PT100013A

PT100013A - Processo para a preparacao de acidos 2,4-dioxo-pirido{2,3}pirimidino-3-aceticos e dos seus sais e esteres

Info

Publication number: PT100013A
Application number: PT100013A
Authority: PT
Inventors: Harry R Howard
Original assignee: Pfizer
Priority date: 1991-01-17
Filing date: 1992-01-15
Publication date: 1993-01-29
Also published as: FI933244A7; FI933244L; IE920120A1; FI933244A0; WO1992012979A1; CA2100164A1; EP0568540A1; JPH05509108A

Description

0 presente invento diz respeito-a''.'ácidos 2,4-dioxo--pirido[2,3-d]pirimidina-3-acéticos. Os compostos são úteis no controlo de determinadas complicações crónicas associadas a diabetes melitus (por exemplo cataratas diabéticas, retinopatia e neuropatia). O presente invento diz também respeito a composições farmacêuticas constituídas por estes compostos e à utilização destes compostos no tratamento de complicações associadas a diabetes mellitus.

As anteriores tentativas no sentido de obter agentes antidiabéticos administráveis por via oral mais eficazes envolveram, na sua maioria, a tentativa de sintetizar novos compostos que diminuissem os níveis de açúcar no sangue. Mais recentemente foram efectuados diversos estudos sobre o efeito de diversos compostos orgânicos no que diz respeito à prevenção ou interrupção de determinadas complicações crónicas associadas a diabetes, tais como cataratas diabéticas, retinopatia e neuropatia, etc. Por exemplo K. Sestanj e outros descrevem no pedido de patente nos E.U.A. ns 3 821 383 determinados inibidores da reductase de aldose, tais como o ácido l,3-dioxo-lH-benz[d,e]isoquinolina--2(3H)-acético e alguns derivados deste ácido com ele intimamente relacionados, que são úteis para este efeito apesar de não terem a reputação de agentes hipoglicémicos. Estes compostos funcionam como inibidores da actividade da enzima reductase de aldose que é a principal responsável pela catalisação da redução das aldoses (tais como a glucose e a galactose) para os correspondentes polióis (tais como o sorbitol e o galactitol) no corpo humano. Deste modo se evita ou reduz indesejadas acumulações de galactitol no cristalino dos pacientes galactossémicos ou de sorbitol no cristalino, retina, sistema nervoso periférico e rins de pacientes diabéticos. Consequentemente, estes compostos controlam determinadas complicações diabéticas, incluindo as de natureza ocular, uma vez que, como jã é do conhecimento dos especialistas -4-

do assunto, a presença de polióis no cristalino do olho conduz à formação de cataratas e à concomitante perda da transparência do cristalino. 0 pedido de patente nos E.U.A. depositado por Fujisawa Pharm. K. K. sob o nM 734 419 e o pedido de patente europeia na 331 059 dizem respeito a ácidos 2,4-dioxo-l(2H)-quinazolinoacéti· co substituídos na posição 3, isoméricos, e reivindicam, respec-tivamente, uma actividade inibidora da reductase de aldose e uma actividade diurética ou anti-hipertensora. i

Os ácidos 1,2,3,4-tetra-hidro-2,4-dioxo-3-quinazolina--alcanóico e a sua utilização como reguladores do crescimento das plantas, como fungicidas e como agentes anti-alérgicos foram descritos pela Akademie der Wissenschaften der DDR (Academia das Ciências da R.D.A.) na patente alemã (democrática) ns 250 118. E. Papadopoulos descreve em Journal of Heterocvclic Chemistrv. ns 15, p. 515, 1981, os procedimentos para a preparação de ácidos 2,4-quinazolinodiona-3-acéticos.

J. Bompart e outros em Ann. Pharm. Fr.. ns 46(6), pp. 361-370, 1988 e C. Montginoul e outros em Ann. Pharm. Fr.. ns 46(4), pp. 223-232 descrevem ainda uma série de ácidos 3-aril--2,4-dioxo-l(2H)-quinazolina acéticos e derivados destes como sendo potenciais inibidores da desnaturação da albumina do soro bovino. A Akademie der Wissenschaften der DDR (Academia das Ciências da R.D.A.) descreve ácidos 6,8-di-haloquinazolinaon-3--acéticos na patente alemã (democrática) ns 155 853. i i

0 presente invento diz respeito a compostos da fórmula

I 0

CHg-COOR2 0

I em que

J X representa hidrogénio, flúor, cloro, bromo, trifluorometi-lo, alquilo com la 4 átomos de carbono, alcoxi com la 4 átomos de carbono ou (alquil com 1 a 4 átomos de carbono)-tio, Q representa um radical alquileno divalente com um a três átomos de carbono, 1

R representa fenxlo, tiazolofenilo, trifluorometiltiazolofe-nilo, benzotiofenilo, benzoxazolilo, benzotiazolilo, fenilo-xadiazolilo, tiazolopiridinilo, oxazolopiridinilo, imidazopi-ridinilo, triazolopiridinilo ou indolilo, em qpe qualquer um dos referidos grupos fenilo, benzotiofenilo, benzoxazolilo, benzotiazolilo e feniloxadiazolilo pode estar facultativamente substituído no anel benzeno com um máximo de dois substituintes idênticos ou não, sendo os referidos substi-tuintes idênticos seleccionados entre flúor, cloro, bromo, trifluorometilo, alquilo com 1 a 4 átomos de carbono e alcoxi com la 4 átomos de carbono e os referidos substituintes não idênticos seleccionados entre flúor, cloro, bromo, trifluorometilo, metilo e metoxi e 2 . R representa hidrogénio ou alquilo com la 6 átomos de carbono, e aos sais farmaceuticamente aceitáveis destes compostos. . . 1

Numa forma de execução preferida do presente invento R representa fenilo ou benzotiazol-2-ilo ou um derivado de fenilo ou de benzotiazol-2-ilo substituído no anel. Com maior preferên-cia, R representa 3,4-diclorofenilo ou 4-bromo-2-fluorofenilo. São compostos preferidos de acordo com o presente invento: ácido 1-(4-bromo-2-fluorofenilmetil)-1,4-di-hidro-2,4-dioxo--3(2H)-pirido[2,3-d]pirimidinoacético, ácido l-(4-bromo-2-fluorofenilmetil)-6-cloro-l,4-di-hidro- -2,4-díoxo-3(2H)-pirido[2,3-d]pirimidinoacético e ácido 1-(3,4-diclorofenilmetil)-1,4-di-hidro-2,4-dioxo-3(2H)--pirido[2,3-d]pirimidinoacético.

Compostos específicos de acordo com o presente invento incluem: ácido l-((6-clorobenzotiazol-2-il)metil)-l,4-di-hidro-2,4--dioxo-3(2H)- pirido[2,3-d]pirimidinoacético; ácido 1—((6-fluorobenzotiazol-2-il)metil)-l,4-di-hidro-2,4--dioxo-3(2H)-pirido[2,3-d]pirimidinoacético; ácido l-((6-(trifluorometil)benzotiazol-2-il)metil)-l,4-di--hidro-2,4-dioxo-3(2H)-pirido[2,3-d]pirimidinoacético;

ácido 6-fluoro-l-((6-(trifluorometil)benzotiazol-2-il)metil)--1,4-di-hidro-2,4-dioxo-3(2H)-pirido[2,3-d]pirimidinoacético; ácido l-(5-fluorobenzoxazol-2-il)metil)-l,4-di-hidro-2,4- -dioxo-3 (2H) --pirido[2,3-d]pirimidinoacético; ácido 1- (2,4-diclorofenilmetil)-l,4-di-hidro-2,4-dioxo-3(2H)--pirido[2,3-d]pirimidinoacético; ácido 6-cloro-l-(3,4-diclorofenilmetil)-l,4-di-hidro-2,4-

dioxo-3(2H)-pirido[2,3-d]pirimidinoacético; ácido 1-(3,4-diclorofenilmetil)-1,4-di-hidro-6-metoxi-2,4-dioxo-3(2H)-pirido[2,3-d]pirimidinoacético; ácido 1-(3,4-diclorofenilmetil)-l,4-di-hidro-6-metil-2,4-dio-xo-3(2H)-pirido[2,3-d]pirimidinoacético; ácido l-(4-bromo-2-fluorofenilmetil)-6-fluoro-l,4-di-hidro--2,4-dioxo-3(2H)-pirido[2,3-d]pirimidinoacético; ácido 1-(4-bromo-2-fluorofenilmetil)-1,4-di-hidro-6-metoxi--2,4-dioxo-3(2H)-pirido[2,3-d]pirimidinoacético;

ácido l-(4-bromo-2-fluorofenilmetil)-1,4-di-hidro-6-metil- -2f4-dioxo-3(2H)-pirido[2,3-d]pirimidinoacético; o presente invento diz também respeito a uma composição farmacêutica para o tratamento de complicações crónicas para o tratamento de complicações crónicas associadas a diabetes constituída por um composto da fórmula I ou por um seu sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável numa quantidade que seja eficaz para evitar ou aliviar estas complicações crónicas e por um suporte farmaceuticamente aceitável. As composições específicas preferidas de acordo com o presente invento são as que contêm os compostos específicos preferidos precedentemente mencionados. O presente invento diz também respeito a um método para tratar um paciente diabético de modo a evitar ou aliviar as complicações crónicas manifestadas pelo referido paciente e caracterizado por se administrar ao referido paciente diabético uma quantidade de um composto da fórmula I ou de um seu sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável com o objectivo de evitar ou aliviar estas complicações. O presente invento diz ainda respeito a compostos das seguintes fórmulas IV, V e VI: ο

V 2 (em que R representa alquilo com 1 a 6 átomos de C)

2 (em que R representa alquilo com 1 a 6 átomos de C) que são, respectivamente, alquil 5-halo-2-(3-alcòxicarbonilmetil-ureido)piridina-3-carboxilatos, alquil l,4-di-hidro-2,4-dioxo-3-(2H)-pirido[2,3-d]pirimidina acetatos e alquil l-(benzil substituídos) 1,4-di~hidro-2,4-dioxo-3(2H)-pirido[2,3-d]pirimidin- 1 2 oacetatos em que X, Q, R e R têm os significados atrás indicados. estes compostos são úteis como intermediários para a preparação de compostos da fórmula I. O seguinte esquema de reacção ilustra a preparação dos compostos de acordo com o presente invento. X co2h

nh2 11

I 11

2 (em que R representa alquilo com 1 a 6 átomos de C)

2 . 2 (em que R representa alquilo (em que R representa H) com 1 a 6 átomos de C)

I

VI χ - - 7 ~ ? -11-

De acordo com o processo utilizado' ’ pára a preparação dos compostos do presente invento converte-se, com o auxílio de um reagente adequado ou de vários reagentes adequados, um éster do ácido carboxílico adequadamente substituído da fórmula VI no composto em epígrafe da fórmula I. Os reagentes que podem ser utilizados nesta transformação são aqueles que são frequentemente utilizados pelos especialistas da técnica de conversão de ésteres de ácidos carboxílicos nos correspondentes ácidos carboxílicos e podem incluir hidróxidos de sódio ou de potássio, ácido clorídrico, ácido trifluoroacético, etc.. Estes reagentes podem ser usados na presença ou na ausência de um solvente inerte no que diz respeito à reacção em causa, tal como água, um álcool inferior, um éter inferior ou um éter cíclico, ou um ácido orgânico (tal como ácido acético). Prefere-se para este passo uma solução de hidróxido de sódio em água. Além disso, estas reacções podem ser efectuadas a uma temperatura compreendida entre cerca de 0°C e o ponto de ebulição do solvente utilizado, sendo realizadas de preferência entre cerca de 20°C e cerca de 40°C. O isolamento dos produtos desejados da fórmula I pode ser efectuado mediante o ajuste do pH da mistura de reacção para valores compreendidos entre 1 e 7, seguido pela filtração do produto ácido precipitado da fórmula I ou pela extracção do produto bruto para dentro de um solvente miscível com água que pode ser subsequentemente secado e evaporado até se obter o produto ácido da fórmula I. 0 produto em bruto I obtido pode ser ainda mais purificado mediante a sua cristalização/recristalização a partir de um sistema solvente adequado ou mediante métodos cromatográficos.

Os ésteres do ácido carboxílico apropriadamente substi- 12 . tuidos da formula VI (em que Q, R e R têm os significados atrás mencionados), os precursores imediatos dos compostos em epígrafe da fórmula I, podem ser facilmente preparados mediante a N-alqui-lação dos compostos N-l não substituídos da fórmula V em analogia -12-

com os métodos descritos na literatura cientifica e familiares dos especialistas do assunto. Assim, os intermediários da fórmula V, que possuem um átomo de hidrogénio removível na posição 1 do pirido[2,3-d]pirimidino acetato, podem ser alquilados com diversos compostos arilalquilo ou heteroarilalquilo activados da 1 1

J

fórmula geral Z-Q-R , em que Q e R têm os significados anterior-mente indicados e Z representa um grupo dissociado tal como um halogéneo ou um (alcano inferior)sulfonato. Esta reacção particular é normalmente efectuada na presença de um agente de condensação de bases, tal como um hidreto, um alcanoato ou uma amida de metal alcalino ou um composto metálico de alquilo ou de arilo, consoante os casos. Além disso, a reacção é geralmente efectuada num solvente orgânico inerte no que diz respeito à reacção em causa, usando-se de preferência uma N,N-di(alquil inferior)(alcano inferior)amida caso se pretenda optimizar os resultados; são agentes preferidos neste contexto o hidreto de sódio como agente de condensação de bases e a Ν,Ν-dimetilformamida como solvente. Em geral, utilizam-se quantidades substancialmente equimolares dos reagentes. A temperatura está compreendida preferencialmente entre cerca de 0°C e o ponto de ebulição do solvente utilizado por um período de cerca de meia hora a cerca de 48 horas. Na prática, a reacção é geralmente efectuada à temperatura ambiente durante um período de tempo que é frequentemente inferior a 24 horas. Além disso e apesar de esta reacção poder ser realizada sob pressões que podem atingir as 5 atmosferas, na prática este passo é adequadamente realizado sob pressão atmosférica, em geral numa atmosfera inerte tal como uma atmosfera de azoto ou de árgon adequadamente isenta de humidade que poderia diminuir o rendimento do produto intermediário VI. Uma vez completada a reacção, o que pode ser determinado por diversos métodos (tais como cromato-grafia em camada fina), os ésteres N-l substituídos da fórmula I desejados são recuperados a partir da mistura de reacção mediante qualquer uma das técnicas padrão conhecidas dos especialistas -13-

do assunto. Na prática, a mistura de reacção?é primeiro diluída com água e o produto da reacção em bruto é depois filtrado (no caso de ser um produto sólido precipitado) ou extraído para dentro de um solvente miscível com água adequado a partir do qual o intermediário em bruto da fórmula VI pode ser isolado mediante evaporação do solvente até à secura. A ulterior purificação destes compostos pode ser melhor realizada no caso dos produtos finais ácidos da fórmula I, isto é, mediante cristalização/recris-talização a partir de um sistema solvente adequado ou mediante cromatografia do produto de reacção em bruto.

Finalmente, os ésteres N-l não substituídos da fórmula V podem ser preparados por um dos diversos métodos descritos na literatura científica. Por exemplo, E. Papadopoulos descreveu em Journal of heterocvclic Chemistrv. vol. 18, p. 515, 1981, um

procedimento para a conversão de um éster ureido num ácido 2,4-quinazolinodiana-3-acético mediante o tratamento do primeiro com hidróxido de amónio concentrado em etanol a 25°C. Nos exemplos descritos no âmbito do presente invento os ureido ésteres da fórmula IV são também optimamente convertidos nos compostos da fórmula V mediante a acção de hidróxido de amónio concentrado em etanol a 50°C. Os mesmos ureido ésteres da fórmula IV são preparados mediante a condensação do nicotinato de metilo III apropriado com um éster do ácido isocianoacético, sendo esta condensação efectuada com quantidades equimolares dos dois componentes na presença ou na ausência de um solvente inerte no que diz respeito à reacção em causa. Em todos os casos, os compostos da fórmula III, os compostos de partida para a preparação dos ureido ésteres da fórmula IV, ou estão comercializados ou podem ser facilmente preparados mediante métodos e procedimentos descritos na literatura científica.

Os ésteres do tipo estrutural gebal VI podem ser isolados antes de ser convertidos nos ácidos da fórmula estrutural I. Nos casos em que se deseja um éster diferente, o ácido I pode ser esterifiçado mediante qualquer um dos diversos processos conhecidos dos especialistas em química orgânica. Por exemplo, o ácido I pode ser suspendido num álcool com 1 a 6 átomos de carbono apropriado, tratado com um ácido inorgânico adequado (por exemplo ácido clorídrico ou ácido sulfúrico) e depois agitado sob uma atmosfera inerte, isenta de humidade, a uma temperatura compreendida entre a temperatura ambiente e aproximadamente o ponto de ebulição do álcool utilizado. O éster bruto VI assim obtido pode ser isolado mediante a remoção do álcool solvente e a purificação por recristalização, cromatografia, destilação ou outra técnica apropriada.

As bases químicas utilizadas no presente invento para preparar os atrás mencionados sais de adição de base farmaceuti-camente aceitáveis são aquelas que não formam sais de adição de base tóxicos com os ácidos 2,4-dioxo-pirido[2,3-d]pirimidina-3-acéticos 1-substituídos, tais como o ácido l-(4-bromo-2-fluorofe-nilmetil)-6-cloro-l,4-di-hidro-2,4-dioxo-3(2H)-pirido[2,3-d]piri-midinoacético. Estes sais de adição de base não tóxicos particulares incluem aqueles que são derivados de catiões farmaceutica-mente aceitáveis tais como sódio, potássio, magnésio, etc. Estes sais podem ser facilmente preparados mediante o tratamento dos compostos ácidos atrás mencionados com uma solução aquosa do catião farmacologicamente aceitável e a subsequente evaporação até à secura da solução resultante, de preferência sob pressão reduzida. Alternativamente, também se pode preparar estes sais mediante a mistura de soluções alcanólicas inferiores dos compostos ácidos com o desejado alcóxido de metal alcalino e a subsequente evaporação até à secura da solução resultante de modo semelhante ao precedente. Em ambos os casos, têm de empregar-se quantidades estequiométricas dos reaqentes a fim de assegurar o completar da reacção e rendimentos máximos no que se refere aos sais de adição de base finais desejados.

Além disso, podem ser preparados sais do composto em epígrafe usando bases orgânicas farmacologicamente aceitáveis para preparar os sais, incluindo estas bases orgânicas compostos tais como dietanolamina, meglumina, ciclohexilamina, diciclohexil-amina, etc. Os sais derivados destas bases orgânicas podem ser preparados mediante a combinação dos dois reagentes em quantidades essencialmente equimolares num solvente adequado a partir do qual pode ser isolado o sal de adição de base derivado em virtude da sua reduzida solubilidade no sistema solvente, ou mediante a concentração até à secura do sistema solvente seguida pela cristalização/recristalização do sal em bruto num sistema solvente adequado.

Os compostos de partida requeridos para a preparação dos compostos da fórmula I ou são compostos conhecidos e comercializados ou encontram-se descritos na literatura ou podem ainda ser facilmente sintetizados pelos especialistas a partir de reagentes químicos comuns por processos convencionais de síntese orgânica. Por exemplo o ácido 2-aminonicotínico pode ser facilmente praparado a partir do 2-aminonicotinonitrilo conhecido (Beilstein, n2 22, p. 542).

Os compostos da fórmula I e os sais farmaceuticamente aceitáveis destes compostos (doravente também designados por compostos activos de acordo com o presente invento) podem ser facilmente adaptados a uma utilização terapêutica como inibidores da reductase de aldose destinados ao controlo de determinadas complicações diabéticas crónicas como resultado da sua capacidade para reduzir os níveis de sorbitol no cristalino e nos nervos -16-

periféricos (por exemplo o nervo ciático) de pacientes diabéticos. Os compostos activos de acordo com o presente invento podem ser administrados a mamíferos afectados (incluindo seres humanos) por qualquer uma das vias de administração oral, tópica ou parentérica. Em geral, estes compostos são administrados em dosagens compreendidas entre cerca de 0,50 mg e cerca de 50 mg por kg de peso corporal por dia, apesar de poderem necessariamente ocorrer variações que serão função do peso e do estado de saúde do paciente a ser tratado e da via de administração particular escolhida.

Estes compostos podem ser administrados quer isoladamente quer em combinação com suportes farmaceuticamente aceitáveis por qualquer uma das vias de administração atrás referidas, sendo esta administração efectuada numa única dose ou subdividida em doses múltiplas. Mais em particular, os compostos activos de acordo com o presente invento podem ser administrados sob uma ampla variedade de formas de dosagem, isto é, podem ser combinados com diversos suportes inertes farmaceuticamente aceitáveis sob a forma de comprimidos, cápsulas, drageias, rebuçados, pós, sprays, suspensões aquosas, soluções injectáveis, elixires, xaropes, etc. Estes suportes incluem diluentes sólidos ou agentes de enchimento, meios aquosos estéreis e diversos solventes orgânicos não tóxicos. Em geral, os compostos activos de acordo com o presente invento estarão normalmente presentes nestas formas de dosagem em concentrações compreendidas entre cerca de 0,5% e cerca de 90%, sendo as percentagens ponderais referidas ao peso da totalidade da composição, a fim de se obter a unidade de dosagem desejada.

No caso da administração se realizar por via oral, podem utilizar-se comprimidos contendo diversos excipientes tais como citrato de sódio, carbonato de cálcio e fosfato de cálcio em -17-

ι

conjunto com diversos agentes desintegrantes" tais como amido, de preferência amido de batata ou de tapioca, ácido algínico e determinados silicatos complexos em conjunto com agentes de ligação tais como polivinilpirrolidona, gelatina e acácia. Além disso, determinados agentes de lubrificação tais como estearato de magnésio, lauril sulfato de sódio e talco são frequentemente úteis no que diz respeito à fabicação de comprimidos. As composições sólidas de tipo semelhante também podem ser utilizadas como agentes de enchimento em cápsulas de gelatina com recheio mole ou duro; neste contexto são também materiais preferidos os glicóis de polietileno de elevada massa molecular. Quando se pretende preparar suspensões aquosas e/ou elixires administráveis por via oral, o ingrediente activo essencial dessas suspensões aquosas e ou elixires pode ser combinado com diversos agentes edulcorantes ou aromatizantes, com corantes ou agentes de tingimento e, se desejado, também com agentes emulsionantes e/ou de suspensão, em conjunto com diluentes tais como água, etanol, propileno glicol, glicerina e diversas combinações destes diluentes entre si.

No caso da administração se efectuar por via parentéri-ca, as soluções dos compostos activos de acordo com o presente invento podem ser preparadas tendo em conta a solubilidade do composto ou do sal a ser utilizado. Assim, podem usar-se soluções em óleo de sésamo ou de amendoim ou em propileno glicol aquoso ou Ν,Ν-dimetilformamida aquosa bem como soluções aquosas estéreis. Estas soluções aquosas deverão ser adequadamente tamponadas, se necessário, e o diluente líquido deverá ser primeiramente tornado isotónico com solução salina ou com glucose suficientes. Estas soluções aquosas particulares são especialmente adequadas para injecção intravenosa, intramuscular, subcutânea e intraperito-neal. Neste contexto, os meios aquosos estéreis utilizados podem ser todos facilmente obtidos por técnicas padrão bem conhecidas dos especialistas do assunto. Adicionalmente, também se pode administrar os compostos topicamente por' intermédio de uma solução oftálmica apropriada (por exemplo 0,5% a 2,0%) aplicada gota a gota ao olho. A utilidade dos compostos de acordo com o presente invento como agentes para o controlo de complicações diabéticas crónicas é previsível como consequência da medição da sua capacidade para (1) inibir a actividade enzimática da reductase de aldose isolada; (2) reduzir ou inibir a acumulação de sorbitol no nervo ciático e no cristalino de ratos agudamente estreptozotoci-nizados (isto é, diabéticos); (3) inverter os níveis a priori elevados de sorbitol no nervo ciático e/ou no cristalino de ratos sofrendo de diabetes crónica induzida por estreptozotocina; (4) evitar ou inibir a formação de galactitol no cristalino de ratos agudamente galactossémicos; e/ou (5) retardar a formação de cataratas e reduzir a severidade da opacidade do cristalino em ratos galactossémicos crónicos.

Os Exemplos que se seguem ilustram a preparação dos compostos de acordo com o presente invento. Nenhum dos pontos de de fusão foi corrigido. As razões entre os solventes utilizados na cromatografia em camada fina (CCF) são razões entre volumes.

Exemplo 1 1- (4‘-Bromo-2-f luorofenilmetil) -6-cloro-l. 4-di-hidro-2.4-dioxo-3 (-2H-PÍridor2.3-dlpirimidinoacetato de etilo A. Ácido 2-amino-5-cloronicotínico

Tratou-se uma mistura de 10 g (72 mmol) de ácido 2-aminonicotínico e de 300 ml de ácido acético com cloro gasoso -19-

durante uma hora à temperatura ambiente. Durante este periodo a solução tornou-se inicialmente homogénea e depois precipitou-se um produto amarelo. A mistura de reacção foi então vertida para dentro de 1000 ml de éter etílico, agitada durante meia hora e depois filtrada. Os resíduos sólidos foram lavados com éter etílico e depois secados, obtendo-se 12,46 g (99%9 do composto em epígrafe, p.f. 250-255°C. B. 2-Amino-5-cloronicotinato de metilo

Uma mistura de 6,2 g (36 mmol) do composto em epígrafe do Exemplo IA e de 70 ml de metanol foi tratada com cloreto de hidrogénio gasoso durante duas horas, aquecido até à temperatura de refluxo e mantido a essa temperatura durante 16 horas (no decurso das quais se obteve uma solução homogénea) e depois tratado com cloreto de hidrogénio gasoso durante mais duas horas. A CCF (CHClg/metanol 90:10) revelou ter-se completado a reacção (Rf 0,70 contra 0,10 para o composto em epígrafe do Exemplo IA). 0 solvente foi removido sob vácuo, os resíduos sólidos foram lavados com NaHC03 a 5% e depois com água e foram subsequentemente secados de um dia para o outro sob vácuo, obtendo-se o composto em apígrafe, 6,21 g (93%), p.f. 260-263°C, m/e: 186 (p+), 188.

De modo semelhante se converteram 5,0 g (36 mmol) de ácido 2-aminonicotínico (Aldrich Chemical Co.) em 50 ml de metanol em 5,4 g (98%) de 2-aminonicotinato de metilo, p.f. 82-84 °C. -20-

C. 6-Cloro-l.4-di-hidro-2.4-dioxo-3(2H)-pirido Γ2.3-dlpirimidino-acetato de etilo

Uma mistura de 6,21 g (33 mmol) do composto em epígrafe do Exemplo 1B e de 3,73 ml (33 mmol) de isocianatoacetato de etilo foi aquecida até a mistura se tornar homogénea e o aquecimento foi então prosseguido durante mais 15 minutos. No decurso do arrefecimento o material transformou-se num sólido duro e borrachoso que foi depois dissolvido em 50 ml de etanol absoluto, tratado com 20 ml de NH40H e agitado durante 3 horas a 50eC. A CCP ((acetato de etilo)/hexano 1:1) revelou a conversão num produto (para Rf 0,60). A solução foi arrefecida, o excesso de etanol foi removido sob vácuo e o resíduo aquoso foi acidificado com cerca de 100 ml de HC1 IN. O sólido amarelo-alaranjado resultante foi filtrado, lavado com HC1 IN e secado a fim de obter-se 7,2 g do produto em bruto. A recristalização a partir de etanol deu origem a 2,33 g (25%) do composto em epígrafe, p.f. 112-114°C, m/e: 283 (p+) , 285. Análise para C^H^gO^Cl: calculado: C 46,57; H 3,55; N 14,81; encontrado: C 46,21; H 3,51; N 14,85.

De modo semelhante, 5 g de 2-aminonicotinato de metilo e 4,66 ml de isocianato-acetato de etilo deram origem, após o tratamento com 60 ml de etanol e com 20 ml de NH40H concentrado a 50°C durante uma hora, a acidificação para pH 3, a extracção com acetato de etilo (2x100 ml) e a concentração dos extractos orgânicos, a 6,21 g do produto em bruto. A recristalização a partir de etanol deu origem a 3,2 g (35,5%) de quarto-hidrato de 1,4-di-hidro-2,4-dioxo-3(2H)-pirido[2,3-d]pirimidinoacetato de etilo, p.f. 109-113°C; m/e: 249(p+). Análise para cnHnN3°4'1_ /4H20: calculado: C 52,07; H 4,57; N 16,656; encontrado: C 52,15; H 4,43; N 16,62. D. 1-(4-Bromo-2-fluorofenilmetil^-6-cloro-l.4-di-hidro-2.4-dioxo--3(2H)-piridof2.3-dlpirimidino-acetato de etilo

Sob uma atmosfera de N2, num balão secado à chama munido de um agitador magnético lavou-se com pentano 0,310 g (7,8 mmol) de NaH (a 60% numa dispersão em óleo). 0 sólido isento de óleo resultante foi suspendido em 35 ml de N,N-dimetilformamida (DMF) anidra (mediante passagem por um crivo) e foi-lhe adicionado em porções e sob agitação o composto em epígrafe do Exemplo 1C (2,00 g, 7,1 mmol). Uma vez terminada a libertação de H.. (após cerca de meia hora), adicionou-se numa só porção brometo de 4-bromo-2-fluorobenzilo (1,89 g. 7,1 mmol). Passadas duas horas obteve-se uma suspensão espessa a que se adicionou mais 10 ml de DMF. Passadas mais 16 horas à temperatura ambiente a CCF (hexano-/(acetato de etilo) 75;25) revelou a existência de produto (Rf 0,80) e a inexist-encia de composto de partida (Rf 0,30). A mistura de reacção foi vertida sobre 200 ml de gelo/I^O, agitada durante 30 minutos, filtrada, bem lavada com H20 e depois secada ao ar, obtendo-se 3,12 g do produto em bruto. A recristalização a partir de etanol deu origem ao composto em epígrafe sob a forma de um produto puro, 2,85 g (86,1%), p.f. 145-147*0; m/e: 469 (P+), 471.

De modo semelhante, 3,0 g (12 mmol) de 1,4-di-hidro--2,4-dioxo-3(2H)-pirido[2,3-d]pirimidino-acetato de etilo, 0,529 g (13,2 mmol) de NaH a 60% e 3,22 g (12,0 mmol) de brometo de 4-bromo-2-fluorobenzilo em 50 ml de DMF anidra deram origem a 2,65 g (50,5%) de l-(4-bromo-2-fluorofenilmetil)-l,4-di-hidro-2,4--dioxo-3(2H)-pirido[2,3-d]pirimidino-acetato de etilo, p.f. 140-143 °C.

De modo semelhante, 1,74 g (7,0 mmol) de 1,4-di-hidro--2,4-dioxo-3(2H)-pirido[2,3-d]pirimidino-acetato de etilo e 1,36 )

ml (7,0 mmol) de alfa,3,4-triclorotolueno (a'97%, Aldrich Chemical Co.) deram origem a 2,61 g (91%) de 1-(3,4-diclorofenilmetil)-2,4--dioxo-3(2H)-pirido[2,3-d]pirimidino-acetato de etilo, p.f. 136-138°C.

Exemplo 2 Ácido 1-(4-bromo-2-fluorofenilmetil)-6-cloro-l.4-di-hidro-2.4- -dioxo-3(2H)-PÍridor2.3-dlpirimidino-acético

Uma mistura de 1,40 g (2,97 mmol) do composto em epígrafe do Exemplo 1D, de 15 ml de HC1 concentrado e de 50 ml de ácido acético glacial foi aquecida até à temperatura de refluxo e mantida a essa temperatura durante 16 horas. A CCF (hexano/(acetato de etilo) 75:25) apenas revelou uma mancha para Rf 0,10. Apõs concentração sob vácuo o resíduo foi recristalizado a aprtir de (acetato de etilo)/hexano (120:55), obtendo-se o composto em epígrafe sob a forma de cristais amarelos, 0,728 g (55,3%), p.f. 195-197°C. Análise para c16H10BrClN304: calculado: C 43,42; H 2,28; N 9,49; encontrado: C 43,46; H 2,34; N 9,35.

Exemplo 3

Hidrocloreto do ácido 1-M-bromo-2-fluorofenilmetil)-6-cloro-l.4--di-hidro-2,4-dioxo-3(2H)-piridor2,3-dlpirimidino-acético

Uma mistura de 2,30 g (5,27 mmol) de l-(4-bromo-2--fluorofenilmetil)-6-cloro-l,4-di-hidro-2,4-dioxo-3(2H)-pirido-[2,3-d]pirimidino-acetato de etilo e de 50 ml de NaOH 2N em 100 ml de etanol absoluto foi agitada durante 3 horas à temperatura ambiente, do que resultou uma solução homogénea. A solução foi -23-

acidificada até se ter um pH de 7 e extraída com acetato de etilo (2x100 ml). Os extractos orgânicos foram lavados com água, secados sobre Na2S04 e concentrados sob vácuo, obtendo-se um óleo viscoso. A trituração com hexanos deu origem a 1,3 g do produto em bruto que foi recristalizado a partir de metanol a fim de dar origem ao composto em epígrafe, o,60 g (26%) sob a forma do sal hidrocloreto, p.f. >300°C. Análise para C- -H- _BrFN_o. »HC1: 16 11 3 4 calculado: C 43,22; H 2,72; N 9,45; encontrado: C 43,60; H 2,33; N 9,10.

De modo semelhante, 2,4 g (5,87 mmol) de l-(3,4-diclo-rofenilmetil)-2,4-dioxo-3(2H)-pirido[2,3-d]pirimidino-acetato de etilo em 90 ml de etanol e 20 ml de NaOH 2N deram origem a 0,370 g (17%) de ácido l-(3,4-diclorofenilmetil)-l,4-di-hidro-2,4-dioxo--3(2H)-pirido[2,3-d]pirimidinoacético sob a forma de cristais brancos a partir de (acetato de etilo)/hexano, p.f. 205-208°C; m/e: 379 (p+) , 381. Análise para C16H1;lC12N304: calculado: C 50,55; H 2,92; N 11,05; encontrado: C 50,54; H 2,75; N 10,84.

Exemplo 4

Os compostos dos Exemplos 2 e 3 foram testados quanto à

sua capacidade para reduzir ou inibir a actividade da enzima reductase de aldose por intermédio do procedimento descrito por S. Hayman e outros em Journal of Biolocrical Chemistry, vol. 240, p. 877, 1965 e modificado por K. Sestanj e outros na patente dos E.U.A. ns 3 821 383. Em cada um dos casos, o substrato utilizado foi a enzima reductase de aldose parcialmente purificada obtida a —6 partir da placenta humana. Numa concentração de 10 M os compostos efectuaram uma inibição percentual superior a 70%.

Exemplo 5

Os compostos dos Exemplos 2 e 3 foram testados quanto à sua capacidade para reduzir ou inibir a acumulação de sorbitol no nervo ciático e no cristalino de ratos estreptozotocinizados (isto é diabéticos) pelo procedimento descrito na patente dos E.U.A. ns 3 821 383. No presente estudo, a quantidade de sorbitol acumulada no nervo ciático e no cristalino de cada animal testado foi medida 27 horas após a indução da diabetes. Os compostos foram administrados por via oral numa dose de 25 mg/kg, a intervalos de 4, 8 e 24 horas após a administração de estreptozotoci-na. os resultados obtidos deste modo são apresentados em termos da inibição percentual (%) efectuada pelo composto testado quando comparado com o caso em que não foi administrado qualquer composto (isto é com o controlo ou animal não tratado em que os níveis de sorbitol passam normalmente de aproximadamente 50 a 100 nM/(g de tecido) para valores tão elevados quanto 400 nM/(g de tecido) no período de teste de 27 horas). Deste modo, descobriu-se que cada um dos compostos proporcionava uma redução de pelo menos 60% nos níveis de sorbitol acumulado no nervo ciático de ratos diabéticos e uma redução de pelo menos 4% no cristalino dos referidos ratos.

Lisboa, 15 de Janeiro de 1992

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Claims

REIVINDICAÇÕES ia. - Processo para a preparação de um composto da fórmula (I): o

QR1 em que X representa hidrogénio, flúor, cloro, bromo, trifluorometi-lo, alquilo com la 4 átomos de carbono, alcoxi com 1 a 4 átomos de carbono ou (alquil com 1 a 4 átomos de carbono)-tio, Q representa um radical alquileno divalente com um a três átomos de carbono, R1 representa fenilo, tiazolofenilo, trifluorometiltiazolo-fenilo, benzotiofenilo, benzoxazolilo, benzotiazolilo, feniloxadiazolilo, tiazolopiridinilo, oxazolopiridinilo, imidazopiridinilo, triazolopiridinilo ou indolilo, em que qualquer um dos referidos grupos fenilo, benzotiofenilo, benzoxazolilo, benzotiazolilo e feniloxadiazolilo pode estar facultativamente substituído no anel benzeno com um máximo de dois substituintes idênticos ou não,, sendo os referidos substituintes idênticos seleccionados entre flúor, cloro, bromo, trifluorometilo, alquilo com 1 a 4 átomos de carbono e alcoxi com 1 a 4 átomos de carbono e os referidos substituintes não idênticos seleccionados entre flúor, cloro, bromo, trifluorometilo, metilo e metoxi; e R representa hidrogénio ou alquilo com la 6 átomos de carbono; caracterizado por se fazer reagir um composto da fórmula (VI): 0

co2r2 VI em que 1 X e R têm os significados anteriormente indicados e
2 R representa alquilo com 1 a 6 átomos de carbono, com um reagente acídico ou básico, na presença ou na ausência de um solvente inerte no que diz respeito â reacção, de modo a obter-se um composto da fórmula (I) e, se desejado, se converter um composto da fórmula (I) assim obtido num seu sal farmaceutica-mente aceitável. 3

2a. - Processo de acordo com a reivindicação 1, carac-terizado por R1 representar fenilo ou benzotiazol-2-ilo, ou um derivado de fenilo ou de benzotiazol-2-ilo substituído no anel. 3a. - Processo de acordo com a reivindicação 2, carac-terizado por Q representar metileno e R^ representar benzotiazol--2-ilo não substituído. 4a. - Processo de acordo com a reivindicação 2, carac- . . 1 tenzado por Q representar metileno e R representar benzotiazol- -2-ilo substituído no anel ou fenilo substituído no anel.

5a. - Processo de acordo com a reivindicação 4, carac-terizado por R-1 representar 4-bromo-2-fluorofenilo ou diclorofe-nilo. 6a. - Processo de acordo com a reivindicação 2, carac-terizado por X representar cloro, Q representar metileno e R^ representar fenilo substituído no anel. 7a. - Processo de acordo com a reivindicação 6, carac-terizado por X representar cloro na posição 6 da molécula e R1 representar 4-bromo-2-fluorofenilo.

8a. - Processo de acordo com a reivindicação 1, carac- 2 terizado por R representar alquilo com 1 a 6 átomos de carbono. 9a. - Processo de acordo com a reivindicação 1, carac-terizado por o composto preparado pelo referido processo ser seleccionado entre os seguintes: ácido l-(4-bromo-2-fluorofenilmetil)-1,4-di-hidro-2,4-dioxo--3(2H)-pirido[2,3-d]pirimidinoacético, 4

ácido 1-(4-bromo-2-fluorofenilmetil) -6-cloro-l,4-di-hidro- -2,4-dioxo-3 (2H) -pirido[2,3-d]pirimidinoacético e ácido 1-(3,4-diclorofenilmetil) -1,4-di-hidro-2,4-dioxo- -3(2H)-pirido[2,3-d]pirimidinoacético 10 a - Processo para a preparação de um composto da fórmula;

0 em que X representa hidrogénio, flúor, cloro ou (alquil com la 4 átomos de carbono)tio; e R representa hidrogénio ou alquilo com la 6 átomos de carbono; caracterizado por se condensar um composto da fórmula (III):

com um éster de ácido isociano-acético na presença ou na ausência de um solvente inerte no que diz respeito à reacção e, se 5

desajado, se converter o composto resultante num seu sal farma-ceuticamente aceitável. llâ. - Processo para a fórmula: preparação de um composto da

em que X representa hidrogénio, flúor, cloro, bromo, trifluorometi-lo, alquilo com la 4 átomos de carbono, alcoxi com la 4 átomos de carbono ou (alquil com 1 a 4 átomos de carbono)-tio; Q representa hidrogénio ou um radical alquileno divalente com um a três átomos de carbono;

R representa fenilo, tiazolofenilo, trifluorometiltiazolo-fenilo, benzotiofenilo, benzoxazolilo, benzotiazolilo, feniloxadiazolilo, tiazolopiridinilo, oxazolopiridinilo, imidazopiridinilo, triazolopiridinilo ou indolilo, em que cada um dos referidos grupos fenilo, benzotiofenilo, benzoxazolilo, benzotiazolilo e fenoxidiazolilo pode estar facultativamente substituído no anel benzeno com um máximo de dois substituintes idênticos ou não, sendo os referidos 6 substituintes idênticos seleccionados entre flúor, cloro, bromo, trifluorometilo, alquilo com 1 a 4 átomos de carbono e alcoxi com 1 a 4 átomos de carbono e os referidos substi-tuintes não idênticos seleccionados entre flúor, cloro, bromo, trifluorometilo, metilo e metoxi; e R representa alcoxi com 1 a 6 átomos de carbono; caracterizado por se alquilar um composto da fórmula (V):

C0?R‘ em que X tem o significado anteriormente indicado; e 2 R representa alquilo com 1 a 6 átomos de carbono; com um composto arilalquilo ou heteroarilalquilo activado na presença de um agente de condensação básico e de um solvente inerte no que diz respeito à reacção, e, se desejado, se converter o composto resultante num seu sal farmaceuticamente aceitável. Lisboa, 15 de Janeiro de 1992

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