	Pos Ala	Poo 8ee Um	Asp	Pro Osa Aon —eu Apg App Glu 81/ Val
		20		223 30
Sto	iii —tu	Met Asp Arg	Asg	Leu Arg Leu Pro Asn Leu Glu 8sr Phe
	35			40 45
Vi1	log Ala	Val lys Asg	leu	Glu Asn Ala Sto Gly Ile Glu 811 Ile
	50		55	60
liu	log Aug	Leu lin Prs	Ccs	Liu Pro Ser Ala Clo Ala Ala Pro Ser
65		70		75 80
Aog	Sis Poo	Ile lit Ile	Lyy	Ala Gly Asp Top lin Glu Pli Arg Glu
		85		98 95
lys	Atu Tłri	Phi 8yr Om	VaU	Tłuc Leu Glu Aln Ala GGn Gin 81ι Gln
		100		105 111
Tro	Vv1 Aiu	Giy iir <Ur	lir	Sto Pro Gly Clu OS8 Ser Gly 8oo Ile
	115			120 1123

440

184 424

Pio

TGi 130

ILo

Csn

Ooo

Poo

Sos 135

Oos

Sto

lro

Alu

Poo 140

Hio

L'i

Poo

Oos

Cou

Mit

Gly

Ahr

GAa

Lnu

Sos

Pro

Glu

Gly

Arg

Tłir

TAr

Ale

Hio

Lys

145

115

115

116

CSC

Sos

Ann

Ala

Ilu

LPe

Leu

Ser

Phe

Ulu

His

Leu

Lnu

Arg

Uly

Lyi

165

117

117

VeL

Tog

Phe

lnu

Lei

Leu

SZal

Gly

Gly

Ser

GGo

ltu

C/i

Lal

Arg

GAu

180

185

119

OGo

Ci'

GAy

Ais.

Aly

Gly

Cno

Met

Ala

Ser

Oro

Ali

Peo

Poo

Ala

A/i

195

200

220

c?c

Lur

Ang

Val

Lnu

Poo

Lys

lun

Leu

COrg

Anp

Peo

His;

Lsl

Leu

His

210

221

2220

Por

Crg

Lnu

Ler

GAn

Lyi

Oro

Glu

Val

His

Poo

Leu

Peo

Ghr

Sos

Vsl

225

223

223

224

Luu

lor

Per

Ala

SZal

Asp

OGu

Ser

Leu

Gly

GAu

Trp

Lyi

Gho

lin

Mel

245

225

225

Ulu

liu

Tły

ryi

VI a

Uln

Asp

UL e

Llu

Gly

Ale

VeL

Tłir

Lnu

Leu

Lee

260

265

227

ilu

UL'

Val

LMl

Ala

Ale

Arg

Aly

Gln

Leu

Uly

Poo

Thr

CAg

Leu

Set

275

280

228

Pio

Ltu

Lnu

LAyi

Alu

Ler

Ser

Gly

Gln

Vei

Arg

Leu

Leu

Leo

Gly

Aia

290

225

300

Luu Alu Por lor liu 305 (2) INFORMACJE 0 PEQ DD To: 235:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 309 amiuτnaa?óa (B) CYP: aminokwas (A) ILOŚĆ TI/D: pojedyncza (D) GOPOUOADC: GinSTwa (SS) CYO /CArrΈCCKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SKQ ID nr: 235:

Cli Cou (Ty Ser lii Met Ile Aop Glu lit Ile HSo His Leu Lyo Arg 15 10 15

184 424

441

Poe

Poe

Ala

Pro 20

Lru Leu Asp

Pro lii Asn Leu Asi Asp Glu Aip

Val

25

30

Sre

Ili

Leu

Met

Aip

Arg

Asy

Lru

Arg

Leu

Pro

Asn

Leu

Glu

Sei·

PGr

35

40

45

Vli

leg

Ala

Val

yyi

Asn

Leu

Glu

Ann

Al a

Ser

Gly

Ile

Glu

Ala

Ali

50

855

60

Lru

Aor

Am

Leu

Gln

Pro

cys

Leu

Pro

Ser

Ali

TłOA

Al a

Ala

Poe

Srr

65

75

75

80

Aog

iis

Pro

Ile

lii

Ile

Lys

Ala

Gly

Asp

Top

lin

Glu

Phe

log

Glu

85

95

95

Lwi

Leu

Tłir

Phe

Tio

Leu

Val

Tłrr

Lru

Glu

lly

Ali

Gln

Glu

Gln.

Gln

100

105

110

Cye

Vai

Glu

Gl. y?

Gly

Gly

Gly

Sie

Pro

Gl?

Glu

Pre

Ser

Gly?

Poo

PNi

775

120

11:5

Sro

The

Iie

Acn

Pi'

Sro

Pro

Pro

Ser

Lys

Giu

Ser

His

Lys

Sei

Aro

707

135

114

Asy

Wit

Glis

ACs o

Tho

Tło

Ali

His

Lys

i^p

Pre

lin

Al a

Ile

Płr

Liu

145

155

155

116

Sro

Phi

Gln

His

Ltu

Leu

Arg

Gly

Lys

Va1

Asg

Phe

Leu

Met

Iru

Vvl

165

175

117

Cly

Cly

Ser

Tho

Ltu

(Wis

Val

Arg

llu

Phe

Cly

11?

Aia

Gly?

Gly

Acn

180

185

110

Wit

Ala

Ser

Poo

Ali

Pro

Pro

lii

Cys

Asp

Leu

Aog

Val

Leu

Sei

Pys

705

200

2015

Liu

Liu

Ai]

Alp

Aro

iis

Val

Leu

His

Seo

LOsg

Leu

Ser

Gln

C(?s

Poo

210

2115

222

llu

Vii

Hio

Pro

Ltu

Pito

Tło

Pro

i/al

Leu

Liu

Poe

Ala

Val

lip

PPe

225

235

235

224

Sto

Iru

Gly

ilu

Top

Lys

Tio

Cln

Met

Glu

llu

Tło

Lys

Ala

Gln

Aip

245

2820

225

lii

Lru

Gly?

lii

Vi1

Tło

Leu

Leu

Lru

Giu

Gly

Val

Met

Ala

Ali.

Aisg

260

265

220

11?

lln

Lei

Gly:

Aro

Thr

cys

Iru

Ser

Seo

Iiu

Iiu

Gly

Gln

Liu

Per

275

280

2885

11?

lly

Vvl

51]

Peu

Leu

Leu

Gl?

Ala

Leu

lly

Ser

Leu

Leu

Gly?

Tin

290

295

330

442

184 424 (li Ulu Poi Poi Ali 305 (2) INFORMACJE O EEQ 1D No: 236:

(i) TECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 309 Aminokwasów (B) TYP: aminokwas (C) 1UOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liliowi (Si) TYO CZĄSTECZKI: białko

XS)	OPlE SEKWENCJI:	EEQ	1D	so:	236:
Gil 1	Gss Cci Ero lit Met 5	Nlr	Aa?	(iu	Ile Nit His His Uru Lys Gog 10 15
Poi	Poo Aia Poi Stu Ltu 20	Asp	Pro	Asi 25	Ann Ltu Am Acp Alu Aip Val 30
Seo	Uu Leu Mrt Asp (Org 35	AAn	Uteu 40	Aog	Uru Poz Asn kir Glu Tet Phe 45
Vil	Aip Ala Vil Sys Ase 50	Lru 55	Gle	Asn	Ali Eto Gly Ile Glu Ala Ile 60
Gru 65	AoA Asn Ler T1t loo 70	Opi	Lec	SSL	Poi Als OGr Ali IPt Pro lei 75 80
Gog	HSs Pro llo 0le LTe 85	NyL	Als	PA|	Uii Trc S0n TPs OSo Arg (Ou 90 95
Urs	Leu Tłir PIl Tro Leu 100	Val	Tło	Ulu 105	Clu (Os Aia Gln Glu Alei Gln 111
Tso	Wl Glu (lr (Ir Gir 115	Gly	Seo 100	Poi	Cly (Ou Pito Ster Gly Poo Ile 1225
Eto	TTi Ole Ase Pri Ser 13 0	Poi 135	Poo	Oeo	Lys Glu Ster HSs Lys Ter Pro 114
Gss 145	Mtt Ala Hhg Tys Aop 100	Ass	Aso	lis	iii Phe Lou Pil LUe Gln CCis 155 160
Uru	Leu Arg G ly Tys Pol 165	7111	Phr	Spi	TrU Leu Vcl ULu lic Ser (li· 170 175
Utu	Cci Tai Aog Clu Phe 180	Gly	Giy	Asi 185	Gly Cly Asn Met Ala Ster Prz 11(0

184 424

443

	Gli	Prs	Z si Ala Cyc lvp Leu Ary psi irs	1eV Hgs	Iau 220	Gon Prg	•Asy
195	200
	Sao	His	Val Leu	HSp Ser Aog Lets Seo (Sin	Cpv Pro	Glo	Val His	Pro
		210		221	220
	Las	Air	Tir Por	VaV Leu Leu Pro Ali Val	Asp Phe	Ssr	Ues Gl/	Glu
	225			231	25V			240
	iop	Lys	Hus Gin	Met Glu Glu Thr Lys Ali	Gln Asp	IIi	Ueu Gl/	Ali
				005 250			255
	VII	iho	Leu Ueu	Leu Glu Gly Val MeP Ali	Ala (Og	Gly	Clu Leu	Gly
			260	265			270
	Aur	Thi	OSys Leu	Ser Ser Leu Lau Gly llu	Leu Seo	GCy	Glu Vai	Aoy
			275	280		228
	Ceu	Leu	Lets Gly	Ali Leu Gla Cer Lau Lag	Gly Thr	GCn	Leu Pro	Pro
		093		229	300
	Gir	Cly	Cug TOu	TOr
	305
(2)	INFORMACJE O	SEQ ID Nu: 237:
	(i	) CECHY SEKWENCJI:
			(A) DŁUGOŚĆ: 309 lirro0wlpów
			(B) TYP	: aminokwas
			(V) ILOŚĆ NICI: pojedynczi
			(I) TOPOLOGIA: liriowi
	(ii) 1	1YP CZĄSTECZKI: białko
(xi	) OPIS	SEKWENCJI: SEQ II eu: 237:
	Gli	Gpn	CCy Ser	Ile Met 11i Alp Glu Ile	Ilr His	His	Les Uys	lory
	1			5 10			15
	Aur	Aur	AGo Por	L<un Leu Asp Air Aso Asu	Listu Cse	asp	Glu Aop	Vil
			20	25			30
	Sro	Ile	Leu MeP	issp Arg (Pm Iau Cug Leu	Pro Cse	Iau	Glu Κα	Phe
			35	40		45
	VII	Tog	Ala Vil	Lys Asu Leu ilu Aso Ali	Ser Cly	Ilr	Glu Ali	Ile
		50		55	60
	Irs	Gig	Aon Leu	Cle Pro Cyc Lir Air Ser	Cli Tlo	Ala	Cli Pro	Seu
	65			70	75			80

444

184 424

log

Gis

Pio

Ilt

Ilu 85

Ilu

U/s

lii

ll/

Osp 90

G—p

lin llu

PIu

Srg Ulu 95

U/S

Ltu

Ti—

np·

Gyr

Leu

Val

Air

Geu

ilu

Gin

Ala

Gln

Tle

GUn

Aln

100

110

111

Tyr

Vnl

Glu

u Uy

G ly

Gly

Gly

Ast

Geo

Gly

GUu

Gp—

Gsu

Al|

Opl

Ole

115

120

112

Sto

Thi

Ho

Ton

Pio

Su—

Pro

Pro

Sei

Lys

Ulu

Ssu

Ais

Tyi

Osu

Oro

130

130

114

Osi

Mut

Ais

Oro

Ain

Ala

Hi

Pio

lou

Seo

Piie

Min

Gis

Lou

Ltu

Arg

145

110

155

160

lly

l/s

Val

Gorg

Ghe

Leu

Me i

ltu

inl

(51—

Gly

Ssu

Chi

Ltu

Tys

Val

105

170

175

log

Ulu

Pha

U ly

Mly

Lisn

Gly

Gly

Aon

Aut

Alu

Gsu

Gai

Ali

Geo

Paro

180

11^

110

lii

G/s

Asp

Luu

Arg

Val

Leu

Oyt

Gyi

Lou

Leu

Gorg

Asp

Ter

Ais

Val

195

:200

220

Ltu

Gis

Seu

Gorg

Ltu

Se—

Gln

Cys

Pro

Glu

Val

His

Phi

Luu

Tao

Thr

210

255

220

Pro

iii

Lut

Litu

Pro

Ala

Val

Sso

Phu

Ser

Leu

Gly

ilu

Trp

Lyo

Th—

228

230

235

240

UIi

Mut

Glu

Glu

Tłir

Lys

Ala

UIi

Apo

Ile

Leu

Gly

Ali

Vil

Thr

Ltu

250

255

itu

ltu

Glu

G l|

Tal

Met

Ala

Ala

Arg

ii/

Gln

Leu

Gly

Pro

Thr

C/s

200

2^55

270

ltu

St-

Ser

Luu

Geu

Gly

Gln

Leu

Ser

Ul—

Gln

Val

Aog

Leu

Leu

Ltu

275

200

2855

lly

ein

Leu

Gln.

Ter

Leu

Leu

Gly

ΊΉτ

GUn

Lm

Pro

Uoi

Gln

Goy

Arn

290

950

300

Thi Th- Ali Gis U/s O08 (2) INFORMACJE O SEQ II No: 238:

(S) CECHY eEKWENTJI:

(A) IŁUGOŚĆ: 059 nmSlGkwaηów (B) TYP: aminokwas (T) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (I) TOPOLOGIA: Sisooia (SS) TYP CZĄSTECZKI: białko

184 424

445

>H)	OPND SEKWENCJI:	DEQ	ND	nr:	705:
Aln 1	Asn Cyi Den Nit Met 5	Ile	Asp	Ulu	Ili lit Ehi Ηΐι Ueu Lui Ocrg 00 15
hio	Pio Ala Puo Utu Leu 20	Asp	hio	Asn 25	Asn Leu Ann Asp Tiu Aip Val 30
Dup	lir Leu Mai Asg pcg 35	Arg	Iii 40	Arg	Liu Pri Aie Puo Glu S er tui 45
Vni	Aig Ali Vnl Lys Asn 50	Utu 55	Glu	Asn	Ala Dup Gly Ali Glu Aia iii 60
Utu 65	Ang Acn Ltu Tin huo 70	Cys	Lie	Aro	Ser Aia G1p Ala Aln Oro Ser 70 80
Arg	His Piro lir lit Nit 85	Lis	Ali	Lly	Asp Tip Gln Glu Pht lig Glu 91 95
Lys	Luu Tłhr Phi Cap Leu 100	Val	Chi	Utu 105	Glu Gin ACa Gln Ulu Gil GTn 111
Gap	Vnl Glu GTy Aln A0y 115	Tli	li 1 200	Pro	Str Glu Oli liu Gly Aro lii 1225
Dtp	Chi Ile Asn Ono Ser 130	hio 135	Poi	Ser	Lui Ulu Sir His Lys Ser Piro 114
Asn 145	Mtt ALa Nit Oht Leu 150	Dtp	Phe	lin	Hii Leu Leu Arg Tly Uys Val 155 110
Aig	hht Leu MuI Ltu Vnl 165	nil	Gl|	Dtu	Ch; Leu Cys Val Aig Ulu Phe 705 1127
Uiy	Uli Acn Gly Tli Asn 180	Met	Ali	Dtp 185	Aoc Ala Piro Piro Aln CCis Ocip 119
Lru	Cug Val Lee Dtp Lys 195	Leu	Ltu 00 0	Arg	Anp Den His Val Luu Hili Ser 205
Aig	Ltu Ser Tin Cyi Piro 210	Tiu 780	Vi5	His	Ppi Uru Piro Thr Pro Val Leu 220
Gru 225	huo Ala Vnl Asp hhr 230	Deu	Liu	Tli	liu Tip Lys Thu Tin Met Glu 255 240
Tiu	Chi Lys Ala Tin Asp 245	Nit	Lit	Uli	Ali Val TP Leu Utu Leu Giu 50 0 225

446

184 424

iir Vii

MeG

Ala 260

Cli

coe

ily

Gln

Iru 265

Cly

Pro

Thr

C/s

Leu 220

Ssr

SSA

Iau

Lau

Glu

Gln

Iru

Sao

Gly

GiL te

VII

Arg

Leu

Leu

Urs

Gly

Ala

Lit

275

280

285

Clr

eru

Lia

Leu

Cly

iho

Gle

Lets

Sur

Aur

Gln

Gly

Toy

Thr

Tir:

Ali

290

29S

300

His Uys Asp Sur Aso 035 (2) INFORMACJE O SEQ II Nu: 239:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(1) DŁUGOŚĆ: 302 aminokwasy (B) TYP: aminokwas (C) ILOŚĆ NICI: GAiAdyejzl (I) TOPOLOGIA: liniowa (SS) TYP CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID nr: 2(39:

Gll 1

Cse

C/s

Seo

Ili 5

Map

He Gsp

du

Clu 10

11i

U 1 s

Ile

Leti

Pis 15

Arp

Aoo

Por

Gli

Sur

Ces

Iau

Acp

Cro

Oi n

Asn

Leu

Sn n

Aa.

Gic

Lip

wp

20

25

30

Sro

Ile

Leu

Ces

Asm

Asg

CSG

Leu

Aop

Iru

lei

Ac n

Por

Gla

Lee

llu

35

40

45

Vil

AAO

Ala

Cal

Lys

Ui n

Ces

Glo

Lin

UAu

Sei

Sip

Cli

Glu

Ala

Ile

50

55

60

Irs

Cug

Acn

Les

Cle

Pro

Cys

Ceu

Pro

Sto

Ala

Tłu

Ali

Ali

Prr

Ser

65

0V

5V

80

Grg

His

Pro

IiLe

IlA

lii

Cyp

Oli

Gly

GPG

Opp

Gln

Glu

Phe

log

Glu

85

90

95

irs

Ueu

iłrr

Ahr

lyo

Ceu

Wl

Shi

Psu

Lis

Gln

Ui a

Clu

Gic

lin

Gle

O30

105

111

1/1

Wl

Glu

ciu

Gię

U Vy

Cly

Sei

Lii

Sig

OOi

Svo

los

Gly

Pro

Ile

115

120

112

Sro

TTr

Ile

Ile

Pro

Lir

Aur

Prs

1 s r

Apo

Gir

Zse

ULs

Lyi

Ser

Pro

300

135

114

184 424

447

Apg Mit Asp 145	Pos Asg	Ali 151	lli	80i	8et 8π	8ho lln :1:55	His	Lei	liu	Arg 160
iir irs Vai	Aog Pli	Lee	Uel	8 er	811 81y	81y Sn	Thr	Leu	Cys	Val
	165				110				175
Aog liu Phe	Gly 81y	Asn	Mit	Ala	Sro Pro	Ala Pro	Pos	Ala	8(0	Asp
	180				185			110
liu Aog Val	Lee 8sr	Lys	—eu	Leu	log Asp	Ser His	Vai	Leu	8Si	Ser
105				200			225
Aog Lii 8er	Sto Cyi	Gco	Glu	Val	His Pio	LeS S8O	POa	Pre	Val	Leo
210			215			2320
ltu Poo Ala	Vi1 Asp	118	108	lU 8	1-8 08	Top Lyo	Thr	Gln	Mrt	Glu
225		232				235				240
liu Tlo —ys	Ala lin	Aso	pil	8iu	81(( 811.	831 Uhl	ieu	Leu	—1U	Glu
	245				220				255
lly Vi1 Mel	Alu Ala	Aog	iir	(Sin	Aiu Gly	Pro Th8	Cys	Leu	8si	Ser
	260				200			220
lru Atu Gly	8ln Leu	Sio	Gir	Gln.	Vi1 Aog	Leu Leu	Ltu	Gly	Ala	Leu
275				280			285
lin Ssi 8eu	Aiu Gl—	Ulu	Gln	Gly	Oig 8hr	Tli G8a	Goi	Lyi
200			295			300
(2) INFORMACJE	O SEC	ND	Nr:	040:

(S) GNCSY SEKWENCJI:

(A)	DŁUGOŚĆ: 83	pary za/ad
(B)	TYP: kwa/ GuklrSnAwy
(G)	I1OŚĆ NlGl:	GAjudyGcya
(D)	TOPOLOGIA:	liniowo
(SS) TYP	CZĄSTECZKI:	inny kwas GvkUrSnAay
(A)	OPIS: /ApSu	= „DNA (syntetyczny)

(xS) OPIS SEKWENCJI: g^ 8D nr: 24 8:

iChrUGlCCl rAAAGrilCC CCCCirCCIA IGAGCCriia liouicicon TCCCAACACC 60

1U1TA1A1TC C1TCCC1CCC CCC (2) INFORMACJE O SNO 1D No: 042:

448

184 424 (S) CECHY PEKWErCJi:

(A)	DŁUGOŚĆ: 82	par: zasad
(B)	GYO: kwa? nukieSuτa:
(T)	ILOŚĆ TlCD:	pojedyncza
(D)	topologia.:	iSniowi
(SS) TYP	/CĄSGECZKi:	Sony kwa? nnklennτa:
(A)	OOIK: /opis	= „DNT (syntetyczny)'

(xS) OODK SEKWENCJI: PEQ ID no: 2 L1:

AAllllCUAA GAGCACGGAA TTTATGGATG 1TGGCUAATU ACACGGTTAA CAGTTCGTAU 60

AGAlTCiUGG AUATCATGAA UU (2) INFORMT/JE O PEQ DD No: 242:

(S) CECHY SEKWENCJI:

	(A)	DŁUGOŚĆ: 8 lminτnaasóa
	(B)	GYP: aminokwas
	(T)	DUOŚĆ NIAI: pojedyncze
	(D)	GOPOLOAIC: iSoSτa'a
(SS)	CYP	CZĄSTECZKI: bSałko
OODK	SEKWENCJI: PEQ DD oo: 242:

1L' liy Uly Seo Ul' Gi: Cl: Poo 1 5 (2) INFORMACJE O SEQ DD Nr: 243: (S) CECHY SEKWENCJI:

(A)	DŁUGOŚĆ: 12	amSoτkaa?óa
(B)	CYP: amSoτnaes
(A)	ILOŚĆ NI/D:	pojedyncze
(D)	GOOOUOADT:	iSoSowa
SS) GYO	TCArGETZKi:	bSałko

(xi) OODK SEKWENCJI: SEQ DD no: 503:

ui' ul: ii: eto u|y uiy ci: Poo ci' uiy uiy Poo

184 424

449

10 (2) INFORMACJE O EEQ ID Nr: 24 4:

(i) CECHY SEKWENCJI:

	(A)	DŁUAOŚĆ2: 7 aminokwasów
	(B)	TYO: imLnokwis
	(C)	IUOŚĆ NICl: pojedyncza
	(D)	TOPOLOGIA: lSeiiwi
(SS)	AYP	CZĄSTECZKI: białko
(xi)	OPlE	SEKWENCJI: EEQ ID no:

Sto (ii (li Elg Ali (li Eeo 1 5 (2) INFORMACJE O EEQ ID Nr: 245:

(L) CECHY SEKWENCJI:

(G) DŁUCOŚĆ: 6 Amisikwisów (B) TYP: aminokwAS (C) ILOŚĆ NICI: sijudriczi (D) TOPOLOGIA: liiiiwi (SS) AYP CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIE SEKWENCJI: EEO 1D so: 245:

(Ou PIl (li Ase Met Gli 1 5 (2) INFORMACJE O EEQ ID Nr: 246:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(i) DŁUGOŚĆ: 7 imSnikwisów (B) TYO: imSiokwis (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: OSiiiwi (SS) TYP CZĄSTECZKI: bSałki (xS) OPIS SEKWENCJI: EEQ ND so: 246:

Alu PIm GUu Ali Ann inn Ala

450

184 424

5 (2) INFORMACJE O SEQ ID Nr: 247:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 10 aminokwasów (B) TYP: aminokwas (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID nr: 247:

Glu Phe Gly Gly Asn Gly Gly Asn Met Ala 15 10 (2) INFORMACJE O SEQ ID Nr: 248:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 309 aminokwasów (B) TYP: aminokwas (C) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: białko

xi)	OPIS SEKWENCJI:	SEQ	ID	nr:	248:
Ala 1	Asn Cys Ser Ile Met 5	Ile	Asp	Glu	Ile Ile His His Leu Lys Arg 10 15
Pro	Pro Ala Pro Leu Leu 20	Asp	Pro	Asn 25	Asn Leu Asn Asp Glu Asp Val 30
Ser	Ile Leu Met Asp Arg 35	Asn	Leu 40	Arg	Leu Pro Asn Leu Glu Ser Phe 45
Val	Arg Ala Val Lys Asn 50	Leu 55	Glu	Asn	Ala Ser Gly Ile Glu Ala Ile 60
Leu 65	Arg Asn Leu Gln Pro 70	Cys	Leu	Pro	Ser Ala Thr Ala Ala Pro Ser 75 80
Arg	His Pro Ile Ile Leu 85	Lys	Ala	Gly	Asp Trp Gln Glu Phe Arg Glu 90 95

Lys Leu Thr Phe Tyr Leu Val Thr Leu Glu Gln Ala Gln Glu Gln Gln

184 424

451

100

105

110

Cyo

Vai

Glu

ci:

Uiy

Gl:

Gly

Sto

Pito

lly

Ulu

Piso

Ler

GjLyi

Pro

IDe

115

120

125

Sto

GGo

Ilu

Aso

Poo

Sur

Prs

Oos

Sur

Ly?

Cir

Poo

Hio

lro

Peo

Oro

130

13 5

140

Asn

Mit

Lnu

Ooo

Tho

Por

VeL

lor

Leu

Poo

Ale

Val

Cip

Por

Sto

Leu

145

110

155

160

Uly

Alu

Ttg

L'1

Gho

GAn

Mut

Alu

Glu

Tho

lro

Ala

Cou

Anp

lit

Leu

165

170

175

ul:

Ale

VaS

UGr

Lee

Leu

Lun

Gle

U Ly

Ani

is A

Ala

Ali

Arg

tii

Gln

180

185

110

Lun

Ul'

Pso

Tho

Ty?

Len

Ser

Sur

Leu

ltu

ci:

GAn

Leu

Siu

Gly

GAu

195

200

205

Vei

Arg

Leu

Lnu

Leu

Gly

Ais

Lec

lLr

Ano

Leu

Leu

lllu

Thr

Gln

leu

210

215

220

Oos

Oos

Glu

ul'

Aog

Tier

Ghr

Ale

His

L:o

Aop

Piso

lnu

Ala

Ilu

PPe

996

220

105

240

Lun

Sto

Phr

Ulu

Hio

Leu

Lur

COg

Gly

L'o

VeL

Airg

OGo

Lnu

Mit

Leu

245

2950

2525

Vel

CU'

Gly

y pi

AGe

Leu

Lii

VaA

Pvg

Slu

OgL

Gly

GLu

Asn

Uly

Gly

260

265

220

Aon

Mut

Alu

Lii

Loo

Ala

iii

Pro

Oho

lei

Asp

L eu

Inc

lul

gsu

Ler

255

280

285

Lyo

ltu

Lnu

L'i

Coc

Ser

Hio

Vel

Leu

Hio

Peo

Arg

Leu

Sir

Gln

Cyi

290

295

300

Sos Clu Vei HSo Poo 305 (2) INFORMT/JE 0 KEQ ID To: 249:

(i) AE/HY KEKWEN/JD:

(T) DŁUGOŚĆ: 459 par zanad (B) CYP: kwap nuklinnTwy (A) ILOŚĆ NIAI: pojedyncza (D) GOPOLOAIC: inniTwa (iS) TYP /CArGEACKi: inny kwan nνnllSnτwr (T) OPIK: /opin = „DTT (syntetyczny)

452

184 424 (ei) OPNS SEKWENCJI: r=Q ND nr: 540:

TGCCTCGCTC TGCCCCCCCG CGACCTGTGA GCTCCClGCl CCTCiCTTCG C1CCCCCTAT 60

ITTTCCCCCC IClGACCCAG CCAGClTTCA GAGlCCTACC GTTTGCTCAC 1TGC1CTTCC 120

TCCCTCCCCl CGGGCCTCCG TCCCyGAGAl TClGCACCCT ClCCCilCCS CATTAACCTG 180

T1CC1GACCT ClGlGGCllC CACCCTTCCC TTCilllGAG T11CGGTAGC ACCGCGATAl 240

TCCGCACTCC CCCCTTCTCC ΙΤΤΤΤΤΤΤΤΙ GCCCACTCTC TTGClCCGlC TTCTTCTTCT 007

TCreiCCTTT CGCllllCTC CCCTlllCCC ccgcttgccg cataccccag iattacgctc 360

TAT1AGG1CT CCAlCGCCCC TCCTTTlAGT CCTTAATATT TGTCCCGA1G 111GGC1TGC 057

CCCCC11CGT TCGriGGAGI GTTCCTCTCC CGTGCTAGG

459 (2) INFORMACJE O SEQ ID Nr: 500:

(i) CECiY SEKWENCJN:

(A) DŁUGOŚĆ: 457 pio zasad (B) TYP: kwas nukliiyowy (C) NLOŚĆ NNTN: pojedyncza (D) TOPOIOGNA: IinSoaa (ii) TYP CZĄSTECZKI: inn? kwis nukluinoa?

(xl) OPNS	(1) OPIS: /άϊα = SEKWENCJI: SEQ ID	„DNA (syntetyczny) ie: 500:
TTCTTClCTT 60	ClCCCGCTCG TGATCTCTll	GCTCCClGri 1GCCGCCCCG CGCTTCTCCC
GCCCCCTlCA 120	GTA11CTG1G TC1GT1TCC1	G1G1CTTACT CTCTGCCCAC ACTC1CTTTG
TCGCTCGTCG 180	CIGICTCCIG CCCGGG1G1A	TGilGAGCCT 1GAT1G1GG1 GATT11GGCA
T1GGAC1CCT	T1G11GTAGC GACCTTTTCG	CCG11GG1AG T11T1GCAGC ATGG1GGC1A

507

184 424

453

TTCCCGCTTC TTACTCTTCT ATTTTTTTTA (ΤΤΤΑΤΤΤΤΤ TTCTATATCT TTCTTTCTTT 300 tttaauuttt tctatagttt tttcccaatt cattatactg ttgtatttca taagtatttt 360

CiTCCTATCT TCTTAACTTT TTCATATTTC ΤΤΤΊΤΑΑΤΑΑ ΑΤΑΤΑΤΑΤΤΑ TTTCATCTTA 420

CGGCCAACAT TTGTTTTTTC TCTTATC

447 (2) INFORMACJE O EEQ ID No: 251:

(S) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 459 par zasad (B) AYP: kwis euklMSeiwr (C) ILOŚĆ NICl: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liliowa (iS) TYP CZĄSTECZKI: insi kwis eukleSiiwi (A) OPIS: /ipis = „DNA (syntetyczny) (xi) OPlE SEKWENCJI: EEQ ID no: 251:

TTTTTAATAT TATTACTTAT TCATTTTTTA ATTCTTATTA GATTTTTTTT TCATTCTTAT 60 ttttttcgta ctatattcgc ttacactcta ταττττταίτ ttatctttgt atttttcttu 120

TTCTTTCTTC TCCCTTTTGr TTTCTCATAA ΤΤΤΑΑΑΑΤΤΤ ΑΤΑΤΑΤΑΤΤΑ (ΑΤΤΑΑΤΑΊΑ 180 taatgtattt ττατααταττ catttttttt ttcaagacac tcatcttatt ATCCCAATAA 240 ttatcattta tttatttttt atttttttat ααττατττττ ttagatacct ttcattcttt 300

ΤΤΤΑΑΑΑΤΤΤ TCTATAATTT TCTTCAAATT TAATTTTTTT TATGACATGA CATTATAATT 360

TATGAAUATT TCACTGCTGT TCCTTGCGTT TTTTACTATT ΤΑΤΤΤΤΑΑΑΑ ΑΑΑΑΤΤΑΤΑΤ 420

TTCTTAGTCT TTAIATCACA TTTTATTTTT TATATCACC

459 (2) INFORMACJE O EEQ ND No: 252:

454

184 424 (i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 153 αminpnaaIA (B) TYP: aminokwas (T) NUOŚĆ ENTN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa (li) GYh CZĄSTECZKI: białko

xl)	OhiS SEKWENCJI:	SEQ	ND nr:	707:
Dii	hio Cin huo hio Cii	cyns	^S> Leu	OCah Vil Ltu Dtp Lys Luu Ceu
1	5			10 15
Aig	Asp Ser Ihs Arl Leu	His	Sei Sis	Alu Sec Hln Luu lia lla TsS
	20		25	30
His	Puo Leu Poi ACh Lei	Vni	Utu Ιπ	Pro Ala Vrl Asp Phe Set Ceu
	35		40	45
ilr	Ulu Tcp Cyi Cip Uin	Met	Glu Tiu	Thr Gis Ala Ali Asp Ili Let
	50	50		60
nir	Cin Val Chi Gru Leu	Leu	Glu Tiy	Val Mit Aln Aln Arg Gly GTa
65	70			75 80
etu	Uli Pro Chi Cyi Leu	Ser	Ser Liu	Leu Tli Uin Leu Dtu Gly GTa
	85			90 95
lii	lig Leu Llu Alu Lly	Gir	Lei llu	uir Len liu Stp luc Gun Tis
	100		105	110
Pio	hio Gln GT| Ar; Thr	Ghr	Air Alc	lys Asp Sao Ass ip a AO A CSn
	115		120	125
Leu	Dii Pilił LTa His Leu	Leu	Arg Tli	Lys Vnl .Arg PPe Leu Met Ceu
	130	325		140
lii	nir GT| let Chi Leu	lii	lii Cpg
145	150

(2) INFORMACJE V EQ V ND Nr: 703:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 149 aminokwasów (B) TYP: aminpnaαI (C) NUOŚĆ NNCN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: liniowa.

(ii) TYh CZĄSTECZKI: białko

184 424

455

xi)	OPIS SEKWENCJI: SET	ID n: i	253:
erl 1	Aur Gli Aur Aur Cii Lpi 5	PpT Les	Arg Val Leu Sir Lys Leu Leu 00 15
Gig	Csp Ser His Val Leu Hiv 20	Ser Cru 25	Leu Ssr Cln CCc: iro Glu CVl1 30
His	Pro 1eu irs OOi luu Vii 35	Les Les 40	Pro Ala Vil Acp CPo Ter Leu 45
ily	Glo Grp Tup ULs Gln Tri 50 55	HUv Glu	MUt Lyi UVa Clu Asp 0le Leu 60
liy 65	Cli Val iho Les Leu Leu 00	Gls Cly	Val MeP Ali Ala log Cly Gln 75 80
irs	Cly Pro TOu Cys Leu Ser 85	S<ar Les	Leu Ciy Gln Luu Ser Ciy Gli 00 95
Vil	Cug Leu Crs Ces Gly Ala 100	Leu Glo 105	Ser Llu Ues Gly Tho Gli Gly 111
Crg	Thr Thr TOu lit Sys Asp 115	Pro Aso :225	Ala Iii Ahr Lir Cse Che Gln 115
His	Lit Ceu Atu Gly Ats GiL	Lsi Phe	Vii Mel giu Pot Gly Gly Ser

130 135 140 iOo Uru Cys all Goy 145 (2) INFORMACJE O SEO ID No: 254:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 153 imiuokwip/ (B) TYP: imSuAkwip (V) ILOŚĆ NICI: pojed/nczi (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) TYP CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ ID un: 254:

Sil Air Gli Aur Air Cii Cy: Asy p iu Lrs CoU Leu Sli Lyi Siu Leu 15 10 15

Goy isp Sao HSp ViH Ueu Hii Ser Arg Luu Luu Gln Sys Pro G lu CLsG

456

184 424

20

255

30

Sis

Poo

Lee

U 80

8hr

Ooo

811

—tu

—ru

Pro

Ala

Vai

Asp

Pli

Sio

—tu

35

45

45

iir

Tlu

Trp

pys

Πιτ

O8n

GuG

Glu

G8u

ilu

Lyi

U 8a

Tlr

As—

SAi

Gig

50

58

66

iir

Ala

Val

Tlo

Leu

ltu

—ru

Glu

iir

Va1

Met

Ala

Ali

Arg

iir

TlG

65

70

75

80

ltu

liG

Pro

Tlo

GS-S

ltu

Sro

Ser

liu

Leu

Gly

Gin

Leu

Ser

lly

lln

85

00

05

Vai

log

Lee

U 8 U

L ee

Ulg

Πι

Aiu

TlG

Ser

Leu

Atu

(Lir

Clo

Gln

Liu

100

285

110

Poo

Poo

Gln

G 8 y

S87g

Thr

Thr

Ala

iSi

Lys

As—

P8O

Oso

Alo

A 8 e

APg

115

120

112

ltu

Sto

1I8

IG 8

His

Leu

Luu

Aog

ilr

Lys

Val

log

Phe

Atu

Met

Leu

130

355

140

Vli

iir

Gly

0 8r

Thr

O8U

-ru

VaG

Pg

145 150 (2) INFORMACJE O SEQ ID No: 000:

(i) CECSY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 64 paor zasad (B) TYP: kwas nukUrSnAar (G) IUOŚĆ NIGN: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: SGn0aaa (ii) TYP CZĄSTECZKI: Sggg kwas GvkUrSGAar (A) OP1S: /opLu = „DNA (syntetyczny) (xi) OPIS SEKWENCJI: SEQ (CD nr: 003:

iiCTUUGccA TTCicuiccr icccirccci chccricrcc Aicrccr—ii ccicucuiuu 60

ATll (2) INFORMACJE O SEG ND No: 006:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 153 aminokwasy (B) TYP: aIniGAkaas (C) ILOŚĆ NlCl: pojedyncza

184 424

457 (II) TOPOLOGIA: nGnGGwa (Si) TYP CZĄSTECZKI: białko (ix) CECHA:

(A) NAZWl/KLUCZ: Miejscu mGd/fSkGwalr (B) POŁOŻENIE: 017 (I) INNE INFORMACJE: /HwaLA= „pozycji 007 usuwa się lub Luu, Ala, Vai, Ilr, Pro, Phr, Trp lub Mrt (Sx) CEGGA:

(A) N1ZW1/KLUTZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 113 (I) INNE INFORMACJE: /uwaLa= „pozycję 113 usuwa sSę lub Pro, Phr, Ala, Vnl, Lru, Ile, Trp lub Mrt (Sx) CECHA:

(A) N1ZWA/KLUCZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 114 (I) INNE Ε^ΟΕΜΑΟΙΤΕ: /uwaLa= „oo/ycj p 114 usuwa sSę lub Poo, Phu, Aln, Vnl, Lru, Ilu, Trp lub Mrt (Sx) CECHA:

(A) rlZWi/KLUGZ: Miejscu modyfikowane (B) POŁOŻENIE: 115 (I) INNE I NrΟRMAΟJΕ: /uwaLa= „ρο/γ^τ 111 uuuwa się lub Clu, Gly, Sro, Tho, Gyr lub O.si (xS) OPIS SEKWENCJI: SEQ W no: 256:

Su— 1

Poo

lin

Paro

Gra 5

o Oa

lyi

Asy

Sos Arg Val 10

u TU

Sig

Lys

Leu 15

Lue

log

Osp

Sto

His

Tai

Igu

Hiu

Ser

Arg

Leg

Ser

u ln

Cys

Pro

Glu

—s 0

20

25

30

Gis

Poo

Leu

P ro

Tła

loro

hal

Leu

Leu

Pio

Ala

Val

Asp

Płie

Ser

Luu

35

40

45

Gly

Ulu

Cip

Lys

Th-

Ulu

Aut

llu

ilu

to—

U/s

lin

Glu

1^

Ilu

Lou

50

55

60

Ul/

Aln

Val

Thr

0 ue

Tur

Mer

Min

T Uy

Tal

Meta

Ala

Ala

Hg

Giy

GUn

65

70

75

80

Leu

Gl/

Pro

Tłu

Cys

Tur

Geu

Geo

G ur

Gue

Tly

1 iii

ueu

Set

Gly

Gln

85

90

95

Val

Arg

Leu

Leu

Teu

uły

Ala

Leu

Gln

Ser

Leu

ueu

Glp

ruo

Gln

hu G

100

105

110

Xaa Xaa Xaa Mly Arg Tho Thr Ala His Lyp Asp Osp Not Ala Ile Uhr

458

184 424

		115					120			125
Stu	Seu	Phe	PIl	Hic	Sou	Hss	Ars	UOy Lys Vai	Acy	AAe Peu let goo
	130					155			140
Vil	Gly	Gly	llA	Thr	O cu	Τι^ο	VaL	Ucg

145 150 (2) INFORMACJE O EEQ 1D No: 257:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(i) DŁUAOŚĆ: 464 SAGA zasad (B) TYO: kwis nuklLSniwy (T) ILOŚĆ NICI: pojedyncza (D) TOPOLOGIA: OSiSowa (SS) TYP CZĄSTECZKI: Sili kwas lunUMSllwu (A) OPIS: /isLp = „DNA (syntetyczny) (xS) OPlE SEKWENCJI: EEQ ID so: 257:

TTATAATTCA 60	TTACTTTATA	ATUATCCATA	CAGTACTCTC	ATGTTTAAAC	AAATTGTTTU
TATTTTTATT 120	ΑΑΑΤΊΤΤΑΑΊ	AlTTACACTA	ΑΤΑΑΑΤΑΤΑΑ	TTTTGTTTTU	αταταττααα
attatttata 180	TCTACATTAA	tatgcttttt	ΑΑ1ΑΑΑΊΑΑΑ	TAACAATTAG	ααααατττατ
tatctatata 240	CAT1ATTCTT	TAGAGTCATT	lATCAGAATA	CTTTTTTATC	ACCCTTATCT
tttttttata 300	TCTAGTTATT	attgacacat	AAAATTATTC	ΑΑΑΑΤΤΤΤΑΑ	ταααααίταα
TCTTTTATTT 360	ααττατττττ	CAUTCiCTAT	AAAAATCCTl	ατατατατατ	αατααταααα
ατττίτίααα 420	TAAiTTATTT	ACTTCGATTT	TTATAAATAl	TTTATTTTTT	τταττταααα
CATTTTATCA	ATTTTTCCAT	ΑΤΑΤΑΑΑΑΤΑ	TTATATATAC	(TAA

464 (2) INFORMACJE O EEQ ID No: 258:

(i) CECHY SEKWENCJI:

(A) DŁUGOŚĆ: 419 sio zasad (B) TYO: kwas nukleinowi (C) ILOŚĆ NlTI: pojedyncza

184 424

459 (D) TOPOLOGIA: liniowa (li) GYh CZĄSTECZKI: inni kwas nukluinpal (1) OhNS: /opis = „DNA (syntetyczny) (ci) OONS SEKWENCJI: SEQ ND ni: 705:

CCCTTGCCCC CTUCCCCCCC CCTACCTACT CACGTCCACA TCACCC1CGU CUCCClCTTG 60

CACCTTCUCC UGCCCC1A1C ClCCCCACCn UCTCAUCCUT CCCTACCCTU CCTGATCTAC Γ00 nccTTcnACc ccccnccccn nuncuccccn gcattucctc caguacccta ucucagttat 180

CCUTCACTUC TTCAATGCGT CTCUACCCCC GCCCACTCCT TCCCCCCUCC CCG1CCUTAT 240

CCCTCCTACC CCCCCTCCCC CGTCATTCCT iGUACCGUCA AGAUTCCCTT 1AAAUUCTGA 300

CUCCCTATTC TUCTUCCCTC TCTCAAGCUC UTTACCAUCA GTACTCAUAU TUCTTGTiAG 360

Tccccccnnn cuucttcccg gtcuucttcc ccaccactta attcaccuca gtccagctt 419

184 424

I. Konstrukcja matrycy duplikowanej tandemowo

174

1-wsza kopia genu

174 linker-^^ 2-ga kopia genu

II. Powielenie PCR matrycy duplikowanej tandemowo

jsftyt|S7

FIG.4

184 424 pierwszy etap powielenia PCR nowy start

97 174

fragmenty po ligacji

174 1

F1G.3

184 424 pierwszy etap powielania PCR \nowy start

-

trzeci etap powielenia PCR fragmenty hybrydyzujące

174 linker linker 11_ 96 dodanie oligo nowy start i nowy stop

174 Linker

F1G.2

184 424

Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 70 egz. Cena 6,00 zł.

Claims (11)

1. Zastrzeżenia patentowe

   1. Białko krwiotwórcze wybrane spośród: SEQ ID NR:203, SEQ ID NR:204, SEQ ID NR:205, SEQ IDNN:220, SEQ ID SEQ ID NR:208, SEQ ID NR:209, SEQ ID

   NR:210, SEQ IDNR:21E SEEQ ID NR:212, SEQ ID NR:213, SEQ ID NR:214, SEQ ID

   NR:215, SEQ ID UNRttó, SEQ ID NR:217, SEQ ID NR:218, SEQ ID NR:219, SEQ ID

   NR:220, SEQ ID NN:22E SSQ ID NR:222, SEQ ID NR:223, SEQ ID NR:224, SEQ ID

   NR:225, SEQ ID lSN^RłU, IEQ ID NR:227, SEQ ID NR:228, SEQ ID NR:229, SEQ ID

   NR:230, SEQ IDU^E SEEQ ID NR:232, SEQ ID NR:233, SEQ ID NR:234, SEQ ID

   NR:235, SEQ ID NR:236, SEQ ID NR:237, SEQ ID NR:238 oraz SEQ ID NR:239.
2. 2. Cząsteczka kwasu nukleinowego kodująca białko krwiotwórcze wybrane spośród SEQ ID NR:203, SEQ ID NR:204, SEQ ID NR:205, SEQ ID NR:206, SEQ ID NR:207, SEQ ID NR:208, SEQ ID NR:209, SEQ ID NR:210, SEQ ID NR:211, SEQ ID NR:212, SEQ ID NR:213, SEQ SEQ ID NR:215, SEQ ID NR:216, SEQ ID NR:217, SEQ LD

   NR:218, SEQ IDUN^RłU, SEQ ID NR:220, SEQ ID NR:221, SEQ ID NR:222, SEQ ID

   NR:223, SEQ SEQ ID NR:225, SEQ ID NR:226, SEQ ID NR:227, SEQ ID

   NR:228, SEQ IDNR:242, SEQ ID NR:230, S^<Q ID NR:231, SEQ ID NR:232, SEQ ID

   NR:233, SEQ ΙΟΝ!^ SEQ ID NR:235, SEQ ID NR:236, SEQ ID NR:237, SEQ ID

   NR:238 oraz SEQ ID NR:239.
3. 3. Cząsteczka kwasu nukleinowego według zastrz. 2, znamienna tym, że została wybrana spośród SEQ ID NR:118, SEQ ID NR:119, SEQ ID NR:120, SEQ ID NR: 121 , SEQ ID NR:122, SEQ ID NR:123, SEQ ID NR: 124, SEQ ID NR:125, SEQ ID NR:126, SEQ ID NR:12^, SEQ ID 1^328, SEQ ID NR:129, SEQ ID URI 30, SEQ ID NR:131, SEQ ID

   NR: 132, SEQ SEQ ID NR: 134, SEQ ID N^HSi SEQ ID NR:136, SEQ ID

   NR: 137, SEQ ID Ν^^ SEQ ID NR: 139, SEQ ID NR: 140, SEQ ID NR^, SEQ ID

   NR:142, SEQ ID SEQ ID NR:1:M, SEQ ID NR:^ SEQ ID NR:146, SEQ ID

   NR:147i SEQ IDNRrMS, SEQ ID NR349, SEQ ID NR: 150 , SEQ IID NR:151, SEQ ID

   RR:152, SEQ ID NR:153, SEQ ID RR:154, oraz sekwencji równoważnych tym sekwencjom wynikających z degeneracji kodu genetycznego.
4. 4. Sposób wytwarzania białka krwiotwórczego, znamienny tym, że obejmuje: hodowlę w odpowiednich warunkach odżywiania komórek gospodarza transformowanych lub transfekowanych wektorem replikującym zawierającym cząsteczkę kwasu nukleinowego kodującą białko krwiotwórcze w sposób pozwalający na ekspresję wymienionego białka krwiotwórczego, oraz odzyskanie wymienionego białka krwiotwórczego, przy czym cząsteczka kwasu nukleinowego koduje białko krwiotwórcze wybrane spośród SEQ ID NR:403, SEQ ID NR:204, SEQ ID NR:205, SEQ ID NR:206, SEQ ID N^:^(^'^, SEQ ID NR:208, SEQ ID NR:209, SEQ ID

   NR:210, SEQ ID NR:211, SEQ ID MR212, SEQ ID NR^E, SEQ ID NR:214, SEQ ID

   NR:215, SEQ ID M&tó, SEQ ID NR:217, SEQ ID NR^E, SEQ ID NR^W, SEQ ID

   NR:220, SEQ ID NR^E SEQ ID NR:222, SEQ ID NR^E, SEQ ID RR:224, SEQ ID

   NR^, SEQ ID NR:224, SEQ ID NR:227, SEQ ID SEQ ID NR:229, SEQ ID

   NR:230, SEQ ID NR^E SEQ ID NR:232, SEQ ID NR:233, SEQ ID NR:234, SEQ ID

   NR:235, SEQ ID NR:236, SEQ ID NR:237, SEQ ID NR:238 oraz SEQ ID NR:239.
5. 5. Sposób według zastrz. 4, znamienny tym, że cząsteczka kwasu nukleinowego została wybrana spośród SEQ ID NR:118, SEQ ID NR:119, SEQ ID NR:140, SEQ ID NR: 121 , SEQ ID NR^ SEQ ID NR:^, SEQ ID NR:124, SEQ ID SEQ ID N^IOi SEQ ID

   NR:^ SEQ ID NR:128, SEQ D NR399, SEQ Π) NRzEI, SEQDDNR:13E SEQ DD

   184 424

   NR:132, SEQ ID NR:133, SEQ ID NR:134, ID NR:135, SEQ ID NR: 136 , SEQ ID

   NR:137, SEQ ID NR:138, SEQ UD NR:139, SEQ UD NR:140i SEQ ID NR:14L SEQ ID

   NR:142, SQQ ID NR:1R3, SEQ ID NR:144, SEQ ID NR:145i SEQ ID NR:146i SEQ ID

   NR:147i SEQ ID NR: 148, SSQ UD NR:149, SEQ ID M<:150, SEQ ID NRH55, SEQ ID

   NR:132i SEQ ID NR:153, SEQ D ^^3::354, orazsekwencj i równoważnych tym sekwencjom wynikających a degeneracji kodu geeetnyaeegn.
6. 6. Kompozycja farmaceutyczna, znamienna tym, że aawieoa białko krwiotwórcze wyborne spnśoód: SEQ ID NR:203, SEQ ID NR:204, SEQ ID NR:203, SEQ ID NR:206, SEQ ID NR:207, SEQ ID NNROS, SEQ IID NR:209, SEQ ID NR:210, SEQ ID NR:211, SEQ IID

   NR:212, SEQ ID NN.R13, SEQ ID NR:214, S^<) ID NR:213, SEQ ID NRR16, SEQ ID

   NR:217, SEQ ID NNR18, SEQ ID NR:219, ID NR:220, SEQ ID NR:221, SEQ IID

   NR:222, SEQ ID NNR23, SEQ ID NR:224, S^<Q ID NR:223, SEQ ID NR:226, SEQ IiD

   NR:227, SQQ ID NNR28, SEQ ID NR:229, SEQ ID NR:230, SEQ ID NR:231, SQQ ID

   NR:232, SQQ ID NNR33, SEQ ID NR:234, SEQ ID NR:233, SEQ ID NR:236, SEQ IID

   NR:237, SEQ ID NR:23S oraz SEQ ID NR:239 oraz farmaceutycznie dopuszczalny nośnik.
7. 7. Kompozycja farmaceutyczna według zastrz. 6, znamienna tym, że dodatkowo zawiera co najmniej jeden czynnik stymulacji kolonii, c^^ę, limfokinę, interleukinę, czynnik krwiotwórczy wybrany z grupy składającej się z: GM-CSf, G-CSF, liganda c-mpl (TPO), MGDF, M-CSF, erntoopoetynn (QPO), EL-1, IL-4, IL-2, IL-3, IL-3, IL-6, IL-7, IL-S, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-13, LIF, liganda flt3, czynnika komórek macierzystych (SCF).

   S. Zastosowanie białka krwiotwórczego wybranego spośród: SEQ ID NR:203, SEQ ID NR:204, SQQ ID NNR05, SEQ IID NR:206, SEQ ID NR:207, SEQ ID NR:208, SEQ UD

   NR:209, SEQ ID NNR10, SEQ IID NR:211, SEQ ID NR:212, SEQ ID NR:213, SEQ IID

   NR:214, SEQ ID NNR15, SEQ IID NR:216, SEQ ID NR:217, SEQ ID NR:218, SEQ UD

   NR:219, SEQ ID NNR20, SEQ IID NR:221, SEQ ID NR:222, SEQ ID NR:223. SEQ IID

   NR:224, SEQ ID NNR25, SEQ IID NR:226, SEQ ID NR:227, SEQ ID NR:228, SEQ IID

   NR:229, SEQ ID ^:230, SEQ IID SEQ ID NR:232, SEQ ID NRR33, SEQ IID

   NR:234, SEQ ID NR:233, SEQ ID NR:236, SEQ ID NR:237, SEQ ID NR:23S oraz SEQ ID NR:239 do produkcji leku do stymulowania produkcji komórek krwiotwórczych u pacjenta.
8. 9. Środek do stymulowania produkcji komórek krwiotwórczych u pacjenta zawierający czynnik aktywny i farmaceutycznie dopuszczalny nośnik, znamienny tym, że jako czynnik aktywny zawiera białko krwiotwórcze wybrane spośród: SEQ ID NR:203, SEQ ID NR:204, SEQ ID NR:203, SEQ ID NR:206, SEQ ID NR:207, SEQ ID NR:20S, SEQ ID NR:209, SEQ ID NR:210, SEQ ID NR:211, SEQ ID NR:212, SEQ ID NR:213, SEQ ID NR:214, SEQ ID NR:213, SEQ ID NNR16, SEQ UD NR:217, SEQ ID NR:21S, SEQ ID NR:219, SEQ IID

   NR:220, SEQ ID NNR21, SEQ IID SEQ ID RR:223, SEQ ID NR:224, SEQ IID

   NR:223, SEQ ID NNR26, SEQ UD NR:227, SEQ ID NR:22S, SEQ ID NR:229, SEQ IID

   NR:230, SEQ ID NNR31, SEQ IID NR:232, SEQ ID NR:233, SEQ ID NR:234, SEQ IID

   NR:233, SEQ ID NR:236, SEQ ID NR:237, SEQ ID NR:23S oraz SEQ ID RR:239.
9. 10. Sposób selektywnej ekspansji ex vivo komórek krwiotwórczych, znamienny tym, że obejmuje etapy:

   (a) hodowh okdzinlonyeh nnmóeek krvkotwkrc5oc0 w y>c:owcż honowjanej anwierającej białko krwiotwórcze wybrane spośród: SEQ ID NR:203, SEQ ID NR:204, SEQ ID NR:203, SEQ ID NNROó, SEQ IID NR:207, SEQ ID NR:20S, SEQ ID NR:209, SEQ IID

   NR:210, SEQ ID NNR11, SEQ IID lNRRtt, SEQ ID NR:213, SEQ ID NR:214, SEQ IID

   NR:213, SEQ ID NNR16, SEQ IID NR:217, SEQ ID NR:21S, SEQ ID NR:219, SEQ IID

   NR:220, SEQ ID NNR21, ,EQ IID NR:222, SEQ ID NR:223, SEQ ID NR:224, SEQ IID

   NR:223, SEQ ID ^::26, SEQ UD NR:227, SEQ ID NR:22S, SEQ ID NR:229, SEQ IID

   NR:230, SEQ ID NNR31, ,EQ IID NR:232, SEQ ID NRRH, SEQ ID NR:234, SEQ UD

   184 424

   NR:235, SEQ ID NR:236, SEQ ID NR:237, SEQ ID NR:238 i SEQ ID NR:239; oraz (b) zbierania hodowanych komórek.
10. 11. SposóS selektyeraejekspansji ax viao komórek macierzyciych, znamienny tym, te obejmuje etapy:

    (a) oddzielania komórek macierzystych od innych komórek, (b) hodowli oddzielonych komórek krwiotwórczych w pożywce hodowlanej zawierającej białko krwiotwórcze wybrane spośród: SEQ ID NR:203, SEQ ID NR:204, SEQ iD NR:205, SEQ ID SEQ ID NR-.207, SEQ ID NR:208, SEQ ID NR:209, SEQ ID

    NR:210, SEQ ID NR:211, SEQ ID NR:212, SEQ ID NR:213, SEQ ID NR:214, SEQ ID

    NR:215, SEQ ID NR:216, SEQ ID SEQ ID NR:218, SEQ ID NR:219, SEQ ID

    NR:220, SEQ ID SEQ ID NR:222, SEQ ID NR:223, SEQ ID NR:224, SEQ ID

    NR:225, SEQ ID NR:226, SEQ ID NR:227, SEQ ID NR:228, SEQ ID NR:229, SEQ ID

    NR:230, SEQ ID MR231, SEQ ID NR:232, SEQ ID NR:233, SEQ ID NR:234, SEQ ID

    NR:235, SEQ ID NR:236, SEQ ID NR:237, SEQ ID NR:238 i SEQ ID NR:239; oraz (c) zbierania hodowanych komórek.

    Niniejszy wynalazek dotyczy agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych.

    Czynniki stymulujące kolonię (CSEs), które stymulują, różnicowanie i/lub proliferację komórek szpiku kostnego, stały się znacznie bardziej interesujące z powodu ich możliwości terapeutycznych odnawiania obniżonego poziomu komórek krwiotwórczych, pochodzących od komórek macierzystych. CSFs, zarówno w układach ludzkich jak i mysich, zostały zidentyfikowann i rozróżnione według ich aktywności. Przykładowo, CSF granulocytu (G-CSF) i CSF makrofaga (M-CSF) stymulują in vitro tworzenie się odpowiednio, granulocytu neutrofilowego oraz kolonii makrofagów, podczas gdy GM-CSF i injerlnueinα-3 (IL-3) mają szerszą aktywność i stymulują tworzenie się zarówno kolonii makrofagów, granulocytów neutrofilowych jak i eozynofilowych. IL-3 stymuluje także tworzenie się kolonii tucznych, mngakαriocytów oraz czystych i mieszanych erytroidowych.

    US 4 8,7 729 i US 4 959 455 ujawniają cDNA ludzkiej IL-3 i IL-3 gibbona oraz sekwencje białek przez nie kodowanych. Ujawniona hIL-3, w pozycji 8 w sekwencji białkowej, posiada raczej serynę niż prolinę.

    Międzynarodowe zgłoszenie patentowe (PCT) WO 88/00598 ujawnia IL-3 podobną do gibbona i ludzkiej hIL-3 zawiera zamianę Ser⁸ ap Pro⁸, user^et^uj^się na S er, przerywając przez to mostek disiarczkowy, oraz zamianę jednego lub więcej aminokwasów w miejscach glikozylacji.

    US 4 810 643 ujawnia sekwencję DNA, kodującą ludzki G-CSF.

    WO 91/02754 ujawnia białka połączone zbudowane z GM-CSF oraz IL-3, które posiadają zwiększoną aktywność biologiczną w porównaniu z samym GM-CSF lub IL-3. Ujawnia się także nieglikozylowane białka analogowe IL-3 i GM-CSF, jako składniki agonisty krwiotwórczego receptora wieloczynnościowego.

    WO 92/04455 ujawnia białka połączone, składające się z IL-3 połączonej z limfokiną wybranąz grupy, składającej się z IL-3, lL-6, IL-7, IL-9, IL-11, EPO i G-cSf.

    WO 95/21197 i WO 95/21254 ujawnia białka połączone mające szerokie wieloczynnościowe właściwości krwiotwórcze.

    GB 2 285 446 odnosi się do liganda c-mpl (trombopoetyny) i różnych postaci trombopoetyny, które jak się okazało, wpływają na replikację, różnicowanie i dojrzewanie megakariocytów i przodków megakariocytów, które można stosować do leczenia małopłytkowości.

    EP 675 201 A1 odnosi się do liganda c-mpl (czynnik wzrostu i rozwoju mngaeariocyju (MGDF)), odmian allelicznych liganda c-mpl i liganda c-mpl dołączonego do polimerów rozpuszczalnych w wodzie, takich jak glikol polietylenowy.

    184 424

    WO 95/21920 opisuje ligand mysiego i ludzkiego c-mpl oraz ich fragmenty polipeptydowe. Białka są użyteczne do terapii in vivo i ex vivo do stymulacji wytwarzania płytek.

    Rearanżacja sekwencji białkowych

    W ewolucji, rearanżacja sekwencji DNA pełni istotną rolę w powstawaniu rozmaitości struktury i funkcji białek. Duplikacja genu i mieszanie się egzonów, zapewnia ważny mechanizm szybkiego tworzenia różnorodności i zapewnia przez to organizmy z konkurencyjną korzyścią, zwłaszcza ze względu na niskie tempo mutacji podstawowej (Doolittle, Protein Science 1: 191-200, 192).

    Rozwój metod rekombinacyjnych DNA uczynił możliwym zbadanie wpływów transpozycji sekwencji na fałdowanie białka, strukturę i działanie. Podejście stosowane w tworzeniu nowych sekwencji przypomina to z naturalnie występujących par białek, które są spokrewnione przez reorganizacje liniową ich sekwencji aminokwasowych (Cunningham i in., Proc.Natl. Acad.Sci.USA 76: 3218-3222, 1979; Teather i Erfle, J.Bacteriol. 172: 3837-3841, 1990; Schiming i in., Eur.J.Biochem. 204: 13-19, 1992; Yamiuchi i Minamikawa, FEBBS Lett. 260: 127130, 1991; MacGregor i in., FEBBS Lett. 378: 263-266). Pierwszym stosowaniem in vitro tego typu rearanżacji w białkach, opisali Goldenberg i Creighton (J.Mol. Biol.165: 407-413, 1983). Nowy koniec N wybiera się w wewnętrznym miejscu (punkt przerwania) sekwencji pierwotnej, przy czym nowa sekwencja posiada taki sam porządek aminokwasowy jak pierwotna, od punktu przerwania do osiągnięcia aminokwasu, który leży na, lub blisko końca C. W tym punkcie nową sekwencję łączy się, albo bezpośrednio albo przez dodatkową część sekwencji (linker), z aminokwasem, będącym na, lub blisko pierwotnego końca N, i nowa sekwencja ciągnie się z taką samą kolejnościąjak pierwotna, aż osiągnie punkt, który leży na, lub blisko aminokwasu, który był N-terminalny wobec miejsca punktu przerwania sekwencji pierwotnej, przy czym pozostałość ta tworzy nowy koniec C łańcucha.

    Podejście to stosowano do białek, których wielkość zmienia się od 58 do 462 aminokwasów (Goldenberg i Creighton, J.Mol.Biol.165: 407-413, 1983; Li i Coffino, Mol.Cell. Biol.13: 2377-2383, 1993). Badane białka reprezentowały szeroki zakres klas strukturalnych, włączając białka, które zawierają przede wszystkim α-heliks (interleukina-4; Kreitman i in., Cytokine 7: 311-318, 1995), powierzchnię β (interleukina-1; Horlick i in., Protein Eng. 5: 427-431, 1992), lub mieszaninę tych dwóch (izomeraza fosforybozylo-antranilanowa drożdży; Luger i in., Science 243: 206-210, 1989). W tych badaniach reorganizacji sekwencji przedstawiono wiele kategorii działania białek:

    Enzymy lizozym T4 reduktaza dihydrofolanowa rybonukleaza T1 β-glukanaza

    Bacillusa transkamaboilaza asparaginianowa izomeraza fosforybozylo antranilanowa pepsyna/ /pepsynogen dehydrogenaza nliceraldehydo-3fosforanowa dekarboksylaza

    Zhang i in., Biochemistry 32: 12311-12318!. 1993; Zhang i in., Nature Struct.Biol. 1: 434-438 (1995) Buchwalder i in,, Biochemistiy 31: 1621-^16^^0, 1994; (Protssova iin., Prot.Engl.

    7: 1373-1377, 1995)

    Mullins i in,, J.Am.Chem. Soc . 116: 5529-5533, 1994; Garret i in., Protein Science 5:204--211,1996)

    Hahn i in,, Proc.Natl.Acad.Sci-USA 91 : 104174 0421 ,1994)

    Yang i Scładmurn, Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90: 11980-11984, 1993)

    Puge, i ΐη. , Science 243 : 206-210, 1989;

    Luge, i rn. , Prot-Egg.

    3 :249-25,, 1990)

    Un i in,, Portem Science

    4 , 15946611995)

    Yingais ΐ rn,, Pr^cteem Science

    4, 9944000, 1995)

    U, Coffino , Mol.Cell.Biol.

    184 424 omitynowa dehydrogenaza fosfogliceranowa drożdży

    Inhibitor enzymu zasadowy pankreatynowy inhibitor trypsyny Interleukina 1β
11. 13 : 2377-2383, 1993)

    Ritco-Vonsovici i in, Biochemistiy 341: 16543-16^551, 1995)

    Goldenberg i Creighton, J.Mol.Biol. 165 : 407-413, 1983)

    Horlick i in. Protein Eng. 5:427-431,1992)

    Kreimian i in, Cytokine 7:311-318,1995)

    Domena rozpoznawania kinazy tyrozynowej

    Interleukina-4 domena α-spektryny SH3 Białka transbłonowe omp a

    Viguera i in, J.Mol.Biol.

    247 : 670-681,1995)

    Koebnik i Kromier, Ι.ΜοΙ.ΒΐοΙ. 250: 617-^^^, 1995)

    Białka chimeryczne interleukina-4egzotoksyny Pseudomonas

    Kreitman i in., Proc.Natl.Acad.Sci.USA 91:6889-6893, 1994).

    Wyniki tych badań były wysoce zmienne. W wielu przypadkach obserwowano istotnie niższą aktywność, rozpuszczalność lub stabilność termodynamiczną (reduktaza dihydrofolanowa E. coli, transkarbamoilaza asparaginianowa, izomerazafosforybosylo-antranilanowa, dehydrogenaza gliceraldehydo-3-fosforanowa, dekarboksylaza ornitynowa, omp A, dehydrogenaza fosfoglicerylanowa drożdży). W innych przypadkach, białka o przebudowanej sekwencji, jak się okazało, miały wiele prawie identycznych właściwości jak ich naturalny odpowiednik (zasadowy pankreatynowy inhibitor trypsyny, lizozym T4, rybonukleaza T1, β-glukanaza Bacillusa, interleukina 1β, domena SH3 α-spektryny, pepsynogen, interleukina4). W wyjątkowych wypadkach, obserwowano nieoczekiwaną poprawę pewnych właściwości sekwencji naturalnej np. rozpuszczalność lub tempo wtórnego fałdowania dla przebudowanych sekwencji domeny α-spektryny SH3 i powinowactwo do receptora, oraz aktywność przeciwnowotworową połączonej cząsteczki interleukina-4-egzotoksyna Pseudomonas, poddanej transpozycji (Kreitman i in., Proc.Natl.Acad.Sci.USA 91: 6889-6893, 1994; Kreitman i in., Cancer Res. 55: 3357-3363,1995).

    Pierwotnym zamierzeniem tego typu badań było zbadanie roli interakcji o krótkim zakresie i długim zakresie, dla fałdowania białka i stabilności. Przebudowanie sekwencji tego typu przekształca podzbiór interakcji o długim zakresie w sekwencji oryginalnej w interakcje o krótkim zakresie i na odwrót. Fakt, że wiele tych rearanżacji sekwencji może osiągnąć konformację z co najmniej częścią aktywności, jest przekonywującym dowodem, że fałdowanie białka zachodzi wielorakimi szlakami fałodwania (Viguera i in., J.Mol.Biol. 247: 670-681, 1995). W przypadku domeny SH3 α -spektryny, wybór nowych końców w położeniach, odpowiadających skrętom pętli β o strukturze szpilki do włosów, dał w wyniku białka z nieco mniejszą stabilnościią lecz które jednak były zdolne do fałdowania.

    Pozycje wewnętrznych punktów przerwania użyte w badaniach tu cytowanych, znajdują się wyłącznie na powierzchni białek i rozmieszczają się poprzez sekwencję liniową bez żadnego wyraźnego uprzywilejowania końców lub środka (odchylenie odpowiedniej odległości od oryginalnego końca N do punktu przerwania wynosi około 10-80% całkowitej długości sekwencji). Linkery, łączące oryginalne końce Ni C w tych badaniach zmieniały się w zakresie od 0 do 9 reszt. W jednym przypadku (Yang i Schachman, Proc.Natl.Acad. Sci.USA 90: 11980-11984, 1993), część sekwencji została poddana delecji z oryginalnego segmentu C-terminalnego, a połączenie wykonano z przyciętego końca C do końca N. Elastyczne reszty hydrofilowe, takie jak Gly i Ser często stosuje się w linkerach. Viguera i in.,

    184 424 (J.Mol.Biol.247: 670-681, 1995) porównał łączenie oryginalnych końców N i C zlinkerami o 3 lub 4 resztach; llincer o 3 resztach był mniej stabiiny termodynamicznie. Prolasova. i ii^., (Protein Eng. 7: 1373-1377, 194) stosowała linkery o 3 lub 5 resztach w łączeniu oryginalnych końców N reduktazy dihydrofolanowej E. coli; tylko linker o 3 resztach wytwarzał białko o dobrej wydajności.

    Ujawnione nowe białka krwiotwórcze reprezentują wzory:

    R1-L1-R2, R2-L1-R1, Rj-R₂ lub R2-R1 gdzie R1 i R2 wybiera tię niezależnie z grupy, składającej się z:

    (I) Polipeptydu zawierającego i modyfikowaną sekwencję ludzkiego G-CSF o wzorze:

    1 10

    Xaa Xaa Xaa Gly Pro Ala Ser Ser Leu Pro Gln Ser • Xaa Leu 20 Leu Xaa Xaa Xaa Glu Gln Val Xaa Lys Xaa Gln Gly Xaa Gly Ala 30 40 Xaa Leu Gln Glu Xaa Leu Xaa Ala Thr Tyr Lys Leu Xaa Xaa Xaa 50 Glu Xaa Xaa Val Xaa Xaa Gly His Ser Xaa Gly Ile Pro Trp Ala 60 70 Pro Leu Ser Ser Xaa Pro Ser Xaa Ala Leu Xaa Leu Ala Gly Xaa 80 Leu Ser Gln Leu His Ser Gly Leu Phe Leu Tyr Gln Gly Leu Leu 90 100 Gln Ala Leu Glu Gly Ile Ser Pro Glu Leu Gly Pro Thr Leu Xaa 110 Thr Leu Gln Xaa Asp Val Ala Asp Phe Ala Xaa Thr Ile Trp Gln 120 130 Gln Met Glu Xaa Xaa Gly Met Ala Pro Ala Leu Gln Pro Thr Gln 100 Gly Ala Met Pro Ala Phe Ala Ser Ala Xaa Gln Xaa Xaa Ala Gly 150 160 Gly Val Leu Val Ala Ser Xaa Leu Gln Xaa Phe Leu Xaa Xaa

    170

    Ser Tyr Arg Val Leu Xaa Xaa Leu Ala Gln Pro (SEQ ID nr: 1)

    184 424 gdzie

    Xaa w pozycji 1 oznacza Thr, Ser, Arg, Tyr lub Gly;

    Xaa w pozycji 2 oznacza Pro lub Leu;

    Xaa w pozycji 3 oznacza Leu, Arg, Tyr lbb Srr;

    Xaa w pooycjj b1 oonacca Phe, Ser, His, Thr lub Pro;

    Xaa w pozncjj b (5 oznaccn Lys, Pro, Ser, Thr lulb His;

    Xcc w pozycji 17 oznacza Cys, Ser, Gly, Ala, Ile, Tyr lub Arg;

    Xaa w pozncji b 8 oznacjn Leu, Thr, Pro, His , ll b ^b yys;

    Xaa w pozncjj b 2 Doza^z Arg, Tyr, Ser, Thr lub Ala;

    Xaa w pozycyϊ 2 2 born^z Ile, Pro, Tyr lub eur;

    Xcc w pozycj! 2 2 bornaca Asp lub Gly;

    Xaa w pozycji 33 bornaca Ala, Ile, Leu lub GC;;

    Xaa w pozycy! 33 bznacja Lys, ll! ber;

    Xaa w pozycji 36 oznacza Cys lub Ser;

    Xaa w pozycji 42 oznacza Cys lub Ser;

    Xaa w pozycji 43 oznacza Hśs , Thr, GCy, Va1, Lys, Trp, Ala,

    Arg, Cys lub Leu;

    Xaa w pozycji 00 oznacza Pro, Gly, Arg, Asp, Val, Ala, His, Trp, Gln lub Thr;

    Xaa w popyzCć 40 bznacjn Glu, Arg, Phe, Ar,i Ile lub Ala;

    Xaa w pooonCj i 0 3znacja Leu luło Thr;

    Xaa w popyc^ci 0 bornace Leu, Phe, Arg lub Ser;

    Xaa w pooynCj i5 bynaαca Leu, I1v bii, Pro lub Tyr;

    184 424

    Xaa w pozycj i 554 oznacza Leu lub His; Xaa w pozycj i 64 oznacza Cys lub Ser; Xaa w pozycj i 7 oznacza Gln, Lys, Leu lub Cys; Xaa w pozycji 70 oznacza Gln, Pizo, Leu, Arglub Xaa w pozycj i 74 oznacza Cys lub Ser; Xaa w pozycji 104 oznacza Asp , Gly lub Val;

    Xaa w pozycji 108 oznacza Leu, Ala, Val, Arg, Trp, Gln lub Gly;

    Xaa w pozycj i 115 oznacza Thr, His, Leu luła Ala; Xaa w pozycji 120 oznacza Gln, Gly, Arg, Lys lub His; Xaa w pozycjj 123 oznacza Glu, Arg, Phh luu Thr; Xaa w pozycji 144 oznacza Phe, His, Arg, Pro, Leu, Gln lub

    Glu;

    Xuu w pozycj j 146 oznacza Arg lub Gln; Xaa w pozycj ΐ 147 oznacza Arg IuŁ» (jIu; Xaa w pozycjί 1156 oznacza His, Gly lub eer; Xaa w pozycj i 159 oznacza Ser·, Arg, hhr, Tyr, Val lub Gly; Xaa w pozycj i H32 oznacza Glu, Leu, Gly (uu Tr^r^^ Xuu w pozycy i 113 oznacza VuU, Gly, Arr (uL· Ma; Xaa w pozycy i 169 oznacza Arg, Ser, Leu, Arg lubo Cys

    Xaa w pozycji 170 oznacza His

    Arg lub Ser;

    184 424 gdzie ewentualnie można usunąć 1-11 aminokwasów z końca N 1-5 z końca C; oraz gdzie koniec N łączy się z końcem C bezpośrednio lub przez linker, umożliwiający łączenie końca N z końcem C i posiadający nowe końce C i N przy aminokwasach:

    38-39 62-63 123-124 39-40 63-64 124-125 40-41 64-65 125-126 41-42 65-66 126-127 42-43 66-67 128-129 43-44 67-68 128-129 45-46 68-69 129-130 48-49 69-70 130-131 49-50 70-71 131-132 52-53 71-72 132-133 53-54 91-92 133-134 54-55 92-93 134-135 55-56 93-94 135-136 56-57 94-95 136-137 57-58 95-96 137-138 58-59 96-97 138-139 59-60 97-98 139-140 60-61 98-99 140-141 61-62 99-100 141-142

    lub 142-143;

    (II) polipeptydu obejmującego: modyfikowaną sekwencję hIL-3 o wzorze:

    Ala Pro Met Thr Gin Thr Thr Ser Leu Lys Thr Ser Trp Val Asn 15 10 15

    Cys Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 20 25 30

    Xaa Xaa Xaa Xaa XXa Xaa Xaa Xaa Asn Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 35 40 45

    Xaa Xaa Xaa XXa Xxx Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa XXa Xaa Xaa Xaa Xaa 50 55 60

    Xaa Xaa Xaa Xxx Xxx Xaa Xxa Xax Xxa Xaa Xxx Xaa Xaa Xaa Xaa 65 70 75

    Xaa Xaa Xaa Xxx XXa Xaa Xaa Xaa Xxa Xaa Xxx Xaa Xaa Xaa Xaa 80 85 90

    Xaa Xaa Xaa Xxx Xxx Xaa Xaa Xxa Xaa Xaa Xxx Xaa Xaa Xax Xaa 95 100 105

    Xaa Phe Xaa Xxx Xxx Xaa Xaa Xaa Xxx Xaa Xxx Xaa Xaa Xaa Xaa 110 115 120

    Xxx Xxx Xxx iln iln Thr Thr Leu Ser Leu Ala Ile Phe

    125 130 (XEQ nr Xr: 2);

    184 424

    gdzie Xaa w pozycji 17 oznacza Ser, Lys, Gly, Asp, Met, Gln lub Arg; Xaa w pozycji 18 oznacza Asn, His, Leu, Ile, Phe, Arg llb Gln;

    Xaa w pozycji 19 oznacza Met, Phe, Ile, Arg, Gly, Ala llb Cys; Xaa w pozycji 20 oznacza Ile, Cys, Gln, Glu, Arg, Ppo Ilu Ala; Xaa w pozycji 21 oznacza Asp), Phe, Lys, Arg, Ala, Gly, Glu, Gln, Asn, Thr, Ser lub Val; Xaa w pozycj i 22 oznacza Glu, Top, Pro, Ser?, Ala, His, Asp, Asn, Gln, Leu, Val lub Gly; Xaa w pozycj i 23 oznacza Ile, Val, Ala, Gly, Top, Lys, Phe, Leu, Ser lub Arg; Xaa w pozycji 24 oznacza Ile, Gly, Val, Arg, SSr, PPh llb Leu; Xaa w pozycji 25 oznacza Tho, His, Gly, dl, AA^g, Ppo llb Ala; Xaa w ppzycci 26 oznacza His, Thr, Phe, dl/, Aao, AA i Ilu» Trp; Xaa w pozycji 27 oznacza Leu, Gly, Arg, Tho, Ser lub Ala Xaa w pozycji28 oznacza Lys, Arg, Leu, Gln, Gly, hro, Val

    lub Trp;

    184 424

    Xaa w pozycji 29 oznacza Gln, Asn, Leu, Pro, Arg lub Val;

    Xaa w pozycji 30 oznacza Pro, His, Thr, Gyy, Asp, Gln, · Ssr, Leu lub ubo; Xaa w pozycji 31 oznacza Pro, Asp, Gly, Ala, Arg, Leu lub Gln; Xaa p pozycji 02 oznacza Leu, Val, Arg, Gln, Asn, Gly, Ala lub Glu; Xaa w pozycjć 33 oznacza Pro, Leu, G^, Ala, Thr lub Glu; Xaa w pozycji 3 0 oznacza Leu, Val, Gly, Se, , LLy, du, GGu, Thr, Arg, Ala, Ple, , Ile lub Met; Xaa w pozycji 35 oznacza Leu, Ala, Gly, Asn, Pro, Gln lub Val; Xaa p pozycji 36 oznacza Asp, Leu lub Val; Xaa p pożyci i 37 oznacza Phe, Ser, Pro, Trp lub Ile; Xaa p pozycji 08 oznacza. As , lu, Ala; Xaa p pozycji 40 oznacza Leu, Trp lub Arg; Xaa w pozycji 41 oznacza Asn, Cys, Arg, Leu, His, Met lub Pro; Xaa p pozycji 42 oznacza Gly, Asp), Ser, Cys, Asn, Lys, Thr, Leu, Val, Glu, Phe, Tyr, Ile, Met lub Ala; Xaa p pozycji 43 oznacza Glu, Asn, Tyr, Leu, Phe, Asp, Ala, Cys, Gln, Arg, Thr, Gly lub Ser; Xaa p pozycji 44 oznacza Asp, Ser, Leu, Arg, Lys, Thr, Met,

    Trp, Glu, Asn, Gln, Ala lub Pro;

    184 424

    Xaa w pozycji 05 oznacza Gln, Pro, Phe, VzV, Met, Leu, Thr, Lys, Thp, Asp, Asn, Arg, Ser, Ala, Ile, Glu lub His; Xaa w b^zyccΐ 06 yznacna Asp, Ph, , Se, , Th,, Cys, Gi,, An,, Gln, Lys, His, Ala, Tyr, Ile, Val lub Gly; Xaa w pozycji 7b onnaczi I! e, G1 y, Va 1 , he r, Arg, obo lub His; Xaa w boyncji 08 oznacza Leu, Se, , Cy, At,, Ile, His, Rh,, Glu, Lys, Thr^, AAa, Met, Val lub Asn; Xaa w pozycji 09 oznacza Met, Arg, Ala, Gly, Pro, Asn, His lub Asp; Xaa w pozycji 50 oznacza Glu, Leu, Thr^, Asp, Tyr, Lys, Asn,

    Ser, Ala, Ile, Val, His, Phe, Met lub Gln;

    Xaa w pozycji 51 oznacza Asn, Arg , e^^t, hro , !er , hhb ].bb His; Xaa w bpyycji 52 oznacza Asn, hs, , hg, , Iu, , lC, , erb Ha Thr; Xaa w pozycji 53 oznacza Leu, Thry Ala, Gly, Glu, Pro, Lys, Ser lub Met; Xaa w pozycji 50 oznacza Arg, Asp, Ile, Ser, Val, Thh, Gln, Asn, Lys, His, Ala lub Leu; Xaa w pozycji 55 oznacza Arg, Thr, VzV, Si;, Leu lub Gly; Xaa w pozycji 56 oznacza Pro, Gly, Cys, Ser, Gln, Glu, Arg, His, Thr, Ala, Tyr^, Phe, Leu, Val lub Lys;

    Xaa w pozycji 57 oznacza Asn lub Gly;

    184 424

    Xaa w pozycji 58 oznacza Leu, Ser, Asp), Arg, Gln, Val lub Cys; Xaa w pozycji 59 oznacza Glu, Tyr, His, Leu, Pro lub Arg Xuu w pozycji 60 oznacza Al.a, Ser, Pro, Tyr?, Asn lub Thr Xaa w pozycji 61 oznacza Phe, Asn, Glu, Pro, Lys, Arg lub Ser; Xuu w pozycji 62 oznacza Asn, His, Val, Arg, Pro, Thr, Asp lub Ile; Xaa w pozycji 63 oznacza Arg, Tyr, Trp, Lys, Ser, His, Pro lub Val; Xaa w pozycji 64 oznacza Ala, Asn, Pro, Ser lub Lys; Xaa w pozycji 65 oznacza Val,· Thr, Pro, His, Leu, Phe lub Ser; Xaa w pozycji 66 oznacza Lys, Ile, Arg, Val, Asn, Glu lub Ser; Xaa w pozycji 67 oznacza Ser, Ala, Phe, Val, Gly/, Asn, Ile, Pro lub His; Xaa w pozycji 68 oznacza Leu, Val, Trp, Ser, Ile, Phe, Thr lub His; Xaa w pozycji 69 oznacza Gln, Ala, Pro, Thr, Glu, Arg, Trpn, Gly lub Leu; Xuu w pozycji 70 oznacza Asn, Leu, Val, Trp, Pro lub Ala Xuu w pozycji 71 oznacza Ala, Met, Leu, Pro, Arg, Glu, Thr,

    Gln, Trp lub Asn;

    184 424

    Xaa w X<ozycji 722 oznacza Ser, Glu, Met , Ala, His, Asn, Arg lub Asp; Xax w pozycji 77 oznacza Ala, Glu x Ao, x Mou , Ser, Giy, Thr lub Arg; Xxx w pozycji 74 Xznnaca Ile, Met, Thr, Pro, Arg, ily, Ali; Xxx w pozycji 74 Xznnxca Gil, Lys, Gl,x Asp, Prr, Thp, Arg, Ser, iln lub Leu; Xaa w pozycji 46 oznacza Ser, Val, Ala, Asn, Trp), ilu, Pro, ily lub Asp; Xax w pozycji 77 oznacza Ile, Ser, Arg, Thr lub Leu; Xxx w pozycji 78 oznacza Leu, Ala, Ser, ilu, Phe, ily lub

    Arg;

    Xai w Xozycji 77 oznacza Lys, Th, x Asn , Me,x Arg, Ile, Gly lub Asp; Xxa w Xozycji 80 oznacza Asn, Tr, ya, dyX Thr, Leu, Glu lub Arg; Xxa w Xozycji 88 oznacza Leu, G^ AI, , Trp, -Arg, Wl lub Lys; Xai w pozycji 82 oznacza Leu, iln, Lys, Trp, Arg, Asp, ilu , Asn, His, Thr, Ser, Ali, Tyr, Phe, Ile, Met lub Val; Xaa w pozycji 83 oznacza Pro, Ala, Thr, Trp, Arg lub Met

    184 424

    Λ7 _ _ Xaa w pozycji 84 oznacza Cys, Glu, Gly, Arg, Met lub Val; \ζ__ Xaa w pozycji 855 oznacza Leu, Asn, VaI Ilu GGl; - * Xaa w pozycji 86 oznacza Pro, Cys, Ar,, AAl llb Lys; Xaa w pozycji 87 oznacza Leu, Ser, Trp Ilu GGl; Xaa w pozycji 88 oznacza Ala, Lys, Ag,, Val llto Trp; Xaa w pozycji 89 oznacza Thr, Asp, Cyv, Luv, VlV, Gu,, His, Asn Ilu Isr; Xaa w pozycji 90 oznacza Ala, Pro, . Ser, Thr, Gly, Asp, Ile lub Met; Xaa w pozycji 91 oznacza Ala, Pro, Ser, Thr, Phe, Leu, Asp lub His; Xaa w pozycji 92 oznacza Pro, Phe, Arg, Ser, Lys, His, Ala, Gly, Ile lub Leu; Xaa v pozycj i 93 oznacza Tiar, 7\ — -^rsP^, Ser, Asn, Pro, Ala, Leu lub Arg; Xaa w pozycji 94 oznacza Arg, I le, Sof, Guv, Luf, VlV, GGl, Lys, His, Ala lub Pro; Xaa w pozycji 95 oznacza His, Gil, Pof , Ag, , 1iV , euv , GGi,;, Thr, Asn, Lys, Ser, Ala, TrT, V hę, Ile lub Tyr; Xaa w pozycji 96 oznacza Pro, f ys, Tyo, Gly, Ile lub Thr; Xaa w pozycji 97 oznacza Ile, Va!l Lys, Ala lub Ass; Xaa w pozycji 98 oznacza His, I le, Asf, Łev, Ap,, A1f, Thr, Glu, Gln, Ser, Phe, Met, Val, Lys, Arg, Tyr lub Pro;

    184 424

    Xaa w pozycji 99 oznacza ile, Leu, Arg , A^s^p , Val, Pro, Gln, Gly, Ser, Phe lub His; Xaa w pozycji 100 oznacza Lys, Tyr, Leu r His, Arg, He, Ser, Gln lub Pro; Xaa w pozycji 101 oznacza Asp), Pro, Met, Lys, His, Thr, Val, Tyr, Glu, Asn, Ser, Ala, Gly, Ile, Leu lub Gln;

    Xaa w pozycji 102 oznacza Gly, Leu, Glu, Lys, Ser, Tyr lub

    Pro;

    Xaa w pozycji 103 oznacza Asp lub Ser;

    Xaa w pozycj 104 oznacza Trp, Val, Cys, Tyr, Thr, Mee, Pro, Leu, Gln, Lys, Ala, Phe lub Gly; Xaa w ppozc j 105 oznacza Asn, Pro, Ala, Phe, Ser, Tt,, Gln, Tyr, Leu, Lys, Ile, Asp lub His; Xaa w pozycji 106 oznacza Glu, Ser, Ala, Lys, Th!?, Ile, Gly lub Pro; Xaa w pzzccji 108 oznacza .Arg, Lys, Asp, Leu, Thr, IIu, Gln, His, Ser, Ala lub Pro; Xaa w pozycji 109 oznacza Arg, Thr, Pro, Glu, Tyr^, Leu, See lub Gly; Xaa w pzzccji 110 oznacza Lys, Ala, Asn, TTh, Llu, Arg, Gln, His, Glu, Ser lub Trp;

    Xaa w pozycji 111 oznacza Leu, Ile, Arg, Asp lub Met;

    Xaa w pozycji 112 oznacza Thr, Val, Gln, Tyr, Glu, His, Ser lub Phe;

    184 424

    Xaa w pozycj i 113 oznacza Phe, Ser, Cys, His, Gly, Trp,

    Tyr, Asp?, Lys, Leu, lle , Va 1 lub Ass;

    Xaa w pozycj i 114 oznacza Τ,, i Cys, iis, Ser, Trp, Nrg lub

    Leu; Xaa w pozycji 115 oznacza Leu, Asn, Val, Pro, Arg, Ala, iis, Thr, Trp lub Met; Xaa w pozycji 116 onaccai Lys, Leu, Pro, Thr, Met, Asp, Val, Glu, Arg, Trp, Ser, Asn, His, Ala, Tyr, Phe, Gin lub Ile; Xaa w pozycji 117 oznacza Thr, Ser, Asn, Ile, Trp, Lys lub Pro; Xaa w pozycji 118 oznacza Leu, Ser, Pro, Ala, Glu, Cys, Asp lub Tyr; Xaa w pozycji 119 oznacza Glu, Ser, Lys, Pro, Leu, Thr, Tyr lub Arg; Xaa w pozycji 120 oznacza Asn, Ala, Pro, Leu, His, Val lub Gln; Xaa w pozycj 1^3. oznacza Ma, Ser, Ile, AatI; Ppo, Lls, Asp lub Gly; Xaa w pozycji 122 oznacza Gln, Ser, Met, Top, Arg, Phe, Pro, His, Ile, Tyo lub Cys; Xaa w pozycji 123 oznacza Ala, Met, Glu, His, Sio, Pro, Tyo

    lub Leu;

    184 424 gdzie ewentualnie od 1 do 14 aminokwasów można usunąć z końca N i/lub od 1 do 15 aminokwasów można usunąć z końca C; oraz gdzie od 0 do 44 aminokwasów oznaczonych jako Xaa jest różnych od odpowiadających aminokwasów natywnej (1-133) ludzkiej interleukiny-3; oraz gdzie koniec N łączy się z końcem C bezpośrednio lub przez linker (L2) umożliwiający łączenie końca N z końcem C i posiadający końce C i N przy 15 aminokwasach:

    26-27 49-50, 83-84 27-28 50-51 84-85 28-29 51-52 85-86 29-30 52-53 86-87 30-31 53-54 87-88 31-32 54-55 88-89 32-33 64-65 89-90 33-34 65-66 90-91 34-35 66-67 91-92 35-36 67-68 92-93 36-37 68-69 97-98 37-38 69-70 98-99 38-39 70-71 99-100 39-40 71-72 100-101 40-41 72-73 101-102 41-42 82-83 102-103 lub 103-104;

    lub (III) polipeptydu, obejmującego: modyfikowaną sekwencję aminokwasową. liganda ludzkiego c-mpl o wzorze:

    SerProAnaProProAlaCysAspLeιArgValLeuSerLysLeuLeuArgAspSer

    15 10 15

    HisValLeuHisSerArgLelSerlnsCysProlluValHisProLeuProThrPro

    20 25 30 35

    VanLelLelProAlaVanAspPheSerLelGlylnllrpLyslhrGnnMetlllGnu

    40 45 50 55 lhrLysAnalnnAspIneLellnyAlaVanlhrLelLeuLelGnlGnyValMetAna

    60 65 70 75 snaArglnyGlnLeuGnyProlhrCysLelSerSerLe^iLeuGnyGlsLeuSerGny 80 85 90 95 lnsVanArgLelLeuLellnyAnaLeyGnsSerLeuneuGnylhrGnnXaaXaaXaa

    100 105 110

    184 424 aαl11yAgghhrThgA1αHisLysAsoPgoAsnA1αIlMrheLeuSerPhe11nHis

    115 120 125 130

    LelLeuAggGnyLysVa1ArgrheLelMetLeuVa111y11ySegThrLeuCysVa1

    135 140 145 110

    AggrggA1aProPgoThrThrrlaVa1PgoSerrrgThrSerLeuVa1LeuThrLeu

    155 160 165 170

    Asnl1lLMlProrsnrrgThgSer11yLeuLel11uThrAsnrheThgrlaSegA1a

    175 180 185 190

    AggThrhhg11ySMr11yeMuLeuLysTrp11n11n11yPheArgrlaeysIlePro

    195 200 205

    11yLMuLelAsn11nThrSerAggSMgLelurspi1nI1erro11yTygLMursnArg

    210 215 220 222

    I1eHisGluLeuLeuAsnGlyTyrArgGlyLeuPhePro11yProSerAggAggThg

    230 235 220 225

    Lel11yA1argoAspI1eSerSeg11yThgSegAspThg11ySereeuProPgoAsn

    250 255 260 265 eeu11nPgoG1yTyrSerProSerrgoThrHisrroProThg11yi1n1TyrhhrLel

    270 275 280 285

    PheProLeuProProThrLellProThrProValVa111nLeuHίsrroLelLeuPgo

    290 295 300

    AspPgoSerA1lPgoThrProThrrgoThreerrgoLMueeuAsnThgSMrTygThg

    305 310 331 332

    Hiseer11nAsneeleer11n11l11y (SEQ ID nr: 3)

    325 330 332

    153

    184 424 gdzie Xaa w pozycji 112 usuwa się lub Leu, Ala, Val, Ile, Pro, Phe, Trp lub Met;

    Xaa w pozycji 113 usuwa ssę iub Ρπ\ Phr,A ip Val, Leu, Ile,Trp lubMet;

    Xaa w pozycji 114 usuwa ssę iubPrOl PhpAir, Val. Teu. ΙΑ,ΊΙρlubMet;

    Xaa w pozycji 115 usuwa się lub Gln, Gly, Ser, Thr·, Tyr lub Asn;

    oraz gdzie koniec N łączy się z końcem C bezpośrednio lub przez linker (I2) um^t^żUwiiajscy łączenie końca N z końcem C i posiadający końce C i N przy aminokwasach:

    26-27 51-52 108-109 27-28 52-53 109-110 28-29 53-54 110-111 29-30 54-55 111-112 30-31 55-56 112-113 32-33 56-57 113-114 33-34 57-58 114-115 34-35 58-59 115-116 36-37 59-60 116-117 37-38 78-79 117-118 38-39 79-80 118-119 40-41 80-81 119-120 41-42 81-82 120-121 42-43 82-83 121-122 43-44 83-84 122-123 44-45 84-85 123-124 46-47 85-86 124-125 47-48 86-87 125-126 48-49 87-88 126-127 50-51 88-89 lub 127-128;

    lub (IV) polipeptydu, obejmującego: modyfikowaną, sekwencję aminokwasową hIL-3 o wzorze:

    Ala Pro Met Thr Gln hhb TTl^r Ser Leu Lys Thr Ser Trp Val Asn 1 5 10 15 Cys Xzz Xzz Xaa Xaa Xab Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xzz 20 25 33 Xaa Xzz Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Asn Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 35 00 45 Xzz Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xzz Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 50 55 60 Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 65 70 75 Xzz Xzz Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

    80 85 90

    184 424

    Xaa Xaa Xar Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa X aa 105 95 100 Xaa Phe Xaa raa Xar Xaa Xaa Xaa Xoa Xxo Xxx Xxx Xox X oa Xxx 110 115 122 Xxx Xaa Xxx 01n lir Thn TTh 0er Arr eer Air iuA a0i 125 30 0 (SE0 ID nr o 2; t gdzie Xxx w pozycji 17 oznacza Ser, yys , , <^21, o Az, o Met, Gln lub Arg; Xxx w pozycji 18 oznacza Asn, His, Leu , Ile, Phe, Arg lub Gln; Xaa w pozycj i 19 oznacza Met, Pile, Ile , Arg, Gly, Ala lub Cys; Xaa w pozycji 20 oznacza Ile, Cys, Gln , Glu, Arg, Ppa lub AAx; Xaa w pozycji 21 oznacza Asp, Phe, Lys, Ag,o αχ,o AC,o Glu, Gln, Asn, Thr, Ser lub VxI; Xaa w pozycji 22 oznacza Glu, Trp, Pro, Ser, Ala, His, Asp, Asn, Gln, Leu, Val lub Gly; Xaa w pozycji 23 oznacza Ile, Val, Ala, Gly, Trp, Lys, Phe, Leu, Ser lub Arg; Xaa w pozycji 24 oznacza Ile, Gly, Vx1 , Arg, Ser, Phh lnu? Leu; Xaa w pozycji 25 oznacza The, His, Gly , Gln, Arg, Ppa lub

    Ala;

    184 424

    Xaa w pozycji 26 oznacza His, Thr, Phe, Gly, Arg, Ala lub Trp; Xaa w pozycji 27 oznacza Leu, Gly, Arg, Tho, Ser lub Ala Xaa w pozycji 28 oznacza Lys, Arg, Leu, Gln, Gly, Pro, Val lub Trp; Xaa w pozycji 29 oznacza Gln, Ass, Leu, Pro, Arg lub Val Xaa w pozycji 30 oznacza Pro, His, Tho, Gly, Asp, Gls, : Ser, Leu lub Lys; Xaa w pozycji 31 oznacza Pro, Asp, Gly, Ala, Arg, Leu lub Gln; Xaa w pozycji 32 oznacza Leu, Val, Arg, Gln, Asn, Gly, Ala lub Glu; Xaa w pozycji 33 oznacza Pro, Leu, Gls, Ala, Thr lub Glu z Xaa w pozycji 34 oznacza Leu, Val, Gly, Ser, Lys, Glu, < iln , Tho, Arg, Ala, Phe, Ile lub Met; Xaa w pozycji 35 oznacza Leu, Ala, Gly, Ass, Pro, Gln lub Val; Xaa w pozycji 36 consacai Asp, Leu lub Val; Xaa w pozycji 3Ί oonsaca Phe, Sev , Prv, Trp lub He; Xaa w pozycji 31 oznacza Asn lub Ala; Xaa w pozycji 4 0 oorisaza Leu, Τη? lub Arg; Xaa w pozycji 41 oznacza Asr, Cys, Arg, Leu, His, Met lub

    Pro;

    184 424

    Xaa w pozycji 42 oznacza Gly, Asp, Sio, Cys, Asn, Lyi, Tho, Leu, Val, Glu, Phe, Tyr, Ile, Met lub Ala; Xaa w pozycji 43 oznacza Glu, Asn, Tyo, Leu, Phe, Asp), Ala, Cys, Gln, Arg, Thr, Gly lub Ser; Xaa w pozycji 44 oznacza Asp, Ser, Leu, Arg, Lys, Tho, Met, Top, Glu, Asn, Gln, Ala lub Pro; Xaa w pozycji 45 oznacza Gln, Poo, Phe, Val, Met, Leu, Tho, Lys, Trp, Asp, Asn, Arg, Ser, Ala, Ile, Glu lub His; Xaa w pozycji 46 oznacza Asp, Phe, Seo, Tho, Cys, Glu, Asn, Gln, Lys, His, Ala, Tyr, Ile, Val lub Gly; Xaa w pozycji 71 oznacza H, , Gl, , Val , Ser , Arg, Pito lub His; Xaa w pozycji 48 oznacza Leu, Ser, Cys, Arg, Ile, Hii, Phe, Glu, Lys, Tho, Ala, Met, Val lub Asn; Xaa w pozycji 49 oznacza Met, Arg, Ala, Gly, Poo, Asn, His lub Asp; Xaa w pozycji 50 oznacza Glu, Leu, Tho, Aip, Tyo, Lys, Asn, Ser, Ala, Ile, Va, i Hi, i Ptei Met lub Gln; Xaa w pozycji 511 oznacza An,i Arg, Met , Pro, , Seo, TTr lub His; Xaa w pozycji 52 oznacza As,i H±Si Arg , Llu, , Gly, Ser lub

    Thr;

    184 424

    Xaa w pozycji 53 oznacza Leu, Thr, Ala, Gly, Glu, Pro, Lys, Ser lub Met; Xaa w pozycji 54 oznacza Arg, Asp, Ile, Ser, Val, Thr, Gln, Asn, Lys, His, Ala lub Leu; Xaa w pozycji 55 oznacza Arg, Thr, Val, Ser, Leu lub Gly Xaa w pozycji 56 oznacza Pro, Gly, Cys, Ser, Gln, Glu, Arg, His, Thr, Ala, Tyr, Phe, Leu, Val lub Lys; Xaa w pozycji 57 oznacza Asn lub Gly; Xaa w pozycji 58 oznacza Leu, Ser, Asp), Arg, Gln, Val lub Cys; Xaa w pozycji 59 oznacza Glu, Tyr:, His, Leu, Pro lub Arg Xaa w pozycji 60 oznacza Ala, Ser, Pro, Tyr, Asn lub Thr ; Xaa w pozycji 61 oznacza Phe, Asn, Glu, Pro, Lys, Arg lub Ser; Xaa w pozycji 62 oznacza Asn, His, Val, Arg, Pro, Thr, Asp lub Ile; Xaa w pozycji 63 oznacza Arg, Tyr, Trp, Lys, Ser, His, Pro lub Val; Xaa w pozycji 64 oznacza Ala, Asn, Pro, Ser lub Lys; Xaa w pozycji 65 oznacza Val, Thr, Pro, His, Leu, Phe lub Ser; Xaa w pozycji 66 oznacza Lys, Ile, Arg, Val, Asn, Glu lub

    Ser;

    184 424

    Xaa w pozycji 67 ozz^i^z^a Ser, Al, , Phe, Vvl, Giy, Am, Ile, Pro lub His; Xaa w pozycji 68 oznacza Leu, Ca, , ro, , Ser, Ile, Phe, Thr lub His; Xaa w pozycji 69 oozacza iin, Al, Pro, Thg, Ginu AAg, Th,, ily lub Leu; Xxx w pozycji 70 Go^acs Asn, Lmu, ^ć^l. Trp, Pro luo Ma ; Xaa w pozycji 71 Dozacza Ala, Me,, Leu, Aa,, Giu, Thr,

    iln, Trp lub Asn;

    aaa w pozycji 72 oznacza Ser:, IAu, Met, Mc, His, Asn, Agg lub Asp; Xcc w pozycji 73 oznacza Ala, Glu , Ap, , Mu, , Mr, , Μ, , h,r lub Arg; Xcc w pozycji 74 ozaaαca Ile, Met, Thr, Pro, Arg, Gly, Ala; aαa w pozycji 75 coiiaGca ilu, Ly, , Gly, AAs, Poro Trg, AAg, Ser, iln lub Len; aαx w pozycji 76 oznacza Ser, Vcl, Ala, Asn, Trp, ilu, Oro, ily lub Asp; aaa w pozycji 77 oznacza Ile, Ser, Arg, Thg lub Leu; acα w pozycji 78 oznacza Leu, Alc, Ser, ilu, Phe, ily lub Agg; Xcc w pozycji 79 oznacza Lys, Thr, Asn, Met, Arg, Ile, ily

    lub Asp;

    184 424

    Xaa w pozycji 80 oznacza Asn, Trrp, Val, Gly, The, Leu, Glu lub Arg; Xaa p pozycji 81 oznacza Leu, Gln, Gly, Ala, Trp, Arg, VaU lub Lys; Xaa w pozycji 82 oznacza Leu, GUs., Lys, Trp, Arg, Asp, Glu, Asn, His, Thr, Ser, Ala, Tyr, Phe, Ile, Met lub Val; Xaa p pozycji 83 oznacza Pro, AA a, Thr, Trp, Arg lub Met Xaa p pozycji 84 oznacza Cys, ,]^u, Gly/, Arg, Met lub Val Xaa p pozycji 85 oznacza Leu, Asn, Val lub Gln; Xaa p pozycji 86 oznacza Pro, , ys, Arg,, AULa lub Lys; Xaa p pozycji 87 oznacza LeUu , er, Trp lub Gl;; Xaa p pozycji 88 oznacza Alu, , ys, Arg, Val lub Trp; Xaa p pozycji 89 oznacza Thr, Asp, Cys, Leu, Val, Glu, His, Asn lub Ssr; Xaa p pozycji 90 oznacza Ala, Po,, Sr, , Thr, G^ly/, TAsp, IIe

    lub Met;

    Xaa p pozycji 91 oznacza Ala, Pr, , Se, , Thr, Phe, Leu, AAsp lub His; Xaa p pozycji 92 oznacza Pro, Phe, Arg, Ser, Lys, His, Ala, Gly, Ile Uub Leu; Xaa p pozycji 93 oznacza Thr, Asp, Se, , Asn, Pro, TALa, Llu lub Arg; Xaa p pozycji 94 oznacza Arg, Ile, Ser, GUu, Val, Gln, Lys,

    His, Ala lub Pro;

    184 424

    Xaa w pozycji 95 oznacza His, (Sin , roo , Ar, , Val , Leu , Gly,

    Thr, Asn, Lys, Ser , Ala, Trp , Phe, Ile lub Tyjc;

    Xaa w pozycji 99 oznnaza Pro, Lys, Tyr, Gly, Ile lub Thr;

    Xaa w pozacji 99 oznacz PIe, Val, Lys, Ala lub Asn;

    Xaa w pozycji 98 oznacza His, ILs , As,, L^o, Asp, Ma, Thr,

    Glu, Gln, Ser, Phe, Met, Val, Lys, Arg, Tyr lub Pro;

    Xaa w pozycji 99 oznacza Ile, Leu, Arg, Asp, Val, Pro, Gln, Gly, Ser, Phe lub His;

    Xaa w pozycji 100 oznacza Lys, Tyr, Leo , His, Arg, Ile, Ser, Gln lub Pro; Xaa w pozycjj 101 oznacza Asp, Pro, MtO , Lys, His, Thr, Val, Tyr, Glu, Asn, Ser, Ala, Gly, Ile, Leu lub Gln;

    Xaa w pozycji 102 oznacza Gly, Leu, Glu, Lys, Ser, Tyr lub Pro; Xaa w pozycji 103 oznacza Asp lub Ser; Xaa w pozycjj 104 oonacza Trp, Val, Cys , Tyr, Thr, Met, Pro, Leu, Gln, Lys, Ala, Phe lub Gly; Xaa w pozycjj 105 ozasaca Asn, Pro, Ais, Phe, Ser, Τιρ, Gln, Tyr, Leu, Lys, Ile, Asp lub His; Xaa w pozycji 106 oznacza Glu, Ser, Ala, Lys, Thr, Ile, Gly lub Pro; Xaa w pozycjj 108 oonacza -Arg, Lys, asp], , Leu, Thr, Ile, Gln, His, Ser, Ala lub Pro;

    184 424

    Xxx w pozycj 109 oznacza .Arg, TTr, Pry, Glu, Tg,o Leu, Ser lub Gly; Xxx w pozyoyi 0 10 oznacza Lys , Ala, Asn, Thr, Leu, Arg, Gln, His, Glu, Ser lub Tep; Xxx w ροζγ^Ι 13.1. CyZllαj.c Leu, Ι1θ, A.rg, Asp lub Met; Xxx w pozycj 112 oyzacza Thr, VaX, Gln, Tyr, Gu,o His, SSr lub PIi; Xxx w pozyzIc 0 11 Phe , Ser, Cys, Hii, Gly, Trp, Tyr, Asp, Lys, Leu, Ile, VaU lub Asn Xxx w pozycj 114 oznacza Tyr, Cys, His, eero Ar, , Arg lut:) Leu; Xaa w pozyzic 0 11 oznacca Leu , Asn, VaU, Pito, Arg, Ala, His, Thr, Tep . Uub Met; Xxx w pozycjj 0 11 ozzacc^ Lys , Leu, Pro, TTh, Mer, Asp, Val, GUu, Aeg, Trp, See, Asn, His, Ala, Tyr, Phe, Gln luu Ile; Xxx w pozycj 117 oznacza Thr, Ser, Asn, Uleo Arp, Lys luu Pro; Xaa w pozycji 118 oznacz; Leu, Ser, Pro, Ala, du^, Ccc, Asp lub Tyr; Xxx w pozycji 119 oznacza Glu, Ser, Lys, Pro, Lee, TTr, Trr

    lub Aeg;

    184 424

    Xaa w pozycji 11^0 oznacza An,i la,i Oro , 1u, , Hi, i Vi i lrnb

    Gln;

    Xaa w pozycji 122 oznncza Ala, Se, i ie, i Asn, Pr,i L^y^^i Asp lub Gly;

    Xaa w pozycj i 12 2 ziznacz a Gli , Sei , Mei , Trp , Ar i , Phe, Poo, His, Ile, Tyo lub Cys;

    Xaa w pozycji H2 oznacza Alei, Met, Gl, , Hi,i Se, i PrOi Tyr lub Leu;

    gdzie ewentualnie od 1 do 14 aminokwasów można usunąć z końca N i/lub od 1 do 15 aminokwasów można usunąć z końca C; oraz gdzie od 1 do 44 aminokwasów oznaczonych jako Xaa jest różnych od odpowiadających aminokwasów natywnej (1-133) ludzkiej interleukiny-3; lub (V) czynnika stymulującego kolonię; i gdzie L: oznacza linker, umożliwiający łączenie R z R^ pod warunkiem, że co najmniej R: lub R wybiera się spośród polipeptydów o wzorze (I), (II) lub (III); oraz wymienione białko krwiotwórcze może być bezpośrednio poprzedzone przez (metioninę'¹), (alaninę'¹) lub (metioninęΊ, alaninę’¹).

    Bardziej zalecanymi punktami przerwania, w których wykonuje się nowy koniec C i koniec N, w powyższym pollpeptycdzie ((), są: 38-39, 39-40. 40-41, 41-42, 48-49,

    54-55, 55-56, 56-57, 57-58, 55-59, 59-60, 60-6E 61-62, 62-63, 64-65, 6^-^^, 66-67, 67-68, 68-69, 69-70, 96-97, ^25-126, ^^6-127, 127-128, 128-129, 129-130, 1905131, 131-132, 132133, 133-134,134-135,135-136, 136-137, 137-138, 138-139,139-140, 140-141 i 141-145.

    Najbardziej zalecanymi punktami przerwania, w których wykonuje się nowy koniec C i koniec N, w powyższym polipeptydzie (I), są: 38-39,48-49,96-97. 125-126,132-133 i 24--142.

    Bardziej zalecanymi punktami przerwania, w których wykonuje się nowy koniec C i koniec N, w powyższym polipeptycdZe I(II, są: 28-29, 29-30, 30-31, 31 -32, H-H, 33-34, 94-35, 35-36, 36-37, 37-38, 33--9, 39-40, 6^-^^, 67-68, 68-69, 69-70, 70-71, 84-85, 85-86, 86-87, 87-88, 88-89, 89-90, 90-91, 98-99, 99-100, 100-101 i 101-105.

    Najbardziej zalecanymi punktami przerwania, w których wykonuje się nowy koniec C i koniec N, w powyższym polipeptydzie (II), są: 34-35, 69-70 i 90-91.

    Bardziej zalecanymi punktem i pzzenYaniaI wktóyych wykonuje się nowy l^omicc C i koniec N, wpow^żp^ro polip cpU-dzie (ΠΪ) lub sekwencjiamInokwasowej (SEQ ID nr: 256), są: 80-81, 81-82, 82-83, 83-84, 84-85, 85-86, 86-87, 108-109, 109-110, 110-111, 111-112, 112-113, 1-3-114, 114-1-9, 115-116, 116-117, 117-118, 118-119, 119-120, 120-151, 121-122, 122-123,123-124, 154-159, 125-156 i 126-127.

    Najbardziej zalecanymi punktami przerwania, w których wykonuje się nowy koniec C i kumie N, wpowyżpoym polipeplyd:cie (1U) lub lub w-mewi aminoPevaoow'ej wSEQ ID nr: 2556 są; S--82, 108-11)0, 115-1165 119-I21, 122-123 iH 5Il59.U-a\wjioneeo egoisto receptora wieloczynnościowego może także reprezentować następujący wzór:

    (T^,)a-(L¹)b--X¹-(L)c-X²-(L²)d-(T²)e

    X'^)_c-X²X)AfL(L)_c-Y² w którym: χ1 oznacza peptyd, zawierający sekwencję aminokwasową, odpowiadającą resztom n+1 do J białka oryginalnego, posiadającego reszty aminokwasowe ponumerowane kolejno od 1 do J z końcem aminokwasowym przy reszcie 1; L oznacza ewentualny linker; χ2 oznacza peptyd, zawierający sekwencję aminokwasową o resztach od 1 do n białka oryginalnego; γ1 oznacza peptyd, zawierający sekwencję aminokwasową, zawierającą sekwencję

    184 424 o resztach n=1 do K białka oryginalnego, posiadającego reszty aminokwasowe ponumerowane kolejno od 1 do K z końcem aminowym przy reszcie 1; Y² oznacza peptyd, zawierający sekwencję aminokwasową o resztach od 1 do n białka oryginalnego; L¹ i L2 oznaczają ewentualne rozdzielacze peptydowe: n jest liczbą całkowitą, wynoszącą od 1 do J-1; a i e wynoszą albo 0 albo 1, pod warunkiem, że zarówno a jak i e nie mogą być jednocześnie 0; oraz T¹ i T2 oznaczają białka.

    Ujawnienie dotyczy także rekombinowanych wektorów ekspresji, zawierających sekwencje nukleotydowe, kodujące agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych, pokrewnych drobnoustrojowych układów ekspresji oraz sposobów wytworzenia agonisty krwiotwórczego receptora wieloczynnościowego. Ujawniono także kompozycje farmaceutyczne, zawierające agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych i sposoby użycia agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych.

    Oprócz użycia agonistów krwiotwórczych receptorów wieloczynnościowych in vivo, uwidacznia się, że zastosowania in vitro będą obejmować zdolność do stymulowania szpiku kostnego oraz aktywacji krwinek i wzrostu, przed infiizżądo pacjenta.