PT92403B - Processo para a preparacao de glicoesfingolipidos com grupos susceptiveis de aclopamento na fraccao esfingoide e de composicoes farmaceuticas que os contem - Google Patents
Processo para a preparacao de glicoesfingolipidos com grupos susceptiveis de aclopamento na fraccao esfingoide e de composicoes farmaceuticas que os contem Download PDFInfo
- Publication number
- PT92403B PT92403B PT92403A PT9240389A PT92403B PT 92403 B PT92403 B PT 92403B PT 92403 A PT92403 A PT 92403A PT 9240389 A PT9240389 A PT 9240389A PT 92403 B PT92403 B PT 92403B
- Authority
- PT
- Portugal
- Prior art keywords
- preparation
- compounds
- glycosphingolipids
- coupling
- formula
- Prior art date
Links
- 150000002339 glycosphingolipids Chemical class 0.000 title claims abstract description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 11
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 9
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 4
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 title 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims abstract description 21
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims abstract description 21
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims abstract description 21
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 125000002657 sphingoid group Chemical group 0.000 claims abstract 3
- 238000005949 ozonolysis reaction Methods 0.000 claims description 14
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 11
- 238000006268 reductive amination reaction Methods 0.000 claims description 10
- WWUZIQQURGPMPG-KRWOKUGFSA-N sphingosine Chemical compound CCCCCCCCCCCCC\C=C\[C@@H](O)[C@@H](N)CO WWUZIQQURGPMPG-KRWOKUGFSA-N 0.000 claims description 10
- YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N C16 ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@@H](CO)[C@H](O)C=CCCCCCCCCCCCCC YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N 0.000 claims description 6
- CRJGESKKUOMBCT-VQTJNVASSA-N N-acetylsphinganine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)[C@H](CO)NC(C)=O CRJGESKKUOMBCT-VQTJNVASSA-N 0.000 claims description 6
- 229940106189 ceramide Drugs 0.000 claims description 6
- ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)C(=O)NC(CO)C(O)C=CCCC=C(C)CCCCCCCCC ZVEQCJWYRWKARO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 6
- VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N newbouldiamide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(O)C(O)C(CO)NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC VVGIYYKRAMHVLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- WWUZIQQURGPMPG-UHFFFAOYSA-N (-)-D-erythro-Sphingosine Natural products CCCCCCCCCCCCCC=CC(O)C(N)CO WWUZIQQURGPMPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- -1 cyanoborohydride Chemical compound 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims 1
- 210000003918 fraction a Anatomy 0.000 claims 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 19
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 abstract description 8
- 125000002485 formyl group Chemical class [H]C(*)=O 0.000 abstract description 8
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 abstract description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 abstract 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 abstract 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- QMXCRMQIVATQMR-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-pyridin-2-ylsulfanylpropanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCSC1=CC=CC=N1 QMXCRMQIVATQMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 description 9
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical group ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QMMFVYPAHWMCMS-UHFFFAOYSA-N Dimethyl sulfide Chemical compound CSC QMMFVYPAHWMCMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 6
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 5
- LOTKRQAVGJMPNV-UHFFFAOYSA-N 1-fluoro-2,4-dinitrobenzene Chemical group [O-][N+](=O)C1=CC=C(F)C([N+]([O-])=O)=C1 LOTKRQAVGJMPNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 4
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 3
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- JSPNNZKWADNWHI-PNANGNLXSA-N (2r)-2-hydroxy-n-[(2s,3r,4e,8e)-3-hydroxy-9-methyl-1-[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoctadeca-4,8-dien-2-yl]heptadecanamide Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC[C@@H](O)C(=O)N[C@H]([C@H](O)\C=C\CC\C=C(/C)CCCCCCCCC)CO[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O JSPNNZKWADNWHI-PNANGNLXSA-N 0.000 description 2
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 2
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 2
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 2
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 229930183167 cerebroside Natural products 0.000 description 2
- RIZIAUKTHDLMQX-UHFFFAOYSA-N cerebroside D Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(=O)NC(C(O)C=CCCC=C(C)CCCCCCCCC)COC1OC(CO)C(O)C(O)C1O RIZIAUKTHDLMQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N sodium cyanoborohydride Chemical compound [Na+].[B-]C#N BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 101000610640 Homo sapiens U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N Ozone Chemical compound [O-][O+]=O CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101001110823 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) 60S ribosomal protein L6-A Proteins 0.000 description 1
- 101000712176 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) 60S ribosomal protein L6-B Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 102100040374 U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 Human genes 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 150000001414 amino alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 238000010504 bond cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 125000001549 ceramide group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 210000003022 colostrum Anatomy 0.000 description 1
- 235000021277 colostrum Nutrition 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 210000001723 extracellular space Anatomy 0.000 description 1
- 238000003682 fluorination reaction Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- DDOVBCWVTOHGCU-QMXMISKISA-N n-[(e,2s,3r)-3-hydroxy-1-[(2r,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxynonadec-4-en-2-yl]octadecanamide Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@H]([C@H](O)\C=C\CCCCCCCCCCCCCC)CO[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O DDOVBCWVTOHGCU-QMXMISKISA-N 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Polymers 0.000 description 1
- OIPPWFOQEKKFEE-UHFFFAOYSA-N orcinol Chemical compound CC1=CC(O)=CC(O)=C1 OIPPWFOQEKKFEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006385 ozonation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- WHMDPDGBKYUEMW-UHFFFAOYSA-N pyridine-2-thiol Chemical compound SC1=CC=CC=N1 WHMDPDGBKYUEMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 1
- 125000004085 sialosyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 229940126577 synthetic vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- PNVUZMNHWBDJQY-UHFFFAOYSA-N trioxidanylmethane Chemical class COOO PNVUZMNHWBDJQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
- C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
- C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
- C07H15/10—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical containing unsaturated carbon-to-carbon bonds
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
Descriç3o da patente de invençSo de BEHRINGWERKE AKTIENGESELLSCHAFT, alenS, industrial e comercial, com sede em D-355O Marburg, Alemanha Ocidental, (inventores: Prof. Dr. Herbert Wiegand e Silke Bosslet, residentes na Alemanha Ocidental), para PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE GLICOESFINOLÍPIDOS COM GRUPOS SUSCEPTÍVEIS DE ACOPLAMENTO NA FRACÇÃO ESFÍNGOIDE E DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS
QUE OS CONTEM
Descrição
A presente invenção refere-se à modificação da fracção química esfingóide de glicoesfingolípidos. Por meio de uma série de reacções foi possível introduzir um grupo amina na posição da dupla ligação entre átomos de carbono na fracção esfingóide após cisão do aldeido de cadeia longa.
GSP
Os glicoesfingolípidos (Formula i) são lipidos da membrana plasmática que são constituídos por uma fracção hidrófila de um hidrato de carbono e por uma fracção hidrófoba de ceramida. A fracção de ceramida é constituída por esfingosina, um aminoálcool de cadeia longa, e por um
- 1 ácido gordo ligado por uma ligação do tipo amida
Ácido Gordo . ι j
--1 ,
Fracção de Ceramida Fracção de Hidrato de Carbono
Com esta fracção hidrófoba em dupla cauda os glicoesfingolípidos encontram-se fixos de tal modo na membrana plasmática exterior que a respectiva cadeia de oligossacárido sobressai no espaço extracelular.
Apesar do intenso trabalho de investigação ainda não é completamente conhecida a função biológica dos glicoesfingolípidos? no entanto parece que desempenham um papel na regulação do comportamento do crescimento e da diferenciação celular. Resultados que mostram que ocorrem em maiores quantidades relativas principalmente glicoesfingolipidos que contem ácido siálico, gangliósidos de origem neuroectodérmica de alguns tumores, enquanto que em tecidos normais estes compostos são expressos em quantidades mais reduzidas, lavaram a que fossem considerados de interesse como antigenes associados a tumores para o diagnóstico e para a terapia de tumores.
A fracção de hidrato de carbono apresenta neste caso um interesse especial. Foi possivel demonstrar
(pedido de Patente Alemã P 38 37 623.7) que o açúcar sialosílico correspondente isolado a partir de uma origem como o colostro de vaca e acoplado a uma protéina de suporte# pode imitar epítopos de gangliósidos: anticorpos monoclonais antigangliósidos reagem com estas neoglicoproteínas.
A fim de se poder estabelecer uma ligaçao dirigida universal aplicável a todos os glicoesfingolípidos, é necessária a modificação química da fracção esfingóide dos glicoesfingolípidos para o processamento adicional desta règião. Isto diz respeito à preparaçao de vacinas sintéticas glicoesfingolipidicas. Adicionalmente a incorporação de um grupo com capacidade para acoplamento também para locais de interesse é relevante na investigação básica, por exemplo é possível utilizar glicoesfingolípidos acoplados a enzimas marcadas em investigação histológica, por exemplo para caracterização de lectinas de mamíferos como receptores para glicoesfingolípidos.
A presente invenção mostra que por meio das reacções seguidamente descritas é possível introduzii um grupo amina como grupo funcional na fracção esfingoide de glicoesfingolípidos após cisão de um aldeído de cadeia longa. Deste modo a fracção de hidrato de carbono conserva-se ligada por uma ligação glicosídica à fracção de ceramida sem alteração.
O grupo amina introduzido possibilita uma serie de outras reacções, por exemplo o acoplamento a reagentes heterobifuncionais para a síntese de conjugados de glicoesfingolípidos e a sua utilização como vacilas sintéticas na terapia de tumores de origem neuroectodérmica.
Para além da introdução de um grupo amina existe também a possibilidade de deixar reagir o produto intermediário (que possui um grupo aldeído) directamente comJoutras moléculas que possuam grupos capazes de acoplamen3 to, por exemplos grupos amina de proteínas, reagentes de acoplamento, etc., Nãs reacções deve-se ter em consideração qu o produto intermediário com os grupos aldeído não e muito estável e que em meio alcalino a fracção de hidrato de carbono á eliminada.
As principais reacções para a introdução dos grcpos com capacidade de acoplamento na posição da dupla ligação entre átomos de carbono na fracção esfingóide são as seguintes:
1. A dupla ligação acima referida e cindica por ozono (H. Wiegandt e G. Baschang, Z. Naturforschung 20 6, (1965), 164-166) e o derivado de metoxi-hidroperóxido obtido como produto secundário (H. Wiegandt, Ang Chem. Intl. Ed. 7, (1968) 87-96) é reduzido a aldeído em metanol por meio da adição de sulfureto de dimetilo (Pappas et al., Tetrahedron Letters, 36 (1966), 4273-4278).
OH
CH 2-o-GLICOSIIÍO
O composto obtido é estável apenas em meio neutro e ácido? em meio alcalino a fracção de hidrato de carbono e eliminada.
2. Após eliminação do aldeido de cadeia longa por extracção com hexano submete-se o produto da ozonólise em metanol a uma aminação redutiva por adição de acetato de amónio 1 M e de ciano-boro-hidreto de sódio (Wiegandt e Ziegler, Hoppe-Seyler·s Fhysiol. Chem. 355, (1974), 11-18).
CH^-O-iGUCOSi:
NaOOBH3
NH^Ac 1 M cm Metanol
Todas as fases reacionais decorrem com um rendimento muito elevado e podem ser seguidas por cromatografia em camada fina; o eluente é clorofórmio/metanol/ /água (65:25:4). A detecção dos produtos de reacção sobre as placas de cromatografia etn camada fina e feita com vapores de ibdo; ou por pulverização com reagente de ninidrina ou de fluoram e orcina.
produto de ozonólise apos a aminação redutiva é detectável positivamente sobre as placas de cromatografia em camada fina por ninidrina e por fluorarem e pode ser feito reagir completamente com reagentes específicos para grupos amina como o fluorodinitrobenzeno (reagente de Sanger), (Itasaka e Hori, J. Biochem. 85, (9179), 1469-1481) ou o SPDP (N-succinimidil-3-(3-piridilditio)-propionato) (Carlsson et al., Biochem, J. 173, (1978), 723-737).
A presente invenção refere-se ainda a glicoesfingolipidos com grupos capazes de acoplamento na posição da dupla ligação entre átomos de carbono, sendo cindido um aldeído de cadeia longa e ficando inalterado o resto da molécula e especiaimente a ligação glicosídica da
fracção de açúcar, em que o grupo capaz de acoplamento e de preferência um grupo amina ou um grupo aldeído, bem como a um processo para a sua preparação e a sua utilização para o acoplamento com parceiros de reacção adequados e como componentes de composições farmacêuticas.
A presente invenção e adicionalmente ilustrada pelos exemplos que se seguem e definida pelas reivindicações.
Sxemplo As
1. Ozonólise
Num balão de reaoção dissolveram-se 6 mg de cerebrósido (galactosilceramida) em 5 ml de metanol e submeteram-se a ozonização (1 bolha por segundo) ate se detectar ozono não consumido por meio de coloração violeta da solução de detecção de KI-amido
2. Redução e aldeído
Sm seguida purgou-se a mistura reaccional com azoto, adicionaram-se 30 ;ul de sulfureto de dimetilo e deixou-se em repouso de um dia para o outro. Após evaporação à secura da solução em evaporador rotativo a frio eliminou-se o aldeído de cadeia longa libertando pela ozonólise por extracção com hexano (3 x 2 ml).
3. Aminação redutiva do produto da ozonólise
Dissolveu-se o resíduo da extracção em 4 ml de acetato de amónio 1 M em metanol, adicionaram-se 15 mg de ciano-boro-hidreto de sódio e aqueceu-se a mistura reaccional a 80°C durante 4 a 5 horas sob refluxo.
Em seguida eliminaram-se os sais do produto da ozonólise apos a aminaçâo redutiva por meio de cromatografia de fase invertida (RP-18) e purificou-se por passa gem através de uma coluna de gel de sílica.
4. ReacçSo do produto da ozonólise após a aminaçâo redutiva com fluorodinitrobenzeno.
Dissolveu-se uma alíquota do produto da ozonólise após a aminaçâo redutiva em 500 pl de metanol e adicionaram-se à mistura reaecional 4 gotas de trietilami na e 20 jil de fluorodinitrobenzeno a 5% em etanol.
A reacção prosseguiu à temperatura ambiente com agitação intermitente durante 1 a 2 horas.
Foi possível identificar imediatamente o dérivado de dinitrofenilo obtido por meio da sua cor amarela na placa de cromatografia em camada fina (placas HPTLC, gel de sílica 60 (Merck, Darmstadt); eluente: clorofórmio/metanol/água, 65:25:4).
Exemplo B
Acoplamento do produto da ozonólise após aminaçâo redutiva dos gangliósidos GM3, GD3, GE2 e GMl em albumina de soro humano (ASH) por meio do reagente de acoplamento heterobifuncional N-succinimidil-3-(2-piridiltio)-propionato (SPDP)t síntese de conj ugados com um grau de derivatizaçâo de 16 a 18 derivados de gangliósido por molécula de ASH.
1. Ρχ-eparaçâo do produto da ozonólise após aminaçâo redutiva dos gangliósidos GM3, GD3, GM2 e GMl
A preparação foi levada a efeito como no Exemplo A para o cerebrósido descrito em 1. a 3.-.
•4Í-·
Por análises de espectro de massa dos derivados de GM1 e de GM3 foi confirmada a estrutura esperada.
As fases de fracção seguintes;
2. Reacção do produto da ozonólise após aminação redutiva com SPDP
3. Reacção de ASH com SPDP
4. Redução do derivado ASH-3PDP
5. Acoplamento do derivado do gangliósido com o derivado proteico bem como os respectivos métodos de détecção foram efectuados de modo análogo aos métodos descritos por J. Carlson et al., (1987) Biochem. J. 173, 723-737 e no pedido de Patente de DE P 38 37 623.7.
As fases 2 e 3 foram levadas a efeito em tampão de fosfato de sódio 0,1 M a pH 7,5 com um excesso de 3 a 5 equivalentes molares (em 3. referido aos grupos epsilon-amonosililo livres) de SPDP. A separação do derivado proteino-SPDP de 3. foi efectuado numa coluna de Sephadex G-25 que foi eluida com o tampão para a reacção seguinte (tampão de fosfato de sódio 0,1 M, pH 6, EDTA 5 mM). A purificação do derivado de gangliósido após reacção com SPDP foi efectuada por meio de cromatografia de fase invertida (RP18).
A identificação por cromatografia em camada fina dos vários produtos intermediários foi efectuada por meio do diferente comportamento na eluição sobre placas de gem de sílica G-60 com o eluente cloroformio/ /metano1/solução aquosa de cloreto de cálcio a 0,2% (65í 25:4) ou (50:40:10).
A fase 4 foi levada a efeito como se segue;
- 9 Efectuou-se a redução das pontas de dissulfureto do derivado ASH-SPDP introduzidas de novo por meio da derivatização por adição de ditiotreitol 25 mM em tampão de fosfato de sódio 0,1 M a pH 6 e EDTA 5 mM com cisão de 2-tiopiridona. Nestas condições reaccionais as pontesde dissulfureto nativas da proteína não foram reduzidas.
A reacção procedeu à temperatura ambiente e o tempo de reacção foi de 1 a 2 horas.
Proteína
(4)
Proteína N-C--SH +
A separação do derivado ASH-SPDP reduzido foi efectuada numa coluna de Sephadex G-25 com tampão de fosfato de sódio 0,1 M a pH 6 com SDTA 5 mM como tampão eluente.
Por reacção de ASH com SPDP em defeito foi possível preparar derivados de ASH seleccionados com o grau de derivatização pretendido.
Os derivados de gangliósidos foram feitos reagir com ASH gue tinha sido derivatizada com 16 a 18 moléculas de SPDP. A transformação foi completa: o grau de derivatização do produto do acoplamento foi de 16 a 18 derivados de gantliósido (de cada um dos gangliósidos GM3, GD3, GM2 e GMl) por molécula de ASH.
O acoplamento (fase reaccional ns 5) foi realizada em pormenor como se segue:
Fez-se reagir o derivado ASH-SPDP reduzido imediatamente com o derivado gangliósido-SPDP. Empregou-se o derivado gangliósido-SPDP num excesso molar de 1 a 5 vezes em relação aos grupos epsilon-aminolisilo da proteína, A reacção demorou 24- a 48 horas à temperatura ambiente.
Claims (2)
- REIVINDICAÇÕES- 19 Processo para a preparação de glicoesfingollpidos com grupos reactivos na fracção esfingóide com a fórmula (2) ou (3).nas quais X ou Y significam um grupo susceptível de acoplamen.v to que permita um acoplamento sob condições nas quais a molécula de partida não sofra qualquer outra alteração, caracterizado por se levar a efeito uma reacção de ozonólise a partir de glicoesfingolipidos com esfingosina na fracção de ceramida.
- - 2« Processo para a preparação de compos0 tos da formula (2) ou (3) corn X = NH, e Y = C , caracte\ rizado por se levar a efeito uma reacção de ozonólise a partir de glicoesfingolipidos com esfingosina na fracção de ceramida.3aProcesso para a preparação de compostos da fórmula (2) com X - NH , caracterizado por se levar a efei z to após uma reacção de ozonólise a partir de glicoesfingolipidos e esfingosina na fracção de ceramida uma aminação redutora com um cianoboro-hidreto alcalino.- 4a Processo para a preparação de compostos de acoplamento caractérizado por se fazerem reagir moléculas apropriadas com compostos da fórmula (2) ou (3).- 5a Processo para a preparação de compostos de acoplamento reactivos caracterizado por se acoplarem reagentes heterobifuncionais com compostos da fórmula (2) ou (3).- 6β Processo para a preparação de conjugados proteicos caracterizado por se fazerem reagir compostos da fórmula (2) ou (3) ou compostos obtidos de acordo com a reivindicação 5 com proteínas.--7a Processo para a preparação de uma composição farmacêutica caracterizado por se incorporar como principio activo um composto obtido de acordo com o processo de qualquer das reivindicações 1, 2, 3, 4, 5 ou 6, em conjunto com substâncias veiculares apropriadas.A requerente reivindica a prioridade do pedido alemão apresentado em 27 de Novembro de 1988, sob
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3840044A DE3840044A1 (de) | 1988-11-27 | 1988-11-27 | Glykosphingolipide mit kopplungsfaehiger gruppe im sphingoidanteil, ihre herstellung und verwendung |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PT92403A PT92403A (pt) | 1990-05-31 |
| PT92403B true PT92403B (pt) | 1995-08-09 |
Family
ID=6367998
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PT92403A PT92403B (pt) | 1988-11-27 | 1989-11-24 | Processo para a preparacao de glicoesfingolipidos com grupos susceptiveis de aclopamento na fraccao esfingoide e de composicoes farmaceuticas que os contem |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US5599914A (pt) |
| EP (1) | EP0371414B1 (pt) |
| JP (1) | JP2919881B2 (pt) |
| KR (1) | KR0147845B1 (pt) |
| AT (1) | ATE155141T1 (pt) |
| AU (1) | AU621688B2 (pt) |
| CA (1) | CA2003662C (pt) |
| DE (2) | DE3840044A1 (pt) |
| DK (2) | DK592489A (pt) |
| ES (1) | ES2104558T3 (pt) |
| PT (1) | PT92403B (pt) |
Families Citing this family (24)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3837623A1 (de) * | 1988-11-05 | 1990-05-10 | Behringwerke Ag | Neoglykoproteine, ihre herstellung und verwendung |
| US6720184B1 (en) | 1991-08-05 | 2004-04-13 | Emory University | Method of altering sphingolipid metabolism and detecting fumonisin ingestion and contamination |
| JPH0559081A (ja) * | 1991-08-29 | 1993-03-09 | Kirin Brewery Co Ltd | 新規スフインゴ糖脂質、その製造法および使用 |
| US5936076A (en) * | 1991-08-29 | 1999-08-10 | Kirin Beer Kabushiki Kaisha | αgalactosylceramide derivatives |
| TW261533B (pt) * | 1992-07-16 | 1995-11-01 | Kirin Brewery | |
| EP0666268B1 (en) * | 1992-10-22 | 2000-04-19 | Kirin Beer Kabushiki Kaisha | Novel sphingoglycolipid and use thereof |
| ATE372783T1 (de) | 1993-01-22 | 2007-09-15 | Sloan Kettering Inst Cancer | Gangliosid-klh-konjugatimpfstoffe mit qs-21 zur verzögerung des wiederauftretens eines melanoms |
| EP0694558B1 (en) * | 1993-04-15 | 1999-01-27 | Kirin Beer Kabushiki Kaisha | Novel sphingoglycolipid and use thereof |
| US5612030A (en) * | 1995-01-17 | 1997-03-18 | University Of Kentucky Research Foundation | Anti-idiotype monoclonal antibody 1A7 and use for the treatment of melanoma and small cell carcinoma |
| US5935821A (en) | 1995-01-17 | 1999-08-10 | Board Of Trustees Of The University Of Kentucky | Polynucleotides related to monoclonal antibody 1A7 and use for the treatment of melanoma and small cell carcinoma |
| US5977316A (en) * | 1995-01-17 | 1999-11-02 | The Board Of Trustees Of The University Of Kentucky | Monoclonal antibody 1A7 and related polypeptides |
| WO1998042718A1 (en) * | 1997-03-26 | 1998-10-01 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Method for generating saccharide fragments |
| JP3390965B2 (ja) * | 1997-09-12 | 2003-03-31 | 理化学研究所 | 糖結合スフィンゴシンを含有するポリマー化合物 |
| US6355244B1 (en) | 1997-11-17 | 2002-03-12 | University Of Kentucky Research Foundation | Methods and compositions for the treatment of psoriasis |
| EP1053243B1 (en) * | 1998-02-12 | 2011-03-30 | Emory University | Sphingolipid derivatives and their methods of use |
| MXPA00012842A (es) | 1998-06-24 | 2004-06-22 | Univ Emory | Uso de 3'-azido-2',3'-didesoxiuridina en combinacion de drogas adicionales contra el vih para la manufactura de un medicamento para el tratamiento del vih. |
| EP2217250A4 (en) | 2007-11-09 | 2011-01-05 | California Inst Of Techn | IMMUNOMODULATING COMPOUNDS AND RELEVANT COMPOSITIONS AND METHODS |
| WO2011127302A2 (en) | 2010-04-07 | 2011-10-13 | Yue Shen | Vehicle for delivering a compound to a mucous membrane and related compositions, methods and systems |
| US20110287048A1 (en) | 2010-05-20 | 2011-11-24 | Round June L | Antigen Specific Tregs and related compositions, methods and systems |
| EP2731617A4 (en) | 2011-07-12 | 2015-07-01 | Brigham & Womens Hospital | LIPID-BASED PSA COMPOSITIONS, METHOD FOR THEIR INSULATION AND USE METHOD THEREFOR |
| JP2016521284A (ja) | 2013-05-10 | 2016-07-21 | カリフォルニア インスティチュート オブ テクノロジー | 大腸ガンのプロバイオティクスによる防止および処置 |
| WO2016201342A1 (en) | 2015-06-10 | 2016-12-15 | California Institute Of Technology | Sepsis treatment and related compositions methods and systems |
| JP6918365B2 (ja) | 2015-08-19 | 2021-08-11 | プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ | 脂質化ｐｓａ組成物および方法 |
| EP3484441A4 (en) | 2016-07-15 | 2020-03-18 | President and Fellows of Harvard College | GLYCOLIPID COMPOSITIONS AND METHOD FOR USE |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2403098A1 (fr) * | 1977-09-19 | 1979-04-13 | Merieux Inst | Nouveau materiau capable de fixer de facon reversible des macromolecules biologiques, sa preparation et son application |
| JPS6057254A (ja) * | 1983-09-09 | 1985-04-03 | Dainabotsuto Kk | 免疫学的測定法による糖脂質の定量方法 |
| DE3410238A1 (de) * | 1984-03-21 | 1985-10-03 | Bayer Ag, 5090 Leverkusen | Glycolipid-aehnliche substanzen in liposomenform |
| IT1199116B (it) * | 1984-07-03 | 1988-12-30 | Fidia Farmaceutici | Derivati di gangliosidi |
| DK17885D0 (da) * | 1985-01-14 | 1985-01-14 | Karlsson Karl Anders | Antiviralt middel |
| JP2782069B2 (ja) * | 1988-08-12 | 1998-07-30 | 和光純薬工業株式会社 | ガングリオシド類の新規な製造法 |
| DE3837623A1 (de) * | 1988-11-05 | 1990-05-10 | Behringwerke Ag | Neoglykoproteine, ihre herstellung und verwendung |
-
1988
- 1988-11-27 DE DE3840044A patent/DE3840044A1/de not_active Withdrawn
-
1989
- 1989-11-24 US US07/440,798 patent/US5599914A/en not_active Expired - Fee Related
- 1989-11-24 DK DK592489A patent/DK592489A/da not_active Application Discontinuation
- 1989-11-24 PT PT92403A patent/PT92403B/pt not_active IP Right Cessation
- 1989-11-24 JP JP1303463A patent/JP2919881B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1989-11-24 AU AU45481/89A patent/AU621688B2/en not_active Ceased
- 1989-11-24 CA CA002003662A patent/CA2003662C/en not_active Expired - Fee Related
- 1989-11-25 KR KR1019890017166A patent/KR0147845B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1989-11-25 DE DE58909806T patent/DE58909806D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1989-11-25 EP EP89121788A patent/EP0371414B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1989-11-25 ES ES89121788T patent/ES2104558T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1989-11-25 AT AT89121788T patent/ATE155141T1/de not_active IP Right Cessation
-
1995
- 1995-06-02 US US08/462,991 patent/US5571900A/en not_active Expired - Fee Related
-
1996
- 1996-02-15 DK DK016196A patent/DK16196A/da not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK592489A (da) | 1990-05-28 |
| AU621688B2 (en) | 1992-03-19 |
| CA2003662A1 (en) | 1990-05-27 |
| JP2919881B2 (ja) | 1999-07-19 |
| PT92403A (pt) | 1990-05-31 |
| ES2104558T3 (es) | 1997-10-16 |
| EP0371414A3 (de) | 1991-05-29 |
| ATE155141T1 (de) | 1997-07-15 |
| CA2003662C (en) | 2000-02-29 |
| KR900007861A (ko) | 1990-06-02 |
| DE58909806D1 (de) | 1997-08-14 |
| JPH02184700A (ja) | 1990-07-19 |
| DE3840044A1 (de) | 1990-06-07 |
| AU4548189A (en) | 1990-05-31 |
| US5599914A (en) | 1997-02-04 |
| EP0371414A2 (de) | 1990-06-06 |
| EP0371414B1 (de) | 1997-07-09 |
| US5571900A (en) | 1996-11-05 |
| DK592489D0 (da) | 1989-11-24 |
| KR0147845B1 (ko) | 1998-08-01 |
| DK16196A (da) | 1996-02-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PT92403B (pt) | Processo para a preparacao de glicoesfingolipidos com grupos susceptiveis de aclopamento na fraccao esfingoide e de composicoes farmaceuticas que os contem | |
| US5280113A (en) | Method for producing synthetic N-linked glycoconjugates | |
| US4563445A (en) | 3-Fucosyl-N-acetyl lactosamine derivatives, and their biological applications | |
| AU602275B2 (en) | Sialic acid glycosides, antigens, immunoadsorbents, and methods for their preparation | |
| Neuenhofer et al. | Synthesis of lysogangliosides | |
| Nicolaou et al. | A practical and enantioselective synthesis of glycosphingolipids and related compounds. Total synthesis of globotriaosylceramide (Gb3) | |
| US5212298A (en) | Method for producing synthetic N-linked glycoconjugates | |
| CA2197336A1 (en) | Sialic acid/fucose based medicaments | |
| EP0373038B1 (en) | New lysosphingolipid derivatives | |
| JPS6163691A (ja) | ガングリオシド誘導体、その製法および用途 | |
| US5668272A (en) | Method for producing synthetic N-linked glycoconjugates | |
| Yamada et al. | Specificity of the glycolipid transfer protein from pig brain. | |
| Tserng et al. | Synthesis of sulfate esters of lithocholic acid, glycolithocholic acid, and taurolithocholic acid with sulfur trioxide-triethylamine | |
| JP3141693B2 (ja) | シアル酸の９位をフッ素で置換したガングリオシドｇｍ３類縁体及びその中間体 | |
| Boullanger et al. | Synthesis and interfacial behavior of three homologous glycero neoglycolipids with various chain lengths | |
| Matsuoka et al. | Synthesis of a useful anomeric thioacetate of an N-acetyllactosamine derivative and its application | |
| EP0413675B1 (en) | Method for producing synthetic N-linked glycoconjugates | |
| WO2003101937A1 (en) | Synthetic methods for the large scale production from glucose of analogs of sphingosine, azidosphingosine, ceramides, lactosyl ceramides, and glycosyl phytosphingosine | |
| EP0368131A2 (de) | Neoglykoproteine, ihre Herstellung und Verwendung | |
| Andersson et al. | Synthesis of oligosaccharides with oligoethylene glycol spacers and their conversion into glycoconjugates using N, N, N′, N ″-tetramethyl (succinimido) uronium tetrafluoroborate as coupling reagent | |
| JPH0436294A (ja) | 牛乳由来の新規なガングリオシド及びその製造法 | |
| Kamio et al. | Galactosylceramide containing omega-amino-fatty acids: preparation, characterization, and sulfotransferase acceptor. | |
| Mahoney et al. | [2] Ganglioside-based neoglycoproteins | |
| Isogai et al. | Synthetic Studies on Sialoglycoconjugates 95: Total Synthesis of Sulfated Glucuronyl Lactosaminyl Paraglobosides | |
| Dahiya et al. | Glycosphingolipid patterns of fetal and adult small intestinal mucosa in the sheep |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FG3A | Patent granted, date of granting |
Effective date: 19950404 |
|
| MM3A | Annulment or lapse |
Free format text: LAPSE DUE TO NON-PAYMENT OF FEES Effective date: 20011031 |