PL241381B1 - Alkoholowy ekstrakt etanolowy z roślin z rodzaju Cannabis do zastosowania w preparatach zabezpieczających pszczoły przed szkodliwym działaniem insektycydów z grupy neonikotynoidów i zwalczających nosemozę - Google Patents
Alkoholowy ekstrakt etanolowy z roślin z rodzaju Cannabis do zastosowania w preparatach zabezpieczających pszczoły przed szkodliwym działaniem insektycydów z grupy neonikotynoidów i zwalczających nosemozę Download PDFInfo
- Publication number
- PL241381B1 PL241381B1 PL433703A PL43370320A PL241381B1 PL 241381 B1 PL241381 B1 PL 241381B1 PL 433703 A PL433703 A PL 433703A PL 43370320 A PL43370320 A PL 43370320A PL 241381 B1 PL241381 B1 PL 241381B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- cannabis
- bees
- extract
- food
- fed
- Prior art date
Links
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 64
- 241000218236 Cannabis Species 0.000 title claims abstract description 13
- 239000002917 insecticide Substances 0.000 title claims abstract description 10
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 title claims abstract description 6
- 241000257303 Hymenoptera Species 0.000 title claims description 68
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 13
- 241001126829 Nosema Species 0.000 title abstract description 23
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 235000008697 Cannabis sativa Nutrition 0.000 claims abstract description 21
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 claims abstract description 21
- 235000005607 chanvre indien Nutrition 0.000 claims abstract description 21
- 240000004308 marijuana Species 0.000 claims abstract description 21
- 244000213578 camo Species 0.000 claims abstract description 19
- 235000009120 camo Nutrition 0.000 claims abstract description 17
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 7
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 claims description 3
- AZHSSKPUVBVXLK-UHFFFAOYSA-N ethane-1,1-diol Chemical compound CC(O)O AZHSSKPUVBVXLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- WCXDHFDTOYPNIE-RIYZIHGNSA-N (E)-acetamiprid Chemical compound N#C/N=C(\C)N(C)CC1=CC=C(Cl)N=C1 WCXDHFDTOYPNIE-RIYZIHGNSA-N 0.000 abstract description 9
- 239000005875 Acetamiprid Substances 0.000 abstract description 9
- 239000005906 Imidacloprid Substances 0.000 abstract description 9
- 229940056881 imidacloprid Drugs 0.000 abstract description 9
- YWTYJOPNNQFBPC-UHFFFAOYSA-N imidacloprid Chemical compound [O-][N+](=O)\N=C1/NCCN1CC1=CC=C(Cl)N=C1 YWTYJOPNNQFBPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 8
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 abstract description 5
- 241000256837 Apidae Species 0.000 abstract description 4
- 230000003053 immunization Effects 0.000 abstract description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 35
- 235000020374 simple syrup Nutrition 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 240000000278 Syzygium polyanthum Species 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- 240000000630 Hedysarum occidentale Species 0.000 description 4
- ZTGXAWYVTLUPDT-UHFFFAOYSA-N cannabidiol Natural products OC1=CC(CCCCC)=CC(O)=C1C1C(C(C)=C)CC=C(C)C1 ZTGXAWYVTLUPDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- NGGMYCMLYOUNGM-UHFFFAOYSA-N (-)-fumagillin Natural products O1C(CC=C(C)C)C1(C)C1C(OC)C(OC(=O)C=CC=CC=CC=CC(O)=O)CCC21CO2 NGGMYCMLYOUNGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- NGGMYCMLYOUNGM-CSDLUJIJSA-N fumagillin Chemical compound C([C@H]([C@H]([C@@H]1[C@]2(C)[C@H](O2)CC=C(C)C)OC)OC(=O)\C=C\C=C\C=C\C=C\C(O)=O)C[C@@]21CO2 NGGMYCMLYOUNGM-CSDLUJIJSA-N 0.000 description 3
- 229960000936 fumagillin Drugs 0.000 description 3
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- MGSRCZKZVOBKFT-UHFFFAOYSA-N thymol Natural products CC(C)C1=CC=C(C)C=C1O MGSRCZKZVOBKFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N Resveratrol Natural products OC1=CC=CC(C=CC=2C=C(O)C(O)=CC=2)=C1 QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005844 Thymol Substances 0.000 description 2
- 206010070863 Toxicity to various agents Diseases 0.000 description 2
- QHMBSVQNZZTUGM-UHFFFAOYSA-N Trans-Cannabidiol Natural products OC1=CC(CCCCC)=CC(O)=C1C1C(C(C)=C)CCC(C)=C1 QHMBSVQNZZTUGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N Trans-resveratrol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1\C=C\C1=CC(O)=CC(O)=C1 LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 238000009341 apiculture Methods 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 2
- QHMBSVQNZZTUGM-ZWKOTPCHSA-N cannabidiol Chemical compound OC1=CC(CCCCC)=CC(O)=C1[C@H]1[C@H](C(C)=C)CCC(C)=C1 QHMBSVQNZZTUGM-ZWKOTPCHSA-N 0.000 description 2
- 229950011318 cannabidiol Drugs 0.000 description 2
- CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N delta1-THC Chemical compound C1=C(C)CC[C@H]2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3[C@@H]21 CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002803 maceration Methods 0.000 description 2
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 2
- 239000005445 natural material Substances 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 2
- 229940016667 resveratrol Drugs 0.000 description 2
- 235000021283 resveratrol Nutrition 0.000 description 2
- 229960000790 thymol Drugs 0.000 description 2
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 2
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 2
- 241000256848 Apis florea Species 0.000 description 1
- 241001225321 Aspergillus fumigatus Species 0.000 description 1
- VBGLYOIFKLUMQG-UHFFFAOYSA-N Cannabinol Chemical compound C1=C(C)C=C2C3=C(O)C=C(CCCCC)C=C3OC(C)(C)C2=C1 VBGLYOIFKLUMQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000963787 Cryptocarya alba Species 0.000 description 1
- XXGMIHXASFDFSM-UHFFFAOYSA-N Delta9-tetrahydrocannabinol Natural products CCCCCc1cc2OC(C)(C)C3CCC(=CC3c2c(O)c1O)C XXGMIHXASFDFSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 108090000192 Methionyl aminopeptidases Proteins 0.000 description 1
- 241000243190 Microsporidia Species 0.000 description 1
- 201000000090 Microsporidiosis Diseases 0.000 description 1
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 1
- 241000241413 Propolis Species 0.000 description 1
- 108091027967 Small hairpin RNA Proteins 0.000 description 1
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- CYQFCXCEBYINGO-UHFFFAOYSA-N THC Natural products C1=C(C)CCC2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3C21 CYQFCXCEBYINGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000002657 Thymus vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000007303 Thymus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 241000895647 Varroa Species 0.000 description 1
- 241001558516 Varroa destructor Species 0.000 description 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000012675 alcoholic extract Substances 0.000 description 1
- -1 amide derivatives of protoporphyrin Chemical class 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229930003827 cannabinoid Natural products 0.000 description 1
- 239000003557 cannabinoid Substances 0.000 description 1
- 229940065144 cannabinoids Drugs 0.000 description 1
- 229960003453 cannabinol Drugs 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- PCXRACLQFPRCBB-ZWKOTPCHSA-N dihydrocannabidiol Natural products OC1=CC(CCCCC)=CC(O)=C1[C@H]1[C@H](C(C)C)CCC(C)=C1 PCXRACLQFPRCBB-ZWKOTPCHSA-N 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000012154 double-distilled water Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 244000053095 fungal pathogen Species 0.000 description 1
- 230000030279 gene silencing Effects 0.000 description 1
- 150000003949 imides Chemical class 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 235000021056 liquid food Nutrition 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 1
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 229940069949 propolis Drugs 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 235000021055 solid food Nutrition 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000001585 thymus vulgaris Substances 0.000 description 1
- 125000003639 thymyl group Chemical group C1(=CC(C)=CC=C1C(C)C)* 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Przedmiotem wynalazku jest ekstrakt sporządzony przy pomocy wodnego roztworu alkoholu etylowego, z korzeni łodyg czy też liści roślin należących do rodzaju Cannabis, takich jak Cannabis sativa, Cannabis indica i Cannabis ruderalis, uodparniający pszczoły miodne przed szkodliwym działaniem insektycydów z grupy neonikotynoidów, najczęściej stosowanych imidaclopridem oraz acetamipridem, a także wykazujący aktywność w zwalczaniu nosemozy wywołanej zakażeniem zarodnikami grzyba Nosema spp.
Description
Przedmiotem wynalazku jest ekstrakt sporządzony przy pomocy wodnego roztworu alkoholu etylowego, z korzeni, łodyg czy liści roślin należących do rodzaju Cannabis, takich jak, Cannabis sativa, Cannabis indica i Cannabis ruderalis, uodparniający pszczoły miodne przed szkodliwym działaniem insektycydów z grupy neonikotynoidów, najczęściej stosowanych - imidaclopridem oraz acetamipridem, a także wykazujący aktywność w zwalczaniu nosemozy wywołanej zakażeniem zarodnikami grzyba Nosema spp.
Dotychczas, w leczeniu nosemozy u pszczół stosuje się powszechnie leki na bazie fumagiliny. Jest to substancja wyizolowana z grzyba Aspergillus fumigatus, której działanie polega jedynie na hamowaniu aktywności enzymu aminopeptydazy metioninowej MetAP-2, bez niszczenia zarodników Nosema spp., co w konsekwencji prowadzi do stopniowego rozwoju oporności grzyba na ten antybiotyk. Ponadto, fumagilina dodana do syropu cukrowego, który podaje się pszczołom, trudno rozpuszcza się w wodzie. Konieczne jest więc stosowanie różnych dodatków chemicznych zwiększających rozpuszczalność antybiotyku w roztworach wodnych. Niestety, takie postępowanie grozi możliwością przenikania do miodu samej fumagiliny lub produktów jej metabolizmu. Alternatywę dla antybiotyków na bazie fumagiliny, w leczeniu nosemozy pszczoły karłowatej (Apis florea), zaproponował Suwannapong i in. w publikacji zamieszczonej w Journal of Asia-Pacific Entomology, nr 21, 2018 r. 437-444, używając ekstraktów etanolowych, przygotowanych na bazie propolisu.
Inny, znany z opisu patentowego MX 2011011839, sposób zapobiegania i zwalczania nosemozy u pszczół, polega na wyciszaniu wybranych genów Nosema spp. W tym celu stosuje się odpowiednie konstrukty genetyczne lub cząsteczki kwasów nukleinowych (np. siRNAs, miRNAs and shRNAs), które są funkcjonalnie związane z białkami penetrującymi komórkę. Niestety, metoda ta również nie gwarantuje dostatecznej skuteczności zwalczania nosemozy u pszczół. Dodatkowo, wiąże się ona z koniecznością użycia drogich technik otrzymywania i oczyszczania genów, a sama idea aplikowania pszczołom preparatów na bazie modyfikowanych genetycznie związków jest dyskusyjna i trudno ją powszechnie zaakceptować.
Z opisu patentowego PL 232685, znany jest preparat podnoszący odporność pszczół, jednak nie wykazano jego działania dotyczącego zwiększenia przeżywalności pszczół poddanych działaniu neonikotynoidów.
Z opisu patentowego PL 231692, znany jest również preparat do zwalczania mikrospor ydioz, a zwłaszcza nosemozy u pszczół, zawierający jedną z rozprowadzonych homogenicznie, amidowych pochodnych protoporfiryny. Z uwagi na fakt, iż miód oraz inne produkty pszczele wykorzystywane są jako pokarm, suplementy diety itp., preparaty przeznaczone dla pszczół powinny bazować na dobrze poznanych, najlepiej naturalnych substancjach, bezpiecznych zarówno dla pszczół jak i dla ludzi, łatwo degradowalnych i niepowodujących zmian genetycznych w organizmach tych pożytecznych owadów.
W literaturze istnieją doniesienia o stosowaniu produktów leczniczych w pszczelarstwie, zawierających ekstrakty z substancji naturalnego pochodzenia. Jednym z takich jest tymol i resweratrol, substancje wyekstrahowane z ziela tymianku (Thymus spp.) i używane w walce z warrozą. Jednakże, jak wynika z eksperymentu przeprowadzonego przez Maistrello i in., opublikowanego w czasopiśmie Apidologie, nr 41, 2008, 141-150, tymol i resweratrol, będące naturalnymi związkami fenolowymi, w wyższych stężeniach, wykazują toksyczność wobec organizmów pszczół. Z kolei Bravo i in. w artykule opublikowanym na łamach Journal of Invertebrate Pathology, nr 149, 2017 r., 141-147, w badaniach in vivo wykazali zarówno aktywność ekstraktu uzyskanego z liści Cryptocarya alba wobec mikrosporydiów Nosema spp., którymi zakażono pszczoły, jak i brak jego toksyczności w pierwszych 8. dniach badania, a więc w stosunkowo krótkim czasie, co nie daje pewności braku toksycznego działania ekstraktu w dłuższym czasie jego podawania pszczołom.
Znane ze stanu techniki, naturalne substancje do zwalczania chorób grzybowych, występujących w pszczelarstwie, wymagają użycia stosunkowo dużych dawek, co niekiedy wywołuje skutki uboczne dla samych pszczół czy też wytwarzanych przez nie produktów. Wszystkie produkty lecznicze stosowane dotychczas w walce z groźną chorobą pszczół jaką jest nosemoza, wykazują w różnym stopniu działania jedynie ograniczające infekcję spowodowaną Nosema spp., a zatem niezbędne są dalsze badania w tym zakresie.
Ważnym powodem corocznego ginięcia znacznej liczby rodzin pszczelich, jest nie tylko nosemoza czy warroza powodowana nadmiernym namnażaniem się pasożyta V. destructor, równie duży
PL 241 381 B1 niepokój wyrażają upadki rodzin pszczelich poza ulem. Udowodniono, że za masowym wymieraniem pszczół stoją środki używane do zwalczania szkodników w uprawach rolnych i lasach, owadobójcze - neonikotynoidy - neuroaktywne substancje z grupy pestycydów znacząco zaburzające orientację pszczół i ich komunikację, mogące być powodem masowego wymierania całych rodzin. Spryskiwanie nasion nikotynoidami powoduje przenikanie takich związków do całej rośliny, w tym do kwiatów i pyłku. Pszczoły, zbierając pyłek i zanosząc go do ula, w zasadzie transportują truciznę, która wpływa nie tylko na pszczoły pracujące poza ulem, ale także na te, które go nie opuszczają, w tym na królową. Dotychczas, w zabezpieczaniu pszczół przed niekorzystnym działaniem insektycydów z grupy neonikotynoidów nie są znane żadne preparaty, toteż podjęto badania w kierunku opracowania takich preparatów naturalnego pochodzenia. Jak podają Krause i in. oraz Siudem i in. w artykułach zamieszczonych w czasopiśmie Farmacja Współczesna nr 9 z 2016 oraz nr 8 z 2015 r., konopie z rodzaju Cannabis zawierają około 500 różnych związków, z czego ponad 80 stanowią kannabinoidy. To właśnie dzięki nim konopie znajdują zastosowanie w lecznictwie, zarówno jako substancje powodujące odurzenia narkotyczne jak Δ9-tetrahydrokannabinol Δ9 - THC, jak i substancje niepowodujące odurzenia narkotycznego, takie jak, kannabinol CBN, kannabidiol CBD i inne.
Celem wynalazku było opracowanie skutecznego, o szerokim spektrum działania i niepowodującego skutków ubocznych, preparatu roślinnego skutecznie zabezpieczającego pszczoły przed niekorzystnym działaniem insektycydów jak i zwalczającego mikrosporydiozy.
Nieoczekiwanie okazało się, że wyekstrahowane wodnym roztworem alkoholu etylowego ekstrakty z korzeni, liści lub łodyg roślin należących do rodzaju Cannabis zarówno przedłużają życie pszczół narażonych na pestycydy z grupy najczęściej występujących nikotynoidów, takich jak, imidacloprid oraz acetamiprid, jak i powodują spadek ilości zarodników chorobotwórczych grzyba Nosema spp., co znacznie ogranicza rozwój nosemozy u pszczoły miodnej.
Istotą wynalazku jest więc alkoholowy ekstrakt z korzeni, liści lub łodyg roślin należących do rodzaju Cannabis, takich jak, Cannabis sativa, Cannabis indica i Cannabis ruderalis, sporządzony przy pomocy wodnego roztworu alkoholu etylowego, korzystnie 65-80%, przydatny do zastosowania w preparatach zabezpieczających pszczoły przed szkodliwym działaniem insektycydów z grupy neonikotynoidów i zwalczających nosemozę.
Jak wykazano w przykładach, ekstrakt według wynalazku, to substancja nietoksyczna, przedłużająca życie pszczół narażonych na insektycydy oraz wykazująca wysoki poziom terapeutyczny zakażeń pszczół miodnych grzybami Nosema spp.
Wynalazek i jego skuteczność działania przedstawiono w poniższych przykładach wykonania.
P r z y k ł a d 1
Poszczególne części roślin jak, korzenie, liście i łodygi roślin Cannabis sativa L., Cannabis indica i Cannabis ruderalis przechowywane w suchym, zacienionym miejscu, zmielono, przesiano przez sita (5,6 mm), po czym odważono po 50 g, umieszczono w kolbach miarowych i zalewano 500 ml 80% wodnego roztworu etanolu. Po 24 godz. maceracji, próbki poddano działaniu ultradźwięków przez 15 minut w temperaturze pokojowej. Po dekantacji, roztwory przesączano przez bibułę filtracyjną. Czynność tę powtórzono jeszcze dwukrotnie, przy czym w ostatniej operacji zmniejszono ilość etanolu do 200 ml. Otrzymane ekstrakty zagęszczono, wysuszono i zliofilizowano.
P r z y k ł a d 2
Poszczególne części roślin jak, korzenie, liście i łodygi roślin Cannabis sativa L., Cannabis indica i Cannabis ruderalis przechowywane w suchym, zacienionym miejscu, zmielono, przesiano przez sita (5,6 mm), po czym odważono po 100 g, umieszczono w kolbach miarowych i zalewano 1000 ml 65% wodnego roztworu etanolu. Po 24 godz. maceracji, próbki poddano działaniu ultradźwięków przez 15 minut w temperaturze pokojowej. Po dekantacji, roztwory przesączano przez bibułę filtracyjną. Czynność tę powtórzono jeszcze dwukrotnie, przy czym w ostatniej operacji zmniejszono ilość etanolu do 400 ml. Otrzymane ekstrakty zagęszczono, wysuszono i zliofilizowano.
P r z y k ł a d 3. Działanie ekstraktów według wynalazku na przedłużanie życia pszczół poddanych działaniu insektycydów.
Liofilizaty z poszczególnych części roślin Cannabis, otrzymanych jak opisano w przykładach 1 i 2, dodawano do pokarmów pszczelich sporządzając mieszanki w postaci:
• Po 500 mg liofilizatu z korzeni Cannabis sativa L., Cannabis indica i Cannabis ruderalis, zmieszano z 250 g hydrolizatu skrobiowego rozpuszczonego w 250 mg przegotowanej wody.
PL 241 381 B1 • Po 100 g liofilizatu z liści Cannabis sativa L., Cannabis indica i Cannabis ruderalis rozpuszczono w 1 litrze ddH2O, po czym 100 ml tego roztworu dodano do 500 g cukru spożywczego rozpuszczonego w 500 g wody.
• Po 500 mg liofilizatu z łodyg Cannabis sativa L., Cannabis indica i Cannabis ruderalis, równomiernie wymieszano z 1,0 kg cukru pudru i 0,25 kg miodu ogrzanego do temp. 50°C.
Tak przygotowane pokarmy używano w temperaturze pokojowej do karmienia pszczół umieszczonych po 40 osobników w 30 standardowych klatkach, w czasie 8-dniowego eksperymentu.
Grupy badawcze to:
1. Imid - 3 klatki ze zdrowymi pszczołami dokarmianymi przez cały czas eksperymentu tylko czystym pokarmem, skażonymi 7. dnia imidaclopridem dodanym do pokarmu w ilości 2,5 mg na 100 ml.
2. Acet - 3 klatki ze zdrowymi pszczołami dokarmianymi przez cały czas eksperymentu tylko czystym pokarmem, skażonymi acetamipridem dodanym do pokarmu 7. dnia w ilości 2,5 mg na 100 ml.
3. ImidEx1 - 3 klatki ze zdrowymi pszczołami dokarmianymi przez 6 dni pokarmem z ekstraktem z korzeni Cannabis sativa L., w 7. dniu skażone imidaclopridem w dawce jak wyżej i przez dalsze dwa dni karmione pokarmem z ekstraktem z korzeni Cannabis sativa L.
4. lmidEx2 - 3 klatki ze zdrowymi pszczołami dokarmianymi przez 6 dni pokarmem z ekstraktem z korzeni Cannabis indica, w 7. dniu skażone imidaclopridem w dawce jak wyżej i przez dalsze dwa dni karmione pokarmem z ekstraktem z korzeni Cannabis indica.
5. lmidEx3 - 3 klatki ze zdrowymi pszczołami dokarmianymi przez 6 dni pokarmem z ekstraktem z korzeni Cannabis ruderalis, w 7. dniu skażone imidaclopridem w dawce jak wyżej i przez dalsze dwa dni karmione pokarmem z ekstraktem z korzeni Cannabis ruderalis.
6. AcetEx4 - 3 klatki ze zdrowymi pszczołami dokarmianymi przez 6 dni pokarmem z ekstraktem z liści Cannabis ruderalis, w 7. dniu skażone acetamipridem w dawce jak wyżej i przez dwa dni karmione pokarmem z ekstraktem z liści Cannabis ruderalis.
7. ImidEx5 - 3 klatki ze zdrowymi pszczołami dokarmianymi przez 6 dni pokarmem z ekstraktem z liści Cannabis indica, w 7. dniu skażone imidaclopridem w dawce jak wyżej i przez dwa dni dalej karmione pokarmem z ekstraktem z liści Cannabis indica.
8. AcetEx6 - 3 klatki ze zdrowymi pszczołami dokarmianymi przez 6 dni pokarmem z ekstraktem z łodyg Cannabis indica, w 7. dniu skażone acetamipridem w dawce jak wyżej i przez dwa dni dalej karmione pokarmem z ekstraktem z łodyg Cannabis indica.
9. AcetEx7 - 3 klatki ze zdrowymi pszczołami dokarmianymi przez 6 dni pokarmem z ekstraktem z łodyg Cannabis sativa L., w 7. dniu skażone acetamipridem w dawce jak wyżej i przez dwa dni dalej karmione pokarmem z ekstraktem z łodyg Cannabis sativa L.
10. AcetEx8 - 3 klatki ze zdrowymi pszczołami dokarmianymi przez 6 dni pokarmem z ekstraktem z liści Cannabis sativa L., w 7. dniu skażone acetamipridem w dawce jak wyżej i przez dwa dni dalej karmione pokarmem z ekstraktem z liści Cannabis sativa L.
Przeżywalność pszczół w poszczególnych klatkach w porównaniu do kontroli, przedstawiono w postaci tabeli 1. Najwięcej martwych pszczół notowano z grup Imid i Acet. Średnie arytmetyczne wyliczone z trzech klatek na koniec doświadczenia, wynosiły odpowiednio 5 oraz 7 żywych pszczół, natomiast najmniej martwych pszczół zanotowano dla grupy AcetEx8, gdzie liczba żywych pszczół na koniec doświadczenia wynosiła 19.
Mając na względzie naturalną umieralność pszczół, należy stwierdzić, iż ekstrakty według wynalazku to substancje przedłużające życie pszczół poddanych działaniu nikotynoidów w postaci acetamipridu i imidaclopridu.
P r z y k ł a d 4. Działanie preparatów według wynalazku na zwalczanie nosemozy.
Otrzymane w przykładzie 3, płynne i stałe pokarmy zawierające wyekstrahowane wyciągi z różnych części roślin z rodzaju Cannabis, używano w temperaturze pokojowej do karmienia pszczół sztucznie zakażonych Nosema spp. W 30 standardowych klatkach umieszczono po 40 pszczół sztucznie zakażonych Nosema spp., które dokarmiano przez okres 6 dni tworząc następujące grupy badawcze:
Zakażone - kontrola - 3 klatki pszczoły zakażone zarodnikami Nosema spp., karmione czystym syropem cukrowym.
Ex1 - 3 klatki pszczoły zakażone zarodnikami Nosema spp., karmione syropem cukrowym z dodatkiem ekstraktu z korzeni Cannabis sativa L. w dawce 1x10 j.w. ekstraktu w 1000 j.w. pokarmu.
PL 241 381 B1
Ex2 - 3 klatki pszczoły zakażone zarodnikami Nosema spp., karmione syropem cukrowym z dodatkiem ekstraktu z liści Cannabis sativa L. w dawce 4x10 j.w. ekstraktu w 1000 j.w. pokarmu.
Ex3 - 3 klatki pszczoły zakażone zarodnikami Nosema spp., karmione syropem cukrowym z dodatkiem ekstraktu z łodyg Cannabis sativa L. w dawce 6x10 j.w. ekstraktu w 1000 j.w. pokarmu.
Ex4 - 3 klatki pszczoły zakażone zarodnikami Nosema spp., karmione ciastem cukrowym z dodatkiem ekstraktu z łodyg Cannabis ruderalis w dawce 3x10 j.w. ekstraktu w 1000 j.w. pokarmu.
Ex5 - 3 klatki pszczoły zakażone zarodnikami Nosema spp., karmione ciastem cukrowym z dodatkiem ekstraktu z liści Cannabis ruderalis w dawce 5x10-1 j.w. ekstraktu na 1000 j.w. pokarmu.
Ex6 - 3 klatki pszczoły zakażone zarodnikami Nosema spp., karmione ciastem cukrowym z dodatkiem ekstraktu z korzenia Cannabis ruderalis w dawce 5x10-1 j.w. ekstraktu na 1000 j.w. pokarmu.
Ex7 - 3 klatki pszczoły zakażone zarodnikami Nosema spp., karmione syropem cukrowym z dodatkiem ekstraktu z łodyg Cannabis indica w dawce 3x10 j.w. ekstraktu w 1000 j.w. pokarmu.
Ex8 - 3 klatki pszczoły zakażone zarodnikami Nosema spp., karmione syropem cukrowym z dodatkiem ekstraktu z liści Cannabis indica w dawce 2x10 j.w. ekstraktu w 1000 j.w. pokarmu.
Ex9 - 3 klatki pszczoły zakażone zarodnikami Nosema spp., karmione ciastem cukrowym z dodatkiem ekstraktu z korzeni Cannabis indica w dawce 5x10 j.w. ekstraktu w 1000 j.w. pokarmu.
W końcowej fazie, z pszczół poddawanych eksperymentom, wykonywano standardowe rozciery do sporządzenia preparatów mikroskopowych. Zarodniki liczono w komorze Burkera obserwowanej w mikroskopie optycznym Olympus BX61 i porównywano z preparatem sporządzonym z rozcieru z pszczół zakażonych, nieleczonych ekstraktami według wynalazku.
W obrazach mikroskopowych zaobserwowano zmniejszoną ilość zarodników Nosema spp. wśród pszczół leczonych ekstraktami według wynalazku w stosunku do kontroli. Podczas gdy w grupie pszczół kontrolnych, nieleczonych, zakażenie rozwinęło się do poziomu 735 000 zarodników Nosema spp./pszczołę, to w grupie pszczół, którym podawano pokarm z ekstraktami z roślin z rodzaju Cannabis , liczba zarodników zmalała do granic do 31 000 zarodników/pszczołę.
Wyn iki eksperymentu przedstawiono na wykresie jako fig. 1 oraz w tabeli 2.
Wyniki jednoznacznie wskazują na dużą skuteczność ekstraktu według wynalazku.
P r z y k ł a d 5. Badanie toksyczności ekstraktów według wynalazku na organizmy pszczół.
W 10 klatkach umieszczono po 40 zdrowych pszczół i karmiono je pokarmami zawierającymi ekstrakty według wynalazku, odpowiednio:
Ex1 - syrop cukrowy z dodatkiem ekstraktu z korzeni Cannabis sativa L.
Ex2 - syrop cukrowy z dodatkiem ekstraktu z liści Cannabis sativa L.
Ex3 - ciasto cukrowe z dodatkiem ekstraktu z łodyg Cannabis sativa L.
Ex4 - syrop cukrowy z dodatkiem ekstraktu z liści Cannabis ruderalis
Ex5 - ciasto z dodatkiem ekstraktu z łodyg Cannabis ruderalis
Ex6 - ciasto z dodatkiem ekstraktu z korzeni Cannabis ruderalis
Ex7 - syrop cukrowy z dodatkiem ekstraktu z łodyg Cannabis indica
Ex8 - syrop cukrowy z dodatkiem ekstraktu z liści Cannabis indica
Ex9 - ciasto z dodatkiem ekstraktu z korzeni Cannabis indica
Dla porównania analogiczną liczbę pszczół umieszczono w jednej klatce jako kontrolę i karmiono czystym pokarmem. Po 15. dniach porównano liczbę żywych pszczół w poszczególnych klatkach z kontrolą. Liczba pszczół w grupach badawczych wynosiła od 11 do 20 sztuk, natomiast liczba żywych pszczół w kontroli wynosiła 9 sztuk.
Przeżywalność pszczół w poszczególnych klatkach w porównaniu do kontroli, przedstawiono w tabeli 3.
Mając na względzie naturalną umieralność pszczół, należy stwierdzić, iż ekstrakt według wynalazku to substancja nietoksyczna i w pełni bezpieczna jako dodatek do pszczelich pokarmów.
Claims (3)
1. Alkoholowy ekstrakt etanolowy z roślin z rodzaju Cannabis, takich jak, Cannabis sativa, Cannabis indica czy też Cannabis ruderalis do zastosowania w preparatach zabezpieczających pszczoły przed szkodliwym działaniem insektycydów z grupy neonikotynoidów i zwalczających nosemozę.
2. Alkoholowy ekstrakt etanolowy według zastrzeżenia 1, znamienny tym, że sporządzany jest z korzeni, łodyg czy też liści roślin należących do rodzaju Cannabis.
3. Alkoholowy ekstrakt etanolowy według zastrzeżenia 1 i 2, znamienny tym, że sporządzany przy pomocy wodnego roztworu alkoholu etylowego o stężeniu 65-80%.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL433703A PL241381B1 (pl) | 2020-04-27 | 2020-04-27 | Alkoholowy ekstrakt etanolowy z roślin z rodzaju Cannabis do zastosowania w preparatach zabezpieczających pszczoły przed szkodliwym działaniem insektycydów z grupy neonikotynoidów i zwalczających nosemozę |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL433703A PL241381B1 (pl) | 2020-04-27 | 2020-04-27 | Alkoholowy ekstrakt etanolowy z roślin z rodzaju Cannabis do zastosowania w preparatach zabezpieczających pszczoły przed szkodliwym działaniem insektycydów z grupy neonikotynoidów i zwalczających nosemozę |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL433703A1 PL433703A1 (pl) | 2021-11-02 |
| PL241381B1 true PL241381B1 (pl) | 2022-09-19 |
Family
ID=78595311
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL433703A PL241381B1 (pl) | 2020-04-27 | 2020-04-27 | Alkoholowy ekstrakt etanolowy z roślin z rodzaju Cannabis do zastosowania w preparatach zabezpieczających pszczoły przed szkodliwym działaniem insektycydów z grupy neonikotynoidów i zwalczających nosemozę |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL241381B1 (pl) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PL248026B1 (pl) * | 2023-06-16 | 2025-10-06 | Univ Marii Curie Sklodowskiej W Lublinie | Preparat oligosacharydowy pozyskiwany z owocników żółciaka siarkowego (Laetiporus sulphureus) do zastosowania w zapobieganiu i zwalczaniu nosemozy u pszczół |
-
2020
- 2020-04-27 PL PL433703A patent/PL241381B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL433703A1 (pl) | 2021-11-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Zeng et al. | Protective effects of dietary flavonoids against pesticide-induced toxicity: A review | |
| Oršolić et al. | Synergystic antitumor effect of polyphenolic components of water soluble derivative of propolis against Ehrlich ascites tumour | |
| Easton-Calabria et al. | Beyond pollination: honey bees (Apis mellifera) as zootherapy keystone species | |
| ES2902629T3 (es) | Composición nutricional sólida con actividad acaricida para apicultura para su uso en la profilaxis y el tratamiento de infestaciones por varroa | |
| ES2778844T3 (es) | Piensos para peces complementados | |
| ES2906261T3 (es) | Composición biocida que comprende un extracto de olea europaea soluble en agua para el control de plagas que afecta a abejas melíferas | |
| KR20130071028A (ko) | 꿀벌의 낭충봉아부패병 치료제 | |
| Rasyid et al. | Toxicity Test of Laban Fruits (Vitex pinnata Linn) by Using Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) Methode | |
| JP4530307B2 (ja) | 魚類寄生虫の治療剤、その使用方法および用途 | |
| CN116672335A (zh) | 茶多酚作为解毒剂在蜜蜂抗杀虫剂中毒中的应用 | |
| Samanci et al. | Propolis: Prevention and Healing Effects in Otorhinolaryngology | |
| WO2014060803A1 (en) | Prenylated chalcone formulation for the treatment of bees | |
| Ayna et al. | Evaluation of the biological activities of royal jelly on prostate and breast cancer cells | |
| TW201912176A (zh) | 用於提升昆蟲免疫力之組合物及方法 | |
| PL241380B1 (pl) | Wodny ekstrakt z roślin z rodzaju Cannabis do zastosowania w preparatach zabezpieczających pszczoły przed szkodliwym działaniem insektycydów z grupy neonikotynoidów i zwalczających nosemozę | |
| KR101323769B1 (ko) | 정제봉독과 비텍신을 유효성분으로 포함하는 동물용 기능성 천연 항생제 조성물 | |
| CN112587557B (zh) | 一种防治拉萨裸裂尻鱼水霉病制剂 | |
| KR20200071360A (ko) | 로즈힙을 활성성분으로 함유하는 치약 조성물 | |
| KR101185328B1 (ko) | 양봉장 수의학 조성물 | |
| ATTAH | Antimicrobial effects of honey and its specific actions on cell walls, membranes and enzymes of some microbial pathogens | |
| Nair et al. | Chemical composition and biological properties of propolis of Mascara (North-Western Algerian) | |
| DE102007037772A1 (de) | Antioxidantenkomplex auf Grape Vital Basis (Citrus- und/oder Traubenkern und/oder Flavonoidbasis) | |
| CN108782615A (zh) | 一种杀蓟马植物精油组合物、制剂及其应用 | |
| Elgebaly et al. | The nephro-protective effects of olive oil and bee honey against gentamicin-induced nephrotoxicity in rabbits | |
| El-Seedi et al. | Insights into the Role of Natural Products in the Control of the Honey Bee Gut Parasite (Nosema spp.). Animals 2022, 12, 3062 |