PL219186B1 - Di-(4-methylthio)phenyl esters 1- isothiocyane-methanphosphorous acids, processes for the preparation and use thereof - Google Patents
Di-(4-methylthio)phenyl esters 1- isothiocyane-methanphosphorous acids, processes for the preparation and use thereofInfo
- Publication number
- PL219186B1 PL219186B1 PL399048A PL39904812A PL219186B1 PL 219186 B1 PL219186 B1 PL 219186B1 PL 399048 A PL399048 A PL 399048A PL 39904812 A PL39904812 A PL 39904812A PL 219186 B1 PL219186 B1 PL 219186B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- methylthio
- acid
- phenyl
- preparation
- amino
- Prior art date
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 35
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 title description 11
- 230000008569 process Effects 0.000 title description 6
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 title 1
- -1 3,5-dimethoxyphenyl Chemical group 0.000 claims description 40
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 37
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- QGJOPFRUJISHPQ-UHFFFAOYSA-N Carbon disulfide Chemical compound S=C=S QGJOPFRUJISHPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 23
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 19
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical class Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- PUJDIJCNWFYVJX-UHFFFAOYSA-N benzyl carbamate Chemical compound NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 PUJDIJCNWFYVJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 7
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 7
- VFZRZRDOXPRTSC-UHFFFAOYSA-N 3,5-Dimethoxybenzaldehyde Chemical compound COC1=CC(OC)=CC(C=O)=C1 VFZRZRDOXPRTSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 125000004172 4-methoxyphenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(OC([H])([H])[H])=C([H])C([H])=C1* 0.000 claims description 6
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 claims description 6
- 150000002540 isothiocyanates Chemical class 0.000 claims description 6
- ZRSNZINYAWTAHE-UHFFFAOYSA-N p-methoxybenzaldehyde Chemical compound COC1=CC=C(C=O)C=C1 ZRSNZINYAWTAHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 6
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 5
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 5
- YJMNLGBCRLOFMJ-UHFFFAOYSA-N OP1(OC1N=C=S)=O Chemical class OP1(OC1N=C=S)=O YJMNLGBCRLOFMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 claims description 4
- WLHCBQAPPJAULW-UHFFFAOYSA-N 4-methylbenzenethiol Chemical compound CC1=CC=C(S)C=C1 WLHCBQAPPJAULW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 claims description 3
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- FAIAAWCVCHQXDN-UHFFFAOYSA-N phosphorus trichloride Chemical compound ClP(Cl)Cl FAIAAWCVCHQXDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- LRCDDWRJPABCCN-UHFFFAOYSA-N OP(CN=C=S)(O)=O Chemical class OP(CN=C=S)(O)=O LRCDDWRJPABCCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims description 2
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 claims description 2
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 claims description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims description 2
- MGRVRXRGTBOSHW-UHFFFAOYSA-N (aminomethyl)phosphonic acid Chemical compound NCP(O)(O)=O MGRVRXRGTBOSHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000004493 2-methylbut-1-yl group Chemical group CC(C*)CC 0.000 claims 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- WLJVXDMOQOGPHL-UHFFFAOYSA-N phenylacetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC=C1 WLJVXDMOQOGPHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 54
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 54
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 43
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- 239000000047 product Substances 0.000 description 28
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 22
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 19
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-N Phosphorous acid Chemical class OP(O)=O ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 12
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 12
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 11
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 235000014443 Pyrus communis Nutrition 0.000 description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 6
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 6
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 6
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 6
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 238000001394 phosphorus-31 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 6
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 6
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 6
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000003039 volatile agent Substances 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 5
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 4
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- POTZYLBXIHSWTH-UHFFFAOYSA-N CCC(C)C(N=C=S)(O1)P1(O)=O Chemical compound CCC(C)C(N=C=S)(O1)P1(O)=O POTZYLBXIHSWTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MNLIBJPPFMMXIK-UHFFFAOYSA-N COC1=CC(C(N=C=S)(O2)P2(O)=O)=CC(OC)=C1 Chemical compound COC1=CC(C(N=C=S)(O2)P2(O)=O)=CC(OC)=C1 MNLIBJPPFMMXIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VBZVMFRABSNMTO-UHFFFAOYSA-N OP1(OC1(CC1=CC=CC=C1)N=C=S)=O Chemical compound OP1(OC1(CC1=CC=CC=C1)N=C=S)=O VBZVMFRABSNMTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N [benzotriazol-1-yloxy(dimethylamino)methylidene]-dimethylazanium Chemical compound C1=CC=C2N(OC(N(C)C)=[N+](C)C)N=NC2=C1 CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- PHUAVVHNKXHOIK-UHFFFAOYSA-N 1-(phenylmethoxycarbonylamino)butylphosphonic acid Chemical compound CCCC(P(O)(O)=O)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 PHUAVVHNKXHOIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZNQOBHWZMLVHNS-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxy-2-oxo-1,2lambda5-oxaphosphiran-3-amine Chemical class NC1P(O1)(O)=O ZNQOBHWZMLVHNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZTQSAGDEMFDKMZ-UHFFFAOYSA-N Butyraldehyde Chemical compound CCCC=O ZTQSAGDEMFDKMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OUTOJMLRXVMYDL-UHFFFAOYSA-N CCC(C)C(NC(OCC1=CC=CC=C1)=O)P(O)(O)=O Chemical compound CCC(C)C(NC(OCC1=CC=CC=C1)=O)P(O)(O)=O OUTOJMLRXVMYDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- USZPCBZZTAYDAJ-UHFFFAOYSA-N COC1=CC(C(N)(O2)P2(O)=O)=CC(OC)=C1 Chemical compound COC1=CC(C(N)(O2)P2(O)=O)=CC(OC)=C1 USZPCBZZTAYDAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NTZCKCRHLXNEGZ-UHFFFAOYSA-N COC1=CC=C(C(N)(O2)P2(O)=O)C=C1 Chemical compound COC1=CC=C(C(N)(O2)P2(O)=O)C=C1 NTZCKCRHLXNEGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- POEFLWFGPUYAFL-UHFFFAOYSA-N COC1=CC=C(C(N=C=S)(O2)P2(O)=O)C=C1 Chemical compound COC1=CC=C(C(N=C=S)(O2)P2(O)=O)C=C1 POEFLWFGPUYAFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RMPTZLYFJSMHCC-UHFFFAOYSA-N COC1=CC=C(C(NC(OCC2=CC=CC=C2)=O)(O2)P2(O)=O)C=C1 Chemical compound COC1=CC=C(C(NC(OCC2=CC=CC=C2)=O)(O2)P2(O)=O)C=C1 RMPTZLYFJSMHCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 101000851058 Homo sapiens Neutrophil elastase Proteins 0.000 description 2
- AMIMRNSIRUDHCM-UHFFFAOYSA-N Isopropylaldehyde Chemical compound CC(C)C=O AMIMRNSIRUDHCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283891 Kobus Species 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 2
- 239000012124 Opti-MEM Substances 0.000 description 2
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 2
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 2
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 2
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 102000052502 human ELANE Human genes 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZBKFYXZXZJPWNQ-UHFFFAOYSA-N isothiocyanate group Chemical group [N-]=C=S ZBKFYXZXZJPWNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000003448 neutrophilic effect Effects 0.000 description 2
- DTUQWGWMVIHBKE-UHFFFAOYSA-N phenylacetaldehyde Chemical compound O=CCC1=CC=CC=C1 DTUQWGWMVIHBKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N thiourea Chemical compound NC(N)=S UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NOQKPEWLSMCOFU-UHFFFAOYSA-N (1-amino-2-methylbutyl)phosphonic acid Chemical compound CCC(C)C(N)P(O)(O)=O NOQKPEWLSMCOFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGSLPJDIFKVSIB-UHFFFAOYSA-N (1-azaniumyl-2-methylpropyl)-hydroxyphosphinate Chemical compound CC(C)C(N)P(O)(O)=O DGSLPJDIFKVSIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UAEPDDGDPAPPHZ-UHFFFAOYSA-N 1-aminobutylphosphonic acid Chemical compound CCCC(N)P(O)(O)=O UAEPDDGDPAPPHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UUFQTNFCRMXOAE-UHFFFAOYSA-N 1-methylmethylene Chemical compound C[CH] UUFQTNFCRMXOAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PSRVZRJMWNFSIZ-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methylsulfanylphenyl)acetic acid Chemical compound CSC1=CC=CC=C1CC(O)=O PSRVZRJMWNFSIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZDCMKVLEYCGQX-UDPGNSCCSA-N 2-(diethylamino)ethyl 4-aminobenzoate;(2s,5r,6r)-3,3-dimethyl-7-oxo-6-[(2-phenylacetyl)amino]-4-thia-1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid;hydrate Chemical compound O.CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1.N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 KZDCMKVLEYCGQX-UDPGNSCCSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IOOMXAQUNPWDLL-UHFFFAOYSA-N 2-[6-(diethylamino)-3-(diethyliminiumyl)-3h-xanthen-9-yl]-5-sulfobenzene-1-sulfonate Chemical compound C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1S([O-])(=O)=O IOOMXAQUNPWDLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZYSGIPNXRYFMGO-UHFFFAOYSA-N CC(C)C(N)(O1)P1(O)=O Chemical compound CC(C)C(N)(O1)P1(O)=O ZYSGIPNXRYFMGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BLQIPSIRMKZQJT-UHFFFAOYSA-N CC(C)C(N=C=S)(O1)P1(O)=O Chemical compound CC(C)C(N=C=S)(O1)P1(O)=O BLQIPSIRMKZQJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PNRFQCBWVAOHMJ-UHFFFAOYSA-N CCC(C)C(N)(O1)P1(O)=O Chemical compound CCC(C)C(N)(O1)P1(O)=O PNRFQCBWVAOHMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PEBLHSQTJXOBNY-UHFFFAOYSA-N CCCC(N)(O1)P1(O)=O Chemical compound CCCC(N)(O1)P1(O)=O PEBLHSQTJXOBNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDSVZBHWHXGVCQ-UHFFFAOYSA-N CCCC(N=C=S)(O1)P1(O)=O Chemical compound CCCC(N=C=S)(O1)P1(O)=O BDSVZBHWHXGVCQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WKEMNPANUVUFNO-UHFFFAOYSA-N COC1=CC(C(NC(OCC2=CC=CC=C2)=O)(O2)P2(O)=O)=CC(OC)=C1 Chemical compound COC1=CC(C(NC(OCC2=CC=CC=C2)=O)(O2)P2(O)=O)=CC(OC)=C1 WKEMNPANUVUFNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BHOJMZKCVXGZEN-UHFFFAOYSA-N COC1=CC(C(NC(OCC2=CC=CC=C2)=O)P(O)(O)=O)=CC(OC)=C1 Chemical compound COC1=CC(C(NC(OCC2=CC=CC=C2)=O)P(O)(O)=O)=CC(OC)=C1 BHOJMZKCVXGZEN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KUDBWFBRUHFZAY-UHFFFAOYSA-N COC1=CC=C(C(N=C=S)P(O)(O)=O)C=C1 Chemical compound COC1=CC=C(C(N=C=S)P(O)(O)=O)C=C1 KUDBWFBRUHFZAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100167062 Caenorhabditis elegans chch-3 gene Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000012571 GlutaMAX medium Substances 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- MJIKHQWGGJVELN-UHFFFAOYSA-N NC(CC1=CC=CC=C1)(O1)P1(O)=O Chemical compound NC(CC1=CC=CC=C1)(O1)P1(O)=O MJIKHQWGGJVELN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GXZMHVWWJFCZBC-UHFFFAOYSA-N OP1(OC1(CC1=CC=CC=C1)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O)=O Chemical compound OP1(OC1(CC1=CC=CC=C1)NC(OCC1=CC=CC=C1)=O)=O GXZMHVWWJFCZBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 1
- 239000012317 TBTU Substances 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Natural products NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KLSUPQBVQYSGSS-UHFFFAOYSA-N [2-methyl-1-(phenylmethoxycarbonylamino)propyl]phosphonic acid Chemical compound CC(C)C(P(O)(O)=O)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 KLSUPQBVQYSGSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VSULGWZITIYPLP-UHFFFAOYSA-N [2-phenyl-1-(phenylmethoxycarbonylamino)ethyl]phosphonic acid Chemical compound C=1C=CC=CC=1COC(=O)NC(P(O)(=O)O)CC1=CC=CC=C1 VSULGWZITIYPLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000003217 anti-cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 125000006267 biphenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000035567 cellular accumulation Effects 0.000 description 1
- 230000004700 cellular uptake Effects 0.000 description 1
- 230000002113 chemopreventative effect Effects 0.000 description 1
- 239000010779 crude oil Substances 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000017095 negative regulation of cell growth Effects 0.000 description 1
- 229940100595 phenylacetaldehyde Drugs 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 150000003585 thioureas Chemical class 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Description
Opis wynalazkuDescription of the invention
Przedmiotem wynalazku są estry di-(4-metylotio)fenylowe pochodne kwasów 1-izotiocyjanometanofosfonowych, sposób ich wytwarzania oraz zastosowanie przeciwnowotworowe.The subject of the invention is di- (4-methylthio) phenyl esters derivatives of 1-isothiocyanomethanophosphonic acids, their preparation and antitumor use.
W literaturze przedmiotu, m.in. w Psurski i współ. Synthesis and antiproliferative activity of novel a- and p-dialkoxyphosphonylated isothiocyanates Bioorg. and Medicinal Chemistry Letters 21 (2011) 4572-4576”, opisane zostały estry dialkilowe kwasów 1-izotiocyjano-metanofosfonowych, które ze względu na wysoką reaktywność grupy izotiocyjanianowej znalazły zastosowanie w szeregu transformacji syntetycznych. Dla przykładu znalazły zastosowanie w reakcjach prowadzących do uzyskania tiomocznikowych pochodnych peptydów (m.in. Jing-Zi i współ. „Synthesis and in vitro study of pseudopeptide thioureas containing a-aminophosphonate moiety as potential antitumor agents” Eur. Journal of Med. Chemistry 45 (2010) 5108-5112), które mogą być wartościowymi związkami wykazującymi aktywność biologiczną, w szczególności przeciwnowotworową. W literaturze opisano również syntezę szeregu Cbz (benzyloksykarbonylo)-zablokowanych, fosfonowych pochodnych aminokwasów, które jednakże nie wykazały aktywności antyproliferacyjnej (przeciwnowotworowej) w warunkach in vitro (Sieńczyk i współ. „Simple phosphonic inhibitors of human neutrophil elastase” Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 21 (2011) 1310-1314).In the literature on the subject, incl. in Psurski et al. Synthesis and antiproliferative activity of novel a- and p-dialkoxyphosphonylated isothiocyanates Bioorg. and Medicinal Chemistry Letters 21 (2011) 4572-4576 ", 1-isothiocyanato-methanophosphonic acid dialkyl esters are described, which, due to the high reactivity of the isothiocyanate group, have found application in a number of synthetic transformations. For example, they have been used in reactions leading to the production of thiourea peptide derivatives (including Jing-Zi et al. "Synthesis and in vitro study of pseudopeptide thioureas containing a-aminophosphonate moiety as potential antitumor agents" Eur. Journal of Med. Chemistry 45 (2010) 5108-5112), which may be valuable compounds with biological, in particular anti-tumor activity. The literature also describes the synthesis of a series of Cbz (benzyloxycarbonyl) -blocked phosphonic derivatives of amino acids, which, however, did not show antiproliferative (antitumor) activity in vitro (Sieńczyk et al. "Simple phosphonic inhibitors of human neutrophil elastase" Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 21 (2011) 1310-1314).
Ze stanu techniki wiadomo, iż grupa izotiocyjanianowa odpowiedzialna jest za szybką akumulację związków w komórkach eukariotycznych na drodze dyfuzji biernej (opisane m.in. w Zhang Y. Molecular mechanism of rapid cellular accumulation of anticarcinogenic isothiocyanates. Carcinogenesis. 2001; 22(3): 425-31) i szereg aktywności biologicznych (opisane m.in. w pracy przeglądowej Zhang Y. The molecular basis that unifies the metabolism, cellular uptake and chemopreventive activities of dietary isothiocyanates. Carcinogenesis. 2012; 33(1): 2-9.).It is known from the prior art that the isothiocyanate group is responsible for the rapid accumulation of compounds in eukaryotic cells by passive diffusion (described, inter alia, in Zhang Y. Molecular mechanism of rapid cellular accumulation of anticarcinogenic isothiocyanates. Carcinogenesis. 2001; 22 (3): 425-31) and a number of biological activities (described, among others, in the review by Zhang Y. The molecular basis that unifies the metabolism, cellular uptake and chemopreventive activities of dietary isothiocyanates. Carcinogenesis. 2012; 33 (1): 2-9. ).
Ze stanu techniki wiadomo jest, iż estry difenylowe fosfonianów odpowiedzialne są za aktywność inhibitorową przeciwko proteazom serynowym opisane m.in. w Sieńczyk i współ. „Simple phosphonic inhibitors of human neutrophil elastase” Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 21 (2011) 1310-1314.It is known from the state of the art that diphenyl esters of phosphonates are responsible for the inhibitory activity against serine proteases, described e.g. in Sieńczyk et al. "Simple phosphonic inhibitors of human neutrophil elastase" Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 21 (2011) 1310-1314.
Z publikacji Psurski i współ. „Synthesis and antiproliferative activity of novel a- and p-dialkoxyphosphonylated isothiocyanates” Bioorg. and Medicinal Chemistry Letters 21 (2011) 4572-4576) znany jest sposób wytwarzania estrów dialkilowych 1-izotiocyjano-aralkilofosfonianów, polegający na tym, że jako substratu użyto chlorowodorków estrów dialkilowych kwasów 1-amino-aralkilofosfonowych, który z wykorzystaniem disiarczku węgla w obecności aminy i tetrafluoroboran 2-(1H-benzotriazolo-1-ilo)-1,1,3,3-tetrametyloaminiowy (TBTU) przekształcany jest w docelowy związek ester dialkilowy kwasu 1-izotiocyjano-aralkilofosfonowego.From the publication by Psurski et al. "Synthesis and antiproliferative activity of novel a- and p-dialkoxyphosphonylated isothiocyanates" Bioorg. and Medicinal Chemistry Letters 21 (2011) 4572-4576), a method for the preparation of 1-isothiocyano-aralkylphosphonate dialkyl esters is known, whereby 1-amino-aralkylphosphonic acid dialkyl ester hydrochlorides were used as a substrate, which with the use of carbon disulfide in the presence of an amine and 2- (1H-benzotriazol-1-yl) -1,1,3,3-tetramethylamino tetrafluoroborate (TBTU) is converted to the target compound 1-isothiocyano-aralkylphosphonic acid dialkyl ester.
W literaturze naukowej i patentowej nie są znane estry di-(4-metylotio)fenylowe pochodne kwasów 1-izotiocyjano-metanofosfonowych, jak również sposoby ich wytwarzania oraz zastosowanie.The di- (4-methylthio) phenyl esters of 1-isothiocyanato-methanophosphonic acids, as well as the methods of their preparation and use are not known in the scientific and patent literature.
Istotą rozwiązania według wynalazku są estry di-(4-metylotio)fenylowe pochodne kwasów 1-izotiocyjano-metanofosfonowych o wzorze ogólnym 1, w których R1 oznacza podstawniki: propylowy, izopropylowy, sec-butylowy, benzylowy, 4-metoksyfenylowy, 3,5-dimetoksyfenylowy.The essence of the solution according to the invention are di- (4-methylthio) phenyl esters of 1-isothiocyanato-methanophosphonic acids of the general formula 1, in which R1 represents the following substituents: propyl, isopropyl, sec-butyl, benzyl, 4-methoxyphenyl, 3,5- dimethoxyphenyl.
Istotą rozwiązania według wynalazku jest również sposób wytwarzania estrów di-(4-metylotio)fenylowych pochodnych kwasów 1-izotiocyjanometanofosfonowych o wzorze ogólnym 1, w którym R1 oznacza podstawniki: propylowy, izopropylowy, sec-butylowy, benzylowy, 4-metoksyfenylowy, 3,5-dimetoksyfenylowy, polegający na tym, że otrzymuje się w reakcji trójchlorku fosforu z 4-metylotiofenolem w acetonitrylu w temperaturze wrzenia przez 2 - 4 godziny fosforyn tri-(4-metylotio)fenylowy, który następnie poddaje się reakcji z odpowiednim aldehydem wybranym spośród aldehydu butylowego, izo-masłowego, 2-metylobutylowego, fenylooctowego, 4-metoksybenzaldehydu, 3,5-dimetoksybenzaldehydu oraz karbaminianem benzylu i otrzymuje się N-(benzyloksykarbonylo) zablokowaną pochodną estru di-(4-metylotio)fenylowego pochodną kwasu 1-amino-metanofosfonowego, którą poddaje się standardowej deprotekcji z użyciem 3-5 ekwiwalentów molowych 33% roztworu kwasu bromowodorowego w kwasie octowym i otrzymuje się bromowodorek estru di-(4-metylotio)fenylowego pochodną kwasu 1-amino-metanofosfonowego, po czym poddaje się go reakcji z 10-15 ekwiwalentami molowymi disiarczku węgla w obecności 4-6 ekwiwalentów molowych diizopropyloetyloaminy w ^^-dimetyloformamidzie w temperaturze pokojowej, a następnie po 20-30 minutach i powstały produkt pośredni rozkłada się do izotiocyjanianu, przy czym w reakcji wykorzystuje się 1,5 równoważnika molowego heksafluorofosforanu 2-(1H-benzotriazolo-1-ilo)-1,1,3,3-tetrametylo-uroniowego.The essence of the solution according to the invention is also a process for the preparation of di- (4-methylthio) phenyl esters of 1-isothiocyanomethane-phosphonic acid derivatives of the general formula 1, in which R1 represents the following substituents: propyl, isopropyl, sec-butyl, benzyl, 4-methoxyphenyl, 3,5 -dimethoxyphenyl, consisting in the fact that it is obtained by reacting phosphorus trichloride with 4-methylthiophenol in acetonitrile at boiling temperature for 2 - 4 hours, tri- (4-methylthio) phenyl phosphite, which is then reacted with a suitable aldehyde selected from butyl aldehyde , isobutyric, 2-methylthio, phenylacetic acid, 4-methoxybenzaldehyde, 3,5-dimethoxybenzaldehyde and benzyl carbamate to give the N- (benzyloxycarbonyl) blocked derivative of di- (4-methylthio) phenyl ester with a derivative of 1-amino-methanophosphonic acid, which is subjected to standard deprotection with 3-5 mole equivalents of 33% hydrobromic acid in acetic acid to give hydrobromide e di- (4-methylthio) phenyl string derivative of 1-amino-methanophosphonic acid, and then reacted with 10-15 molar equivalents of carbon disulfide in the presence of 4-6 molar equivalents of diisopropylethylamine in ^^ - dimethylformamide at room temperature, and then after 20-30 minutes and the resulting intermediate decomposes to the isothiocyanate, the reaction using 1.5 molar equivalents of 2- (1H-benzotriazol-1-yl) -1,1,3,3-tetramethyl uronium hexafluorophosphate.
PL 219 186 B1PL 219 186 B1
Istotą rozwiązania według wynalazku są estry di-(4-metylotio)fenylowych pochodnych kwasów 1-izotiocyjano-metanofosfonowych o wzorze ogólnym 1, w których R1 oznacza podstawniki: propylowy, izopropylowy, sec-butylowy, benzylowy, 4-metoksyfenylowy, 3,5-dimetoksyfenylowy do stosowania w preparacie farmaceutycznym przeznaczonym do leczenia nowotworów płuc, piersi, jelita grubego ze szczególnym uwzględnieniem nowotworów opornych na doksorubicynę. Podstawową zaletą wyróżniającą związki będące przedmiotem wynalazku spośród strukturalnie zbliżonych związków, jest obecność w jednej cząsteczce dwóch grup funkcyjnych wykazujących niezależnie od siebie aktywność biologiczną. Zaletą sposobu według wynalazku jest prostota procesu oczyszczania produktu, a także wysoka wydajność reakcji i wysoka czystość otrzymywanych produktów.The essence of the solution according to the invention are esters of di- (4-methylthio) phenyl derivatives of 1-isothiocyanato-methanophosphonic acids of the general formula 1, in which R1 represents the following substituents: propyl, isopropyl, sec-butyl, benzyl, 4-methoxyphenyl, 3,5- dimethoxyphenyl for use in a pharmaceutical preparation intended for the treatment of lung, breast and colorectal neoplasms with particular emphasis on doxorubicin-resistant neoplasms. The main advantage that distinguishes the compounds, which are the subject of the invention from among structurally similar compounds, is the presence of two functional groups in one molecule which independently exhibit biological activity. The advantage of the process according to the invention is the simplicity of the product purification process, as well as high reaction efficiency and high purity of the products obtained.
Wynalazek został bliżej przedstawiony we wzorach strukturalnych oraz w przykładach jego realizacji.The invention is illustrated in more detail in the structural formulas and in the examples of its implementation.
P r z y k ł a d 1P r z k ł a d 1
Sposób wytwarzania estru di-(4-metyIotio)fenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(propylo)metanofosfonowego związek o wzorze 2.A method for producing 1-isothiocyano- (propyl) methanophosphonic acid di- (4-methylthio) phenyl ester of a compound of formula 2.
Etap 1. Otrzymywanie fosforynu trój-4-metylotiofenylowego.Step 1. Preparation of tri-4-methylthiophenyl phosphite.
W tym celu do kolby okrągłodennej wyposażonej w mieszadło magnetyczne dodaje się 5 g (36 mmola) 4-metylotiofenolu i 20 ml acetonitrylu. Po rozpuszczeniu do mieszaniny reakcyjnej dodaje się 1,065 ml (12 mmola) chlorku fosforu (III). Całość ogrzewa się przez 3 godziny w temperaturze wrzenia. Następnie pod zmniejszonym ciśnieniem usuwa się lotne składniki mieszaniny na wyparce obrotowej. Powstały surowy produkt w postaci oleju wykorzystuje się bezpośrednio, bez oczyszczania do kolejnego etapu.To this end, 5 g (36 mmol) of 4-methylthiophenol and 20 ml of acetonitrile are added to a round bottom flask equipped with a magnetic stirrer. After dissolution, 1.065 ml (12 mmol) of phosphorus (III) chloride are added to the reaction mixture. The mixture is heated to reflux for 3 hours. The volatile components of the mixture are then removed under reduced pressure on a rotary evaporator. The resulting crude oil product is used directly without purification for the next step.
Etap 2. Otrzymywanie estru di-4-metylotiofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylo)-1-amino(propylo)metanofosfonowego.Step 2. Preparation of N- (benzyloxycarbonyl) -1-amino (propyl) methanophosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester.
W tym celu do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-4-metylotiofenylowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne odważa się 1,82 g (12 mmola) karbaminianu benzylu i 1,36 ml (15 mmola) aldehydu butylowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 30 ml acetonitrylu mieszaninę reakcyjną schładza się w łaźni lodowej do temperatury około 5°C i dodaje się 0,05 ekwiwalenta molowego kwasu tetrafluoroborowego. Po 40 - 60 minutach powstały produkt odsącza się, a pozostały roztwór odparowuję się pod zmniejszonym ciśnieniem na wyparce rotacyjnej i pozostałość rozpuszcza się w 100 - 150 ml metanolu i umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu do stałej wagi. Uzyskuje się 4,78 g surowego produktu (M=531,13 g/mol, wzór sumaryczny C26H30NO5PS2,wydajność 75%). Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 532,1381/532,1406 [M + H]+.For this purpose, 1.82 g (12 mmol) of benzyl carbamate and 1.36 ml (15 mmol) of butylaldehyde are weighed into a round-bottom flask - containing the tri-4-methylthiophenyl phosphite formed directly in step 1 - and equipped with a magnetic stirrer. After all components are dissolved in 30 ml of acetonitrile, the reaction mixture is cooled in an ice bath to about 5 ° C and 0.05 molar equivalents of tetrafluoroboric acid are added. After 40-60 minutes, the product formed is filtered off, the remaining solution is evaporated under reduced pressure on a rotary evaporator, and the residue is dissolved in 100-150 ml of methanol and placed at -20 ° C for 24 hours to crystallize the product. The resulting product was filtered off with suction and air dried to constant weight. 4.78 g of crude product is obtained (M = 531.13 g / mol, crude formula C26H30NO5PS2, yield 75%). Mass spectrum (ESI, m / z): theoretical / found 532.1381 / 532.1406 [M + H] + .
Etap 3. Otrzymywanie bromowodorku estru di-4-metylotiofenylowego kwasu 1 -amino-(propylo)metanofosfonowego.Step 3. Preparation of 1-amino- (propyl) methanephosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester hydrobromide.
Do kolby okrągłodennej odważa się 2 g estru di-4-metylotiofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylo)-1-amino-(propylo)metanofosfonowego (3,76 mmol) i dodaje się 8 ml 33% roztworu kwasu bromowodorowego w kwasie octowym. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Następnie lotne składniki mieszaniny reakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej a uzyskany olej rozpuszcza się w minimalnej ilości metanolu i dodaje się eteru dietylowego do pierwszego zmętnienia. Kolbę umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu, który odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu do stałej wagi. Otrzymuje się 1,7 g (M=477,02 g/mol, wzór sumaryczny C18H25BrNO3PS2, wydajność 95%) bromowodorku estru di-4-metylotiofenylowego kwasu 1-amino-(propylo)metanofosfonowego.2 g of N- (benzyloxycarbonyl) -1-amino- (propyl) methanephosphonic acid (3.76 mmol) are weighed into a round bottom flask and 8 ml of a 33% solution of hydrobromic acid in acetic acid are added. The reaction is carried out at room temperature for 2 hours. The volatile components of the reaction mixture are then removed on a rotary evaporator and the resulting oil is dissolved in the minimum amount of methanol and diethyl ether is added to the first turbidity. The flask was placed at -20 ° C for 24 hours to crystallize the product, which was filtered under reduced pressure and air dried to constant weight. 1.7 g (M = 477.02 g / mol, total formula C18H25BrNO3PS2, 95% yield) of 1-amino- (propyl) methanophosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester hydrobromide are obtained.
Etap 4. Otrzymywanie estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(propylo)metanofosfonowego.Step 4. Preparation of 1-isothiocyano- (propyl) methanephosphonic acid di- (4-methylthio) phenyl ester.
33
Do kolby gruszkowej o pojemności 100 cm3 odważa się 1000 mg (2,1 mmola, M = 477,02 g//mol) bromowodorku estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-amino-(propylo)metanofosfonowego 3 i rozpuszcza się w 10 cm W,W-dimetyloformamidu (DMF). Następnie do kolby powoli dodaje się 1,3 ml (10eq, 21 mmoli, M = 76,14 g/mol, d = 1,26 g/ml) disiarczku węgla oraz 1,46 ml (4eq, 8,4 mmoli, M = 129,24 g/mol, d=0,742 g/ml) N,N-diizopropyloetyloaminy (DIPEA). Reakcję prowadzi się przez 30 minut w temperaturze pokojowej na mieszadle magnetycznym. Następnie do kolby dodaje się 1200 mg (1,5eq, 3,15 mmola, M = 379,3 g/mol) heksafluorofosforanu 2-(1H-benzotriazolo-1-ilo)-1,1,3,3-tetrametylouroniowego (HBTU) i reakcję prowadzi się przez kolejne 30 minut w temperaturze 3 pokojowej. W kolejnym etapie do mieszaniny reakcyjnej dodaje się 20 cm3 toluenu i odparowuje naTo a pear shaped flask of 100 cm 3 weighed 1000 mg (2.1 mmol, M = 477.02 g // mol) of the hydrobromide salt of di- (4-methylthio) phenyl-amino-1- (propyl) -methanephosphonic 3 and dissolved in 10 cm of W, N-dimethylformamide (DMF). Then 1.3 ml (10eq, 21 mmol, M = 76.14 g / mol, d = 1.26 g / ml) of carbon disulfide and 1.46 ml (4eq, 8.4 mmol, M = 129.24 g / mol, d = 0.742 g / ml) N, N-diisopropylethylamine (DIPEA). The reaction is carried out for 30 minutes at room temperature on a magnetic stirrer. Then 1200 mg (1.5eq, 3.15 mmol, M = 379.3 g / mol) of 2- (1H-benzotriazol-1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate (HBTU ) and the reaction is carried out for a further 30 minutes at room temperature 3. In the next step, 20 cm 3 of toluene are added to the reaction mixture and evaporated there
PL 219 186 B1 3 wyparce rotacyjnej. Odparowanie z 20 cm3 toluenu powtarza się dwukrotnie, a następnie pozostały 33 w kolbie olej rozpuszcza się w 30 cm3 toluenu i przenosi się do rozdzielacza o objętości 100 cm3. 3 GB 219 186 B1 three rotary evaporator. The evaporation from 20 cm 3 of toluene is repeated twice, then the oil remaining in the flask is dissolved in 30 cm 3 of toluene and transferred to a 100 cm 3 separating funnel. 3
Warstwę organiczną trzykrotnie ekstrahuje się 30 cm3 wody destylowanej, a następnie dwukrotnie 3 cm3 nasyconego roztworu chlorku sodu. Warstwę organiczną suszy się następnie nad bezwodnym siarczanem magnezu, sączy i lotne składniki usuwa się na wyparce rotacyjnej. Pozostały olej rozpuszcza się w mieszaninie heksan : octan etylu, 3:1(v/v) i przeprowadza się chromatografię kolumnową na żelu krzemionkowym z użyciem eluentu heksan : octan etylu, 3:1(v/v) w efekcie uzyskuje się 792 mg estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(propylo)metanofosfonowego z wydajnością 86% w postaci klarownego oleju. Wzór sumaryczny C19H22NO3PS3. Masa cząsteczkowa 439,05 g/mol.The organic layer is extracted three times with 30 cm 3 of distilled water and then twice with 3 cm 3 of a saturated sodium chloride solution. The organic layer was then dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered, and the volatiles were removed on a rotary evaporator. The residual oil is dissolved in 3: 1 hexane: ethyl acetate (v / v) and column chromatography on silica gel with the eluent 3: 1 hexane: ethyl acetate (v / v) gives 792 mg of ester 1-isothiocyano- (propyl) methanephosphonic acid di- (4-methylthio) phenyl in 86% yield as a clear oil. Summary formula C19H22NO3PS3. Molecular weight 439.05 g / mol.
Rf (heksan; octan etylu, 3:1(v/v)) 0,57Rf (hexane; ethyl acetate, 3: 1 (v / v)) 0.57
Widmo 31P NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 12,49 (s) 31 P NMR spectrum (solution in CDCl 3 , δ [ppm]): 12.49 (s)
Widmo 1H NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm], J[Hz]); 7.26 - 6.74 (m, 8H, Ar-H), 4.13 (ddd, J = 17.0, 9.1, 5.4 Hz, 1H, CHP), 2.46 (s, 6H, 2xSCH?), 2.08 - 1.94 (m, 2H, CH3CH2), 1.81 - 1.66 (m, 1H, CHA), 1.61 - 1.43 (m, 1H, CHS), 0.99 (t, J = 7.4 Hz, 3H, CH3). 1 H NMR spectrum (solution in CDCl 3, δ [ppm], J [Hz]); 7.26 - 6.74 (m, 8H, Ar-H), 4.13 (ddd, J = 17.0, 9.1, 5.4 Hz, 1H, CHP), 2.46 (s, 6H, 2xSCH ? ), 2.08 - 1.94 (m, 2H, CH3CH2 ), 1.81 - 1.66 (m, 1 H, CHA), 1.61 - 1.43 (m, 1H, C H S), 0.99 (t, J = 7.4 Hz, 3H, CH 3).
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 462,0397/462,0397 [M+H]+ Mass spectrum (ESI, m / z): theoretical / found 462.0397 / 462.0397 [M + H] +
P r z y k ł a d 2P r z k ł a d 2
Sposób wytwarzania estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(izo-propylo)metanofosfonowego związek o wzorze 3.Preparation of 1-isothiocyano- (iso-propyl) methanephosphonic acid di- (4-methylthio) phenyl ester compound of formula 3.
Etap 1. Otrzymywanie fosforynu trój-4-metylotiofenylowego.Step 1. Preparation of tri-4-methylthiophenyl phosphite.
Etap ten przebiega jak w przykładzie 1.This step is as in example 1.
Etap 2. Otrzymywanie estru di-4-metylotiofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylo)-1-amino-(izo-propylo)metanofosfonowego.Step 2. Preparation of N- (benzyloxycarbonyl) -1-amino- (iso-propyl) methanephosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester.
W tym celu do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-4-metylotiofenylowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne odważa się 1,82 g (12 mmola) karbaminianu benzylu i 1,36 ml (15 mmola) aldehydu izomasłowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 30 ml acetonitrylu mieszaninę reakcyjną schładza się w łaźni lodowej do temperatury około 5°C i dodaje się 0,05 ekwiwalenta molowego kwasu tetrafluoroborowego. Po 40 - 50 minutach powstały produkt odsącza się, a pozostały roztwór odparowuje się pod zmniejszonym ciśnieniem na wyparce rotacyjnej i pozostałość rozpuszcza się w 100 - 150 ml metanolu i umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu do stałej wagi. Uzyskuje się 5,1 g surowego produktu (M=531,13 g/mol, wzór sumaryczny C26H30NO5PS2,wydajność 80%).For this purpose, 1.82 g (12 mmol) of benzyl carbamate and 1.36 ml (15 mmol) of isobutyraldehyde are weighed into a round-bottom flask - containing the tri-4-methylthiophenyl phosphite formed directly in step 1 - and equipped with a magnetic stirrer. After all components are dissolved in 30 ml of acetonitrile, the reaction mixture is cooled in an ice bath to about 5 ° C and 0.05 molar equivalents of tetrafluoroboric acid are added. After 40-50 minutes, the product formed is filtered off, the remaining solution is evaporated under reduced pressure on a rotary evaporator, and the residue is dissolved in 100-150 ml of methanol and placed at -20 ° C for 24 hours to crystallize the product. The resulting product was filtered off with suction and air dried to constant weight. 5.1 g of crude product are obtained (M = 531.13 g / mol, summarized formula C26H30NO5PS2, yield 80%).
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 532,1381/532,1396 [M+H]+ Mass spectrum (ESI, m / z): theoretical / found 532.1381 / 532.1396 [M + H] +
Etap 3. Otrzymywanie bromowodorku estru di-4-metylotiofenylowego kwasu 1-amino-(izo-propylo)metanofosfonowego.Step 3. Preparation of 1-Amino- (iso-propyl) methanephosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester hydrobromide.
Do kolby okrągłodennej odważa się 2 g estru di-4-metylotiofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylo)-1-amino-(propylo)metanofosfonowego (3,76 mmol) i dodaje się 10 ml 33% roztworu kwasu bromowodorowego w kwasie octowym. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Następnie lotne składniki mieszaniny reakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej a uzyskany olej rozpuszcza się w minimalnej ilości metanolu i dodaje się eteru dietylowego do pierwszego zmętnienia. Kolbę umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu, który odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu do stałej wagi. Otrzymuje się 1,6 g (M = 477,02 g/mol, wzór sumaryczny C18H25BrNO3PS2, wydajność 90%) bromowodorku estru di-4-metylotio-fenylowego kwasu 1-amino-(izo-propylo)metanofosfonowego.2 g of N- (benzyloxycarbonyl) -1-amino- (propyl) methanephosphonic acid (3.76 mmol) are weighed into a round bottom flask and 10 ml of a 33% solution of hydrobromic acid in acetic acid are added. The reaction is carried out at room temperature for 2 hours. The volatile components of the reaction mixture are then removed on a rotary evaporator and the resulting oil is dissolved in the minimum amount of methanol and diethyl ether is added to the first turbidity. The flask was placed at -20 ° C for 24 hours to crystallize the product, which was filtered under reduced pressure and air dried to constant weight. 1.6 g (M = 477.02 g / mol, total formula C18H25BrNO3PS2, 90% yield) 1-amino- (iso-propyl) methanophosphonic acid di-4-methylthiophenylether hydrobromide are obtained.
Etap 4. Otrzymywanie estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(izo-propylo)metanofosfonowego.Step 4. Preparation of 1-isothiocyano- (iso-propyl) methanephosphonic acid di- (4-methylthio) phenyl ester.
33
Do kolby gruszkowej o pojemności 100 cm3 odważa się 954 mg (2 mmole, M=477,02 g/mol) bromowodorku estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-amino-(izo-propylo)metanofosfonowego 3 i rozpuszcza się w 15 cm3 N,N-dimetyloformamidu (DMF). Następnie do kolby powoli dodaje się 1,81 ml (15eq, 30 mmoli, M = 76,14 g/mol, d = 1,26 g/ml) disiarczku węgla oraz 1,41 ml (4eq, 8 mmoli, M = 129,24 g/mol, d=0,742 g/ml) N,N-diizopropyloetyloaminy (DIPEA). Reakcję prowadzi się przez 35 minut w temperaturze pokojowej na mieszadle magnetycznym. Następnie do kolby dodaje się 1140 mg (1,5eq, 3 mmole, M = 379,3 g/mol) heksafluorofosforanu 2-(1H-benzotriazolo-1-ilo)-1,1,3,3-tetrametylouroniowego (HBTU) i reakcję prowadzi się przez kolejne 40 minut w temperaturze pokojowej.To a pear shaped flask of 100 cm 3 weighed 954 mg (2 mmol, M = 477.02 g / mol) of the hydrobromide salt of di- (4-methylthio) -phenyl ester 1-amino (iso-propyl) -methanephosphonic 3 and dissolved in 15 cm 3 of N, N-dimethylformamide (DMF). Then 1.81 ml (15eq, 30 mmol, M = 76.14 g / mol, d = 1.26 g / ml) of carbon disulfide and 1.41 ml (4eq, 8 mmol, M = 129) are slowly added to the flask. , 24 g / mol, d = 0.742 g / ml) N, N-diisopropylethylamine (DIPEA). The reaction is carried out for 35 minutes at room temperature on a magnetic stirrer. Then 1140 mg (1.5eq, 3 mmol, M = 379.3 g / mol) of 2- (1H-benzotriazol-1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium (HBTU) hexafluorophosphate are added to the flask and the reaction is continued for another 40 minutes at room temperature.
33
W kolejnym etapie do mieszaniny reakcyjnej dodaje się 20 cm3 toluenu i odparowuje na wyparce rota3 cyjnej. Odparowanie z 20 cm3 toluenu powtarza się dwukrotnie, a następnie pozostały w kolbie olejIn a next step the reaction mixture was added 20 cm 3 of toluene and evaporated on a rota evaporator 3 mixture. The evaporation from 20 cm 3 of toluene is repeated twice, and then the oil remaining in the flask
PL 219 186 B1 rozpuszcza się w 30 cm3 toluenu i przenosi się do rozdzielacza o objętości 100 cm3. Warstwę orga33 niczną trzykrotnie ekstrahuje się 30 cm3 wody destylowanej, a następnie dwukrotnie 30 cm3 nasyconego roztworu chlorku sodu. Warstwę organiczną suszy się następnie nad bezwodnym siarczanem magnezu, sączy i lotne składniki usuwa się na wyparce rotacyjnej. Pozostały olej rozpuszcza się w mieszaninie eter naftowy : octan etylu, 5:1(v/v) i przeprowadza się chromatografię kolumnową na żelu krzemionkowym z użyciem eluentu eter naftowy : octan etylu, 5:1(v/v) w efekcie uzyskuje się 498 mg estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(izo-propylo)metanofosfonowego z wydajnością 78% w postaci żółtawego, klarownego oleju. Wzór sumaryczny C19H22NO3PS. Masa cząsteczkowa 439,05 g/mol.The mixture is dissolved in 30 cm 3 of toluene and transferred to a 100 cm 3 separating funnel. The organic layer is extracted three times with 30 cm 3 of distilled water and then twice with 30 cm 3 of a saturated sodium chloride solution. The organic layer was then dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered, and the volatiles were removed on a rotary evaporator. The residual oil was dissolved in 5: 1 (v / v) petroleum ether: ethyl acetate and column chromatography on silica gel with the eluent petroleum ether: ethyl acetate 5: 1 (v / v) gave 498 mg of 1-isothiocyano- (iso-propyl) methanophosphonic acid di- (4-methylthio) phenyl ester in 78% yield as a yellowish, clear oil. Summary formula C 19 H 22 NO 3 PS. Molecular weight 439.05 g / mol.
Rf (eter naftowy : octan etylu, 5:1(v/v)): 0,61Rf (petroleum ether: ethyl acetate, 5: 1 (v / v)): 0.61
Widmo 31P NMR (roztwór w CDCl3, δ [ppm]): 11,73 (s) 31 P NMR spectrum (solution in CDCl 3 , δ [ppm]): 11.73 (s)
Widmo 1H NMR (roztwór w CDCh, δ [ppm]): 7.35 - 7.04 (m, 8H, Av-H), 4.02 (dd, J = 15.4, 4.2 Hz, 1H, CHP), 2,58-2,43 (m, 1H, CH), 2.47 (s, 6H, 2xSCH?), 1.25-1.14 (m, 6H, 2xCH3). 1 H NMR spectrum (CDCl 3 solution, δ [ppm]): 7.35 - 7.04 (m, 8H, Av-H), 4.02 (dd, J = 15.4, 4.2 Hz, 1H, CHP), 2.58-2, 43 (m, 1H, CH), 2.47 (s, 6H, 2xSCH?), 1.25-1.14 (m, 6H, 2 xCH 3).
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 440,0578/440,0616 [M+H]+.Mass spectrum (ESI, m / z): theoretical / found 440.0578 / 440.0616 [M + H] + .
P r z y k ł a d 3P r z k ł a d 3
Sposób wytwarzania estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(sec-butylo)-metanofosfonowego o wzorze 4.Process for the preparation of 1-isothiocyano- (sec-butyl) -methanophosphonic acid di- (4-methylthio) phenyl ester of formula 4.
Etap 1. Otrzymywanie fosforynu trój-4-metylotiofenylowego.Step 1. Preparation of tri-4-methylthiophenyl phosphite.
Etap ten przebiega jak w przykładzie 1.This step is as in example 1.
Etap 2. Otrzymywanie estru di-4-metylotiofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylo)-1-amino(sec-butylo)metanofosfonowego.Step 2. Preparation of N- (benzyloxycarbonyl) -1-amino (sec-butyl) methanephosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester.
W tym celu do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-4-metylotiofenylowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne odważa się 1,82 g (12 mmola) karbaminianu benzylu i 1,6 ml (15 mmola) aldehydu 2-metylobutylowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 30 ml acetonitrylu mieszaninę reakcyjną schładza się w łaźni lodowej do temperatury około 5°C i dodaje się 0,05 ekwiwalenta molowego kwasu tetrafluoroborowego. Po 40-50 minutach powstały produkt odsącza się, a pozostały roztwór odparowuję się pod zmniejszonym ciśnieniem na wyparce rotacyjnej i pozostałość rozpuszcza się w 100 - 150 ml metanolu i umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu do stałej wagi. Uzyskuje się 4,6 g surowego produktu (M= 545,1460 g/mol, wzór sumaryczny C27H32NO5PS2, wydajność 70%).For this purpose, 1.82 g (12 mmol) of benzyl carbamate and 1.6 ml (15 mmol) of 2-methylbutylaldehyde are weighed into a round-bottom flask - containing the tri-4-methylthiophenyl phosphite formed directly in step 1 - and equipped with a magnetic stirrer. After all components are dissolved in 30 ml of acetonitrile, the reaction mixture is cooled in an ice bath to about 5 ° C and 0.05 molar equivalents of tetrafluoroboric acid are added. After 40-50 minutes, the resulting product is filtered off, the remaining solution is evaporated under reduced pressure on a rotary evaporator and the residue is dissolved in 100-150 ml of methanol and placed at -20 ° C for 24 hours to crystallize the product. The resulting product was filtered off with suction and air dried to constant weight. 4.6 g of crude product are obtained (M = 545.1460 g / mol, total formula C 27 H 32 NO 5 PS 2 , yield 70%).
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 546,1538/546,1539 [M+H]+ Mass spectrum (ESI, m / z): theoretical / found 546.1538 / 546.1539 [M + H] +
Etap 3. Otrzymywanie bromowodorku estru di-4-metylotiofenylowego kwasu 1-amino-(sec-butylo)metanofosfonowego.Step 3. Preparation of 1-Amino- (sec-butyl) methanephosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester hydrobromide.
Do kolby okrągłodennej odważa się 2 g estru di-4-metylotiofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylo)-1-amino-(sec-butylo)metanofosfonowego (3,66 mmol) i dodaje się 10 ml 33% roztworu kwasu bromowodorowego w kwasie octowym. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 3 godziny. Następnie lotne składniki mieszaniny reakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej a uzyskany olej rozpuszcza się w minimalnej ilości metanolu i dodaje się eteru dietylowego do pierwszego zmętnienia. Kolbę umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu, który odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu do stałej wagi. Otrzymuje się 1,6 g (M=491,03 g/mol, wzór sumaryczny C19H27BrNO3PS2, wydajność 90%) bromowodorku estru di-4-metylotiofenylowego kwasu 1-amino-(sec-butylo)metanofosfonowego.2 g of N- (benzyloxycarbonyl) -1-amino- (sec-butyl) methanephosphonic acid (3.66 mmol) are weighed into a round bottom flask and 10 ml of a 33% solution of hydrobromic acid in acetic acid are added. The reaction is carried out at room temperature for 3 hours. The volatile components of the reaction mixture are then removed on a rotary evaporator and the resulting oil is dissolved in the minimum amount of methanol and diethyl ether is added to the first turbidity. The flask was placed at -20 ° C for 24 hours to crystallize the product, which was filtered under reduced pressure and air dried to constant weight. 1.6 g (M = 491.03 g / mol, total formula C19H27BrNO3PS2, 90% yield) of 1-amino- (sec-butyl) methanophosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester hydrobromide are obtained.
Etap 4. Otrzymywanie estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(sec-butylo)metanofosfonowego.Step 4. Preparation of 1-isothiocyano- (sec-butyl) methanophosphonic acid di- (4-methylthio) phenyl ester.
33
Do kolby gruszkowej o pojemności 100 cm3 odważa się 1470 mg (3 mmole, M=491,03 g/mol) bromowodorku estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-amino-(sec-butylo)metanofosfonowego 3 i rozpuszcza 20 cm3 dimetyloformamidu (DMF). Następnie do kolby powoli dodaje się 2,35 ml (13eq, mmoli, M = 76,14 g/mol, d = 1,26 g/ml) disiarczku węgla oraz 3,10 ml (6eq, 18 mmoli, M = 129,24 g//mol, d=0,742 g/ml) N,N-diizopropyloetyloaminy (DIPEA). Reakcję prowadzi się przez 25 minut w temperaturze pokojowej na mieszadle magnetycznym. Następnie do kolby dodaje się 1720 mg (1,5eq, 4,5 mmola, M=379,3 g/mol) heksafluorofosforanu 2-(1H-benzotriazolo-1-ilo)-1,1,3,3-tetrametylouroniowego (HBTU) i reakcję prowadzi się przez kolejne 30 minut w temperaturze pokojowej.To a pear shaped flask of 100 cm 3 weighed 1470 mg (3 mmol, M = 491.03 g / mol) of the hydrobromide salt of di- (4-methylthio) phenyl-amino-1- (sec-butyl) -methanephosphonic 3 and dissolved 20 cm 3 dimethylformamide (DMF). Then 2.35 ml (13eq, mmol, M = 76.14 g / mol, d = 1.26 g / ml) of carbon disulfide and 3.10 ml (6eq, 18 mmol, M = 129, 24 g / mol, d = 0.742 g / ml) of N, N-diisopropylethylamine (DIPEA). The reaction is carried out for 25 minutes at room temperature on a magnetic stirrer. Then 1720 mg (1.5eq, 4.5 mmol, M = 379.3 g / mol) of 2- (1H-benzotriazol-1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate (HBTU ) and the reaction is carried out for a further 30 minutes at room temperature.
33
W kolejnym etapie do mieszaniny reakcyjnej dodaje się 30 cm3 toluenu i odparowuje na wyparce rota3 cyjnej. Odparowanie z 30 cm3 toluenu powtarza się dwukrotnie, a następnie pozostały w kolebie olej rozpuszcza się w 40 cm3 toluenu i przenosi się do rozdzielacza o objętości 100 cm3. Warstwę orga6In a next step the reaction mixture is added 30 cm3 of toluene and evaporated on a rota evaporator 3 mixture. The evaporation from 30 cm 3 of toluene is repeated twice, then the oil remaining in the flask is dissolved in 40 cm 3 of toluene and transferred to a 100 cm 3 separating funnel. Orga layer 6
PL 219 186 B1 niczną trzykrotnie ekstrahuje się 40 cm3 wody destylowanej, a następnie dwukrotnie 30 cm3 nasyconym roztworem chlorku sodu. Warstwę organiczną suszy się następnie nad bezwodnym siarczanem magnezu, sączy i lotne składniki usuwa się na wyparce rotacyjnej. Pozostały olej rozpuszcza się w mieszaninie eter naftowy : octan etylu, 1:1(v/v) i przeprowadza się chromatografię kolumnową na żelu krzemionkowym z użyciem eluentu eter naftowy : octan etylu, 1:1(v/v) w efekcie uzyskuje się 1110 mg estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(sec-butylo)metanofosfonowego z wydajnością 82% w postaci żółtego, klarownego oleju. Wzór sumaryczny C20H24NO3PS3. Masa cząsteczkowa 453,06 g/molThe mixture is extracted three times with 40 cm 3 of distilled water and then twice with 30 cm 3 of saturated sodium chloride solution. The organic layer was then dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered, and the volatiles were removed on a rotary evaporator. The residual oil is dissolved in 1: 1 (v / v) petroleum ether: ethyl acetate and column chromatography on silica gel with eluent petroleum ether: ethyl acetate 1: 1 (v / v) gives 1110 mg of 1-isothiocyano- (sec-butyl) methanophosphonic acid di- (4-methylthio) phenyl ester in 82% yield in the form of a clear yellow oil. Summary formula C 20 H 24 NO 3 PS 3 . Molecular weight 453.06 g / mol
Rf (eter naftowy : octan etylu, 1:1(v/v)): 0,25R f (petroleum ether: ethyl acetate, 1: 1 (v / v)): 0.25
Widmo 31P NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 12,28 (s, 1P, 62%), 11,83 (s, 1P, 38%) 31 P NMR spectrum (CDCl3 solution, δ [ppm]): 12.28 (s, 1P, 62%), 11.83 (s, 1P, 38%)
Widmo 1H NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 7.31 - 7.08 (m, 8H, Ar-H), 4.25 - 3.96 (m, 1H, 1 H NMR spectrum (solution in CDCl 3, δ [ppm]): 7.31 - 7.08 (m, 8H, Ar-H), 4.25 - 3.96 (m, 1H,
CHP), 2.46 (s, 6H, 2xSCH3), 2.29 - 2.13 (m, 1H, CHA), 1.65 - 1.36 (m, 2H, CHS, CH), 1.20 (d, J = 6 Hz, 3H, CHCH3), 0.96 (t, J = 7.4 Hz, 3H, CH2CH3).CHP), 2.46 (s, 6H, 2xSCH3), 2.29 - 2.13 (m, 1H, CHA), 1.65 - 1.36 (m, 2H, CH S , CH), 1.20 (d, J = 6Hz, 3H, CHCH3) , 0.96 (t, J = 7.4Hz, 3H, CH2CH3).
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 454,0734/454,0751 [M+H]+.Mass spectrum (ESI, m / z): theoretical / found 454.0734 / 454.0751 [M + H] + .
P r z y k ł a d 4P r z k ł a d 4
Sposób wytwarzania estru estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(benzylo)metanofosfonowego o wzorze 5.Process for the preparation of 1-isothiocyano- (benzyl) methanophosphonic acid di- (4-methylthio) phenyl ester of formula 5.
Etap 1 .Otrzymywanie fosforynu trój-4-metylotiofenylowego.Stage 1. Preparation of tri-4-methylthiophenyl phosphite.
Etap ten przebiega jak w przykładzie 1.This step is as in example 1.
Etap 2. Otrzymywanie estru di-4-metylotiofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylo)-1-amino(benzylo)metanofosfonowego.Step 2. Preparation of N- (benzyloxycarbonyl) -1-amino (benzyl) methanophosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester.
W tym celu do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-4-metylotiofenylowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne odważa się 1,82 g (12 mmola) karbaminianu benzylu i 1,4 ml (15 mmola) aldehydu fenylooctowego. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 30 ml acetonitrylu mieszaninę reakcyjną schładza się w łaźni lodowej do temperatury około 5°C i dodaje się 0,05 ekwiwalenta molowego kwasu tetrafluoroborowego. Po 60 - 80 minutach powstały produkt odsącza się, a pozostały roztwór odparowuję się pod zmniejszonym ciśnieniem na wyparce rotacyjnej i pozostałość rozpuszcza się w 100-150 ml metanolu i umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu do stałej wagi. Uzyskuje się 4,51 g surowego produktu (M= 579,13 g/mol, wzór sumaryczny C30H30NO5PS2, wydajność 65%).For this purpose, 1.82 g (12 mmol) of benzyl carbamate and 1.4 ml (15 mmol) of phenylacetaldehyde are weighed into a round-bottom flask - containing the tri-4-methylthiophenyl phosphite formed directly in step 1 - and equipped with a magnetic stirrer. After all components are dissolved in 30 ml of acetonitrile, the reaction mixture is cooled in an ice bath to about 5 ° C and 0.05 molar equivalents of tetrafluoroboric acid are added. After 60-80 minutes, the product formed is filtered off, the remaining solution is evaporated under reduced pressure on a rotary evaporator and the residue is dissolved in 100-150 ml of methanol and placed at -20 ° C for 24 hours to crystallize the product. The resulting product was filtered off with suction and air dried to constant weight. 4.51 g of crude product are obtained (M = 579.13 g / mol, crude formula C30H30NO5PS2, yield 65%).
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 580,1381/580,1411 [M+H]+.Mass spectrum (ESI, m / z): theoretical / found 580.1381 / 580.1411 [M + H] + .
Etap 3. Otrzymywanie bromowodorku estru di-4-metylotiofenylowego kwasu 1-amino-(benzylometanofosfonowego.Step 3. Preparation of 1-amino- (benzylmethanesophosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester hydrobromide.
Do kolby okrągłodennej odważa się 2,5 g estru di-4-metylotiofenyIowego kwasu N-(benzyloksykarbonylo)-1-amino-(benzyIo)metanofosfonowego (4,31 mmol) i dodaje się 20 ml 33% roztworu kwasu bromowodorowego w kwasie octowym. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez2.5 g of N- (benzyloxycarbonyl) -1-amino- (benzyl) methanephosphonic acid (4.31 mmol) are weighed into a round bottom flask and 20 ml of a 33% solution of hydrobromic acid in acetic acid are added. The reaction is carried out at room temperature for
3,5 godziny. Następnie lotne składniki mieszaniny reakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej a uzyskany olej rozpuszcza się w minimalnej ilości metanolu i dodaje się eteru dietylowego do pierwszego zmętnienia. Kolbę umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu, który odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu do stałej wagi. Otrzymuje się3.5 hours. The volatile components of the reaction mixture are then removed on a rotary evaporator and the resulting oil is dissolved in the minimum amount of methanol and diethyl ether is added to the first turbidity. The flask was placed at -20 ° C for 24 hours to crystallize the product, which was filtered under reduced pressure and air dried to constant weight. Receives
2,1 g (M=525,01 g/mol, wzór sumaryczny C22H25BrNO3PS2, wydajność 95%) bromowodorku estru di-4-metylotiofenylowego kwasu 1-amino-(benzylo)metanofosfonowego.2.1 g (M = 525.01 g / mol, total formula C22H25BrNO3PS2, 95% yield) 1-amino- (benzyl) methanophosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester hydrobromide.
Etap 4. Otrzymywanie estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(benzylo)-metanofosfonowego.Step 4. Preparation of 1-isothiocyano- (benzyl) -methanophosphonic acid di- (4-methylthio) phenyl ester.
33
Do kolby gruszkowej o pojemności 100 cm3 odważa się 1600 mg (4 mmole, M=525,01 g/mol) bromowodorku estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-amino-(benzylo)metanofosfonowego i roz3 puszcza w 15 cm3 dimetyloformamidu (DMF). Następnie do kolby powoli dodaje się 2,41 ml (10eq, 40 mmoli, M = 76,14 g/mol, d = 1,26 g/ml) disiarczku węgla oraz 2,76 ml (4eq, 16 mmoli, M = 129,24 g//mol, d=0,742 g/ml) N,N-diizopropyloetyloaminy (DIPEA). Reakcję prowadzi się przez 25 minut w temperaturze pokojowej na mieszadle magnetycznym. Następnie do kolby dodaje się 2290 mg (1,5eq. mmoli, M = 379,3 g/mol) heksafluorofosforanu 2-(1H-benzotriazolo-1-ilo)-1,1,3,3-tetrametylouroniowego (HBTU) i reakcję prowadzi się przez kolejne 30 minut w temperaturze pokojowej. W kolej3 nym etapie do mieszaniny reakcyjnej dodaje się 30 cm3 toluenu i odparowuje na wyparce rotacyjnej.To a pear shaped flask of 100 cm 3 was weighed 1600 mg (4 mmol, M = 525.01 g / mol) of the hydrobromide salt of di- (4-methylthio) phenyl-amino-1- (benzyl) -methanephosphonic and staggered 3 dissolved in 15 cm 3 dimethylformamide (DMF). Then 2.41 ml (10eq, 40 mmol, M = 76.14 g / mol, d = 1.26 g / ml) of carbon disulfide and 2.76 ml (4eq, 16 mmol, M = 129) are slowly added to the flask. , 24 g / mol, d = 0.742 g / ml) N, N-diisopropylethylamine (DIPEA). The reaction is carried out for 25 minutes at room temperature on a magnetic stirrer. Then 2290 mg (1.5 eq. Mmol, M = 379.3 g / mol) of 2- (1H-benzotriazol-1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate (HBTU) was added to the flask and the reaction was is carried out for another 30 minutes at room temperature. The rail 3 step was added to the reaction mixture, 30 cm 3 of toluene and evaporated on a rotary evaporator.
33
Odparowanie z 30 cm3 toluenu powtarza się dwukrotnie, a następnie pozostały w kolebie olej roz33 puszcza się w 40 cm3 toluenu i przenosi się do rozdzielacza o objętości 100 cm3. Warstwę organicznąThe evaporation from 30 cm 3 of toluene is repeated twice, then the oil remaining in the flask is dissolved in 40 cm 3 of toluene and transferred to a 100 cm 3 separating funnel. Organic layer
PL 219 186 B1 trzykrotnie ekstrahuje się 40 cm3 wody destylowanej, a następnie dwukrotnie 30 cm3 nasyconym roztworem chlorku sodu. Warstwę organiczną suszy się następnie nad bezwodnym siarczanem magnezu, sączy i lotne składniki usuwa się na wyparce rotacyjnej. Pozostały olej rozpuszcza się w mieszaninie eter naftowy : octan etylu, 3:1(v/v) i przeprowadza się chromatografię kolumnową na żelu krzemionkowym z użyciem eluentu eter naftowy : octan etylu, 3:1(v/v) w efekcie uzyskuje się 1520 mg estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(benzylo)metanofosfonowego z wydajnością 78% w postaci żółtego, klarownego oleju. Wzór sumaryczny C23H22NO3PS3. Masa cząsteczkowa 487,59 g/mol.The mixture is extracted three times with 40 cm 3 of distilled water and then twice with 30 cm 3 with saturated sodium chloride solution. The organic layer was then dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered, and the volatiles were removed on a rotary evaporator. The remaining oil is dissolved in a mixture of petroleum ether: ethyl acetate 3: 1 (v / v) and column chromatography on silica gel with the eluent petroleum ether: ethyl acetate 3: 1 (v / v) gives 1520 mg of 1-isothiocyano- (benzyl) methanophosphonic acid di- (4-methylthio) phenyl ester in 78% yield as a yellow, clear oil. Summary formula C23H22NO3PS3. Molecular weight 487.59 g / mol.
Rf (eter naftowy : octan etylu, 3:1(v/v)): 0,54 Widmo 31P NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 11,53 (s)R f (petroleum ether: ethyl acetate, 3: 1 (v / v)): 0.54 31 P NMR spectrum (solution in CDCl 3 , δ [ppm]): 11.53 (s)
Widmo 1H NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]); 7.44 - 7.10 (m, 13H, Ar-H), 4.30 (ddd, J= 14.4, 11.2, 3.2 Hz, 1H, CHP), 3.44 (ddd, J=14.1, 7.2, 3.3 Hz, 1H, CHA), 3.16 (ddd, J= 13.9, 11.1, 7.8 Hz, 1H, CHb), 2.47 (s, 6H, 2xSCH3). 1 H NMR spectrum (CDCl3 solution, δ [ppm]); 7.44 - 7.10 (m, 13H, Ar-H), 4.30 (ddd, J = 14.4, 11.2, 3.2 Hz, 1H, CHP), 3.44 (ddd, J = 14.1, 7.2, 3.3 Hz, 1H, CHA), 3.16 (ddd, J = 13.9, 11.1, 7.8 Hz, 1H, CH ^), 2.47 (s, 6H, 2xSCH 3).
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczne/znalezione 488,0578/488,0620 [M+H]+.Mass spectrum (ESI, m / z): theoretical / found 488.0578 / 488.0620 [M + H] + .
P r z y k ł a d 5P r z k ł a d 5
Sposób wytwarzania estru di-4-metylotiofenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(4-metoksyfenylo)metanofosfonowego o wzorze 6.Process for the preparation of 1-isothiocyano- (4-methoxyphenyl) methanophosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester of formula 6.
Etap 1. Otrzymywanie fosforynu trój-4-metylotiofenylowego.Step 1. Preparation of tri-4-methylthiophenyl phosphite.
Etap ten przebiega jak w przykładzie 1.This step is as in example 1.
Etap 2. Otrzymywanie estru di-4-metylotiofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylo)-1-amino-(4-metoksyfenylo)metanofosfonowego.Step 2. Preparation of N- (benzyloxycarbonyl) -1-amino- (4-methoxyphenyl) methanophosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester.
W tym celu do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-4-metylotiofenylowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne odważa się 1,82 g (12 mmola) karbaminianu benzylu i 1,82 ml (15 mmola) 4-metoksybenzaldehydu. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 30 ml acetonitrylu mieszaninę reakcyjną schładza się w łaźni lodowej do temperatury około 5°C i dodaje się 0,05 ekwiwalenta molowego kwasu tetrafluoroborowego. Po 40 - 50 minutach powstały produkt odsącza się, a pozostały roztwór odparowuję się pod zmniejszonym ciśnieniem na wyparce rotacyjnej i pozostałość rozpuszcza się w 100 - 150 ml metanolu i umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu do stałej wagi. Uzyskuje się 6,1 g surowego produktu (M= 595,66 g/mol, wzór sumaryczny C30H30NO6PS2, wydajność 85%).For this purpose, 1.82 g (12 mmol) of benzyl carbamate and 1.82 ml (15 mmol) of 4-methoxybenzaldehyde are weighed into a round-bottomed flask - containing the tri-4-methylthiophenyl phosphite formed directly in step 1 - and equipped with a magnetic stirrer. After all components are dissolved in 30 ml of acetonitrile, the reaction mixture is cooled in an ice bath to about 5 ° C and 0.05 molar equivalents of tetrafluoroboric acid are added. After 40-50 minutes, the product formed is filtered off, the remaining solution is evaporated under reduced pressure on a rotary evaporator and the residue is dissolved in 100-150 ml of methanol and placed at -20 ° C for 24 hours to crystallize the product. The resulting product was filtered off with suction and air dried to constant weight. 6.1 g of crude product are obtained (M = 595.66 g / mol, crude formula C30H30NO6PS2, yield 85%).
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 596,1330/596,1397 [M+H]+ Mass spectrum (ESI, m / z): theoretical / found 596.1330 / 596.1397 [M + H] +
Etap 3. Otrzymywanie bromowodorku estru di-4-metylotiofenylowego kwasu 1-amino-(4-metoksyfenylo)metanofosfonowego.Step 3. Preparation of 1-Amino- (4-methoxyphenyl) methanophosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester hydrobromide.
Do kolby okrągłodennej odważa się 4 g estru di-4-metylotiofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylo)-1-amino-(4-metoksyfenylo)metanofosfonowego (6,72 mmol) i dodaje się 25 ml 33% roztworu kwasu bromowodorowego w kwasie octowym. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 3 godziny. Następnie lotne składniki mieszaniny reakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej a uzyskany olej rozpuszcza się w minimalnej ilości metanolu i dodaje się eteru dietylowego do pierwszego zmętnienia. Kolbę umieszcza się w temperaturze - 20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu, który odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu do stałej wagi. Otrzymuje się 3,3 g (M=541,45 g/mol, wzór sumaryczny C22H25BrNO4PS2, wydajność 90%) bromowodorku estru di-4-metylotiofenylowego kwasu 1-amino-(4-metoksyfenylo)metanofosfonowego.4 g of N- (benzyloxycarbonyl) -1-amino- (4-methoxyphenyl) methanophosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester (6.72 mmol) (6.72 mmol) are weighed into a round bottom flask and 25 ml of a 33% solution of hydrobromic acid in acetic acid are added. The reaction is carried out at room temperature for 3 hours. The volatile components of the reaction mixture are then removed on a rotary evaporator and the resulting oil is dissolved in the minimum amount of methanol and diethyl ether is added to the first turbidity. The flask is placed at -20 ° C for 24 hours to crystallize the product, which is filtered under reduced pressure and air dried to constant weight. 3.3 g (M = 541.45 g / mol, total formula C22H25BrNO4PS2, 90% yield) of 1-amino- (4-methoxyphenyl) methanophosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester hydrobromide are obtained.
Etap 4. Otrzymywanie estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(4-metoksyfenylo)metanofosfonowego.Step 4. Preparation of 1-isothiocyano- (4-methoxyphenyl) methanephosphonic acid di- (4-methylthio) phenyl ester.
33
Do kolby gruszkowej o pojemności 100 cm3 odważa się 1900 mg (3,5 mmole, M=541,45 g/mol) bromowodorku estru di-4-metylotiofenylowego kwasu 1-amino-(4-metoksyfenylo)metanofosfonowego 3 i rozpuszcza w 15 cm3 dimetyloformamidu (DMF). Następnie do kolby powoli dodaje się 2,11 ml (10eq, 35 mmola, M=76,14 g/mol, d=1,26 g/ml) disiarczku węgla oraz 2,44 ml (4eq, 14 mmola, M=129,24 g/mol, d=0,742 g/ml) diizopropyloetyloaminy (DIPEA). Reakcję prowadzi się przez 30 minut w temperaturze pokojowej na mieszadle magnetycznym. Następnie do kolby dodaje się 1990 mg (1,5eq, 5,25 mmoli, M = 379,3 g/mol) heksafluorofosforanu 2-(1H-benzotriazolo-1-ilo)-1,1,3,3-tetrametylouroniowego (HBTU) i reakcję prowadzi się przez kolejne 30 minut w temperaturze pokojowej.To a pear shaped flask of 100 cm 3 weighed 1,900 mg (3.5 mmol, M = 541.45 g / mol) di-ester hydrobromide 4-metylotiofenylowego of 1-amino- (4-methoxyphenyl) methanephosphonic 3 and dissolved in 15 cm 3 dimethylformamide (DMF). Then 2.11 ml (10eq, 35 mmol, M = 76.14 g / mol, d = 1.26 g / ml) of carbon disulfide and 2.44 ml (4eq, 14 mmol, M = 129) are slowly added to the flask. , 24 g / mol, d = 0.742 g / ml) of diisopropylethylamine (DIPEA). The reaction is carried out for 30 minutes at room temperature on a magnetic stirrer. Then 1990 mg (1.5eq, 5.25 mmol, M = 379.3 g / mol) of 2- (1H-benzotriazol-1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate (HBTU ) and the reaction is carried out for a further 30 minutes at room temperature.
33
W kolejnym etapie do mieszaniny reakcyjnej dodaje się 30 cm3 toluenu i odparowuje na wyparce rota3 cyjnej. Odparowanie z 30 cm3 toluenu powtarza się dwukrotnie, a następnie pozostały w kolebie olej rozpuszcza się w 40 cm3 toluenu i przenosi się do rozdzielacza o objętości 100 cm3. Warstwę orga8In a next step the reaction mixture is added 30 cm3 of toluene and evaporated on a rota evaporator 3 mixture. The evaporation from 30 cm 3 of toluene is repeated twice, then the oil remaining in the flask is dissolved in 40 cm 3 of toluene and transferred to a 100 cm 3 separating funnel. Orga layer 8
PL 219 186 B1 niczną trzykrotnie ekstrahuje się 40 cm3 wody destylowanej, a następnie dwukrotnie 30 cm3 nasyconym roztworem chlorku sodu. Warstwę organiczną suszy się następnie nad bezwodnym siarczanem magnezu, sączy i lotne składniki usuwa się na wyparce rotacyjnej. Pozostały olej rozpuszcza się w mieszaninie heksan : octan etylu, 3:1(v/v) i przeprowadza się chromatografię kolumnową na żelu krzemionkowym z użyciem eluentu heksan ; octan etylu, 3:1(v/v) w efekcie uzyskuje się 1250 mg estru di-4-metylotiofenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(4-metoksyfenylo)metanofosfonowego z wydajnościąThe mixture is extracted three times with 40 cm 3 of distilled water and then twice with 30 cm 3 of saturated sodium chloride solution. The organic layer was then dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered, and the volatiles were removed on a rotary evaporator. The residual oil was dissolved in hexane: ethyl acetate 3: 1 (v / v) and column chromatographed on silica gel with the eluent hexane; ethyl acetate, 3: 1 (v / v) the result is 1,250 mg of 1-isothiocyano- (4-methoxyphenyl) methanophosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester with a yield of
71% w żółtawego ciała stałego. Wzór sumaryczny C23H22NO4PS3. Masa cząsteczkowa 503,59 g/mol.71% in a yellowish solid. Summary formula C23H22NO4PS3. Molecular weight 503.59 g / mol.
Rf (heksan : octan etylu, 3:1(v/v)) 0,37R f (hexane: ethyl acetate, 3: 1 (v / v)) 0.37
Widmo 31P NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 9,22 (s) 31 P NMR spectrum (solution in CDCl 3 , δ [ppm]): 9.22 (s)
Widmo 1H NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]): 7.24 - 7.08 (m, 6H, Ar-H), 6.95 - 6.84 (m, 4H, Ar-H), 4.74 (d, J= 18,3 Hz, 1H, CHP), 3.81 (s, 3H, OCH3), 2.48 (s, 6H, 2XSCH?) 1 H NMR spectrum (solution in CDCl 3, δ [ppm]): 7.24 - 7.08 (m, 6H, Ar-H), 6.95 - 6.84 (m, 4H, Ar-H), 4.74 (d, J = 18.3 Hz, 1H, CHP), 3.81 (s, 3H, OCH3), 2.48 (s, 6H, 2XSCH ? )
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 504,0527/504,0510 [M+H]+.Mass spectrum (ESI, m / z): theoretical / found 504.0527 / 504.0510 [M + H] + .
P r z y k ł a d 6P r z k ł a d 6
Sposób wytwarzania estru di-4-metylotiofenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(3,5-dimetoksyfenylo)metanofosfonowego o wzorze 7.Preparation of 1-isothiocyano- (3,5-dimethoxyphenyl) methanophosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester of formula 7.
Etap 1 .Otrzymywanie fosforynu trój-4-metylotiofenylowego.Stage 1. Preparation of tri-4-methylthiophenyl phosphite.
Etap ten przebiega jak w przykładzie 1.This step is as in example 1.
Etap 2. Otrzymywanie estru di-4-metylotiofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylo)-1-amino-(3,5-dimetoksyfenylo)metanofosfonowego.Step 2. Preparation of N- (benzyloxycarbonyl) -1-amino- (3,5-dimethoxyphenyl) methanephosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester.
W tym celu do kolby okrągłodennej - zawierającej fosforyn trój-4-metylotiofenylowy powstały bezpośrednio w etapie 1 - wyposażonej w mieszadło magnetyczne odważa się 1,82 g (12 mmola) karbaminianu benzylu i 2,49 g (15 mmola) 3,5-dimetoksybenzaldehydu. Po rozpuszczeniu wszystkich składników w 30 ml acetonitrylu mieszaninę reakcyjną schładza się w łaźni lodowej do temperatury około 5°C i dodaje się 0,05 ekwiwalenta molowego kwasu tetrafluoroborowego. Po 40 - 50 minutach powstały produkt odsącza się, a pozostały roztwór odparowuję się pod zmniejszonym ciśnieniem na wyparce rotacyjnej i pozostałość rozpuszcza się w 100-150 ml metanolu i umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu. Uzyskany produkt odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu do stałej wagi. Uzyskuje się 5,62 g surowego produktu (M=625,69/mol, wzór sumaryczny C31H32NO7PS2, wydajność 75%).For this purpose, 1.82 g (12 mmol) of benzyl carbamate and 2.49 g (15 mmol) of 3,5-dimethoxybenzaldehyde are weighed into a round-bottomed flask - containing the tri-4-methylthiophenyl phosphite formed directly in stage 1 - equipped with a magnetic stirrer. . After all components are dissolved in 30 ml of acetonitrile, the reaction mixture is cooled in an ice bath to about 5 ° C and 0.05 molar equivalents of tetrafluoroboric acid are added. After 40-50 minutes, the resulting product is filtered off, the remaining solution is evaporated under reduced pressure on a rotary evaporator and the residue is dissolved in 100-150 ml of methanol and placed at -20 ° C for 24 hours to crystallize the product. The resulting product was filtered off with suction and air dried to constant weight. 5.62 g of crude product are recovered (M = 625.69 / mol, summarized formula C31H32NO7PS2, yield 75%).
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 626,1436/626,1594 [M+H]+.Mass spectrum (ESI, m / z): theoretical / found 626.1436 / 626.1594 [M + H] + .
Etap 3. Otrzymywanie bromowodorku estru di-4-metylotiofenylowego kwasu 1-amino-(3,5-dimetoksyfenylo)metanofosfonowego.Step 3. Preparation of 1-Amino- (3,5-dimethoxyphenyl) methanophosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester hydrobromide.
Do kolby okrągłodennej odważa się 3,5 g estru di-4-metylotiofenylowego kwasu N-(benzyloksykarbonylo)-1-amino-(3,5-dimetoksyfenylo)-metanofosfonowego (5,6 mmol) i dodaje się 25 ml 33% roztworu kwasu bromowodorowego w kwasie octowym. Reakcję prowadzi się w temperaturze pokojowej przez 4 godziny. Następnie lotne składniki mieszaniny reakcyjnej usuwa się na wyparce obrotowej a uzyskany olej rozpuszcza się w minimalnej ilości metanolu i dodaje się eteru dietylowego do pierwszego zmętnienia. Kolbę umieszcza się w temperaturze -20°C na 24 godziny w celu krystalizacji produktu, który odsącza się pod zmniejszonym ciśnieniem i suszy na powietrzu do stałej wagi. Otrzymuje się 2,7 g (M=572,47 g/mol, wzór sumaryczny C23H27BrNO5PS2, wydajność 85%) bromowodorku estru di-4-metylotiofenylowego kwasu 1-amino-(3,5-dimetoksyfenylo)metanofosfonowego.3.5 g of N- (benzyloxycarbonyl) -1-amino- (3,5-dimethoxyphenyl) -methanophosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester (5.6 mmol) are weighed into a round bottom flask and 25 ml of a 33% acid solution are added. hydrobromic acid in acetic acid. The reaction is carried out at room temperature for 4 hours. The volatile components of the reaction mixture are then removed on a rotary evaporator and the resulting oil is dissolved in the minimum amount of methanol and diethyl ether is added to the first turbidity. The flask was placed at -20 ° C for 24 hours to crystallize the product, which was filtered under reduced pressure and air dried to constant weight. 2.7 g (M = 572.47 g / mol, total formula C23H27BrNO5PS2, 85% yield) of 1-amino- (3,5-dimethoxyphenyl) methanophosphonic acid di-4-methylthiophenyl ester hydrobromide are obtained.
Etap 4. Otrzymywanie estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(3,5-dimetoksyfenylo)metanofosfonowego.Step 4. Preparation of 1-isothiocyano- (3,5-dimethoxyphenyl) methanophosphonic acid di- (4-methylthio) phenyl ester.
33
Do kolby gruszkowej o pojemności 100 cm3 odważa się 2000 mg (3,5 mmola, M=572,47g /mol) bromowodorku estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-amino-(3,5-dimetoksyfenylo)metanofosfo3 nowego i rozpuszcza w 10 cm3 dimetyloformamidu (DMF). Następnie do kolby powoli dodaje się 2,12 ml (10eq, 35 mmoli, M = 76,14 g/mol, d = 1,26 g/ml) disiarczku węgla oraz 2,42 ml (4eq, 14 mmoli, M=129,24 g/mol, d=0,742 g/ml) N,N-diizopropyloetyloaminy (DIPEA). Reakcję prowadzi się przez 25 minut w temperaturze pokojowej na mieszadle magnetycznym. Następnie do kolby dodaje się 2980 mg (1,5eq, 7,8 mmola, M=379,3 g/mol) heksafluorofosforanu 2-(1H-benzotriazolo-1-ilo)-1,1,3,3-tetrametylouroniowego (HBTU) i reakcję prowadzi się przez kolejne 30 minut w temperaturze 3 pokojowej. W kolejnym etapie do mieszaniny reakcyjnej dodaje się 30 cm3 toluenu i odparowuje na 3 wyparce rotacyjnej. Odparowanie z 30 cm3 toluenu powtarza się dwukrotnie, a następnie pozostały w kolbie olej rozpuszcza się w 40 cm3 toluenu i przenosi się do rozdzielacza o objętości 100 cm3.To a pear shaped flask of 100 cm 3 weighed 2000 mg (3.5 mmol, M = 572,47g / mol) of the hydrobromide salt of di- (4-methylthio) phenyl-amino-1- (3,5-dimethoxyphenyl) metanofosfo 3 new and dissolved in 10 cm 3 of dimethylformamide (DMF). Then 2.12 ml (10eq, 35 mmol, M = 76.14 g / mol, d = 1.26 g / ml) of carbon disulfide and 2.42 ml (4eq, 14 mmol, M = 129) are slowly added to the flask. , 24 g / mol, d = 0.742 g / ml) N, N-diisopropylethylamine (DIPEA). The reaction is carried out for 25 minutes at room temperature on a magnetic stirrer. Then, 2980 mg (1.5eq, 7.8 mmol, M = 379.3 g / mol) of 2- (1H-benzotriazol-1-yl) -1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate (HBTU ) and the reaction is carried out for a further 30 minutes at room temperature 3. In the next stage, 30 cm 3 of toluene are added to the reaction mixture and evaporated on the 3rd rotary evaporator. Evaporation from 30 cm 3 of toluene is repeated twice, then the oil remaining in the flask is dissolved in 40 cm 3 of toluene and transferred to a 100 cm 3 separating funnel.
33
Warstwę organiczną trzykrotnie ekstrahuje się 40 cm3 wody destylowanej, a następnie dwukrotnie 3 cm3 nasyconym roztworem chlorku sodu. Warstwę organiczną suszy się następnie nad bezwodPL 219 186 B1 nym siarczanem magnezu, sączy i lotne składniki usuwa się na wyparce rotacyjnej. Pozostały olej rozpuszcza się w mieszaninie eter naftowy : octan etylu, 1:1(v/v) i przeprowadza się chromatografię kolumnową na żelu krzemionkowym z użyciem eluentu eter naftowy : octan etylu, 1:1(v/v) w efekcie uzyskuje się 1470 mg estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(3,5-dimetoksyfenylo)metanofosfonowego z wydajnością 79% w postaci żółtego osadu. Wzór sumaryczny C24H24NO5PS3. Masa cząsteczkowa 533,62 g/molThe organic layer is extracted three times with 40 cm 3 of distilled water and then twice with 3 cm 3 of saturated sodium chloride solution. The organic layer was then dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered, and the volatiles were removed on a rotary evaporator. The residual oil is dissolved in 1: 1 petroleum ether: ethyl acetate (v / v) and column chromatography on silica gel with eluent petroleum ether: ethyl acetate 1: 1 (v / v) gives 1470 mg of 1-isothiocyano- (3,5-dimethoxyphenyl) methanophosphonic acid di- (4-methylthio) phenyl ester in 79% yield in the form of a yellow solid. Summary formula C24H24NO5PS3. Molecular weight 533.62 g / mol
Rf (Eter naftowy : octan etylu, 1:1(v/v)) 0,13Rf (Petroleum ether: ethyl acetate, 1: 1 (v / v)) 0.13
Widmo 31P NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]); 8,59 (s) 31 P NMR spectrum (CDCl 3 solution, δ [ppm]); 8.59 (s)
Widmo 1H NMR (roztwór w CDCI3, δ [ppm]); 7.43 - 6.36 (m, 11H, Ar-H), 5.25 (d, J = 18.5 Hz, 1H, CHP), 3.77 (s, 6H, 2xOCH3), 2.45 (s, 6H, 2xSCH3) 1 H NMR spectrum (CDCl 3 solution, δ [ppm]); 7.43 - 6.36 (m, 11H, Ar-H), 5.25 (d, J = 18.5 Hz, 1H, CHP), 3.77 (s, 6H, 2xOCH 3 ), 2.45 (s, 6H, 2xSCH 3 )
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 556,0452/556,0435 [M+Na]+.Mass spectrum (ESI, m / z): theoretical / found 556.0452 / 556.0435 [M + Na] + .
P r z y k ł a d 7P r z k ł a d 7
Badanie aktywności antyproliferacyjnej estrów difenylowych kwasów 1-izotiocyjano-metanofosfonowych z wykorzystaniem linii nowotworowych ludzkiego raka płuc A549, gruczołu sutkowego MCF-7, jelita grubego LoVo oraz jelita grubego opornej na doksorubicynę LoVo/DX.Study of the antiproliferative activity of 1-isothiocyanato-methanophosphonic acid diphenyl esters with the use of A549 human lung cancer, MCF-7 mammary gland, LoVo colon and LoVo / DX-resistant colon.
Roztwory wyjściowe testowanych związków przygotowane zostały jako 50 mM roztwory w dimetylosulfotlenku (DMSO). Linie komórkowe hodowane były w warunkach in vitro w odpowiednich dla danej linii medium hodowlanym: A549 - medium OptiMEM + RPMI 1640 + GlutaMAX medium suplementowane 5% surowicy wołowej, MCF-7 - medium Eagle z dodatkiem 2 mM roztworem L-glutaminy, 1,0 mM roztworem pirogronianu sodu, 10% surowicy wołowej i 0,8 mg/L insuliny, LoVo i LoVo/DX Opti-MEM + RPMI 1640 suplementowane 2 mM roztworem L-glutaminy, 1,5 g/L roztworem wodorowęglanu sodu, 4,5 g/L glukozy, 1,0 mM pirogronianu sodu oraz 5% surowicą wołową i 100 μg/L doxorubicyny (tylko w medium dla linii LoVoDX). Ponadto wszystkie media hodowlane zawierały 100 jednostek/ml penicyliny 100 μg/ml streptomycyny. Do odklejenia komórek od płytek hodowlanych używano 0,25% roztworu Trypsyna-EDTA. Następnie policzone komórki posiano na płytki 96-dołkowe w ilości 10 komórek/dołek (100 μL zawiesiny komórkowej 10 komórek/mL na dołek). Po 24 godzinnej inkubacji na płytki nanoszono roztwory testowanych związków przygotowywane poprzez rozcieńczanie wyjściowego roztworu w medium hodowlanym OR. Robocze stężenia wynosiły 100 μM, 50 μM, 25 μΜ, 12,5 μM dając ostatecznie stężenia 50 μM, 25 μM, 12,5 μM, 6,25 μM w dołkach testowych. Każde stężenie naniesiono w trzech powtórzeniach. Płytki były następnie inkubowane przez kolejne 72 godziny w inkubatorze (wilgotność >90%, temperatura 37°C, 5% stężenie CO2). Po tym czasie wykonano test SRB; do każdego z dołków dodano po 50 μL 50% roztworu kwasu trichlorooctowego i płytki inkubowano przez 1 godzinę w temperaturze 4°C. Następnie płytki wypłukano pod bieżącą wodą, osuszono i do każdego z dołków dodano po 50 μL 0,4% roztworu sulforodaminy B w 1% kwasie octowym i inkubowano w ciemności przez 30 minut. Po tym czasie płytki wypłukano w 1% kwasie octowym, osuszono i do każdego z dołków dodano po 150 μL 10 mM roztworu Tris w wodzie dejonizowanej. Po 30 minutowej inkubacji w temperaturze pokojowej odczytano absorbancję przy długości fali 540 nm. Analizę wyników wykonano poprzez porównanie absorbancji dołków traktowanych związkami w odpowiednich stężenia do dołków kontrolnych (nie traktowanych związkami). Następnie określono krzywą zależności procenta zahamowania proliferacji od stężenia i na jego podstawie określono wartość IC50 (stężenie powodujące zahamowanie wzrostu komórek w 50%). Test dla każdego ze związków powtórzony został co najmniej trzykrotnie.Stock solutions of test compounds were prepared as 50 mM solutions in dimethylsulfoxide (DMSO). Cell lines were cultured in vitro in a culture medium appropriate for a given line: A549 - OptiMEM medium + RPMI 1640 + GlutaMAX medium supplemented with 5% bovine serum, MCF-7 - Eagle medium with the addition of 2 mM L-glutamine solution, 1.0 mM sodium pyruvate solution, 10% bovine serum and 0.8 mg / L insulin, LoVo and LoVo / DX Opti-MEM + RPMI 1640 supplemented with 2 mM L-glutamine solution, 1.5 g / L sodium bicarbonate solution, 4.5 g / L glucose, 1.0 mM sodium pyruvate and 5% bovine serum and 100 μg / L doxorubicin (only in the medium for the LoVoDX line). In addition, all culture media contained 100 units / ml penicillin 100 µg / ml streptomycin. A 0.25% Trypsin-EDTA solution was used to detach the cells from the culture plates. The counted cells were then plated at 10 cells / well in 96-well plates (100 µL of 10 cells / mL cell suspension per well). After incubation for 24 hours, solutions of test compounds prepared by diluting the stock solution in OR culture medium were applied to the plates. The working concentrations were 100 µM, 50 µM, 25 µM, 12.5 µM resulting in final concentrations of 50 µM, 25 µM, 12.5 µM, 6.25 µM in the test wells. Each concentration was plotted in triplicate. The plates were then incubated for a further 72 hours in an incubator (> 90% humidity, 37 ° C temperature, 5% CO2 concentration). After this time, the SRB test was performed; 50 µL of 50% trichloroacetic acid solution was added to each well and the plates were incubated for 1 hour at 4 ° C. The plates were then rinsed under running water, dried and 50 µL of 0.4% sulforhodamine B solution in 1% acetic acid was added to each well and incubated in the dark for 30 minutes. After this time, the plates were washed with 1% acetic acid, dried, and 150 µL of a 10 mM solution of Tris in deionized water was added to each well. After incubation for 30 minutes at room temperature, the absorbance was read at 540 nm. Analysis of the results was done by comparing the absorbance of compound-treated wells at the appropriate concentrations to control (untreated) wells. The concentration-inhibition percentage curve was then determined and the IC50 value (the concentration causing 50% inhibition of cell growth) was determined from this. The test for each compound was repeated at least three times.
PL 219 186 B1PL 219 186 B1
P r z y k ł a d 8P r z k ł a d 8
Aktywność inhibitorowa otrzymanych w przykładach 1 - 6 pochodnych wobec ludzkiej elastazy neutrofilowej.Inhibitory activity of the derivatives obtained in Examples 1-6 against human neutrophilic elastase.
Aktywność biologiczną przebadano pod kątem zdolności do hamowania proteolitycznej aktywności ludzkiej elastazy neutrofilowej. Wszystkie pomiary kinetyki enzymatycznej wykonano przy użyciu czytnika mikropłytek. Badania rozpoczęto od wyznaczania Km dla substratu w warunkach prowadzonych testów (temperatura 37°C, długość fali wzbudzenia 400 nm i emisji 505 nm, czas pomiaru 15 minut). Pomiaru dokonano przy różnych stężeniach substratu w zakresie stężeń od 10 pM do 500 pM przy stałym stężeniu enzymu 0,0025 U/ml (~4,5 nM). Wartość Km wynosiła 125 pM w podanych warunkach. Pomiary aktywności inhibitorowej wykonano przy różnych stężeniach inhibitorów w zakresie stężeń od 100 pM do 8,8 pM. W badaniach wykorzystano zsyntetyzowany przez autorów patentu substrat MeO-Suc-Ala-Ala-Pro-Val-AFC. Końcowe stężenie substratu wynosiło 40 pM. Wszystkie pomiary przeprowadzono w buforze o składzie: 0.1 M HEPES, 0.5 M NaCl, 0.03% Triton X-100 (pH 7.5). Do seryjnie rozcieńczonego badanego związku, w ilości 50 pl w każdym dołku, dodano 50 pl substratu i inkubowano tak przygotowaną płytkę w 37°C przez 30 minut. Po inkubacji reakcja została zainicjowana przez dodanie 100 pl enzymu. Płytkę umieszczono w spektrofluorymetrze i przeprowadzono pomiar. Na podstawie uzyskanych danych wyznaczono dla każdego rozcieńczenia badanego związku stałą pseudo pierwszego rzędu kobs.The biological activity was tested for the ability to inhibit the proteolytic activity of human neutrophilic elastase. All enzymatic kinetics measurements were performed using a microplate reader. The research began with determining the Km for the substrate under the test conditions (temperature 37 ° C, excitation wavelength 400 nm and emission 505 nm, measurement time 15 minutes). Measurements were made at various substrate concentrations in the concentration range from 10 pM to 500 pM at a constant enzyme concentration of 0.0025 U / ml (~ 4.5 nM). The Km value was 125 pM under the stated conditions. Measurements of inhibitory activity were performed at different concentrations of inhibitors in the concentration range from 100 pM to 8.8 pM. The research used the MeO-Suc-Ala-Ala-Pro-Val-AFC substrate synthesized by the authors of the patent. Final substrate concentration was 40 pM. All measurements were performed in a buffer with the composition: 0.1 M HEPES, 0.5 M NaCl, 0.03% Triton X-100 (pH 7.5). To the serially diluted test compound, 50 µl in each well, 50 µl of substrate was added and the prepared plate was incubated at 37 ° C for 30 minutes. After incubation, the reaction was initiated by adding 100 µl of enzyme. The plate was placed in a spectrofluorimeter and the measurement was performed. On the basis of the obtained data, the pseudo-first order constant kobs was determined for each dilution of the tested compound.
[P] = vst+ vi - prędkość początkowa vs - prędkość w stanie ustalonym kobs - stała pseudo pierwszego rzędu[P] = v s t + vi - initial speed vs - steady state speed kobs - first order pseudo constant
[P] - stężenie produktów t - czas[P] - concentration of products t - time
Następnie wyznaczono stałą drugiego rzędu kinact/KIThe second order constant kinact / KI was then determined
kinact/KI - stała drugiego rzędukinact / KI - second order constant
[S] - stężenie substratów[S] - concentration of substrates
KM - stała Michaelis-MentenKM - the constant Michaelis-Menten
-1s-1-1s-1
Uzyskane wyniki przedstawiono w poniższej tabeli (wartości k2/Ki [M-1s-1])The obtained results are presented in the table below (k2 / Ki [M -1s-1 ] values)
Zastrzeżenia patentowePatent claims
Claims (3)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL399048A PL219186B1 (en) | 2012-04-30 | 2012-04-30 | Di-(4-methylthio)phenyl esters 1- isothiocyane-methanphosphorous acids, processes for the preparation and use thereof |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL399048A PL219186B1 (en) | 2012-04-30 | 2012-04-30 | Di-(4-methylthio)phenyl esters 1- isothiocyane-methanphosphorous acids, processes for the preparation and use thereof |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL399048A1 PL399048A1 (en) | 2012-10-08 |
| PL219186B1 true PL219186B1 (en) | 2015-03-31 |
Family
ID=47076855
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL399048A PL219186B1 (en) | 2012-04-30 | 2012-04-30 | Di-(4-methylthio)phenyl esters 1- isothiocyane-methanphosphorous acids, processes for the preparation and use thereof |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL219186B1 (en) |
-
2012
- 2012-04-30 PL PL399048A patent/PL219186B1/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL399048A1 (en) | 2012-10-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SU1528321A3 (en) | Method of producing indolysine derivatives or pharmaceutically acceptable salts thereof | |
| Ji et al. | Synthesis and biological evaluation of novel phosphoramidate derivatives of coumarin as chitin synthase inhibitors and antifungal agents | |
| Recher et al. | Design, synthesis and biological evaluation of sulfur-containing 1, 1-bisphosphonic acids as antiparasitic agents | |
| FI108034B (en) | Process for the preparation of therapeutically or prophylactically useful guanidine alkyl-1,1-bisphosphonic acid derivatives | |
| US6982280B1 (en) | Epothilone derivatives, a method for the production thereof, and their use | |
| EP3131910B1 (en) | Use of a 1,3,5-triazin-2-yl phosphoramidate compound in the synthesis of sofosbuvir | |
| CN102617391B (en) | A kind of resveratrol phenylacrylamide derivative, its preparation method and its use | |
| Idowu et al. | Design, synthesis and antitumor properties of glycosylated antitumor ether lipid (GAEL)-chlorambucil-hybrids | |
| CN102180845B (en) | Butenolide structure-containing benzyl amino dithio formiate compounds, and preparation method and application thereof | |
| CN106243183B (en) | Ursolic acid-hydrogen sulfide donor reagent derivatives and its synthetic method | |
| Yamada et al. | Preparation and characterization of novel 4-bromo-3, 4-dimethyl-1-phenyl-2-phospholene 1-oxide and the analogous phosphorus heterocycles or phospha sugars | |
| US20110021624A1 (en) | Alpha-Amino-N-Substituted Amides, Pharmaceutical Composition Containing Them and Uses Thereof | |
| PL215528B1 (en) | Di-(4-methoxy)phenyl esters, derivatives of 1- isothiocyane-methanphosphorous acids, processes for the preparation and use thereof | |
| Zhang et al. | Synthesis and Anti‐proliferative in‐vitro Activity of Two Natural Dihydrostilbenes and their Analogues | |
| KR20160085330A (en) | Method for Producing Benzyl Ester 2-aminonicotinicotinate Derivative | |
| RU2443678C1 (en) | Fluorinated 1,4-naphthoquinone derivatives having cytotoxic effect on human cancer cells in culture | |
| PL216473B1 (en) | Diphenyl esters, derivatives of 1- isothiocyane-methanphosphorous acids, processes for the preparation and use thereof | |
| Yamaoka et al. | Synthesis and evaluation of novel phosphasugar anticancer agents | |
| CN109608492B (en) | A kind of bisphosphonic acid compound for osteoporosis and preparation method thereof | |
| CZ303569B6 (en) | Lipophosphonoxins, their preparation and use | |
| EP3551615B1 (en) | Scalable polypropionate lactone stereotetrads | |
| CN1229372C (en) | New Synthetic Process of Important Intermediate of New Anticancer Drug Gemcitabine | |
| RU2675699C1 (en) | Method for obtaining 5,7-dimethyl-3-hydroxymethyl-1-adamantanol | |
| Dyachenko et al. | New 4, 4-bis (trifluoromethyl)-4H-1, 3, 2-benzodioxaphosphinine 2-oxides (sulfides) | |
| Leisvuori et al. | Chemical and enzymatic stability of amino acid derived phosphoramidates of antiviral nucleoside 5′-monophosphates bearing a biodegradable protecting group |