PL208420B1 - Nowy szczep Lactobacillus plantarum i kompozycja zawierająca nowy szczep Lactobacillus plantarum - Google Patents

Nowy szczep Lactobacillus plantarum i kompozycja zawierająca nowy szczep Lactobacillus plantarum

Info

Publication number
PL208420B1
PL208420B1 PL380802A PL38080206A PL208420B1 PL 208420 B1 PL208420 B1 PL 208420B1 PL 380802 A PL380802 A PL 380802A PL 38080206 A PL38080206 A PL 38080206A PL 208420 B1 PL208420 B1 PL 208420B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
lactobacillus plantarum
strain
lactobacillus
bacteria
new strain
Prior art date
Application number
PL380802A
Other languages
English (en)
Other versions
PL380802A1 (pl
Inventor
Piotr B. Heczko
Magdalena Strus
Urszula Skorupska
Barbara Łukawska
Grzegorz Stefański
Original Assignee
Inst Biotechnologii Surowic I Szczepionek Biomed Społka Akcyjna
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Inst Biotechnologii Surowic I Szczepionek Biomed Społka Akcyjna filed Critical Inst Biotechnologii Surowic I Szczepionek Biomed Społka Akcyjna
Priority to PL380802A priority Critical patent/PL208420B1/pl
Publication of PL380802A1 publication Critical patent/PL380802A1/pl
Publication of PL208420B1 publication Critical patent/PL208420B1/pl

Links

Landscapes

  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest nowy szczep Lactobacillus plantarum i kompozycja zawierająca nowy szczep Lactobacillus plantarum.
Podstawowymi gatunkami z rodzaju Lactobacillus zasiedlającymi ludzki przewód pokarmowy są między innymi: Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus, zaś z rodzaju Bifidobacterium od ludzi izolowane zostały: Bifidobacterium infantis (z dwoma podgatunkami), Bifidobacterium longum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium dentium, Bifidobacterium catenulatum i Bifidobacterium angulatum.
Obecność bakterii z rodzaju Lactobacillus i Bifidobacterium zarówno w górnym jak i w dolnym odcinku, nie wyłączając śluzówki żołądka, jest uważana za szczególnie pożądaną. Posługując się określeniem Fullera bakterie te zaliczamy do probiotyków.
Probiotyki są to żywe, bakteryjne dodatki do żywności, stymulujące i poprawiające funkcjonowanie przewodu pokarmowego gospodarza.
Wymagania stawiane szczepom probiotycznym są bardzo wysokie, a mianowicie powinny one:
1. pochodzić ze zdrowej mikroflory ludzkiego organizmu,
2. posiadać precyzyjnie określony rodzaj i gatunek, potwierdzony najnowszymi badaniami molekularnymi,
3. wykazywać wyjątkową, antagonistyczną aktywność wobec typowych patogenów przewodu pokarmowego,
4. posiadać zdefiniowane właściwości powierzchniowe i adherencyjne potwierdzone za pomocą badań przeprowadzonych przy u ż yciu hodowli tkankowej,
5. wykazywać oporność na sole żółci i niskie pH soku żołądkowego,
6. wykazywać wzór oporności na dane antybiotyki typowy dla poszczególnych gatunków, a ponadto, nie posiadać plazmidowego DNA kodują cego oporność.
Bakterie probiotyczne wykorzystywane są do uzupełnienia, odtwarzania i podtrzymywania prawidłowego składu normalnej flory po zakończonej kuracji antybiotykowej. Dzięki zdolności do adherencji bakterie probiotyczne blokują uwolnione na powierzchni jelita receptory przez co uniemożliwiają przytwierdzenie się i kolonizację bakteriom chorobotwórczym wywołującym biegunki poantybiotykowe. Ponadto coraz więcej prac naukowych mówi o celowym wykorzystaniu bakterii probiotycznych do profilaktyki i leczenia ostrych zakażeń jelitowych, których czynnikami chorobotwórczymi są najczęściej E. coli, Shigella, Salmonella, Capylobacter, a także rotawirusy. Badania wykazują wzajemne zależności pomiędzy Helicobacter pylori, a bakteriami probiotycznymi. Bakterie probiotyczne wzmacniają mechanizmy obronne organizmu człowieka. W celu odtworzenia naturalnej flory bakteryjnej podaje się zwiększone ilości bakterii probiotycznych w kompozycjach leczniczych. Znane jest z polskiego opisu patentowego nr 184037 zastosowanie Lactobacillus plantarum zawierających specyficzną względem mannozy adhezynę, do wytwarzania środka farmaceutycznego hamującego wiązanie się bakterii patogenicznych eksprymujących specyficzne względem mannozy adhezyny z powierzchnią komórek nabłonkowych. Szczep Lactobacillus plantarum, który można zastosować zgodnie z wynalazkiem przywiera do kuleczek agarozowych powleczonych Dmannozą. Wynalazek dotyczy ponadto zastosowania takich szczepów do wytwarzania środka farmaceutycznego do stosowania w profilaktyce i/lub leczeniu stanów związanych z translokacją bakteryjną, zapalenia żołądka i jelit oraz innych chorób wywołanych przez bakterie eksprymujące specyficzne względem mannozy adhezyny. Znany jest z polskiego opisu patentowego nr 184603 środek farmaceutyczny do leczenia i/lub profilaktyki uszkodzenia i niewydolności wątroby. Środek ten zawiera szczep Lactobacillus plantarum zdolny do kolonizacji ludzkiej błony śluzowej jelita in vivo w połączeniu z argininą i farmaceutycznie dopuszczalnym noś nikiem. W szczególności przedmiotem wynalazku jest środek zawierający nowy szczep Lactobacillus plantarum 299 lub Lactobacillus plantarum 299v zdeponowane w DSM.
Celem wynalazku jest wyizolowanie nowego szczepu bakterii kwasu mlekowego o silnych właściwościach probiotycznych, który będzie miał optymalne oddziaływanie na przewód pokarmowy.
Istotą wynalazku jest nowy szczep Lactobacillus plantarum PL02, nr depozytu B/00012, zdeponowany w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów w Instytucie Immunologii i Terapii Doświadczalnej PAN we Wrocławiu i kompozycja zawierająca nowy szczep bakterii Lactobacillus plantarum PL02.
PL 208 420 B1
1. Identyfikacja szczepu.
Szczep Lactobacillus plantarum PL02 pochodzi z przewodu pokarmowego zdrowych noworodków karmionych mlekiem matki. Szczep został zdeponowany zgodnie z traktatem Budapeszteńskim w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów (PCM) w Instytucie Immunologii i Terapii Doś wiadczalnej Polskiej Akademii Nauk, 53-114 Wrocław, ul. Rudolfa Weigla 12.
Depozyt złożono w dniu 16. 06. 2005 r.
Depozytowi nadano numer B/00012
2. Oznaczanie przynależności gatunkowej szczepu Lactobacillus plantarum PL02.
W celu zbadania przynależności gatunkowej szczepu Lactobacillus plantarum PL02 posłużono się zarówno metodą fenotypową za pomocą zestawu API 50CHL jak i genotypową (metoda PCR z zastosowaniem gatunkowo swoistych starterów) ponadto wykonano sekwencjonowanie podjednostki 16S rRNA. Potwierdzono zarówno metodami fenotypowymi jak i genotypowymi, że badany szczep PL02 należy do gatunku Lactobacillus plantarum.
3. Oznaczanie antagonistycznych właściwości szczepu Lactobacillus plantarum PL02 wobec typowych czynników patogennych przewodu pokarmowego za pomocą metody słupkowej.
Antagonizm wobec innych bakterii i grzybów jest jednym z dokładniej poznanych i udowodnionych mechanizmów działania bakterii probiotycznych w przewodzie pokarmowym. Polega on na eliminacji drobnoustrojów chorobotwórczych
- dzię ki wytwarzanym metabolitom, takim jak kwas mlekowy i octowy pochodzących gł ównie z fermentacji wę glowodanów,
- dzięki syntezie swoistych zwią zków antybakteryjnych (substancji podobnych do bakteriocyn, lantybiotyków), takich jak laktocyna (Lactobacillus spp.), czy acidofilina (Lactobacillus acidophilus)
Substancje podobne do bakteriocyn lub bardziej precyzyjnie lantybiotyki są aktywnymi biologicznie, peptydowymi substancjami działającymi bakteriobójczo na blisko spokrewnione drobnoustroje. Mechanizm ich działania polega na wytwarzaniu por w ścianie komórek wrażliwych bakterii, przez które wypływają niskocząsteczkowe substancje, takie jak jony i elektrolity zawarte w cytoplazmie, co w konsekwencji prowadzi do zniszczenia komórki. Szczepy wytwarzające bakteriocyny mają jednocześnie geny zabezpieczające je przed samounicestwieniem.
Badanie antagonizmu przeprowadzono za pomocą metody słupkowej. Wybrano drobnoustroje wskaźnikowe (Tabela 1), które stanowią tlenowe i beztlenowe czynniki patogenne zakażeń ludzkiego przewodu pokarmowego, oraz stanowią element składowy lokalnej flory przewodu pokarmowego (wybrane gatunki Lactobacillus i Bifidobacterium).
T a b e l a 1: Antagonizm badanego szczepu Lactobacillus plantarum PL02.
Szczepy wskaźnikowe Strefa zahamowania wzrostu/skala zahamowania wzrostu
Stapylococcus aureus ATTC 25923 15 mm / 2
Salmonella enteritidis 23 mm / 3
Shigella sonnei 22 mm / 3
Escherichia coli ATCC 24922 25 mm / 3
Campylobacter jejuni ATCC 29428 28 mm / 4
Helicobacter pylori DSMZ 4867 22 mm / 3
Clostrdium difficile 25 mm / 3
Lactobacillus rhamnosus GG 12 mm / 1
Lactobacillus plantarum DSMZ 20174 15 mm / 1
Bifidobacterium longum DSMZ 20219 21 mm / 2
Skala zahamowania wzrostu: 1 - Średnica strefy zahamowania wynosi: 12-16 mm 2 - Średnica strefy zahamowania wynosi: 17-21 mm 3 - Średnica strefy zahamowania wynosi: 22-26 mm 4 - Średnica strefy zahamowania wynosi: 27-35 mm
PL 208 420 B1
Badany szczep Lactobacillus plantarum PL02 wykazuje bardzo silne i silne antagonistyczne właściwości wobec bakterii wskaźnikowych należących do rodzajów: Campylobacter, Helicobacter, Clostridium, Shigella, Salmonella, Escherichia, czyli do bakterii będących typowymi patogenami ludzkiego przewodu pokarmowego, zaś słabe działanie wobec innych bakterii z rodzaju Lactobacillus, które mogą kolonizować przewód pokarmowy drogą naturalną.
4. Oznaczanie właściwości adherencyjnych szczepu Lactobacillus plantarum PL02 do ludzkiej linii tkankowej HT-29MTX.
Właściwości adherencyjne szczepu Lactobacillus plantarum PL02 zostały przeprowadzone na ludzkiej linii komórek jelitowych HT-29MTX. Działanie metotrexatu (MTX) indukuje tkankę HT-29 do wydzielania zwiększonej ilości śluzu, dzięki czemu ten model tkankowy bardziej przypomina naturalne właściwości jelita grubego zdrowego człowieka. Hodowlę tkankową prowadzono metodą wielokrotnych pasaży przez okres 20 dni do uzyskania jednolitej warstwy (monolayer). Stosowano podłoże
DMEM, wzbogacone dodatkiem 10% inaktywowanej, płodowej surowicy cielęcej. Ponadto, podłoże to zawierało 3 mM/ml L-glutaminy oraz antybiotyki: 100 μg/ml-1 streptomycyny i 100 U/ml-1 penicyliny. Hodowle prowadzono w temperaturze 37°C w atmosferze o zwiększonej wilgotności zawierającej 10% CO2, zmieniając podłoże odżywcze 2 razy w tygodniu. Zliofilizowany szczep Lactobacillus plantarum PL02 zawieszano w 10 ml bulionu MRS i inkubowano przez pół godziny w cieplarce, w temperaturze 37°C, a następnie sprawdzono gęstość mieszaniny szczepów za pomocą dziesiątkowych rozcieńczeń. Do testu adherencji pobrano 500 μl badanego szczepu o gęstości około 2x109 i 500 μl płynu hodowlanego DMEM. Tak przygotowaną mieszaninę dodawano do dołków zawierających komórki Ht-29MTX. Komórki linii tkankowej wraz z badanym szczepem inkubowano w temperaturze 37°C, w atmosferze wzbogaconej 10% CO2 przez 30 minut. Po inkubacji komórki przemywano dwukrotnie PBS w celu usunięcia nie przyczepionych bakterii, a następnie utrwalano 3,7% formaldehydem w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Po utrwaleniu komórki ponownie przemywano PBS i barwiono fioletem krystalicznym przez 3 minuty. Preparat oceniano mikroskopowo przy powiększeniu 1000 x. Zliczano komórki Lactobacillus plantarum PL02, które zaadherowały do linii tkankowej w 20 polach widzenia preparatu. Badanie adherencji szczepu Lactobacillus plantarum PL02 do tkanki HT-29MTX było przeprowadzone dwukrotnie w dniu 05.06.2006,12.06.2006.
T a b e l a 2. Wynik adherencja szczepu Lactobacillus plantarum PL02 do ludzkiej linii tkankowej HT-29MTX.
Data wykonania oznaczenia Stopień adherencji
05.06.2006 ++ +
12.06.2006 ++ +
Legenda dotycząca określenia stopnia adherencji do tkanki HT-29-MTX wg standardu wewnętrznego.
Stopień adherencji Liczba komórek bakteryjnych
Bardzo wysoki stopień adherencji +++ Powyżej 80
Wysoki stopień adherencji ++ Zakres 60-80
Średni stopień adherencji + Zakres 40-60
Słaby stopień adherencji Poniżej 40
• Liczbę komórek bakteryjnych podaje się jako ś rednią z 20 pól widzenia w preparacie.
• Komórki HT29-MTX stosuje się do badań w postaci hodowli jednowarstwowej (monolayeru).
Ś rednia z 20 pól widzenia z dwóch badań wynosiła 85 komórek bakteryjnych dając bardzo wysoki stopień adherencji (+++).
Badany szczep Lactobacillus plantarum PL02 wyizolowany z normalnej mikroflory ustroju ludzkiego wykazywał bardzo wysoki stopień adherencji do ludzkiej linii komórkowej nabłonka jelitowego
HT-29MTX.
PL 208 420 B1
5. Oznaczanie oporności na antybiotyki szczepu Lactobacillus plantarum PL02 za pomocą metody dyfuzyjno krążkowej.
Szczep Lactobacillus plantarum PL02 oraz wzorzec tego samego gatunku tj. Lactobacillus plantarum DSMZ 20174 posiewano metodą redukcyjną na płytki ze stałym podłożem MRS, a następnie inkubowano w standardowych warunkach beztlenowych w temperaturze 37°C przez 24 godz. Uzyskane w ten sposób pojedyncze kolonie zawieszano w 1 ml płynnego podłoża MRS i inkubowano w tych samych warunkach przez 24 godz. Nastę pnie przy wykorzystaniu soli fizjologicznej doprowadzano gęstość hodowli do 0,5 według skali McFarland'a. Tak przygotowane zawiesiny bakteryjne rozprowadzano przy użyciu jałowego wacika po całej powierzchni uprzednio przygotowanych płytek ze stałym podłożem MRS w objętości 20 ml. Na płytki nakładano krążki nasycone antybiotykami, a nastę pnie inkubowano w warunkach beztlenowych w temperaturze 37°C przez 24 godz.
T a b e l a 3: Wrażliwość badanych szczepów Lactobacillus plantarum PL02 i Lactobacillus plantarum DSMZ 20174 na antybiotyki oznaczone metodą krążkową.
Antybiotyk Stężenie L. plantarum 20174 L. plantarum PL02
Penicylina 10 μg/L 33 32
Ciprofloksacyna 5 μg/L 6 9
Cefaklor 30 μg/L 40 38
Doksacyklina 30 μg/L 28 26
Oksycylina 1 μg/L 8 11
Kotrymoksazol 25 μg/L 28 25
Erytromycyna 15 μg/L 32 30
Ampicylina 10 μg/L 33 34
Gentamycyna 10 μg/L 14 10
Wankomycyna 30 μg/L 6 6
Metronidazol 5 μg/L 6 6
Oporność szczepów bakterii probiotycznych na leki przeciwbakteryjne jest przedmiotem szczegółowych badań ze względów bezpieczeństwa przyszłych preparatów leczniczych. Chodzi tu głównie o mo ż liwość przeniesienia genów opornoś ci na antybiotyki z podanych w preparacie, ż ywych bakterii na inne składniki flory chorego i rozpowszechnienie genów oporności wśród składników normalnej flory, co może spowodować uniemożliwienie leczenia ewentualnych zakażeń tego chorego lub jego kontaktów. Bakterie z rodzaju Lactobacillus wykazują oporność gatunkową, tzn. oporność, która na stałe związana jest z danym gatunkiem (np. bakterie Lactobacillus acidophilus są zawsze wrażliwe na wankomycynę, zaś np. Lactobacillus rhamnosus są na ten lek zawsze oporne). Oporność na dany antybiotyk pojawiająca się w jednym lub kilku szczepach danego gatunku odbiegająca od generalnej wrażliwości całego gatunku, lub znajdowana w szczepach wyizolowanych od chorego w trakcie leczenia antybiotykiem może oznaczać jednostkowe nabycie cechy oporności na drodze mutacji lub wymiany materiału genetycznego zlokalizowanego na plazmidzie, jest to już oporność plazmidowa (nabyta). Zjawisko nabywania oporności przez bakterie z rodzaju Lactobacillus nie jest korzystne, istnieje bowiem zagrożenie jej przekazywania enterokokom (również drogą plazmidową), które wraz ze szczepami Lactobacillus są naturalnym symbiontem przewodu pokarmowego.
6.1. Izolacja DNA chromosomalnego metodą kolumienkową.
Na zdjęciu (a) widoczny prążek odpowiadający DNA chromosomalnemu (na wysokości prążka 23130pz markera wielkości λ/Hind III). Nie widać żadnych prążków poniżej ani powyżej DNA chromosomalnego, które mogłyby świadczyć o obecności DNA plazmidowego. Kontrolą pozytywną jest szczep Lactobacillus rhamnosus u którego poniżej DNA chromosomalnego(prążek na wysokości 23130pz) widoczne są dodatkowe prążki świadczące o obecności DNA plazmidowego - zdjęcie (b).
PL 208 420 B1
6.2. Izolacja DNA plazmidowego wg metody O'Sullivan.
Metoda używana do rodzaju Latobacillus i Lactococcus. Na zdjęciu (c) widać niewielkie ilości
DNA chromosomalnego (na wysokości prążka 23130pz markera wielkości λ/Hind III), które pozostało w trakcie izolacji DNA plazmidowego, nie widać prążków odpowiadających wielkością DNA plazmidowemu (poniżej wysokości 23130pz).
Lekooporność szczepu należącego do gatunków Lactobacillus plantarum (PL02), reprezentuje wzór oporności typowy dla danego gatunku. Ponadto w wyniku zastosowania dwóch metod wykazano brak obecności dodatkowego prążka DNA (poniżej wysokości 23130pz), który mógłby być obrazem plazmidowego DNA.
7. Oznaczenie oporności szczepu Lactobacillus plantarum PL02 na niskie pH.
Szczep Lactobacillus plantarum PL02 namnożono w płynnym podłożu MRS. Hodowlę prowadzono w warunkach beztlenowych w 37°C przez 24 godziny, a po upływie tego czasu, za pomocą dziesiątkowych rozcieńczeń, określono uzyskaną gęstość poszczególnych bakterii. Następnie przy pomocy 1N HCl obniżano pH medium hodowlanego do wartości 1,2 równej wartości pH soku żołądkowego. Hodowle dalej inkubowano przez 20 minut w warunkach beztlenowych w 37°C, a następnie ponownie ją wysiewano w celu określenia stopnia redukcji badanych populacji bakterii pod wpływem niskiego pH.
PL 208 420 B1
T a b e l a 4: Oporność szczepów: Lactobacillus plantarum PL02 i szczepu wzorcowego Lactobacillus plantarum DSMZ 20174 na niskie pH.
Gęstość bakterii podana w j.t.k./1 ml
Szczep Czas wyjściowy 20 min. inkubacji w pH 1.2
L. plantarum 20174 7 x 108 5 x 107
L. plantarum PL02 1 x 108 2 x 107
8. Oznaczanie oporności szczepu Lactobacillus plantarum PL02 na sole żółci.
W celu oznaczenia oporności badanego szczepu Lactobacillus plantarum PL02 na sole żółci posłużono się metodą Dashkevicz'a i Feighner'a. Metoda ta polegała na dodaniu do agaru MRS barwnika wskaźnikowego - purpury bromokrezolowej w ilości 0,17 g/l oraz soli żółci w pięciu kolejnych stężeniach: 1 g/l, 2 g/l, 5 g/l, 10 g/l, 20 g/l. Na tak przygotowane, stałe podłoża MRS posiewano metodą redukcyjną 100 μΐ hodowli szczepu Lactobacillus plantarum PL02, który następnie inkubowano w standardowych warunkach beztlenowych przez 48 godz. Po zakończonej inkubacji oceniano zmianę barwy kolonii szczepu Lactobacillus plantarum PL02, które oporne na dane stężenie soli żółci nabierały koloru jasno żółtego, jak również podłoże wzrostowe zmieniało swoje zabarwienie z fioletowego na żółte.
T a b e l a 5: Wzrost szczepu Lactobacillus plantarum PL02 w obecności soli żółci w stężeniach: 1, 2, 5, 10, 20 g/l.
Sole żółci stężenie L. plantarum 20174 L. plantarum PL02
1 g/l +++ +++
2 g/l +++ +++
5 g/l +++ +++
10 g/l +++ +++
20 g/l +++ +++
Przebadany szczep Lactobacillus plantarum PL02 wykazał dużą oporność zarówno na niskie pH (równe wartości pH występujące w soku żołądkowym) jak i na sole żółci, co może świadczyć o przystosowaniu tego szczepu do warunków panujących w ludzkim przewodzie pokarmowym.
9. Badanie antagonistycznego działania Lactobacillus plantarum PL02 na wzrost Candia albicans.
Do badania antagonistycznego działaniem Lactobacillus plantarum PL02 na wzrost Candida albicans wybrano 4 grzyby z których 3 pochodziły z przewodu pokarmowego, zaś jeden był szczepem kolekcyjnym (Candida albicans ATCC 10231). Ponadto jako kontrolę antygrzybiczego działania bakterii kwasu mlekowego na grzyby zastosowano również szczep Lactobacillus rhamnosus GG. Do badania posłużono się zmodyfikowaną metodą półilościową według Fitzsimmons i Berry. Metoda polegała na zastosowaniu podłóż dwuwarstwowych. Pierwszą warstwę stanowiło podłoże MRS agar (Oxoid) na którym posiewano w formie paska o szerokości 2 cm badane szczepy probiotyczne z rodzaju Lactobacillus. Po wymazaniu płytki inkubowano przez 48 godzin w warunkach beztlenowych, a po upływie tego czasu na wierzch wylewano drugie, lekko przestudzone, płynne podłoże MYPG agar (Bacto YM Agar, Difco) w kierunku wzrostu grzybów wskaźnikowych. Po zastygnięciu na podłoże wysiewano grzyby z rodzaju Candida o gęstości 0,5 MacFarlanda. Następnie płytki były wkładane na 4 godziny do lodówki na 4°C, a następnie dalszą inkubacje prowadzono już w warunkach tlenowych w 37°C przez 24 godziny. Uzyskane wyniki oceniono według następującej legendy:
- Brak działania antagonistycznego Lactobacillus wobec Candida albicans nie zaobserwowano żadnej strefy zahamowania wzrostu Candida wzdłuż paska z wymazanym szczepem probiotycznym.
+ Częściowe działanie antagonistyczne Lactobacillus wobec Candida albicans obserwuje się lekkie przyhamowanie wzrostu Candida jedynie nad paskiem z wymazanym szczepem probiotycznym.
PL 208 420 B1 ++ Wyraźne działanie antagonistyczne Lactobacillus wobec Candida albicans obserwuje się wyraźne przyhamowanie wzrostu Candida nad paskiem z wymazanym szczepem probiotycznym czasami wyraźniej w jego górnej i dolnej części.
+++ Bardzo silne działanie antagonistyczne Lactobacillus wobec Candida albicans obserwuje się wyraźne przyhamowanie wzrostu Candida nad paskiem i poza jego powierzchnią wzdłuż całej linii posiewu szczepu probiotycznego.
Badanie antagonistycznego działania Lactobacillus plantarum PL02 za pomocą metody półilościowej w warunkach in vitro wykazało, że badany szczep wykazuje działanie wobec 4 wybranych szczepów grzybów Candida albicans.
T a b e l a 1. Antagonistyczne działanie Lactobacillus plantarum PL02 na wybrane szczepy Candida albicans.
Badany szczep L. plantarum PL02 Kontrola L. rhamnosus GG
C. albicans 1 ++ +++
C. albicans 2 ++ +++
C. albicans 3 ++ +++
C. albicans wzorzec ATCC 10231 +++ +++
Przeprowadzone badania laboratoryjne wykazały, że badany szczep Lactobacillus plantarum PL02 można uznać za szczep probiotyczny pochodzenia ludzkiego, ponieważ spełnia wszystkie kryteria funkcjonalności i bezpieczeństwa wymagane od probiotyków doustnych i pochodzi z ludzkiego przewodu pokarmowego. Tak więc z punktu widzenia mikrobiologicznego może on być zalecany jako dodatek żywnościowy w celu uzupełniania składu fizjologicznej flory przewodu pokarmowego dzieci i dorosłych we wszystkich stanach wskazujących na zaburzenia tego składu z różnych przyczyn, np. związanych z leczeniem antybiotykami, biegunką na różnym tle, niedoborami witamin i innych składników pokarmowych itp.
P r z y k ł a d w y k o n a n i a
Kompozycja probiotyczna według wynalazku została zastosowana w produkcie będącym suplementem diety. Produkt ten ma postać kapsułek. Jedna kapsułka zawiera 1·109 bakterii Lactobacillus plantarum PL02 oraz maltodekstrynę, mleko i sacharozę. Preparat stosuje się w celu ochrony przewodu pokarmowego, np. w czasie stosowania antybiotyków.

Claims (2)

1. Nowy szczep bakterii Lactobacillus plantarum PL02 PCM B/00012.
2. Kompozycja składająca się z nowego szczepu bakterii, nośnika i substancji wypełniającej znamienna tym, że jako szczep bakteryjny zawiera Lactobacillus plantarum PL02 PCM B00012.
PL380802A 2006-10-10 2006-10-10 Nowy szczep Lactobacillus plantarum i kompozycja zawierająca nowy szczep Lactobacillus plantarum PL208420B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL380802A PL208420B1 (pl) 2006-10-10 2006-10-10 Nowy szczep Lactobacillus plantarum i kompozycja zawierająca nowy szczep Lactobacillus plantarum

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL380802A PL208420B1 (pl) 2006-10-10 2006-10-10 Nowy szczep Lactobacillus plantarum i kompozycja zawierająca nowy szczep Lactobacillus plantarum

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL380802A1 PL380802A1 (pl) 2008-04-14
PL208420B1 true PL208420B1 (pl) 2011-04-29

Family

ID=43033805

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL380802A PL208420B1 (pl) 2006-10-10 2006-10-10 Nowy szczep Lactobacillus plantarum i kompozycja zawierająca nowy szczep Lactobacillus plantarum

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL208420B1 (pl)

Also Published As

Publication number Publication date
PL380802A1 (pl) 2008-04-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111484957B (zh) 动物双歧杆菌乳亚种i797、其分离纯化方法及应用
Dodoo et al. Targeted delivery of probiotics to enhance gastrointestinal stability and intestinal colonisation
Presti et al. Evaluation of the probiotic properties of new Lactobacillus and Bifidobacterium strains and their in vitro effect
Rönkä et al. Probiotic and milk technological properties of Lactobacillus brevis
ES2534750T3 (es) Lactobacillus pentosus que produce bacteriocinas y uso del mismo en composiciones alimentarias y farmacéuticas
KR101255894B1 (ko) 락토바실러스 플란타룸 및 그의 용도
EP2000530B1 (en) Composition of lactobacillus strains and the application of the composition of lactobacillus strains
ES2540569T3 (es) Bifidobacteria productora de ácido fólico, composición alimenticia y uso de dicha bifidobacteria
EP3494206B1 (en) Lactic bacteria and the use thereof for the preventive, inhibitory and/or reductive treatment of the formation of bacterial biofilms
US8440450B2 (en) Antibiotic-sensitive lactic acid bacteria strains
Saini et al. In vitro evaluation of probiotic potential of Lactobacillus cultures of human origin capable of selenium bioaccumulation
Mandal Curd lactobacilli with probiotic potentiality
KR100435505B1 (ko) 김치에서 분리된 헬리코박터 필로리의 부착과성장억제성능 락토바실러스 플란타룸
CA2890965C (en) Probiotic strains isolated from dogs for use in dog food, treats and/or supplements
Gomes et al. Comparison of antagonistic ability against enteropathogens by G+ and G− anaerobic dominant components of human fecal microbiota
Kiray et al. Evaluation of vaginal lactobacilli with potential probiotic properties and biotherapeutic effects isolated from healthy Turkish women
PL208420B1 (pl) Nowy szczep Lactobacillus plantarum i kompozycja zawierająca nowy szczep Lactobacillus plantarum
PL208421B1 (pl) Nowy szczep Bifidobacterium longum
PL208422B1 (pl) Nowy szczep Lactobacillus rhamnosus
PL209430B1 (pl) Kompozycja probiotyczna i zastosowanie kompozycji probiotyczej
KR102787888B1 (ko) 락티플란티바실러스 플란타룸 nd88 및 이를 포함하는 충치 개선, 예방 또는 치료용 조성물
RU2364623C2 (ru) Бактериальный штамм бифидобактерий - продуцент фолиевой кислоты (варианты), его применения и пробиотическая композиция
KR100825500B1 (ko) 경구 운반체의 개발을 위한 돼지 유래 신규 유산균 및 이의용도
PL232906B1 (pl) Nowy szczep Lactobacillus plantarum PL4
PL248297B1 (pl) Szczep Lactiplantibacillus plantarum PL6 i zastosowanie szczepu Lactiplantibacillus plantarum PL6