PL243225B1 - Sposób poprawy dojrzałości mięsa marynat zimnych ze śledzi poławianych w okresie żerowania - Google Patents

Sposób poprawy dojrzałości mięsa marynat zimnych ze śledzi poławianych w okresie żerowania Download PDF

Info

Publication number
PL243225B1
PL243225B1 PL438618A PL43861821A PL243225B1 PL 243225 B1 PL243225 B1 PL 243225B1 PL 438618 A PL438618 A PL 438618A PL 43861821 A PL43861821 A PL 43861821A PL 243225 B1 PL243225 B1 PL 243225B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
herring
marinades
whole
cold storage
fillets
Prior art date
Application number
PL438618A
Other languages
English (en)
Other versions
PL438618A1 (pl
Inventor
Patryk Kamiński
Mariusz Szymczak
Barbara Szymczak
Original Assignee
Univ West Pomeranian Szczecin Tech
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univ West Pomeranian Szczecin Tech filed Critical Univ West Pomeranian Szczecin Tech
Priority to PL438618A priority Critical patent/PL243225B1/pl
Publication of PL438618A1 publication Critical patent/PL438618A1/pl
Publication of PL243225B1 publication Critical patent/PL243225B1/pl

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L17/00Food-from-the-sea products; Fish products; Fish meal; Fish-egg substitutes; Preparation or treatment thereof
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23BPRESERVATION OF FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES
    • A23B4/00Preservation of meat, sausages, fish or fish products
    • A23B4/06Freezing; Subsequent thawing; Cooling
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23BPRESERVATION OF FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES; CHEMICAL RIPENING OF FRUIT OR VEGETABLES
    • A23B4/00Preservation of meat, sausages, fish or fish products
    • A23B4/14Preserving with chemicals not covered by groups A23B4/02 or A23B4/12
    • A23B4/18Preserving with chemicals not covered by groups A23B4/02 or A23B4/12 in the form of liquids or solids
    • A23B4/20Organic compounds; Microorganisms; Enzymes
    • A23B4/22Microorganisms; Enzymes; Antibiotics
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14Hydrolases (3)
    • C12N9/48Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/64Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Marine Sciences & Fisheries (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Meat, Egg Or Seafood Products (AREA)

Abstract

Przedmiotem zgłoszenia jest sposób poprawy dojrzałości mięsa zimnych marynat rybnych ze śledzi poławianych w sezonie żerowania, który charakteryzuje się tym, że przed marynowaniem składuje się chłodniczo śledzia całego w lodzie lub w wodzie z lodem o temperaturze od 0 do 4 C przez czas od jednej do czternastu dób, nie dłużej niż do rozpoczęcia pękania brzuchów śledzi. Po składowaniu chłodniczym śledzie są filetowane i poddawane marynowaniu zgodnie z własną technologią marynowania śledzi. Przed składowaniem chłodniczym śledzia całego lub po filetowaniu po składowaniu chłodniczym filety zamraża się i składuje zamrażalniczo przez co najmniej dwie doby w temperaturze nie wyższej niż -20°C, następnie rozmraża się śledzia całego lub fileta śledzia w temperaturze od 0 do 7°C. Podczas składowania chłodniczego całego świeżego śledzia następuje dyfuzja proteaz trawiennych z wnętrzności do mięśni śledzia. Enzymy trawienne wykonują wstępną proteolizę białek przed marynowaniem, uwalniają katepsyny z lizosomów i wspierają je w procesie marynowania śledzi. Marynaty otrzymane nową metodą mają większą aktywność proteolityczną, większą zawartość produktów hydrolizy białka, które nadają charakterystyczne cechy sensoryczne marynat. Sposób nie wpływa negatywnie na zanieczyszczenie mikrobiologiczne marynowanych filetów śledzia.

Description

Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest sposób poprawy dojrzałości mięsa marynowanych śledzi (marynat zimnych ze śledzia) poławianych w okresie żerowania z wykorzystaniem proteaz trawiennych. Sposób można stosować dla śledzi bałtyckich jak i atlantyckich.
Polska jest jednym z największych producentów marynat zimnych ze śledzi w Europie. Duża skala produkcji oraz obniżanie limitów połowowych na śledzia bałtyckiego i atlantyckiego sprawiły, że w przemyśle rybnym przetwarza się śledzie poławiane przez cały rok. Niestety śledź bałtycki złowiony w sezonie żerowania (po tarle) posiada najsłabszą przydatność technologiczną do produkcji zimnych marynat rybnych. Jest to spowodowane niską zawartością lipidów i niską aktywnością proteaz w tkance mięśniowej (Kołakowski, E., Bortnowska, G., Lachowicz, K., 1993. Wpływ sezonu połowu na szybkość dojrzewania marynat ze śledzia bałtyckiego. XXIV Sesja Naukowa KTiChŻ PAN, Wrocław, 36).
Prawidłowo dojrzałe zimne marynaty ze śledzia posiadają bardzo miękką tkankę mięśniową o charakterystycznym smaku. Za dojrzewanie marynat odpowiada wysoka aktywność kwaśnych proteaz (katepsyn). Niestety ich aktywność jest najmniejsza podczas żerowania śledzia (Kołakowski, E., Bortnowska, G., Lachowicz, K., 1993. Wpływ sezonu połowu na szybkość dojrzewania marynat ze śledzia bałtyckiego. XXIV Sesja Naukowa KTiChŻ PAN, Wrocław, 36). W tym okresie dominuje aktywność proteaz przewodu pokarmowego, który jest wyrzucany podczas filetowania śledzi. Marynaty wykonane ze śledzia złowionego podczas żerowania posiadają mniejszą zawartość produktów hydrolizy białka (aminokwasy i peptydy), które nadają typowy smak i zapach produktu (Sikorski Z., Kołakowski E. 2000. Endogenous Enzyme Activity and Seafood Quality: Influence of Chilling, Freezing, and Other Environmental Factors in: Seafood enzymes Ed.: Haard, N.F. & Simpson). Substancje te posiadają także aktywność biologiczną, cenną dla zdrowia człowieka, np. przeciwutleniającą, regulującą ciśnienie krwi, transportującą mikroskładniki itd. (Gildberg A. 2004. Enzymes and Bioactive Peptides from Fish Waste Related to Fish Silage, Fish Feed and Fish Sauce Production. Journal of Aquatic Food Product Technology, 13, 3-11). Mniejszy stopień proteolizy objawia się także bardziej twardą i gumowatą teksturą mięsa typową dla śledzia surowego.
Na rynku brakuje handlowych preparatów proteaz, które są aktywne w kwaśnym środowisku marynat i mogłyby zastąpić lub uzupełnić niską aktywność katepsyn śledzi. Ze względu na kwaśno-słone środowisko marynat zimnych, tzn. pH w zakresie 3,5-4,5 oraz zawartość soli 2-5%, podczas marynowania najbardziej aktywne są katepsyny: B, D i L. Endoproteazy jakimi są katepsyny D, B1, i L są odpowiedzialne za wzrost miękkości mięśni podczas dojrzewania. Egzoproteazy takie jak A, B2 i C są odpowiedzialne za tworzenie się takich cech sensorycznych jak smak i zapach. Katepsyny działają synergicznie dlatego też pojedynczy enzym nie jest w stanie zastąpić całego kompleksu enzymów odpowiedzialnego za dojrzewanie marynat rybnych. Enzymy przewodu pokarmowego takie jak trypsyna, chymotrypsyna oraz karboksypeptydazy A i B aktywne są w środowisku zasadowym i obojętnym. Dlatego enzymy te są wykorzystywane tylko do tradycyjnego solenia śledzi, a nie do produkcji kwaśnych marynat. Proteaza trawienna jaką jest trypsyna stanowi rolę podobną do katepsyny D. Zaczyna działać jako pierwsza aktywując inne enzymy trawienne. Ponadto nadtrawia ściany komórkowe wnętrzności powodując zjawisko pękania brzuszków. Chymotrypsyna w rybach występuje w formie A i B, które mają wysoką aktywność i niską tolerancję na temperaturę i pH (Zhou, L., Budge, S.M., Ghaly, A.E., Brooks, M.S., Dave, D., 2011 Extraction, Purification and Characterization of Fish Chymotrypsin: A Review. American Journal of Biochemistry and Biotechnology 7, 104-123). Karboksypeptydazy i aminopeptydazy, podobnie do katepsyny B2, A i C, rozkładają białka do peptydów i woln ych aminokwasów, czyli wpływają na smak. Zauważono, że zastosowanie enzymów proteolitycznych z wnętrzności śledzia pomogło w uwolnieniu katepsyn z mięśni oraz śledziony i wątroby (Siebert, G., 1958. Aktivitat Eiweiss spaltender Enzyme in Fischen. Experientia 14, 65-66; McLay, R., 1980. Activities of cathepsin A and D in cod muscle. Journal of the Science of Food and Agriculture, 31, 1050-1054).
Szymczak i Lepczyński (Szymczak, M., Lepczyński, A., 2016. Occurrence of aspartyl proteases in brine after herring marinating. Food Chemistry, 194, 470-475) stwierdzili, że w kąpieli pozostałej po marynowaniu śledzi występują nie tylko aktywne katepsyny ale również pepsyna, pochodzącą z przewodu trawiennego śledzi. Wiadome jest, że enzymy trawienne mogą dyfundować do mięśni śledzi podczas składowania chłodniczego ryb (Mukundan, M.K., Antony, P.D., Nair, M.R., 1986. A Reviev on Autolysis in Fish. Fisheries Research, 4, 259-269). Jednakże, ze względu na zbyt duże różnice w specyficzności enzymów trawiennych, w porównaniu do katepsyn, dotychczas nie uwzględniano ich roli w dojrzewaniu marynat. Ponadto nieprawidłowe składowanie śledzi całych z przewodem pokar mowym prowadzi do szybkiego zepsucia ryby. Śledź w okresie tarła można składować chłodniczo do 2 tygodni zaś w okresie żerowania do 1 tygodnia.
Znane są także metody nieenzymatyczne, które poprawiają dojrzewanie marynat zimnych. Należą do nich mrożenie oraz wielokrotne mrożenie-rozmrażanie mięsa śledzi, które powoduje uszkodzenia lizosomów i uwalnianie katepsyn (Szymczak M., Kamiński P., Felisiak K., Szymczak B., Dmytrów I., Sawicki T. 2020. Effect of constant and fluctuating temperatures during frozen storage on quality of marinated fillets from Atlantic and Baltic herrings (Clupea harengus). LWT - Food Science and Technology, 133, 109961) (Sposób zwiększenia aktywności proteolitycznej w kąpieli pozostałej po marynowaniu śledzi, Szymczak M., nr prawa wyłącznego P.415721). Fizyczne uszkodzenia struktury mięśni wynikają z powstawania i zmiany wielkości kryształków lodu w zamrażanej żywności.
Problemem technicznym znanych rozwiązań jest brak wykorzystania proteaz trawiennych (zwane zasadowymi proteazami) w procesie marynowania zimnego śledzi z uwagi na ich znikomą aktywność w kwaśnym środowisku marynat. Również dotychczas nie stosowano metody wstępnej enzymatycznej obróbki filetów z udziałem proteaz trawiennych lub innych preparatów proteolitycznych przed procesem zimnego marynowania do poprawy dojrzewania zimnych marynat ze śledzi.
Sposób poprawy dojrzałości mięsa marynowanych śledzi poławianych w okresie żerowania, według wynalazku, z wykorzystaniem proteaz trawiennych, charakteryzuje się tym, że przed marynowaniem składuje się chłodniczo śledzia całego w wodzie z lodem lub w lodzie o temperaturze od 0 do 4°C przez czas od jednej do czternastu dób, nie dłużej niż do rozpoczęcia pękania brzuchów śledzi. Śledzia całego składuje się chłodniczo w mieszaninie wody z lodem wodnym zgodnie z metodą CFW - Clean Fresh Water (Mallikage, M. 2001. The effect of different cooling system on quality of pelagic species. (Final project). The United Nations University, Reykjavik, IS.). W sposobie można stosować tradycyjne lodowanie (ryba w lodzie), ale CFW umożliwia składowanie chłodnicze dużej masy śledzi w basenie (1x1x1 metr) bez zgniatania śledzi, z lepszą kontrolą temperatury, bez konieczności odcieku roztapiającego lodu. CFW umożliwia dłuższe składowanie w optymalnych warunkach niż lodowanie. Po składowaniu chłodniczym śledzie są filetowane i poddawane marynowaniu zgodnie z własną technologią marynowania śledzi. W pierwszym wariancie przed składowaniem chłodniczym śledzia całego zamraża się i składuje zamrażalniczo przez co najmniej dwie doby w temperaturze nie wyższej niż -20°C, następnie rozmraża się śledzia w temperaturze od 0 do 7°C. Śledzie zamraża się zgodnie z Rozporządzeniem WE nr 853/2004, zał. III, sek. VIII. Rozdz. III D, pkt 1-2. Śledzie rozmraża się zgodnie z dowolną metodą. W innym wariancie po składowaniu chłodniczym śledzie filetuje się, a następnie filety ze śledzia zamraża się i składuje zamrażalniczo przez co najmniej dwie doby w temperaturze nie wyższej -20°C, następnie rozmraża się filety w temperaturze 0-7°C. Śledzie zamraża się zgodnie z Rozporządzeniem WE nr 853/2004, zał. III, sek. VIII. Rozdz. III D, pkt 1-2. Śledzie rozmraża się zgodnie z dowolną metodą.
Korzystnie śledzie składowane chłodniczo mają stopień świeżości odpowiadający ocenie QIM w zakresie 9-18 punktów w skali 29 punktowej.
Zaletą rozwiązania według wynalazku jest to, że podczas składowania chłodniczego całego świeżego śledzia następuje dyfuzja proteaz trawiennych z wnętrzności do mięśni śledzia. Enzymy trawienne wykonują wstępną proteolizę białek przed marynowaniem, uwalniają katepsyny z lizosomów i wspierają je w procesie marynowania śledzi, w tym bałtyckich. Marynaty otrzymane sposobem według wynalazku mają większą aktywność proteolityczną, większą zawartość produktów hydrolizy białka, które nadają charakterystyczne cechy sensoryczne marynat. Sposób nie wpływa negatywnie na zanieczyszczenie mikrobiologiczne marynowanych filetów śledzia. Sposób według wynalazku wskazuje jaki potrzebny jest czas składowania chłodniczego śledzia aby uzyskać pozytywny wpływ proteaz trawiennych z przewodu pokarmowego na lepsze dojrzewanie marynowanych filetów śledzia. W sposobie wykorzystuje się pozytywny wpływ proteaz trawiennych z przewodu pokarmowego na lepsze dojrzewanie marynowanych filetów śledzia, co jest możliwe dzięki zastosowaniu zamrażania-rozmrażania śledzi całych lub ich filetów przed lub po składowaniu chłodniczym.
Sposób według wynalazku przedstawiono w przykładzie wykonania oraz na rysunku, na którym Fig. 1 przedstawia etapy produkcji marynat zimnych sposobem według wynalazku, Fig. 2 przedstawia aktywność proteaz trawiennych (Fig. 2A) chymotrypsyny, (Fig. 2B) trypsyny esterazowej, (Fig. 2C) karboksypeptydazy A i (Fig. 2D) karboksypeptydazy B w marynatach wyprodukowanych ze śledzia składowanego chłodniczo od 0 do 5 dób z i bez mrożnia, Fig. 3 przedstawia aktywność katepsyny B, D i L w marynatach ze śledzi wyprodukowanych ze śledzia składowanego chłodniczo od 0 do 5 dób z i bez mrożnia, Fig. 4 przedstawia zawartość azotu niebiałkowego oraz frakcji tyrozyny i peptydów w marynatach wyprodukowanych ze śledzia składowanego chłodniczo od 0 do 5 dób z i bez mroźnia. Na rysunku skróty oznaczają: SCh - Składowany Chłodniczo, SCh+M - Składowany Chłodniczo + Mrożone filety, M+SCh - Mrożony cały + Składowany Chłodniczo, abcwyniki oznaczone tą samą małą literą nie różnią się statystycznie wpływem czasu składowania chłodniczego; ABCwyniki oznaczone tą samą dużą literą nie różnią się statystycznie wpływem metody utrwalania.
P r z y k ł a d
Śledzie złowiono podczas sezonu żerowania i podzielono na 3 próby:
a) Składowane chłodniczo (SCh) - śledzie całe umieszczono w szczelnie zamkniętych wiadrach z wodą i lodem odpowiednio w stosunku 2:0,4:0,9 (m:m:m), ryby składowano chłodniczo od 1 do 5 dób w temp. 0,8 ± 0,8°C, po czym filetowano i marynowano przez 7 dób w kąpieli marynującej zawierającej 5% kwasu octowego i 6% chlorku sodu w temperaturze 7°C. Udział masy filetów do masy kąpieli wynosił 1,0:1,5. Marynowanie wykonano w szczelnie zamkniętych wiaderkach.
b) Składowane chłodniczo + Mrożone filety (SCh+M) - śledzie całe składowano chłodniczo tak jak SCh, a następnie filetowano i zamrożono w -20°C w workach z tworzywa PE-PA i składowano zamrażalniczo 3 doby. Filety śledzia w worku rozmrożono w wodzie o temperaturze +10°C i marynowano w sposób opisany powyżej.
c) Mrożone w całości + Składowane chłodniczo (M+SCh) - śledzie całe zamrożono, składowano zamrażalniczo i rozmrożono jak opisano powyżej. Następnie śledzie całe składowano chłodniczo od 1 do 5 dób, jak opisano powyżej i filetowano. Filety poddano marynowaniu jak opisano powyżej.
Stopień świeżości śledzia przed i podczas składowania chłodniczego oceniono metodą Quality Index Method (QIM) zgodnie z metodą (Nielsen D, Hyldig G. Influence of handling procedures and biological factors on the QIM evaluation of whole herring (Clupea harengus L.) Food Res Int. 2004; 37, 975-983). Po marynowaniu z każdej z trzech prób pobierano po 2 filety do badań mikrobiologicznych zachowując zasady aseptyczności. Pozostałe filety odciekały na sicie przez 5 min. W odciekniętych filetach wykonano ocenę sensoryczną metodą Szymczak i in. (Szymczak M., Szymczak B., Koronkiewicz A., Felisiak K., Bednarek M. 2013. Effect of cover brine type on the quality of meat from herring marinades. Journal of Food Science, 78, 4, 619-625). Pozostałe filety odskórzono, zmielono kuchenną maszynką do mielenia mięsa i w farszu wykonano oznaczenia biochemiczne:
Aktywność proteaz trawiennych
Aktywność proteaz oznaczono w ekstraktach mięsa marynowanego śledzia. Enzymy ekstrahowano z mięsa buforem TrisHCl 150 mM o pH 7,8 (1:10; w:v), ekstrakt odwirowano (9000 g przez 10 min w 4°C) i w supernatancie oznaczono aktywność:
(i) esterazową trypsyny w pH 8,2 wobec Να-p-Tosyl-L argininę metyl ester hydrochlorida (TAME) metodą Hummel (1959), 1 U zdefiniowano jako 1 μM zhydrolizowanego TAME w 1 min przy 247 nm, (ii) chymotrypsyny w pH 7,8 wobec N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester (BTEE) metodą, Hummel (1959), 1 U zdefiniowano jako 1 μM zhydrolizowanego BTEE w 1 min przy 256 nm, (iii) karboksypeptydazy A w pH 7,5 wobec 4-Methoxyphenylazoformyl-Phe (AAFP) zgodnie z Mock et al. (1996), 1 U zdefiniowano jako 1 μM AAFP zhydrolizowanej w 1 min, stosując pomiar przy 350 nm, (iv) karboksypeptydazy B w pH 7,65 wobec Bz-Gly-Arg (BGA) metodą Folk et al. (1960). 1 U zdefiniowano jako 1 μM zhydrolozowanego BGA w 1 min, stosując pomiar przy 254 nm.
Aktywność katepsyn
Aktywność katepsyn oznaczono w ekstraktach mięsa marynowanego śledzia zgodnie z metodą Szymczak (Szymczak M. Sposób zwiększenia aktywności proteolitycznej w kąpieli pozostałej po marynowaniu śledzi, P.415721). Enzymy ekstrahowano z mięsa wodą destylowaną (1:5 m:v), a następnie ekstrakt odwirowano (9000 g przez 10 min w 4°C). W supernatancie zmierzono aktywność katepsyny D oraz katepsyn B i L, odpowiednio wobec substratów: Mca-GKPILFFRLK, (Dnp)-r-NH2 i Z-FR-MCA. Podczas reakcji fluorescencję mierzono stosując mikrokuwetę za pomocą spektrofluorymetru (Hitachi, F-7000, Tokio, Japonia) o długościach wzbudzenia i emisji odpowiednio przy 328 i 393 dla katepsyny D i 322 i 460 nm dla peptydaz cysteinowych. Aktywność katepsyn wyrażono w jednostkach fluorescencji (Flu).
Zawartość frakcji produktów hydrolizy białka
Zawartość trzech frakcji azotowych oznaczono w ekstraktach z mięsa przy końcowym stężeniu kwasu trichlorooctowego równym 5%:
• zawartość azotu niebiałkowego za pomocą metody Kjeldahla [AOAC. 1990. Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists, 15th edition, In K. Helrich (Ed.) AOAC, Arlington, p. 1298], • zawartość tyrozyna [PHB (A)] i peptydy [PHB (R)] zmodyfikowaną metodą Lowry’ego [Kołakowski E. 2005. Analysis of proteins, peptides, and amino acids in foods. In S. Otles (Ed.), Methods of analysis of food components and additives (pp. 59-96). Boca Raton: CRC Taylor & Francis].
Analiza mikrobiologiczna
Analizę mikrobiologiczną wykonano dla filetów marynowanego śledzia. Przygotowanie próbek do badań wykonano zgodnie z normą (ISO 6887-1:2017-05 Przygotowanie próbek do badań, zawiesiny wyjściowej i rozcieńczeń dziesięciokrotnych do badań mikrobiologicznych - Część 1: Ogólne zasady przygotowania zawiesiny wyjściowej i rozcieńczeń dziesięciokrotnych). Wykonano oznaczenie: ogólnej liczby bakterii psychrofilnych i mezofilnych zgodnie z normą (ISO 4833-1/2013 Microbiology of the food chain - Horizontal method for the enumeration of microorganisms - Part 1: Colony count at 20 and 30 C by the pour plate technique), liczby drożdży i pleśni (ISO 21527-2:2009 Food and feed microbiology - Horizontal method for the determination of yeast and mould counts - Part 2: Method for counting colonies in products with water activity less than or equal to 0.95) oraz Enterobacteriaceae (ISO 21528-1:2017-08 Mikrobiologia łańcucha żywnościowego - Horyzontalna metoda wykrywania i oznaczania liczby Enterobacteriaceae - Część 1: Wykrywanie Enterobacteriaceae).
Uzyskane wyniki badań pokazały, że marynaty wykonane ze śledzia nawet bez składowania chłodniczego (czas 0) zawierały aktywność proteaz trawiennych (Fig. 2ABCD). Dłuższy czas składowania chłodniczego, szczególnie po 3-5 dobach, śledzia całego świeżego powodował wzrost aktywności proteaz trawiennych w marynowanym śledziu (Fig. 2). W efekcie marynaty SCh miały jedne z najwyższych aktywności proteaz trawiennych ale dopiero po 4-5 dobach składowania chłodniczego surowca. Dodanie obróbki mrożenia śledzia całego spowodowało z jednej strony inaktywację proteaz (chymotrypsyny, trypsyny estereazowej oraz karboksypeptydazy A) oraz ułatwiło dyfuzję tych proteaz z wnętrzności do mięsa śledzia podczas składowania chłodniczego. W efekcie marynaty M+SCh miały najniższą aktywność proteaz ze śledzia składowanego 0 dób oraz wzrost aktywności wraz z czasem składowania chłodniczego surowca (Fig. 2). Marynaty przygotowane z filetów śledziowych poddanych zamrażaniu/rozmrażaniu cechowały się dużymi różnicami w aktywności karboksypeptydazy A i B, trypsyny esterazowej szczególnie w 2 i 4 dobie przechowywania (Fig. 2BD). Obecność proteaz trawiennych w marynatach była spowodowana dyfuzją tych enzymów z przewodu pokarmowego do mięsa podczas składowania chłodniczego całego świeżego śledzia. Wyniki pokazały, że dłuższy czas składowania chłodniczego zwykle sprzyjał dyfuzji proteaz trawiennych. Prawdopodobnie ze względu na wartość pH aktywność proteaz trawiennych była największa podczas składowania chłodniczego, zaś podczas marynowania aktywność tych proteaz była znacznie niższa. Oznacza to, że proteazy trawienne wykonały wstępną proteolizę tkanki mięśniowej śledzia, uwolniły cześć katepsyn z lizosomów, przygotowały substrat dla katepsyn głównie podczas składowania chłodniczego oraz w mniejszym stopniu podczas marynowania. Dowodem na to są wyniki aktywności katepsyn pokazane na Fig. 3 oraz wyniki zawartości produktów hydrolizy białka pokazane na Fig. 4.
Aktywność katepsyny D była większa w marynatach zrobionych ze śledzia dłużej składowanego chłodniczo, szczególnie zamrażanego przed składowaniem chłodniczym (Fig. 3A). W przypadku katepsyny B aktywność była większa tylko po zastosowaniu mrożenia przed składowaniem chłodniczym (Fig. 3B). Badane metody składowania śledzia nie miały wpływu na wyższą aktywność katepsyny L w marynatach oprócz marynat M+SCh wykonanych ze śledzia bez składowania chłodniczego (Fig. 3C).
Składowanie zamrażalnicze śledzi może obniżyć aktywność katepsyny B i L, ale dopiero po przynajmniej 1-2 miesiącach w temp. ok. -18°C. Krótki czas zamrażania głównie wpływa na uwalnianie katepsyn do przestrzeni międzykomórkowej (Szymczak, M., Kamiński, P., Felisiak, K., Szymczak, B., Dmytrów, I., Sawicki, T. 2020. Effect of constant and fluctuating temperatures during frozen storage on quality of marinated fillets from Atlantic and Baltic herrings (Clupea harengus). LWT - Food Science and Technology, 133, 109961). Dlatego można przypuszczać, że wyższa aktywność katepsyn była spowodowana przez (i) uwalnianie katepsyn z lizosomów przez proteazy trawienne i/lub (ii) uszkodzenie lizosomów przez kryształy lodu.
Wysoka aktywność proteaz trawiennych (Fig. 2) i jednocześnie katepsyn (Fig. 3) w marynatach ze śledzia mrożonego w całości i składowanego chłodniczo (M+SCh) przełożyła się na największą zawartość azotu niebiałkowego (NPN) w tych marynatach do 3 doby składowania śledzia (Fig. 4A). Mniejszą zawartość NPN zawierały marynaty ze śledzi składowanego i mrożonego, a najmniejszą zawartość NPN miały marynaty ze śledzi tylko składowanych chłodniczo. Po 3-4 dobach składowania surowca zawartość NPN w marynatach była najniższa, po czym zawartość NPN rosła do 5 doby składowania. Wzrost NPN z czasem składowania wskazuje na większą aktywność proteaz w mięsie marynat, zaś spadek zawartości NPN może wskazywać na dyfuzje tych związków z mięsa do kąpieli, która jest intensywniejsza w śledziu o wyższym stopniu proteolizy białka (Szymczak, M., Kołakowski, E., 2012. Losses of nitrogen fractions from herring to brine during marinating. Food Chemistry, 132, 237-243). Poszczególne frakcje peptydów i aminokwasów występujące w NPN również potwierdzają pozytywny wpływ proteaz trawiennych na marynowanie śledzia. W marynatach M+SCh, w których stwierdzono największy wzrost aktywności endopeptydaz, również stwierdzono największą zawartość frakcji peptydów (Fig. 4B). Natomiast w marynatach SCh+M zawartość PHB(R) rosła łagodniej (Fig. 4B), co było powiązane z mniejszą aktywnością endopeptydaz (Fig. 2 i Fig. 3). W przypadku frakcji aminokwasów [PHB(A)] różnice w zawartości pomiędzy trzema metodami były mniejsze niż dla frakcji peptydów. Zawartość PHB(A) w marynatach była większa gdy śledzia całego dłużej składowano chłodniczo, jednak wzrost był zauważalny dopiero po 1-3 dobach składowania (Fig. 4C). Najwyższą zawartość frakcji aminokwasowych miały marynaty ze śledzia mrożonego i do 3 doby składowania chłodniczego surowca. Marynaty sporządzone po 5 dobach składowania chłodniczego surowca nie różniły się istotnie zawartością PHB(A) bez względu na metodę składowania (Fig. 4C).
Podczas składowania chłodniczego śledzia świeżego rosła wartość oceny QIM od 9 punktów w dobie 0 do 18,6 punktów po 5 dobach składowania (Tabela 1), w skali 29 punktów. Wraz z wyższą wartością QIM rosła wartość oceny sensorycznej marynat SCh i SCh+M od 4,6 do 4,8-4,9 punkta, zaś w marynatach SCh+M od 4,1 do 4,4 tylko do 2 doby składowania surowca (Tabela 1). Od 1 do 3 doby składowania śledzia najwyższą ocenę sensoryczną otrzymały marynaty SCh, zaś od 4 do 5 doby składowania otrzymały marynaty SCh+M. Najniższą ocenę uzyskały marynaty M+SCh, gdyż mrożenie spowodowało denaturacje wrażliwych proteaz, przez co w proteolizie białek śledzia większy udział miała chymotrypsyna. Ponadto dezintegracja struktury tkanki mięśniowej białek mięśniowych śledzia pod wpływem mrożenia spowodowała nierównomierne wnikanie proteaz trawiennych i/lub uwalnianie katepsyn. Mrożenie sprzyjało wysokiej aktywności chymotrypsyny, która hydrolizuje wiązania peptydowe z różnymi grupami karbonylowymi α-aminokwasów i atakuje większe niepolarne grupy aromatyczne (tyrozyna, fenyloalanina, tryptofan), z których powstają gorzkie produkty hydrolizy białek. Gorzki smak PHB pochodzi od gorzkich peptydów, a przede wszystkim od aminokwasów hydrofobowych (fenyloalanina, tyrozyna, tryptofan, leucyna, walina i izoleucyna) ułożonych na C-końcu peptydu (Umetsu, H., Ichishima, E., 1985. Mechanism of Digestion of Bitter Peptide from a Fish Protein Concentrate by Wheat Carboxypeptidase. Nippon Shokuhin Kogyo Gakkaishi 32, (4), 281-287). Peptydy takie są wielokrotnie bardziej gorzkie niż pojedynczy aminokwas występujący na końcu tego peptydu (Nishimura, T., Kato, H., 1988. Taste of Free Amino and Peptides. Food Reviews International, 4(2), 175-194).
Wysoka aktywność karboksypeptydaz A i B w marynatach SCh i SCh+M, w przeciwieństwie do marynat M+SCh, wpłynęła na polepszenie cech sensorycznych tych pierwszych. Wymienione karboksypeptydazy odpowiadają za usuwanie goryczki w żywności poprzez (i) wytwarzanie niskocząsteczkowych kwaśnych peptydów posiadających zdolność maskowania gorzkiego smaku oraz (ii) przez odcięcie gorzkich aminokwasów od peptydów wskutek czego smak gorzki obniża się nawet kilkusetkrotnie (Broncano, J.M., Timón, M.L., Parra, V., Andres, A.I., Petrón, M.J., 2011. Use of proteases to improve oxidative stability of fermented sausages by increasing low molecural weight compounds with antioxidation activity. Food Research International, 44 (9), 2655-2659; Kołakowski, E., 2005. Enzymy i ich wykorzystanie w modyfikacji białek żywnościowych [w: Enzymatyczna modyfikacja składników żywności]. Red. E. Kołakowski, W. Bednarski, S. Bielecki. Wyd. Akademii Rolniczej w Szczecinie, Szczecin 31-99). Zatem niska aktywność karboksypeptydazy B w marynatach M+SCh mogła zdecydować o niższej ocenie sensorycznej (Tab. 1).
Wyniki badań mikrobiologicznych wykazały, że czas składowania chłodniczego oraz metoda składowania nie wpłynęły na zwiększenie zanieczyszczenia marynowanych filetów przez bakterie psychrofilny i mezofile, oraz drożdże i pleśnie. Zanieczyszczenie tymi mikroorganizmami było mniejsze niż 1 log(jtk/g) (Tabela 2). W badanych marynatach stwierdzono obecność Enterobacteriaceae, które stanowią florę fizjologiczną przewodu pokarmowego śledzi. Prawdopodobnie bakterie te dyfun
PL 243225 BI dowały z wnętrzności do mięsa razem z materią przewodu pokarmowego, w podobny sposób jak przypadku proteaz trawiennych. Największe zanieczyszczenie Enterobacteriaceae wynosiło tylko 0,801 log(jtk/g) w marynatach zrobionych ze śledzia bez składowania chłodniczego (czas 0 dni). Dłuższy czas składowania chłodniczego obniżył istotnie ilość Enterobacteriaceae w marynatach nawet do < 0,1 log(jtk/g). Zastosowanie mrożenia przed lub po składowaniu chłodniczym śledzia spowodowało redukcję liczebności Enterobacteriaceae do poziomu poniżej 0,1 log(jtk/g). Nowa metoda produkcji marynat nie miała zatem istotnie negatywnego wpływu na jakość mikrobiologiczną mięsa marynat.
Tabela 1
Ocena QIM śledzia całego podczas składowania chłodniczego oraz ocena sensoryczna marynowanych filetów stosując różne metody składowania śledzia.
Metoda składowania śledzia przed marynowaniem Czas składowania chłodniczego (doby) Ocena QIM dla śledzia całego podczas składowania chłodniczego (punkty) Ocena sensory czna marynowanych filetów śledzia (punkty)
Składowany chłodniczo (SCh) 0 9,1 ±0,6 4,61 ±0,15
1 13,1 ±0,5 4,69 ±0,08
2 13,8 ±0,5 4,78 ±0,05
3 14,8 ±0,5 4,76 ±0,01
4 16.2 ±0,5 4,79 ±0,03
5 18,6 ±0,4 4,80 ±0,05
Składowany chłodniczo + Mrożone filety (SCh±M) ' 0 9,1 ±0,6 4,61 ±0,15
1 13,1 ±0,5 4,67 ±0,10
2 13,8 ±0,5 4,73 ±0,03
3 14.8 ±0,5 4,72 ±0.07
4 16,2 ±0,5 4,83 ±0.02
5 18,6 ±0,4 4,92 ±0,05
Mrożony cały + składowany chłodniczo (M+SCh) 0 12,2 ±0,5 4,13 ±0,32
1 12,6 ±0,4 4,03 ±0,28
2 14.2 ±0,5 4,40 ±0.31
3 13,8 ±0,4 4,24 ±0,28
4 14,3 ±0,4 4,32 ±0,21
5 14,2 ±0,4 4,27 ±0,29
Tabela 2
Zanieczyszczenie mikrobiologiczne marynowanych filetów ze śledzia składowanego przed marynowaniem od 0 do 5 dób trzeba metodami [log(jtk/g)].
Metoda składowania śledzia Czas składowania śledzia (doba) Psychrofile Mezofile Drożdże i pleśnie Enterobacteriace ae
Składowanie 0 <0,1 <0,1 <0,1 0,801
chłodnicze 1 <0.1 <0.1 <0,1 0,739
(SCh) 2 <0,1 <0,1 <0,1 <0,1
3 <0,1 <0,1 <0,1 0,746
4 <0,1 <0,1 <0,1 <0,1
5 <0.1 <0.1 <0,1 <0.1
Składowanie 0 <0,1 <0,1 <0,1 0,801
chłodnicze ± 1 <0.1 <0,1 <0,1 <0,1
mrożenie 2 <0.1 <0.1 <0,1 <0.1
(SCh±M) 3 <0,1 <0,1 <0,1 <0,1
4 <0.1 <0.1 <0,1 <0.1
5 <0,1 <0,1 <0,1 <0.1
Mrożenie ± 0 <0,1 <0,1 <0,1 <0,1
składowanie 1 <0,1 <0,1 <0,1 <0,1
chłodnicze 2 <0.1 <0.1 <0,1 <0.1
(M+SCh) 3 <0,1 <0,1 <0,1 <0,1
4 <0.1 <0.1 <0,1 <0.1
5 <0,1 <0,1 <0,1 <0,1
PL 243225 BI

Claims (2)

1. Sposób poprawy dojrzałości mięsa marynowanych śledzi poławianych w okresie żerowania z wykorzystaniem proteaz trawiennych, znamienny tym, że przed marynowaniem składuje się chłodniczo śledzia całego w lodzie lub w wodzie z lodem o temperaturze od 0 do 4°C przez czas od 1 do 14 dób, nie dłużej niż do rozpoczęcia pękania brzuchów śledzi, przy czym przed składowaniem chłodniczym śledzia całego zamraża się i składuje zamrażalniczo przez co najmniej dwie doby w temperaturze nie wyższej niż -20°C, następnie rozmraża się śledzia w temperaturze 0-7°C lub po składowaniu chłodniczym filety ze śledzia zamraża się i składuje zamrażalniczo przez co najmniej dwie doby w temperaturze nie wyższej -20°C, następnie rozmraża się filety w temperaturze 0-7°C.
2. Sposób poprawy dojrzałości mięsa marynowanych śledzi według zastrz. 1, znamienny tym, że śledzie składowane chłodniczo mają stopień świeżości odpowiadający ocenie Quality lndex Method QIM w zakresie 9-18 punktów w skali 29 punktowej.
PL438618A 2021-07-29 2021-07-29 Sposób poprawy dojrzałości mięsa marynat zimnych ze śledzi poławianych w okresie żerowania PL243225B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL438618A PL243225B1 (pl) 2021-07-29 2021-07-29 Sposób poprawy dojrzałości mięsa marynat zimnych ze śledzi poławianych w okresie żerowania

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL438618A PL243225B1 (pl) 2021-07-29 2021-07-29 Sposób poprawy dojrzałości mięsa marynat zimnych ze śledzi poławianych w okresie żerowania

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL438618A1 PL438618A1 (pl) 2023-01-30
PL243225B1 true PL243225B1 (pl) 2023-07-17

Family

ID=85174245

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL438618A PL243225B1 (pl) 2021-07-29 2021-07-29 Sposób poprawy dojrzałości mięsa marynat zimnych ze śledzi poławianych w okresie żerowania

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL243225B1 (pl)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL248501B1 (pl) * 2023-03-15 2025-12-22 Univ West Pomeranian Szczecin Tech Sposób poprawy dojrzałości mięsa marynowanych śledzi o niskiej jakości technologicznej

Also Published As

Publication number Publication date
PL438618A1 (pl) 2023-01-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Pan et al. Effect of low‐temperature preservation on quality changes in Pacific white shrimp, Litopenaeus vannamei: a review
Sriket Proteases in fish and shellfish: Role on muscle softening and prevention.
Ntzimani et al. Slurry ice as an alternative cooling medium for fish harvesting and transportation: Study of the effect on seabass flesh quality and shelf life
Szymczak et al. Effect of constant and fluctuating temperatures during frozen storage on quality of marinated fillets from Atlantic and Baltic herrings (Clupea harengus)
Sriket et al. Retardation of post-mortem changes of freshwater prawn (Macrobrachium rosenbergii) stored in ice by legume seed extracts
Santos-Yap 4 Fish and Seafood
Takahashi et al. Effect of various protease inhibitors on heat-induced myofibrillar protein degradation and gel-forming ability of red tilefish (Branchiostegus japonicus) meat
Gandotra et al. Change in proximate composition and microbial count by low temperature preservation in fish muscle of Labeo rohita (Ham-Buch)
Wang et al. Preliminary mechanism of acidic electrolyzed water ice on improving the quality and safety of shrimp
Martínez et al. Autolytic degradation of belly tissue in anchovy (Engraulis encrasicholus)
Strateva et al. Histological, physicochemical and microbiological changes in fresh and frozen/thawed fish
Sriket et al. Post-mortem changes of muscle from fresh water prawn (Macrobrachium rosenbergii) as influenced by spawning stages
Wei et al. Application of high-hydrostatic pressure to extend shelf life of miso-marinated escolar loins during cold storage
Rodríguez‐Jerez et al. Histamine, putrescine and cadaverine formation in Spanish semipreserved anchovies as affected by time/temperature
Gómez-Estaca et al. Functional aptitude of hake minces with added TMAO-demethylase inhibitors during frozen storage
PL243225B1 (pl) Sposób poprawy dojrzałości mięsa marynat zimnych ze śledzi poławianych w okresie żerowania
Klomklao et al. Seafood enzymes: Biochemical properties and their impact on quality
Kamiński et al. The effect of previous storage condition on the diffusion and contribution of digestive proteases in the ripening of marinated Baltic herring (Clupea harengus)
Castañeda et al. Microstructural changes and the effect on myofibril proteins in yamu (Brycon amazonicus) fish meat during cold storage
Kose et al. Sustainability of fermented fish products
Kitanovski et al. Extension the shelf-life of fresh golden rainbow trout via ultra-fast air or cryogenic carbon dioxide super chilling
Kang et al. Heat-induced softening of surimi gels by proteinases
Mazorra-Manzano et al. Pacific whiting (Merluccius productus) underutilization in the Gulf of California: muscle autolytic activity characterization
PL237103B1 (pl) Sposób marynowania ryb morskich i słodkowodnych opornych na marynowanie
Kamiński et al. Application of a crude digestive proteases preparation to improve the ripening of marinated fillets from low‐technological value Baltic herring (Clupea harengus membras L.)