PL209070B1 - Zastosowanie antygenu CHV do wytwarzania szczepionki przeznaczonej do ochrony szczeniąt przed wirusem opryszczki psa, szczepionka anty-CHV oraz zestaw szczepionki multiwalentnej - Google Patents
Zastosowanie antygenu CHV do wytwarzania szczepionki przeznaczonej do ochrony szczeniąt przed wirusem opryszczki psa, szczepionka anty-CHV oraz zestaw szczepionki multiwalentnejInfo
- Publication number
- PL209070B1 PL209070B1 PL356556A PL35655601A PL209070B1 PL 209070 B1 PL209070 B1 PL 209070B1 PL 356556 A PL356556 A PL 356556A PL 35655601 A PL35655601 A PL 35655601A PL 209070 B1 PL209070 B1 PL 209070B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- vaccine
- chv
- virus
- canine
- inactivated
- Prior art date
Links
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 117
- 241000680578 Canid alphaherpesvirus 1 Species 0.000 title claims abstract description 21
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 title claims description 15
- 208000029433 Herpesviridae infectious disease Diseases 0.000 title abstract 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 28
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 28
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 28
- 229940031626 subunit vaccine Drugs 0.000 claims abstract description 16
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 claims abstract description 15
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims abstract description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 60
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 21
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 16
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 claims description 16
- 241000282465 Canis Species 0.000 claims description 15
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 claims description 13
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 claims description 13
- SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methoxy-5-methylphenyl)ethanamine Chemical compound COC1=CC=C(C)C=C1CCN SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-N Methacrylic acid Chemical compound CC(=C)C(O)=O CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 150000002888 oleic acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 12
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 claims description 11
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 claims description 11
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N Aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 claims description 10
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 10
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 10
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 10
- JNYAEWCLZODPBN-KVTDHHQDSA-N (2r,3r,4r)-2-[(1r)-1,2-dihydroxyethyl]oxolane-3,4-diol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@@H](O)[C@H]1O JNYAEWCLZODPBN-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 9
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 9
- 229940049964 oleate Drugs 0.000 claims description 9
- 244000052769 pathogen Species 0.000 claims description 9
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 claims description 8
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 claims description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 8
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 claims description 8
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims description 8
- -1 sorbitan ester Chemical class 0.000 claims description 8
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 claims description 8
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229940086737 allyl sucrose Drugs 0.000 claims description 7
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 claims description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 7
- FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N maleic anhydride Chemical compound O=C1OC(=O)C=C1 FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- RFIMISVNSAUMBU-UHFFFAOYSA-N 2-(hydroxymethyl)-2-(prop-2-enoxymethyl)propane-1,3-diol Chemical compound OCC(CO)(CO)COCC=C RFIMISVNSAUMBU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 101710121417 Envelope glycoprotein Proteins 0.000 claims description 6
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 claims description 6
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 6
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical group [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 6
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 6
- 230000012173 estrus Effects 0.000 claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 6
- 230000013011 mating Effects 0.000 claims description 6
- 241000701157 Canine mastadenovirus A Species 0.000 claims description 5
- 241000701931 Canine parvovirus Species 0.000 claims description 5
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 5
- 229940031348 multivalent vaccine Drugs 0.000 claims description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 4
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 claims description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N (2r,3r,4s)-2-[(1r)-1,2-dihydroxyethyl]oxolane-3,4-diol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N 0.000 claims description 3
- VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N beta-propiolactone Chemical compound O=C1CCO1 VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000003599 detergent Substances 0.000 claims description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 3
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N Acrylic acid Chemical compound OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims description 2
- 229960001631 carbomer Drugs 0.000 claims description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 2
- 102100021696 Syncytin-1 Human genes 0.000 claims 1
- 230000035606 childbirth Effects 0.000 claims 1
- 125000005395 methacrylic acid group Chemical group 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 16
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 12
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 11
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 7
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 102100034349 Integrase Human genes 0.000 description 5
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 5
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 5
- XDOFQFKRPWOURC-UHFFFAOYSA-N 16-methylheptadecanoic acid Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O XDOFQFKRPWOURC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 4
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 4
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 3
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 3
- 206010019973 Herpes virus infection Diseases 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 3
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 3
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 3
- 230000002631 hypothermal effect Effects 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IZQAUUVBKYXMET-UHFFFAOYSA-N 2-bromoethanamine Chemical compound NCCBr IZQAUUVBKYXMET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 238000000729 Fisher's exact test Methods 0.000 description 2
- XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N IDUR Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 2
- VQTUBCCKSQIDNK-UHFFFAOYSA-N Isobutene Chemical compound CC(C)=C VQTUBCCKSQIDNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 2
- BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N hexadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCO BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-M octanoate Chemical compound CCCCCCCC([O-])=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 208000000995 spontaneous abortion Diseases 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- UMHYVXGZRGOICM-AUYXYSRISA-N 2-[(z)-octadec-9-enoyl]oxypropyl (z)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC UMHYVXGZRGOICM-AUYXYSRISA-N 0.000 description 1
- WLAMNBDJUVNPJU-UHFFFAOYSA-N 2-methylbutyric acid Chemical compound CCC(C)C(O)=O WLAMNBDJUVNPJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 description 1
- GHUXAYLZEGLXDA-UHFFFAOYSA-N 8-azido-5-ethyl-6-phenylphenanthridin-5-ium-3-amine;bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N=[N+]=[N-])=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 GHUXAYLZEGLXDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 206010000234 Abortion spontaneous Diseases 0.000 description 1
- 241000700587 Alphaherpesvirinae Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 101100282617 Bovine herpesvirus 1.1 (strain Cooper) gC gene Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 206010014080 Ecchymosis Diseases 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000009701 Embryo Loss Diseases 0.000 description 1
- 101000918259 Enterobacteria phage T4 Exonuclease subunit 1 Proteins 0.000 description 1
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 1
- 101000896152 Escherichia phage Mu Baseplate protein gp47 Proteins 0.000 description 1
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- 241000701087 Felid alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 208000001951 Fetal Death Diseases 0.000 description 1
- 241000700586 Herpesviridae Species 0.000 description 1
- 241000700588 Human alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 1
- 208000013016 Hypoglycemia Diseases 0.000 description 1
- 102100037792 Interleukin-6 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 108700001237 Nucleic Acid-Based Vaccines Proteins 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 206010033733 Papule Diseases 0.000 description 1
- 208000001300 Perinatal Death Diseases 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 229920002594 Polyethylene Glycol 8000 Polymers 0.000 description 1
- 239000004353 Polyethylene glycol 8000 Substances 0.000 description 1
- 208000005107 Premature Birth Diseases 0.000 description 1
- 206010036590 Premature baby Diseases 0.000 description 1
- 206010041660 Splenomegaly Diseases 0.000 description 1
- 101800001271 Surface protein Proteins 0.000 description 1
- 108010008038 Synthetic Vaccines Proteins 0.000 description 1
- QYKIQEUNHZKYBP-UHFFFAOYSA-N Vinyl ether Chemical compound C=COC=C QYKIQEUNHZKYBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- UYCAGRPOUWSBIQ-WOYAITHZSA-N [(1s)-1-carboxy-4-(diaminomethylideneamino)butyl]azanium;(2s)-5-oxopyrrolidine-2-carboxylate Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1.OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N UYCAGRPOUWSBIQ-WOYAITHZSA-N 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 125000003158 alcohol group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 208000022531 anorexia Diseases 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000036471 bradycardia Effects 0.000 description 1
- 208000006218 bradycardia Diseases 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 229960000541 cetyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 210000003022 colostrum Anatomy 0.000 description 1
- 235000021277 colostrum Nutrition 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 229940052303 ethers for general anesthesia Drugs 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 238000002941 microtiter virus yield reduction assay Methods 0.000 description 1
- 208000015994 miscarriage Diseases 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N n-Triacontane Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AFFLGGQVNFXPEV-UHFFFAOYSA-N n-decene Natural products CCCCCCCCC=C AFFLGGQVNFXPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002445 nipple Anatomy 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 229940124276 oligodeoxyribonucleotide Drugs 0.000 description 1
- 238000006384 oligomerization reaction Methods 0.000 description 1
- 206010030899 opisthotonus Diseases 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000009984 peri-natal effect Effects 0.000 description 1
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 230000003169 placental effect Effects 0.000 description 1
- 210000003281 pleural cavity Anatomy 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 229920000058 polyacrylate Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229940085678 polyethylene glycol 8000 Drugs 0.000 description 1
- 235000019446 polyethylene glycol 8000 Nutrition 0.000 description 1
- 229920000223 polyglycerol Polymers 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 229940010310 propylene glycol dioleate Drugs 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000019617 pupation Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- WBHHMMIMDMUBKC-XLNAKTSKSA-N ricinelaidic acid Chemical compound CCCCCC[C@@H](O)C\C=C\CCCCCCCC(O)=O WBHHMMIMDMUBKC-XLNAKTSKSA-N 0.000 description 1
- 229960003656 ricinoleic acid Drugs 0.000 description 1
- FEUQNCSVHBHROZ-UHFFFAOYSA-N ricinoleic acid Natural products CCCCCCC(O[Si](C)(C)C)CC=CCCCCCCCC(=O)OC FEUQNCSVHBHROZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 229940032094 squalane Drugs 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 208000002254 stillbirth Diseases 0.000 description 1
- 231100000537 stillbirth Toxicity 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 229960000834 vinyl ether Drugs 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
- 239000005723 virus inoculator Substances 0.000 description 1
- 230000009278 visceral effect Effects 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/245—Herpetoviridae, e.g. herpes simplex virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
- A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5254—Virus avirulent or attenuated
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
- A61K2039/552—Veterinary vaccine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55566—Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/70—Multivalent vaccine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/16011—Herpesviridae
- C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
- C12N2710/16722—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/16011—Herpesviridae
- C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
- C12N2710/16734—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/16011—Herpesviridae
- C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
- C12N2710/16761—Methods of inactivation or attenuation
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Mycology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Oncology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
Przedmiotem wynalazku jest zastosowanie antygenu CHV do wytwarzania szczepionki przeznaczonej do ochrony szczeniąt przed wirusem opryszczki psa, szczepionka anty-CHV oraz zestaw szczepionki multiwalentnej.
Wirus opryszczki psa (ang. Canine Herpesvirus lub CHV) został opisany po raz pierwszy w 1965 r. (L. E. Carmichael, Am. J. Vet. Res. 1965, 26, 803-814). Zaka ż enie wirusem opryszczki psa następnie zidentyfikowano w wielu krajach (USA, Francji, Zjednoczonym Królestwie, Szwajcarii, Włoszech, Japonii, Australii, Nowej Zelandii itd.). CHV odpowiedzialny jest za problemy w rozmnażaniu zwierząt w hodowlach psów a w szczególności odpowiedzialny jest za śmiertelność nowonarodzonych szczeniąt, co może powodować poważne straty w niektórych hodowlach. Jest również odpowiedzialny za poronienia i śmiertelność okołoporodową. Podejrzewa się, że zakażenie CHV zmniejsza płodność suk. Przenoszenie CHV zachodzi na drodze płciowej, drodze ustno-nosowej lub przez łożysko.
CHV należy do rodziny Herpesviridae i podrodziny Alphaherpesvirinae. Dotychczas zidentyfikowano jeden typ CHV. Jest to wirus otoczkowy zawierający cząsteczkę dwuniciowego DNA. Otoczka zawiera kilka glikoprotein pochodzenia wirusowego. Glikoproteiny gB, gC i gD odpowiedzialne są za indukcję przeciwciał neutralizujących u myszy.
CHV jest antygenowo podobny do wirusa opryszczki kota (J. A. Limcumpao i wsp., Arch. Virol., 1990, 111, 165-176), ale bez znaczącej krzyżowej neutralizacji (X. Xuan i wsp., Arch. Virol., 1992, 122, 359-365).
CHV jest silnie zależny od swojego gospodarza i namnaża się tylko na komórkach pochodzących od psa (Pierson i wsp., zbiór Medecine Veterinaire, marzec/kwiecień 1998, 174 nr 3/4, 87-94).
Nowonarodzone szczeniaki są bardzo wrażliwe na zakażenie CHV w czasie pierwszych 3 tygodni życia. Do zakażenia dochodzi w czasie narodzin lub w czasie pierwszych dni życia. Stąd nie jest możliwe szczepienie szczeniąt. Jedyne dostępne sposoby ochrony to właściwe postępowanie natury sanitarnej, takie jak ogrzewanie szczeniaków lampą z podczerwienią i terapia surowicą. CHV jest jednak mało immunogenny i trudno jest przygotować dobrą surowicę (L. E. Carmichael, J. Am. Vet, Med. Assoc, 1970, 156, 1714-1721).
W naturalnych warunkach szczenięta mogą być chronione przez przeciwciała neutralizujące CHV obecne w siarze serododatnich suk: przy nieobecności tych przeciwciał szczeniak jest bardzo wrażliwy na zakażenie przez CHV (D. L. Huxsoll i I. E. Hemelt, J. Am. Vet. Med. Assoc, 1970, 156, 1706-1713). Psy obciążone ryzykiem są to szczeniaki urodzone z nie zakażonych suk w kontakcie z wydzielającymi zwierzętami oraz szczenięta urodzone z suk zakażonych latentnych, ale seronegatywnych lub słabo seropozytywnych. Przeciwciała neutralizujące CHV są krótkotrwałe, dlatego zwierzę może być zakażone i seronegatywne.
CHV u szczeniaków w wieku poniżej 3 tygodni powoduje noworodkowe zakażenie wirusem opryszczki, które często jest śmiertelne. Inkubacja jest szybka a szczeniaki giną po kilku dniach, w przeważającej liczbie przypadków w wieku przed upływem 5 dni życia, najczęściej bez innych objawów oprócz silnej hipotermii i wyniszczających chorób nerwowych. W formach mniej ostrych po hipotermii występują takie objawy jak anoreksja, depresja, bradykardia, hipoglikemia, obrzęk podskórny, rumień i grudki brzuszne, miękkie stolce szaro-żółte, bóle brzucha, wymioty, ciągłe wycie, saneczkowanie oraz śmierć w okresie od 24 do 72 godzin w opistotonus. Autopsja może wykazać splenomegalię, wyciek surowiczy w jamach opłucnej i otrzewnej oraz wybroczyny trzewne (Pierson i wsp., zbiór Medecine Veterinaire, marzec/kwiecień 1998, 174 nr 3/4, 87-94). Artykuł ten przypomina, że dotychczas nie jest handlowo dostępna żadna szczepionka przeciwko wirusowi opryszczki psów i sugeruje, że byłoby użyteczne móc szczepić latentnie zakażone reproduktory, aby zmniejszyć ponowne wydzielanie wirusa typu dzikiego.
Delisle F., w swoim artykule (Red. Med. Vet, 1982, 158, 669-676) proponuje z kolei szczepienie suk przed ciążą szczepionką inaktywowaną lub wstrzykiwanie surowic szczeniakom po narodzinach. Przypomina jednak, że nie jest handlowo dostępna żadna szczepionka. Patrz też L. E. Carmichael, J. Am. Vet. Med. Assoc, 1970, 156, 1714-1721. Ze swojej strony Appel A., w artykule („Canine Herpesvirus in Virus Infections of Vertebrates, tom 1, M.C. Horzinek, Ed. M.J. Appel, Elsevier Science Publisher, 1987, 5-15) proponuje szczepienie suk tuż przed lub na początku ciąży szczepionką inaktywowaną.
H. Poulet i P. Dubourget (Point Vet., 1993, 25, 69-75) ze swojej strony zasugerowali w 1992 roku ogólnie szczepienie matki z dawką przypominającą pod koniec ciąży. Autorzy przypominają też, że
PL 209 070 B1 były przeprowadzone próby uzyskania wychodząc z wirusów atenuowanych (L. E. Carmichael i wsp., Infection and Immunity, 1978, 20(1), 108-114; US-A-4,213,965: szczepionki żywej atenuowanej, złożonej z termowrażliwego wariantu wirusa CHV, zwanego „o małym zakresie), ale że próby te nie dały jednak przekonujących rezultatów i nie doprowadziły do komercjalizacji szczepionki.
Anvik J. O. w swoim artykule (Vet. Med., kwiecień 1991, 4, 394-403) precyzuje, że produkcja neutralizujących przeciwciał u matki a w konsekwencji ochrona miotu jest nieprzewidywalna ze względu na słabą immunogenność wirusa CHV.
Ze względu na trudności w szczepieniu, Pierson i wsp. (zbiór Medecine Veterinaire, marzec/kwiecień 1998, 174 nr 3/4, 87-94) poszli tak daleko, że zaproponowali szczepienie matki inaktywowaną szczepionką przeciwko katarowi kota (FHV) lub podanie przeciwciał anty-FHV szczeniakom od urodzenia.
Dotychczas żadna z hipotez szczepienia nie została potwierdzona, żadna szczepionka nie jest dostępna w handlu i żadna publikacja nie podaje przekonujących wyników szczepienia zapowiadających bliską komercjalizację takiej szczepionki.
Poza tym u samic w ciąży, zakażenie CHV może prowadzić do resorpcji zarodka, mumifikacji płodu, poronienia lub przedwczesnego porodu, martwych urodzeń i śmierci okołoporodowej. Mogą pojawić się też uszkodzenia łożyska.
Chociaż istnieją szczepionki przeciwko różnym wirusom opryszczki u innych gatunków zwierząt, w tym u kota, nie była nigdy dotychczas proponowana skuteczna szczepionka przeciw wirusom opryszczki psa.
Celem tego wynalazku jest opracowanie możliwości szczepienia przeciwko wirusom opryszczki psa pozwalającego na szczepienie szczeniaków.
Innym celem wynalazku jest opracowanie skutecznych i dopuszczalnych farmaceutycznie szczepionek do stosowania w ramach szczepienia. Zgłaszający stwierdził nieoczekiwanie, że jest możliwe szczepienie ciężarnych suk i noworodków przez podawanie szczepionki w czasie okresu ciąży, a w szczególności jak najbliżej porodu, aby uzyskać wysokie miano przeciwciał anty-CHV u ciężarnej samicy w momencie porodu. To wysokie miano zapewnia ochronę szczeniąt od momentu oszczenienia się przez przekazywanie przeciwciał matczynych w czasie karmienia. Ponadto przeciwciała te utrzymują się zasadniczo u szczeniąt podczas pierwszych tygodni życia, okresu w czasie którego są wrażliwe na chorobę (3 do 4 tygodni). Miano przeciwciał zobojętniających u suki równe lub wyższe od 0,9 log10 jest korzystne, a ściślej miano równe lub wyższe od 1,2 log10. Miana wskazane są wyliczane według sposobu podanego w przykładzie 7. Szczepienie suki powoduje między innymi redukcję stopnia zakażenia u szczeniąt. Zgłaszający zaobserwował zresztą u suk szczepionych i utrzymywanych w środowisku skażonym wyższą wagę urodzeniową szczeniaków i tendencję do większej częstości ciąż. Zjawiska te można wyjaśnić przez zmniejszenie lub brak uszkodzeń łożyska u szczepionych suk (A. Hashimoto i wsp., Am. J. Vet. Res., 1979, 40(9), 1236-1240; A. Hashimoto i wsp., Am. J. Vet. Res. 1982, 43(5), 844-850).
Wynalazek dotyczy więc zastosowania antygenu CHV do wytwarzania szczepionki przeznaczonej do ochrony szczeniąt przed wirusem opryszczki psa, przeznaczonej do podawania ciężarnej suce 1 do 20 dni przed przypuszczalną datą porodu, w szczególności 1 do 15 dni, korzystniej 5 do 15 dni, a najkorzystniej 5 do 10 dni przed tą datą i wywołującej wysoki poziom przeciwciał anty-CHV u ciężarnej suki w momencie porodu indukując ochronę u szczeniąt przez przeniesienie przeciwciał w czasie karmienia sutkiem.
Korzystnie szczepionka przeznaczona jest do wywołania u ciężarnej samicy w momencie porodu poziomu przeciwciał anty-CHV wyższego lub równego 0,9 log10, a korzystnie wyższego lub równego 1,2 log10.
Wynalazek ponadto dotyczy zastosowania antygenu CHV do wytwarzania szczepionki pozwalającej na szczepienie szczeniąt przeciwko wirusowi opryszczki psa przeznaczonej do podawania ciężarnej suce jak najbliżej terminu porodu, w szczególności w czasie ostatniej jednej trzeciej ciąży, i wywołującej u ciężarnej samicy w momencie porodu poziom przeciwciał anty-CHV wyższy lub równy 0,9 log10, a korzystnie wyższy lub równy 1,2 log10, indukując ochronę u szczeniąt przez przeniesienie przeciwciał w czasie karmienia sutkiem, przy czym korzystnie szczepionka przeznaczona jest do podawania 1 do 20 dni przed przypuszczalną datą porodu, w szczególności 1 do 15 dni, korzystniej 5 do 15 dni, a najkorzystniej 5 do 10 dni przed tą datą.
Równie korzystnie szczepionka jest przeznaczona do podawania samicy uprzednio szczepionej szczepionką przeciwko CHV, korzystniej szczepienia oddzielone są od siebie okresem co najmniej
PL 209 070 B1 dwóch lub trzech tygodni, a korzystnie podanie pierwszej szczepionki ma miejsce w okresie od rui 2 do 3 tygodni przed pierwszym podaniem, w szczególności w okresie trwającym od rui i obejmującym pierwszą jedną trzecią ciąży, korzystnie 7 do 10 dni po kryciu.
Stosowaną szczepionką jest korzystnie ta sama szczepionka pozwalająca na ochronę szczeniąt przed wirusem opryszczki psa lub są to dwie różne szczepionki pozwalające na ochronę szczeniąt przed wirusem opryszczki psa.
Szczepionka korzystnie zawiera antygen wybrany z grupy złożonej z inaktywowanego wirusa CHV, atenuowanego wirusa CHV, podjednostki wirusa CHV, antygenu wyrażanego przez rekombinanta, korzystniej zawiera podjednostki wirusa CHV, korzystnie ekstrahowane podjednostki, jeszcze korzystniej zawiera glikoproteiny otoczki wirusa CHV.
Równie korzystnie szczepionka zawiera inaktywowany wirus CHV.
Ponadto korzystne jest, jeśli szczepionka zawiera zaróbkę lub nośnik i adiuwant dopuszczalne w weterynarii.
Szczepionka korzystnie zawiera ilość antygenu od około 105 do około 109,5 TCID50 na dawkę odpowiadającą mianu przed inaktywacją.
W korzystnym zastosowaniu szczepionka jest formułowana w postaci emulsji olej-w-wodzie lub w postaci zawiesiny z karbomerem, korzystniej w postaci emulsji zawierającej albo oleinian anhydromannitolu, kwas olejowy etoksylowany i olej parafinowy ciekły lekki, albo kopolimery blokowe polioksypropylen-polioksyetylen, ester sorbitanu i kwasu olejowego etoksylowanego i skwalenu, albo w formie zawiesiny polimery kwasu akrylowego lub metakrylowego usieciowane alillo-sacharozą lub za pomocą allilo-pentaerytiritolu.
Cele wynalazku już wymienione, jak i inne, można osiągnąć za pomocą szczepienia suki obejmującego podanie szczepionki ciężarnej suce możliwie jak najbliżej porodu, a zwłaszcza w czasie ostatniej jednej trzeciej ciąży (średni czas trwania ciąży u suki wynosi około 63 dni), a w szczególności podanie w czasie od 1 do 20 dni, szczególnie od 1 do 15, a ściślej od 5 do 15 dni, korzystnie od 5 do 10 dni przed przypuszczalną datą porodu, zwykle 10 dni przed tą datą tak, aby uzyskać wysokie miano przeciwciał CHV u ciężarnej samicy przy porodzie, indukując ochronę szczeniaków przez przeniesienie przeciwciał matczynych w czasie karmienia sutkiem. Zasadniczo przeciwciała utrzymują się w czasie pierwszych tygodni ż ycia szczeniąt, to jest w czasie, gdy są one wrażliwe na chorobę (3 do 4 tygodnie).
Wynalazek również dotyczy szczepionki anty-CHV zawierającej podjednostki z ekstrakcji wirusa CHV, ewentualnie po usunięciu kapsydów wirusa, w nośniku lub zaróbce, korzystnie z adiuwantem dopuszczalnym w weterynarii.
Ponadto wynalazek dotyczy szczepionki anty-CHV zawierającej inaktywowany wirus CHV lub podjednostki z ekstrakcji wirusa CHV, ewentualnie po usunięciu kapsydów wirusa, w formie liofilizowanej, które mogą być zawieszone przed użyciem w adiuwancie.
Adiuwantem jest korzystnie wodorotlenek glinu.
Równie korzystnie adiuwantem jest polimer kwasu akrylowego lub metakrylowego lub polimer bezwodnika maleinowego i pochodnej alkenylu, korzystnie polimery kwasu akrylowego lub metakrylowego usieciowane alillo-sacharozą lub za pomocą allilo-pentaerytiritolu.
Korzystna szczepionka jest formułowana w postaci emulsji olej-w-wodzie.
W korzystnej szczepionce emulsja olej-w-wodzie zawiera albo oleinian anhydromannitolu, kwas oleinowy etoksylowany i olej parafinowy płynny lekki, albo kopolimery blokowe polioksypropylen-polioksyetylen, ester sorbitanu i kwasu olejowego etoksylowanego i skwalen.
Wynalazek ponadto dotyczy szczepionki anty-CHV zawierającej inaktywowany wirus CHV w iloś ci antygenu, która jest równoważ na mianu odpowiadającemu przed inaktywacją od 105 do 109,5 TCID50, w szczególności od 105 do 109 TCID50, a korzystnie od 106 do 108 na dawkę w nośniku lub zaróbce dopuszczalnych w weterynarii, korzystnie z adiuwantem.
Szczepionka korzystnie zawiera adiuwant wybrany z wodorotlenku glinu, polimeru kwasu akrylowego lub metakrylowego lub polimeru bezwodnika maleinowego i pochodnej alkenylu, korzystnie polimery kwasu akrylowego lub metakrylowego usieciowane alillo-sacharozą lub za pomocą allilo-pentaerytiritolu, sekwencję immunostymulującą lub jest formułowana w postaci emulsji olej-w-wodzie, korzystniej emulsja olej-w-wodzie zawiera albo oleinian anhydromannitolu, kwas oleinowy etoksylowany i olej parafinowy płynny lekki, lub kopolimery blokowe polioksypropylen-polioksyetylen, ester sorbitanu i kwasu olejowego etoksylowanego i skwalen.
PL 209 070 B1
Szczepionka korzystnie jest wytwarzana z wirusa CHV inaktywowanego termicznie, korzystniej wirus CHV jest inaktywowany przez formalinę, β-propionolakton, etylenoiminę, lub binarną etylenoiminę.
Korzystna szczepionka jest szczepionką wytworzoną z podjednostek którą można otrzymać przez poddanie zawiesiny cząsteczek wirusa CHV, korzystnie inaktywowanych, działaniu odpowiedniego detergentu.
Ponadto szczepionka korzystnie zawiera podjednostki wirusa CHV w ilości równoważnej mianu przed inaktywacją od 106 do 109,5 TCID50, w szczególności od 107 do 109 TCID50, a korzystnie od 107,5 do 108,5 na dawkę.
Równie korzystnie szczepionka zawiera co najmniej jeden antygen co najmniej jednego innego patogenu psa, przy czym patogen psa jest korzystnie wybrany z grupy złożonej z wirusa choroby Carre, parwowirusa psa, adenowirusa psa i ich kombinacji.
Szczepionka korzystnie zawiera miano glikoproteiny gB mierzonej testem ELISA, od około 0,01 μg do około 30 μg, korzystnie od około 0,1 μg do około 10 μg, a korzystniej od około 0,3 μg do około 3 μg na dawkę.
Według definicji antygen w ilości skutecznej w szczepionce według wynalazku pozwala na indukcję wysokiego i ochronnego miana przeciwciał w warunkach protokołu u ciężarnej samicy i noworodka. Może chodzić tu o antygen zawierający inaktywowany wirus CHV, atenuowany wirus CHV, jedną lub kilka podjednostek wirusa CHV lub kilka antygenów wyrażanych przez rekombinanty.
Korzystnie, szczepionka przeznaczona jest do produkowania u ciężarnej samicy w momencie porodu miana przeciwciał anty-CHV (jak określonego w przykładzie 7) wyższego lub równego około 0,9 log10, a korzystnie wyższego lub równego około 1,2 log10.
W szczególności w przypadku zwierzęcia, które nigdy nie było szczepione przeciwko CHV korzystnie przeprowadza się inne lub kilka innych podań szczepionki anty-CHV przed podaniem opisanym tu powyżej w celu indukcji odpowiedzi immunologicznej u zwierzęcia. Odstępy czasu między tymi dwoma podaniami powinny być wystarczające w celu indukcji efektu przypominającego, co na ogół wymaga przynajmniej 2 do 3 tygodni. Pierwsze podanie szczepionki przeprowadza się w szczególności w okresie od rui do przynajmniej dwóch lub trzech tygodni przed podaniem opisanym powyżej, a zwłaszcza w okresie od rui do pierwszej jednej trzeciej ciąży włącznie, co obejmuje jedno podanie przed kryciem. Korzystnie, podanie to przeprowadza się około 7 do 10 dni przed kryciem. Korzystnie ten schemat powtarza się przy każdym szczenieniu się.
Jeśli zwierzę już było uprzednio szczepione przeciw CHV, to może wystarczyć jedno podanie blisko porodu.
Podanie lub przynajmniej jedno z dodatkowych podań może też być przeprowadzone szczepionką mającą odmienny skład od tej używanej bliżej porodu, różnica może dotyczyć antygenu i/lub formulacji szczepionki.
Podanie szczepionki może być przeprowadzone zwłaszcza drogą pozajelitową, korzystnie drogą podskórną lub domięśniową.
Objętości dawki mogą być zawarte zwłaszcza w zakresie między 0,2 i 2 ml, a korzystnie około 1 ml.
Celem wynalazku jest też zastosowanie antygenu CHV do wytwarzania szczepionki przeciwko wirusowi opryszczki psa do podawania według opisanego powyżej protokołu.
Specjalista z tej dziedziny posiada odpowiednią wiedzę, aby określić precyzyjnie dawkę każdej szczepionki wynikającą z funkcjonalności i typu szczepionki.
Gdy zwierzęciu podaje się kilka szczepień, stosowane szczepionki mogą być różnych typów wybrane w szczególności z tych cytowanych powyżej.
Celem wynalazku są też szczepionki inaktywowane lub szczepionki z podjednostkowe, w szczególności wykorzystywane w opisanym sposobie szczepienia.
Zastosowanie podjednostek CHV opisane było tylko u myszy (J. A. Limcumpao i wsp., J. Vet. Med. Sci., 1991, 53(3), 423-432). Dane uzyskane dla myszy nie mogą jednak być ekstrapolowane na gatunek psa, jak precyzuje ten dokument. Chociaż miana przeciwciał uzyskane z oczyszczonymi glikoproteinami gp145/112, gp80 i gp47 indukują odpowiedź i wykrywalne przeciwciała. Jednak nie jest możliwe określenie, czy to miano przeciwciał może się przekładać na ochronę ponieważ mysz nie jest wrażliwa na wirus CHV. Stąd nie jest możliwe opracowanie metody prowokacji wirulencji u tego gatunku. Także nie są dostępne żadne dane dotyczące odporności komórkowej indukowanej przez CHV. Co więcej stosunek między mianem przeciwciał uzyskanych u myszy a tych uzyskanych u psa nie jest znany, a miana te mogą się okazać inne. Wcześniej opublikowano, że króliki immunizowane glikoproteiną gl wirusa opryszczki bydlęcej typu 1 mają wyższe miano neutralizujące niż króliki immu6
PL 209 070 B1 nizowane gIII, podczas gdy u bydła glikoproteina gIV indukuje najwyższe miano neutralizujące a glikoproteiną gl jest najmniej immunogenna. Wskazane dane pokazują trudność transpozycji wyników ze zwierząt laboratoryjnych na gatunek docelowy.
Szczepionki inaktywowane lub z podjednostkowe pozwalają na szczepienie suki w czasie fazy ciąży bez ryzyka dla suki i jej potomstwa. Szczepienie z dawką przypominającą pod koniec ciąży jest sposobem zapewnienia optymalnego miana neutralizujących przeciwciał przy porodzie. To miano warunkuje ochronę uzyskaną przez przeniesienie przeciwciał neutralizujących od suki na jej szczeniaki na początku karmienia sutkiem.
Hodowlę i namnażanie wirusa CHV przeprowadza się korzystnie na komórkach psa pierwotnych lub liniach, w szczególności na komórkach nerki psa typu MDCK (po angielsku Madin-Darby Canine Kidney lub MDCK dostępny od American Type Culture Collection (ATCC) pod numerem CCL34), w szczególności z wielokrotnością zakażenia (moi) 0,1 do 0,001 dawek zakażających 50% hodowli komórek (dawkach zakaźnych hodowli tkankowej TCID50) na komórkę, korzystnie 0,01 TCID50/komórkę. Wirus CHV zbiera się 3 do 4 dni później. Można uzyskać miano wirusa około 106 do 108 TCID50/ml, a ogólnie od 106,5 do 107,5 TCID50/ml.
Aby uzyskać inaktywowaną szczepionkę wirus CHV inaktywuje się w szczególności za pomocą traktowania chemicznego (na przykład, formaliną lub formaldehydem, β-propionolaktonem, etylenoiminą, etylenominą binarną (BEI) i/lub termicznie. Korzystnie wirus według wynalazku jest inaktywowany przez działanie etylenoiminy. Cząsteczki wirusa mogą być zatężane za pomocą klasycznych technik zatężania, w szczególności technikami sączenia w żelu, ultrawirowania w gradiencie sacharozy lub selektywnego strącania, zwłaszcza w obecności glikolu polietylenowego (PEG).
Szczepionka podjednostkowa jest korzystnie szczepionką z podjednostek po ekstrakcji, to znaczy, że jest przygotowywana na podstawie całego wirusa lub znacznej części tego wirusa (na przykład, po wyeliminowaniu kapsydu). W szczególności szczepionka może zawierać różne glikoproteiny otoczki lub mieszaninę glikoprotein otoczki. Przygotowanie szczepionki podjednostkowej jest korzystnie przeprowadzane wychodząc z inaktywowanej zawiesiny wirusa, w szczególności inaktywowanej, jak opisano powyżej. Korzystnie, aby uzyskać szczepionkę z podjednostek zawierającą przede wszystkim glikoproteiny otoczki zawiesina cząsteczek wirusa, korzystnie inaktywowanych, uzyskana uprzednio poddana jest działaniu odpowiedniego detergentu, w szczególności niejonowego, korzystnie alkoholu etoksylowanego mającego korzystnie HLB zawarty między 12 i 15. Kapsydy wirusów są następnie usuwane, w szczególności przez ultrawirowanie. Inne ekwiwalentne sposoby pozwalające na eliminację kapsydów i zebranie glikoprotein otoczki są znane specjaliście z tej dziedziny.
Aby opracować szczepionkę inaktywowaną lub szczepionkę podjednostkową, antygen jest podnoszony w nośniku lub zaróbce dopuszczalnym w weterynarii i korzystnie z dodanym adiuwantem dopuszczalnym w weterynarii. Ilość antygenu odpowiada w szczególności mianu odpowiadającemu przed inaktywacją od około 105 do około 109,5 TCID50 na dawkę, w szczególności od około 105 do około 109 TCID50 na dawkę. Ściślej, dla szczepionki inaktywowanej, miano przed inaktywacją zawarte jest od około 105 do około 109 TCID50 na dawkę, a zwłaszcza od około 106 do około 108 na dawkę. A dokładniej, dla szczepionki z podjednostek miano przed inaktywacją zawarte jest od około 106 do około 109,5, a zwłaszcza od około 107 do około 109, a korzystnie od około 107,5 do około 108,5 na dawkę. Korzystnie, jeśli chodzi o szczepionkę podjednostkową, zawiera ona miano glikoproteiny gB mierzone za pomocą ELISA od około 0,01 μg do około 30 μg, w szczególności od około 0,1 μg do około 10 μg, a korzystnie od około 0,3 μg do około 3 μg na dawkę.
Szczepionki według wynalazku są przechowywane i magazynowane w postaci formulacji w 5°C albo w formie liofilizowanej, korzystnie ze stabilizatorem, w szczególności SPGA (sacharoza, fosforan, glutaminian, albumina, EP-B 1-0,008,255). Szczepionki te mogą być następnie podniesione w rozpuszczalniku (nośnik lub zaróbka i/lub adiuwancie).
Aby dodać adiuwanty do preparatów immunogennych i szczepionek według wynalazku, można jako adiuwant stosować (1) wodorotlenek glinu, (2) polimery kwasu akrylowego lub metakrylowego, polimer bezwodnika maleinowego i pochodnej alkenylowej, lub (3) sekwencję immunostymulującą (ISS), a zwłaszcza sekwencję oligodezoksyrybonukleotydowe mającą jeden lub szereg nie metylowanych motywów CpG (Klinman D. M. i wsp., Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 1996, 93, 2879-2883; WO-A1-98/16247), lub (4) formułować preparat immunogenny lub szczepionkę w formie emulsji olej-wwodzie, a zwłaszcza emulsji SPT opisanej na str. 147 publikacji „Vaccine Design, the Subunit and Adiuvant Approach wydanej przez M. Powell, M. Newman, Plenum Press 1985, i emulsji MF59 opisanej na str. 183 tej samej publikacji.
PL 209 070 B1
Emulsja olej-w-wodzie może być mianowicie na bazie oleju parafinowego płynnego lekkiego (typ Farmakopea europejska); oleju izoprenoidowego, takiego jak skwalan, skwalen; oleju będącego wynikiem oligomeryzacji alkenów, zwłaszcza izobutenu lub decenu; estrów kwasów lub alkoholi z liniowym ugrupowaniem alkoholowym, a ściślej olejów roślinnych, oleinianu etylu, di(kaprylanu/kapranu) glikolu propylenowego, tri(kaprylanu/kapranu) glicerolu, dioleinianu glikolu propylenowego; estrów kwasów rozgałęzionych tłuszczowych lub alkoholi, a zwłaszcza estrów kwasu izostearowego. Olej stosowany jest w połączeniu z emulgantami, aby wytworzyć emulsję. Emulganty są korzystnie niejonowymi środkami powierzchniowo czynnymi, w szczególności estrami sorbitanu, mannitu (na przykład, oleinian anhydromannitolu), glicerolu, poliglicerolu, glikolu polipropylenowego i kwasu olejowego, izostearynowego, rycynoolejowego, hydroksystearynowego, ewentualnie etoksylowane, kopolimery blokowe polioksypropylen-polioksyetylen, w szczególności Pluronic®, a zwłaszcza L121.
Polimery kwasu akrylowego lub metakrylowego są w szczególności usieciowane za pomocą eterów polialkenylowych cukrów lub polialkoholi. Związki te znane są jako karbomery (Pharmeuropa tom 8, nr 2, czerwiec 1996). Specjalista w dziedzinie znajdzie również odniesienia w opisie patentowym US-A-2,909,462 (włączonym jako odnośnik), w którym opisano takie polimery akrylowe sieciowane związkiem polihydroksylowanym zawierającym co najmniej 3 grupy hydroksylowe, korzystnie nie więcej niż 8, przy czym atomy wodoru co najmniej trzech grup hydroksylowych są zastąpione przez nienasycone rodniki alifatyczne o przynajmniej 2 atomach węgla. Korzystne rodniki zawierają od 2 do 4 atomów wę gla, np. grup winylowych, allilowych i innych nienasyconych grup etylenowych. Rodniki nienasycone mogą same zawierać inne podstawniki takie jak metyl. Produkty sprzedawane pod nazwą Carbopol® (BF Goodrich, Ohio, USA) są tu szczególnie odpowiednie. Są one usieciowane allilo-sacharozą albo za pomocą allilo-pentaerytritolu. Wśród nich można wymienić Carbopol® 974P, 934P i 971P.
Wśród kopolimerów bezwodnika maleinowego i pochodnych alkenylowych, korzystnymi są kopolimery EMA® (Monsanto), które są kopolimerami bezwodnika maleinowego i etylenu, liniowymi lub usieciowanymi, na przykład, usieciowane eterem diwinylowym. W tej kwestii można odnieść się do publikacji J. Fields i wsp., Nature, 186, 778-780, 4 czerwca 1960 roku (włączonej niniejszym jako odniesienie). Z punktu widzenia budowy, polimery kwasu akrylowego lub metakrylowego oraz kopolimery EMA® są korzystnie utworzone z jednostek podstawowych o następującym wzorze:
R, R2
----c-(Ch,2) x-c-(Ch2) y---COOH COOH w którym:
- R1 i R2, które to są identyczne lub różne, oznaczają H albo CH3
- x = 0 lub 1, korzystnie x = 1
- y = 1 lub 2, przy czym x + y = 2.
Dla kopolimerów EMA®, x = 0 a y = 2. Dla karbomerów x = y = 1.
Stężenie polimeru w końcowej kompozycji szczepionki będzie od 0,01% do 1,5% wag./obj., korzystnie od 0,05 do 1% wag./obj., a najkorzystniej od 0,1 do 0,4% wag./obj.
Szczególnie korzystna forma szczepionki obejmuje szczepionkę inaktywowaną lub podjednostkową w postaci emulsji olej w wodzie zawierającą oleinian anhydromannitolu, etoksylowany kwas olejowy i lekki płynny olej parafinowy. W szczególności, sposób immunizacji ciężarnych suk będzie obejmował podanie właśnie takiej szczepionki. W tym celu podaje się dwie iniekcje, korzystnie podskórne, szczególnie według schematu opisanego powyżej, na przykład, z pierwszym zastrzykiem podczas pierwszej jednej trzeciej ciąży, korzystnie 10 dni po dacie krycia, a w szczególności drugi zastrzyk podaje się podczas ostatniej jednej trzeciej, korzystnie około 10 dni przed przypuszczalnym porodem.
Wynalazek opisuje sposób przygotowania opisanej szczepionki inaktywowanej lub podjednostkowej.
Rozwiązania według wynalazku pozwalają na wytworzenie szczepionek multiwalentnych zawierających inaktywowaną walencję wirusa opryszczki psa lub podjednostkową walencję opryszczki psa
PL 209 070 B1 oraz zawierających przynajmniej jedną inną walencję dla przynajmniej jednego innego patogenu psa, w nośniku lub zaróbce dopuszczalnych w weterynarii, korzystnie z adiuwantem, w szczególności jednym z tych opisanych uprzednio. Te patogeny są w szczególności wybrane z grupy obejmującej wirus choroby Carre'go, parwowirus psa i adenowirus psa, ale mogą być włączone także inne walencje.
Inaktywowane szczepionki CHV lub szczepionki podjednostkowe według wynalazku mogą być podawane jednocześnie w tym samym preparacie lub kolejno w różnych preparatach z inną lub innymi walencjami psa, które mogą być w formie żywych atenuowanych, inaktywowanych, podjednostkowych, rekombinowanych lub polinukleotydowych szczepionek.
Wynalazek również dotyczy zestawu szczepionki multiwalentnej zawierającej oddzielnie przygotowaną szczepionkę CHV według wynalazku oraz szczepionkę przeciwko innemu patogenowi psa, w szczególności wybraną z grupy złożonej z wirusa choroby Carre, parwowirusa psa, adenowirusa psa i ich kombinacji.
Taki zestaw szczepionki multiwalentnej może obejmować oddzielnie przygotowane walencje CHV w nośniku lub zaróbce dopuszczalnych w weterynarii, korzystnie z adiuwantem, w szczególności tymi opisanymi uprzednio, i przynajmniej jedną walencję przynajmniej jednego innego patogenu psa. Walencja CHV według wynalazku może służyć jako rozpuszczalnik dla innej walencji psa, w szczególności dla walencji atenuowanej, rekombinowanej lub polinukleotydowej przygotowanej w formie liofilizowanej.
Wynalazek będzie poniżej opisany za pomocą sposobów wykonania przedstawionych jako nie ograniczające przykłady.
P r z y k ł a d y
P r z y k ł a d 1: Szczep wirusa
Stosowany szczep wirusa opryszczki psa jest szczepem F205 (L. E. Carmichael, Am. J. Vet. Res., 1965, 26, 803-814) zdeponowanym w American Type Culture Collection (ATCC) pod numerem dostępu VR-647.
P r z y k ł a d 2: Amplifikacja wirusa opryszczki psa
Komórki linii psiej (Madin-Darby Canine Kidney czyli MDCK dostępne od ATCC pod numerem CCL-34) hodowano w 2 litrowych (850 cm2) okrągłodennych butelkach w podłożu Eagle zmodyfikowanym przez Dulbecco minimalnym podłożu koniecznym (DMEM - Gibco BRL) uzupełnionym 5% płodową surowicą cielęcą (Bayer Diagnostic) i 50 mg/l gentamycyny przy 200000 komórek na ml w objętości 350 ml. Komórki hodowano w 37°C w atmosferze zawierającej 5% CO2.
Po 3 lub 4 dniach warstwa komórek dochodzi do konfluencji. Następnie podłoże hodowlane zastępuje się podłożem DMEM bez surowicy, ale nadal z dodatkiem 50 mg/l gentamycyny, i komórki zaszczepia się wirusem opryszczki psa (przykład 1) z wielokrotnością zakażenia (moi) 0,01 TCID50/komórkę. Hodowlę wirusa utrzymuje się w 37°C.
Gdy efekt cytopatyczny (ECP) jest kompletny (około 96 godzin od początku hodowli) zbiera się zawiesinę wirusa i zamraża w -70°C. Można przeprowadzić kilka pasaży amplifikacji komórkowej przed zaszczepieniem wirusa w zależności od pożądanej ilości wirusa. Pasaże komórkowe i hodowla wirusa mogą być też przeprowadzone hodując komórki na mikronośnikach w bioreaktorze.
Wirus przechowuje się w 5°C do następnych etapów.
Miano wirusa CHV przy zbieraniu wynosi 107,2 TCID50 na ml.
P r z y k ł a d 3: Mianowanie wirusa CHV
Miano wirusa CHV ustalano w mikropłytkach z 96 studzienkami w podłożu F15 z dodatkiem 5% płodowej surowicy cielęcej i 50 mg/l gentamycyny. Rozcieńczenia 3 rzędu zawiesiny wirusa mieszano z zawiesiną komórek MDCK w mikrostudzienkach w proporcji 0,10 ml rozcieńczenia wirusa na 100000 komórek w 0,15 ml na studzienkę. Po 4 do 5 dniach inkubacji w 37°C z 5% CO2 studzienki wykazujące uogólniony ECP liczono i wyliczono miano w średnich dawkach zakaźnych hodowli tkankowej 50% (TCID50) metodą Karber.
P r z y k ł a d 4: Inaktywacja wirusa
Zamplifikowany, jak opisano w przykładzie 2, wirus CHV inaktywowano za pomocą etylenoiminy w stężeniu około 12 mM w 37°C przez 6 godzin.
Etylenoiminę przygotowywano bezpośrednio przed użyciem rozpuszczając 28,0 g wodorotlenku sodu w granulkach w 200 ml wody destylowanej i dodając 68,1 g bromoetyloaminy (BEA), co odpowiada roztworowi etylenoiminy 1,2 M (H. Bahnemann, Arch. Virol., 1975, 47, 47-56). Inaktywowana zawiesina wirusa była zatężana 100 razy na kasecie do ultrasączenia typu Ultrasette z progiem odcięcia 300 kDa (Filtron). Zatężony inaktywowany wirus może być zmrożony i przechowywany w -40°C.
PL 209 070 B1
P r z y k ł a d 5: Ekstrakcja glikoprotein wirusa
Inaktywowany wirus (przykład 4) klarowano przez wirowanie w 2500 g przez 30 min. Supernatant następnie zatężono 50 razy na kasecie do ultrasączenia typu Ultrasette z progiem odcięcia 300 kDa (Filtron). Do zatężonego roztworu dodano glikol polietylenowy 8000 (PEG 8000) do 8% wag./obj. i chlorek sodu 4% wag./obj. Po kontakcie przez 16 godzin w 4°C wytrącony wirus osadzono przez wirowanie w 2500 x g przez 60 min, a następnie zawieszono w buforze fosforanowym (PBS: NaCl 8 g/l; KCl 0,2 g/l; KH2PO4 0,2 g/l; Na2HPO4, 2 H2O 1,44 g/l). Następnie zawieszono w izotonicznym buforze fosforanowym w jednej setnej wyjściowej objętości. Zatężony wirus następnie poddano ultrawirowaniu zonalnemu na poduszce sacharozy (35% i 60% wag./wag. w PBS przez 60 min przy 200000 x g) z rotorem zonalnym lub rotorem o stałym kącie Ti45. Wirus zebrano na interfazie i rozcieńczono około cztery razy PBS. Następnie dodano alkohol cetylowy 10 EO (alkohol etoksylowany HLB 13) w stężeniu 1,5% wag./obj., inkubowano jedną godzinę w 37°C. Kapsydy osadzono następnie przez ultrawirowanie przez jedną godzinę w 230000 x g rotorem Ti45. Zebrano supernatant zawierający glikoproteiny. Roztwór glikoprotein może być ewentualnie zebrany przez ultrawirowanie.
Roztwór oczyszczonych glikoprotein zakonserwowano w temperaturze - 40°C do formułowania szczepionki.
P r z y k ł a d 6. Formułowanie szczepionek
Zatężony inaktywowany antygen (przykład 4) lub roztwór podjednostek (przykład 5) po rozmrożeniu rozcieńcza się buforem PBS w zależności od wymaganej ilości antygenów na dawkę.
Szczepionkę z adiuwantem przygotowuje się w sposób następujący: 167 ml fazy wodnej złożonej z 8 ml antygenu wirusa inaktywowanego lub podjednostki i 159 ml PBS emulgowano w 83 ml fazy olejowej zawierającej 7% wag./obj. oleinianu anhydromannitolu, 8% wag./obj. etoksylowanego kwasu olejowego z 11 EO (tlenek etylenu) i 85% obj./obj. płynnego lekkiego oleju parafinowego (typ Farmakopea europejska) za pomocą emulgatora turbinowego Silverson w 32°C przez 2 minuty. Sformułowana szczepionka w formie emulsji olej-w-wodzie jest następnie przechowywana w 5°C.
Alternatywny sposób przygotowania szczepionki polega na przygotowaniu emulsji przez trzy przejścia przez homogenizator wysokociśnieniowy model Y110 (Microfluidics Corp.) z ciśnieniem 600 bar i temperaturą zawartą między 30 a 40°C z mieszaniną 5% wag./obj. skwalenu, 2,5% wag./obj. Pluronic® L121, 0,2% wag./obj. estru kwasu olejowego i etoksylowanego anhydrosorbitolu z 20 EO, 92,3% obj./obj. antygenu wirusa rozcieńczonego po rozmrożeniu do 1/30 w buforze PBS. Sformułowana szczepionka w formie emulsji olej-w-wodzie jest następnie przechowywana w 5°C.
Alternatywny sposób polega na uzyskaniu roztworu 0,4% wag./obj. Carbopol® 974P w soli fizjologicznej (9 g/l NaCl). Wartość pH doprowadza się do 7,3-7,4 wodorotlenkiem sodu. Ten roztwór Carbopol następnie miesza się z równą częścią antygenu wirusa rozcieńczonego po rozmrożeniu do 1/16. Sformułowana szczepionka w formie emulsji olej-w-wodzie jest następnie przechowywana w 5°C.
0,5 ml roztworu podjednostek (przykład 5) po rozmrożeniu rozcieńczonego buforem PBS 1/15 dodaje się do 0,5 ml substratu liofilizacji SPGA (sacharoza, fosforan, glutaminian, albumina, EP-B1-0,008,255). Tę mieszaninę rozdziela się do butelek i liofilizuje, a następnie przechowuje w 5°C. Rozcieńczalnik stanowią adiuwanty uprzednio opisane, włączając wyłącznie PBS w fazie wodnej.
P r z y k ł a d 7: Miano przeciwciał neutralizujących anty-CHV
Surowice do mianowania testowano pod kątem ich zdolności do neutralizacji wirusa CHV. Surowice pobrane od zwierząt rozcieńcza się seryjnie trzykrotnie podłożem DMEM z dodatkiem 5% płodowej surowicy cielęcej w płytkach 96 studzienkowych do hodowli komórek. Do 0,05 ml rozcieńczonej surowicy dodaje się 0,05 ml podłoża zawierającego około 200 TCID50/ml CHV. Tę mieszaninę inkubuje się przez 2 godziny w 37°C w atmosferze zawierającej 5% CO2.
Następnie do każdej mieszaniny dodawano 0,15 ml zawiesiny komórek MDCK zawierającej około 100000 komórek na ml. Efekt cytopatyczny (CPE) obserwowano za pomocą mikroskopu z kontrastem fazowym po 5 dniach hodowli w 37°C w atmosferze zawierającej 5% CO2. Miano neutralizujące każdej surowicy wyliczono według metody Kaerbera. Miana podane są w formie największego rozcieńczenia hamującego efekt cytopatyczny dla 50% studzienek. Miana są wyliczone jako log10
VN50. Każda surowica jest mianowana przynajmniej dwa razy, a korzystnie cztery razy.
P r z y k ł a d 8. Skuteczność suk rasy Beagle EOPS nie szczepionych włączono do badań i podzielono losowo na 2 grupy po 6 zwierząt. Suki pierwszej grupy szczepiono szczepionką CHV podjednostkową z dodatkiem emulsji olej-w-wodzie na bazie oleju parafinowego, a suki drugiej grupy szczepionką placebo.
PL 209 070 B1
Suki szczepiono 2 razy drogą podskórną około 10 dni po kryciu, a następnie około 10 dni przed przypuszczalną datą porodu. Sukom podawano liofilizat podniesiony w 1 ml rozpuszczalnika oleistego. Odpowiada on mianu równoważnemu 107,7 TCID50 przed inaktywacją.
Po porodzie, nowonarodzone szczeniaki testowano w wieku 3 dni 50 do 100 TCID50 wirulentnego szczepu CHV, na przykład, F205 wyizolowanego przez L. E. Carmichael (Am. J. Vet. Res., 1965, 26, 803-814) lub CHV 270 (H. Hill, Am. J. Vet. Res., 1974, 35, 669-673) lub CHV C4012SE drogą ustno-nosową (0,5 ml doustnie i po 0,25 ml do każdego nozdrza). Następnie szczeniaki obserwowano przez trzy tygodnie. Notowano objawy kliniczne i śmiertelność. Po padnięciu, wszystkie szczeniaki poddano autopsji. Uszkodzenia makroskopowe charakterystyczne dla zakażenia wirusem opryszczki psa były poszukiwane na poziomie nerek, śledziony, wątroby, płuc, przewodu pokarmowego, serca i węzłów krezkowych oraz pobierano próbki do izolacji CHV na komórkach MDCK. Diagnoza zakażenia wirusem opryszczki psa oparta jest na śmierci szczeniaka, obecności charakterystycznych uszkodzeń makroskopowych i potwierdzana przez izolację wirusa.
Wszystkie szczepione suki uległy serokonwersji i mają wysokie miano neutralizujących przeciwciał w momencie porodu. Te miana mierzono za pomocą sposobu opisanego w przykładzie 6 i są wyrażane jako log10 VN50.
| Średnie miana neutralizujących przeciwciał anty-CHV u suk | Dzień pierwszego szczepienia | Dzień szczepienia przypominającego | Dzień próby | 3 tygodnie po próbie |
| grupa kontrolna | <0,24 +/- 0,00 | <0,24 +/- 0,00 | <0,29 +/- 0,13 | <1,36 +/- 0,65 |
| grupa szczepiona | <0,35 +/- 0,17 | <1,04 +/- 0,34 | 1,76 +/- 0,20 | 2,11 +/- 0,51 |
Wśród szczeniaków urodzonych ze szczepionych matek żaden nie zdechł na zakażenie wirusem opryszczki psa (0/27). Z tych szczeniaków nie wyizolowanego żadnego wirusa CHV.
Wśród szczeniaków urodzonych z nieszczepionych matek (grupa placebo) zaobserwowano poziom śmiertelności spowodowanej CHV 62% (18/29). Izolację wirusa stwierdzono także u 55% szczeniaków (16/29): pobrania pochodzące od 2 szczeniaków były skażone przez bakterie i nie mogły być badane w celu izolacji wirusa CHV.
Różnica poziomu śmiertelności między dwiema grupami jest wysoce znacząca (dokładny test Fischera; p <0,0001).
Suki Yorkshire podzielone losowo na dwie grupy trzymano w zakażonym środowisku. 14 suk pierwszej grupy szczepiono szczepionką CHV podjednostkową z dodatkiem emulsji olej-w-wodzie na bazie oleju parafinowego (przykład 6), a suki drugiej grupy szczepiono szczepionką placebo. Protokół szczepienia był identyczny jak ten opisany powyżej.
Przy porodzie określano masę szczeniaków.
Masa 28 szczeniaków urodzonych ze szczepionych suk jest znacząco wyższa (masa średnia 141,8 g) niż 14 szczeniaków urodzonych z matek nie szczepionych (średnia masa 85,0 g), czyli przyrost masy 166,8%. Różnica jest znacząca (Kruskal-Wallis, p<0,01).
Wyniki wskazują w środowisku skażonym tendencję do zwiększenia częstości ciąży u szczepionych suk.
Częstość ciąży wynosi 82% u suk szczepionych (50/61) i 68% u suk nieszczepionych (grupa placebo) (19/28) (dokładny test Fischera; p =0,11).
Należy podkreślić, że wynalazek określony przez załączone zastrzeżenia nie jest ograniczony do poszczególnych sposobów wykonania przytoczonych w powyższym opisie, ale obejmuje warianty, które nie wykraczają poza jego zakres.
Claims (32)
1. Zastosowanie antygenu CHV do wytwarzania szczepionki do ochrony szczeniąt przed wirusem opryszczki psa, przeznaczonej do podawania ciężarnej suce 1 do 20 dni przed przypuszczalną datą porodu, w szczególności 1 do 15 dni, korzystniej 5 do 15 dni, a najkorzystniej 5 do 10 dni przed tą datą i wywołującej wysoki poziom przeciwciał anty-CHV u ciężarnej suki w momencie porodu indukując ochronę u szczeniąt przez przeniesienie przeciwciał w czasie karmienia sutkiem.
PL 209 070 B1
2. Zastosowanie antygenu CHV do wytwarzania szczepionki pozwalającej na szczepienie szczeniąt przeciwko wirusowi opryszczki psa przeznaczonej do podawania ciężarnej suce jak najbliżej terminu porodu, w szczególności w czasie ostatniej jednej trzeciej ciąży, i wywołującej u ciężarnej samicy w momencie porodu poziom przeciwciał anty-CHV wyższy lub równy 0,9 log10, a korzystnie wyższy lub równy 1,2 log10, indukując ochronę u szczeniąt przez przeniesienie przeciwciał w czasie karmienia sutkiem.
3. Zastosowanie według zastrz. 1, znamienne tym, że szczepionka przeznaczona jest do wywołania u ciężarnej samicy w momencie porodu poziomu przeciwciał anty-CHV wyższego lub równego 0,9 log10, a korzystnie wyższego lub równego 1,2 log10.
4. Zastosowanie według zastrz. 2, znamienne tym, że szczepionka przeznaczona jest do podawania 1 do 20 dni przed przypuszczalną datą porodu, w szczególności 1 do 15 dni, korzystniej 5 do 15 dni, a najkorzystniej 5 do 10 dni przed tą datą.
5. Zastosowanie według zastrz. 1 do 4, znamienne tym, że szczepionka jest przeznaczona do podawania samicy uprzednio szczepionej szczepionką przeciwko CHV.
6. Zastosowanie według zastrz. 5, znamienne tym, że szczepienia oddzielone są od siebie okresem co najmniej dwóch lub trzech tygodni a korzystnie podanie pierwszej szczepionki ma miejsce w okresie od rui od 2 do 3 tygodni przed pierwszym podaniem, w szczególności w okresie trwającym od rui i obejmujący pierwszą jedną trzecią ciąży, korzystnie 7 do 10 dni po kryciu.
7. Zastosowanie według zastrz. 5 lub 6, znamienne tym, że stosowana szczepionka jest tą samą szczepionką pozwalającą na ochronę szczeniąt przed wirusem opryszczki psa lub są to dwie różne szczepionki pozwalające na ochronę szczeniąt przed wirusem opryszczki psa.
8. Zastosowanie według zastrz. 1 do 7, znamienne tym, że szczepionka zawiera antygen wybrany z grupy złożonej z inaktywowanego wirusa CHV, atenuowanego wirusa CHV, podjednostki wirusa CHV, antygenu wyrażanego przez rekombinanta.
9. Zastosowanie według zastrz. 8, znamienne tym, że szczepionka zawiera podjednostki wirusa CHV, korzystnie podjednostki ekstrahowane.
10. Zastosowanie według zastrz. 9, znamienne tym, że szczepionka zawiera glikoproteiny otoczki wirusa CHV.
11. Zastosowanie według zastrz. 8, znamienne tym, że szczepionka zawiera inaktywowany wirus CHV.
12. Zastosowanie według zastrz. 1 do 11, znamienne tym, że szczepionka zawiera zaróbkę lub nośnik oraz adiuwant dopuszczalne w weterynarii.
13. Zastosowanie według zastrz. 9 do 12, znamienne tym, że szczepionka zawiera ilość antygenu od około 105 do około 109,5 TCID50 na dawkę odpowiadającą mianu przed inaktywacją.
14. Zastosowanie według zastrz. 9 do 13, znamienne tym, że szczepionka jest formułowana w postaci emulsji olej-w-wodzie lub w postaci zawiesiny z karbomerem.
15. Zastosowanie według zastrz. 14, znamienne tym, że szczepionka jest formułowana w postaci emulsji zawierającej albo oleinian anhydromannitolu, kwas olejowy etoksylowany i olej parafinowy ciekły lekki, albo kopolimery blokowe polioksypropylen-polioksyetylen, ester sorbitanu i kwasu olejowego etoksylowanego i skwalenu, albo w formie zawiesiny polimery kwasu akrylowego lub metakrylowego usieciowane alillo-sacharozą lub za pomocą allilo-pentaerytiritolu.
16. Szczepionka anty-CHV zawierająca podjednostki z ekstrakcji wirusa CHV, ewentualnie po usunięciu kapsydów wirusa, w nośniku lub zaróbce, korzystnie z adiuwantem dopuszczalnym w weterynarii.
17. Szczepionka anty-CHV zawierająca inaktywowany wirus CHV lub podjednostki z ekstrakcji wirusa CHV, ewentualnie po usunięciu kapsydów wirusa, w formie liofilizowanej, które mogą być zawieszone przed użyciem w adiuwancie.
18. Szczepionka według zastrz. 16 lub 17, znamienna tym, że adiuwantem jest wodorotlenek glinu.
19. Szczepionka według zastrz. 16 albo 17, znamienna tym, że adiuwantem jest polimer kwasu akrylowego lub metakrylowego lub polimer bezwodnika maleinowego i pochodnej alkenylu, korzystnie polimery kwasu akrylowego lub metakrylowego usieciowane alillo-sacharozą lub za pomocą allilo-pentaerytiritolu.
20. Szczepionka według zastrz. 16 lub 17, znamienna tym, że jest formułowana w postaci emulsji olej-w-wodzie.
PL 209 070 B1
21. Szczepionka według zastrz. 20, znamienna tym, że emulsja olej-w-wodzie zawiera albo oleinian anhydromannitolu, kwas oleinowy etoksylowany i olej parafinowy płynny lekki, albo kopolimery blokowe polioksypropylen-polioksyetylen, ester sorbitanu i kwasu olejowego etoksylowanego oraz skwalen.
22. Szczepionka anty-CHV zawierająca inaktywowany wirus CHV w ilości antygenu, która jest równoważna odpowiadającemu przed inaktywacją mianu od 105 do 109,5 TCID50, w szczególności od 105 do 109 TCID50, a korzystnie od 106 do 108 na dawkę w nośniku lub zaróbce dopuszczalnych w weterynarii, korzystnie z adiuwantem.
23. Szczepionka według zastrz. 22, znamienna tym, że zawiera adiuwant wybrany z wodorotlenku glinu, polimeru kwasu akrylowego lub metakrylowego lub polimeru bezwodnika maleinowego i pochodnej alkenylu, korzystnie polimery kwasu akrylowego lub metakrylowego usieciowane alillosacharozą lub za pomocą allilo-pentaerytiritolu, sekwencję immunostymulującą lub jest formułowana w postaci emulsji olej-w-wodzie.
24. Szczepionka według zastrz. 23, znamienna tym, że emulsja olej-w-wodzie zawiera albo oleinian anhydromannitolu, kwas oleinowy etoksylowany i olej parafinowy płynny lekki, lub kopolimery blokowe polioksypropylen-polioksyetylen, ester sorbitanu i kwasu olejowego etoksylowanego oraz skwalen.
25. Szczepionka według zastrz. 16 do 24, znamienna tym, że jest wytwarzana z wirusa CHV inaktywowanego termicznie.
26. Szczepionka według zastrz. 25, znamienna tym, że wirus CHV jest inaktywowany przez formalinę, β-propionolakton, etylenoiminę, lub etylenoiminę binarną.
27. Szczepionka według zastrz. 16 do 21, znamienna tym, że szczepionka jest szczepionką wytworzoną z podjednostek którą można otrzymać przez poddanie zawiesiny cząsteczek wirusa CHV, korzystnie inaktywowanych, działaniu odpowiedniego detergentu.
28. Szczepionka według zastrz. 16 do 21 albo 23 do 27, znamienna tym, że zawiera podjednostki wirusa CHV w ilości równoważnej mianu przed inaktywacją od 106 do 109,5 TCID50, w szczególności od 107 do 109 TCID50, a korzystnie od 107,5 do 108,5 na dawkę.
29. Szczepionka według zastrz. 16 do 28, znamienna tym, że zawiera co najmniej jeden antygen co najmniej jednego innego patogenu psa.
30. Szczepionka według zastrz. 29, znamienna tym, że patogen psa jest wybrany z grupy złożonej z wirusa choroby Carre, parwowirusa psa, adenowirusa psa i ich kombinacji.
31. Szczepionka według zastrz. 16 do 21 albo 25 do 30, znamienna tym, że zawiera miano glikoproteiny gB mierzonej testem ELISA, od około 0,01 μg do około 30 μg, korzystnie od około 0,1 μg do około 10 μg, a korzystniej od około 0,3 μg do około 3 μg na dawkę.
32. Zestaw szczepionki multiwalentnej zawierający oddzielnie przygotowaną szczepionkę CHV jak określoną w zastrz. 16 do 31 oraz szczepionkę przeciwko innemu patogenowi psa, w szczególności wybraną z grupy złożonej z wirusa choroby Carre, parwowirusa psa, adenowirusa psa i ich kombinacji.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR0000797A FR2804026B1 (fr) | 2000-01-21 | 2000-01-21 | Vaccination contre l'herpesvirose canine et vaccins |
| PCT/FR2001/000189 WO2001052887A2 (fr) | 2000-01-21 | 2001-01-19 | Vaccination contre l"herpesvirose canine et vaccins |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL356556A1 PL356556A1 (pl) | 2004-06-28 |
| PL209070B1 true PL209070B1 (pl) | 2011-07-29 |
Family
ID=8846182
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL356556A PL209070B1 (pl) | 2000-01-21 | 2001-01-19 | Zastosowanie antygenu CHV do wytwarzania szczepionki przeznaczonej do ochrony szczeniąt przed wirusem opryszczki psa, szczepionka anty-CHV oraz zestaw szczepionki multiwalentnej |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP1248648B1 (pl) |
| JP (1) | JP2003520249A (pl) |
| AT (1) | ATE540693T1 (pl) |
| AU (1) | AU782657C (pl) |
| BR (2) | BR0107771A (pl) |
| CA (1) | CA2397861C (pl) |
| FR (1) | FR2804026B1 (pl) |
| HU (1) | HU228703B1 (pl) |
| MX (1) | MXPA02007115A (pl) |
| NZ (1) | NZ520242A (pl) |
| PL (1) | PL209070B1 (pl) |
| WO (1) | WO2001052887A2 (pl) |
| ZA (1) | ZA200205830B (pl) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2510189A1 (en) * | 2002-12-19 | 2004-07-08 | Thomas Gore | Trivalent vaccine with maternal antibody transfer via the milk |
| EP1843787B1 (en) * | 2005-01-28 | 2011-11-02 | North-West University | Lipid and nitrous oxide combination as adjuvant for the enhancement of the efficacy of vaccines |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2909462A (en) | 1955-12-08 | 1959-10-20 | Bristol Myers Co | Acrylic acid polymer laxative compositions |
| AU532186B2 (en) | 1978-07-21 | 1983-09-22 | Merck & Co., Inc. | Herpes virus vaccine |
| ATE149091T1 (de) * | 1987-11-03 | 1997-03-15 | Syntex Inc | Einen tetra-polyol enthaltendes impfstoff- adjuvans |
| US5753235A (en) * | 1996-02-15 | 1998-05-19 | Heska Corporation | Recombinant canine herpesviruses |
| JPH11106351A (ja) * | 1997-10-02 | 1999-04-20 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | オイルアジュバントワクチンおよびその製造方法 |
| US6093564A (en) * | 1997-10-03 | 2000-07-25 | V.I. Technologies, Inc. | Methods and compositions for the selective modification of nucleic acids |
| GB9726555D0 (en) * | 1997-12-16 | 1998-02-11 | Smithkline Beecham Plc | Vaccine |
| FR2775601B1 (fr) * | 1998-03-03 | 2001-09-21 | Merial Sas | Vaccins vivants recombines et adjuves |
| FR2776928B1 (fr) * | 1998-04-03 | 2000-06-23 | Merial Sas | Vaccins adn adjuves |
-
2000
- 2000-01-21 FR FR0000797A patent/FR2804026B1/fr not_active Expired - Lifetime
-
2001
- 2001-01-19 EP EP01905858A patent/EP1248648B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-19 AU AU33831/01A patent/AU782657C/en not_active Expired
- 2001-01-19 MX MXPA02007115A patent/MXPA02007115A/es active IP Right Grant
- 2001-01-19 NZ NZ520242A patent/NZ520242A/en not_active IP Right Cessation
- 2001-01-19 CA CA2397861A patent/CA2397861C/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-19 BR BR0107771-6A patent/BR0107771A/pt active IP Right Grant
- 2001-01-19 WO PCT/FR2001/000189 patent/WO2001052887A2/fr not_active Ceased
- 2001-01-19 JP JP2001552934A patent/JP2003520249A/ja active Pending
- 2001-01-19 AT AT01905858T patent/ATE540693T1/de active
- 2001-01-19 PL PL356556A patent/PL209070B1/pl unknown
- 2001-01-19 BR BRPI0107771-6A patent/BRPI0107771B1/pt unknown
- 2001-01-19 HU HU0203831A patent/HU228703B1/hu unknown
-
2002
- 2002-07-22 ZA ZA200205830A patent/ZA200205830B/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FR2804026A1 (fr) | 2001-07-27 |
| AU3383101A (en) | 2001-07-31 |
| ZA200205830B (en) | 2003-09-29 |
| HUP0203831A3 (en) | 2004-07-28 |
| EP1248648A2 (fr) | 2002-10-16 |
| AU782657C (en) | 2006-07-13 |
| HU228703B1 (en) | 2013-05-28 |
| FR2804026B1 (fr) | 2004-06-11 |
| WO2001052887A3 (fr) | 2002-01-31 |
| MXPA02007115A (es) | 2003-01-28 |
| HUP0203831A2 (hu) | 2003-03-28 |
| NZ520242A (en) | 2004-06-25 |
| CA2397861A1 (en) | 2001-07-26 |
| BRPI0107771B1 (pt) | 2017-06-13 |
| PL356556A1 (pl) | 2004-06-28 |
| BR0107771A (pt) | 2002-11-12 |
| ATE540693T1 (de) | 2012-01-15 |
| WO2001052887A2 (fr) | 2001-07-26 |
| EP1248648B1 (fr) | 2012-01-11 |
| AU782657B2 (en) | 2005-08-18 |
| CA2397861C (en) | 2017-04-04 |
| JP2003520249A (ja) | 2003-07-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| TWI733653B (zh) | Ｆｍｄｖ重組疫苗及其用途 | |
| TWI781962B (zh) | 抗豬小病毒疫苗 | |
| ES2632429T3 (es) | Vacunas subunitarias de rotavirus y procedimientos para la fabricación y utilización de las mismas | |
| KR102166196B1 (ko) | M hyo 다가 백신 및 이의 용도 | |
| US7850978B2 (en) | Vaccine against feline calicivirus | |
| US6551598B2 (en) | Vaccination against canine herpesvirosis and vaccines therefor | |
| US9913896B2 (en) | Attenuated parvovirus vaccine for muscovy duck parvovirus and goose parvovirus (derzsy's disease) | |
| JP4873632B2 (ja) | 改良された不活化ｆｃｖワクチン | |
| PL209070B1 (pl) | Zastosowanie antygenu CHV do wytwarzania szczepionki przeznaczonej do ochrony szczeniąt przed wirusem opryszczki psa, szczepionka anty-CHV oraz zestaw szczepionki multiwalentnej | |
| KR100934687B1 (ko) | 고양이 칼리시바이러스 질병에 대한 불활성화 백신 | |
| CN102481358A (zh) | 对抗蓝舌病毒的异源性引发-加强免疫疗法 | |
| HK1212379B (en) | Attenuated parvovirus vaccine for muscovy duck parvovirus and goose parvovirus ( derzsy's disease) |