PL238779B1 - Peptydomimetyki i ich zastosowanie w terapii nowotworowej jelit oraz w zapewnieniu ich prawidłowej perystaltyki - Google Patents

Peptydomimetyki i ich zastosowanie w terapii nowotworowej jelit oraz w zapewnieniu ich prawidłowej perystaltyki Download PDF

Info

Publication number
PL238779B1
PL238779B1 PL419612A PL41961216A PL238779B1 PL 238779 B1 PL238779 B1 PL 238779B1 PL 419612 A PL419612 A PL 419612A PL 41961216 A PL41961216 A PL 41961216A PL 238779 B1 PL238779 B1 PL 238779B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
compound
tyrosyl
cancer
opioid
use according
Prior art date
Application number
PL419612A
Other languages
English (en)
Other versions
PL419612A1 (pl
Inventor
Andrzej Wojciech Lipkowski
Aleksandra MISICKA-KĘSIK
Aleksandra Misicka-Kęsik
Krzysztof RÓŻYCKI
Krzysztof Różycki
Piotr SOSNOWSKI
Piotr Sosnowski
Anna Katarzyna PUSZKO
Anna Katarzyna Puszko
Anna LASKOWSKA
Anna Laskowska
Original Assignee
Inst Homeostazy Spolka Z Ograniczona Odpowiedzialnoscia
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Inst Homeostazy Spolka Z Ograniczona Odpowiedzialnoscia filed Critical Inst Homeostazy Spolka Z Ograniczona Odpowiedzialnoscia
Priority to PL419612A priority Critical patent/PL238779B1/pl
Priority to PCT/PL2017/050057 priority patent/WO2018097741A1/en
Priority to US16/464,532 priority patent/US20190375787A1/en
Priority to EP17872975.2A priority patent/EP3544622A4/en
Publication of PL419612A1 publication Critical patent/PL419612A1/pl
Publication of PL238779B1 publication Critical patent/PL238779B1/pl

Links

Landscapes

  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Przedmiotem zgłoszenia są peptydomimetyki. Jednym ze związków dotyczących zgłoszenia jest związek przedstawiony na wzorze ogólnym, gdzie: R1 oznacza łańcuch boczny D-aminokwasu wybranego spośród: D-Ala, D-Tre, D-Ser, D-Met, D-Leu, D-Glu, D-Asp, D-Lys lub D-Arg, R2 oznacza nic albo resztę L-aminokwasową wybraną spośród Gly lub Lys albo resztę dipeptydową L-Gly-L-Lys, R3 oznacza resztę L-aminokwasową wybraną spośród: Phe lub Trp, R4 oznacza nic albo resztę L-aminokwasową Lys, R5 oznacza liniowy nasycony lub nienasycony łańcuch węglowodorowy o wzorze ogólnym CnHm, gdzie n jest liczbą całkowitą od 1 do 4, natomiast m jest parzystą liczbą całkowitą od 2 do 10. R6-10 oznaczają niezależnie podstawnik wybrany spośród: wodorowego, hydroksylowego, metylowego, formylowego, karboksylowego, metoksykarbonylowego, karbamoilowego, cyjanowego, aminowego, metyloaminowego, dimetyloaminowego, jodkowego, fluorkowego, nitrowego lub sulfonowego. Zgłoszenie obejmuje także zastosowanie przedmiotowych peptydomimetyków w terapii nowotworów jelit oraz zapewnieniu ich prawidłowej perystaltyki. Opisane w zgłoszeniu związki wykazują efekt cytostatyczny i cytotoksyczny w stosunku do komórek nowotworów jelit, posiadają powinowactwo do receptorów μ i δ a działają jako antagoniści leków opioidowych. Przeznaczone są do podawania przez układ pokarmowy, w postaci tabletek, wlewów, zastrzyków lub implantów.

Description

Opis wynalazku
Przedmiot wynalazku stanowią analogi peptydomimetyków nadające się do stosowania w terapii nowotworów jako antagonistów leków opioidowych oraz zastosowanie tych związków w terapii nowotworów jelit. Opisane związki wykazują efekt cytostatyczny i cytotoksyczny w stosunku do komórek nowotworów jelit, wykazują powinowactwo do receptorów μ i δ a działają jako antagoniści leków opioidowych. Przeznaczone są do podawania przez układ pokarmowy, w postaci tabletek, wlewów, zastrzyków lub implantów, w leczeniu i wspomaganiu terapii nowotworów jelit oraz zapewnieniu prawidłowej perystaltyki jelit przy przyjmowaniu opioidów.
Stan techniki
Związkami powszechnie stosowanymi w leczeniu raka jelit, jak i innych rodzajów nowotworów są fluoropirymidyny, na czele z 5-fluorouracilem (5-FU). Preparat ten często podawany jest z leukoworyną w postaci iniekcji bolusowej bądź w formie ciągłego wlewu dożylnego (Humeniuk R., et. al., 2009). 5-FU często stosowany jest w chemoterapii w połączeniu z innymi lekami, jak oksaliplatyna, która osłabia replikację DNA i indukuje apoptozę komórkową (Raymond E., Faivre S., et. al., 1998; Raymond E., Chaney S. G., et. al., 1998), czy irynotekan, hamujący działanie topoizomerazy I (Akhtar R., et. al., 2014). Popularnym związkiem farmakologicznym stosowanym w terapii nowotworów jelita jest też kapecytabina podawana doustnie i wchłaniania przez błonę śluzową przewodu pokarmowego (Pentheroudakis G., et. al., 2002).
Bardzo często terapiom leczenia nowotworów towarzyszą leki przeciwbólowe, stosowane we wszystkich stadiach rozwoju guza o sile rosnącej wraz z zaawansowaniem choroby. W szczególnie ciężkich przypadkach, gdy leczenie operacyjne bądź farmakologiczne przestaje być skuteczne lub nie jest możliwe, terapia ogranicza się w zasadzie jedynie do uśmierzania bólu w ostatnich dniach życia pacjenta. Grupę najsilniejszych leków opioidowych od lat tworzą określone związki, wśród których jedynym z najczęściej stosowanych jest morfina.
Silna aktywność przeciwbólowa morfiny sprawia, że jest to środek powszechnie stosowany w terapii wszelkiego rodzaju nowotworów. Środowiska naukowe podjęły jednak nowe tematy badań, analizując również wpływ morfiny na same nowotwory. Do chwili obecnej wyniki nie są jasne. Dowiedziono m.in., że morfina w dawkach istotnych klinicznie przyspieszała wzrost nowotworu piersi u modeli mysich (Bimonte S., et. al., 2015; Nguyen J., et. al., 2014); było to związane z przyspieszoną angiogenezą, zahamowaniem apoptozy i progresją cyklu komórkowego (Farooqui M., et. al., 2007). Podobne wnioski wyciągnięto z doświadczeń na mysich modelach mięsaka i białaczki (Ishikawa M., et. al., 1993). W badaniach in vitro i in vivo stwierdzono ponadto, że wzrostowi guza sprzyjać może sporadyczne aplikowanie dużych dawek morfiny lub długotrwałe jej podawanie w małych dawkach (Zong J., et. al., 2000). Co więcej, morfina hamować może apoptozę komórek rakowych (Lin X., et. al., 2007) bądź indukować wzrost guza poprzez zwiększenie ekspresji cyklooksygenazy-2 (COX-2) (Farooqui M., et. al., 2006; Salvemini D., et. al., 1993; Arerangaiah R., et. al., 2007; Nedelec E., et. al., 2001) i/lub stymulowanie angiogenezy za pośrednictwem prostaglandyny E2 (Chang S. H., et. al., 2004; Griffin R. J., et. al., 2002; Salvemini D., et. al., 1994; Leahy K. M., et. al., 2002).
Celem wynalazku jest dostarczenie nowych związków nadających się do leczenia i zapobiegania nowotworu jelit i jednocześnie wypierające opioidy z receptorów opioidowych w przewodzie pokarmowym i przywracające/utrzymujące motorykę jelit podczas podawania morfiny.
Szczególnym celem wynalazku było jednoczesne zniwelowanie negatywnych efektów towarzyszących u chorych przyjmujących morfinę w ramach terapii przeciwbólowej podczas leczenia antynowotworowego a także leczenia nowotworów w obszarze jelit. W przypadku tych chorób około 75% pacjentów wymaga stałego leczenia przeciwbólowego. Ponadto, leczenie bólu przewlekłego związane jest z szybkim rozwojem tolerancji na lek, co powoduje konieczność zwiększania dawek analgetyków, a to z kolei może powodować nasilenie się skutków ubocznych ich stosowania [Hiliger M. Współczesna onkologia 2001; 5(4): 168-174]. Niektóre analgetyki opioidowe, tj. morfina, wykazują także działanie stymulujące proliferację nowotworów [Farooqui M, Li Y, Rogers T et al., British Journal of Cancer 2007; 97(11): 1523-1531] co obniża skuteczność stosowanej terapii antynowotworowej.
PL 238 779 B1
Istota wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest związek wybrany spośród:
tyrozylo-D-alanylo-glicylo-fenyloalanylo-cynamylopiperayzyny (TyrDAlaGlyPheCyn), tyrozylo-D-alanylo-glicylo-tryptofylo-cynamylopieparyzyny (TyrDAlaGlyTrpCyn), tyrozylo-D-treonylo-glicylo-fenyloalanylo-cynamylopiperayzyny (TyrDThrGlyPheCyn), tyrozylo-D-treonylo-glicylo-tryptofylo-cynamylopieparyzyny (TyrDThrGlyTrpCyn), lub ich farmaceutycznie dopuszczalnych soli.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest związek określony powyżej do stosowania w leczeniu lub zapobieganiu nowotworu jelita.
Korzystnie, związek do stosowania według wynalazku jest stosowany w postaci przeznaczonej do podawania doustnego, iniekcyjnego lub dożylnego. Korzystnie, w postaci doustnej tabletki do podawania bezpośrednio do układu pokarmowego lub wlewu dożylnego do podawania obwodowego lub zastrzyku do iniekcji guza i jego okolic.
Korzystnie, związek do stosowania według wynalazku jest stosowany w postaci wielolekowej kompozycji farmaceutycznej, zwłaszcza zawierającej dodatkowo opioid o działaniu przeciwbólowym i/lub lek przeciwnowotworowy.
Korzystnie, związek do stosowania według wynalazku jest przeznaczony do stosowania w klasycznej chemioterapii raka jelit prowadzonej przedoperacyjnie (terapia neo-adiuwantowa) lub pooperacyjnie (terapia adiuwantowa) lub w chemioterapii nieoperacyjnego raka jelita lub w jej wspomaganiu lub jest przeznaczony do stosowania w leczeniu innych nowotworów do zabezpieczania jelit przed przerzutem do nich nowotworu pierwotnie pochodzącego z innej tkanki.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest związek określony powyżej do stosowania w terapii przeciwbólowej jako antagonista leków opioidowych.
Korzystnie, jest on przeznaczony do podawania doustnego lub obwodowego w celu eliminowania zaparć wywoływanych przez leki opioidowe. Równie korzystnie, jest przeznaczony do oddziaływania na receptory opioidów. Równie korzystnie, jest stosowany w postaci doustnej tabletki do podawania bezpośrednio do układu pokarmowego, lub wlewu dożylnego do podawania obwodowego. Równie korzystnie, jest stosowany w postaci wielolekowej kompozycji farmaceutycznej, korzystnie zawierającej opioid stosowany w terapii przeciwbólowej. Równie korzystnie, jest stosowany w postaci kompozycji zawierającej polimer stanowiący nośnik substancji aktywnej.
Nieoczekiwanie okazało się, że związki według wynalazku oprócz właściwości antagonistycznych względem opioidów wykazują działanie cytostatyczne i cytotoksyczne względem komórek nowotworowych jelit. Wykazano również, że wykazują one działanie cytostatyczne i cytotoksyczne w stosunku do komórek nowotworowych jelit, a także mają powinowactwo do receptorów opioidowych będąc antagonistami leków opioidowych. Tym samym wynalazek łączy efekt zabezpieczenia jelit przed niekorzystnym odziaływaniem opioidów na motorykę a także jest pomocny w terapii ich nowotworów jelit lub prewencji w ich rozwoju np. w wyniku przerzutu do jelit.
Szczegółowy opis wynalazku
Ogólnie, wynalazek dotyczy peptydomimetyków nadających się do stosowania w leczeniu i profilaktyce nowotworów jelita.
Podczas poszukiwania nowych peptydomimetyków opioidów, które powinny wykazywać wysokie powinowactwo do receptorów opioidowych, szczególnie receptorów opioidowych mu, a jednocześnie działać jako antagonista wobec leków opioidowych, takich jak morfina, fentanyl lub peptydów opioidowych, takich jak enkefalina lub bifalina, nieoczekiwanie okazało się, że uzyskane peptydowe analogi opioidów wykazują również działanie cytotoksyczne w stosunku do komórek nowotworowych jelit. Działanie to przejawia się zarówno poprzez efekt cytostatyczny i uśmiercanie komórek nowotworowych jak też poprzez rozluźnienie struktur guza i ułatwianie wnikania innych substancji czynnych do wewnątrz guza.
Poniższe przykłady ilustrują efekt cytostatyczny i cytotoksyczny w stosunku do komórek nowotworu jelit wywoływany zgodnie z wynalazkiem. Przedstawiono także przykłady oddziaływania z receptorami opioidowymi.
Peptydomimetyki według wynalazku mogą być uzyskane metodami znanymi ze stanu techniki, w szczególności sposobem opisanym w treści polskiego zgłoszenia patentowego numer P.402324. Podane poniżej opisy syntezy przykładowych peptydomimetyków mogą być łatwo zaadoptowane przez specjalistę do uzyskiwania dowolnego związku według wynalazku,
PL 238 779 B1
a) chlorowodorek tyrozylo-D-alanylo-glicylo-cynamonylopiperazyny
Trans-1-cynamonylo piperazynę acylowano t-Boc-Tyr-D-Ala-Gly, przy użyciu N,N-dicykloheksylokarbodiimidu za pomocą metody sprzęgania N-hydroksysukcynimidu w roztworze N,N-dimetyloformamidu. Po odsączeniu N, N'-dicykloheksylomocznika, surowy produkt pośredni został wytrącony wodą. Osad przemywano trzy razy wodą i wysuszono. T-butyloksykarbonylową grupę ochronną usunięto z użyciem 5% chlorowodoru w octanie etylu. Surowy produkt końcowy w postaci soli (chlorowodorku) wytrącano eterem etylowym. Surowy produkt oczyszczono za pomocą preparatywnej HPLC w układzie gradientu 0,5% kwas solny/etanol.
Jako czysty produkt izolowano chlorowodorek tyrozylo-D-alanylo-glicylo-cynamonylopiperazyny.
b) chlorowodorek tyrozylo-D-treonylo-glicylo-fenyloalanylo-cynamonylopiperazyny
Trans-1-cynamonylo piperazynę acylowano t-Boc-Tyr-D-Thr-Gly-Phe, przy użyciu N,N-dicykloheksylokarbodiimidu za pomocą metody sprzęgania N-hydroksysukcynimidu w roztworze N,N-dimetyloformamidu. Po odsączeniu N,N'-dicykloheksylomocznika, surowy produkt pośredni został wytrącony wodą. Osad przemywano trzy razy wodą i wysuszono. T-butyloksykarbonylową grupę ochronną usunięto z użyciem 5% chlorowodoru w octanie etylu. Surowy produkt końcowy w postaci soli (chlorowodorku) wytrącano eterem etylowym. Surowy produkt oczyszczono za pomocą preparatywnej HPLC w układzie gradientu 0,5% kwas solny/etanol. Jako czysty produkt izolowano chlorowodorek tyrozyloD-treonylo-glicylo-fenyloalanylo-cynamonylopiperazyny (określanego jako peptydomimetyk 2)
c) dichlorowodorek tyrozylo-D-arginylo-cynamonylopiperazyny
Trans-1-cynamonylopiperazynę acylowano t-Boc-Tyr-D-Arg, przy użyciu N,N-dicykloheksylokarbodiimidu za pomocą metody sprzęgania N-hydroksysukcynimidu w roztworze N,N-dimetyloformamidu. Po odsączeniu N,N'-dicykloheksylomocznika, surowy produkt pośredni został wytrącony wodą. Osad przemywano trzy razy wodą i wysuszono. T-butyloksykarbonylową grupę ochronną usunięto z użyciem 5% chlorowodoru w octanie etylu. Surowy produkt końcowy w postaci soli (chlorowodorku) wytrącano eterem etylowym. Surowy produkt oczyszczono za pomocą preparatywnej HPLC w układzie gradientu 0,5% kwas solny/etanol. Jako czysty produkt izolowano dichlorowodorek tyrozylo-D-arginylo-cynamonylopiperazyny.
Analogicznie mogą być uzyskane szczególnie korzystne związki według wynalazku wybrane spośród:
Korzystnie, związek według wynalazku został wybrany z grupy składającej się z: tyrozylo-D-alanylo-glicylo-cynamylopiperazyny, tyrozylo-D-treonylo-glicylo-fenylo-cynamylopiperazyny, tyrozylo-D-arginylo-cynamylopiperazyny, i tyrozylo-D-treonylo-cynamylopiperazyny, L-tyrozylo-D-alanylo-L-fenyloalanylo-cynamylopiperazyny, L-tyrozylo-D-alanylo-L-tryptofylo-cynamylopiperazyny, L-tyrozylo-D-treonylo-L-fenyloalanylo-cynamylopiperazyny, L-tyrozylo-D-treonylo-L-tryptofylo-cynamylopiperazyny,
Wyżej wymienione związki otrzymuje się najpierw poprzez syntezę Boc-L-Tyr-D-Ala lub Boc-L-Tyr-D-Thr lub Boc-L-Tyr-D-Ala-Gly lub Boc-L-Tyr-D-Thr-Gly przy zastosowaniu żywicy 2-chlorotritylowej, gdzie wykorzystuje się Fmoc-zabezpieczone aminokwasy i metodę HATU/DIPEA w trakcie sprzęgania oraz 20% piperydynę w DMF w trakcie zdejmowania grup ochronnych. Po zdjęciu z żywicy za pomocą mieszaniny AcO:TFE:DCM, otrzymane produkty wykorzystuje się do zacytowania fenylalanylo-trans-1-cynamylopiperazyny oraz tryptofylo-trans-1-cynamylopiperazyny wykorzystując metodę TBTU/DIPEA. Grupa t-butyloksykarbonylowa usuwana jest za pomocą TFA:DCM.
Aby lepiej zilustrować aktywność prezentowanego wynalazku jak związku wykazującego efekt cytostatyczny i cytotoksyczny w stosunku do komórek nowotworowych jelit, poniżej przedstawiono przykład efektywnego działania na liniach komórkowych raka jelit. Przedstawiono także przykłady oddziaływania z receptorami opioidowymi.
P r z y k ł a d 1
Przeprowadzono ocenę hamowania migracji z wykorzystaniem płytek 24-dołkowych wyposażonych w inserty z membraną PET (polyethylene terephthalate). Doświadczenie wykonano dla stężeń IC50 badanych związków obserwując hamowanie migracji komórek, czyli ilości komórek wędrujących/przechodzących na dolną stronę membrany. Komórki po przejściu przez membranę były barwione fioletem krystalicznym i liczone.
PL 238 779 B1
A) TyrDAlaGlyPheCyn
Fenylalanylo-trans-1-cynamylopiperazyna została zacylowana za pomocą t-Boc-Tyr-D-Ala-Gly wykorzystując metodę TBTU/DIPEA. Produkt reakcji został wytrącony 10% NaHCQ3 i oddzielony od mieszaniny poreakcyjnej za pomocą filtracji. Osad został przemyty 3-krotnie wodą do momentu uzyskania neutralnego pH przesączu. Grupa t-butyloksykarbonylowa usunięta została za pomocą TFA:DCM (1:1). Surowy produkt oczyszczono za pomocą preparatywnego systemu HPLC w układzie gradientowym woda/metanol z dodatkiem 0.1% kwasu trifluorooctowego. Przeciwjon wymieniono na Cl- za pomocą żywicy jonowymiennej Dowex. Oczyszczony produkt hydrochlorek tyrozylo-D-alanylo-glicylo-fenyloalanylo-cynamylopiperayzyny zwany dalej TyrDAlaGlyPheCyn. Związek użyto w badaniach komórkowych:
- Dla komórek HT29 (rak jelita) wyznaczono hamowanie migracji do ok. 70% przy 150 μΜ.
- Dla komórek Colo205 (rak jelita) wyznaczono hamowanie migracji do ok. 60% przy 170 μmol.
- Dla komórek SW480 (rak jelita) wyznaczono hamowanie migracji do ok. 62% przy 304 μmol
- Dla komórek SW620 (rak jelita)wyznaczono hamowanie migracji do ok. 40% przy 400 μmol
B) TyrDAlaGlyTrpCyn
Tryptofylo-Trans-1-cynamylopiperazyna została zacylowana za pomocą t-Boc-Tyr-D-Ala-Gly wykorzystując metodę TBTU/DIPEA. Produkt reakcji został wytrącony 10% NaHCQ3 i oddzielony od mieszaniny poreakcyjnej za pomocą filtracji. Osad został przemyty 3-krotnie wodą do momentu uzyskania neutralnego pH przesączu. Grupa t-butyloksykarbonylowa usunięta została za pomocą TFA:DCM (1:1). Surowy produkt oczyszczono za pomocą preparatywnego systemu HPLC w układzie gradientowym woda/metanol z dodatkiem 0.1% kwasu trifluorooctowego. Przeciwjon wymieniono na Cl- za pomocą żywicy jonowymiennej Dowex. Oczyszczony produkt hydrochlorek tyrozylo-D-alanylo-glicylo-tryptofylocynamylopieparyzyny jest zwany dalej TyrDAlaGlyTrpCyn. Związek użyto w badaniach komórkowych: - Dla komórek HT29 (rak jelita) wyznaczono hamowanie migracji do ok. 50% przy 300 μΜ.
- Dla komórek Colo205 (rak jelita) wyznaczono hamowanie migracji do ok. 40% przy 280 μmol.
- Dla komórek SW480 (rak jelita) wyznaczono hamowanie migracji do ok. 33% przy 291 μmol
- Dla komórek SW620 (rak jelita) wyznaczono hamowanie migracji do ok. 28% przy 452 μmol
C) TyrDThrGlyPheCyn
Fenylalanylo-trans-1-cynamylopiperazyna została zacylowana za pomocą t-Boc-Tyr-D-Thr-Gly wykorzystując metodę TBTU/DIPEA. Produkt reakcji został wytrącony 10% NaHCQ3 i oddzielony od mieszaniny poreakcyjnej za pomocą filtracji. Osad został przemyty 3-krotnie wodą do momentu uzyskania neutralnego pH przesączu. Grupa t-butyloksykarbonylowa usunięta została za pomocą TFA:DCM (1:1). Surowy produkt oczyszczono za pomocą preparatywnego systemu HPLC w układzie gradientowym woda/metanol z dodatkiem 0.1% kwasu trifluorooctowego. Przeciwjon wymieniono na Cl- za pomocą żywicy jonowymiennej Dowex. Oczyszczony produkt hydrochlorek tyrozylo-D-treonylo-glicylo-fenyloalanylo-cynamylopiperayzyny zwany dalej TyrDThrGlyPheCyn. Związek użyto w badaniach komórkowych:
- Dla komórek SW480 (rak jelita) wyznaczono hamowanie migracji do ok. 45% przy 430 μmol
D) TyrDThrGlyTrpCyn
Tryptofylo-Trans-1-cynamylopiperazyna została zacylowana za pomocą t-Boc-Tyr-D-Thr-Gly wykorzystując metodę TBTU/DIPEA. Produkt reakcji został wytrącony 10% NaHCQ3 i oddzielony od mieszaniny poreakcyjnej za pomocą filtracji. Osad został przemyty 3-krotnie wodą do momentu uzyskania neutralnego pH przesączu. Grupa t-butyloksykarbonylowa usunięta została za pomocą TFA:DCM (1:1). Surowy produkt oczyszczono za pomocą preparatywnego systemu HPLC w układzie gradientowym woda/metanol z dodatkiem 0.1% kwasu trifluorooctowego. Przeciwjon wymieniono na Cl- za pomocą żywicy jonowymiennej Dowex. Oczyszczony produkt hydrochlorek tyrozylo-D-treonylo-glicylo-tryptofylocynamylopieparyzyny jest zwany dalej TyrDThrGlyTrpCyn. Związek użyto w badaniach komórkowych: - Dla komórek SW480 (rak jelita) wyznaczono hamowanie migracji do ok. 39% przy 426 μmol
- Dla komórek SW620 (rak jelita)wyznaczono hamowanie migracji do ok. 33% przy 552 μmol
P r z y k ł a d 2
Przeprowadzono ocenę wpływu badanych związków na wzrost komórek metodą kolorymetryczną z użyciem odczynnika MTT lub XTT wyznaczając IC50. Testy były oparte na redukcji soli pod wpływem
PL 238 779 B1 mitochondrialnej dehydrogenazy, aktywnych metabolicznie komórek. Barwny produkt redukcji oznaczano spektrofotometrycznie i w ten sposób oznaczano ilość żywych komórek.
A) TyrDAlaGlyPheCyn (związek otrzymany według schematu pokazanego w przykładzie 1)
- Dla komórek HT29 (rak jelita) wyznaczono IC50 dla 150 μΜ.
- Dla komórek Colo205 (rak jelita) wyznaczono IC50 dla 170 μταΙ.
- Dla komórek HCT116 (rak jelita) wyznaczono IC50 dla 284 μταΙ.
- Dla komórek SW480 (rak jelita) wyznaczono IC50 dla 304 μταΙ
- Dla komórek SW620 (rak jelita) wyznaczono IC50 dla 400 μταΙ
B) TyrDAlaGlyTrpCyn (związek otrzymany według schematu pokazanego w przykładzie 1)
- Dla komórek HT29 (rak jelita) wyznaczono IC50 dla 300 μΜ.
- Dla komórek Colo205 (rak jelita) wyznaczono IC50 dla 280 μταΙ.
- Dla komórek HCT116 (rak jelita) wyznaczono IC50 dla 321 μταΙ.
- Dla komórek SW480 (rak jelita) wyznaczono IC50 dla 291 μταΙ
- Dla komórek SW620 (rak jelita) wyznaczono IC50 dla 452 μταΙ
C) TyrDThrGlyPheCyn (związek otrzymany według schematu pokazanego w przykładzie 1) - Dla komórek HCT116 (rak jelita) wyznaczono IC50 dla 557 μταΙ.
- Dla komórek SW480 (rak jelita) wyznaczono IC50 dla 430 μταΙ
- Dla komórek SW620 (rak jelita) wyznaczono IC50 dla 634 μταΙ
D) TyrDThrGlyTrpCyn (związek otrzymany według schematu pokazanego w przykładzie 1)
- Dla komórek HT29 (rak jelita) wyznaczono IC50 dla 500 μΜ.
- Dla komórek Colo205 (rak jelita) wyznaczono IC50 dla 610 μταΙ.
- Dla komórek HCT116 (rak jelita) wyznaczono IC50 dla 403 μταΙ.
- Dla komórek SW480 (rak jelita) wyznaczono IC50 dla 426 μταΙ
- Dla komórek SW620 (rak jelita) wyznaczono IC50 dla 552 μταΙ
P r z y k ł a d 3
Tryptαfylα-Trans-1-cynaτylαpiperazyna została zacytowana za pomocą t-Bαc-Tyr-D-Ala-Gly wykorzystując metodę TBTU/DIPEA. Produkt reakcji został wytrącony 10% NaHCO3 i αddzielαny αd τieszaniny poreakcyjnej za pomocą filtracji. Osad został przemyty 3-krotnie wodą do momentu uzyskania neutralnego pH przesączu. Grupa t-butyloksykarbonylowa usunięta została za pomocą TFA:DCM (1:1). Surowy produkt αczyszczαnα za pomocą preparatywnego systemu HPLC w układzie gradientowym wαda/τetanαl z dαdatkieτ 0.1% kwasu trifluαrααctαwegα. Przeciwjαn wyτieniαnα na O- za pomocą żywicy jonowymiennej Dowex. Oczyszczαny produkt hydrochtorek tyrαzylα-D-alanylα-glicylα-tryptαfylαcynaτylαpiperyzyny jest zwany dalej TyrDAlaGlyTrpCyn. Tryptαfylα-Trans-1-cynaτylαpiperazyna została zacytowana za pomocą t-Bαc-Tyr-D-Thr-Gly wykorzystując metodę TBTU/DIPEA. Produkt reakcji został wytrącony 10% NaHCO3 i αddzielαny αd τieszaniny pαreakcyjnej za pomocą filtracji. Osad został przeτyty 3-krotnie wodą do momentu uzyskania neutralnego pH przesączu. Grupa t-butylαksykarbαnylowa usunięta została za pomocą TFA:DCM (1:1). Surowy produkt oczyszczono za pomocą preparatywnego systemu HPLC w układzie gradientαwyτ wαda/τetanαl z dαdatkieτ 0.1% kwasu trifluαrααctαwegα. Przeciwjαn wyτieniαnα na O- za pomocą żywicy jonowymiennej Dowex. Oczyszczony produkt hydrochtorek tyrαzylα-D-treαnylα-glicylα-tryptαfylα-cynaτylαpiperyzyny jest zwany dalej TyrDThrGlyTrpCyn. Fenylalanylα-trans-1-cynamylopiperazyna została zacylowana za pomocą t-Bαc-Tyr-D-Ala-Gly wykorzystując metodę TBTU/DIPEA. Produkt reakcji został wytrącony 10% NaHCO3 i αddzielαny od mieszaniny poreakcyjnej za pomocą filtracji. Osad został przemyty 3-krotnie wodą do momentu uzyskania neutralnego pH przesączu. Grupa t-butyloksykarbonylowa usunięta została za pomocą TFA:DCM (1:1). Surowy produkt oczyszczono za pomocą preparatywnego systemu HPLC w układzie gradientαwyτ wαda/τetanαl z dαdatkieτ 0.1% kwasu trifluαrααctαwegα. Przeciwjαn wyτieniαnα na Oza pomocą żywicy jonowymiennej Dowex. Oczyszczony produkt hydrochlorek tyrozylo-D-alanylα-glicylα-fenylαalanylα-cynaτylαpiperayzyny jest zwany datoj TyrDAlaGlyPheCyn.
Fenylalanylα-trans-1-cynamylopiperazyna została zacylowana za pomocą t-Bαc-Tyr-D-Thr-Gly wykorzystując metodę TBTU/DIPEA. Produkt reakcji został wytrącony 10% NaHCO3 i αddzielαny αd mieszaniny poreakcyjnej za pomocą filtracji. Osad został przemyty 3-krotnie wodą do momentu uzyskania neutralnegα pH przesączu. Grupa t-butyloksykarbonylowa usunięta została za pomocą TFA:DCM (1:1). Surowy produkt oczyszczono za pomocą preparatywnego systemu HPLC w układzie gradiento
PL 238 779 B1 wym woda/metanol z dodatkiem 0.1% kwasu trifluorooctowego. Przeciwjon wymieniono na Cl- za pomocą żywicy jonowymiennej Dowex. Oczyszczony produkt hydrochlorek tyrozylo-D-treonylo-glicylo-fenyloalanylo-cynamylopiperazyny jest zwany dalej TyrDThrGlyPheCyn.
Badanie powinowactwa receptorowego analizowanych związków zbadano metodą radioizotopową polegającą na konkurencyjnym wiązaniu 0.5 nM selektywnego radioaktywnego agonisty receptora opioidowego μ:[3H]DAMGO oraz δ:[3H]DELT w obecności rosnących stężeń badanych związków w postaci nieznakowanej (10-10,5 - 10-6) wykazało wartości:
TyrDAlaGlyPheCyn - dla receptora μ poniżej 1,7 a dla receptora δ poniżej 11 TyrDAlaGlyTrpCyn - dla receptora μ poniżej 76 a dla receptora δ poniżej 250 TyrDThrGlyPheCyn - dla receptora μ poniżej 1,7 a dla receptora δ poniżej 1,4 TyrDThrGlyTrpCyn - dla receptora μ poniżej 4,5 a dla receptora δ poniżej 56 Co świadczy o zdolności do wiązania się badanych związków do zastosowanych receptorów.

Claims (12)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Związek wybrany spośród: tyrozylo-D-alanylo-glicylo-fenyloalanylo-cynamylopiperazyny (TyrDAlaGlyPheCyn), tyrozylo-D-alanylo-glicylo-tryptofylo-cynamylopiperyzyny (TyrDAlaGlyTrpCyn), tyrozylo-D-treonylo-glicylo-fenyloalanylo-cynamylopiperazyny (TyrDThrGlyPheCyn), tyrozylo-D-treonylo-glicylo-tryptofylo-cynamylopiperazyny (TyrDThrGlyTrpCyn), lub ich farmaceutycznie dopuszczalnych soli.
  2. 2. Związek określony w zastrz. 1 do stosowania w leczeniu lub zapobieganiu nowotworu jelita.
  3. 3. Związek do stosowania według zastrz. 2, znamienny tym, że jest stosowany w postaci przeznaczonej do podawania doustnego, iniekcyjnego lub dożylnego.
  4. 4. Związek do stosowania według zastrz. 2, znamienny tym, że jest stosowany w postaci doustnej tabletki do podawania bezpośrednio do układu pokarmowego lub wlewu dożylnego do podawania obwodowego lub zastrzyku do iniekcji guza i jego okolic.
  5. 5. Związek do stosowania według zastrz. 2, znamienny tym, że jest stosowany w postaci wielolekowej kompozycji farmaceutycznej, korzystnie zawierającej dodatkowo opioid o działaniu przeciwbólowym lub/i lek przeciwnowotworowy.
  6. 6. Związek do stosowania według zastrz. 2, znamienny tym, że jest przeznaczony do stosowania w klasycznej chemioterapii raka jelita prowadzonej przedoperacyjnie (terapia neo-adiuwantowa) lub pooperacyjnie (terapia adiuwantowa) lub w chemioterapii nieoperacyjnego raka jelita lub w jej wspomaganiu lub jest przeznaczony do stosowania do zabezpieczania jelit przed przerzutem do nich nowotworu pochodzącego z innej tkanki.
  7. 7. Związek określony w zastrz. 1 do stosowania w terapii przeciwbólowej jako antagonista leków opioidowych.
  8. 8. Związek do stosowania według zastrz. 7, znamienny tym, że jest przeznaczony do podawania doustnego lub obwodowego w celu eliminowania zaparć wywoływanych przez leki opioidowe.
  9. 9. Związek do stosowania według zastrz. 7, znamienny tym, że jest przeznaczony do oddziaływania na receptory opioidów.
  10. 10. Związek do stosowania według zastrz. 7, znamienny tym, że jest stosowany w postaci doustnej tabletki do podawania bezpośrednio do układu pokarmowego, lub wlewu dożylnego do podawania obwodowego.
  11. 11. Związek do stosowania według zastrz. 7, znamienny tym, że jest stosowany w postaci wielolekowej kompozycji farmaceutycznej, korzystnie zawierającej opioid stosowany w terapii przeciwbólowej.
  12. 12. Związek do stosowania według zastrz. 1 albo zastrz. 7, znamienny tym, że jest stosowany w postaci kompozycji zawierającej polimer stanowiący nośnik substancji aktywnej.
PL419612A 2016-11-28 2016-11-28 Peptydomimetyki i ich zastosowanie w terapii nowotworowej jelit oraz w zapewnieniu ich prawidłowej perystaltyki PL238779B1 (pl)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL419612A PL238779B1 (pl) 2016-11-28 2016-11-28 Peptydomimetyki i ich zastosowanie w terapii nowotworowej jelit oraz w zapewnieniu ich prawidłowej perystaltyki
PCT/PL2017/050057 WO2018097741A1 (en) 2016-11-28 2017-11-28 Peptidomimetics and their use in therapy
US16/464,532 US20190375787A1 (en) 2016-11-28 2017-11-28 Peptidomimetics and their use in therapy
EP17872975.2A EP3544622A4 (en) 2016-11-28 2017-11-28 PEPTIDOMIMETICS AND THEIR THERAPEUTIC USE

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL419612A PL238779B1 (pl) 2016-11-28 2016-11-28 Peptydomimetyki i ich zastosowanie w terapii nowotworowej jelit oraz w zapewnieniu ich prawidłowej perystaltyki

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL419612A1 PL419612A1 (pl) 2018-06-04
PL238779B1 true PL238779B1 (pl) 2021-10-04

Family

ID=62223383

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL419612A PL238779B1 (pl) 2016-11-28 2016-11-28 Peptydomimetyki i ich zastosowanie w terapii nowotworowej jelit oraz w zapewnieniu ich prawidłowej perystaltyki

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL238779B1 (pl)

Also Published As

Publication number Publication date
PL419612A1 (pl) 2018-06-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP1957516B1 (en) Alfa-helix mimetics and method relating to the treatment of cancer stem cells
CN106470696B (zh) 用于治疗癌症的药物组合
TR201809734T4 (tr) Seçici opioid bileşikler.
US20210283109A1 (en) Heterocyclic diamidines
JP2024088768A (ja) カンナビノイドプロドラッグ化合物
CN101102776B (zh) 抗肿瘤药
WO2007109620A2 (en) Macrocyclic peptides and methods for making and using them
PL238779B1 (pl) Peptydomimetyki i ich zastosowanie w terapii nowotworowej jelit oraz w zapewnieniu ich prawidłowej perystaltyki
US10344053B2 (en) Inhibitors for inhibiting tumor metastasis
JP7223502B6 (ja) 医薬組成物
CA2720516C (en) Indoline anti-cancer agents
DK2699580T3 (en) DIAZONAMI DISEASES
PL201289B1 (pl) Zastosowanie pochodnej a-halogenoakryloilodystamycyny do wytwarzania leku do leczenia nowotworów u ludzi
WO2018097741A1 (en) Peptidomimetics and their use in therapy
PL238778B1 (pl) Peptydomimetyki i ich zastosowanie w terapii nowotworu trzustki
JP2005516060A (ja) 新規なオピオイド誘導体
EP4347618B1 (en) Cyclic peptide antibiotics
US12297175B2 (en) Physics-driven discovery of novel small therapeutic compounds for use as a BCL-2 inhibitor
US20230073261A1 (en) Drg-mdm2-1 for use as a novel mouse double minute 2 (mdm2) inhibitor
US20230071340A1 (en) Drg-mdm2-4 for use as a novel mouse double minute 2 (mdm2) inhibitor
WO2021167572A1 (en) Drg-mdm2-3 for use as a novel mouse double minute 2 (mdm2) inhibitor
HK40111202A (zh) 环肽抗生素
WO2021167574A1 (en) Drg-mdm2-5 for use as a novel mouse double minute 2 (mdm2) inhibitor
WO2021167571A1 (en) Drg-mdm2-2 for use as a novel mouse double minute 2 (mdm2) inhibitor
WO2021167575A1 (en) Drg-mdm2-6 for use as a novel mouse double minute 2 (mdm2) inhibitor