PT93585A - Processo para a preparacao de composicoes concentradas e fluidas contendo produtos pesticidas biossinteticos - Google Patents

Description

DescríçSo referente λ patente de invençSo de SOLVAY * Cie (Socíété Anonyme), belga, Industrial e comercial, com sede em 33, rue du Prince Albert, B-1050 Bruxelles, Bélgica, para: "PROCESSO PARA A PREPARACAO BE COWPSSICQES CONCENTRADAS £ FLUIDAS CONTENDO PRODUTOS PESTICIDAS BiQSSINTETICQS" A presente invenção refere-se a composições contendo produtos pesticidas biossintêticos provenientes de microorga-nismos da ordem das bactláceas» assim como aos processos para a sua preparaçto e a sua utilização, 0$ produtos pesticidas biossintêticos apresentam numerosas vantagens relativamente aos pesticidas químicos, no* meadamente pelo facto da sua grande especificidade. Assim os pesticidas biossintêticos tóxicos ou patogêneos para insectos, slo em geral nSo tóxicos e nSo patogêneos para o homem e os outros seres vivos* Por outro lado, devido I sua especificidade» nlo põem em risco em geral os predadores e parasitas naturais dos insectos que se pretendem eliminar, nem os insectos benéficos, Νϊο sSo fitotóxicos e n3o deixam qualquer resíduo tóxico. Finalmente os insectos nio parecem desenvolver uma resistência a este tipo de pesticidas» contrarlamente ao que se possa quando da utilização de insecticidas orgânicos sintéticos

Os pesticidas biossintêticos podem ser obtidos a partir de microorganlsmos muito diversos. A ciasse dos pesticidas biossintêticos mais correntemente utilizados na luta contra certos insectos sSo obtidos a partir de Bacilius thurin-giensis e de Bacilius sphaericus» dos quais se conhecem nume- 4» 1

rosas variedades.

Os pesticidas biossintêticos, não sendo em geral solúveis, necessitam do recurso a técnicas particulares para a sua aplicação. Podem apresentar-se na forma de partículas sólidas secas ou na forma de suspensões de partículas sólidas num líquido apropriado. Em geral são utilizados na forma de suspensões que são pulverizadas sobre as zonas infestadas, de harmonia com diversas técnicas conhecidas por si. Uma técnica frequentemente utilizada para tratar grandes superfícies, tais como florestas ou grandes extensões de terras cultivas, ou ainda grandes extensões de âgua, pântanos ou rios, consiste em pulverizar por via aérea suspensões de pesticidas biossintéticos.

Na Patente Americana 3 087 865 foi proposto preparar--se composições pesticidas biossintéticas que contêm esporos, corpos de inclusão (cristais) e as toxinas solúveis provenientes de microorganismos do género Bacillus» tais como o Bacil-lus thuringiensis, podendo estas composições apresentar-se no-meadamente na forma de suspensões que podem conter, entre outros, diversos estabilizadores, tais como sais de metais alca-linoterrosos.

Do mesmo modo foi proposto na patente FR 1 393 646 incorporar pequenas porções de 1 ou mais sais metálicos solúveis em âgua, nas suspensões insecticidas bacterianas, tendo em vista impedir a formação de maus odores.

No entanto, até ao presente esta adição de estabili-sadores conhecidos não permitiu resolver problemas críticos necessários à obtenção de boas composições utilizáveis no terreno, Assim, não foi possível com os estabilisadores conhecidos preparar composições estáveis, conservando uma boa activi-dade no decurso da armazenagem e que, simultaneamente, permi- 2 »

tam inibir a libertação de odores desagradáveis que se produzem quando da armazenagem das suspensões, nem suster a dilatação ou a retracçlo dos recipientes contendo as composições pesticidas biossintéticas, Por outro lado, não foi possível utilizar produtos pesticidas biossintéticos qualquer que fosse o valor do pH, tal como um pH neutro, ligeiramente ácido ou lí-geiramente básico, apesar da adição de agentes bactericidas ou bacterioestáticos. Por outro lado, a adição de certos compostos tendo em vista remediar estes inconvenientes, tais como o xi-leno, às composições biossintéticas ê fortemente desaconselhado^ porque conduz a composições tóxicas para os animais de sangue quente e/ou frio. A presente invenção tem por objectivo procurar composições contendo produtos pesticidas biossintéticos que não apresentem os inconvenientes das composições conhecidas. Mais concretamente, visa procurar composições de produtos pesticidas biossintéticos que sejam estáveis, que conservem uma boa acti-Yidade no decurso da armazenagem, que não apresentem libertações gasosas e cuja côr e viscosidade não se alterem com o tempo; por outro lado, que os recipientes contendo estas composições não se dilatem nem se retractem, mesmo apõs um tempo de armazenagem muito longo â temperatura ambiente, ou quando o produto pesticida biossintético tem um pH neutro, ligeiramente ácido ou ligeiramente alcalino. Visa igualmente procurar composições aptas a receber a aprovação dos orgânismos oficiais para a agricultura, porque são não tóxicas na prática para os animais de sangue quente e/ou frio. Visa igualmente obter composições líquidas muito fluídas apesar da sua elevada concentração em matérias activas. As composições de acordo com a invenção têm uma concentração em matérias activas elevada, de modo que o volume a transportar para uma dose de matéria activa determinada seja reduzido; são por outro lado extremamente fluj das, sendo a sua viscosidade suficientemente reduzida para poderem ser facilmente pulverisadas. l * 3

Em conclusão, as composições de acordo com a invenção aliam caraeterísticas muito diferentes, são com efeito muito fluidas, estáveis, dispersam-se espontaneamente na água e têm uma concentração de matéria activa muito elevada» A invenção refere-$e para o efeito a composições contendo produtos pesticidas biossintêticos provenientes de micro-organismos da ordem das baciláceas, sob a forma de partículas sõlidas em suspensão num líquido e contendo pelo menos um sal escolhido de entre sulfato de amónio e sulfato de sódio, ou uma mistura dos mesmos»

As composições preferidas de acordo com a invenção são aquelas que contêm sulfato de amónio.

Nas composições de acordo com a invenção o sal pode estar presente em doses variáveis compatíveis com o produto pesticida biossintético particular utilizado e nos limites de solubilidade do sal. Em geral a quantidade de sal está compreendida entre 10 e 60% em peso de líquido.

Quando o sai é sulfato de amónio a quantidade utilizada está compreendida entre 20 e 50% e de preferência entre 25 e 45% em peso de líquido»

Quando o sal é sulfato de sódio a quantidade utilizada está compreendida entre 12 e 25% e de preferência entre 15 e 22% em peso de líquido»

As composições de acordo com a invenção na forma de suspensão num líquido contendo água têm uma duração de conservação elevada numa gama de pH compreendidos entre 3,5 e 8,5.

Mais particularmente, as composições da invenção são utilizáveis em gamas de pH ácidos compreendidas entre valores

de pH de 3*5 e 6*5* em gamas de pH neutros compreendidas entre valores de pH de 6*5 e 7,5, e gamas de pH básicos compreendidas entre valores de pH 7*5 e 8,5. Resulta desta situação que as composições da invenção podem ser utilizadas ajustando-se o pH a valores situados em qualquer das gamas citadas acima.

Por outro lado esta situação permite obter composições estáveis cujo pH pode evoluir livremente sem que obrigue a tomar medidas drásticas para fixar o pH com o tempo. Finalmente, e em resumo» resulta desta situação que as composições de acordo com a invenção podem ser conservadas sem risco mais longamente que as composições conhecidas anteriormente.

Por pesticidas biossintéticos provenientes de micro-organismos da ordem das baciláceas entendem-se igualmente micrj organismos transformados por inserção de ADH codificante para a fabricação de toxinas e proveniente de outros microorganis-mos.

Os pesticidas biossintéticos provenientes da ordem das baciláceas podem-se encontrar em composições concentradas de acordo com a invenção em formas muito diversas. Assim» podem estar presentes na forma dos próprios organismos em qualquer estágio da sua evolução, incluindo-se nestes as formas ve-getativas eventuais, tal qual, em associação com o seu meio de cultura, soo a forma total ou parcialmente lisada, sob uma forma total ou parcialmente esporulada, sob uma forma tendo libertado parcial ou totalmente os esporos por diversos meios» tais como autólise baeteriana, ou sob a forma de produtos que são excretados espontaneamente pelos organismos, tais como as exo-toxinas, na forma dos produtos que se podem extrair destes organismos» tais como as endotoxinas* por qualquer método conhecido por si implicando ou não uma Ólise do organismo em causa» sob a forma de produtos eventualmente libertados pelos organismos no decurso de certas fases da sua evolução (cristais ou endotoxinas associadas ou não aos esporos) ou ainda sob diversas 5 - (testas formas simultaneamente.

Estas diferentes formas podem eventualmente estar associadas a resíduos no meio de cultura. Foram obtidos bons resultados com misturas contendo os esporos» os cristais ou as endotoxinas associadas e eventualmente exotoxinas que se formam espontaneamente quando da autólise da bactéria no fim da esporulação, Misturas deste tipo podem conter» para além dos esporos, dos cristais associados ou não aos esporos e das exotoxinas eventuais» células ou resíduos de células» assim como produtos sólidos residuais do meio nutriente utilizado na cultura.

Como microorganismos da ordem das bacilâceas adequados em geral como fontes de pesticidas bíossintêticos, utilizam-se microorganismos do género Bacillus, tais como o Bacillus thuringiensis» o Bacillus sphaericus, o Bacillus popilliae, o Bacillus cereus» o Bacillus larvae, o Bacillus lentimorbus o Bacillus fribourgensis e o Bacillus penetrans (Pasteuria).

Foram obtidos bons resultados com os Bacillus sphaericus e os Bacillus thuringiensis de quaisquer serotipos, incluindo bactérias provenientes de transformação genética» e mais particularmente os Bacillus sphaericus de serotipos 1a» 2a2b, 2a2c» 5a5b, 6» 25, 26a26b, 26a26c, e os Bacillus thuringiensis de serotipos 1» 3a, 3a3b, 4» 6, 7, 8, 8a8b, 9, 10 e 14, Os melhores resultados foram obtidos com o Bacillus sphaerKus de serotipos 5a5b e 25 e os Bacillus thuringiensis de serotipos 1 (variedade thuringiensis) 3a3b (variedade Kurstaki), 6 (varie dade subtoxicus e entomocidus) 7 (variedade aizawai), 8a8b (variedade morrisoni) e 14 (variedade israêlensis), Os diversos tipos de Bacillus thuringiensis e de Bacillus sphaericus podem ser utilizados nas composições de acordo com a invenção sob a forma dos próprios microorganismos» tal qual ou lisados, dos seus esporos, das endotoxinas ou de cristais associados ou não aos esporos, ou sob várias destas formas. Estas diferentes for- 6

mas podem eventualmente estar associadas a resíduos do meio de cultura. Foram obtidos bons resultados utilizando a mistura contendo os esporos e os cristais associados que se forma espontaneamente na autólise da bactéria no fim da esporulação. Uma tal mistura, além dos esporos e dos cristais associados ou não aos esporos, pode conter células ou resíduos de células, assim como produtos sélidos residuais do meio nutriente utilizado na cultura.

As composições de acordo com a invenção apresentam--se na forma de uma suspensão de partículas sólidas de produtos pesticidas biossintéticos num líquido. Estas suspensões contêm em geral de 10 a 45% em peso e mais frequentemente de 15 a 40% em peso de produtos pesticidas biossintéticos.

As composições de acordo com a invenção podem conter ainda diversos outros aditivos cuja natureza e função dependem da utilização destas composições e que são conhecidas dos especialistas na técnica*

As composições de acordo com a invenção podem igualmente conter resíduos da fabricação do pesticida biossintêtico.

As composições de acordo com a invenção apresentam-$e na forma de suspensões num líquido. Este último deve ser inerte face aos pesticidas biossintéticos e não deve nomeadamente de^ sactivar nem provocar a sua coagulação nem qualquer outra alteração física» 0 líquido pode ser constituído por um dissolvente único ou por uma mistura de dissolventes. Em geral o dissolvente contém égua.

Foram obtidos bons resultados quando o dissolvente contém pelo menos 80% e mais frequentemente pelo menos 95% em peso de ãgua. Em geral o líquido presente na composição de acor do com a invenção é constituído essencialmente por égua. 7

A presente invenção refere-se igualmente aos processos para a preparação das composições de acordo com a invenção»

Para o efeito o sal de acordo com a invenção, para formar as composições de acordo com a invenção, é utilizado em qualquer fase da fabricação de pesticidas biossintêticos ou dos seus eventuais precursores, ou da preparação das composições de acordo com a invenção, desde que esta seja posterior â fermentação dos microorganismos que geram os referidos pesticidas»

Um processo bastante conveniente para a preparação de composições de acordo com a invenção consiste em separar o meio de cultura dos microorganismos geradores dos produtos pesticidas biossintêtlcos, em separar deste a água por técnicas habituais de separação de água, tais como centrifugação, ultra-filtração, precipitação por adição de um não-dissolvente, tal como acetona, ou a floculação» de modo a obter uma pasta. 0 sal ou sais de acordo com a invenção e os restantes aditivos eventuais são adicionados em seguida a esta pasta. tto caso do Bacillus thuringiensis e do Bacillus sphae ricus, o meio de cultura é separado por exemplo no fim da fase de esporulação» Um outro processo consiste em separar do meio de cultura dos microorganismos geradores de produtos pesticidas biossintêticos, no fim da fase de esporulação, fracções ricas em endotoxinas ou em esporos ou nestes dois produtos simultânea mente» Estas fracções são em seguida tratadas de acordo com as mesmas técnicas utilizadas para o tratamento das pastas»

Para obter composições na forma de põs secos seca-se a pasta assim obtida por técnicas habituais, tais como secagem por atomização, secagem por liofilizaçáo ou secagem em tambor, de modo a obter-se partículas sólidas contendo em geral menos do que 12¾ e de preferência menos do que 7% de água. 8

Uma outra técnica consiste em adicionar o ou os sais de acordo com a invenção e os restantes aditivos eventuais à pasta antes dãaseear e submeter a mistura à secagem de acordo com uma ou outra das técnicas indicadas anteriormente.

Para obter as composições de acordo com a invenção na forma de suspensões pode-se dispersar as partículas sói idas de pesticida numa fase líquida que contenha de preferência água e que contenha adicionalmente o ou os sais» assim como os outros aditivos eventuais» para formar um creme*

Uma outra técnica consiste em incorporar na pasta obtida apôs a separação da égua do meio de fermentação» o sal ou sais» eventualmente na forma de uma solução concentrada» assim como os restantes aditivos eventuais.

Uma técnica preferida consiste em dissolver o sal ou os sais de acordo com a invenção em água» em seguida em se incorporar nesta solução o produto pesticida biossintético na forma de um pé seco» de preferência» um pô seco por atomização. A presente invenção refere-se igualmente a um processo para utilização das composições*

As composições de acordo com a invenção podem ser utilizadas como pesticidas e mais particularmente como agente para eliminar os insectos em qualquer fase do seu desenvolvimento. Para o efeito são pulverizadas sobre as superfícies infestadas» vegetais» rios» ribeiros e qualquer extensão de água, segundo qualquer método conhecido por si» tal como a pulverização manual» a pulverização mecânica e mais particularmente a pulverização por via aérea, Podem nomeadamente ser pulverizadas sobre superfícies infestadas por insectos e mais particularmen-te pelos lepidôpteros» dípteros, coleôpteros» afanípteros, or-tópteros isôpteros e homépteros* 9

As doses a utilizar são função do pesticida biossin-tético utilizado e do agente patogênico a eliminar*

No caso do Bacillus thuringiensis e do Bacillus sphaericus, pulverizam-se em geral 50 a 5000 g de partículas sólidas por hectar. As composições de acordo com a invenção podem ser pulverizadas tal qual quando se apresentam na forma de suspensões* Podem ser igualmente dispersas diluídas ou emulsionadas num diluente como a água, ou num diluente orgânico. Neste caso diluem-se uma até 300 vezes, habítualmente 2 a 120 vezes e de preferência 4 a 60 vezes o seu volume de diluente.

Os exemplos que se seguem servem para ilustrar a invenção.

Exemplo 1

Num fermentador BIOLAFFITE de 15 litros equipado com um agitador, uma sonda de pH, uma sonda de oxigénio, um sistema de arejamento, esterilizâvel, introduzem-se 450g de farinha de soja contendo 52% aproximadamente de proteinas, 250g de amido hidrolisado, 20g de KH2P04, 20g de K2HPQ4, 3,2g de MgS04*7iy), 0,12g de MnS04*H20, Q,14g de ZnSQ4*7H20, Q,2g de Fe2($04)3, 1,5g de CaCl2*H20 e 10 litros de água.

Mistura-se este meio de cultura até estar homogênioi leva-se o pH deste meio a 7.

Esteriliza-se este meio de cultura a 120»C durante 30 minutos*

Arrefece-se até que o meio de cultura atinja uma temperatura de 30®C e introduz-se, em condições estéreis, no fermentador 1 litro de uma cultura de Bacillus thringiensis sero-tipo 14 (variedade israelensis) em fase de crescimento* 10

0 fermentador ê agitado a 450 rotaçóes por minuto e ê arejado a 0,4 vvm (volume de ar por volume do meio por minuto),

Após 32 horas o Bacillus thuringiensis apresenta-se na forma de uma bactéria esporulada parcialmente lisada. Esta g cultura contém 1,1 * 10 esporos por ml e o seu pH ê de 7,5. Adicionam-se 2%ode Scido cítrico em pô ao produto assim obtido. 0 pH deste produto ê ajustado a 4,8 por adição de ácido fosfórico. 0 produto assim obtido é concentrado por centrifugação para dar origem a uma pasta contendo cerca de 12% de matéria seca e esta pasta ê atomizada tendo em vista fornecer um produto contendo 6% de Sgua,

Em seguida dissolvem-se 22,5g de sulfato de amónio em 75 ml de Sgua à temperatura ambiente e incorpora-se nesta solução 25 g do pó obdito acima. 0 creme obtido é muito fluido. 0 tempo de escoamento de 5 rnl deste creme através de uma pipeta graduada Standard de 10 ml é de 1,8 segundos â temperatura ambiente.

Este creme dispersa-se espontaneamente na água.

Depois de 30 dias a 208C não se observa qualquer per-da de actividade insecticida. Num ensaio de envelhecimento acelerado, isto é, após 25 dias a 45®C, não se observa senão uma ligeira perda da actividade insecticida (inferior a 30%, sendo a precisão das medidas de actividade insecticida da ordem de 20%). - 11

Exemplo 2

Dissolvem-se 15g de sulfato de sódio em 75 ml de água à temperatura ambiente,

Incorpora-se nesta solução 25 g do põ tal como foi descrito no exemplo 1, 0 creme obtido ê muito fluido, 0 tempo de escoamento de 5 ml deste creme através de uma pipeta graduada Standard de 10 ml é de 2,7 segundos l temperatura ambiente*

Este creme dispersa-se espontaneamente na água.

Passados 30 dias a 20^0 não se observa qualquer perda de actiYidade insecticida.

Num ensaio de envelhecimento acelerado, isto ê, apôs 25 dias a 45*C» não se observa senão uma ligeira perda da acti-vldade insecticida (inferior a 30¾).

Exemplo 3R (de comparação)

Incorporam-se 25 g do pô tal como foi descrito no exemplo 1 em 75 ml de água* 0 creme obtido é viscoso* 0 tempo de escoamento de 5 ml deste creme através de uma pipeta graduada de Standard de 10 ml é de mais do que 60 segundos â temperatura ambiente.

Este creme não se dispersa na água.

Exemplo 4R (de comparação)

Dissolvem-se 18,75 g de cloreto de sódio em 75 ml de - 12 -

Sgua à temperatura ambiente.

Incorporam-se nesta solução 25g do pó descrito no exemplo 1. 0 creme obtido é viscoso; apresenta um tempo de escoa mento superior a 60 segundos.

Exemplo 5R (de comparação)

Dissolvem-se 15g de cloreto de amónio em 75 ml de água à temperatura ambiente.

Incorporam-se nesta solução 25g do pó descrito no exemplo 1. 0 creme obtido ê viscoso, apresentando um tempo de escoamento superior a 60 segundos.

Exemplo õR (de comparação)

Dissolvem-se 15g de (NH^JHgPO^ (fosfato de amónio monobâsico) em 75 ml de água â temperatura ambiente.

Incorporam-se nesta solução 25 g do pó descrito no exemplo 1. 0 creme obtido ê ligeiramente viscoso, apresentando um tempo de escoamento de 23,2 segundos.

Este creme não se dispersa na água.

Exemplo 7R (de comparação)

Dissolvem-se 15g de acetato de amónio em 75 ml de - 13

âgua à temperatura ambiente

Incorpora-se nesta solução 25g do põ descrito no exemplo 1, 0 creme obtido ê viscoso. Apresenta um tempo de escoamento superior a 60 segundos.

Exemplo 8R (de comparação)

Dissolvem-se 15g de sufato de magnésio em 75 ml de água à temperatura ambiente.

Incorporam-se nesta solução 25 g do pé descrito no exemplo 1. 0 creme obtido ê viscoso. Apresenta um tempo de escoamento superior a 60 segundos.

Exemplos 9 e 10 A cultura descrita no exemplo 1 adicionara-se 4%d de uma solução a 25% de ortofenilfenol em metanol» e depois 1% de Scido cítrico em pé. 0 pH deste produto ê ajustado ao valor 4 por adição de ácido fosfórico. O produto assim obtido I concentrado porcentrifuga-ção para dar origem a uma pasta contendo cerca de 13% de matéria seca.

Misturam-se em 61 litros de metanol 23 kg de parahi-droxibenzoato de metilo e 21 kg de uma solução aquosa contendo 33% de 1,2-benzoisotiazolino-3-ona, e em seguida 11kg de um - 14

agente tensioactivo (Óxido de etileno sobre alquilfenol), 6,7 litros desta mistura são adicionados por cada m* de pasta. 0 produto obtido ê atomizado; obtém-se um pó contendo cerca de 6¾ de âgua.

Dissolvem-se 30g de sulfato de amónio em 76 ml de égua à temperatura ambiente·

Incorporam-se nesta solução 25g de pó para o exemplo 9 e 30 g de pó para o exemplo 10·

Os cremes obtidos são muito fluidos, apresentando um tempo de escoamento de 1,7 segundos para o exemplo 9 e de 1,9 segundos para o exemplo 10.

Estes cremes dispersam-se espontaneamente em água.

Passados 30 dias a 20®C não se observa qualquer perda de actividade insecticida. Num ensaio de envelhecimento acelerado, isto ê, após 25 dias a 45&C, não se observa senão uma ligeira perda da actividade insecticida (inferior a 30¾).

Exemplos 11 e 12

Dissolvem-se 13,5 g de sulfato de sódio em 75 ml de âgua â temperatura ambiente.

Incorporam-se nesta solução 25g de pó para o exemplo 11 e 30 g de pó para o exemplo 12, pó tal como foi descrito no exemplo 9.

Os cremes obtidos são muito fluidos, apresentando um tempo de escoamento de 1,9 segundos para o exemplo 11 e de 15 -

Claims (1)

1. 2,1 segundos para o exemplo 12 Estes cremes dispersam-se espontaneamente na água. Passados 30 dias a 208C não se observa qualquer perda da actividade insecticida. Num ensaio de envelhecimento acelerado, isto é, apõs 2õ dias a 45flC, não se observa senão unia ligeira perda da actividade insecticida (inferior a 30¾). REIVINDICAÇÕES - 18 - Processo para a preparação de composições contendo produtos pesticidas biossintêticos provenientes de microorga-nismos da ordem das bacilâceas sob a forma de partículas em suspensão num líquido e contendo pelo menos um sal» sendo este sal escolhido entre o sulfato de amónio, o sulfato de sódio ou uma mistura dos mesmos, caracterizado por se dissolver o sal em água e se lhe incorporar o produto pesticida biossintético. - 2* - Processo de acordo com a reivindicação 1 caracterizado por o produto pesticida biossintético utilizado ser um pó seco por atomização. - 3« - Processo de acordo com as composições anteriores ca- 16 -

   racterizado por se obterem composições nas quais a quantidade de sal estâ compreendida entre 10 e 60% em peso de liquido* - 49 * Processo de acordo com as reivindicações anteriores caracterizado por se obterem composições nas quais a quantidade de sulfato de amónio utilizada está compreendida entre 20 e 50% em peso de liquido* • 5* - Processo de acordo com as reivindicações 1 a 3 carac-terizado por se obterem composições nas quais a quantidade de sulfato de sódio utilizada estâ compreendida entre 12 e 25% em peso de líquido. - 6§ *· Processo de acordo com qualquer das reivindicações anteriores caracterizado por se obterem composições nas quais os microorganismos da ordem das baciláceas são microorganismos dos tipos Bacillus thuringiensis ou Bacillus sphaericus* - . Processo para a eliminação de insectos caracterizado por se pulverizarem sobre as superfícies infestadas composições preparadas de acordo com qualquer das reivindicações anterioresi Foram inventores René Detroz, belga, engenheiro industrial* residente em Chaussêe de Louvaín* 534, B-1328 õhain, Bélgica» e lucien Charmoilie, francês, engenheiro horticultor, 17

   residente era Rue Vervloesem, 159» B-1200 Bruxelles, Bélgica, A requerente declara que o primeiro pedido desta patente foi depositado em França, em 31 de Março de 1ôS9, sob O No. 69,04393. Lisboa, 28 de Março de 1990. 0 AGENTE OFICIAL

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