PL184531B1 - Kompozycja o opóźnionym uwalnianiu ludzkiego hormonu wzrostu do wytwarzania leku do terapii - Google Patents
Kompozycja o opóźnionym uwalnianiu ludzkiego hormonu wzrostu do wytwarzania leku do terapiiInfo
- Publication number
- PL184531B1 PL184531B1 PL96323832A PL32383296A PL184531B1 PL 184531 B1 PL184531 B1 PL 184531B1 PL 96323832 A PL96323832 A PL 96323832A PL 32383296 A PL32383296 A PL 32383296A PL 184531 B1 PL184531 B1 PL 184531B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- hgh
- polymer
- metal cation
- growth hormone
- human growth
- Prior art date
Links
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 title claims abstract description 261
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 title claims abstract description 261
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 title claims abstract description 258
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 85
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 title 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims abstract description 71
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims abstract description 71
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims abstract description 70
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 49
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 claims abstract description 38
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 14
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 14
- 229920000249 biocompatible polymer Polymers 0.000 claims abstract description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 111
- 239000011701 zinc Substances 0.000 claims description 33
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 30
- 235000004416 zinc carbonate Nutrition 0.000 claims description 30
- 239000011667 zinc carbonate Substances 0.000 claims description 30
- 229910000010 zinc carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 30
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 26
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 26
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 23
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 19
- ONIOAEVPMYCHKX-UHFFFAOYSA-N carbonic acid;zinc Chemical compound [Zn].OC(O)=O ONIOAEVPMYCHKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N Zinc dication Chemical compound [Zn+2] PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 15
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 11
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 claims description 8
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 claims description 8
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 5
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Polymers OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 claims description 4
- ZOIORXHNWRGPMV-UHFFFAOYSA-N acetic acid;zinc Chemical compound [Zn].CC(O)=O.CC(O)=O ZOIORXHNWRGPMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 4
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims description 4
- 239000004246 zinc acetate Substances 0.000 claims description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 3
- 229920001610 polycaprolactone Polymers 0.000 claims description 3
- 239000004632 polycaprolactone Substances 0.000 claims description 3
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 claims description 3
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 claims description 3
- 229920006149 polyester-amide block copolymer Polymers 0.000 claims description 3
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 claims description 3
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 claims description 3
- 229920001710 Polyorthoester Polymers 0.000 claims description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims description 2
- 239000002745 poly(ortho ester) Substances 0.000 claims description 2
- 229920002721 polycyanoacrylate Polymers 0.000 claims description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims description 2
- 239000003405 delayed action preparation Substances 0.000 claims 2
- 206010013883 Dwarfism Diseases 0.000 claims 1
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 claims 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 claims 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 claims 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 claims 1
- 230000000899 immune system response Effects 0.000 claims 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims 1
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 claims 1
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 235000014380 magnesium carbonate Nutrition 0.000 claims 1
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 claims 1
- 208000003068 pituitary dwarfism Diseases 0.000 claims 1
- 210000003635 pituitary gland Anatomy 0.000 claims 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 56
- 229920001606 poly(lactic acid-co-glycolic acid) Polymers 0.000 description 43
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 31
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 20
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 20
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 17
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 15
- FMRLDPWIRHBCCC-UHFFFAOYSA-L Zinc carbonate Chemical compound [Zn+2].[O-]C([O-])=O FMRLDPWIRHBCCC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 14
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 10
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 9
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 9
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 9
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 8
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 6
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 6
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 6
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 5
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 5
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 5
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 5
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N Pentane Chemical compound CCCCC OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 4
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 4
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 4
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 4
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 4
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 4
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 4
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 1,4-dioxane-2,5-dione Chemical compound O=C1COC(=O)CO1 RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 3
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 3
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 3
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 3
- -1 e.g. Substances 0.000 description 3
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 3
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 3
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000000935 solvent evaporation Methods 0.000 description 3
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 3
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 description 2
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 2
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 2
- 102000004218 Insulin-Like Growth Factor I Human genes 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 2
- 239000008135 aqueous vehicle Substances 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000000366 juvenile effect Effects 0.000 description 2
- JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N lactide Chemical compound CC1OC(=O)C(C)OC1=O JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 2
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 2
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 description 2
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 2
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 2
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 2
- 206010003497 Asphyxia Diseases 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000792859 Enema Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000599951 Homo sapiens Insulin-like growth factor I Proteins 0.000 description 1
- 101001044927 Homo sapiens Insulin-like growth factor-binding protein 3 Proteins 0.000 description 1
- 108090001117 Insulin-Like Growth Factor II Proteins 0.000 description 1
- 102000048143 Insulin-Like Growth Factor II Human genes 0.000 description 1
- 241001082241 Lythrum hyssopifolia Species 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002744 anti-aggregatory effect Effects 0.000 description 1
- 208000008784 apnea Diseases 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006472 autoimmune response Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920003123 carboxymethyl cellulose sodium Polymers 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000005266 casting Methods 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000007920 enema Substances 0.000 description 1
- 229940095399 enema Drugs 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000013265 extended release Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- BCQZXOMGPXTTIC-UHFFFAOYSA-N halothane Chemical compound FC(F)(F)C(Cl)Br BCQZXOMGPXTTIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003132 halothane Drugs 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 102000044162 human IGF1 Human genes 0.000 description 1
- 102000057148 human IGFBP3 Human genes 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 description 1
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 1
- 150000003891 oxalate salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229920001281 polyalkylene Polymers 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 238000012667 polymer degradation Methods 0.000 description 1
- 239000003505 polymerization initiator Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000000751 protein extraction Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- IHBMMJGTJFPEQY-UHFFFAOYSA-N sulfanylidene(sulfanylidenestibanylsulfanyl)stibane Chemical compound S=[Sb]S[Sb]=S IHBMMJGTJFPEQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- WGIWBXUNRXCYRA-UHFFFAOYSA-H trizinc;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylate Chemical compound [Zn+2].[Zn+2].[Zn+2].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O.[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O WGIWBXUNRXCYRA-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 238000011179 visual inspection Methods 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- YZYKBQUWMPUVEN-UHFFFAOYSA-N zafuleptine Chemical compound OC(=O)CCCCCC(C(C)C)NCC1=CC=C(F)C=C1 YZYKBQUWMPUVEN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000006076 zinc citrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011746 zinc citrate Substances 0.000 description 1
- 229940068475 zinc citrate Drugs 0.000 description 1
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011686 zinc sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000009529 zinc sulphate Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/27—Growth hormone [GH], i.e. somatotropin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1611—Inorganic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
- A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
- A61K9/1647—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/02—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
1. Kompozycja o opóznionym uwalnianiu ludzkiego hormonu wzrostu do wytwa- rzania leku do terapii, zawierajaca a) polimer zgodny biologicznie, i b) czastki ludzkiego hormonu wzrostu kompleksowanego kationem metalu, znamienna tym, ze stosunek mo- lowy kationu metalu do bialka jest wiekszy niz 4:1 i mniejszy niz 10:1. PL
Description
Przedmiotem wynalazku jest kompozycja o opóźnionym uwalnianiu ludzkiego hormonu wzrostu do wytwarzania leku do terapii, zawierająca a) polimer zgodny biologicznie, i b) cząstki ludzkiego hormonu wzrostu kompleksowanego kationem metalu, charakteryzująca się tym, że stosunek molowy kationu metalu do białka jest większy niż 4:1 i mniejszy niż 10:1.
Kompozycja według wynalazku charakteryzuje się tym, że stosunek molowy kationu metalu do białka wynosi co najmniej 6:1.
Kompozycja według wynalazku charakteryzuje się tym, że jako kation metalu zawiera Zn(II).
Kompozycja według wynalazku charakteryzuje się tym, że zawiera kation metalu dodany do ludzkiego hormonu wzrostu w postaci soli rozpuszczalnej w wodzie.
Kompozycja według wynalazku charakteryzuje się tym, że zawiera kation metalu dodany do ludzkiego hormonu wzrostu w postaci octanu cynku.
Kompozycja według wynalazku charakteryzuje się tym, że zawiera cząstki ludzkiego hormonu wzrostu kompleksowanego kationem metalu, rozproszone w polimerze zgodnym biologicznie.
Kompozycja według wynalazku charakteryzuje się tym, że zawiera polimer wybrany z grupy obejmującej polilaktyd, poliglikolid, poli(laktydo-koglikolid), polikwas mlekowy, polikwas glikolowy, polikaprolakton, poliwęglan, poliesteramid, polibezwodnik, poliaminokwas, poliortoester, policyjanoakrylan, polidioksanon, poliszczawian alkilenowy, poliuretan, ich mieszaniny i kopolimery.
Kompozycja według wynalazku korzystnie zawiera polimer wybrany z grupy obejmującej polilaktyd, poliglikolid, poli(laktydo-koglikolid).
Kompozycja według wynalazku korzystnie zawiera cząstki ludzkiego hormonu wzrostu kompleksowanego kationem metalu obecne w polimerze w stężeniu wynoszącym od 0,1% do 30% wagowych, korzystnie od 0,1% do 20% wagowych.
Kompozycja według wynalazku korzystnie zawiera cząstki ludzkiego hormonu wzrostu kompleksowanego kationem metalu obecne w polimerze w stężeniu wynoszącym 15% wagowych.
184 531
Kompozycja według wynalazku korzystnie zawiera polimer zgodny biologicznie zawierający również kation metalu.
Kompozycja według wynalazku korzystnie jako kation metalu zawiera Zn(II).
Kompozycja według wynalazku korzystnie zawiera kation metalu pochodzący z grupy soli obejmującej ZnCO3, Zn3(C6H5O7)2, Zn(OAc)2, ZnSO4 i ZnCl2.
Kompozycja według wynalazku korzystnie jako kation metalu zawiera Mg(II).
Kompozycja według wynalazku korzystnie zawiera kation metalu pochodzący z grupy soli obejmującej Mg(OHU MgCO3, Mg3(C6H5O7)2, Mg(OAc)2, MgSO4 i MgCl?.
Kompozycja według wynalazku charakteryzuje się tym, że stosunek kationu metalu do polimeru wynosi od 1:99 do 1:2 wagowo, korzystnie 1% wagowo.
Kompozycja ludzkiego hormonu wzrostu o opóźnionym uwalnianiu według wynalazku charakteryzuje się tym, że zawiera:
a) zgodny biologicznie poli(laktydo-koglikolid) z rozproszonym w nim Zn(II), przy czym Zn(II) dodany jest w postaci ZnCO3, i b) cząstki ludzkiego hormonu wzrostu (hGH) kompleksowanego Zn(II), przy czym Zn(II) dodany jest do ludzkiego hormonu wzrostu w postaci octanu cynku w stosunku molowym Zn:hGH wynoszącym 10:1, i cząstki ludzkiego hormonu wzrostu (hGH), kompleksowanego Zn(II), są obecne w polimerze w stężeniu 15% wagowych.
Kompozycja o opóźnionym uwalnianiu według wynalazku zawiera macierz polimerową z biologicznie zgodnego polimeru oraz cząstki biologicznie czynnego, stabilizowanego kationami metalu, hGH, przy czym cząstki te są rozproszone w biologicznie zgodnym polimerze.
Preparat hGH o opóźnionym uwalnianiu wytwarza się sposobem, który polega na rozpuszczaniu zgodnego biologicznie polimeru w rozpuszczalniku polimerowym w celu wytworzenia roztworu polimeru, rozproszeniu cząstek biologicznie czynnego, stabilizowanego hGH w roztworze polimeru i przeprowadzeniu polimeru w postać stałą w celu wytworzenia macierzy polimerowej zawierającej dyspersję cząstek hGH.
Stosowanie preparatu o opóźnionym uwalnianiu polega na zapewnianiu skutecznego terapeutycznie poziomu we krwi biologicznie czynnego, niezagregowanego ludzkiego hormonu wzrostu u pacjenta przez wydłużony okres, poprzez podawanie pacjentowi dawki preparatu o opóźnionym uwalnianiu.
Do korzyści ze stosowania preparatu o opóźnionym uwalnianiu hGH należy uzyskanie dłuższego, bardziej długotrwałego i wyrównanego poziomu hGH we krwi in vivo, niższego początkowego piku hGH i większych korzyści leczniczych poprzez wyeliminowanie wahań poziomu hGH w surowicy. Korzystne jest również lepsze stosowanie się chorego do wskazań lekarza i akceptacja leczenia dzięki zmniejszeniu niezbędnej liczby wstrzyknięć. Korzystna jest również możliwość stosowania mniejszych ilości hGH, niż w przypadku schematu ze stosowaniem wstrzyknięć bolusu hGH, ponieważ poziom hGH w surowicy utrzymuje się na poziomie bardziej zbliżonym do progu terapeutycznego.
Ludzki hormon wzrostu (hGH), stosowany w kompozycji według wynalazku, stanowi biologicznie czynny hGH w postaci cząsteczkowej (monomerycznej, czyli niezagregowanej). hGH cząsteczkowy zwykle nie jest immunogenny.
Zagregowany hGH może powodować pobudzenie odpowiedzi immunologicznej, czego wynikiem jest powstanie przeciwciał skierowanych przeciwko hGH. Zjawisko to może zmniejszać skuteczność długofalowego leczenia hGH. Ponadto, hGH zagregowany może powodować pobudzenie odpowiedzi autoimmunologicznej na hGH endogenny.
Opóźnione uwalnianie biologicznie czynnego, niezagregowanego hormonu wzrostu jest to takie uwalnianie, w wyniku którego osiąga się oznaczalny poziom w surowicy biologicznie czynnego, monomerycznego hormonu wzrostu przez czas dłuższy, niż po bezpośrednim podaniu wodnego hGH. Korzystne jest, aby opóźnione uwalnianie stanowiło uwalnianie hGH przez okres co najmniej około tygodnia, najkorzystniej, przez okres co najmniej około dwóch tygodni.
Opóźnione uwalnianie biologicznie czynnego, niezagregowanego hGH z macierzy polimerowej może być ciągłe lub nieciągłe, ze względnie stałą lub zmienną prędkością uwalniania. Ciągłość uwalniania hGH i poziom uwalnianego hGH można ustalać, stosując m.in. jeden
184 531 lub więcej typów kompozycji polimerowych, różną ilość hGH w preparacie i/lub rozmaite zarobki w celu osiągnięcia pożądanego efektu.
Stabilizowany hGH stanowi biologicznie czynny, niezagregowany hGH w kompleksie z co najmniej jednym rodzajem wielowartościowego kationu metalu, o wartościowości wynoszącej co najmniej +2, ze składnika kationu metalu. W preparacie o opóźnionym uwalnianiu według wynalazku stabilizowany hGH jest obecny w postaci cząstek stałych.
Do odpowiednich wielowartościowych kationów metali należą kationy metali znajdujące się w zgodnych biologicznie składnikach kationów metali. Składnik kationu metalu jest biologicznie zgodny, jeżeli składnik kationowy jest w stosowanych ilościach nietoksyczny dla organizmu biorcy, jak również nie wykazuje istotnego szkodliwego lub niepożądanego działania na organizm biorcy, takiego jak np. odczyn immunologiczny w miejscu wstrzyknięcia.
Typowo, stosunek molowy składnika kationu metalu do hGH, dla kationu metalu stabilizującego hGH, wynosi od około 4:1 do około 10:1.
Korzystny kation metalu, stosowany do stabilizowania hGH, stanowi Zn+2 W korzystniejszym wykonaniu, stosunek molowy składnika kationu metalu, zawierającego kationy Zn+, do hGH, wynosi około 6:1.
Specjalista może ocenić, czy kation metalu nadaje się do stabilizowania hGH, różnymi technikami oznaczania stabilności, np. poprzez elektroforezę na żelu poliakryloamidowym, elektroogniskowanie, chromatografię z odwróconymi fazami, HPLC i testy potencyjne liofilizowanych cząstek hGH, zawierających kationy metalu, w celu oznaczenia potencji hGH po liofilizacji i w czasie uwalniania z mikrocząstek. W stabilizowanym hGH tendencja hGH do agregacji w mikrocząstce w czasie uwodniania in vivo i/lub do zmniejszania aktywności biologicznej lub potencji z powodu uwodnienia, lub z powodu procesów wytwarzania preparatu o opóźnionym uwalnianiu, lub z powodu charakterystyki chemicznej preparatu o opóźnionym uwalnianiu, zmniejsza się poprzez wytworzenie kompleksu hGH z co najmniej jednym typem kationu metalu przed kontaktem hGH z roztworem polimeru.
Stabilizowany hGH jest typowo stabilizowany w celu zapobieżenia istotnej agregacji in vivo w czasie wydłużonego okresu uwalniania. Istotną agregację definiuje się jako taką, która prowadzi do zagregowania co najmniej około 15% początkowej ilości monomeru hGH znajdującego się w kapsułkach. Korzystnie, agregację utrzymuje się na poziomie poniżej 5% początkowej ilości monomeru hGH. Korzystniej, agregację utrzymuje się na poziomie poniżej 2% początkowej ilości monomeru hGH.
W kompozycji hGH o opóźnionym uwalnianiu można również mieszać z innymi zarobkami, takimi jak środki powodujące pęcznienie lub dodatkowe środki stabilizujące, takie jak bufory, w celu stabilizowania hGH w czasie liofilizacji. Środki powodujące pęcznienie stanowią zazwyczaj substancje obojętne. Odpowiednie środki powodujące pęcznienie są znane specjalistom.
Polimer, lub macierz polimerowa, odpowiednie do stosowania w kompozycji o opóźnionym uwalnianiu według wynalazku, muszą być biologicznie zgodne. Polimer jest zgodny biologicznie wtedy, gdy polimer i wszelkie produkty jego rozpadu są nietoksyczne dla organizmu biorcy, jak również nie wykazują istotnych niepożądanych lub szkodliwych działań na organizm biorcy, takich jak odczyn immunologiczny w miejscu wstrzyknięcia.
Polimer kompozycji hGH o opóźnionym uwalnianiu musi również podlegać rozpadowi biologicznemu. Podatność na rozpad biologiczny w rozumieniu niniejszego opisu oznacza kompozycję, która in vivo rozpada się, tworząc substancje chemiczne o mniejszych cząstkach. Rozpad biologiczny może dokonywać się np. przez procesy enzymatyczne, chemiczne i fizyczne.
Odpowiednie zgodne biologicznie, podlegające rozpadowi biologicznemu polimery stanowią np. polilaktydy, poliglikolidy, poli(laktydo-koglikolidy), polikwas mlekowy, polikwas glikolowy, poiikwas mlekowo-koglikolowy, polikaprolakton, poliwęglany, poliesteramidy, polibezwodniki, polikwasy aminowe, poliortoestry, policyjanoakrylany, poli(p-dioksamton), poliszczawiany alkilenowe, poliuretany podlegające rozpadowi biologicznemu, ich mieszaniny i kopolimery.
Ponadto można modyfikować końcowe funkcyjności polimeru. Można np. stosować poliestry blokowane, odblokowane lub mieszaninę polimerów blokowanych i odblokowanych.
184 531
Polimer blokowany stanowi polimer znany ze stanu techniki, zwłaszcza polimer o zablokowanych końcowych grupach karboksylowych. Ogólnie, grupa blokująca jest pochodną inicjatora polimeryzacji i stanowi typowo grupę alkilową. Polimer odblokowany stanowi polimer znany ze stanu techniki, zwłaszcza polimer o wolnych końcowych grupach karboksylowych.
Specjalista może również ocenić dopuszczalną masę cząsteczkową polimerów stosowanych w kompozycji według wynalazku, biorąc pod uwagę takie czynniki, jak pożądana prędkość rozpadu polimeru, właściwości fizyczne, takie jak właściwości wytrzymałościowe, i prędkość rozpuszczania polimeru w rozpuszczalniku. Typowo, dopuszczalny zakres masy cząsteczkowej wynosi od około 2000 do około 2000000 daltonów. W korzystnym wykonaniu, polimer stanowi polimer lub kopolimer podlegający rozpadowi biologicznemu. W korzystniejszym wykonaniu, polimer stanowi poli(laktydo-koglikolid) (zwany w dalszym ciągu niniejszego opisu „PLGA”) o stosunku laktyd:glikolid wynoszącym około 1:1, i o masie cząsteczkowej od około 5000 do około 70000 daltonów. W jeszcze korzystniejszym wykonaniu, masa cząsteczkowa PLGA wynosi od około 6000 do około 31000 daltonów.
Ilość hGH zawartego w dawce mikrocząstki o opóźnionym uwalnianiu lub w innej kompozycji o opóźnionym uwalnianiu, zawierającej biologicznie czynne, stabilizowane cząstki hGH, stanowi ilość skuteczną w leczeniu lub zapobieganiu, którą może ocenić specjalista, biorąc pod uwagę takie czynniki, jak masa ciała chorego, schorzenie, rodzaj zastosowanego polimeru i prędkość uwalniania z polimeru.
W jednym z wykonań wynalazku preparat hGH o opóźnionym uwalnianiu zawiera od około 0,01% wagowych do około 50% wagowych biologicznie czynnych, stabilizowanych cząstek hGH. Ilość zastosowanych takich cząstek hGH będzie różna; zależy ona od pożądanego działania hGH, planowanego poziomu uwalniania, czasu, w którym hGH ma być uwalniany i długości trwania tego czasu. Korzystny zakres zawartości hGH w cząstce wynosi od około 0,1%) wagowych do około 30% wagowych cząstek hGH. Korzystniejszy zakres zawartości hGH w cząstce wynosi od około 0,1% wagowych do około 20% wagowych cząstek hGH, a najkorzystniejsza zawartość biologicznie czynnego, stabilizowanego hGH w cząstce wynosi około 15% wagowych.
W innym wykonaniu, preparat hGH o opóźnionym uwalnianiu zawiera również drugi kation metalu, który nie wchodzi w skład stabilizowanych cząstek hGH, i który jest rozproszony w polimerze. Drugi kation metalu stanowi, korzystnie, ten sam rodzaj kationu metalu, co kation metalu znajdujący się w stabilizowanym hGH. Zamiast tego, drugi kation metalu może stanowić jeden lub więcej różnych kationów metalu.
Działanie drugiego kationu metalu polega na modulowaniu uwalniania hGH z macierzy polimerowej preparatu o opóźnionym uwalnianiu w taki sposób, że stanowi on rezerwuar kationów metalu, służący dalszemu spowolnieniu uwalniania, czyli wydłużeniu czasu stabilizacji hGH przez kation metalu w celu zwiększenia stabilności hGH w kompozycji.
Kation metalu, stosowany w modulacji uwalniania, typowo stanowi co najmniej jeden rodzaj wielowartościowego kationu metalu. Przykłady drugiego kationu metalu, odpowiedniego do modulowania uwalniania hGH, stanowią np. Mg(OH)2, MgCO3 (np. 4MgCO3 · Mg(OH)2 · 5H2O), ZnCO3 (np. 3Zn(OH)2 · 2ZnCO3), CaCO3, Zn3(C6H5O7)2 (cytrynian cynku), Mg(OAc^, MgSO4, Zn(OAc)2, ZnSO4, ZnCŁ MgCL i Mg^CgHsO,^ (cytrynian magnezu). Odpowiedni stosunek drugiego kationu metalu do polimeru wynosi od około 1:99 do około 1:2, wagowo. Optymalny stosunek zależy od zastosowanego polimeru i drugiego kationu metalu.
Macierz polimerową, zawierającą rozproszony kation metalu, służący do modulowania uwalniania biologicznie czynnego środka z macierzy polimerowej, opisano szczegółowo w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 08/237057, złożonym 3 maja 1994, oraz w zgłoszeniu patentowym PCT/US95/05511; obie te publikacje w całości włącza się do niniejszego opisu jako odnośniki literaturowe.
Kompozycję hGH o opóźnionym uwalnianiu według wynalazku można wytwarzać w rozmaitych kształtach, np. w postaci błony, granulek, cylindrów, krążków lub mikrocząstek. Mikrocząstkę definiuje się jako składnik polimerowy o średnicy wynoszącej poniżej 1 mm, w którym rozproszone są stabilizowane cząstki hGH. Mikrocząstka może mieć kształt sferyczny, niesferyczny lub nieregularny. Korzystne jest, aby mikrocząstka bezdechu stanowiła
184 531 mikrosferę. Typowo, mikrocząstka będzie miała rozmiary odpowiednie do wstrzyknięć. Korzystnie, średnica mikrocząstek wynosi od około 1 do około 180 mikronów.
W sposobie wytwarzania preparatu o opóźnionym uwalnianiu biologicznie czynnego, niezagregowanego hGH, odpowiednią ilość cząstek biologicznie czynnego, stabilizowanego hGH rozprasza się w roztworze polimeru.
Odpowiedni roztwór polimeru zawiera od około 1% wagowego do około 30% wagowych odpowiedniego zgodnego biologicznie polimeru, przy czym zgodny biologicznie polimer typowo rozpuszczony jest w odpowiednim rozpuszczalniku polimerowym. Korzystnie, roztwór polimeru zawiera od około 2% (stężenie wagowe) do około 20% (stężenie wagowe) polimeru. Korzystniejszy jest roztwór polimeru, zawierający od około 5% do około 10% wagowych polimeru.
Odpowiedni rozpuszczalnik polimerowy stanowi rozpuszczalnik, w którym polimer rozpuszcza się, lecz w którym stabilizowane cząstki hGH w zasadzie nie rozpuszczają się i nie wchodzą z nim w reakcje. Przykłady odpowiednich rozpuszczalników polimerowych stanowią polarne ciecze organiczne, takie jak chlorek metylenu, chloroform, octan etylowy i aceton.
Dla wytworzenia biologicznie czynnych, stabilizowanych cząstek hGH, hGH miesza się w odpowiednim rozpuszczalniku wodnym z co najmniej jednym odpowiednim kationem metalu w warunkach pH odpowiednich dla kompleksu kationu metalu i hGH. Typowo, kompleks hGH będzie stanowił mętny osad zawieszony w rozpuszczalniku. Jednakże, kompleks hGH może również stanowić roztwór. W korzystniejszym wykonaniu hGH tworzy kompleks Zn+2
Odpowiednie warunki pH dla wytworzenia kompleksu hGH stanowi, typowo, wartość pH od około 7,0 do około 7,4. Odpowiednie warunki pH osiąga się typowo przez zastosowanie jako rozpuszczalnika wodnego bufora, takiego jak dwuwęglan sodowy.
Odpowiednie rozpuszczalniki stanowią rozpuszczalniki, w których zarówno hGH, jak i kation metalu co najmniej w nieznacznym stopniu rozpuszczają się; warunki te spełnia np. wodny bufor dwuwęglanu sodowego. Dla rozpuszczalników wodnych korzystne jest stosowanie wody dejonizowanej lub wody do wstrzyknięć.
Rozumie się, że hGH może być w stanie stałym lub rozpuszczonym przed wejściem w kontakt z kationem metalu. Rozumie się również, że kation metalu może być w stanie stałym lub rozpuszczonym przed wejściem w kontakt z hGH. W korzystnym wykonaniu zbuforowany wodny roztwór hGH miesza się z wodnym roztworem kationu metalu.
Typowo, kompleks hGH występuje w postaci mętnego osadu, zawieszonego w rozpuszczalniku. Jednakże, kompleks hGH może również stanowić roztwór. W jeszcze korzystniejszym wykonaniu hGH tworzy kompleks z Zn'2
Kompleks hGH następnie suszy się, np. przez liofilizację, w celu wytworzenia stałych cząstek stabilizowanego hGH. Kompleks hGH w postaci zawiesiny lub roztworu może być liofilizowany w całości lub można go dzielić na mniejsze objętości, które następnie poddaje się liofilizacji. W korzystnym wykonaniu, zawiesinę kompleksu hGH poddaje się mikronizacji, z zastosowaniem np. dyszy ultradźwiękowej, po czym liofilizuje dla wytworzenia stabilizowanych cząstek hGH. Do dopuszczalnych sposobów liofilizacji mieszaniny kompleksów hGH należą sposoby znane ze stanu techniki.
Korzystnie, cząstki stabilizowanego hGH mają średnicę od około 1 do około 6 mikrometrów. Cząstki hGH można poddawać fragmentacji oddzielnie, jak to opisano w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 08/006682, złożonym 21 stycznia 1993, w którym opisano sposób wytwarzania małych cząstek środków biologicznie czynnych; opis ten w całości włącza się do niniejszego opisu jako odnośnik literaturowy. Zamiast tego, cząstki hGH można poddać fragmentacji po dodaniu do roztworu polimeru, np. za pomocą sondy ultradźwiękowej lub dyszy ultradźwiękowej.
W innym wykonaniu, drugi kation metalu, nie wchodzący w skład stabilizowanych cząstek hGH, również rozprasza się w roztworze polimeru.
Rozumie się, że drugi kation metalu i stabilizowany hGH można rozpraszać w roztworze polimeru po kolei, w odwróconej kolejności, zmiennie, oddzielnie lub przez jednoczesne dodanie. Zamiast tego, polimer, drugi kation metalu i stabilizowany hGH można dodawać
184 531 do rozpuszczalnika polimerowego po kolei, w odwróconej kolejności, zmiennie, oddzielnie lub przez jednoczesne dodanie.
Sposób wytwarzania preparatu do modulowania uwalniania biologicznie czynnego środka z polimeru podlegającego rozpadowi biologicznemu opisano szczegółowo w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 08/237057.
W tym sposobie rozpuszczalnik polimerowy przeprowadza się następnie do postaci stałej w celu wytworzenia macierzy polimerowej, zawierającej dyspersję stabilizowanych cząstek hGH.
Jeden z odpowiednich sposobów wytwarzania preparatu hGH o opóźnionym uwalnianiu z roztworu polimeru stanowi metoda odparowania rozpuszczalnika, jak to opisano w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 3737337, wydanym na rzecz Schnoringa i wsp., opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 3523906, wydanym na rzecz Vranchena i wsp., opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 3691090, wydanym na rzecz Kitajima i wsp., lub w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 4389330, wydanym na rzecz Tice'a i wsp. Odparowanie rozpuszczalnika stosuje się zwykle jako sposób wytwarzania mikrocząstek hGH o opóźnionym uwalnianiu.
W metodzie odparowania rozpuszczalnika, roztwór polimeru, zawierający dyspersję stabilizowanych cząstek hGH, miesza się lub wstrząsa z fazą rozpraszającą, z którą rozpuszczalnik polimerowy miesza się częściowo, w celu wytworzenia emulsji. Fazę rozpraszającą stanowi zwykle wodny rozpuszczalnik. Do fazy rozpraszającej dodaje się często substancje emulgujące, w celu stabilizacji emulsji. Następnie odparowuje się rozpuszczalnik polimerowy przez co najmniej kilka godzin, przeprowadzając w ten sposób polimer w postać stałą w celu wytworzenia macierzy polimerowej, zawierającej dyspersję stabilizowanych cząstek hGH.
Korzystny sposób wytwarzania mikrocząstek stabilizowanego hGH o opóźnionym uwalnianiu z roztworu polimeru opisano w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 5019400, wydanym na rzecz Gombotz'a i wsp., i w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 08/443726, które złożono 18 maja 1995; publikacje te w całości włącza się do niniejszego opisu jako odnośniki literaturowe. Ten sposób wytwarzania mikrosfer, w porównaniu z innymi sposobami, takimi jak separacja faz, dodatkowo zmniejsza ilość hGH niezbędnego do wytworzenia preparatu o opóźnionym uwalnianiu o określonej zawartości hGH.
W sposobie tym roztwór polimeru, zawierający dyspersję stabilizowanych cząstek hGH, poddaje się obróbce w celu wytworzenia kropelek, przy czym co najmniej znaczna część kropelek zawiera roztwór polimeru i stabilizowane cząstki hGH. Kropelki te następnie zamraża się w sposób odpowiedni dla wytworzenia mikrocząstek. Przykłady sposobów obróbki dyspersji roztworu polimeru w celu wytworzenia kropelek stanowią np. przeprowadzenie dyspersji przez dyszę ultradźwiękową, rozpylacz Rayleigha, lub inne znane sposoby wytwarzania kropelek z roztworu.
Do odpowiednich sposobów zamrażania kropelek w celu wytworzenia mikrocząstek należą kierowanie kropelek do ciekłego gazu, lub w pobliże płynnego gazu, np. ciekłego argonu i ciekłego azotu, w celu wytworzenia zamrożonych mikrokropelek, które następnie oddziela się od ciekłego gazu. Zamrożone mikrokropelki wystawia się następnie na działanie ciekłego nierozpuszczalnika, np. etanolu, lub etanolu zmieszanego z heksanem lub pentanem.
Rozpuszczalnik w zamrożonych mikrokropelkach ekstrahuje się jako stały i/lub ciekły do nierozpuszczalnika w celu wytworzenia mikrocząstek zawierających stabilizowany hGH. Zmieszanie etanolu z innymi nierozpuszczalnikami, takimi jak heksan lub pentan, może zwiększać prędkość ekstrakcji rozpuszczalnika, w porównaniu z prędkością uzyskiwaną przy zastosowaniu samego etanolu, z niektórych polimerów, np. z polimerów poli(laktydo-koglikolidowych).
Zmieniając rozmiar kropelki, na przykład, poprzez zmianę średnicy dyszy ultradźwiękowej, można wytwarzać mikrocząstki hGH o opóźnionym uwalnianiu w szerokim zakresie rozmiarów. Jeżeli pożądane jest wytworzenie mikrocząstek o bardzo dużych rozmiarach, mikrocząstki można wyciskać przez strzykawkę bezpośrednio do zimnej cieczy. Zwiększając lepkość roztworu polimeru można również zwiększać rozmiar mikrocząstki. Rozmiar mikrocząstek wytwarzanych tym sposobem może wynosić np. od powyżej 1000 mikrometrów aż do poniżej 1 mikrometra.
184 531
Inny sposób wytwarzania preparatu hGH o opóźnionym uwalnianiu z roztworu polimeru, polega na wylewaniu błony, np. w formie, dla wytworzenia warstwy błony lub określonego kształtu. Na przykład, po nałożeniu roztworu polimeru, zawierającego dyspersję stabilizowanych cząstek hGH, do formy, rozpuszczalnik polimerowy usuwa się sposobami znanymi ze stanu techniki, lub też obniża się temperaturę roztworu polimeru aż do uzyskania warstwy lub kształtu o zgodnej suchej masie. Wylewanie błony roztworu polimeru, zawierającego środek biologicznie czynny, opisano szczegółowo w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 08/237057, który w całości włącza się do niniejszego opisu jako odnośnik literaturowy.
Uważa się, że uwalnianie hGH może zachodzić w dwóch różnych mechanizmach. hGH może ulegać uwalnianiu przez dyfuzję przez wypełnione wodą kanały w macierzy polimerowej, np. poprzez rozpuszczanie hGH lub poprzez puste miejsca powstające przez usunięcie rozpuszczalnika polimerowego w czasie wytwarzania preparatu o opóźnionym uwalnianiu.
Drugi mechanizm stanowi uwalnianie hGH wywołane rozpadem polimeru. Prędkością rozpadu można sterować poprzez zmianę właściwości polimeru, wpływających na prędkość uwadniania polimeru. Do tych właściwości należą, m.in., stosunek poszczególnych monomerów, takich jak laktyd i glikolid, w polimerze; zastosowanie L-izomeru monomeru zamiast mieszaniny racemicznej; i masa cząsteczkowa polimeru. Właściwości te mogą wpływać na hydrofilność i krystaliczność, od których zależy prędkość uwadniania polimeru. W celu zwiększenia uwodnienia można dodawać również zarobki hydrofilowe, takie jak sole, węglowodany i środki powierzchniowo czynne, które zmieniają prędkość erozji polimeru.
Zmieniając właściwości polimeru można sterować udziałem dyfuzji i/lub rozpadu polimeru w uwalnianiu hGH. Na przykład, zwiększając zawartość glikolidu w polimerze poli(laktydokoglikolidowym) i zmniejszając masę cząsteczkową polimeru, można zwiększyć hydrolizę polimeru, w ten sposób zwiększając uwalnianie hGH w mechanizmie erozji polimeru.
Ponadto prędkość hydrolizy polimeru jest większa w nieobojętnym pH. Tak więc do roztworu polimeru, stosowanego do wytwarzania mikrosfer, można dodawać zarobki o odczynie kwaśnym lub zasadowym, w celu zmiany prędkości erozji polimeru.
Kompozycję według wynalazku można podawać ludziom, lub zwierzętom, poprzez wstrzyknięcie, wszczep (np. podskórnie, domięśniowo, dootrzewnowe, doczaszkowo, dopochwowo i śródskórnie), podawanie do błon śluzowych (np. donosowo lub poprzez czopek), lub in situ (np. przez enemę lub aerozol) w celu zapewnienia pożądanego dawkowania hGH w oparciu o znane parametry leczenia różnych schorzeń za pomocą hGH. Poniżej wynalazek opisano bardziej szczegółowo za pomocą przykładów.
Przykład 1. Wytwarzanie hGH stabilizowanego Zn+2
W niniejszym przykładzie stosowano ludzki hormon wzrostu (hGH), którego sekwencję DNA opisano w opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 4898830, wydanym na rzecz Goeddel'a i wsp. Ludzki hormon wzrostu stabilizowano poprzez wytworzenie nierozpuszczalnych kompleksów z cynkiem.
hGH rozpuszczano w próbkach 4mM buforu dwuwęglanu sodowego (pH 7,2) w celu wytworzenia roztworów hGH o stężeniu hGH wynoszącym od 0,1 do 0,5 mM. Z wody dejonizowanej i dwuwodzianu octanu cynku wytworzono 0,9 mM roztwór Zn+2 i dodano go do roztworów hGH w celu wytworzenia kompleksu Zn+2-hGH. pH kompleksu Zn''-hGH doprowadzono następnie do wartości pomiędzy 7,0 a 7,4, dodając 1% kwas octowy. Wytworzył się mętny osad, zawierający hGH stabilizowany Zn+2.
Zawiesinę hGH stabilizowanego Zn' poddano następnie mikronizacji dyszą ultradźwiękową (Typ V1A; Sonics and Materials, Danbury, CT) i rozpyleniu do rury polipropylenowej (o średnicy 17 cm i głębokości 8 cm), zawierającej ciekły azot. W celu wytworzenia zamrożonych cząstek. Następnie rurę polipropylenową umieszczono w zamrażarce w temperaturze -80°C aż do momentu odparowania ciekłego azotu. Zamrożone cząstki, zawierające hGH stabilizowany Zn'2 poddano następnie liofilizacji dla wytworzenia cząstek hGH stabilizowanych Zn''.
184 531
Przykład 2. Wytwarzanie mikrosfer PLGA zawierających biologicznie czynny, stabilizowany antyagregacyjnie hGH
Z hydrofilowego polimeru poli(laktydo-koglikolidowego) RG502H o wolnych końcowych grupach karboksylowych (zwanego w dalszym ciągu niniejszego opisu „odblokowanym PLGA”) (50:50 PLGA, 9300 daltonów; Boehringer Ingelheim Chemicals, Inc.) lub z bardziej hydrofobowego polimeru PLGA o zablokowanych końcowych grupach karboksylowych (zwanego w dalszym ciągu niniejszego opisu „zablokowanym PLGA”) (50:50 PLGA, 10000 daltonów; partia nr 115-56-1, Birmingham Polymers, Inc., Birmingham, AL) wytworzono mikrosfery zawierające ludzki hormon wzrostu (hGH) stabilizowany Zn+2
Polimer rozpuszczono w chlorku metylenu w temperaturze pokojowej. Do roztworu polimeru dodano liofilizowane cząstki hGH oraz węglan cynku. Mieszaninę poddano następnie sonikacji w celu wytworzenia homogennej zawiesiny. Zawiesinę atomizowano przez dyszę sonikacyjną na podłoże zamrożonego etanolu, pokryte ciekłym azotem. Naczynie zawierające mikrosfery przechowywano w temperaturze -80°C w celu ekstrahowania chlorku metylenu, a następnie liofilizowano dla wytworzenia wolnego proszku.
Przykład 3. Analiza białka hGH zawartego w mikrosferach.
Identyczność zamkniętego w mikrosferach hGH oznaczano poprzez rozpuszczenie nieuwodnionych mikrosfer w chlorku metylenu i acetonie, zebranie białka, liofilizację i rekonstrukcję w buforze HEPES zawierającym 10 mM EDTA. Podobnej obróbce poddawano próbki kontrolne dla upewnienia się, że proces ekstrakcji nie narusza struktury białka.
Zamknięty w mikrosferach hGH analizowano poprzez pomiar odsetka monomeru hGH znajdującego się w hGH po zamknięciu go w mikrosferach metodą chromatografii wykluczenia rozmiaru (size exclusion chromatography - SEC).
Wyniki analizy SEC niezmienności hGH w mikrosferach hGH o opóźnionym uwalnianiu przedstawiono poniżej.
| Kompozycja (polimer; % węglanu cynku) | % monomeru (SEC) |
| odblokowany 31K; 6% ZnCO3 | 98,6 |
| odblokowany 31K; 6% ZnCO3 | 99,2 |
| odblokowany 31K; 3% ZnCO3 | 97,7 |
| odblokowany 31K; 3% ZnCO3 | 97,8 |
| odblokowany 31K; 1%ZnCO3 | 97,6 |
| odblokowany 31K; 0% ZnCO3 | 97,8 |
| odblokowany 31K; 0% ZnCO3 | 97,1 |
| zablokowany 10K; 1% ZnCO3 | 98,2 |
| zablokowany 10K; 1% ZnCO3 | 98,4 |
| zablokowany 8K; 0% ZnCO3 | 98,5 |
| zablokowany 10K; 1% ZnCO3 | 98,4 |
Wyniki wskazują, że proces zamykania do mikrosfer nie spowodował agregacji białka. Procentowa wydajność ekstrakcji białka (w stosunku do ilości mierzonej zawartością azotu w mikrosferach) wynosiła od około 40 do około 98%. Uważa się, że zmienność ta jest związana z utratą substancji w czasie etapów przejściowych sposobu; sposób ekstrakcji modyfikuje się w celu zwiększenia odtwarzania białka.
Przykład 4. Oznaczanie wpływu węglanu cynku na kinetykę uwalniania in vitro.
Wytworzono mikrosfery według opisu z przykładu 2, zawierające 15% wagowych hGH (kompleks Zn:białko hGH, 6:1); 0%, 1%, 6%, 10% lub 20% wagowych węglanu cynku; i polimer poli(laktydo-koglikolidowy).
184 531
Oznaczano kinetykę uwalniania in vitro preparatów mikrosfer hGH o opóźnionym uwalnianiu, zawierających węglan cynku w różnym stężeniu, poprzez zawieszenie próbki (10 mg) każdego typu mikrosfer w różnych 1,5 ml próbkach bufora HEPES (50 mM HEPES, 10 mM KCl, 0,1% NaN3), pH 7,2, i inkubację w temperaturze 37°C. Ilość uwalnianego białka oceniano ilościowo poprzez pobieranie próbek buforu 1, 3, 7, 10, 14, 21 i 28 dni po inkubacji i uzupełnianie świeżym buforem po pobraniu każdej próbki.
Sporządzono wykres krzywej kumulacyjnego procentu uwalniania (w odniesieniu do początkowej zawartości hGH w masie początkowej mikrosfer) w stosunku do czasu. Analizowano zawartość monomeru hGH w próbkach białka uwolnionego w poszczególnych punktach czasowych metodą chromatografii wykluczenia rozmiaru.
Uważa się, że węglan cynku działa jako rezerwuar jonów cynku, ułatwiając tworzenie się kompleksów Zn-hGH i utrudniając dysocjację do rozpuszczalnego hGH. Jako że rozpuszczalność węglanu cynku w wodzie jest mała, uwalnianie jonów cynku z rezerwuaru jest powolne, co powoduje modulację rozpuszczalności białka.
W analizie stwierdzono, że w nieobecności węglanu cynku prędkość uwalniania hGH z mikrosfer była bardzo duża i całe białko ulegało uwolnieniu w bardzo krótkim czasie.
Przykład 5. Test hGH po rozpadzie in vivo mikrosfer hGH stabilizowanego Zn+2 zawierających zablokowane PLGA.
Mikrosfery z zablokowanego PLGA, zawierające 15% wagowych hGH stabilizowanego Zn+2 i 0%, 6%, 10% lub 20% ZnCO3 wytworzono sposobem z przykładu 2. Grupom badanych szczurów wstrzyknięto podskórnie próbki po 50 mg różnych mikrosfer hGH. Po 60 dniach szczury uśmiercono i wycięto próbki skóry z miejsca wstrzyknięcia. Wycięte próbki skóry umieszczano w 10% obojętnej zbuforowanej formalinie na co najmniej 24 godziny. Następnie skrawano je ostrzem żyletki dla usunięcia nadmiaru skóry i umieszczano w PBS.
Próbki tkanek poddano obróbce w firmie Pathology Associates, Inc. (Frederick, MD). Próbki skóry zatopiono w glikometakrylanie, podzielono na skrawki i badano pod kątem obecności hGH, stosując zestaw HistoScan/LymphoScan Staining Kit (produkt nr 24-408M; Accurate Chemical and Scientific Corp., Westbury, NY) według zaleceń producenta. Próbki tkanek oceniano w punktach ze względu na obecność lub nieobecność zabarwienia, które wskazywało na obecność lub nieobecność hGH w próbce.
Wszystkie próbki skóry pobrane z miejsca wstrzyknięcia mikrosfer hGH, okazały się dodatnie ze względu na obecność hGH, co oznacza, że mikrosfery wytworzone z użyciem zablokowanego PLGA po 60 dniach in vivo nadal zawierały hGH.
Sposobem opisanym w przykładzie 2 wytworzono mikrosfery, zamykając w nich 0% lub 15% wagowych hGH, w postaci kompleksu Zn:hGH, jak również 0%, 1% lub 6% wagowych soli ZnCO3, w zablokowanym PLGA i w odblokowanym PLGA.
Porównywano rozpad in vivo mikrosfer z odblokowanego PLGA w i mikrosfer z zablokowanego PLGA poprzez wstrzyknięcie próbki mikrosfer szczurom i następnie analizowanie mikrosfer pozostających w miejscu wstrzyknięcia w różnym czasie po wstrzyknięciu. Dla każdej próbki mikrosfer w każdym punkcie czasowym badano trzy szczury. W dniu podania mikrosfer, 750 pl zarobki (3% karboksymetyloceluloza o niskiej lepkości i 1% Tween-20 w soli fizjologicznej) dodawano do fiolek zawierających 50 ± 1 mg mikrosfer. Zaraz potem fiolki energicznie wstrząsano w celu wytworzenia zawiesiny, którą następnie aspirowano do strzykawki o pojemności 10 ml, bez użycia igły.
Szczury (samce szczepu Sprague-Dawleya) znieczulano mieszaniną halotanu i tlenu. Miejsca wstrzyknięcia (okolica międzyłopatkowa) wygolono i oznaczono trwałym tatuażem dla zapewnienia dokładności pobrania wycinka skóry w określonych punktach czasowych. Każdemu ze szczurów wstrzyknięto całą fiolkę mikrosfer, stosując igły o grubości 18-21.
W oznaczonych dniach (dni 15, 30, 59 i 90 po wstrzyknięciu dla zwierząt otrzymujących mikrosfery z zablokowanego PLGA, lub dni 7, 14, 21, 18 i 45 po wstrzyknięciu dla zwierząt otrzymujących mikrosfery z odblokowanego PLGA) szczury uśmiercano przez uduszenie CO2 w postaci gazowej i wycięto skórę z miejsca wstrzyknięcia (wraz z mikrosferami). Z uwagi na skłonność mikrosfer do skupiania się w miejscu wstrzyknięcia, obecność lub nieobecność mikrosfer oceniano wzrokowo.
184 531
Ocena wzrokowa pozwoliła stwierdzić, że mikrosfery z odblokowanego PLGA ulegały istotnie szybszemu rozpadowi, niż mikrosfery z zablokowanego PLGA, i że dodatek ZnCO3 do zablokowanego PLGA istotnie spowalniał rozpad polimeru. Na przykład, u szczurów po wstrzyknięciu mikrosfer z odblokowanego PLGA, zawierających 0% hGH i 0% lub 1% ZnCO3, w dniu 60 były widoczne tylko nieliczne mikrosfery, a w dniu 90 mikrosfer nie obserwowano. Ponadto, u szczurów po wstrzyknięciu mikrosfer z zablokowanego PLGA zawierających 0% lub 15% hGH i 6% ZnCO3, w dniu 90 mikrosfery były widoczne.
Przykład 6. Badania farmakokinetyczne in vivo mikrosfer hGH o opóźnionym uwalnianiu u szczurów
W celu przeprowadzenia przesiewowego badania różnych preparatów mikrosfer hGH, oceny parametrów farmakokinetycznych po podaniu hGH drogą dożylną (i.v.), podskórną (s.c.), i podskórną pompą osmotyczną (Alzet) oraz oceny profilu w surowicy i prędkości uwalniania in vivo różnych preparatów mikrosfer hGH, przeprowadzono badania na szczurach.
Szczury szczepu Sprague-Dawleya podzielono na grupy po trzy osobniki, randomizowano według masy ciała, i każdej grupie podawano jeden preparat mikrosfer hGH. Szczurom podawano podskórnie około 7,5 mg hGH w 50 mg jednego typu różnych mikrosfer, zawieszonych w 0,75 ml wodnego rozczynnika. Skład rozczynnika był następujący: 3% CMC (o niskiej lepkości) i 1% polisorbat 20 w 0,9% NaCl. Podawaną dawkę mikrosfer oceniano pośrednio poprzez zważenie dawki pozostałej w fiolce i skorygowanie po uwzględnieniu pozostałego rozczynnika. Następnie obliczano dawkę hGH z zawartości białka w mikrosferach, oznaczonej analizą azotową.
W z góry wyznaczonych odstępach czasu, aż do 30 dni po wstrzyknięciu, pobierano próbki krwi. W ciągu pierwszych 24 godzin pobierano po 250 μΐ krwi, a w punktach czasowych po 24 godzinach co najmniej 400 μΐ. Próbki krwi pozostawiano do skrzepnięcia i oznaczano stężenia hGH w surowicy testem radioimmunologicznym. Zaaprobowano zestaw do testów radioimmu-nologicznych (RIA) z ICN i stosowano ten zestaw do oznaczania poziomu hGH w surowicy szczurów.
W celu oceny parametrów farmakokinetycznych szczurom podawano hGH w soli fizjologicznej poprzez wstrzyknięcie bolusu podskórnie, dożylnie lub poprzez podawanie w pompie osmotycznej (Alzeb Model 2ML4), wszczepianej podskórnie.
Trzy grupy szczurów otrzymywały pojedyncze podskórne wstrzyknięcia hGH w 0,9% NaCl w dawce 0,5 lub 7,5 mg/kg w objętości 1,0 ml/kg, a dwie grupy otrzymywały pojedyncze dożylne wstrzyknięcia hGH w 0,9% NaCl w dawce około 1,0 mg i 5,0 mg hGH na kg masy zwierzęcia, przy czym objętość dawki wynosiła 1,0 ml/kg. Szczury otrzymujące preparat w pompie Alzet podzielono na cztery grupy po trzy osobniki, randomizowane ze względu na masę ciała, którym podawano około 20 mg/ml i 40 mg/mi hGH w 0,9% soli fizjologicznej w pompie (Alzet Model 2002, 200 μΐ, uwalnianie w czasie 14 dni) i około 4 mg/ml i 12 mg/ml hGH w 0,9% soli fizjologicznej w pompie (Alzet Model 2ML4, 2 ml, uwalnianie w czasie 28 dni). Oczekiwana prędkość uwalniania z pomp odpowiada, odpowiednio, około 2% i 4-6% dawce hGH ProLease (około 15 mg/kg) dziennie. Pompy Alzet wszczepiano podskórnie w okolicy międzyłopatkowej po 1-2 minutowym zwilżeniu jałową solą fizjologiczną.
Preparaty mikrosfer hGH o opóźnionym uwalnianiu, wytworzone według opisu z przykładu 2, zawierały 15% wagowo hGH w kompleksie z Zn w stosunku 6:1 Zn:hGH; 0%, 1%, 3% lub 6% wagowo węglanu cynku; i 8K odblokowanego PLGA, 10K zablokowanego PLGA lub 31K odblokowanego PLGA.
W celu oceny różnych preparatów hGH o opóźnionym uwalnianiu, wskaźnikami stosowanymi in vivo były Cmax, CDS i Cniax/CD5, przy czym stanowi maksymalne obserwowane stężenie w surowicy, a CDS stanowi stężenie w surowicy w dniu 5, które powinno odpowiadać stężeniu stanu równowagi. Wyniki były następujące:
184 531
| Kompozycja | „Pik” in vitro (%) | % monomeru w dniu 7. | Cma (ng/ml) | C w dniu 5 (ng/ml) | Cmc/CD, |
| 8K odblokowanego PLGA, 0% ZnCO3 | 22,0 ± 0,9 | 99,3* | 323,3 ± 98,6 | 20,4 ± 14,2 | 19,5 ± 10,6 |
| 8K odblokowanego PLGA, 1% ZnCO3 | 16,4 ± 1,6 | 97,3* | 309,0 ±67,1 | 20,4 ± 14,2 | 39,5 ± 17,7 |
| 8K odblokowanego PLGA, 3% ZnCO3 | 15,9 ±6,9 | 98,7 | 670,5 ± 244,4 | 9,0 ± 4,2 | 44,8 ± 22,6 |
| 8K odblokowanego PLGA, 6% ZnCO3 | 17,6 ±2,7 | 99,3 | 358,0 ±58,9 | 18,8 ± 14,7 | 42,4 ± 6,8 |
| 31K odblokowanego PLGA, 0% ZnCO3 | 12,3 ± 1,1 | 98,2 | 592 ±318,2 | 4,5 ± 1,5 | 132,5 ±47,9 |
| 31K odblokowanego PLGA, 1% ZnCO3 | 11,4 ± 1,3 | 98,8 | 432,7 ±91,6 | 5,1 ±0,3 | 84,1 ± 14,9 |
| 31K odblokowanego PLGA, 3% ZnCO3 | 7,9 ± 1,9 | 99,4 | 643,6 ± 203,9 | 8,0 ± 2,6 | 93,3 ± 62,0 |
| 31K odblokowanego PLGA, 6% ZnCO3 | 15,8 ±0,5 | 99,8 | 1691,8 ± 340,0 | 6,6 ± 0,8 | 262,2 ± 83,5 |
| 10K zablokowanego PLGA, 1% ZnCO3 | 12,7 ±0,1 | 99,3 | 615,9 ±384,3 | 4,5 ± 1,0 | 155,0 ± 126,8 |
| 10K zablokowanego PLGA, 3% ZnCO3 | 18,1 ±3,2 | 99,6 | 1053,2 ± 293,3 | 3,6 ±0,8 | 291,7 ±71,1 |
| 10K zablokowanego PLGA, 6% ZnCO3 | 9,9 ± 1,4 | 99,0 | 1743,5 ±428,4 | 4,9 ± 2,7 | 516,1 ±361,6 |
*Wartość otrzymana z dwukrotnego badania tej samej kompozycji
Wyniki badania przesiewowego wskazują, że oba odblokowane polimery (8K i 31K) wykazują in vivo kinetykę uwalniania różną od pierwotnego preparatu, w którym stosuje się zablokowany 10K PLGA i 6% wagowych węglanu cynku. Wartość Cnm była na ogół niższa dla preparatów z odblokowanym PLGA, niż dla preparatów pierwotnych, co sugeruje, że „pik” in vivo może osiągać niższe wartości przy zastosowaniu preparatów odblokowanego polimeru. „Pik” definiuje się jako odsetek hGH uwalnianego w ciągu pierwszych 24 godzin po wstrzyknięciu. Wartość „piku” in vitro wynosiła 8-22%. Zawartość węglanu cynku w kompozycji wydaje się nie mieć wpływu na efekt „piku” ani na profil uwalniania in vitro.
Stężenie w surowicy w dniach 4-6 utrzymywało się na dość stałym poziomie powyżej wartości podstawowej (tzn. wartości sprzed pobrania) przy stosowaniu preparatów z odblokowanym polimerem, natomiast stężenie w surowicy przy zastosowaniu preparatów z zablokowanym polimerem, w tych samych punktach czasowych, było zbliżone do wartości podstawowych. Dane z uwalniania in vitro w czasie 7 dni wykazują, że uwalniane białko hGH było monomeryczne. Nie było możliwe uzyskanie wiarygodnych danych po upływie 6 dni z powodu wytwarzania przez organizm szczurów przeciwciał anty-hGH.
Przykład 7. Badania farmakokinetyczne na małpach rezusach
Celem niniejszego badania na małpach z rzędu Naczelnych była ocena profilu farmakokinetycznego różnych preparatów hGH o opóźnionym uwalnianiu w porównaniu z rutynowymi sposobami podawania hGH (np. wstrzyknięcie bolusu podskórnie, codzienne wstrzyknięcia podskórne
184 531 i wstrzyknięcia podskórne połączone z zastosowaniem pompy osmotycznej) oraz określenie, czy preparat hGH o opóźnionym uwalnianiu zapewnia optymalny profil hGH we krwi.
Badane preparaty mikrosfer hGH o opóźnionym uwalnianiu stanowiły: 1) 15% hGH (w kompleksie z Zn w stosunku Zn:hGH wynoszącym 6:1), 6% wagowych węglanu cynku i 10K zablokowanego PLGA; 2) 15% hGH (w kompleksie z Zn w stosunku Zn:hGH wynoszącym 6:1), 1% wagowy węglanu cynku i 8K odblokowanego PLGA (polimeru PLGA „RG502H”), i 3) 15% hGH (w kompleksie z Zn w stosunku Zn:hGH wynoszącym 6:1), 1% wagowy węglanu cynku i 31K odblokowanego PLGA (polimeru PLGA „RG503H).
Do każdej grupy należały cztery małpy i każdej z nich podano pojedyncze wstrzyknięcie podskórne do okolicy szyjnogrzbietowej, w dniu 1. Każdej małpie podano dawkę 160 mg mikrosfer hGH o opóźnionym uwalnianiu (24 mg hGH) w 1,2 ml ro/czynnika do wstrzyknięć przez igłę o grubości 20. Rozczynnik do wstrzyknięć stanowił wodny rozczynnik zawierający 3% (stężenie wagowe) karboksymetylocelulozy (soli sodowej), 1% (objętościowo) Tween 20 (polisorbat 20) i 0,9% chlorek sodu.
Zadaniem dawki hGH było zapewnienie oznaczanego stężenia hGH w surowicy do analizy farmakokinetycznej. Dla uzyskania parametrów farmakokinetycznych utworzono dodatkowe grupy badane po cztery małpy, otrzymujące: 1) pojedyncze wstrzyknięcie podskórne (24 mg hGH), 2) codzienne wstrzyknięcia podskórne (24 mg/28 dni = 0,86 mg hCH/dziennie), 3) wstrzyknięcie podskórne (3,6 mg hGH) połączone z pompą osmotyczną Alzet (20,4 mg hGH) (dawka całkowita 24 mg hGH), i 4) wstrzyknięcie podskórne rozczynnika do wstrzyknięć jako kontrolę (w grupie kontrolnej otrzymującej rozczynnik były tylko trzy małpy).
W następujących punktach czasowych pobierano próbki krwi na hGH, IGF1, IGFBP3 i przeciwciała anty-hGH: -7, -5, -3, bezpośrednio przed podaniem dawki, i 0,5, 1, 2, 3, 5, 8, 10, 12, 24, 28, 32 i 48 godzin, 5, 4, 6, 8, 11, 14, 17, 20, 23, 26, 29, 32, 25, 28, 41, 44, 47, 50, 53, 56 dni po podaniu dawki.
Oznaczano następnie stężenie IGF-2 i hGH w surowicy. Dla ilościowej oceny hGH w surowicy małp stosowano zestaw IRMA z firmy RADIM (dystrybucja: Wein Laboratories, P.O. Box 227, Succasunna, NJ). Limit oznaczenia ilościowego dla zestawu IRMA wynosił 0,1 ng/ml w buforze PBS i 1,5 ng/ml w surowicy młodych małp rezusów o podstawowym poziomie GH wynoszącym 4 ng/ml.
Test IRMA zaaprobowano w zakresie stężenia 1,5-75 ng dla surowicy młodych małp rezusów. Dokładność pomiaru była w zakresie ± 10%.
Wyniki wykazują, że mikrosfery hGH o opóźnionym uwalnianiu uwalniały istotny, opóźniony poziom hGH w ciągu jednego miesiąca, podczas gdy wstrzyknięcia podskórne nie były w stanie utrzymać takiego samego poziomu w surowicy.
Profil IGF-1 w surowicy wykazuje, że poziom IGF-1 w surowicy był podwyższony powyżej wartości podstawowych w dniach 2-29 po podaniu mikrocząstek. Wykazuje to, że z mikrosfer hGH o opóźnionym uwalnianiu uwolniła się ilość hGH dostateczna dla wywołania działania farmakodynamicznego. Wskazuje to również, że uwalniany hGH był czynny biologicznie, co sugeruje, że proces zamykania w mikrosfery nie wpływa niekorzystnie na biopotencję hGH.
Specjaliści ocenią, stosując jedynie rutynowe techniki badawcze, że istnieje wiele równoważników szczegółowych wykonań wynalazku przedstawionych w niniejszym opisie. Takie równoważniki są objęte zakresem niniejszego wynalazku, określonym w zastrzeżeniach.
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 70 egz.
Cena 4,00 zł.
Claims (17)
- Zastrzeżenia patentowe1. Kompozycja o opóźnionym uwalnianiu ludzkiego hormonu wzrostu do wytwarzania leku do terapii, zawierająca a) polimer zgodny biologicznie, i b) cząstki ludzkiego hormonu wzrostu kompleksowanego kationem metalu, znamienna tym, że stosunek molowy kationu metalu do białka jest większy niż 4:1 i mniejszy niż 10:1.
- 2. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że stosunek molowy kationu metalu do białka wynosi co najmniej 6:1.
- 3. Kompozycja według zastrz. 1 albo 2, znamienna tym, że jako kation metalu zawiera Zn(II).
- 4. Kompozycja według zastrz. 1 albo 2, znamienna tym, że zawiera kation metalu dodany do ludzkiego hormonu wzrostu w postaci soli rozpuszczalnej w wodzie.
- 5. Kompozycja według zastrz. 4, znamienna tym, że zawiera kation metalu dodany do ludzkiego hormonu wzrostu w postaci octanu cynku.
- 6. Kompozycja według zastrz. 1 albo 2, znamienna tym, że zawiera cząstki ludzkiego hormonu wzrostu kompleksowanego kationem metalu, rozproszone w polimerze zgodnym biologicznie.
- 7. Kompozycja według zastrz. 6, znamienna tym, że zawiera polimer wybrany z grupy obejmującej polilaktyd, poliglikolid, poli(laktydo-koglikolid), polikwas mlekowy, polikwas glikolowy, polikaprolakton, poliwęglan, poliesteramid, polibezwodnik, poliaminokwas, poliortoester, policyjanoakrylan, polidioksanon, poliszczawian alkilenowy, poliuretan, ich mieszaniny i kopolimery.
- 8. Kompozycja według zastrz. 7, znamienna tym, że zawiera polimer wybrany z grupy obejmującej polilaktyd, poliglikolid, poli(laktydo-koglikolid).
- 9. Kompozycja według zastrz. 1 albo 2, znamienna tym, że zawiera cząstki ludzkiego hormonu wzrostu kompleksowanego kationem metalu obecne w polimerze w stężeniu wynoszącym od 0,1% do 30% wagowych, korzystnie od 0,1% do 20% wagowych.
- 10. Kompozycja według zastrz. 9, znamienna tym, że zawiera cząstki ludzkiego hormonu wzrostu kompleksowanego kationem metalu obecne w polimerze w stężeniu wynoszącym 15% wagowych.
- 11. Kompozycja według zastrz. 1 albo 2, znamienna tym, że zawiera polimer zgodny biologicznie zawierający również kation metalu.
- 12. Kompozycja według zastrz. 11, znamienna tym, że jako kation metalu zawiera Zn(II).
- 13. Kompozycja według zastrz. 12, znamienna tym, że zawiera kation metalu pochodzący z grupy soli obejmującej ZnCO3, Zn3 (C6H5O7)2, Zn(OAc)2, ZnSCO i ZnCl2.
- 14. Kompozycja według zastrz. 11, znamienna tym, że jako kation metalu zawiera Mg(II).
- 15. Kompozycja według zastrz. 12, znamienna tym, że zawiera kation metalu pochodzący z grupy obejmującej Mg(OH)2 MgCO3, Mg/CJ^^, Mg(OAcU MgSO4 i MgCf.
- 16. Kompozycja według zastrz. 11, znamienna tym, że stosunek kationu metalu do polimeru wynosi od 1:99 do 1:2 wagowo, korzystnie 1% wagowo.
- 17. Kompozycja ludzkiego hormonu wzrostu o opóźnionym uwalnianiu według zastrz. 1, znamienna tym, że zawiera:a) zgodny biologicznie poli(laktydo-koglikolid) z rozproszonym w nim Zn(II), przy czym Zn(II) dodany jest w postaci ZnCO3, ib) cząstki ludzkiego hormonu wzrostu (hGH) kompleksowanego Zn(II), przy czym Zn(II) dodany jest do ludzkiego hormonu wzrostu w postaci octanu cynku w stosunku molowym184 531Zn:hGH wynoszącym 10:1, i cząstki ludzkiego hormonu wzrostu (hGH), kompleksowanego Zn(II), są obecne w polimerze w stężeniu 15% wagowych.Ludzki hormon wzrostu (hGH) stanowi białko wydzielane przez przysadką mózgową, które można wytwarzać metodami rekombinacyjnej inżynierii genetycznej. hGH powoduje wzrost wszystkich zdolnych do wzrostu tkanek. hGH stosuje się, typowo, do leczenia chorych z karłowatością przysadkową. Obecnie, w celu utrzymania odpowiedniego poziomu hGH w surowicy, chorym podaje się podskórnie bolus wodnego hGH trzy razy w tygodniu lub raz dziennie. U chorych przewlekle, otrzymujących hGH, konieczność częstego wykonywania wstrzyknięć powoduje niepełne stosowanie się chorych do zaleceń lekarza.Dla rozwiązania problemów związanych z częstymi wstrzyknięciami wodnego hGH, prowadzono badania w celu wytworzenia preparatów umożliwiających kontrolowane uwalnianie, zawierających wyższe dawki hGH, niż wstrzyknięcie w postaci bolusu; preparaty te wytwarza się w postaci kapsułek macierzy polimerowej, z której hGH ulega uwalnianiu in vivo przez czas co najmniej około tygodnia.Jednakże te preparaty o kontrolowanym uwalnianiu często uwalniają na początku dużą ilość hGH, a następnie bardzo małe ilości hGH. Ponadto, z powodu dużego stężenia hGH w tych preparatach o kontrolowanym uwalnianiu, cząsteczki hGH mają tendencję do agregacji po kilku dniach, wytwarzając zagregowany hGH, który in vivo wykazuje działanie immunogenne, i prawdopodobnie zmniejszoną aktywność biologiczną.Tak więc istnieje potrzeba opracowania środków do opóźnionego wydzielania biologicznie czynnego hGH in vivo, bez wywoływania odpowiedzi układu immunologicznego w okresie uwalniania hGH.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/473,544 US5654010A (en) | 1992-12-02 | 1995-06-07 | Composition for sustained release of human growth hormone |
| US08/477,725 US5667808A (en) | 1992-12-02 | 1995-06-07 | Composition for sustained release of human growth hormone |
| PCT/US1996/008086 WO1996040072A2 (en) | 1995-06-07 | 1996-06-03 | Composition for sustained release of human growth hormone |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL323832A1 PL323832A1 (en) | 1998-04-27 |
| PL184531B1 true PL184531B1 (pl) | 2002-11-29 |
Family
ID=27044171
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL96323832A PL184531B1 (pl) | 1995-06-07 | 1996-06-03 | Kompozycja o opóźnionym uwalnianiu ludzkiego hormonu wzrostu do wytwarzania leku do terapii |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0831787B1 (pl) |
| JP (1) | JPH11506740A (pl) |
| CN (1) | CN1102854C (pl) |
| AT (1) | ATE204468T1 (pl) |
| AU (1) | AU708756B2 (pl) |
| BR (1) | BR9608542A (pl) |
| CA (1) | CA2223436A1 (pl) |
| CZ (1) | CZ288147B6 (pl) |
| DE (1) | DE69614685T2 (pl) |
| DK (1) | DK0831787T3 (pl) |
| ES (1) | ES2161366T3 (pl) |
| HU (1) | HUP9900870A3 (pl) |
| IL (1) | IL122385A (pl) |
| MX (1) | MX9709698A (pl) |
| NO (1) | NO316104B1 (pl) |
| NZ (1) | NZ310644A (pl) |
| PL (1) | PL184531B1 (pl) |
| PT (1) | PT831787E (pl) |
| RU (1) | RU2161502C2 (pl) |
| SK (1) | SK281571B6 (pl) |
| WO (1) | WO1996040072A2 (pl) |
Families Citing this family (101)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ATE268591T1 (de) * | 1995-06-27 | 2004-06-15 | Takeda Chemical Industries Ltd | Verfahren zur herstellung von zubereitungen mit verzögerter freisetzung |
| EP0946169B1 (en) | 1996-12-20 | 2003-02-26 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Method of producing a sustained-release preparation |
| MY118835A (en) * | 1997-04-18 | 2005-01-31 | Ipsen Pharma Biotech | Sustained release compositions and the process for their preparation |
| US6306826B1 (en) | 1997-06-04 | 2001-10-23 | The Regents Of The University Of California | Treatment of heart failure with growth hormone |
| US6663899B2 (en) | 1997-06-13 | 2003-12-16 | Genentech, Inc. | Controlled release microencapsulated NGF formulation |
| US6113947A (en) * | 1997-06-13 | 2000-09-05 | Genentech, Inc. | Controlled release microencapsulated NGF formulation |
| US6191107B1 (en) | 1997-09-26 | 2001-02-20 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Complex of human growth hormone and zinc |
| NZ525914A (en) | 1998-03-10 | 2004-03-26 | Genentech Inc | Novel polypeptides and nucleic acids encoding the same |
| EP3112468A1 (en) | 1998-05-15 | 2017-01-04 | Genentech, Inc. | Il-17 homologous polypeptides and therapeutic uses thereof |
| IL138930A0 (en) | 1998-05-15 | 2001-11-25 | Genentech Inc | Il-17 homologies polypeptides and therapeutic uses thereof |
| US20020172678A1 (en) | 2000-06-23 | 2002-11-21 | Napoleone Ferrara | EG-VEGF nucleic acids and polypeptides and methods of use |
| AU5152700A (en) | 1999-06-15 | 2001-01-02 | Genentech Inc. | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
| CA2494705A1 (en) | 1999-12-01 | 2001-06-07 | Genentech, Inc. | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
| EP2290081A3 (en) | 1999-12-23 | 2012-08-01 | Genentech, Inc. | IL-17 homologous polypeptide and therapeutic uses thereof |
| ES2323220T3 (es) | 2000-01-13 | 2009-07-09 | Genentech, Inc. | Polipeptidos humanos stra6. |
| US6740520B2 (en) | 2000-03-21 | 2004-05-25 | Genentech, Inc. | Cytokine receptor and nucleic acids encoding the same |
| JP2003528149A (ja) | 2000-03-24 | 2003-09-24 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | 軟骨性疾患の治療のためのインスリンの使用 |
| US6998137B2 (en) * | 2000-04-07 | 2006-02-14 | Macromed, Inc. | Proteins deposited onto sparingly soluble biocompatible particles for controlled protein release into a biological environment from a polymer matrix |
| AU6531101A (en) | 2000-06-02 | 2001-12-17 | Genentech Inc | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
| DE60136281D1 (de) | 2000-08-24 | 2008-12-04 | Genentech Inc | Methode zur inhibierung von il-22 induziertem pap1 |
| EP1944317A3 (en) | 2000-09-01 | 2008-09-17 | Genentech, Inc. | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
| US6673580B2 (en) | 2000-10-27 | 2004-01-06 | Genentech, Inc. | Identification and modification of immunodominant epitopes in polypeptides |
| WO2002053136A1 (en) | 2000-12-28 | 2002-07-11 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Sustained release preparations |
| US7271150B2 (en) | 2001-05-14 | 2007-09-18 | United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Modified growth hormone |
| US20070160576A1 (en) | 2001-06-05 | 2007-07-12 | Genentech, Inc. | IL-17A/F heterologous polypeptides and therapeutic uses thereof |
| CA2448218C (en) | 2001-06-21 | 2012-05-29 | Genentech, Inc. | Sustained release formulation |
| JP2005518212A (ja) | 2002-02-25 | 2005-06-23 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | 新規な１型サイトカインレセプターｇｌｍ−ｒ |
| EP1610820B2 (en) | 2003-04-04 | 2013-08-21 | Genentech, Inc. | High concentration antibody and protein formulations |
| EP2093570A1 (en) | 2003-06-06 | 2009-08-26 | Genentech, Inc. | Modulating the interaction between HGF beta chain and c-met |
| MXPA06000347A (es) | 2003-07-08 | 2006-03-28 | Genentech Inc | Polipeptidos heterologos il-17 a/f y usos terapeuticos de los mismos. |
| US20050233960A1 (en) | 2003-12-11 | 2005-10-20 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for inhibiting c-met dimerization and activation |
| US7481997B1 (en) | 2004-02-12 | 2009-01-27 | Montana State University | Snow mountain virus genome sequence, virus-like particles and methods of use |
| KR101204286B1 (ko) | 2004-03-30 | 2012-11-26 | 엔에스진 에이/에스 | 성장 인자 ＮｓＧ33의 치료학적 용도 |
| CN101947310A (zh) | 2004-10-27 | 2011-01-19 | 丹佛大学 | 促肾上腺皮质激素类似物以及相关方法 |
| EP1827401A2 (en) | 2004-12-10 | 2007-09-05 | Talima Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for treating conditions of the nail unit |
| US20060275230A1 (en) | 2004-12-10 | 2006-12-07 | Frank Kochinke | Compositions and methods for treating conditions of the nail unit |
| EP1871163A2 (en) | 2005-06-06 | 2008-01-02 | Genentech, Inc. | Transgenic models for different genes and their use for gene characterization |
| US8389469B2 (en) | 2005-06-06 | 2013-03-05 | The Rockefeller University | Bacteriophage lysins for Bacillus anthracis |
| ES2391334T3 (es) | 2005-06-21 | 2012-11-23 | Xoma Technology Ltd. | Anticuerpos y fragmentos de los mismos que se unen a la IL-1beta |
| US7582291B2 (en) | 2005-06-30 | 2009-09-01 | The Rockefeller University | Bacteriophage lysins for Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium and other bacteria |
| JP2009504183A (ja) | 2005-08-15 | 2009-02-05 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | 遺伝子破壊、それに関連する組成物および方法 |
| ES2357626T3 (es) | 2005-08-24 | 2011-04-28 | The Rockefeller University | Lisinas mutantes de ply-gbs. |
| AU2006335053A1 (en) | 2005-11-21 | 2007-07-19 | Genentech, Inc. | Novel gene disruptions, compositions and methods relating thereto |
| CA2633554C (en) | 2005-12-22 | 2012-11-13 | Genetech, Inc. | Recombinant production of heparin binding proteins |
| CA2638821A1 (en) | 2006-02-17 | 2007-10-11 | Genentech, Inc. | Gene disruptons, compositions and methods relating thereto |
| SG170728A1 (en) | 2006-03-23 | 2011-05-30 | Novartis Ag | Anti-tumor cell antigen antibody therapeutics |
| US7695928B2 (en) | 2006-04-10 | 2010-04-13 | Genentech, Inc. | Disheveled PDZ modulators |
| EP2010662A2 (en) | 2006-04-19 | 2009-01-07 | Genentech, Inc. | Novel gene disruptions, compositions and methods relating thereto |
| CN101557827A (zh) * | 2006-08-31 | 2009-10-14 | 诺瓦提斯公司 | 用于口服递送的包含hgh的药物组合物 |
| AU2007333635B2 (en) | 2006-12-20 | 2014-02-20 | Xoma (Us) Llc | Treatment of IL-1-beta related diseases |
| CN101361968B (zh) | 2007-08-06 | 2011-08-03 | 健能隆医药技术（上海）有限公司 | 白介素-22在治疗脂肪肝中的应用 |
| US8933197B2 (en) * | 2007-08-15 | 2015-01-13 | Amunix Operating Inc. | Compositions comprising modified biologically active polypeptides |
| MX2010006823A (es) | 2007-12-20 | 2010-09-30 | Xoma Technology Ltd | Metodos para el tratamiento de la gota. |
| GB0812742D0 (en) | 2008-07-11 | 2008-08-20 | Critical Pharmaceuticals Ltd | Process |
| WO2011047267A1 (en) | 2009-10-15 | 2011-04-21 | Genentech, Inc. | Chimeric fibroblast growth factors with altered receptor specificity |
| WO2011056561A1 (en) | 2009-10-27 | 2011-05-12 | Beth Israel Deaconess Medical Center | Methods and compositions for the generation and use of conformation-specific antibodies |
| BR112012017535A2 (pt) | 2010-01-15 | 2019-09-24 | Of Medicine And Dentistry Of New Jersey University | uso de compostos de vanádio para cicatrização de osso |
| EP2550018B1 (en) | 2010-03-22 | 2019-02-27 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Compositions and methods useful for stabilizing protein-containing formulations |
| MX2012012743A (es) | 2010-05-03 | 2012-11-23 | Genentech Inc | Composiciones y metodos utiles para reducir la viscosidad de formulaciones que contienen proteina. |
| SI2585045T1 (sl) | 2010-06-24 | 2019-11-29 | Hoffmann La Roche | Sestavki in postopki, ki vsebujejo alkilglikozide za stabilizacijo formulacij, ki vsebujejo beljakovine |
| CN102380091A (zh) | 2010-08-31 | 2012-03-21 | 健能隆医药技术（上海）有限公司 | 白介素-22在治疗病毒性肝炎中的应用 |
| JP6149226B2 (ja) | 2010-10-01 | 2017-06-21 | ホーバ セラピューティクス アンパルトセルスカブ | アロディニア、痛覚過敏、自発痛及び幻肢痛の処置 |
| EP2624852B1 (en) | 2010-10-08 | 2016-12-14 | Shanghai Kexin Biotech Co., Ltd | Diagnostic and therapeutic uses of moesin fragments |
| WO2012045274A1 (en) | 2010-10-08 | 2012-04-12 | Shanghai Kexin Biotech Co., Ltd. | Moesin modulators and uses thereof |
| WO2012092539A2 (en) | 2010-12-31 | 2012-07-05 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Antibodies to dll4 and uses thereof |
| US10487114B2 (en) | 2011-04-27 | 2019-11-26 | Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. | Methods for administering peptides for the generation of effective c/s conformation-specific antibodies to a human subject in need thereof |
| CN102875683B (zh) * | 2011-07-11 | 2014-06-11 | 旭华（上海）生物研发中心有限公司 | 长效重组人生长激素的Fc融合蛋白 |
| HRP20230153T1 (hr) | 2011-10-31 | 2023-03-31 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Formulacije protutijela protiv il13 |
| US20150017157A1 (en) | 2011-12-19 | 2015-01-15 | Xoma (Us) Llc | Methods for treating acne |
| EP2802603A4 (en) | 2012-01-09 | 2015-11-04 | Scripps Research Inst | REGIONS DETERMINING ULTRALONGUAL COMPLEMENTARYITY AND USES THEREOF |
| US20150011431A1 (en) | 2012-01-09 | 2015-01-08 | The Scripps Research Institute | Humanized antibodies |
| CA2904703A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-10-02 | Hallux, Inc. | Method of treating infections, diseases or disorders of nail unit |
| US9688747B2 (en) | 2013-03-15 | 2017-06-27 | Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. | Methods and compositions for the generation and use of conformation-specific antibodies |
| CN111518199A (zh) | 2013-07-18 | 2020-08-11 | 图鲁斯生物科学有限责任公司 | 具有超长互补决定区的人源化抗体 |
| US20160168231A1 (en) | 2013-07-18 | 2016-06-16 | Fabrus, Inc. | Antibodies with ultralong complementarity determining regions |
| AU2014318579A1 (en) | 2013-09-13 | 2016-04-14 | The California Institute For Biomedical Research | Modified therapeutic agents and compositions thereof |
| AU2014337367B2 (en) | 2013-10-15 | 2020-04-30 | The Scripps Research Institute | Peptidic chimeric antigen receptor T cell switches and uses thereof |
| CA2926698C (en) | 2013-10-15 | 2021-06-22 | The California Institute For Biomedical Research | Chimeric antigen receptor t cell switches and uses thereof |
| CN104623637A (zh) | 2013-11-07 | 2015-05-20 | 健能隆医药技术（上海）有限公司 | Il-22二聚体在制备静脉注射药物中的应用 |
| CN104623639A (zh) | 2013-11-07 | 2015-05-20 | 健能隆医药技术（上海）有限公司 | 白介素22二聚体在制备治疗胰腺炎药物中的应用 |
| EP3079668A1 (en) | 2013-12-09 | 2016-10-19 | Durect Corporation | Pharmaceutically active agent complexes, polymer complexes, and compositions and methods involving the same |
| AU2014364589B2 (en) | 2013-12-18 | 2020-02-27 | The California Institute For Biomedical Research | Modified therapeutic agents, stapled peptide lipid conjugates, and compositions thereof |
| NL2014230B1 (en) | 2015-02-04 | 2016-10-12 | Stichting Vu-Vumc | Wound healing formulation. |
| MA41629A (fr) | 2015-03-04 | 2018-01-09 | Center For Human Reproduction | Compositions et méthodes d'utilisation de l'hormone anti-müllérienne pour le traitement de l'infertilité |
| US10800828B2 (en) | 2015-03-26 | 2020-10-13 | The Scripps Research Institute | Switchable non-scFv chimeric receptors, switches, and methods of use thereof to treat cancer |
| US11091546B2 (en) | 2015-04-15 | 2021-08-17 | The Scripps Research Institute | Optimized PNE-based chimeric receptor T cell switches and uses thereof |
| US20190000928A1 (en) | 2015-06-17 | 2019-01-03 | The California Institute For Biomedical Research | Modified therapeutic agents and compositions thereof |
| US11510966B2 (en) | 2016-04-15 | 2022-11-29 | Evive Biotechnology (Shanghai) Ltd | Use of IL-22 in treating necrotizing enterocolitis |
| AU2017345479B2 (en) | 2016-10-19 | 2024-03-21 | The Scripps Research Institute | Chimeric antigen receptor effector cell switches with humanized targeting moieties and/or optimized chimeric antigen receptor interacting domains and uses thereof |
| JP2021526837A (ja) | 2018-06-12 | 2021-10-11 | アンジーエックス・インコーポレーテッド | 抗体−オリゴヌクレオチドコンジュゲート |
| WO2020205716A1 (en) | 2019-04-01 | 2020-10-08 | Genentech, Inc. | Compositions and methods for stabilizing protein-containing formulations |
| CN119409834A (zh) | 2019-08-12 | 2025-02-11 | 北京恩瑞尼生物科技股份有限公司 | 用于通过cd39表达细胞的adcc靶向促进和增强t细胞介导的免疫反应的方法和组合物 |
| CA3158893A1 (en) | 2019-10-24 | 2021-04-29 | Minotaur Therapeutics, Inc. | Chimeric cytokine modified antibodies and methods of use thereof |
| US12583900B2 (en) | 2019-12-04 | 2026-03-24 | The Scripps Research Institute | Peptide conjugates and methods of use |
| US12527875B2 (en) | 2020-02-19 | 2026-01-20 | Evive Biotechnology (Shanghai) Ltd | Methods for treating graft versus host disease |
| JP2024517759A (ja) | 2021-04-28 | 2024-04-23 | ミノトール セラピューティクス インコーポレイテッド | ヒト化キメラウシ抗体および使用方法 |
| WO2022233989A1 (en) | 2021-05-06 | 2022-11-10 | Hoba Therapeutics Aps | Prevention and treatment of chemotherapy-induced neuropathic pain |
| JP2024522196A (ja) | 2021-06-09 | 2024-06-11 | ザ スクリプス リサーチ インスティテュート | 長時間作用型デュアルｇｉｐ／ｇｌｐ－１ペプチドコンジュゲートおよび使用方法 |
| JP2024546758A (ja) | 2021-12-10 | 2024-12-26 | ホバ セラピューティクス エーピーエス | 侵害受容性疼痛の治療 |
| IL316289A (en) | 2022-04-29 | 2024-12-01 | Purinomia Biotech Inc | Methods and compositions for treating diseases and disorders driven by eosinophils |
| WO2025076280A1 (en) | 2023-10-05 | 2025-04-10 | Ashibio, Inc. | Methods and compositions for treating mmp-9 mediated disorders |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3773919A (en) * | 1969-10-23 | 1973-11-20 | Du Pont | Polylactide-drug mixtures |
| HUT35524A (en) * | 1983-08-02 | 1985-07-29 | Hoechst Ag | Process for preparing pharmaceutical compositions containing regulatory /regulative/ peptides providing for the retarded release of the active substance |
| DK204791D0 (da) * | 1991-12-20 | 1991-12-20 | Novo Nordisk As | Hidtil ukendt farmaceutisk praeparat |
| US5656297A (en) * | 1992-03-12 | 1997-08-12 | Alkermes Controlled Therapeutics, Incorporated | Modulated release from biocompatible polymers |
| DK0674506T3 (da) * | 1992-12-02 | 2001-01-08 | Alkermes Inc | Væksthormonholdige mikrosfærer med styret frigivelse |
| EP0686045B1 (en) * | 1993-02-23 | 2000-11-15 | Genentech, Inc. | Excipient stabilization of polypeptides treated with organic solvents |
| AU695323B2 (en) * | 1994-09-09 | 1998-08-13 | Takeda Chemical Industries Ltd. | Sustained release preparation containing metal salt of a peptide |
-
1996
- 1996-06-03 PT PT96919016T patent/PT831787E/pt unknown
- 1996-06-03 NZ NZ310644A patent/NZ310644A/xx unknown
- 1996-06-03 JP JP9500870A patent/JPH11506740A/ja active Pending
- 1996-06-03 WO PCT/US1996/008086 patent/WO1996040072A2/en not_active Ceased
- 1996-06-03 CA CA002223436A patent/CA2223436A1/en not_active Abandoned
- 1996-06-03 BR BR9608542-8A patent/BR9608542A/pt not_active Application Discontinuation
- 1996-06-03 PL PL96323832A patent/PL184531B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 CZ CZ19973907A patent/CZ288147B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 IL IL12238596A patent/IL122385A/xx not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 SK SK1671-97A patent/SK281571B6/sk unknown
- 1996-06-03 HU HU9900870A patent/HUP9900870A3/hu unknown
- 1996-06-03 DK DK96919016T patent/DK0831787T3/da active
- 1996-06-03 DE DE69614685T patent/DE69614685T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-03 CN CN96194614A patent/CN1102854C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-03 RU RU97119935/14A patent/RU2161502C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 ES ES96919016T patent/ES2161366T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-03 AU AU61469/96A patent/AU708756B2/en not_active Ceased
- 1996-06-03 EP EP96919016A patent/EP0831787B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-03 AT AT96919016T patent/ATE204468T1/de not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-12-05 NO NO19975708A patent/NO316104B1/no unknown
- 1997-12-05 MX MX9709698A patent/MX9709698A/es not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| MX9709698A (es) | 1998-07-31 |
| CZ390797A3 (cs) | 1998-07-15 |
| EP0831787A2 (en) | 1998-04-01 |
| NO975708D0 (no) | 1997-12-05 |
| EP0831787B1 (en) | 2001-08-22 |
| WO1996040072A2 (en) | 1996-12-19 |
| PT831787E (pt) | 2002-02-28 |
| PL323832A1 (en) | 1998-04-27 |
| NZ310644A (en) | 1999-08-30 |
| CZ288147B6 (en) | 2001-05-16 |
| RU2161502C2 (ru) | 2001-01-10 |
| ES2161366T3 (es) | 2001-12-01 |
| HUP9900870A2 (hu) | 1999-09-28 |
| DE69614685T2 (de) | 2002-06-27 |
| DE69614685D1 (de) | 2001-09-27 |
| HK1009089A1 (en) | 1999-09-10 |
| CN1102854C (zh) | 2003-03-12 |
| NO975708L (no) | 1998-02-05 |
| DK0831787T3 (da) | 2001-12-17 |
| IL122385A0 (en) | 1998-06-15 |
| ATE204468T1 (de) | 2001-09-15 |
| AU708756B2 (en) | 1999-08-12 |
| WO1996040072A3 (en) | 1997-01-23 |
| AU6146996A (en) | 1996-12-30 |
| JPH11506740A (ja) | 1999-06-15 |
| CN1187120A (zh) | 1998-07-08 |
| CA2223436A1 (en) | 1996-12-19 |
| SK167197A3 (en) | 1998-06-03 |
| NO316104B1 (no) | 2003-12-15 |
| BR9608542A (pt) | 1999-11-30 |
| SK281571B6 (sk) | 2001-05-10 |
| IL122385A (en) | 2001-01-11 |
| HUP9900870A3 (en) | 2001-04-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PL184531B1 (pl) | Kompozycja o opóźnionym uwalnianiu ludzkiego hormonu wzrostu do wytwarzania leku do terapii | |
| US6051259A (en) | Composition for sustained release of human growth hormone | |
| AU772910B2 (en) | Method of producing submicron particles of a labile agent | |
| EP0758227B1 (en) | Modulated release from biocompatible polymers | |
| AU705451B2 (en) | Composition for sustained release of non-aggregated erythropoietin | |
| US6368630B1 (en) | Modulated release from biocompatible polymers | |
| US5674534A (en) | Composition for sustained release of non-aggregated erythropoietin | |
| HU221602B (hu) | Fémkationnal komplexet képező, interferont tartalmazó, szabályozott hatóanyag-leadású gyógyszerkészítmény | |
| US6514533B1 (en) | Device for the sustained release of aggregation-stabilized, biologically active agent | |
| AU705968B2 (en) | Device for releasing aggregation-stabilized, biologically active agent | |
| EP1080718A1 (en) | Composition for sustained release of human growth hormone | |
| AU5836599A (en) | composition for sustained release of human growth hormone | |
| HK1009089B (en) | Composition for sustained release of human growth hormone |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20080603 |