PL238768B1 - Nowy analog nukleozydo difosforanu, kompozycja farmaceutyczna zawierająca analog nukleozydo difosforanu, jego zastosowanie i sposób syntezy - Google Patents
Nowy analog nukleozydo difosforanu, kompozycja farmaceutyczna zawierająca analog nukleozydo difosforanu, jego zastosowanie i sposób syntezy Download PDFInfo
- Publication number
- PL238768B1 PL238768B1 PL422415A PL42241517A PL238768B1 PL 238768 B1 PL238768 B1 PL 238768B1 PL 422415 A PL422415 A PL 422415A PL 42241517 A PL42241517 A PL 42241517A PL 238768 B1 PL238768 B1 PL 238768B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- nucleoside
- formula
- compound
- diphosphate
- ppm
- Prior art date
Links
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 8
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 title description 3
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 claims abstract description 79
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 57
- -1 nucleoside diphosphate analogues Chemical class 0.000 claims abstract description 36
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims abstract description 35
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 19
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 claims abstract description 19
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 92
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 46
- 239000011669 selenium Substances 0.000 claims description 35
- 239000001177 diphosphate Substances 0.000 claims description 34
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 33
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 claims description 33
- 239000011630 iodine Substances 0.000 claims description 33
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 claims description 28
- IJOOHPMOJXWVHK-UHFFFAOYSA-N chlorotrimethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)Cl IJOOHPMOJXWVHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 14
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 9
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 8
- 125000000845 uracil-1-yl group Chemical group [*]N1C(=O)N([H])C(=O)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 8
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 7
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 7
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 6
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 claims description 5
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 claims description 5
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 claims description 5
- HCJWCUDNVVDOMX-UHFFFAOYSA-N OP(O)(O)=O.[SeH2] Chemical compound OP(O)(O)=O.[SeH2] HCJWCUDNVVDOMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims description 4
- 125000003294 thymin-1-yl group Chemical group [H]N1C(=O)N(*)C([H])=C(C1=O)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims description 3
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 claims description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical class CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-O pyridinium Chemical compound C1=CC=[NH+]C=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims description 2
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 claims description 2
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 abstract description 44
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 abstract description 17
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 abstract description 7
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 abstract description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 3
- 125000003748 selenium group Chemical class *[Se]* 0.000 abstract 1
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 87
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 45
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 34
- 239000000047 product Substances 0.000 description 31
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 28
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethanethiol Chemical compound CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 28
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 23
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 18
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 18
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 17
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 17
- 150000005690 diesters Chemical class 0.000 description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 15
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 14
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 14
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 14
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 14
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 14
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 14
- ZKKKYAXUVWVZSQ-UHFFFAOYSA-N 2-ethylhexyl phosphono hydrogen phosphate Chemical compound CCCCC(CC)COP(O)(=O)OP(O)(O)=O ZKKKYAXUVWVZSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 12
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 12
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 12
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical class [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J diphosphate(4-) Chemical class [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 9
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 9
- 238000001394 phosphorus-31 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 7
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 7
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 7
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 7
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 6
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 6
- 230000000873 masking effect Effects 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 6
- 230000036436 anti-hiv Effects 0.000 description 5
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 5
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 5
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 5
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N triphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 4
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 4
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 4
- VCMJCVGFSROFHV-WZGZYPNHSA-N tenofovir disoproxil fumarate Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O.N1=CN=C2N(C[C@@H](C)OCP(=O)(OCOC(=O)OC(C)C)OCOC(=O)OC(C)C)C=NC2=C1N VCMJCVGFSROFHV-WZGZYPNHSA-N 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- 101710205625 Capsid protein p24 Proteins 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 3
- 101710177166 Phosphoprotein Proteins 0.000 description 3
- 101710149279 Small delta antigen Proteins 0.000 description 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 3
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 3
- 230000007073 chemical hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000004712 monophosphates Chemical class 0.000 description 3
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 3
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 3
- 229960004556 tenofovir Drugs 0.000 description 3
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 3
- MWDNZMWVENFVHT-UHFFFAOYSA-L (2-decoxy-2-oxoethyl)-[2-[2-[(2-decoxy-2-oxoethyl)-dimethylazaniumyl]ethylsulfanyl]ethyl]-dimethylazanium;dichloride Chemical class [Cl-].[Cl-].CCCCCCCCCCOC(=O)C[N+](C)(C)CCSCC[N+](C)(C)CC(=O)OCCCCCCCCCC MWDNZMWVENFVHT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XYFCBTPGUUZFHI-UHFFFAOYSA-N Phosphine Chemical compound P XYFCBTPGUUZFHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical group [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- UCQFCFPECQILOL-UHFFFAOYSA-N diethyl hydrogen phosphate Chemical compound CCOP(O)(=O)OCC UCQFCFPECQILOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- BEMGDKVALHDZKN-UHFFFAOYSA-N hydroxy-di(octan-3-yloxy)-sulfanylidene-lambda5-phosphane Chemical compound CCCCCC(CC)OP(O)(=S)OC(CC)CCCCC BEMGDKVALHDZKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-M phosphonate Chemical compound [O-]P(=O)=O UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 125000004437 phosphorous atom Chemical group 0.000 description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- WTHNBLKUMCPUFE-UHFFFAOYSA-N (4-oxo-1,3,2,4lambda5-dioxathiaphosphetan-4-yl) phosphono hydrogen phosphate Chemical class OP(=O)(O)OP(=O)(O)OP1(=O)OSO1 WTHNBLKUMCPUFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DRVMZMGCPWFDBI-UHFFFAOYSA-L 2,2,2-trifluoroethyl phosphate Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OCC(F)(F)F DRVMZMGCPWFDBI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- VKIGAWAEXPTIOL-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxyhexanenitrile Chemical compound CCCCC(O)C#N VKIGAWAEXPTIOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BJWOKLSWCGAAGW-UHFFFAOYSA-N 3-ethyloctan-3-yl dihydrogen phosphate Chemical compound CCCCCC(CC)(CC)OP(O)(O)=O BJWOKLSWCGAAGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000450599 DNA viruses Species 0.000 description 1
- KKUKTXOBAWVSHC-UHFFFAOYSA-N Dimethylphosphate Chemical compound COP(O)(=O)OC KKUKTXOBAWVSHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WWJJVKAEQGGYHJ-UHFFFAOYSA-M Dimethylthiophosphate Chemical compound COP([O-])(=S)OC WWJJVKAEQGGYHJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940126656 GS-4224 Drugs 0.000 description 1
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 1
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 1
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 108050008598 Phosphoesterases Proteins 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 229920000388 Polyphosphate Polymers 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical group OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- YTFJQDNGSQJFNA-UHFFFAOYSA-L benzyl phosphate Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OCC1=CC=CC=C1 YTFJQDNGSQJFNA-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N butan-1-amine Chemical class CCCCN HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001733 carboxylic acid esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000006652 catabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000005549 deoxyribonucleoside Substances 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- BLTQUMGSCQHJAM-UHFFFAOYSA-N dioctan-3-yl hydrogen phosphate Chemical compound CCCCCC(CC)OP(O)(=O)OC(CC)CCCCC BLTQUMGSCQHJAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 1
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 125000001181 organosilyl group Chemical group [SiH3]* 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 150000008300 phosphoramidites Chemical class 0.000 description 1
- 229910000073 phosphorus hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 239000001205 polyphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011176 polyphosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000012048 reactive intermediate Substances 0.000 description 1
- 239000013643 reference control Substances 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000002342 ribonucleoside Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 229960001355 tenofovir disoproxil Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 125000002264 triphosphate group Chemical class [H]OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])O* 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
Przedmiotem zgłoszenia są nowe analogi nukleozydo difosforanów, ich zastosowanie jako środków przeciwwirusowych, oraz sposób otrzymywania tych związków. W szczególności zgłoszenie dotyczy siarkowych lub selenowych analogów nukleozydo 5'-difosfranów stanowiących nową grupę pochodnych nukleotydowych, oraz ich zastosowania jako leków antywirusowych, zwłaszcza hamujących namnażanie ludzkiego wirusa niedoboru odporności (HIV).
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku są nowe analogi nukleozydo difosforanów, ich zastosowanie jako środków przeciwwirusowych, oraz sposób otrzymywania tych związków. W szczególności wynalazek dotyczy siarkowych lub selenowych analogów nukleozydo 5’-difosforanów stanowiących nową grupę pochodnych nukleotydowych, oraz ich zastosowania jako leków antywirusowych, zwłaszcza hamujących namnażanie ludzkiego wirusa niedoboru odporności (HIV).
Z literatury znanych jest kilka pochodnych odpowiednio maskowanych nukleozydo 5’-difosfo-ranów, które w organizmie ulegają przekształceniu w aktywne biologicznie nukleotydy. Pośród pronukleotydów ukierunkowanych na zwalczanie wirusów, w tym HIV, najlepsze i najbliższe zastosowaniom terapeutycznym wyniki uzyskano w przypadku przedstawionych poniżej typów nukleotydów.
Diglicerydowe nukleozydo difosforany (Hostetler K. Y. et al., J. Biol. Chem., 1990, 265, 61126117) opisane wzorem (I),
otrzymane zostały w celu ułatwienia przenikania związku jako potencjalnego leku przez błonę komórkową. Synteza tych pochodnych zakładała utworzenie nukleozydo monofosforanu aktywowanego morfoliną, który następnie sprzęgano z monofosforanem zawierającym resztę glicerydową, jako potencjalną grupę maskującą. Badania trwałości proponowanych proleków wykazywały hydrolizę wiązania pirofosforanowego i uwolnienie monofosforanów nukleozydów antywirusowych, zamiast zakładanego odblokowanego nukleozydo 5’-difosforanu (II).
W literaturze znaleźć można również doniesienia o podobnych diglicerydowych pochodnych (III), różniących się występowaniem heteroatomu (siarki) w grupie blokującej resztę fosforanową. Metoda syntezy tych pochodnych jest analogiczna do tej opisanej dla związków (II). Wzór ogólny przykładowego analogu (III), który przedstawiono poniżej, ujawnia Hong C. I. et al., J. Med. Chem., 1996, 39, 17711777:
Bonnaffe D. et ah, Tetrahedron Letters, 1995, 36, 4, 531-534 ujawnia acylowe nukleozydo difosforany opisane wzorem (IV).
PL 238 768 Β1
Rj = R2: C=C (d4T) (IV)
W tego rodzaju pochodnych nukleotydów, grupy maskujące atom Pp, zbudowane są z długich łańcuchów kwasów tłuszczowych, które podobnie jak w przypadku struktur (I), miały zwiększać lipofilowość związku. Synteza tych analogów zakładała otrzymywanie soli amonowych acylowych pochodnych difosforanów, a następnie ich kondensację (wobec DCC) z nukleozydem o potwierdzonej aktywności antywirusowej. Podczas badań hydrolizy chemicznej oraz enzymatycznej związków typu (IV) stwierdzono szybki rozpad wiązania C-O-P, co w konsekwencji uniemożliwiało wydajny transport potencjalnych proleków przez błony komórkowe (Bonnaffe D. et al., ,J. Org. Chem., 1996, 61, 895-902).
Stosując podobną metodę syntezy do tej wspomnianej powyżej, otrzymano również pochodne alkiloalkoksy nukleozydo difosforanów, o wysokiej aktywności antywirusowej, (Ruiz J. C. et al., Antivirai Res., 2007, 75, 87-90) opisane wzorem (Va, Vb),
(Vb)
Bis-acyloksybenzylo nukleozydo difosforany opisane wzorem (VI),
określane są pronukleotydami DiPPro (Schulz T. et al., ChemMedChem, 2014, 9, 762-15 775), gdzie grupę R stanowi alkil lub alkenyl. Synteza tego typu pochodnych nukleotydów zakłada sprzęganie monofosforanu nukleozydu z amidofosforynem zawierającym lipofilową bis(acyloksybenzylową) grupę maskującą. Tak otrzymany produkt pośredni jest utleniany i utworzone zostają bis-acyloksybenzylo oraz bis-alkanoiloksybenzylowe analogi nukleozydo difosforanów opisane wzorem (V). Pronukleotydy te przekształcane są w 5’-difosforany nukleozydów na drodze hydrolizy chemicznej i/lub enzymatycznej estru karboksylowego w łańcuchu bocznym grupy maskującej //-resztę fosforanową pronukleotydu. W wyniku enzymatycznego rozpadu wiązania acyloestrowego oraz następującej po nim reakcji 1,6-eliminacji, uwolniony zostaje mono-maskowany nukleozydo 5’-difosforan. Powtórzenie tego procesu powoduje utworzenie się docelowego nukleotydu przedstawionego wzorem (VII).
PL 238 768 Β1
Wykorzystując podobne podejście syntetyczne, otrzymano pochodne analogiczne do typu (V), zawierające w swojej strukturze nieidentyczne reszty R w grupach maskujących atom P/?(Weinschenk L. et al., J. Med. Chem. 2015, 58, 6114-6130). Analogi te opisane wzorem ogólnym (VIII),
zawierają resztę R1, której zadaniem jest destabilizacja grupy blokującej oraz resztę R2 zwiększającą lipofilowość pronukleotydu. W otrzymanych nukleozydo 5’-difosforanach, rolę nukleozydu antywirusowego spełniają AZT (3’-azydo-3’deoksytymidyna) lub d4T (2’,3’-dideoksy-2’3’-didehydrotymidyna). Podobnie jak w przypadku pochodnych (VI), wykazano, po hydrolizie enzymatycznej lub/i chemicznej, uwolnienie docelowego nukleotydu (II) lub (VII).
Bis-benzyloksybenzylowe nukleozydo 5’-difosforany (Weinschenk L. et al., J. Med. Chem. 2015, 58, 6114-6130) opisane wzorem (IX), zostały zsyntezowane w podobny sposób jak pochodne (V) i (VII). W swojej strukturze zawierają, zamiast acylowej grupy alifatycznej, acylową grupę aromatyczną z podstawnikami wyciągającymi lub 5 donującymi elektrony (X = -Cl, -Me, -OMe, -CF3, -CN, -NO2). Poprzez wybór odpowiedniego podstawnika w pierścieniu aromatycznym, można znacząco wpływać na stabilność grup maskujących, a przez to, na tworzenie odblokowanego nukleozydo 5’-difosforanu typu (II) lub (VIII).
Nuci = AZT, d4T (ix)
PL 238 768 Β1
Warto również wspomnieć o pronukleotydach zawierających w swojej strukturze dwa nukleozydy o potwierdzonym działaniu antywirusowym (AZT, d4T) - dinukleozydo difosforanach (Qi S. et ah, Chin. Chem. Lett., 2014, 25, 427-430) opisanych wzorem (X),
Nukleozydy nie stanowią jednak dobrych grup odchodzących, stąd w wyniku hydrolizy wiązania pirofosforanowego, uwolnione zostają nukleozydo 5’-monofosforany.
W literaturze nie występują pronukleotydy zawierające w swojej strukturze heteroatomy, jako czynniki zwiększające lipofilowość zakładanych związków. Istnieje jednak wiele doniesień literaturowych (Misiura K. et ah, Org. Lett., 2005, 7 (11), 2217-2220; Burgess K. et al., J. Am. Chem. Soc., 2000, 2047-2059; Eckstein R, Ann. Rev. Biochem., 1985, 54, 367-402) opisujących różne podejścia syntetyczne w celu otrzymania nukleozydo α-tio difosforanów oraz α-tio trifosforanów typu (XI):
B = Ade, Cyt, Gua, Thy R = H, OH n=l or2 (XI)
Wykorzystując aktywację fosforanu nukleozydu imidazolem, przeprowadzono kondensację tak przygotowanego substratu z solą n-butyloamonową kwasu siarkowego i otrzymano nukleozydo fosforosulfonian (Kowalska J. et al., Bioorg. & Med. Chem. Lett., 2012, 22, 3661-3664) opisany wzorem (XII):
= Ade, Cyt, Gua, Ura (XII).
WO1989011486 opisuje sposób otrzymywania pochodnych nukleotydów, posiadających przy atomie fosforu dwa atomy siarki lub atom siarki i atom azotu - odpowiednio ditiofosforanów i tiofosforoamidów. Metoda opiera się o chemię fosfin i pozwala na uzyskanie powyższych pochodnych zarówno dla serii rybo-jak i deoksyrybonukleozydów. Uzyskane substancje mogą być potencjalnie wykorzystane
PL 238 768 Β1 w leczeniu zakażeń bakteryjnych, wirusowych, chorób nowotworowych. Jeśli przyłączone zostaną substancje o właściwościach fluorescencyjnych czy przeciwciała lub antygeny, mogą posłużyć jako znaczniki w biochemii i diagnostyce medycznej.
WO1991007092 ujawnia polifosforany i ich tioanalogi posiadające w swojej strukturze łańcuchy alkilowe lub alkenylowe, działające przeciwko wirusowi HIV. Zasada działania oparta jest na terapii antysensowej. Powtarzającym się merem jest fragment fosforanowy lub tiofosforanowy z dołączonym nukleozydem, który sam nie wykazuje efektu terapeutycznego (niemodyfikowane nukleozydy). Wśród otrzymanych substancji znalazły się również analogi ditiofosforanowe. Efekt terapeutyczny został potwierdzony badaniami in vitro.
W zgłoszeniu patentowym US20030099981 ujawniono protokół syntetyczny opisujący otrzymywanie triestrówtiofosforanowych, bazujący na chemii /-/-fosfonianów, a mianowicie na reakcjach sprzęgania monoestrów /-/-fosfonianowych do diestrów i następnie ich reakcji z substancjami transferującymi siarkę. Proces jest uniwersalny zarówno dla nukleozydówjak i oligonukleotydów posiadających funkcję /-/-fosfonianową. Może być prowadzony w jednoczesnej obecności w roztworze substancji sprzęgających oraz transferujących atom siarki. Nie otrzymywano jednak tą metodą tiodifosforanów nukleozydów.
PL217694 dostarcza nowe analogi nukleotydu w postaci amido-mononofosforanów. Jest to jednak starsza generacja proleków ponieważ uzyskanie aktywnego trifosforanu wymaga dwóch etapów fosforylacji, do difosforanu a następnie do trifosforanu.
WO2016026493 zapewnia di- i trifosforany nukleozydów wykazujące mechanizm działania jako proleki oraz metodę ich syntezy. Związki te charakteryzują się obecnością grup maskujących na resztach fosforanowych, które po wejściu do komórki uwalniają odpowiednio di- lub trifosforan nukleozydu. Zadaniem grup maskujących jest umożliwienie cząsteczce di- lub trifosforanu nukleozydu przeniknięcie przez barierę biologiczną, jaką stanowi błona komórkowa. Innowacją tego pomysłu jest maskowanie tylko reszty fosforanowej β w przypadku difosforanów nukleozydów lub tylko reszty fosforanowej γ dla trifosforanów nukleozydów. Otrzymane substancje są potencjalnymi prolekami anty-HIV.
WO2016145142 zapewnia nowe kompozycje terapeutyczne zawierające nukleotydy i nukleozydy z siarką w cząsteczce zasady, do leczenia chorób wywołanych zakażeniem wirusowym, zwłaszcza wirusami RNA i DNA. Zgłoszenie zapewnia pochodne tritiofosforanów, gdzie A jest siarką, Xjest tlenem i co najmniej jeden Xjest siarką, R4 jest wodorem.
II II ,Λν
ΗΟ-Ρ“0-Ρ“Ο-Ρ-Ο-η Μ 'X
OH ÓH A'R10-< S— R 3-)--f-R6 r4r7 (XIII)
Pomimo wielu istniejących już rozwiązań wykorzystujących pochodne nukleotydowe jako związki do leczenia chorób wirusowych istnieje ciągła potrzeba uzyskania skutecznego rozwiązania umożliwiającego stworzenie kompozycji farmaceutycznych zawierających związki, które wykazywałyby udoskonalone parametry farmakokinetyczne i fizykochemiczne.
Celem wynalazku jest zapewnienie analogów nukleozydów efektywnie hamujących replikację wirusów, zwłaszcza HIV, w szczególności wykazujących wysoką aktywność przeciwwirusową i trwałość oraz posiadających wysoki stopień selektywności. Celem wynalazku jest dostarczenie pronukleotydów, które ulegają przekształceniu w komórce w aktywne biologicznie nukleotydy.
Przedmiotem wynalazku jest związek o wzorze
lub jego sól, gdzie Z stanowi N3 a B stanowi tymidyny-1-yl, albo Z stanowi H a B stanowi uracyl-1-y 1,
PL 238 768 Β1
Ri i R2 stanowi alkil, aryl lub H,
X i Y stanowi O albo S, Se, przy czym gdy X stanowi O wówczas Y stanowi S lub Se, gdy X stanowi S, Se wówczas Y stanowi O.
Przedmiotem wynalazku jest również związek o wzorze
lub jego sól, gdzie Z stanowi N3 a B stanowi tymin-1-yl, albo Z stanowi H a B stanowi uracyl-1-yl, Xjest S lub Se, R1 jest alkilem lub arylem, a R2jest alkilem lub H.
Przedmiotem wynalazku jest związek o wzorze
lub jego sól, gdzie Z stanowi N3 a B stanowi tymin-1 -yl, albo Z stanowi H a B stanowi uracyl-1-yl, X jest S lub Se, R1 i R2 stanowi alkil.
Korzystnie, powyższy związek o wzorze XIV, XIVa albo XIVb występuje w postaci soli trietyloamoniowej.
Następnym przedmiotem wynalazku jest związek o wzorze XIV, XIVa albo XIVb do zastosowania jako lek.
Innym przedmiotem wynalazku jest kompozycja farmaceutyczna zawierająca powyższy związek o wzorze XIV, XIVa albo XIVb, i dopuszczalny farmaceutycznie nośnik.
Innym przedmiotem wynalazku jest kompozycja farmaceutyczna zawierająca związek o wzorze XIV, XIVa albo XIVb do zastosowania w leczeniu zakażeń wirusowych.
Korzystnie, zakażenie wywołane jest retrowirusem.
Korzystnie, zakażeniem wirusowym jest zakażenie wirusem HIV.
Przedmiotem wynalazku jest ponadto sposób otrzymywania powyższego związku opisany schematem:
[X(Va)
PL 238 768 Β1 przy czym
X stanowi O, S, Se
TMS-CI stanowi chlorek trimetylosililu
Ri, R2 stanowi alkil, aryl, H
Z stanowi N3 a B stanowi tymidyny-1-yl, albo Z stanowi H a B jest uracyl-1-ylem.
Dokładniej, przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania związku jak określono powyżej, w którym to sposobie związek o wzorze XV:
poddaje się kondensacji z chlorkiem trimetylosililu (TMS-CI) w obecności pirydyny, a następnie tak otrzymany reaktywny /-/-fosfoniano diester o wzorze XVI:
poddaje się utlenianiu w obecności elementarnego jodu z otrzymaniem związku pośredniego - adduktu pirydyniowego o wzorze XVII:
który następnie poddaje się reakcji kondensacji z obecnym w medium reakcyjnym nukleofilem a następnie hydrolizie, i gdzie nukleofil jest wybrany spośród:
a) fosforano mono- lub diestru o wzorze XVIII:
o
II
Ό---P---ORd
I or2 (XV9H) z wytworzeniem ct-S (lub Se)-nukleozydo 5’-difosforanu o wzorze XIVa:
(Xiva)
PL 238 768 Β1 albo
b) fosforanu siakowego lub selenowego o wzorze XIX:
S(Se) o—p—OR,
OR, (XIX) z wytworzeniem β-S (lub Se)-nuklezydo 5’-difosoranu o wzorze XIVb:
X stanowi O, S lub Se,
Ri, R2 stanowi alkil, aryl, H
Z stanowi N3 a B stanowi tymidyn-1-yl, albo Z stanowi H a B stanowi uracyl-1-yl.
W syntezie siarkowych i selenowych nukleozydo 5’-difosforanów wykorzystano metodę, w której nukleozydo 5'-/-/-fosfoniany (lub ich tio- albo seleno- analogi) kondensują z monoestrem lub diestrem alkilo i/lub arylo fosforanu (lub odpowiednio tio- lub seleno fosforanu) w obecności jodu, tworząc odpowiednie difosforany. Powyższy sposób syntezy cechuje się wysoką wydajnością.
Syntezę siarkowych i selenowych analogów nukleozydo difosforanów opisanych wzorem XIV prowadzi się w sposób uwzględniający potrzebę uzyskania produktu posiadającego heteroatom (siarkę lub selen) przy atomie fosforu w pozycji a- (XIVa), bądź w pozycji β- (XIVb) nukleozydo difosforanu.
Synteza a- modyfikowanych heteroatomem (siarka lub selenem) nukleozydo 5’-difosforanówtypu XIVa,
Pierwszym etapem reakcji prowadzonej w pirydynie jest kondensacja /-/-tio (lub seleno) fosfonianu nukleozydu typu XV (gdzie X stanowi S lub Se) z chlorkiem trimetylosililu. Celem aktywacji jest przekształcenie /-/-fosfonianu monoestru w bardziej reaktywny i podatny na reakcję utleniania Hfosfoniano diester typu XVI. Tak powstały diester jest następnie utleniany w obecności elementarnego jodu. Wynikiem tego etapu jest powstanie wysoce reaktywnego związku pośredniego - adduktu pirydyniowego XVII, który ulega szybko reakcji z obecnym w medium reakcyjnym nukleofilem (fosforano mono- lub diestrem XVIII) z wytworzeniem α-S-nukleozydo 5’-difosforanu typu XIVa.
Synteza β- modyfikowanych heteroatomem (siarka lub selenem) nukleozydo 5’-difosforanów typu XIVb.
Schemat syntezy //-P pochodnych, różni się od powyżej opisanej procedury tym, że w pierwszym etapie używanym substratem jest tlenowy /-/-fosfonian nukleozydu typu XV (gdzie X stanowi O), który kondensowano z chlorkiem trimetylosililu w pirydynie generując /-/-fosfoniano diester typu XVI. W kolejnym etapie powstały diester poddawano reakcji oksydatywnej kondensacji wobec jodu z odpowiednim siarkowym lub selenowym fosforanem typu XIX do produktu- β-S (lub Se)-nukleozydo 5’-difosforanu typu XIVb.
Zarówno a-, jak i //-analogi tio- lub seleno difosforanów były izolowane przez chromatografię kolumnową z fazy chlorek metylenu : metanol (v:v) (80:20).
Otrzymane związki stanowią nową grupę pochodnych nukleotydowych, których indeks selektywności jest istotnie wyższy niż nukleozydów, z których się wywodzą oraz innych znanych pochodnych nukleotydowych. Również cytotoksyczność otrzymanych analogów nukleozydo difosforanów, a także ich aktywność anty-HIV jest istotnie wyższa w odniesieniu do nukleozydo difosforanów opisanych w literaturze. Otrzymane związki są nietoksyczne. Związki typu XIVb wykazują aktywność pronukleotydów, tzn. wnikają do komórek jako pochodne nukleotydów, co dowiodły analizy HPLC i wyniki aktywności antywirusowej pochodnych ddU. Związki typu XIVa charakteryzują się wysoką trwałością
PL 238 768 Β1 (>48 h) w medium hodowlanym komórek (RPMI) oraz w medium hodowlanym komórek wzbogaconym enzymami (RPMI/FBS), przy jednocześnie wysokiej aktywności anty-HIV.
Otrzymane związki są stabilne podczas przechowywania. Związki te są trwałe w buforach 1 o pH 1, a więc w roztworach o kwasowości podobnej do tej w żołądku, co czyni je dobrymi kandydatami do doustnego podawania jako leki.
Przykład 1
Synteza 3’-azydo-3’-deoksytymidyn-5’-ylo a-tio-p-benzylo-difosforanu (XX)
W celu usunięcia śladów wody, z rozpuszczonego w pirydynie nukleozyd-5’-ylo /-/-tiofosfonianu (1 ekwiwalent molowy) odparowano rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna). Do pozostałości rozpuszczonej w pirydynie dodano chlorek trimetylosililu (2 ekwiwalenty molowe). Po 10 minutach reakcja tworzenia nukleozydo /-/-tiofosfoniano diestru typu XVI była zakończona, co stwierdzono przy pomocy analizy widma 31P NMR obserwując zanik sygnału substratu (typu XV) (-54,8 ppm) i pojawienie się dwóch sygnałów (dwa diastereoizomery) w regionie -58,5 ppm pochodzących od siliło /-/-tiofofonianu AZT (typu XVI). Do mieszaniny reakcyjnej dodano roztwór jodu (1,5 ekwiwalentu molowego) w pirydynie (1 mmol/ml) i dodano fosforan benzylu (3 ekwiwalenty molowe). Po pięciu minutach dodano wodę (10 ekwiwalentów molowych). Nadmiar jodu rozłożono etanotiolem (do odbarwienia roztworu). Po odparowaniu rozpuszczalników pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna), oleistą pozostałość rozpuszczoną w chlorku metylenu naniesiono na kolumnę wypełnioną żelem krzemionkowym SI 60 w chlorku metylenu stosując gradient wody (0-20%). Frakcje zawierające czysty produkt XX połączono i odparowano, a pozostałość poddano liofilizacji z zamrożonej mieszaniny metanolu i benzenu. Otrzymano produkt w postaci suchego białego proszku. Uzyskano wydajność 52% otrzymanej pochodnej AZT opisanej wzorem XX.
Wydajność 52%. HRMS [M-Et3NH+]- m/z 532.0000 obliczona dla [C17H20N5O9P2S-] 532,04624 31P NMR {1H} (CH3CN, 121.4 Hz): δ (ppm) 46.06 (m), -13.46 (m).
31P NMR (CH3CN, 121,4 Hz) : δ (ppm) 46.02 (m), -13.48 (m)
Przykład 2
Synteza 3’-azydo-3’-deoksytymidyn-5’-ylo a-tio-p-dietylo-difosforanu (XXI)
W celu usunięcia śladów wody, z rozpuszczonego w pirydynie nukleozyd-5’-ylo /-/-tiofosfonianu (1 ekwiwalent molowy) odparowano rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna). Do pozostałości rozpuszczonej w pirydynie dodano chlorek trimetylosililu (2 ekwiwalenty molowe). Po 10 minutach reakcja tworzenia nukleozydo /-/-tiofosfoniano diestru typu XVI
PL 238 768 Β1 była zakończona, co stwierdzono przy pomocy analizy widma 31P NMR obserwując zanik sygnału substratu (typu XV) (-54,8 ppm) i pojawienie się dwóch sygnałów (dwa diastereoizomery) w regionie -58,5 ppm pochodzących od sililo-/-/-tiofosfonianu AZT (typu XVI). Do mieszaniny reakcyjnej dodano roztwór jodu (1,5 ekwiwalentu molowego) w pirydynie (1 mmol/ml) i dodano fosforan dietylu (3 ekwiwalenty molowe). Po pięciu minutach dodano wodę (10 ekwiwalentów molowych). Nadmiar jodu rozłożono etanotiolem (do odbarwienia roztworu). Po odparowaniu rozpuszczalników pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna), oleistą pozostałość rozpuszczoną w chlorku metylenu naniesiono na kolumnę wypełnioną żelem krzemionkowym SI 60 w chlorku metylenu stosując gradient wody (020%). Frakcje zawierające czysty produkt XXI połączono i odparowano, a pozostałość poddano liofilizacji z zamrożonej mieszaniny metanolu i benzenu. Otrzymano produkt w postaci suchego białego proszku. Uzyskano wydajność 82% otrzymanej pochodnej AZT opisanej wzorem XXI.
Wydajność 82%. HRMS [M-Et3NH+]- m/z 498,0672 obliczona dla [C14H22N5O9P2S-] 498,06189 31P NMR {1H} (CH3CN, 121.4 Hz): δ (ppm) 46.59 (m), -13.05 (m).
31P NMR (CH3CN, 121,4 Hz) : δ (ppm) 46.52 (m), -13.07 (m).
P rzykład 3
Synteza 3’-azydo-3’-deoksytymidyn-5’-ylo a-seleno-p-dietylodifosforanu (XXII)
W celu usunięcia śladów wody, z rozpuszczonego w pirydynie nukleozyd-5’-ylo /-/-selenofosfonianu (1 ekwiwalent molowy) odparowano rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna). Do pozostałości rozpuszczonej w pirydynie dodano chlorek trimetylosililu (2 ekwiwalenty molowe). Po 10 minutach reakcja tworzenia nukleozydo /-/-seleno fosfoniano diestru typu XVI była zakończona, co stwierdzono przy pomocy analizy widma 31P NMR obserwując zanik sygnału substratu (typu XV) (-48,5 ppm) i pojawienie się dwóch sygnałów (dwa diastereoizomery) w regionie -57,7 ppm pochodzących odsililo-/-/-selcnofosfonianu AZT (typu XVI). Do mieszaniny reakcyjnej dodano roztwór jodu (1,5 ekwiwalentu molowego) w pirydynie (1 mmol/ml) i dodano fosforan dietylu (3 ekwiwalenty molowe). Po pięciu minutach dodano wodę (10 ekwiwalentów molowych). Nadmiar jodu rozłożono etanotiolem (do odbarwienia roztworu). Po odparowaniu rozpuszczalników pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna), oleistą pozostałość rozpuszczoną w chlorku metylenu naniesiono na kolumnę wypełnioną żelem krzemionkowym SI 60 w chlorku metylenu stosując gradient wody (0-20%). Frakcje zawierające czysty produkt XXII połączono i odparowano, a pozostałość poddano liofilizacji z zamrożonej mieszaniny metanolu i benzenu. Otrzymano produkt w postaci suchego białego proszku. Uzyskano wydajność 45% otrzymanej pochodnej AZT opisanej wzorem XXII.
Wydajność 45%. HRMS [M-Et3NH+]- m/z 546,0098 obliczona dla [Ci4N22N5O9P2Se-] 546,00635 31P NMR{1H} (CH3CN, 121.4 Hz) : δ (ppm) 35.07, 34.94 (dd, JP,P = 11.18, 10.83 Hz).
31P NMR (CH3CN, 121,4 Hz) : δ (ppm) 35.79 (m), -13.69 (m).
Przykład 4
Synteza 3’-azydo-3’-deoksytymidyn-5’-ylo a-tio-p-bis(2-etyloheksylo)-difosforanu (XXIII)
PL 238 768 Β1
W celu usunięcia śladów wody, z rozpuszczonego w pirydynie nukleozyd-5’-ylo /-/-tiofosfonianu (1 ekwiwalent molowy) odparowano rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna). Do pozostałości rozpuszczonej w pirydynie dodano chlorek trimetylosililu (2 ekwiwalenty molowe). Po 10 minutach reakcja tworzenia nukleozydo /-/-tiofosfoniano diestru typu XVI była zakończona, co stwierdzono przy pomocy analizy widma 31P NMR obserwując zanik sygnału substratu (typu XV) (-54,8 ppm) i pojawienie się dwóch sygnałów (dwa diastereoizomery) w regionie -58,5 ppm pochodzących od siliło 1 i 1 silo-/-/-tiofosfonianu u AZT (typu XVI). Do mieszaniny reakcyjnej dodano roztwór jodu (1,5 ekwiwalentu molowego) w pirydynie (1 mmol/ml) i dodano fosforan bis-etyloheksylu (3 ekwiwalenty molowe). Po pięciu minutach dodano wodę (10 ekwiwalentów molowych). Nadmiar jodu rozłożono etanotiolem (do odbarwienia roztworu). Po odparowaniu rozpuszczalników pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna), oleistą pozostałość rozpuszczoną w chlorku metylenu naniesiono na kolumnę wypełnioną żelem krzemionkowym SI 60 w chlorku metylenu stosując gradient wody (0-20%). Frakcje zawierające czysty produkt XXIII połączono i odparowano, a pozostałość poddano liofdizacji z zamrożonej mieszaniny metanolu i benzenu. Otrzymano produkt w postaci suchego białego proszku. Uzyskano wydajność 67% otrzymanej pochodnej AZT opisanej wzorem XXIII.
Wydajność 67%. HRMS [M-Et3NH+]- m/z 666,2520 obliczona dla [C26H46N5O9P2S-] 666,24970 31P NMR {Ή} (CH3CN, 121.4 Hz): δ (ppm) 46.19 (m), -12.81 (m).
31P NMR (CH3CN, 121,4 Hz): 8 (ppm) 46.17 (m), -12.77 (m).
Przykład 5
Synteza 3’-azydo-3’-deoksytymidyn-5’-ylo a-seleno-p-bis(2-etyloheksylo)-difosforanu (XXIV)
W celu usunięcia śladów wody, z rozpuszczonego w pirydynie nukleozyd-5’-ylo /-/-selenofosfonianu (1 ekwiwalent molowy) odparowano rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna). Do pozostałości rozpuszczonej w pirydynie dodano chlorek trimetylosililu (2 ekwiwalenty molowe). Po 10 minutach reakcja tworzenia nukleozydo /-/-seleno fosfoniano diestru typu XVI była zakończona, co stwierdzono przy pomocy analizy widma 31P NMR obserwując zanik sygnału substratu (typu XV) (-48,5 ppm) i pojawienie się dwóch sygnałów (dwa diastereoizomery) w regionie -57,5 ppm pochodzących odsililo-/-/-selenofosfonianu AZT (typu XVI). Do mieszaniny reakcyjnej dodano roztwór jodu (1,5 ekwiwalentu molowego) w pirydynie (1 mmol/ml) i dodano fosforan bisetyloheksylu (3 ekwiwalenty molowe). Po pięciu minutach dodano wodę (10 ekwiwalentów molowych). Nadmiar jodu rozłożono etanotiolem (do odbarwienia roztworu). Po odparowaniu rozpuszczalników pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna), oleistą pozostałość rozpuszczoną w chlorku metylenu naniesiono na kolumnę wypełnioną żelem krzemionkowym SI 60 w chlorku metylenu stosując gradient wody (0-20%). Frakcje zawierające czysty produkt XXIV połączono i odparowano, a pozostałość poddano liofilizacji z zamrożonej mieszaniny metanolu i benzenu. Otrzymano produkt w postaci suchego białego proszku. Uzyskano wydajność 34% otrzymanej pochodnej AZT opisanej wzorem XXIV.
Wydajność 34%. HRMS [M-Et3NH+]- m/z 714,1985 obliczona dla [C26H46N5O9OP2Se-] 714,19415 31P NMR {Ή} (CH3CN, 121.4 Hz): δ (ppm) 37.92 (m), -13.34 (m).
31P NMR (CH3CN, 121,4 Hz): δ (ppm) 37.90 (m), -13.50 (m).
PL 238 768 Β1
Przykład 6
Synteza 3’-azydo-3’-deoksytymidyn-5’-ylo-tio-p-(2-chloropirydyn-3-ylo)-difosforanu (XXV)
W celu usunięcia śladów wody, z rozpuszczonego w pirydynie nukleozyd-5’-ylo H- tiofosfonianu (1 ekwiwalent molowy) odparowano rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna). Do pozostałości rozpuszczonej w pirydynie dodano chlorek trimetylosililu (2 ekwiwalenty molowe). Po 10 minutach reakcja tworzenia nukleozydo N-tiofosfoniano diestru typu XVI była zakończona, co stwierdzono przy pomocy analizy widma 31P NMR obserwując zanik sygnału substratu (typu XV) (-54,8 ppm) i pojawienie się dwóch sygnałów (dwa diastereoizomery) w regionie -58,5 ppm pochodzących od sililo-77-tiofosfonianu AZT (typu XVI). Do mieszaniny reakcyjnej dodano roztwór jodu (1,5 ekwiwalentu molowego) w pirydynie (1 mmol/ml) i dodano fosforan 2-chloro pirydyn-3-ylu (3 ekwiwalenty molowe). Po pięciu minutach dodano wodę (10 ekwiwalentów molowych). Nadmiar jodu rozłożono etanotiolem (do odbarwienia roztworu). Po odparowaniu rozpuszczalników pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna), oleistą pozostałość rozpuszczoną w chlorku metylenu naniesiono na kolumnę wypełnioną żelem krzemionkowym SI 60 w chlorku metylenu stosując gradient wody (0-20%). Frakcje zawierające czysty produkt XXV połączono i odparowano, a pozostałość poddano liofilizacji z zamrożonej mieszaniny metanolu i benzenu. Otrzymano produkt w postaci suchego białego proszku. Uzyskano wydajność 47% otrzymanej pochodnej AZT opisanej wzorem XXV.
Wydajność 47%. HRMS [M-Et3NH+]- m/z 552,9889 obliczona dla [C15H16CIN6O9P2S-] 552,98687 31P NMR {1H} (CH3CN, 121.4 Hz) : δ (ppm) 44.95 (m), -18.93 (m).
31P NMR (CH3CN, 121,4 Hz): δ (ppm) 45.03 (m), -18.95 (m).
P rzykład 7
Synteza 3’-azydo-3’-deoksytymidyn-5’-ylo a-tio-p-(2,2,2-trifluoroetylo)-difosforanu (XXVI)
W celu usunięcia śladów wody, z rozpuszczonego w pirydynie nukleozyd-5’-ylo /-/-tiofosfonianu (1 ekwiwalent molowy) odparowano rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna). Do pozostałości rozpuszczonej w pirydynie dodano chlorek trimetylosililu (2 ekwiwalenty molowe). Po 10 minutach reakcja tworzenia nukleozydo H-tiofosfoniano diestru typu XVI była zakończona, co stwierdzono przy pomocy analizy widma 31P NMR obserwując zanik sygnału substratu (typu XV) (-54,8 ppm) i pojawienie się dwóch sygnałów (dwa diastereoizomery) w regionie -58,5 ppm pochodzących od siliło /-/-tiofosfonianu AZT (typu XVI). Do mieszaniny reakcyjnej dodano roztwór jodu (1,5 ekwiwalentu molowego) w pirydynie (1 mmol/ml) i dodanofosforan 2,2,2-trifluoro etylu (3 ekwiwalenty molowe). Po pięciu minutach dodano wodę (10 ekwiwalentów molowych). Nadmiar jodu rozłożono etanotiolem (do odbarwienia roztworu). Po odparowaniu rozpuszczalników pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna), oleistą pozostałość rozpuszczoną w chlorku metylenu naniesiono na kolumnę wypełnioną żelem krzemionkowym SI 60 w chlorku metylenu stosując gradient wody (0-20%). Frakcje zawierające czysty produkt XXVI połączono i odparowano, a pozostałość poddano liofilizacji z zamrożonej mieszaniny metanolu i benzenu. Otrzymano produkt w postaci suchego białego proszku. Uzyskano wydajność 20% otrzymanej pochodnej AZT opisanej wzorem XXVI.
PL 238 768 Β1
Wydajność 20%. HRMS [M-Et3NH+]- m/z 524,0024 obliczona dla [C12H15F3N5O9P2S-] 524,00233 31PNMR{1H} (CH3CN, 121.4 Hz): δ (ppm) 44.61 (m),-13.71 (m).
31P NMR (CH3CN, 121,4 Hz): δ (ppm) 44.61 (m),-13.71 (m).
Przykład 8
Synteza 3’-azydo-3,-deoksytymidyn-5’-ylo a-tio-6-dimetylo-difosforanu (XXVII)
W celu usunięcia śladów wody, z rozpuszczonego w pirydynie nukleozyd-5’-ylo H- tiofosfonianu (1 ekwiwalent molowy) odparowano rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna). Do pozostałości rozpuszczonej w pirydynie dodano chlorek trimetylosililu (2 ekwiwalenty molowe). Po 10 minutach reakcja tworzenia nukleozydo /-/-tiofosfoniano diestru typu XVI była zakończona, co stwierdzono przy pomocy analizy widma 31P NMR obserwując zanik sygnału substratu (typu XV) (-54,8 ppm) i pojawienie się dwóch sygnałów (dwa diastereoizomery) w regionie -58,5 ppm pochodzących od sililo/-/-tiofosfonianu AZT (typu XVI). Do mieszaniny reakcyjnej dodano roztwór jodu (1,5 ekwiwalentu molowego) w pirydynie (1 mmol/ml) i dodano fosforan dimetylu (3 ekwiwalenty molowe). Po pięciu minutach dodano wodę (10 ekwiwalentów molowych). Nadmiar jodu rozłożono etanotiolem (do odbarwienia roztworu). Po odparowaniu rozpuszczalników pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna), oleistą pozostałość rozpuszczoną w chlorku metylenu naniesiono na kolumnę wypełnioną żelem krzemionkowym SI 60 w chlorku metylenu stosując gradient wody (0-20%). Frakcje zawierające czysty produkt XXVII połączono i odparowano, a pozostałość poddano liofilizacji z zamrożonej mieszaniny metanolu i benzenu. Otrzymano produkt w postaci suchego białego proszku. Uzyskano wydajność 52% otrzymanej pochodnej AZT opisanej wzorem XXVII.
Wydajność 52%. HRMS [M-Et3NH+]- m/z 470,0286 obliczona dla [C12H18N5O9P2S-] 470,03059 31P NMR {Ή} (CH3CN, 121.4 Hz): δ (ppm) 48.75 (m), -8.75 (m).
31 P NMR (CH3CN, 121,4 Hz) : δ (ppm) 48.28 (m), -8.77 (m).
Przykład 9
Synteza 2’,3’-dideoksyurydyn-5’-ylo a-tio-p-bis(2-etyloheksylo)-difosforanu (XXVIII)
W celu usunięcia śladów wody, z rozpuszczonego w pirydynie nukleozyd-5’-ylo /-/-tiofosfonianu (1 ekwiwalent molowy) pochodnej ddU odparowano rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna). Do pozostałości rozpuszczonej w pirydynie dodano chlorek trimetylosililu (2 ekwiwalenty molowe). Po 10 minutach reakcja tworzenia nukleozydo /-/-tiofosfoniano diestru typu XVI była zakończona, co stwierdzono przy pomocy analizy widma 31P NMR obserwując zanik sygnału substratu (typu XV) (-54,8 ppm) i pojawienie się dwóch sygnałów (dwa diastereoizomery) w regionie -58,5 ppm pochodzących od sililo-/-/-tiofosfonianu AZT (typu XVI). Do mieszaniny reakcyjnej dodano roztwór jodu (1,5 ekwiwalentu molowego) w pirydynie (1 mmol/ml) i dodano fosforan bis(etyloheksylu) (3 ekwiwalenty molowe). Po pięciu minutach dodano wodę (10 ekwiwalentów molowych). Nadmiar jodu rozłożono etanotiolem (do odbarwienia roztworu). Po odparowaniu rozpuszczalników pod zmniejszonym ci
PL 238 768 Β1 śnieniem (wyparka rotacyjna), oleistą pozostałość rozpuszczoną w chlorku metylenu naniesiono na kolumnę wypełnioną żelem krzemionkowym SI 60 w chlorku metylenu stosując gradient wody (0-20%). Frakcje zawierające czysty produkt XXVIII połączono i odparowano, a pozostałość poddano liofilizacji z zamrożonej mieszaniny metanolu i benzenu. Otrzymano produktw postaci suchego białego proszku. Uzyskano wydajność 25% otrzymanej pochodnej AZT opisanej wzorem XXVIII.
Wydajność 25%. HRMS [M-Et3NH+]- m/z 611,2320 obliczona dla [C25H45N2O9P2S-]
611,23265 31P NMR {1H} (CH3CN, 121.4 Hz): δ (ppm) 47.62 (m), -11.39 (m).
31 PNMR(CH3CN, 121,4 Hz): δ (ppm) 47.61 (m),-11.39 (m).
P rzy kład 10
Synteza 3:-azydo-3’-deoksytymidyn-5’-ylo p-dibutylo-p-tio-difosforanu (XXIX)
W celu usunięcia śladów wody, z rozpuszczonego w pirydynie nukleozyd-5’-ylo /-/-fosfonianu (1 ekwiwalent molowy) odparowano rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna). Do pozostałości rozpuszczonej w pirydynie dodano chlorek trimetylosililu (2 ekwiwalenty molowe). Po 10 minutach reakcja tworzenia nukleozydo /-/-fosfoniano diestru typu XVI była zakończona, co stwierdzono przy pomocy analizy widma 31P NMR obserwując zanik sygnału substratu (typu XV) (~3,5 ppm) i pojawienie się dwóch sygnałów (dwa diastereoizomery) w regionie —1,5 ppm pochodzących od sililo-/-/fosfonianu AZT (typu XVI). Do mieszaniny reakcyjnej dodano roztwór jodu (1,5 ekwiwalentu molowego) w pirydynie (1 mmol/ml) i dodano tiofosforan dibutylu (3 ekwiwalenty molowe). Po pięciu minutach dodano wodę (10 ekwiwalentów molowych). Nadmiar jodu rozłożono etanotiolem (do odbarwienia roztworu). Po odparowaniu rozpuszczalników pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna), oleistą pozostałość rozpuszczoną w chlorku metylenu naniesiono na kolumnę wypełnioną żelem krzemionkowym SI 60 w chlorku metylenu stosując gradient wody (0-20%). Frakcje zawierające czysty produkt XXIX połączono i odparowano, a pozostałość poddano liofilizacji z zamrożonej mieszaniny metanolu i benzenu. Otrzymano produkt w postaci suchego białego proszku. Uzyskano wydajność 71% otrzymanej pochodnej AZT opisanej wzorem XXIX.
Wydajność 71%. HRMS [M-Et3NH+]- m/z 554,1233 obliczona dla [CisHsoNsOgPzS'] 554,12449 31P NMR{1H} (CH3CN, 121.4 Hz): δ (ppm) 54.84 (d, JP,P = 22.79 Hz), -13.46 (d, JP,P = 22.70 Hz). 31P NMR (CH3CN, 121,4 Hz): δ (ppm) 54.82 (m), -13.47 (m).
Przykład 11
Synteza 3’-azydo-3’-deoksytymidyn-5’-ylo p-dibutylo-p-seleno-difosforanu (XXX)
W celu usunięcia śladów wody, z rozpuszczonego w pirydynie nukleozyd-5’-ylo /-/-fosfonianu (1 ekwiwalent molowy) odparowano rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna). Do pozostałości rozpuszczonej w pirydynie dodano chlorek trimetylosililu (2 ekwiwalenty molowe). Po 10 minutach reakcja tworzenia nukleozydo /-/-fosfoniano diestru typu XVI była zakończona, co stwierdzono przy pomocy analizy widma 31P NMR obserwując zanik sygnału substratu (typu XV)
PL 238 768 Β1 (~3,5 ppm) i pojawienie się dwóch sygnałów (dwa diastereoizomery) w regionie —1,5 ppm pochodzących od sililo-/-/-fosfonianu AZT (typu XVI). Do mieszaniny reakcyjnej dodano roztwór jodu (1,5 ekwiwalentu molowego) w pirydynie (1 mmol/ml) i dodano selenofosforan dibutylu (3 ekwiwalenty molowe). Po pięciu minutach dodano wodę (10 ekwiwalentów molowych). Nadmiar jodu rozłożono etanotiolem (do odbarwienia roztworu). Po odparowaniu rozpuszczalników pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna), oleistą pozostałość rozpuszczoną w chlorku metylenu naniesiono na kolumnę wypełnioną żelem krzemionkowym SI 60 w chlorku metylenu stosując gradient wody (0-20%). Frakcje zawierające czysty produkt XXX połączono i odparowano, a pozostałość poddano liofdizacji z zamrożonej mieszaniny metanolu i benzenu. Otrzymano produkt w postaci suchego białego proszku. Uzyskano wydajność 37% otrzymanej pochodnej AZT opisanej wzorem XXX.
Wydajność 37%. HRMS [M-Et3NH+]- m/z 602,0645 obliczona dla [Ci8H30N5O9P2Se-]- 602,06895 31P NMR {1H} (CH3CN, 121.4 Hz): δ (ppm) 47.14 (m), -12.55 (m).
31P NMR (CHsCN, 121,4 Hz): δ (ppm) 54.95 (m), -13.44 (m)
Przykład 12
Synteza 3'-azydo-3'-deoksytymidyn-5’-ylo p-bis(2-etyloheksylo)-p-tio-difosforanu (XXXI)
W celu usunięcia śladów wody, z rozpuszczonego w pirydynie nukleozyd-5’-ylo H- fosfonianu (1 ekwiwalent molowy) odparowano rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna). Do pozostałości rozpuszczonej w pirydynie dodano chlorek trimetylosililu (2 ekwiwalenty molowe). Po 10 minutach reakcja tworzenia nukleozydo /-/-fosfoniano diestru typu XVI była zakończona, co stwierdzono przy pomocy analizy widma 31P NMR obserwując zanik sygnału substratu (typu XV) (~3,5 ppm) i pojawienie się dwóch sygnałów (dwa diastereoizomery) w regionie ~-1,5 ppm pochodzących od sililo/-/-fosfonianu AZT (typu XVI). Do mieszaniny reakcyjnej dodano roztwór jodu (1,5 ekwiwalentu molowego) w pirydynie (1 mmol/ml) i dodano tiofosforan 25 bis(etyloheksylu) (3 ekwiwalenty molowe). Po pięciu minutach dodano wodę (10 ekwiwalentów molowych). Nadmiar jodu rozłożono etanotiolem (do odbarwienia roztworu). Po odparowaniu rozpuszczalników pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna), oleistą pozostałość rozpuszczoną w chlorku metylenu naniesiono na kolumnę wypełnioną żelem krzemionkowym SI 60 w chlorku metylenu stosując gradient wody (0-20%). Frakcje zawierające czysty produkt XXXI połączono i odparowano, a pozostałość poddano liofilizacji z zamrożonej mieszaniny metanolu i benzenu. Otrzymano produkt w postaci suchego białego proszku. Uzyskano wydajność 97% otrzymanej pochodnej AZT opisanej wzorem XXXI.
Wydajność 97%. HRMS [M-Et3NFI+]- m/z 666,2494 obliczona dla [C26H46N5O9P2S-]- 666,24970 31P NMR {1H} (CH3CN, 121.4 Hz): δ (ppm) 54.65 (d, J P,P = 21.04 Hz), -13.41 (d, J P,P = 21.15 Hz) 31P NMR (CH3CN, 121,4 Hz): δ (ppm) 54.65 (m), -13.43 (m)
Przykład 13
Synteza 3’-azydo-3’-deoksytymidyn-5’-ylo p-dimetylo-p-tio-difosforanu (XXXII)
W celu usunięcia śladów wody, z rozpuszczonego w pirydynie nukleozyd-5’-ylo H- fosfonianu (1 ekwiwalent molowy) odparowano rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna). Do pozostałości rozpuszczonej w pirydynie dodano chlorek trimetylosililu (2 ekwiwalenty molowe). Po 10 minutach reakcja tworzenia nukleozydo /-/-fosfoniano diestru typu XVI była zakończona, co stwierdzono przy pomocy analizy widma 31P NMR obserwując zanik sygnału substratu (typu XV) (~3,5 ppm) i pojawienie się dwóch sygnałów (dwa diastereoizomery) w regionie ~-1,5 ppm pochodzących od sililo/-/-fosfonianu AZT (typu XVI). Do mieszaniny reakcyjnej dodano roztwór jodu (1,5 ekwiwalentu molowego) w pirydynie (1 mmol/ml) i dodano tiofosforan dimetylu (3 ekwiwalenty molowe). Po pięciu minutach dodano wodę (10 ekwiwalentów molowych). Nadmiar jodu rozłożono etanotiolem (do odbarwienia roztworu). Po odparowaniu rozpuszczalników pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna), olei
PL 238 768 Β1 sta pozostałość rozpuszczoną w chlorku metylenu naniesiono na kolumnę wypełnioną żelem krzemionkowym SI 60 w chlorku metylenu stosując gradient wody (0-20%). Frakcje zawierające czysty produkt XXXII połączono i odparowano, a pozostałość poddano liofilizacji z zamrożonej mieszaniny metanolu i benzenu. Otrzymano produkt w postaci suchego białego proszku. Uzyskano wydajność 38% otrzymanej pochodnej AZT opisanej wzorem XXXII.
Wydajność 38%. HRMS [M-Et3NH+]- m/z 470,0308 obliczona dla [C12H18N5O9P2S-]- 470,03059 31P NMR{1H} (CH3CN, 121.4 Hz): δ (ppm) 57.27 (d, JP,P = 22.93 Hz), -13.94 (d, JP,P= 22.99 Hz). 31P NMR (CH3CN, 121,4 Hz) : δ (ppm) 57.26 (m), -13.94 (m).
Przykład 14
Synteza 2’,3’-dideoksyurydyn-5’-ylo p-bis(2-etyloheksylo)-p-tio-difosforanu (XXXIII)
W celu usunięcia śladów wody, z rozpuszczonego w pirydynie nukleozyd-5’-ylo /-/-fosfonianu (1 ekwiwalent molowy) pochodnej ddU odparowano rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna). Do pozostałości rozpuszczonej w pirydynie dodano chlorek trimetylosililu (2 ekwiwalenty molowe). Po 10 minutach reakcja tworzenia nukleozydo /-/-fosfoniano diestru typu XVI była zakończona, co stwierdzono przy pomocy analizy widma 31P NMR obserwując zanik sygnału substratu (typu XV) (~3,5 ppm) i pojawienie się dwóch sygnałów (dwa diastereoizomery) w regionie ~-1,5 ppm pochodzących od sililo-/-/-fosfonianu AZT (typu XVI). Do mieszaniny reakcyjnej dodano roztwór jodu (1,5 ekwiwalentu molowego) w pirydynie (1 mmol/ml) i dodano tiofosforan bis(etyłoheksylu) (3 ekwiwalenty molowe). Po pięciu minutach dodano wodę (10 ekwiwalentów molowych). Nadmiar jodu rozłożono etanotiolem (do odbarwienia roztworu). Po odparowaniu rozpuszczalników pod zmniejszonym ciśnieniem (wyparka rotacyjna), oleistą pozostałość rozpuszczoną w chlorku metylenu naniesiono na kolumnę wypełnioną żelem krzemionkowym SI 60 w chlorku metylenu stosując gradient wody (020%). Frakcje zawierające czysty produkt XXXIII połączono i odparowano, a pozostałość poddano liofilizacji z zamrożonej mieszaniny metanolu i benzenu. Otrzymano produkt w postaci suchego białego proszku. Uzyskano wydajność 62% otrzymanej pochodnej AZT opisanej wzorem XXXIII.
Wydajność 62%. HRMS [M-Et3NH+]- m/z 611,2345 obliczona dla [C25H45N2O9P2S-]- 611,23265 31P NMR{1H} (CH3CN, 121.4 Hz): δ (ppm) 54.65 (d, JP,P = 21.04 Hz), -13.41 (d, JP,P = 21.15 Hz). 31P NMR (CH3CN, 121,4 Hz) : δ (ppm) 54.65 (m), -13.43 (m).
P rzy kład 15
Oznaczanie cytotoksyczności, aktywności przeciwwirusowej i trwałości związków.
Oznaczanie cytotoksyczności CC50 i CC90.
Cytotoksyczność i aktywność anty-HIV związków ΧΧ-ΧΧΧΙII była badana na komórkach CEMT-4 według procedur opisanych poniżej. W celu oznaczenia cytotoksyczności związków, komórki CEM-T4 hodowano w standardowych warunkach (37°C, 5% CO2) w 96-studzienkowych płytach hodowlanych w mediach (RPMI, 10% FOS) wzbogaconych w testowane substancje. Hodowle prowadzono w mediach stanowiących szereg rozcieńczeń testowanych substancji. Kontrolę stanowią hodowle prowadzone w
PL 238 768 Β1 czystym medium (RPMI, 10% FCS). Żywotność komórek oznaczono po 7 dniach hodowli przy użyciu testu MTT (Sigma, USA). Do każdej studzienki hodowlanej dodawano 10 pL roztworu (5 mg/mL) MTT (bromek [3-(4,5-dimetyloimidazo-2-ilo)-2,5-difenylotetrazoliny]. Hodowle inkubowano w temperaturze 37°C przez 3 godziny. Komórki i wytworzony przez enzymy mitochondrialne produktkryształy formazanu odwirowano, usuwano medium i dodawano DMSO w celu zlizowania komórek i rozpuszczenia kryształów. Pomiar natężenia barwy fioletowej wykonano przy użyciu spektrofotometru płytkowego przy długości fali 560 nm.
Obliczenia cytotoksyczności wykonano poprzez pomiar absorbancji, gdzie wartości absorbancji dla kontroli (K) to średnia pomiarów z pięciu studzienek hodowlanych. Stanowi ona 100% żywotności komórek CEM-T4. Wartość absorbancji dla komórek hodowlanych zawierających badane związki w określonych stężeniach, wyliczano w oparciu o odczyty absorbancji z trzech powtórzeń. Uzyskane wyniki za każdym razem odnoszono do wartości kontrolnej.
Żywotność komórek (P) obliczono wg wzoru:
(A-T)x 100 p = --------K-T
W którym P oznacza przeżywalność komórek wyrażona w %%, K - wartość absorpcji dla kontroli, A - wartość absorbancji dla hodowli komórek w obecności testowanych związków, T + 0,06, stała wartość absorbancji medium RPMI/10% FCS.
Na podstawie wyliczeń sporządzono wykresy zależności przeżywałności komórek od testowanych związków w określonych stężeniach, na podstawie których wyznaczono wartości CCso i CC90.
Aktywność anty-HIV-1 (ECso i ECgo).
Komórki CEM-T4 preinkubowano 24 godz. w standardowych warunkach (37°C, 5% CO2) w medium (RPMI, 10% FCS) wzbogaconym w testowane preparaty w stężeniach 0,001-20 μΜ. Inkubacje prowadzono na płytce 96 studzienkowej płaskodennej, gdzie w studzience w 200 pL roztworu leku zawieszono tysięcy komórek. Hodowle dla każdego stężenia związku prowadzono w czterech powtórzeniach. Kontrole referencyjne, określające hamowanie replikacji HIV-1 stanowiły hodowle prowadzone w medium wzbogaconym w AZT w stężeniach 0,32 μΜ, 0,16 μΜ, 0,08 μΜ, 0,04 μΜ, 0,02 μΜ, 0,01 μΜ, 0,005 μΜ, 0,0025 μΜ, 0,0012 μΜ, 0,0006 μΜ. Kontrolę odzwierciedlającą prawdziwą replikację wirusa stanowiły hodowle prowadzone w czystym medium RPMI, 10% FCS.
Po 24 godzinnej inkubacji w medium wzbogaconym w testowane preparaty i AZT, inokulowano przez dodanie identycznej, znanej ilości wirusa HIV-1 i hodowlę prowadzono przez 8 dni. W zebranych nadsączach z ósmego dnia hodowli oznaczono białko wirusowe p24, marker wielkości replikacji wirusa. Hamowanie replikacji wirusa przedstawiono jako procentową zawartość białka p24 w hodowlach prowadzonych w mediach wzbogaconych w testowane substancje w odniesieniu do hodowli (hodowle wirusa HIV-1 w komórkach CEM-T4 w medium bez inhibitorów), przyjmując, że zmierzona ilość markera p24 w kontroli odpowiada 100% replikacji wirusa. Wszystkie hodowle dla każdego stężenia, każdej testowanej substancji prowadzone były w trzech powtórzeniach.
Cytotoksyczność (CC), aktywność anty-HIV (EC) związków wg niniejszego wynalazku oraz ich wskaźniki selektywności przedstawiono w Tabelach 1 i 2. Tabela 1 przedstawia parametry farmakokinetyczne (CC50, CC90, ECso, EC90, SI50) otrzymanych α-modyfikowanych heteroatomem tj. siarką lub selenem analogów nukleozydo 5’-difosforanów. Tabela 2 przedstawia parametry farmakokinetyczne otrzymanych β- modyfikowanych heteroatomem tj. siarką lub selenem analogów nukleozydo 5’-di-fosforanów. Tabela 3 przedstawia porównawcze parametry farmakokinetyczne znanych związków - cytotoksyczność (CCso) i aktywność anty-HIV-1 (ECso) przykładowych nukleotydówtypu VII i IX, tenofoviru oraz nukleozydo w (AZT i ddU). Związki XXVIII i XXXIII są analogami ddU. Pochodne tych związków jeśli nie są pronukleotydarni to nie wykazują żadnej aktywności antywirusowej. Fakt pojawienia się aktywności oznacza, że do komórki dostarczony został ufosforylowany nukleozyd, który ma charakter pronukleotydu. Brak aktywności świadczyłby o rozpadzie związków XXVIII i XXXIII do nukleozydu jeszcze przed wniknięciem do komórki pod wpływem działania enzymów defosforylujących. Nukleozyd, pomimo iż przenika przez błonę komórkową nie wykazuje jakkolwiek aktywności, ddU nie jest bowiem substratem dla kinaz fosforylujących go do monofosforanu (w przeciwieństwie do AZT), a następnie do di - i kolejno do tri-fosforanu, będącego aktywnym lekiem.
PL 238 768 Β1
Tabela 1
| Związek | CC50 [μΜ] | CC90 [μΜ] | EC50 [μΜ] | EC9o [μΜ] | SIso |
| XX | >212 | >212 | 0,007 | 0,02 | 30 286 |
| XXI | >250 | >250 | 0,02 | >0,5 | 12 500 |
| XXIII | >450 | >450 | 0,035 | >0,5 | 12 857 |
| XXIV | 25 | 88 | 0,005 | 0,03 | 20 000 |
| XXV | >226 | >226 | <0,004 | 0,03 | 56 500 |
| XXVI | >238 | >238 | 0,025 | 0,19 | 9520 |
| XXVII | >240 | >240 | 0,007 | 0,027 | 34 286 |
| XXVIII | 160 | 330 | 3,7 | 8 | 43 |
Tabela 2
| Nr związku | CC50 [μΜ] | CC90 [μΜ] | EC50 [μΜ] | EC9o [μΜ] | SI50 |
| XXIX | >300 | »300 | 0,004 | 0,026 | 75 000 |
| XXX | >330 | »330 | 0,003 | 0,05 | 110 000 |
| XXXI | >190 | »190 | 0,02 | 0,2 | 9 500 |
| XXXII | >258 | >258 | 0,005 | 0,012 | 51 600 |
| XXXIII | 310 | >390 | 4,4 | 9,3 | 70 |
PL 238 768 Β1
Tabela 3
| Lp. | Związek | CC50 [μΜ] | EC50 [μΜ] | SI50 |
| l.a | C4H9’DiPPro-AZTDP (typ vii) | 60 | 0,011 | 5 455 |
| 2,a | C6Hi3-DiPPro-AZTDP (typ VII) | 47 | 0,016 | 2 938 |
| 3.a | CII3/CF3-Ph-DiPPro-AZTDP (typ IX) | 100 | 0,012 | 8 333 |
| 4.a | C4H9/C1 iH23-DiPPro-AZTDP (typ IX) | 36 | 0,013 | 2 769 |
| 5.a | CH3/C9Hi9-DiPPro-AZTDP (typ IX) | 20 | 0,016 | 1 250 |
| 6. | AZT | 60 | 0,0011 | 6 000 |
| 7.b | ddU | »250 | 48 | >5,2 |
| 8.c | tenofovir | >1 000 | 0,55 | 1 818 |
a Weinschenk et al., J. Med. Chem. 2015, 58, 6114-6130; b Oznaczone na komórkach CEM-T4;
Baba M. i wsp., Blochem. Biophys. Res.
bCommun„ 1987, 142(1), 128-134;
c· Informacje dotyczące tenofoviru (Viread®) na stronie internetowej FDA (Food and Drug Administration).
https://www.fda.gov/ohrms/dockets/ac/01/briefmg/3792bl 01 gilead.pdf
Badanie trwałości związków
Trwałość i ścieżki rozpadu badanych związków były badane w mediach hodowlanych komórek [RPMI] i mediach hodowlanych komórek wzbogaconych enzymami (surowica z płodów bydlęcych, FBS), w tym fosfoesterazami [RPMI/FBS 9:1 (v/v)]. Próbki związków były inkubowane w 37°C a proces śledzony przy pomocy HPLC.
Analizy HPLC wykonywane były na kolumnie Lichrospher RP18-5 (5 μίτι) 25 cm x 4,6 mm, stosując system: bufor A octan trietyloamoniowy (0.01 M) i bufor B - acetonitryl/ bufor A (4:1 v/v) i gradient B w A 0-95% przez 30 min., szybkość przepływu 1 ml/min., w temp. 37°C.
Medium hodowlane komórek RPMI-1640 oraz surowica z płodów bydlęcych FBS były zakupione w Sigmie (odpowiednio R7256 i F7524).
Stosując w/w wyżej warunki, badania nad trwałością modyfikowanych siarką lub selenem analogów nukleozydo 5’-difosforanów w medium hodowlanym komórek RPMI wskazały na trwałość związków utrzymującą się przez przynajmniej 7 dni.
Badania w mediach hodowlanych komórek wzbogaconych aktywnością enzymatyczną (RPMI/FBS) obserwowano różnice w zależności, czy badane związki posiadały modyfikację heteroatomem w pozycji α-P czy β-Ρ. W przypadku tych pierwszych obserwowano trwałość związków utrzymującą się przynajmniej przez 7 dni, co przyjednocześnie atrakcyjnych parametrach antywirusowych, czyni te związki atrakcyjnymi kandydatami jako leki antywirusowe. Tabela 4 przedstawia parametry stabilności modyfikowanych heteroatomem (siarką lub selenem) analogów nukleozydo 5’-difosforanów.
W odróżnieniu, analogi posiadające modyfikacje siarką lub selenem w pozycji β-Ρ ulegają rozpadowi z czasem połowicznego rozpadu (ti/2) pomiędzy 1-50 h. W każdym przypadku produktem rozpadu jest nukleozydo 5’-monofosforan, co przy jednocześnie wysokiej aktywności antywirusowej, czyni te związki potencjalnymi pronukleotydami antywirusowymi (Tabela 4).
PL 238 768 Β1
Tabela 4
| a-modyfikowane heteroatomem (siarką lub selenem) analogi nukleozydo 5 ’-difosforanów | β-modyfikowane heteroatomem (siarką lub selenem) analogi nukleozydo 5 ’-difosforanów | ||
| Nr związku | tl/2 | Nr związku | tl/2 |
| XXI | >7 dni | XXIX | 2h |
| XXII | >7 dni | XXX | 2h |
| XXVIII | >7 dni | XXXI | 50 h |
| XXXIII | 1 h |
Zastrzeżenia patentowe
Claims (10)
- Zastrzeżenia patentowe1. Związek o wzorzelub jego sól, gdzie Z stanowi N3 a B stanowi tymidyn-1-yl, albo Z stanowi H a B stanowi uracyl-1-ylRi i R2 stanowi alkil, aryl lub H,X i Y stanowi O albo S, Se, przy czym gdy X stanowi O wówczas Y stanowi S lub Se, gdy X stanowi S, Se wówczas Y stanowi O.
- 2. Związek o wzorzelub jego sól, gdzie Z stanowi N3 a B stanowi tymin-l-ył, albo Z stanowi H a B stanowi uracyl-1 -yl, X stanowi S lub Se, R1 stanowi alkil lub aryl, a R2 stanowi alkil lub H.PL 238 768 Β1
- 3. Związek o wzorzelub jego sól, gdzie Z stanowi N3 a B stanowi tymin-1 -yl, albo Z stanowi H a B stanowi uracyl-1 -yl, Y stanowi S lub Se, R1 i R2 stanowi alkil.
- 4. Związek według któregokolwiek z zastrz. 1 do 3, znamienny tym, że występuje w postaci soli trietyloamoniowej.
- 5. Związek według któregokolwiek z zastrz. 1 do 3 do zastosowania jako lek.
- 6. Kompozycja farmaceutyczna zawierająca związek według któregokolwiek z zastrz. 1 do 3 i dopuszczalny farmaceutycznie nośnik.
- 7. Kompozycja farmaceutyczna według zastrz. 6 do zastosowania w leczeniu zakażeń wirusowych.
- 8. Kompozycja farmaceutyczna do zastosowania według zastrz. 7, znamienna tym, że zakażenie wywołane jest retrowirusem.
- 9. Kompozycja farmaceutyczna do zastosowania według zastrz. 8, znamienna tym, że zakażenie wywołane jest wirusem HIV.
- 10. Sposób otrzymywania związku jak określono w którymkolwiek z zastrz. 1 do 3, w którym związek o wzorze XV:poddaje się kondensacji z chlorkiem trimetylosililu (TMS-CI) w obecności pirydyny, a następnie tak otrzymany reaktywny /-/-fosfoniano diester o wzorze XVI:poddaje się utlenianiu w obecności elementarnego jodu z otrzymaniem związku pośredniego - adduktu pirydyniowego o wzorze XVII:PL 238 768 Β1 który następnie poddaje się reakcji kondensacji z obecnym w medium reakcyjnym nukleofilem a następnie hydrolizie, i gdzie nukleofil jest wybrany spośród:a) fosforano mono- lub diestru o wzorze XVIII:oIIΌ---P---ORiOR2 (XVIII) z wytworzeniem a-S (lub Se)-nukleozydo 5’-difosforanu o wzorze XIVa:albob) fosforanu siarkowego lub selenowego o wzorze XIX:S(Se)Ό—P--OR, or2 (XIX) z wytworzeniem β-S (lub Se)-nukleozydo 5’-difosforanu o wzorze XIVb:przy czym w powyższych wzorachX stanowi O, S lub Se,Ri, R2 stanowi alkil, aryl, HZ stanowi N3 a B stanowi tymidyn-1-yl, albo Z stanowi H a B stanowi uracyl-1-yl.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL422415A PL238768B1 (pl) | 2017-07-31 | 2017-07-31 | Nowy analog nukleozydo difosforanu, kompozycja farmaceutyczna zawierająca analog nukleozydo difosforanu, jego zastosowanie i sposób syntezy |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL422415A PL238768B1 (pl) | 2017-07-31 | 2017-07-31 | Nowy analog nukleozydo difosforanu, kompozycja farmaceutyczna zawierająca analog nukleozydo difosforanu, jego zastosowanie i sposób syntezy |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL422415A1 PL422415A1 (pl) | 2019-02-11 |
| PL238768B1 true PL238768B1 (pl) | 2021-10-04 |
Family
ID=65270256
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL422415A PL238768B1 (pl) | 2017-07-31 | 2017-07-31 | Nowy analog nukleozydo difosforanu, kompozycja farmaceutyczna zawierająca analog nukleozydo difosforanu, jego zastosowanie i sposób syntezy |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL238768B1 (pl) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PL217694B1 (pl) * | 2010-10-19 | 2014-08-29 | Inst Chemii Bioorg Polskiej Akademii Nauk | Analog nukleotydu, sposób otrzymywania analogu nukleotydu, zastosowanie analogu nukleotydu, pro-nukleotyd antywirusowy, kompozycja farmaceutyczna |
-
2017
- 2017-07-31 PL PL422415A patent/PL238768B1/pl unknown
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PL217694B1 (pl) * | 2010-10-19 | 2014-08-29 | Inst Chemii Bioorg Polskiej Akademii Nauk | Analog nukleotydu, sposób otrzymywania analogu nukleotydu, zastosowanie analogu nukleotydu, pro-nukleotyd antywirusowy, kompozycja farmaceutyczna |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| ALEXANDRE HOFER: "20150706", A MODULAR SYNTHESIS OF MODIFIED PHOSPHOANHYDRIDES * |
| JOANNA ROMANOWSKA: "200905", ARYL NUCLEOSIDE H-PHOSPHONATES. PART 16: SYNTHESIS AND ANTI-HIV-1 ACTIVITY OF DI-ARYL NUCLEOSIDE PHOSPHOTRIESTERS * |
| KONRAD MISIURA I WSP.: "200507", SYNTHESIS OF NUCLEOSIDE A-THIOTRIPHOSPHATES VIA AN OXATHIAPHOSPHOLANE APPROACH * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL422415A1 (pl) | 2019-02-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11559542B2 (en) | Phosphoramidate derivatives of 5-fluoro-2′-deoxyuridine for use in the treatment of cancer | |
| US6455513B1 (en) | Chemical compounds | |
| CA1336820C (en) | Fluorinated nucleosides and process for treating retrovirus infections therewith | |
| ES2498046T3 (es) | Compuestos antivirales de éster de fosfonato | |
| PT1628685E (pt) | Análogos de fosfonatos antivirais | |
| PT98720B (pt) | Processo para a preparacao de derivados de fosfolipidos de nucleosidos e de composicoes farmaceuticas que os contem | |
| AU2014268040A1 (en) | Phosphoric acid/phosphonic acid derivatives and medicinal uses thereof | |
| PT707591E (pt) | Esteres de acido metilfosfonico, processo para a sua preparacao e sua utilizacao | |
| US6686462B2 (en) | Antiviral compounds and methods of administration | |
| CN106661075A (zh) | 二磷酸和三磷酸前体药物 | |
| CZ297267B6 (cs) | Deriváty pyrimidinu nesoucí fosfonátovou skupinu,zpusob jejich prípravy, jejich pouzití pro lécbu a farmaceutické prípravky tyto látky obsahující | |
| JPH01501864A (ja) | 抗ウイルス剤 | |
| Okruszek et al. | The synthesis of nucleoside 5'-O-(1, 1-dithiotriphosphates) | |
| US5153180A (en) | Fluorinated nucleosides and process for treating retrovirus infections therewith | |
| Meier et al. | Synthesis and Antiviral Evaluation of SATE-Foscarnet Prodrugs and New Foscarnet—AZT Conjugates | |
| PL238768B1 (pl) | Nowy analog nukleozydo difosforanu, kompozycja farmaceutyczna zawierająca analog nukleozydo difosforanu, jego zastosowanie i sposób syntezy | |
| Kim et al. | Phosphonate Isosteres of 2′, 3′-Didehydro-2, 3-dideoxynucleoside Monophosphates: Synthesis and Anti-HIV Activity | |
| CA2141030A1 (en) | Liponucleotides of seco-nucleosides, their production as well as their use as antiviral pharmaceutical agents | |
| EP1334108B1 (en) | ARYL PHOSPHATE DERIVATIVES OF d4T | |
| EP4356928A1 (en) | Nucleoside diphosphate or diphosphonate prodrugs, or nucleoside analogue diphosphate or diphosphonate prodrugs | |
| JPH08512040A (ja) | デオキシヌクレオシドのリポヌクレオチド、それらの製造方法および抗ウイルス薬としてのそれらの用途 | |
| PL217694B1 (pl) | Analog nukleotydu, sposób otrzymywania analogu nukleotydu, zastosowanie analogu nukleotydu, pro-nukleotyd antywirusowy, kompozycja farmaceutyczna | |
| HK40069170A (en) | Phosphoramidate derivatives of 5-fluoro-2'-deoxyuridine for use in the treatment of cancer | |
| HK40001167A (en) | Pharmaceutical formulation comprising a phosphoramidate derivative of 5-fluoro-2'-deoxyuridine for use in the treatment of cancer |