PT736030E

PT736030E - Antifungicos de tetra-hidrofurano

Info

Publication number: PT736030E
Application number: PT95906620T
Authority: PT
Inventors: Ashit Kumar Ganguly; Russell Edwin Pike; Anil K Saksena; Haiyan Wang; Raymond G Lovey; Yi-Tsung Liu; Viyyoor M Girijavallabhan; Frank Bennett
Original assignee: Schering Corp
Priority date: 1993-12-21
Filing date: 1994-12-20
Publication date: 2002-01-30
Also published as: PL181193B1; HUT75879A; CA2179396A1; DE122006000004I1; JP2834889B2; NO2006002I1; FR06C0009I1; CZ294823B6; IL112081A0; FI962577L; LU91216I2; HU9601709D0; HU225062B1; AU1512795A; WO1995017407A1; PL315169A1; NZ278713A; NO962616L; AU681753B2; NL300219I1

Description

DESCRIÇÃO "ANTIFUNGICOS DE TETRA-HIDROFURANO"

Esta invenção diz respeito a antifungicos de tetra-hidrofurano, anti-fúngicos substituídos com (2R-cis)-4-[4-[4-[4-[[(5-(2,4-di-halofenil)-tetra-hidro-5-(lH-l,2,4-triazol-l-ilrnetil)-tetra-hidrofurano-3-il]metoxi]fenil]-2,4-di-hidro-2-[alquilo ( C3-Cg) substituído com mono- ou di-hidroxi-]-3H-l,2,4-triazol-3-ona, ésteres e sais dos mesmos farmaceuticamente aceitáveis, composições farmacêuticas contendo-os, úteis para tratar e/ou prevenir infecções antifúngicas em hospedeiros, incluindo animais de sangue quente, especialmente humanos, com tais antifúngicos de tetra-hidrofurano. A Publicação Internacional Número WO 89/04829, publicada a 1 de Junho de 1990 e a USP 5.039.676 (A.K. Saksena et al.) divulga compostos antifungicos (±) çis e (±) txans representados pela fórmula

em que X = F, Cl; Z = alquilo inferior, alcanoílo (C2-C8) ou fenilo substituído por 2-alquilo inferior-3-oxo-l,2,4-triazol-4-ilo, e.g., (+) çis e (±) trans-1 -[4-[[2-(2,4-difluorofenil)-2-[( 1H-1,2,4-triazol-1 -il)metil] tetra-hidro-4-furaníl]metoxi]fenil]-4-(l-metietil)piperazina. No entanto, a WO 89/04829 não divulga os compostos desta invenção. A Publicação de Patente Europeia com o N° 05399381, do mesmo titular do presente pedido, publicada a 5 de Maio de 1993 divulga, por exemplo, antifungicos [(5R)-çis-4-[4-[4-[4-[[5-(2,4-di-halofenil)-5-(lH-l ,2,4-triazol-l -il-metil)tetra-Mdrofurano-3-7il]metoxi]fenil]-l-piperazinil]fenil)-2,4-di-hidro-2-al-quil(C]-Cio)]-3H-l,2,4-triazol-3-ona mas não divulga os compostos desta invenção. A Patente dos E.U. de Janssen 4.791.111 divulga, por exemplo, a (+)çis-4-[4-[4-[4-[[2-2,4-diclorofenil)-2-( 1 Η-1,2,4-triazol-1 -ilmetil)-1,3-dioxo-lano-4-il]metoxi]fenil]-l-piperazinil]-2,4-di-Mdro-2-(2-hidroxi-l-metilpropil)-3H-l,2,4-triazol-3-ona útil como agente antimicrobiano e com maior solubilidade, mas não divulga os compostos desta invenção.

Existe uma necessidade para agentes antifungicos de largo espectro com maior solubilidade e com um perfil de actividade favorável para o tratamento de infecções fúngicas sistémicas, especialmente infecções por Aspergillus. Candida. Cvrotococcus e oportunistas.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO A presente invenção fornece compostos representados pela fórmula!

em que X é independentemente ambos F ou ambos Cl ou um X é independentemente F e o outro é independentemente Cl; -3- -3-

Ά,» ι /<V (/>-. ί· <· '

Ri é um grupo alquilo (C3 a Cs) de cadeia linear ou ramificada substituído com uma ou duas porções hidroxi ou estereoisómeros do mesmo ou um éster farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

Num aspecto preferido da presente invenção, são fornecidos compostos representados pela fórmula II

em que X é independentemente ambos F ou ambos Cl ou um X é independentemente F e o outro é independentemente Cl; em que R2 é H ou alquilo (CrC3) e R3 é alquilo (CrC3) substituído com uma porção hidróxido e o carbono com o asterisco (*) tem a configuração absoluta R ou S; um éster do mesmo ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

Noutro aspecto preferido, a presente invenção fornece um composto representado pela fórmula III

em que R5 é

um éster do mesmo ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

Noutro aspecto da presente invenção é fornecido um composto representado pela fórmula IV

rv em que R9 = - C H(C2H5)CH(OR6)CH3 ou - C H(CH3)CH(OR6)CH3 em que é H, um poliéter éster ; um fosfato éster; um sulfato éster; um éster heterocíclico; um alcanoato éster; um alcenoato éster; um aminoácido éster; um ácido éster ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

DESCRICÃO DETALHADA DA INVENÇÃO E DAS CONCRETIZAÇÕES PREFERIDAS O termo "grupo alquilo (C3-C8) substituído com uma ou duas porções hidroxi", tal como é aqui usado significa grupos alquilo de cadeia linear ou ramificada de três a oito carbonos incluindo mas não limitado a metilo, etilo, n- e iso-propilo. n-, sec-. iso- e tert-butilo. n-, sec-, iso-, tert e neo-pentilo. n-, sec-, iso-. tert e neo-hexilo. n-, sec-, iso-. tert e neo-heptilo. n-, sec-. iso-. tert e neo-octilo. substituído com uma ou duas porções hidroxi e inclui estereoisómeros R e S de tais grupos alquilo (C3-Cs). O termo "aquilo (Ci-C3) substituído com uma porção hidroxi" significa -CH2OH, CH(OH)CH3, -CH2CH2OH, CH(OH)C2H5s * C H2CH(OH)CH3, e -(CH2)3-OH em que os carbonos com o asterisco (*) têm a configuração absoluta R ou S. O termo "grupo alquilo C4 ou C5 substituído com hidroxi" significa CH(C2H5)CH(OH)CH3, -CH(C2Hs)CH2CH2OH, -(CH2)2-CH(OH)C2H5, - C H(CH3) C H(OH)CH3j - C H(CH3) C H(OH)CH3 ou - C H(C2H5)CH2OH em que $ cada carbono com o asterisco ( ) tem a configuração absoluta R ou S. O termo "ésteres" significa (a) ésteres poliéter (b) ésteres fosfato (c) ésteres heterocíclicos (d) ésteres alcanoato e alcenoato (e) amino-alcanoatos e (f) ésteres ácidos e (g) ésteres sulfato. O termo "ésteres poliéter" tal como é aqui usado significa aqueles

O __ll_

ésteres poliéter representados pela fórmula C —(chr7chr7),—RfJ em que R7 é tal como aqui definido e s é um número inteiro desde 1 a 6, de preferência s = 1 a 3 e mais preferível s = 1; t é um número inteiro desde 1 a 6; de preferência t é de 1 a 3, mais preferível t é 2 ou 3.

Rs é R7 ou -(CHR7)s-C02R7; de preferência R8 é CH3 ou C2H5 ou -CH2CO2H ou -CH2C02CH3. Ésteres poliéter tipicamente apropriados incluem -C0CH20(CH2CH20)1CH3; -C0CH20(CH2CH2O)2CH3, e -C0CH20- (CH2CH20)3CH3. O termo "ésteres fosfato” tal como é aqui usado significa aqueles ésteres ácidos de fosfato representados pela fórmula O II cj 9 2—(CHFtyrt-ff))—p— (OW)2 em que z é 0 ou 1; R7 é tal como aqui em cima definido e de preferência é Η; n é um número inteiro desde 0 a 6, m é 0 ou 1

e W é H, CH2Ar ou oh e em que Ar é como aqui em cima definido. Ácidos de fosfato e ésteres tipicamente apropriados incluem

O o Ϊ “ OH -C-{CH2)n-0-P<0H)2 em O i 1 t

•P~(OCH2CeH5)2 — P-(OH)2 W que m = η = 1 a 4; ou c—CHiCH3)-o-P(OH)2 e sais dos mesmos farmaceuticamente aceitáveis. -7-

α Á- Ο termo "éster heterocíclico" tal como é aqui usado significa és-

P -C-(CHR7)w—n (CHR7)ç

teres heterocíclicos representados pela fórmula OJ em que R7 é tal como aqui em cima definido, W é um número inteiro desde 1 a 5 de preferência Wél a3;qé = 3ou4eYé CHR7, -O-, NH, NR7, S, SO ou S02. Ésteres heterocíclicos tipicamente apropriados incluem O O o o -C-CHj-l/ \mH -C-CHr-N^ p -I-CHt-n' so

O , — C-CH2—N O —C-CH2—N S02

I S-\ _ Q Q -C-N N-CH3 \_t -S-CHrVn O termo "ésteres alcanoato e alcenoato" tal como é aqui usado significa grupos alcanoato ou alcenoato de cadeia linear ou ramificada facultativamente substituídos com uma porção hidroxi ou de éter ou misturas de tais alcanoatos ou alcenoatos. Ésteres alcanoato preferidos incluem acetato a decanoato, especialmente acetato a butanoato. Os alcanoatos éster substituídos com hidroxi

preferidos incluem alcanoatos Q a C8 substituídos com uma porção hidroxi, O O . , A —cch2oh especialmente são os alcenoatos C10-C20 hexadecenoato. e ° CH*OH)CH3 Os alcenoato ésteres preferidos e incluem alcenoatos C14 a Ci8, tal como o cis-7- -8- i>_ Κι"1'

O termo "amino alcanoato” tai como é aqui usado inclui os resíduos de atninoácidos naturais e não naturais de preferência com grupos amina protegidos pelos grupos protectores convencionais, bem conhecidos dos entendidos na técnica, tal como o acetato de fenilo. O termo "ácido éster" tal como é aqui usado significa aqueles ácido5 I)r-c- —*C-(CR7R7)r

-OH ésteres representados pela fórmula ..... em que R7 é tal como aqui em cima definido e k é um número inteiro desde 1 a 8. Os ácido ésteres tipicamente apropriados incluem os ácidos oxálico, malónico, succínico glutárico o oII II e adípico bem como os diácidos de cadeia ramificada tal como —cchch3-coh _

Os compostos da presente invenção bem como os ésteres dos mesmos apresentam actividade antifúngica de largo espectro em vários ensaios in vitro contra Candida. outras leveduras, dermatófitos, Aspergillus e fungos oportunistas. Os testes de actividade antifúngica in vitro foram realizados através de métodos de diluição de agar convencionais em meio caldo Sabouraud dextrose ("SDB") contra um largo número de fungos. As Concentrações Inibitórias Mínimas ("CIMs") foram medidas em testes realizados após 24,48 e 72 horas. O termo "fungos oportunistas" inclui Crytococcus. Histoplasma. Blastomvces. Coccidioides. Fusarium. Mucor. Paracoccidioides. Fonsecaea. Wangiella, Sporothrix. Pneumocvstis. Trichosporon tal como mostrado pela actividade m vivo numa espécie animal apropriada é.g. ratinho, ratazana ou coelho. Os compostos da invenção são esperados exibir actividade contra vários géneros e espécies de bactérias, protozoários, gram negativas, gram positivas, Anaeróbios, Legionella Borrelia, Mycoplasma. Treponema. Gardneralla. Trichomononas e Trvpanosoma.

Os compostos preferidos de fórmula III em que R5 = grupos alquilo C4 e C5 substituídos com hidroxi, apresentaram a seguinte actividade antifungica in vitro em SDB contra 37 espécies de Aspergillus niger. flavus. fumigatus e terreus: média geométrica de CIMs na gama de < 0,05 até > 1,53 (mcg/mL) e média geométrica de CFMs na gama de 0,27 até > 4,24 mcg/mL.

Os compostos preferidos de fórmula III em que R5 = grupo alquilo C5 substituído com hidroxi, apresentaram (1) actividade antifungica excepcional medida pela média geométrica de CIMs e CFMs em vários ensaios in vitro contra Ç. albicans (N = 26), Ç. krusei (N = 26), C. glabrata (N = 9), C. tropicalis (N = 4), C. stellatoidea (N = 1), Ç. neoformans (N = 3), e contra os dermatófítos, T. rubrum. T. menta, e T. tonsurans (N = 6 (após 48 ou 78 horas) comparada com a do fluconazole bem como (2) actividade antifungica excepcional nos seguintes modelos in vivo: uma Aspergillus flavus e fiimigatus (quatro estirpes) num modelo de rato imunocomprometido pulmonar (PO-1XDX4D) comparada com a de outros azoles e.g. itraconazole, e num modelo orgânico de Candida albicans (quatro espécies) com rato normal e comprometido (PO-1XDX4D) comparada com a de outros azoles, e.g. fluconazole. A actividade antifungica oral in vivo dos compostos da presente invenção foi comparada com antifungicos de azole, e.g., fluconazole num modelo de infecção pulmonar por Aspergillus em ratinhos. Foi usado o procedimento de David Loebenberg et al. entitulado ”Sch 42427, The Active Enantiomer of Antifimgal agent Sch 39304; In vitro Activity", Antimicrobial Agents and Chemotherapy. (1992), 36 498-501. O modelo pulmonar Aspergillus flavus está também descrito no Pedido de Patente Europeia N° 0 539 938 Al publicado em 5 de Maio de 1993. -10- -10- (Ο C.- |·ί . 1Λ "

Os compostos preferidos de fórmula III apresentaram actividade in vitro antifungica excepcional em SDB contra 37 espécies de Asnergillus com (a) CIMs em meio geométrico de < 0,05 até < 0,81 comparada com a do fluconazole (CIMs em meio geométrico > 32) e (b) com MFCs em meio geométrico de < 0,89 até < 3,78 comparada com a do fluconazole (MFC em meio geométrico > 32).

As Tabelas Q, R, e S em baixo mostram a actividade antifungica in vitro excepcional de três compostos preferidos de fórmula III comparada com a do fluconazole. A Tabela Q mostra tal actividade antifungica como a percentagem de estirpes de vários fungos com CIMs < 1 mcg/mL para os três compostos preferidos de fórmula III comparada com a do fluconazole. A Tabela R mostra a actividade antifungica como a percentagem das mesmas estirpes com MFCs < 1 mcg/mL. A Tabela S mostra os 90 valores de CIM in vitro para os três compostos preferidos de fórmula III contra os mesmos organismos apresentados nas Tabelas Q e R.

Os compostos mais preferidos de fórmula III em que R5 =

Me OH apresentaram consistentemente maiores níveis de soro em ratos, ratazanas, cães e macacos seguindo o doseamento oral com uma formulação de metil celulose comparado com os de azoles de estrutura similar e também exibiram, através de doseamento por D.O., tempo de meia vida no soro bastante elevado com boa distribuição nos tecidos. Os compostos de fórmula III acima referidos mais preferidos não são indutores de várias enzimas metabolizantes de drogas do fígado citocromo P-450 após administração oral num modelo de rato m vivo. -11-

TABELA Q ACTIVIDADE ANTIFÚNGICA IN VITRO PARA COMPOSTOS SELECCIONADOS DE FÓRMULA III1

PERCENTAGEM DE ESTIRPES COM CIMs < 1 MCG/ML (MCG/ML) R5 if m ;?0H M» S Jf Jf* Jf >—OH m/h FLZ' ORGANISMO ESTIRPES Aspergillus 37 100 100 100 0 Candida Albicans 26 100 100 100 100 Candida Kursei 16 100 100 100 100 Candida Tropicalis & Stellatoidea 5 100 100 100 100 Candida Glabrata 9 22 22 33 0 Cryptococcus Neoformans 3 100 100 100 0 Dermatophytes 1. 6 100 100 100 100 p-OOO Vr* v· [ΠΙ] 2.FLZ = fluconazole -12- fvf U. t'.H L.

TABELA R ACTIVIDADE ANTIFÚNGICA IN VITRO PARA COMPOSTOS SELECCIONADOS DE FÓRMULA III1

PERCENTAGEM DE ESTIRPES COM CIMs < 1 MCG/ML _(MCG/ML)_ R5 1 pT* !«·*·< /«•OH Ue/S jT Jr* jf* /—OH m/R FLZ: ORGANISMO ESTIRPES Aspergillus 37 50 62 89 0 Candida Albicans 26 100 100 100 100 Candida Kursei 1-16 88 94 100 0 Candida 5 100 100 100 100 Tropicalis & Stellatoidea Candida Glabrata 9 22 22 22 0 Cryptococcus Neoformans 3 100 100 100 0 Dermatophytes 6 67 83 100 0 1. F H -oc-oO 'νΝ—N [uri 2.FLZ = fluconazoie

TABELA S ACTIVIDADE ANTIFÚNGICA IN VITRO PARA COMPOSTOS SELECCIONADOS DE FÓRMULA III1

PERCENTAGEM DE ESTIRPES COM CIMs < 1 MCG/ML (MCG/ML) R5 *rm Λ-* u/s jf" -C >—OH FLZ2 ORGANISMO ESTIRPES Aspergillus 37 0,122 0,096 0,112 29,9 Candida Albicans 26 0,274 0,174 0,139 0,887 Candida Kursei 16 0,058 0,014 0,12 29,9 Candida 5 0,117 0,117 0,354 0,917 Tropicalis & Stellatoidea Candida Glabrata 9 28,8 17,1 28,8 29,3 Ciyptococcus Neoformans 3 0,05 0,007 0,101 25,9 Dermatophytes 6 0,165 0,101 0,707 29,4

2.FLZ = fluconazole -14- h·’- κ —"*—*-·5- (^

Os ésteres preferidos dos compostos da presente invenção de fórmula IV também apresentaram actividade antifungica in vivo excepcional contra uma vasta gama de fungos. Após e.g. administração de IV em ratos, ratazanas, cães e macacos oral e parental. Os ésteres preferidos de fórmula IV em baixo em que R9 é : -14- h·’- κ —"*—*-·5- (^

y-Me >r°H Ϊ/Γ 759.3 “W>

Me ^•'OCHzCeHs och2c5h5 ΛΓ861.4 ¢-.1 15 ,ο r9 R9

HT891 «•"s^OMe χ\^ΟΜβ x-s^OMe

^TTpi O \_^N.Me r-M. “*841^°ro„ AT 826 ^Me0 k^oΜ* 828 OPOgHa. 2NMG &

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Me I HteT>°T?€ Μ+853Λ Y^q^n^OM® M+817

.NMG MT 801

Me/S '^OH -2NMG OHNT 781.7 Mé

^OPOsHs. 2NMG

ΝΓ881.3 r-Me /r°Y^s^^0P°3H2· 2NMG WT881.3

/-Me 11*961.2 #—Me-V^jO Μθ' *Tf OH -2B3n

j—Me —/H >Y“ 11+742.4

M*773.1 M* 873.3 -c T^-OH ***** OH 111+781.8 Ίτ°· y^°-<*OH -2NMQ o OH M+839

M+701.4

M+983 1]

M+ 821.5 NH.C0.CH2CeHs -17-

Os ésteres mais preferidos acima são prontamente metabolizados in vivo nos correspondentes álcoois e.g. R5 é

Os ésteres metabolizáveis mais preferidos incluem aqueles dos compostos de fórmula IV em que Rg é

M» •2NMG

0 em que Y, R7 e q são tal como acima definidos e

Me' OCOCH2PC)3H2

•2NMG

Os compostos antifungicos desta invenção representados pela fórmula I têm a configuração estereoquímica absoluta R no carbono no anel de tetra-hidrofurano que transporta as porções di-halofenilo e 1 H. 1,2,4-triazol-l-ilmetilo, e a porção CH2OY tem a configuração estereoquímica "cis" relativa à porção 1 H,l,2,4-triazol-l-ilmetilo. Ver a fórmula I em baixo.

e Υ = -Ο'Ο'Ο'Ο· em que Ri é um grupo alquilo (C3-C8) de cadeia linear ou ramificada substituído com um ou dois grupos hidroxi, que existe preferencialmente como um único estereoisómero, mas são também contempladas dentro do alcance desta invenção misturas de estereoisómeros.

Os compostos de fórmula I são genericamente mas não especificamente divulgados como as séries "cis", tipo ii, na col. 9 linhas 59-68 de Saksena et al. USP 5.039.676 e Exemplo 68 na Col. 5, linha 16 até col. 52, linha 44.

PREPARAÇÕES SINTÉTICAS GERAIS

Os compostos desta invenção podem ser preparados por uso das sequências de passos ilustradas nos seguintes Esquemas I-IV. No Esquema I, o composto 3 é rapidamente preparado a partir do composto 1 comercialmente disponível de acordo com os Exemplos la, lb e lç. O composto 4 é preparado por reacção do L(+)-tartarato de dietilo ("L-DET") e crivos moleculares na presença de tetra-isopropóxido de titânio (i-PrO)4Ti num solvente aprótico, tal como o cloreto de metileno, a uma temperatura de 0“ a -35°C. Ver por Exemplo, T. Katsuki, K.B. Shaipless, J. Am. Chem. Soc.. 102. 5974 (1980); e 103, 464 (1981). É adicionado um agente oxidante, e.g. tert-butil-hidroperóxido ("TBHP") a esta mistura reaccional (passo d do Esquema I). O composto 3 é adicionado e é produzido o composto de fórmula 4 (quando é usado L(+)-tartarato) de dietilo. A reacção do composto 4 com lH-l,2,4-triazole na presença de uma base forte, e.g., NaH num solvente aprótico, tal como o DMF, a 80°C proporciona o diol de fórmula 5. O grupo hidroxi primário no composto 5 é convertido num grupo de saída, por exemplo, mesilato ou tosilato (composto 6) por reacção de 5 com, por exemplo, cloreto de mesilo ("MsCl"), num solvente aprótico, e.g., cloreto de metileno na presença de base, e.g., trietilamina ("Et3N")· O composto 6 é tratado com base forte, e.g., hidreto de sódio (NaH) num solvente aprótico, e.g., DMF à temperatura ambiente para dar o oxirano 7. A reacção de 7 com malonato de dietilo na presença de base forte, e.g., hidreto de sódio num solvente aprótico, e.g., DMSO a 25°-75°C proporciona a lactona 8. A redução de 8 com um hidreto de metal, e.g., borohidreto de lítio (L1BH4) num álcool, e.g., etanol (EtOH), proporciona o triol 9. A conversão dos dois álcoois primários de 9 em grupos de saída (mesilatos ou tosilatos) por reacção de 9 com excesso de cloreto de tosilo num solvente aprótico, e.g., THF, na presença de base, e.g., Et3N, proporciona o ditosilato 10. O composto 10 é posto em contacto com base forte, e.g., NaH, num solvente aprótico tal como o tolueno a temperaturas elevadas de 100°-120°C para proporcionar uma mistura de dois tosilatos (çis e trans) que são separados por cromatografia para produzir 0 çis-tosilato 11. A reacção do composto 11 com álcoois HOY na presença de base forte, tal como o NaH num solvente aprótico, tal como o DMSO a uma temperatura de 25°-75°C proporciona compostos de fórmula I. O esquema II proporciona uma sequência de reacção alternativa para obter compostos da presente invenção. A reacção do composto 11 com o composto 12 comercialmente disponível na presença de NaH dá o composto 13. A hidrólise do grupo N-acetilo de 13 é realizada com uma base forte tal como o NaOH na presença de n-BuOH para proporcionar o composto 14. Deve tomar-se -20-

At k-~rh claro que em vez do grupo N-acetilo no composto 12, também se pode usar outro grupo básico instável qualquer tal como N-formilo, N-benzoílo, etc., para proporcionar os correspondentes derivados de N-formilo e N-benzoílo do composto 13. A reacção de 13 com p-cloronitrobenzeno na presença de eliminador de ácido clorídrico tal como o K2CO3 proporciona o nitro composto 15. A redução catalítica de 15 na presença de um catalisador de platina ou paládio produz a amina 16. O tratamento de 16 com cloroformato de fenilo na presença de piridina dá o uretano 17. A reacção de 17 com hidrazina produz a semicarbazida 18 que é ciclizãda na presença de acetato de formamidina para fornecer a triazolona chave 19. A alquilação de 19 de acordo com os Exemplos 19 e 20 proporciona os compostos de estrutura 20 incluindo compostos de fórmula I em que Rj é definido como acima. O esquema III proporciona um acesso estereoespecífico ao çis-álcool 26 e ao o çis-tosilato 11 por aplicação de química enzimática. Por Exemplo, a reacção do triol 9 com acetato de etilo na presença de lipases pancreáticas suínas dá um único monoacetato 21. O grupo hidroxi primário restante de 21 é protegido por um grupo ácido instável tal como o grupo tetra-hidropiranilo para dar um composto tal como 0 22. A hidrólise do grupo acetoxi em 22 é realizada com uma base tal como o KOH que proporciona 23. Os restantes passos são: (i) tosilação do composto 23 para proporcionar 24; (ii) ciclização de 24 na presença de NaH para proporcionar 25; (iii) desprotecção do THP éter em 25 usando um catalisador ácido tal como o ácido sulfónico p-tolueno (para dar 26) seguido de tosilação do 26 resultante para fornecer o intermediário chave 11.

Uma descrição detalhada de uma preparação preferida de intermediário chave é divulgada no Pedido de Patente dos E.U. N° de Série 08/055.268, do mesmo tiyular do presente pedido, registada em 30 de Abril de 1993, que é aqui incorporada por referência. -21 - A^t r.

ESQUEMA I

Reagentes: (a) NaOAc; (b) Reacção de Wittig; (c) KOH; (d) L-DET, TBHP, (1-Pr)4Ti; (e) NaH, 1,2,4-triazole, DMF; (f) MsCl, Et3N, CH2CI2; (g) NaH, DMF; (h) NaH, CH2(COOEt)2, DMSO; (i) LiBH4, EtOH; (j) TsCl, Et3N, THF; (k) NaH, tolueno, calor; (1) cromatografia; (111) NaOY, DMSO X = F ou Cl -22-

ESQUEMA II NCOCHg 11 (X» dou F5 ^Ό -0-0“* i r/V^ Λ"\. ΜΗ 11 lá κ 11 I_1

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I_L 18 (Próxima Página) -23- •V. ι>ι Ή ι

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11 r~ooo-£r V*i ^^ooo-ix· ία

Reagentes: (a) NaH; (b)

NaOH/n-BuOH; (c) p-Cl-C6H4N02/K2C03/DMS0; (d) H2/Pt/C; (e) C6H5OCOCl/piridma/CH2Cl2; (f) NH2-NH2/H20/dioxano; (g) Acetato de formamidina/DMF/calor; (h) de acordo com os Exemplos 19 e 20

ESQUEMA III

Reagentes: (a) Lipase pancreática suína/EtoAc; (b) di-hidropirano/H+; (c) KOH; (d) Cloreto de tosil/piridina; (e) NaH; (f) Metanol/H+; (g) Cloreto de tosil/piridina. -25-

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ESQUEMA V

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/ N '•OOO-** ~quant:

16F H -90% ‘''«.Η, 1TFΪΛ ^ kt OPh -90% NH I NH2

SrH^ 18F <90% F -^"°’0‘04~0~N^N f(°u>

19F

NH

20F

ESQUEMA VI „« coor Vo —, OH OH OR·"' 35 36 37 RlXé preferencialmente CHj ^ e preferencialmente CH-Ph c N-NHCHO N-NHCHO ,«1 - e R“À átx CHO d R 'Y * R» Y %H 1 OCHjPh OCH^Ph OCHjPti 40(jsótnero Syn>9:l) 3® 38 ο

(a) pírrolidina, t.a., 24h; (b) R4x-X, NaH, DMF; (c) RED-AL, tolueno. -20°, (d) H2NNHCHO, MeOH; (e) R2xMgBr, Et20, -10°C até t.a., 24h; (f) 17F do esquema V e procedimento do Exemplo 32d; (g) H2j Pd, HCOOH, 80°C. -28- r C~

ESQUEMA YII Preparação de Poliéter ésteres

Re(OCHR7CHR7)tOH Re(OCHR7CHR7)rO(CHR7)s-CC52H

DCCD, DMAP1,44 CH2CI2 Q /-Me

°γ (PHRAWCHRjCHfirOWe

O

45X 1 OCCD * Ólciclohexilcarbodiamída DMAP = 4-(N,N-Dimetilomino)Piridina

Tabela para o Esquema VII

Me OH usando 20P(X = F) £2 £1 £5 M.S. X M+ _ 6POCH2CO2H COCHgOH ôP = êrupo Protector,e.g., CH2Ph 7ΕΘ.3 CH3(OCH2CH2)aOH CICH2CO2H C0CH20(CH2CH20>3Me 905

Tabela para o Esquema VII

R

Me OH SI SÃ SÃ M.S. CH3(OCH2CH2)OH CICH2C02Na -C0CH2O(CH2CH20)Me 817 CH3(0CH2CH)20H CICH2C02Na -C0CH20(CH2CH20)2Me 861 CH3(OCH2CH2)30H C!CH20O2Na -C0CH2(CH2CH20)3Me 905 HO2C(OCH2CH2)20H aCH2C02Na -COCH20(CH2CH20)2COOH 905

Fosfato ésteres Esquema VIIIA

20F

(>~ )2Ν-Ρ~(ΟΟΗ2θ6Η5)2 Tetrazote, t-BuOOH 46R, -c

Me i //P(OCH2C6H5)2 0

FWC.H2. AcOH, ETOH

47 · 2NMG i -30- ο

j { s'

P.SOTTRMA VIIIB 20F, R, =

[91 hoIcH1 |[CHR7)riLG (49) Bi=... DCCD, DMAP, CH2C12 Me LG-Hal

RrMe Ϊ 0 {CHR7)„Hal 50

9 1. AflOP(OCH2CeH5 )2 2. AcOH 10%Pd/C, Hz ETOH

Tabela para o Esquema VIIIA

X = F / 47 R1 •Me •SeOPOsHg

.2NMG M.S. (M+) 781.8

Me /"— Mg JL( .2NMGXâ-OPOsHa 781.7

MeX

-Me O 873.3 2-op(OH)-oc6H40h

Me 47 Ri

OCH2CI

Me' .2NMG ΟΟΟ(0Η2)4θΡ03Η2 -31 - fyjι ι l—. Λ-Λ k,. \fy^ ? X ' M.S. <M+) 961.4 961.2 M.S. (M+) 839 881.3

Me' j-Me .2NMG\s OC0{CH2)4OP03H2 m 881.3 • /—Me CH(.OH)CH3 JR / OPO3H2 \S B L/—oco—ς#,„μ 853.2

.2NMG AR=

AR ? rMe ·Ν^·Ν-(ΗW ,>OH Me

20F AR- -32-

Esquema V111C

HO^'

Al·· h*-r^ o"0~fOH©~ CHíOPh 54 AR' OH OCCD, DMAP, CH2CI2 /—Me (a)

hJ /* —A- I -3. /Me . hh“(B Wfí >0 CHaOPh Me Π 55

10%Pd/C, H2, EtOH, AcOH

Wm V°^ch2°-p Me I AR-N^ísK- OCHíPh OCHjPh 57 /—Meu«m^VCH!0H o 56 (b) AR-/ /—Mô W >5*0 CH20-f£oh Me H OH 58 ° Ύ .0 AR- ./

^=N /T°-ff-'CH2CH?'O H Me II OH O .2NMG Satt 58.2NMG

(a)/— N-P(OCH2Ph)2 .Tetrazole, t-BuOOH; (b)io%Pd/C, H2, EtOH, AcOH: (c)2NMG -33 -

Ksquema IX

Preparação de Esteres Heterociclicos

Tabela para o Esquema IX sa-Hi

828 841 826 O Esquema IV proporciona uma sequência de reacção adicional para obter os compostos da presente invenção. O composto 27 é preparado a partir do éter metílico do composto 12 no Esquema II sujeitando o éter metílico de 12 às reacções dos passos a a g do Esquema II. A reacção do composto 27 com HBr ou BBR3 aquoso dá o composto fenólico 28. A reacção do composto 28 com um equivalente de NaH e o subsequente tratamento com, por exemplo, cloreto de 2-(trimetil-sililetoximetilo ("SEM-Cl") e DMF a temperaturas ambientes produz o composto 29 em que o azoto fica protegido com SEM. A desprotonação do composto 29 com NaH seguida de reacção do anião assim formado com o tosilato 11 em DMF ou DMSO a temperaturas elevadas produz o composto 30. O grupo protector de azoto de 30, e.g., SEM é removido por tratamento com, por exemplo, HC1 6N em metanol a temperaturas ambientes durante 3 horas para produzir o composto 19. O composto 19 é tratado com NaH e DMSO a 20°C durante 3Λ h e em seguida alquilado com RiX para produzir o composto I. Em RjX, Ri é um grupo aquilo C3-C8 tendo pelo menos uma porção hidroxi protegida, e.g., O-SEM e X' é um grupo de saída, por exemplo, brosilato. A remoção do grupo protector de hidroxi do composto 31, e.g., O-SEM é realizada por, por exemplo, HC1 6N em metanol para dar os compostos desta invenção de fórmula I. O Esquema V proporciona uma via preferida para a preparação dos compostos desta invenção expostos no Esquema II. Reage-se o sal de sódio do composto 31 preparado por reacção de (4-[4-(4-nitrofenil)-l-piperazinil]fenol com NaH em DMSO anidro a 50°-60°C durante 30 minutos com o tosilato de 2,4-difluorofenilo 11F (composto 11 no Esquema II em que X = F) durante lha 50°-70°C para proporcionar, após cromatografía "flash" sobre sílica ou cristalização, o composto 15F (composto 15 no Esquema Π em que X = F). A redução de 15F por hidrogenação na presença de 5% Pd/C em etanol contendo HC1 IN proporcionou o composto amino 16F (composto 16 no Esquema II em -35-

c que X = F). A reacção de 16F com cloroformato de fenilo em piridina anidra a 0-5°C durante 2 h proporcionou o carbamato de fenilo 17F (composto 17 do Esquema II em que X = F). A reacção de 17F com hidrato de hidrazina em 1,2-dimetoxietano a 80°C durante 4 h proporcionou a semicarbazida 18F (composto 18 do Esquema II em que X = F). A reacção de 18F com acetato de formamidina e Et3N em 2-metoxietanoI sob árgon seco em reactor agitado a 80°C durante a noite proporcionou o 3H-1,2,4-triazol-3-ona 19F (composto 19 no Esquema II em que X = F). A reacção do composto 19(f) com RjX de acordo com o procedimento do Esquema IV produziu compostos de fórmula I. O Esquema VI proporciona uma via estereoselectiva, alternativa para a preparação dos compostos preferidos desta invenção. Junta-se o composto 35 (e.g. ácido S-láctico metiléster) com excesso de pirrolidina em cloreto de metileno durante24 horas à temperatura ambiente para dar o amido 36. A reacção de 36 e NaH com por exemplo, haleto de benzilo em DMF deu o 37. A redução selectiva do amido 37 com uma solução 3,4M de hidreto de sódio bis(2-metoxietoxi)alumínio ("RED-ΑΓ) em tolueno a —20°C deu o aldeído 38. A reacção do aldeído 38 com H2NNHCHO em metanol deu o 39 que foi feito reagir com um reagente de Grignard e.g. brometo de etilmagnésio em éter seco a uma temperatura de -10°C até à temperatura ambiente durante 24 horas para dar o 40 em que a razão do isómero S,S: isómero S,R foi de 94:6. Quando a reacção de Grigand foi realizada na presença de 1,2 equivalentes de bis(trimetilsilil)acetamida a razão SS para SR foi de 99:1. Reagiu-se o composto 40 com composto 17F do Esquema V em tolueno na presença de DBU (1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno) durante seis horas a 80°C. A ciclização foi efectuada por aumento da temperatura até 100°-110°C e continuando a manter esta temperatura durante a noite. Após purificação via TLC, obteve-se o 20F. O tratamento do 20F com hidrogénio e paládio preto em metanol contendo ácido fórmico aquecido a 60°C deu o produto bruto que foi isolado e purificado (via -36- M L- ,,Λ TLC) para dar o composto 20F, i.e. o composto de fórmula III em que i—Me R5= eX = F, Mt = 701*.

Mb' >S-oh A reacção do reagente de Grignard com a propanimina 39 produz 40 em que a estereoquímica absoluta induzida no novo centro quiral em 40 é substancialmente a mesma (i.e., S) que a do carbono quiral de 39. Pelo termo "substancialmente a mesma" tal como aqui é usado, quer dizer-se que a razão de S:S para S:R (em e.g., 40) é superior a 9:1, de preferência superior a 15:1 e mais preferencialmente é de pelo menos 99:1.

Os dados de espectro de massa aqui apresentados como M+ são iões progenitores que foram determinados pela técnica de Bombardeamento Atómico Rápido (FAB) e representam os picos ·Μ+1. O Esquema VII proporciona um método geral para a preparação dos poliéter ésteres dé álcoois da presente invenção. O alcoolato do álcool éter 42 e.g. CH3(0CH2CH2)30H i.e., 42 em que R7 = H e t = 3, foi preparado por reacção de 42 com excesso de base forte e.g. NaH em éter anidro e.g. THF a temperaturas de banho de gelo. A mistura reaccional assim formada foi agitada durante várias horas i.e., 2 ou mais e adicionou-se à mistura sal de sódio do ácido 43 e.g. sal de sódio do ácido cloroacético (43 em que LG = Cl, R7 = H e s = 1). A mistura reaccional assim formada foi agitada em banho de gelo e manteve-se agitação até a temperatura atingiu a temperatura ambiente. Foi cuidadosamente adicionada água à mistura reaccional e o ácido poliéter 44 foi separado e purificado por técnicas convencionais.

Adicionou-se, a uma solução de 44 em CH2C12, 1,3-1,5 equiva- -37- -37-

M wt·' C-

lentes da base 4-(N,N-dimetilamino)piridina ("DMAP") e 20F em que

Diminuiu-se a temperatura da mistura reaccional assim formada por uso de um banho de gelo e adicionaram-se 1,3-1,5 equivalentes de diciclo-hexilcarbodiimida ("DCCP"). A mistura reaccional assim formada foi continuamente agitada enquanto a temperatura aumentou até à temperatura ambiente. O precipitado de ureia foi removido c o produto bruto isolado por técnicas convencionais. O resíduo assim formado foi purificado por cromatografia em gel de sílica para proporcionar o composto puro [M + H]+ = 906 calculado por FAB. Prepararam-se os compostos 45 listados na Tabela para o Esquema VTI, por substituição apropriada de diferentes materiais de partida 42 e 43. Os valores de MS dos produtos que se encontram abaixo de 45 na Tabela para o Esquema VII foram medidos por Bombardeamento Atómico Rápido ("FAB").

Os Esquemas VIII A-C ilustram os métodos generalizados para preparar fosfato ésteres dos álcoois desta invenção. O Esquema VIIIA proporciona um método para a preparação de fosfato ésteres de fórmula IV em que R6 é ez = m = n = 0. Reagiu-se o composto 20F do Esquema II em cloreto de metileno à temperatura ambiente com 1,5 equivalentes de N,N-diisopropil-dibenzilfosforamida, 1,5 equivalentes de peróxido de tert-butilo (3M em iso-octano) e uma base tal como a tetrazole durante várias horas. Seguiu-se a progressão da reacção por TLC (5% metariol:EtoAc v:v) em gel de sílica. Lavou-se o produto bruto em EtOAc com tiosulfato de sódio e purificou-se usando técnicas padrão para proporcionar o dibenzilfosfato éster 46.

Removeram-se os grupos éster de dibenzilo de 46 para dar 47 por tratamento de 46 dissolvido em volumes iguais de etanol e ácido acético glacial na presença de excesso de Pd/C a 10% sob uma atmosfera de hidrogénio à temperatura ambiente num reactor agitado durante a noite. A reacção continuou até não ser encontrado material de partida por TLC (ou RMN). Removeu-se o catalisador por filtração e purificou-se o fosfato éster 47 bruto por técnicas padrão. O tratamento de 47 em metanol à temperatura ambiente com dois equivalentes de base e.g. NMG (ou Et3N) proporcionou 47 · 2NMG. Os compostos 46 e 47 preparados de acordo com o Esquema VIIIA encontram-se na Tabela para o Esquema VIIA. O Esquema ΥΠΙΒ ilustra a preparação de fosfato ésteres de fórmula IV em que Rs = Γ i O II c — (CHR^t(0)^-P(0W)2 z = m= len = 0. Tratou-se o composto 20F dissolvido em cloreto de metileno com 1,3 equivalentes de DMAD, 1,3 equivalentes de DCCD e 1,3 equivalentes do ácido 49 de fórmula e.g., H02C(CH2)4Br, i.e., z = 1, n = 4, R7 = H e o grupo de saída LG é Br. Agitou-se a reacção à temperatura ambiente até não ser encontrado material de partida por TLC, a purificação do produto bruto deu o brometo 50, um sólido -Me 02C(CH2)4Br branco em que Rj = ^ . Aqueceu-se o brometo 50 num benzeno a 80°C durante a noite com 1,5 equivalentes de dibenzilfosfato de prata (da Sigma Chemical Co., St. Louis). A mistura reaccional foi arrefecida e lavada com base aquosa, e.g., K2C03. O produto bruto foi separado e purificado por cromatografia cm coluna de gel de sílica para dar o éster fosfato de dibenzilo 51. O tratamento de 51 em etanol/ácido acético glacial com excesso de Pd/C a 10% sob uma atmosfera de hidrogénio durante a noite à temperatura ambiente deu o fosfato éster 52. O tratamento de 52 em metanol com dois equivalentes de base e.g. NMG (ou Et3N) deu 52 · 2NMG. -39- h*. rh CL·—„v ( O Esquema VIIIC proporciona um procedimento alternativo para a preparação de fosfato ésteres de fórmula IV em que R<> é como acima definido para o Esquema VIIIB e z = 1 e n = 1. Agitou-se, durante a noite à temperatura ambiente, o éter benzílico do acetato de metilo 53 em metanol-água e excesso de base e.g. K2C03, para dar o éter benzílico 54. A reacção de uma solução de 20F e 54 em cloreto de metileno com 1,3-1,5 equivalentes de DCCD e DMAP à temperatura ambiente durante a noite deu o éster 55. Removeu-se o grupo éter benzílico de 55 por tratamento com excesso de Pd/C a 10% em etanol-ácido glacial sob uma atmosfera de hidrogénio à temperatura ambiente durante a noite. A purificação do produto bruto deu 56. O tratamento de 56 com 1,5 equivalentes de diisopropildibenzilfosfato e 1,5 equivalentes de peróxido de tert-butilo e tetrazole de acordo com o procedimento do Esquema VIIIB deu o éster de dibenzilo 57. A remoção dos grupos dibenzilo com Pd/C a 10% em etanol-ácido acético glacial sob atmosfera de hidrogénio deu (como acima descrito) o fosfato éster 58. O tratamento de 58 com dois equivalentes de base, e.g. NMG, deu 58 · 2NMG. O Esquema IX ilustra a preparação de ésteres heterocíclicos da jr"8

V»OH presente invenção. Reagiu-se o composto 20F, em que Rt = dissolvido em cloreto de metileno com o composto 62 (Hal = Br ou Cl, w = 1-5, e.g., Cl-CH2-COCl) na presença de uma base tal como a piridina a uma temperatura de 0°-5°C durante quatro horas. Colocou-se a reacção num frigorífico durante a noite. Se necessário, adicionava-se composto 62 e base, e a reacção continuou até não estar presente 20F detectado por TLC. A purificação do produto bruto por cromatografia em coluna em gel de sílica deu 59 puro (w = 1, Hal = Cl). Produziu-se 61 por reacção de 59 com excesso do composto heterocíclico de azoto 60 (e.g., Y = NH, R7 = H e q = 4) a uma temperatura de 50°-60°C durante uma hora. A substituição do composto heterocíclico de azoto 60 com compostos de cinco e seis membros, e.g. morfilina, N-metilpiperdina proporcionou os compostos apresentados na tabela em baixo do Esquema IX.

Os alcanoato e alcenoato ésteres de 20F que são convenientemente preparados por técnicas sintéticas padrão, (por exemplo, por reacção do anidrido ou do haleto de ácido do ácido alcanóico ou do ácido alcenóico na presença de base e.g., piridina) produziram os alcanoato ou alcenoatos dos compostos de fórmula I.

Os sulfato ésteres podem ser preparados por reacção dos álcoois de fórmulas I a IV com trióxido de enxofre na presença de excesso de piridina a temperaturas de 70°-90°C durante pelo menos 2 horas de acordo com o procedimento de R.M. Moriarty et. al. Tetrahedron Letters. Vol. 35, N° 44, p 8103-8106(1994).

Os compostos de fórmula I podem ser também preparados por reacção do composto 11 com álcoois de fórmula HOY na presença de uma base forte, e.g., NaH num solvente aprótico, tal como o DMSO.

OTs + ΌΥ

(R) - Séries "Tosilato"

Ver Exemplo 15 em que X = F ou Cl e Rj = um grupo alquilo (C3-C8) substituído com uma ou duas porções hidroxi.

Os compostos representados pela fórmula I apresentam uma acti-vidade antifungica de largo espectro, em testes de pesquisa antifungica convencionais, contra patogénicos de humanos e animais, tais como os seguintes: Asper-gillus, Blastomyces, Candida, Cryptococcus, Coccidioides, Epiáermophyton, Fonsecaea, Fusarium, Mucor, Saccharomyces, Torulopsis, Trichophyton, Trichosporon, Sporothrix e Pneumocysitis. O s compostos preferidos de fórmula IV apresentam actividade antifungica tópica, oral e parentérica em testes in vivo .em animais e tal actividade é surpreendentemente melhor que a de agentes antifungicos existentes e.g. itraconazole e fluconazole bem como do que a dos compostos de azole especificamente divulgados por Saksena et al. na USP 5.039.676 e Publicação Internacional N° WO 93/09114.

Espera-se que os compostos antifungicos de fórmula I e composições farmacêuticas desta invenção apresentem actividades anti-alérgicas, anti-inflamatórias e imuno-moduladoras, actividade anti-infecciosa de largo espectro, e.g., actividades anti-bacteriana, anti-protozoária e anti-helmíntica. A presente invenção também proporciona uma composição para tratar ou prevenir infecções fúngicas compreendendo uma quantidade antifungica eficaz de um composto representado pela fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável para esse fim. -42- ÍJ*·^

C-J

As composições farmacêuticas da presente invenção podem também conter uma quantidade fungicida eficaz de outros compostos antifungicos tal como composto activo da parede celular. O termo "composto activo da parede celular", tal como é aqui usado, significa qualquer composto que interfere com a parede celular de fungos e inclui, mas não é limitado a, compostos tais como papulacandinas, equinocandinas, e aculeacinas bem como inibidores da parede celular de fungo tais como nicomicinas, e.g., nicomicina K e outras que são descritas na USP 5.006.513.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da presente invenção incluem sais de adição de ácido e base farmaceuticamente aceitáveis.

Os sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis preferidos são sais de adição de ácido não tóxicos formados por adição aos compostos da presente invenção cerca de uma quantidade calculada de um ácido mineral, tal como HC1, HBr, H2SO4, HNO3 ou H3PO4, ou de um ácido orgânico, tal como um ácido alquilo ou arilsulfónico tal como metanossulfónico, isitiónico, para-toluenossulfónico, naftilsulfónico e semelhantes.

As bases farmaceuticamente aceitáveis apropriadas para uso na presente invenção são aquelas que formam sais farmaceuticamente aceitáveis dos ésteres acídicos farmaceuticamente aceitáveis dos compostos antifungicos de fórmulas I, II, III ou IV e incluem bases orgânicas e inorgânicas apropriadas. As bases orgânicas apropriadas incluem alquil aminas primárias, secundárias e terciárias, alcanolaminas, aminas aromáticas, aminas alquilaromáticas e aminas cíclicas. Exemplos de aminas orgânicas são as bases farmaceuticamente aceitáveis seleccionadas de cloroprocaína, procaína, piperazina, glucamina, N- metilglucamina, N-N-dimetil glucamina etilendodiamina, dietanolamina, díiso-propilamina, dietilamina, N-benzilenodiamina, dietanolamina, diisopropilamina, dietilamina, N-benzil-2-feniletilamina, N-n'dibenziletilenodiamina, colina, clemi-zole, trietilamina ("Et3N"), tris(hidroximetil)aminometano, ou D-glucosamina. As base orgânicas preferidas incluem N-metil glucamina ("NMG"), dietanolamina, e tris(hidroximetil)aminometano ("TRIS"). O uso de dois equivalentes de NMG nesta invenção é mais preferido. As bases inorgânicas apropriadas também incluem hidróxidos de metais alcalinos tal como o hidróxido de sódio.

As composições farmacêuticas da presente invenção podem ser adaptadas para qualquer modo de administração e.g., para administração oral, parentérica, e.g., sc, im. IV e IP, local ou vaginal ou por inalação (oral ou intranasalmente).

Tais composições são formuladas combinando o composto de fórmula I ou uma quantidade equivalente de um sal farmaceuticamente aceitável do composto I com um veículo ou diluente inerte e farmaceuticamente aceitável apropriado.

Exemplos de composições apropriadas incluem composições sólidas ou líquidas para administração oral tais como comprimidos, cápsulas, pílulas, pós, grânulos, soluções supositórios, trociscos, rebuçados, suspensões ou emulsões. Um veículo sólido pode ser uma ou mais substâncias que podem também actuar como diluentes, aromatizantes, solubilizantes, lubrificantes, agentes de suspensão, ligantes ou agentes desintegradores de comprimidos; pode também ser um material de encapsulação. Em pó, o veículo é um sólido finamente dividido que está em mistura com o composto activo finamente dividido. No comprimido, o composto activo é misturado com veículo contendo as propriedades ligantes necessárias em proporções apropriadas e compactado na forma e tamanho desejados.

As formas de dosagem correntes podem ser preparadas de acordo com procedimentos bem conhecidos na arte, e podem conter uma variedade de ingredientes, excipientes e aditivos. As formulações para uso corrente incluem pomadas, cremes, loções, pós, aerossóis, pessários e pulverizadores.

Para preparar supositórios, primeiro liquefaz-se uma cera de baixo ponto de fusão tal como uma mistura de glicéridos de ácido gordo ou manteiga de cacau, e os ingredientes activos são aí homogeneamente dispersos por agitação. A mistura homogénea liquefeita é então vertida para moldes de tamanho conveniente, arrefecida e solidificada.

As preparações em forma líquida incluem soluções, suspensões e emulsões. Como exemplo podem ser mencionados água ou soluções de água-propileno glicol para injecção parentérica. As preparações líquidas podem também ser formuladas em solução com uma quantidade apropriada de uma hidroxipropil a- β- ou γ-ciclodextrina contendo 2 a 11 grupos hidroxipropilo por molécula de ciclodextrina, polietilenoglicol, e.g., PEG-200 ou propilenoglicol, cujas soluções podem também conter água. As soluções aquosas apropriadas para uso oral podem ser preparadas por adição do componente activo em água e adição, se desejado, de corantes, aromatizantes, estabilizantes, adocicantes, solubilizantes e espessantes apropriados. As suspensões aquosas apropriadas para uso oral podem ser feitas dispersando o componente activo, finamente dividido, em água. Uma composição aquosa farmacêutica particularmente preferida pode ser preparada a partir dos compostos de fórmulas I a IV juntamente com -45-

hidroxipropil-β-ciclodextrina em água. O uso de derivados de α-, β- e γ-ciclodextrinas, por exemplo, hidroxipropi 1 - β-ciclodextrina são divulgadas por N. Bodor USP 4.983.586, Pitha USP 4.727.064 e Janssen Pedido de Patente Internacional Farmacêutica N° PCT/EP 84/00417.

As composições farmacêuticas da presente invenção podem ser preparadas misturando o veículo farmaceuticamente aceitável, e.g., uma hidroxipropil-p-ciclodextrina em água, e adicionando aí uma quantidade antifungica eficaz de uma droga da presente invenção. A solução assim formada é filtrada, e facultativamente, a água pode ser removida por métodos bem conhecidos, e.g., evaporação rotativa ou liofilização. A formação da solução pode ocorrer a uma temperatura de cerca de 15° até 35°C. A água é normalmente água esterilizada e pode também conter sais e tampões, e.g., fosfato ou citrato, farmaceuticamente aceitáveis bem como conservantes. A razão molar do composto antifungico de fórmula I para hidroxipropil-p-ciclodextrina é de cerca de 1:1 até 1:80, de preferência 1:1 até 1:2. Normalmente a hidroxipropil-p-ciclodextrina encontra-se presente em excesso molar.

Também se encontram incluídas preparações na forma sólida cuja intenção é serem convertidas, um pouco antes de serem usadas, em preparações na forma líquida para administração quer oral quer parentérica. As preparações na forma sólida cuja intenção é serem convertidas em preparações na forma líquida podem conter, em adição aos materiais activos, tais como compostos desta invenção, e facultativamente um composto activo da parede celular, especialmente um inibidor da parede celular de fungo, e.g., uma nicomicina, aromatizantes, corantes, estabilizantes, tamponantes, adocicantes artificiais e naturais, dispersantes, espessantes, solubilizantes e semelhantes. O solvente utilizado para preparar as preparações na forma líquida podç ser água, água -46-

Μ ,ÂS

L .Η"*

C ο <-Λ isotónica, etanol, glicerina, polietilenoglicóis, propilenoglicol, e semelhantes, bem como misturas dos mesmos.

As formas parenterais para serem injectadas intravenosa, intramuscular, ou subcutaneamente encontram-se geralmente na forma de uma solução estéril, e podem conter sais ou glucose para tomar a solução isotónica. A dosagem corrente para humanos para uso antifungico na forma de uma formulação farmacêutica compreendendo um composto de fórmula I (geralmente em concentrações na gama desde cerca de 0,1% até cerca de 20% de preferência desde cerca de 0,5% até cerca de 10% em peso) juntamente com um veículo usual farmaceuticamente aceitável e não tóxico, é uma aplicação diária à pele afectada até melhorar a condição.

Duma forma geral, a dosagem oral para humanos para uso antifungico varia desde cerca de 1 mg por quilograma de peso corporal até cerca de 50 mg por quilograma de peso corporal por dia, em doses individuais ou divididas, sendo preferido cerca de 2 mg por quilograma de peso corporal até cerca de 20 mg por quilograma de peso corporal por dia e sendo mais preferido a dose de cerca de 5 mg por quilograma de peso corporal até cerca de 10 mg por quilograma de peso corporal por dia.

Duma forma geral, a dosagem parentérica para humanos para uso antifungico varia desde cerca de 0,5 mg por quilograma de peso corporal por dia, até cerca de 20 mg por quilograma de peso corporal por dia, em doses individuais ou divididas, sendo preferido cerca de 1 até 10 mg por quilograma de peso corporal por dia. -47- fo-v

'r. ι A quantidade exacta, a frequência e o período de administração dos compostos da presente invenção para uso antifungico varia, evidentemente, com o sexo, idade e condição clínica do paciente bem como da gravidade da infecção determinada pelo assistente clínico.

PARTE EXPERIMENTAL GERAL

Os compostos desta invenção são preparados de acordo com os Esquemas I-IX acima e com os seguintes Exemplos que usam materiais de partida comercialmente disponíveis. r vj J0r^ íV~° J| Ί + NaOAc EXEMPLO la 2-Acetilloxi-1-C2.4-difIuorofenilletanona

Adicionar 191 g de 2-cloro-2',4'-difluoroacetofenona (Aldrich Chemical Co.) a uma mistura de 246 g de acetato de sódio, 3 g de Nal, e 3 L de DMF. Agitar a mistura a 20°C durante 18 h e então concentrar a 1 L. Decantar o resíduo em 6 L de HC1 aquoso diluído e frio e extrair com EtOAc. Lavar o extracto com salmoura, secar sobre Na2S04 anidro, filtrar a mistura assim formada, e evaporar o filtrado para deixar um resíduo. Sujeitar o resíduo a cromatografia em gel de sílica, eluindo com CH2Cl-2-hexano para obter 198 g do composto do título.

-48- F OAc

♦ MePhsPBr + Na-HMOS

THF EXEMPLO lb

F OAc

Acetato de l-r2-('2.4-Difluorofenim-2-propenol

Suspender 131 g de MePhsPBr em 270 mL de THF seco, mecanicamente agitado a 20°C. Adicionar 393 mL de NaN(Me-,Si)? 1M em THF, inicialmente devagar, e depois rapidamente durante 5 minutos enquanto se aplica gelo suficiente para manter a temperatura a < 23 °C. Agitar a mistura assim formada durante lha 20°-24°C, arrefecer até ~ -70°C, e agitar outra 1/2 h. Em seguida adicionar à mistura uma solução de 65,5 g do produto do Exemplo la em 140 mL de THF seco, a uma velocidade suficientemente baixa para manter a temperatura abaixo de -70°C. Continuar a agitar a mistura reaccional assim formada no banho frio ao longo da noite durante a qual a temperatura aumenta para 20°C. Adicionar 50 mL de EtOAc à suspensão assim formada, e então adicionar 3 L de hexano. Permitir que a mistura assim formada estabilize durante ~15 min., e filtrar por sucção para remover o Ph3PO. Enquanto o bolo filtrado ainda está húmido, transferi-lo para uma proveta. Triturar o bolo cuidadosamente com 1/2 L de hexano e filtrar por sucção novamente para remover o restante produto remanescente. Lavar os filtrados de hexano combinados com 2 x 1 L de uma solução 1:1 (v/v) MeOH-água, e em seguida com salmoura. Secar a camada orgânica sobre MgS04, filtrar e evaporar o filtrado para deixar ficar um óleo vermelho. Adicionar 1,5 L de hexano e filtrar por sucção ao através de uma almofada de Celite para deixar ficar uma solução amarela límpida. Sujeitar o óleo amarelo a cromatografia em gel de sílica, eluindo com 1/2 L de hexano, e em seguida 1 L de 15:1 (v/v) hexano-EtOAc. Combinar as ffacções homogéneas para obter 38,6 g do composto do título como um óleo. Ρά^°“οΗ

EXEMPLO lc 2-(2.4-DifluorofemD-2-t>ropenol

Dissolver 40 g do produto do Exemplo lb em 400 mL de dioxano. Adicionar uma solução de 18 g de KOH a 85% em 315 mL de água. Agitar vigorosamente a mistura assim formada durante 1 h, e então verter a mistura em 1 L de Et20. Separar a camada aquosa e extrair com 250 mL de Et20. Combinar os extractos orgânicos, e lavá-los com água e em seguida salmoura. Secar o extracto orgânico sobre K2CO3 anidro, e adicionar 10 g de carvão vegetal. Filtrar, e evaporar o filtrado para obter 31,3 g do composto do título como um óleo cor de palha.

Exemplo ld ( SVí-Vr2-r2-í2.4-Difluorofenil~)loxiranillmetanol

Adicionar 33 g de pó de crivo molecular de 3Â a uma solução de 13 g de L-(+)-tartarato de dietilo em 2,3 L de CH2C12, e arrefecer a mistura assim formada a -5°C. Adicionar uma solução de 15,4 mL de tetra-isopropóxido de titânio em 100 mL de CH2C12 durante 2-3 minutos e em seguida arrefecer a mistura assim formada a -22°C. Adicionar 109,5 mL de uma solução 5,5 M de tert-butilhidroperóxido em 2,2,4-trimetilpentano durante 4-6 minutos, e arrefecer a mistura assim formada a -25°C. Agitar a mistura a -25°C durante 25 minutos e -50-

em seguida adicionar uma solução de 40 g de 2-(2,4-difluorofenil)-3-propenol do Exemplo lc em 100 mL de CH2CI2 durante 3-4 minutos. Agitar a mistura assim formada a -27°C durante 4 1/2 horas. Adicionar 102 mL de hidróxido de sódio aquoso a 30% saturado com NaCl e agitar a mistura assim formada enquanto se aquece a +10°C durante um período de 1/2 hora. Adicionar à mistura 100 g de MgS04 anidro e 33 g de Celite, e agitar 1/2 hora a +10°C. Filtrar por sucção a mistura, lavar 0 bolo de filtro assim formado com 1,2 L de éter dietílico (Et20) e em seguida com 1,5 L de tolueno, e secar as camadas orgânicas combinadas sobre MgS04 anidro. Filtrar a camada orgânica, e evaporar o filtrado in vacuo para formar um resíduo. Dissolver o resíduo em 1L de Et20 e filtrar por sucção a mistura para remover insolúveis. Filtrar por sucção o filtrado através de 100 g de gel de sílica, e lavar a almofada com 200 mL de Et20 fresco. Evaporar o filtrado in vacuo para dar 41 g (94%) do composto do título bruto como um óleo amarelado, [cc]£ - 36,7° (c= 1, MeOH); PMR (CDC13) d 7,40 (m, 1H), 6,85 (m, 2H), 3,95 (m, 2H), 3,31 (d, 1H), 2,84 (d, 1H), 1,91 (m, 1H, deutério permutável). EXEMPLO 2 (RVf+Vr2-f2-f2.4-DifluorofeniDloxiranillmetanol

Seguir o procedimento de Exemplo ld, excepto substituir uma quantidade equivalente de D-(-)-tartarato de dietilo no lugar de L-(+)-tartarato de dietilo para dar o composto do título bruto [a] 2J + 33,9° (c= 1, MeOH).

Purificar uma porção do composto bruto por cromatografia em gel de sílica para obter uma amostra homogénea por TLC, [a] Ϊ + 40,0° (c= 1,

MeOH). EXEMPLO 3 ('RV('-V2-(/2.4-DifluorofenilV3-í 1,2.4-triazol-1 -il)-l .2-propanodiol

Dissolver 8,91 g de lH-l,2,4-triazole em 150 mL de DMF anidro e arrefecer a mistura assim formada a 0-5°C. Adicionar 2,81 g de hidreto de sódio (60% de dispersão de óleo) e agitar a mistura assim formada 30 minutos à temperatura ambienle. Adicionar aí 10,9 g do produto do Exemplo ld. Agitar a mistura reaccional assim formada durante 2 horas a 60-70°C. Arrefecer a mistura até à temperatura ambiente, adicionar 10 mL de H20 e evaporá-la in vacuo para dar um resíduo. Dissolver o resíduo em 100 mL de H20 e 900 mL de acetato de etilo (EtOAc). Extrair a camada de H20 com outros 250 mL de EtOAc. Lavar os extractos de EtOAc combinados com 100 mL salmoura. Secar os extractos de EtOAc sobre MgS04 anidro e evaporar. Triturar o resíduo oleoso assim formado com 10 mL de CH2C12 e adicionar 100 mL de Et20. Agitar a mistura de CH2C12-Et20 durante 1 hora à temperatura ambiente. Filtrar para dar 11,2 g (75%) do composto do título, [a]£ - 70,7° (c= 1, MeOH), espectro de massa (FAB): 256 [M+H]+. Recristalizar 1,0 g do produto filtrado a partir de 5 mL de CH3CN para dar 0,83 g do composto do título, p.f. 99-100°C; [a]“ - 71,5° (c= 1,0, MeOH); análise elementar: Calculada para CuHnF2N302l/2CH3CN; 52,27C, 4,57H, 17,78N, 13/78F; Encontrado: 52,26C, 4,58H, 17,54N, 13,78F; PMR(DMSO) d 8,25 (s, 1), 7,66 (s, 1), 7,33, (m, 1), 7,09 (t, 1), 6,90 (t, 1), 5,72 (s, 1), 5,05 (t, 1), 4,53 (s, 2), 3,61 (m, 2). EXEMPLO 4 (S)-(+)-2-(2.4-Difluorofenil)-3-(1.2.4-triazol-l-il)-1.2-propanodiol

Seguir o procedimento do Exemplo 3, excepto substituir uma -52- /<st tj«.w> C~ i

I quantidade equivalente do produto do Exemplo 2 no lugar do produto do Exemplo 1 para dar o composto do título; PF 95-101°C; [a] £ + 70,0° (c= 1,0,

MeOH). O PMR e o espectro de massa foram consistentes com a estrutura do composto do título. EXEMPLO 5 fRV2-í2,4-DifluorofenilV3-i 1,2.4-tríazoI-1 -ilV1.2-propanodiol-1 - metanossulfonato

Suspender 10,9 g do produto reduzido a pó do Exemplo 3 em 150 mL de CH2CI2. Adicionar aí 8,95 mL de trietilamina e arrefecer a mistura assim formada a 0-5°C. Adicionar 3,64 mL de cloreto de metanossulfonilo em 20 mL de CH2CI2 durante 10 minutos. Agitar a mistura assim formada durante 1 hora à temperatura ambiente. Arrefecê-la a 0-5°C, extrair com 100 mL de KH2P04 a 5% frio (0-5°C), seguido de 100 mL de H2O fria (0-5°C), seguido de 50 mL de salmoura. Secar a camada orgânica separada através de MgS04 anidro e evaporar para obter 13,7 g (96%) do [M+H+]+ do título; PMR (CDC13) d 7,95 (s, 1), 7,82 (s, 1), 7,53 (m, 1), 6,81 (m, 2), 4,84 (d, 1), 4,65 (d, 1), 4,46 (m, 2), 3,05 (s, 3). EXEMPLO 6 (SV2-C 2.4-Difluorofenil V3-( 1.2.4-triazol-1 -iP-1.2-propanodiol-1 - metanossulfonato

Seguir o procedimento do Exemplo 5, excepto substituir uma quantidade equivalente do produto do Exemplo 4 no lugar do produto do Exemplo 3 para dar o composto do título. O PMR é consistente com a estrutura do composto do título. EXEMPLO 7 (RVl-[2-r2-f2.4-Difluorofenil')1oxiranilmetil1-1.2.4-triazole

Dissolver 13,7 g do produto do Exemplo 5 em 200 mL de DMF anidro e arrefecer a solução assim formada a 10-15°C. Adicionar aí 1,71 g de hidreto de sódio (60% de dispersão de óleo) e agitar a mistura reaccional assim formada à temperatura ambiente durante 90 minutos. Concentrar in vácuo até 50 mL. Adicionar aí 200 mL de H20 fria (0-5°) e extrair com porções 3 x porções de 200 mL de EtOAc. Lavar os extractos combinados de EtOAc com 100 mL salmoura. Secar os extractos de EtOAc sobre MgS04 anidro e evaporá-los para dar 10,8 g de um resíduo. Aplicar o resíduo em CH2CI2 a uma coluna de 400 g de gel de sílica de qualidade MPLC com previamente preparada por enchimento pastoso com CH2C12 contendo 1 mL de Et3N por litro. Eluir com 1 litro, de cada um de EtOAc a 25, 50 e 75%; CH2C12 (v/v) seguido de 2 litros de EtOAc. Combinar as fracções para dar 6,92 g (68%) do composto do título. Espectro de massa (FAB): 238 [M+H]+; PMR (CDC13) d 7,97 (s, 1), 7,77 (s, 1), 7,07 (m, 1), 6,73 (m, 2); 4,73 (d, 1), 2,84 (d, 1), 2,78 (d, 1). EXEMPLO 8 f SV1 -[2-Γ2-Γ2.4-Difluorofenil)1 oxiranilmetill-1.2,4-triazole

Seguir o procedimento do Exemplo 7, excepto substituir uma quantidade equivalente do produto do Exemplo 6 no lugar do produto do Exemplo 5 para dar o composto do título. [PMR é consistente com a estrutura do composto do título]. -54- Âki. £-

•L. V EXEMPLO 9

Etilf5R-cisV e (5R-transV5-(2.4-DifluorofeniD-2-oxo-S-[(lH-L2.4-triazol-l-il]metil]tetra-hidro-3-furancarboxilato

Dissolver 9,35 mL de malonato de dietilo em 70 mL de DMSO anidro. Adicionar 2,24 g de hidreto de sódio (60% de dispersão de óleo) em 2 porções e agitar a mistura reaccional assim formada à temperatura ambiente durante 1 hora. Adicionar 6,65 g do produto do Exemplo 7 e agitar 1B horas a 50-55°C. Arrefecer até à temperatura ambiente e verter a mistura reaccional numa mistura bem agitada de 500 mL de KH2PO4, 500 mL de salmoura, e 1 litro de EtOAc. Separar e extrair a camada de H2O com outros 300 mL de EtOAc. Lavar os extractas de EtOAc combinados com 500 mL de salmoura. Secar os extractos de EtOAc sobre MgS04 anidro e evaporar para dar um óleo. Aplicar o óleo CH2CI2 a uma coluna de 400 g MPLC graduada com gel de sílica preparada com hexano. Eluir com 500 mL de hexano, seguido por 2 litros de 50% EtOAcrhexano (v/v), seguido por 2 litros de EtOAc. Combinar as fracções para dar 8,66 g (80%) do composto do título. Espectro de massa (FAB): 352 [M+H]+, PMR (CDCI3) d 8,08 (s, 2), 7,91 (s, 1), 7,71 (s, 1), 7,42 (m, 1), 7,13 (m,l), 7,85 (m,2), 4,60 (m, 4), 4,10 (m, 4), 3,49 (t, 1), 3,14 (t, 1), 3,89 (m, 4), 1,18 (m, 6). EXEMPLO 10

Etil( 5 S-cisV e (5 S-transV5-(2.4-DifluorofenilV2-oxo-5-f ΠΗ-1.2.4-triazol-1 -iBmetilltetra-hidro-3-furancarboxilato

Seguir o procedimento do Exemplo 9, excepto substituir uma quantidade equivalente do produto do Exemplo 8 no lugar do produto do Exemplo 7 para dar o composto do título. [PMR e espectro de massa são consistentes com a estrutura do composto do título]. EXEMPLO 11 ÍRVÍ-V4-(2.4-DifluorofenilV24iidroximetil-5-[ 1Η-Γ1.2.4-triazol-1 -ilíl-l .4- pentanodiol

Dissolver 8,5 g do produto do Exemplo 9 em 125 mL de EtOH e adicionar 2,15 g de LiCl. Arrefecer a mistura agitada a 0°C e adicionar 1,92 g de NaBH4 em porções. Agitar a mistura durante 18 horas sem arrefecimento adicional. Adicionar 125 mL de MeOH e 10 mL de H2O à mistura e agitar durante 4 horas. Evaporar a mistura até à secura e extrair 0 precipitado com EtOH quente. Evaporar o extracto até à secura, adicionar 200 mL de THF ao resíduo, e sonicar a mistura agitada durante 15 min. Filtrar a mistura e evaporar o filtrado. Sujeitar o resíduo a cromatografia em gel de sílica, eluindo com CH2CI2-MeOH-NH^H (95:5:1) (v/v/v) para obter 3,9 g do composto do título. Espectro de massa (FAB): 314 (M+H+); PMR (DMSO) d 8,25 (s, 1), 7,69 (s, 1), 7,35 (m, 1), 7,13 (m, 1), 6,94 (m, 1), 6,27 (s, 1), 5,16 (t, 1), 4,44 (m, 4), 3,39 (m, 1), 3,20 (m, 1), 3,05 (t, 2), 2,11 (m, 1), 1,52 (m, 1). EXEMPLO 12 (S)-(+)-4-í2.4-Difluorofenil)-2-hidroximeti]-5-r 1 H-Π .2.4-triazolilll -1.4- pentanodiol

Seguir 0 procedimento do Exemplo 11, excepto substituir uma quantidade equivalente do produto do Exemplo 10 no lugar do produto do Exemplo 9 para dar o composto do título. Sujeitar uma porção do produto bruto a cromatografia em gel de sílica eluindo com CH2Cl2-MeOH-NH4OH para dar um produto homogéneo por TLC, Dissolver o material em HjO e filtrar, e liofilizar 0 filtrado para dar o composto do título, [a] “ + 54,50 (c = 1,0, MeOH). EXEMPLO 13 (ΊΟ-/-1-4-/ 2.4-Difluorofenil V2- ΓΓ (4-metilfenilVsulfoniloxilmetill - 5- Γ1 H-( L2.4- triazolilll 1.4-pentanodiol-1 -/4-metilbenzeno)sulfonato

Dissolver 4,4 g do produto do Exemplo 11 em 50 mL de CH2C12-THF (1:1, v/v). Adicionar 4,7 mL de Et3N e 180 mg de N,N-dimetilamino-piridina, e arrefecer a solução a 0°C. Adicionar 5,9 g de cloreto de p-toluenossulfonilo em porções e agitar a mistura reaccional assim formada a 0°C durante 1/2 hora, e em seguida agitá-la à temperatura ambiente durante 5 horas. Adicionar 100 mL de EtOAc e filtrar por sucção a mistura. Concentrar o filtrado; adicionar aí 150 mL de EtOAc, e lavar com KH2P04 aquoso a 5%. Lavar a camada orgânica com NaHC03 aquoso a 5% frio, e em seguida com salmoura saturada, e então secar sobre MgS04 anidro. Filtrar a mistura, e evaporar o filtrado. Submeter o resíduo a cromatografia em gel de sílica, eluindo com EtOAc-hexano para dar 6,4 g (73%) do composto do título, PMR (CDC13) d 7,95 (s, 1), 7,67 (m, 5), 7,30 (m, 6) 6,70 (t, 2), 4,74 (d, 1), 4,53 (d, 1), 4,13 (m, 1), 3,97 (m, 1), 3,8 (m, 2), 2,43 (s, 6), 1,95 (m, 2), 1,77 (m, 1). Espectro de massa (FAB): 622 [M+H]+. EXEMPLO 14 fSVf+)-4-(2.4-Difluorofenil)-2-rr(4-metilfenil)-sulfoniloxilmetin-5-riH-(1.2.4-triazolim 1.4-pentanodiol-1 -/4-metilbenzeno)sulfonato

Seguir o procedimento do Exemplo 13 excepto substituir uma quantidade equivalente do produto do Exemplo 12 no lugar do produto do Exemplo 11 para dar o composto do título, [a] “ + 14,2° (c = 1, MeOH). EXEMPLO 15 ( -)-(5R-cisV5-f2.4-Difluorofenir)-S-lY 1 Η-1,2.4-triazol-1 -iDmetin-tetra-hidro-3-furanometanol 4-toluenossulfonato

Dissolver 6,3 g do produto do Exemplo 13 em 150 mL de tolueno e aquecer a solução assim formada a 100°C. Adicionar 2,4 g de dispersão de NaH a 60% em óleo, em porções, e então aquecer a mistura reaccional assim formada a refluxo até se completar a ciclização (aproximadamente 3-4 horas). Arrefecer a mistura e decantar a solução do excesso de NaH. Lavar a solução com KH2PO4 aquoso a 5% frio. Evaporar a camada orgânica para formar um resíduo e submeter o resíduo a cromatografia em gel de sílica, eluindo com acetona-hexano para obter 1,6 g (35%) do composto do título como 0 menos polar dos dois produtos, [a] % - 39,4° (c = 1, CHC13); PMR (CDC13) d 8,09 (s, 1), 7,88 (m, 3), 7,31 (m, 3) 6,81 (m, 2), 4,52 (ABq, 2), 3,99 (m, 1), 3,85 (m, 1), 3,70 (m, 1), 3,59 (m, 1), 2,49 (m, 2), 2,47 (s, 3), 1,90 (m, 1). Espectro de massa (FAB): 450 [M+H]+. EXEMPLO 16 f+V('5S-cisV5-(/2.4-DifluorofenilV5-f('lH-1.2.4-triazol-l-iLmetill-tetra-hidro-3-furanometanol 4-toluenossulfonato

Seguir o procedimento do Exemplo 15, excepto substituir uma quantidade equivalente do produto do Exemplo 14 no lugar do produto do Exemplo 13 para dar o composto do título, [oc]^5 + 40,3° (c = 0,3, CHCI3), pf 96-98°C. -58-

EXEMPLQ 17 ('-V[f2RVcisl-4-r4-r4-r4-fí5-(,2.4-Difluorofeni1Vtetra-hidro-5-riH-l,2.4-iriazol-l-ilmetil)furano-3-illmetoxilfenil-l-piperazinil1fenil-2.4-di-hidro-3H-1.2.4-tríazol-3-ona. O composto do título é preparado partindo com o tosilato do

Exemplo 15 e 4-[4-(4-nitrofenil)-l-piperazinil]fenol (Exemplo 3a da USP 4.791.111) e usando o esquema sintético delineado no Esquema V e J. Heeres, et al., J. Med. Chem 1984, Vol 27, p894-900 em 898 e 900. EXEMPLO 18 M-rr2R)-cisl-4-r4-r4-r4-rr5-(2.4-Difluorofenll)-Tetra-hidro-5-nH-1.2.4-Triazol-l-ilmetil)-3-Furanil]Metoxi1Fenil7-l-PiperazimnFenil|-2.4-Di-hidro-2-Γ 1 fS)-Metil-2(R)-Hidroxipropill-3H-1.2.4-Triazol-3-ona.

a. 2-O-SEM Éter do f2R. 3R)-2.3-Butanodiol

Adicionaram-se em quatro porções, a uma solução agitada de 4,95 g de (2R, 3R)-2,3-butanodiol, (55 mmoles) e 9,3 g de SEM-C1 (55,7 mmoles) em 55 mL de DMF anidro a 0°C, 2,34 g de NaH disperso em óleo a 60% (58,5 mmoles) durante 10 minutos. A mistura resultante foi agitada a 0°C durante 4 horas e à temperatura ambiente durante a noite. Verteu-se a mistura reaccional turva em 0,5 L de uma solução de KH2P04 a 5% e extraiu-se com 2 x 300 mL de éter; a solução etérea combinada foi lavada uma vez com água destilada, salmoura saturada, seca sobre MgS04 e evaporada para dar um líquido incolor. Cromatografia instantânea sobre 350 g de gel de sílica com 1 L de 7% EtOAc/Hexano, 2 L de 10% EtOAc/Hexano e 1 L de 15% EtOAc/Hexano deu 1,74 g do composto do título (rendimento 14,4%) MS: (M+H)+ = 221. b. Brosilacão

Agitou-se uma mistura de 0,7 g do 2-0-SEM éter do Exemplo 18(a), (3,18 mmoles) e 0,97 g de cloreto de 4-bromobenzenossulfonilo (3,82 mmoles) em 5 mL de piridina anidra sob uma atmosfera de N2 à temperatura ambiente durante 6 horas. Diluiu-se a mistura reaccional tipo lama avermelhada com 50 mL de água arrefecida em gelo, e extraiu-se com 2 x 25 mL de éter. Lavou-se a solução etérea combinada com 2 x 25 mL de solução de CuS04 a 1%, água destilada, salmoura saturada, secou-se sobre MgS04 e evaporou-se para dar um resíduo oleoso avermelhado. Cromatografia instantânea sobre 50 g de gel de sílica com 1 L de 10% EtOAc/Hexano deu 1,02 g do brosilato como um líquido incolor (rendimento 72,9%) [α] o = -3,69° (CHCI3 ; c = 1,). c. Reaccão de Alquilacão

Agitou-se uma mistura de 0,98 g do brosilado do Exemplo 18(b) (2,23 mmoles), 0,69 g do 3H-l,2,4-triazol-3-ona do Exemplo 17 (1,12 mmoles) e 0,37 g de carbonato de césio (1,12 mmoles) em 20 mL de DMF anidro a 80°C sob N2 durante a noite (~20 horas). A mistura reaccional foi diluída com 100 mL de água arrefecida em gelo, extraída com 2 x 50 mL de acetato de etilo. A solução orgânica combinada foi lavada uma vez com água destilada, salmoura, seca sobre MgS04 e evaporada para dar um resíduo sólido castanho. Cromatografia instantânea do resíduo sobre 125 g de gel de sílica com 1,2 L de 80% EtOAc/Hexano deu 0,327 g do produto como um sólido bronzeado (rendimento 35,7%) MS - (M+H)+ - 81,7. -60- Λ

fa-jO r· ι L.--''««ÍK ,^ ^** i d. Hidrólise Ácida de 18íc) até ao produto do título

Agitou-se uma mistura de 0,32 g do éter-SEM do Exemplo 18(c) e 6 mL de uma solução de HC1 6N em 6 mL de metanol à temperatura ambiente durante 4 horas e evaporou-se sob pressão reduzida. Diluiu-se o resíduo com 5 mL de água gelada, cuidadosamente basificado com uma solução de Na2C03 a 10% até ser obtido um pH de 8-9. A extracção da mistura reaccional assim formada com 2 x 25 mL de CH2CI2 seguida de lavagem com salmoura saturada, seca sobre MgS04 e evaporada deu um sólido bronzeado. A filtração do sólido bronzeado através de uma coluna de 50 g de gel de sílica e eluição com 0,75 L de 4% MeOH/CH2Cl2 deu 0,26 g do composto do título como um sólido bronzeado, rendimento 96,6%. MS = (M+H)+ = 687;. [«]£= -23,65° (CHC13; c = 1). EXEMPLO 19 (,-Vj'(2RVcis1-4-r4-r4-r4-rrr5-r2.4-DifluorofenilVTetra-hidro-5-(,lH-1.2.4-Triazol-l-ilmetilV3-FuranillMetoxilFenin-l-PiperazinillFenil]-2.4-Di-hidro-2-1Γ1 ÍRl-Metil-2(R)-Hidroxipropill -3H-1,2,4-Triazol-3-ona. a. Reaccão de Mitsunobu

Adicionou-se, gota a gota, a uma solução agitada de 0,72 g do éter 2-O-SEM do Exemplo 18(a) (3,27 mmoles), 2,1 g de trifenilfosfina (8,06 g) e 1,2 g de ácido p-nitrobenzóico (7,17 mmoles) em 30 mL de benzeno seco a 0°C, 1,25 mL (8,06 mmoles) de azodicarboxilato de dietilo ("DEAD"). A solução amarela límpida assim formada tomou-se turva e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas, e carregada numa coluna de 100 g de gel de sílica. A eluição da coluna com 15% EtOAc/Hexano deu 1,5 g do 3-p-nitrobenzoato contendo a configuração absoluta S (rendimento de 95%) MS: 219 (M+ - 150), 252 (M+-117). b.

Hidrólise Básica do p-Nitrobenzoato

Agitou-se ma solução de 1,12 g do p-nitrobenzoato do Exemplo 19(a) (3 mmoles) e 3,5 mL de uma solução de NaOH IN em 20 mL de metanol à temperatura ambiente durante 3 horas. Os solventes foram evaporados e o resíduo foi diluído com 10 mL de água destilada, e extraído com 2 x 20 mL de éter. A solução etérea combinada foi lavada uma vez com salmoura saturada, seca sobre MgS04 e evaporada para dar 0,67 g do álcool correspondente como um líquido incolor (~100%), que foi usado directamente para a próxima reacção sem purificação adicional. c. Brosilacão. Alquilacão e Hidrólise Ácida

Seguindo os procedimentos do Exemplo 18(c) e (d), preparou-se em 3 passos o composto do título com um rendimento global de 32% a partir dos produtos do Exemplo 19(b) e do Exemplo 17. MS: [M+H]+ = 687; [a]^3 = - 23,65° (CHC13; c = 1). EXEMPLO 20 M-r(2RVcisl-4-r4-r4-r4-rrf5-f2.4-DifluorofenilVTetra-hidro-5- nH-l^^-Tríazol-l-ilmetill-S-FuranillMetoxilFenill-l-PiperazimllFenin^.d-Di- hidro-2-[YSVl-Metil-3-Hidroxipropill-3H-1.2.4-Tríazol-3-ona.

a. Formação do Éter TBDPS

Adicionou-se a uma solução de 0,9 g de (R)-(-)-l,3-butanodioI (10 mmoles), 1,5 g de imidazole (22 mmoles) em 10 mL de DMF anidro a 0°C s 3 ml, de t-butilclorodifenilsilano ("TBDPS") (11 mmoles) durante 3 minutos. A mistura reaccional foi agitada a 0°C durante 4 horas, diluída com 50 mL de água arrefecida em gelo e extraída com 2 x 30 mL de éter. A fase aquosa foi extraída em contra-corrente com 50 mL de éter e a solução etérea combinada foi lavada uma vez com salmoura saturada, seca sobre MgSC>4 e evaporada para dar um resíduo incolor. Cromatografia instantânea sobre 150 g de gel de sílica com 1,5 L de 5% EtOAc/Hexano e 1 L de 10% EtOAc/Hexano deu 2,87 g do éter de TBDPS (87,5%) MS: [M+H]+ = 329; [a]2fl3 = +0,64° (CHC13; c = 1). b. Brosilacão

Adicionaram-se, a uma solução de 0,984 g de éter de TBDPS do Exemplo 20(a) (3 mmoles) em 7 mL de piridina anidra, 0,845 g de cloreto de 4-bromobenzenossulfonilo (3,3 mmoles). A reacção foi corrida trabalhada e purificada de acordo com o procedimento de Exemplo 18(b) e foram obtidos 1,02 g do brosilato com rendimento de 61,1%; MS: [M+23]+ = 569/571; [a] “ = +2,45° (CHC13; c = 1). c. Alquilacão

Reagiu-se o brosilato do Exemplo 20(b), 0,95 g (1,74 mmoles) com o composto do Exemplo 17 de acordo com o procedimento do Exemplo 18(c) para proporcionar 0,49 g do produto alquilado correspondente, rendimento 60,3% MS: [M+H]+ 925; [a] * = -32,27° (CHC13; c = 1). d. Hidrólise Acida

Hidrolizou-se o composto do Exemplo 20(c), 0,32 g, (0,35 mmoles) com uma solução de HC1 6N de acordo com o procedimento do

Exemplo 18(d) para dar 0,22 g do composto do título (rendimento 92,4%); MS: M+ = 686; [M+Naf = 709; [a] 2J = -38,52° (CHC13; c = 1).

Altemativamente agitou-se uma solução de 0,19 g do composto do Exemplo 20(c) e 60 mg de fluoreto de tetrabutilamónio (0,23 mmoles) em 5 mL de THF à temperatura ambiente durante 24 horas. Concentrou-se a solução castanha a um xarope. Cromatografia instantânea do xarope sobre 50 g de gel de sílica com 0,5 L cada de 2% e 4% MeOH/CHzCh deu 0,11 g do composto do título (rendimento 88,7%). EXEMPLO 21 í-)-r(2R)-cis1-4-f4-[4-r4-rr5-(2.4-DifluorofenilVTetra-hidro-5-(lH-l,2.4-Triazol-l-Ilmetil)-3-Furanil)MetoxilFenill-l-PiperazininFenill-2.4-Di-hidro-2- Γ ÍRVl -Metil-3-Hidroxipropil]-3H-1,2.4-Triazol-3-ona.

Os procedimentos do Exemplo 20 foram seguidos excepto que uma quantidade equivalente de S-(+)-l,3-butanodiol foi substituída pelo enantiómero R correspondente. Foi obtido em quatro passos um rendimento global de 31,8% em composto do título; MS = [M+H]+ = 687. EXEMPLO 22 M-r(2R)-cisl-4-r4-14-f4-fr5-(2.4-Difluorofenil)-Tetra-hidro-5-(lH-1.2.4-Tria7.o1-1-ilmetil)-3-Furanil]MetoxilFenil)-l-PiperazinillFenill-2.4-Di-hidro-2-Γ 1(SV 1 -Metil-2-Hidroxipropill-3H-1.2.4-Triazol-3-ona. a. Fenilacão

Adicionou-se a uma solução de 10 g de (2R, 3R)-(-)-2,3-butanodiol (111 mmoles) em 40 mL de CH2CI2 anidro e 80 mL de ciclohexano a 0°C 1 mL de ácido trifluorometanossulfónico (TfOH), seguido de adição gota a gota de 21 mL de tricloroacetimidato de benzilo (113 mmoles). Agitou-se a lama resultante à temperatura ambiente durante a noite, diluiu-se com 125 mL de hexano e filtrou-se. Concentrou-se 0 filtrado combinado a um xarope amarelo. Cromatografia instantânea do xarope amarelo sobre 250 g de gel de sílica com 1.5 L de 7% EtOAc/Hexano, 2 L de 15% EtOAc/Hexano e 2 L de 25% EtOAc/Hexano, 1,5 L de 10% MeOH/CH2Cl2 deu 11,88 g do 2-monoéter benzílico do material de partida (rendimento 74,5%) e 2,03 g de material de partida não reagido MS: [M+H]+: 181. b. Reacção de Mitsunobu

Converteu-se o 2-monoéter benzílico do Exemplo 22(a), 5,4 g, em 6.6 g do éster 3-benzoato (rendimento 66,9%) por reacção Mitsunobu de acordo com o procedimento do Exemplo 19(a); MS: [M+H]+: 330. c. Hidrólise Alcalina

Os 5,3 g do produto do Exemplo 22(b) foi submetido a hidrólise alcalina de acordo com o procedimento do Exemplo 19(b) para dar 2,33 g do 2-monoéter benzílico de (2R, 3S)-2,3-butanodiol (rendimento 80,3%) (M+H)+ = 181; [α] o = -23,75° (CHC13; c = 1).

d. Formação do Éter de SEM

Adicionou-se numa só porção, a uma solução agitada de 3,14 g do produto do Exemplo 22(c) (17,44 mmoles) e 3,8 mL de diisopropiletilamina (2,82 g, 21,8 mmoles) em 30 mL de CH2C12 anidro à temperatura ambiente, 3,8 mL de SEM-C1 (3,64 g, 21,8 mmoles). Formou-se um fumante e agitou-se durante 20 horas a solução amarela resultante. Evaporou-se sob pressão reduzida a mistura reaccional cor de laranja e os resíduos sólidos foram particionados entre éter e água. A solução etérea foi lavada uma vez com água destilada, salmoura saturada, seca sobre MgS04 e concentrada para dar o produto bruto. Cromatografia instantânea do produto bruto sobre 200 g de gel de sílica com 2L de 3% EtOAc/Hexano deu 5,3 g do éter de 3-O-SEM do produto do Exemplo 22(c) (rendimento 98%) como um líquido incolor; MS: [M+H]+: 311. e. Hidrogenólise

Hidrogenou-se uma mistura de 5,25 g do produto do Exemplo 22(d) (16,94 mmoles) e 0,5 g de 10% Pd/C em 150 mL de metanol sob pressão atmosférica durante 6 horas. Os catalisadores foram filtrados e lavados com metanol adicional. O filtrado combinado foi concentrado para dar um líquido incolor. Cromatografia instantânea do líquido sobre 100 g de gel de sílica com 2 L de 10% EtOAc/hexano 3,35 g do álcool livre (rendimento 95%) como um líquido incolor; MS: 174,103. f. Brosilacão O produto do Exemplo 22(e) 1 g foi convertido em 1,52 g do brosilato correspondente com um rendimento de 76,2% de acordo com o procedimento de 18(b); [a]£ = -32,69° (CHC13; c = 1). g. Reaccão de Alauilacão 1,48 g do brosilato do Exemplo 22(f) foi feito reagir com o produto do Exemplo 17 para dar 0,75 g da triazol-3-ona 2-alquilada (rendimento 54,3%); [<x]“ =-32,69° (CHC13;c=1). h.

Hidrólise Ácida A hidrólise de 0,7 g do produto do Exemplo 22(g) de acordo com o procedimento do Exemplo 18(d) deu 0,51 g do composto do título como um creme sólido (rendimento 86,7%); [a] ^ = -32,69° (CHCI3; c = 1). EXEMPLO 23 í-V[í2RVcisl-4-14-r4-r4-ír5-f2,4-DifluorofenilVTetra-hidro-5-nH-1,2.4-Triazol-l -ilmetilV3-FuranillMetoxilFenin-1 -PiperazinillFenill-2.4-Di-hidro-2-[lfS)-Metil-2ÍSVHidroxipropill-3H-1.2.4-Triazol-3-ona. a. Reaccão de Mitsunobu

Fez-se reagir 0 produto do passo e do Exemplo 22 (1,99 g, 9,05 mmoles) com ácido p-nitrobenzóico de acordo com o procedimento do Exemplo 19(a) para dar 3,3 g do produto (rendimento 98,8%); MS = [M+H]+: 221. b. Hidrólise Alcalina

Hidrolizou-se o produto do passo (a) deste Exemplo (2,36 g, 6,4 mmoles) com 7 mL de NaOAc IN para dar 1,18 g do éter de 3-O-SEM de (2S, 3S)-2,3-butanodiol (rendimento 83,7%). MS: [M+H]+: 221 [ct]“ = +55,15° (CHCI3;c=l). c. Formação do Brosilato O produto do passo (b) deste Exemplo (1,15 g) foi convertido no brosilato de acordo com o procedimento do Exemplo 18(b) para dar 3,47 g do -67-

Αχί ih*-H ο

brosilato (rendimento 97,7%). d. Alquilacão e Hidrólise Acida

Seguiram-se os procedimentos dos Exemplos 18(c) e (d) excepto que o produto do Exemplo 23(c) foi substituído pelo do 18(b) para dar o composto do título. EXEMPLO 24 (2R-cisV4-Γ4-Γ 4-f 4-ΓΓ - 5-f 2.4-difluorofenil')-tetra-hidro-5-( 1 Η-1.2,4-triazol-l-ilmetil)furano-3-il1metoxi]fenill-l-piperazinirifeniri2-4-di-hidro-2-IYS)-l-etil-2(~SVhidroxipropill-3H-1.2.4-Triazol-3-ona. a. Converteu-se o éster de metilo do ácido (S)-láctico no éter benziloxi-metílico correspondente de acordo com o procedimento de W. C. Still, et al. Tetrahedron Letters, 21, 1035-1038 (1980). b. Redução ao Aldeído

Adicionou-se gota a gota 37,7 mL de uma solução DIBAL-H 1M, a uma solução agitada de 7,67 g do éter do passo (a) deste Exemplo em tolueno a -78°C (banho de neve carbónica/acetona) sob uma atmosfera de azoto. Após 6 minutos adicionou-se metanol (10 mL) seguido de uma solução aquosa do sal de Rochelles. Após aquecimento até à temperatura ambiente a mistura foi particionada entre EtOAc e água. A fase orgânica foi separada, lavada com água, seca (MgS04) e concentrada para produzir o aldeído bruto que foi usado no passo seguinte sem purificação.

I -68- Iq,,_ v h ( *- i b. Passo de Grignard A solução THF de 80 mL de solução 1 molar do reagente de Grignard brometo de etilmagnésio foi adicionado gota a gota a uma solução de THF agitada do aldeído bruto obtido no passo (b) deste Exemplo a -78°C (banho de neve carbónica/acetona) sob uma atmosfera de azoto. Após se ter completado a adição, a mistura resultante aqueceu lentamente até à temperatura ambiente durante a noite e agitada durante um período adicional de 48 horas. Adicionou-se uma solução aquosa do sal de Rochelles e em seguida a mistura resultante foi particionada entre acetona e água. A fase orgânica foi separada, lavada com água, seca (MgSC>4) e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica usando EtOAc/Hexano (1:10) como eluente para dar (i) álcool não polar (2S, 3S) 2,31 g; 31%, como um óleo incolor, (ii) uma mistura de ambos os álcoois, 1,23 g; 41% e (iii) álcool polar (2S, 3R) 1,23 g; 16%, como um óleo incolor. c. Brosilacão do álcool polar

Adicionou-se cloreto de 4-bromobenzenossulfonilo (1,035 g, 4,1 mmoles) a uma solução agitada (0,605 g, 2,7 mmoles) do álcool polar (2S, 3R) do passo (b) deste Exemplo e 2,20 g (5,9 mmoles) de DMAP em CH2C12 à temperatura ambiente sob uma atmosfera de azoto. A mistura resultante foi agitada durante 12 horas e em seguida particionada entre EtOAc e água. A fase orgânica foi separada, lavada com água, seca e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica usando EtOAc/Hexano (1:10) como eluente para dar o brosilato desejado como um óleo incolor. d. Alquilacão e hidrólise ácida

Seguiram-se os procedimentos dos Exemplos 18(c) e (d) excepto que o brosilato (2S, 3R) do passo (c) deste Exemplo foi substituído pelo usado no Exemplo 18(c). A hidrólise ácida produziu o composto do título como um sólido branco, pf 170-172°C. EXEMPLO 25 (2R-cis)-4-[4-[4-[4-[[-5-(2,4-difluorofeml)-tetra-hidro-5-(lH- 1.2.4-triazol-l-ilmetiDfurano-3-iHmetoxi1fenil]-l-piperazÍnif)fenil]-2-4-di-hidro- 2-tYRVt-etil-2('SVhidroxipropin-3H-l-2.4-Triazol-3-ona.

Seguiram-se os procedimentos do Exemplo 24 excepto que o álcool (2S, 3S) não polar do passo (b) do Exemplo 24 foi convertido no (2S, 3S)-3-brosilato. A alquilação do brosilato seguida de hidrólise ácida do grupo protector SEM de acordo com os procedimentos do Exemplo 24(d) proporcionou o composto do título.

Exemplo 26 (2R-cisV4-r4-r4-r4-rr-5-í2.4-difluorofenilVtetra-hidro-5-flH-1.2.4-

triazol-l-ilmetil3furano-3-illmetoxilfenilll-piperazinillfenill2-4-di-hidro-2-rfRV l-etil-2fRVhidroxipronill-3H-1.2.4-triazol-3-ona.

Seguiram-se os procedimentos do Exemplo 24 excepto que o éster de metilo do éster láctico (R) foi substituído pelo éster de metilo do ácido láctico-(S) no passo (a) do Exemplo 24. O álcool (2R, 3S) foi usado nos passos (c) e (d) para proporcionar o composto do título.

Exemplo 27 (2R-cisV4- Γ4-|~4-Γ4-Γ Γ-5-f 2.4-difluorofenilVtetra-hidro-5-f 1 Η-1.2.4- tri azol -1 -ilmetiDfurano-3-illmetoxilfemll 1 -piperazinillfenill 2-4-di-hidro-2- Γ (S)-1 -etil-2(RVhidroxipropill-3H-1.2,4-Triazol-3-ona.

Seguiram-se os procedimentos do Exemplo 26 excepto que o álcool (2R, 3R) foi usado nos passos (c) e (d) para proporcionar o composto do título.

Exemplo 28 í2R-cisV4-r4-r4-r4-rr-5-í2.4-difluorofenir)-tetra-hidro-5-ílH-l,2.4-triazol-l-ilmetil')furano-3-illmetoxilfenilll-piperazinillfenill2-4-di-hidro-2-í(RV 1 -etil-3-hidroxipropin-3H-1.2,4-triazol-3-ona. a. Redução

Adicionou-se gota a gota 60 mL de uma solução THF 1M de LiAlH4 (60 mmoles) a (3R)-hidroxivalerato de metilo (5,28 g, 40,0 mmoles) dissolvido em 100 mL de THF anidro a 0-5°C. Permitiu-se que a solução aquecesse até à temperatura ambiente e à mistura assim formada adicionou-se sequencialmente, 2,5 mL de água, gota a gota, 2,5 mL de NaOH a 15% e 7,5 mL de água. A mistura reaccional assim formada foi agitada à temperatura ambiente durante 4 horas. Os sólidos inorgânicos foram removidos por filtração e o filtrado foi evaporado para dar 4,31 g de (3R)-l,3-pentanodiol. b. Formação do 1-O-SEM éter

Seguiu-se o procedimento do Exemplo 18(a) excepto que uma quantidade equivalente do produto do passo (a) deste Exemplo foi substituída pelo (2R, 3R)-2,3-butanodiol para proporcionar o composto do título. c.

Reaccão de Mitsunobu

Seguiu-se o procedimento do Exemplo 19(a) excepto que uma quantidade equivalente do produto do passo (b) deste Exemplo foi substituída pelo 2-SEM éter de (2R, 3R)-2,3-butanodiol para dar 3,34 g do p-nitrobenzoato correspondente. d. Hidrólise Básica

Seguiu-se o procedimento do Exemplo 19(b) excepto que uma quantidade equivalente do éster do p-nitrobenzoato do passo (c) deste Exemplo foi usado para proporcionar 1,88 g do 1-O-SEM éter de (3S)-l,3-pentanodiol. e. Brosilacão. Alquilacão e Hidrólise Ácida

Seguiram-se os procedimentos do Exemplo 18(b), (c), e (d) excepto que uma quantidade equivalente do produto do passo (d) deste Exemplo foi substituído pelo correspondente 1-0-SEM éter de (2R, 3R) 2,3-butanodiol usado no Exemplo 19(b) para produzir 1,04 g do composto do título deste Exemplo. [<x]“ - -8,42° (CHC13; c = 1).

Exemplo 29 í2R-cisV4-r4-[4-14-[7-5-f2.4-difluorofenilVtetra-hidro-5-( 1H-1.2.4-triazol-l-ilmetiDfurano-3-illmetoxilfenilll-piperazinillfenill2-4-di-hidro-2-rrSV l-etil-3-hidroxipropill-3H-1.2.4-triazol-3-ona.

Seguira-se os procedimentos (a) e (b) do Exemplo 28 para produzir l-0-SEM-(3R)-l,3-pentanodiol que foi directamente convertido no 3R brosilato seguindo os procedimentos do Exemplo 18(b). O 3R brosilato foi usado para -72-

ι ν ¢, alquilar ο produto do Exemplo 17 de acordo com os procedimentos do exemplo 18(c). O produto assim formado foi submetido a hidrólise ácida de acordo com os procedimentos do Exemplo 18(d) para proporcionar 368 mg (rendimento de 90%) do composto do título; [a]“ = -47,1 Γ (CHC13; c = 1).

Exemplo 30 í2R-cis)-4-r4-r4-r4-fr-S-(2.4-difluorofenin-tetra-hidro-5-('lH-1.2.4-triazol-l-ilmetil)-3-furanil1metoxilfenilll-piperaziniflfenill2-4-di-hidro-2-ri-hidroxi-f 2R)-butill-3H-1.2,4-triazol-3-ona. a. Preparação de (2S)-1.2-butanodiol

Hidrogenou-se uma solução de (2S)-3-buteno-l,2-diol que foi adquirida na Eastman Kodak, (3 g, 0,034 mmoles) em 40 mL de etanol na presença de 300 mg de Pd/C a 10% durante a noite. A mistura reaccional assim formada foi filtrada através de celite. O bolo de filtro assim formado foi lavado com etanol e os filtrados combinados foram evaporados para proporcionar 2,08 g (rendimento de 68%) do composto do título. b. Formação, brosilacão. alquilacão e hidrólise ácida do 1-O-SEM éter

Seguiram-se os procedimentos do Exemplo 18(a) - (d) excepto que se substitui uma quantidade equivalente do produto do passo (a) deste Exemplo pelo (2R, 3R) 2,3-butanodiol do Exemplo 18 para proporcionar o composto do título [a] l = -24,3° (CHC13; c = 1).

Exemplo 31 (2R-cisV4-[4-r 4-Γ4-ΓΓ-5-( 2.4-difluorofenil Vtetra-hidro-5-( 1 Η-1.2,4-triazol-l-ilmetilV3-furanillmetoxilfenilll-piperazinil1fenil12-4-di-hidro-2-ri-hidroxi-(2SVbutin-3H-1.2.4-triazo1-3-ona.

Seguiram-se os procedimentos do Exemplo 30 com a excepção de se ter substituído uma quantidade equivalente de (2R)-3-buteno-l,2-diol (disponível na Eastmand Kodak) por (2S)-3-buteno-l,2-diol no passo (a) do Exemplo 30. Os procedimentos do Exemplo 30(b) foram subsequentemente seguidos para produzir o composto do título [a] “ = -29,4° (CHCI3; c = 1).

Exemplo 32 í-¥2R-cis)-4-r4-r4r-5-í2.4-difluorofenintetra-hidro-5-ílH-1.2.4-triazol-1 -ilmetiDfurano-3-illmetoxilfenill-1 -piperazinir)fenil-2.4-di-hidro-2-r( SV 1 -etil-2í S Vhidroxipropin -3H-1.2.4-triazol-3-ona. a. (SV2-(benziloxí) propionaldeído por redução selectiva de ácido (SVÍQ-benziDláctico pirrolidina amida: Adicionou-se lentamente e com agitação, a uma solução do ácido S-(0-benzil)láctico pirrolideno amido preparado de acordo com o procedimento de Tetrahedron. 1989, vol. 45, p 57-67 (5 g, 0,0214 mol) dissolvido em 20 mL de tolueno arrefecido num banho de metanol gelado, 4,25 mL de RED-AL (solução 3,4M de hidreto bis(2-metoxietoxi) alumínio de sódio) em tolueno disponível na Aldrich Chemical Catálogo # 19, 619-3). A solução foi agitada durante 5 horas, temperada com 2,5 mL de acetona e subsequentemente com 35 mL de HC1 2N. A mistura assim formada foi extraída com EtOAc. Os extractos orgânicos foram lavados com água, NaHCOa e salmoura, seca sobre Na2S04 e evaporada para dar 0 produto do título. b. (SV2-(FeniloxiVN-(Formllaminol propanimina. O propionaldeído do passo (a) (1 g, 16,09 mmol) foi adicionado gota a gota a uma solução de hidrazina fórmica (0,73 g, 12,18 mmol) dissolvido em 5 mL de metanol. A mistura reaccional assim formada foi agitada durante a noite. O solvente foi removido por evaporação e o resíduo assim formado foi agitado com éter etílico. O excesso de hidrazina fórmica não dissolvido foi removido por filtração e o éter foi removido para proporcionar um resíduo que foi submetido a cromatografia em gel .de sílica(/) usando 20% EtOAc: hexano (v:v) para dar 805 mg do produto do título como um sólido ceroso amarelo-claro com forte actividade UV; ms [M + H]+ = 207. c. Ácido 2-Í3-Í2S. 3Sy2-ÍFeniloxitpentil)fórrnico hidrazido

Adicionou-se brometo de etilmagnésio (1,3 mL, 3,9 mmol, 3,0 molar em éter etílico) a uma solução agitada de 200 mg, 0,97 mmol da propanimina do passo (b) em 10 mL de éter etílico a 0°C. A mistura reaccional assim formada foi agitada durante a noite à temperatura ambiente e temperada com água. A camada orgânica foi separada e o solvente removido para proporcionar um resíduo que foi submetido a cromatografia em gel de sílica usando 30 a 50% de EtOAc:hexano (v:v) para proporcionar 113 mg; (rendimento de 50%) do composto do título como um óleo. A razão do isómero S,S: isómero S,R no produto foi 94:6. Quando a reacção foi repetida na presença de 1,2 equivalentes de bis(trimetilsilil) acetamida a razão S,S:S,R aumentou para 99:1 MS: [M + H]+ = 237. d. Reaccão de Ciclizacão

Agitou-se uma solução de 156,3 mg, 0,66 mmol do produto do passo (c) e 400 mg, 0,60 mmol de 17F do Esquema V e 1 mole de DBU (1,8- diaza biciclo [5.4.0]undec-7-eno) em volume a 80°C durante seis horas; aumentou-se a temperatura até 100° a 110°C e manteve-se a agitação a esta temperatura durante a noite. Permitiu-se que a mistura reaccional arrefecesse até à temperatura ambiente e manteve-se a agitação durante o fim de semana. Removeu-se o solvente por evaporação e o produto bruto foi purificado em TLC preparativo (80% EtOAc/ hexano, v:v) para proporcionar 200 mg do éter benzílico do produto do título deste Exemplo como um sólido espumante; MS: [M + H]+ = 792. Esta reacção de ciclização é a invenção de Mergelsberg, Gala et aL que é divulgada no Pedido de Patente dos E.U. S.N. (Referência do mandatário #CD0475), do mesmo requerente do presente pedido. e.

Hidrogenólise

Adicionou-se 40 mg de negro de Pd em carbono e 4 mL de ácido fórmico à solução do éter benzílico (190 mgs, 0,24 mmol) do passo d dissolvida em 10 mL de metanol. O frasco reaccional foi selado com um balão e aquecido a 60°C durante quatro horas. Removeram-se os catalisadores por filtração através de um bolo de celite e o filtrado foi vertido para água fria. Ajustou-se o pH da solução assim formada para um valor de 4 a 5 com amónia. Extraiu-se a mistura assim formada com EtOAc. Separou-se e secou-se sobre Na2S04 a camada orgânica. Removeu-se o solvente para proporcionar um produto bruto que foi purificado em TLC preparativo (5% metanol: CH2CI2, v:v) como um sólido bronzeado. MS: [M + H]+ = 701. [a] = -28,4° (c = 1,0, CHC13;).

Lisboa, 18 de Outubro de 2001

ALBERTO CANELAS Agente Oficial da Propriedade Industrial RUA VICTOR CORDON, 14 1200 LISBOA

Claims

- 1 - REIVINDICAÇÕES 1. Um composto representado pela fórmula I

em que X é independentemente ambos F ou ambos Cl ou um X é independentemente F e o outro é independentemente Cl; Ri é um grupo alquilo (C4 a C5) de cadeia linear ou ramificada substituído com uma porção hidroxi.
2. Um composto da Reivindicação 1 em que Rj é um grupo alquilo C4- ou C5- substituído com um grupo hidroxi seleccionado de: - C H(C2H5) C H(OH)CH3, - C H(C2H5)CH2CH2OH, -(CH2)2 C H(OH)C2H5, - C H(CH3) C H(OH)CH3, - C H(C2H5)CH2OH, - C H(CH3)CH2CH2OH em que os carbonos com o asterisco (*) tem a configuração absoluta R ou S.
3. Um composto representado pela fórmula III

-2- em que R5 é -Me >a’0H

li*·- ρΓΜ® /S OH

I ,Λ », ‘"· .4 ί Me

Me

Me 5/ _Me > . J a OH >*0W Μβί R J?· p^Me Me OH * ÍV_Mft V-OH OU \-OH m/s

OH 1
4. Um composto representado pela fórmula IV

>~NCy^QhN^ [IV] r9 em que R9 = - C H(C2H5) C H(OH)CH3 ou - C H(CH3) C H(OH)CH3.
5. Um composto da Reivindicação 3 em que R5 é
6. Um composto com a fórmula
7. Um éster farmaceuticamente aceitável de um composto reivindicado em qualquer uma das reivindicações anteriores.
8. Um éster farmaceuticamente aceitável de um composto reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em que o hidrogénio da referida porção hidroxi é substituído por um grupo de fórmula (CHR7)s-(OCHR7CHR7)t— ORa em que R7 é H ou grupo alquilo (Ci-Cê) de cadeia linear ou ramificada; e s é um número inteiro de 1 a 6; t é um número inteiro de 1 a 6; R8 é R7 ou -(CHR7)S-CO2R7.
9. Um éster farmaceuticamente aceitável de um composto reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em que o hidrogénio da referida porção hidroxi é substituído por um grupo de fórmula

O em que z é 0 ou 1; R7 é H ou um grupo alquilo (Ci-Cg) de cadeia linear ou ramificada e de preferência é Η; n é um número inteiro de 0 a 6 e W é H, CH2Ar ou 0H e em que Ar é fenilo ou fenilo substituído com halo, ciano, nitro ou tri-halometilo.
10. Um éster farmaceuticamente aceitável de um composto reivindicado em qualquer uma das reivindicações anteriores, em que o hidrogénio da referida porção hidroxi é substituído por SO(OH)2.
11. Um éster farmaceuticamente aceitável de um composto reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em que o hidrogénio da referida porção hidroxi é substituído por um grupo de fórmula

o em que R7 é definido como em cima, W é um número inteiro de 1 a 5 de preferência Wédela3;qé = 3ou4eYé CHR7, -O-, NH, NR7, S, SO ou SO2.
12. Um éster farmaceuticamente aceitável de um composto t -5- <_____ reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em que o hidrogénio da referida porção hidroxi é substituído por um grupo alcanoílo ou alcenoílo de cadeia linear ou ramificada que é facultativamente substituído com uma porção hidroxi ou éter.
13. Um éster farmaceuticamente aceitável de um composto reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em que o referido grupo hidroxi é esterificado com um resíduo de aminoácido natural, em que os grupos amino são facultativamente protegidos com grupos protectores convencionas.
14. Um éster farmaceuticamente aceitável de um composto reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em que o hidrogénio da referida porção hidroxi é substituído por um grupo de fórmula o 9 —c-(CR7R7)r^"OH em que R7 é definido como em cima e k é um número inteiro de 1 a 8.
15. Um éster farmaceuticamente aceitável de um composto reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em que o hidrogénio da referida porção hidroxi é substituído por um grupo de fórmula (CHR7)s-(OCHR7CHR7) - 0R8 em que R7 é H ou grupo alquilo (CrC6) de cadeia linear ou ramificada, Rs é R7 ou 0 II — (CHR7)s“ C_0R7 esélaóetélaó. -6- At í>*-f \ O f · ^ -4.. \ X
16. Um éster farmaceuticamente aceitável de um composto reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, em que o hidrogénio da referida porção hidroxi é substituído por um grupo de fórmula

O II z^CHR7)s-(OterP(OW)2 em que z é 0 ou 1, m é 0 ou 1, n é 0 a 6, e R7 é H ou um grupo alquilo (CrCâ) de A cadeia linear ou ramificada e W é H, CH2Ar ou OH em que Ar é fenilo ou fenilo substituído com halo, ciano, nitro ou tri-halometilo.
17. Um éster farmaceuticamente aceitável de um composto de acordo com a Reivindicação 5 ou Reivindicação 6 em que o hidrogénio da porção hidroxi é substituído por

o r z—(Chr7)„—(Ohsr Pjpw)2 em que z é 0 ou 1; R7 é H; m é 0 oul, n é um número inteiro de 0 a 6 e W é H.
18. Um éster farmaceuticamente aceitável de um composto de acordo com a Reivindicação 5 ou Reivindicação 6, em que o hidrogénio da porção hidroxi é substituído por o o ~r-C (Οφη-Ο- P(OH)2 -7-
19. Um composto com a fórmula
20. Um sal farmaceuticamente aceitável de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores.
21. Uma composição farmacêutica para tratar ou prevenir infecção fúngica compreendendo uma quantidade antifúngica eficaz de um composto de qualquer umas das reivindicações anteriores juntamente com um veículo para a mesma farmaceuticamente aceitável.
22. A composição farmacêutica da Reivindicação 21, em que o modo de administração é oral ou parentérico.
23. Um método para obter compostos de fórmula III da * * Reivindicação 3 em que R4 é C H(C2H5) C H(OH)CH3, em que a estereoquímica -8- absoluta em cada carbono com asterisco (*) é a mesma, i.e., S,S ou R,R substancialmente livre de S,R ou R,S e em que o éster do ácido láctico-S ou R é convertido no amido correspondente, que é selectivamente reduzido ao aldeído correspondente e em seguida convertido no N-formil amino propanimina correspondente que compreende a reacção do N-formil amino propanimina de fórmula NNHCHO * .11 CH3CH(OPG)CK com brometo de etilmagnésio em condições de reacção de Grignard suficientes para produzir um composto de fórmula NHNHCHO í CH3CH(OPG)CT(C2H5) em que a estereoquímica absoluta induzida no carbono com o duplo asterisco ( ) é substancialmente a mesma que a do carbono com um único asterisco e em que PG é um grupo protector de hidroxi convencional tal como o benzilo.
24. Um método da Reivindicação 23, em que o éster de metilo do ácido láctico-S é usado como o material de partida e a reacção de Grignard é conduzida na presença de mais do que um equivalente de bis(trimetilsilil)ace-tamida. Lisboa, 18 de Outubro de 2001 ^-- ALBERTO CANELAS Agente Oficial dá Propriedade Industrial RUA VICTOR CORDON, 14 1200 LISBOA