PT1966130E - Compostos miméticos de lisina modificados - Google Patents

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PT1966130E
PT1966130E PT68491521T PT06849152T PT1966130E PT 1966130 E PT1966130 E PT 1966130E PT 68491521 T PT68491521 T PT 68491521T PT 06849152 T PT06849152 T PT 06849152T PT 1966130 E PT1966130 E PT 1966130E
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PT
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benzamido
carboxylic acid
pyrrolidine
aminoacetyl
compound
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PT68491521T
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Bjarne Due Larsen
Jorgen Soberg Petersen
Ketil Jorgen Haugan
John A Butera
James K Hennan
Edward H Kerns
Evgueni Lvovich Piatnitski
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Zealand Pharma As
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Description

ΕΡ1966130Β1
DESCRIÇÃO
COMPOSTOS MIMÉTICOS DE LISINA MODIFICADOS
Campo
Os presentes ensinamentos referem-se a compostos miméticos cie lisina que têm atividade farmacológica, tal como atividade antiarrítmica, e propriedades desejáveis de biodisponibilidade. Os presentes ensinamentos ainda se referem às composições farmacêuticas que compreendem tais compostos e métodos de utilização e preparação de tais compostos e composições.
Antecedentes Há um reconhecimento elevado de que a comunicação intercelular é essencial para a homeostase, proliferação e diferenciação celulares. Acredita-se que tal comunicação se ja facilitada por junções cornunicantes. Estas estruturas são consideradas uma via para acoplar células e permitir a "comunicação cruzada". (Veja-se em geral. Sperelakis N., eds., Ce11 Interactions and Gap Junctions, CRC Press, Inc. (1989)). A comunicação cruzada entre junções cornunicantes é denominada "comunicação intercelular de junção comunicante" (GJIC).
Em geral, as junções cornunicantes são regiões especializadas da membrana da célula que contêm conjuntos de centenas a milhares de canais densamente reunidas que conectam diretamente o citoplasma de duas células adjacentes. Os canais de junção comunicante são compostos de dois hemicanais, ou de conexons, proporcionados por cada uma das duas células vizinhas. Cada conexon é, por sua vez, composto de seis proteínas chamadas conexinas. 1 ΕΡ1965130Β1
No coraçsLO, a condução de impulsos elétricos ocorre através das junções comunicantes. GJIC anormais estão ligadas a uma variedade de estados de doença, incluindo doença cardíaca. Por exemplo, mostrou-se crue ratinhos :a uma conexma heterozigóticos para o gene Cx43, que codi ventricular especifica, desenvolvem arritmias ventriculares aca repentina. (Guerrero espontâneas e sofrem de morte cardí et al., j. Clm. invest., 99, 1991-1998 (1997)) . Expressão em ratinhos heterozigóti cos está uma incidência aumentada de arrit mias nte isquemia. (Lerner et al., reduzida de Cx43 diretamente ligada ventriculares dur Circuiaiion, iOi, 54/-552 (2000)) . Diversos outros estudos n, 97, 651-660 864-875 (1993); mostraram a expressão reduzida ou a distribuição alterada de Cx43 em corações cronicamente isquémicos, hibernantes ou hipertrofiados. (Kaprelian et al., Circula (1998); Peters et al., Circulation, 88,
Saffitz et al., Cardiovasc. Res., 42, 309-317 (1999)).
Diversos péptidos que influenciam GJIC foram identificados, incluindo os péptidos antiarrítmieos AAP (Aonuma et al., Chem. Pharm. Buli. (Tokyo), 28, 3332-3339 (1980)), AAP10 (Dhein et al,, Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol., 350, 174-184 (1994); Muiler et al., Eur. J. Pharmacol., 327, 65-72 (1997)), e HP5 (divulgado na Patente US N° 4.775.743). Entretanto, estes péptidos exibem as características indesejáveis, incluindo a baixa estabilidade, a semivida curta, e uma falta da disponibilidade biológica oral. O documento WO 2004/048400 descreve dipéptidos que facilitam a comunicação intracelular mediada por junções comunicantes. Este documento propôs que os dipéptidos descritos são úteis no tratamento de doenças associadas com comunicação intracelular de junção comunicante prejudicada. 2 ΕΡ1966130Β1Sumário maneira ampla, os presentes ensinamentos referem-se aos compostos miméticos de reivindicação 1, que têm a tal como atividade antiarrítm iisina, como foi definido na atividade farmacológica útil, íca, e propriedades desejáveis de disponibilidade biológica.
Breve Descrição das Figuras A Figura 1 mostra os resultados de um teste para eotudar o efeito dos compostos no esforço metabólico 1±a condução atrial induzida que retarda e num modelo in vitro como foi descrito em Haugan et ai., J. Cardiovasc. Electrophysiol., 16, 537-545 (2005).
Descrição Pormenorizada
us Presentes tem a Fórmula III ensinamentos proporcionam compostos que
em. e sais que: Y ' é NR2r3; k é 0 ; 3 ΕΡ1966130Β1 Z' é benzoilo opcionalmente substituído com 1-5 grupos Q; ilquilo) , N (C-i-io alquilo) 2, e Q, em cada ocorrência, independentemente é selecionado a partir de F, Cl, Br, I, Ci-io alquilo, CF3, OCF3 N02, O-Ci-10 alquilo, OH, NH2, NH (Ci-io NHC (0) Ci-10 alquilo; R1 é H; R" é H e R3 é selecionado a partir de H, Ci~i0alqui) C (0) R6, e C (0) OR6; R4 é OH ou NH2;
Ra é H ou Ci-ίο alquilo; aiquiio. R° é selecionado a partir de H,
Em algumas formas de realização, Y' é NR2R~’, Rz é H, Pd é C (0) R6 e R6 é H (isto é, RJ é C(0)H) ou um Ci-i0alquilo opcionalmente substituído (por exemplo, R3 é C(0)CH3). benzoilo substituído com grupos y, ntement e se. lecion; ido a pa rtir de F f cif .tí 2Γ f I f L|- d cf3, ocf3 , no2, 0- -Ci-io al< quilo 0'H ]\[H l (Ό 2 n f Ollf ±M x ^ f dlii \ N(Ci-io alqr lilo) 2, e NHC (0 ) Ci — Ί Q 8.1 .quilo e
Os compostos de acordo com os presentes ensinamentos incluem aqueles que têm as seguintes estruturas: ΕΡ1966130Β1
e sais farmaceuticamente aceitáve e hidratos mesmo.
Em outro aspeto, os presentes ensinamentos proporcionam composições farmacêuticas que compreendem um composto de acordo com os presentes ensinamentos e um veiculo farmaceuticamente aceitável.
Revelam-se no presente documento métodos de prevenção ou trs it ame η' t o de uma condi ção pat ológic a que admini; st reLr a um indi viduo com nec essida de do exemplí o, um s 0 ir "h umanc >) de uma quan tidade t erap eficaz de um comp osto ou con rpos ição f a rma cê' ut ic com os pres entes ensi nament os . Os exempl .os d a : patológicas que podem ser tratadas ou prevenidas usando compostos dos presentes ensinamentos incluem, mas não são limitados a, doença cardiovascular (por exemplo, fibrilação atrial, vibração atrial, taquicardia ventricular ou fibrilação ventricular); osteoporose; inflamação do epitélio da desordens do tecido alveolar; 5 ΕΡ1966130Β1 incontinência da bexiga; audição danificada, tal como devido às doenças da cóclea; lesões endoteliais; diabetes incluindo neuropatia diabética e retinopatia; condições relacionadas ao CMS; isquernia (por exemplo, isquemia do sistema nervoso central, da medula espinhal, do cérebro ou da haste do cérebro); desordens do tecido dental que incluem a doença peridental; doenças de rim; manifestações hematológicas (por exemplo, anemia, leucopenia, trombocitopenia, e pancitopenia) especialmente seguindo tratamento com compostos citostáticos ou terapia da irradiação; feridas tais como feridas superficiais e feridas profundas resultando do traumatismo; deficiência eréctil; incontinência da bexiga urinária; dor neuropática; inflamação subcrónica e crónica; câncer; falha da transplantação da medula e da célula de haste; condições que se levantam durante a transplantação das células e dos tecidos ou durante procedimentos médicos tais como a cirurgia; condições causadas por um excesso de espécies de oxigénio reativo, de radicais livres ou de óxido nítrico; doenças ou desordens da gravidez (por exemplo, pré-eclampsia e trabalho prematuro); e acidente vascular ΟΘΙΓθ]θΙΓ6.1
Os compostos e composições farmacêuticas de acordo com os presentes ensinamentos podem ser formulados para a administração parentérica ou oral. A menos que especificado de outra maneira, as seguintes definições são proporcionadas para os termos específicos que são usados na seguinte descrição escrita.
Durante toda a descrição e as reivindicações o código de três letras para aminoácidos naturais é usado assim como 6 ΕΡ1966130Β1 em geral aceite três códigos da letra para outros a-aminoácidos, tais como sarcosina (Sar) . Onde a forma de L ou de D não foi especificada, deve ser compreendido que o aminoácido na pergunta pode ser a forma de L ou de D, Uma mistura de quantidades equimolares de compostos D e L é denominada racémica e designada pelo prefixo DL, por exemplo, DL-leucina. Pode alternativamente ser designada pelo prefixo rac- (por exemplo, rac-leucina) ou pelo prefixo [+/-]. Os presentes ensinamentos incluem todos os estereoisómeros possíveis dos compostos das fórmulas I II e III assim, como dos compostos específicos mostrados no presente documento. 0 termo "péptido" designa no presente documento uma cadeia de duas ou mais moléculas que são ligadas por meio de uma ligação peptídica. Os péptidos podem conter um ou vários aminoácidos nciturciis, um ou vários aminoácidos não naturais, uma ou várias moléculas que não são aminoácidos, mas são capazes de formar ligações peptídicas, ou de misturas dos mesmos. 0 termo "aminoácido" refere-se a uma molécula que tem a fórmula geral NHR-CHR’ -COOH (em que R é H e R' é uma cadeia lateral de aminoácido, ou R e R1 juntamente com o carbono e o azoto ao qual eles estão ligados formam um anel, por exemplo, prolina) a qual é capaz de formar uma ligação peptídica com uma ou várias outras moléculas que têm a mesma fórmula geral, 0 termo engloba ambos aminoácidos L e D.
Um "amin oácido de ocorrêm c i a natura 1" refere -se a um. dOS seguintes 20 aminoácidos: AI 3. (A) , Cys (C) , Ser (S), Thr (I) , Asp (D) , Glu (E), Asn (N) , Glu (Q), His (H) , Arg (R) f Lys (K), Ile (I), Leu (L), Met (M) , Vai (V), Phe (F), Tyr (Y) , Trp (W) , Gly (G), e Pr o (P) . i STormalment e, estes ΕΡ1966130Β1 são L aru-i-no adidos, mas os presentes ensinsitientos igualmente permitem a utilização cie D— aminoácidos.
Como usado no presente documento, o termo "mimético de lisina" refere-se a um aminoácido não natural que compreende um anel C5-salifático ou aromático e pelo menos duas fun^^.οηα 1 idaoes basicas oe amma (isto é, pelo menos uma funcionalidade básica de amina além do que a N-amina terminal). Em alguns casos, a mimético de lisina tem a fórmula NHR-CHR'-COOH, onde R e R' juntamente com o carbono e o azoto ao qual eles estão ligados formam um anel de 5-6 membros, onde o anel (a) contém pelo menos um azoto de anel adicional, por exemplo, ácido imidazolidina-2-carboxílico (±ca), ou (b) carrega um sudstituinte amina, por exemplo, ácido a. m i η o - p i rrolidina-2-carboxíl i c o (4Amp) ou ácido amino-piperidina-2-carboxílico (4Ampi). Em outros casos, o mimético de lisina tem a fórmula NHR-CHR'-COOH onde R é H e R' é uma cadeia lateral que compreende um anel C5-ealifático ou aromático, onde (a) o anel contém pelo menos um azoto de anel ou carrega um substituinte amina, e (b) o anel é separado de metileno da estrutura principal do aminoácido por 1 ou 2 átomos. Um exemplo não limitante de tal mimético de lisina é o amino-fenilalanina (4AmF), onde 1 átomo separa o anel da estrutura principal. Os miméticos de lisina podem igualmente ter a fórmula NHR-CR'R"-COOH onde R é H e R' e R" juntos formam um anel Cs-salifático ou aromático, onde o anel contém pelo menos um azoto do anel ou carrega um substituinte amina. Um exemplo não limitante deste tipo de mimético de lisina é ácido 4-amino-piperidina-4-carboxílico (Pip). Igualmente incluído dentro da definição de "mimético de lisina" são aminoácidos β- e γ- não naturais que compreendem um anel C5-salif ático ou aromático e pelo menos duas funcionalidades básicas de amina como descritas acima, como o ácido 3,5-diamino-benzoico (Damba). Outros miméticos de lisina são análogos 8 ΕΡ1966130Β1 de 4-aminoprolina onde o azoto de anel prolina não está presente (por exemplo, ácido 3- aminociclopentanocarboxílico) ou está localizado em outra posição no anel prolina (por exemplo, ácido J — aminopirrolidi na-l-carboxílico ou 3- aminopi rrolidina- -1- carboxamida). Em qualquer dos miméticos de lisina, as funcionalidades básicas da amina podem ser um grupo amino primário (por exemplo, 4AmF, Damba, 4Ampi, e 4Amp) ou um grupo amino secundário (por exemplo, Pip e Ica). Os exemplos de miméticos de lisina têm grupos amina cíclicos alifáticos e arainas arílicas incluem Damba, 4Amp, 4Ampi, Ica, Pip, e 4AmF, que tem as seguintes estruturas:
0 termo "alquilo" como é usado no presente documento em separado ou como parte de um outro grupo, refere-se a uma cadeia de hidrocarboneto alifática substituída ou não substituída, por exemplo, que tem 1 a 10 átomos de carbono, 9 ΕΡ1936130Β1 que podem ser de cadeia linear ou ramificada. Os exemplos de grupos alquilo incluem metilo (Me), etilo (Et), propilo (por exemplo, n-propilo e isopropilo), butilo (por exemplo, n-butilo, isobutilo, s-butilo, t-butilo), grupos pentilo (por exemplo, n-pentilo, isopentilo, neopentilo) e similares. Incluído especificamente dentro da definição de ''alquilo" são aquelas cadeias de hidrocarboneto alifáticas que são substituídas opcionalmente. 0 termo "alquenilo", como é usado no presente documento em separado ou como parte de outro grupo, refere-se a uma cadeia de hidrocarboneto alifática substituída ou não substituída, por exemplo, que tem de 2 a 10 átomos de carbono, que podem ser de cadeia linear ou ramificada e contêm uma ou várias ligações duplas carbono-carbono. Uma ou várias ligações duplas podem ser internas (tal como, em 2-buteno) ou terminal (tal como, em 1-buteno).
Preferivelmente as porções alquenilo contêm uma ou duas ligações duplas. O termo "alquenilo" inclui ambos isómeros E e Z de cada um de uma ou várias ligações duplas. Incluído especificamente dentro da definição de "alquenilo" são aquelas cadeias de hidrocarboneto alifáticas que são substituídas opcionalmente. Os exemplos de porções alquenilo incluem vinilo, alilo, e butenilo (por exemplo, 1-buteno e 2-buteno). O termo "alquinilo", como é usado no presente documento em separado ou como parte de outro grupo, refere-se a uma cadeia de hidrocarboneto alifática substituída ou nac substituída, por exemplo, quf tem 10 átomos de carbono, que podem ser de cadeia linear ou ramificada e contêm uma ou várias ligações triplas carbono-carbono. Uma ser em de ou varras ligações triplas carbono-carbono podem internas (tal como, em 2-butino) ou terminal (tal como, 1-butino). Incluído especificamente dentro da definição 10 EP19S6130B1 "alquinilo"- sao aquelas caceias de hidrocarboneto alifáticas que são substiruidas opcionalmente. Os exemplos de grupos alquinilo incluem, etinilo, propinilo, butinilo* pentinilo, e similares.
Como é usado no presente documento em separado ou coino parte de um outro grupo, o termo "cicloalquilo" refere-se a grupos carbocíclicos não aromáticos substituídos ou não substituídos, por exemplo, que tem de 3 a 2 0 átomos de carbono de anel e opcionalmente contendo uma ou mais (por exemplo, 1, 2 ou 3) ligações duplas ou triplas, incluindo alquilo ciclizada, alquenilo, e grupos alquinilo. Os grupos cicloalquilo podem ser monocíclicos (por exemplo, ciclohexilo) ou policíclico (por exemplo, sistema de anel espiro, ou por ponte, fusionado), onde os átomos de carbono são localizados dentro ou fora do sistema do anel. Toda a posição apropriada do anel da porção cicloalquilo pode ser covalentemente ligada à estrutura química definida. Os exemplos de grupos cicloalquilo incluem ciclopropilo, ciclopropilmetilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, ciclonexilmetilo, ciclohexiletilo, cicloheptilo, ciclopentenilo, ciclohexenilo ciclohexadienilo, c i c1oheptatrienilo, norbornilo, norpini1o, norca rn i1o, adamantilo, grupos espiro [4.5]decanilo, homólogos, isómeros, e similares. Igualmente são incluídas na definição de grupos cicloalquilo as porções que têm um ou mais anéis aromáticos fusionados (isto é, que tem uma. ligação em comum com) ao anel cicloalquilo, por exemplo, derivados benzo de ciclopentano (indanilal) , ciclohexano (tetra-hidronaftilo), e similares. Incluídos especificamente dentro da definição de "cicloalquilo" são aqueles carbociclos que são substituídos opcionalmente. O termo "arilo", como é usado no presente documento em separado ou como parte de um outro grupo, refere-se a 11 ΕΡ1966130Β1 hidrocarbonetos policíclicos ou monocíclicos aromáticos substituídos ou não substituídos tal como, por exemplo, fenilo, naftilo, antracenilo, fenantrenilo, e similares. Em algumas formas de realização, os grupos arílicos têm de 6 a aproximadamente 20 átomos de carbono. Qualquer posição apropriada do anel da porção arilo pode ser covalentemente ligada à estrutura química definida (por exemplo, 1-naftilo, 2-naftilo, etc) . Incluído especificamente dentro da definição de "arilo" são aqueles hidrocarbonetos aromáticos que são substituídos opcionalmente. G termo "aralquilo" refere-se a uma porção arilo, como definido no presente documento, ligada a uma porção alquilo, como definido no presente documento. Os grupos aralquilo são ligados covalentemente à estrutura química definida através de seus grupos alquilo. Os grupos aralquilo opcionalmente podem ser substituídos na porção arilo, porção alquilo, ou ambos.
Como é usado no presente documento em separado ou como parte de um outro grupo, "cicloheteroalquilo" refere-se a um grupo cicloalquilo não aromático substituído ou não substituído, por exemplo, que tem de 3 a 20 átomos do anel, que contenha 1-4 heteroátomos de anel selecionados independentemente do oxigénio (0), azoto (N) e enxofre (S), e contêm opcionalmente uma ou mais (por exemplo, 1, 2 ou 3) ligações duplas ou triplas. 0 grupo cicloheteroalquilo pode ser unido à estrutura química definida em qualquer heteroátomo ou átomo de carbono que resulte numa estruturei estável. Um ou mais átomos de N ou S num anel cicloheteroalquilo podem ser oxidados (por exemplo, N-hidroxipiperidina, N-óxido de rnorfolina, S-óxido de tiomorfolina, S,S-dióxido de tiomorfolina) . Os exemplos de grupos cicloheteroalquilo incluem rnorfolina, tiomorfolina, pirano, imidazolidina, imidazolina, oxazolidina, 12 ΕΡ1966130Β1 pirazolidina, pirazolina, pirrolidina, pirrolina, tetrahidrofurano, tetrahidrotiofeno, piperidina, piperazina, e similares. Igualmente são incluídas na definição de cicloheteroalquilo são porções que têm um ou mais anéis aromáticos fusionados (isto é, tem uma ligação em comum com) ao anel cicloheteroalquilo, por exemplo, benzimidazolina, cromano, cromeno, indolinotetrahidroquinolina, e similares. Os grupos cicloheteroalquilo podem igualmente conter um ou mais grupos oxo, tal como ftalimida, piperidona, oxazolidinona, pirimidina-2, 4 (1H, 3H) -diona, piridin-2 (1H) -ona, e similares. Incluídos esoecificamente dentro da definição de "cicloheteroalquilo" são aqueles sistemas do anel substituídos opcionalmente em qualquer heteroátomo e/o\ átomo de carbono aue resulte numa estrutura estável.
Como θ u. s a.cio no presente documento em separado ou como parte de um outro grupo, "heteroarilo ref p-re -se aos sistemas de anel aromáticos mo nocí c1ico s ou poli C' T i icos que têm de 5 a 20 átomos do anel e contendo de 1-4 rano, tiofeno, pinama, pirazol, heteroátomos do anel selecionados independente de 0, N e S. Em geral, os anéis heteroarilo não contêm ligações 0-0, S-S, ou S-0. Os grupos heteroarilo incluem os anéis heteroarilo monocíclicos fusionados a um anel fenilo. 0 grupo heteroarilo pode ser unido à estrutura química definida em qualquer heteroátomo ou átomo de carbono que resulte numa estrutura estável. Um ou mais átomos de N ou S num anel heteroarilo podem ser oxidados (por exemplo, N-hidroxipiridina, N-óxido de piridina, S-óxido de tiofeno, S,S-dióxido de tiofeno). Os exemplos de grupos heteroarilo incluem, por exemplo, pirrol, fu pirimidina, piridazina, pirazina, triazol, imidazol, isotiazol, tiazol, tiadiazol, isoxazoi, oxazol, oxadiazol, indol, isoindol, benzofurano, benzotxofeno, qu iη o1ina, 2-met i1qu ino1i na, is oqu i ηo1ina, quiη o x aii n a, 13 ΕΡ1966130Β1 quinazolina, benzotriazol, benztetrazol, indazolr benzimidazol, benzotiazol, benzisotiazol, benzisoxazol/ benzoxadiazol, benzoxazol, cinolina, lH-indazod, 2H" indazol, indolizina, isobenzofurano, naft-iridina/ ftalazina, pteridina, purina, oxazolopiridiaa? tiazolopiridina, imidazopiridina, furopiridina, tienopiridina, piridopirimidina, piridopirazina, piridopiridazina, tienotiazol, tienoxazol, e tienoimidazol· Incluídos especificamente dentro da definição de "heteroarilo" são aqueles sistemas aromáticos do anel que são substituídos opcionalmente em qualquer heteroátomo e/ou átomo de carbono que resulte numa estrutura estável. 0 termo "heterociclo" significa uma heteroarilo ou cicloheteroalquilo como definida no presente documento.
Como é usado no presente documento, "bioisóstero de ácido carboxílico" significa um substituinte ou gruoo que tenha as propriedades químicas ou físicas similares àquela de uma porção de ácido carboxílico e que produza de maneira ampla propriedades biológicas similares àquela de uma porção de ácido carboxílico. Veja, em geral, R. B. Silverman, The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action (Academic Press, 1992), Os exemplos de bioisósteros de ácido carboxílico incluem, mas não são limitados a, amidas, sulfonamidas, ácidos sulfónicos, ácidos fosfonamídicos, fosfanatos de alquilo, N- cianoacetamidas, 3-hidroxi-4H-piran-4-ona, imidazol, oxazol, tiazol, pirazol, triazol, oxadiazol, tiadiazol, ou tetrazol, cadci um dos quais pode ser opcionalmente substituído (por exemplo, por Ci-i0 alquilo, OH, etc.).
Como é usado no presente documento, "bioisóstero de amida"; significa um substituinte ou grupo que tenha as propriedades químicas ou físicas similares àquela de uma 14 EP19S6130B1 porção amida e que produza de maneira ampla propriedades biológicas similares àquela de uma porção amida. Veja, em geral, R. B. Silverman, The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action (Academic Press, 1992) . Os exemplos de bioisósteros de amida incluem, mas não são limitados a, ácidos carboxílicos, sulfonamidas, ácidos sulfónicos, ácidos fosfonamidicos, fosfanatos de alquilo, N-cianoacetamidas, 3-hidroxi-4H-piran-4-o na, imidazol, oxazol, tiazol, pirazol, triazol, oxadiazol, tiadiazol, ou tetrazol, cada um dos quais pode ser opcionalmente substituído (por exemplo, por Ci_10 alquilo, OH, etc.). A frase "grupo hidrofóbico" refere-se a um anel carbono aromático opcionalmente substituído, preferivelmente um anel carbono aromático de 6 a 12 membros. 0 grupo hidrofóbico pode ser opcionalmente substituído como discutido sibaixo. Os grupos hidrofóbicos ilustrativos incluem benzilo, fenilo, e naftilo. substituído" como é usado no icõi um ou mais átomos de z, 3, 4, 5, ou 6 átomos de presente documento, signif^ hidrogénio (por exemplo, 1, hidrogénio) do grupo que cada um pode ser substituído com um átomo ou grupo comumente usado na química farmacêutica. Cada substituinte pode ser o mesmo ou diferente. Os exemplos de substituintes apropriados incluem, mas não são limitados a, alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquiio, arilo, aralquílo, cicloheteroalquilo, heteroarilo, 0RÕ (por exemplo, hidroxilo, alcóxi (por exemplo, metoxi, etoxi, e propoxi), ariloxi, heteroariloxi, aralquiloxi, éter, éster, carbamato, etc.), hidroxialquilo, alcoxicarbonilo, alcoxialcoxi, perhaloalquilo, perfluoroalquilo (por exemplo, CF3, CF2CF3) , perfluoroaleóxi (por exemplo, OCF3, OCF2CF3) , alcoxialquilo, SR° (por exemplo, tiol, alquiltlo, ariltio, heteroariltio, aralquiltio, etc.), S+R62, S (0)R6, 15 ΕΡ1966130Β1 S02R , R (por exemplo, amina primária (isto é, NH2) , amina secundária, amina terciária, amida, carbamato, uréia, hidrazida, haleto, nitrilo, nitro, sulfeto, sulfoxiao, sulfona, sulfonamida, tiol, carboxi, aldeído, ceto, ácido carboxuico, éster, amida, imina, e imida. incluindo seleno e derivados dos substitu.int.es ainda substituídos. Preferivelmente podem estar presentes, onde tio dos mesmos, onde cada um podem ser opcionalmente , 1-3 substituintes opcionais
os substituintes são grupos Q formas de aromático numerarão como def rnictos no presente documento. Nas realização em que um grupo funcional com um anel do carbono substituído, tais substituições tipicamente menos do que aproximadamente 10 substituições, mais preferivelmente de 1 g 5, com cerca de 1 ou 2 substituições são preferidas.
Os números de carbono usados nas definições no presente documento (por exemplo, C1-10 alquilo, C2-io alquenilo, C2-10 alquinilo, C6-2o arilo, etc.) referem-se à estrutura principal de carbono e a ramificação de carbono, mas não inclui átomos de carbono dos substituintes.
Em vários lugares nos presentes substituintes da especificação dos compostos dos presentes ensinamentos são divulgados nos grupos ou nos intervalos. Pretende-se especificamente que os presentes ensinamentos incluam cada e toda subcombinação individual dos membros de tais grupos e intervalos. Por exemplo, o termo "Ci-6 alquilo" é pretendido especificamente para divulgar individualmente n r* Ul L- 5, Cr-C4, Cr -c3, Ci ^ 2 r W ^ 6 f Γ1 _ ^3 ^3 f C3“C4, C4~ c6, c4- -C 3, 6 C5- 0 termo "Ci- '10 ai quilo" é parei. divulgar individualmente
Ci, C2, C3, C«, C5, Cg, Cr--Cg, c2-c5, C2-C4, C2-C3, C3-C6, C6alquilo. Similarmente, pretendido especificamente C1—C g, C2-C8,
Ci, C2, C3, C4, C5, Cg, C 7, C3, C?, Cio, Ci-Cio, C1-C9, C1-C7, Ci~Cg, Ci~Cs, C1-C4, C1-C3, Ci-C2, C2-Cio, C2-C9, 16 ΕΡ1966130Β1 ΕΡ1966130Β1 O to I •C7, C2 Cg? C2-C.5, ''-'2 -c4, c2-c3, ,'Ί p 0 e 3 - e 10 / 3 ^ 9 r p p _p --3 -3 - / f C3~ C6, C3--C5, ^ 3 f C4- Cio, C4-C9, P P p 04 08 f ξ ^4 0 5 f C 4 C· 5 ; c5- -Cio, C "C ' C 5 ~O 8 >· ^ 5; ~ C 7, c5-c6, C. -C· , c6-c9, C 6”C'7, c7- 'Cio, C7-C9, c7-c8, ^ is- /•Ί f-t ^10 í O 8 O 9 ^ e C9-Cio alqui lo, Os compostos dos presentes ensinamentos podem conter um átomo ass imétri .co (igualmente referido como um centro quiral), e alguns dos compostos podem conter um ou mais átomos ou centros assimétricos, que podem assim causar isómeros óticos (enantiómeros) e diastereómeros. Os presentes ensinamentos incluem. tais enantiómeros e diastereómeros, assim como os estereoisómeros racémicos e resolvidos, enantiomericamente puros R e S, assim como outras misturas dos estereoisómeros R e S e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos. Os isómeros óticos podem ser obtidos na forma pura pelos procedimentos padrão conhecidos àqueles versados na técnica, que incluem, mas não são limitados formação diastereomérica de sal, definição cinética, e síntese assimétrica. Os presentes ensinamentos igualmente englobam isómeros eis e trans de compostos contendo porções alquenilo (por exemplo, alcenos e iminas). Igualmente compreende—se que os presentes ensinamentos abrangem todos os regioisómeros possíveis, e as misturas dos mesmo que podem ser obtidas na forma pura pelos procedimentos padrão da separação conhecidos àqueles versados na técnica, e para incluir, mas não são limitados a, crorriatografia de coluna, cromatografia de camada fina, e cromatografia líquida de capacidade elevada.
Os termos "modulador de comunicação intercelular", "facilitador de junção comunicante", "composto que facilita a comunicação de junção comunicante" e "abridor de junção comunicante", etc., todos referem-se a um composto que facilita, o intercelular mantém, da ou normaliza, uma comunicação unção comunicante (GJIC), ΕΡ1966130Β1 independentemente do mecanismo particular atrás desta ação. Mais especifícamente, o termo "abridor de junção comumcante" pode referir-se a uma substância que normalize (isto é, aumentos) a troca das moléculas que podem passar através das junções comunicantes entre espaços extraceluiares e intracelulares e/ou que podem normalizar ou aumentar GJIC. 0 termo "agonista" refere-se a um composto que possa interagir com um tecido, uma célula ou uma fração de célula que seja o alvo de um composto AAP, AAP10, ou HP5 (ou do análogo funcional do mesmo), para causar substancialmente as mesmas respostas fisiológicas no tecido, célula ou fração de célula como o composto AAP, AAP10, ou HP5 (ou análogo funcional do mesmo) . Ni um aspeto, a resposta fisiológica é uma ou várias da contração, relaxamento, secreção, ativação da enzima, etc. Preferivelmente, o composto se liga ao tecido, célula ou fração de célula. Num aspeto, o composto se liga a um recetor no tecido, célula, fração de célula, que se liga a AAP, AAP10, ou HP5 (ou um análogo funcional do mesmo). n ;ermo ant igonista' refere-se um composto que iniba ou antagonize uma ou observadas num tecido, célula contatado o tecido, célula, mais respostas fisiológicas ou fração de célula após ter ou fração de célula com o (ou análogo funciona fisiológica é uma ou ma ão, ativação da enzima, 1 do is de composto AAP, AAP10, ou HP5 mesmo), Num aspeto, a resposta contração, relaxamento, secreç
Preferivelmente, o composto se liga ao tecido, célula ou fração de célula. Num aspeto, o composto se liga a um recetor no tecido, célula, ou fração de célula que se ligam à AAP, AAP 10, ou HP5 (ou análogo funcional do mesmo) e/ou que inibe o emperramento de um ou mais do análogo de AAP, AAP10, ou HP5 (ou análogo funcional do mesmo) ao recetor. 18 EP196S130B1 EP196S130B1 "normalizar"
Corfio é usado no presente documento, retere-se a uma mudança numa resposta fisiológica tal que a resposta se observada num envolver um dependendo da torna insignificantemente diferente de uma paciente normal. Assim, a normalização pode aumento ou uma diminuição na resposta patologia envolvida. B. Compostos Exemplares com os presentes alguns casos, os incluídos entre
Os compostos exemplares de acordo ensinamentos estão listados abaixo. Em nomes alternados para os compostos sao parênteses após o nome químico.
Composto 1: ácido (2 S n i t r o - b e η z o i 1 a m i η o) - p i r r o 1 i d i 4R)-4Amp(4-Nitrobenzoil)-OH) 4R) 1- (2-amino-acet.il) -4- (4- a-2-carboxílico (H-Gly-(2S,
Composto 2: ácido benzoilamino-pirrolidina-2 (2S, 4R) 1- (2-amino-aceti.l) -4- irboxílico (ácido (2S,4R)-1-(2- aminoacetil)-4-benzamidopirro lidina-2-carboxílico H-Glv- (2S, 4R)-4Amp(Benzoil)-OH)
Composto 3 meti1-benzo i1ami : ácido (2 S,4 R) 1-(2-amino-acetil)-4 no)-pirrolidina-2-carboxílico (H-Gry- (4- (2S, 4R)-4Amp(4-metilbenzoil)-OH) 1-(2-amino-acetil) carboxílico (H- 4- (4-Gly-
Composto 4: ácido (2S,4R) me toxi-benzoilamino)-pirrolidina-2-(2S,4R)-4Amp(4-metoxibenzoil)-OH)
Composto 10: ácido (2S,4R) 1-(2-amino-acetil)-4-(4-hidroxi-benzoilamino)—pirrolidina—2—arboxílico (H- Gly-(2S,4R)-4Amp(4-hidroxibenzoil)-OH) 19 ΕΡ1966130Β1
Composto 11: ácido (2S,4S) 1-(2-amino-acetil)-4-(4- metoxi-benzoilamino)-pirrolidina-2-carboxílico (H- Gly-(2S,4S)-4Amp(4-metoxibenzoil)-OH) 1-(2-amino-acetxl)-4-(4-carboxilico (H- Gly-
Composto 12: ácido (2S,4S) metil-benzoilamino)-pirrolidina-2 (2S, 4S) -4 Amp (4-metilbenzoi.l) -OH)
Composto 13: ácido (2Sf4S) 1-(2-amino-acetil)-4-(4- nitro-benzoilamino) -pirrolidina~2™carboxílico (íi-Giy- (2S, 4 S)-4 Amp(4-ni t robenzo i1)-OH) -(2-amino-acetil)-4-(H-Gly-(2S,4S)-4Amp
Composto 14: ácido (2S,4S) benzoilamino-pirrolidina-2-carboxílico (benzoil)-OH) 1-(2-Amino-acetil)-4-(H-Gly-(2S4S)-4Ampi
Composto 18: ácido (2S,4S) benzoilamino-piperidine-2-carboxílico (Benzoil)-OH)
Composto 64: (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4- benzamidopirrolidina-2-carboxamida
Composto 65: (2S,4R) l-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N- metilpirrolidina-2-carboxamida
Composto 66: (2S,4R) 1-(2-aminaacetil)-4-benzamido-N- etilpirrolidina-2-carboxamida
Composto 67: (2S, 4R) 1-(2-aminoacetil)--4-benzamido-N- i s op r op i .1. pi.rrolidina-2-carboxam i da .mido-N-
Composto 68: (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-ben opropilpirrolidina-2-carboxamida 20 ΕΡ196613061
Composto 69: (2S,4R) 4-benzamido-l-(2-(terc- butoxicarbonilamino)acetil) pirrolidina-2-carboxamida
Composto 70: (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N- (pentan-3-il)pirrolidina-2-carboxamida
Composto 71: (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N- ciclopentilpirrolidina-2-carbo x ami da
Composto 72: (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N- i s obut i1p ir r o1idi na-2-carbo xami d a
Composto 73: (2S,r4R) l-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N- ciclobutilDirrolidina-2-carboxamida
Composto 74: (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N- terc-butilpirrolidina-2-carboxamida
Composto 76: (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N- ((R)-3-metilbutan-2-il)pirrolidina-2-carboxamida
Composto 77: (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N- ((R)-3,3-dimetilbutan-2-il)pirrolidina-2-carboxamida
Composto 80: ácido (2S,4R) l-(2-acetamidoacetil)-4-benzamidopirrolidina-2-carboxilico
Composto 81: ácido (2S,4R) 4-benzamido-l-{2- (metilamino)acetil)-pirrolidina-2-carboxílico
Composto 82: ácido (2S, 4R) 4-benzamido-l-(2-(2,2,2-trifluoroacetamido)acetil)pirrolidina-2-carboxílico
Composto 83: ácido (2S,4R) 4-benzamido-l-(2-(terc-butoxicarbοηi1amino)aceti1) Pirr°1idina-2-carboxi1ico 21 ΕΡ1966130Β1
Composto 85: ácido (2S,4R) 4-benzamido-l-(2- f o r m a m i d o a c e t i1)p i r r o1i di n a ~ 2-carboxílico
Composto 93: ácido (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-(2- fluorobenzamido)pirrolidina-2-carboxílico
Composto 94: ácido (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-(3- fluorobenzamido)pirrolidina-2-carboxílico
Composto 95: ácido (2 S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-(4- f1u o robenzami do)pi rr o1i d i na-2-carboxi1i c o
Composto 96: ácido (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-(2- m e t i 1 b e n z a m i d o) p i r r o 1 i d i n a - 2 - c a r b o x í 1 i c o
Composto 97: ácido (2S,4R) 1-(2-amlnoacetil)-4-(3- metilbenz amido)pirrolidina-2-carboxí1ico
Composto 98: ácido (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-(4- metilbenzamido)pirrolidina-2-carboxílico
Composto 99: ácido (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-(4- met o x i be n zamido)pi r r o1i di na-2-c a rbo x í1i c o
Composto 100: ácido (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-(3- me t o x i b e n z a m i cl o) p i r r o 1 i d i n a - 2 - carboxílico
Composto 101: ácido (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4- (4- hidroxibenzamido)pirrolidina-2-carboxí1ico
Composto 102: ácido (2 S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-(3- hidroxibenzamido)pirrolidina-2-carboxí1ico
Os presentes ensinamentos abrangem também isómeros e/ou enantiómeros dos compostos listados acima (por 22 ΕΡ1966130Β1 exemplo, 2S4S, 2S4R, 2R4R, 2R4S, assim como seus sais e hidratos. 3 S 5 S, 3S5R, 3R5R, 3R5Í f
Sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos dos presentes ensinamentos que têm uma porção acídica podem sei formados usando bases orgânicas e inorgânicas. Os sais apropriados formados com bases incluem sais de metal, tai& como sais de metal alcalino ou alcalino terroso, por exemplo, sais de sódio, potássio, ou magnésio; os sais de amónia e sais de amina orgânica, tais como aqueles formados com morfolina, tiomorfolina, piperidina, pirrolidina, mono? di- ou trialquilamina de cadeia curta (por exemplo, etil' terc-butil-, dietil-, diisopropil-, trietil-, tributil- ou dimetilpropilamina) , ou mono-, di-, ou tri-hidrox1 alquilamina de cadeia curta (por exemplo, mono-, di- ou trietanolamina). Os sais internos também podem ser formados. De maneira similar, quando um composto dos presentes ensinamentos contém uma porção básica, os sais podem ser formados usando ácidos orgânicos e inorgânicos. Por exemplo, os sais podem ser formados dos seguintes ácidos: acético, propiónico, láctico, cítrico, tartárico, succínico, fumárico, maléico, malónico, mandéico, málico, fosfórico, nítrico, naftalenossulfónico, e canforsulfónico f t. á 1 i c o, c 1 o r í d rico, b r o m í d r i c o, s u1fú r i c o, met anossulfónico, benzenossulfónico, toluenossuIfónico assim como outros ácidos f a rmaceut i c: ame n t e conhecidos sais de adição de aminoácido podem igualmente ser formados com aminoácidos tais como lisina, glicina, ou fenilalanina.
Também se revelam pró-fãrmacos dos compostos descritos no presente documento. Como é usado no presente documento, "pró-fármaco" refere-se a uma porção que produza, gere ou liberte um composto dos presentes ensinamentos quando administrado a um indivíduo mamífero. Os pró-fármacos podem ser preparados por meio da modificação dos grupos 23 ΕΡ1966130Β1 funcionais presentes nos compostos de tal maneira modificações são clivadas, ou por manipulação de rotina ou in vivo, dos compostos de origem. Os exemplos dos pró-fármacos incluem compostos dos presentes ensinamentos como descritos no presente documento que contêm uma ou mais porções moleculares adicionadas a um grupo hidroxilo, amino, sulfidrilo, ou carboxilo do composto, e que quando administrados a um indivíduo mamífero, são clivados in vivo para formar o grupo hidroxilo, amino, sulfidrilo, ou carboxilo livre, respetivamente. Os exemplos dos pró--fármacos incluem, mas não são limitados a, derivados de acetato, formiato e benzoato do álcool e aminas funcionais nos compostos dos presentes ensinamentos. Os exemplos de pró-fármacos preferidos incluem pró-fármacos de oxazolidinona ou imidazolidinona. Os pró-fármacos de éster são formados preferivelmente com álcoois de cadeia curta, tais como os C; álcoois. A preparação e a utilização dos pró-fármacos são discutidas em T. Higuchi e V. Stella, "Pro-drugs as Novel Delivery Systems", Vol. 14 de A.C.S. Symposium Series, e em Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987.
Também se revelam derivados dos compostos, e mais particularmente formas protegidas dos compostos. Como meio de exemplo, 03 compostos podem ser protegidos em N- e/ou C-terminal, e/ou em. cadeia lateral de aminoácido (naqueles compostos onde é uma cadeia lateral de aminoácido) . Os exemplos de grupos de proteção incluem tBu, Boc, Fmoc, Fm, Benzilo, D de e Z e incluem também os compostos quando acoplados a uma fase contínua, por exemplo quando foram, feitos pela síntese da fase contínua. 24 ΕΡ1966130Β1 C. Composições Farmacêuticas
Os compostos dos presentes ensinamentos podem servir como medicamento cm sua forma pura ou como composições farmacêuticas, que podem ser administradas através de qualquer método aceitável conhecido na técnica, individualmente ou em combinação. As composições farmacêuticas de acordo com os presentes ensinamentos podem compreender um composto dos presentes ensinamentos na adição de mistura com um ou mais portadores, diluentes, veículos ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Tais composições podem ser formuladas à administração oral (incluindo a cavidade bucal ou sublingual) ou pela adminisrração parentérica (incluindo administração intravenosa (i.v.), subcutânea (s.c), intramuscular (i.m.), i n t raperitoneal (i.p.)). Outras vias de administração incluem a administração epidural, retal, intranasal ou cutânea ou pela inalação pulmonar. Esoecialmente as
sustentada composições SÓlldclS OU tormuiaçoes preferidas proporcionam a libertação dos compostos dos presentes ensinamentos. As são preferivelmente sob a forma de formulações
líquidas geral em Alfonso R e os métodos para sua preparação são descritos em "Remington's Pharmaceutical Sciences", 17 a Ed., . Gennaro (Ed.), Marca Publishing Company, Easton, 985. PA, EUA,
Tais composições contêm em geral uma quantidade eficaz de um ou mais compostos ativos dos presentes ensinamentos, juntamente com um portador apropriado ei fim de fornecer a dosagem numa forma compatível com a via de administração selecionada. Preferivelmente, o portador está na forma de um veículo, um diluente, um agente de tarnponamento, um agente de ajuste de tonicidade, um conservante e estabilizadores. Os excipientes que constituem o portador devem ser compatíveis com o ingrediente ou ingredientes 25 ΕΡ1966130Β1 farmaceuticamente ativos e são preferivelmente capazes de estabilizar os compostos sem ser deletérios ao inof que está a ser tratado. f o rrr LU 1 cl Ç ã O de libertação si istenuada ou ser usada de moclo aue as auantidades
Uras terapeuticamente eficazes da preparação sejam libertadas na circulação sanguínea ao longo de muitas horas ou dias que se seguem a administração do composto ou composição, por exemplo, pela injeção ou deposição transdérmica. As apr oprradas para a 11 .bert -ação sus "c e ilímer os biodegradáveis, -j~ .ais como áC id< ci cio D — láctico, acido DL- -láctico, gli có li co, e isómeros dos mesm OS . De manei ra s im ou o di 1 mente pode inclu: ir cru a j Lquer mate r i, s ust ent ada conhecido na técnica, f* £ 1 to de g. Liceri lo ou o die esteara to de gli ce O u mi st urado com uma cer a. formul ações de libert açi ãO ! susten tada es ou micelas d IpOSÍ ções dos presen t 0 S e f e i tos terapeuti cos :ia do composto, da via de administra Ção incluir, mas não são limitadas a, formulações que incluem pelo menos um dos compostos divulgados combinados nisto com lipossomos, microesferas, emulsões estabilizadores líquidos. ensinamentos requerem para os desejados e dependerão da potu composição particular usada e d selecionada. Os compostos serão administrados tipicamente na faixa de 0,001 g a 10 g por paciente por dia. Por exemplo, os compostos podem ser administrados na faixa de aproximadamente 1 mg a cerca de 1000 mg por paciente por dia, cie aproximadamente 10 mg a cerca de 100 mg por paciente por dia, ou cerca de 50 mg por paciente por dia. 26 ΕΡ1966130Β1 0 regime de dose mais apropriado pode melhor ser determinado por um médico com experiência, para cada
paciente i nd i v i du a1mente. 0 ótimo regime de dose com os compostos e as composições f armacêuticas de acordo com os presentes ensinamentos, depe ;nde dos fatores tais como cL doença ou a desordem particular que estão a ser tratados, o efeito desejado, e a idade, o peso ou o índice de massa corporal, e as condições físicas gerais do paciente. A administração pode ser conduzida numa forma farmacêutica unica para aliviar sintomas agudos ou como uma terapia continua sob a forma das doses múltiplas sobre o tempo. Alternativamente, os sistemas contínuos da infusão ou formulações depot de libertação lenta podem ser utilizados. Dois ou mais compostos ou composições farmacêuticas de acordo com os presentes ensinamentos podem ser coadministrados simultaneamente ou sequencialmente em qualquer ordem. Além disso, os compostos e as composições podem ser administrados numa maneira similar para finalidades profiláticas. Finalmente, o melhor regime de dosagem será decidido pelo médico de plantão para cada Dciciente individucLlmente. D. Utilizações Terapêuticas
Os compostos de SLeordo com os presentes ensinamentos, podem facilitar e/ou manter a comunicação intercelular negociada por junções comuni cantes. Num aspeto, os compostos de acordo com οε ; present .es ensinamentos direcionam- -se às mesmas células alvo por AAP, AAP10, HP5, e/ou por análogos funcionais das mesmas, isto é, os compostos são capazes de modular a função destas células agonizando ou antagonizando a função de AAP, AAP10, HP5, e/ou análogos funcionais dos mesmos. 0 âmbito dos presentes ensinamentos, entretanto, não é limitado aos compostos que têm propriedades agonísticas ou antagonísticas específicas 27 ΕΡ1966130Β1 de AAP. Os presentes ensinamentos igualmente referem-se à preparação e à utilização de composições farmacêuticas para o tratamento das patologias que podem, ser associadas com uma comunicação de junção comunicante intercelular danificada e métodos para usar estas composições, por exemplo, como divulgado no documento WO 02/077017 "New Medicai Uses of Intercellular Communication Facilitating Compounds",
Descrevem-se no presente documento métodos de tratamento de um indivíduo que tem, ou prevenção que um indivíduo em risco desenvolva, uma condição associada com GJIC prejudicado (por exemplo, arritmia cardíaca ou osteoporose) que compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de alguns dos compostos dos presentes ensinamentos. Os indivíduos que podem ser tratados usando compostos de acordo com os presentes ensinamentos incluem, mas não são limitados a, animais, preferivelmente mamíferos, por exemplo, roedores (que incluem ratinhos, ratos, hamster, e lagomorfos, tais como coelhos) , cães, porcos, cabrsLS (em geral algum animal doméstico), e primatas. Num aspeto preferido, o indivíduo é ser humano.
Os exemplos das condições que prevenidas usando os compostos dos incluem, mas não SSO limitados a. podem ser tratadas ou presentes ensinamentos doença c a r d. i. o v a s c u 1 a r; osteoporose; distúrbios do inflamação do epitélio da via tecido alveolar; incontinência da aérea; bexiga; audição prejudicada (por exemplo, devido às doenças da cóclea); lesões endoteliais; diabetes (Tipo I ou Tipo II) e complicações diabéticas (incluindo a retinopatia diabética e neuropatia diabética); arteriosclerose; condições relacionadas ao CNS; apreensões; isquemia (por exemplo, isquemia do sistema nervoso central, da medula espinhal, do 28 ΕΡ1966130Β1 cérebro ou da haste do cérebro); distúroios dentais do tecido (que incluem a doença periodental) ; doenças cio rim; manifestações hematológicas (por exemplo, anemia, leucopenia, trombocitopenia, e pancitopenia, especialmente seguindo tratamento com compostos eitos- táticos ou terapia da irradiação); traumatismo resultante das feridas (por exemplo, feridas superficiais e feridas profundas); fratura de osso; disfunção eréctil; incontinência da bexiga urinária; dor neuropática; inflamação subcrónica e crónica; câncer; faina de transplante da medula e da célula de haste; condições que se levantam durante a transplantação das células e dos tecidos ou durante procedimentos médicos tais como a cirurgia; condições causadas por um excesso de espécie reativa do oxigénio e/ou de radical livre e/ou óxido nítrico; doenças ou distúrbios da gravidez (por exemplo, pré-eclampsia e trabalho prematuro); infertilidade ΕΡ1966130Β1 feminina; e vai ilar cerebral. Os comoost; de acordo com os presentes ensinamentos podem igualmente ser usados para induzir o trabalho (por exemplo, facilitando o efeito de oxitocina na contração do útero). angina
Num aspeto preferido, os presentes ensinamentos proporcionam um composto antiarritmico farmacologicamente ativo para o tratamento ou a prevenção das arritmias e complicações trombóticas que levantam-se durante distúrbios cardiovasculares, tais como a doença cardíaca isquémica aguda (por exemplo, angina. pectoris estável, pectoris ΙΠ; ive. míc arto do miocárdio agudo), parada cardíaca congestiva (por exemplo, sistólicas, diastólicas, parada cardíaca de rendimento elevado, a rendimento no lado direito ou esquerdo), doenças congenitais, pulmonar do núcleo, miocardite, doença cardíaca hipertensiva, revascularização coronária, e realização específicas, aixo, cardíacas cardiomiopatia, durante a similares. Sm formas de :.ompostos de acordo com. os 29 EP196S130B1 presentes ensinamentos podem ser usados para tratar e/ou prevenir as bradiarritmias (por exemplo, devido à doença no nó da cavidade, nó do AV, feixe de His, remificação direita ou esquerda do feixe), e as taquiarritmias associadas com a reentrada (por exemplo, complexos prematuros atrial, complexos conectivos de AV, complexos prematuros ventri cu1ares, fibri1ação atria1, vib ração atria1, taquicardia supraventricular paroximal, taquicardia reentrante do nó da cavidade, taquicardia reentrante nodal de AV, e taquicardia ventricular não sustentada). Além disso, os compostos de acordo com os presentes ensinamentos podem ser úteis no alivio de uma condição patológica onde o retardamento da velocidade da condução é um fator importante, por exemplo, taquicardia ventricular, fibrilação ventricular, e fibrilação atrial. Os compostos de acordo com os presentes ensinamentos podem ser administrados sozinhos ou em combinação com outros compostos antiarrítmicos, tais como agentes de classe III (por exemplo, lidocaína) , agentes de classe II (por exemplo, metoprolol ou propranolol), agentes de classe III (por exemplo, amiodarona ou sotalol) ou agentes de classe IV (por exemplo, verapamil).
Os compostos de acordo com os presentes ensinamentos podem igualmente ser usados para tratar ou prevenir uma ou mais arritmias da reentrada, da cardiomiopatia ventricular da reentrada (por exemplo, aparecimento durante o infarto miocardio agudo, o infarto miocárdio crónico, a angina pectoris estável e a anaina oectoris instável), a alternância infecciosa ou a automática, fibrilação atria de repolarização, taquicardia ventricular monomófica, aiternancia de onda T, bradiarritmias, contratibilidade reduzida do tecido cardíaco, trombose, e similares.
As funções aaicionais em qu« ima comunicacao 30 ΕΡ1966130Β1 mterceluiar de abertura-conectiva endotelial foi implicada são o comportamento migratório de células endoteliais após ferimento, angiogênese, crescimento e senescência endotelial e a coordenação de respostas vasornotoras (Christ et al. Braz. J Med Biol. Res., 33, 423-429 (2000)).
Consequentemente, os compostos de acordo com os presentes ensinamentos podem ser usados para realçar respostas vasculares conduzidas e para melhorar a fonte de sangue durante condiçoes com demanda metabólica aumentada (por e durante a exemplo, exercício físico, taquicardia), isquemia.
Os compostos de acordo com os presentes ensinamentos podem ser usados para citoproteger um tecido ou órgão de um mamífero na necessidade de tal tratamento. Citoproteção refere-se à diminuição, prevenção ou alívio dos sintomas associados com o inchamento não desejado da célula. Os tecidos e os órgãos particulares que tirarão proveito do método incluem aqueles confinados ou impactados de outra maneira por uma cápsula fibrosa tal como o coração ou o rim. Igualmente são incluídos os tecidos associados com o osso tal como o cérebro, a medula e a medula espinhal. Os compostos dos presentes ensinamentos podem ser usados para prevenir ou tratar rerimento isquémico nos órgãos de um mamífero com necessidade de tal tratamento, incluindo, por exemplo, do coração, do sistema nervoso central, do rim, do aparelho gastrointestinal, do fígado, dos pulmões, e dos membros. a utilização dos as manifestações com os compostos
Descreve-se no presente documento compostos para tratar ou prevenir hematológicas que seguem o tratamento Ção S O iui citostáticos ou a terapia da irradiação, a recupere danificada da hematopoese é observada nos pacientes ap·-" tratamento citostático 5-fluorouracilo (5-FU). Isto inc 31 ΕΡ196613061 a ausência de recuperação de contagens de sangue pernéricas, incluindo neutropenia severa, anemia severa com reticulocitopenia e a presença de eritrócitos periféricos anormais e de trombocitopenia severa. Além, 5-8 dobras diminuem a celularidade da medula óssea e do índice hematopoético progenitor (formação de unidades granulomacrofágicas da colónia (CFU-GM), o estouro eritróide de formação de unidade (BFU-E), as unidades de formação colónias misturadas (mistura CFU), e as unidades de formação colónias totais (CFU - C) na medul observados. (Veja, por exemplo, Montecir i O — £ ai., Blood, 96, 917-924, (2000); Presley et a N° 55, IGJC 2005, Whistler, Cana LO O O <N X5 ) . s.
Abstract neste aspeto dos presentes ensinamentos o tratamento ou a prevenção das situações clínicas gerais comurnente associadas ao pancitopenia iatrogénico.
Os compostos de acordo com os presentes ensinamentos podem ser usados para tratar ou prevenir a osteoporose. Sabe-se que esse GJIC é importante na formação do osso, A eficácia dos compostos pode ser avaliada, por exemplo, por um aumento na atividade do osteoblasto num ensaio padrão da atividade do osteoblasto que meça ou a formação da onda do cálcio e/ou a atividade da fosfatase alcalina de células do osteoblasto na presença dos compostos. A atividade da fosfatase alcalina igualmente pode ser usada para fornecer uma medida da atividade do osteoblasto usando ensaios colorimétricos padrão.
Preferivelmente, um ou ma is dos compostos c o mposições farmacêuticas de acordo 1 com os prese ensinamentos são administrados a um indivíduo na necessidade disso numa quantidade terapêutica eficaz. Como é usado no presente documento, "uma quantidade terapeuticamente eficaz" refere-se a uma quantidade que 32 ΕΡ1966130Β1 reduz sintomas de uma dada condição ou de uma patologia, e preferivelmente que normalize respostas fisiológicas num ΕΡ1966130Β1 indivíduo com condição ou a patologia, A re pnurao aos sintomas ou a normalização de respostas fisiológicas pode ser determinada utilizando métodos rotineiros na técnica e podem variar com uma dada condição ou patologia. Num aspeto, uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ou mais compostos ou composições farmacêuticas é uma quantidade que restaura um parâmetro fisiológico mensurável substancialmente ao mesmo valor (preferivelmente dentro de ± 30%, mais preferencialmente dentro de ± 20%, e ainda mais preferencialmente dentro de ± 10% do valor) do parâmetro num indivíduo sem a condição ou a patologia. A quantidade eficaz será determinada pelo perito na especialidade levando em consideração fatores como a potência do fármaco, idade e constituição do paciente, peso corporal, perfil farmacocinético do fármaco, e em geral o fármaco será prescrito para cada paciente ou grupo de pacientes. Entretanto, a quantidade eficaz do composto oode estar pelo menos a um peso corporal de aproximadamente 10 pg/xg/dia, tal como pelo menos o peso corporal de aproximadamente 100 pg/kg/dia, pelo menos o peso corporal de aproximadamente 300 pg/kg/dia, e pelo menos o peso corporal de aproximadamente 1000 pg/kg/dia. De um outro lado, a quantidade eficaz do composto ou do dímero pode ser no máximo aproximadamente 100 mg/kg/dia de peso corporal, tal como no máximo aproximadamente 5 0 mg/kg/dia de peso corporal e no máximo aproximadamente 10 mg/kg/dia de peso corporal. Espera-se que a quantidade eficaz do composto esteja a um peso corporal de aproximadamente 100 pg/kg/dia, a um peso corporal previsto de aproximadamente 300 pg/Kg/'dia ou peso corporal de aproximadamente 1000 pg/kg. 33 ΕΡ1966130Β1 Ξ. Ensaios Biológicos
Os compostos preferidos dos presentes ensinamentos podem mostrar ligação, preferivelmente ligação específica, a um tecido, a uma célula, ou a uma fração de célula em que é referido no presente documento como ura "teste de ligação do local padrão de AAP". 0 teste pode detetar e opcionalmente quantificar a ligação de um composto indivíduo, por exemplo, AAP, AAP10, HP 5, ou um análogo funcional disso. Numa forma de realização preferida, o ecido, iza ou outra de um composto pode ser um modulador da função de tal t célula, ou fração de célula (isto é, o composto agon antagonizei a função do péptiao antiarrítmico) . Em forma de realização, o composto pode ser um modulador , o composto é Os compostos os presentes moduladores de recetor para o péptido antiarrítmico (isto é um agonista ou um antagonista do recetor). adicionalmente preferidos de acordo com ensinamentos podem mostrar a boa função como uma comun: agonistas ;ação conectiva da abertura (por exemplo, como os ou os antagonistas de AAP). Num aspeto, os tiarrítmicos compostos podem funcionar como fármacos
Os compostos preferidos do agonista dos presentes ensinamentos podem fornecer uma condutibilidade intracelular (Gj) que seja substancialmente a mesma como, ou sejam maiores do que, o Gj de AAP em que é referido no presente documento como um "ensaio cardiomiócito padrão". Os compostos antagonista preferidos podem fornecer um Gj que seja menos (por exemplo, pelo menos aproximadamente lí ou pelo menos aproximadamente menos de 2 0%) do que ej de AAP e/ou obstruir a habilidade de AAP de normalizar o Gj de urna célula isquémica, isto é, para retornar suostancialmente o Gj aos mesmos valores encontrados em células não preferidos de isquémicas, Os compostos adicionalmente acordo com os presentes ensinamentos podem 34 ΕΡ1966130Β1 ΕΡ1966130Β1 um bloco de AV num ratinho são de CaCl2, em que é referido no presente documento aument ar o t emp ir como um "ensaio de arritmia induzido por cálcio padrão". Os compostos dos presentes ensinamentos podem prevenir a condução cardiaca que retarda na presença de várias formas do estresse metabólico (por exemplo, isquemia, hipoglicemia ou acidez) em que é referido no presente documento como um "modelo da tira atrial isolada p ciCÍ-£clQ 0.0 0Str0SS6 metabólico induzido por lenta condução". Os compostos dos presentes ensinamentos podem adicionalmente mostrar diminuições na incidência de arritmias da reentrada ou no tamanho de uma zona do enfarte observada em que é referido no presente documento como um "ensaio de reentrada ventricular padrão".
Em argumas formas de realização, os compostos dos presentes ensinamentos podem exibir uma boa semivida de acordo com o que é referido no presente documento como um "ensaio de estabilidade de plasma in vítreo", Os compostos que mostram uma boa estabilidade no ensaio têm numa forma de realização uma semivida de mais do que aproximadamente 48 noras, ou inais de 24 horas, ou mais de 12 horas, ou mais de 6 horas, ou mais de 3 horas, ou mais de 1 hora, ou mais de 3u minutos, ou mais de 20 minutos, ou mais de 15 minutos, ou mais de 10 minutos, ou mais de 5 minutos, ou maia v.ie 1 minuto. Nestas formas de realização, os compostos dos presentes ensinamentos podem mostrar a estabilidade realçada na circulação sanguínea.
Os ensaios particulares úteis para identificar e opcionalmente determinar a atividade dos compostos dos P·1-“®w-lites ensinamentos s«o adicionalmente descritos abaixo. 35 ΕΡ1966130Β1 1. Ensaios padrão de estabilidade de plasma ΕΡ1966130Β1De s c revem-s e 10 presente documento compostoí que possuem estabilidade aumentada in vitro ou in vivo. Como exemplo, os compostos dos presentes ensinamentos que compreendem uma ligação de péptido podem ser alquilados ou de outra maneira modificados para estabilizar o composto contra degradação enzimática. Alternativamente ou adicionalmente, os compostos podem compreender um ou mais aminoácidos D. É possível testar se um composto possui estabilidade aumentada, num ensaio padrão da estabilidade.
Num exemplo de um ensaio de estabilidade de plasma in vitro, os compostos são incubados em plasma ou soro e amostras são tomadas em. intervalos regulares para análise por HPLC ou LC/MS/MS, para quantificar o teor de composto não degradado. (Veja-se, por exemplo, documento WO 02/077017, a descrição inteira do qual é incorporada por referência no presente documento). As condições apropriadas (coluna, solvente, gradiente e temperatura) para tal análise são estimadas para assegurar que o pico do composto e os picos do plasma não tenham o mesmo tempo de retenção. Isto é feito por .injeções subsequentes de um composto, piasma e uma coinjeção com o composto e o plasma, seguidos pela otimização de parâmetros do método LC até que uma separação satisfatória seja obtida. Uma amostra de plasma de controlo sem o composto de péptido, tratada da mesma, maneira, igualmente é tomada e avaliada. As amostras podem incluir, mas não são limitadas a, um branco, o composto a uma concentração apropriada (por exemplo, 0,1 mg/ml), piasma sem composto, uma. ou mais amostras para. t = 0 e uma ou mais amostras em cada intervalo regular. Preferivelmente, amostras múltiplas são tomadas em paralelo. As concentrações de amostra (altura de pico em mAJ ou contagens de .ião) são traçadas contra o tempo e 36 ΕΡ1966130Β1 adequadas para uma função que descreve um decaimento monoexponencial (por exemplo, usando um pacote padrão Excel). Preferivelmente, um composto de acordo com os presentes ensinamentos tem uma meia vida de mais do que aproximadamente 30 minutos (por exemplo, mais do que aproximadamente 1 hora, ou mais do que aproximadamente 3 horas, ou mais do que aproximadamente 6 horas, ou mais do que aproximadamente 12 horas, ou mais do que aproximadamente 24 horas, ou mais do que aproximadamente 48 horas) como determinado usando este ensaio. A estabilidade em plasma pode ser examinada in vivo usando ensaios padrão. Por exemplo, os compostos podem ser administrados a um mamífero, tal como um ratinho, por injeções de bolus em volumes de aproximadamente 1 ml/kg tanto para dosagem i.v. quanto p. o. Preferivelmente, os compostos são testados paralelamente às amostras de controlo tais como tampão ou um péptido antiarrítmico com uma estabilidade conhecida. As amostras de sangue são coletadas em períodos de tempo diferentes (por exemplo, em B.D. 5, 15, 30, 60, 90, 120, 180 e 240 minutos, onde B.D. refere-se a antes da dose). As quantidades de compostos nas amostras podem ser determinadas usando métodos de rotina na arte, tal como LC/MS/MS. Por exemplo, as concentrações de compostos em amostras de plasma podem ser calculadas de uma curva padrão externa cobrindo os intervalos de concentração do composto de 1,00 a 1000 nM. As concentrações de plasma contra dados de tempo podem ser usadas para modelagem farmacocinética em WinNonLin 3.5 (Pharsight, Mountain View, CA) usando análise não compartimentada e os parâmetros resultantes de AUC, Fpo, Cl* 11 unax e tmax podem ser determinados como é conhecido na técnica. 37 ΕΡ1966130Β1 2. Ensaios padrão de cardiomiócito
Os compostos dos presentes ensinamentos podem ser testados num ensaio de cardiomiócito, que meça a função da junção da abertura de células cardíacas após administração dos compostos. Num exemplo, as células cardíacas são isoladas de um mamífero, tal como corações de uma cobaia, por perfusão com colagenase de acordo com o método de Langendorf. As células são expostas ao composto e avaliadas quanto a GJIC por técnica de "patch clamp" usando métodos conhecidos na técnica. A condutância intercelular (Gj) é calculada usando a fórmula: ^ ^p„piíÍAG ^ptfepcmsa J ~ ~~ u-ua S P o (Equação 1) ; rela t ivas s em G ή por função do tempo entes e isto (por exen τρίο, a determinad onde Ip.pulso e Ip,repouso representam a corrente na célula passiva durante o pulso e antes do pulso respetivamente, e Up e Ua representam a tensão da célula passiva e ativa. A mudança no valor de Gj mediante administraçãc analisada comparando as mudanças rí exemplo, o Gj relativo como uma durante estimulação com corar aproximadamente 1 n, - fc M) pode ser P re fe r i velmente, o composto for nece uma Gj que é s ub s t a n c i almente a mesma que a Gj (± 10%) de um péptido antiarrítmico, t al como AAP, A- AP 10, HP5 e análogos funcionais do mesmo . Num exeinp lo, a célula é uma célula -isquemiua e o composto fornece uma Gj que é substancialmente a mesma como aquela de uma célula não isquémiea (± 20%, preferivelmente, ± 10%) . Detalhes adicionais a respeito de execução de ensaios de cardiomiócito são proporcionados no documento WO 02/077017. 38 ΕΡ1966130Β1 3. Ensaio padrão de arritmia induzida por cálcio modelo de Péptidos apropriados para administração a células cardíacas podem ser identificados num modelo in vivo de arritmias induzidas por cálcio de acordo com
Lynch et al. (1981) J Cardiovasc. Pharmacol. 3:4 49 50,
Ratinhos mar tonos sao anestesiados com Cetamina (75 mg/kg) e medetomidina (1 mg/kg) IP. Uma cânula i.v. é introduzida na veia da cauda. Um sinal de ECG da derivação II é registado contínuamente posicionando elétrodos de aço inoxidável de ECG sobre o membro frontal direito e o membro frontal esquerdo. O elétrodo de terra é colocado no membro traseiro direito. O sinal é amplificado e filtrado usando componentes do fisiógrafo Gould e o software de aquisição de dados po-ne-mah. Após um período de equilíbrio de 90 segundos o composto de teste é injetado na veja-se da cauda (durante 30 segundos). Os ratinhos pré-tratados com veículo são testados como animais de controlo. O volume de injeção é de 100 pl/ratinho de 30 g em todas as experiências. Infusão de CaCb (30 mg/ml, 0,1 ml/min/ratinho de 30 g, 100 mg/kg/mrn) é começada 3 minutos após administração IV de j-ármaco ou veiculo (soiuçao salina a 0, 9%) . O retardo de tempo para o início do bloco de condução cardíaco é determinado como o tempo do começo da infusão de CaCl2 até o primeiro evento arrítmico ocorrido. 0 primeiro bloco de condução é definido como o primeiro intervalo RR, maior do que ou igual a 3 vezes um intervalo RR do período do pré-tratamento , 0 primeiro evento arrítmico ocorrido é um bloco AV de segundo grau (falha intermitente da condução de AV caracterizaaa por uma onda P sem o complexo concomitante de QRS) ou um bloco AS de segundo grau (intervalo RR prolongado e um complexo QRS sem urna onda P precedente) . As respostsis ssio expressas com relação ao tempo até o bloco AV de 2o grau ocorrido em ratinhos tratados com veículo. 39 ΕΡ1966130Β1 4. Modelo de tira atrial isolada padrão de diminuição de condução induzida por stress metabólico
Os pépticios apropriados para administração às células cardíacas podem ser identificados num modelo in vitro como descrito por Haugan et al. (J. Cardiovasc. Electrophysiol., 16, 537-545 (2005)).
Ratos (300-400 g) são mortos por um golpe agudo no pescoço. O coração é extirpado rapidamente e transferido para um prato pequeno contendo tampão Tyrodes modificado oxigenado 37° contendo (em mM): NaCl 136, KC1 4, MgCl2 0,8, CaCl2 1,8 HEPES 5, MES 5, glicose 6, pH 7,3. O átrio esquerdo é dissecado com cuidado e uma amostra de tecido de 2x6 milímetros aproximadamente é retirada do apêndice atrial esquerdo e colocada numa câmara de tecido (volume de 5 ml) (Steiert Organ Bath, Hugo Sach Electronic, Alemanha). A câmara fica em perfusão em todo o estudo com tampão Tyrodes oxigenado a 37°C a. uma taxa de 10 ml/minuto.
Um elétrodo bipolar de estimulação (aço inoxidável revestido de teflon, diâmetro de 75 μΜ) é colocado numa extremidade do tecido. A estimulação é efetuada a 1 Hz usando pulsos retangulares no dobro do limiar (duração do estímulo 0,2 ms) libertados por um estimulador (Hugo Sachs, Tipo 215) através de uma unidade de isolação (Universal Isolated Stimulator Un.it tipo 2 63, Hugo Sachs, Alemanha) .
Dois microelétrodos separados de irídio puro (World Precision Instruments, impedância da ponta 3,5-4,0 ΜΩ) são colocados numa linha ao longo do eixo geométrico longitudinal da preparação para registrar CV atrial. As distâncias do elétrodo de estimulação para o primeiro e segundo microelétrodos são de 1,5-2,0 mm e 3,0-4,0 mm!, respetivamente. Cada microelétrodo é conectado a um pré- 40 ΕΡ1966130Β1 amplificador do estágio principal (amplificação de lOx os sinais). Os pré-amplificadores são conectados a módulo amplificador de biopotencia.1 que está conectado ao sistema de aquisiçao de dados por ura PLUGSYS Hugo Sachs. Os sinais são filtrados a 1 kHz e amostrados a 10 kHz.
Depois de um período de equilíbrio de 30 minutos, a regulação a 1 Hz é iniciada. Durante o primeiro período de registro de 20 minutos (período da linha de base), a câmara fica sob perfusão com tampão Tyrodes oxigenado a 37°C, pH /.3. Os compostos (por exemplo, compostos miméticos de lisina modificados dos ensinamentos presentes, AAP, AAP10 ou controlos) são eidicionados, então, ao tampão de perfusão para um outro período de 20 minutos (período de pré-tratamento) . Depois dos 20 minutos de pré- tratamento, a perfusão é mudada para um tampão Tyrodes não oxigenado isento de glicose a 37°C, pH 7,3 (com ou sem compostos de interesse) por 40 minutos (período de stress metabólico). A mudança na velocidade de condução durante o stress metaoólico é comparada a um grupo de controlos não tratados. Em preparações não tratadas, a condução diminui em 15-45% durante o período de 40 minutos de stress metabólico. Em algumas formas de realização, os compostos de acordo com os presentes ensinamentos podem prevenir a redução de condução induzida, por stresse metabólico dura.nte o período de 40 minutos de maneira comparável aos compostos AAP, AAP10, HP5, ou um análogo funcional dos mesmos, isto é, os compostos podem preservar a condução normal durante um episódio de stresse metabólico. 5. Ensaio hematológico
Os compostos ser testados para dos presentes ensinamentos podem também determinar seus efeitos na aceleração da. 41 ΕΡ1966130Β1 ΕΡ1966130Β1 ?gu ida a um st resse ir idu 2 ido p cr 5- J) na p roliferaçao da medula óssea.« Ratos >s com 5-FU (75— 100 n mol/ / kg 1. p . ) por 4 s a ngue são cole Ladas da P°nta da cauda o < com 5-FU (Dia u) e 4, 8, 12, l 6, 20, as mediaas sanguíneas periféricas (granuíó^t recuperação em fluorouracilo (5 machos são trate dias. Amostras c antes do tratam^ 24, 28 dias era seguida à primeira dose de 5-FU. * de contagens os, linfócitos, eritrócitos, trombócitos, retic curocitos) hemoglobina no plasma são feitas. Após a ident-if^^s, janela com pancitopenia severa, o estudo é reioetid- x Uj-CiuLc o tratamento concomitante com um composto dos - , j. -já., o presentes e n s i name nt o s. F. Preparação de compostos exemplares são apresentados ensinamentos. 0
Os seguintes exemplos não limitadores meramente a fim de ilustrar os presentes perito na especialidade compreenderá que há equivalente-numerosos e variações não exemplificadas, mas ainda fazem parte dos presentes ensinamentos.
Os compostos miméticos de lisina dos presentes ensinamentos podem ser sintetizados por meio de síntese de fase sólida ou de fase de solução. Neste contexto, referência é feita, entre muitos outros, a Fields et al,, "Principies and practice of solid-phase peptide synthesis", Synthetic Peptides (2002, 2a edição). O esqu de ácido imidazol-2- composto hidro-lH-co. ema 1 ilustra uma síntese exemplar de (2S, 4R)-4-benzamido-l-(2-(4, 5-di~ i 1 arai η o) a c e t i 1) pirro 1 i dina-2-ca rb o x i 1 i 42 ΕΡ1966130Β1
Esquema 1
Diferentes derivados de aminoácido N-substituídos podem ser usados para sintetizar outros compostos. Por exemplo, 2-cloro-lH-imidazol ou 4-bromo-lH- imidazol pode ser tratado com glicina em água (por exemplo, de acordo com o procedimento determinado em European Journal of Medicinal Chemistry (1989), 24 (6), 623-5) para formar ácido 2-(1H- imidazol-2- ilamino)acético ou ácido 2(lH-imidazol-4-ilamino)acético, respetivamente, que pode então ser usado para sintetizar ácido (2S,4R)-1-(2-(lH-imidazol-2-ilamino)acetil)-4-benzamidopirrolidina-2-carboxílico ou ácido (2S,4R)-1(2- (1 H-imidazol-4-ilamino)acetil)-4- benzamidopirrolidina-2-carboxilico cie uma maneira similar ao esquema 1, Os compostos tais como ácido (2S,4R)-4-benzamido-1-(2-(piridin-2-ilamino)acetil)pirrolidina-2-carboxilico, ácido (2S,4R)-4-benzamido-l-(2-(pirimidin-4-ilamino)acetil)pirrolidina-2-carboxilico e ácido (2S,4R)-4-benzamido-1-(2-(pirimidin-2-ilamino)acetil)pirrolidina-2-carboxilico podem de maneira similar ser sintetizados de ácido 2-(piridin-2- ilamino)acético, ácido 2-(pirimidin-4-ilamino)acélico e ácido 2-(pirimidin-2- ilamino)acético, r e s ρ e t i v a mente.
Alternativamente, o derivado de glicina pode ser sintetizado de acordo com o esquema 2: ΕΡ1966130Β1
Esquema 2 ΕΡ1966130Β1
K^COs, OMSO
1)LtOH,M«OH 2J Η*Ρ<ί O
H !Tj'OK 2- (lH-pirazol-5-ser usado para (2S,4R)-1-(2-(lH-pirazol- 5- ilamino) acetil) — 4—benzamidopirrolidma—2 — carooxilico usando o método mostrado no esquema 1. aciao
No exemplo acima, ilamino)acético produzido assim pode smtenz,
ClC,. .ao
Outros compostos podem ser sintetizados de acordo com o esquema 1 utilizando os materiais de partida de ácido carboxíiico apropriados. Por exemplo, ácido (2S,4R)~4“ benzamido-1-(lH-imidazol-2- carbonil)pirrolidina-2-carboxílico, ácido (2S,4R)-4-benzamido-l-(1 H-pirazola- 5-carbonil)pirrolidina-2-carboxílico ou ácido (2S,4R)-4-benzamido-1-(1H- imidazol-5-carbonil)pirrolidina-2-carboxílico pode ser sintetizado de acordo com o esquema 1 usando ácido lH-imidazol-2-carboxílico, ácido de 1H-pirazol-5-carboxílico ou ácido lH-imidazol-5-carboxílico, respetivamente. 0 esquema 3 ilustra uma outra síntese exemplar de um composto. Neste exemplo, ácido (2S,4R)-4-benzamido-l-(2-(3-fe η i1u reido)acet i1)p i r r o1i dina-2-c a rbo x11i c o, R3 é C (0)NR6R7. 44 ΕΡ1966130Β1
Diferentes isocianatos (por exemplo, metilisocianato ou isopropilisocianato) podem ser utilizados na síntese do esquema 3 para produzir outras ureias (por exemplo, ácido (2S,4R)-4-benzamido-l-(2- (3-metilureido)acetil)pirrolidina-2-carboxílico ou ácido (2S,4R)-4-benzamido- 1- (2- (3-isopropilureido)acetil)pirrolidina-2-carboxilico). 0 esquema 4 ilustra uma síntese exemplar de ácido (2S, 4R) -4- benzarnido-1 - (2- (metilsulfonamido)acetil)pirrolidina-2-carboxílico.
Esquema 4
45 ΕΡ196613061 ΕΡ196613061 outros cloretos etanossulfonilo ou amidas diferentes
Começando com exemplo, cloreto do 2-sulfonilo) , sulfon de sulfonilo ÍPor cloreto de propan°'" (por exemplo, ácido (2S,4R)-4-benzamido-l-(2- (etilsulronamrdo)acetil)pirrolidina-2-carboxílico ou ácido (2S,4R)-4- benzamido-1 --(2-(1 met.i 1 e1.11 suif onamido) acetil) pirrolidina-2-carboxí 1 ico) podem ser preparadas usando o método mostrado no esquema 4.
Outros compostos (por exemplo, ácido (2S,4R)-1-(3-aminopropanoil)-4-benzamidopirrolidina-2-carboxílico) podem ser sintetizados, por exemplo, de acordo com o Esquema 5.
Esquema 5
0 Esquema 6 mostra uma síntese exemplar de composto, ácido (2S,4R)-1-(2-aminoacetil)-4-(fenilamino)pirrolidina- 2- carboxílico. 46 ΕΡ1966130Β1
Esquema 6
1) UOH, THF 2} "5ΉΡ
t) &isOH, MísGH 2} HCi, 1,4-<SSoxafia OCM 1) ívSsOH, HCf 2> G.
HOBí. EDC! DCM
De maneira similar, o Esquema 7 ilustra um composto de síntese exemplar, ácido (2S,4R)-1-(2-aminoacetil)-4-(benzi1ami η o)pi rro1i di na-2-c a rb o x11i c o.
Esquema 7
Outros compostos podem ser preparados usando os materiais de partida apropriados de acordo com os métodos dos Esquemas 6 ou 7. 0 Esquema 8 mostra uma síntese exemplar de composto, ácido (2S, 4R) (2-aminoacetil) ---4--- (2- fenilacetamido)pirrolidina-2- carboxílico. 47 ΕΡ1966130Β1
<) MaQB, NSSOH 2) HG!, i,4-dio!tarte,
Ν' prepar SCIOS u s 3. n ô. o os acordo com o método do
Outros compostos podem ser materiais de partida apropriados de Esquema 8.
Outros compostos podem ser sintetizados, por exemplo, de acordo com o Esquema 9 que ilustra a síntese de ácido (2S,4R)- 1-(2-aminoacetil)-4-(fenilsulfonamido)pirrolidina-2-carboxílico.
Esquema 9
1) 3JOH, W » MsySO,. THF jf L/ \ 3) PhSosCÍ, ΛϊΓ í / 30 Q u HO i hobí. sues Ϋ
1) feiOH, hfeQM 2) HCi, 1,4-dÍQxano, 0 Esquema 10 mostra uma síntese exemplar de ácido (2S, 4R) --- 1 --- (2-aminoacetil) -4- (4-feniloxazol-2- il)pirrolidina-2-carboxílico (veja-se, por exemplo, Tetrahedron: Asymmetry, 14 (20), 3141-3152; 2003). ΕΡ1966130Β1
Esquema 10
HCi Refíuxo
WH} NOBi, £K1, acetoniWKt
0 Esquema 11 ilustra a sír itese de um outro composto ó. L·- .1. o o (2 S, 4 R) -1 - (2 - arai noacetil)-4- (5-fen iloxazol- 211)pirrolidina -2- carboxílico (veja-se, por exemplo,
Journal of Heterocyclic Chemistry (1998), 35(6), 1533- 1534) .
Esquema 11
ΕΡ1966130Β1 A síntese de ainda outro composto ácido (2S,4R)-1-(2-aminoacetil) ---4--- (4-fenil-lH-imidazol- 2-il) pirrolidina-2--carboxílico é mostrada no Esquema 12 (veja-se, por exemplo, Tetrahedron: Asymmetry, 14(20), 3141-3152; 2003; Journal of Medicinal Chemistry, 44(18), 2990-3000; 2001).
Esquema 12
o
p«, meOH ;nh 2) KHrjQAc, alterso
O Esquema 13 ilustra uma síntese exemplar de um composto N-((3R,5S)-1-(2-aminoacetil)-5-(1 H-tetrazol-5-il)pirrolidin-3- il)benzamida.
Esquema 13
1) (JWJjjOOjs, 2S TncSofete eSanúíico 4} MC"!, hk-m
compostos podem ser sintetizados O Esquema 14 mostra um o método pelo qual certos (veja-se, por exemplo, 50 ΕΡ1966130Β1 ΕΡ1966130Β1 íournal of Medicina
Chemistry, 44(18), 2990- 30Oí
Esquema 14
Além da N- ( (3R, 5S) ---1--- (2-aminoacetil) -5- (5-metil-lH-imidazol-2- 11)pirrolidin-3-il)benzamida mostrada no Esquema 14, os compostos que têm bioisósteros diferentes do ácido carboxílico podem ser sintetizados de acordo com este método usando reagentes diferentes de bromocarbonilo (por exemplo, N-((3R,5S)-1-(2-aminoacetil)-5-(1 H-imidazol-2-il)pirrolidin-3- il)benzamida ou N-((3R,5S)-1 - (2-aminoacetil)-5-(5-isopropil-l H-imidazol-2- il)pirrolidin-3-il)benzamida).
Os Esquema para sintetizar 15-17 ilustram outro ertos. métodos exemplar* 51 ΕΡ1966130Β1
Esquema 15
N- ( (3R, 5S) -1 - (2~aiainoacetil) -5- {4-metiloxazol-2-il)pirrolidin-3- il) benzantida
Esquema 16
N-((3R,5S)-1 -(2-aminoacetil)~5~ (5-metil-4H-l,2,4-triazol-3-il)pirrolidin-3- iljbenzamida 52 ΕΡ1966130Β1 Esquema 17
N-{(3.R, 5S)-1 - (2-aminoacetil)-5- (5-metil-4H-l, 3,4-oxadiazol-2-il)pirrolidin-3-il)benzamida
Além dos compostos mostrados nos Esquemas 15-17, os compostos que têm bioisósteros carboxílicos diferentes podem ser sintetizados de acordo com estes métodos por meio da variação dos reagentes. Por exemplo, diferentes reagentes de brometo podem ser usados no Esquema 15 (por exemplo, para produzir N-((3R,5S)-1-(2-aminoacetil)-5-(oxazol-2-il)pirrolidin-3-il)benzamida); dimetilaminocetais diferentes podem ser usados no Esquema 16 (por exemplo, para produzir N-((3R,5S)-1-(2-aminoacetil)-5-(4H-1,2,4-triazol-3- il)pirrolidin-3-il)benzamida ou N-((3R, 5S)-1-(2-aminoacetil)-5-(5-isopropil-4H- 1,2,4-triazol-3-il)pirrolidin-3-il)benzamida); e ésteres orto diferentes podem ser usados no Esquema 17 (por exemplo, para produzir N- ( (3R, 5S) -1- (2- arninoacetil) -5-(1,3, 4-oxadiazol-2-il)pirrolidin-3-il)benzamida). 1. Síntese geral de péptido
Os compostos dos presentes ensinamentos podem ser preparados usando o método de síntese descrito, por exemplo, no documento WO 98/11125 (a divulgação inteira do qual é incorporada para referência no presente documento). Os referidos métodos de síntese resultarão num péptido primário ou produto similar a péptido que tem um contra-ião 53 ΕΡ1966130Β1 de trifluoroacetato e que pode ser apropriado para a preparação de ura medicamento. Em alguns casos, entretanto, pode ser vantajoso executar uma permuta de contra-ião de trifluoroacetato para um anião farmaceuticamente aceitável ou preferido (por exemplo, acetato), por exemplo, por cromatografia de permuta iónica. Alternativamente, o ΕΡ1966130Β1 peptioo primário produto similar a péptido podem, ser repetidamente liofilizados e dissolvidos em ácido clorídrico diluído para obter o cloridrato purificado.
Aparelho e estratégia sintética
Ao usar a metodologia de fase contínua, os péptidos modificados foram sintetizados em lotes num vaso de polietileno equipado com um filtro de polipropileno para filtragem usando 9-fluorenilmetiloxicarboniio (Fmoc) e terc-butiloxicarbonilo (Boc) ou grupos de proteção de outra maneira apropriados para as funcionalidades N-amino e cadeia lateral tais como Alil, Alloc, Dde, Z etc. Ao usar técnicas de sintetizados sínteses. ase da solução, os péptidos modificados fórum usando equipamento padrão durante todas as
Solventes 0 solvente DMF (N,N-dimetilformamida, Riedel de-Hãen, Alemanha) foi purificado passando através de uma coluna empacotada com uma resina de forte permuta de catiões (ácido forte Lewatit S 100 MB/H, Bayer AG Leverkusen, Alemanha) e analisado quanto a aminas livres antes do utilização por adição de 3,4-di-hidro~3--hidroxi-4-oxo~ 1,z,3-benzotriazina (Dhbt-OH) dando surgimento a uma cor amarela (anião de Dhbt-O) se as aminas livres estiverem presentes. O solvente DCM Riedel de-Hãen, Alemanha) (diclorometano, foi usado grau analítico, diretamente sem iri :ação. Acetonitrilo (grau HPLC, Lal> Scan, Dublin, 54 EP19S6130B1
Irlanda) foi usado diretamente sem purificação Aminoácidos comprados em formas
Aininoácxdos protecjidos por Fmoc e Boc foram de AQ.va.nced CneinTech (ACT) , Bacnem e de NeoMPS protegidas de cadeia lateral adequadas.
Derivados de ácido benzoico e
Derivados de ácido usados sem purificaçã oenzoico foram comprados de Aldrich o adicional.
Reagentes de acoplamento
Reagente de acoplamento di-isopropilcarbodiimida (DIC) foi comprado de (Riedel de-Háen, Alemanha).
Suportes Sólidos
Os péptidos foram sintetizados em TentaGel (por exemplo, sRam) e roliestireno (por exemplo, resina PAM) de Advanced ChemTech e Rapp.
Catalisadores e outros Reagentes D x i s o p r o p 11 e t x 1 am .1 n a, (DIEA) foi comprada de Aldrich, Alemanha, e etilenodiamina de Fluka, hidrazina, piperidina e piridina de Riedel de-Hãen, Frankfurt, Alemanha. 4-(N,N-dimetilamino)piridina (DMAP) foi comprada de Fluka, Suíça e usada como um catalisador em reações de acoplamento envolvendo anidridos simétricos. Etanditiol e Tioanisol foram comprados de Riedel de-Hãen, Frankfurt, Alemanha. 3,4-dx-hidro-3-hidroxi-4-oxo-l, 2,3- benzotriazina (Dhbt-OH), 1-hx droxibenzotri a z o1 (HOBt) (HOAt) foram obtidos de 55 ΕΡ1966130Β1
ΕΡ1966130Β1 Fluka, Suíça. Procedimentos de acoplamento 0 primeiro aminoácido anidrido simétrico em DMF pode ser acoplado como um gerado do aminoácido Ν·~α~ protegido apropriado e os aminoácidos subsequentes podem ser acoplados como ésteres de HOBt ou HOAt oerad<~>s in situ feitos de aminoácidos Ν-α-protegidos apropriados e HOBt ou HOAt por meio de DIC em DMF. As acilações foram verificadas pelo teste de ninhidrina executado a 80°c a fim de prevenir a desproteção de Fmoc durante o teste (b d T-arsen A Holm, Int. J. Pept. Protein Res., 43, 1- 9 (1994)).
Desproteção do Grupo de Proteção (Fmoc e Fm) A desproteção do grupo Fmoc e Fm f0i executada pelo tratamento com piperidina 20% em DMF (1x5 e lxl0 min”to) , seguido de lavagem com DMF (5 x 15 ml, 5 mi.nuto cada) até que nenhuma cor amarela pudesse ser detetada após adição de Dhbt-OH ao D ME1 drenado.
Desproteção do Grupo de Proteção (Boc e tBu) A desproteção do grupo Boc e tBu fGi executada pelo tratamento com o TFA 50% em DCM v/v (2x2 minuto, 1 x 30 minuto) seguido de lavagem com. DCM (6x2 minuto) e, então, com tratamento de DMF (2x2 minuto) com a DIEA 5% em DMF v/v (3 x 2 minuto) e seguido finalmente de lavagem com DMF (6 x 2 minuto).
Desproteção de Aloc e Alil
Uma solução de 3 eq. Pd(PPh3)4 dissolvidos em 15-20 ml C H C13, AcOH, NMM (37:2:1) fo i adi c i o n adí resn 3. de 56 ΕΡ1966130Β1 Péptido. 0 tratamento foi continuado por três horas em temperatura ambiente acompanhado de borbulhamento de uma corrente de Nz através da mistura.
Acoplamento de Ésteres de Hobt roram :c e, 3 eq. De aminoácido N-a-amino protegido dissolvidos em DMF juntamente com 3 eq. HOBt e 3 ea. então, adicionados à resina. Anidrido Simétrico Preformado
Seis eq. de aminoácido Ν-α-amino protegido foram dissolvidos em DCM e arrefecidos a 0°C. DIC (3 eq.) foram adicionados e a reação continuou por 10 minutos. O solvente foi removido a vácuo e o restante dissolvido em DMF. A solução foi adicionada imediatamente à resina seguida por 0,1 eq. de DMAP.
Clivagem do Composto da resina usando TF MS A com ácido Frankfurt, % (TFMSA, por 30-60 TFA 0 OS reduzida. O do ácido bruto foi desempenho massa de A resina de Peptidilo foi tratada trifluoroacético 90% (TFA, Riedel de-Háen,
Alemanha) ácido trifluorometanossulfónico 4 Aidrich) etanditiol 2%, tioanisol 4% v/v a t. a. minutos. A resina filtrada foi lavada com filtrados e os lavados evaporados sob pressão i resíduo foi lavado com éter e liofilizado trifluoroacético-água. O produto liofilizado anaiisado por cromatografia líquida de alto (HPLC) e identificado por espectrometria de ionização por eletrospray (ESMS).
Clivagem do Composto da Resina, usando TFA 57 ΕΡ1966130Β1 ΕΡ1966130Β1 A resina de Peptidilo foi tratada com ácido trifluoroacético (TFA, Riedel de-Haen, Frankfurt, Alemanha) água 95% v/v ou com TFA 95% e etanditiol 5% v/v a temperat ura ambiente por 2 horas , A resina filtrada foi lavada com TF A- -água 95% e os filtrados e os lavados evaporados sob pressão reduzida. 0 resíduo foi lavado com éter e liofilizado do ácido acético- água. 0 produto liofilizado bruto foi analisado por cromatografia liquida de alto desempenho (HPLC) e identificado por espectrometria de massa de ionização por eletrospray (ESMS).
Condições Preparativas de HPLC
Lzada usando uma equipada com um ico AFC2000, 0 de instrumento e A cromatografia preparativa foi realJ VISION Workstation (PerSeptive Biosystem) coletor/autoamostrador de fração automát software VISION-3 foi usado para controlo aquisição de dados.
Coluna
Krom.as.ilo (EKA Chemicals) KR100-10-C8 100Ά, C-8, 10 pm; CER 2230, 250 x 50,8 mm ou uma VYDAC 218TP101550, 300A, C-18, 10- 15 pm, 250 x 50 mm. 0 sistema de tampão u s 3. do incluiu A: 0, 1 Q, -r '0 de TFA em MQV; B: 0,085% de TFA, 10%· de MQV, 90% de MeCN. As taxas de fluxo foram de 35-40 ml/min e a temperatura da coluna f oi de 25 °C. Deteção de i JV foi executada a 21b nm e 280 nm. Gradientes apropriados foram aperfeiçoados para péptidos individuais.
Condições analíticas de HPLC A análise de gradiente de HPLC foi feita usando um sistema de HPLC Hewlett Packard HP 1100 consistindo numa. 58 ΕΡ1966130Β1 ΕΡ1966130Β1 -a o
Bomba Quaternária HP 1100, um Autoamost rador HP 1100 um Termostato de Coluna HP 1100 e Detetor de Comprimento de Onda Múltiplo HP 1100 Hewlett Packard Chemstation pari
software LC :ev, A. 0i )1) :ox usado para controlo de instrumento e aquisição de dados. Para HPLC colunas diferentes foram usad. ínantica, is como apropriado, tal como VYDAC 238TP5415, C-18, 5 μΙΠ, 30 0A ou uma Júpiter, Phenomenex 00F-4053-E0; 5 pm C-18, 300A 150 x 4,6 mm e outras. O sistema de tampão incluiu A: 0,1% de TFA em mqv· B; 0, 085% de TFA, 10% de MQV, 90% de MeCN. As taxas de fluxo foram de 1 ml/minuto a temperatura preferida da coluna foi de 4 0 °C. A deteção UV foi executada em 215 nm Como acima, os gradientes apropriados foram aperfeiçoados para os péptidos individuais.
Espectros copia de Massa
Os péptrdos foram dissolvidos em metanol super gradiente (Labscan, Dublin, Irlanda), água Milli-Q (Millipore, Bedford, MA) e ácido fórmico (Merck, Damstadt, Alemanha) (50:50:0, 1 v/v/v) para dcir concentrações entre 1 e 10 mg/ml. As soluções de péptido (20 ml) foram analisadas no modo de polaridade positiva por ESI-TOF-MS usando um espectrómetro de massa LCT (Micromass, Manchester, Reino Unido) precisão de ± 0,1 m/z. sólida Síntese de fase
Em todas as sínteses, a resina seca foi colocada num vaso de polietileno equipado com um filtro de polipropileno para filtragem. A resina foi inchada em DMF. O primeiro aminoácido foi acoplado ou como um anidrido simétrico preformado ou como um éster pré-ativado de HOBt como descrito acima. O seguinte aminoácido de acordo com a sequência foi acoplado como um éster preformado de HObt 59 ΕΡ1966130Β1 como descrito acima. Todos os acoplamentos foram continuados por no mínimo 2 horas, a menos que especificado de outra maneira. 0 acoplamento do derivado de ácido oenzoico a funcionalidade amino da cadeia lateral no aminoacido mimetico de lisina foi em todos os casos executaao usando um éster de HObt preformado. 0 produto final de peptido foi clivado do suporte sólido e analisado por HPLC e MS como descrito acima.
Em todos os casos o derivado de ácido benzoico é funcionalízado como um ácido carboxílico e foi acoplado como um éster de HOBt gerado in situ por meio de DIC em THE .
Todos os acoplamentos foram continuados por no mínimo 2 horas. As acilações foram verificadas pelo teste de ninhidrina executado a 80°C como descrito anteriormente. Após a síntese terminada a resina de péptido foi lavada com DMF (3 X 15 ml, 1 minuto cada uma), D CM (3x15 ml, 1 minuto cada uma), éter dietílico (3 x 15 ml, 1 minuto cada uma) e seca a vácuo. Q péptido foi clivado, então, da resina como descrito acima e seco por congelamento. Após a purificação usando a HPLC preparativa como descrito acima, o produto de péptido foi colhido e a identidade do péptido foi confirmada por ES-MS. Síntese de fase de Solução Exemplar
Um aminoácido protegido apropriado ou um hidroxi ou tiohidroxi ácido acético com um ácido carboxílico não protegido (1 eq.) é dissolvido em DMF juntamente com DIC (1 eq.) e HOBt (1 eq.). Após 1 hora de pré-ativação um bloco de construção de mimético de lisina (LM) é adicionado com um grupo amino não protegido (1,1 eq.) juntamente com ο ΤΕΆ (1,3 eq.) e a mistura é agitada durante toda a noite à 60 ΕΡ1966130Β1 temperatm ambiente.
A mistura de reação é evaporada até resíduo é dissolvido em acetato de etilo. A secura o :ase de acetato de etilo é extraída com (1) uma solução aquosa de ácido clorídrico (0,1 M) e (2) uma solução aquosa de hidróxido de sódio (0,1 M) (3) água a fim remover o excesso de material de partida. A fase orgânica é tratada com o MgSCh (dessecado) filtrado e evaporado até a secura. O grupo amino protegido restante do LM é desprotegido usando TFA/DCM se o grupo de proteção é baseado em tBu, ciclonexano Pd se baseado em benzilo, piperidina/DCM se hidrazina se baseado ΘΙΤ1 Dde. Após sproteção (ί 2 horas) 3. mistura de a secura. ο resíduo é lavado com eq.) que foi pré- -ati vado pelo tratamento com £ o rr: (leq. ) em DMF A reação de acoplament o é :ante toda a noite. reação é evaporada éter dietílico e dissolvido em DMF juntamente com 1,3 eq. e adicionado finalmente a uma solução de um ácido benzoico s ub s t. i t u í do (1 DIC (leq.) continuadci durante A mistura de reação é evaporada até a secura e o resíduo é dissolvido em acetato de etilo. A fase de acetato de etilo é extraída com (1) uma solução aquosa de ácido clorídrico (0,1 M) e (2) uma solução aquosa de hidróxido de sódio (0,1 M) (3) água a fim remover o excesso de material de partida. A fase orgânica é tratada com MgS04 (dessecado) filtrsLdo e evaporado até ci secura.
Os grupos de proteção usando TFA/DCM se os grupos tBu, Cielohexeno de Pd restantes são desprotegidos de proteção são baseados em se baseados em Benzilo,
Piperidina/DCM se baseados em Fluorenilo, hidrazina se baseados em Dde. Após terminar a reação de desproteção (1-2 61 EP19S6130B1 horôLS) a mistura de reação é evaporada até a secura. 0 resíduo é lavado com éter dietilico e dissolvido em TFA/Água e purificado usando HPLC preparativa. Após purificação usando HPLC preparativa como descrito acima, o produto de péptido foi colhido e a identidade do péptido foi confirmada por ES--MS. EP19S6130B1 2. Síntese de Fase Sólida do Composto 2: á amino-acetil)-4- benzoilamino-oirrolidina-2-carboxílico
Io (2S4R) t'2-
Resina PAM (Advanced Chemtech) foi inchada em DMF, lavada com Trietilo amina 5% (TEA) em DMF e lavada com DMF até que nenhuma cor amarela pudesse ser detetada após adicionar Dhbt-OH ao DMF drenado. (2S4R) Boc-4Amp(Fmoc)-ΌΗ foi acoplado como anidrido simétrico como se segue.
3 eq. (2S4R) Boc-4Amp (Fmoc)-OH foi dissolvido em DCM e arrefecido até 0°C. DIC (1,0 eq.) fc reação foi continuada, por 10 minutos. adicionadc
O solvente removido a vácuo e o resíduo dissolvido em DMF. A solução foi adicionadsi. imediatamente à resina seguida por 0,1 eq. de DMAP. 0 acoplamento foi continuado durante toda a noite. O reagente de acoplamento em excesso foi removido por lavagem com DMF. A desproteção do grupo Fmoc foi executada tratamento coni ρ_ι_ρθ3—i_dma z 0*6 emi DMF (j_x.j e ixiQ minuto) , seguido de lavagem com DMF até que nenhuma cor amarela pudesse ser detetada após adição de Dhbt-OH ao DMF drenado. 0 acoplamento de ácido benzoico foi realizado como se segue. 3 eq de ácido benzoico foram dissolvidos em DMF iuntamente com 3 eq· HOBt e 3 eq. DIC e adicionados, então, re jsina. 0 acoplarnento continuado durante tods noite. 0 reagente de acoplamento em excesso foi removido por lavagem com DMF- Antes da desproteção do grupo Boc a 62 ΕΡ1966130Β1 ΕΡ1966130Β1 resina :°i tratada com DCM. A desproteção do grupo Boc fo: de TF A em DC M v/v X Csl pela .1 .a vagem com DCí 'l e, .o com 5% DISA em DMF v/v 2rainuto, 1 x 30 minuto) seguido pela então, com DMF e, então, tratamento com e seguido finalmente de lavagem com DMF. O acoplamento de Boc-Gly-OH foi realizado como se segue. 3 eq. Boc-Gly-OH foram dissolvidos em DMF iuntamente com 3 eq. HOBt e 3 eq. DIC e adicionados, então, à resina. O acoplamento for continua.cio por 2 noras. O reanente de acoplamento em excesso foi removido por lavagem com DMF. O acoplamento foi repetido e continuado durante toda a noite. Antes daL clivagem do peptido do suporte sólido a resina de péptido foi lavada com D CM e, então, com éter e seca fi na1mente s ob vá cu o. A clivagem do dipéptido da Resina RAM foi realizada como se segue. A resina de péptido foi tratada com ácido trifluoroacético (TFA, Riedel de-Hâen) e após 10 minuto um volume correspondente a 10% do volume total de TFA de ácido t r i fluoromet anos sulfónico (TFMSA, Aldrich) foi adicionado a temperatura ambiente e a reação foi continuada por 2 horas. As resinas filtradas foram lavadas com TFA. A matéria-prima roi precipitada da soiuçao de TFA adicionando dietiléter. A matéria-prima foi colhida como um óleo marrom. A solução de éter foi ainda extraída com água e a fase de água foi evaporada. A quantidade total de matéria-prima foi puririçada usanoo HrrC prep. (coluna Vyd3.c C18) : Tampão A: 0,1% de TFA em Água; Tampão B: 90% AcCN; 0,1% de TFA; 9,9% Água. Fluxo: 35 ml/minuto Gradiente: 0 - 47 minuto 100% A a /5% Ά (linear; . Pureza HPLC: 99%. MS: calculado Μ + H = 291,12; encontrado Μ + H = 291,7. 3. Síntese de Fase de Solução do Composto 2 63 ΕΡ1966130Β1 A uma solução de NaHC03 (58,64 g, 0,698 mol) em água (625 ml) A/-BOC-trans-4-amino-L-prolina metilo éster cloridrato (50 g, 0,1745 mol, CNH Technologies, 98%) foi adicionado em porções, seguidas por EtOAc (500 ml). a mistura foi arrefecida até 0°C. Uma solução de cloreto de benzoilo (20,26 ml, 0, 1745 mol) em EtOAc (100 ml) foi adicionada durante 25 minuto a 0°C. A mistura de reação foi agitada a 0°C por 1 hora. As fases foram separadas e a fase aquosa foi extraída com 2x200 ml de EtOAc. A fração orgânica combinada foi lavada com 200 ml de HC1 IN, 100 ml de solução de NaHC03 saturada, 100 ml de salmoura, seca sobre MgSOí e concentrada peLra dar 60, 67 g de (2S,4R)-1-tere~'butii-2-metil-4-benzamidopirrolidína--- 1,2- dicarboxilato como u.m óleo pesado (rendimento 99,8%; rendimento 94% ajustado para EtOAc residual). 1H RMN (CDCI3, δ, ppm; para dois conformadores) : 7,78-7,7 (m, 2 H) , 7,56-7,4 (m, 3 H) , 6,25-6,1 (m, 1 H) , 4,8-4,67 (m, 1 H), 4,51-4,41 (m, 0,4 H) , 4,34 (dd, J = 7, 7 Hz, 0,6 H) , -1, 4 Hz, 0,4 H) , (s, 5,4 H), MS il-2- met il-4- ben 19 g, contem 5, 6 (100 ml) e 0 so^ 3, 97-3, 84 (m, 1 H) , 3, 76 (s, 3H), 3,52 (dd, J = 11, 4 Hz, 0,6 H) , 3,39 (dd, J = 11, 4 Hz, 0,4 H) , 2,47-2,21 (m 2 H) , I, 1,43 (s, 5,4 H), para M+Na) : 371. (2S, 4R) -l-t« 1,2- dicarboxilat foi evaporado sob vácuo para remover EtOAc residual. O óleo residual foi dissolvido em Et20 (100 ml). Solução de HC1 2N em Et20 (700 ml) foi adicionada (exoterma suave; precipitação começou após aproximadamente 5 minutos). A mistura foi agitada a temperatura ambiente por 21 h. Nesse ponto, 200 ml de solução de HC1 2N em Et20 foram adicionados e a mistura foi agitada por 24 h adicionais. O precipitado foi filtrado, lavado com 50 0 ml oe éter dietílico seco em vaci 64 EP196S130B1 EP196S130B1 tem.per atur d C ambiente por 2 4 Ι-'Ί põira dar 46, 03 g de C10 2Γ id rato d 0 4- benzam idopirrol idi na-2-carboxiíato de (2 S, 4R) - meti lo í V \ endimento de 99%) Λ H RMN (CD 3od, cl . ppm): 7, 91 _’Ί ,84 (m f 2 H) 7,6- 7,44 (m, 3H) , 4,78 (t, J = 8, 5 Hz, 1 H) , 4, 6 9- 4, 5 9 (m, 1 H ), 3,77 (dd, J - 12, 6, 6 Hz , 1 H) , 3,52 { dd, Ο 12, 5 Hz, 1 H) , 2 , 67 -2,5 (M, 2 H) , M S (m/z, ESI PO siti νο í para M + H) : 249. A uma solução de BOC-Gly-OH (28,13 g, 0,1606 mol) e 1-hidroxibenzotriazol (0,1686 mol, 25,64 g; contém 11,12% em peso de H20) em THE (1,3 L) foi adicionado cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)- N'etilcarbodiimida (0, 1686 mol, 32,328 g) (frasco A), A mistura foi agitada a temperatura ambiente por 4 h, a seguir a agitação foi paralisada e o resíduo oleoso foi deixado sedimentar. Num frasco separado (frasco B) , NaOH (0, 1606 mol; 32 ml de solução 5N) foi adicionado a uma suspensão de cloridrato de 4-benzamidopirrolidina-2-carboxilato de (2S, 4R)-metilo (0,1606 mo 1, 45,73 g) eir mistura foi agitada a t€ durante cujo tempo a ma solução de éster de I adicion a da ao firasc o B minuto, deix ando pa: ra f- γ Frasco A foi lavado c om foi decantada do ó le< o (0,52 L) durante 15 minuto A iratura ambiente por 10 minuto, a dos sólidos se dissolveu. A Drpnarada no frasco A foi temperât-Urâ θ-ΓΠΟίΘΠυθ αυΐαΠΓΘ ΙΟ o resíduo oleoso. O resíduo no >0 ml de THE’ e a solução de THE" sado e adicionada à mistura no Frasco B. A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 4 0 minuto Água (50 0 ml) foi adicionada e a mistura foi concentrada sob vácuo para remover THE’ (~550 ml de volume residual). EtOAc (500 ml) foi adicionado, seguido por salmoura (300 ml)
Ae fases foram separadas e a fase aquosa foi extraída com 2x300 ml de EtOAc. A fração organica combinada foi lavada com 2x250 ml de HC1 IN, 2x250 mi de soiução de NaHC03 sat. e 150 ml de salmoura, então, seca sobre MgS04 e concentrada para dar 48,31 g de (2S, 4R) 65 ΕΡ1966130Β1 metil-4-benzamido-l-(2-(terc- como butoxicarbonilamino)acetil)pirrolidina-2-carboxilato um sólido espumoso (rendiment ppm; para doí c; Ç :onf ormadores 7,39 (m, 3 H) r O λ '< f ^ ! H J = O N IX! ,2 H), 5, 32 (Br r S, 1 H), J = 7 ' Hz, 1 l· D , 4,1 .1-3, 8 6 (m 3,76 (S, 3 H) , 3, 69- 3,56 (M, : (s, 9 H), MS (m/z, ESI positiv de 74%) . tH RMN (CDCI3, δ 7,81-7,72 (m, 2 H) , 7, 57- Hz, 0,8 H), 6,25 (d, J 4,88-4,74 (m, 1 H) , 4,65 (t 2 Η) 1 3,83-3,78 (m, 1 H) , H), 2,65-2,3 (m, 2 Η) 1 1,43 , para M + Na): 428. A uma solução de (2S, 4R) metil—4—benzamido—1-(2- (fc er c — butoxicarbonii — ammo) acetil)pirrolidina—2— carboxilato (23,33 g, 0,0575 mol) em metanol (450 ml) foi uQ-icionado NaOH (0,2875 mol, 144 ml de solução aquosa 2N) a -1 a 1°C durante 15 minuto A mistura foi agitada a -5 a -1°C por 2,5 n. HC1 (0,2 875 mol, 144 ml de solução aquosa zN) foi adicionado a —3 ει l^C durante 25 minuto MeOH foi destilado sob vacuo, então, 500 ml de EtOAc foram adicionados. A fase aquosa foi saturada com NaCI e as fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída com 2x250 ml
EtOAc e a solução combinada de EtOAc foi seca sobre MgS04 e concentraaa para dar 22,54 g de ácido (2S, 4R) 4-benzamido··· 1” (2- (terc- butoxicarbonilami.no) acetil) pirrolidina-2- carboxílico como um sólido espumoso branco (contém 6,6% em peso EtOAc; rendimento de 94% ajustado para EtOAc residual). RMN (C.D30D, δ, ppm) : 7, 87-7,7 9 (m, 2 H) , 7, 58-7,42 (m, 3 H) , 4,81-4,7 (m 1 H) , 4, 69-4,56 (m, 1 H) , 4,05-3,72 (m, 3 H), 3,67-3,49 (m, 1 H), 2,64-2,28 (m, 2 H), 1,43 (s, 9 H) , MS (m/z, ESI positivo) para Μ + H: 392; para M + Na: 414.
Acido (2 S, 4R) 4-Benzamido-l-(2-(terc- butoxicarbonilamino)acetil)pirrolidina-2-carboxílico (21,97 g; contêm 6,6% em peso EtOAc; 0,0524 mol, ajustados para EtOAc residual) foi dissolvido em dioxa.no (100 ml) . 0 66 ΕΡ1966130Β1 solvente foi evaporado sob vácuo para remover EtOAc residual. 0 resíduo foi dissolvido em dioxano anidro (200 ml) e HC1 (100 ml de solução recentemente preparada ~3, 6N em dioxano) foi adicionado a 10 - 12 °C. A solução foi deixada aquecer até a temperatura ambiente (a precipitação começou após aproximadamente 2 minuto). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 21 h, em cuio tempo 30 ml de solução de HC1 ~3,6N foram adicionados e a mistura foi agitada por 5,5 h adicionais. Sólidos precipitados foram filtrados usando pressão de N2, lavados com 4x25 ml de dioxano e secados sob vácuo a temperatura ambiente por 24 h para dar 18,7 g de produto bruto como sólido branco. O produto bruto foi dissolvido em i-PrOH (104 ml) e 210 ml de éter dietílico foram adicionados por 1 h (precipitado formado imediatamente mediante cada adição de éter). A mistura foi agitada por 1 h, filtrada usando pressão de N2, lavada com 2x50 ml de solução Et20-i-Pr0H 3:1 e seca sob o vacuo a temperatura ambiente por 2 4 h e a 40' por 4í la r 15,7 g cloridrato d< ácido (2S, 4R)-1 ( ^ oa ce til) -4-be: nzair íidopi rrolidina- -2- -carboxil ieo. RMN 0- d6 , δ, ppm, pai :a doi _s conform tad ores): 8 ,77 (d, J _ '—j 0, 8 H), 8,71 (d, J - " / Hz, 0,2 H) , 8,68-7 , 95 V ^ H) , _ ‘“7 , 8 3 (m, 2 t í) ; 7,59- 7,4 3 (m, 3 H), 4,87 -4,7 9 (m, 0,2 4, 68 í-4,54 (m, 0, 8 H), 4,o 4-4,4 4 (m, 1 H) , 4 r\ f U ~ 3, 47 4 H) , 2,47-2, 12 ím, 2 H) . HRMS Cc lleulado para L C14H1 3N3O4 H ) : 292,1297 , encontr a do: 292, : 1294 . 4. Síntese dos compostos 64-68 e 70-78
Acido bu t o x i c arbon i1arai ηo g, 0,1 mmol), (Aldrich, 0,021 cloridrato de l-(3, (AIdri ch, 0, 029 g (2S, 4R) --4-benzamido-l- (2- (terc- ) a c e t i 1) ρ i r r o 1 i d i n a - 2 - c a r b o x í 1 i c o (0, 05 mononidrato de 1-hidroxibenzotriazol g, 0,15 mmol, 1,2 equivalentes) e 3-dimetilaminopropil) --3--et ilcarbodiimida , 0,15 mmol, 1,2 equivalentes) foram 67 EP19SS130B1 dissolvidos em acetonitrilo (15 ml) sob atmosfera de azoto com arrefecimento com gelo. A temperatura foi aumentada gradualmente à temperatura ambiente durante o período de tempo de 2 horas e a mi stura foi então agitada à temperatura ambiente durante a noite. A solução de reação foi arrefecida outra vez até 0°C, solução aquosa 25-30% da amina correspondente (preparada de um reagente puro obtido de Aldrich) (0,1 ml) foi adicionada e a agitação foi continuada com arrefecimento por 30 minutos e, então, à temperatura ambiente por 2 horas. Acetonitrilo (5 ml) foi adicionado à mistura de reação e os voláteis foram removidos a vácuo. O resíduo semissólido foi purificado por cromatografia de sílica gel (EMD, 0,040-0,063 mm) (solvente de revelação: 3-5% de gradiente metanol-diclorometano) para dar os amidos correspondentes em rendimento 80-87%. 0 produto da etapa precedente foi dissolvido em diclorometano seco (10 ml) sob atmosfera de azoto e solução etérea 1M de ácido clorídrico (Aldrich) (1 ml) foi adicionada enquanto mantendo a temperatura a- baixo de 3U°C. A mistura de reação foi agitada durante a noite sob atmosfera de azoto. 0 precipitado foi filtrado, lavado com diclorometano (2 ml) e éter dietilico (2 ml) e seco sob alto vácuo para dar um sal de cloridrato dos compostos correspondentes 64 - 68 e 70 - 78 em rendimento de 75-84% e pelo menos em pureza de 98%. 5. Síntese do Composto 80: ácido (2S, 4R)-1-(2--- acetamidoacetil)-4- benzamidopirrolidina-2-carboxílico A uma solução de ácido benzoilamino-pirrolidina-2-ca e trietilamina (Aldrich) (2S4R) 1-(2-amino rboxílico (0,05 g, (0,19 ml, 1,37 equivalentes) em acetona (3 ml) foi lentamente -acetii) -4-0,17 mmo1) mmol, 8 adicionado equivalentes) com anidrido acético (0,13 ml, 1,37 mmol, 68 ΕΡ1966130Β1 agitação à temperatura ambiente sob a atmosfera de azoto. A mistura foi agitada por 3 horas enquanto monitorada por LCMS. Mediante conclusão, os voláteis foram removidos a. vácuo e o resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Xterra MSC18 50 x 250 m, lOu) usando 40/60 a 90/10 de gradiente metanol/água (ácido fórmico 0,1% em metanol e ácido fórmico 0,1 em água) para dar 0,020 g (rendimento de 35%) do produto desejado como sólido branco com solubilidade limitada em solventes orgânicos. 6. Síntese do Composto 81: ácido (2S, 4R)-4-benzamido-l-(2-(metilamino)acetil)pirrolidina-2-carboxílico A uma solução de 4--benzamidopirrolidina-2-carboxilato de (2S, 4R)-metilo (intermediário na síntese do Composto 2) (0,05 g, 0,20 mmol), cloridrato de 1- (3,3- dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (Aldrich) (0,043 g, 0,22 mmol, 1,1 equivalentes), monohidrato de 1- hidroxibenzotriazol (Aldrich) (0,030 g, 0,22 mmol, 1,1 equivalentes) e ácido 2-(terc- butoxicarbonil(metil)amino) acético (Aldrich) (0,038 g, 0,20 mmol) em diclorometano anidro (10 ml) foi adicionada At-met ilmorf olina (0,05 ml) sob atmosfera de azoto a 0°C. A mistura de reação foi deixada aquecer à temperatura ambiente durante o período de tempo de 2 horas e agitada durante a noite à temperatura ambiente. Os voláteis foram removid os a vácuo e o resíduo foi purifi cado por cromatografia de sílica gel (EM), 0,040- 0, 0 63 mm) (solvente de revelação: metanol/d iclorometano gradiente 3-5%) para dar 0,064 g (rendimento de 7 5%) do produto de acoplamento 4-benzamido- 1-(2-(terc-butoxicarbonil(metil)amino)acetil) pirrolidina-2- carboxilato de (2S, 4R)- metilo. A uma solução do amido acima mencionado (0,064 g, de 0,15 mmol) em metanol (5 ml) foi adicionada solução aquosa 69 ΕΡ1966130Β1 2Ν de hidróxido de sódio (0,38 ml, dos 0,75 mmol, 5 equivalentes) a 0°c sob atmosfera de azoto durante 5 minutos. A reação foi monitorada por LCMS e terminada em 2 horas. Ácido clorídrico 2N aquoso (Aldrich) (0,38 ml, 0,75 mmol, 5 equivsLlentes) foi adicionado a 0°C durante 5 minuto Metanol foi destilado sob vácuo. Acetato de etilo (10 ml) e agua. (1 ml) foram adicionados. A fase aquosa foi saturada com cloreto de sódio e as fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída com acetato de etilo (2x10 ml) . As iraçoes orgamcas de magnésio e con branco ácido butoxicarbonilo combinadas foram secadas sobre o sulfato centradas para dar um produto espumoso (2S, 4R)-4-benzamido-l-(2-(terc- (metil)amino)acetil)pirrolidina-2- a etapa seguinte sem carboxílico que foi usado puri ficação. O ácido aa etapa precedente foi dissolvido em diciorometano seco (10 ml) sob atmosfera de azoto e solução etérea 1M de ácido clorídrico (Aldrich) (1 ml) foi adicionada enquanto mantendo a temperatura a- baixo de 30 °C. A mistura de reação foi agitadci durante a noite sob atmosfera de azoto, o precipitado formado foi filtrado, lavado com diciorometano (2 ml), éter dietílico (2 ml) e seco sob alto vácuo. O produto foi ainda purificado por HuiiC preparativa (coluna: Xterra MSC18 19 x 150 mm) usando gradiente metanol/água de 5% a 95% (ácido fórmico 0,1% em metanol e ciCíqo rórmico 0,1% em água) para dar 0,026 g (38% sobre 3 etapas) do produto desejado. * Síntese do Composto 82: ácido (2S, 4R) —4—benzamido—1 — (2-(2,2,2- trifluoroacetamido)acetil)pirrolidina-2- carboxílico. 1-(2-amino-acetil)-4-(Composto 2, 0,05 g, A uma solução de ácido (2S4R) benzoilamiη o-pi rr o1idina-2-carbox11i co 70 ΕΡ1966130Β1 0,17 mmol) e trietilamina (Aldrich) (0,048 ml, 0,34 mmol, 2 equivalentes) era acetona (3 ml) foi adicionado lentamente anidrido trifluoroacético (0,024 ml, 0,17 mmol) com agitação à temperatura ambiente sob atmosfera de azoto. A mistura foi agitada por 1,5 horas com monitoração cuidadosa por LCMS. Mediante conclusão, os voláteis foram removidos a vácuo e o resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Xterra MSC18 50 x 250 mm, lOu) gradiente metanol/água de 5% a 90% (ácido iórmico 0,1% em metanol e ácido fórmico 0,1% em água) para dar 0,012 g (rendimento de 18%) do produto desejado. 8. Síntese do Composto 84: ácido (2S, 4R)-4-benzamido-l- (2- (dimetilamino)acetil) pirrolidina-2-carboxílico A uma solução de ácido (2S4R) 1-(2-amino-acetil)-4- benzoilamino-pirrolidina-2-carboxílico (Composto 2, 0,05 g, 0,17 mmol) em metanol (3 ml) à temperatura ambiente foi adicionado formaldeído aquoso 37% (Aldrich) (0,1 ml). A mistura resultante foi agitada nesta temperatura por 3 horas, a seguir arrefecida até 0°C e cianoborohidreto de sódio (Aldrich) (0,043 g, 0,69 mmol, 4 equivalentes) foi adicionado em parcelas durante 5 minutos. Após agitação por 1 hora a temperatura ambiente, o solvente foi removido a vácuo e o resíduo solido foi purificado por HPLC preparativa (coluna: XTerra MS C18, 5u, 19xl50mm) usando gradiente de metanol/água de 5% a 95% (ácido fórmico 0,1% em metanol e ácido fórmico 0,1% em água) para dar 0,017 g (rendimento de 31%) do produto desejado. 9. Síntese do Composto 85: ácido (2S, 4R)-4-benzamido-l-(2-formamidoacetil) pirrolidina-2-carb<">xílico*
Anidrido acético (Acros) (0,32 ml, equivalentes) foi adicionado gota a gota a 3,4 mmo .0 ima solução de 71 ΕΡ1966130Β1 ácido (2S4R) 1-(2-amino-acetil)-4- benzoilamino- pirrolidina-2-carboxílico (Composto 2, 0,1 g, 0,34 mmol, 1 equivalente) em ácido fórmico (J.T.Baker) (1 ml) a 0 °C. Depois que a adição estava completa, a mistura de reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada por 24 horas adicionais. A mistura de reação foi monitorada por TLC e LCMS. Um montante suplementar de anidrido acético (0,32 ml, 3,4 mmol, 10 equivalentes) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada por 24 horas à temperatura ambiente. Água gelada (1 ml) foi adicionada e os voláteis foram removidos a vácuo para render um produto bruto oleoso que foi ainda purificado por HPLC (coluna: Water Atlantis 19 x 150 milímetros) usando ácido fórmico 0,1% em Η2Ο/Μθ0Η 20---40% MeOH durante 15 minutos de gradiente para dar 0,031 g (29%) do produto desejado.
Os procedimentos gerais para a síntese dos compostos esboçados acima foram exemplares listados no usados Quadro 1.
Quadro 1
Composto Nome MH+ encontrado MH+ calculado Pureza de HPLC % de Rendimento ácido (2S4R) 1-(2-Amino-acetil)-4-(4-nitro- benzoilamino)-pirrolidina-2-carboxílico 336,17 336,11 89 18 3 ácido (2S4R) 1-(2-Amino-acetil)-4-(4-raetil- benzoilamino)-pirro]idina-2-carboxílico 305,2 305,14 87 28 4 ácido (2S4R) 1-(2-Amino-acetil)-4-(4-raetoxi- benzoilamino)~pirrolidina~2-carboxílico 321,18 321,13 95 37 6 (referência) ácido (2S4R)1-(2-Amino-4~carboxi-butyril) --4-- benzoilamino~pirroiidina-2- carboxílico 363,16 363,14 97 18 U ácido (2S4S) 1~ (2-Amino-acetil)-4-· (4-metoxi- benzoilamino) --pirrolidina-2-carboxílico 321,05 321,13 99 36 12 ácido (2S4S) 1-(2-Amino-acetil)-4-(4— metil- benzoilamino)-pirrolidina-2-carboxílico 305,27 305,14 99 37 72 ΕΡ1966130Β1 13 ácido (2S4S) 1-(2-Amino-acetil)-4-(4-nitro- benzoilamino)-pirrolidina-2-carboxílico 336,18 336,11 99 4 0 ι 4 ácido (2S4S) 1-(2-Amino-acetil)-4-(benzoilamino)-pirrolidina-2-carboxílico 291,29 291,12 99 15 24 (referência) ácido 3-(2-Amino-acetilamino)-5-(4-metil- benzoilamino)-benzoico 327,22 327,12 99 25 26 (referência) ácido 3~(2-Amino-acetilamino)-5-benzoilamino- benzoico 313,13 313,11 99 10 28 (referência) ácido (2S4R) {[4- (4-Nitro-benzoilamino)-pirrolidina-2-carbonil1-amino}-acético 336,19 336,11 97 39 29 (referência) ácido (2S4R) {[4-(4-Metoxi-benzoilamino)-pirrolidina-2-carbonil1-amino}-acético co K> 1— K) 321,13 97 30 30 (referência) ácido (2S4R)2-{[4-(4-Metil-benzoilamino)-pirrolidina-2-carbonil]-amino}-acético co o cn K) 00 305,14 98 28 35 (referência) ácido (2S4S) {[4-(benzoilamino)-pirrolidina-2- carbonil]-amino}-acético K> VD 1— K) 291,12 95 24 36 (referência) ácido (2S4S) {[4-(4-Metoxr-benzoilamino)-pirrolidina-2-carbonilj-amino}-acético 321,35 321,13 97 33 37 (referência) ácido (2S4S) { [4-(4-Nitro-benzoilamino)-pirrolidina- 2-carbonil]-amino}-acético 336,09 336,11 92 37 38 (referência) ácido (2 S 4 S) {[4-(4-Metil-benzoilamino)-pirrolidina-2-carbonil]-amino}-acético 305,29 305,14 95 41. 39 (referência) ácido [2-Amino-3-(4-benzoilamino-fenil)-acetilamino]-acético 341,22 341,14 98 20 40 (referência) ácido {2-Amino-3-[4-(4-metoxi-benzoilamino)-fenil]-a c et i1ami η o}- acético 371,28 371,15 93 56 41 (referência) ácido {2-Amino-3-[4-(4-Nitro- benzoilamino)-fenil]-acetilamino}- acético 386,28 386,12 93 45 42 (referência) ácido {2-Amino-3-[4-(4-metil benzoilamino)-fenil]-acetilamino}- acético 355,25 355,15 7 7 40 4 3 (referência) ácido [(1-Benzoil-imidazolidina-2-carbonil)-amino]-acético 277,17 277,11 90 22 44 (referência) ácido {[1-(4-nitro-benzoil)-imidazolidina-2- carbonil]-amino}-acético 322,15 322,09 95 24 48 (referência) ácido (3-Amiηo-5-beη z o i1am i η o-benzoilamino)-acético 313,33 313,11 98 22 49 (referência) ácido (3-Amino-5-(4-metoxi-benzoilamino)-benzoilamino)-acético 343,29 343,12 89 45 50 (referência) ácido (3-Amino-5-(4-metil-benzoilamino)-benzoilamino)-acético 327,21 327,12 96 40 51 (referência) ácido (3,5-di-Amino-benzoilamino)-acético 209,11 209,08 98 51 73 ΕΡ1966130Β1 52 (referência) ácido (2S4R)4-Benzoilamino-l-(2-hidroxi- acetil)-pirrolidina-2-carboxílico 292,15 292,29 93 25 54 (referência) ácido 3-Benzoilamino-5-(2-hidroxi-acetilamino)-benzoico 314,10 314,09 96 12 5 6 (referência) arnida de ácido l-Benzoil-3-(2-hidroxi- acetil)-imidazolidina-2- carboxilico 278,12 278,09 95 17 64 (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4- benzamidopirrolidina-2-carboxamida 291 291,1 98 7 7 65 (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido- N - m e t i 1 p i r r o 1 i d i n a - 2 - c, a r b o x a m i d a 305 305, 1 >99 82 66 (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N- etilpirrolidina-2-carboxamida 317,1 318,1 >99 76 67 (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N- isopropil.pirrolidina-2-carboxamida 333,2 333,2 >99 81 6 8 (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N- ciclopropilpirrolidina-2- carboxamida OJ Co 1--' Lú 331,2 9 9 84 69 (2S,4R) 4-benzamido-l-(2-(terc-butoxicarbonilamino)acetil) pirroiidina-2- carboxamida 391 391,2 >99 80 7 0 (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N- (pentan-3-il)pirrolidina-2- carboxamida 361,1 361,2 >99 81 -7 Ί (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N- ciclopentilpirrolidina-2- carboxamida 359 359,2 9 9 81 72 (2S, 4R) 1- (2-aminoacetil) -4-benzarnido- N- isobutilpirroildine-2-carboxamida , 34 7 34 7,2 99 7 9 73 (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido- N- ciclobutilpirrolidina-2-carboxamida 345 345,2 >99 78 74 (2S,4R) 1- (2-aminoacetil)-4-benzamido- N- terc-butilpirrolidina-2-carboxamida 346, 9 347,2 >99 83 75 (referência) (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N-(tetrahidro-2H-piran-4- il)pirrolidina-2- carboxamida 374,9 375,2 >99 7 5 76 (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzemido-N- ( (R) -3-met.ilbutan-2 il) pirrolidina- 2- carboxamida 361 361,2 9 9 80 -7 -7 (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido- N-((R)-3,3-dimetilbutan-2-il)pirrolidina-2- carboxamida 374,9 375,2 9 9 83 78 (referência) (2S,4R) 1- (2-aminoacetil)-4-benzamido-N- fenilpirrolidina-2-carboxamida 367,2 366, 9 9 9 82 7 9 (referência) (2S,4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N-((R)-tetrahidrofuran-3- il)pirrolidina-2- carboxamida 360,3 380,2 >99 13 8 0 ácido (2S,4R) 1-(2-acetamidoacetil)-4-benzamidapirrolidina-2- carboxilico 334,1 334, 1 >99 35 81 (2S,4R) 4-benzamido-l-(2-(metilamino) acetil)-pi rrolidina-2-ácido carboxilico 306,2 306, 1 >99 38 82 ácido (2S,4R) 4-benzamido-l-(2-(2,2,2- trifluoroacetamido)acetil)pirrolldine-2- carboxilico 388 38 8,1 >99 18 74 ΕΡ1966130Β1 83 ácido (2S,4R) 4-benzamido-l-(2-(terc-butoxicarbonilamino) acetil) pirrolidina-2- carboxílico 392,3 392,2 >99 30 84 (referência) ácido (2S,4R) 4-benzamido-l-(2-(dimetilamino) acetil)pirrolidina-2-carboxilico 320 320,1 >99 31 O R u O ácido (2S,4R) 4-benzamido-l-(2-formamidoacetil) pirrolidina-2-carboxílico 320,1 320,1 >99 29 G. Dados do ensaio biológico 1. Efeito dos compostos em arritmias induzidas por cálcio 0 efeito antiarrítmico dos compostos de acordo com os presentes ensinamentos foi testado num modelo de airritmias induzidas por cálcio de acordo com o modelo de Lynch et al., J. Cardiovasc. Pharmacol. (1981), 3: 49-60. Ratinhos CD-I machos foram anestesiados com Cetamina (75 mg/kg) e medetomidina (1 mg/kg) IP. Uma cânula i.v. foi introduzida na veia da cauda. Um sinal de ECG da derivação II foi registado continuamente posicionando elétrodos de aço inoxidável de ECG sobre o membro frontal direito e o membro frontal esquerdo. O elétrodo de terra foi colocado no membro traseiro direito. 0 sinal foi amplificado e filtrado usando componentes do fisiógrafo Gould e o software de aquisição de dados po-ne-mah. Após um período de equilíbrio de 90 segundos composto de teste foi injetado na veia da cauda (durante 30 segundos). Os ratinhos pré-tratados com veículo (salina 0,9%) foram testados como animais de controlo. O volume de injeção foi de 100 μΐ/ratinho de 30 g em todas as experiências. Infusão de CaCl, (30 mg/ml, 0,1 ml/min/ratinho de 30 g, 100 mg/: kg/min) f 'ο .ί começada 3 minutos após administração IV de fármaco ου veículo. 0 retardo de tempo para o início do bloco de condução cardíaco foi determinado como o tempo do começo da infusão de CaCl2 até o primeiro evento arrítmic O 0 corrido. 0 primeiro bloco de condução foi definido como o primeiro 75 ΕΡ1966130Β1 intervalo rr, maior do que ou igual a 3 vezes um intervalo RR do período do pré- tratamento. 0 primeiro evento arrítmico ocorrendo foi ou um bloco AV de segundo grau (falha intermitente da condução de AV caracterizada por uma onda P sem o complexo concomitante de QRS) ou um bloco SA de segundo grau (intervalo RR prolongado e um complexo QRS sem uma onda P precedente). ΕΡ1966130Β1 Ratinhos pré-tratados com veículo (salina n / 9%) foram testados em todos os dic :omo ume medida para o nível de controlo em animal não tratado. 0 volume da in-iao5n . , Jcvdo .ιοί de 10 μΐ em todas as experiências. 0 retardo de tç ipo para o início de arritmias foi determinado como o tempo ^ do começo da infusão de CaCl? até o primeiro evento de ut . z r bioco de condução definido como falha intermitente da οοηπ,,, - , , σ ' u Ç a O Cie /i o ou AV caracterizada por ativação retardada de οη^. _ „ , ^ v ' VJd p ΦΙΟΟΟ SA) ou uma onda P sem o complexo QRS concomitant-( AV) . o retardo de tempo para início de bloco A\; , . J e aado no Quadro 2. (bloco
Quadro 2
Composto Tempo para bloco AV (s) Solução salina (controlo) 62 - 7 8 76 ΕΡ1966130Β1 2 134,7 6 117, 9 26 122,8 52 135,6 54 121,7 5 6 128,1 64 111,7 65 115,2 6 6 122,7 67 134,4 68 co cn 80 111,5 81 123,2 82 113,8 83 110, 9 84 108,8
Provém dos dados apresentados no Quadro 2 eme o pré-tratamento de um ratinho com uma série de compostos dos presentes ensinamentos resultou num ciumento consistente no tempo para um bloco AV no ratinho após infusão de CaCl2. Os compostos dos presentes ensinamentos exibem, assim, propriedades antiarrítmicas. 2. Efeito dos compostos na redução de condução atrial induzida por stress metabólico manter a condução durante stress metabólico foi testada num modelo in vitro como descrito por Haugan et al. (J. Cardiovasc. Electrophysiol., 2005:i6: 537-545). Ratos (300-400 g) foram mortos com um golpe brusco no pescoço. O coração foi extirpado rapidamente e transferido para um prato pequeno contendo tampão Tyrodes modificado oxigenado a 37° (em mM) : NaCl 136, KC1 4, MgC-1.2 0,8, CaCl2 1,8 HEPES 5, MES 5, Glicose 6, pH 7,3. 0 átrio 77 ΕΡ1966130Β1 esquerdo foi dissecado com cuidado e uma amostra de tecido de 2x6 mm aproximadamente foi retirada do apêndice atrial esquerdo e colocada numa câmara de tecido (volume 5 ml.) (Steiert Organ Bath, Hugo Sach Electronic, Alemanha) . a. câmara ficou em perfusão durante todo o estudo com tcLmpão Tyrodes a 37°C a uma taxa de 10 ml/minuto.
Um elétrodo bipolar de estimulação (aço inoxidável revestido com Teflon, diâmetro de 75 μΜ) foi colocado numa extremidade do tecido. A estimulação foi conduzida a 1 Hz usando pulsos retangulares no dobro do limiar (duração do estímulo 0,2 mis) libertados por um estimulador (Hugo Sachs, Tipo 215) através de uma unidade da isolação (Universal Isolated Stimulator Unit tipo 263, Hugo Sachs, Alemanha).
Dois microelétrodos separados de irídio puro (World Precision Instruments, impedância da ponta 3,5-4,0 MQ) foram colocados numa linha ao longo do eixo longitudinal da preparação para gravar CV atrial. As distâncias do elétrodo de estimulação para o primeiro e o segundo microelétrodos são de 1,5-2,0 mm e 3,0-4,0 mm, respetivamente. Cadci microelétroclo foi conectado a um pré-amplificador do estágio principal (amplificação de lOx os sinais). Os pré-amplificadores foram conectados a um módulo amplificador de biopotencial que foi conectado ao sistema de aquisição de dados através de um Hugo Sachs PLUGSYS. Os sinais foram filtrados a 1 kHz e amostrados a 10 kHz.
Depois de um período de equilíbrio de 30 minutos, regulagem a 1 Hz foi iniciada. Durante os primeiros 20 minutos de período de gravação (período da linha de base), a câmara ficou em perfusão com tampão Tyrodes oxigenado a 37
Então, a amostra de teste (Composto 2) ou controlo foi adicionada ao tampao de perfusão para um outro período de 20 minutos (período de pré-tratamento). Depois 78 ΕΡ1966130Β1 ΕΡ1966130Β1 dos 20 minutos para um t amp ã o de pré- tratamento, Tyrodes não oxigenai a periusãLO foi mudada , isento de glicose a 37 °C, pH 7,3 (com ou minutos (período de destas experiências são sem compostos do interesse) por 40 stress metabólico), Os resultados mostrados graficamente na figura 1.
Com referência à figura 1, em preparações que contêm o controlo, a velocidade de condução diminuiu em 22%, Em contraste, em preparações tratadas com o Composto 2, a velocidade de condução atrial não mudou em comparação com a linha de base.
Segue-se dos dados apresentados na figura 1 que o pré-tratamento de uma tira atrial de ratinho isolada com um composto dos presentes ensinamentos impediu significativamente a redução de condução cardíaca induzida por stress metabólico. As doenças cardíacas tais como fibrilação atrial, a vibração atrial, taquicardia ventricular e fibrilação ventricular são todas caracterizadas pela presença de redução de condução cardíaca anormal. Assim, por meio do efeito na condução cardíaca, espera-se que os compostos dos presentes ensinamentos exerçam efeitos antiarrítmicos. 3. Ensaio da estabilidade de plasma
Para prever sua estabilidac l.e de plasm a, o s com postos dos pre, sentes ens inamentos fora m inc ubado, s em Dias ;ma de rsLt inno macn o (1:1 plasma:tampão pH 7, 4) a conc entrsL c3_ óv de 1 μΜ a 37 1 3C. Após 3 horas, a. r e ação foi arre f ec_ Lda abr uptamente com acetonitrilo f ri, 3. » Ά SC ) 1U Ç ã 0 .1 “0 i cen f' Ί -f-jj g ada Θ 0 sobrenada n te foi anali; s a cio com LC- -MS usa ndo as s e gui n tes condições de : E1PLC: col una Thermo Hyp e r s i 1 -Key stone Aquasilo Cl 8 (5 0mm x 2, 1 mn íi, 5 μΜ) a tem perat ura ambier ite; Solvente A: ác ido í : ó rm i co 0, 1 % em 79 ΕΡ1966130Β1 água; Solvente B: ácido fórmico 0,1% em acetonitrilo; gradiente de solvente: 100% A a 50% A durante 2,5 min, a 10% A durante 1,5 min e retornando a 10 0% A e reequilibrando por 1,5 minuto; taxa de fluxo: 0,8 ml/minuto A percentagem de composto restante foi calculada dividindo as contagens de área de sinal LC---MS de amostra de incubação de 3 horas pelo tempo = contagens de área. Os resultados destas experiências estão resumidos no Quadro 3 a seguir.
Quadro 3
Composto % Restante Z 93 64 27 r rp 87 66 100 6 7 100 6 8 9 6 6 9 92 ·—> r\ 1 L/ 93 71 90 72 88 7 3 95 80 10 0 81 100 82 34 8 3 100 84 100 85 107 4. Ensaio de Estabilidade Metabólica
Para prever a estabilidade do composto sob o metabolismo da primeira passagem (Fase I), compostos dos presentes ensinamentos foram incubados em microssomas de fígado de ratinho macho a concentração de 1 μΜ e 80 ΕΡ1966130Β1 concentração de proteína de 0,-5 mg/ml a 37 °C. Após 15 minuto, a reação foi arrefecida rapidamente com acetonitrilo fria. A, solução foi centrifugada e o soorenadante foi analisado com LC-MS usando as condições de HPLC descritas na seção 3 acima. A percentagem restante foi calculada dividindo as contagens de área LC-MS da amostra
de 15 minutos de incubação pei ,o tempo = 0 contagens de área e a meia vida do composto foi derivada usando a cinétic a de reaçao de primeira ordem. Baseado neste ensaio, os Compostos 2, fo4, 65, 66, 6 /, 68, 69, 70, 71, 72, 73, CO O 81, 82, 83 e 84 tiveram semividas maiores do que 30 minutos em microssomas de fígado de ratinho macho. 5. Modelo de Tamanho de Infarto Canino e Arritmia de Reperfusão 0 Composto 2 foi testado em cães submetidos a uma oclusão da artéria coronária de 60 minutos e reperfusão de 4 horas, como descrito por Hennan et al. (J. Exp. :ont rolo cte veiculo (n=7).
Complexos ventriculares
Pharmacol. Ther., 317, 236-43 (2006)). 0 c omposto 2 foi administrado IV 10 minut o cintes da reperf usão como uin bolus + infusão IV em do s e s de: 0,25 pg/kg de bolus + 0,19 pg/kg/h de intuss0 (n=6) ; 2,5 pg/kg de bc r>lus + 1,9 pg/kg/h de infusão (n=7); 25 pg/kg de bolus + 19 pg/kg/h de infusão (n=6); 75 pg/kg de bolus + 57 pg/kg/h de infusão (n=5); prematuros (PVCs) Qu atro o u ma i s taquicardia ventr foram quantificados durante a reperfusão. PVCs consecutivos foram definidos como icular (VT). A incidência total de VT foi reduzida significativamente com as duas doses mais elevadas de Composto 2 (eventos 1,7±0,8; 2,2±1,4; p<0,05) em. comparação com os controlos (23±6,1). Os PVCs totais foram reduzidos significativamente de 11,1±1,6% em animais de controlo para 2,0±0,7% e 1,8±0,8% após as duas doses mais altas de Composto 2. O tamanho de infarto, expresso como 81 ΕΡ1966130Β1 ΕΡ1966130Β1 foi reduzido para 7,9±1,5 e de Composto 2. dos presentes potentes com percentagem do ventrículo esquerdo, significativamente de 19,0±3,5 em controlos 7,1+0,8% (p<0,05) nas duas doses mais altas
Estes resultados demonstram que os compostos ensinamentos são compostos antiarritmicos efeitos cardioprotetores. 6. Modelo de Inchamento de célula in vitro e Retomada de Tintura Péptidos capazes de demonstrar citoproteção podem ser identificados num modelo in vitro de inchamento de célula induzido por isquemia e retomada de tintura. Nesta experiência, o efeito do Composto 2 na retomada de tintura de calceína induzido pela inibição metabólica em células de glioma C6 cultivadas que sobre-expressam conexina 43 foi estudado. As células foram incubadas sob condições de controlo e durante isquemia simulada (SI) por 40 minutos na presença de calceína (200 μΜ) . Em seguida a incubação as células foram submetidas a microscopia de epifluorescência
ναα U.C peLra determinar a retoma calceína. A incubação de células C6 em meio SI aumentou a retomada de tintura em 5 vezes acima dos valores de controlo. A retomada foi inibida dependentemente da dose pelo Composto 2 e a retomada mínima foi obtida a 100 μΜ de Composto 2 (32% de redução relativa da resposta induzível de SI; p<0,05 versus veículo). As células de controlo exibiram inchamento de célula durante o período de stress de 40 minuto, ao passo que as células tratadas com o Composto 2 não.
DOCUMENTOS REFERIDOS NA DESCRIÇÃO
Esta lista de documentos referidos pelo autor do presente pedido de patente foi elaborada apenas para informação do leitor. Não é parte integrante do documento de patente 82 ΕΡ1966130Β1 europeia. Não obstante o cuidado na sua elaboração, ο IEP não assume qualquer responsabilidade por eventuais erros ou omissões.
Documentos de patente referidos na descrição * ÍJS 4775743 A [0005] * WO 2004048400 A [0006] * WO 02077017 A [0092] [0108] [0110] * WO 9811125 A [0145]
Literatura não relacionada com patentes referida na descrição * Cell interactions and Gap Juncfions. CRC Press, Inc, 1989 [0002] * GUERRERO et al, J. Clin. Invest., 1997, vol, 99, 1991-1998 [0004] LERNER et [0004] al. Circulation, 2000, vol. 101, 547-552 KAPRELIAN [0004] et al Circulation, 1998, vol. 97, 651-660 PETERS et [0004] al. Circulation, 1993 , vol. 88, 864-875 SAFFITZ et 317 [0004] al. Cardiovasc. Res., 1999, vol. 42, 309- AOMUMA et al. C "hem. Pharm. Buli. (Tokyo), 1980, vol. 28, 3332-3339 [0005] • DHEIN et al. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol., 1994, vol. 350, 174-184 [0005] • MOLLER et al. Eur. J. Pharmacol,, 1997, vol. 327, 65-72 [0005] • HAUGAN et al. J. Cardiovasc. Electrophysiol., 2005, vol. 16, 537-545 [0008] [0112] [0197] ® R. B. SILVERMAN. The Organic Chemistry of Drug Design 83 ΕΡ1966130Β1 and Drug Action. Academic Press, 1992 [0033]
Pro-drugs as Novel Delivery Systems. T. HIGUCHI ; V. STELLA. A.C.S. Symposium Series, and in Bioreversible Carriers in Drug Design. American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987, vol. 14 [0084] Remington's Pharmaceutical Sciences. Mark Publishing Company, 1985 [0086] CHRIST et al. Braz. J Me d Bíol. Res., 2000, vol. 33, 423-429 [0097] MONTECINO—RGDRIGUEZ et al. Blood, 2000, vol. 96, 917- 924 [0099] PRESLEY et al. IGJC 2005, 2005 [0099] LYNCH et al. J Cardiovasc. Pharmacol,, 1981, vol. 3, 49-60 [0111]
Principies and practice of solid-phase peptide synthesis. FIELDS et al. Synthetic Peptides. 2 0 02 [0120]
European Journal of Medicinal Chemistry, 1989, vol. 24 (6), 623-5 [0122]
Tetrahedron: Asymmetry, 2003, vol. 14 (20), 3141-3152 [0137] [0139]
Journal of Heterocyclic Chemistry, 1998, vol. 35 (6), 1533-1534 [0138]
Journal of Medicinal Chemistry, 2001, vol. 44 (18), 2990-3000 [0139] [0141] B. D. LARSEN ; A, HOLM. Int. J. Pept. Protein Res., 1994, vol. 43, 1-9 [0153] LYNCH et al. J. Cardiovasc. Pharmacol, 1981, vol. 3, 49-60 [0194] HENNAN et al. J. Exp. Pharmacol. Ther., 200 6, vol. 317, 236-43 [0205]
Lisboa, 21 de Janeiro de 2014 84

Claims (12)

  1. ΕΡ1966130Β1 REIVINDICAÇÕES
    -Z' ou ura sal farmaceuticarnente aceitável ou hidrato do mesmo, em que: R1 é hidrogénio; NR3R3 em que R2 é hidrogénio, e R3 é selecionado a V ' partir de hidrogénio, Ci_i0 alquilo, C(0)R° e C(0)0R°; R1 2 é OH ou NH2; R3 e R6 são independentemente selecionados a partir de hidrogénio e Ci-io alquilo; Z' é benzoilo, opcionalmente substituído com 1 a 5 grupos Q, em que cada grupo Q é independentemente selecionado a partir de F, Cl, Br, I, Ci-io alquilo, CF3, OCF3, N02, O-Ci-10 alquilo, OH, NH2, NH (Ci-i0 alquilo), Ν(Ο3-10 alquilo) 2, e NHC(O) Ci-io alquilo.
  2. 2. O composto de acordo com a reivindicação 1, em que Pd é hidrogénio. de acordo com a reivindicação 1, em que R3 é hidrogénio ou Ci-i0 alquilo opcionalmente
  3. 3. O composto é C (O) P.6, e R6 substituído. 1 1 O composto de acordo com qualquer uma das 2 reivindicações 1 a 3 que tem a seguinte estrutura: ΕΡ1966130Β1
    N—Z' Fr hidrato do mesmo ou um sal farmaceuticamente aceitável 6. 0 composto de acordo com qualquer reivindicações 1 a 3 que tem a seguinte estrutur ma 3. S
    R im sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato do mesmo 7. 0 composto de acordo com. qualquer uma das reivindicações 1 a 3 que tem a seguinte estrutura: 2 ΕΡ1966130Β1
    Ν—Ζ' do mesmo. ou um sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato 8. 0 composto de acordo com a reivindicação 1 ane é: ácido 1-(2-amino-acetil)-4-(4-nitro-benzoilamino) pirrolidina-2-carboxílico; ácido 1“ (2 -· am i η o - a c e t i 1) -4™benzoilamino~pirrolidina-2 carboxílico; ácido 1-(2-amino-acetil)-4-(4-metil-benzoilamino) pirrolidina-2-carboxílico; ácido 1—(z—amino—aceti1)—4—(4—metoxi—benzoilamino) ρ i r r olidina-2 - c a. r b o x í 1 i c o; ou ácido 1-(2-amino-acetil)-4-(4-hidroxi-benzoilamino) pirrolidina-2-arboxílico; ou um sal farmaceut.icamente aceitável ou hidrato do mesmo. 9. 0 composto de acordo com a reivindicação 1 ou 8 que é ácido (2S, 4R) 1-(2-amino-acetil)-4-(4-nitro benzoilamino) -pirrolidina-2-carbox 1.1 ico; ácido (2S, 4R) 1-(2-amino-acetil)-4-benzoilamino pirrolidina-2-carboxílico; ácido (2S, 4R) 1-(2-amino-acetil)-4-(4-metil benzoilamino)-pirrolidina-2-carboxílico; ácido (2S, 4R) 1-(2-amino-acetil)-4-(4-metoxi benzoilamino)-pirrolidina-2-carboxílico, ou ácido (2S, 4R) 1-(2-amino-acetil)-4-(4-hidroxi b enzoilamino)-pirrolidina-2-arboxí1ic o; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato do mesmo. ΕΡ1966130Β1
  4. 10. Um composto que é: 1--- (2-aminoacetil) -4-benzamido-N-metiIpirrolidina-2-carboxamida; 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N-etiIpirrolidina-2-carboxami da; 1-(2-aminoacetil)~4-benzamido-N-isopropilpirrolidina-2~ carboxamida; 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N-ciclopropiIpirrolidina-2 carboxamida; 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N-(pentan-3-il)pirrolidina 2 - c a rb o x am i da; 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N-ciclopentilpirrolidina-2 c a rb o x ami da; 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N-isobutiIpirrolidina-2-carboxamida; 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N-ciclobutilpirrolidina-2- carboxamida; 1- (2-aminoacetil)~4-benzamido~N~terc-butiIpirrolidina-2-carboxamida; ou ácido 4-benzamido-l-(2-(2,2,2 trifluoroacetamido)acetil)pirrolidina-2-carboxílico; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato do mesmo.
  5. 11. O composto de acordo com a reivindicação 10 que é: (2S, 4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N metiIpirrolidina-2-ca rboxamida; (2S, 4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N-etilpirrolidina 2- carboxamida; (2S, 4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N isopropilpirrolidina-2-ca rb o x am i da.; (2S, 4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N ciclopropiIpirrolidina-2-carboxamida; (2S, 4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N-(pentan-3 i 1) p i r r o 1 i d i n a - 2 - c a r b o x am i da.; ΕΡ1966130Β1 (2S, 4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N- ciclopentilpirrolidina-2-carboxamida; (2 S, 4R) i-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N- i s o b u t i 1 p i r r o 1 i d i n a - 2 - c a r b o x a m i d a; (2S, 4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamido-N- ciclobutilpirro1idina—2—carboxamida; (2S, 4R) 1- (2-aminoacetil)-4-benzamido-N-terc- butilpirrolidina-2-carboxamida; ou ácido (2 S, 4R) 4-benzamido-l-(2-(2,2,2- trifluoroacetamido)acetil)pirrolidina-2-carboxílico; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato do mesmo. 12. 0 composto de acordo com a reivindicação 1 que é: ácido 1-(2-acetamidoacet i1)-4-benzamidopirrolidina-2- carboxílico; ácido 4-benzamido-l-(2-(metilamino)acetil)-pirrolidina-2-carboxílico; acido 4-benzamido-l-(2-(terc-butoxicarbonilamino) acetil)pirrolidina-2-carboxílico; ácido 4-benzamido-l-(2 — formamidoacetil)pirrolidina-2- carboxílico; 1 - (2-aminoac,eti 1) -4-benzamidopirrolidina-2- carboxamida; ou 4-benzamido-l-(2-(terc- butoxicarbonilamino) acetil)pirrolidina-2-carboxamida; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato do mesmo. 13. 0 composto de acordo com a reivindicação 1 ou 12 que é: ácido (2S, 4R) 1-(2-acetamidoacetil)-4- benzamidopirrolidina-2-carboxílico; ácido (2S, 4R) 4-benzamido-l-(2-(metilamino)acetil)- pírrolidina-2-carboxílico; ácido (2S, 4R) 4-benzamido-l-(2-(terc- 5 ΕΡ1966130Β1 butoxicarbonilamino)acetil)pirrolidina-2- carboxílico; ácido (2S, 4R) 4-benzamido-l-(2~ formamidoacetil)pirrolidina-2-carboxílico; (2 S r 4R) 1-(2-aminoacetil)-4-benzamidopirrolidina-2- carboxamida; ou (2S, 4R) 4-benzamido-l--(2-(terc- butoxicarbonilami.no) acet il) pirrolid.ina.-2-carboxamida; idrato do mesmo. ou um sal farmaceuticamente aceitável ou 14. 0 composto de acordo com a reivindicação 1 que é ácido 1 - (2 - am i η o - a c e t i 1) - 4- benzo i 1 ara i η o - p i r r o 1 i d i n a - 2 -carboxílico, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato do mesmo. 15. 0 composto de acordo com a reivindicação 14 que é ácido (2S, 4R) 1-(2-amino-acetil)-4-benzoilamino-pirrolidina-2-carboxílico, ou um sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato do mesmo.
  6. 16. Uma composição farmacêutica que compreende um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15 ou um sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato do mesmo, e um veiculo farmaceuticamente aceitável.
  7. 17. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15 para utilização em terapêutica. 18. Um composto de acorao com qualquer uma das reivindicações 1 a 15 para utilização num método de prevenção ou tratamento de uma condição patológi ca, em que a condição patológica é isquemia. 19. Um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15 para utilização num método de prevenção ou tratamento de lesão isquémica em um ou mais 6 ΕΡ1966130Β1 órgãos de um mamífero. 20. Um. composto de acordo reivindicações 1 a 15 para prevenção ou tratcimento de uma a condição patológica é doença 21. Um composto de acordo reivindicações 1 a 15 para com qualquer uma QcL S utilização num método de condição patológi ca, em que cardiovascular. 1 com qualquer uma dciS utilização num método de ama condição patológica de prevenção ou acordo com cardiovascular :ratament o de reivindicação go, é fibrilação em Gue doença atrial, palpitação atrial, raquicardia ventricular ou fibrii< L cir:ã n τ
  8. 22. O composto reivindicações 1 prevenção ou tratsimento d' de acordo com qualquer uma das a 15 Para utilização num método de ia condição patológica de quaíquer uma das reivindicações 18 a 21, em que o composto é formulado para a administração parentérica ou oral.
  9. 23. Jciii^aÇaO ue um convosco de acordo com das reivindicações 1 a 15 na preparação de um para a prevenção ou tratamento de uma condieão em que a condxção patológica é isquemia qualquer uma medicamento patológica,
  10. 24. Utilização de um composto de acordo das reivindicações 1 a 15 na preparação para a prevenção ou tratamento de lesão i mais órgãos de um mamífero. com qualquer uma de um medicamento .squémica em um ou 25. da s Utilização de reivindicações um composto de acordo com qualquer uma 1 a i5 na preparação de um medicamento para a prevenção ou tratamento de uma condição pato em que a condição patológica é doença cardiovascular ógica, 7 ΕΡ1966130Β1
  11. 26. A utilização de acordo com a reivindicação 25, em que a doença cardiovascular é fibrilação atrial, palpitação atria1, taquicardia ventricu1ar ou fibri1ação ventricu1ar.
  12. 27. A utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 23 a 26, em que o composto é formulado para a a dm i n istração pare n tér i c a ou ora1. Lisboa, 21 de Janeiro de 2014 8
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Families Citing this family (49)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK1966130T3 (da) * 2005-12-23 2014-02-10 Zealand Pharma As Modificerede lysin-mimetiske forbindelser
WO2008079266A2 (en) * 2006-12-21 2008-07-03 Wyeth Synthesis of pyrrolidine compounds
WO2009010733A2 (en) * 2007-07-15 2009-01-22 Zealand Pharma A/S Peptide gap junction modulators
US8377968B2 (en) 2008-06-02 2013-02-19 Zalicus Pharmaceuticals, Ltd. N-piperidinyl acetamide derivatives as calcium channel blockers
CA2771612A1 (en) * 2009-09-18 2011-03-24 Zalicus Pharmaceuticals Ltd. Selective calcium channel modulators
HK1210969A1 (en) * 2012-01-20 2016-05-13 奥克塞拉有限公司 Substituted heterocyclic compounds for disease treatment
WO2014134306A1 (en) 2013-03-01 2014-09-04 Zalicus Pharmaceuticals, Ltd. Heterocyclic inhibitors of the sodium channel
BR112015022096A8 (pt) 2013-03-15 2019-11-26 Chromocell Corp compostos moduladores de canal de sódio, composição que os compreende e uso dos mesmos
CN105611923B (zh) 2013-09-10 2019-08-23 卓莫赛尔公司 用于治疗疼痛和糖尿病的钠通道调节剂
US10010541B2 (en) 2014-01-30 2018-07-03 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Modulation of tissue transglutaminase activation in disease
JP2017507934A (ja) * 2014-02-28 2017-03-23 ヒカル リミテッド ビルダグリプチンのための新規な実用的プロセス
JP6989864B2 (ja) 2017-05-05 2022-02-03 ジーランド ファーマ，アー／エス ギャップ結合細胞間コミュニケーションモジュレータ及び糖尿病性眼疾患の治療のためのそれらの使用
EP3661922B1 (en) * 2017-08-04 2024-10-23 Takeda Pharmaceutical Company Limited Inhibitors of plasma kallikrein and uses thereof
CR20200054A (es) 2017-08-09 2020-03-21 Denali Therapeutics Inc Compuestos, composiciones y métodos
HUE062446T2 (hu) 2017-09-01 2023-11-28 Denali Therapeutics Inc Vegyületek, készítmények és eljárások
WO2019060693A1 (en) 2017-09-22 2019-03-28 Kymera Therapeutics, Inc. CRBN LIGANDS AND USES THEREOF
JP7366031B2 (ja) 2017-09-22 2023-10-20 カイメラ セラピューティクス， インコーポレイテッド タンパク質分解剤およびそれらの使用
IL315310A (en) 2017-12-26 2024-10-01 Kymera Therapeutics Inc Irak degraders and uses thereof
EP3737666A4 (en) 2018-01-12 2022-01-05 Kymera Therapeutics, Inc. PROTEIN DEGRADATION AGENTS AND ASSOCIATED USES
US11512080B2 (en) 2018-01-12 2022-11-29 Kymera Therapeutics, Inc. CRBN ligands and uses thereof
EP3817822A4 (en) 2018-07-06 2022-07-27 Kymera Therapeutics, Inc. PROTEIN DEGRADANTS AND USES THEREOF
WO2020010177A1 (en) 2018-07-06 2020-01-09 Kymera Therapeutics, Inc. Tricyclic crbn ligands and uses thereof
JP7623943B2 (ja) 2018-11-30 2025-01-29 カイメラ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｉｒａｋ分解剤およびそれらの使用
EP3923935A4 (en) 2019-02-13 2022-10-26 Denali Therapeutics Inc. COMPOUNDS, COMPOSITIONS AND METHODS
MA54959A (fr) 2019-02-13 2021-12-22 Denali Therapeutics Inc Composés, compositions et procédés
US11485750B1 (en) 2019-04-05 2022-11-01 Kymera Therapeutics, Inc. STAT degraders and uses thereof
WO2020251972A1 (en) 2019-06-10 2020-12-17 Kymera Therapeutics, Inc. Smarca degraders and uses thereof
WO2020251971A1 (en) 2019-06-10 2020-12-17 Kymera Therapeutics, Inc. Smarca degraders and uses thereof
BR112021026517A2 (pt) 2019-06-28 2022-05-10 Kymera Therapeutics Inc Degradadores de irak e usos dos mesmos
CN112142823B (zh) * 2019-06-28 2022-08-05 深圳翰宇药业股份有限公司 一种zp-1609的合成方法
EP3996746A4 (en) 2019-07-11 2023-08-23 Praxis Precision Medicines, Inc. T-TYPE CALCIUM CHANNEL MODULATOR FORMULATIONS AND METHODS OF USE THEREOF
WO2021011868A1 (en) 2019-07-17 2021-01-21 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
EP4072591A4 (en) 2019-12-10 2024-06-05 Kymera Therapeutics, Inc. IRAQ DEGRADER AND USES THEREOF
WO2021127283A2 (en) 2019-12-17 2021-06-24 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
JP2023509366A (ja) 2019-12-17 2023-03-08 カイメラ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｉｒａｋ分解剤およびそれらの使用
CN115297931A (zh) 2019-12-23 2022-11-04 凯麦拉医疗公司 Smarca降解剂和其用途
IL296451B2 (en) 2020-03-19 2026-05-01 Kymera Therapeutics Inc MDM2 joints and their uses
TW202210483A (zh) 2020-06-03 2022-03-16 美商凱麥拉醫療公司 Irak降解劑之結晶型
WO2022120355A1 (en) 2020-12-02 2022-06-09 Ikena Oncology, Inc. Tead degraders and uses thereof
EP4259144A4 (en) 2020-12-09 2025-08-20 Kymera Therapeutics Inc SMARCA DEGRADING AGENTS AND THEIR USES
WO2022147465A1 (en) 2020-12-30 2022-07-07 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
EP4291178A1 (en) * 2021-02-10 2023-12-20 Breye Therapeutics ApS Danegaptide for use in the treatment or prevention of a kidney disease
TW202245788A (zh) 2021-02-15 2022-12-01 美商凱麥拉醫療公司 Irak4降解劑及其用途
AU2022271290A1 (en) 2021-05-07 2023-11-23 Kymera Therapeutics, Inc. Cdk2 degraders and uses thereof
EP4423086A1 (en) 2021-10-25 2024-09-04 Kymera Therapeutics, Inc. Tyk2 degraders and uses thereof
EP4422635A4 (en) 2021-10-29 2025-11-26 Kymera Therapeutics Inc IRAQ4 DEGRADATION AGENTS AND THEIR SYNTHESIS
EP4452260B1 (en) 2021-12-22 2026-01-28 Breye Therapeutics ApS Gap junction modulators and their use for the treatment of age-related macular degeneration
IL314437A (en) 2022-01-31 2024-09-01 Kymera Therapeutics Inc IRAK joints and their uses
WO2026009141A1 (en) * 2024-07-01 2026-01-08 Seqirus Inc. Ionizable cationic compound

Family Cites Families (76)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE1125587B (de) * 1957-03-06 1962-03-15 Schering Ag Roentgenkontrastmittel
US4462943A (en) * 1980-11-24 1984-07-31 E. R. Squibb & Sons, Inc. Carboxyalkyl amino acid derivatives of various substituted prolines
ZA817601B (en) * 1980-11-24 1982-10-27 Squibb & Sons Inc Carboxyalkyl amino acid derivatives of various substituted prolines
DE3273628D1 (en) 1981-08-03 1986-11-13 Squibb & Sons Inc Phosphonamidate compounds
DE3360065D1 (en) 1982-03-08 1985-03-28 Schering Corp Carboxyalkyl dipeptides, processes for their production and pharmaceutical compositions containing them
US4514391A (en) 1983-07-21 1985-04-30 E. R. Squibb & Sons, Inc. Hydroxy substituted peptide compounds
US5684016A (en) * 1984-04-12 1997-11-04 Hoechst Aktiengesellschaft Method of treating cardiac insufficiency
US4560506A (en) 1984-05-25 1985-12-24 E. R. Squibb & Sons, Inc. Mercaptocycloalkylcarbonyl and mercaptoarylcarbonyl dipeptides
US4746676A (en) * 1984-09-12 1988-05-24 Rorer Pharmaceutical Corporation Carboxyalkyl dipeptide compounds
EP0175266B1 (en) * 1984-09-12 1996-03-20 Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. Antihypertensive derivatives
JPS61148198A (ja) * 1984-12-22 1986-07-05 Ajinomoto Co Inc 新規トリペプチド化合物および甘味剤
JPS6259296A (ja) 1985-09-10 1987-03-14 Green Cross Corp:The ペプタイド誘導体
EP0254032A3 (en) 1986-06-20 1990-09-05 Schering Corporation Neutral metalloendopeptidase inhibitors in the treatment of hypertension
EP0566157A1 (en) 1986-06-20 1993-10-20 Schering Corporation Neutral metalloendopeptidase inhibitors in the treatment of hypertension
US4849525A (en) 1987-09-21 1989-07-18 E. R. Squibb & Sons, Inc. Phosphinylcycloalkylcarbonyl and phosphinylcycloalkenylcarbonyl dipeptides
US5120859A (en) * 1989-09-22 1992-06-09 Genentech, Inc. Chimeric amino acid analogues
FR2700166B1 (fr) * 1993-01-07 1995-02-17 Rhone Poulenc Rorer Sa Dérivés de pyrrolidine, leur préparation et les médicaments les contenant.
CN1174504A (zh) 1993-11-09 1998-02-25 麦克公司 促进生长激素释放的哌啶、吡咯烷和六氢－1h－吖庚因
DE4408531A1 (de) 1994-03-14 1995-09-28 Hoechst Ag PNA-Synthese unter Verwendung einer gegen schwache Säuren labilen Amino-Schutzgruppe
GB9409150D0 (en) 1994-05-09 1994-06-29 Black James Foundation Cck and gastrin receptor ligands
JPH0892207A (ja) * 1994-07-26 1996-04-09 Sankyo Co Ltd ピロリジン誘導体
US5491164A (en) 1994-09-29 1996-02-13 Merck & Co., Inc. Inhibitors of farnesyl-protein transferase
WO1997036873A1 (en) 1996-04-03 1997-10-09 Merck & Co., Inc. Piperidines, pyrrolidines and hexahydro-1h-azepines promote release of growth hormone
CZ63199A3 (cs) 1996-08-28 1999-08-11 The Procter & Gamble Company Sloučeniny typu substituovaných cyklických aminů jako inhibitory metaloproteáz, způsob jejich přípravy a použití jako léčiv
CZ295838B6 (cs) 1996-09-09 2005-11-16 Zealand Pharma A/S Způsob výroby peptidů
WO1998010653A1 (en) 1996-09-13 1998-03-19 Merck & Co., Inc. Piperidines, pyrrolidines and hexahydro-1h-azepines promote release of growth hormone
CZ298749B6 (cs) * 1996-10-18 2008-01-16 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitory serinových proteáz a farmaceutické prostředky s jejich obsahem
JP4024309B2 (ja) * 1996-10-22 2007-12-19 第一三共株式会社 新規な感染症治療薬
AU5599898A (en) 1996-12-12 1998-07-03 Merck & Co., Inc. Piperidines, pyrrolidines and hexahydro-1h-azepines promote release of growth hormone
US6864250B1 (en) 1997-08-22 2005-03-08 Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. N-acylated lipophilic amino acid derivatives
US6399629B1 (en) * 1998-06-01 2002-06-04 Microcide Pharmaceuticals, Inc. Efflux pump inhibitors
RU2243214C2 (ru) * 1998-06-04 2004-12-27 Астразенека Аб Новые производные и аналоги 3-арилпропионовой кислоты
US6426331B1 (en) * 1998-07-08 2002-07-30 Tularik Inc. Inhibitors of STAT function
US6242422B1 (en) 1998-10-22 2001-06-05 Idun Pharmacueticals, Inc. (Substituted)Acyl dipeptidyl inhibitors of the ice/ced-3 family of cysteine proteases
CA2382755A1 (en) 1999-07-28 2001-02-01 Aventis Pharmaceuticals Products Inc. Substituted oxoazaheterocyclyl compounds
WO2001026644A2 (en) 1999-10-14 2001-04-19 Curis, Inc. Mediators of hedgehog signaling pathways, compositions and uses related thereto
US6552016B1 (en) 1999-10-14 2003-04-22 Curis, Inc. Mediators of hedgehog signaling pathways, compositions and uses related thereto
AU1916401A (en) 1999-11-12 2001-06-06 Guilford Pharmaceuticals Inc. Dipeptidyl peptidase iv inhibitors and methods of making and using dipeptidyl peptidase iv inhibitors
WO2002077017A2 (en) 2001-02-22 2002-10-03 Zealand Pharma A/S Medical uses of intercellular communication facilitating compounds
JP4327398B2 (ja) 2000-02-23 2009-09-09 ジーランド・ファーマ・ア／エス 新規な抗不整脈性ペプチド
WO2001074796A1 (en) 2000-03-31 2001-10-11 Bristol-Myers Squibb Pharma Company SUCCINOYLAMINO HETEROCYCLES AS INHIBITORS OF Aβ PROTEIN PRODUCTION
AU2001253633A1 (en) 2000-04-17 2001-10-30 Idun Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of the ice/ced-3 family of cysteine proteases
WO2001083517A1 (en) 2000-05-03 2001-11-08 Tularik Inc. Stat4 and stat6 binding dipeptide derivatives
AU7549501A (en) 2000-06-16 2002-01-02 Biogen Inc Angiogenesis-modulating compositions and uses
CA2418199A1 (en) 2000-07-21 2002-01-31 Corvas International, Inc. Peptides as ns3-serine protease inhibitors of hepatitis c virus
US7244721B2 (en) 2000-07-21 2007-07-17 Schering Corporation Peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus
AR029851A1 (es) * 2000-07-21 2003-07-16 Dendreon Corp Nuevos peptidos como inhibidores de ns3-serina proteasa del virus de hepatitis c
MXPA03000627A (es) 2000-07-21 2004-07-30 Schering Corp Nuevos peptidos como inhibidores de proteasa serina-ns3 del virus de la hepatitis c.
AU2001282871A1 (en) * 2000-08-17 2002-02-25 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
AU9684401A (en) 2000-10-13 2002-04-22 Curis Inc Hedgehog antagonists, methods and uses related thereto
US6376514B1 (en) 2000-10-17 2002-04-23 The Procter & Gamble Co. Substituted six-membered heterocyclic compounds useful for treating multidrug resistance and compositions and methods thereof
FR2816838B1 (fr) * 2000-11-17 2004-12-03 Oreal Utilisation de derives de l'acide 2-oxothiazolidine- 4-carboxylique comme agents prodesquamants
DE60229059D1 (de) 2001-05-08 2008-11-06 Univ Yale Proteomimetische verbindungen und verfahren
CA2462200A1 (en) 2001-08-10 2003-02-20 Palatin Technologies, Inc. Peptidomimetics of biologically active metallopeptides
AU2003207625B2 (en) 2002-01-23 2006-09-07 Schering Corporation Proline compounds as NS3-serine protease inhibitors for use in treatment of hepatites C virus infection
EP1480999A2 (en) 2002-02-08 2004-12-01 Idun Pharmaceuticals (substituted)acyl dipeptidyl inhibitors of the ice/ced-3 family of cysteine proteases
CN100384819C (zh) * 2002-07-02 2008-04-30 诺瓦提斯公司 与细胞凋亡蛋白抑制剂结合的smac蛋白的肽抑制剂
AU2003265853A1 (en) 2002-08-29 2004-03-19 Curis, Inc. Hedgehog antagonists, methods and uses related thereto
WO2004032834A2 (en) * 2002-10-04 2004-04-22 Merck & Co., Inc. Thrombin inhibitors
EP1567487A4 (en) 2002-11-15 2005-11-16 Bristol Myers Squibb Co OPEN-CHAINED, PROLYL-FROSTED MODULATORS OF ANDROGEN RECEPTOR FUNCTION
US20060194947A1 (en) * 2002-11-25 2006-08-31 Larsen Bjarne D Peptide gap junction modulators
MXPA05010444A (es) 2003-04-03 2005-11-04 Merck Patent Gmbh Compuestos de carbonilo.
US20040229848A1 (en) 2003-05-05 2004-11-18 Hans-Ulrich Demuth Glutaminyl based DP IV-inhibitors
TW201245229A (en) 2003-10-14 2012-11-16 Hoffmann La Roche Macrocyclic carboxylic acids and acylsulfonamides as inhibitors of HCV replication
CN1528745A (zh) 2003-10-21 2004-09-15 山东大学 吡咯烷类基质金属蛋白酶抑制剂及其制备方法
US7507760B2 (en) 2004-01-22 2009-03-24 Neuromed Pharmaceuticals Ltd. N-type calcium channel blockers
CN1946690A (zh) 2004-02-27 2007-04-11 先灵公司 用作丙型肝炎病毒ns3丝氨酸蛋白酶抑制剂的含环丁烯二酮基团化合物
HUE029852T2 (en) * 2004-03-15 2017-04-28 Janssen Pharmaceutica Nv Opioid receptor modulators
AU2005228894B9 (en) 2004-03-30 2011-10-13 Intermune, Inc. Macrocyclic compounds as inhibitors of viral replication
AU2005247906B2 (en) * 2004-05-18 2011-08-25 Merck Sharp & Dohme Corp. Substituted 2-quinolyl-oxazoles useful as PDE4 inhibitors
EP1604977A1 (en) * 2004-06-02 2005-12-14 Faust Pharmaceuticals CIS pyrrolidinyl derivatives and their uses
DK1778702T3 (da) 2004-07-16 2011-10-17 Gilead Sciences Inc Antivirale forbindelser
US7820699B2 (en) 2005-04-27 2010-10-26 Hoffmann-La Roche Inc. Cyclic amines
EP1943257A2 (en) 2005-05-19 2008-07-16 Genentech, Inc. Fibroblast activation protein inhibitor compounds and methods
DK1966130T3 (da) * 2005-12-23 2014-02-10 Zealand Pharma As Modificerede lysin-mimetiske forbindelser
WO2008079266A2 (en) 2006-12-21 2008-07-03 Wyeth Synthesis of pyrrolidine compounds

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